KR20240120739A - 고분자량 가교결합 히알루론산과 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생리학적으로 허용 가능한 매질에서, 본 발명에서 정의된 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산 및 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 화장료(cosmetic) 분야에 관한 것이다. 특히 피부 및/또는 입술(lip) 케라틴 물질의 즉각적인 스무딩 효과(smoothing effect) 및/또는 밀도 및/또는 볼륨(volume)의 증가를 제공하기 위해 의도된, 고분자량 가교결합 히알루론산(high molecular weight cross-linked hyaluronic acid) 및 저분자량 비-가교결합 히알루론산(low molecular weight non-cross-linked hyaluronic acid)의 구체적인 조합에 특히 관련된 것이다.
히알루론산은 세포외 기질의 필수 구성성분 중 하나이다. 피부에서, 이는 섬유아세포에 의해 합성되고, 이로부터 세포외 공간으로 분비된다. 히알루론산은 특히 진피의 구조와 조직에 관여하여 진피의 단단함(firmness)과 탄력성(elasticity)을 보장하는 데 도움을 준다. 이 조직에서, 밀착연접은 표피의 물 균형과 투과성 조절에 핵심적인 역할을 한다(Furuse et al., 2002. J Cell Biol. 156, 1099-11, Morita et al., 2011. J Derm Sci. 31, 81-89). 마찬가지로, 340 kDa 당단백질인 피브릴린-1(fibrillin-1)은, 진피의 탄성 네트워크의 필수적인 구성요소이다. 게다가, 히알루론산은 강력한 수분 보유 능력을 가지고 있다. 따라서 피부 수화도를 조절하는 데 중요한 역할을 한다.
수년 동안, 히알루론산은 산업적으로, 특히 박테리아 발효에 의해 생산될 수 있었고, 화장 산업에서는 이 분자를 노화방지 및 보습 특성을 위해 사용하는 것이 일반적이다.
구조적으로, 히알루론산은 β-1,4 및 β-1,3 글리코시드 결합을 교대로 연결하여 함께 연결된 글루쿠론산과 N-아세틸글루코사민으로 이루어진 이당류 모노머들 자체의 반복으로 형성된 폴리머이다. 여느 폴리머와 마찬가지로, 히알루론산은 수 천 달톤에서 수 백만(대략 5000 내지 20,000,000 Da)의 반복 횟수에 따라 몰 질량이 달라질 수 있는 거대 분자이다.
노화 방지 요인이기도 한 즉각적인 스무딩 효과를 얻기 위해서, 화장료 제형에 충전제(filler)를 첨가하여 피부의 시각적 및 촉각적 요철을 흐리게 하고, 이에 따라 광학 효과(optical effect)를 통해 잔주름 및 주름을 포함하는 노화 징후를 감소시키는 것이 일반적이다. 그러나, 충전제는 히알루론산이 제공하는 보습 효과에 부정적인 영향을 미치는 것으로 알려져 있다.
따라서 피부 및/또는 입술에 즉각적인 스무딩 효과를 또한 제공하는 새로운 보습 화장료 조성물(cosmetic composition)을 제공할 필요가 있다.
출원인은 이러한 필요를 충족시키기 위해 정확하게 새로운 화장료 조성물(cosmetic composition)을 개발하였다. 참으로, 놀랍게도, 출원인은 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산 및 적어도 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 특정 조합이 케라틴 물질에 대한 수화 및 즉각적인 스무딩 효과를 현저하게 증가시키는 것을 가능하게 한다는 것을 증명할 수 있었다. 출원인은 또한 이 조합이 입술 및 그 주변 부위에 스무딩 및 플럼핑 효과를 얻는 것을 가능하게 한다는 것을 보여줄 수 있었고; 평활한, 부드러운 및 플럼핑한 입술의 모습의 개선이 특히 주목되었다. 그러나, 적어도 하나의 고분자량 비-가교결합 히알루론산과 적어도 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합은 원하는 성능을 얻는 것을 가능하게 하지 않으며, 이는 고분자량 히알루론산의 가교결합의 필수적인 역할을 강조한다.
본 발명에 따른 히알루론산의 이러한 특정 조합은 따라서 피부 및/또는 입술에 보습 효과 및 즉각적인 스무딩 효과를 모두 제공하는 데 특히 유리하고 따라서 피부 노화의 징후를 방지 및/또는 감소시키고 및/또는 입술에 볼륨화, 리프팅 및 스무딩 효과를 부여할 뿐만 아니라 주름의 출현을 방지 및/또는 감소시킨다.
본 발명의 제1 양태는 생리학적으로 허용가능한 매질((physiologically acceptable medium)에서, 분자량이 2000 kDa 이상인 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나, 및 분자량이 300 kDa 이하인 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나의 조합을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산은 분자량이 3000 kDa 이상인 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 평균 분자량이 200 kDa 이하인 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산은 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머(SODIUM HYALURONATE CROSSPOLYMER)를 갖는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 INCI 명칭:
ㆍ소듐 히알루로네이트, 및
ㆍ히알루론산의 생성물(product)로부터 선택되는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산의 가교결합률은 0.001% 내지 5%, 바람직하게는, 0.1% 내지 1%, 바람직하게는 0.1% 내지 0.6%인 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산 및 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은, 원료가 조성물의 총중량에 대해 0.001 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.005 중량% 내지 5 중량%, 더 바람직하게는 0.01 중량% 내지 1 중량%의 함량으로 조성물 내 각각 존재하는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 항산화제(antioxidant), 연화제(emollient agent), 보습제(moisturizing agent), 노화방지제(anti-aging agent), 향료(fragrance) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 화장료 보조제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 5% 미만의 충전제, 특히 2% 미만의 충전제, 바람직하게는 1% 미만의 충전제를 포함하거나 또는 심지어 충전제가 없는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 피부 및/또는 입술을 위한 국소 조성물(topical composition)의 형태, 특히 크림, 수중유 또는 유중수 에멀젼 또는 다중 에멀젼, 현탁액, 젤(gel), 우유, 로션, 세럼(serum), 마스크 또는 립 밤(lip balm)의 형태인 것을 특징으로 한다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 정의된 바와 같은 조성물의 적어도 하나의 층의 케라틴 물질에 국소 도포하는 단계를 포함하는, 케라틴 물질, 특히 피부 및/또는 입술을 케어(care)하기 위한 화장 공정(cosmetic process)에 관한 것이다.
바람직하게는, 상기 화장 공정(process)은 특히 피부 및/또는 입술의, 케라틴 물질의 수화 및/또는 케라틴 물질의 즉각적인 스무딩 효과를 촉진하기 위해서 및/또는 케라틴 물질의, 단단함 및/또는 탄력성 및/또는 밀도 및/또는 볼륨을 촉진하고, 이에 따라 피부 노화의 징후를 예방 및/또는 감소시키고, 특히 피부 및/또는 입술의 단단함 및/또는 탄력성, 및/또는 밀도 및/또는 볼륨의 손실, 및/또는, 특히 입술의 윤곽 및/또는 입술위의 선에서, 주름의 출현을 예방 및/또는 감소시키기 위한 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 화장 공정은 상기 조성물이 피부 및/또는 입술의 노화와 관련된 징후, 특히 피부 및/또는 입술의 단단함 및/또는 탄력성, 및/또는 밀도 및/또는 볼륨의 손실, 및/또는 피부 및/또는 입술 및/또는 얇은 입술 및/또는 입술 제시선의 윤곽 상의 주름에 관한 징후를 나타내는 건강한 대상체에게 적용되는 것을 특징으로 한다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 또한 케라틴 물질, 특히 피부 및/또는 입술에 즉각적인 스무딩 효과를 제공하기 위한 유효 성분(active ingredient)의 조합으로서의, 2000 kDa 이상, 바람직하게는 3000 kDa 이상의 분자량을 갖는 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나, 및 300 kDa 이하의 분자량을 갖는 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나의 화장 용도에 관한 것이다.
[도 1] 본 발명에 따른 히알루론산의 조합이 수화에 미치는 생체내 효과 및 즉각적인 스무딩 효과
[도 2] 전문가 패널에 의한 임상 평가 동안 연구된 3가지 영역의 표현.
[도 2] 전문가 패널에 의한 임상 평가 동안 연구된 3가지 영역의 표현.
본 발명에 따른 특정 히알루론산의 조합
제1 양태에 따르면, 본 발명은 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산 및 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합에 관련된 것이다.
놀랍게도, 출원인은 동일한 화장료 조성물에서 이들 2개의 특정 히알루론산의 조합이 상승 효과를 생성하여, 이들 히알루론산 각각에 의해 개별적으로 제공되는 이점을 강화한다는 것을 보여줄 수 있었다.
특정 구현예에 따르면, 본 발명에 따라 사용되는 히알루론산은 화장픔 조성물에서 분말 또는 젤의 형태로 본 발명에 따라 구현된다.
히알루론산이 분말 형태인 경우, 일반적으로 100% 유효 성분으로 존재한다.
히알루론산이 젤 형태인 경우, 일반적으로 젤의 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량%의 함량으로 존재한다.
"히알루론산" 또는 "HA"는 β-1,4 및 β-1,3 글리코시드 결합을 교대로 결합하여 함께 연결된 글루쿠론산 및 N-아세틸글루코사민으로 이루어진 이당류 모노머의 반복에 의해 형성된 폴리머를 의미한다. 자연히 선형으로 존재하는 히알루론산 거대분자는, 가교결합된 형태로 존재할 수도 있다. "가교결합된 히알루론산"은 히알루론산의 사슬이 공유결합 또는 이온결합에 의해 함께 연결되어, 질서 있는 3차원 네트워크를 형성하는 것을 의미한다. 상이한 이용분야에 따라, 상이한 가교결합도를 갖는 가교결합된 히알루론산의 제조가 가능하다. 히알루론산을 기반으로 하는 가교결합된 폴리머는 통상의 기술자에게 잘 알려진 방법에 의해 얻어진다. 현재 가교결합된 히알루론산 제조에 사용되는 가교결합제의 대표적인 예는 디비닐 설폰(DVS), 1,4-부탄디올 디글리시딜 에테르, 수용성 카보디이미드, 및 수 개의 아민기를 함유하는 가교결합제이다.
"히알루론산 염"은 특히 히알루론산 나트륨, 히알루론산 칼륨, 또는 기타 화장용으로 허용되는 히알루론산 염을 의미한다.
히알루론산 폴리머는 특히 반복 횟수 및 가교결합도에 따라 다양한 크기일 수 있다. 전형적으로, 히알루론산은 수천 달톤 내지 수 백만, 예를 들어 103 내지 107 Da 사이, 즉 1 내지 10,000 kDa 사이의 몰 질량을 갖는다.
고분자량 가교결합 히알루론산
본 발명에 따른 유효 성분의 조합은 따라서 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산 또는 이의 염 중 하나를 포함한다.
본 발명에 따르면, 고분자량 가교결합 히알루론산은 0.001% 내지 5%이고, 바람직하게는 0.01% 내지 1% 그리고 가장 바람직하게는 0.1% 내지 0.6%에 이르는 가교결합도를 갖는다.
본 발명에 따르면, 히알루론산은 분자량이 1000 kDa 이상, 바람직하게는 1200 kDa 이상, 바람직하게는 1400 kDa 이상, 바람직하게는 2000 kDa 이상, 예를들어, 3000 kDa 이상인 경우 "고분자량 히알루론산"으로 지칭된다.
본 발명에 따르면, 히알루론산의 분자량(molecular weight) 또는 분자질량(molecular mass)은 사용된 원료를 구성하는 히알루론산 분자의 "평균" 분자량을 의미한다. 실제로, 히알루론산의 공급원으로 사용되는 원료는 몰 질량이 약간 변할 수 있는 히알루론산 폴리머를 포함한다. 이러한 분자량의 변화는 특히 히알루론산 분자가 중합시 포함하는 기본 단위(즉, 이당류 모노머)의 수가 약간 변한다는 사실과 관련이 있다. 그러므로, "히알루론산의 몰 질량" 또는 "히알루론산의 평균 몰 질량"은 몰 질량이 "대략" 표시된 질량을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 특히, 표시된 히알루론산의 몰 질량은 ±20%, 바람직하게는 ±15%, 및 더욱 바람직하게는 ±10%만큼 변할 수 있다.
따라서, 본 발명에 따르면, 몰 질량이 1000 kDa인 히알루론산에 대해 말할 때, 상기 히알루론산의 평균 몰 질량은 대략 1000 kDa이지만, 800 내지 1200 kDa일 수 있고, 바람직하게는 850 내지 1150 kDa일 수 있고, 바람직하게는 900 내지 1100 kDa일 수 있다.
특정 구현예에 따르면, 본 발명에 사용되는 고분자량 가교결합 히알루론산은 젤의 형태이다. 이 특정 구현예에 따르면, 본 발명에 사용되는 고분자량 가교결합 히알루론산은 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd에 의해 "Phylcare® HyacrossTM TL 100"이라는 명칭으로 시판되는 생성물인 것이 바람직하다. "Phylcare® HyacrossTM TL 100"은 생성물 총 중량을 기준으로 1 중량% 내지 5 중량%의 유효 성분을 포함하는 히알루론산 젤이다. 이 생성물의 조성물에 사용되는 히알루론산 폴리머는 몰 질량이 1000 kDa 내지 1800 kDa이다. 생성물 "Phylcare® HyacrossTM TL 100"은 국제 명명 화장료 성분(INCI): 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머, 펜틸렌 글리콜, 아쿠아(AQUA)에 의거하여 참조된다.
또 다른 특정 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용되는 고분자량 가교결합 히알루론산은 분말의 형태이다. 이 특정 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용되는 고분자량 가교결합 히알루론산은 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd에서 생산한 시판 명칭 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 생성물인 것이 바람직하다. "Phylcare® HyacrossTM TL 200"은 분말 형태의 히알루론산으로 100% 순수, 즉 100% 유효 성분으로 구성된다. 본 생성물의 조성물에 사용되는 히알루론산 폴리머는 몰 질량이 3000 kDa 이상이다. 생성물 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"은 국제 명명법(INCI): 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머로 참조된다.
화장료 유효 성분으로서의 용량에 있어, 고분자량 가교결합 히알루론산은 목적하는 효과를 얻기 위하여 본 발명의 화장료 조성물 내에 유효량으로 존재한다.
특히, 고분자량 가교결합 히알루론산, 바람직하게는 상표명 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 생성물은 조성물 총 중량을 기준으로 원료(생성물의 중량) 0.001% 내지 10%, 바람직하게는 0.005% 내지 5%, 보다 바람직하게는 0.01% 내지 1 중량%에 이르는 함량으로 존재한다.
저분자량 비-가교결합 히알루론산
본 발명에 따른 유효 성분의 조합은 또한 적어도 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산 또는 이의 염 중 하나를 포함한다.
본 발명에 따르면, 히알루론산은 분자량이 500 kDa 이하, 바람직하게는 400 kDa 이하, 바람직하게는 300 kDa 이하인 경우 "저분자량 히알루론산"이라 한다.
구체적인 구현예에 따르면, 조합하여, 본 발명에 따라 사용되는 저분자량 히알루론산은 분자량이 500 kDa 이하, 바람직하게는 400 kDa 이하, 바람직하게는 300 kDa 이하 그리고 바람직하게는 50 kDa 이상, 바람직하게는 100 kDa 이상이다. 특히, 구체적인 구현예에 따르면, 그 분자량의 범위가 100 kDa 내지 300 kDa이다.
구체적인 구현예에 따르면, 조합하여, 본 발명에 따라 사용되는 저분자량 히알루론산은 분자량이 200 kDa 이하, 바람직하게는 150 kDa 이하, 바람직하게는 100 kDa 이하 그리고 바람직하게는 10 kDa 이상, 바람직하게는 50 kDa 이상이다. 특히, 구체적인 구현예에 따르면, 그 분자량의 범위가 10 kDa 내지 100 kDa이다.
구체적인 구현예에 따르면, 조합하여, 본 발명에 따라 사용되는 저분자량 히알루론산은 분자량이 100 kDa 이하, 바람직하게는 50 kDa 이하, 바람직하게는 10 kDa 이하 그리고 바람직하게는 1 kDa 이상, 바람직하게는 5 kDa 이상이다. 특히, 구체적인 구현예에 따르면, 그 분자량의 범위가 5 kDa 내지 10 kDa이다.
본 발명에 따르면, 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 젤의 형태일 수도 있고, 분말의 형태일 수도 있다. 보다 유리하게는, 분말의 형태이다.
구체적인 구현예에 따르면, 본 발명에 사용된 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 Soliance사에서 "Bashyal powder"라는 명칭으로 시판한 생성물이다. 상기 "Bashyal powder" 생성물은 100% 순수한, 즉 100% 유효 성분으로 이루어진 분말 형태의 히알루론산이다. 본 생성물의 조성물에 사용된 히알루론산 폴리머는 100 kDa 내지 300 kDa에 이르는 몰 질량을 가진다. "Bashyal powder"는 국제 명명법(INCI): 소듐 히알루로네이트에서 참조된다.
구체적인 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용된 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 Givaudan사에서 "PRIMALHYAL ULTRAFILLER"라는 이름으로 시판된 생성물이다. 생성물 "PRIMALHYAL ULTRAFILLER"는, 100% 순수, 즉 100% 유효 성분으로 이루어진 분말 형태의 히알루론산이다. 본 생성물의 조성물에 사용된 히알루론산 폴리머는 평균 몰 질량이 15 kDa 미만이다. "PRIMALHYAL ULTRAFILLER"는 국제 명명법(INCI): 소듐 아세틸 히알루로네이트로 참조된다.
또 다른 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용된 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 Sochibo사에서 "Oligo HA"라는 명칭으로 시판된 생성물이다. "Oligo HA" 생성물은, 100% 순수, 즉 100% 유효 성분으로 이루어진 분말 형태의 히알루론산이다. 본 생성물의 조성물에 사용된 히알루론산 폴리머는 5 kDa 내지 10 kDa 범위의 몰 질량을 갖는다. 상기 "Oligo HA"는 국제 명명법(INCI): 히알루론산으로 참조된다.
화장료 유효 성분으로서의 용량에 있어, 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 목적하는 효과를 얻기에 유효한 양으로 본 발명의 화장료 조성물에 존재한다.
특히, 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 바람직하게는 "Bashyal powder"라는 상표명을 갖는 생성물 또는 "Oligo HA"라는 상표명을 갖는 생성물, 또는 "PRIMALHYAL ULTRAFILLER"라는 상표명을 갖는 생성물은 조성물의 총 중량을 기준으로 원료(생성물의 중량) 0.001% 내지 10%, 바람직하게는 0.005% 내지 5%, 더욱 바람직하게는 0.01% 내지 1%의 함량으로 존재한다.
본 발명에 따른 화장료 및 갈레닉 조성물
본 발명의 맥락에서, 상기 기재된 히알루론산의 조합은 특히 화장료 조성물, 특히, 특히 피부, 바람직하게는 얼굴 및/또는 목의 피부, 및/또는 입술 위에, 케라틴 물질에 국소 도포하기에 적합한 화장료 조성물의 제조에 사용된다.
따라서, 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 생리학적으로 허용가능한 매질에서, 상기 정의된 바와 같은 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나, 및 상기 정의된 바와 같은 적어도 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나의 조합을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
"화장료 조성물"은 인체의 표피 부분 그리고 더 구체적으로는 케라틴 물질, 특히 사람의 피부 및/또는 입술과 접촉할 수 있는 화장용, 즉 미적 목적을 위한 모든 조성물을 의미한다.
"생리학적으로 허용가능한 매질"란 독성, 비적합성, 불안정성 및/또는 알레르기 반응의 위험 없이, 케라틴 물질과 접촉하여 국소 사용에 적합한 모든 부형제를 의미한다.
본 발명에 따른 "케라틴 물질"은 피부 및/또는 그 부속물, 그리고 더 구체적으로는 사람의 피부 및/또는 입술을 의미한다. 특히, 이는 얼굴 및/또는 목 및/또는 신체의 피부, 및 입술에 관한 것이다.
일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머, 펜틸렌 글리콜, 아쿠아를 갖는 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd에서 생산된 "Phylcare® HyacrossTM TL 100"이라는 명칭으로 시판되는 유효 성분을 포함한다.
일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머를 갖는 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd에서 생산된 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"이라는 명칭으로 시판되는 유효 성분을 포함한다.
일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트를 갖는 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 특히 Soliance사에 의해 "Bashyal powder"라는 명칭으로 시판되는 유효 성분을 포함한다.
또 다른 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 INCI 명칭: 히알루론산을 갖는 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 특히 Sochibo사에 의해 "Oligo HA"라는 명칭으로 시판되는 유효 성분을 포함한다.
바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 생리학적으로 허용가능한 매질에 다음을 포함한다:
ㆍ 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머로 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd가 제조한 상표명 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 유효 성분,
및
ㆍ 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 특히 Soliance사의 "Bashyal powder"라는 상표명을 가지는, INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트인 유효 성분.
또 다른 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 생리학적으로 허용가능한 매질에서, 다음을 포함한다:
ㆍ 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머로 Bloomage Freda Biopharm Co, Ltd가 제조한 상표명 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 유효 성분,
및
ㆍ 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 특히 Sochibo의 상표명 "Oligo HA"를 갖는, INCI 명칭: 히알루론산인 유효성분.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 히알루론산, 각각 고분자량 가교결합 히알루론산 및 저분자량 비-가교결합 히알루론산을 목적하는 효과를 얻기에 유효한 양으로 포함한다.
구체적인 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산 및 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산을, 각각 조성물의 총 중량에 대해 0.001% 내지 10%, 바람직하게는 0.005% 내지 5%, 더욱 바람직하게는 0.01% 내지 1 중량% 범위의 함량으로 원료(생성물 중량)를 포함한다.
구체적인 구현예에 따르면, 본 발명에 따라 사용된 각각의 히알루론산은 조성물의 총 중량에 대해 0.05 중량% 내지 0.8 중량% 범위, 보다 바람직하게는 0.1 중량% 내지 0.6 중량%에 이르는 원료(생성물 중량)의 함량으로, 조성물에 존재한다.
상기 히알루론산이 젤-형성 용매에 분산될 때, 이들은 각각 조성물의 총 중량에 대해 0.1 중량% 내지 10 중량% 범위, 보다 바람직하게는 1 중량% 내지 5 중량%에 이르는 활성 물질(active material)(히알루론산 폴리머)의 함량으로 조성물에 존재한다.
유리하게는, 본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 상기 고분자량 가교결합 히알루론산 및 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산을 0.01 내지 100 사이, 바람직하게는 0.1 내지 10 사이, 가장 바람직하게는 0.5 내지 2 사이로 이루어지는 고분자량 가교결합 히알루론산/저분자량 비-가교결합 히알루론산 비율(원료 중량 기준)로 포함한다.
히알루론산 폴리머의 활성 물질의 중량에 의해 추론하면, 상기 고분자량 가교결합 히알루론산의 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산에 대한 비율은 일반적으로 0.1 내지 10, 특히 0.5 내지 2의 범위일 것이다.
일 구현예에서, 본 발명의 화장료 조성물은, 특히 피부, 바람직하게는 얼굴 및/또는 목의 피부, 및/또는 입술을 위한, 케라틴 물질에 대한 케어 및/또는 메이크업 조성물이다.
바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은, 특히 피부, 바람직하게는 얼굴 및/또는 목의 피부, 및/또는 입술을 위한 케라틴 물질을 케어하기 위한 조성물이다.
본 발명의 화장료 조성물은 국소 도포용 조성물을 얻을 목적으로 상기 정의된 바와 같이, 적어도 고분자량 가교결합 히알루론산 및 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 및, 추가로, 통상의 기술자에게 공지된 것 중에서 허용가능한 하나 이상의 화장료 부형제를 포함한다.
따라서 본 발명은 또한 특히 크림, 수중유 또는 유중수 에멀젼 또는 다중 에멀젼의 형태, 현탁액, 젤, 밀크, 로션, 세럼, 마스크 또는 립밤의 형태로 조성물, 특히 피부 및/또는 입술을 위한 국소 조성물 형태의 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 또한 항산화제, 연화제, 보습제, 노화방지제, 향료 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 화장료 보조제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물에 유리하게 사용되는 화장료 보조제는 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001% 내지 10%, 바람직하게는 0.001% 내지 5 중량% 범위의 함량으로 존재할 수 있다.
특정 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은, 바람직하게는 INCI 명칭 폴리글리세린-3(polyglycerin-3) 및 폴리글리세린-6(polyglycerin-6)의 생성물로부터 선택되는, 3 내지 10 글리세롤 단위를 갖는 하나 이상의 폴리글리세롤을 포함하는 하나 이상의 화장료 성분을 유리하게 포함할 수 있다.
본 발명에 따라 사용가능한 폴리글리세롤을 기반으로 하는 화장료 성분으로서, SAKAMOTO사에 의해 시판되는 참고물질은 특히 다음을 일컬을 수 있다.
PGL-S의 INCI 명칭 폴리글리세린-3
폴리글리세린 310의 INCI 명칭 폴리글리세린-4
폴리글리세린-500 MB의 INCI 명칭 폴리글리세린-6 및 아쿠아(물)
폴리글리세린-750 MB의 INCI 명칭 폴리글리세린-10 및 아쿠아(물).
출원인은, 특히 상기 정의된 바와 같은 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나, 및 상기 정의된 바와 같은 적어도 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나와 조합하여 폴리글리세롤을 사용하는 것이 입술의 플럼핑 효과, 및 특히 즉각적인 및/또는 장기 플럼핑 효과를 더욱 개선하는 것을 가능하게 한다는 것을 실제로 보여줄 수 있었다
일 구현예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은, 특히 INCI 명칭 폴리글리세린-3 및 폴리글리세린-6의 생성물로부터 선택된, 적어도 0.5%의 폴리글리세롤, 특히 적어도 1%의 폴리글리세롤, 바람직하게는 적어도 2%의 폴리글리세롤을 포함한다.
일 구현예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은, 특히 INCI 명칭 폴리글리세린-3 및 폴리글리세린-6을 갖는 생성물로부터 선택된, 10% 미만의 폴리글리세롤, 특히 8% 미만의 폴리글리세롤, 바람직하게는 6% 미만의 폴리글리세롤을 포함한다.
조성물의 성질에 따라, 하나 이상의 미용적으로 허용가능한 부형제가 또한 선택될 수 있다. 케라틴 물질에 사용되도록 의도된 화장료 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 모든 부형제가 본 발명에서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 미용적으로 허용가능한 부형제는 폴리머, 계면활성제, 레올로지제(rheology agent), 전해질, pH 조절제, 보존제, 염료, 진주층(nacre), 안료 및 이들의 혼합물로부터 선택된다.
구체적인 구현예에 따라, 본 발명의 화장료 조성물은 5% 미만의 충전제, 2% 미만의 충전제, 바람직하게는 1% 미만의 충전제, 특히 블러링 효과를 갖는 충전제를 포함한다.
그러나, 또 다른 특정 구현예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은 충전제, 특히 블러링 효과를 갖는 충전제가 결여된다. 실제로, 블러링 효과를 갖는 충전제는 유리하게도 즉각적인 스무딩 효과를 얻을 수 있고 점도를 얻을 수 있고 도포시 덜 반짝이는 모습을 가질 수 있지만, 이러한 충전제는 히알루론산의 수화 효과에 부정적인 영향을 미칠 수 있다.
"충전제"는 불용성 형태로 조성물의 매질에 분산되어 있는 플레이트, 구형 또는 장형, 무색 또는 백색, 광물 또는 유기, 천연 또는 합성의 입자를 의미한다. 이러한 충전제는 특히 조성물의 레올로지 또는 질감을 수정 및/또는 매트화 효과를 부여하는 역할을 한다. "블러링 효과" 충전제는 피부의 미세 완화를 위장하여 따라서 주름, 잔주름, 모공 및 반점과 같은 완화 및/또는 색상의 불완전성을 광학 보정 효과를 통해 약화시키는 것을 가능하게 하는 효과를 의미한다.
화장 공정 및 용도
하기에 기재된 화장 공정 및 화장 용도는 케라틴 물질, 특히 건강한 케라틴 물질, 바람직하게는 피부, 특히 얼굴 및/또는 목의 피부, 및 "건강한" 대상체의 건강한 입술에 도포하기 위한 것이다.
본 발명에 따른 케라틴 물질은 특히 건강한 케라틴 물질("건강한" 대상체), 즉 병리학적 상태(병리에 영향 받은, "건강하지 않은" 대상체)와 관련될 수 있는 병태 또는 장애를 제시하지 않은 케라틴 물질이다. 본 명세서의 나머지 부분에서 건강한 피부 및/또는 입술 또는 피부 및/또는 입술이라는 용어는 혼용되어 사용될 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 케라틴 물질, 특히 건강한 케라틴 물질, 특히 피부 및/또는 입술을 케어하기 위한 화장 공정에 관한 것으로서, 전술한 바와 같은 화장료 조성물의 적어도 하나의 층의 케라틴 물질에 도포하는 단계를 포함한다.
본 발명의 맥락에서, 상기 화장 공정은, 특히 피부 및/또는 입술의, 케라틴 물질의 수화를 촉진하기 위한 것이다.
본 발명의 맥락에서, 상기 화장 공정은 또한, 특히 피부 및/또는 입술위에, 케라틴 물질에 즉각적인 스무딩 효과를 제공하기 위한 것이다.
"스무딩 효과"는 본 발명에 따른 조성물이 피부 거칠기 및/또는 미세기복을 감소시키는 것을 가능하게 함을 의미한다. "즉각적인 스무딩 효과"는, 본 발명에 따른 조성물이 상기 조성물의 도포 후 1시간 이내에 스무딩 효과를 얻는 것을 가능하게 함을 의미한다.
따라서, 특히 수화, 거칠기 및 피부 미세기복에 대한 효과를 통해, 본 발명의 상기 화장 공정은 피부 노화의 징후를 감소시키는 것을 가능하게 한다.
본 발명의 맥락에서, 상기 화장 공정은 또한, 특히 피부 및/또는 입술의, 케라틴 물질의 단단함 및/또는 탄력성을 촉진하고, 따라서 피부 노화의 징후를 예방 및/또는 감소시키기 위한 것이며, 특히 주름의 출현을 방지 및/또는 감소시키기 위한 것이다.
따라서, 본 발명의 화장 공정은 또한 특히 흥미로운 노화방지 특성을 갖는다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명은, 특히 피부 및/또는 입술에, 케라틴 물질에 즉각적인 스무딩 효과를 제공하기 위해 유효 성분의 조합으로서 앞서 정의된 바와 같은 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산 및 하나의 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 화장 용도에 관한 것이다.
특정 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 화장 공정 및 용도에 사용되는 조성물은 다음을 포함한다:
ㆍ 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머로 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd사가 제조한 상표명 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 유효 성분,
및
ㆍ 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 특히 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트로 Soliance사의 "Bashyal powder"라는 상표명을 갖는 유효성분.
또 다른 구체적이고 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 화장 공정 및 용도에 사용되는 조성물은 다음을 포함한다:
ㆍ 고분자량 가교결합 히알루론산, 특히, INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머로 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd사가 제조한 상표명 "Phylcare® HyacrossTM TL 200"인 유효 성분,
및
ㆍ 저분자 비-가교결합 히알루론산, 특히 INCI 명칭: 히알루론산으로 Sochibo의 상표명 "Oligo HA"를 갖는 유효 성분.
특정 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물들은 건조한 피부를 가진 건강한 대상체들에게 적용될 것이다.
구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물들은 피부의 단단함 및/또는 탄력성의 손실을 나타내는 건강한 대상체들에게 적용될 것이다.
또 다른 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 피부 노화, 특히 주름과 관련된 징후를 제시하는 건강한 대상체에게 적용될 것이다.
특정 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 건조한 입술 및/또는 얇은 입술 및/또는 입술의 윤곽 상에 선 및/또는 주름을 나타내는 입술을 갖는 건강한 대상체에게 적용될 것이다.
본 발명은 이제 하기의 비제한적인 실시예에서 예시될 것이다. %는 달리 표시되지 않는 한, 조성물의 총 중량을 기준으로 원료의 중량으로 표시된다.
실시예들
실시예 1: 피부의 즉각적인 스무딩 효과에 대한 연구
1 - 1 연구 프로토콜
연구 목적
연구의 목적은 피부 레플리카 방법(skin replica method)에 의해 하나 이상의 생성물의 미세기복 네트워크 또는 MRN(도포 전 및 1시간 후)에 대한 즉각적인 스무딩 효과를 평가하고 비교하는 것이다.
다른 생성물의 즉각적인 스무딩 효과는 모두 35세 이상이고, 평가된 영역에서 피부 질환이 없는 남성 또는 여성 지원자를 대상으로 평가되었다.
측정 원리
피부 표면의 레플리카를 연구 동안 다른 시간들에서 취한다. 이 레플리카들은 표면의 각인들인데, 그것은 다음에 시험된 유효 성분들의 미용 효과들을 평가하기 위해 사용된다. 이 레플리카는 Quantiline 소프트웨어를 사용한 이미지 분석에 의해 처리된다.
레플리카는 직경 24 mm의 접착 고리 1개를 시험 부위에 적용하여 취해진다. 그런 다음 주걱을 사용하여, Silflo 실리콘 주조 수지(Flexico)와 촉매(Flexico)를 고리 내부에 펼친다. 건조 후 레플리카를 피부 표면에서 벗겨낸다.
레플리카를 35°의 입사각으로 방목 조명기에 의해 조명하여 피부 표면의 각 선 뒤에 그림자를 발생시킨다. 그런 다음 이러한 그림자를 피부 표면을 대표하는 파라미터를 계산하는 Quantiline 소프트웨어를 사용하여 레플리카의 비디오 이미지에 대해 분석한다.
레플리카들은 명암을 최대화하도록 광원에 대해 위치된다(북-남 방향).
처리 후에 취한 레플리카는 처리 전에 채취한 것에 대해 엄격하게 재위치시킨다.
레플리카의 표면을 90개의 등거리 선으로 분할하여, 소프트웨어는 이들 각각에 대해 다음과 같은 파라미터들을 계산한다:
ㆍ Ra는 프로파일의 길이에 대한 길이 프로파일의 적분 면적의 비인 평균 거칠기이다. 평균 Ra는 모든 프로파일의 Ra 값의 산술 평균이다. (임의의 단위)
ㆍ Rz는 고려되는 프로파일 상의 피크의 평균 진폭이다. 각각의 프로파일은 동일한 길이의 5개의 세그먼트로 분할되고 이들 각각에 대해 피크 Rzi의 진폭이 계산된다. 평균 Rz는 모든 프로파일의 Rzi 값의 산술 평균이다. (임의의 단위)
ㆍ Rm은 최대 거칠기(분석된 5개의 세그먼트 사이의 최대 거칠기)이다.
ㆍ 면적: 피부의 실제 길이와 볼 수 있는 길이 사이의 인자에 해당한다. 이것은 피부의 평활과 미세-주름의 강조이다. 피부의 미세-주름이 많을수록 면적이 증가한다. 결과는 %로 "면적" 결과 창에 표시된다.
측정은 평가된 생성물의 도포 전 및 도포 후 1시간 후의 팔뚝의 피부 상에서 측정되었다. 평가된 생성물은 기술자에 의해 2 μL/cm2의 양으로 펼쳐졌다.
종점
주요 종점은 Rm, Rz, Ra 및 면적이다.
이들 파라미터는 처리가 피부 평활에 유익한 효과가 있으면 감소한다. 생성물은 1차 종점 중 적어도 2개가 유의하게 감소하면 피부 스무딩 효과가 있다고 할 수 있다.
적용 전 값과 적용 1시간 후 값간의 차이는 각 파라미터, 각 지원자 및 각 생성물에 대해 계산된다. 이러한 차이는 분산 분석에 의해 비교된다. 유의한 경우, Newman-Keuls test를 사용하여 생성물을 분류한다.
통계 분석
사용된 통계적 방법은 분산 분석(ANOVA)이다. 데이터가 정규 분포를 따른다고 가정하였다. ANOVA를 사용하여, 평균의 다중 비교 및 유사성 군 결정을 위해 Student-Newman-Keuls 검정을 수행한다.
표본 크기: 12명의 대상체를 평가할 수 있도록 충분한 수의 지원자가 포함되어야 한다.
유의 수준: α 위험도가 5% 이하(< 또는 =).
계산 방법:
ㆍ 피부에 대한 생성물의 효과:
각 파라미터 및 각 생성물에 대해 평균의 ANOVA에 의한 계산 및 비교, 처리 전(t0) 및 처리 후(ti) 시간.
백분율 변화는 다음 식을 사용하여 계산된다:
VARi% = (Pi - P0) /P0*100
여기서:
P0: 시간 t0에서 처리 면적의 파라미터의 평균.
Pi: 시간 ti에서 처리 면적의 파라미터의 평균.
백분율은 처리 전 값과 비교하여 차이가 유의한 경우에만 계산된다.
1 - 2: 실시예에 사용된 화장료 유효 성분의 시판 참고물질
고분자량 히알루론산
·
ㆍ"Hyacross TL200"
INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머인 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd사에서 생산한 "Phylcare® HyacrossTM TL 200" 시판 생성물.
분자량이 3000 kDa 이상인 가교결합 히알루론산.
·
ㆍ"고분자량 Na 히알루로네이트"
Sochibios사가 생산하는 "Bio-sodium hyaluronate powder" 시판 생성물로 INCI 명칭은 소듐 히알루로네이트이다.
1000 kDa 및 1500 kDa 범위의 평균 분자량의 비-가교결합 히알루론산.
저분자량 비-가교결합 히알루론산
ㆍ"Bashyal”
Soliance사가 생산하는 "Bashyal powder" 시판 생성물로, INCI 명칭은 소듐 히알루로네이트이다.
100 kDa 내지 300 kDa 범위의 평균 분자량의 히알루론산.
ㆍ"Oligo HA”
Sochibo사가 생산하는 “Oligo HA” 시판 생성물로, INCI 명칭은 히알루론산이다.
5 kDa 내지 10 kDa 범위의 평균 분자량의 히알루론산.
단독으로 또는 조합하여, 이들 유효성분은 조성물의 총 중량에 대하여 0.3 중량% 내지 0.5 중량%에 이르는 개별 농도의 원료로 실시예에서 사용되었다.
1 - 3: 제형 평가
[표 1]
고분자량 및 저분자량의, 가교결합 또는 비-가교결합된, 상이한 히알루론산들을 전술된 조제에서 단독으로 그리고 조합하여 시험하였다.
[표 2]
플라시보는 물, 글리콜 및 보존제로 구성된 단순 제형이다. 상이한 시험들 중 유사한 점도를 얻기 위하여, 점도제(Carbopol Ultrez 20 = 수산화나트륨으로 pH 6 부근으로 중화된 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머)를 첨가하였다. 점도제의 양은 동등한 점도를 유지하도록 상이한 조제들에서 조절하였다.
조제 제조 공정
a. 상 A를 80℃로 가열(물+보존제);
b. 입자가 사라질 때까지 300 RPM에서 탈응집(defoculation)과 함께 Carbopol Ultrez 20을 상 A에 첨가한다;
c. 10% 수산화나트륨 용액을 젤이 형성될 때까지 500 RPM에서 상 A에 첨가한다;
d. 글리콜(글리세린/부틸렌 글리콜/프로판 디올/펜틸렌 글리콜)을 칭량하여 캡슐에 넣는다;
e. 균질한 페이스트가 형성될 때까지 글리콜 혼합물에 히알루론산(HA)을 적신다;
f. 단계 (e)에서 얻은 글리콜/HA 혼합물을 600 RPM에서 탈응집과 함께 60°C에서 단계 (c)에서 얻은 상 A에 첨가한다;
g. 400 RPM에서 30℃에서 탈응집과 함께 냉각한다;
h. 모터 및 물 보충을 중지한다.
1 - 4: 즉각적인 스무딩 효과에 대한 연구 결과
본 연구의 결과는 도 1에 제시되어 있다.
놀랍게도, 특정 유형의 히알루론산의 구체적인 조합이 즉각적인 스무딩 효과에 상승 효과를 내는 것으로 관찰되었다.
특히 "Bashyal" 또는 "Oligo HA"와 같은 저분자량 히알루론산과 "Hyacross TL 200"과 같은 고분자량 가교결합 히알루론산의 조합은 유의미한 즉각적인 평활 결과를 얻을 수 있게 한다.
게다가, 이들 같은 저분자량 히알루론산과 "고분자량 Na 히알루로네이트"와 같은 고분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합은 이러한 즉각적인 스무딩 효과를 얻는 것을 가능하게 하지 않는다는 것이 관찰되었다.
따라서 이러한 결과는, 놀랍게도, 즉각적인 스무딩 효과를 얻기 위해서는 고분자량 히알루론산 폴리머의 가교결합이 필수적임을 보여준다.
실시예 2: 피부 수화 연구
2 - 1 연구 프로토콜
연구목적
연구의 목적은 코네오미터(corneometer)를 이용하여 피부의 전기커패시턴스와 임피던스의 변동을 측정하여 하나 이상의 생성물의 단기 보습 효과(6시간 및 24시간)를 평가하고 비교하는 것이다.
다른 생성물의 보습 효과를, 모두 적어도 18세 이상 연령이고, 평가된 영역의 피부 질환이 없는 남성 또는 여성 지원자를 대상으로 평가하였다.
측정 원리
코네오미터는 피부의 수분 함량(피부의 유전 상수 변화)의 함수로서 전기커패시턴스의 변동을 측정한다. 이의 센서는 두 개의 전극으로 구성되어 있으며, 이는 피부 표면에 전기장을 발생시키는데 사용된다. 전극 시스템과 피부의 커패시턴스는 프로브와 접촉하는 생물학적 매질의 유전 상수 변화에 영향을 받는다. 피부에 수분을 더 많이 공급할수록 유전 상수는 증가한다. 전극에 교류 전류를 인가한다. 주어진 전위차에 도달하는 데 필요한 시간은 시스템의 커패시턴스에 반비례하며, 각질층의 유전 상수의 증가는 교류 전류의 주파수 증가로서 코네오미터에 의해 기록된다. 커패시턴스 변화는 임의의 단위로 표시된다.
임피던스는 표피의 상부층의 수화 정도를 나타낸다. 피부의 유전 상수는 피부의 수분 함량과 관련이 있다. 전기적 특성의 측정은 각질층의 수화도를 평가하기 위한 객관적인 방법으로 인정되고 있다(E. Berardesca - EEMCO guidance for the assessment of stratum corneum hydration: electrical methods - Skin Research and Technology 1997; 3: 126-132).
코네오미터는 임피던스를 정의하는 다음 식의 일부인, 피부 커패시턴스, Cx를 결정한다:
Z = [Rx² + (1/2 π fCx)²] ½
여기서: Z: 임피던스
Rx: 저항(저항 = 1/컨덕턴스)
f: 교류 주파수
Cx: 커패시턴스
이 측정은 팔뚝에서 수행된다. 이 영역은 각 측정 사이에 저자극성, 신축성, 비폐쇄, 접착 직물(Smith & Nephew의 Hypafix)에 의해 유지된 고리에 의해 마찰로부터 보호되며, 15분의 안정화 기간 직전에 제거된다.
안정화의 15분 후 코네오미터로 3회 연속 측정이 실시되는데, 이는 측정실의 주변 조건(온도: 22℃ +/- 2℃ 및 상대 습도: 50% +/- 10%)에 맞게 영역을 조절하는 것을 가능하게 한다.
피부에 대한 사전 준비는 없다. 시험 생성물은 기술자에 의해 측정 시작 전에 cm2당 2 μL의 양으로 한번에 모두 도포된다.
연구 당일 아침(측정 전)에, 지원자들은 평소 사용하던 개인 관리 용품만을 사용하였다. 연구 기간 동안 다른 생성물을 사용해서는 안 된다.
종점
전기용량은 대략 0 내지 150의 스케일로 임의의 단위로 표시된다. 그 값이 클수록, 수화도가 큰 것을 의미한다.
통계 분석
사용된 통계적 방법은 분산 분석(ANOVA)이다. 데이터는 정규 분포를 따른다고 가정하였다. ANOVA를 사용하여, 평균의 다중 비교 및 유사성 군 결정을 위해 Student-Newman-Keuls 검정을 수행한다.
표본 크기: 10명의 대상체를 평가할 수 있도록 충분한 수의 지원자가 포함되어야 한다.
유의 수준: 5% 이하(< 또는 =)의 α위험.
계산 방법:
- 처리되지 않은 영역은 생성물로 간주된다.
- 분석의 인자들은 지원자, 측정 시간 및 생성물이다.
1 - 전체 ANOVA, 모든 요인이 가공하지 않은 데이터에 결합된다. 잔여의 그래프는 이상치를 탐지하는 데 도움이 된다.
2 - 3가지 측정값의 평균 값을 계산한다: 평균의 그룹화.
3 - 전체적 ANOVA, 그룹화의 유효성을 검증하기 위해 평균(1 -의 평균과 비교)에 대해 모든 인자를 조합했다.
4 - 모든 생성물 및 지원자에 대한 평균값에 대한 ANOVA를 T0(적용 전)에서 조합하여 T0에서 측정 부위를 비교하였다 .
5 - 적용 전 값과 비교한 변화량 산출 : Ti - T0 (=ΔT)
여기서:
Ti: ti에서 수화도
T0: t0에서 같은 면적의 수화도
6 - ΔT에 대한 ANOVA, 각 측정 시간에 대해 모든 생성물 및 지원자를 조합하여 각 시간에서의 생성물을 비교하였다.
7 - ΔT에 대한 전체적인 ANOVA, 모든 요인을 함께(T0 없음)하여 생성물들을 모두 함께 전세계적으로 비교한다. 다른 생성물을 더 정확하게 비교하기 위해 분석에서 생성물을 고려하지 않을 수 있다.
8 -
a) 미처리 영역과 관련하여 서로 다른 생성물의 효과를 비교하기 위한 백분율 계산:
미처리 영역(또는 기준)과 비교한 차이가 유의한 경우에만 해당된다.
각 지원자에 대한 백분율은 다음과 같이 계산된다:
VARi% =
여기서:
- Tri: ti에서 처리 영역의 수화도
- Tr0: t0에서 처리 영역의 수화도
- Tnti: ti에서 미처리 대조군의 수화도
- Tnt0: t0에서 미처리 대조군의 수화도
b) 미처리 영역이 없이 결과의 백분율 계산:
백분율 변화는 평균으로부터 다음과 같이 계산된다:
VARi% = (Ti - T0) / T0*100
여기서:
T0: "적용 전" 시점의 수화도.
Ti: 시간 ti에서의 수화도
백분율은 "적용 전" 시간과 비교하여 차이가 상당한 경우에만 계산된다.
9 - 전체 ANOVA를 백분율에 적용하여 %로 평균을 구한다.
2 - 2: 실시예에 사용된 화장료 유효 성분의 시판 참고물질
본 실시예에서 사용된 시판 참고물질은 상기 실시예 1 - 2와 동일하다.
2 - 3: 평가된 제형
본 실시예에서 평가된 제형은 상기 실시예 1 - 3과 동일하다.
2 - 4: 보습 효과에 대한 연구 결과
본 연구의 결과는 도 1에 제시되어 있다.
놀랍게도, 특정 유형의 히알루론산의 특정 조합이 수화도에 상승 효과를 내는 것으로 관찰되었다.
6시간 및 24시간에 대한 수화도
결과는 플라시보 조성물과 단지 하나의 히알루론산 "Bashyal" 또는 "Hyacross TL 200"을 포함하는 조성물(비교용)의 경우, 측정된 수화도는 6시간에서 13%에서 22% 사이로 포함되고 24시간에서 14%에서 21% 사이로 포함됨을 보여준다(도 1).
놀랍게도, 결과는 "Bashyal" + "Hyacross TL 200" 조합을 포함하는 조성물의 경우(본 발명에 따름), 수화도는 6시간에서 34%(비교의 경우 13 내지 22%), 24시간에서 28%(비교의 경우 14 내지 21%)임을 보여준다(도 1).
예를 들어, "Bashyal"과 같은 저분자량 히알루론산과 "Hyacross TL 200"과 같은 고분자량 가교결합 히알루론산의 조합(본 발명에 따름)은 수화도의 증가를 얻는 것을 가능하게 한다.
더욱이, "Bashyal"과 "고분자량 Na 히알루로네이트"(비교)와 같은 고분자량의 비-가교결합 히알루론산의 조합은 그러한 증가를 허용하지 않는다는 것이 관찰되었다.
6시간 및 24시간에서 감지할 수 없는 수분 손실(TEWL)
결과는 플라시보 조성물과 히알루론산 단지 하나의 "Bashyal" 또는 "Hyacross TL 200"을 포함하는 조성물(비교용)의 경우, 측정된 감지할 수 없는(insensible) 수분 손실은 6시간에서 -12%에서 -14% 사이로 포함되고 24시간에서 -5%에서 -13% 사이로 포함됨을 보여준다(도 1).
놀랍게도, 그 결과는 "Bashyal" + "Hyacross TL 200" 조합을 포함하는 조성물(본 발명에 따름)의 경우, 인지할 수 없는(imperceptible) 수분 손실이 6시간에서 -21%, 24시간에서 -17%임을 보여준다(도 1).
"Bashyal"과 같은 저분자량 히알루론산과 "Hyacross TL 200"과 같은 고분자량 가교결합 히알루론산의 조합(본 발명에 따른 것)은 감지할 수 없는 수분 손실을 감소시킬 수 있게 한다.
게다가, "Bashyal"과 "고분자량 Na 히알루로네이트"와 같은 고분자량의 비-가교결합 히알루론산의 조합(비교용)은 그러한 효과를 얻을 수 없도록 하는 것으로 관찰되었다.
결론
따라서, 이러한 결과는 놀랍게도, 저분자량 히알루론산과 고분자량 히알루론산의 조합의 맥락에서, 개선된 보습 효과를 얻기 위해서는 고분자량 히알루론산 폴리머의 가교결합이 필수적임을 보여준다.
실시예 3: 입술의 플럼핑 및 스무딩 효과에 관한 연구
3 - 1 연구 프로토콜
연구 목적
본 연구의 목적은 본 발명에 따른 히알루론산의 조합이 입술, 입술 윤곽 및 코입술 영역에 플럼핑 및 스무딩 효과를 어느 정도까지 제공할 수 있는지를 평가하는 것이었다. 이 목적으로, 고분자량 가교결합 히알루론산과 저분자량 비-가교결합 히알루론산의 조합을 포함하는 시험 조제의 효과를 대상체 패널에 대해 평가하였다. 조제들은 다음에 기술되어 있다.
연구에 포함되는 대상체
효과는 유럽 혈통의 여성 지원자들에 대해 평가되었다. 이 지원자들, 또는 대상체들은 시험되는 조제, 시험 조제 또는 대조군 조제에 따라 두 군으로 나뉘었다.
- 군 1: 17명의 지원자, 평균 연령: 45.6 +/- 6.7세 (37세에서 57세 사이).
- 군 2: 15명의 지원자, 평균 연령: 47.5 +/- 4.9세 (39세에서 56세 사이).
지원자들은 모든 피부 타입을 가지고 있었고(피부 타입에 대한 선택 없음) 모두 립케어 생성물의 사용자였다. 게다가, 이 연구에 포함된 지원자들은 모두 다음과 같은 것을 나타내었다:
ㆍ 입술 윤곽에 주름,
ㆍ 입술의 볼륨 부족, 및
ㆍ 빈약하게 수화됨을 나타내는 입술.
본 발명에 따른 히알루론산 조합의 효과를 시험하기 위해 평가된 조제
시험된 조제는 관심 있는 유효 성분의 화장료 유효성을 평가할 수 있도록 하는 기초 화장료 제형에 해당한다. 대조군 조성물이라고도 하는 이러한 본 조제를 표 3에 기재하였다.
표 3: 대조군 조성물이라고도 하는, 기본 조제
[표 3]
본 연구 동안, 군 2는 기본 화장료 조제만에 해당하는, 따라서 본 발명에 따른 히알루론산의 조합은 함유하지 않는 대조군 조제(CTL 조제)(표 3)를 단독으로 투여받았다.
반대로, 군 1은 시험군 조성물(2HA 제형), 즉 본 발명에 따른 히알루론산의 조합을 또한 함유하는 염기성 화장료 조제를 받았다:
·
ㆍ "Hyacross TL200"
INCI명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머인 Bloomage Freda Biopharm Co., Ltd사가 생산하는 “Phylcare® HyacrossTM TL 200” 시판 생성물. 평균 분자량 3000 kDa 이상의 가교결합 히알루론산.
ㆍ "PRIMALHYAL ULTRAFILLER"
Givaudan사에서 생산하는 시판 생성물 "PRIMALHYAL ULTRAFILLER". 평균 분자량이 15 kDa 미만인 히알루론산.
표 4: 시험 조성물이라고도 불리는, 2HA 조제
[표 4]
평가된 조제(대조군 조제 또는 2HA 조제)는 연구 기간, 즉 28일 동안 1일 2회, 오전 및 저녁에 입술과 입술 윤곽에 도포되었다.
3 - 2: 결과
3.2.1. 연구 1
시험된 제형(상기 섹션 2 -1에 기술됨)의 플럼핑 효과는 도포 직후, 도포 후 8시간 및 24시간, 최종적으로 연구 7일 및 28일에 전문가 패널에 의해 평가되었다.
플럼핑 효과는 윗 입술의 굴곡을 측정하여 평가하였다.
결과는 2HA 조제가 도포 직후 윗 입술의 곡률을 유의하게 감소시킨다는 것을 보여준다. 이러한 굴곡의 감소는 입술 볼륨의 증가를 반영한다. 게다가, 대조군 조제와 달리, 우리는 8시간 및 24시간에서 유의한 효과 대 대조군 조제에 대한 비유의적인 효과를 여전히 보기 때문에 이 효과는 시간이 지남에 따라 유지된다. 이러한 효과는 2HA 조제에 대해서만 7일 및 28일에도 관찰된다.
따라서, 본 발명에 따른 히알루론산의 조합은 증명된 장기 효과와 함께 도포시 유리하게 입술을 플럼핑시키는 작용을 가능하게 한다.
3.2.2. 연구 2 - 임상평가
본 연구의 일환으로, 훈련된 평가자에 의해 임상 평가가 수행되었다. 시험된 화장료 제형(상기 단락 2 - 1에 기재됨)의 효과를 얼굴의 3개 영역(모두 입술 포함)에 대해 평가하였다. 평가된 기준은: 입술 영역의 모습(구역 1), 입술 윤곽 영역의 모습 구역 2) 및 입술을 둘러싸는 넓은 영역의 모습(구역 3)이다. 구역 1, 2 및 3은 도 2에 나타내었다.
[표 5]
T4W = 연구 시작 4주 후, T0 = 연구 시작 시, 시험 생성물의 첫 도포 전, NS = 유의하지 않음
대조군 조제와 비교하여, 2HA 조제는 평가된 모든 기준에 대해 더 나은 결과를 얻을 수 있게 한다는 것에 주목한다.
이 결과들은 본 발명에 따른 히알루론산 조합의 화장료 관심을 반영한다. 이 조합은 유리하게 입술 및 그 주변 영역에 스무딩 및 플럼핑 효과를 얻을 수 있게 하며, 특히 입술의 평활하고 부드러우며 플럼핑한 모습의 개선 및 입술의 건강(분홍색)의 개선이 있다. 입술 주변의 주름의 평활도 및 보다 일반적으로 입술 주위 피부의 평활도 또한 주목된다.
3 - 3: 결론
본 발명에 따른 히알루론산의 조합을 포함하는 화장료 조성물의 입술 및 입술을 감싸는 얼굴 영역에 대한 플럼핑 및 스무딩 효과를 평가하는 것을 목적으로 하는 이들 연구는, 본 발명에 따른 히알루론산의 조합이 2HA 조제로 하여금 평활, 부드러움 및 플럼핑에 대해 장기 작용을 갖는 대조군 조제보다 더 효과적일 수 있음을 보여준다.
실시예 4: 피브릴린-1의 발현에 대한 본 발명에 따른 히알루론산의 조합의 효과를 면역염색을 통한 연구.
4 - 1: 외식편(Explant) 준비
직경 12 ± 1 mm의 24개의 외식편을 광형 Ⅱ - Ⅲ를 가진 유럽 혈통의 62세 여성의 복부 성형술로부터 준비하였다. 외식편은 5% CO2로 풍부화된 습한 대기에서 37℃의 BEM(BIO-EC's Explants Medium)에 위치시켰다.
외식편은 다음과 같이 6개의 배치(batch)로 나뉘었다:
[표 6]
생성물의 도포
0일차, 2일차, 5일차 및 6일차에 테스트한 생성물 P1 내지 P4를 1 cm²외식편 당 2 μL(≒ 2 mg/cm²)의 양으로 국소 도포하고 작은 주걱을 사용하여 펼쳤다. 대조군 배치의 외식편은 매질 갱신을 제외하고는 어떠한 처리도 받지 않았다. 매질의 절반은 1일차, [?]일차 및 5일차에 갱신(1 mL/웰)되었다.
샘플
0일차에, 배치 T0로부터 3개의 외식편을 취하여 반으로 절단하였다. 각각의 샘플을 반으로 절단하고, 하나는 OCT에서 -80℃에서 동결시키고, 나머지 반은 포르말린에 고정시켰다. 7일차에, 각각의 배치로부터 3개의 외식편을 취하여 0일째와 동일한 방법으로 처리하였다.
4 - 2: 실시예에 사용된 화장료 유효 성분의 시판 참고물질
본 실시예에서 사용된 시판 참고물질은 상기 실시예 1 - 2와 동일하다.
4 - 3: 제형평가
[표 7]
고분자량 및 저분자량의, 가교결합 또는 비-가교결합된, 상이한 히알루론산을 상기 조제에서 단독으로 및 조합하여, 시험하였다.
[표 8]
플라시보는 물, 글리콜 및 보존제로 구성된 단순 제형이다. 상이한 시험들 중 유사한 점도를 얻기 위하여 점도제(Carbopol Ultrez 20 = 수산화나트륨으로 pH 6 부근으로 중화된 아크릴레이트/C10 내지 30 알킬 아크릴레이트)를 첨가하였다. 점도제의 양은 동등한 점도를 유지하도록 상이한 조제들에서 조절하였다.
4 - 4: 피브릴린-1 발현 연구 결과
피브릴린-1 면역염색
피브릴린-1은 실온에서 밤새 0.3% PBS-BSA에 1/200 희석된 다클론성 항-피브릴린-1 항체(Sima Aldrich,)로 냉동 섹션에 라벨링되었고 AlexaFluor AF488 (Lifetechnologies)에 드러내었다. 핵은 프로피듐 요오드(propidium iodide)로 대조염색되었다. 면역염색은 현미경 관찰에 의해 평가되었고 이미지 분석에 의해 반정량화되었다.
얻어진 결과는 플라시보 조제(P1) 또는 본 발명에 따라 사용된 2개의 히알루론산 중 하나만을 함유하는 조제(P2 및 P3)로의 처리는 7일차에 피브릴린-1의 발현에 유의한 변화가 나타나지 않음을 보여준다.
이와 대조적으로, 놀랍게도, 본 발명에 따른 "Bashyal"과 같은 저분자량 히알루론산과 "Hyacross TL 200"과 같은 고분자량 가교결합 히알루론산의 조합(조제 P4)은 7일차에 피브릴린-1의 발현을 유의하게 증가(+35%)시키는 것으로 관찰되었다. 따라서, 본 발명에 따른 유효 성분의 조합은 피브릴린-1의 발현에 상승 효과를 낼 수 있게 한다.
따라서, 이러한 결과는 본 발명에 따른 저분자량 히알루론산과 고분자량 가교결합 히알루론산의 조합이 피부의 단단함 및/또는 탄력성을 촉진하는데 사용될 수 있음을 보여준다.
실시예 5: 본 발명에 따른 화장료 제형
조성물은 화장 분야에서 사용되는 전통적인 방법에 따라 제조된다.
페이셜 플럼퍼
[표 9]
페이셜 플럼퍼는 아침 및/또는 저녁에 도포하기에 이상적인, 얼굴에 대한 보습 및 스무딩 트리트먼트다. 얼굴 및/또는 목의 피부, 특히 주름 및 잔주름 주위에 도포되어, 즉각적인 스무딩 효과를 제공하여 거칠기를 감소시키고 피부 미세기복을 평활화한다. 피부는 눈에 띄게 평활화되고, 맑고 젊어진다.
립 플럼퍼
[표 10]
립 플럼퍼는 입술에 수분을 공급하고 플럼핑하는 트리트먼트다. 입술에 도포 후 잔주름이 덜 보이고 입술이 풍성하고 플럼퍼하게 보인다. 스무딩 효과는 즉각적이다.
Claims (14)
- 생리학적으로 허용 가능한 매질(physiologically acceptable medium)에서, 분자량이 2000 kDa 이상인 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산(high molecular weight cross-linked hyaluronic acid ) 또는 이의 염 중 하나, 및 분자량이 300 kDa 이하인 저분자량 비-가교결합 히알루론산(low molecular weight non-cross-linked hyaluronic acid) 또는 이의 염 중 하나의 조합을 포함하는 화장료 조성물(cosmetic composition).
- 제1항에 있어서, 상기 고분자량 가교결합 히알루론산은 분자량이 3000 kDa 이상인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 평균 분자량이 200 kDa 이하인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 고분자량 가교결합 히알루론산은 INCI 명칭: 소듐 히알루로네이트 크로스폴리머(SODIUM HYALURONATE CROSSPOLYMER)를 갖는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은 INCI 명칭
* 소듐 히알루로네이트, 및
* 히알루론산을 갖는 생성물(product)로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 고분자량 가교결합 히알루론산의 가교결합률은 0.001% 내지 5%, 바람직하게는 0.1% 내지 1%, 바람직하게는 0.1% 내지 0.6%인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 고분자량 가교결합 히알루론산 및 상기 저분자량 비-가교결합 히알루론산은, 원료가 조성물의 총 중량에 대하여 원료를 0.001 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.005 중량% 내지 5 중량%, 더 바람직하게는 0.01 중량% 내지 1 중량% 범위의 함량으로 조성물 내에 각각 존재하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 항산화제(antioxidant agent), 연화제(emollient agent), 보습제(moisturizing agent), 노화방지제(anti-aging agent), 향료(fragrance), 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 화장료 보조제(adjuvant)를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 5% 미만의 충전제(filler), 특히 2% 미만의 충전제, 바람직하게는 1% 미만의 충전제를 포함하거나 또는 심지어 충전제가 없는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 피부 및/또는 입술을 위한 국소 조성물(topical composition)의 형태, 특히 크림, 수중유(oil-in-water) 또는 유중수(water-in-oil) 에멀젼 또는 다중 에멀젼(multiple emulsion), 현탁액, 젤(gel), 밀크, 로션, 세럼(serum), 마스크 또는 립 밤(lip balm)의 형태인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 조성물의 적어도 하나의 층의 케라틴 물질에 국소 도포하는 단계를 포함하는, 케라틴 물질, 특히 피부 및/또는 입술을 케어(care)하기 위한 화장 공정(cosmetic process).
- 제11항에 있어서, 특히 피부 및/또는 입술의, 케라틴 물질의 수화 및/또는 케라틴 물질의 즉각적인 스무딩 효과(smoothing effect)를 촉진하기 위해서 및/또는 케라틴 물질의 단단함(firmness) 및/또는 탄력성(elasticity) 및/또는 밀도 및/또는 볼륨(volume)을 촉진하고, 이에 따라 피부 노화의 징후를 예방 및/또는 감소시키고, 특히 피부 및/또는 입술의 단단함 및/또는 탄력성, 및/또는 밀도 및/또는 볼륨의 손실, 및/또는, 특히 입술의 윤곽(contour) 및/또는 입술 위의 선(line)에서, 주름(wrinkle)의 출현을 예방 및/또는 감소시키기 위한 것을 특징으로 하는, 화장 공정.
- 제12항에 있어서, 상기 조성물은 피부 및/또는 입술의 노화와 관련된 징후, 특히 피부 및/또는 입술의 단단함 및/또는 탄력성, 및/또는 밀도 및/또는 볼륨의 손실, 및/또는 피부 및/또는 입술 및/또는 얇은 입술 및/또는 입술 제시선의 윤곽 상의 주름에 관한 징후를 나타내는 건강한 대상체(healthy subject)에게 적용되는 것을 특징으로 하는, 화장 공정.
- 케라틴 물질, 특히 피부 및/또는 입술에 즉각적인 스무딩 효과를 제공하기 위한 유효 성분(active ingredient)의 조합으로서의, 2000 kDa 이상, 바람직하게는 3000 kDa 이상의 분자량을 갖는 적어도 하나의 고분자량 가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나, 및 300 kDa 이하의 분자량을 갖는 저분자량 비-가교결합 히알루론산, 또는 이의 염 중 하나의 화장 용도.
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