KR840002088B1

KR840002088B1 - 치환된 3, 6-비스(아미노 알콕시) 아크리딘류의 제조방법

Info

Publication number: KR840002088B1
Application number: KR1019800004119A
Authority: KR
Inventors: 채드윅크 머독크 키이쓰; 로버어트 다미아니 마아틴; 에밀 더어 프레데릭
Original assignee: 아메리칸 사이아나밋드 캄파니; 죤 제이 헤이간
Priority date: 1979-10-31
Filing date: 1980-10-28
Publication date: 1984-11-14
Also published as: IE802066L; CA1170260A; AU538477B2; KR830004256A; ES496412A0; ATE26708T1; HK4491A; JPS5673065A; EP0031407B1; IE52711B1; JPH0259125B2; DE3071953D1; DK460180A; EP0031407A1; ES8106893A1; ZA806195B; DK460080A; AU6314180A

Abstract

내용 없음.

Description

치환된 3, 6-비스(아미노 알콕시) 아크리딘류의 제조방법

본 발명의 하기 구조식(I)의 신규화합물 제조에 관한 것이다.

여기서 n는 1, 2 또는 3 ; R₁및 R₂는 각각 수소 또는 메틸, R₃및 R₄는 같거나 다르고 수소 또는 (C₁-C₄)의 직쇄 또는 분지된 알킬, 그리고 R₃및 R₄는 인접한 N(질소) 함께 피롤리디노, 피페리디노, 모르폴리노 또는 N-메틸피페라지노, 그리고 R₅, R₆및 R₇는 같거나 다르고 수소, 플루오로, 클로로, 브로모 및 니트로 ; 단 n이 1 또는 2이고 R₁및 R₂가 수소 또는 메틸이고 R₃및 R₄가 저급 알킬 이때는 R₅, R₆및 R₇중 적어도 하나는 수소이외의 치환체이어야 한다. 이러한 신규한 치환된 아크리딘류는 여러가지 약제학적으로 가능한 유기 및 무기 염 형성 시약과 함께 산 부가염류를 형성한다.

본 발명의 아크리딘류중 하나의 유리염기형을 1, 2 또는 3당량의 산과 함께 중성용매내에서 적당히 혼합하여 생성된 이런 산 부가염류는 황산, 인산, 염산, 브롬산, 질산, 구연산, 주석산, 초산 등의 관련된 산류와 반응하여 형성된다. 본 발명의 목적을 위해서, 치환된 3, 6-비스(아미노 알콕시) 아크리딘 유리염기는 그의 비독성 산 부가염류와 동등하다.

이러한 치환된 3, 6-비스(아미노 알콕시) 아크리딘류는 1몰의 치환된 3, 6-아크리딘디올 디나트륨염을 2몰의 하기구조식의 알킬 할라이드로 처리함으로써 용이하게 제조될 수 있다 :

여기서 X는 클로로 또는 브로모 그리고 R₁, R₂, R₃및 R₄는 상기와 같다. 이 반응은 불활성용매 즉 디메틸포름아미드 내에서 75-100℃에서 1시간 또는 그 이상 수행하는 것이 바람직하다. 생성물은 불활성 용매를 반응혼합물로 부터 증발시켜 제거하고 잔사를 물에 취한후 디에틸에테르로 수상을 추출함으로써 단리할수 있다. 에테르를 증발시켜 얻은 생성물을 선단 크로마토그라피에 의해 정제할 수 있다.

또한, 이 화합물은 3, 6-아크리딘디올을 1, 2- 또는 1, 3-디할로-알칸류 또는 1-할로-2, 또는 3-하이드록시 설폰일 알칸과 함께 용매 즉 디메틸포름아미드 내에서 15분-2시간동안 반응시킴으로써 제조될 수있다. 생성된 비스(할로알콕시) 아크리딘은 암모니아의 여러가지 아민류와 함께, 바람직하게는 80-150℃의 밀폐된 용기내에서 10-50시간동안 반응시킬 수 있다. 그렇게 단리된 생성물을 상기와 같이 정제한다.

3, 6-아크리딘디올 디나트륨 염류는 문헌에 기술된 바와같이 치환된 3, 6-아크리딘디올을 디메틸포름아미드 같은 불활성용매내에서 실온에서 15-30분간 수화나트륨으로 처리함으로써 제조될 수 있다.

이러한 아크리딘 화합물은 또한 금속원자 즉 염화제 2철, 염화아연, 염화제 1동, 6염화백금산칼륨, 염화크롬등과 복합체를 형성하며 이것은 본 발명의 부분으로 간주된다.

본 발명에 따르는 구조식(Ⅱ)의 화합물과 그들의 약제학적으로 허용되는 염류는 항종양제 및 면역반응 향진제로서 유용한 것이다.

구조식(Ⅱ)의 화합물에 있어서, n은 1, 2 또는 3 ; R₁및 R₂는 각각 수소 또는 메틸 ; R₃및 R₄는 같거나 다르고 수소 또는 (C₁-C₄)의 직쇄 또는 분지된 알킬 ; 그리고 R₃및 R₄는 인접된 N(질소)와 함께 피롤리디노, 피페리디노, 모르폴리노 또는 N-메틸 피페라지노 ; 그리고 R₅, R₆및 R₇은 같거나 다르고 수소, 플루오로, 클로로, 브로모 및 니트로이다 ; 최근에, 충실성 신생물(solid neoplasms)의 치료를 위한 외과적-보조 화학요법의 개념이 임상적 종양학자에게 광범위하게 받아들여지고 있다. 커다란 원발(原發) 종양을 제거하기 위해서는 수술이 효과적인 치료양식이지만 가끔, 작고 광범위하게 흩어진 전이성 병소를 제거하는데는 적용하지 못한다. 암환자의 주요사인(死因)은 용해되지 않는 전이성 종양병소의 생장이라는 것을 알수 있다. 수술의 보조수단으로서의 전신적 화학 요법은 종양전이의 제거에 이상적으로 적당하며, 사람의 충실성종양(solid tumors) 치료분야의 발전에 많은 기여를 했다.

원발종양 그리고 전이성 종양의 생장에 대한 약의 치료효과를 평가하기 위해 사용되는, 여러가지 실험적동물 종양모델이 있다. 루이스(Lewis) 폐암은, 피하이식되었을때, 종양생장의 초기 단계에 있어서 폐로 전이되는 커다란 원발종양을 일으키는 매우 악성인, 수술해낸 쥐의 암이다. 원발종양의 수술적 제거는 종양이식 6일안에 실시하여 종양이 폐로 퍼지는 것을 막지 않는 한 치료효과가 없다. 실험동물의 실제적 사인은, 원발종양의 계속적 존재보다도, 전이성 폐종양의 생장때문이다. 이런 모델 시스템에 있어서, 치료제의 활성은, 원발 종양의 생장억제(그럼으로써 전이형성을 막음), 또는 원발 종양의 비 치료적인 외과적제거와 병행하여, 폐 전이의 생장억제로 표시된다. 이것은 약대신 비 치료적 수술 및 위약(僞藥)을 받은 쥐에 비해 약으로 치료된 쥐에 있어서의 평균 수명의 증가와 장기 생존자(즉 "치유")수의 증가에 의해 알 수 있다. 또한 루이스 폐암은 폐에 "인공적" 전이를 정착시키기 위해 쥐의 정맥내에 이식할 수 있다. 이런 경우에, 치료제의 활성은 이런 폐종양 전이의 생장 억제에 의해 나타난다.

쥐의 피하에 이식된 B16 흑종은 많은 먼 부위까지 전이되는 커다란 원발 종양을 일으킨다. 종양이 전이되기전인 원발 종양의 생장동안에 일찍 수술을 하면 치유된다. 비 치료적 수술과 병행한 전신적 화학요법이 종양의 전이를 막기 위해 또는 원발종양의 수술적 제거전에 이미 형성된 전이의 셍장을 억제하기 위해 알려져 왔다. 후자의 경우에 있어서, 효과적인 화학요법은, 위약으로 치료된 쥐에 비교할때 약으로 치료된 쥐에 있어서, 평균수명의 증가 또는 장기생존자(즉 "치유")수의 증가로 알수 있다.

본 발명의 활성 화합물은 하기공정에 따라 시험할때 활성이다.

(A) 쥐에게 정맥내로 접종한 루이스폐암에 대한 아크리딘의 항종양 활성

루이스 폐암 세포, 5×10⁵생존 가능세포를 BDF₁쥐의 정맥내에 주사한다. 약을 표준식염수에서 제조하고, 종양세포접종 후 1, 7 및 13일에 38mg/kg-400mg/kg의 용량으로 하루 1번 경구 투여한다. 쥐대조군에 식염수 위약을 약대신, 같은날 경구투여한다. 모든쥐는 종양접종후 19일에 희생되었고 그들의 폐를 제거하여 각각 무게를 달았다. 또한, 종양이 있는 쥐와 같은 성별, 나이, 그리고 체중을 갖은 10마리의 정상적인, 종양이 없는 BDF₁쥐의군을 희생시켜 폐를 제거하여 무게를 달아 정상적인 폐의 평균무게를 결정했다. 정상적인 폐의 평균무게를 종양이 있는 쥐의 폐의 무게로 부터 감하여, 종양이 있는 쥐의 폐에 존재하는 종양조직의 무게를 결정했다. 약의 양성적인 효과는, 식염수 위약으로 치료된 쥐의 평균 폐 종양무게와 비교할때, 약으로 치료된 쥐의 평균 폐종양 무게에 있어서 ≥58%감소로 표시된다.

이 시험의 결과는 하기표 I 에 나타나 있다.

이 동물모델 시험 시스템의 참고는 :

i) 정맥내 이식된 루이스폐암의 생장특성 및 화학요법 적반응, 오베제라외 암 화학요법 보고서, 2부, 5권 : 111-125, 1975,

[표 I]

쥐¹에 정맥내 이식된 루이스 폐암에 대한 아크리딘류의 항종양 활성

1. 첫날 5×10⁵루이스 폐 종양세포로 정맥내 접종된 BDF₁숫쥐 ; 종양 접종후 1, 7 및 13일에 3, 6-비스(2-디에틸아미노에톡시)아크리딘 트리하이드로클로라이드가 투여됨.

2. 평균 폐 종양무게 = 종양이 있는 쥐의 평균 폐의 무게 - 종양이 없는 정상적인 쥐의 평균 폐의 무게.

*폐 종양무게 억제가 싱당하다(≥58%)는 것을 나타냄.

(B) 쥐의 피하로 접종된 루이스 폐암종에 대한 아크리딘류의 외과보조적 항종양활성

BDF₁쥐에게 5×10⁵생존 가능한 루이스 폐암세포를 첫날 오른발 뒤쪽에 피하접종했다. 3, 6-비스(2-디에틸아미노에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드를 표준 식염수에 제조하고 종양 접종후 1, 7 및 13일에 50mg/kg-400mg/kg의 용량으로 하루 한번씩 경구투여했다. 대조군의 쥐에게 약대신 식염수 위약을 주고, 종양이 있는 또 하나의 쥐군에게 100mg/kg의 용량으로 양성적 대조약인 사이클로포스파미드를 복강내 주사했다. 종양이식후 11일째에, 쥐를 넴부탈(Nembutal)로 마취하고 종양이 생긴 발을 발목위에서 절단했다. 수술로 절단한 자리를 알코올로 닦아내고 스텐레스 강철 절창협자로 봉합한다. 종양이 생긴 발을 각각 무게를 달고 여기서 정상적인 발의 평균무게(같은 나이, 성별, 체중을 갖은 종양이 없는 쥐로부터 절단된 발을 무게에 달아 측정)를 감하여 절단된 발에 있는 종양조직의 무게를 얻는다. 쥐를 종양이식후 90일이 될때까지 죽음을 관찰했다. 치료약의 효과는 : (a) 발바닥 원발종양의 상당한(≥58%) 생장억제, (b) 약으로 치료된 쥐의 수명의 상당한(≥25%) 증가, 또는 (c) 90일에서의 생존수 즉 위약으로 처리된 대조군에 비해 "치유"수의 통계적으로 상당한(p<0.05)증가로 나타난다. 이 시험 결과는 하기 표 Ⅱ에 나타나 있다.

이 동물 모델 시험 시스템의 참고는 :

1) "충실성종양(solid tumor)의 치료에 있어서의 성공과 실패. 메틸-CCNU (NSC-95441)와 외과-화학요법을 사용한 전이성 루이스 폐암의 치료" 마이오외, 암화학요법 보고고서 56 : 183-195, 1972.

2) "루이스 폐(LL)암을 사용한 외과적-보조 화학요법 치료에서의 임상적으로 활성인 항종양제의 효능" 메르커외, Int. J. of Cancer 21 : 482-489, 1978.

[표 Ⅱ]

BDF₁쥐¹의 발바닥에 피하이식된 루이스 폐암에 대한 아크리딘의 외과적-보조 항종양활성

1. 첫날 5×15⁵루이스 폐 종양 세포를 발바닥에 피하접종한 BDF₁숫쥐 : 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드를 경구로, 그리고 사이클로포스파미드를 복강내에 종양이식후 1, 7, 그리고 13일에 투여했다.

2. 종양이식후 11일째에 종양이 있는 발을 절단한 후 측정된 평균 종양무게.

*원발종양 생장의 상당한(≥58%)억제를 나타냄.

**식염수 대조군에 비해, 생존쥐의 수에 있어서의 상당한 (p<0.05)증가를 나타냄.

+식염수 대조군에 비해, 약으로 치료된 쥐의 수명에 있어서의 상당한 (≥25%)증가를 나타냄.

(C) 쥐에 피하로 이식된 B 16 흑종에 대한 아크리딘류의 외과적-보조 항종양 활성

BDF₁쥐를 첫날에 5×10⁵생존 가능한 B16 흑종세포로 오른발 뒷바닥에 피하 접종했다. 약을 표준 식염수에서 제조하고 종양 이후의 1, 7 그리고 13일에 50-400mg/kg의 용량으로 하루 한번 경구투여했다. 쥐의 대조군에 약 대신 식염수 위약을 주고, 또 다른군의 종양함유 쥐에게는 양성 대조약인 사이클로포스파미드를 100mg/kg의 양으로 복강내 주사했다. 종양 이식후 21일째, 쥐를 넴부탈로 마취하고 종양이 생긴 발을 발목위에서 절단했다. 수술로 절단한 자리를 알코올로 닦아내고 스텐레스 강철 절창협자로 봉합했다. 종양이 생긴발을 각각 무게 달고 여기서 정상적인 발의 평균무게(같은 성별, 나이 및 체중을 가진 종양이 없는 쥐로부터 절단된 발을 무게달아 측정한것)을 감하여 절단된 발의 종양조직의 무게를 얻는다. 종양이식후 90일이 될때까지 죽음을 관찰했다. 치료제의 효과는 : 위약으로 치료된 대조군 쥐에 비한 (a) 발바닥의 원발종양에서의 상당한(≥58%) 생장억제, (b) 약으로 치료된 쥐의 수명에 있어서의 상당한(≥25%)증가 또는 (c) 90일째의 생존수 즉 위약으로 처리된 대조군에 비해 "치유"수의 상당한(p≤0.05) 증가로 나타난다. 이 시험의 결과는 하기 표 Ⅲ에 있다.

이 동물 모델 시험시스템의 참고는 :

1) "외과 보조적 화학요법에 있어서 쥐의 종양모델에 대한 효력" 그리스월드, 디, 피, 제이알, 암화학요법 보고서 2권, 5 : 187-204, 1975.

[표 Ⅲ]

BDF₁쥐¹의 발바닥에 피하로 이식된 B16 흑종에 대한 아크리딘의 외과적-보조 항종양 활성

1. 첫날 발바닥에 5×10⁵B16 흑종 세포로 피하접종된 BDF₁숫쥐 : 종양이식후 1, 7, 그리고 13일에 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드를 경구로, 그리고 사이클로 포스파미드를 복강내에 투여했다.

2. 종양이식후 1일째 종양이 생긴 발을 절단한후 측정된 평군 종양무게

*종양생장의 상당한 (≥58%)억제를 나타냄.

**식염수 대조군에 비해, 생존쥐의 수의 상당한 (p<0.05)증가를 나타냄.

+식염수 대조군에 비해, 약으로 치료된 쥐의 수명에 있어서의 상당한 (≥25%) 증가를 나타냄.

[표 Ⅳ]

B16 흑종으로 피하접종된 쥐의 폐에 있어서 전이성병소의 분포에 대한 아크리딘의 효과

BDF₁숫쥐를 0.25㎖의 10% 종양 군등질로 첫날 피하접종했다. 약을 1, 5, 9 그리고 13일째에 복강내 투여했다. 쥐를 25일날 군당 10마리씩 희생시켰다. 시험결과로 부티의 전이적 병소의 분포는 표 3에 있다.

(D) 쥐의 B-16 흑종에 대한 사이클로포스파미드 활성의 잠재력

BDF₁숫쥐에 0.25㎖의 10% B-16 흑종 군등질을 피하 접종한다. 사이클로 포스파미드를 접종후 2일째에 80mg/kg의 용량으로 복강내 투여한다. 시험화합물을 종양이식에 따라 +6, +8, +10일에 복강내 투여한다. 종양을 +26일에 측정하니, 양성적 반응이, 사이톡산으로 처리한 대조군에 비해, 종양크기의 억제가

50%인 것으로 나타났다. 사이톡산과 함께 투여한 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드는, 국소종양 생장을 50% 억제 했으나, 각 화합물을 따로 투여한 것은 그런 결과를 얻지 못했다. 이 실험 결과는 표 5에 있다.

[표 V]

쥐의 B16 흑종에 대한 사이트톡신과 아크리딘 조합의 효과

0.25㎖의 10% 종양균등질을 0일에 피하접종한 BDF₁쥐에 ; 사이클로포스파미드를 2일에, 3, 6-비스(2-디에틸아미노-에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드를 6, 8 그리고 10일째에 복강내 투여했다.

1은 치료된 쥐의 수에 대한 생존수.

2는 치료하지 않은 대조군에 비교했을때 p<0.05 수준으로 상당함.

3은 사이클로포스파미드 단독으로 치료한 것과 비교했을 때 p<0.05 수준으로 상당함.

4는 각 약을 따로 사용하여 치료한 것과 비교할때 p<0.05 수준으로 상당함.

5MST = 평균생존기간

5ILS = 대조군에 대한 수명의 증가 백분률.

면역조절제와 화학요법 보조제의 사용은, 면역 결핍과 암의 치료에의 새로운 치료적 접근을 이룩하며, 이것은 정상적인 숙주세포, 또는 조절가능한 면역계의 특별한 성분과 구별되는 바이러스성 입자 및 박테리아같은 뚜렷한 항원이 대부분의 종양세포내 또는 위에 존재한다는 개념을 기초로 하고 있다. 다수의 종양면역학자들은, 잠재적으로 악성인 세포들이 항상 나타나지만 그들의 "이질성" 때문에, 체액성 및 세포 면역계의 성분에 의해 정상적으로 제거된다는 견해를 지지하고 있다. 그러나 때때로, 종양세포는 이런 면역 감시로부터 벗어나서 계속 재생하여 암이 생기게 된다. 정상적이고 효과적인 면역 감시작용이 실패하는 이유는 완전히 이해되고 있지는 않지만, 나이를 먹을수록 면역계가 덜 효과적이 되기 때문이라고 생각된다. 어떤 유전성 면역 결핍중, 여러가지 박테리아성, 진균성 또는 바이러스성 감염에서, 그리고 면역이 억제되는 치료를 받고있는 환자에 있어서는 면역계가 저하된다. 예를들어 세포독성적 화학요법 및 바이러스치료 같은 질병을 치료하기 위한 여러가지 치료양식과 마찬가지로, 종양자체의 생장은 숙주의 저항을 크게 저하시키고, 외인성 및 내인성 감염 모두에 대해 예민성을 증가시키므로 이는, 아마도 종양생장의 재발과 치료로 유도된 종양의 경감뒤에 종종 나타나는 전이에 대한 설명이 될 것이다.

만약 면역계의 억제가 악성물의 생장을 용이하게 한다면 면역 반응의 어떤 특별한 면을 조절함으로써, 숙주가 남은 암세포를 극복할 수 있도록 도울 수도 있다. 그러므로, 질병에 대한 증가된 예민성과 암근절 실패의 이유가 되는 이런 결핍증을 극복하기 위해서는, 숙주 자신의 면역 방어 작용을 회복시키고 자극시킬수 있는 화학약품(즉, 면역조절제)을 찾아내는 것이 바람직하다고 생각된다. 그런 면역조절제는 커다랗고 빨리증식하는 종양의 생장을 저지할 수는 없을 것 같으나, 그들의 임상적 용도는 통상적인 수술, 방사선 치료 또는 화학요법에 의해 종양을 많이 감소시킨 환자에 있어서의 정상적인 면역감시작용을 고양시키는 능력으로 부터 나온것이라는 것을 알 수 있다. 장기 생존자나 완전히 치료되는 예가 더욱 많기를 바란다.

동물의 실험적 연구는, 바실루스 갈메트 구에린(BCG)의 생세균, 코리네박테리움 파붐의 열로 살균된 세포, 폴리뉴클레오 티드 및 구충제, 레바미졸을 포함하는 다수의 면역조절제의 항종양 능력을 보여주었다. 이런 물질들은 세포 면역을 자극하고 종양경감을 일으킨다는 것이 알려졌다. 악성흑종 및 급성백혈병에 대해 BCG를, 그리고 폐암 및 유방암에 대해 레바미졸을 써서 초기 임상시험에서 어느정도 성공을 거두었다. 비록 이런 약에 의한 항종양 효과가 유망하지만, 중요한 치료적 이점은 아직 실현되지 않있다. 이것이 매우 새로운 치료적 접근이므로, 이런 약들의 완전한 잠재력을 밝혀내기 위해서는 신규치료제 및 치료 방법은 임상적으로 세밀한 평가를 받아야 한다. 현대의 연구는, 표준 치료수단과 병행하여 사용하면 종양세포의 근절에 유효한 레바미졸 같은 기지의 면역조절제와 유사한, 그러나 더욱 효력있는 약의 발견에 주의를 기울이고 았다. 숙주저항 자극제는, 사실 면역자극제와 항암제 모두를 검출할 수 있는 동물모델에서 찾아낼 수 있다. 쥐를, 암환자에게 보통있는 면역저하를 촉진시키는 조건하에 놓는다. 이런 상태는, 백혈병과 동시에 질병에 관련된 면역저하를 일으키는 백혈병 바이러스나 이식가능한 포유류 종양중의 하나를 쥐에 감염시킴으로써 이루어진다. 효과적인 약은, 실험쥐에 있어서의 항체반응을 회복시기거나 고양시킬 수 있는 그들의 능력으로 알아볼 수 있다.

본 발명의 활성 화합물과 신규조성물들은 하기 공정에 따라 시험할 때 면역조절제로서 활성이다.

(E) 라우서(Rauscher) 백혈병 바이러스

라우서 백혈 바이러스를 BALB/C 쥐에 복강내 접종한다. 바이러스 접종물은 BALB/C 쥐의 21일간 감염된 비장으로부터 만든 20%(W/V) 비장 추출물이다. 모든 쥐는 최소중량은 18g으로, 3g 범위내에서 변할 수 있고 같은 성별인데 보통은 숫놈을 쓴다. 7일째에 양의 적혈세포를 복강내 주사한다. 매 시험군마다 5마리의 쥐를 쓴다. 시험 화합물을 6일째에 37.5-600mg/kg (체중)의 용량으로 0.5㎖(식염수내의 0.2% 노블(Noble) 한천으로) 경구투여 하고 7일째 그리고 8일째도 같은 방법으로 투여한다. 14일째에 쥐의 무게를 달고 후안동(後眼洞)으로 부터 피를 뽑는다. 피를 모으고 수집한 혈청을 4℃에서 24시간 저장한다. 혈구응집시험을 미적량판(microtiter plate) 기술을 이용하여 표준방법에 의해 실행한다. 백혈성(면역억제된)쥐에 대한 허용할만한 혈구응집소역가는

1 : 28이다. 양성적 대조화합물인 폴리 I : C(폴리이노신산 : 폴리시티딜린산)을 +6, +7 및+8 일에 복강내 투여한다. 양성적 대조군의 허용할만한 혈구응집소 역가는 백혈성 대조쥐에서 얻은 것의 4배 이상이다. 본 받명의 대조적인 화합물에 대한 시험결과는 표 6과 7에 나타나 있다.

[표 Ⅵ]

라우서 백혈병 바이러스 비장 크기의 감소 %

[표 Ⅶ]

라우서 바이러스로 유도된 백혈병을 가진 쥐에서의 항체회복

(F) 인터페론 유도

18-24g의 무게인 타코닉 농장(Taconic Farms) 백색 숫쥐에게 1.0㎖의 0.2% 한천수용액에 현탁시키거나 용해시킨 시험화합물을 감염 18시간 전에 먹이로 먹인다. 이 쥐를 0.2㎖ 부피의 증류수내의 LD₉₅의 콜롬비아 SK 바이러스를 피하주사하여 감염시킨다. 감염은 되었으나 치료되지 않은 그룹의 쥐를 대조군으로 사용하여 감염의 치사율을 보여준다. 시험기간은 7일이다. 살아 남은 동물로 부터 혈청을 모아 인터페론을 평가하는데 사용한다.

60×15mm 조직배양 접시내에 필요한 수 만큼의 L-929 쥐 세포의 단일층들을 제조한다. 생장배지는 최소필수 배지에다가 배지희석 유지제로서 10% 태아송아지 혈청을 더한 것이다. 최소필수배지에 2% 태아 혈청을 배지 희석유지제로 가하여 1 : 10로 두배의 혈청희석액을 제조했다. 매 희석액의 5㎖를 3개의 단층 봉합 각각에 가하여 37℃에서 밤새 배양한다. 단층을 따뜻한 최소필수 배지로 2번 세척하고, 0.5㎖의 최소필수 배지내의 소수포성구 내염 바이러스(접시당 약 60플래크 단위를 형성하는)를 가한다. 접시를 매 15분마다 기울여 바이러스를 분산시키고 단층이 건조되는 것을 방지하면서 바이러스를 37℃에서 60분간 흡수시킨다. 흡수후에 각각의 접시를, 0.8㎖/kg의 디에틸아미노에톡시 덱스트란을 함유하는 1부분 4% 노블한천으로 구성된 8㎖의 한천배지와 함께 7부분의 최소필수배지 +2% 태아 송아지 혈청에 겹쳐놓는다. 한천을 굳게 놔두고 37℃에서 배양한다. 플래크 발생을 관찰하고, 적당한 시기(2-4일)에 20% 에탄올내의 0.1% 크리스탈 바이올렛으로 염색한다. 접시당 발생한 플래크(plaques/dish)의 수를 세고 평균을 계산하고, 그 결과를 희석에 대한 곡선으로 그린다. 화합물이 주어진 희석액에서 플래크 형성의 50% 또는 그 이상을 억제한다면 활성인 것으로 생각되며 그 억제는 인터페론의 존재로 인한 것이다. 본 발명의 대표적인 화합물에 대한 이 시험의 결과는 표 8이 있다.

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘 트리하이드로클로라이드로 경구 전치료함으로써, 치명적 바이러스 감염에 대해 쥐를 보호 ; 20마리의 스위스 숫쥐 그룹에 400mg/kg의 용량으로 3, 6-비스(2-디에틸아미노에톡시) 아크리딘. 3HCl을, 200mg/kg의 용량으로 티롤론 하이드로 클로라이드를, 또는 식염수 위약을 1회경구 투여했다. 약치료후 24, 48, 72 및 96시간에 쥐들을 분리해서 인터페론 예민 바이러스인 콜롬비아SK를 LD₉₅의 용량으로 피하주사했다. 쥐를 바이러스 감염후 14일간 관찰하여, 약으로 전치료한 경우에 위약으로 치료한 대조군에 비해 생존수에 있어서 상당한 증가를 가져오는지의 여부를 결정했다. 전형적으로, 콜롬비아 SK 바이러스에 의한 치명적인 감염의 방어는 인터페론의 유도와 관련이 있다. 그 결과는 표 9에 있다.

[표 Ⅷ]

아크리딘을 경구 투여한후 BDF₁쥐¹에 있어서의 순환하는 인터페론의 유도

1. 300 mg/kg의 단일용량으로 0시간에 3, 9-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-아크리딘 3HCl을 경구투여한 BDF₁숫쥐

2. 쥐의 L-929 세포내의 소수포성구내염 바이러스의 세포병리적 효과에 있어서 50% 감소를 일으키는 혈청희석액의 역수

[표 Ⅸ]

인터페론예민 바이러스, 콜롬비아 SK에 대한 약의 항바이러스적 효과

(G) 정상적인 쥐에 있어서의 NK-세포 활성의 자극

천연의 킬러(Natural killer) 임파세포(NK 세포)의 존재가 최근에 쥐, 생쥐 및 사람의 경우에 설명되어 왔다. 정상적인 동물이나 사람에게서 유래한 NK세포는 시험관내에서 시험할때, 광범위한 유성 생식성및 타가생식성 종양세포 및 바이러스로 감염된 세포의 빠른 파괴를 중재한다.

NK세포로 중재된 목적세포의 파괴를 위해서는 동물을 미리 종양세포나 바이러스에 노출시키지 말아야 한다. 쥐에서 이식된 종양의 생장을 방해하는 것은 높은 수준의 NK세포 활성과 관련이 있어 왔다. 여러가지 바이러스, 박테리아, 또는 이식된 종양세포로 감염된 동물에 있어서의 NK세포 활성 수준의 빠른 증가는 면역감시체계내의 NK세포의 가능한 역할을 암시해준다. 인터페론의 투여는, 쥐의 NK세포 활성 수준의 빠르고 실제적인 증가를 유도하거나 야기한다는 것이 최근 보고되었다. 결과는 표 10에 나타냈다.

NK세포 활성의 이러한 자극에 대한 참고는 :

1) 제이, 와이, 디외, 제이, 에이, 하이보그, 에이치, 티이, 홀덴과 알. 비이 헤르 베르만, J. Immunology, 122, 174(1979).

2) 에스, 아인혼, 에이치, 글롬 그렌과 에이치, 그란더, Int. J. Cancer, 22, 405-412(1978)

3) 저자미상, Nature, 273, 759, (1978)

4) 저자미상, Nature, 277, 221, (1978)

[시험 공정]

5-10 마리의 쥐군들에 시험화합물이나 위약을, 경구, 복강내, 정맥내 혹은 피하로 투여한다. 약 18시간후에 쥐를 희생시켜 쥐의 각군으로 부터 비장을 제거하고 군대로 모은다. 모은 비장을 4℃의 혈청이 제거된 이글(Eagle)의 최소 필요배지(MEM)에 놓고 부드럽게 균질화하여 분열시킨다. 생성된 단일세포 현탁액을 60메쉬 나일론 체에 여과하여 찌꺼기를 제거하고 세포를 원심분리에 의해 모은다. 세포결정소구를 10㎖의저장 인산염 완충 식염수(0.0M 염화나트륨 +0.001M 인산칼륨완충액, pH7.0)에 5-10초간 재현탁하여 적혈구를 용해시킨다. 10% 태아송아지 혈청(MCM+F)으로 보충한 40㎖의 MEM를 가하고 세포현탁액을 여과하여 응집된 찌꺼기는 제거한다. 비장세포를 원심분리하여 모으고 MEM+F에 재현탁시키고 세포밀도를 배지 1㎖당 1-2×10⁷비장세포로 맞춘다.

사람이나 쥐의 종양세포를 NK세포로 중재된 세포분해의 목표물로 사용한다. 목표세포를 50-100 U Ci의 51크롬(51크롬산나트륨으로써)을 함유하는 MEM+F 0.5㎖에 배양한다. 37℃에서 1-3시간 배양한후, 목포세포를 40㎖ 부피의 냉 MEM+F로 3번 세척하여 세포내성 51크롬을 제거한다. 51크롬라벨을 붙인 목표세포를 0.5-1×10⁵/㎖ (배지)의 세포 밀도로 MEM+F에 재현탁시킨다.

시험화합물이나 위약으로 치료된 쥐의 비장으로 부터 모은, 각 세포 현탁액의 3중 분석을 NK-세포 활성을 평가하기 위해 실시한다. 비장세포(5×10⁶)과 51크롬라벨을 붙인 목표세포(1×10⁵)를 1.0㎖의 MEM+F를 함유하는 10×75㎖ 플라스틱 팔콘튜브(Falcon tube)에 넣는다. 튜브를 37℃에서 4시간 배양하고 4℃까지 식힌후 원심분리한다. 세포가 없는 상등배지의 부분표본들을 각 분석튜브로부터 제거하고, 용해된 목표세포로부터 유리된 51크롬의 양을 결정한다. 위약으로 치료된 쥐의 비장세포를 분석한 것에 비해, 약으로 치료된 쥐의 비장세포의 분석에서 유리되 나온 51크롬 양이 통계학적으로 상당히 증가한다는 것은, 약에 의한 NK세포활성의 자극을 보여준다.

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘. 3HCl이 이 시험에서 활성이다.

본 발명의 신규 화합물은 그들의 고유한 권리로 항종양활성을 갖고 있으며 화학요법 보조제이다. 더우기, 그것들은 항종양제의 활성을 상승 시키며 외과적치료에 보조제로서 작용한다.

[표 X]

아크리딘을 경구투여한 정상적인 쥐에 있어서의 천연킬러임파 세포의 증가된 수준

*비장의 NK-세포와 공배양된 종양목표세포를 용해하여 유리된 전체⁵¹Cr의 %

(H) 정상적인 쥐 골수에 대한 효과의 결핍

정상적인 쥐의 골수에 대한 약의 효과는, 대퇴골의 전체세포수를 세어 결정함으로써, 그리고 생존세포가 반고체 배지내에서 집락을 형성하는 능력에 의해 평가된다. C₅₈BL₆숫쥐에게 실험화합물은 경구투여하고 비교약 사이톡산은 복강내 투여한다. 치료 24시간후에 용량단위당 3마리의 쥐로 부터 얻은 하나의 대퇴골을 분석한다. 핵이된 세포를 모은 골수 현탁액에서 유핵세포의 수를 세고 4개의 배양접시마다 1㎖의 배양배지속에 50, 000세포를 분포시켜 집락검정을 실시한다. 골수세포생장을 지지하는 배지는 0.9% 메토셀, 1.8% 사람혈청알부민, 10%소의 태아 혈청 그리고 10% "조절된" L-세포배지로 보충된 맥코이(McCoy)배지이다. 배지를 습한 대기내에서 37℃에서 배양하고 7일째에 집락을 센다. 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘, 3HCl은 총 유핵세포수에 대해 최소 효과를 나타내나, 사이톡산은 세포 수를 상당히 저하시킨다.

본 발명의 화합물은, 약 5mg-200mg/kg (체중)/일의 범위로 경구투여시 면역 조절제(즉, 면역 반응을 조절한다)로서 효과적이다. 최적 결과를 위한 바람직한 용량은 약 5mg-약 50mg/kg 체중/일이고, 약 70kg의 체중을 갖는 객체에 대해 24시간 동안에 총량 약 350mg-약 3.5g의 활성 화합물이 투여되도록 용량을 정해 사용한다. 이런 용량은 최적치료적 반응을 제공할 수 있도록 조절할 수 있다. 예를들면, 여러번 나누어서 매일 투여할 수 있고, 또는 용량을, 치료상황의 위급에 의해 지시된 대로 용량을 비율적으로 감소시킬 수도 있다. 본 발명의 실질적인 이점은 활성화합물이 통상적인 방법 즉, 경구나 부칼(buccal) 투여를 할수 있고 또한 음식에 직접 넣을 수도 있다는 것이다.

본 발명의 화합물들은 예컨데 불활성 희석제 또는 동화가 용이한 식용 담체와 함께 경구투여될 수 있고, 혹은 경질이나 연질 껍질 젤라틴 캅셀에 봉해질 수 있다. 혹은 정제로 압축될 수 있다. 또는 음식에직접 넣어서 먹을 수도 있다. 경구치료적 투여를 위해서, 활성화합물들은 부형제와 결합될 수 있고 정제, 트로치, 캅셀, 엘릭서, 현탁액, 시럽, 웨이퍼등의 형태로 사용될 수 았다. 그런 조성물이나 제제는 적어도 0.5%의활성 화합물을 함유하여야 한다. 조성물 및 제제의 백분율은 물론 변할 수 있으며 단위무게의 약 2%-약60% 범위에서 알맞게 변할 수 있다. 그런 치료적으로 유용한 조성물 내의 활성성분의 양에서 적당한 투여량을 결정한다. 본 발명에 따른 바람직한 조성물이나 제제는, 경구 단위 용량형의 경우 약 50-250㎖의 활성 화합물을 함유할 수 있도록 제조된다.

정제, 트로치, 환제, 캅셀 등은 다음 것을 함유할 수 있다 : 트라가칸트고무, 아카시아, 옥수수전분이나 젤라틴 같은 결합제 ; 인산칼슘 같은 부형제 ; 옥수수전분, 감자전분, 알긴산등과 같은 붕해제 ; 스테아린산 마그네슘 같은 윤활제 ; 그리고 슈크로즈, 락토즈 또는 사카린 같은 감미제를 가할 수 있거나 페퍼민트, 동록유 또는 체리향 같은 향미제를 가할 수 있다. 단위용량형이 캅셀일때, 상기의 물질외에도, 그것은 지방유같은 액상담체를 함유할 수 있다. 여러가지 기타 물질들이 코팅제로서 쓰일 수 있거나 용량단위의 물리적 형태를 수정하기 위해 쓰일 수 있다. 예를들면, 정제, 환제 또는 캅셀제는 쉘락, 서당 또는 두가지로 코팅될수 있다. 시럽이나 엘릭서는 활성화합물, 감미제로서의 서당, 방부제로서의 메틸 및 프로필파라벤류, 염료와 체리나 오렌지향 같은 향미제를 함유할 수 있다. 물론 모든 단위용량형을 제조하는데 사용된 모든 물질은 약제학적으로 순수하고 사용된 양에 있어서 실질적으로 비독성 이어야 한다.

본 발명은 하기 특별한 실시예와 연결되어 보다 상세히 설명될 것이다.

[실시예 1]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디클로로-2-니트로아크리딘

119.5mg의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디클로로아크리딘을 1㎖의 농황산에 용해시킨다. 용액을 빙욕에서 냉각시키고 60mg의 질산칼륨을 가한다. 혼합물을 0℃에서 1시간, 그후 실온에서 20시간 교반하고, 20㎖의 빙수에 쏟고 5N 수산화나트륨으로 PH를 11.5로 맞춘다. 혼합물을 디클로로메탄으로 3번 추출한다. 추출물을 합하고 무수 황산나트륨상에서 건조하고, 여과한 후 진공에서 검은 검(gum)이 될때까지 농축한다. 이 검을 25㎖의 끓는 헥산에서 슬러리화(slurried) 하고 여과한다. 여액을 10㎖까지 농축하고 빙욕에서 냉각한다. 결정을 모으고 진공에서 건조하여 54mg의 바라던 생성물을 얻는다. m.p100-120℃

[실시예 2]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디니트로아크리딘

5.37g의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘트리하이드로 클로라이드 모노하이드레이트를 20㎖의 농황산에 용해시킨다. 용액을 빙욕에서 냉각시키고 2.22g의 질산칼륨을 가한다. 혼합물을 0℃에서 1시간 그후 실온에서 18시간 교반하고 300㎖의 빙수에 쏟고 10N수산화나트륨으로 PH를 12로 맞춘다. 혼합물을 디클로로메탄으로 3번 추출한다. 추출물을 합하고 물로 세척한 후 무수황산나트륨 상에서 건조하고 여과한 후 진공에서 농축하여 4.3g의 조생성물을 얻는다. 이 물질을 전개제로써 초산 에틸을 사용한 알루미나상의 건조컬럼크로마토그라피에 의해 정제한다. 화합물을 메탄올로부터 결정화하여 2.5g의 바라던 생성물을얻는다. m.p.138-140℃

[실시예 3]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디클로로아크리딘

2.148g의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘트리하이드로 클로라이드 모노하이드레이트를 8㎖의 농황산에 용해시킨다. 이용액을 빙욕에서 냉각시키고 1.175g의 N-클로로석신이미드를 가한다. 실시예3의 공정에 의해 1.5g의 적갈색 조생성물을 얻는다. 이생성물을 100㎖의 디클로로메탄에 용해시키고 2인치×

인치의 알루미나상(bed)를 통해 여과한다. 여과상을 1ℓ의 디클로로메탄, 그리고 1ℓ의 초산에틸로 세척한다. 여액을 합하고 진공에서 농축한후 잔사를 10㎖의 헥산으로부터 결정화하여 1.067g의 원하는 생성물을 황색결정으로서 얻는다. m.p.83-84℃

[실시예 4]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디브로모아크리딘

1.566g의 N-브로모석신이미드를 N-클로로석신이미드 대신 사용하여 실시예 3의 공정을 되풀이한다. 조생성물을 초산에틸 2ℓ를 사용하여 2 1/2인치×1 1/2인치 마그네졸 플러그를 통해 여과한다. 여액을 진공에서 농축하고 잔사를 10㎖의 헵탄으로부터 결정화하여 0.921g의 바라던 생성물을 황색결정으로 얻는다. m.p66-68℃

[실시예 5]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디클로로-1 (또는 2), 7-디니트로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디클로로아크리딘을, 혼합물을 80℃에서 16시간 가열하는 것을 제외하고는 실시예 1에 기술된 것과 같이 처리하여 원하던 생성물을 얻는다.

[실시예 6]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디브로모-2 (또는 1) 니트로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4.5-디브로모아크리딘을 실시예 2와 같이 처리하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 7]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디브로모-1-(또는2), 7-디니트로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디브로모아크리딘을 실시예 5에서와 같이 처리하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 8]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시-4, 5-디아세트아미도아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디니트로아크리딘을, 환원에서의 용매인 무수초산 내에서, 수소와 팔라디움촉매로 환원하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 9]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-2 (또는 1)-니트로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디브로모-2 (또는 1) 니트로아크리딘을 트리-

-부틸틴 하이드라이드로 환원하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 10]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-2 (또는 1)-아미노아크리딘

에탄올을 용매로서 사용하는 것을 제외하고는 실시예 8의 방법으로, 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-2 (또는 1) 니트로아크리딘을 환원하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 11]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디하이드록시아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디아미노아크리딘을 농질산/황산으로 디아조화하여 얻은 비스-디아조니움염을 5% 수용성황산내에서 3시간 교반하며 가수분해하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 12]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디플루오로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-4, 5-디아미노아크리딘을 실시예 11과 같이 디아조화한다. 비스-디아조니움염을 4불화붕산 칼륨으로 처리한다. 4불화붕산염을 열분해하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 13]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-1 (또는 2), 7-디클로로아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-1 (또는 2), 7-디아미노아크리딘을 농질산/황산으로 디아조화 한다. 비스-디아조니움염을 염화제 1동으로 처리하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 14]

3, 6-비스(2-클로로 에톡시) 아크리딘 하이드로클로라이드

오일내의 2.36g의 61.14% 수화나트륨현탁액과 5.20g의 3, 6-아크리딘디올 설페이트(21)의 혼합물(2 : 1)에 50㎖의 N, N-디메틸포름아미드를 가한다. 실온에서 40분간 교반한후, 6.35g (4.57㎖)의 클로로에틸메탄설포네이트를 반응혼합물에 가한다, 혼합물을 실온에서 2시간 그리고 50℃에서 2.5시간 교반한하고 250㎖의 빙수에 붓고 냉장고에서 밤새 방치한다. 생성된 황색결정을 모으고 100㎖의 클로로포름에 용해시킨다 이용액에 이소프로판올 내의 6N염산을 6㎖가한다. 에테르로 클로로포름용액을 희석하여 바라던 생성물을 2.8g의 황색결정으로 얻는다. m. p228-220℃

[실시예 15]

3, 6-비스(2-메틸아미노에톡시)아크리딘 트리하이드로클로라이드

100㎖의 메틸아민 내의 1.5g의 3, 6-비스(2-클로로 에톡시) 아크리딘 하이드로클로라이드현탁액을 80℃의 강철연소통에서 24시간 가열한다. 과량의 메틸아민을 감압하에서 제거한다. 오렌지색잔사를 함유한 클로로포름용액을 30㎖의 포화 수용성 중탄산 나트륨으로 2번 세척하고, 황산나트륨상에서 건조한 후 여과한다.

클로로포름을 제거하고 잔사를 50㎖의 에탄올에 용해시키고, 이소프로판올 내의 6N 염산 10㎖를 가한다. 이용액을 끓을 때까지 가열하고 맑은 용액이 얻어질 때까지 물을 가하고 용액을 식혀서 바라던 생성물 1.25g을 오렌지색결정으로 얻는다.

[실시예 16]

3, 6-비스(2-

-프로필아미노에톡시)아크리딘 트리하이드로클로라이드

3, 6-비스(2-클로로메톡시) 아크리딘하이드로 클로라이드 및

-프로필아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.20g을 황색결정으로 얻는다. m. p250-252℃

[실시예 17]

3, 6-비스(2-에틸아미노 에톡시)아크리딘 비스하이드로클로라이드

실시예 15와 같이, 3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 에틸아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.4g을 오렌지색결정으로 얻는다. m. p253-255℃

[실시예 18]

3, 6-비스(2-

-부틸아미노에톡시)아크리딘 트리하이드로클로라이드

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및

-부틸아민으로 부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.45g을 황색결정으로 얻는다. m. p254-256℃

[실시예 19]

3, 6-비스[2-(2-하이드록시 에틸아미노)에톡시]아크리딘

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로클로라이드 및 에탄올아민으로부터 실시예 15의 방법으로화합물을 제조하여 바라던 생성물 0.7g을 황색 결정으로 얻는다. m. p125-127℃

[실시예 20]

3, 6-비스[2-(2-하이드록시에틸아미노)에톡시]아리크딘리하이드로 클로라이드

3, 6-비스[2-(2-하이드록시에틸아미노)에톡시] 아크리딘을 실시예 15와 같이 트리하이드로클로라이드염으로 전환시켜 바라던 생성물 0.2g을 오렌지색 결정으로 얻는다. m. p256-258℃

[실시예 21]

3, 6-비스(2-아미노에톡시)아크리딘트리하이드로클로라이드

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로클로라이드 및 암모니아로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 0.3g을 오렌지색 결정을 얻는다. m. p274-275℃

[실시예 22]

3, 6-비스(2-이소프로필아미노에톡시)아크리딘 트리하이드클로라이드

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드와 이소프로필아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 1.1g의 바라던 생성물을 황색결정으로 얻는다. m. p232-234℃

[실시예 23]

3, 6-비스(2-아세트아미도 에톡시)아크리딘

3, 6-비스(2-아미노 에톡시)아크리딘을 무수초산/초산으로 처리하고 휘발성물질을 진공에서 제거하고 결정화하여 원하는 생성물을 얻는다.

[실시예 24]

3, 6-비스(2-아세트아미도 에톡시)-4, 5-디클로로아크리딘

3, 6-비스(2-아세트아미도 에톡시)아크리딘을 실시예 1과 같이 염소화하여 원하는 생성물을 얻는다.

[실시예 25]

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로클로라이드

11.80g의 수화나트륨(61.14% 오일분산액)및 26.0g의 3, 6-아크리딘 디올설 페이트(2ℓ)의 혼합물(2 : 1)에 250㎖의 건조 N, N-디메틸포름 아미드를 가한다. 혼합물을 실온에서 1.5시간 교반하고 49.8g의 3-클로로프로필-

-톨루엔 설포네이트를 가한다. 이 혼합물을 실온에서 3시간 20분 그리고 50℃에서 2시간 교반한다. 휘발성물질을 35-40℃의 감압하에서 제거하고, 잔사를 1200㎖의 빙냉포화 중탄산나트륨수용액에 담근다. 생성된 황갈색 결정을 모으고 500㎖의 클로로포름에 용해시킨다. 이소프로판올내의 6N염산을 30㎖가하고 혼합물의 에테르로 희석한다. 고체를 모으고, 에테르로부터 재결정하여 바라던 생성물을 황갈색 결정으로 얻는다. m. p211-213℃

[실시예 26]

3, 6-비스(2-이소프로필아미노프로폭시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로클로라이드와 이소프로필 아민으로부터 실시예 15의 방법으로 이화합물을 제조한다.

[실시예 27]

3, 6-비스(3-디에틸아미노프로폭시)아크리딘 트리하이드로클로라이드

혼합물을 100℃에서 24시간 가열하는 것을 제외하고는 실시예 15의 방법으로 3, 6-비스클로로프로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 디에틸아민으로부터 이 화합물을 제조하여 원하는 생성물 1.5g을 황색결정으로 얻는다. m. p235-236℃

[실시예 28]

3.6-비스(3-n-프로필아미노프로폭시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및

-프로필아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.54g을 황색결정으로 얻는다. m. p260-262℃

[실시예 29]

3, 6-비스(3-n-부틸아미노프로필)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(3-클로로프로폭시아크리딘 하이드로 클로라이드 및

-부틸아미노로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 2.0g을 오렌지색 결정으로 얻는다. m. p247-249℃

[실시예 30]

3, 6-비스(3-에틸아미노프로폭시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 에틸아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.4g을 황색결정으로 얻는다. m. p265-266℃

[실시예 31]

3, 6-비스(3-메틸아미노프로폭시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 메틸아민으로부터 실시예 15의 방법으로 화합물을 제조하여 바라던 생성물 1.4g을 황색결정으로 얻었다. m. p285-287℃

[실시예 32]

3, 6-비스(4-아미노부톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드와 암모니아로부터 실시예 15의 방법으로 이 화합물을 제조한다.

[실시예 33]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘-염화 제2철 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드 및 1당량의 염화 제2철의 현탁액을 2시간 환류하고 농축한후 냉각하여 1 : 1 복합체에 상응하는 바라던 생성물을 결정으로 얻는다.

[실시예 34]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘-염화아연 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 유리염기 및 1당량의 염화아연의 현탁액을 2시간 환류한다. 혼합물을 초산에틸로 침전시켜 1 : 1 복합체를 얻는다.

[실시예 35]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘-염화백금 복합체

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드 및 1당량의 6 염화 팔미틴산칼륨의 현탁액을 에탄올내에서 환류한다. 침전을 모아 바라던 1 : 1 복합체를 얻는다.

[실시예 36]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시) 아크리딘-염화크롬 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 및 1당량의 염화크롬의 현탁액을 2시간 환류한다. 용매를 제거하여 바라던 1 : 1 복합체를 얻는다.

[실시예 37]

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘-염화제 2동 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드 및 1당량의 염화제 2동의 현탁액을 2시간 환류한다. 농축하고 냉각하여 1 : 1 부가물을 얻는다.

[실시예 38]

3.6-비스(2-디메틸아미노 에톡시)아크리딘-코발트 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드 및 1당량의 질산코발트의 현탁액을 2시간 환류한다. 고체를 모아 바라던 1 : 1 복합체를 얻는다.

[실시예 39]

3, 6-비스(2-아미노 에톡시)아크리딘-동 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-아미노 에톡시)아크리딘 및 1당량의 염화 제2동의 현탁액을 2시간 환류한다. 용매를 제거하여 바라던 생성물을 얻는다.

[실시예 40]

3, 6-비스(2-디메틸아미노프로폭시)아크리딘-철 복합체

에탄올내의 3, 6-비스(2-디메틸아미노프로폭시)아크리딘 및 1당량의 염화제 2철의 현탁액을 2시간 환류한다. 용매를 제거하여 원하는 생성물을 얻는다.

[실시예 41]

2, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-2 (또는 1)-아미노-4, 5-디클로로 아크리딘

3, 6-비스(2-디에틸아미노 에톡시)-2-니트로-4, 5-디클로로 아크리딘을 실시예 10의 방법으로 환원하여 이화합물을 제조한다.

[실시예 42]

3, 6-비스[2-(4-메틸-1-피페라진일) 에톡시]아크리딘

혼합물을 100℃에서 24시간 가열하여 반응시키고 유리염기를 단리하는 것을 제외하고는 실시예 15의 방법으로, 3, 6-비스(2-클로로에톡시)-아크리딘 하이드로클로라이드 및 N-메틸피페라진으로 부터 이화합물을 제조한다.

[실시예 43]

3, 6-비스[2-(1-모르포리노)에톡시] 아크리딘

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 모르포리노로부터 실시예 42의 방법으로 제조한다.

[실시예 44]

3, 6-비스[3-(1-피페리디노)프로폭시] 아크리딘

유리염기를 단리하는 것을 제외하고는 실시예 27의 방법으로, 3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 피페리딘으로 부터 제조한다.

[실시예 45]

3, 6-비스[3-(1-피페리디노)프로폭시]아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스[3-(1-피페리디노)프로폭시]아크리딘의 트리하이드로 클로라이드 염을 실시예 1의 방법으로 제조한다.

[실시예 46]

3, 6-비스[3-(1-피롤일)프로폭시]아크리딘

3, 6-비스(3-클로로프로폭시)아크리딘 하이드로클로 라이드 및 피롤로부터 실시예 44의 방법으로 제조한다.

[실시예 47]

3, 6- 비스[3-(4- 메틸-1-피페라진일)프로폭시] 아크리딘

3, 6-비스(3-클로로폭시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 N-메틸피페라진으로 부터 실시예 44의 방법으로 제조한다.

[실시예 48]

3, 6-비스(4-클로로부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드

11.8g의 수화나트륨(오일내의 61.1% 분산액) 및 26.0g의 3, 6-아크리딘디올의 혼합물에 250㎖의 디메틸포름아미드를 가한다. 이혼합물을 실온에서 1.5시간 교반하고, 52.5g의 4-클로로부틸-

-톨루엔 설포네이트를 가한다. 이 혼합물을 실온에서 3시간 20분, 그리고 50℃에서 2시간 교반한다. 휘발성물질을 35-40℃의 감압하에서 제거한다. 잔사를 1200㎖의 빙냉포화중탄산나트륨 수용액이 담근다. 생성된 황갈색결정을 모으고 500㎖의 클로로포름에 용해시키고, 이소프로판올 내의 6N 염산 30㎖를 가하고, 혼합물을 에테르로 희석하여 바라던 생성믈을 염산염으로 얻는다.

[실시예 49]

3, 6-비스(4-디에틸아미노부톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

2.0g의 3, 6-비스(4-클로로부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 150㎖의 디에틸아민의 혼합물을 100℃의 강철연소통 내에서 24시간 가열한다. 과량의 디에틸아민을 감압하에서 제거한다. 잔사를 150㎖의 클로로포름에 용해시키고, 이 클로로포름용액을 30㎖의 포화중탄산나트륨수용액으로 2번 세척하고, 황산나트륨상에서 건조한 후 여과한다. 클로로포름을 증발시키고 잔사를 50㎖의 무수에탄올내에 용해시킨다. 이소프로판올내의 6N 염산 10㎖를 가하여 바라던 생성물을 황색결정으로 얻는다.

[실시예 50]

3, 6-비스(4-메틸아미노부톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 메틸아민으로부터 실시예 15의 방법으로 제조한다.

[실시예 51]

3, 6-비스(4-클로로-2-메틸부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드

3, 6-아크리딘디올 및 4-클로로-2-메틸-1-부탄올메탄으로부터 실시예 25의 방법으로 제조한다.

[실시예 52]

3, 6-비스(4-디메틸-2-메틸부톡시)아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로-2-메틸부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 디메틸아민으로부터 실시예 27의 방법으로 제조한다.

[실시예 53]

3, 6-비스(4-아미노-2-메틸부톡시) 아크리딘 하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로-2-메틸부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 암모니아 로부터 실시예 15의 방법으로 제조한다.

[실시예 54]

4, 5-디클로로-3, 6-비스 [3-(1-피페리디노) 프로폭시] 아크리딘

3, 6-비스[3-(1-피페리노)프로폭시]아크리딘 및 N-클로로석신이미드로부터 실시예 3의 방법으로 제조한다.

[실시예 55]

4, 5-디브로모-3, 6-비스[2-(1-피페리디노) 에톡시] 아크리딘

3, 6-비스[2-(1-피페리디노)에톡시]아크리딘 및 N-브로모석신이미드로부터 실시예 4의 방법으로 제조한다.

[실시예 56]

4, 5-디클로로-2, 3-비스[2-(1-피페리디노) 에톡시] 아크리딘

3, 6-비스[2-(1-피페리디노)에톡시]아크리딘 및 N-클로로석신이미드로부터 실시예 3의 방법으로 제조한다.

[실시예 57]

3, 6-비스[4-(1-피페리디노)부톡시]아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로부톡시)아크리딘 하이드로클로라이드 및 피페리딘으로부터 실시예 44의 방법으로 제조한다.

[실시예 58]

3, 6-비스[4-(1-피페리디노)-2-메틸부톡시 ] 아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(4-클로로-2-메틸부톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 피페리딘으로부터 실시예 44의 방법으로 제조한다.

[실시예 59]

3, 6-비스[2-(1-피롤일)에톡시]아크리딘 트리하이드로 클로라이드

3, 6-비스(2-클로로에톡시)아크리딘 하이드로 클로라이드 및 피롤로부터 실시예 46의 방법으로 제조한다.

[실시예 60]

4, 5-디클로로-3, 6-비스[2-(1-피롤일)에톡시]아크리딘

3, 6-비스[2-(1-피롤일)에톡시]아크리딘 트리하이드로 클로라이드 및 N-클로로석신이미드로부터 실시예 3의 방법으로 제조한다.

Claims

하기 구조식(A)의 3, 6-아크리딘올 또는 그의 반응성 유도체를 할로알킬-알칸-또는 할로알킬-페닐알칸-설포네이트와 함께 반응시키고, 하기 구조식(B)의 생성된 비스(할로알콕시) 아크리딘을 암모니아 또는 아민류와 함께 반응시킴을 특징으로 하는 하기 구조식(I)의 치환된 3, 6-비스(아미노알콕시) 아크리딘류와 그의 금속복합체 또는 산부가염의 제조방법.

여기서 n은 1, 2 또는 3 : R₁및 R₂는 각각 수소 또는 메틸 : R₃및 R₄는 같거나 다르고 수소 또는 (C₁-C₄)의 직쇄나 분지된 알킬 : 그리고 R₃및 R₄는 인접한 N(질소)과 함께 피롤리디노, 피페리디노, 모르폴리노 또는 N-메틸피페라지노 ; 그리고 R₅, R₆및 R₇은 같거나 다르고 수소, 플루오로, 클로로, 브로모 및 니트로이다 : 단 n이 1 또는 2이고 R₁과 R₂가 수소 또는 메틸이고 R₃및 R₄가 저급알킬일때는 R₅, R₆및 R₇중 적어도 하나는 수소이외의 치환체이어야 한다. X는 클로로 또는 브로모이다.