KR820001271B1

KR820001271B1 - 2'-데옥시-5-플루오로 우리딘 유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR820001271B1
Application number: KR790002877A
Authority: KR
Inventors: 세쓰로우 후지이; 에이이찌 사가키바라
Original assignee: 에이이찌 사가키바라; 후나이 야쿠힌 고교 가부시끼가이샤
Priority date: 1979-08-23
Filing date: 1979-08-23
Publication date: 1982-07-19

Abstract

내용 없음.

Description

2'-데옥시-5-플루오로 우리딘 유도체의 제조방법

본 발명은 다음의 일반식(Ⅰ)로 표시되는 신규한 2'-데옥시-5-플루오로 우리딘 유도체의 제조방법에 관한 것이다.

(식중, R은 수소원자, 1내지 5개의 탄소원자를 갖는 알킬기, 1내지 4개의 탄소원자를 갖는 알콕시기, 아세틸옥시기 또는 할로겐원자를 나타내고 n은 1-3의 정수를 표시한다.)

2'-데옥시-5-플루오로 우리딘(이하 FUDR라함)은 제암제로서 사용되고 있는 화합물이다.

그렇지만 의약품으로서의 FUDR은 극히 독성이 강하고 안전역이 좁으며 투여경로가 동맥내에 주사하는 방법에 국한되어 경구 투여가 불가능하므로 치료시에 제한을 받는 결점이 따른다. (피시지안스 데스크 리퍼렌스, 1387항, 1978년)

종래 FUDR의 제암작용 발현의 작용 기능에 대하여 씨, 하이델버거(C. Heidelberger)등에 의하여 연구가 되고, 또 그들에 의하여 상술의 결점이 없고 제암작용이 보다 강력한 FUDR유도체를 찾아내려는 연구도 행해져왔다.

그리고 이러한 FUDR유도체중 한개인, 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로 우리딘(이하 아세틸 FUDR라함)는 생체내에서 분해되기 곤란하고 경구 투여가 가능하다는 특징이 있음이 발결되었다. (캔사, 리서치, 23권, 49항이하, 1963년) 그렇지만 제암활성에 관한 실험결과에 의하면 아세틸 FUDR은 FUDR에 비하여 큰 차이가 없거나 유효성이 낮다고까지도 평가되고 있어서 그 효능이 불만족한것임이 알려졌다. (바이오 캐미칼, 파마칼러지 14권, 1605항이하, 1965년, 캔사리서치, 23권, 420항 이하, 1963년). 이와 같이 FUDR 유도체에 관해서는 많은 연구가 행하여 지고 있고 그와 같은 결과는 예컨데 FUDR 및 그 유도체의 화학구조와 제암활성과의 상관관계로서 캔사 리서치, 30권, 1555-1556항, 1970년에 총괄되어 있다. 즉 위 문헌에는 FUDR의 제암작용 발현의 작용 기능설명에서 작용 발현의 열쇠가 되는 것으로 판명된 3종류의 효소활성을 기준으로 하여 FUDR의 분자구조상 어떠한 부위가 여하한 형태의 것이 필요한가를 나타내는 그림이 게재 설명되어 있고 FUDR의 피리미딘 핵상의 3위의 N에는 치환되지 못한다고 설명되어 있다.

본 발명자들은 아세틸 FUDR 유도체에 있어 그 항종활성의 강화와 독성의 저하를 꾀하기 위해 연구를 계속한 결과 상술한 바와는 달리 FUDR의 피리미딘 핵상의 3위의 N을 특정의 알로일기로 치환한 일반식(Ⅰ)로 표시되는 신규 화합물이 요구하는 작용을 갖는 것을 찾아내어 본 발명을 완성하였다.

본 발명을 상술하면 다음과 같다.

일반식(Ⅰ)에 표시된 R중에 1내지 5개의 탄소원자를 갖는 알킬기로서는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, n-부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기, n-펜틸기, 이소펜틸기등의 직쇄 또는 측쇄를 갖는 일칼기를 들수 있고 1내지 4개의 탄소원자를 갖는 알콕시기로서는 메톡시기, 에톡시기, n-프로폭시기, 이소프로폭시기, n-부톡시기, sec-부톡시기, tert-부톡시기등의 직쇄 또는 측쇄를 갖는 알콕시기를 들수 있고 할로겐원자로서는 불소, 염소, 브롬, 요오드등을 들을수 있다.

본 발명에 의한 일반식(Ⅱ)의 화합물은 예를 들면 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-플루오로 우리딘에 일반식(Ⅱ)로 표시되는 안식향산 할라이드를 반응시키므로서 제조된다.

(식중, hal은 할로겐 원자를 표시한다.)

원료의 안식향산 할라이드로서는 특히 클로라이드 또는 브로마이드가 적당하다.

원료의 사용 몰 비는 아세틸 FUDR 1몰에 대하여 1내지 3몰의 안식향산 할라이드를 사용하는 것이 좋다.

반응은 통상 유기용매중에서 행하는 것이 좋고 유기용매로서는 에텔, 디옥산, 클로로포름, 아세트니트릴, 피리딘, 디메틸포름아마이드등의 비프로론성용매를 들을 수 있다.

본 반응은 유기염기 특히 트리알킬 아민, 피리딘등과 같은 방향족 아민의 존재하에 행하는 것이 좋다.

염기는 통상 안식향산 할라이드 1몰에 대하여 1내지 5몰을 사용하나 유기염기를 그 자신용매로서 사용할때는 그 이상의 몰수로 사용할 수 있다.

반응은 빙냉하 내지 용매의 비등온도로 진행시키고 반응시간은 30분 내지 수시간이 바람직하다. 반응생성물은 반응혼합물을 여과하여 얻은 여액을 감압하에 농축하고 이것을 재결정화시키던가 또는 크로마토그래프에 의하여 분리, 정제하여 본 발명 화합물을 얻는다. 점조성 유상물로서 얻을 때에는 소량의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 후 이것을 교반하면서 서서히 수중에 주입하므로서 본 발명 화합물을 고체 상태로 얻을 수 있다.

이하 본 발명에 의한 화합물의 약리시험결과를 나타낸다.

(a) 항종양 활성측정 시험

시험방법 : 잘코마 180종양세포(ICR계 수컷 쥐의 복강내에 계대배양되어 있는 것) 약 500만개를 5주된 ICR계 수컷 쥐의 경부피하에 이식하였다.

24시간후에 본 발명의 화합물을 투여하기 시작하였다. 투여는 1일 1회, 7일간, 경구 존데법에 의하여 강제투여 하였다. 다시 연일 투여 직전에 각 동물의 체중을 측정했다. 본 발명화합물은 1%트원80 (Tween 80)-생리식염액에 현탁한 상태로 투여하고 또한 대조군에는 그 용액만을, 각동물당 0.1ml/10g의 동일 용량을 투여하였다.

본 발명 화합물의 투여량은 개개의 화합물에 따라 다르나 대개 1mg/kg 내지 200mg/kg의 범위이고, 동일화합물에 있어서는 투여량을 3내지 12단계로 바꾸고 각 투여단계마다 1군의 쥐(6마리로된)에 본 발명화합물을 투여했다. 또한 대조군에는 18마리의 쥐를 사용했다. 이식으로부터 8일째에 쥐를 에텔마취하여 방혈시켜서 치사시키고 종양조직을 적출하여 곧바로 종양 중량을 측정하였다. 개개의 화합물에 따라, 투여량마다 종양중량의 평균치(이것을 T라함)와 대조군에 있어서 종양중량의 평균치(이것을 C라함)를 각각 구하여 T/C치가 0.70 및 0.50을 나타내는 수치를 읽어냈다.

결과

항종양활성평가에 있어, T/C치가 0.70-0.51의 경우는 약간 유효하고 0.50이하의 경우는 유효하다. (응용약리 7권, 1277-1292항 1973년) 따라서 T/C 0.70 또는 0.50을 나타내는 수치가 작을수록 항종양활성이 강하게된다.

본 발명의 화합물은 공지화합물에 비하여 항종양활성의 작용강도에 있어 양호한 것으로 밝혀졌다.

(b) 독성측정의 시험

본 발명화합물의 작용으로부터 판단하여 측적독성을 고려하여 다음의 시험방법으로 독성치를 구했다.

시험 방법 : 5주된 ICR계 수컷쥐를 1군을 10마리로하여 사용했다. 투여는 1일 1회, 7일간, 경구 존데법에 의하여 강제적으로 행하였다. 또한 투여 직전에 각동물의 체중을 측정하였다. 본 발명화합물은 1%트원80 (Tween 80)-생리식염액에 현탁한 상태로 각동물당 0.1ml/10g의 동일용량을 투여하였다.

본 발명 화합물의 투여량은 개개의 화합물에 따라 다르나, 대개 100mg/kg 내지 800mg/kg의 범위로 동일화합물에 따라 투여량을 45단계로 나누어 각 투여단계마다 1군의 쥐에 본 발명화합물을 투여하였다. 투여 개시로 부터 14일째에 동물의 생사를 판정하고 리치필드 월콕슨법에 의하여 LD₁₀을 구하였다.

결과 :

상기(a) 및 (b)의 시험결과로부터 치료계수(LD₁₀치/T/C0.50치)를 산출하면 다음과 같다.

※ 5-플루오로 우리딘에 관해서 (a) 및 (b)와 같은 시험을 행하여 치료 계수를 구했다.

상기표로부터 알수있는 바와 같이 본 발명 화합물을 공지 화합물에 비하여 보다 우수한 항종양 활성을 갖는 것이 분명하다.

본 발명화합물의 임상상의 투여량은 1일에 100내지 1000mg의 범위가 좋다. 투여경로는 정맥내 주사, 좌제에 의한 직장 내 투여와 같이 비경로적인 투여도 가능하나 경구적 투여가 적합하다. 경구투여 방법으로서는 각단위당 30-500mg의 본 발명화합물을 활성성분으로 함유하는 정제, 캡슐제, 액제등을 를수있다. 이들 정제, 캡슐제는 활성성분외에 통상 사용되는 다음과 같은 성분을 함유할 수도 있다. 예를 들면 부형제로서는 유당, 콘스타치, 감자 전분, 미결정셀룰로우스등, 결합제로서는 어런비아고무, 젤라틴, 하이드록시프로필 셀룰로우스, 감자 전분 등 활택지로서는 스테아린산 마노네슘, 탈크등, 붕괴제로서는 카복시메틸 셀룰로우스, 칼슘, 감자전분, 콘스타치등이 사용된다. 액제에는 통상 쓰여지는 용해제, 현탁제 등을 사용할 수 있으나 특히 폴리에틸렌글리콜 200을 쓰는 것이 더 좋다. 다음에 실시예를 설명하다.

[실시예 1]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 10.0g과 트리에틸아민 10ml를 무수디옥산 50ml에 용해한 후 빙냉한다.

2-메틸벤조일 클로라이드 7.0g을 가한후 실온에서 30분간, 45℃로 60분간 유지한다. 생성한 결정을 여과 제거하여 여액을 감압하에 농축한다. 유상잔류물을 에타놀 50ml에 가온용해한 다음 냉각시켜 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸벤조일) 우리딘의 결정을 얻는다. 에타놀로부터 재결정하여 무색프리즘형 결정 11.3g(수율 84.0%)을 얻는다. 본품은 융점 108-109℃로 흡수 스펙톨은 본품의 구조를 나타낸다.

핵자기공명 흡수 스펙톨 : δ(ppm, CDCl₃)

우리딘 부분 7.76(d, H6), 6.20(broad-t, H1'), 2.4부근(m, H2'), 5.10-5.26(m, H3'), 4.16-4.40(m, H4'.5'), 2.07(s, CH₃CO), 2.00(s, CH₃CO)벤조일부분 7.58(d, H6), 7.12-7.54(m, H3,4,5). 2.62(s, CH₃)

원소분석치 : C₂₁H₂₁FN₂O₈로서의 계산치(%) C56.25, H4.72, N6.25 실측치(%) C56.10, H4.62, N6.42

[실시예 2]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 500mg을 무수피리딘 5ml에 용해한 후 빙냉한다. 2-메틸벤조일 크로라이드 710mg을 가한 후 실온으로 100분간 유지한다. 이하 실시예 1과 같이 처리하여 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸벤조일) 우리딘의 결정200mg(수율 29.5%)을 얻는다. 본품은 108-109℃을 나타내고, 실시예 1로 얻은 결정과 혼융 시험에 있어서 일치하였다.

[실시예 3]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로 우리딘 500mg과 트리에틸 아민 0.76ml를 무수 클로르포름 10ml에 용해한 후 빙냉한다. 2-메틸 벤조일 크로라이드 710mg을 가한 후 실온으로 120분간 유지한다. 이하 실시예 1과 같이 처리하여 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸벤조일) 우리딘의 결정 330mg (수율 48.7%)을 얻는다. 본품은 융점 108-109℃을 나타내고, 실시예 1로 얻은 결정과 혼융시험에 있어서 일치하였다.

[실시예 4]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 500mg과 트리에틸아민 0.76ml를 무수아세트니트릴 10ml에 용해한 후 빙냉한다. 2-메틸벤조일 크로라이드 710mg을 가한 후 실온에서 90분간 유지한다.

이하 실시예 1과 같이 처리하여 2'- 데옥시- 3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸 벤조일) 우리딘의 결정 260mg(수율 38.4%)를 얻는다.

본품은 융점 108-109℃를 나타내고, 실시예 1로 얻은 결정과 혼용시험에 있어서 일치하였다.

[실시예 5]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 500mg과 트리에틸아민 0.76ml를 무수에텔 20ml에 가해 교반한다. 2-메틸벤조일 크로라이드 710mg을 가한 후 실온에서 6시간 교반을 계속한다. 반응액의 시리카겔 박층 크로마토 그래프에 의하여 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸벤조일) 우리딘의 생성을 확인하였다.

전개용매로서 크로로포름 : 메타놀=39 : 1을 사용하여 실시예 1로 얻은 화합물을 표준품으로 사용하였다.

RF치, 0.62

[실시예 6]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로 우리딘 500mg과 트리에틸아민 0.76ml를 무수디메틸포름 아마이드 10ml에 용해한 후 빙냉한다. 2-디메틸벤조일 크로라이드 710mg을 가한 후 실온에서 90분간 유지한다. 반응액의 시리카겔 박층 크로마토 그래프에 의하여 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로-3-(2-메틸벤조일) 우리딘의 생성을 전기 실험예와 같이 확인하였다.

[실시예 7]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 15.0g과 트리에틸아민 15ml를 무수디옥산 75ml에 용해한 후 빙냉한다. 2,3-디메톡시벤조일 크로라이드 13.6g을 가한 후 실온에서 30분간, 90℃로 30분간 유지한다. 생성한 결정을 여과 제거하여 여액을 감압하에 농축한다. 유상 잔류물에 에타놀 200ml를 가해 가열하면 유상잔류물을 완전히 용해시킨 후 냉각하면 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-3-(2,3-디메톡시벤조일)-5-플루오로 우리딘의 결정을 얻는다. 에타놀로부터 재결정하여 무색침상정 19.65g(수율 88.4%)를 얻는다. 본품은 융점 139-141℃로, 2흡수 스펙톨은 본품의 구조를 지지한다.

핵자기공명흡수스펙톨 : δ(ppm, CDCl₃), 우리딘 부분 7.71(d, H6), 6.24 (broad-t, H1'), 2.4부근(m, H2'), 5.14-5.28(m, H3'), 4.16-4.43(m, H4',5'), 2.11(s, CH₃CO), 2.04(s, CH₃CO), 벤조일부분 7.54(dd, H6), 7.10-7.20(m, H4,5), 3.85(s, OCH₃), 3.83(s, OCH₃)

원소분석치 : C₂₂H₂₃FN₂O₈으로서의 계산치(%)

C 53.44, H 4.69, N 5.67,

실측치(%) C 53.17, H 4.92, N 5.80

[실시예 8]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 1.0g과 트리에틸아민 0.76ml를 무수디옥산 10ml에 용해한 후 빙냉한다. 벤조일크로라이드 0.65g을 가한 후 실온으로 60분간, 45℃로 30분간 유지한다. 생성한 결정을 여과 제거하고, 여액을 감압하에 농축한다.

유상잔류물을 시리카겔 칼람크로마토그래프(칼람 : 직경 3.5cm, 길이 21cm, 용매 : 크로로포름-메타놀 99 : 1)로 정제한다. 유상잔류물을 디메틸 설폭사이드 10ml에 용해하여 충분히 교반시킨 물 300ml중에 적하하면 침전이 생성한다. 이것을 여과하여 충분히 수세한 후 감압하에 실온으로 건조시키면 3-벤조일-2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘의 분말 1.04g(수율 79.1%)이 얻어진다.

본품의 흡수스펙톨은 본품의 구조를 지지한다.

핵자기공명 흡수스펙톨 : δ(ppm, CDCl₃), 우리딘 부분, 7.82(d, H6), 6.31 (broad-t, H1'), 2.5부근(m, H2'), 5.66-5.35(m, H3'), 4.24-4.47(m, H4',5'), 2.16(s, CH₃CO), 2.07(s, CH₃CO), 벤조일부분 7.99(d, H2,6), 7.46-7.81(m, H3,4,5)

원소분석치 : C₂₀H₁₉FN₂O₈로서의 계산치(%)

C 55.30, H 4.41, N 6.45, 실측치(%) C 55.52, H 4.48, N 6.63

[실시예 9-39]

실시예 8과 같이하여 다음표로 표시하는 2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 유도체를 얻었다.

[실시예 40]

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 500mg과 트리에틸아민 0.76ml을 무수디옥산 10ml에 용해한 후 빙냉한다. 벤조일브로마이드 850mg을 가한후 실온으로 15분간 70℃로 30분간 유지한다.

이하 실시예 8과 같이 처리하여 3-벤조일-2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘 400mg (수율 60.5%)을 얻는다. 본품의 흡수 스펙톨은 실시예 8로 얻은 화합물과 일치하였다.

Claims

2'-데옥시-3',5'-디-0-아세틸-5-플루오로우리딘에 일반식(Ⅱ)로 표시되는 안식향산 할라이드를 반응시킴을 특징으로하는 일반식(Ⅰ)로 표시되는 2'-데옥시-5-플루오로우리딘유도체의 제조방법.

(식중, R은 수소원자, 1내지 5개의 탄소원자를 갖는 알킬기, 1내지 4개의 탄소원자를 갖는 알콕시기, 아세틸옥시기 또는 할로겐 원자를 나타내고, n은 1-3의 정수를 나타내며 hal은 할로겐원자를 표시한다)

(식중 R 및 n은 전기와 같음)