KR890005262A - 효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 신규 dna(yep1) 및 그 분리방법 - Google Patents

효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 신규 dna(yep1) 및 그 분리방법 Download PDF

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내용 없음

Description

효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 신규 DNA(YEP1) 및 그 분리방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 프로모터 개발용 벡터인 pK15과 pKW4의 조립과정도,
제2도는 효모와 대장균의 이중 활성을 가진 프로모터(YEP1)의 분리방법 개략도,
제3 A-C도는 YEP1의 제한효소 지도 및 여러가지 분석도 A는 제한효소 지도 및 부분삭제 실험도, B는 프라이머(Primer) 연장실험과 서던(Southern)분석실험에 사용한 탐침(Probe)도, C는 염기서열 분석도

Claims (3)

  1. 효모에서 추출한 유전자 DNA를 제한효소 AluI과 HaeⅢ로 처리한 다음, 1% 아가로스 젤에서 전기 영동에 의하여 DNA길이 500-2500염기쌍되는 것을 회수하여 이것을, 제한효소 BamHI으로 처리하고 대장균 폴리머라제 Klenow분획으로 처리한 pK15벡터에 T4 DNA리가아제 효소를 이용하여 접합시켜 이 접합된 것을 대장균 세표 LE392에 트란스포메이션하여 배양한 다음 알카리 처리하여 플라스미드 DNA를 추출하고 이 추출된 플라스미드 DNA를 효모에 트란스포메이션하여 배양한 다음 BamHI제한효소로 처리하는 효모로 부터 효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)를 분리하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 트란스포메이션한 대장균 세포 LE392를 엠피실린과 클로람페닐콜 함유 베지에서 배양하고, 또한, 트란스포메이션한 효모세포를 클로람페니콜 함유 베지에서 배양하여, 효모로 부터 효모와 대장균의 두 가지 포로모터 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)를 분리하는 방법.
  3. 다음의 염기 서열을 가진 효모와 대장균의 두 가지 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)
    GTCGACACACTGGACACCTTGAATTCTTCCACTTATTTAAGCATT
    GGCAATGAAAAGTGTGCTGGCACGGGATCGTTACTAATCCAGTAG
    TTTCTGAATCCATTCTTTCAAGGCAAACGGGACATGTGGGGAGTT
    CGACTTTTACCAGTTCCTTTTTTTTCTTAACAGTGAATGGATCAG
    TAAGCAGATAGGGGAAGTCCTCGTTAGCGGCTGGTCTTTGGAGA
    GCTTTTTTTGAAAAACTATTTCTTTTACAGAGATCACATGGCATG
    TTTCGGGATCCCGATATTCTATTTTGGGGGTACGCTGTCTTAAGT
    TTGCCTGTAAGTATTATTGTTGTCTCAGGTGCAATTTACGTTTTA
    CAGTGGGCTAACCCAACTTAATACAACTTTTCATTCCTTTGTATA
    GAGTCTTCATGAATGAAAGTCTTATTCATTTTTTTTTTTTTTTAG
    CATAGTTTTATATTCCTTTTTTATTCCAAGACTTATATTCTCATT
    ATATTCTATTTAGTTTCGCATGGAATTTCAAGTACACATATAACT
    ACAGCCTTACTTGAAAATTGCCTGTCTGGGTCTTATACTTTGCAC
    CCTTGTACAGCTTTGTATTTTTGCCAATTGTTAATCCAGATACAA
    TATCGATGGCTTCTACATAGATTCCACTGGCCGATTGTCCTATGT
    AAGAATATTCTAAGGAGACTGTTTGTAAATCAACTTTTTTTGTAA
    AATTTGGCCCAGTATTTTCATACTCAATACAGCCACGTAGTACAG
    GTACCGTTCCAGTGGCAGTTGATTTATCAAAAATCCATTGTCCTT
    GACCCATGATAATGCTATTTTCAAAACGG.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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