KR20240000170A - Composition for regulating Biofilm formation of Cutibacterium sp. comprising Sorbitan caprylate - Google Patents

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Abstract

본 발명은 솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주 (Cutibacterium sp.)의 바이오필름 형성 조절용 조성물, 마이크로바이옴 밸런스 유지용 화장료 조성물 및의약외품 조성물에 관한 것으로서,
솔비탄 카프릴레이트을 유효성분으로 포함하는 조성물이 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성을 조절함으로써, 피부 마이크로바이옴 밸런스를 유지함에 따라 피부에 안전하면서도 피부 상태 개선 효과가 우수한 화장료 조성물, 의약외품 조성물로 이용될 수 있다.
The present invention relates to a composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium sp., a cosmetic composition for maintaining microbiome balance, and a quasi-drug composition containing sorbitan caprylate as an active ingredient,
A composition containing sorbitan caprylate as an active ingredient regulates the biofilm formation of Cutibacterium strains, thereby maintaining the skin microbiome balance, making it safe for the skin and used as a cosmetic composition and quasi-drug composition with excellent skin condition improvement effects. It can be.

Description

솔비탄 카프릴레이트를 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 조성물 {Composition for regulating Biofilm formation of Cutibacterium sp. comprising Sorbitan caprylate}Composition for regulating biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate {Composition for regulating Biofilm formation of Cutibacterium sp. comprising Sorbitan caprylate}

본 발명은 솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주 (Cutibacterium sp.)의 바이오필름 형성 조절용 조성물, 화장료 조성물, 의약외품 조성물 및 큐티박테리움 균주의 마이크로바이옴 밸런스 유지용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention provides a composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium sp. containing sorbitan caprylate as an active ingredient, a cosmetic composition, a quasi-drug composition, and maintaining the microbiome balance of Cutibacterium strains. It relates to a cosmetic composition for use.

미생물의 바이오필름은 환경 내에 적응하기 위한 그들만의 생활양식이다. 미생물에 의하여 형성된 바이오필름은 다양한 표면에 강하게 부착되어 있어 제거하기가 힘들고, 부유생활을 할 때에 비하여 가혹한 환경(예를 들어, pH, 온도, 영양분의 고갈 등)과 항생제들의 공격 등에 대하여 훨씬 강한 저항력을 가지기 때문에 멸균과 소독이 힘들다.Microorganisms' biofilms are their own way of life to adapt to the environment. Biofilms formed by microorganisms are strongly attached to various surfaces and are difficult to remove, and have much stronger resistance to harsh environments (e.g. pH, temperature, depletion of nutrients, etc.) and antibiotic attacks than when living in a floating environment. Because it has sterilization and disinfection, it is difficult.

또한, 미생물은 이러한 생물막의 형성 결과로 다양한 이득을 얻을 수 있기 때문에, 대부분의 자연 및 산업 환경에서 생물막 형태로 존재하게 된다. 생물막을 형성하는 미생물들은 EPS (extracellular polymeric substance; Carbohydrate, Protein, and Nucleic acid)라 불리는 개개의 미생물이 외부로 분비한 고분자 물질로 덮여 표면에 고착되어 존재한다. 따라서, 바이오필름은 세균, 효모, 곰팡이 등 미생물이 특정조건에서 인체 (예를 들어, 피부, 구강, 치아 등)나 설비 (예를 들어, 배관, 저장탱크 등) 등의 표면에 필름처럼 부착되어 있는 미생물의 집합체라 할 수 있으며, 그 자체가 미생물의 서식처로도 제공되어 균의 서식을 가속화하기도 한다. 이러한 바이오필름의 미생물은 산업계 및 의학계 전반에서 심각한 문제를 일으킬 수 있으므로, 바이오필름 제거 또는 형성 억제용 조성물 및 바이오필름 형성을 억제하거나 제거하는 방법에 대한 연구가 요구되는 상황이다.Additionally, because microorganisms can obtain various benefits as a result of the formation of such biofilms, they exist in the form of biofilms in most natural and industrial environments. Microorganisms that form biofilms exist fixed to the surface, covered with a polymer substance secreted externally by individual microorganisms called EPS (extracellular polymeric substance; Carbohydrate, Protein, and Nucleic acid). Therefore, biofilm is a film in which microorganisms such as bacteria, yeast, and mold attach to the surface of the human body (e.g., skin, oral cavity, teeth, etc.) or facilities (e.g., pipes, storage tanks, etc.) under certain conditions. It can be said to be a collection of microorganisms, and it itself serves as a habitat for microorganisms, accelerating the growth of bacteria. Since these microorganisms in biofilms can cause serious problems throughout industry and medicine, research on compositions for removing or inhibiting the formation of biofilms and methods for inhibiting or removing biofilm formation is required.

특히, 다당류의 수소결합으로 밀집되어 있는 바이오필름 외부 매트릭스는 항균제 등이 내부로 침투하는 것을 막아 항균제의 작용을 방해한다. 따라서, 바이오필름 제거를 위해 강산/강염기 처리 또는 물리적으로 직접 긁어 내는 방법 등을 필요로 한다. 하지만, 피부나 두피와 같은 인체 바이오필름은 위의 제거 방법을 사용하지 못한다. 또한, 생활에서 사용하는 제품은 안전성 등의 문제로 바이오필름을 제거할 수 있는 강한 화학 약품을 사용하지 못한다.In particular, the outer matrix of the biofilm, which is densely packed with hydrogen bonds of polysaccharides, prevents antibacterial agents from penetrating into the inside, thereby hindering the action of antibacterial agents. Therefore, to remove the biofilm, strong acid/strong base treatment or direct physical scraping is required. However, the above removal method cannot be used for human body biofilms such as skin or scalp. In addition, products used in daily life cannot use strong chemicals that can remove biofilm due to safety issues.

이에 따라서 바이오필름 제거에 있어서 인체에 보다 안전하고 효과적인 방법을 개발하기 위하여 많은 연구가 진행되고 있다.Accordingly, much research is being conducted to develop methods that are safer and more effective for the human body in removing biofilm.

큐티박테리움 아크네스 (Cutibacterium acnes, C.acnes)는 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium acnes)라고도 불리며, 피부, 결막, 외이(外耳), 인두부, 여성 비뇨기 등에 상재하는 균이다. 얼굴 모공피지선의 80% 이상 비율로 존재하는 피부 우점균인 동시에 (상리)공생균이고 (Sci Rep. 2016; 6: 36062, Br J Dermatol. 2008 Mar. 158(3):442-455), 심상성 여드름 (acne vulgaris)을 일으키는 원인이기도 하다.Cutibacterium acnes (C.acnes), also called Propionibacterium acnes, is a bacteria that resides in the skin, conjunctiva, external ear, pharynx, and female urinary tract. It is a skin-dominant bacteria that exists in more than 80% of facial pores and sebaceous glands, and is also a (mutual) commensal bacteria (Sci Rep. 2016; 6: 36062, Br J Dermatol. 2008 Mar. 158(3):442-455). It is also a cause of acne vulgaris.

여드름 소구 제품에서 사용하고 있는 살리실산이나 벤조일퍼옥사이드, 테트라사이클린 같은 여드름 기능성 소재는 공생균과 유익균도 제거하여 마이크로바이옴 군집붕괴/장내 세균 불균형 (dysbiosis) 우려가 있고, 항생제 내성 문제를 야기할 수 있다.Acne functional materials such as salicylic acid, benzoyl peroxide, and tetracycline used in acne treatment products also remove symbiotic and beneficial bacteria, raising the risk of microbiome colony collapse/intestinal dysbiosis and causing antibiotic resistance problems. there is.

이러한 배경하에, 본 발명자들은 유해균을 선택적으로 억제하고, 여드름과 관계성이 없는 균주는 유지함으로써 마이크로바이옴 밸런스를 유지할 수 있는 인체에 보다 안전하고 효과적인 본 발명을 완성하였다. Against this background, the present inventors have completed the present invention, which is safer and more effective for the human body and can maintain microbiome balance by selectively suppressing harmful bacteria and maintaining strains not related to acne.

본 발명의 하나의 목적은 솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주 (Cutibacterium sp.)의 바이오필름 형성 조절용 조성물을 제공하는 것이다. One object of the present invention is to provide a composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium sp. containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

본 발명의 하나의 목적은 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide a cosmetic composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

본 발명의 하나의 목적은 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

본 발명의 다른 하나의 목적은 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 마이크로바이옴 밸런스 유지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition for maintaining the microbiome balance of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

이하 본 발명 내용에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시한 일 양태의 설명 및 실시 형태는 공통된 사항에 대하여 다른 양태의 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 또한, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 더불어, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다. Hereinafter, the contents of the present invention will be described in detail as follows. Meanwhile, the description and embodiment of one aspect disclosed in the present invention may also be applied to the description and embodiment of other aspects with respect to common matters. Additionally, all combinations of the various elements disclosed in the present invention fall within the scope of the present invention. In addition, the scope of the present invention cannot be considered limited by the specific description described below.

또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 발명에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도한다.Additionally, it is intended that those skilled in the art may use no more than routine experimentation to include many equivalents to the specific embodiments of the invention described herein that are encompassed by the invention.

상기 목적을 달성하기 위한 하나의 양태는 솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주 (Cutibacterium sp.)의 바이오필름 형성 조절용 조성물을 제공한다. One aspect for achieving the above object provides a composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium sp. containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

본 발명의 용어, “솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)”는 솔비톨과 카프릴릭애시드의 에스터 결합물이다. 물에 오일이 순산된 형태인 수중유(Oil in Water) 형태의 유탁액을 만드는데 사용된다. 또한, 솔비탄 카프릴레이트는 방부를 도우므로, 방부제 농도나 용량을 낮추는 역할을 하기도 한다. The term of the present invention, “Sorbitan caprylate”, is an ester combination of sorbitol and caprylic acid. It is used to create an emulsion in the form of oil in water, which is a form of pure dispersion of oil in water. In addition, sorbitan caprylate helps with preservatives and thus plays a role in lowering the concentration or dosage of preservatives.

본 발명에서 솔비탄 카프릴레이트는 큐티박테리움 아크네스의 바이오필름을 균주에 따라 선택적으로 조절할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. In the present invention, sorbitan caprylate can selectively control the biofilm of Cutibacterium acnes depending on the strain, but is not limited thereto.

본 발명의 용어, “큐티박테리움 (Cutibacterium sp.)”은 그람 양성, 무산소성의 불규칙한 모양의 세균 속이다. 본 발명의 “큐티박테리움 아크네스 (Cutibacterium acnes, C.acnes)”는 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium acnes)로 불렸으며, 혐기성 혹은 내산소성(aerotolerant)이며 운동성이 없고 탄수화물 발효가 가능한 균이다. 모낭의 피지선에서 분비되는 지방산을 분해하며 살고, 일반적으로 젊은이들의 여드름의 원인이 되거나 기회감염균으로 작용한다. 특히, 유전자 타입에 따라 피부에서 유익균과 유해균으로 구별되므로 필요에 따라 선택적으로 조절할 필요가 있다.The term of the present invention, “Cutibacterium sp.”, is a genus of Gram-positive, anaerobic, irregularly shaped bacteria. “Cutibacterium acnes (C.acnes)” of the present invention, also called Propionibacterium acnes, is an anaerobic or aerotolerant bacterium that is non-motile and capable of carbohydrate fermentation. . It lives by breaking down fatty acids secreted by the sebaceous glands of hair follicles, and generally causes acne in young people or acts as an opportunistic infection. In particular, since beneficial and harmful bacteria are distinguished on the skin depending on the genetic type, it is necessary to selectively control them as needed.

본 발명의 용어, “RT (ribotype)”은 균주의 16S 리보좀 서브유닛의 핵산 서열(16S rDNA)을 의미하며, C.acnes는 유전자 타입(ribotype)에 따라 여러 균주 (strain)으로 나뉜다. 그 예로, RT1, RT2, RT3, RT4, RT5, RT7, RT8, RT9 또는 RT10일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 일 구현예에서는 건강 피부 대비 여드름 피부에서 발견된 비율에 따라, 유전자 타입을 기준으로 C.acnes를 상재균, 유익균, 유해균으로 구분하였다 (Am J Clin Dermatol. 2019 Jun; 20(3): 335-344, J Invest Dermatol. 2013 Sep; 133(9): 2152-2160). The term “RT (ribotype)” of the present invention refers to the nucleic acid sequence (16S rDNA) of the 16S ribosomal subunit of the strain, and C. acnes is divided into several strains depending on the gene type (ribotype). For example, it may be RT1, RT2, RT3, RT4, RT5, RT7, RT8, RT9 or RT10, but is not limited thereto. In one embodiment of the present invention, C.acnes was classified into common bacteria, beneficial bacteria, and harmful bacteria based on gene type, depending on the ratio found in acne skin compared to healthy skin (Am J Clin Dermatol. 2019 Jun; 20(3) : 335-344, J Invest Dermatol. 2013 Sep; 133(9): 2152-2160).

본 발명의 용어, “상재균 (resident flora)”은 인체에 존재하는 미생물(세균) 가운데 다수의 사람들이 공유하며 병원성을 나타내지 않는 것으로, 기본적으로 사람의 건강에 영향을 주지 않고 공생관계에 있는 것을 가리키지만, 면역력 저하로 인한 기회감염을 유발하기도 한다. The term “resident flora” of the present invention refers to microorganisms (bacteria) present in the human body that are shared by many people and do not exhibit pathogenicity. Basically, they do not affect human health and are in a symbiotic relationship. However, it can also cause opportunistic infections due to decreased immunity.

“우점균”은 일정한 군집 내에서 가장 수가 많거나 넓은 면적을 차지하는 균으로서, 우점종이라고도 한다.“Dominant bacteria” are bacteria that are the most numerous or occupy the largest area within a certain community, and are also called dominant species.

“공생균”은 살아있는 동물, 식물 또는 미생물 숙주와 물리적으로 밀접한 관계를 유지하며, 숙주에 질병을 유발하지 않고 함께(공생)하는 미생물로서, 숙주와의 상호작용 종류에 따라 관련 미생물은 편리공생균(commensal)과 상리공생균(symbiont)으로 구분된다. “Symbiotic bacteria” are microorganisms that maintain a close physical relationship with a living animal, plant, or microbial host and coexist (symbiotically) without causing disease in the host. Depending on the type of interaction with the host, the related microorganism is a convenient symbiotic bacteria. It is divided into commensal and symbiont.

상기 상재균, 우점균 및 공생균은 큐티박테리움 아크네스의 RT1 (ribotype 1)의 유전자 타입을 갖는 균주 등 일 수 있으며, 구체적으로, 큐티박테리움 아크네스 ATCC6919일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 우점균 및 공생균은 상재균과 혼용되어 사용될 수 있다.The commensal bacteria, dominant bacteria, and symbiotic bacteria may be a strain having the RT1 (ribotype 1) genotype of Cutibacterium acnes, and specifically, may be Cutibacterium acnes ATCC6919, but are not limited thereto. In the present invention, dominant bacteria and commensal bacteria can be used interchangeably with commensal bacteria.

본 발명의 용어, “유익균”은 피부 재생 효과를 증진시킴으로써 피부 방어력을 증진시키고, 유해균의 세포막 파괴(사멸) 및 생장 억제를 통해 피부 재생을 증진시킨다. 또한, 염증인자의 발현을 억제시켜 피부 진정 및 피부 장벽 강화 효과를 나타내며, 피부 수분량 증진 및 수분 손실 억제 효과를 나타내고, 피부 pH를 약산성화하여 pH 환경을 개선함으로써, 피부 항상성을 유지하는 데 도움을 주는 균주를 의미한다. 상기 유익균은 예를 들어, 큐티박테리움 아크네스의 RT6 (ribotype 6)의 유전자 타입을 갖는 균주 등 일 수 있으며, 구체적으로, 큐티박테리움 아크네스 HL110PA3일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The term “beneficial bacteria” of the present invention enhances skin defense by enhancing the skin regeneration effect and promotes skin regeneration by destroying (killing) the cell membrane and inhibiting the growth of harmful bacteria. In addition, it suppresses the expression of inflammatory factors to soothe the skin and strengthen the skin barrier, increases skin moisture content and suppresses moisture loss, and helps maintain skin homeostasis by improving the pH environment by making the skin pH slightly acidic. The state refers to the strain. The beneficial bacteria may be, for example, a strain having the RT6 (ribotype 6) genotype of Cutibacterium acnes, and specifically, may be Cutibacterium acnes HL110PA3, but is not limited thereto.

본 발명의 용어, “유해균”은 피부에 염증 반응 또는 여드름 등을 일으키는 균을 의미한다. 상기 피부 유해균은 예를 들어, 큐티박테리움 아크네스의 RT4 (ribotype 4) 또는 RT5 (ribotype 5)의 유전자 타입을 갖는 균주 등 일 수 있으며, 구체적으로, 큐티박테리움 아크네스 HL053PA1 또는 HL043PA1일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. As used herein, the term “harmful bacteria” refers to bacteria that cause inflammatory reactions or acne on the skin. The skin harmful bacteria may be, for example, a strain having a genotype of RT4 (ribotype 4) or RT5 (ribotype 5) of Cutibacterium acnes, and specifically, it may be Cutibacterium acnes HL053PA1 or HL043PA1. , but is not limited to this.

본 발명에서 용어, “바이오필름 (Biofilm)”은 미생물에 의하여 형성된 막 모양 구조체로, 표면에 연결된 미생물 세포층으로 이루어진 잘 구성된 미생물계로 복잡한 구조적 기능적 특징을 가지고 있다. 생체막은 미생물의 대사 과정에 영향을 주는 물리 화학적 구배를 갖는다. 바이오필름을 형성하는 세포는 부유세포보다 항생제에 대한 저항성이 1000배 이상 높으며, 바이오필름 형성은 여러 질병의 발병(pathogenesis)에 중요한 역할을 한다고 보고된다.In the present invention, the term “biofilm” refers to a membrane-shaped structure formed by microorganisms. It is a well-organized microbial system consisting of a layer of microbial cells connected to the surface and has complex structural and functional characteristics. Biological membranes have physical and chemical gradients that influence microbial metabolic processes. Cells that form biofilms are more than 1,000 times more resistant to antibiotics than floating cells, and biofilm formation is reported to play an important role in the pathogenesis of various diseases.

본 발명에서 용어, “바이오필름 형성 조절”은 미생물의 바이오필름 생성을 유지, 강화, 억제 또는 제거함을 의미한다. 바이오필름은 균이 만드는 일종의 보호막으로서, 이러한 바이오필름 형성 조절은 균의 생존과 직접적인 관계가 있다. In the present invention, the term “controlling biofilm formation” means maintaining, enhancing, suppressing, or eliminating biofilm production by microorganisms. Biofilm is a type of protective film created by bacteria, and controlling biofilm formation is directly related to the survival of bacteria.

본 발명에서 용어, “선택적 조절”은 선택적으로 바이오필름을 유지, 강화 또는 억제하는 것을 의미한다. 다시 말해, 바이오필름을 선택적으로 조절한다는 것은 피부 유해균의 바이오필름을 선택적으로 억제하거나, 피부 유익균의 바이오필름을 선택적으로 유지 또는 강화함을 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 바이오필름 형성의 선택적 조절로, 피부에 유익한 유익균은 유지하면서, 유해균만을 선택적으로 억제하여 피부 개선 효과 및 마이크로바이옴 밸런스 유지할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. As used herein, the term “selective regulation” refers to selectively maintaining, enhancing or suppressing a biofilm. In other words, selectively controlling the biofilm may mean selectively suppressing the biofilm of skin harmful bacteria or selectively maintaining or strengthening the biofilm of skin beneficial bacteria, but is not limited to this. By selectively controlling biofilm formation, skin-improving effects and microbiome balance can be maintained by selectively suppressing only harmful bacteria while maintaining beneficial bacteria beneficial to the skin, but is not limited to this.

본 발명의 일 구현예에서는 솔비탄 카프릴레이트 적용 시, 상재균의 바이오필름 형성율은 대조군과 유사하였고, 유해균의 바이오필름 형성은 억제하는 반면, 유익균의 바이오필름 형성은 현저히 증가함을 확인하였다 (표 1).In one embodiment of the present invention, when applying sorbitan caprylate, the biofilm formation rate of resident bacteria was similar to the control group, and while the biofilm formation of harmful bacteria was suppressed, the biofilm formation of beneficial bacteria was confirmed to significantly increase. (Table 1).

또한, 피부 조성물에 일반적으로 많이 사용되는 방부 소재, 항균성을 갖는 소재 또는 계면활성제 (유화제) 적용 시, 유해균 및 유익균에 대한 선택적인 제어 효과가 없는 반면, 솔비탄 카플레이트는 상재균/유익균 대비 유해균에서만 바이오필름 형성을 억제하는 것을 확인하였는바 (표 2, 표 3, 표 4), 솔비탄 카프릴레이트는 유해균의 바이오필름만을 선택적으로 억제하는 조성물로서 우수함을 확인하였다.In addition, when applying preservative materials, materials with antibacterial properties, or surfactants (emulsifiers) commonly used in skin compositions, there is no selective control effect on harmful and beneficial bacteria, while Sorbitan Carplate has less harmful bacteria than common/beneficial bacteria. It was confirmed that it inhibits biofilm formation only (Table 2, Table 3, Table 4), and it was confirmed that sorbitan caprylate is excellent as a composition that selectively inhibits only the biofilm of harmful bacteria.

본 발명의 다른 하나의 양태는 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 화장료 조성물을 제공한다. Another aspect of the present invention provides a cosmetic composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

상기 “솔비탄 카프릴레이트”, “큐티박테리움”, “바이오필름”, “바이오필름 형성 조절”은 전술한 바와 같다. “Sorbitan caprylate”, “Cutibacterium”, “biofilm”, and “biofilm formation control” are the same as described above.

본 발명의 용어, “화장료 조성물”은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 향수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성되는 군에서 선택되는 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.As the term of the present invention, “cosmetic composition” refers to solution, external ointment, cream, foam, nutritional lotion, softening lotion, perfume, pack, softening water, emulsion, makeup base, essence, soap, liquid cleanser, bath additive, sunscreen cream, It may be a formulation selected from the group consisting of sun oils, suspensions, emulsions, pastes, gels, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansers, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, patches and sprays. , but is not limited to this.

본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The cosmetic composition of the present invention may further include one or more cosmetically acceptable carriers that are blended with general skin cosmetics, and common ingredients include, for example, oil, water, surfactant, moisturizer, lower alcohol, thickener, Chelating agents, pigments, preservatives, fragrances, etc. may be appropriately mixed, but are not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 상기 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.Cosmetically acceptable carriers included in the cosmetic composition of the present invention vary depending on the formulation of the cosmetic composition.

본 발명의 화장료 제형이 연고, 페이스트, 크림, 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the cosmetic formulation of the present invention is an ointment, paste, cream, or gel, the carrier ingredients include animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, and oxidation. Zinc, etc. may be used, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more types.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨데 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizing agent, or emulsifying agent may be used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, etc. can be used, especially cottonseed oil, peanut oil, corn germ oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan. may be used, but is not limited thereto. These may be used singly or two or more types may be used.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, the carrier components include water, liquid diluents such as ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, and miso. Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tracant may be used, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more types.

본 발명의 제형이 비누인 경우에는, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될수 있다.When the formulation of the present invention is a soap, alkali metal salts of fatty acids, fatty acid hemiester salts, fatty acid protein hydrolyzates, isethionates, lanolin derivatives, fatty alcohols, vegetable oils, glycerol, sugars, etc. may be used as carrier ingredients. However, it is not limited to this. These may be used alone or in combination of two or more types.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로 플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다. When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silcate, polyamide powder, or mixtures thereof may be used as the carrier ingredient, and especially in the case of a spray, chloro May contain propellants such as fluorohydrocarbons, propane/butane or dimethyl ether.

한편, 본 발명에 기재된 모든 성분이 바람직하게는 화장품 안전기준 등에 관한 규정 및 중국 '화장품 안전·기술 규범'에서 규정한 최대 사용치를 초과하지 않는 범위 내에서 본 발명의 조성물에 포함될 수 있다.Meanwhile, all ingredients described in the present invention may be included in the composition of the present invention within a range that does not exceed the maximum usage level specified in the Regulations on Cosmetic Safety Standards, etc. and the Chinese 'Cosmetic Safety and Technology Code'.

본 발명의 일 구현예에서는 화장료 조성물로서 적법한지 확인하기 위하여 항균 활성을 가지고 있는 방부제로서 화장품 원료인 펜틸렌 글라이콜 (pentylene glycol)을 혼합하여, 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜이 유해균의 바이오필름만을 선택적으로 억제함을 확인하였다 (표 5). 또한, 솔비탄 카프릴레이트 및 일반적인 화장수 원료를 혼합 시에도 상재균 (RT1)/유익균 대비 유해균에서만 바이오필름 형성을 억제함을 확인하였고 (표 7), 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜 및 일반적인 화장수 원료를 혼합 시에도 상재균 (RT1) 대비 유해균 (RT4, RT5)의 바이오필름 형성을 억제함을 확인하였는바, 화장료 조성물로서도 우수함을 확인하였다 (표 8).In one embodiment of the present invention, in order to confirm whether it is legal as a cosmetic composition, pentylene glycol, a cosmetic raw material, is mixed as a preservative with antibacterial activity, and sorbitan caprylate/pentylene glycol is mixed. It was confirmed that only the biofilm of harmful bacteria was selectively inhibited (Table 5). In addition, when mixing sorbitan caprylate and general cosmetic ingredients, it was confirmed that biofilm formation was suppressed only by harmful bacteria compared to common bacteria (RT1)/beneficial bacteria (Table 7), and sorbitan caprylate/pentylene glycol And it was confirmed that it suppresses the biofilm formation of harmful bacteria (RT4, RT5) compared to common bacteria (RT1) even when mixing common cosmetic ingredients, confirming that it is excellent as a cosmetic composition (Table 8).

본 발명의 다른 하나의 양태는 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 의약외품 조성물을 제공한다. Another aspect of the present invention provides a quasi-drug composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

상기 “솔비탄 카프릴레이트”, “큐티박테리움”, “바이오필름”, “바이오필름 형성 조절”은 전술한 바와 같다. “Sorbitan caprylate”, “Cutibacterium”, “biofilm”, and “biofilm formation control” are the same as described above.

본 발명의 용어 “의약외품”은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미한다. 예를 들어, 약사법에 따른 의약외품은 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람/동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.The term “quasi-drug” in the present invention refers to products that have a milder effect than pharmaceuticals among products used for the purpose of diagnosing, treating, improving, alleviating, treating, or preventing diseases in humans or animals. For example, quasi-drugs under the Pharmaceutical Affairs Act exclude products used for pharmaceutical purposes and include products used to treat or prevent diseases in humans and animals, and products that have a mild or no direct effect on the human body.

구체적으로, 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인위생용품을 포함할 수 있다. 보다 구체적으로 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 또는 연고제일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.Specifically, the quasi-drugs may include external skin preparations and personal hygiene products. More specifically, it may be a disinfectant cleaner, shower foam, garnish, wet tissue, detergent soap, hand wash, or ointment, but is not limited thereto.

본 발명에 따른 상기 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.When using the composition according to the present invention as a quasi-drug additive, the composition can be added as is or used together with other quasi-drugs or quasi-drug components, and can be used appropriately according to conventional methods. The mixing amount of the active ingredient can be appropriately determined depending on the purpose of use.

본 발명의 다른 하나의 양태는 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성 조절용 식품 조성물을 제공한다. Another aspect of the present invention provides a food composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium strains containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

상기 “솔비탄 카프릴레이트”, “큐티박테리움”, “바이오필름”, “바이오필름 형성 조절” 은 전술한 바와 같다. “Sorbitan caprylate”, “Cutibacterium”, “biofilm”, and “biofilm formation control” are as described above.

본 발명의 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합체, 건강기능식품 등의 통상적인 의미의 식품을 모두 포함하며, 본 발명의 솔비탄 카프릴레이트를 포함할 수 있는 한, 이에 제한되지 않는다. 또한 본 발명에 따른 솔비탄 카프릴레이트를 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있으며, 환제, 분말, 과립, 제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함할 수 있다.The term "food" in the present invention refers to meat, sausages, bread, chocolate, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea, drinks, alcoholic beverages, It includes all foods in the conventional sense, such as vitamin complexes and health functional foods, and is not limited thereto, as long as it can contain the sorbitan caprylate of the present invention. In addition, it can be manufactured by adding sorbitan caprylate according to the present invention to juices, teas, jellies, juices, etc. manufactured using sorbitan caprylate as a main ingredient, and may include forms such as pills, powders, granules, preparations, tablets, capsules, or liquids. You can.

상기 식품 조성물의 제조 시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 생약 추출물, 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 포함할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래한 추출물을 유효성분으로 하므로, 안정성 면에서 문제가 없기 때문에 혼합량에 큰 제한은 없다.When manufacturing the food composition, it can be manufactured by adding raw materials and ingredients commonly added in the art, and the types are not particularly limited. For example, like regular foods, it may include various herbal extracts, foodologically acceptable food additives, or natural carbohydrates as additional ingredients, but is not limited thereto. The mixing amount of the active ingredients can be appropriately determined depending on the purpose of use. Since the composition of the present invention uses extracts derived from natural products as the active ingredient, there is no problem in terms of stability, so there is no significant limitation on the mixing amount.

본 발명의 다른 하나의 양태는 솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 마이크로바이옴 밸런스 유지용 화장료 또는 의약외품 조성물을 제공한다. Another aspect of the present invention provides a cosmetic or quasi-drug composition for maintaining the microbiome balance of a Cutibacterium strain containing sorbitan caprylate as an active ingredient.

상기 “솔비탄 카프릴레이트”, “화장료 조성물”, “의약외품”은 전술한 바와 같다. “Sorbitan caprylate”, “cosmetic composition”, and “quasi-drug” are the same as described above.

본 발명의 용어, “마이크로바이옴 (Microbiome)”은 인체에 서식하는 미생물의 유전정보 전체나 미생물 자체를 일컫는 용어로서, 인간의 몸에 서식하며 공생하는 미생물인 마이크로바이오타 (Microbiota)와 게놈 (Genome) 의 합성어이다. The term “microbiome” of the present invention refers to the entire genetic information of microorganisms inhabiting the human body or the microorganisms themselves. Microbiota and genome (Microbiome), which are microorganisms that inhabit and coexist in the human body It is a compound word of Genome.

본 발명의 용어, “마이크로바이옴 밸런스”는 상기 마이크로바이옴 균형 유지를 의미하는 것으로서, 유익균 성장을 촉진하면서 유해균 성장을 억제하는 방식으로 마이크로바이옴의 균형을 유지할 수 있으며, 마이크로바이옴 밸런스가 무너질 경우 피부 장벽이 약해짐으로써 유해 미생물의 증식이 쉬워지게 된다. 구체적으로, 상기 마이크로바이옴 밸런스는 피부의 마이크로바이옴 밸런스일 수 있고, 또는 큐티박테리움 균주의 마이크로바이옴 밸런스 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The term “microbiome balance” of the present invention refers to maintaining the microbiome balance, and the balance of the microbiome can be maintained by promoting the growth of beneficial bacteria while suppressing the growth of harmful bacteria, and the microbiome balance is If it breaks down, the skin barrier becomes weak, making it easier for harmful microorganisms to proliferate. Specifically, the microbiome balance may be the microbiome balance of the skin, or the microbiome balance of the Cutibacterium strain, but is not limited thereto.

본 발명의 솔비탄 카프릴레이트는 유해균의 바이오필름은 억제하는 반면, 유익균의 바이오필름을 유지 또는 강화함으로써, 마이크로바이옴의 밸런스를 유지할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The sorbitan caprylate of the present invention can maintain the balance of the microbiome by maintaining or strengthening the biofilm of beneficial bacteria while suppressing the biofilm of harmful bacteria, but is not limited to this.

본 발명은 솔비탄 카프릴레이트을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 조성물은 큐티박테리움 균주의 바이오필름 형성을 조절함으로써, 피부 마이크로바이옴 밸런스를 유지함에 따라 피부에 안전하면서도 피부 상태 개선 효과가 우수한 화장료 조성물, 의약외품 조성물로 이용될 수 있다. The present invention relates to a composition containing sorbitan caprylate as an active ingredient. The composition maintains the skin microbiome balance by controlling the biofilm formation of Cutibacterium strains, thereby improving skin condition while being safe for the skin. It can be used as an excellent cosmetic composition and quasi-drug composition.

도 1은 솔비탄 카프릴레이트 0.05% 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 2은 솔비탄 카프릴레이트 0.1% 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 3은 방부 소재 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 4는 항균성을 가지는 소재 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 5는 솔비탄 카프릴레이트 및 펜틸렌 글라이콜 혼합원료 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 6은 솔비탄 카프릴레이트 및 펜틸렌 글라이콜 혼합원료가 적용된 화장수 처리시 큐티박테리움 아크네스 균주별 바이오필름 형성율을 비교한 그래프이다.
도 7은 솔비탄 카프릴레이트 및 펜틸렌 글라이콜 혼합원료가 적용된 화장수 처리시 큐티박테리움 아크네스 유해균의 바이오필름만 선택적으로 억제하는 효과를 나타낸 그래프이다.
Figure 1 is a graph comparing the biofilm formation rate for each Cutibacterium acnes strain when treated with 0.05% sorbitan caprylate.
Figure 2 is a graph comparing the biofilm formation rate for each Cutibacterium acnes strain when treated with 0.1% sorbitan caprylate.
Figure 3 is a graph comparing the biofilm formation rate for each Cutibacterium acnes strain when processing preservative materials.
Figure 4 is a graph comparing the biofilm formation rate for each Cutibacterium acnes strain when processing a material having antibacterial properties.
Figure 5 is a graph comparing the biofilm formation rate for each Cutibacterium acnes strain when processing mixed raw materials of sorbitan caprylate and pentylene glycol.
Figure 6 is a graph comparing the biofilm formation rate by Cutibacterium acnes strain when treating lotion with mixed raw materials of sorbitan caprylate and pentylene glycol.
Figure 7 is a graph showing the effect of selectively suppressing only the biofilm of harmful bacteria Cutibacterium acnes when treating lotion with mixed raw materials of sorbitan caprylate and pentylene glycol.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these examples are for illustrative purposes only and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실험예 1. 큐티박테리움 아크네스 (Cutibacterium acnes, C.acnes) 균주 선정 및 배양Experimental Example 1. Selection and cultivation of Cutibacterium acnes (C.acnes) strains

C.acnes를 유전자 타입 (ribotype, RT)을 기준으로 여드름 유발과 연관성이 있는 균주를 선정하였다. ATCC6919 (C.acnes RT1), HL053PA1 (C.acnes RT4), HL043PA1 (C.acnes RT5), HL110PA3 (C.acnes RT6)와 같은 4종을 준비하였으며, C.acnes 균주별 (RT별) 혐기성 조건에서 멸균(고압멸균기(Autoclave)에서 121℃ 2기압, 15분)시킨 RCM 액체배지에서 배양하였다.C. acnes strains that were associated with causing acne were selected based on their gene type (ribotype, RT). Four species were prepared: ATCC6919 (C.acnes RT1), HL053PA1 (C.acnes RT4), HL043PA1 (C.acnes RT5), and HL110PA3 (C.acnes RT6), and anaerobic conditions were performed for each C.acnes strain (by RT). It was cultured in RCM liquid medium that had been sterilized (121°C, 2 atmospheres, 15 minutes in an autoclave).

배양한 균주 4종의 OD값을 0.03으로 맞추기 위하여, 배양물이 0.03의 OD600이 되도록 균을 희석시켰으며, 24 well plate에 각각 0.9ml씩 분주(seeding)하였다. 시험군 시료 농도를 맞추어 24 well plate에 0.1ml씩 분주하였으며, 대조군은 시료 대신 멸균정제수(DW)를 0.1ml씩 분주하였고, 균주와 시료를 혼합하기 위하여, 진탕배양기 (shaking incubator)에서 300rpm 조건으로 30분 수행하였다. 60 내지 84시간 (약 72시간)동안 혐기 조건 밀폐용기에서 배양하였다. In order to set the OD value of the four cultured strains to 0.03, the bacteria were diluted so that the culture had an OD 600 of 0.03, and 0.9 ml of each was seeded into a 24 well plate. 0.1 ml each was dispensed into a 24 well plate according to the test group sample concentration. For the control group, 0.1 ml each of sterilized purified water (DW) was dispensed instead of the sample. To mix the strain and sample, the samples were incubated at 300 rpm in a shaking incubator. It was carried out for 30 minutes. Cultured in a closed container under anaerobic conditions for 60 to 84 hours (about 72 hours).

실험예 2. 시료 준비Experimental Example 2. Sample preparation

멸균정제수(water)에 시료(솔비탄 카프릴레이트)를 무게(g)로 계량하여 혼합하였고, voltexing 후 균질화하여 실험하였다. 제형 적용 실험시에는 멸균제형에 시료 혼합하였고, voltexing 후 균질화 하여 실험하였다. The sample (sorbitan caprylate) was weighed and mixed in sterilized purified water (water), voltexed, and homogenized for testing. During the formulation application experiment, the sample was mixed with the sterilized formulation, voltexed, and then homogenized.

실험예 3. 바이오필름 형성 억제 효과 검정Experimental Example 3. Test of biofilm formation inhibition effect

plate 바닥에 바이오필름이 형성되기에, plate에서 상층액 제거하고, 1회 멸균정제수로 세척(washing)하였다. 0.05% CV염료 (크리스탈 바이올렛, crystal violet) 1ml을 로딩하여 20분간 반응시켜 바이오필름을 염색하였다. 염료 제거 후 1회 멸균정제수로 세척하였고, CV 염료의 용출 목적으로 20% 아세트산 (acetic acid) 1ml을 로딩하여, 진탕배양기에서 300rpm 조건으로 30분 수행하였다. 분광광도계(Spectrophotometer)를 이용하여 545nm에서 흡광도(OD545)를 측정하여 CV염료의 용출량을 정량하였으며, 대조군과 실험군의 흡광도 값을 계산해 바이오필름 형성 억제를 평가/비교하였다. As a biofilm was formed on the bottom of the plate, the supernatant was removed from the plate and washed once with sterilized purified water. Biofilm was stained by loading 1ml of 0.05% CV dye (crystal violet) and reacting for 20 minutes. After removing the dye, it was washed once with sterilized purified water, and 1 ml of 20% acetic acid was loaded for the purpose of eluting the CV dye, and carried out in a shaking incubator at 300 rpm for 30 minutes. The elution amount of CV dye was quantified by measuring the absorbance (OD 545 ) at 545 nm using a spectrophotometer, and the absorbance values of the control and experimental groups were calculated to evaluate/compare the inhibition of biofilm formation.

실시예 1. 솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate) 소재 적용 시 바이오필름 형성 여부 확인Example 1. Confirmation of biofilm formation when applying sorbitan caprylate material

솔비탄 카프릴레이트 0.05%, 0.1% 적용 시, 바이오필름 형성 여부를 확인하기 위하여 CV염료를 이용하여 염색 후, 분광광도계를 이용하여 545nm에서 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 확인하였다 (표 1). When applying sorbitan caprylate 0.05% or 0.1%, the absorbance (OD 545 ) was measured at 545 nm using a spectrophotometer after staining with CV dye to check whether biofilm was formed, through which biofilm was formed. Inhibition was confirmed (Table 1).

상기 표 1에 나타나듯이, 솔비탄 카프릴레이트 0.05% 적용 시, C.acnes의 상재균(공생균)인 RT1에서는 대조군(바이오필름 형성율 100%)과 바이오필름 형성율이 유사하였고, 유해균인 RT5에서는 대조군보다 형성율이 약 2배 감소하여 바이오필름 형성이 억제되었으며, 유익균인 RT6에서는 대조군보다 형성율이 약 2배 증가하여 바이오필름 형성이 강화됨을 확인하였다 (도 1),As shown in Table 1, when 0.05% sorbitan caprylate was applied, the biofilm formation rate in RT1, a symbiotic bacteria of C. acnes, was similar to the control group (biofilm formation rate 100%), and the rate of biofilm formation was similar to that of the control group (100% biofilm formation rate). In RT5, the formation rate was reduced by about two times compared to the control group, suppressing biofilm formation, and in RT6, a beneficial bacteria, the formation rate was increased by about two times compared to the control group, confirming that biofilm formation was strengthened (Figure 1).

솔비탄 카프릴레이트 0.1% 적용 시, RT1에서는 대조군과 바이오필름 형성이 유사하였고, RT5에서는 대조군보다 약 10배 감소하여 바이오필름 형성이 억제되었으며, RT6에서는 대조군보다 바이오필름 형성이 유사함을 확인하였다 (도 2).When 0.1% sorbitan caprylate was applied, biofilm formation was similar to the control group at RT1, biofilm formation was suppressed by about 10 times less than the control group at RT5, and biofilm formation was confirmed to be similar to that of the control group at RT6. (Figure 2).

이를 통하여 솔비탄 카프릴레이트는 상재균의 바이오필름 형성에는 영향을 미치지 않으며, 유익균의 바이오필름을 강화/유지하는 동시에 유해균의 바이오필름 형성을 선택적으로 억제할 수 있음을 확인하였다. Through this, it was confirmed that sorbitan caprylate does not affect the biofilm formation of flora and fauna and can selectively inhibit the formation of biofilms of harmful bacteria while strengthening/maintaining the biofilm of beneficial bacteria.

실시예 2. 방부 소재, 항균성을 갖는 소재 또는 계면활성제 (유화제) 적용 시 바이오필름 형성 억제 비교Example 2. Comparison of inhibition of biofilm formation when applying preservative materials, antibacterial materials, or surfactants (emulsifiers)

실시예 2-1. 방부 소재 적용 시 바이오필름 형성 억제 비교Example 2-1. Comparison of inhibition of biofilm formation when applying preservative materials

피부 조성물에 많이 사용되는 원료 3종 글리세릴 카프릴레이트 (glyceryl caprylate), 옥탄다이올 (octanediol), 헥산디올 (hexanediol)을 비교군으로 선정하였고, 균주에 0.05% 시료를 적용하여 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였다 (표 2). Three types of raw materials commonly used in skin compositions, glyceryl caprylate, octanediol, and hexanediol, were selected as comparison groups, and 0.05% sample was applied to the strain to measure absorbance (OD 545 ). ) was measured, and the inhibition of biofilm formation was compared (Table 2).

상기 표 2에 나타나듯이, 비교군에서 유해균 (RT5)의 바이오필름 형성율이 대조군과 유사하고, 유익균 (RT6)의 바이오필름 형성율이 감소하거나 유사하였는바, 비교군은 유해균 및 유익균에 대한 선택적 제어 효과가 없음을 확인하였다. As shown in Table 2 above, the biofilm formation rate of harmful bacteria (RT5) in the comparison group was similar to the control group, and the biofilm formation rate of beneficial bacteria (RT6) was reduced or similar, and the comparison group was selective for harmful and beneficial bacteria. It was confirmed that there was no control effect.

반면, 시험군(솔비탄 카프릴레이트)에서는 RT5 바이오필름 형성율은 감소, RT6 바이오필름 형성율은 현저히 증가하였고, 특히 상재균 (RT1)/유익균 대비 유해균에서만 바이오필름 형성을 억제하였는바, 솔비탄 카프릴레이트의 선택적인 유해균의 바이오필름 형성 제어 효과가 우수함을 확인하였다 (도 3). On the other hand, in the test group (Sorbitan caprylate), the RT5 biofilm formation rate decreased and the RT6 biofilm formation rate significantly increased. In particular, biofilm formation was suppressed only in harmful bacteria compared to common bacteria (RT1)/beneficial bacteria. It was confirmed that tan caprylate has an excellent effect in selectively controlling biofilm formation of harmful bacteria (FIG. 3).

실시예 2-2. 항균성을 갖는 소재 적용 시 바이오필름 형성 억제 비교Example 2-2. Comparison of inhibition of biofilm formation when applying antibacterial materials

바이오필름의 형성을 제어하는 항균소재를 4종 항균소재(토타롤, totarol), 항균성 식물추출물(BHC-C, 황금 추출물, 락토바실러스 발효물, 감초뿌리 추출물 및 밀리타리스동충하초균사체 추출물 mixture), 금속 항균소재(Sepitonic M3, Zn/Cu), 항균성 유산균발효물(락토포린, 락토바실러스 발효여과물)을 선정하였고, 균주에 0.3% 시료를 적용하여 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였다 (표 3).The antibacterial materials that control the formation of biofilm include four types of antibacterial materials (totarol), antibacterial plant extracts (BHC-C, golden extract, Lactobacillus ferment, licorice root extract, and Militaris Cordyceps sinensis mycelium extract mixture), Metal antibacterial material (Sepitonic M3, Zn/Cu) and antibacterial lactic acid bacteria fermentation product (lactophorin, Lactobacillus fermentation filtrate) were selected, and 0.3% sample was applied to the strain to measure absorbance (OD 545) , through which bio Film formation inhibition was compared (Table 3).

표 3에 나타나듯이, 항균소재 (totarol)는 RT1, RT5, RT6 모두 대조군 대비 바이오필름 형성율이 낮았다. 항균성 식물추출물의 유해균(RT5)의 바이오필름 형성율에는 영향이 없었고, 유익균(RT6)의 바이오필름 형성율이 현저히 감소함을 확인하였으며, 금속 항균소재(Zn/Cu) 및 항균성 유산균발효물의 RT5와 RT6의 바이오필름 형성율이 대조군과 유사하였다. 따라서, 솔비탄 카프릴레이트와 달리, 기존에 항균성을 갖는 것으로 알려진 4종의 소재는 유해균에 대한 선택적인 바이오필름 형성 억제 활성을 갖지 않는 것을 확인하였다 (도 4). As shown in Table 3, the antibacterial material (totarol) had a lower biofilm formation rate compared to the control group in RT1, RT5, and RT6. It was confirmed that there was no effect on the biofilm formation rate of harmful bacteria (RT5) of the antibacterial plant extract, and that the biofilm formation rate of beneficial bacteria (RT6) was significantly reduced, and that the RT5 and The biofilm formation rate of RT6 was similar to that of the control group. Therefore, unlike sorbitan caprylate, it was confirmed that the four materials previously known to have antibacterial properties did not have selective biofilm formation inhibitory activity against harmful bacteria (FIG. 4).

실시예 2-3. 계면활성제 (유화제) 바이오필름 형성 억제 비교Example 2-3. Comparison of surfactant (emulsifier) inhibition of biofilm formation

피부 조성물에 사용되는 대표적인 계면활성제 (유화제) 4종을 솔비탄계 (Sorbitan Stearate), PEG계 (PEG-40 Hydrogenated Castor Oil), 폴리글리세릴계(Polyglyceryl-4 Caprylate), 레시틴계 (Hydrogenated Lecithin)를 비교군으로 선정하였고, 균주에 0.05% 시료를 적용하여 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였다 (표 4).Comparison of four representative surfactants (emulsifiers) used in skin compositions: Sorbitan Stearate, PEG-based (PEG-40 Hydrogenated Castor Oil), Polyglyceryl-4 Caprylate, and Hydrogenated Lecithin. Groups were selected, and 0.05% samples were applied to the strains to compare whether biofilm formation was inhibited (Table 4).

상기 표 4에 나타나듯이, 비교군에서 PEG계의 유해균 (RT4)의 바이오필름 형성율이 대조군 대비 약 3배 이상 증가하고, 폴리글리세릴계 및 레시틴계는 상재균(RT1) 및 유익균 (RT6)의 바이오필름 형성율이 대조군 대비 현저히 감소하였다.As shown in Table 4 above, in the comparison group, the biofilm formation rate of PEG-based harmful bacteria (RT4) increased by more than three times compared to the control group, and polyglyceryl-based and lecithin-based bacteria increased by more than 3 times compared to the control group. The biofilm formation rate was significantly reduced compared to the control group.

반면, 시험군(솔비탄 카프릴레이트)에서는 유해균인 RT4 및 RT5 바이오필름 형성율은 감소, RT6 바이오필름 형성율은 현저히 증가하였고, 특히 상재균/유익균 대비 유해균에서만 바이오필름 형성을 억제하였는바, 솔비탄 카프릴레이트의 선택적인 유해균의 바이오필름 형성 제어 효과가 우수함을 확인하였다.On the other hand, in the test group (sorbitan caprylate), the formation rate of RT4 and RT5 biofilms, which are harmful bacteria, decreased, and the rate of RT6 biofilm formation significantly increased. In particular, biofilm formation was suppressed only in harmful bacteria compared to common/beneficial bacteria. It was confirmed that sorbitan caprylate is effective in selectively controlling the biofilm formation of harmful bacteria.

실시예 3. 솔비탄 카프릴레이트의 화장료 조성물로서 적법성 평가Example 3. Evaluation of the legality of sorbitan caprylate as a cosmetic composition

실시예 3-1. 솔비탄 카프릴레이트를 화장품 원료와 동시 사용시 바이오필름 형성 억제 효과 검정Example 3-1. Testing the effect of inhibiting biofilm formation when sorbitan caprylate is used simultaneously with cosmetic raw materials

항균 활성을 가지고 있는 방부제로서 화장품 원료인 펜틸렌 글라이콜 (pentylene glycol)을 선정하였고, 이를 솔비탄 카프릴레이트에 동시 사용하는 경우 바이오필름 형성율을 측정하였다. Pentylene glycol, a cosmetic raw material, was selected as a preservative with antibacterial activity, and the biofilm formation rate was measured when used simultaneously with sorbitan caprylate.

균주에 0.1% 솔비탄 카프릴레이트, 0.2% 펜틸렌 글라이콜 혼합원료를 적용하여, 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였다 (표 5).A mixture of 0.1% sorbitan caprylate and 0.2% pentylene glycol was applied to the strain, the absorbance (OD 545 ) was measured, and the inhibition of biofilm formation was compared (Table 5).

표 5에서 나타나듯이, 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜의 유해균 (RT5)의 바이오필름 형성율이 대조군 대비 약 5배 감소하였고, 유익균(RT6)의 바이오필름 형성율은 대조군 대비 2배 증가하였는바, 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜 혼합원료에서도 유해균의 바이오필름만 선택적으로 억제함을 확인하였다 (도 5).As shown in Table 5, the biofilm formation rate of harmful bacteria (RT5) of sorbitan caprylate/pentylene glycol decreased by about 5 times compared to the control group, and the biofilm formation rate of beneficial bacteria (RT6) was 2 times that of the control group. As it increased, it was confirmed that only the biofilm of harmful bacteria was selectively suppressed in the caprylate/pentylene glycol mixed raw material (FIG. 5).

실시예 3-2. 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜의 화장수 제형에 적용 시 바이오필름 형성 억제 효과 검정Example 3-2. Testing the effect of inhibiting biofilm formation when applied to lotion formulation of sorbitan caprylate/pentylene glycol

솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜 혼합원료를 일반적인 화장수 제형에 사용하기 위하여, 일반적인 화장수 원료를 혼합하였다 (표 6).In order to use the sorbitan caprylate/pentylene glycol mixed raw material in a general lotion formulation, general lotion raw materials were mixed (Table 6).

균주에 0.2% 솔비탄 카프릴레이트를 화장수 제형에 적용 (시험군 1)하여 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였으며 (표 7), 균주에 0.3% 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜를 화장수 제형에 적용 (시험군 2)하여 흡광도(OD545)를 측정하였고, 이를 통해 바이오필름 형성 억제 여부를 비교하였다 (표 8).0.2% sorbitan caprylate was applied to the strain in a cosmetic lotion formulation (test group 1), the absorbance (OD 545 ) was measured, and through this, the inhibition of biofilm formation was compared (Table 7), and 0.3% sorbitan was added to the strain. Caprylate/pentylene glycol was applied to the lotion formulation (test group 2), the absorbance (OD 545 ) was measured, and the inhibition of biofilm formation was compared (Table 8).

상기 표 7에서 나타나듯이, 솔비탄 카프릴레이트의 화장수를 균주에 적용 시, 시험군 1에서 상재균 (RT1)/유익균 대비 유해균에서만 바이오필름 형성을 억제함을 확인하였다(도 6). As shown in Table 7 above, when applying sorbitan caprylate lotion to strains, it was confirmed that biofilm formation was suppressed only in harmful bacteria compared to common bacteria (RT1)/beneficial bacteria in test group 1 (FIG. 6).

또한, 솔비탄 카프릴레이트/펜틸렌 글라이콜의 화장수를 균주에 적용시, 시험군 2에서도 유해균인 RT4 및 RT5의 바이오필름이 선택적으로 억제됨을 확인하였다 (도 7). In addition, when applying sorbitan caprylate/pentylene glycol lotion to the strains, it was confirmed that biofilms of harmful bacteria RT4 and RT5 were selectively inhibited in test group 2 (FIG. 7).

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되어야 한다. From the above description, those skilled in the art to which the present invention pertains will understand that the present invention can be implemented in other specific forms without changing its technical idea or essential features. In this regard, the embodiments described above should be understood in all respects as illustrative and not restrictive. The scope of the present invention should include the meaning and scope of the patent claims described below rather than the detailed description above, and all changes or modified forms derived from the equivalent concept thereof.

Claims (10)

솔비탄 카프릴레이트 (Sorbitan caprylate)를 유효성분으로 포함하는, 큐티박테리움 균주 (Cutibacterium sp.)의 바이오필름 형성 조절용 조성물.
A composition for controlling biofilm formation of Cutibacterium sp., comprising sorbitan caprylate as an active ingredient.
제1항에 있어서, 상기 큐티박박테리움 속 균주는 큐티박테리움 아크네스 (Cutibacterium acnes, C.acnes)인 것을 특징으로 하는, 조성물.
The composition according to claim 1, wherein the strain of the genus Cutibacterium is Cutibacterium acnes (C.acnes).
제2항에 있어서, 상기 큐티박테리움 아크네스는 피부 상재균으로서 RT1 (ribotype 1)의 유전자 타입을 갖는 균주 (strain)인, 조성물.
The composition according to claim 2, wherein the Cutibacterium acnes is a skin flora and is a strain having a genotype of RT1 (ribotype 1).
제2항에 있어서, 상기 큐티박테리움 아크네스는 피부 유익균으로서 RT6 (ribotype 6)의 유전자 타입을 갖는 균주인, 조성물.
The composition according to claim 2, wherein the Cutibacterium acnes is a skin beneficial bacteria and is a strain having a genotype of RT6 (ribotype 6).
제2항에 있어서, 상기 큐티박테리움 아크네스는 피부 유해균으로서 RT4 (ribotype 4) 또는 RT5 (ribotype 5)의 유전자 타입을 갖는 균주인 것인, 조성물.
The composition according to claim 2, wherein the Cutibacterium acnes is a skin-harmful bacterium and is a strain having a genotype of RT4 (ribotype 4) or RT5 (ribotype 5).
제4항에 있어서, 상기 솔비탄 카프릴레이트는 피부 유익균의 바이오필름을 선택적으로 유지 또는 강화하는 것인, 조성물.
The composition of claim 4, wherein the sorbitan caprylate selectively maintains or strengthens the biofilm of beneficial skin bacteria.
제5항에 있어서, 상기 솔비탄 카프릴레이트는 피부 유해균의 바이오필름을 선택적으로 억제하는 것인, 조성물.
The composition of claim 5, wherein the sorbitan caprylate selectively inhibits biofilm of harmful skin bacteria.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물인, 조성물.
The composition according to claim 1, wherein the composition is a cosmetic composition.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 의약외품 조성물인, 조성물.
The composition of claim 1, wherein the composition is a quasi-drug composition.
솔비탄 카프릴레이트를 유효성분으로 포함하는 큐티박테리움 균주의 마이크로바이옴 밸런스 유지용 화장료 조성물. A cosmetic composition for maintaining the microbiome balance of a Cutibacterium strain containing sorbitan caprylate as an active ingredient.
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