KR950013771B1

KR950013771B1 - 14-클로로다우노마이신의 제조방법과 (2"r)-4'-o-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 제조방법

Info

Publication number: KR950013771B1
Application number: KR1019880007016A
Authority: KR
Inventors: 토모야 마찌나미; 타케시 나카무라; 캔 니시하타; 신니찌 곤도; 토미오 타케우찌
Original assignee: 자이단 호진 비세이부즈 가가구 겐규가이; 이시가와 도구지
Priority date: 1987-06-12
Filing date: 1988-06-11
Publication date: 1995-11-15
Also published as: DE3886101T2; KR890000509A; DE3886101D1; DK79194A; EP0295119A3; DK170172B1; CA1303027C; EP0295119A2; ES2060652T3; US4889926A; DK170051B1; DK317888D0; EP0295119B1; DK317888A

Abstract

내용 없음.

Description

14-클로로다우노마이신의 제조방법과 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 제조방법

본 발명은 항종양 활성을 갖고, 항종양제로서 유용하고 또한 항종양제로서 유용한 안트라시클린형의 반-합성 항생제를 제조하는데 중간 화합물로서 유용한 새로운 화합물, 14-클로로다우노마이신과 이의 산부가염에 관한 것이다. 또한 본 발명은 14-클로로다우노마이신의 효과적인 제조방법에 관한 것이며, 더우기 본 발명은 반-합성 안트라시클린 유도체형의 항종양제중 하나인 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 효과적이고 새로운 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 따른 14-클로로다우노마이신은 다음 일반식(Ⅰ)의 화합물로 표시된다.

일반식(Ⅰ)의 이러한 새로운 화합물은 종양환자를 치료하는데 효과적인 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 합성하는데 중요한 중간 생성물로서 유용하다.

4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신이 항종양 활성을 갖는 것은 일본특허공고 제47194/84호와 미국특허 제4,303,785호에 서술되어 있다.

출발화합물로서 다음 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신을 사용한 상기 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 공지된 제조방법은 일본특허 출원 공개 제156,300/81호, 미국특허 제4,360,664호와 유럽특허출원 제39,060-A1호에 서술된 방법과 일본특허출원 공개 제104,299/80호, 미국특허 제4,303,785호와 유럽특허출원 제14,853-A1호에 서술된 방법이 있다.

일본특허 공개 제156,300/81 또는 미국특허 제4,360,664호에 언급된 방법에 의하면, 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신(이후부터는 (2''R)-4'-O-THPADM으로 약칭한다)을 메틸 오르토포름메이트의 존재하에서 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신(이후부터는 DM으로 약칭한다)를 브롬화하여 제조한 다음, 반응 생성물과 부산물인 다음 일반식(Ⅳ')의 14-브로모-13-디메틸케탈다우노마이신을 아세톤과 물로 가수분해하여,

다음 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 제조한 후,

일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜 4'-O-테트라하이드로피란일화한 다음, 생성된 14-브로모-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 다른 O-테트라하이드로피란일화된 부산물을 가수분해하여 4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신과 기타 가수분해된 부산물을 제조하고, 끝으로 컬럼 크로마토그라피를 통하여 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM과 불필요한 부산물과 분리시켜서 (2''R)-4'-O-THPADM을 회수한다.

또한, 일본특허 출원 공개공보 제104,299/80호 또는 미국특허 제4,303,785호 두번째-언급한 방법에 따르면, 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM은 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 다음 일반식(B)의 14-아세톡시다우노마이신으로 변화시킨 다음,

14-아세톡시다우노마이신을 4'-O-테트라하이드로피란일화한 후 생성된 4'-O-테트라하이드로피란일-14-아세톡시다우노마이신과 다른 O-테트라하이드로피란일화된 부산물을 가수분해하여, 4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신과 다른 가수분해된 부순물을 제조하고, 끝으로 컬럼 크로마토그라피를 통하여 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM을 불필요한 부산물과 분리하고 상술한 4'-O-테트라하이드로피란일화하여 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM 생성물을 회수하고 정제하며, (2''R)-4'-O-THPADM의 가수분해와 크로마토그라피 분리는 일본특허출원 공개공보 제156,300/81호 미국특허 제4,360,664호의 첫번째-언급한 방법과 동일한 방법으로 행한다.

더우기, 본 발명에 서술된 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM의 절대적 화학구조는 (2''R)-4'-O-THPADM의 어떤 유도체의 X-선 분석에 의하여 측정되었다[하마노 우메즈와등의 "항생물질지" 37, 1094-1097(1984) 참조]. 아드리아마이신으로부터 출발한 (2''R)-4'-O-THPADM의 제조방법으로서, 미국특허 제4,303,785호 또는 일본특허 공고 제47,194/81호와 일본특허출원 공개공보 제116,591/87호, 미국특허출원 제925,774호 또는 유럽특허출원 제228,546-A2에 서술된 바와 같이 다른 방법도 공지되어 있다.

출발물질로서 DM을 사용하여 (2''R)-4'-O-THPADM의 공지된 제조방법에서, DM의 4'-위치에 도입된 테트라하이드로피란일기가 원하는 (2''R)-배열을 나타내는 이러한 중간 화합물은 4'-테트라하이드로피란일화 단계에서 형성될 수 있다. 그러나, 이들 공지 방법으로, 4'-O-테트라하이드로피란일기가 입체이성체와 같은 (2''S)-배열을 갖는 화합물의 부형성과 테트라하이드로피란일화가 DM의 4'-위치에서 일어날 뿐만아니라 9-위치에서도 일어나므로 인한 9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일화된 화합물의 부형성을 피하는 것은 불가능하다. 따라서 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM의 수율은 DM을 출발물질로하여 제조하는 한, 매우 낮다.

이러한 최종 생성물의 낮은 수율을 개량하기 위하여는 전술한 두 부산물, 즉 (2''S)-4'-O-테트라하이드로피란일화된 생성물과 9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일화된 생성물을 회수한 다음 (2''R)-4'-O-THPADM의 합성에서 이들의 재순환과 재사용에 적합한 중간 생성물로 변환시키는 방법을 채택해야 하는 것이다. 전술한 공지된 두 방법에서, 중간 화합물로서 생성된 14-브로모다우노마이신은 이의 성질에서 불안정하고, 첫째 이것 때문에 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM을 합성하기 위하여 부산물을 회수, 재순환과 재사용하는데 적합한 방법을 제공하고 설립하는 것이 아직까지 가능하지 않다.

본 발명에서는, 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM을 공정의 4'-O-테트라피란일화 단계의 주반응 생성물로부터 얻을 수 있음과 동시에 테트라하이드로피란일화 단계에서 형성된 부산물을 회수하여 높은 수율로 높은 안정성을 갖는 중간 생성물로 변환시킬 수 있고, 이렇게 회수된 높은 안정성을 갖는 중간 생성물을 원하는 최종 생성물의 합성을 위해 재순환시키고 재사용할 수 있으므로서, 원하는 (2''R)-4'-O-THPADM의 제조가 다우노마이신(DM)을 출발화합물로서 사용할 때라도 전체 높은 수율을 이룰 수 있는 높은 안정성을 갖는 중간 생성물로 용이하게 행하는 새로운 방법에 의하여, 전술한 종래 방법의 낮은 효율의 문제점을 해결할 수 있는 (2''R)-4'-O-THPADM의 새로운 개량된 제조방법을 개발하고 제공하는데 연구를 해왔다.

일반식(Ⅱ)의 다우노마이신을 출발물질로 사용하고, 중간 생성물로서 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 얻는 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM의 전술한 공지의 제조방법(주로 전술한 일본특허출원 공개공보 제104,299/80호와 제156,300/81호의 방법)에 있어, 테트라하이드로피란일화 단계에서 불필요한 대량의 부산물이 형성되므로서 최종 화합물은 이들 종래 방법으로는 낮은 수율로 얻을 수 밖에 없다. 중간 화합물, 14-브로모다우노마이신은 너무 불안정하여 이를 -10℃에서 약 1주일간 고체 상태로 저장할 때, 14-브로모다우노마이신은, 7-위치에 결합된 아미노당분이 분열하여 14-브로모다우노마이신의 분해를 가져오므로서 이의 저장전의 최초양의 삼분의 이 정도로 작은 양으로 남을 뿐이다.

또한, 공지된 다우노마이신의 14-할로겐화 유도체는 전술한 일반식(Ⅱ)의 14-브로모다우노마이신과 더불어 14-요오드 다우노마이신을 포함한다. 14-브로모다우노마이신과 14-요오드다우노마이신은 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신으로부터 다음 일반식(C)의 아드리아마이신을 제조하는데 중요한 중간 생성물로서 사용된다(일본특허 공고 제46,597/72호 또는 미국특허 제3,803,124호 참조).

또한 14-브로모다우노마이신은 다우노마이신을 직접 브롬화하여 제조할 수 있다(전술한 일본특허 공고 제46,597/72호 또는 미국특허 제3,803,124호 참조). 지금까지 알려져 있는 14-요오드다우노마이신 유도체는 특히 다음 일반식(D)의 14-요오드-N-트리플루오로아세틸다우노마이신이 있는데,

이는 다우노마이신의 N-트리플루오로아세틸화 유도체를 산화 칼슘의 존재하에 요오드와 반응시켜서 이루어지는 방법에 의하여 제조된다(일본특허 공고 제46,597/72호 참조). 다른 다우노마이신의 14-할로겐화 유도체는 항종양 활성의 목적만으로 합성되고 테라지마등에 의하여 보고된 다우노마이신의 14-플루오로 유도체이다("일본 화학학회지"3권, ⅢL 40의 제54회 매년 봄 심포지움의 "고헨요-시-슈" 참조).

본 발명의 14-클로로다우노마이신은 어느 문헌에도 기재되거나 보고된 적이 없는 것이다.

본 발명의 연구 과정에서 상술한 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM의 개량된 새로운 제조방법을 제공하는 것을 시도했으며, 본 발명자는 종래 중간 화합물로서 사용된 14-요오드다우노마이신 또는 14-브로모다우노마이신에 존재하는 요오드기 또는 브로모에 보다도 더 안정하고, 14-플루오로다우노마이신에 존재하는 플루오로기 만큼 반응성을 갖는 클로로 치환기의 실용성에 주의하여 먼저 새로운 화합물로서 14-클로로다우노마이신의 제조를 시도했다. 연구결과, 본 발명자들은 14-클로로다우노마이신을 제조하는데 성공했고, 또한 14-클로로다우노마이신의 우수한 제조방법을 개발하는데 성공했다. 따라서, 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-14-디알킬케탈다우노마이신을 제조한 다음, 이 화합물을 산성 조건하에서 산 수용액으로 가수분해하여 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신의 수용액을 얻기 위하여 알킬 오르토포름메이트의 존재하에 DM을 케탈화 및 브롬화 하는 일련의 반응단계를 계속적으로 행하고, 대량의 금속 할라이드, 바람직하기로는 알카리 금속 또는 알카리 토류 금속 할라이드를 상기 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신의 수용액에 가할 때, 할로겐-상호 교환반응이 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신의 14-브로모기와 금속 할라이드 사이에서 일어나므로서, 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신은 14-클로로다우노마이신의 제조와 단리를 쉬운 방법으로 행하도록 반응 용액에서 염석하여 효과적으로 제조할 수 있고, 또한 이 14-클로로다우노마이신은 14-브로모다우노마이신보다 극히 더 안정하고, 더우기 14-클로로다우노마이신은 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM을 합성하는데 중간체로서 유용하고 14-클로로다우노마이신을 회수 재순환 및 재사용하는데 충분한 안정성을 가짐을 알 수 있다.

또한 14-클로로다우노마이신을 생성시키는 14-브로모다우노마이신과 금속 염화물 사이의 할로겐-교환반응이 효과적으로 일어남과 동시에 반응생성물, 즉 14-클로로다우노마이신을 전술한 바와 같이 염석을 통하여 반응 용액으로부터 효과적으로 단리시킬 수 있음에 따라 14-클로로다우노마이신을 다우노마이신으로부터 높은 수율로 제조할 수 있음을 알 수 있다.

그러므로, 본 발명의 첫번째 특징에 의하면, 다음 일반식(Ⅰ)으로 표시되는 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 제공한다.

14-클로로다우노마이신의 산부가염은 염산, 황산, 인산, 질산, 브롬화 수소산과 같은 약학적으로 수용할 수 있는 무기산과의 14-클로로다우노마이신의 염 또는 초산, 프로피온산, 말레산, 시트르산, 석신산과 메탄술폰산과 같은 약학적으로 수용할 수 있는 유기산과의 14-클로로다우노마이신의 염을 포함한다.

본 발명의 두번째 특징에 의하면, 다음 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 제조하는 방법을 제공하는데

이 방법은 다음 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신 또는 이의 산부가염을,

다음 일반식(Ⅲ)의 알킬 오르토포름메이트와,

CH(OR)₃

(상기식에서 R은 저급 알킬기를 나타낸다)

유기 용매에 용해한 브롬화제 용액과 반응시켜서, 다음 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-13-디알킬케탈다우노마이신 또는 이의 산부가염을 형성시키고,

(상기식에서 R은 전술한 바와 같다)

일반식(Ⅳ)의 화합물을 산성조건하에 산의 수용액과 처리하여 가수분해한 다음, 이렇게 생성된 다음 일반식(Ⅴ)으로 표시되는 14-브로모다우노마이신의 산부가염을 함유하는 생성된 수성 반응 혼합물에 초과량의 고체 금속 염화물을 가하여,

고체 금속 염화물을 이 수성 반응 혼합물에 용해시키고, 용해된 금속 염화물을 14-브로모다우노마이신 산부가염과 반응시켜 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신의 14-브로모기가 금속염화물과 할로겐-교환 반응하여, 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 산부가염을 생성시킴과 동시에 14-클로로다우노마이신 산부가염의 염석에 의하여 생성된 반응 수용액으로부터 침전된 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 산부가염을 생성시키고, 반응수용액으로부터 14-클로로다우노마이신의 산부가염을 회수하고, 필요하면 회수된 14-클로로다우노마이신 산부가염을 약 알카리조건하에서 수성알카리 화합물로 처리하여 이의 유리 염기 형태의 14-클로로다우노마이신을 제조하는 것으로 이루어진다.

본 발명의 두번째 특징에 따른 방법에서 일반식(Ⅱ)의 출발물 다우노마이신은 이의 유리염기 형태 또는 이의 산부가염(바람직하기로는 염화수소산염)으로 사용되고, 출발물 다우노마이신은 초과량의 일반식(Ⅲ)의 알킬 오르토포름메이트와, 브롬, 피리디늄하이드로브로마이드, 퍼브로마이드, 피롤리돈하이드로트리브로마이드와 페닐트리메틸암모늄 퍼브로마이드와 같은 브롬화제와 반응한다. 상기 방법에 사용된 일반식(Ⅲ)의 알킬 오르토포름메이트의 예를들면, 메틸 오르토포름메이트와 에틸 오르토포름메이트와 같은 저급(C₁-C₅) 알킬 오르토포름메이트가 있다.

이 방법에서, DM의 케탈화와 브롬화가 일어나 일반식(Ⅳ)의 14-브롬-13-디알킬케탈다우노마이신을 얻는다. 이들 반응물의 원하는 반응온도는 0-30℃이고, 바람직한 반응시간은 30분 내지 4시간이다. 상기 반응으로 얻은 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-14-디알킬케탈다우노마이신은 불활성 유기 용매에서 산의 수용액(예를들어 브롬수소산)으로 가수분해한다. 이 가수분해 반응은 0-50℃의 반은온도에서 1-48시간동안 행하는 것이 바람직하다.

전술한 불활성 유기 용매의 예를들면 메탄올과 에탄올과 같은 알콜, 아세톤과 같은 케톤과 테트라하이드로푸란, 디옥산과 디메톡시에탄과 같은 에테르가 있다. 가수분해의 유용한 산의 예를들면 염화수소산, 브롬화수소산, 황산과 인산과 같은 강한 무기산과 유기술폰산, 예를들어 메탄술폰산과 톨루엔술폰산과 같은 강한 유기산이 있다.

생성된 14-브로모다우노마이신의 산부가염을 함유하는 생성된 물함유 반응 혼합물에서 유기 용매상을 제거하고, 14-브로모다우노마이신의 생성 수용액에 고체 형태의 대량의 금속 염화물을 가한다. 대량의 고체 금속 염화물은 물함유 반응 혼합물에 용해하고, 용해된 금속 염화물은 14-브로모다우노마이신과 반응하여 14-클로로다우노마이신을 생성시키며, 이는 반응용액에 용해된 대량의 금속 염화물의 존재로 인하여 반응 용액에서 염석되므로 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드가 침전된다. 침전물을 수집하고 건조하면 분말인 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드를 얻는다. 상기 할로겐-교환 반응에 유용한 금속 염화물의 예를들면, 리튬, 나트륨과 카륨과 같은 알카리 금속의 염화물 뿐만아니라 바륨과 같은 알카리 토류 금속의 염화물도 있다. 생성된 14-브로모다우노마이신 산부가염을 함유하는 수성 반응 혼합물에 첨가된 초과량의 고체 금속 염화물은 첨가된 고체 금속 염화물에서 상기 수성 반응 혼합물에 용해된 금속 염화물의 일부가 존재하는 모든 14-브로모다우노마이신을 14-클로로다우노마이신으로 변환시키는데 충분하고, 용해된 금속 염화물의 나머지 부분은 염석법에 의하여 반응용액으로부터 침전되는 14-클로로다우노마이신부가염을 생성시키는데 충분하다.

본 발명의 두번째 특징의 바람직한 방법에 따르면, 14-클로로다우노마이신의 제조는 다음 공정을 사용하여 계속적으로 쉽게 효과적으로 행할 수 있다. 따라서 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신 또는 이의 산부가염은 유기 용매 용액에서 일반식(Ⅲ)의 알킬 오르로포름메이트와 브롬화제와 반응하여 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-13-디알킬아세탈다우노마이신 또는 이의 상부가염을 형성한다.

산화 프로필렌을 일반식(Ⅳ)의 화합물을 함유하는 생성된 반응 혼합물에 첨가하므로서 산화 프로필렌이 반응혼합물에 존재하는 부산물 브롬화수소와 반응하기 때문에 브롬화수소를 포획하여 제거한다. 생성반응혼합물에서, 유기용매를 증류제거하여 반응혼합물을 농축시킨다. 일반식(Ⅳ)의 반응생성물을 용해시킬 수 없는 다른 유기용매(예를들어, 이소프로필 에테르)를 농축된 반응 혼합물에 가하므로서 일반식(Ⅳ)의 화합물의 침전이 일어난다. 이렇게 침전된 일반식(Ⅳ)의 화합물을 여과하여 전술한 불활성 유기 용매 바람직하기로는 아세톤의 액체혼합물과 산의 수용액에 용해시키고, 일반식(Ⅳ)의 화합물의 산성 가수분해를 상기 액체 혼합물에서 상기 산으로 행하면 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 얻는다. 얻은 14-브로모다우노마이신을 함유하는 반응용액을 물과 혼합할 수 없는 유기용매로 세척하여 가수분해 반응에서 사용된 유기용매를 제거하고, 불필요한 반응 부산물을 제거한다. 세척되고 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 함유하는 남은 수용액에, 고체 형태의 초과량의 알카리 금속 염화물 또는 알카리 토류 금속 염화물 바람직하기로는 염화나트륨 또는 염화 칼륨을 소량씩 가하여 금속 염화물을 일반식(Ⅴ)의 화합물과 반응시키고 할로겐-상호교환반응을 시켜서, 일반식(Ⅴ)의 화합물의 14-브로모기를 14-클로로기로 치환하고, 동시에 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 염석이 일어난다. 결과적으로, 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 염화수소산염이 형성되고 침전물으로서 얻는다.

본 발명의 두번째 특징의 방법에 의하여, 14-클로로다우노마이신을 제조하기 위한 반응 단계를 계속적이고 쉬운 방법으로 행하고, 이 방법으로 출발물 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신의 염화수소산염에서 계산된 바와 같은 73% 또는 그 이상의 높은 수율로 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 염화수소산염을 얻는다.

14-클로로다우노마이신을 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM의 합성에 사용할때, 형성된 불필요한 부산물의 회수와 재사용을 쉽고 효과적으로 행할 수 있으므로서 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM을 후술한 바와 같이 20.8% 또는 그 이상의 양호한 전체 수율로 얻을 수 있다. (2''R)-4'-O-THPADM의 20.8% 또는 그 이상의 이러한 수율은 전술한 일본특허 출원 공개공보 제104,299/80호 또는 미국특허 제4,303,785호와 일본특허출원 공개공보 제156,300/81호 또는 미국특허 제4,360,664호의 종래 방법으로 행하였을때 얻은 (2''R)-4'-O-THPADM의 약 6-9%의 통상적인 양의 불량한 수율과 비교할때 우수한 개량을 가져온다.

본 발명의 첫번째 및 두번째 특징에 의하면, 아드리아마이신의 다른 유도체, 특히(2''R)-4'-O-THPADM의 중요한 중간 화합물로서 유용한 14-클로로디우노마이신과 14-클로로다우노마이신을 제조하는 방법을 제공한다.

그외, 본 발명에 따른 클로로다우노마이신은 다음 시험예에서 볼 수 있는 바와 같이, 여러가지 실험 종양에 대하여 우수한 항종양 활성을 나타내므로, 본 발명의 14-클로로다우노마이신은 항종양제로서 사용된다.

쥐의 백혈병 P-388세포, 쥐의 백혈병 P-388-세포(아드리아마이신에 대한 내성), 쥐의 백혈병 B16세포, 인간의 폐암 PC14세포와 쥐의 백혈병 L-1210세포를 포함한 여러가지 실험 종양에 대한 14-클로로다우노마이신의 항종양 활성은 다음 방법에 의하여 시험관에서 시험하고 평가했다 :

종양 세포는 5% CO₂를 함유하는 공기하에 37℃에서 50㎍/ml으로 10% 태아 혈청, 10μM 2-히드록시에틸디술피드와 가나마이신으로 보충된 RPMI 1640 매체에서 배양했다.

종양 세포는 등급 농도의 각 시험 화합물을 함유하는 성장 매체에서 72시간 동안 쥐의 흑색종양 B16을 갖는 1.5×10⁴세포/ml; 쥐의 백혈병 P388, P388/ADR과 L-1210을 갖는 2×10⁴세포/ml; 인체 폐암 PC14세포를 갖는 2.5×10⁴세포/ml의 최초 밀도에서 배양한다.

IC₅₀값, 즉 50% 성장 억제 농도를 갖는 시험 화합물을 MTT 분석법에 의하여 평가한다(모스만, 티; "제이.임무놀.방법", 65, 55-63(1983)참조).

[표 1]

실험종양에 대한 14-클로로다우노마이신의 항종양 활성(IC₅₀값, ng/ml).

더욱이, 본 발명자에 의하여 세로히 제조된 14-클로로다우노마이신은 -10℃에서 1주일동안 저장하여도 14-브로모다우노마이신과는 달리 고체 형태의 14-클로로다우노마이신은 실제적인 분해를 받지 않기 때문에, 공업적 규모로 여러가지 안트라시클린 유도체를 제조하는 합성법에서 출발물질로서 취급하기가 쉬움을 알 수 있다.

또한, 14-클로로다우노마이신은 유기 용매에 용해한 이의 용액까지도 어떠한 안정성을 가지며 유기용매에 용해한 14-클로로다우노마이신의 용액이 약간의 물과 산성 화합물을 함유할때, 14-클로로다우노마이신의 분해율은 동일한 조건하에 있는 14-브로모다우노마이신보다 훨씬 더 적음을 나타낸다. 또한 14-클로로다우노마이신을 테트라하이드로피란일화 하기 위하여 산 촉매의 존재하에 유기용매에 용해한 3, 4-디하이드로-2H-피란과 14-클로로다우노마이신을 반응시키는 반응단계를 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM의 합성에 사용할때, 금한 무수상태에서 반응계를 유지하기 위하여 특별히 주의하지 않아도, 출발물 14-클로로다우노마이신 그 자체가 분해할 위험은 거의 없다.

14-클로로다우노마이신을 테트라하이드로피란일화 하기 위한 반응단계는 이의 통상적인 작업에서 극한 무수 상태에서 반응계를 유지하기 위하여 주의나 설비가 필요치 않고 쉽게 작업할 수 있는 이점을 가짐을 알 수 있다.

테트라하이드로피란일화의 반응 단계에서 출발물 14-클로로다우노마이신의 분해에 대한 내성을 가지므로 의도한 항종양 화합물, (2''R)-4'-O-THPADM을 개량된 수율로 얻을 수 있음을 알 수 있다.

본 발명의 세번째 특징에 따르면, 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 제조방법을 제공하는데,

이 방법은 다음 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 테트라하이드로피란일화시키고,

다음 일반식(Ⅵ)의 생성된 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 부산물(2''S)-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 부산물 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 분리시킨 다음,

일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜서 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 형성시키는 것으로 이루어진다.

본 발명의 네번째 특징에서, 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신 또는 이의 산부가염의 제조방법을 제공하는데,

이 방법은 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 테트라하이드로피란일화시키고,

생성된 다음 일반식(Ⅵ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 다음 일반식(Ⅶ)의 부산물(2''S)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신 및 일반식(Ⅷ)의 부산물 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 분리시킨 다음,

일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜서 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 형성시키고,

부산물, 일반식(Ⅶ)의 (2''S)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 일반식(Ⅷ)의 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 회수하고, 여기서 회수된 일반식(Ⅶ)의 화합물과 일반식(Ⅷ)의 화합물을 산성조건하에서 가수분해시켜서 14-클로로다우노마이신을 재생시키고, 다시 재생된 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 테트라하이드로피란일화하고, 그러므로서 일반식(Ⅵ)의 화합물의 두번째 생성물을 제조한 다음, 일반식(Ⅵ)의 두번째 생성화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜서 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 두번째 생성물을 얻는 것이다.

본 발명의 세번째 특징에 따른 방법은 후술할 것이다.

본 발명의 세번째 특징에 따른 방법의 첫 단계에서, 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 염을 산촉매의 존재하에 유기 용매에서 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 테트라하이드로피란일화한다.

이러한 테트라하이드로피란일화에 유용한 용매의 예를들면, 디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 염화 메틸렌, 클로로로름, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 또는 이의 혼합 용매가 있다. 반응 온도는 0°-50℃가 바람직하고, 바람직한 반응 온도는 1-72시간이다. 이 테트라하이드로피란일화 반응의 단계에서 사용된 산촉매는 d-캄포술폰산과 p-톨루엔술폰산과 같은 유기 술폰산, 삼불화 붕소와 같은 루이스산과, 염산과 황산과 같은 무기산에서 선택하는 것이 적합하다.

테트라하이드로피란일화 반응으로부터 얻은 반응 혼합물은 의도한 바와 같이 형성된 일반식(Ⅵ)의 화합물과 함께 부산물로서 일반식(Ⅶ)과 (Ⅷ)의 화합물을 함유한다. 이 반응혼합물은 탄산수소나트륨과 같은 유연한 알카리 금속염으로 중화시킨다음, 클로로포름과 같은 흔화할 수 없는 유기 용매로 추출하며, 일반식(Ⅵ)의 화합물, 일반식(Ⅶ)의 화합물과 일반식(Ⅷ)의 화합물은 추출제로 사용된 유기 용매에 추출된다. 이들 테트라하이드로피란일화된 생성물(Ⅵ), (Ⅶ)과 (Ⅷ)을 함유하는 생성된 추출용액은 이들 생성물을 분리하기 위하여 실리카 겔상에서 컬럼 크로마토그라피하면, 원 생성물, 주로, 의도한 일반식(Ⅵ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 부산물 일반식(Ⅶ)의 (2''S)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 일반식(Ⅷ)의 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 서로 분리할 수 있다.

더욱이, 전술한 종래 방법에서 형성된 불안정한 (2''R)-14-브로모-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 부산물 일반식(Ⅶ)의 (2''S)-14-브로모-4'-O-테트라하이드로피란일다우마이신을 상술한 방법과 동일한 방법으로 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그라피하여 분리 및 정제할때, 이들의 실제 부분은 이 단계에서 이미 분해된다.

(즉, 아글리곤에서 아미노 당분의 분해)

본 발명의 세째 특징에 따른 방법의 둘째 단계에서, 반응을 행하여 일반식(Ⅵ)의 단리된 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시키고, 이 반응을 디메틸술폭시드와 같은 유기 용매에 용해된 일반식(Ⅵ)의 화합물 용액에서 행한다. 일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-하이드록실기로 변환시킨 반응은 알카리 금속 수산화물 또는 알카리 금속 탄산염으로 화합물(Ⅵ)을 가수분해하여 직접 행한다.

그러나, 일반식(Ⅵ)의 14-클로로기를 14-하이드록실기로 변환시킨 반응은 다음 일반식(Ⅸ)으로 표시되는 유기 카르복실산의 알카리 금속 염 또는 알카리 토류 금속염과 일반식(Ⅵ)의 화합물을 반응시키는 방법에 의하여 바람직하게 행하여 다음 일반식(Ⅹ)의 에스테르 화합물을 얻은 다음, 알카리 조건하에서 일반식(Ⅹ)의 에스테르 화합물을 가수분해하면 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 얻는다.

(상기식에서 R'는 수소원자 또는 알킬이나 알알킬기를 뜻하며, 바람직하기로는 저급알킬기이며 M은 알카리금속 또는 알카리 토류 금속을 뜻하고, 바람직하기로는 알카리 금속 또는 알카리 토류 금속 알칸오에이트이고, 더욱 바람직하기로는 포름산 리튬이다)

(상기식에서 R'는 수소원자 또는 알킬이나 알알킬기를 뜻하고, 바람직하기로는 사용된 카르복실산(Ⅸ)의 카르복실기에 결합된 저급알킬기이다)

일반식(Ⅵ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 유기 카르복실산의 알카리금속염, 예를들면, 포름산 리튬과 반응시켜 에스테르화하면, 일반식(Ⅹ)의 (2''R)-14-O-아실-4'-O-테트라하이드로파란일아드리아마이신이 형성된다.

이러한 에스테르화 반응에 유용한 용매의 예를들면 디메틸술폭시드, 디메틸포름아미드, 디옥산 및 테트라하이드로푸란과 디메톡시에탄과 같은 에테르, 초산 알킬, 아세톤과 같은 케톤등이 있다.

반응 온도는 0-50℃가 바람직하며, 바람직한 반응시간은 1-48시간이다. 이때 일반식(Ⅹ)의 에스테르 화합물의 가수분해는 첨가된 중탄산 나트륨 수용액의 존재하에 불활성 용매, 예를들어 테트라하이드로푸란 또는 디옥산과 같은 에테르, 아세톤과 같은 케톤, 디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드 또는 이의 혼합된 용매에서 10-40℃ 행하며, 여기서 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-THPADM이 제조된다.

본 발명의 네번째 특징에 따른 방법에서, 일반식(Ⅰ)의 테트라하이드로피란일화의 반응단계와 일반식(Ⅵ)의 화합물이 일반식(A)의 원하는 화합물로 변환한 반응단계는 본 발명의 세째특징에 따른 방법의 해당 반응 단계와 같은 방법으로 실시한다.

본 발명의 첫 반응단계에서의 부산물이고 일반식(Ⅵ)의 화합물과 크로마토그라피로 분리된 일반식(Ⅶ)과 (Ⅷ)의 화합물을 불활성 유기 용매에서 용해시키고 이를 유기 용매에서 강산으로 가수분해하여 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드로 변환시킬 수 있고, 여기서 재생된 14-클로로다우노마이신은 (2''R)-4'-O-THPADM의 합성에 재순환시키고 재사용할 수 있다.

상기 가수분해 반응에서 사용된 불활성 유기 용매의 예를들면 테트라하이드로푸란과 디옥산과 같은 에테르, 아세톤과 같은 케톤, 디메틸술폭시드와 N, N'-디메틸포름아미드가 있다. 강산으로서는, 유기산 특히 술폰산 또는 무기산이 사용된다.

본 발명의 네번째 특징의 방법에 따르면, 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신은 다우노마이신하이드로클로라이드부터 20.8%의 수율로 얻을 수 있다.

따라서, (2''R)-4'-O-THPADM의 수율은 종래 방법에 의한 것과 비교할때 우수하게 개량되었다(일반특허출원 공개공보 제104,299/80호에 서술된 방법에 의한 수율은 6.9% 뿐이고, 일본특허출원 공개공보 제156,300/81호에 서술된 방법에 의한 수율은 8.7%).

일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아미드리아마이신은 전술한 두 종래 공지 방법에 의하여 순수한 결정성 생성물 형태로 얻지 못하나, 본 발명의 세번째 및 네번째 특징의 방법은 포름산-포름산나트륨 완충 용액을 사용한 산성 물-추출방법을 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 회수 및 정제에 사용하면 순수한 결정성 생성물이 이루어지기 때문에 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 양호한 정제가 가능하다.

그러므로, 본 발명은 높은 순도와 높은 수율을 갖는 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 제조하기 위한 개량된 방법을 제공한다.

본 발명을 실시예를 들어 설명하면 다음과 같고, 이는 본 발명을 제한하는 것은 아니다.

[실시예 1]

다우노마이신으로부터 14-클로로다우노마이신과 이의 염화수소산염의 제조

다우노마이신 하이드로클로라이드(4.94g)를 50ml의 메탄올과 50ml의 디옥산에 용해시키고, 4.4ml의 오르토포름산메틸과 0.60ml의 브롬과 혼합한다.

반응 용액을 1시간 동안 10-15℃에서 교반한 다음 1.55ml의 산화 프로필렌으로 처리한다. 4℃에서 30분후, 반응혼합물을 이의 사분의 일체적으로 농축시킨다. 농축물을 530ml의 이소프로필 에테르에 붓고 형성된 적색 침전물을 원심분리하여 수집한 다음, 70ml의 이소프로필 에테르로 세척한다.

185ml의 아세톤과 180ml의 0.25M 브롬수소산을 침전물에 가하고, 혼합물을 실온에서 2일동안 교반한다.

반응혼합물을 흔들면서 세번 210ml씩의 이소프로필 에테르로 세척하고 수성층을 분리한다. 14-브로모다우노마이신하이드로브로마이드를 함유하는 수용액에 수량씩 고체 염화 나트륨을 가하고, 형성된 침전물을 원심분리하여 수집한다. 침전물을 염화 나트륨의 20% 수용액으로 두번 세척하고 여과하여 수집하고 건조하면 50g의 적색분말인 조 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드를 얻는다.

14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드의 조 생성물을 235ml의 탄산수소나트륨의 7% 수용액에 용해시키고 생성된 14-클로로다우노마이신(유리염기형태)을 450ml의 염화 메틸렌으로 추출하고, 200ml씩의 염화 메틸렌으로 세번 추출하고 210ml씩의 염화 메틸렌과 메탄올(6 : 1)의 혼합용매로 더 추출한다. 추출물을 혼합하고, 무수황산 나트륨으로 건조하고, 감압하에 35ml로 농축시킨다. 농축물을 180ml의 이소프로필 에테르에 적가하고 석출된 14-클로로다우노마이신(유리염기)을 여과하여 수집한다.

수율 : 3.65g

융점 : 174-176℃(분해)

질량 스펙트럼(FD) : m/e 562(M+1)⁺

50ml의 염화 메틸렌과 메탄올(3 : 1)의 혼합용매에 상기에서 얻은 3.6g의 14-클로로다우노마이신(유리염기)을 용해시킨다. 생성된 용액을 얼음으로 냉각하면서 6.4ml의 염화 메틸렌에 용해한 1M-염화수소 용액을 점차적으로 가한다. 용액을 이소프로필 에테르(280ml)에 적가하고 형성된 침전물을 수집하고 이소프로필 에테르로 세척하면서 3.83g의 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드를 얻는다.

수율 : 73%

융점 : 166-167℃

NMR(D₂O, ppm)δ : 1.35(5'-메틸), 2.60-2.96(10-메틸렌), 3.79(3'-메틴), 3.90(4-O-메틸), 4.28(5'-메틴), 5.49(1'-메틴), 7.33(2와 3-메틴), 7.60(1-메틴).

[실시예 2]

(a) 14-클로로다우노마이신의 테트라하이드로피란일화 반응 :

14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드(3.83g)을 건조 DMF(90ml)에 용해시키고 촉매로서 18ml의 3, 4-디하이드로-2H-피란과 피리디늄 d-칼포-술포네이트(2.1g)와 혼합한다. 혼합물을 10℃에서 교반하고, 4ml씩의 3, 4-디하이드로-2H-피란과 피리디늄 d-칼포술포네이트(0.4g)를 20시간에 및 29시간후에 혼합물에 가한다. 44시간 후, 반응혼합물을 180ml의 클로로포름으로 희석하고 각 180ml의 탄산수소 나트륨의 1% 용액으로 두번 세척한다.

클로로포름 용액을 180ml씩의 탄산수소나트륨의 1% 수용액으로 두번 세척하고, 180ml씩의 탄산수소나트륨의 0.1% 수용액으로 두번 세척하고 물(100ml)로 세척한 다음 무수 황산 나트륨으로 건조시킨다. 건조된 크롤로포름 용액을 용출제로서 클로로포름과 메탄올(70 : 1)의 혼합된 용매를 사용하여, 실리카겔(250g)의 컬럼에서 크로마토그라피한다.

(2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 함유하는 용출액을 농축하면 적색분말인 958mg의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 얻는다.

더불어, (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 함유하는 이러한 용출액의 부분을 혼합하여 농축시키면, 3.23의 이들 부산물의 혼합물이 회수된다.

(b) (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 제조

실시예 2의 공정(a)에서 얻은 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신(200mg)을 디메틸 술폭시드(6ml)에 용해시키고 리튬 포름메이트 모노리드레이트(204mg)과 혼합한다. 반응 혼합물을 5시간동안 실온에서 교반하고, 혼합물을 초산 에틸(35ml)로 희석하고 35ml의 물로 세척한다. 유기층을 분리하고, 30ml씩의 물을 네번 세척하고, 감압하에 오일로 농축한다.

(2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 함유하는 오일을 테트라하이드로푸란(6ml)에 용해시키고, 2.4의 탄산수소 나트륨의 0.1M 용액으로 처리한다. 혼합물을 3.5시간동안 실온에서 교반하여 가수분해 반응을 행한다. 염화 메틸렌(50ml)을 반응 혼합물에 가하고, 용액을 40ml씩의 물로 세번 세척한다. 염화 메틸렌 용액을 네번 포름메이트 완충제(pH 3.3, 30ml)로 추출한다.

수산화 나트륨 수용액을 가하여 결합된 완충제 추출액의 pH를 7.5로 조정하고 생성물을 염화메틸렌(25ml)으로 네번 추출한다. 염화 메틸렌 추출물을 무수 황산 나트륨에서 건조하고 농축 건조하면 조 생성물인 122mg의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 얻는다. 조 생성물을 염화메틸렌으로 결정한 다음, 염화메틸렌으로 재결정하면 순수한 생성물인 93mg의 (2''R)-4'-O-THPADM을 얻는다.

융점 : 184-186℃(분해)

: +210°(c 0.2, 클로로포름)

IR(KBr)

: 3460(O-메틸과 히드록실), 1720(카르보닐), 1620과 1580(퀴논)

1N-NMR(CDC₃δ: 1.34(5'-매틸), 1.45-1.87(테트라하이드로피란일), 2.10-2.40(8-메틸렌), 3.00(3'-메틴), 3.00-3.31(10-메틸렌), 3.67(4'-메틴), 3.98-4.05(5'-메틴), 4.09(4-O-메틸), 4.71-(2''-메틴, 테트라하이드로피란일의 아노미), 4.75-(14-메틸렌), 5.32(7-메틴), 5.52(1'-메틴, 다우노스아민의 아노미), 7.40(3-메틴), 7.79(2-메틴), 8.04(1-메틴).

하기의 실시예 3에서 회수한 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드의 수율을 공제하고, (2''R)-4'-O-THPADM의 수율은 소모된 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드를 기초로하여 28%의 양으로 계산된다.

[실시예 3]

14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드의 회수

실시예 2의 공정(a)에서 얻은 3.23g의 부산물의 혼합물을 80ml의 아세톤과 0.25M 브롬수소산(1 : 1)의 혼합 용매에 용해시키고, 생성 용액을 30시간동안 실온에서 교반하면 14-클로로다우노마이신이 재생한다. 반응 혼합물을 45ml씩의 이소프로필 에테르로 세번 세척하고, 수성층을 분리시킨다. 염화 나트륨(14g)을 14-클로로다우노마이신의 수용액에 가하고 형성된 적색 침전물을 염화 나트륨의 20% 용액으로 세척하면 조생성물을 얻는데, 이를 상기 실시예 1에서 서술한 방법에 따라 정제하면, 분말인 2.34g의 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드를 얻는다.

융점 : 165-166℃

질량스펙트럼(FD)(유리염기) : m/e 562(M+!)⁺

재생된 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드의¹H-NMR은 상기 실시예 1에서 얻은 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드의 것과 동일하다. 그러므로, 실시예 2의 공정(a)에 사용된 2.34g-부의 출발물 14-클로로다우노마이신 하이드로클로라이드(3.83g)를 테트라하이드로피란일화 단계의 부산물로부터 회수한다(회수된 수율 : 61%).

Claims

다음 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신 또는 이의 산부가염을 다음 일반식(Ⅲ)의 알킬오르토포름메이트와 유기 용매에 용해한 브롬화제용액과 반응시켜서 다음 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-13-디알킬케탈다우노마이신 또는 이의 산부가염을 형성시키고, 다음 일반식(Ⅳ)의 화합물을 산성조건하에서 산의 수용액으로 처리하여 가수분해한 다음, 초과량의 고체금속 염화물을 여기서 생성되고 다음 일반식(Ⅴ)으로 표시되는 14-브로모다우노마이신의 산부가염을 함유하는 생성된 수성반응 혼합물에 가하여 고체금속 염화물을 상기 수성 반응 혼합물에 용해시키고, 용해된 금속 염화물을 14-브로모다우노마이신 산부가염과 반응시키므로서 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신의 14-브로모기가 금속 염화물과 할로겐 교환반응을 하여 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 산부가염을 생성시킴과 동시에 14-클로로다우노마이신 산부가염의 염석에 의하여 생성된 수성 반응용액에서 침전된 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신의 산부가염을 약알칼리조건하에서 수성 알카리 화합물과 처리하여 유리염기 형태의 14-클로로다우노마이신을 얻음을 특징으로 하는 다음 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염의 제조방법.

(상기식에서 R은 저급알킬기이다)

(상기식에서 R은 전술한 바와 같다)
제 1 항에 있어서, 사용된 금속 염화물이 염화 나트륨 또는 염화 칼륨과 같은 알칼리 금속 염화물임을 특징으로 하는 제조방법.
제 1 항에 있어서, 생성된 14-브로모다우노마이신 산부가염을 함유하는 수성 반응 혼합물에 첨가된 고체 금속 염화물의 양이, 첨가된 고체 금속 염화물로 상기 수성반응 혼합물에 용해된 일부의 금속 염화물이 존재하는 모든 14-브로모다우노마이신을 14-클로로다우노마이신으로 변환시키는데 충분하고 나머지 부의 용해된 금속 염화물이 염석법에 의하여 반응 용액으로부터 침전된 14-클로로다우노마이신 산부가염을 생성시키는데 충분한 금속 염화물의 양임을 특징으로 하는 제조방법.
제 1 항에 있어서, 일반식(Ⅱ)의 다우노마이신 또는 이의 산부가염을 일반식(Ⅲ)의 알킬 오르토포름메이트와 유기 용매에 용해한 브롬화제 용액과 반응시켜 일반식(Ⅳ)의 14-브로모-13-디알킬케탈다우노마이신 또는 이의 산부가염을 형성시키고 생성된 일반식(Ⅳ)의 화합물을 함유하는 반응생성 혼합물에 산화 프로필렌을 가하여, 산화 프로필렌을 반응 혼합물에 존재하는 부산물 브롬화 수소와 반응시켜 반응 혼합물에서 브롬화 수소를 포획제거한 다음, 유기 용매를 반응생성 혼합물에서 증류 제거하여 반응 혼합물을 농축시키고, 일반식(Ⅳ)의 화합물을 용해시킬 수 없는 유기 용매를 농축된 반응 혼합물에 가하여 일반식(Ⅳ)의 화합물을 침전시키고, 침전된 일반식(Ⅳ)의 화합물을 회수한 다음, 불활성 유기 용매의 액체 혼합물과 산의 수용액에 용해시켜서, 일반식(Ⅳ)의 화합물을 상기 액체 혼합물에서의 수성산으로 가수분해하여 형성된 일반식(Ⅴ)의 14-브로모다우노마이신을 함유하는 반응수용액을 얻고, 이 반응 수용액을 물과 혼화할 수 없는 유기 용매로 세척하고, 유기 용매상을 상기 반응 용액에서 제거한 다음, 염화 나트륨 또는 염화 칼륨과 같은 초과량의 고체 알칼리 금속 염화물 또는 알칼리 토류 금속 염화물을 소량씩 세척단계에서 얻은 일반식(Ⅴ)의 화합물의 남은 수용액에 가하여, 염화나트륨 또는 염화 칼륨과 같은 알카리 금속 염화물 또는 알카리 토류 금속 염화물을 수용액에 용해시킨 후, 일반식(Ⅴ)의 화합물과 반응시켜서 할로겐-상호 교환 반응하게 하여 일반식(Ⅴ)의 화합물의 14-브로모기를 14-클로로기로 치환시키고, 동시에 염색시키고, 생성된 일반식(1)의 14-클로로다우노마이신의 염화수소산염을 침전시킴을 특징으로 하는 제조방법.
다음 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 테트라하이드로피란일화하고, 생성된 다음 일반식(Ⅳ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 부산물 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 부산물 14-클로로-9, 4-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 분리시킨 다음, 일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜서, 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아이리아마이신을 형성시킴을 특징으로 하는 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 제조방법.
다음 일반식(Ⅰ)의 14-클로로다우노마이신 또는 이의 산부가염을 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜서 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 테트라하이드로피란일화하고, 생성된 다음 일반식(Ⅳ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 다음 일반식(Ⅶ)의 부산물 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 다음 일반식(Ⅷ)의 부산물 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신과 분리시킨 다음, 일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 형성시키고 부산물, 일반식((Ⅶ)의 (2''R)-14-클로로-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신과 일반식)(Ⅷ)의 14-클로로-9, 4'-디-O-테트라하이드로피란일다우노마이신을 회수하고, 회수된 일반식(Ⅶ)의 화합물과 일반식(Ⅷ)의 화합물을 산성 조건하에서 가수분해시켜 14-클로로다우노마이신을 재생시키고, 다시 재생된 14-클로로다우노마이신의 4'-히드록시기를 산촉매의 존재하에 3, 4-디하이드로-2H-피란과 반응시켜 테트라하이드로피란일화하여, 일반식(Ⅵ)의 화합물인 두번째 생성물을 제조한 다음, 일반식(Ⅵ)의 두번째 생성 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시켜서 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신의 두번째 생성물을 얻음을 특징으로 하는 다음 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일이드리아마이신 또는 이의 산부가염의 제조방법.
제 5 항 또는 제 6 항에 있어서, 일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록실기로 변환시키는 반응이 일반식(Ⅵ)의 화합물을 알칼리 금속 히드록시드 또는 카본데이트로 직접 가수분해시키는 것임을 특징으로 하는 제조방법.
제 5 항 또는 제 6 항에 있어서, 일반식(Ⅵ)의 화합물의 14-클로로기를 14-히드록시기로 변환시키는 반응이 일반식(Ⅵ)의 화합물을 포름산 리튬과 같은 알카리 금속 또는 알카리 토류 금속 알칸모에이트인 다음 일반식(Ⅸ)의 유기 카르복실산의 알카리 금속 또는 알카리 토류 금속염과 반응시켜서 다음 일반식(Ⅹ)의 에스테르 화합물을 얻은 다음, 일반식(Ⅹ)의 에스테르 화합물을 알카리 조건하에서 가수분해시켜 일반식(A)의 (2''R)-4'-O-테트라하이드로피란일아드리아마이신을 생성시키는 것으로 이루어짐을 특징으로 하는 제조방법.

(상기식에서 R'는 수소원자 또는 알킬이나 알알킬기, 바람직하기로는 저급알킬기를 나타내며, M은 알카리 금속 또는 알카리 토류 금속을 나타낸다.

(상기식에서 R'는 수소원자 또는 알킬이나 알알킬기를 나타내고, 바람직하기로는 사용된 카르복실산(Ⅸ)의 카르복실기에 결합된 저급 알킬기이다.)