KR890701623A - 발현마커로서 HBxAg 를 함유하는 SV 40 발현벡터 - Google Patents

발현마커로서 HBxAg 를 함유하는 SV 40 발현벡터

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Abstract

내용 없음

Description

발현마커로서 HBxAg를 함유하는 SV 40 발현벡터
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 HBV/adw 게놈의 물리적 구조 및 유전적 구성을 나타내는 도식이다 [참조: Tiollais et al.(1981), Science, 213:406-411 as modified by One et al.(1983), N.A.R., 11:1747-1757]. 긴(L)가닥의 5'- 말단이 짧은(S) 가닥의 5'-말단과 쌍을 이룬다고 보고하고 있다. 특정한 제한 부위는 호에 결합된 화살표를 나타내며, 제한 엔도뉴클레아제의 요약은 오노(Ono)등에 의해 분석된 HBV/adw 게놈의 물리적 지도에 상응한다. 게놈을 둘러싸는 넓은 화살표는 L가닥의 4개의 커다란, 개방된 영역에 상응한다. 이들 4개의 잠재적인 암호화 영역을 S, P, X 및 C로 나타낸다. 4개의 지정된 각각의 영역에 있는 괄호(aa)안의 아미노산 잔기의 수는 각 영역에 의해 암호화되는 예상되는 폴리펩타이드의 길이에 상응한다. 한정된 유전자 S 및 C에 상응하는 두 개의 영역은 넓은 화살표안의 점이 찍힌 영역으로 나타낸다. 단일 EcoRI엔도뉴클레아제 절단 부위가 지도의 개시점으로서 사용된다, 제2도는 문헌 [참조:Reddy et al.(1978), Science, 200:494-501, as modified by Van Heuverswyn and Fiers(1979), Eur.J.Biochem., 100:51-60]에 의해 보고된 기본 서열로부터 제조된 SV40 DNA제한 지도를 도식적으로 기술한 것이다, 제3도는 문헌 [참조:Sutcliffe(1979), Cold Spring Harbor Symposium on Quantitative Biology 43, 77]의 기본 서열 데이터로부터 제조된 플라스미드PBR 322제한 지도를 도식적으로 기술한 것이다.

Claims (15)

  1. 아미노산 서열에서 HBxAg의 항원성 결정인자에 상응하는 약 6 내지 약 40개의 아미노산을 함유하고, 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노-말단에서 카복시 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식의 폴리펩타이드로 이루어진 그룹중에서 선택되는 아미노산 잔기를 포함하는 항원성 합성 폴리펩타이드.
    Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly; Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys; 및 Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-Val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly.
  2. 제1항에 있어서, 추가로 아미노산 잔기 서열의 아미노- 또는 카복시- 말단에 시스테인 잔기를 함유하는 폴리펩타이드.
  3. 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노- 말단에서 카복시 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 반복단위가 산화된 시스테인 잔기에의해 함께 결합되어 있는, 다수의 합병 합성 폴리펩타이드 반복단위를 함유하는 수용성 또는 수분산성 항원성 중합체.
    R1-Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly-R2; Cys-Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys;Cys-Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-Val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly-Cys
    상기식에서, R1및 R2는 각각 시스테인 잔기이고, 단 R1및 R2중 단지 하나만 존재한다.
  4. 제3항에 있어서, 합성 폴리펩타이드 반복단위가 추가로, 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노- 말단에서 카복시- 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식으로 이루어진 그룹중에서 선택되는 폴리펩타이드를 함유하는 항원성 중합체.
    Cys-Leu-Ser-Ala-Met-Ser-Thr-Thr-Asp-Leu-Glu-Ala-Thr-Phe-Lys-Asp-Cys; Cys-Leu-Phe-Lys-Asp-Trp-Glu-Glu-Leu-Gly-Glu-Glu-Ile-Arg-Leu-Lys-Val-Cys;및 R1-Ala-Pro-Ala-Pro-Cys-Asn-Phe-Phe-Thr-Ser-Ala-R2.
  5. 아미노산 잔기 서열에서 HBxAg의 항원성 결정인자에 상응하는 약 6 내지 약 40개의 아미노산 잔기를 함유하며, 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노-말단에서 카복시-말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식의 폴리펩타이드 서열로 이루어진 그룹중에서 선택되는 아미노산 잔기서열을 포함하는 항원성 합성 폴리펩타이드와 면역반응할 수 있는 항체 조합 부위를 함유하는 수용체 분자.
    Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly; Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys; 및Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly.
  6. 아미노산 잔기 서열에서 HBxAg의 항원성 결정인자에 상응하는 약 6 내지 약 40개의 아미노산 잔기를 함유하며 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노-말단에서 카복시- 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식의 폴리펩타이드 서열로 이루어진 그룹중에서 선택되는 아미노산 잔기 서열을 포함하는 항원성 합성 폴리펩타이드 및 HBxAg와 면역 반응할 수 있는 항체 조합 부위를 갖는 수용체 분자를 함유하는 적어도 하나의 제1시약 용기를 포함함을 특징으로 하는, 체내 샘플 중 HBxAg의 존재를 결정하기 위한 진단용 분석 시스템.
    Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly; Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys; 및Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-Val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly.
  7. 제6항에 있어서, 추가로 수용체 분자와 면역반응하는 상기 항원성 합성 폴리펩타이드인 제2시약을 제2용기에 함유하는 전단용 분석 시스템.
  8. 제7항에 있어서, 추가로 상기 수용체 분자 및 HBxAg 사이의 면역반응을 신호로 알리기 위한 지시 수단을 포함하는 진단용 분석 시스템.
  9. 아미노산 잔기 서열에서 HBxAg의 항원성 결정인자에 상응하는 약 6 내지 약 40개의 아미노산 잔기를 함유하여 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노- 말단에서 카복시- 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식(A), (B) 및 (C)의 폴리펩타이드 서열로 이루어진 그룹중에서 선택되는 아미노산 잔기 서열을 포함하는 항원성 합성 폴리펩타이드 및 HBxAg와 면역반응할 수 있는 항체 조합 부위를 갖는 수용체 분자를 사용하여, 상기 수용체 분자 및 HBxAg 사이의 면역반응을 신호로 알리기 위한 지시 수단의 존재하에, 분석할 체내 샘플로부터 고체 매트릭스-결합된 단백질을 혼합하고, 상기 혼합물을, 면역반응이 일어나는 것을 상기 지시 수단이 신호로 나타낼 수 있는 충분한 시간 동안 유지시켜, 상기 신호의 존재를 확인하는 단계를 포함함을 특징으로 하여, 감지가능 양의 HBxAg 또는 이의 실질적인 폴리펩타이드 부분의 존재를 분석하는 방법.
    (A)Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly;(B)Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys;및(C)Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-Val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly.
  10. 제9항에 있어서, 상기 체내 샘플 및 수용체를 상기 지시 수단의 부재하에 혼합하고 혼합물을 결합된 면역반응 생성물이 형성되기에 충분한 시간 동안 유지시키고, 생성물을 세정한 후 상기 지시 수단을 면역반응 생성물과 혼합함을 특징으로 하는 방법.
  11. (a) 아미노산 잔기 서열에서 HBxAg의 항원성 결정인자에 상응하는 약 6 내지 약 40개의 아미노산 잔기를 함유하며 왼쪽에서 오른쪽으로 및 아미노- 말단에서 카복시- 말단의 방향으로 나타낸 하기 서열식의 폴리펩타이드 서열로 이루어진 그룹중에서 선택되는 아미노산 잔기서열을 포함하는 하나의 폴리펩타이드, HBxAg의 실질적인 폴리펩타이드 부분 및 실질적으로 정제된 형태의 HBxAg로 이루어진 그룹중에서 선택되는 항원을 고체 매트릭스에 부착시켜 고체 지지체를 형성하고;
    Gln-Leu-Asp-Pro-Ala-Arg-Asp-Val-Leu-Cys-Leu-Arg-Pro-Val-Gly;Ser-Ala-Val-Pro-Thr-Asp-His-Gly-Ala-His-Gly-Ala-His-Leu-Ser-Leu-Arg-Gly-Leu-Pro-Val-Cys; Met-Glu-Thr-Thr-Val-Asn-Ala-His-Gln-Ile-Leu-Pro-Lys-Val-Leu-His-Lys-Arg-Thr-Leu-Gly;
    (b) 고체 지지체를 분석할 액체 체내샘플과 혼합하여 고체 및 액체 상을 형성하고; (c) 상기 혼합물을, 체내 샘플중에 존재하는 항-HBxAg 항체가 상기 고체 지지체의 항원과 면역반응 하기에 충분한 시간 동안 유지시키고; (d) 상기 면역반응의 존재를 지시수단으로 측정하는 단계를 포함함을 특징으로 하여, 체내 샘플중에 존재하는 항 HBxAg 항체의 존재를 분석하는 방법.
  12. 제11항에 있어서, 고체 매트릭스가 니트로 셀룰로오즈인 방법.
  13. 제11항에 있어서, 고체 매트릭스가 미세역가 플레이트인 방법.
  14. 제11항에 있어서, 체내 샘플이 혈청인 방법.
  15. 제11항에 있어서, 상기 지시 수단이 표지된 항체, 항-HBxAg항체와 반응하는 에스. 아우레우스(S. aureus) 단백질 A 또는 항체 조합 부위인 방법.
    ※ 참고사항: 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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