KR20240067072A - IL-4 및/또는 IL-13 RNA를 포함하는 mRNA 백신 및 이의 용도 - Google Patents
IL-4 및/또는 IL-13 RNA를 포함하는 mRNA 백신 및 이의 용도 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 이상 IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 연관된 장애, 특히 천식, 아토피성 피부염 및 알레르기성 장애를 치료하거나 예방하기 위한, 적어도 하나의 사이토카인(바람직하게는 IL-4, IL-13 또는 이의 단편) 및 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하는 mRNA 백신에 관한 것이다.
Description
본 발명은 mRNA 백신, 및 이상(aberrant) IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 관련된 장애, 특히 천식(asthma), 아토피성 피부염(atopic dermatitis) 및 알레르기 장애를 치료하기 위한 이의 용도에 관한 것이다.
알레르기 질환은 다양한 유전적 요인과 환경적 요인의 상호 작용으로 인해 발생하는 복잡한 질환이다. 지난 수십 년 동안 관찰된 알레르기의 증가는 대부분 같은 기간에 발생한 환경 변화로 설명된다. 모든 알레르기 중에서, 알레르기성 천식(allergic asthma), 알레르기성 비염(allergic rhinitis) 및 식품 알레르기(food allergy)는 주요 공중 보건 문제이다. 2050년에는 전 세계 인구의 절반이 알레르기 질환을 앓게 될 것으로 추산된다. 따라서 알레르기 질환의 증가는 전 세계적으로 중요한 건강 문제로 대두되어 심각한 사회경제적 부담을 안겨주고 있으며, 아직까지 효율적인 장기간 치료법이 없는 상태이다.
알레르기 질환의 발병은 면역계가 알레르기 항원에 노출되어 발생한다. 이러한 노출은 관용(tolerance) 붕괴의 원인으로 간주되어, 인터류킨 4(IL-4) 및 인터류킨 13(IL-13)과 같은 2형 T 헬퍼 세포(Th2) 사이토카인의 생성, 높은 수준의 면역글로불린 E(IgE) 항체, 및 염증 조직 내 면역 세포의 침윤 및 확대 등을 특징으로 하는 2형 면역 반응을 초래한다. 비만 세포, 호염기구 및 호산구는 특히, 히스타민과 같은 미리 형성된 염증 매개체를 함유하는 세포질 과립의 방출에 관여한다.
따라서 IL-4 및 IL-13 사이토카인은 알레르기 질환의 발병에 중요한 역할을 한다. 두 사이토카인은 모두 오랫동안 알레르기 질환의 발병과 연관되어 왔으며 이들의 생물학적 기능에 기초하여 치료학적으로 중요한 사이토카인이다. IL-4 및 IL-13은 유사한 구조를 가지며 하나의 수용체 서브유닛(IL-4Rα)을 공유한다. 그러나 많은 유사성에도 불구하고 IL-4와 IL-13은 알레르기에서 중복되지 않는 기능을 수행하는 것으로 생각된다.
IL-4는 천식 환자의 혈청 및 기관지폐포 세척액에서 증가된 IL-4 수준이 관찰되었기 때문에, 알레르기 발생과 관련된 다발성 사이토카인이다(Gour N. & Wills-Karp M., 2015). IL-4는 알레르기 발달의 초기 단계에서 특이적으로 작용하는 것으로 간주된다. IL-4의 중요한 역할은 예를 들어 IgE 생성 유도, IgE 수용체 발현의 상향 조절 및 0형 미경험 T 헬퍼 세포(Th0)의 Th2 림프구로의 분화와 같은, 알레르기를 유발하는 다양한 효과에 있다.
대조적으로, IL-13은 알레르기 반응의 효과기 및 말기 단계에 더 많이 관여한다(Gour N. & Wills-Karp M., 2015). IL-13은 기도 과민 반응, 점액 생성, 기도 평활근 변화 및 상피하 섬유증(sub-epithelial fibrosis)을 포함하되 이에 제한되지 않는 알레르기 질환의 주요 증상을 유발하기에 충분한 것으로 나타났다.
따라서 IL-4 및 IL-13은 알레르기 치료에 유망한 치료 표적이며, 특히 장기적인 치료 효과에 도달하기 위해서는, 이들 분자를 차단하는 현재 전략을 개선할 필요성이 분명히 있다.
최근, 알레르기를 치료하거나 예방하기 위한 신규 치료법이 개발되었다. 수동 면역을 기반으로 한 이 치료는 특히 알레르기와 관련된 병원성 요인을 표적으로 한다. 예를 들어, IL-4 및 IL-13 또는 이들의 수용체에 대한 재조합 항체의 사용은 해당 분야에 기재되어 있다. 그러나 재조합 항체의 사용은 높은 비용, 반복 주입의 필요성, 및 항-약물 항체(ADA) 출현 또는 기타 이상반응의 잠재적 위험으로 인해 제한된다.
RNA 백신은 1990년에 새로운 치료학적 관점으로 등장하였다. 다른 유형의 백신(예를 들어, 약독화 바이러스 및 DNA 기반 백신)과 비교하여 RNA를 백신으로 사용하면 큰 이점이 있을 수 있다. 실제로 RNA 백신을 사용하는 것이 돌연변이나 감염의 위험이 없기 때문에 더 안전할 수 있다. 또한, RNA의 면역원성은 생체내 전달에 앞서 조절될 수 있다. 백신화 과정의 효율성을 또한 RNA의 시험관내 변형을 통해 그의 안정성과 번역성을 증가시킴으로써 획득할 수 있다. 마지막으로, RNA 백신은 매우 신속하고 저렴한 비용으로 생산될 수 있다.
그러나, RNA를 백신으로 사용하기 위해서는 많은 어려움, 특히 RNA 불안정성, RNA의 높은 선천 면역원성 및 생체내 전달을 극복할 필요가 있다.
본 발명에서, 본 출원인은 자기-단백질(self-protein)(즉, IL-4 및 IL-13)에 대한 항체의 생성을 유도하는 데 사용될 수 있는 RNA 백신을 제공하는 반면, 일반적인 mRNA 백신은 비자기-단백질에 대한 항체를 수용하는 대상체(subject)에 의해 그 생성을 유도한다. 특히, 본 발명에 개시된 RNA 백신은 수용 대상체에서 실질적인 독성 없이 자기-단백질에 대한 항체의 생성을 효율적으로 유도한다.
이와 같이, 본 출원인은 본원에서 IL-4 및 IL-13(또는 이의 단편) 및 T 세포 에피토프(epitope) 중에서 선택된 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열을 포함하는 신규의 RNA 백신을 제공한다. 이 신규의 mRNA 백신은 특히 천식, 아토피성 피부염 및 알레르기 질환과 같은 염증성 질환을 치료하는 데 특히 중요하다.
발명의 요약
본 발명은 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하는 조성물에 관한 것이며, 여기서 적어도 하나의 RNA 분자는
- 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프로서, 바람직하게는 여기서 적어도 하나의 사이토카인이 인터류킨-4(IL-4) 및/또는 인터류킨-13(IL-13)인, 사이토카인, 또는 이의 단편 또는 에피토프,
- 적어도 하나의 T 세포 에피토프, 및
- 선택적으로 적어도 하나의 스페이서(spacer)
를 포함하는 적어도 하나의 아미노산 서열을 암호화(encoding)한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-4이다.
일 구현예에서, IL-4 단편은 서열번호 7-10, 13-16, 94-97 및 109-112로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-13이다.
일 구현예에서, IL-13 단편은 서열번호 25-28, 35-38, 119-122 및 129-132를 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프, 및 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프를 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 CRM197, 디프테리아(diphteria)와 파상풍 에피토프의 조합(TpD), 파상풍 독소의 에피토프(TT), 보편적인 CD4 폴리에피토프, 이의 변이체 및 단편을 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 스페이서는 PMGLP, 카텝신 절단 부위, 아미노산 더블릿(doublet), GP, GPGPG, GGSGGGGSGG, (GGGGS)n(여기서 n의 범위는 1 내지 4이다), LG, ASG, KG 및 RR을 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 바람직하게는 나노입자(예를 들어, 지질 나노입자), 리포솜 또는 바이러스-유사 입자 내에 캡슐화된다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 조성물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 본원에 기재된 조성물 및 선택적으로 적어도 하나의 애주번트(adjuvant)를 포함하는 백신 조성물이다.
본 발명의 또 다른 목적은 약제로서 사용하기 위한 본원에 기재된 조성물이다.
본 발명은 또한 염증성 장애를 치료하는데 사용하기 위한, 본원에 기재된 조성물, 약학 조성물 또는 백신 조성물에 관한 것으로서, 바람직하게는 여기서 상기 장애는 이상 IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 연관된다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 천식(알레르기성 또는 대상체알레르기성), 알레르기 상태(예를 들어, 식품 알레르기, 독 알레르기, 동물에 대한 알레르기, 약물 알레르기, 고 IgE 증후군(hyper IgE syndrome), 알레르기성 비염(allergic rhinitis), 알레르기성 결막염(allergic conjunctivitis) 및 알레르기성 장위염(allergic enterogastritis)), 아토피성 질환(atopic disorder)(예를 들어, 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 두드러기(urticaria)(만성 특발성 두드러기(chronic idiopathic urticaria) 및 만성 자발성 두드러기(chronic spontaneous urticaria) 포함), 습진(eczema)), 수포성 유천포창(bullous pemphigoid), 호흡기 질환(respiratory disorder)(예를 들어, 알레르기성 및 비알레르기성 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환(chronic obstructive pulmonary disease)(COPD)), 비용종증(nasal polyposis) 및 기도 염증을 수반하는 기타 상태(예를 들어, 호산구 증가증(eosinophilia), 섬유증(fibrosis), 및 낭성 섬유증(cystic fibrosis) 및 폐 섬유증(pulmonary fibrosis)을 포함한 과도한 점액 생성, 전신 경화증(systemic sclerosis)(SSc)); 염증성 및/또는 자가면역 장애 또는 상태, 위장 장애 또는 상태(예를 들어, 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease)(IBD) 및 호산구성 식도염(eosinophilic esophagitis)(EE), 및 호산구-매개된 위장병(eosinophilic-mediated gastrointestinal disease), 궤양성 대장염(ulcerative colitis) 및 크론병(Crohn's disease)); 전신 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus), 간 장애 또는 상태(예를 들어, 간경변(cirrhosis) 및 간세포 암종(hepatocellular carcinoma)), 피부경화증(scleroderma); 섬유증성 질환 또는 장애(fibrotic disease or disorder)(예를 들어, 간 섬유증(예를 들어 B형 및/또는 C형 간염 바이러스에 의해 유발된 섬유증(fibrosis caused by a hepatitis B and/or C virus))), 피부경화증(scleroderma); 고형 종양 또는 암, 예를 들어 백혈병(leukemia)(예를 들어, B 세포 만성 림프구성 백혈병(B cell chronic lymphocytic leukaemia)), 교모세포종(glioblastoma), 림프종(lymphoma)(예를 들어, 호지킨 림프종(Hodgkin's lymphoma)) 및 비만세포증(mastocytosis)을 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다. 일 구현예에서, 염증성 장애는 천식(알레르기성 또는 대상체알레르기성), 알레르기성 상태(예를 들어, 식품 알레르기, 독 알레르기, 동물에 대한 알레르기, 약물 알레르기, 아나필락시스(anaphylaxis), 고 IgE 증후군, 알레르기성 비염, 알레르기성 결막염 및 알레르기성 장위염), 아토피성 장애(예를 들어, 아토피성 피부염, 두드러기(만성 특발성 두드러기 및 만성 자발성 두드러기 포함), 습진), 수포성 유천포창, 호흡기 장애(예를 들어, 알레르기성 및 비알레르기성 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD)), 비용종증 및 기도 염증을 수반하는 기타 상태(예를 들어 호산구 증가증, 섬유증, 및 낭성 섬유증 및 폐 섬유증을 포함한 과도한 점액 생성, 전신 경화증(SSc)); 염증성 및/또는 자가면역 장애 또는 상태, 위장 장애 또는 상태(예를 들어, 염증성 장질환(IBD) 및 호산구성 식도염(EE), 및 호산구-매개 위장병, 궤양성 대장염 및 크론병); 전신 홍반성 루푸스, 간 장애 또는 상태(예를 들어 간경변 및 간세포 암종), 피부경화증; 섬유증성 질환 또는 장애(예를 들어 간의 섬유증(예를 들어, B형 및/또는 C형 간염 바이러스에 의해 유발된 섬유증)), 피부경화증; 고형 종양 또는 암, 예를 들어 백혈병(예를 들어, B 세포 만성 림프구성 백혈병), 교모세포종, 림프종(예를 들어, 호지킨 림프종) 및 비만세포증을 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 천식(예를 들어, 알레르기성 천식), 아토피성 피부염, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 폐 섬유증, 음식 알레르기, 비용종증 및 호산구성 식도염을 포함하거나 이들로 이루어지는 그룹 중에서 선택되고, 바람직하게 상기 염증성 장애는 알레르기, 천식 또는 아토피성 피부염이다.
정의
본 발명에서, 하기의 용어는 하기의 의미를 갖는다:
본원에 사용된 바와 같이, "약"이라는 용어는 양, 시간적 지속기간 등과 같은 측정 가능한 값을 언급할 때 명시된 값으로부터 ±20%, 어떤 경우에는 ±10%, 어떤 경우에는 ±5%, 어떤 경우에는 ±1%, 또는 어떤 경우에는 ±0.1%의 변동을 포함하는 것으로 의도되며, 그러한 변동은 개시된 방법을 수행하는 데 적절하다.
본원에 사용된 바와 같이, "애주번트"는 본 발명의 조성물의 면역원성을 향상시키는 물질이다. 면역 반응을 증강시키기 위해 애주번트가 종종 제공되며 이는 숙련가에게 주지되어 있다.
본원에 사용된 바와 같이, "항원 제시 세포" 또는 "APC"라는 용어는 표면상에 주요 조직적합성 복합체(MHC)와 복합체를 이루는 외래 항원을 드러내는 보조 세포(를 들어, B 세포, 수지상 세포 등)와 같은 면역계 세포를 지칭한다. T 세포는 T 세포 수용체(TCR)를 사용하여 이러한 복합체를 인식할 수 있다. APC는 항원을 가공하여 이를 T 세포에 제시한다.
본원에 사용된 바와 같이, "~로부터 유래된"이라는 용어는 제1 분자와 제2 분자 사이의 관계를 나타낸다. 이는 일반적으로 제1 분자와 제2 분자 사이의 구조적 유사성을 지칭하며, 제2 분자로부터 유래된 제1 분자에 대한 가공 또는 공급원 제한을 의미하거나 포함하지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, "에피토프"라는 용어는 항체 또는 MHC 분자 또는 이의 결합 단편이 결합하는 단백질에 위치한 아미노산의 특정 배열을 지칭한다. 에피토프는 아미노산이나 당 측쇄와 같은 분자의 화학적으로 활성인 표면 그룹으로 이루어질 수 있으며, 특정한 3-차원 구조 특징뿐만 아니라 특정한 전하 특징을 가질 수 있다. 에피토프는 선형(또는 연속적)이거나 또는 입체형태적일 수 있다, 즉 반드시 인접할 필요는 없는 단백질의 다양한 영역에 있는 2개 이상의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
특히, 본원에 사용된 바와 같이, "T 세포 에피토프"라는 용어는 II형 MHC 분자에 의해 제시될 때 TCR(특히 CD4+ T 세포(예를 들어, Th2 세포)에 의해 발현됨)에 의해 인식되고 결합될 수 있는 에피토프를 지칭한다. 일 구현예에서, TCR을 발현하는 T 세포는 T 헬퍼 세포(예를 들어, Th2 세포)이고, T 세포 에피토프의 TCR에의 결합은 T 세포의 활성화를 유도하여, 상기 T 세포에 의한 염증전 분자의 생성을 유도한다.
본원에 사용된 바와 같이, "B 세포 에피토프"라는 용어는 B 세포 미세환경에 가용성 분자로 존재할 때 B 세포에 의해 발현되거나, 또는 다양한 세포 유형의 표면에 제시될 때 BCR을 통해 가교결합된 B 세포 수용체(BCR)에 의해 인식되고 결합될 수 있는 에피토프를 지칭한다. 일 구현예에서, BCR에 대한 B 세포 에피토프의 결합은 B 세포의 활성화를 유도하여, 이의 활성화 및 상기 B 세포에 의한 특정 항체의 생성을 유도한다.
본원에 사용된 바와 같이, "면역 반응"이라는 용어는 특히 외부 요소에 대한 반응으로, 유기체 내에서 발생하는 반응을 지칭한다. 따라서 이는 예를 들어 림프구(예를 들어, B 세포 및 T 세포, CD4+, CD8+, Th1 및 Th2 세포 포함), 항원 제시 세포(예를 들어, 수지상 세포와 같은 전문적인 항원 제시 세포), 자연 살해 세포, 골수 세포(예를 들어, 대식세포, 호산구, 비만 세포, 호염기구 및 과립구) 및 상기 세포에 의해 또는 간에서 생성된 거대분자(비제한적으로, 항체, 사이토카인 및 보체 포함)의 작용을 지칭할 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같은 "면역 반응"이라는 용어는 T 세포-매개된 및/또는 B 세포-매개된 면역 반응을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, IL-4, IL-13 또는 이들의 혼합물 중에서 선택된 적어도 하나의 사이토카인의 "생물학적 활성을 억제"하거나 "생물학적 활성을 중화 "하는 항체는 상기 사이토카인의 활성을, 항체 부재 하의 사이토카인의 활성 수준과 비교하여 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70% 또는 80% 이상까지 억제하는 항체를 지칭하고자 한다. 사이토카인의 활성을 평가하기 위해 사용될 수 있는 기능 분석의 예는 해당 분야에 주지되어 있다.
본원에 사용된 바와 같이, "약제학적으로 허용되는 부형제"라는 용어는 동물, 특히 포유동물, 바람직하게는 인간에게 투여될 때 유해하거나, 알레르기성이거나 또는 기타 불리한 반응을 일으키지 않는 부형제를 지칭한다. 여기에는 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 따라서 약제학적으로 허용되는 부형제는 무독성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질 또는 임의의 유형의 제형 보조제를 지칭할 수 있다. 인간 투여의 경우, 제제는 FDA 또는 EMA와 같은 규제 기관에서 요구하는 무균성, 발열성, 일반 안전성 및 순도 표준을 충족해야 한다.
본원에 사용된 바와 같이, "대상체"라는 용어는 면역 반응이 유도될 수 있는 살아있는 유기체(예를 들어, 포유동물, 특히 인간, 영장류, 개, 고양이, 말, 양 등)를 포함하도록 의도된다. 일 구현예에서, 대상체는 인간이다. 일 구현예에서, 대상체는 "환자", 즉 온혈 동물, 바람직하게는 인간일 수 있으며, 이들은 의료 서비스를 받기를 기다리고 있거나 받고 있거나 의료 서비스의 대상이 되었거나 대상이 되거나 또는 될 것이거나, 또는 예를 들어 염증성 장애와 같은 표적 질환 또는 상태의 발병이 모니터링된다. 일 구현예에서, 대상체는 성인(예를 들어 18세 이상의 대상체)이다. 다른 구현예에서, 대상체는 아동(예를 들어 18세 미만의 대상체)이다. 일 구현예에서, 대상체는 남성이다. 다른 구현예에서, 대상체는 여성이다. 일 구현예에서, 대상체는 염증성 장애를 앓고 있고, 바람직하게는 진단된다. 일 구현예에서, 대상체는 염증성 장애가 발생할 위험이 있다. 위험 요인의 예로는 유전적 소인, 염증성 질환의 가족력 등이 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, "치료 유효량"이라는 용어는 본원에 기재된 바와 같이 특정 생물학적 결과를 달성하는데 유효한 조성물의 양을 지칭한다. 따라서, "치료 유효량"이라는 용어는 표적에 심각한 부정적 또는 불리한 부작용을 일으키지 않으면서, (1) 표적 질환 또는 상태의 발병을 지연 또는 예방하는 것; (2) 표적 질환 또는 상태의 하나 이상의 증상의 진행, 악화 또는 열화를 늦추거나 중단시키는 것; (3) 표적 질환 또는 상태의 증상을 개선시키는 것; (4) 표적 질환 또는 상태의 중증도 또는 발생률을 감소시키는 것; 또는 (5) 표적 질환 또는 상태를 치유하는 것을 목표로 하는 조성물의 수준 또는 양을 의미한다. 치료 유효량은 예방학적 또는 예방적 작용을 위해, 표적 질환 또는 상태의 발병 이전에 투여될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 치료 유효량은 치료 작용을 위해 표적 질환 또는 상태의 개시 후에 투여될 수 있다.
본원에 사용된 바와 같이, "치료" 또는 "치료하는"이라는 용어는 치료학적 치료 및 예방학적 또는 예방적 조치 둘 다를 지칭하며; 여기서 목적은 표적 질환 또는 상태를 예방하거나 늦추는(줄이는) 것이다. 치료가 필요한 사람으로는 이미 질환이 있는 사람, 질환에 걸리기 쉬운 사람 또는 질환을 예방해야 하는 사람이 있다. 치료량의 본원에 기재된 바와 같은 조성물을 수용한 후 대상체가 하기 중 하나 이상에서 관찰 가능하고/하거나 측정 가능한 개선을 보이는 경우, 대상체는 질환 또는 상태에 대해 성공적으로 "치료"된 것이다: 병원성 세포수의 감소; 병원성인 전체 세포 퍼센트의 감소; 특정 상태와 연관된 증상 중 하나 이상의 어느 정도의 경감; 이환율 및 사망률 감소, 및/또는 삶의 질 문제 개선. 성공적인 치료 및 상태 개선을 평가하기 위한 상기 매개변수는 의사에게 친숙한 일상적인 절차에 의해 쉽게 측정 가능하다.
도 1 및 2는 본 발명에 따른 IL-4 RNA 작제물의 맵이다. EP: 에피토프; EPX: 다중 에피토프의 존재(X 에피토프가 존재함); FL: 전장(full-length).
도 3 및 4는 본 발명의 IL-13 RNA 작제물의 맵이다. EP: 에피토프; EPX: 다중 에피토프의 존재(X 에피토프가 존재함); FL: 전장.
도 5는 형질감염된 HEK293 세포에서 muIL4 및 CRM의 시험관내 단백질 발현을 나타내는 그래프의 조합이다. 단백질 발현은 LNP/mRNA 형질감염 후 24시간째에 유세포분석법으로 측정되었다. LNP/mRNA-muIL4(흰색 상자), LNP/mRNA-CRM(사선 상자), LNP/mRNA-muIL4-TpD(투명 회색 상자), LNP/mRNA-muIL4-N19(진한 회색) 및 LNP/mRNA-muIL4-CRM(검은색 상자)이 시험되었다. 도 5A는 muIL4를 발현하는 세포의 백분율을 나타내는 그래프이다. 도 5B는 CRM을 발현하는 세포의 백분율을 나타내는 그래프이다. 도 5C는 발현된 세포에서 muIL4의 형광 강도(MFI)의 중앙값을 나타내는 그래프이다. (n=2) 범위가 있는 평균.
도 6은 본 발명의 적어도 하나의 RNA 작제물로 형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서의 muIL4의 시험관내 활성을 나타낸다. 단백질 활성은 LNP/mRNA 형질감염 24시간 후 HEK293 세포 상등액에서 증식성 생물분석으로 측정되었다. mRNA-muIL4(흰색), mRNA-muIL4-TpD(투명 회색), mRNA-muIL4-CRM(검은색), mRNA-muIL4-N19(진한 회색) 및 mRNA-CRM(사선 원) 형질감염의 상등액이 시험되었다. 샘플 희석의 함수로 490 ㎚에서의 광학 밀도(OD)가 표시된다. (n=2) 범위가 있는 평균.
도 7은 생체내 연구 계획을 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍ LNP/mRNA로 3회 근육내(IM) 면역화를 수용하였다(화살표). 지시된 시점에서 혈액 샘플을 채취하였다.
도 8은 BALB/c 마우스에 LNP/mRNA를 근육내 주사한 후 혈청 샘플에서 muIL4에 대한 중화 항체의 유도를 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍의 LNP 내 mRNA-muIL4(흰색 원), mRNA-CRM(사선 원), mRNA-muIL4-TpD(투명한 회색 원), mRNA-muIL4-N19(어두운 회색 원) 또는 mRNA-muIL4-CRM(검은색 원)의 3개의 IM 면역화를 수용하였다. 막대는 중앙값을 나타낸다. muIL4에 대한 최대 중화 역가의 절반에 의해 입증된 중화 능력은 첫 번째 투여 후 D21, D41, D62 및 D80에 결정되었다. CRM, muIL4-N19 및 muIL4-CRM의 경우 그룹당 n=10. muIL4-TpD의 경우 n=9 및 muIL4의 경우 n=2.
도 9는 BALB/c 마우스에서 LNP/mRNA를 근육내 주사한 후의 동물 생존 곡선을 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍의 LNP 내 mRNA-muIL4(파선), mRNA-muIL4-TpD(회색 선), mRNA-CRM, mRNA-muIL4-N19 및 mRNA-muIL4-CRM(검정색 선)의 3개의 IM 면역화를 수용하였다. Kaplan-Mayer 생존 곡선이 표시된다(n=10/그룹).
도 3 및 4는 본 발명의 IL-13 RNA 작제물의 맵이다. EP: 에피토프; EPX: 다중 에피토프의 존재(X 에피토프가 존재함); FL: 전장.
도 5는 형질감염된 HEK293 세포에서 muIL4 및 CRM의 시험관내 단백질 발현을 나타내는 그래프의 조합이다. 단백질 발현은 LNP/mRNA 형질감염 후 24시간째에 유세포분석법으로 측정되었다. LNP/mRNA-muIL4(흰색 상자), LNP/mRNA-CRM(사선 상자), LNP/mRNA-muIL4-TpD(투명 회색 상자), LNP/mRNA-muIL4-N19(진한 회색) 및 LNP/mRNA-muIL4-CRM(검은색 상자)이 시험되었다. 도 5A는 muIL4를 발현하는 세포의 백분율을 나타내는 그래프이다. 도 5B는 CRM을 발현하는 세포의 백분율을 나타내는 그래프이다. 도 5C는 발현된 세포에서 muIL4의 형광 강도(MFI)의 중앙값을 나타내는 그래프이다. (n=2) 범위가 있는 평균.
도 6은 본 발명의 적어도 하나의 RNA 작제물로 형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서의 muIL4의 시험관내 활성을 나타낸다. 단백질 활성은 LNP/mRNA 형질감염 24시간 후 HEK293 세포 상등액에서 증식성 생물분석으로 측정되었다. mRNA-muIL4(흰색), mRNA-muIL4-TpD(투명 회색), mRNA-muIL4-CRM(검은색), mRNA-muIL4-N19(진한 회색) 및 mRNA-CRM(사선 원) 형질감염의 상등액이 시험되었다. 샘플 희석의 함수로 490 ㎚에서의 광학 밀도(OD)가 표시된다. (n=2) 범위가 있는 평균.
도 7은 생체내 연구 계획을 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍ LNP/mRNA로 3회 근육내(IM) 면역화를 수용하였다(화살표). 지시된 시점에서 혈액 샘플을 채취하였다.
도 8은 BALB/c 마우스에 LNP/mRNA를 근육내 주사한 후 혈청 샘플에서 muIL4에 대한 중화 항체의 유도를 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍의 LNP 내 mRNA-muIL4(흰색 원), mRNA-CRM(사선 원), mRNA-muIL4-TpD(투명한 회색 원), mRNA-muIL4-N19(어두운 회색 원) 또는 mRNA-muIL4-CRM(검은색 원)의 3개의 IM 면역화를 수용하였다. 막대는 중앙값을 나타낸다. muIL4에 대한 최대 중화 역가의 절반에 의해 입증된 중화 능력은 첫 번째 투여 후 D21, D41, D62 및 D80에 결정되었다. CRM, muIL4-N19 및 muIL4-CRM의 경우 그룹당 n=10. muIL4-TpD의 경우 n=9 및 muIL4의 경우 n=2.
도 9는 BALB/c 마우스에서 LNP/mRNA를 근육내 주사한 후의 동물 생존 곡선을 나타낸다. BALB/c 마우스는 D0, D7 및 D28에 10 ㎍의 LNP 내 mRNA-muIL4(파선), mRNA-muIL4-TpD(회색 선), mRNA-CRM, mRNA-muIL4-N19 및 mRNA-muIL4-CRM(검정색 선)의 3개의 IM 면역화를 수용하였다. Kaplan-Mayer 생존 곡선이 표시된다(n=10/그룹).
본 발명은 적어도 하나의 RNA 분자, 또는 상기 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하는 조성물에 관한 것이며, 여기서 적어도 하나의 RNA 분자는 (i) 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편의 아미노산 서열, (ii) 적어도 하나의 T 세포 에피토프의 아미노산 서열 및 선택적으로 (iii) 적어도 하나의 스페이서의 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 단일 아미노산 쇄 중에 (i) 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편의 아미노산 서열, (ii) 적어도 하나의 T 세포 에피토프의 아미노산 서열 및 선택적으로 (iii) 적어도 하나의 스페이서의 아미노산 서열을 포함하는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 단일 아미노산 쇄 중에, N-말단에서 C-말단으로 (i) 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편의 아미노산 서열, 선택적으로 (ii) 적어도 하나의 스페이서의 아미노산 서열 및 (iii) 적어도 하나의 T 세포 에피토프의 아미노산 서열을 포함하는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다. 일 구현예에서, 단일 단백질 작제물은 바람직하게는 N-말단에 신호 펩티드를 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로, (i) 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편을 암호화하는 서열, 선택적으로 (ii) 적어도 하나의 스페이서를 암호화하는 서열 및 (iii) 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 서열을 포함한다. 일 구현예에서, RNA 분자는 바람직하게는 5'에 신호 펩티드를 암호화하는 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 적어도 하나의 사이토카인으로부터의 T 세포 에피토프가 아니다. 더욱 바람직하게, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 적어도 하나의 사이토카인이 아닌 다른 유기체로부터 기원한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편은 치료될 대상체와 동일한 유기체로부터 기원한다. 예를 들어, RNA 분자가 인간을 치료하는 데 사용되도록 의도된 경우, 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편은 인간(천연 또는 재조합)이다.
따라서, 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 2개의 도메인, 즉 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편을 암호화하는 제1 도메인(여기서, 상기 적어도 하나의 사이토카인은 바람직하게는 치료될 대상체와 동일한 유기체로부터 기원한다 - 따라서 상기 도메인은 "자기-도메인"으로서 정의될 수 있다), 및 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 제2 도메인(여기서 바람직하게 상기 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 치료될 대상체가 아닌 다른 유기체로부터 유래한다 - 따라서 상기 도메인은 "비-자기-도메인(non-self domain)"으로서 정의될 수 있다)을 포함하는 것으로서 기재될 수 있다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 상기 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편의 적어도 하나의 에피토프를 암호화한다. 일 구현예에서, 상기 적어도 하나의 에피토프는 B 세포 에피토프이다. 또 다른 구현예에서, 상기 적어도 하나의 에피토프는 T 세포 에피토프이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 사이토카인 활성이 감소된 사이토카인, 또는 이의 단편을 암호화한다. 임의의 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 고유 활성을 갖는 사이토카인의 발현 유도가 독성을 유발할 수 있으므로 사이토카인 활성의 감소는 특히 관련성이 있을 수 있다. 실제로, 일 구현예에서, 본 발명은 이상 IL-4 및/또는 IL-13 활성과 관련된 질환을 치료하는 것을 목표로 하며, 증가된 양의 기능성 IL-4 및/또는 IL-13의 발현을 초래하는 RNA 분자의 투여는 심각한 부작용을 유발할 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자에 의해 암호화되는 사이토카인, 또는 이의 단편의 잔류 사이토카인 활성은 상기가 유래하는 사이토카인에 대해 측정된 사이토카인 활성의 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% 이하이다. 사이토카인 활성을 측정하는 데 사용될 수 있는 분석은 해당 분야에 주지되어 있다.
일 구현예에서, 사이토카인은 IL-4 또는 IL-13이고, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자에 의해 암호화되는 사이토카인, 또는 이의 단편의 잔류 사이토카인 활성은 시험 A의 조건에서 측정될 수 있다. 시험 A는 CTLL-2 세포상에서, 예를 들어 약 48시간 배양 후에 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자로 형질감염된 세포(예를 들어, HEK293 세포)의 상등액(바람직하게 상등액은 형질감염 후 24h째에 수집된다)의 연속 희석에 의해 유도된 증식 활성의 측정에 기초한 시험관내 시험이다. 세포 증식을 측정하는 방법은 해당 부분에서 주지되어 있으며 MTS/PMS 분석(기질 추가 및 4시간 배양 후 490 ㎚에서 광학 밀도 판독 포함)을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 시험 A의 일례를 실시예 2에 나타낸다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자에 의해 암호화된 사이토카인, 또는 이의 단편의 잔류 사이토카인 활성은, 시험 A의 조건에서 측정될 때, 동일한 희석으로, 상기가 유래하는 사이토카인에 대해 측정된 사이토카인 활성의 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% 이하이다.
어떠한 이론에도 얽매이지 않고, 본 출원인은 적어도 하나의 RNA 분자가 시험관내에서 생성되고 생체내에서 표적 세포(예를 들어, 항원 제시 세포(APC), 특히 수지상 세포)로 전달 후에 이들 세포에서 적어도 하나의 단백질 또는 펩티드 생성을 유도함을 시사한다. 이후 펩티드(들) 또는 단백질(들)은 세포외 구획의 세포에 의해 분비되거나 프로테아솜에 의해 분해되고 소포체로 처리되어, 나중에 MHC 부류 I 및 부류 II 분자에 의해 세포막에 제시되는 에피토프를 생성할 수 있다.
MHC 부류 II 분자를 통한 IL-4 및/또는 IL-13 에피토프(본 발명의 RNA 작제물로부터의)의 제시는 CD4+ T 세포의 활성화를 유도할 수 있으며, 이는 차례로 B 림프구를 활성화시켜 상기 에피토프(들)에 특이적인 항체의 생성을 유도할 것이다. 또한, IL-4 및/또는 IL-13 에피토프는 MHC 부류 I 분자에 의해 제시될 수 있으며 세포독성 항원-특이적 CD8+ T 세포의 활성화를 유도하여, 세포 표면에서 동일한 항원을 발현하는 세포를 용해시킬 수 있다. 또한, MHC 분자에 의한 본 발명의 RNA 분자의 제2 도메인의 T 세포 에피토프의 제시는 IL-4 및/또는 IL-13 에피토프의 제시 후에 유도된 면역 반응을 증가시킬 수 있다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 mRNA 분자, 바람직하게는 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서를 암호화하는 비-복제 mRNA 분자이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프, 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서는 상이한 mRNA 분자에 의해 암호화된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프, 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서는 단일 mRNA 분자에 의해 암호화된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프, 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서는 단일 단백질 작제물, 바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물에 포함된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-4이다.
일 구현예에서, IL-4는 포유동물 IL-4로부터 유래된다.
일 구현예에서, IL-4는 포유동물 IL-4의 변이체이며, 여기서 상기 변이체는 상기 변이체가 유래하는 포유동물 IL-4와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성(identity)을 나타낸다.
본원에 사용된 바와 같이, "동일성" 또는 "동일한"이라는 용어는 2개 이상의 핵산 서열 또는 2개 이상의 폴리펩티드의 서열 사이의 관계에 사용되는 경우, 각각 2개 이상의 핵산 또는 아미노산 잔기의 스트링간의 일치 수에 의해 결정되는 바와 같은, 핵산 서열 또는 폴리펩티드 사이의 서열 관련성의 정도를 지칭한다. "동일성"은 특정 수학 모델 또는 컴퓨터 프로그램(즉, "알고리즘")에 의해 처리된 끊김 정렬(있는 경우)이 있는 둘 이상의 서열 중 더 작은 서열 간에 동일한 동일성 퍼센트를 측정한다. 관련된 핵산 서열 또는 폴리펩티드의 동일성은 공지된 방법에 의해 쉽게 계산될 수 있다. 이러한 방법에는 하기의 문헌에 기재된 것들이 포함되나, 이들로 제한되지는 않는다: Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part 1, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M. Stockton Press, New York, 1991; 및 Carillo et al., SIAM J. Applied Math. 48, 1073 (1988). 동일성을 결정하기 위한 바람직한 방법은 시험된 서열 간에 가장 큰 일치를 제공하도록 설계된다. 동일성 결정 방법은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 프로그램에 기재되어 있다. 2개의 서열 사이의 동일성을 결정하기 위한 바람직한 컴퓨터 프로그램 방법에는 ClustalO(Sievers F., et al 2011), GAP(Devereux et al., Nucl. Acid. Res. \2, 387 (1984); Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.), BLASTP, BLASTN, 및 FASTA(Altschul et al., J. MoI. Biol. 215, 403-410 (1990))를 포함한 GCG 프로그램이 있다. BLASTX 프로그램은 국립 생물공학 정보 센터(NCBI) 및 기타 출처(BLAST Manual, Altschul et al. NCB/NLM/NIH Bethesda, Md. 20894; Altschul et al., 상기)에서 공개적으로 이용 가능하다. 주지된 Smith Waterman 알고리즘을 사용하여 동일성을 결정할 수도 있다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-4의 단편, 예를 들어 상기 단편이 유래하는 IL-4 분자의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120 또는 125개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 IL-4의 단편이다.
일 구현예에서, IL-4의 단편은 에피토프를 포함하거나 이로 이루어질 수 있다. 일 구현예에서, 상기 IL-4의 단편은 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어진다. IL-4의 에피토프의 예를 하기에 나열한다.
일 구현예에서, IL-4는 전장 IL-4이다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-4는 인간 IL-4이다. 인간 IL-4는 서열번호 1(UniProt ID: P05112-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 1
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 인간 IL-4를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 인간 IL-4를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 2, 또는 서열번호 2와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 2
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-4 사이토카인 단편은 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
인간 IL-4의 에피토프의 예는 LQEIIKTLNSLTEQKTLCTELT(서열번호 3), KETFCRAATVLRQFY(서열번호 4), AQQFHRHKQLIRFLKRLDRNLWGLAG(서열번호 5) 및 LENFLERLKTIMREKYSKC(서열번호 6)을 포함하나 이들로 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5 또는 서열번호 6을 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLQEIIKTLNSLTEQKTLCTELTC(서열번호 7), CKETFCRAATVLRQFYC(서열번호 8), CAQQFHRHKQLIRFLKRLDRNLWGLAGC(서열번호 9) 및 CLENFLERLKTIMREKYSKC(서열번호 10)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9 또는 서열번호 10을 포함하거나 이로 구성된 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 인간 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 인간 IL-4 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 서열번호 104(AUGGGCCUGACCAGCCAGCUGCUGCCCCCCCUGUUCUUCCUGCUGGCCUGCGCCGGCAACUUCGUGCACGGC)에 의해 암호화될 수 있는 서열번호 103(MGLTSQLLPPLFFLLACAGNFVHG)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 인간 IL-4의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 하기의 서열을 갖는 펩티드를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다:
- MKWVTFISLLFLFSSAYS(서열번호 88, 혈청 알부민 프리프로단백질로부터 유래)
- MQLLSCIALILALV(서열번호 89, 인간 IL-2로부터 유래)
- MGVKVLFALICIAVAEA(서열번호 90, 가우시아 루시퍼라제(Gaussia luciferase)로부터 유래):
- MAFLWLLSCWALLGTTFG(서열번호 91, 인간 키모트립시노겐으로부터 유래);
- MWWRLWWLLLLLLLLWPMVWA(서열번호 92) 및
- MNLLLILTFVAAAVA(서열번호 93, 인간 트립시노겐-2로부터 유래)
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 117, 127, 137, 140 및 142를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-4는 쥐 IL-4이다. 쥐 IL-4는 서열번호 11(UniProt ID: P07750-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 11
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 쥐 IL-4를 암호화하는 서열을 포함한다. 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 12, 또는 서열번호 12와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 12
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-4 사이토카인 단편은 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
IL-4의 에피토프의 예는 LREIIGILNEVTGEGTPCTEMD(서열번호 13), SELVCRASKVLRIFY(서열번호 14), SSVLMELQRLFRAFRCLDS(서열번호 15) 및 LKDFLESLKSIMQMDYS(서열번호 16)가 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 13, 서열번호 14, 서열번호 15 또는 서열번호 16을 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가되어 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLREIIGILNEVTGEGTPCTEMDC(서열번호 17), CSELVCRASKVLRIFYC(서열번호 18), CSSVLMELQRLFRAFRCLDSC(서열번호 19) 및 CLKDFLESLKSIMQMDYSC(서열번호 20)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 19 또는 서열번호 20을 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 쥐 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 쥐 IL-4 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 서열번호 141(AUGGGCCUGAACCCCCAGCUGGUGGUGAUCCUGCUGUUCUUCCUGGAGUGCACCCGCAGC)에 의해 암호화될 수 있는 서열번호 140(MGLNPQLVVILLFFLECTRS)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 쥐 IL-4의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 103, 117, 127, 137 및 142를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-4는 개(canine) IL-4이다. 개 IL-4는 서열번호 21(UniProt ID: O77762-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 21
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 개 IL-4를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 개 IL-4를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 22, 또는 서열번호 22와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 22
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-4 사이토카인 단편은 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
개 IL-4의 에피토프의 예는 IKEIIKMLNILTARNDSCMELT(서열번호 94), KEIFCRAATVLRQIY(서열번호 95), RYLRGLYRNLSSMAN(서열번호 96) 및 LKDFFLERLKVIMQKKY(서열번호 97)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 94-97을 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 하나 이상의 사이토카인 잔기(들)가 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CIKEIIKMLNILTARNDSCMELTC(서열번호 105), CKEIFCRAATVLRQIYC(서열번호 106), CRYLRGLYRNLSSMANC(서열번호 107), 및 CLKDFFLERLKVIMQKKYC(서열번호 108)을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 105-108을 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 개 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 개 IL-4 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 AUGGGCCUGACCAGCCAGCUGAUCCCCACCCUGGUGUGC CUGCUGGCCCUGACCAGCACCUUCGUGCACGGC(서열번호 79)에 의해 암호화될 수 있는 서열 MGLTSQLIPTLVCLLALTSTFVHG(서열번호 78)을 포함하거나 이로 이루어지는 개 IL-4의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93이 포함되지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 84, 103, 117, 127, 137, 140 및 142가 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-4는 말(equine) IL-4이다. 말 IL-4는 서열번호 99(UniProt ID: P42202)의 서열을 갖는다.
서열번호 99
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 말 IL-4를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 말 IL-4를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 100, 또는 서열번호 100과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 100
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-4 사이토카인 단편은 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
말 IL-4의 에피토프의 예는 LQEIIKTLNLTDGKGKNSCMELT(서열번호 109), KEICRAAKVLQQYK(서열번호 110), RSLIKECLSGLDRNLKGMAN(서열번호 111) 및 LKDFLERLKTIMKEKYSKC(서열번호 112)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 109-112를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLQEIIKTLNLTDGKGKNSCMELTC(서열번호 113), CKEICRAAKVLQQYKC(서열번호 114), CRSLIKECLSGLDRNLKGMANC(서열번호 115) 및 CLKDFLERLKTIMKEKYSKC(서열번호 116)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 113-116을 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 말 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 말 IL-4 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 서열번호 85(AUGGGCCUGACCUACCAGCUGCUGCCCGCCCUGGUGUGCCUG CUGGCCUGCACCAGCUUCAUCCAGGGC)에 의해 암호화될 수 있는 서열번호 84(MGLTYQLLPALVCLLACTSFIQG)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 말 IL-4의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 103, 117, 127, 137, 140 및 142를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-13이다.
일 구현예에서, IL-13은 포유동물 IL-13으로부터 유래된다.
일 구현예에서, IL-13은 포유동물 IL-13의 변이체이고, 여기서 상기 변이체는 상기 변이체가 유래되는 포유동물 IL-13과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인은 IL-13의 단편, 예를 들어 상기 단편이 유래되는 IL-13 분자의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115 또는 120개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 IL-13의 단편이다.
일 구현예에서, 단편은 에피토프로 이루어지거나 이를 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 IL-13의 단편은 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어진다. IL-13의 에피토프의 예를 하기에 나열한다.
일 구현예에서, IL-13은 전장 IL-13이다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-13은 인간 IL-13이다. 인간 IL-13은 서열번호 23(UniProt ID: P35225-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 23
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 인간 IL-13 단백질을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 인간 IL-13을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 24, 또는 서열번호 24와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 24
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-13 사이토카인 단편은 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
인간 IL-13의 에피토프의 예는 LRELIEELVNITQNQKAPLCNG(서열번호 25), NGSMVWSINLTAGMYCA(서열번호 26), AGMYCAALESLINVSGCSAIEK(서열번호 27) 및 VAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN(서열번호 28)을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 25, 서열번호 26, 서열번호 27 또는 서열번호 28을 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLRELIEELVNITQNQKAPLCNGC(서열번호 29), CNGSMVWSINLTAGMYCAC(서열번호 30), CAGMYCAALESLINVSGCSAIEKC(서열번호 31) 및 CVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFNC(서열번호 32)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31 또는 서열번호 32를 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 인간 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 인간 IL-13 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 서열번호 118(AUGCACCCCCUGCUGAACCCCCUGCUGCUGGCCCUGGGCCUGAUGGCCCUGCUGCUGACCACCGUGAUCGCC)에 의해 암호화될 수 있는 서열번호 117(MHPLLNPLLLALGLMALLLTTVIA)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는, 인간 IL-13의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 103, 127, 137, 140 및 142를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-13은 쥐 IL-13이다. 쥐 IL-13은 서열번호 33( UniProt ID: P20109-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 33
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 쥐 IL-13을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 34, 또는 서열번호 34와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 34
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-13 사이토카인 단편은 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
쥐 IL-13의 에피토프의 예는 LKELIEELSNITQDQTPLCNG(서열번호 35), NGSMVWSVDLAAGGFCV(서열번호 36), AGGFCVALDSLTNISNCNAIYR(서열번호 37) 및 VAHFITKLLSYTKQLFRHGPF(서열번호 38)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 37 또는 서열번호 38을 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
쥐(murine) IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLKELIEELSNITQDQTPLCNGC(서열번호 39), CNGSMVWSVDLAAGGFCVC(서열번호 40), CAGGFCVALDSLTNISNCNAIYRC(서열번호 41) 및 CVAHFITKLLSYTKQLFRHGPFC(서열번호 42)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 39, 서열번호 40, 서열번호 41 또는 서열번호 42를 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 쥐 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 쥐 IL-13 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 RNA 서열 서열번호 143(AUGGCCCUGUGGGUGACCGCCGUGCUGGCCCUGGCCUGC CUGGGCGGCCUGGCC)에 의해 암호화될 수 있는, 서열번호 142(MALWVTAVLALACLGGLA)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 쥐 IL-13의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 103, 117, 127, 137 및 140을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-13은 개 IL-13이다. 개 IL-13은 서열번호 43(UniProt ID: Q9N0W9-1)의 서열을 갖는다.
서열번호 43
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 개 IL-13을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 개 IL-13을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 44, 또는 서열번호 44와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 44
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-13 사이토카인 단편은 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
개 IL-13의 에피토프의 예는 LKELIEELVNITQNQASLCNG(서열번호 119), NGSMVWSVNLTAGMYCA(서열번호 120), AGMYCAALESLINVSDCSAIQR(서열번호 121) 및 VIQLVKNLLTYVRGVYRHGNF(서열번호 122)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 119-122를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 개 IL13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLKELIEELVNITQNQASLCNGC(서열번호 123), CNGSMVWSVNLTAGMYCAC(서열번호 124), CAGMYCAALESLINVSDCSAIQRC(서열번호 125) 및 CVIQLVKNLLTYVRGVYRHGNFC(서열번호 126)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 123-126을 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 개 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 개 IL-13 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 AUGGCCCUGUGGCUGACCGUGGUGAUCGCCCUGACCUGCCUGGGCGGCCUGGCC(서열번호 128)에 의해 암호화될 수 있는 서열 MALWLTVVIALTCLGGLA(서열번호 127)를 포함하거나 이로 이루어지는 개 IL-13의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 103, 117, 137, 140 및 142를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, IL-13은 말 IL-13이다. 말 IL-13은 서열번호 101(UniProt ID: B6C802)의 서열을 갖는다.
서열번호 101
일 구현예에서, 적어도 하나의 사이토카인을 암호화하는 RNA 서열은 말 IL-13을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 말 IL-13을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 102, 또는 서열번호 102와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 102
일 구현예에서, 적어도 하나의 IL-13 사이토카인 단편은 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드이다.
말 IL-13의 에피토프의 예는 LKELIKELVNITQNQAPLCNG(서열번호 129), NGSMVWSVNLTADTYCRA(서열번호 130), ADTYCRALESLSNVSTCSAIQN(서열번호 131) 및 VIVLVKDLLKNLRKIFHGGK(서열번호 132)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 129-132를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 하나 이상의 시스테인 잔기(들)가 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 말단에 부가된다. 일 구현예에서, 하나의 시스테인 잔기가 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 펩티드의 각 말단에 부가되어, 상기 펩티드에 사이클릭 형태를 부여한다.
말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 사이클릭 펩티드의 예는 CLKELIKELVNITQNQAPLCNGC(서열번호 133), CNGSMVWSVNLTADTYCRAC(서열번호 134), CADTYCRALESLSNVSTCSAIQNC(서열번호 135) 및 CVIVLVKDLKNLRKIFHGGKC(서열번호 136)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 한 구현예에 따르면, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프, 예를 들어 서열번호 133-136을 포함하거나 이로 이루어지는 사이클릭 펩티드를 암호화하는 하나 이상의 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 서열, 특히 말 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편을 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열은 신호 펩티드, 예를 들어 고유의 말 IL-13 단백질의 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함한다.
일 구현예에서, 신호 펩티드는 바람직하게는 RNA 서열 서열번호 138(AUGGCCCUGUGGCUGACCGCCGUGAUCGCCCUGGCCUGCCU GGGCGGCCUGGCCAGCCCC)에 의해 암호화될 수 있는 서열번호 137(MALWLTAVIALACLGGLASP)의 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 말 IL-13의 신호 펩티드이다.
본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 88-93을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 신호 펩티드의 다른 예는 서열번호 78, 84, 103, 117, 127, 140 및 142를 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 (i) IL-4, IL-4의 적어도 하나의 변이체, IL-4의 적어도 하나의 단편 또는 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 적어도 하나의 아미노산 서열(특히 상기에 기재된 펩티드 중 하나) 및 (ii) IL-13, IL-13의 하나 이상의 변이체, IL-13의 적어도 하나의 단편 또는 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 적어도 하나의 아미노산 서열(특히 상기에 기재된 펩티드 중 하나)을 암호화한다.
본 발명에 따르면, 적어도 하나의 RNA 분자는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는, 동일하거나 상이할 수 있고 적어도 하나의 스페이서에 의해 함께 연결될 수 있는 적어도 2, 3, 4, 5 또는 10개의 T 세포 에피토프(예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개 이상의 T 세포 에피토프)를 포함하는 아미노산 서열을 암호화한다. 스페이서의 예는 본원에 나열되어 있다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 우성 T 세포 에피토프, 즉 HLA-제한되지 않는 에피토프이다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 Th2 에피토프이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 펩티드 또는 단백질에 포함되고, 적어도 하나의 RNA 분자는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 적어도 하나의 펩티드 또는 단백질을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 적어도 하나의 펩티드 또는 단백질은 사이토카인, 또는 이의 단편과 구별된다.
T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 펩티드 또는 단백질의 예는 CRM197, 이의 변이체 및 단편(예를 들어, CRM197(299-312), CRM197(425-440), CRM197(300-450)), 디프테리아와 파상풍 에피토프의 조합(TpD), 파상풍 독소의 에피토프(TT), 및 보편적인 폴리에피토프 CD4(예를 들어, N10, N19)를 포함하거나 이로 이루어지는 그룹을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 CRM197, 또는 이의 변이체 또는 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. CRM197은 단일 염기 치환(52번 위치에서 글리신에서 글루탐산으로의 돌연변이)으로 인한 독성 활성이 없는 서열번호 48의 서열을 갖는 디프테리아 독소의 무독성 돌연변이체이다.
서열번호 48
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 CRM197의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 48과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다. 일 구현예에서, 상기 CRM197의 변이체는 52번 위치에 글리신에서 글루탐산으로의 돌연변이를 포함하며(서열번호 48 참조) 따라서 무독성이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 전장 CRM197를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 CRM197의 단편, 예를 들어 서열번호 48로부터 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 또는 500개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. CRM197 단편의 구체적인 예가 본원에 나열되어 있다.
일 구현예에서, CRM197을 암호화하는 RNA 서열은 서열번호 49, 또는 서열번호 49와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 49
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 48의 아미노산 299 내지 아미노산 312를 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197의 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 서열번호 48의 아미노산 299 내지 아미노산 312로 이루어지는 CRM197의 단편은 CRM197(299-312)로서 지칭되며 서열번호 50(KTTAALSILPGIGS)의 서열로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 서열번호 50의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 50과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 50의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197(299-312)의 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 펩티드 또는 단백질을 암호화하는 RNA 서열은 CRM197(299-312)를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. CRM197(299-312)을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 51, 또는 서열번호 51(AAGACCACCGCCGCCCUGAGCAUCCUGCCCGGCAUCGGCAGC)과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 48의 아미노산 425 내지 아미노산 440을 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197의 단편을 암호화 하는 RNA 서열을 포함한다. 서열번호 48의 아미노산 425 내지 아미노산 440으로 이루어지는 CRM197의 단편은 CRM197(425-440)로서 지칭되며 서열번호 52(TPLPIAGVLLPTIPGK)의 서열로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 서열번호 52의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 52와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 52의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197(425-440)의 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 펩티드 또는 단백질을 암호화하는 RNA 서열은 CRM197(425-440)을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. CRM197(425-440)을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 53, 또는 서열번호 53(ACCCCCCUGCCCAUCGCCGGCGUGCUGGCUGCCCACCAUCCCCGGCAAG)과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 48의 아미노산 300 내지 아미노산 450을 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197의 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 서열번호 48의 아미노산 300 내지 아미노산 450으로 이루어지는 CRM197의 단편은 CRM(300-450)으로서 지칭되며 서열번호 46의 서열로 이루어진다.
서열번호 46
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 서열번호 46의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 46과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 46의 적어도 약 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140 또는 145개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하거나 이로 이루어지는 CRM197(300-450)의 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하는 펩티드 또는 단백질을 암호화하는 RNA 서열은 CRM197(300-450)을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. CRM197(300-450)을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 47, 또는 서열번호 47과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 47
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. TpD는 디프테리아와 파상풍 에피토프 모두 및 선택적으로 카텝신 절단 부위를 포함한다.
일 구현예에서, TpD는 서열번호 54(ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ)의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 54의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 54와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 전장 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 전장 TpD를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 55, 또는 서열번호 55와 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 RNA 서열이다.
서열번호 55
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 TpD의 단편, 예를 들어 서열번호 54로부터 적어도 약 5, 10, 15, 20, 25 또는 30개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 "p2-스페이서-p30" 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. P2-스페이서-p30은 파상풍 독소(TT)의 2개의 에피토프, 즉 펩티드 P2 및 펩티드 P30, 및 적어도 하나의 스페이서를 포함하는 펩티드이다.
일 구현예에서, 스페이서는 1 내지 20개의 아미노산을 포함한다. 일 구현예에서, 스페이서는 2개의 아미노산으로 이루어진다. 일 구현예에서, 스페이서는 RR로 이루어진다.
일 구현예에서, p2-스페이서-p30은 서열번호 63의 서열로 이루어지는 펩티드 "p2TT", 서열번호 62의 서열로 이루어지는 펩티드 "p30TT", 및 선택적으로 스페이서(예를 들어, RR)를 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, p2-스페이서-p30은 작제물 p2-RR-p30, 즉 펩티드 p2TT 및 p30TT 및 스페이서 RR을 포함하거나 이로 이루어지고 서열번호 56의 서열 또는 서열번호 56과 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 그의 변이체를 포함하거나 이로 이루어지는 작제물, p2-RR-p30 작제물을 포함하거나 이로 이루어진다.
서열번호 56
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 이의 단편을 포함하는 펩티드 또는 단백질은 전장 p2-RR-p30이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 적어도 하나의 T 세포 에피토프 또는 이의 단편을 포함하는 펩티드 또는 단백질은 서열번호 56으로부터의 적어도 약 5, 10, 15, 20, 25, 30, 32, 35 또는 37개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 p2-RR-p30의 단편이다.
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 p2-RR-p30을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. p2-RR-p30을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 57, 또는 서열번호 57과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 서열이다.
서열번호 57
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 하나 이상의 보편적인 CD4 폴리에피토프를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는, 선택적으로 스페이서(들)에 의해 연결된 적어도 2개의 보편적인 CD4 폴리에피토프를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 보편적인 CD4 폴리에피토프의 예는 서열번호 58 내지 67의 서열(표 1)을 갖는 펩티드를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 스페이서의 예가 본원에 제공된다.
[표 1]
보편적인 CD4 폴리에피토프 아미노산 서열
TT: 파상풍 독소, PfC: 피. 팔시파룸(P. falciparum) 포자소체 단백질, HBVnc: HBV 뉴클레오캡시드, HbsAg: HBV 표면 항원, HA: 인플루엔자 바이러스 헤마글루티닌, MT: 인플루엔자 바이러스 기질 단백질
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 서열번호 58-67 중에서 선택된 서열의 변이체이고, 여기서 상기 변이체는 서열번호 58-67과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 표 1에 개시된 바와 같은 보편적인 전장 CD4 단백질 폴리에피토프이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프는 서열번호의 58-60, 63 및 65-67의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산) 또는 서열번호 61-62 및 64의 적어도 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 또는 17개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 보편적인 CD4 폴리에피토프의 단편이다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 RNA 서열은 선택적으로 스페이서(들)에 의해 연결된 적어도 2개의 보편적인 CD4 폴리에피토프를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 보편적인 CD4 폴리에피토프를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 68 내지 77의 서열(표 2)을 포함하거나 이로 이루어지는 RNA 서열을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
[표 2]
보편적인 CD4 폴리에피토프 뉴클레오티드 서열
TT: 파상풍 독소, PfC: 피. 팔시파룸 포자소체 단백질, HBVnc: HBV 뉴클레오캡시드, HbsAg: HBV 표면 항원, HA: 인플루엔자 바이러스 헤마글루티닌, MT: 인플루엔자 바이러스 기질 단백질
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 스페이서에 의해 선택적으로 연결된, 표 1로부터의 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 또는 30개의 보편적인 CD4 폴리에피토프를 포함하는 아미노산 서열을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 적어도 2개의 동일하거나 상이한 보편적인 CD4 폴리에피토프를 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 병원체-유래된 항원, 예를 들어 비제한적으로 TT 및 플라스모디움 팔시파룸, 인플루엔자 바이러스 및 B형 간염 바이러스로부터의 단백질로부터 유래된 10 또는 19개의 인간 CD4+ T 세포 에피토프(각각)(표 1에 나열된 바와 같다)를 포함하거나 이로 이루어지는 N10, N19와 같은 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 포함하거나 이로 이루어지는 재조합 펩티드 또는 단백질을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 본원에 기재된 바와 같은 10개의 보편적인 CD4 에피토프(본원에서 N10으로 지칭됨)를 암호화하는 RNA 서열을 포함하고, 선택적으로 여기서 보편적인 CD4 폴리에피토프는 스페이서에 의해 연결된다. 스페이서의 예가 본원에 나열되어 있다.
N10 작제물의 비제한적인 예는 서열번호 80 서열의 펩티드이다.
서열번호 80
일 구현예에서, RNA 분자는 서열번호 80의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 80과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, RNA 분자는 전장 N10 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, RNA 분자는 N10의 단편, 예를 들어 서열번호 80으로부터의 적어도 약 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 125, 150 또는 175개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 RNA 서열은 N10을 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. N10을 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 81, 또는 서열번호 81과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 서열이다.
서열번호 81
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 본원에 기재된 19개의 보편적 CD4 에피토프(본원에서 N19로 지칭됨)를 암호화하는 RNA 서열을 포함하고, 선택적으로 여기서 보편적 CD4 폴리에피토프는 스페이서에 의해 연결된다. 스페이서의 예가 본원에 나열되어 있다.
N19 작제물의 비제한적인 예는 서열번호 82 서열의 펩티드이다.
서열번호 82
일 구현예에서, RNA 분자는 서열번호 82의 변이체를 암호화하는 RNA 서열을 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열번호 82와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
일 구현예에서, RNA 분자는 전장 N19 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, RNA 분자는 N19의 단편, 예를 들어 서열번호 82로부터의 적어도 약 10, 15, 20, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300 또는 330개 아미노산(바람직하게는 인접 아미노산)을 포함하는 단편을 암호화하는 RNA 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 RNA 서열은 N19를 암호화하는 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. N19를 암호화하는 RNA 서열의 예는 서열번호 83, 또는 서열번호 83과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 서열이다.
서열번호 83
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 스페이서를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 서열을 포함한다. 일 구현예에서, 사이토카인은 스페이서에 의해 적어도 하나의 T 세포 에피토프에 연결된다. 일 구현예에서, 사이토카인은 하나 이상의 스페이서(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5개)에 의해 적어도 하나의 T 세포 에피토프에 연결된다. T 세포 에피토프 또는 사이토카인 단편을 연결하기 위해 스페이서가 존재할 수도 있다.
일 구현예에서, 스페이서는 절단 가능하다. 일 구현예에서, 스페이서는 예를 들어 카텝신과 같은 프로테아제에 의해 절단될 수 있다.
일 구현예에서, 스페이서는 절단 불가능하다.
스페이서의 예는 PMGLP(서열번호 86), 카텝신 절단 부위, 아미노산 더블릿, GP, LG, GS, GPGPG(서열번호 45), GGSGGGGSGG(서열번호 98), (GGGGS)n(여기서 n의 범위는 1 내지 4이다)((서열번호 139)n), ASG, KG 및 RR을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 스페이서는 서열번호 87(CCCAUGGGCCUGCCC)의 핵산 서열 또는 서열번호 87에 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 99% 동일성을 갖는 핵산 서열에 의해 암호화될 수 있는, PMGLP(서열번호 86)의 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 예를 들어 2 내지 10개 아미노산 범위의 길이를 갖는 짧은 올리고- 또는 폴리펩티드 스페이서가 스페이서를 형성할 수 있다. 일 구현예에서, 링커는 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산으로 이루어진다.
짧은 스페이서의 예는 GP, LG, ASG, KG 및 RR을 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 짧은 스페이서 GP, LG, ASG, RR 및 KG는 각각 표 3에 나열된 RNA 서열에 의해 암호화될 수 있다.
[표 3]
스페이서 아미노산 서열
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 103의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N-말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 103의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 1의 서열을 갖는 인간 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 48의 서열을 갖는 CRM197을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 2의 RNA 서열) 및 CRM197(바람직하게는 서열번호 49의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 104의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 104의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 2의 서열을 갖는 인간 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 49의 서열을 갖는 CRM197을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 103의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 103의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 1의 서열을 갖는 인간 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 54의 서열을 갖는 TpD를 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 2의 RNA 서열) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 55의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 104의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 104의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 2의 서열을 갖는 인간 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 55의 서열을 갖는 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 103의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 103의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 1의 서열을 갖는 인간 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 82의 서열을 갖는 N19 작제물을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4를 암호화하는 RNA 서열(바람직하게는 서열번호 2의 RNA 서열) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 83의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 104의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 104의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 2의 서열을 갖는 인간 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 83의 서열을 갖는 N19 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 추가로 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4(바람직하게는 서열번호 1의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 140의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 140의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 11의 서열을 갖는 쥐 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 48의 서열을 갖는 CRM197을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열(바람직하게는 서열번호 12의 RNA 서열) 및 CRM197(바람직하게는 서열번호 49의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 141의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 141의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 12의 서열을 갖는 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 49의 서열을 갖는 CRM197을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 146의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 146의 변이체이고, 여기서 상기 변이체는 상기 변이체가 유래되는 서열번호 146과 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
서열번호 146
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 TpD (바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 140의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 140의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 11의 서열을 갖는 쥐 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 54의 서열을 갖는 TpD를 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 12의 RNA 서열) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 55의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 141의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 141의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 12의 서열을 갖는 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 55의 서열을 갖는 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 144의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 144의 변이체이고, 여기서 상기 변이체는 상기 변이체가 유래되는 서열번호 144와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
서열번호 144
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 140의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 140의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 11의 서열을 갖는 쥐 IL-4, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 82의 서열을 갖는 N19 작제물을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열(바람직하게는 서열번호 12의 RNA 서열) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 83의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 141의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 141의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 12의 서열을 갖는 쥐 IL-4를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 83의 서열을 갖는 N19 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 145의 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 서열번호 145의 변이체이고, 여기서 상기 변이체는 상기 변이체가 유래되는 서열번호 145와 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 동일성을 나타낸다.
서열번호 145
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4(바람직하게는 서열번호 11의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 13, 14, 15 또는 16 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4(바람직하게는 서열번호 21의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 94, 95, 96 또는 97 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4(바람직하게는 서열번호 99의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-4의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 109, 110, 111, 112 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 117의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N-말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 117의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 23의 서열을 갖는 인간 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 48의 서열을 갖는 CRM197을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 24의 RNA 서열) 및 CRM197(바람직하게는 서열번호 49의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 118의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 118의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 24의 서열을 갖는 인간 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 49의 서열을 갖는 CRM197을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 117의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 117의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 23의 서열을 갖는 인간 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 54의 서열을 갖는 TpD를 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 24의 RNA 서열) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 55의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 118의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 118의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 24의 서열을 갖는 인간 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 55의 서열을 갖는 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 117의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 117의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 23의 서열을 갖는 인간 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 82의 서열을 갖는 N19 작제물을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 24의 RNA 서열) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 83의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 118의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 118의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 24의 서열을 갖는 인간 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 83의 서열을 갖는 N19 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13(바람직하게는 서열번호 23의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 인간 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 25, 26, 27 또는 28 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 142의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 142의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 33의 서열을 갖는 쥐 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 48의 서열을 갖는 CRM197을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열(바람직하게는 서열번호 34의 RNA 서열) 및 CRM197(바람직하게는 서열번호 49의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 143의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 143의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 34의 서열을 갖는 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 49의 서열을 갖는 CRM197을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 142의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 142의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 33의 서열을 갖는 쥐 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 54의 서열을 갖는 TpD를 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 34의 RNA 서열) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 55의 RNA 서열) 및 선택적으로 스페이서를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 143의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 143의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 34의 서열을 갖는 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 55의 서열을 갖는 TpD를 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드(바람직하게는 서열번호 142의 서열을 가짐)를 추가로 암호화한다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 N- 말단에서 C-말단으로: 바람직하게는 서열번호 142의 서열을 갖는 신호 펩티드, 바람직하게는 서열번호 33의 서열을 갖는 쥐 IL-13, GP 스페이서 및 바람직하게는 서열번호 82의 서열을 갖는 N19 작제물을 포함하거나 이로 이루어지는 단일 단백질 작제물(바람직하게는 단일 1-쇄 단백질 작제물)을 암호화한다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열(바람직하게는 서열번호 34의 RNA 서열) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 83의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 GP 스페이서를 암호화하는 서열(바람직하게는 RNA 서열 GGCCCC)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 신호 펩티드를 암호화하는 서열(바람직하게는 서열번호 143의 RNA 서열)을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 RNA 분자는 5'에서 3'으로: 바람직하게는 서열번호 143의 서열을 갖는 신호 펩티드를 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열번호 34의 서열을 갖는 쥐 IL-13을 암호화하는 RNA 서열, 바람직하게는 서열 GGCCCC를 갖는 GP 스페이서를 암호화하는 RNA 서열, 및 바람직하게는 서열번호 83의 서열을 갖는 N19 작제물을 암호화하는 RNA 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13(바람직하게는 서열번호 33의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 쥐 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 35, 36, 37 또는 38 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13(바람직하게는 서열번호 43의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 개 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 119, 120, 121 또는 122 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어진 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13(바람직하게는 서열번호 101의 서열을 가짐) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(서열번호 48) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(299-312)(서열번호 50) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(425-440)(서열번호 52) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 CRM197(300-450)(서열번호 46) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 TpD(바람직하게는 서열번호 54의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 p2-RR-p30(TT)(서열번호 56) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N10 작제물(바람직하게는 서열번호 80의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 N19 작제물(바람직하게는 서열번호 82의 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 말 IL-13의 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 펩티드(바람직하게는 서열번호 129, 130, 131 또는 132 중에서 선택된 서열을 갖거나 포함하는 펩티드) 및 적어도 하나의 CD4 폴리에피토프(바람직하게는 서열번호 58-67로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 서열을 가짐) 및 선택적으로 스페이서를 포함하거나 이로 이루어지는 아미노산 서열을 암호화한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 안정성 및/또는 번역 효율을 촉진하는 능력을 갖는 화학 구조를 포함하며 이 또한 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 바람직하게는 5' 및 3' UTR을 포함한다. 일 구현예에서, 5' UTR의 길이는 0 내지 3000개 뉴클레오티드이다. 5' 및 3' UTR은 발현될 유전자(예를 들어, IL-4 또는 IL-13)에 대한 자연 발생의 내인성 5' 및 3' UTR일 수 있다. 대안적으로, 관심 유전자에 내생적이지 않은 UTR 서열은, UTR 서열을 순방향 및 역방향 프라이머에 통합시키거나 주형의 임의의 다른 변형에 의해 통합시킴으로써 부가될 수 있다. 발현될 유전자에 내생적이지 않은 UTR 서열의 사용은 RNA의 안정성 및/또는 번역 효율을 변형하는 데 유용할 수 있다. 예를 들어, 3' UTR 서열의 AU가 풍부한 요소는 mRNA의 안정성을 감소시킬 수 있는 것으로 공지되어 있다.
일 구현예에서, 5' UTR은 내인성 유전자의 Kozak 서열을 함유할 수 있다. 일 구현예에서, 5' UTR은, RNA 게놈이 세포에서 안정한 RNA 바이러스로부터 유래될 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 리보솜 결합, 번역 개시 및 세포 내 mRNA 안정성을 결정하는 5' 단부상의 캡과 3' 폴리(A) 꼬리를 모두 갖는다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 폴리(A) 꼬리를 포함한다. 폴리(A) 꼬리는 RNA에 안정성을 제공하고 분해를 감소시킨다. 일반적으로 폴리(A) 꼬리의 길이는 RNA의 안정성과 양의 상관관계가 있다. 일 구현예에서, 폴리(A) 꼬리는 100 내지 5000개 아데노신이다.
또한 3' 단부에 다양한 화학기를 부착시켜 RNA 안정성을 증가시킬 수 있다. 이러한 부착에는 변형된/인공 뉴클레오티드, 앱타머 및 기타 화합물이 포함될 수 있다. 예를 들어, ATP 유사체를, 폴리(A) 폴리머라제를 사용하여 폴리(A) 꼬리에 통합시킬 수 있다. ATP 유사체는 RNA의 안정성을 더욱 증가시킬 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 5' 캡을 포함한다. RNA의 5' 캡은 RNA 분자에 안정성을 제공할 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 내부 리보솜 진입 부위(IRES) 서열, 특히 mRNA에 대한 캡-독립적 리보솜 결합을 개시하고 번역의 개시를 촉진하는 바이러스, 염색체 또는 인공적으로 설계된 서열을 포함한다.
GC 함량은 mRNA 안정성을 조절하거나 또한 2차 구조를 감소시키는 역할을 한다. GC 함량의 농축은 mRNA의 안정성 및 또한 생체내 단백질 번역을 최적화하고 증가시킬 수 있다. 일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자는 최적화된 GC 함량을 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 RNA 분자는 높은 GC 함량을 포함한다.
일 구현예에서, RNA 서열을, 1-메틸슈도유리딘 잔기에 의해 적어도 하나, 바람직하게는 모든 유리딘 잔기를 대체하도록 변형시킨다.
일 구현예에서, RNA는 네이키드 RNA가 아니며 표적 세포내로의 전달을 위해 제형화된다.
조성물을 주지된 방법, 예를 들어 리포펙션, 소노포레이션, 미세주사, 바이오리스틱, 바이로솜, 리포솜, 지질 나노입자, 면역리포솜, 다중양이온 또는 지질:핵산 접합체, 바이러스-유사 입자 및 인공 비리온에 의해 표적 세포내로 전달할 수 있다.
비-바이러스 전달 시스템이 활용되는 경우, 예시적인 전달 비히클은 리포솜이다. 숙주 세포 내로 핵산을 도입하기 위해(시험관내, 생체외 또는 생체내) 지질 제형의 사용이 고려된다. 또 다른 양태에서, 핵산은 지질과 회합될 수 있다. 지질과 회합된 핵산은 리포솜의 수성 내부에 캡슐화되거나, 리포솜의 지질 이중층 내에 산재되거나, 리포솜 및 올리고뉴클레오티드 모두와 회합되는 연결 분자를 통해 리포솜에 부착되거나, 리포솜에 포집되거나, 리포솜과 복합체를 이루거나, 지질을 함유한 용액에 분산되거나, 지질과 혼합되거나, 지질과 결합되거나, 지질에 현탁액으로서 함유되거나, 미셀과 함유되거나 복합체를 이루거나, 또는 달리 지질과 회합될 수 있다. 지질/RNA 회합된 조성물은 용액 중의 특정 구조로 제한되지 않는다. 예를 들어, 이는 이중층 구조, 미셀 또는 "붕괴된" 구조로 존재할 수 있다. 또한 단순히 용액에 산재해 크기나 모양이 균일하지 않은 집합체를 형성할 수도 있다. 지질은 자연적으로 발생하거나 합성된 지질일 수 있는 지방 물질이다. 예를 들어, 지질에는 세포질에서 자연적으로 발생하는 지방 소적뿐만 아니라 지방산, 알코올, 아민, 아미노 알코올 및 알데히드와 같은 장쇄 지방족 탄화수소 및 그 유도체를 함유하는 화합물 부류가 포함된다. 일 구현예에서, 전달 비히클은 LNP로서 지칭될 수 있는 지질 나노입자이다.
사용하기에 적합한 지질은 상업적인 공급원으로부터 수득할 수 있다. 예를 들어, 디미리스틸 포스파티딜콜린("DMPC")은 Sigma, St. Louis, MO로부터 수득할 수 있고; 디세틸 포스페이트("DCP")는 K&K Laboratories(Plainview, NY)로부터 수득할 수 있고; 콜레스테롤("Choi")은 Calbiochem-Behring으로부터 수득할 수 있고; 디미리스틸 포스파티딜글리세롤("DMPG") 및 기타 지질은 Avanti Polar Lipids, Inc.(Birmingham, AL)로부터 수득할 수 있다.
"리포솜"은 동봉된 지질 이중층 또는 집합체의 생성에 의해 형성된 다양한 단일 및 다중층 지질 비히클을 포괄하는 일반적인 용어이다. 리포솜은 인지질 이중층 막과 내부 수성 매질을 갖춘 소포 구조를 갖는 것을 특징으로 할 수 있다. 다중층 리포솜은 수성 매질에 의해 분리된 다중 지질층을 가지고 있다. 이는 인지질이 과량의 수용액에 현탁될 때 자발적으로 형성된다. 지질 성분은 폐쇄된 구조가 형성되기 전에 자기-재배열을 거쳐 지질 이중층 사이에 물과 용해된 용질을 포집한다. 그러나, 용액 내에서 정상적인 소포 구조와 상이한 용액 내 구조를 갖는 조성물도 또한 포함된다. 예를 들어, 지질은 미셀 구조를 취하거나 단순히 지질 분자의 불균일한 집합체로 존재할 수 있다. 리포펙타민-핵산 복합체 및 리피도트도 또한 고려된다.
일 구현예에서, 조성물은 약학 조성물이고 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함한다. 결과적으로, 본 발명은 추가로 적어도 하나의 RNA 분자(여기서 적어도 하나의 RNA 분자는 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서의 아미노산 서열을 암호화한다), 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하거나, 이로 본질적으로 이루어지거나 또는 이루어지는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 부형제는 이온 교환제, 알루미나, 스테아르산알루미늄, 레시틴, 혈청 단백질, 예를 들어, 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예를 들어 포스페이트, 글리신, 소르빈산, 소르빈산 칼륨, 포화 식물성 지방산, 물, 염 또는 전해질의 부분 글리세라이드 혼합물, 예를 들어 황산프로타민, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드 실리카, 삼규산 마그네슘, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로오스-계 물질(예를 들어, 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 약제이거나 약제로서 사용하기 위한 것이다. 결과적으로, 본 발명은 추가로 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하거나, 이로 본질적으로 이루어지거나 또는 이루어지는 약제에 관한 것이며, 여기서 적어도 하나의 RNA 분자는 본원에 기재된 바와 같은 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서를 암호화한다.
본 발명은 또한 약제로서 사용하기 위한 적어도 하나의 RNA 분자에 관한 것이며, 여기서 적어도 하나의 RNA 분자는 적어도 하나의 사이토카인 또는 사이토카인 단편, 적어도 하나의 T 세포 에피토프 및 선택적으로 적어도 하나의 스페이서를 암호화한다.
본원에 사용된 바와 같이, 약학 조성물 또는 약제와 관련하여 "본질적으로 이루어지는"이라는 용어는 본 발명의 조성물 또는 적어도 하나의 RNA 분자가 상기 약학 조성물 또는 약제 내에서 생물학적 활성을 갖는 유일한 치료제 또는 작용제임을 의미한다.
일 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물 또는 약제는 IL-4 또는 이의 단편 및 적어도 하나의 스페이서에 의해 선택적으로 연결된 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하거나 이로 본질적으로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물 또는 약제는 IL-13 또는 이의 단편 및 적어도 하나의 스페이서에 의해 선택적으로 연결된 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하거나 이로 본질적으로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물 또는 약제는 IL-4 및 IL-13(또는 이의 단편) 둘 다 및 스페이서에 의해 선택적으로 연결된 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하거나 이로 본질적으로 이루어진다. 일 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물 또는 약제는 (i) IL-4(또는 이의 단편) 및 선택적으로 스페이서에 의해 연결된 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자 및 (ii) IL-13(또는 이의 단편) 및 선택적으로 스페이서에 의해 연결된 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하거나 이로 본질적으로 이루어진다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하는 조성물은 백신 조성물이다. 본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 백신 조성물은 적어도 하나의 애주번트를 포함한다. 본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 백신 조성물은 어떠한 애주번트도 포함하지 않는다.
본 발명은 또한 본 발명의 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신의 제형에 관한 것이며, 여기서 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신은 항원보강된다. 따라서 일 구현예에서, 본 발명의 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신은 하나 이상의 애주번트를 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 또는 백신 조성물은 주사, 국소(예를 들어 경피 전달에 의해), 직장, 비강 또는 질로 투여될 수 있다(또는 투여용이다).
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물은 주사에 적합한 형태로 존재한다. 따라서, 일 구현예에서, 본 발명의 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물은 근육내, 복강내 또는 피하 주사에 의해 대상체에게 주사되어야 한다(또는 주사용이다).
주사용으로 적합한 형태의 예에는 멸균 용액 또는 분산액, 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말이 포함되지만 이에 제한되지는 않는다. 미생물에 의한 오염 방지는 예를 들어 다양한 항균제 및 항진균제(예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산, 티메로살 등)와 같은 보존제를 조성물에 첨가함으로써 이루어질 수 있다. 일 구현예에서, 주사 중 통증을 감소시키기 위해 등장성 제제, 예를 들어 설탕 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 일 구현예에서, 주사용 조성물의 흡수 연장은 흡수 지연제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 조성물에 사용함으로써 이루어질 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 동결건조된 백신 조성물을 주사용수에 용해하고 온화하게 혼합하며; 이어서, 상기에 기재된 바와 같은 면역애주번트를 첨가하고; 혼합물을 부드럽게 혼합하며, 적합한 주사기에 충전한다. 따라서 본 발명은 또한 본 발명의 백신 조성물로 충전되거나 미리 충전된 주사기를 포함하는 의료 장치에 관한 것이다.
일 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물은 국소 투여에 적합한 형태로 존재한다. 국소 투여에 적합한 형태의 예에는 중합체 패치 또는 방출 조절형 패치 등이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
다른 구현예에서, 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물은 직장 투여에 적합한 형태이다. 직장 투여에 적합한 형태의 예에는 좌제, 미세 관장제, 관장제, 겔, 직장 거품제, 크림, 연고 등이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명은 또한 대상체의 염증성 장애를 치료하기 위한 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 또는 본 발명의 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물에 관한 것이다.
따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 염증성 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 IL-4, IL-13 또는 이들 둘 다에 대한 면역 반응을 유도하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 추가로 본 발명의 적어도 하나의 RNA 분자, 조성물, 약학 조성물, 약제 또는 백신 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 IL-4, IL-13 또는 이들 둘 다의 생물학적 활성을 억제하거나 생물학적 활성을 중화시키는 항체의 생성을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일 구현예에서, 항체는 다클론 항체이다.
일 구현예에서, 대상체는 염증성 장애, 특히 이상 IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 연관된 장애를 앓고 있으며, 바람직하게는 이것으로 진단된다.
일 구현예에서, 대상체는 인간이다. 바람직하게는, 이 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물에 포함된 적어도 하나의 사이토카인은 인간이다.
일 구현예에서, 대상체는 비-인간 동물, 예를 들어 농장 동물 - 농업적으로 중요한 동물(예를 들어 소, 암소, 들소, 피그, 돼지, 양, 염소, 말, 당나귀, 알파카, 라마, 사슴, 엘크, 무스, 타조, 에뮤, 오리, 거위, 닭, 자고새, 메추라기, 꿩, 밍크, 연어, 대구, 메기, 청어, 송어, 농어, 농어, 가자미 , 상어, 참치, 암, 바닷가재, 가재, 달팽이, 대합조개, 굴 등), 반려동물(예를 들어, 고양이, 토끼, 설치류, 물고기, 뱀 등) 및 비-인간 영장류(예를 들어, 침팬지, 고릴라 및 오랑우탄을 포함한 대형 유인원; 긴팔원숭이를 포함한 소형 유인원; 구세계 원숭이; 신세계 원숭이; 및 안경원숭이, 여우원숭이 및 로리스를 포함하는 원원류)이지만 이로 제한되지 않는다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 이상 IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 연관된 장애이다.
염증 장애의 예로는 천식(알레르기성 또는 비-알레르기성), 알레르기 상태(예를 들어, 식품 알레르기, 독 알레르기, 고양이 알레르기, 약물 알레르기, 고 IgE 증후군, 알레르기성 비염, 알레르기성 결막염 및 알레르기성 장위염), 아토피성 질환(예를 들어, 아토피성 피부염, 두드러기(만성 특발성 두드러기 및 만성 자발성 두드러기 포함), 습진), 수포성 유천포창, 호흡기 질환(예를 들어, 알레르기성 및 비알레르기성 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD)), 비용종증 및 기도 염증을 수반하는 기타 상태(예를 들어, 호산구 증가증, 섬유증 및 낭성 섬유증 및 폐 섬유증을 포함한 과도한 점액 생성, 전신 경화증(SSc)); 염증성 및/또는 자가면역 장애 또는 상태, 위장 장애 또는 상태(예를 들어, 염증성 장 질환(IBD) 및 호산구성 식도염(EE), 및 호산구-매개된 위장병, 궤양성 대장염 및 크론병 및 전신 홍반성 루푸스); 전신 홍반성 루푸스, 간 장애 또는 상태(예를 들어, 간경변 및 간세포 암종), 피부경화증; 섬유증성 질환 또는 장애(예를 들어, 간 섬유증(예를 들어 B형 간염 및/또는 C형 간염에 의해 유발된 섬유증)), 피부경화증; 고형 종양 또는 암, 예를 들어 백혈병(예를 들어, B 세포 만성 림프구성 백혈병), 교모세포종, 림프종(예를 들어, 호지킨 림프종) 및 비만세포증을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 천식(예를 들어, 알레르기성 천식), 아토피성 피부염, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 폐 섬유증, 음식 알레르기, 비용종증 및 호산구성 식도염을 포함하는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 천식(예를 들어, 알레르기성 천식), 아토피성 피부염, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 폐 섬유증 및 음식 알레르기를 포함하는 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 알레르기, 천식 또는 아토피성 피부염이다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 알레르기성 천식이다.
일 구현예에서, 염증성 장애는 고형 종양이다. 일 구현예에서, 본 발명의 방법은 고형 종양으로부터의 전이를 예방하기 위한 것이다.
일 구현예에서, 치료는 단일 용량 또는 일정 기간에 걸친 수회 용량으로 이루어진다.
본 발명의 일 구현예에서, 치료될 대상체에게 상기 기재된 바와 같은 치료 유효량의 조성물을 적어도 1회 투여한다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, IL-4에 대한 항체의 양이 대상체로부터 수득된 혈청 샘플에서 검출 가능하지 않은 경우, 치료될 대상체에게 상기 기재된 바와 같은 치료 유효량의 조성물을 추가로 투여할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, IL-13에 대한 항체의 양이 대상체로부터 수득된 혈청 샘플에서 검출 가능하지 않은 경우, 치료될 대상체에게 상기 기재된 바와 같은 치료 유효량의 조성물을 추가로 투여할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, IL-4 및 IL-13에 대한 항체의 양이 대상체로부터 수득된 혈청 샘플에서 검출 가능하지 않은 경우, 치료될 대상체에게 상기 기재된 바와 같은 치료 유효량의 조성물을 추가로 투여할 수 있다.
실시예
RNA 구성
IL-4(전장 또는 이의 에피토프), 스페이서 및 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 RNA 분자에 상응하는, 본 발명에 따른 작제물이 도 1 및 2와 표 4 및 5에 제시되어 있다.
[표 4]
IL-4 전장 사이토카인을 암호화하는 RNA 작제물
FL: 전장
[표 5]
IL-4 에피토프를 암호화하는 RNA 작제물
EP: 에피토프; EPX: X는 에피토프의 수를 나타낸다; FL: 전장
IL-13(전장 또는 이의 에피토프), 스페이서 및 적어도 하나의 T 세포 에피토프를 암호화하는 RNA 분자에 상응하는, 본 발명에 따른 작제물이 도 3 및 4와 표 6 및 7에 제시되어 있다.
[표 6]
IL-13 전장 사이토카인을 암호화하는 RNA 작제물
FL: 전장
[표 7]
IL-13 에피토프를 암호화하는 RNA 작제물
EP: 에피토프; EPX: X는 에피토프의 수를 나타낸다; FL: 전장
실시예 1
물질 및 방법
마우스
IL4RA/IL13/IL4 인간화된 마우스 주(hIL-4/hIL-13KI; hIL-4RαKI) 및 암컷 BALB/cJRj 마우스를 하기 실험에 사용하였다(Conde et al., 2021).
IL-4 및 IL-13에 의한 비강 내 시험접종.
hIL-4/hIL-13KI; hIL-4RαKI 마우스를 IL-4 또는 IL-13을 암호화하는 서열, 또는 대조용으로서 PBS를 포함하는, 본 발명의 mRNA 작제물에 노출시켰다. 희생 후, BAL 호산구 수치 분석을 수행하였다.
마우스 및 인간 IL-4 및 IL-13, 및 T 세포 에피토프에 대한 항체의 정량화.
본 발명의 mRNA 백신의 면역원성을 ELISA 시스템을 사용하여, 백신접종 후 다양한 시점에서 수집된 혈청에서 마우스 IL-4, 인간 IL-4, 마우스 IL-13, 인간 IL-13 및 T 세포 에피토프(들)에 대한 항체를 평가함으로써 평가하였다.
백신접종된 마우스의 혈청에서 IL-4 및 IL-13에 대한 중화 능력 평가.
항-마우스 IL-4, 항-마우스 IL-13, 항-인간 IL-4 및 항-인간 IL-13 항체의 중화 능력을 예를 들어 CTLL-2 세포 증식 분석(ECACC, ref. 93042610, 배치 번호: 12K006.) 또는 HEK-Blue IL-4/IL-13 리포터 유전자 세포주 생물분석(InvivoGen, hkb-il413, 배치 번호: X14-37-01)(제조사의 지침에 따라 조정됨)을 사용하여 평가하였다.
실시예 2
물질 및 방법
mRNA의 시험관내 기능성
LNP에 캡슐화된 쥐 IL4(mu-IL4), CRM 또는 융합 단백질 muIL4-GP-CRM, muIL4-GP-TpD 또는 muIL4-GP-N19를 암호화하는 mRNA 3 ㎍을 OptiMEM 무 혈청 배지에 희석하고 완전 배지 중의 6X105 HEK293 세포에 첨가하였다. 밤새 배양 후, 세포를 수확하고 고정시키고 Inside 염색 키트(Miltenyi)를 사용하여 투과화시켰다. muIL4 및 CRM197의 세포내 발현을, 항-마우스 IgG1-APC 접합된 것에 의해 검출된 단클론 항-마우스 IL-4 PE-접합된(클론 BVD4-1D11) 및 항-디프테리아 독소 IgG1(클론 8G1)로 세포를 염색하여 평가하였다. 발현을 유세포 분석법으로 평가하였다.
형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서의 muIL4의 시험관내 활성.
본 발명의 mRNA로 형질감염된 HEK293 세포의 상등액을 형질감염 후 24시간째에 수집하고, muIL4 증식 활성을 CTLL-2 세포 분석을 사용하여 평가하였다. 간략하게, CTLL-2 세포를 10 ng/㎖의 인간 IL-2 존재 하에 완전 RPMI-1640 배지에서 증식시켰다. 활성 생물분석을 위해, 인간 IL-2를 상등액에 존재하는 잠재적인 mu-IL4로 대체하였다. 따라서 잠재적인 mu-IL4는 CTLL-2 성장을 유도한다.
상등액 샘플을 선택된 희석비로 첨가하고 배양 플레이트에서 RPMI-1640 배지 + FBS[10%(v/v)]에 2배 연속 희석하였다. Mu-IL4 단백질을 10 ng/㎖에서 시작하는 양성 대조용 표준 곡선으로 사용하였다. 이어서 20,000개의 CTLL-2 세포를 모든 웰에 첨가하였다. 48시간 배양한 후, 기질 40 ㎕를 첨가하여 MTS/PMS 분석을 통해 세포 생존율을 정량화하였다. 광학 밀도(OD)를 490 ㎚에서 4시간 배양 후 판독하였다.
LNP/mRNA의 근육내 주사 후 muIL4에 대한 중화 항체의 생체내 생성.
5주령 암컷 BALB/c ByJ 마우스를 Janviers 연구소(Saint Berthevin, France)로부터 수득하였다. 첫 번째 면역화 7일 전에 투여-전 채혈을 수행하였다. 0일, 7일 및 28일차에 muIL4, CRM 또는 융합 단백질 muIL4-GP-TpD, muIL4-GP-N19 및 muIL4-GP-CRM을 암호화하는 10 ㎍의 mRNA를 함유하는 50 ㎕의 LNP를 동물에게 근육내(IM) 경로로 주사하였다. 혈액을 21일, 41일, 62일 및 80일차에 수집하였다. muIL-4에 대한 중화 능력을 CTLL-2 세포에 대해 수행된 생물분석 시험을 사용하여 평가하였다.
간략하게, 세포를 인간 IL 2의 존재 하에서 증식시키고, 중화 생물분석을 위해 인간 IL 2를 mu-IL4로 대체하였다. 따라서, 면역화 후에 유도된 잠재적인 항-muIL-4 중화 항체는 CTLL-2 성장을 방지할 것이다.
혈청 샘플을 1/200 최종 희석비로 첨가하고, 양성 대조용 다클론 항-mu-IL4 항체(AF-404-NA, Biotechne)를 1 ㎍/㎖의 최종 농도로 첨가하였다. 모든 샘플을 RPMI-1640 배지 + FBS[10%(v/v)]에서 2배 연속 희석하였다. Mu-IL4를 혈청 샘플 및 대조군에 2 ng/㎖로 첨가하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 배양하였다. 이어서, 20,000개의 CTLL-2 세포를 사전-배양된 샘플(muIL-4를 함유한 혈청 또는 양성 대조군)에 첨가하였다. 48시간 배양 후, 세포 생존율을 MTS/PMS 분석으로 정량화하였다.
NC50 결과를 mu-IL4 활성(최대값은 CTLL-2 세포와 함께 2 ng/㎖의 mu-IL4 배양에 의해 정의된다)의 50%를 중화하는 혈청 희석 인자(dil-1)로 나타내었다. NC50을 50%의 mu-IL4 활성을 생성시키는 혈청 희석을 보간하여 결정한다.
작제물
5개의 상이한 mRNA 작제물을 사용하였다. 쥐 IL-4를 3개의 상이한 T 세포 에피토프: TpD(서열번호 144), N19(서열번호 145) 및 CRM197(서열번호 146)에 커플링하였다. RNA-IL4(서열번호 147) 및 RNA-CRM(서열번호 148)은 둘 다 대조군으로 사용되었다.
서열번호 147
서열번호 148
결과
형질감염된 HEK293 세포에서 muIL4 및 CRM의 시험관내 단백질 발현
muIL4 발현이, mRNA-CRM이 단독 형질감염된 조건(사선 상자)을 제외하고, 모든 시험 조건에서 관찰되었으며, 이때 IL4를 발현하는 세포의 백분율은 80%를 초과하였다(도 5A). CRM 발현이 CRM 및 muIL4-CRM 조건에서 관찰되었다(도 5B). HEK293 세포에서 muIL4의 MFI는 muIL4, muIL4-TpD 및 muIL4-N19와 비교하여 muIL4-CRM(검은색 상자)의 경우 2 내지 4배 더 높았다(도 5C).
형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서의 muIL4의 시험관내 활성
도 6에 나타낸 바와 같이, mRNA-IL4로 형질감염된 세포에서 가장 높은 mu-IL-4 활성이 관찰되었다. mRNA-muIL4-N19, mRNA-muIL4-CRM, mRNA-muIL4-TpD로 형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서 측정된 muIL4 활성은 더 낮았다. 마지막으로, mRNA-CRM으로 형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서는 mu-IL4 활성이 검출되지 않았다. 웨스턴 블롯에 의해 관찰된 바와 같이(데이터는 표시되지 않음), 실질적으로 동일한 양의 mIL4 단백질을 상이한 조건(mRNA-CRM 조건 제외)에서 형질감염된 HEK293 세포의 상등액에서 정량화하였다. 따라서, 도 6에서 관찰된 muIL4 활성의 시험관내 차이는 muIL4 단백질 양의 차이로 인한 것이 아니라, 대신 고유의 쥐 IL4와 비교하여 본 발명의 RNA 작제물에 의해 수득된 단백질의 더 낮은 활성으로 인한 것이다.
BALB/c 마우스에서 LNP/mRNA를 근육내 주사한 후 혈청 샘플에서 muIL4에 대한 중화 항체 분석
0일, 7일 및 28일차에 5주령 암컷 BALB/c ByJ 마우스에 muIL4, CRM 또는 융합 단백질 muIL4-GP-TpD, muIL4-GP-N19 및 muIL4-GP-CRM을 암호화하는 mRNA 10 ㎍을 함유하는 LNP 50 ㎕를 근육내(IM) 경로로 주사하였다. 21, 41, 62, 80일차 및 연구 종료일(104일차)에 혈액을 수집하고(도 7) 이들 마우스의 혈청에서 중화 항체의 존재를 평가하였다.
LNP 내 muIL4-TpD, muIL4-N19 및 muIL4-CRM을 암호화하는 10 ㎍의 mRNA로 3회 면역화된 마우스에서 muIL4에 대한 중화 항체가 41일차부터 검출되었다. 41일차에 7/9, 6/10 및 8/10 반응자가, 각각 LNP 내 muIL4-TpD, muIL4-N19 및 muIL4-CRM을 암호화하는 mRNA가 투여된 그룹에서 검출되었다(NC50 >200 dil-1). 62일차에, muIL4-CRM 그룹에서 한 마리의 마우스가 더 양성으로 나타났지만 중앙값은 모든 그룹에서 감소하기 시작하였는데, 이는 아마도 41일쯤에 반응의 최고점에 도달하였음을 나타낸다. 높은 중화 능력 마우스를 제외하고, NC50은 62일 내지 80일 사이에 감소하지 않았으며, 중앙값은 62일 내지 80일 사이에 대략 동일하였다: muIL4-CRM 그룹의 경우 726 내지 775, muIL4-N19 그룹의 경우 302 내지 266, muIL4-TpD 그룹의 경우 481 내지 605. muIL4 중화 항체는 언제든 muIL4 및 CRM 그룹에서 검출되지 않았다(도 8 및 표 8).
[표 8]
21일, 41일, 62일 및 80일차에 CRM, muIL4, muIL4-CRM, muIL4-N19 및 muIL4-CRM 그룹에 대한 muIL4 중화 능력의 중앙 NC50(Dil-1).
mRNA-CRM, mRNA-muIL4-CRM 및 mRNA-muIL4-N19를 캡슐화한 LNP가 주사된 모든 동물은 80일차에 살아 있었다(100%). LNP 내 mRNA-muIL4-TpD를 수용한 마우스의 생존율은 한 마리의 고립된 마우스의 사망으로 인해 90%로 떨어진다. 최종적으로, 80일차에 LNP 내 mRNA-muIL4를 수용한 그룹에서는 생존율이 20%에 불과한 것으로 관찰되었으며, 두 라운드의 면역화(D0 및 D7) 후에 마우스의 60%가 사망하였다(도 9). 이 결과는 본 발명에 기재된 바와 같은 mRNA 작제물에서는 관찰되지 않았던 mRNA-muIL4의 독성을 나타낸다.
Claims (15)
- 적어도 하나의 RNA 분자를 포함하는 조성물로서, 여기서 적어도 하나의 RNA 분자가
- 적어도 하나의 사이토카인, 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프(epitope)로서, 바람직하게는 여기서 적어도 하나의 사이토카인이 인터류킨-4(IL-4) 및/또는 인터류킨-13(IL-13)인, 사이토카인, 또는 이의 단편 또는 에피토프,
- 적어도 하나의 T 세포 에피토프, 및
- 선택적으로 적어도 하나의 스페이서(spacer)
를 포함하는 적어도 하나의 아미노산 서열을 암호화(encoding)하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
적어도 하나의 사이토카인이 IL-4인, 조성물. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
IL-4 단편이 서열번호 7-10, 13-16, 94-97 및 109-112로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 조성물. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
적어도 하나의 사이토카인이 IL-13인, 조성물. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
IL-13 단편이 서열번호 25-28, 35-38, 119-122 및 129-132로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 조성물. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
적어도 하나의 RNA 분자가 IL-4 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프, 및 IL-13 또는 이의 적어도 하나의 단편 또는 에피토프를 암호화하는, 조성물. - 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
적어도 하나의 T 세포 에피토프가 CRM197, 디프테리아(diphteria)와 파상풍 에피토프의 조합(TpD), 파상풍 독소의 에피토프(TT), 보편적인 CD4 폴리에피토프, 이의 변이체 및 단편으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 조성물. - 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
적어도 하나의 스페이서가 PMGLP, 카텝신 절단 부위, 아미노산 더블릿(doublet), GP, GPGPG, GGSGGGGSGG, (GGGGS)n(여기서 n의 범위는 1 내지 4이다), LG, ASG, KG 및 RR로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 조성물. - 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
적어도 하나의 RNA 분자가 바람직하게는 나노입자, 리포솜 또는 바이러스-유사 입자(virus-like particle) 내에 캡슐화(encapsulating)되는, 조성물. - 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 조성물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 조성물 및 선택적으로 적어도 하나의 애주번트(adjuvant)를 포함하는 백신 조성물.
- 약제로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 조성물.
- 염증성 장애를 치료하는데 사용하기 위한, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 조성물, 제10항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 약학 조성물 또는 백신 조성물로서, 바람직하게는 여기서 상기 장애가 이상(aberrant) IL-4 및/또는 IL-13 발현 또는 활성과 연관되는, 조성물, 약학 조성물 또는 백신 조성물.
- 제13항에 있어서,
염증성 장애가 천식(알레르기성 또는 비-알레르기성), 알레르기 상태(예를 들어, 식품 알레르기, 독 알레르기, 동물에 대한 알레르기, 약물 알레르기, 아나필락시스(anaphylaxis), 고 IgE 증후군(hyper IgE syndrome), 알레르기성 비염(allergic rhinitis), 알레르기성 결막염(allergic conjunctivitis) 및 알레르기성 장위염(allergic enterogastritis)), 아토피성 질환(atopic disorder)(예를 들어, 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 두드러기(urticaria)(만성 특발성 두드러기(chronic idiopathic urticaria) 및 만성 자발성 두드러기(chronic spontaneous urticaria) 포함), 습진(eczema)), 수포성 유천포창(bullous pemphigoid), 호흡기 질환(respiratory disorder)(예를 들어, 알레르기성 및 비알레르기성 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환(chronic obstructive pulmonary disease)(COPD)), 비용종증(nasal polyposis) 및 기도 염증을 수반하는 기타 상태(예를 들어, 호산구 증가증(eosinophilia), 섬유증(fibrosis), 및 낭성 섬유증(cystic fibrosis) 및 폐 섬유증(pulmonary fibrosis)을 포함한 과도한 점액 생성, 전신 경화증(systemic sclerosis)(SSc)); 염증성 및/또는 자가면역 장애 또는 상태, 위장 장애 또는 상태(예를 들어, 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease)(IBD) 및 호산구성 식도염(eosinophilic esophagitis)(EE), 및 호산구-매개된 위장병(eosinophilic-mediated gastrointestinal disease), 궤양성 대장염(ulcerative colitis) 및 크론병(Crohn's disease)); 전신 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus), 간 장애 또는 상태(예를 들어, 간경변(cirrhosis) 및 간세포 암종(hepatocellular carcinoma)), 피부경화증(scleroderma); 섬유증성 질환 또는 장애(fibrotic disease or disorder)(예를 들어, 간 섬유증(예를 들어 B형 및/또는 C형 간염 바이러스에 의해 유발된 섬유증(fibrosis caused by a hepatitis B and/or C virus))), 피부경화증(scleroderma); 고형 종양 또는 암, 예를 들어 백혈병(leukemia)(예를 들어, B 세포 만성 림프구성 백혈병(B cell chronic lymphocytic leukaemia)), 교모세포종(glioblastoma), 림프종(lymphoma)(예를 들어, 호지킨 림프종(Hodgkin's lymphoma)) 및 비만세포증(mastocytosis)으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 조성물, 약학 조성물 또는 백신. - 제13항 또는 제14항에 있어서,
염증성 장애가 천식(예를 들어, 알레르기성 천식), 아토피성 피부염, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 폐 섬유증, 음식 알레르기, 비용종증 및 호산구성 식도염으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되고, 바람직하게는 여기서 상기 염증성 장애가 알레르기, 천식 또는 아토피성 피부염인, 조성물, 약학 조성물 또는 백신.
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