KR840000798B1 - N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법 - Google Patents

N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법 Download PDF

Info

Publication number
KR840000798B1
KR840000798B1 KR1019800003562A KR800003562A KR840000798B1 KR 840000798 B1 KR840000798 B1 KR 840000798B1 KR 1019800003562 A KR1019800003562 A KR 1019800003562A KR 800003562 A KR800003562 A KR 800003562A KR 840000798 B1 KR840000798 B1 KR 840000798B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amoxicillin
methyl
asparaginyl
water
impurities
Prior art date
Application number
KR1019800003562A
Other languages
English (en)
Other versions
KR830003496A (ko
Inventor
에쓰미 나까무라
다까시 스즈끼
다다스 야나기다
무네히꼬 야마무라
Original Assignee
다나베 세이야구 가부시기 가이샤
마쓰바라 이찌로오
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 다나베 세이야구 가부시기 가이샤, 마쓰바라 이찌로오 filed Critical 다나베 세이야구 가부시기 가이샤
Priority to KR1019800003562A priority Critical patent/KR840000798B1/ko
Publication of KR830003496A publication Critical patent/KR830003496A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR840000798B1 publication Critical patent/KR840000798B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D499/00—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D499/21—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a nitrogen atom directly attached in position 6 and a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D499/44—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6
    • C07D499/48—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical
    • C07D499/50—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical substituted in beta-position to the carboxamido radical
    • C07D499/54—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical substituted in beta-position to the carboxamido radical by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D499/00—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D499/04—Preparation
    • C07D499/18—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D499/00—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D499/21—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a nitrogen atom directly attached in position 6 and a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D499/44—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6
    • C07D499/48—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical
    • C07D499/58—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical substituted in alpha-position to the carboxamido radical
    • C07D499/64—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical substituted in alpha-position to the carboxamido radical by nitrogen atoms
    • C07D499/68—Compounds with an amino radical acylated by carboxylic acids, attached in position 6 with a carbon chain, substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, attached to the carboxamido radical substituted in alpha-position to the carboxamido radical by nitrogen atoms with aromatic rings as additional substituents on the carbon chain

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Polyamides (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

내용 없음.

Description

N'-메틸-D-아스파라길 아목시실린의 정제방법
제1도는 실시에 1-(A)에서 얻은 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실류의 수성요액의 고성능 액체크로마토그람이고,
제2도 및 제3도는 실시예 6-(A)에서 얻은 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액의 고성능 액체 크로마토그람임.
본 발명은 6-[D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산(이하에서 간단하게 “N'-메틸-D-아스파라기닐아목시실린”이라고 칭한다)의 정제방법에 관한 것이다.
N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 그람 음성 및 그람 양성의 미생물에 대하여 유능한 억제작용을 나타내는 반-합성페니실린이다.
N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은, (I) 6-아미노페니실란산을 D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐 초산으로 축합하거나 또는, (ii) 아목시실린을 D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온산으로 축합하여 제조되는 것은 공지되어 있다(미국특허 No.4,053,609).
그러나 상술한 방법으로 제조한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 부산물, 출발물질 등속과 같은 불순물로 예외없이 오염되어서 이것은 결과적으로 의약용으로는 정제를 거듭하여야 한다. 이들 불순물을 더욱 상세하게 하기 위한 예를 들면, D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온 아미도)-2-p-히드록시페닐 초산(이하에 “불순물(A)”라고 칭한다), 페니실로산(이하에 “불순물(B)”라고 칭한다), 페니실로산 및 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린(이하에, “불순물(C)”라고 칭한다)과 미지의 구조의 유색물질(이하에, 불순물(D)”라고 칭한다)은 (i)방법에 의하여 제조한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에 함유되고 불순물(B),(C) 및 (D)와 아목시실린(이하에, 불순물(E)”라고 칭한다)은 (ii)방법에 의하여 제조한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에 함유되어 있다.
종래에는 페니실린과 세팔로스포린을 활성목탄, 알루미나, 이론교환수지(예를 들면, 앰버라이트 Amberlite CG-400, 앰버라이트 IRA-93, 다이아이온(Diaion) WA-21, 앰버라이트 IR-45), 이온교환 다당류(예를 들면, 디에틸아미노 에틸셀룰로오스) 또는 세파덱스(Sephadex)의 컬럼에서 크로마토그래피로 정화하였다.
그러나, 상술한 불순물(A) 내지 (E)의 물리-화학적 성질은 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 성질과 완전히 비슷하므로, 이들의 공지방법으로는 이들 불순물을 만족하게 제거하기 곤란하다.
예를 들면, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 정제를 활성목탄의 컬럼에서 실시할 때에, 이 생성물은 불순물(A)나 (E)와 함께 거의 동시에 용출되고 그 다음 불순물(B)와 (C)가 용리된다.
한편으로는, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 정제를 다이아이온 WA-10, 다이아이온 WA-21, 엠버라이트 IRA-93 및 앰버라이트 IR-45와 같은 약한 음이온교환수지의 사용으로 실실할 때에는 불순물(A)나 (E)와 때로는 불순물(B), (C) 및/또는 (D)가 상기한 생성물의 대부분과 함께 용출도니다. 그리고 활성목탄과 약한 음이온교환수지는 N'-메틸-D-D아스파라기닐 아목시실린을 고도의 순도로 회수하기 위해 사용하는 것은 효과적이 아니다.
또한 알루미나의 컬럼에서의 크로마토그래피는 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에서 불순물(C) 및 (D)를 제거하는데 유용하나 불순물(A),(B) 및 (E)는 알루미나크로마토그래피로 상기한 생성물에서 분리되지 않는다.
그 외에 강한 음이온교환수지는 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에서 불순물(B),(C) 및 (D)를 제거하는데 사용되나 여기에서 불순물(A)나 (E)는 제거하지 못한다. 세파덱스나 이온교환 다당류의 사용은 또한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에서 불순물의 분리가 만족치 못하므로 이 경우에 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린(순도 : 약 80%)의 1g의 정제용으로 이들 흡착제를 400 내지 600ml의 다량을 사용하여야 한다.
본 발명의 목적은, N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 정제에 간단하고 실용적인 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 스티렌-디비닐벤젠 공중합체의 무극성 대기공성(macroporous) 흡착수지를 사용하여 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 정제하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 그외의 목적은 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 합성에서 파생하는 불순물을 제거하는 방법을 제공하는 것이다.
또 그외의 목적은 작업자들에게 간단한 흡착-용리조작에 의하여 그순도와 그수율로 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 회수할 수 있게 하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 그의 여러 목적은 아래의 설명으로 명백하게 될 것이다.
본 발명에 의하면, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은,
(A) N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액을 무극성, 대기공성 스티렌락비닐벤젠 공중합체 흡착수지와 접촉하여서 이 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하고,
(B) 흡착된 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 물이나 또는 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물로 용리하고 ; 그 다음,
(C) 상기한 용출물에서 정제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 분리하는 과정으로 정제되는 것이다.
0.6 내지 1.1ml/g의 세공 용적을 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(즉, 디비닐벤젠으로 가교된 폴리스티렌의 무극성 대기공성 흡착수지는 본 발명에 사용하기에 적당하다. 이 수지의 비표면적은 적당한 것으로는 200 내지 800㎡/g, 특히 300 내지 750㎡/g의 범위 이내라야 한다.
또한 본 발명에 사용되는 무극성 대기공성 수지는, 45 내지 840μ, 특히 70 내지 370μ의 입자크기를 가지는 것이 적당하다. 이러한 공중합체의 대표적 실례는 0.890ml/g의 세공용적, 501.3㎡/g의 비표면적과 280 내지 370μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(“다이아이온 HP-10”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사 제조), 1.077ml/g의 세공용적, 718.0㎡/g의 비표면적과 280 내지 370μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(“다이아이온 HP-20”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사 제조), 0.990ml/g의 세공용적, 570㎡/g의 비표면적과 280 내지 370μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(“다이아이온 HP-30”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사의 제조), 0.687ml/g의 세공용적, 704.7㎡/g의 비표면적과 280 내지 370μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벡젠 공중합체(“다이아이온 HP-40”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사의 제조), 0.693ml/g의 세공용적, 300㎡/g의 비표면적과 280 내지 840μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(“앰버라이트 XAD-2”의 상품명으로 로옴 앤드 하아스(Rohm & Haas) 회사의 제조)와 0.998ml/g의 세공용적, 200㎡/g의 비표면적과 280 내지 840μ의 입자크기를 가진 스티렌-디비닐벤젠 공중합체(“앰버라이트 XAD-4”의 상품명으로 로옴 앤드 하아스 회사의 제조)를 포함한다.
본 발명의 흡착 및 용리의 과정은 회분조작(回分操作)으로 실시되는데 컬럼에서 연속하여 이들 과정을 실시하는 것이 적당하다.
본 발명의 흡착과정은 무극성 대기공성 스티렌-비닐벤젠 공중합체 흡착수지를 충진한 컬럼에 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액을 통과시켜서 용이하게 완성된다. 본 발명에 사용되는 수지는 미리 물로 팽윤된 것이라야 한다.
사용하는 수지의 용량은 수성용액에 함유된 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 농도나 또는 컬럼을 통과하는 수성용액의 용량에 따라서 광범위하게 변경할 수 있다. 그러나 일반적으로 이것의 수성용액에 존재한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 매 그람당 3 내지 100ml, 특히 30 내지 80ml의 수지를 사용하는 것이 적당하다. 또한 0.1 내지 5, 특히 0.3 내지 2의 공간속도에서 수성용액을 컬럼에 통과시키는 것이 적당하다. 흡착과정은 2° 내지 15℃, 특히 4° 내지 6℃의 온도가 적당하다.
상술한 흡착과정을 실시하는데는 0.5 내지 25W/V%, 특히 10 내지 15W/V%의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 수성용액을 사용하는 것이 적당하다. 이 수성용액은, 예를 들면 물에 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 용해하여 보통방법으로 제조되는데 필요하면, 이 용액을 활성목탄으로 더 처리하거나 또는 불용물을 제거하기 위해 이것을 여과한다.
본 발명의 용출과정은 물이나 또는 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물의 사용으로 용이하게 완성된다.
즉, 수지의 흡착된 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 용출은 0.3 내지 15, 특히 0.5 내지 5의 공간속도에서 컬럼에 물이나 또는 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물을 통과시켜서 실시된다. 예를 들면, 물을 용출제로 사용할 때에는 물을 0.3 내지 15, 특히 0.5 내지 5의 공간속도에서 컬럼에 통과시키는 것이 적당하다. 이 경우 불순물(A)(또는 (E) 및 (B)는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 용착을 실시하기 전에 먼저 용출물에 완전히 유리되고 그 다음, N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 물로 컬럼에 용출을 계속하여서 컬럼에서 점차로 용출된다. 그리하여 정제N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액을, 이 화합물을 함유하는 용출물이나 분획물(分劃物)을 수집하여 얻는다.
이것에 관해서는 이들 용출물에 존재한 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 각 용출물들의 자외선 흡수를 272mm에서 분석하여서 검출되므로 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 이들의 용리물이나 분획물은 불순물을 함유하는 것들에서 용이하게 식별된다.
상술한 불순물(A) 내지 (E)중에서 불순물(C) 및 (D)는 컬럼에서 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 용출하는 과정중이나 또는 이 컬럼을 물로 더 세척할지라도 수지에 흡착된데로 남는다.
이에 반하여, 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물을 용출제로 사용하는 경우에 용출과정은 이 혼합물을 0.3 내지 5, 특히 1 내지 3의 공간속도에서 컬럼을 통과시키어 적당하게 실시된다.
이 경우에는 상기한 혼합물로 용출하기 전에, 이것에 흡착된 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 가진 무극성 대기공성 수지를 물로 세척하여서 불순물(A)(또는 (E)) 및 (B)를 제거하게 하는 것이 특히 바람하다.
이 세척과정은 0.1 내지 5의 공간속도에서 물을 상기한 수지의 컬럼에 통과시키어 실시된다.
물과 물에 혼화되어 유기용매의 혼합물의 적당한 실례는 물과 1 내지 4개의 탄소원자를 가진 알카놀(즉, 메탄올, 에탄올)의 혼합물 ;
물과 3 내지 4개의 탄소원자를 가진 알카논(즉, 아세톤, 메틸에틸케톤)의 혼합물 ;
물과 2 내지 4개의 탄소원자를 가진 디알킬에테르(즉, 디메틸에테르, 디에틸에테르)의 혼합물 ;
물과 4개의 탄소원자를 가진 환상 알킬에테르(즉, 테트라히드로푸란, 디옥산)의 혼합물 ;
물과 3 내지 4개의 탄소원자를 가진 N,N-디알킬알카노일아미드(즉, 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드)의 혼합물과 ;
물과 디메틸술폭시드의 혼합물을 포함한다.
상기한 것들 중에서 물과 1 내지 3개의 탄소원자를 가진 알카놀의 혼합물을 본 발명에서 사용하는 것이 바람직하다. 특히 1 내지 15V/V%(더욱 적당하게는 2 내지 8V/V%)의 수성 메탄올이나 수성 에탄올을 사용하면 컬럼에서 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 급속히 용리하여 이것의 고도의 회수율을 이루는데 유효하다.
동시에 불순물(C) 및 (D)는 상기한 수성 혼합물로 이들을 용리하는 동안 컬럼에서 실질적인 탈착현상을 볼 수가 없었다.
상술한 어느 경우에든지 용리과정은 2° 내지 15℃, 특히 4° 내지 6℃의 온도에서 적당하게 실시된다.
또한 스티렌-디비닐벤젠 공중합체 흡착수지에 흡착된 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 용리를 물이나 또는 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물을 사용하여 실시할 때에는 이 조제생성물에 함유한 불순물(A)(또는 (E)) 및 (B)는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 탈착을 실시하기 전에 용출물에 완전히 유리된다.
이에 반하여 스티렌-디비닐벤젠 공중합체 흡착수지에 일단 흡수된 불순물(C) 및 (D)는 물이나 또는 물과 물에 혼화되는 유기용매의 혼합물로 용출을 수차 반복하여도 용출물에 유리되지 않는다.
그러므로, 불순물에서 완전히 유리하는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액은 이 화합물을 함유하는 용출물이나 분획물을 회수하여 용이하게 얻어진다.
상기한 것으로 얻은 수성용액에서 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 분리는 통상 방법으로 이루어진다.
예를 들면, N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 상기한 수성용액의 역침투(逆浸透) 및/또는 동결건조에 의한 축합, 동결 농축, 농축에 의하여 고순도로 회수한다.
본 발명의 방법에 의하면, N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 합성에서 파생하는 여러 가지 불순물은 무극성 대기공성 흡착수지의 컬럼에서 간단한 흡착-용리조작에 의하여 이 화합물에서 완전히 유효하게 제거된다. 그외에 본 발명의 정제과정은 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 실질적인 분해를 하지 않고 실시할 수 있으므로 불순물에서 완전히 유리된 이 화합물을 높은 수율로 회수된다.
다음 실험과 여러 실시예는 본 발명을 더욱 상세하게 설명되나 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
실험 및 여러 실시예에서 고성능 액체 크로마토그래피를 아래와 같은 조건하에서 실시하였다.
조건(A) :
컬럼 : 스테인레스강 컬럼(150mm×4mm)
충진재 : 5-μm실리카겔에 화학적으로 결합된 옥타데실트리클로로실란
이동상 : 메탄올-pH 5.5 인산염
완충제(12.5 : 87.5V/V)
유속 : 0.5ml/분
조건(B) :
메탄올-pH5.5 인산염 완충제(2.5 : 97.5V/V)를 이동상으로 사용한 외는 (A)조건에 기술한 바와 동일한 조건하에서 고성능 액체 크로마토그래피를 실시하였다.
부수적으로 본 명세서에 기술한 불순물(B)의 화학적 구조는 다음과 같다.
불순물(B), 즉 페니실로산 :
Figure kpo00001
한편, 본 명세서에 기술한 불순물(C)을, IR-스펙트럼, UV-스펙트럼, NMR-스펙트럼 및 이들의 원소분석의 분석자료로 보아서 다음의 화학적 구조를 가지는 것으로 결정하였다.
불순물(C), 즉 페니실로산과 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 축합물.
Figure kpo00002
실험
(A) 방법
실시예 1-(A)에서 기술한 바와 동일한 방법으로 제조한 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액(순도 : 79%)을 수지나 또는 흡착제로 충진한 컬럼에 통과시켰다.
그 다음, 이 컬럼을 물로 용출하고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 분획물들을 회수하였다.
이들 분획물들에 함유한 여러 불순물과 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 순도 및 회수율을 고성능 액체 크로마토그래피로 검사하였다(조건A).
수지 또는 흡착제
(i) : 스티렌-디비닐벤젠 공중합체
(구멍용적 ; 1.077ml/g, 비표면적 ; 718㎡/g, 입자크기 ; 280 내지 370μ)
(“다이아이온 HP-20”의 상품명 미쓰비시 화공 주식회사의 제조)
(ii) : 강한 음이온교환수지
(트리메틸암모늄 기로 치환한 폴리스티렌 ; -N＋(CH3)3)
(“엠버라이트 CG-400”의 상품명으로 로움 앤드 하아스 회사의 제조)
(iii) : 약한 음이온교환수지
(디비닐벤젠 아크릴디메틸아미노 알킬아미드(즉, CH2=CH-CONH(CH2)n-N(CH3)2공중합체)
(“다이아이온 WA-10”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사의 제조).
(Ⅳ) : 약한 음이온교환수지
(디메틸아미노기 ; -N(CH3)2로 치환한 폴리스티렌)
(“엠버라이트 IRA-93”의 상품명으로 로움 앤드 하아스 회사의 제조)
(Ⅴ) : 약한 음이온교환수지
(N-(폴리아미노에틸렌)아미노에틸기 : -CH2NH(CH2CH2NH)nH로 치환ㅎㄴ 스티렌-디비닐벤젠 공중합체)
(“다이아이온 WA-21”의 상품명 미쓰비시 화공 주식회사의 제조)
(Ⅵ) : 에피클로로히드린으로 교차 연결한 텍스트란겔
(“세파덱스 G-10”의 상품명으로 파르마시아(Pharmacia) 정밀 화공 회사의 제조)
(Ⅶ) : 디에틸아미노에틸 셀룰로오스
(Ⅷ) : 알루미나
(XI) : 약한 음이온교환수지
(제1, 제2 및/또는 제3아미노기로 치환한 폴리스티렌)
(“엠버라이트 IR-45”의 상품명으로 로움 앤드 하아스 회사의 제조)
(B) 결과
결과를 다음의 표에 나타낸다. 즉, 본 발명의 방법에서 불순물(A) 및(B)는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 탈착을 실시하기 전에 용출물에 완전히 유리되고, 불순물(C) 및(D)는 물로 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 용출하는 동안 수지에 흡착된 대로였다. 그리고, 이들 불순물에서 완전히 유리된 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 거의 정략적으로 회수할 수 있었다. 그러나, 본 발명의 방법과는 다르게 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 흡착제 (Ⅱ),(Ⅲ),(Ⅳ),(Ⅵ) 및 (Ⅶ)을 사용하여 불순물(A)에서 분리될 수 없었다. 그 이유는, 양자의 물질이 거의 동시에 융출되었기 때문이었다.
알루미나(Ⅷ)을 사용한 경우에 불순물(A) 및 (B)는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린과 함께 용출되었다. 음이온교환수지(Ⅴ)의 경우에는 불순물 (A),(B) 및 (C)를 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린과 함께 용출되었다.
또한 음이온교환수지(IX)를 사용한 경우에는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린과 불순물(A) 내지 (D)의 모든 것이 거의 동시에 용출되었다.
[표] 분획물의 성분*
Figure kpo00003
(주의)
* : (＋) ; 해당성분은 수집한 분획물에 함유되었다.
(－) ; 해당성분은 수집한 분획물에 함유되었다.
** : N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 순도와 회수율은 수집한 하기한 분획물에 근거하여 평가하였다.
(Ⅰ),(Ⅳ) 및 (Ⅸ) ;
N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 모든 분획물
(Ⅱ),(Ⅲ),(Ⅵ),(Ⅶ) 및 (Ⅷ) ;
불순물(C)의 용출을 실시하기 전에 얻어진 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 분획물
(Ⅴ) ;
불순물(D)의 용출을 실시하기 전에 얻어진 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 분획물
[실시예 1]
(A) N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 합성
(1) 89.7g의 D-2-(D-2-0-니트로페닐술페닐아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-P-히드록시페닐 초산과 20.2g의 N-메틸모르폴린을 1000ml의 디메틸포름아미드에 용해하고 이것에 200ml의 테트라히드로푸란에 넣은 21.7g의 에틸클로로 탄산염의 용액을 고반하면서 -25° 내지 -20℃에서 가하였다.
그 다음 이 혼합물에 400ml의 물에 넣은 76.4g의 6-아미노-페니실란산 트리에틸아민염의 용액을 -10° 내지 -8℃에서 가하였다.
이 혼합물을 40분간 -10° 내지 -5℃에서 교반하고 30분간 -5° 내지 0℃에서 더 교반하였다.
이 혼합물을 수성 5% 구연산 용액으로 pH3으로 되게 조정하고 1000ml의 테트라히드로푸란과 500ml의 초산에틸의 혼합물로 추출하였다.
이 추출물을 물로 세척하여 건조하고 그 다음 40℃이하의 온도에서 출발하여서 용매를 제거하게 하였다.
이 잔유물을 에테르로 결정하여서 황색 침상물인 133g의 6-[D-2-(D-2-0-니트로페닐술페닐아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도]-페니실란산을 얻었다.
융점 165°-167℃(분해)
IRν
Figure kpo00004
(cm-1) : 3400, 3250, 1780, 1730, 1640.
(2) 제1항에서 얻은 생성물의 64.6g과 티오벤조아미드의 27.4g을 메탄올과 테트라히드로푸란의 혼합물(4:1)의 1000ml에 가하고 이 혼합물을 40분간 실온에서 교반하였다.
이 반응혼합물을 30℃이하의 온도에서 증발하여서 용매를 제거하였다. 이와 같이 하여 얻은 잔유물을 257.0ml의 물에 용해하고 이것에 8.0g의 활성탄을 가하여서 이 혼합물을 교반하였다. 이 혼합물을 여과하고 불용성 물질을 소량의 물로 세척하였다. 이 여과물과 세척용액을 합하였다.
257.0ml의 수성용액인 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 얻었다. 이 수성용액은 150mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다(순도 : 879%).
고성은 액체 크로마토그래피(조건 A) : 제1도
(B) N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 정제
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 1.077ml/g, 비표면적 : 718.0㎡/g, 입자크기 : 280 내지 370μ)(“다이아이온 HP-20”이 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사에서 제조)를 미리 물로 팽윤하고 800ml의 이 수지를 컬럼(직경 5.25cm, 높이 37.0cm)에 주입하였다.
(A)항에서 얻은 170ml의 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)을 컬럼에 통과시키어 상기한 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하였다.
그 다음 물을 2.0의 공간속도(즉, 26.7ml/분의 이동률)에서 컬럼에 통과시켜 900ml씩의 분획물을 수집하였다.
각 분획물에 용출한 여러 물질을 272nm에서 자외선 흡수로 검출하였다. 불순물(A) 및 (B)를 분획물 No. 1 및 2에 각각 용출하고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 분획물 No.3 내지 17에 용출하였다.
한편 불순물(C) 및 (D)는 상술한 조작에도 수지에서 용출되지 않았다.
분획물 No.3 내지 17을 가하여서 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 13500ml의 수성용액을 얻었다. 이 수성용액은 1.78mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다.
회수율 : 94.1%
고성능 액체 크로마토그래피(조건 A) : 불순물은 수성용액에서 검출되지 않았다.
상술한 것에서 얻은 수성용액의 동결 건조로 백색 분말인 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 얻었다.
IRν
Figure kpo00005
(cm-1) : 3280, 1760, 1660
박층 크로마토그래피(실리카겔, 용매 : n-부탄올-초산-물(4:1:1) : Rf=0.43.
[실시예 2]
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 1.077ml/g, 비표면적 : 718㎡/g, 입자크기 : 280 내지 370μ)(“다이아이온 HP-20”이 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사에서 제조)를 미리 물로 팽윤하고 800ml의 이 수지를 컬럼(직경 5.25cm, 높이 37.0)에 주입하였다.
실시예 1-(A)에 기술한 바와 같은 방법으로 얻은 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)의 167ml를 컬럼에 통과시켜 수지에 흡착하는 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린에 흡착하게 하였다.
이 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린이 흡착한 후 물(1,800ml)과 8V/V% 수성 에탄올을 2.0의 공간속도에서 컬럼에 계속하여 통과시켜서 900ml씩의 분획물을 수집하였다.
상술한 조작에 의하여 불순물(A) 및 (B)는 분획물 No. 1 및 2에 각각 용출되고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 분획물 No.3 내지 6에 용출하였다.
이에 반하여 불순물(C) 및 (D)는 조작하는 동안 이 수지에서 용출되지 않았다. 분획물 No.3 내지 6을 혼가하여서 정제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 3,600ml의 수성용액을 얻게 하였다. 이 수성용액은 6.68mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다.
회수율 : 96%
고성능 액체 크로마토그래피(조건 A) : 불순물은 이 수성액에서 검출되지 않았다.
[실시예 3]
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 1.687ml/g, 비표면적 : 704.7㎡/g, 입자크기 : 280 내지 370μ)(“다이아이온 HP-40”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사에서 제조)를 미리 몰로 팽윤하고 800ml의 이 수지를 컬럼(직경 5.25cm, 높이 37.0)에 주입하였다.
실시예 1-(A)에 기술한 바와 같은 방법으로 얻은 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)의 167ml를 컬럼에 통과시켜서 상기한 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하였다. 이러한 흡착을 한 후 물(1,600ml)와 2.0V/V% 수성 에탄올을 컬럼에 2.0의 공간속도에서 계속하여 통과시키고, 1,000ml씩의 분획물을 수집하였다.
상술한 조작에 의하여 불순물(A) 및 (B)는 분획물 No. 1 및 2에 각각 용출되고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 분획물 No.3 내지 8에 용출하였다. 이에 반하여 불순물(C) 및 (D)는 상술한 조작은 하는 동안 수지에서 용출되지 않았다. 분획물 No.3 내지 6을 혼가하여서 정제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 6,000ml의 수성용액을 얻게 하였다. 이 수성용액은 4.30mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다.
회수율 : 96.5%
고성능 액체 크로마토그래피(조건 A) : 불순물은 이 수성액에서 검출되지 않았다.
[실시예 4]
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 1.077ml/g, 비표면적 : 718㎡/g, 입자크기 : 280 내지 370μ)(“다이아이온 HP-20”의 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사에서 제조)를 미리 물로 팽윤하고 7,693ml의 수지를 컬럼(직경 14.0cm, 높이 50.0)에 주입하였다.
실시예 1-(A)에 기술한 바와 같은 방법으로 얻은 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)의 1.667ml를 컬럼에 통과시켜서 상기한 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하였다.
그 다음 물(1,600ml)와 4V/V% 수성 에탄올을 컬럼에 2.0의 공간속도에서 계속하여 통과시키고, 7,000ml씩의 분획물을 수집하였다. 상술한 조작에 의하여 불순물(A) 및 (B)는 분획물 No. 1 및 2에 각각 용출되고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 분획물 No.3 내지 11에 용출하였다. 이에 반하여 불순물(C) 및 (D)는 이런 조작을 하는 동안 수지에서 용출되지 않았다. 분획물 No.3 내지 11을 혼가하여서 정제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 63,000ml의 수성용액을 얻게 하였다. 이 수성용액은 3.85mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다.
회수율 : 97.0%
고성능 액체 크로마토그래피(조건 A) : 불순물은 이 수성액에서 검출되지 않았다.
[실시예 5]
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 0.693ml/g, 비표면적 : 300㎡/g, 입자크기 : 280 내지 840μ)(“앰버라이트 XAD-20”의 상품명으로 로옴 앤드 하아스회사에서 제조)를 미리 물로 팽윤하고 이 수지의 800ml를 컬럼(직경 5.25cm, 높이 37.0)에 주입하였다.
실시예 1-(A)에 기술전 바와 동일한 방법으로 얻은 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)의 200ml를 컬럼에 통과시켜서 상기한 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하였다. 그 다음 물(2,000ml)와 2V/V% 수성 에탄올을 컬럼에 4.0의 공간속도에서 계속하여 통과시켜서 1,000ml씩의 분획물을 수집하였다.
상술한 조작에 의하여 불순물(A) 및 (B)는 분획물 No. 1 및 2에 각각 용출되고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린은 분획물 No.3 내지 10에 용출하였다.
이에 반하여 불순물(C) 및 (D)는 상술한 조작은 하는 동안 수지에서 용출되지 않았다. 분획물 No.3 내지 10을 혼가하여서 정제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 8,000ml의 수성용액을 얻게 하였다.
이 수성용액은 3.60mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다.
회수율 : 06.0%
고성능 액체 크로마토그래피(조건 A) : 이 수성용액에서 불순물을 검출되지 않았다.
[실시예 6]
(A) N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 합성
(1) 1.51g의 N-(D-2-0-벤질옥시카르보닐아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피오닐옥시) 숙신이미드와 1.86g의 6-(D-2-아미노-2-p-히드록시페닐아세트아미도) 페니실란산트리에틸아민염을 10ml의 디메틸 포름아미드에 용해하였다.
이 용액을 16시간 동안 0℃ 내지 5℃에서 교반하였다.
이 반응혼합물에 20ml의 수성 5% 구연산 용액을 가하고 이 혼합물을 40ml의 테트라히드로푸란과 20ml의 초산에틸과의 혼합물로 추출하였다.
이 추출물을 물로 세척하고 건조한 다음 40ml 이하의 온도에서 증발하여서 용매를 제거하게 하였다.
이 잔유물(무색 카라멜)에 에테르를 가하고 이것의 침전물을 여과하여 수집하였다.
이렇게 하여서 무색 침상물인 2.35g의 6-(D-2-0-벤질옥시카르보닐아미노-3-N-메틸카르바모일프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산을 얻었다.
수율 : 91.1%
IRν
Figure kpo00006
(cm-1) : 3280, 1770, 1720, 1640
박층 크로마토그래피(실리카겔 용매 : 테트라히드로푸란-메탄올-초산(50:30:3)) : Rf=0.663
(2) 62.7g의 6-[D-2(D-2-벤질옥시카르보닐 아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미드)-2-p-히드록시페닐아세트아미도]-페니실란산과 40.0g의 30% 팔라듐-바륨 탄산염을 1,000ml의 메탄올에 현탁하였다. 이 현탁물을 1시간 동안 대기압력하의 수소가스 분위기 중에서 실온으로 진탕하였다.
수소의 포착이 완료된 다음 용해되지 않는 물질을 여과하여 제거하였다.
이 여과물을 40℃이하의 온도에서 증발하여서 용매를 제거하였다. 이것의 잔유물을 250ml의 물에 용해하고 이 수성용액을 9g의 활성탄으로 처리하였다.
조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 250ml의 수성용액을 얻었다. 이 수성용액은 150mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하였다(순도 : 79%).
고성능 액체 크로마토그래피 : 제2도(조건 A), 제3도(조건 B).
(B) N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 정제
스티렌-디비닐벤젠 공중합체 수지(세공용적 : 1.077ml/g, 비표면적 : 718.0㎡/g, 입자크기 : 280 내지 370μ)(“다이아이온 HP-20”이 상품명으로 미쓰비시 화공 주식회사에서 제조)를 미리 물로 팽윤하고 800ml의 이 수지를 컬럼(직경 5.25cm, 높이 37.0cm)에 주입하였다.
(A)항에서 얻은 수성용액(즉, 조제 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린의 수성용액)의 170ml을 컬럼에 통과시켜서 상기한 수지에 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 흡착하게 하였다.
그 다음 물(1,600ml)과 2V/V% 수성 에탄올을 컬럼에 20의 공간속도에서 계속하여 통과시키고 1,000ml의 분획물을 수집하였다.
상술한 조작에 희하여 불순물(B) 및 (E)는 분획물 No. 1 및 그에 각각 용출되고 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 분획물 No.3 내지 8에 용출되었다.
이에 반하여 불순물(C) 및 (D)는 상술한 조작을 하는 동안 수지에서 용출되지 않았다.
분획물 No.3 내지 8을 혼가하여서 N'-메틸-D-아스파라기닐 아목시실린을 함유하는 6,000ml의 수성용액을 얻게 하였다.
이 수성용액은 4.13mg/ml의 N'-메틸-D-아스파라기닐 시실린을 함유하였다.
회수율 : 97%
고성능 크로마토그래피(조건 A 및 B) : 불순물은 수성용액에서 검출되지 않았다.

Claims (1)

  1. 6-[D-2(D-2-아미노-3-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트 아미도]-페니실란산의 수성용액을 무극성 대기공성(macroporous) 스티렌 디비닐벤질 공중합체 흡착수지로 접촉하여서 이 수지에 6-[D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산을 흡착하게 하고 ;
    흡착된 6-[D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일 프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산을 물이나 또는 물과 물에 혼화될 수 있는 유기용매의 혼합물로 용출한 다음 ;
    정제 6-[D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일 프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산을 용출물에서 분리하는 과정을 포함하여 조제 6-[D-2-(D-2-아미노-3-N-메틸카르바모일-프로피온아미도)-2-p-히드록시페닐아세트아미도] 페니실란산을 정제하는 방법.
KR1019800003562A 1980-09-10 1980-09-10 N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법 KR840000798B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019800003562A KR840000798B1 (ko) 1980-09-10 1980-09-10 N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019800003562A KR840000798B1 (ko) 1980-09-10 1980-09-10 N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR830003496A KR830003496A (ko) 1983-06-20
KR840000798B1 true KR840000798B1 (ko) 1984-06-12

Family

ID=19217671

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019800003562A KR840000798B1 (ko) 1980-09-10 1980-09-10 N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR840000798B1 (ko)

Also Published As

Publication number Publication date
KR830003496A (ko) 1983-06-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1315229C (en) Chromatographic purification process
CS258114B2 (en) Method of raw anthracycline glycosides purification
DE69933046T2 (de) Reinigung von echinocandin cyclopeptiden
DK173231B1 (da) Fremgangsmåde til udvinding af glykopeptidiske antibiotika
US4874843A (en) Chromatographic purification process
US4440753A (en) Purification of glycopeptide antibiotics using non-functional resins
Cassidy et al. EPITHIENAMYCINS. II ISOLATION AND STRUCTURE ASSIGNMENT
EP1697383A1 (en) Process for the purification of macrolides
US4172077A (en) Process for the isolation of alkaloid components from the plant Vinca Rosea L.
JP3083369B2 (ja) テイコプラニン回収方法
KR840000798B1 (ko) N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법
US4313875A (en) Purification of penicillin derivative
JPH0645626B2 (ja) セフタジジムの回収方法
US4003892A (en) Method of separating thionine and its N-methyl derivatives from each other
KR20080039970A (ko) 식물 유래의 지지체 상에서의 타크롤리무스 정제 방법
US3983108A (en) Antibiotic purification process
AU613640B2 (en) Chromatographic purification process
US3093638A (en) Cephalosporin c
KR20010050635A (ko) 고순도 아카보스 제조방법
US5180670A (en) Method for purification of mitomycin C
US5360917A (en) Process for producing macrolide compounds
JPH02178288A (ja) ３―ヒドロキシメチル―７―アミノセフエムカルボン酸の精製法
KR920000102B1 (ko) 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법
JP2971128B2 (ja) マイトマイシンｃの精製法
Rudolph et al. Purification of the Chlorosis Inducing Toxin from Pseudomonas phaseolicola (Burkh.) Dowson.