KR880700064A - 고무 폴리머라제 및 이의 제법과 용도 - Google Patents

고무 폴리머라제 및 이의 제법과 용도

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Abstract

내용 없음

Description

고무 폴리머라제 및 이의 제법과 용도
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (55)

  1. 거의 순수한 형태의 고무 폴리머라제(polymerae).
  2. 제1항에 있어서, 언급된 폴리머라제가 헤베아(Hevea)속의 식물로부터 회수되는 고무 폴리머라제.
  3. 제1항에 있어서, 언급된 폴리머라제가 헤베아 브라질린시스(Hevea brasiliensis) 라텍스로부터 회수되는 고무 폴리머라제.
  4. 제1항에 있어서, 언급된 폴리머라제가 단량체성이며, 나트륨도데실술페이트폴리아크릴아미드 겔전기 영동에 의해 측정된 것으로서 약 36,000 내지 약 44,000의 분자량을 갖는 고무 폴리머라제.
  5. 고무 폴리머라제 활성을 나타내는 하나이상의 활성부위를 갖는 거의 순수한 폴리펩티드로 이루어진 고무 폴리머라제.
  6. 제5항에 있어서, 언급된 폴리펩티드가 헤베아브라질린시스 라텍스로부터 회수된 고무폴리머라제와 거의 동종성을 나타내는 고무 폴리머라제.
  7. 제5항에 있어서, 언급된 하나이상의 활성 부위가 헤베아브라질린시스 라텍스로부터 회수된 고무 폴리머라제의 활성부위에 대해 효소학적으로 상당하게 작요하는 고무 폴리머라제.
  8. 제5항에 있어서, 언급된 하나이상의 활성부위가 헤베아 브라질린시스 라텍스로부터 회수된 고무 폴리머라제상의 상응하는 부위로부터 변화되어 증간된 고무 폴리머라제합성을 갖는 폴리펩티드를 형성하는 고무 폴리머라제.
  9. 라텍스중의 고무 입자에 결합된 고무 폴리머라제 및 용액중에 유리된 고무 폴리머라제를 함유하는 헤베아 속의 식물로부터 화학적으로 안정화된 라텍스를 제조하고, 라텍스로부터 용액중에 유리된 고무 폴리머라제를 분리시킨 다음, 분리된 고무 폴리머라제를 정제하여 거의 순수한 형태의 고무 폴리머라제를 수득함을 특징으로하여, 거의 순수한 형태의 고무 폴리머라제를 제조하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 언급된 식물이 헤베아 브라질린시스인 방법.
  11. 제9항에 있어서, 언급된 안정화된 라텍스가, 폴리하이드록시 화합물, 살균제, 및 완충제로 이루어진 안정화 용액 약 1 내지 약 10부피를 언급된 라텍스 약 1부피에 첨가하는 방법에 의해 제조되는 방법.
  12. 제11항 있어서, 언급된 안정화 용액이 추가로 술프하이드릴 화합물을 함유하는 방법.
  13. 제11항에 있어서, 언급된 폴리하이드록시 화합물이 글리세롤, 소르비톨, 및 수크로스 중에서 선택되는 방법.
  14. 제11항에 있어서, 언급된 안정화 용액이 글리세롤 약 10 내지 약 80중량/부피%, 나트륨 아지드 약 0.001 내지 약 1중량/부피%, 및 완충제로 이루어지며, 언급된 용액이 약 7 내지 약 12의 pH를 갖는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 언급된 안정화 용액이 글리세롤 약 50중량/부피%, 나트륨 아지드 약 0.3중량/부피%, 및 중탄산나트륨 약 0.1M로 이루어지는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 언급된 안정화 용액이 추가로 약 5mM 시스테인을 함유하는 방법.
  17. 제9항에 있어서, 언급된 분리가 크로마토그라피분리로 이루어지는 방법.
  18. 제17항에 있어서, 언급된 크로마토그라피 분리가 이온 교환 크로마토그라피로 이루어지는 방법.
  19. 제18항에 있어서, 이온 교환크로마토그라피를 사용한 크로마토그라피 분리가, 용액중에 유리된 고무폴리머라제가 수지에 결합하여 폴리머라제-수지 복합체를 형성하도록 이온 교환수지를 라텍스에 혼합하고, 복합체를 분리시킨 다음, 복합체로부터 고무폴리머라제를 회수함으로써 이루어지는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 언급된 이온 교환수지가 음이온 이온교환수지인 방법.
  21. 제9항에 있어서, 언급된 분리가 0 내지 4℃에서 수행되는 방법.
  22. 제9항에 있어서, 언급된 정제가, 분리된 고무 폴리머라제를 투석시켜 투석물을 생성시키고, 투석물에 겔을 첨가하여 겔폴리머라제 복합체를 형성시킨 다음, 복합체를 투석물로부터 분리시키고, 폴리머라제를 복합체로부터 회수한 다음, 회수된 폴리머라제를 겔여과 크로마토그라피시켜 거의 순수한 형태의 고무 폴리머라제를 생성시킴으로써 이루어지는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 언급된 투석물을 단백질에 대한 흡수제와 혼합하고 투석물에 겔을 첨가하기 전에 흡수제를 제거하는 추가의 단계를 포함하는 방법.
  24. 제23항에 있어서, 언급된 흡수제가 알루미나 C 감마인 방법.
  25. 제22항에 있어서, 언급된 겔이 칼슘포스페이트 겔인방법.
  26. 제9항에 있어서, 언급된 정제가, 용액중에 유리된 고무폴리머라제를 고무 폴리머라제에 대한 부동화된 항체와 접촉시켜, 고무 폴리머라제-항체 복합체를 형성시키고, 용액으로부터 복합체를 분리시킨 다음, 복합체로부터 고무 폴리머라제를 회수하는 단계들로 이루어지는 방법.
  27. 헤베아속의 식물로부터 화학적으로 안정화된 라텍스를 제조하고, 화학적으로 안정화된 라텍스를 고무 폴리머라제에 대한 부동화된 항체와 잡촉시켜 고무 폴리머라제-항체 복합체를 형성시킨 다음, 라텍스로부터 복합체를 분리시키고, 복합체로부터 고무폴리머라제를 거의 순수한 형태로 회수하는 단계들로 이루어진 거의 순수한 형태의 고무 폴리머라제를 제조하는 방법.
  28. 제9항의 방법에 의해 제조된 거의 순수한 고무 폴리머라제.
  29. 폴리하이드록시 화합물, 살균제, 및 완충제로 이루어진 안정화 조성물을 라텍스에 첨가함으로써 라텍스를 안정화시키는 방법.
  30. 제29항에 있어서, 언급된 안정화 조성물이 술프하이드릴 화합물을 추가로 함유하는 방법.
  31. 제29항에 있어서, 안정화 조성물이 용액인 방법.
  32. 제31항에 있어서, 언급된 용액이 약 7내지 약 12의 pH를 갖는 방법.
  33. 제31항에 있어서, 안정화 용액 약 1 내지 약 10부피를 라텍스 약 1부피에 첨가하는 방법.
  34. 제31항에 있어서, 안정화 용액 약 2부피를 라텍스 약 1부피에 첨가하는 방법.
  35. 제31항에 있어서, 언급된 안정화 용액이 글리세롤 약 50중량/부피%, 나트륨 아지드 약 0.3중량/부피%, 및 중탄산나트륨 약 0.1M으로 이루어지는 방법.
  36. 이소펜테닐 피로포스페이트, 알릴 피로포스페이트, 및 거의 순수한 고무폴리머라제를 함유하는 반응 혼합물을 형성시키고, 천연고무를 생성시키기에 충분한 시간동안 반응혼합물을 항온 처리한 다음, 천연고무를 회수하는 단계들로 이루어진 천연고무의 제조방법.
  37. 제36항에 있어서, 언급된 천연고무가 고분자 천연 고무인 방법.
  38. 제36항에 있어서, 언급된 알릴 피로포스페이트가 디메틸알릴 피로포스페이트, 고분자 천연 고무 입자, 및 저분자 천연고무 입자중에서 선택되는 방법.
  39. 제36항에 있어서, 언급된 반응 혼합물이, 완충제, 2가 금속이온, 중금속 킬레이트제, 및 폴리머라 제용 안정화제를 함유하는 방법
  40. 제36항에 있어서, 언급된 반응 혼합물이, 완충제, 염화마그네숨, 이칼륨 EDTA, 및 술프하이드릴 화합물을 추가로 함유하는 방법.
  41. 제40항에 있어서, 언급된 완충제가 0.1 내지 0.6M 트리스 클로라이드로 이루어지는 방법.
  42. 제40항에 있어서, 염화마그네슘의 농도가 약 1mM 내지 약 10mM이고, 이칼륨 EDTA의 농도가 약 5mM 내지 약 10mM이며, 술프하이드릴 화합물이 약 0mM 내지 약 10mM 농도의 글루타티온인 방법.
  43. 제36항에 있어서, 언급된 반응혼합물의 pH가 약 5 내지 약 10인 방법.
  44. 제36항에 있어서, 언급된 반응혼합물의 pH가 약 7내지 약 7인 방법.
  45. 제36항에 있어서, 언급된 항온 처리를 약 4℃ 내지 약 60℃의 온도에서 수행하는 방법.
  46. 제36항에 있어서, 언급된 항온처리를 약 30℃의 온도에서 수행하는 방법.
  47. 제36항에 있어서, 언급된 항온처리를 약 1시간 내지 약 16시간동안 수행하는 방법.
  48. 제36항에 있어서, 언급된 항온처리를 약 4시간 내지 약 8시간동안 수행하는 방법.
  49. 제36항의 방법에 의해 제조된 고분자 천연고무.
  50. 이소펜테닐 피로포스페이트와 하나이상의 다른 공중합성단량체, 알릴 피로포스페이트, 및 거의 순수한 고무폴리머라제를 함유하는 반응 혼합물을 형성시키고, 공중합체를 생성시키기에 충분한 시간동안 반응혼합물을 항온처리한 다음, 공중합체를 회수하는 단계들로 이루어진, 공중합체의 제조방법.
  51. 제50항의 방법에 의해 제조된 공중합체.
  52. 이소펜테닐 피로포스페이트, 이소펜테닐 피로포스페이트아이소머라제, 2가 금속이온, 포스페이타제억제제, 및 완충제를 함유하는 반응 혼합물을 형성시키고, 디메틸알릴피로 포스페이트를 생성시키기에 충분한 시간동안 반응혼합물을 항온처리한 다음, 디메틸알릴 피로포스페이트를 회수하는 단계들로 이루어진, 디메티알릴 피로포스페이트의 제조방법.
  53. 제52항에 있어서, 2가 금속 이온이 Mgtt이고, 포스페이타제억제제가 플루오르화 나트륨이며, 완충제가 중탄산나트륨이고, 항온처리를 약 1 내지 2시간 동안 수행하는 방법.
  54. 제52항에 있어서, 언급된 항온처리를 약 35 내지 40℃의 온도에서 수행하는 방법.
  55. 제52항에 있어서, 언급된 디메틸알릴 피로포스페이트를, 10,000분자량 컷 오프(cut off)를 갖는 막을 통해 항온 처리된 혼합물을 여과시킴으로써 회수하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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