KR927002375A - 거핵구 형성 인자 - Google Patents

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Abstract

내용 없음

Description

거핵구 형성 인자
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (27)

  1. 실질적으로 다른 단백질성 물질과 연관되지 않은 거핵구 콜로니 자극 인자 단백질.
  2. 제1항에 있어서, 표Ⅲ의 아미노산#1~아미노산#182의 아미노산과 동일하거나 대체적으로 동일한 모두 또는 일부의 서열 또는 그의 생물학적 활성 단편을 함유하는 단백질.
  3. 제1항에 있어서, (a)표Ⅰ에 나타낸 바와 동일하거나 대체적으로 동일한 DNA 서열, (b)표Ⅱ에 나타낸바와 동일하거나 대체적으로 동일한 DNA 서열, (c)표Ⅲ에 나타낸 바와 동일하거나 대체적으로 동일한 DNA 서열, (d)서열(a)~(c)의 단편, (e)(a)~(d)의 어느 것과도 하이브리다이징할 수 있는 DNA 서열로 구성된 군으로부터 선택된 DNA 서열에 의해 코딩되는 단백질.
  4. 제1항에 있어서, 제1도의 제한 지도에 의해 특징지어지는 DNA 서열에 의해 코딩되는 단백질.
  5. 제1항에 있어서, ATCC 40857에 함유된 게놈 KpnⅠ-SnaBⅠ DNA 서열에 의해 코딩되는 단백질.
  6. 제1항에 있어서, ATCC 40856에 함유된 게놈 DNA 서열 18-5665에 의해 코딩되는 단백질.
  7. 제1항에 있어서, 중간 및 큰 크기의 거핵구 세포로 구성되어 있는 콜로니의 성장 및 발달을 자극할 수 있는 단백질.
  8. 제1항에 있어서, 쥐의 피브린 혈병 거핵구 콜로니 형성 검정에서의 생물학적 비활성이 약 5×107희석단위/㎎인 단백질 보다큰 단백질.
  9. 제1항에 있어서, 쥐의 피브린 혈병 거핵구 콜로니 형성 검정에서의 생물학적 비활성이 2×108희석단위/㎎인 단백질.
  10. 제1항에 있어서, 하나 이상의 하기의 특성을 갖는 단백질 : (1)비환원 조건하의 12%소듐 도데실 술페이트 포리아크릴아미드겔 전기 영동 및 쥐의 피브린 혈병 거핵구 콜로니 형성 생물학적 검정에 의해 측정된 약 28~38kd의 겉보기 분자량; (2)환원 조건하의 12%소듐 도데실 술페이트 포리아크릴아미드 겔 전기 영동에 의해 결정된 약 20~27kd의 겉보기 분자량; (3)pH 4.5의 산성 조건하에서 SP-Zeta Prep에 결합할 수 있는 능력; (4)맥아-세파로오스 및 콘카나발린-A 세파로오스에 결합할 수 있는 능력; (5)트리플루오로아세트산 및 아세토니트릴 용매계를 사용한 역상 HPLC(C18)컬럼 상에서 6~15%n-프로판올에 용리되는 능력; (7)아세토니트릴 및 헵타플루오로부티르산 용매계를 사용한 역상 HPLC(C4)컬럼 상에서 27~37% 아세토니트릴에 용리되는 능력.
  11. 제1항에 있어서, 사람의 골수 이식 환자의 노에 하기와 같은 단계로 구성된 정제 단계를 행하여 생산되는 단백질 : (a)뇨를 농축하고; (b)생성된 체류액에 음이온 교환 컬럼 크로마토그래피를 행하고; (c) (b)단계로 부터의 유출액에 양이온 교환 컬럼 트로마토그래피를 행하고; (d)렉틴 친화성 컬럼 크로마토그래피를 통해 (c)단계로 부터의 물질을 용리시키고; (e)(d)단계로 부터의 용출액에 양이온 교환 우수 성능액체 크로마토그래피를 행하고; (f)2부의 TFA를 사용하여 (e)단계로 부터의 용출액을 희석하고 이를 아세토니트릴 및 트리플루오로아세트산 용매에서 역상 고압 액에 크로마토그래프를 행하며; (g)2부의 피리딘 및 아세트산을 사용하여 (f)단계로 부터의 용출액을 희석하고 이를 n-프로판올, 피리딘 및 아세트산 용매계에서 제2역상 고압 액체크로마토그래피를 행하고; (h)헵토플루오로부티르산 및 아세토니트릴 용매계에서 임의적으로 (g)단계로 부터의 용출액에 제3역상 고압액체 크로마토그래피를 행한다.
  12. 제1항에 있어서, 발현 조절 서열과 연관하여 작용하여 meg-CSF 발현을 코딩하는 DNA 서열로 형질전환된 세포주를 배양함으로써 생상되는 단백질.
  13. 제1항에 있어서, DNA 서열이 (a)표Ⅰ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (b)표Ⅱ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (c)표Ⅲ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (d)서열(a)~(c)의 단편; (e)(a)~(d)의 어느것과도 하이브리다이징할 수 있는 DNA 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 단백질.
  14. 골수 이식 환자로 부터의 뇨에 제9항의 정제 단계를 행하며 meg-CSF가 마지막 컬럼으로부터 단일피이크로서 용리됨을 특징으로 하는 동종 meg-CSF의 제조방법.
  15. 발현 조절 서열과 연관되어 작용하는 meg-CSF 발현을 코딩하는 cDNA 서열로 형질 전환된 세포주를 배양함을 특징으로 하는 meg-CSF의 제조방법.
  16. (a)표Ⅰ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (b)표Ⅱ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (c)표Ⅲ에 나타낸 바와 동일하거나 대체로 동일한 DNA 서열, (d)서열(a)~(c)의 단편; (e)(a)~(d)의 어느것과도 하이브리다이징할 수 있는 DNA 서열로 구성된 군으로부터 선택된 meg-CSF를 코딩하는 DNA 서열.
  17. 발현 조절 서열과 연관하여 작용하는 제16항의 DNA 서열로 형질 전환된 세포.
  18. 제17항에 있어서, 포유류 또는 세균류 세포를 함유하는 세포.
  19. 쥐의 피브린 혈병 거핵구 콜로니 형성 검정에서의 비활성이 폴리펩타이드 1㎎당 약 5×107희석 단위보다 큰 동종 meg-CSF.
  20. 제19항에 있어서, 비활성이 폴리펩타이드 1㎎당 약 2×108희석단위인 단백질.
  21. (a)표Ⅰ의 뉴클로에타이드 #1~#7505를 함유하는 DNA 서열, 그의 단편 또는 대체적으로 이와 유사한 서열로 형질 전환된 세포를 배양하고; (b)배양 배지로 부터 표Ⅲ에 나타낸 아미노산 #1~#182, 그의 단편 또는 대체적으로 이와 유사한 서열을 함유하며 거핵구 세포의 성장 및 발달을 자극할 수 있는 단백질을 회수, 분리 및 정제하는 단계로 생산되는 거핵구형성 단백질.
  22. 약제학적으로 유효한 운반자 내에 치료학적 유효량의 meg-CSF 또는 그의 단편을 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
  23. 제22항에 있어서, 치료학적 유효량의 사이토킨, 조혈소, 성장 인자 또는 전구형성-유사 인자를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
  24. 제23항에 있어서, 사이토킨이 G-CSF, CSF, CSF-1, GM-CSF, IL-1, IL-3, IL-4, 적혈구 조혈소, IL-11, IL-6, TPO, M-CSF 및 IL-7로 구성된 군으로 부터 선택된 약제학적 조성물.
  25. 환자에게 유효량의 meg-CSF 또는 그의 단편을 투여함을 특징으로 하는 출혈 이상 또는 혈소판 결핍증의 치료방법.
  26. 제25항에 있어서, meg-CSF와 함께 하나이상의 조혈소, 사이토킨, 성장인자, 전구형성-유사 인자 또는 향체 유효량을 동시에 또는 차례로 투여함을 특징으로 하는 치료방법.
  27. 제26항에 있어서, 조형소가 G-CSF, CSF-1, GM-CSF, IL-1, IL-3, IL-4, IL-11, 적혈구 조혈소, IL-6, IL-7, 또는 TPO인 치료방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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