KR890010197A - 이.콜라이 세포로부터 유용한 펩티드를 유전공학적 방법으로 생산하기 위해 제조된 발현벡터, 형질전환균주 및 그의 제조방법 - Google Patents

이.콜라이 세포로부터 유용한 펩티드를 유전공학적 방법으로 생산하기 위해 제조된 발현벡터, 형질전환균주 및 그의 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

이.콜라이 세포로부터 유용한 펩티드를 유전공학적 방법으로 생산하기 위해 제조된 발현벡터, 형질전환균주 및 그의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도 Tac 전사 활성화 서열 및 락토오즈 오페론 억제단백질의 유전자(lacr)를 포함하는 pT6-IN를 플라스미드의 제조 과정을 보여주는 계통도.
제2도 이.콜라이 효소 베타갈락토시다제의 아미노 말단을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 pPLCT(S) 와 pPLCT(H) 플라스미드의 제조.
제3도 각각의 발현 벡터에서 이.콜라이 베타갈락토시다제의 아미노 말단 서열과 pUC18의 멀티링커가 연결된 부위를 나타내는 유전자 지도.
제4도는 발현 벡터 pCT1의 제조과정을 보여주는 계통도.
제5도는 발현 벡터 pCT10의 제조과정을 보여주는 계통도.
제6도 발현 벡터 pCT20의 제조과정을 보여주는 계통도.
제7도 발현 벡터 pCT30의 제조과정을 보여주는 계통도.
제8도 각 플라스미드에 의해 형질전환된 이.콜라이의 배양액으로부터 이소프로필 베타갈락토사이드로 발현을 유도하기 전과 후에 준비한 세포 추출액을 SDS-폴리아클릴아미드 젤에서 전기 영동한 결과.
제9도 제8도의 결과 중 플라스미드 pCT1, pCT10 및 pCT20를 포함하는 이.콜라이에 의해 생성된 단백질 밴드들을 덴시토미터로 스켄한 결과.

Claims (16)

  1. 전사 및 해독 활성화 서열, 폴리펩티드의 아미노 말단 서열을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열, 전사 및 해독 정지화 신호가 발현 과정에 적합하도록 제조된 발현 벡터로서 이 재조합된 발현 벡터를 숙주 미생물에 도입하였을때 발현대상의 유전자 산물이 폴리펩티드의 아미노 말단과 융합된 상태로 생산되는 것을 특징으로하는 발현벡터.
  2. 제1항에 있어서, 전사 활성화 서열이 tac 전사활성화 서열인 벡터.
  3. 제2항에 있어서, 폴리펩티드의 아미노 말단을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열이 이.콜라이 베타갈락토시다제의 아미노 말단 아미노산을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열인 벡터.
  4. 제3항에 있어서, 벡타 갈락 토시다제의 뉴클레오티드 서열 다음부위에 여러개의 제한효소 부위가 존재하여 여러개의 발현대상 펩티드의 유전자를 삽입시킬 수 있는 벡터.
  5. 제4항에 있어서, 이.콜라이의 락토오즈 오페론억제 단백질을 코우드화하는 서열이 삽입되어 이.콜라이 숙주의 균주 제한이 없는 벡터.
  6. 제1,2,3,4 또는 제5항에 있어서, 폴리펩티드의 아미노말단 서열이 베타 갈락토시다제의 아미노말단을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열로서 아미노말단의 아미노산이 각각 354개(Hpal 부위), 280개(Clal 부위) 또는, 200개(Sau 3A 부위)인 뉴클레오티드 서열인 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 벡타가 플라스미드인 벡터.
  8. 벡터 pCT10.
  9. 벡터 pCT20.
  10. 벡터 pCT30.
  11. 간염 B형 바이러스의 pre-S2 부위를 코우드화하는 뉴클레오티드 서열이 삽입된 pCTHB20벡터.
  12. 제 1,2,3,4,5,7,8,9,10,11항중 어느 하나의 벡터에 의해 형질 절환된 이.콜라이 균주.
  13. 전사 및 해독 활성화 서열, 폴리펩티드의 아미노말탄 서열을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열, 전사 및 해독 정지화 신호가 발현과정에 적합 하도록 제조된 발현 벡터로서 이 재조합된 발현벡터를 숙주미생물에 도입하였을때 발현대상의 유전자 산물이 폴리펩티드의 아미노 말단과 융합된 상태로 생산되는 것을 특징으로하는 발현벡터의 제조방법.
  14. 제13항에 있어서, 전사 활성화 서열이 tac 전사활성화 서열인 벡터의 제조방법.
  15. 제14항에 있어서, 폴리펩티드의 아미노 말단을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열이 이.콜라이 베타 갈락토시다제의 아미노말단 아미노산을 코우드화하는 뉴클레오티드 서열인 벡터의 제조방법.
  16. 제15항에 있어서, 폴리펩티드의 아미노말단 서열이 베타 갈락토시다제의 아미노 말단을 코우드화 하는 뉴클레오티드 서열로서 아미노말단의 아미노산이 각각 354개(Hpal 부위), 280개(Clal 부위) 또는 200개(Sau 3A 부위)인 뉴클레오티드 서열인 벡터의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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