KR101951646B1 - A cosmetic composition comprising marinobacter-fermented spirulina extract for antioxydant and skin winkle improvement - Google Patents

A cosmetic composition comprising marinobacter-fermented spirulina extract for antioxydant and skin winkle improvement Download PDF

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cosmetic composition
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이경록
한병석
김경민
김정환
김수영
강지미
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주식회사 아미코스메틱
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Abstract

The present invention provides a cosmetic composition for antioxidation and wrinkle amelioration, including a spirulina marinobacter fermented extract as an active ingredient.

Description

스피룰리나 마리노박터 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 및 주름개선용 화장료 조성물{A COSMETIC COMPOSITION COMPRISING MARINOBACTER-FERMENTED SPIRULINA EXTRACT FOR ANTIOXYDANT AND SKIN WINKLE IMPROVEMENT}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a cosmetic composition for improving antioxidative and anti-wrinkle properties, comprising an extract of Ferulina marinobacter fermented extract as an active ingredient,

본 발명은 스피룰리나 마리노박터 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising a fermented extract of Spirulina marinobacter as an active ingredient.

피부는 외부환경과 접촉하여 자극에 대한 신체를 보호하는 가장 기초적인 방어기관이며, 외적인 아름다움을 표현하는 중요한 기관이다. Skin is the most basic defensive body that protects the body against irritation in contact with the external environment, and is an important body expressing external beauty.

외적인 아름다움이 젊음과 건강을 상징하는 판단의 기준일 뿐 아니라 자신감을 표출하여 업무능력에 영향을 주는 경쟁력으로 자리잡고 있기 때문에, 현대사회에서 피부를 관리하는 경향이 증가하고 있다.Since external beauty is not only a standard of judgment that symbolizes youth and health but also a competitiveness that affects business ability by expressing self-confidence, the tendency to manage skin in modern society is increasing.

그러나 나이가 들어감에 따라 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 감소하고, 외적으로는 오존층 파괴와 같은 환경오염으로 인한 자외선, 자유 라디칼 및 활성산소의 증가로 인하여 발생하는 물리적, 화학적 자극 및 스트레스로 인해 피부의 정상기능이 약화되어 노화가 촉진되며 혈색이 나빠지고 피부가 주름지게 된다.However, as the age increases, the secretion of various hormones that regulate metabolism decreases, the function of immune cells and the activity of cells decrease, and the biosynthesis of immune proteins and biocompatible proteins necessary for the living body is decreased, and the ozone layer destruction , The free radicals and free radicals caused by environmental pollution such as physical and chemical stimuli and stress caused by the increase in the normal function of the skin is weakened to promote aging, the color is bad and the skin is wrinkled.

이러한 현상을 방지하고 톤이 밝은 피부를 유지하기 위해서, 기존에 알려진 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 산화로 인한 피부노화를 방지함으로써 피부를 개선시키고자 노력하였다.In order to prevent such phenomenon and to maintain the skin with a bright tone, physiologically active substances obtained from various known animals, plants and microorganisms were added to cosmetics to prevent skin aging caused by oxidation, thereby trying to improve the skin.

화장품 업계는 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 다수의 제품을 개발하고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 점차 증가하고 있다.The cosmetics industry is developing a number of products using natural products to reduce skin irritation caused by various chemicals. In addition to low adverse effects on skin, natural materials have recently been increasingly developed as cosmetic raw materials, as consumers have become more receptive to cosmetics using natural materials.

그러나, 통상의 방법으로 수득된 천연 유래의 추출물을 함유하는 화장료 제품은 피부 개선 효과 등 기능성이 충분히 구현되지 아니하며, 피부 개선 활성이 지속적으로 유지되지 않는 문제가 있었다. However, a cosmetic product containing a natural-derived extract obtained by an ordinary method has not been sufficiently functionalized, such as skin improving effect, and the skin improving activity is not maintained constantly.

따라서, 우수한 기능성과 함께 생체 안정성 및 피부 개선 효과가 우수한 천연물 유래 화장료 제품의 개발 필요성이 꾸준히 대두되고 있는 상황이다.Accordingly, there is a continuing need to develop cosmetic products derived from natural products, which have excellent functionalities and excellent biostability and skin improving effect.

최근 기능성 화장품의 소재로 스피룰리나가 주목을 받고 있다. 스피룰리나(Spirulina)는 열대 지역에 알카리성이 높고 염분이 많은 호수의 표면에서 광합성을 하면서 자생하는 청녹색의 남조류이다. 스피룰리나는 단백질 및 각종 영양성분이 고농도로 함축되어 있기 때문에 건강기능 식품으로서 주목을 받았다.Recently, Spirulina has been attracting attention as a functional cosmetic material. Spirulina is a blue-green cyanobacterium that grows wild in the tropics while photosynthesising on the surface of a high-alkaline, salty lake. Spirulina has been attracting attention as a health functional food because it has a high concentration of proteins and various nutrients.

특히, 건강식품으로서의 안전성과 영양면에서 완전식품으로 국제연합(UN), 세계보건기구(WHO)와 미국식품의약국(FDA)등에서 공식 인정받았으며, 우주인들의 비상식량으로 미국항공우주국(NASA)에서 결정된 식품이기도 하다.In particular, it has been officially recognized by the United Nations, the World Health Organization and the Food and Drug Administration (FDA) as a complete food product in terms of safety and nutrition as a health food. It is also a decided food.

스피룰리나는 생물체가 필요로 하는 모든 영양소, 특히 단백질과 녹황색 야채가 가지고 있는 천연 엽록 영양소가 고농도로 함축되어 있다. 그리고 인체에 필요한 5대 영양소(각종 단백질, 탄수화물, 각종미네랄, 지방, 각종 비타민)와 2~3만 가지 종류의 고른 영양소가 함축되어 있다.Spirulina is a high concentration of all the nutrients that are needed by the organism, especially the proteins and the natural chlorophyll nutrients of the greenish-yellow vegetables. It contains five nutrients (protein, carbohydrate, various minerals, fat, various vitamins) necessary for the human body, and even nutrients from 20,000 to 30,000 kinds.

또한, 매우 높은 단백질 함량(55~77%)을 가지고 있고, 각종 성분이 인체와 거의 같은 비로 구성되어 있어 체내 소화흡수율이 95% 이상이며, 소화기능이 약화된 환자, 노약자, 유아 등이 섭취할 때 효과가 크고, 장기간 복용하여도 영양에 불균형을 일으키지 않는 강알카리성 완전식품이다.In addition, it has a very high protein content (55 ~ 77%) and various components are composed almost same ratio with the human body, so digestion rate of body is more than 95%, and the digestive function is weakened, the elderly, It is a strong alkaline whole food that does not cause imbalance in nutrition even when used for a long time.

최근엔 항암효과 및 각종 면역 기능 증강 효과가 보고되었으며, 다양한 비타민이 상당량 함유되어 있어 기능성 화장품의 소재로 개발될 수 있다. 그러나 아직 스피룰리나를 기능성 화장품 소재로 이용하여 피부 생리활성 및 피부 효능은 구체적으로 규명된 바 없다.Recently, anticancer effect and various immune function enhancing effects have been reported, and it can be developed as a functional cosmetic material because it contains a large amount of various vitamins. However, the use of Spirulina as a functional cosmetic material has not yet been specifically identified for skin physiological activity and skin efficacy.

한편, 미생물이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정에서 생활에 유용한 물질이 만들어지는 것을 발효라고 한다. 천연물에는 피부에 유익한 각종 아미노산, 유기산, 및 천연 항산화제와 같은 생리활성 성분이 포함되어 있다. 천연물을 유용한 미생물을 통해 발효하면, 생리활성 성분이 발효하기 전보다 배로 증가되는 것으로 알려져 있다.On the other hand, it is called fermentation that a substance useful for living is produced in the process of decomposing organic matter using an enzyme possessed by a microorganism. Natural products include physiologically active ingredients such as various amino acids, organic acids, and natural antioxidants that are beneficial to skin. It is known that fermentation of natural products through useful microorganisms increases the biologically active component twice before fermentation.

각종 화장품 업계에서는 이러한 발효과정을 통해 기능성이 증대된 천연 화장품 개발이 지속되어 왔다. 특히 발효된 천연물은 각종 기능성 성분의 입자가 발효과정을 통해 작아지기 때문에 피부 흡수율이 증대된다. 또한, 기존에 없던 새로운 생리활성 성분을 만들 수 있기 때문에 천연물을 발효함으로써 다양한 기능성 효과가 발휘될 수 있다.Various cosmetics industry has continued to develop natural cosmetics with enhanced functionality through such fermentation process. Particularly, the fermented natural product increases the skin absorption rate because particles of various functional ingredients are reduced through the fermentation process. In addition, since a new physiologically active ingredient which has not existed can be produced, various functional effects can be exhibited by fermenting a natural product.

따라서 본 발명자들은 스피룰리나를 이용하여 기능성이 향상된 화장품 조성물을 개발하고자 개발하고자 하였다.Therefore, the present inventors intend to develop a cosmetic composition having improved functionality by using spirulina.

본 발명의 일 측면에 따르면, 마리노박터 센글리엔시스(Marinobacter shengliensis)를 접종하여 수득한 스피룰리나 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising, as an active ingredient, a spirulina fermented extract obtained by inoculating Marinobacter shengliensis .

일 실시예에 있어서, 상기 발효 추출물은 상기 발효 추출물은 23 내지 27℃에서 발효시켜 수득할 수 있다.In one embodiment, the fermentation extract may be obtained by fermenting the fermentation extract at 23 to 27 ° C.

일 실시예에 있어서, 상기 발효 추출물은 상기 발효 추출물은 96 내지 144시간 동안 발효시켜 수득할 수 있다.In one embodiment, the fermentation extract may be obtained by fermenting the fermentation extract for 96 to 144 hours.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화용 또는 주름 개선용일 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may be for antioxidant or wrinkle improvement.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨, 로션, 크림, 세럼, 에멀젼, 에센스, 파우더, 파운데이션, 스프레이, 마스크팩, 시트팩, 수면팩, 워시오프팩 및 필오프팩으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition is selected from the group consisting of a skin, a lotion, a cream, a serum, an emulsion, an essence, a powder, a foundation, a spray, a mask pack, a sheet pack, a sleep pack, Or more.

본 발명의 일 측면에 따른 화장료 조성물은 스피룰리나 발효 추출물을 유효성분으로 포함하므로, 항산화 및 주름 개선 효과가 우수하다.The cosmetic composition according to one aspect of the present invention is excellent in antioxidative and wrinkle-reducing effects because it contains a ferulic extract of Spirulina as an active ingredient.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.It should be understood that the effects of the present invention are not limited to the effects described above, but include all effects that can be deduced from the description of the invention or the composition of the invention set forth in the claims.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 발효 추출물의 항산화 활성을 농도별로 측정한 결과이다.FIG. 1 is a graph illustrating the antioxidative activity of fermented extract according to an embodiment of the present invention.

도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 발효 추출물의 콜라게나제 저해 활성을 농도별로 측정한 결과이다.FIG. 2 is a graph showing the results of measurement of collagenase inhibitory activity of the fermented extract according to an embodiment of the present invention.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 발효 추출물의 항산화 활성을 농도별로 측정한 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 발효 추출물의 콜라게나제 저해 활성을 농도별로 측정한 결과이다.
FIG. 1 is a graph illustrating the antioxidative activity of fermented extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a graph showing the results of measurement of collagenase inhibitory activity of the fermented extract according to an embodiment of the present invention.

본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.As used herein, the terminology used herein is intended to encompass all commonly used generic terms that may be considered while considering the functionality of the present invention, but this may vary depending upon the intent or circumstance of the skilled artisan, the emergence of new technology, and the like. Also, in certain cases, there may be a term selected arbitrarily by the applicant, in which case the meaning thereof will be described in detail in the description of the corresponding invention. Therefore, the term used in the present invention should be defined based on the meaning of the term, not on the name of a simple term, but on the entire contents of the present invention.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.Unless defined otherwise, all terms used herein, including technical or scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Terms such as those defined in commonly used dictionaries are to be interpreted as having a meaning consistent with the contextual meaning of the related art and are to be interpreted as either ideal or overly formal in the sense of the present application Do not.

수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.The numerical range includes numerical values defined in the above range. All numerical limitations of all the maximum numerical values given throughout this specification include all lower numerical limitations as the lower numerical limitations are explicitly stated. All the minimum numerical limitations given throughout this specification include all higher numerical limitations as the higher numerical limitations are explicitly stated. All numerical limitations given throughout this specification will include any better numerical range within a broader numerical range, as narrower numerical limitations are explicitly stated.

이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail, but it should be apparent that the present invention is not limited by the following examples.

본 발명의 일 측면에 따르면, 발효 균주를 접종하여 수득한 스피룰리나 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising, as an active ingredient, a spirulina fermented extract obtained by inoculating a fermentation strain.

상기 화장료 조성물은 스피룰리나 발효 추출물을 유효성분으로 포함하여 항산화 및 주름 개선 효과가 우수할 뿐만 아니라 피부 자극이 적다.The cosmetic composition contains Spirulina fermented extract as an active ingredient and has excellent antioxidative and wrinkle-reducing effects, and also has little skin irritation.

상기 발효 균주는 마리노박터(Marinobacter)일 수 있고, 바람직하게는 마리노박터 센글리엔시스(Marinobacter shengliensis)일 수 있다.The fermentation strain may be Marinobacter , and preferably Marinobacter shengliensis .

상기 마리노박터 센글리엔시스는 그램-음성균이며, 호염성, 호기성 간균으로 단일의 극성 편모를 가지고, 제주 용암해수(Lava Seawater)에서 분리될 수 있다.The Marinobacter senrygensis is a gram-negative bacterium. It is a horny, aerobic bacterium having a single polar flagellum and can be isolated from the lava seawater of Jeju Island.

본 발명자들은 상기 마리노박터 센글리엔시스 발효에 의해 스피룰리나에 함유된 유효성분의 가수분해가 촉진되어 다양한 피부 유용성분이 증대되고, 인해 항스트레스 및 항염 활성 등 피부 개선 효과가 현저히 개선될 수 있음을 확인하였다.The inventors of the present invention have confirmed that the hydrolysis of the active ingredient contained in Spirulina is promoted by the fermentation of Marinobacterium gingensis to thereby increase the diverse skin components and thus the skin improving effect such as anti-stress and anti-inflammatory activity can be remarkably improved .

상기 “유효 성분으로 포함하는”은 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는, 예컨대, 주름개선효능과 관련된 콜라겐 합성, 탄력 개선, 피부 자극 완화, 피부 진정 효과 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미할 수 있다.As used herein, the term " comprising as an active ingredient " means an effective amount that can exhibit a skin improving effect, for example, a degree of collagen synthesis associated with a wrinkle reducing effect, an elasticity improvement, a skin irritation alleviation, can do.

상기 “스피룰리나(Spirulina)”는 지구에서 가장 오래된 조류로서 세포벽이 얇은 다세포 생물이다. 상기 스피룰리나는 고염분 알카리 환경에서 자생하며, 인공 양식으로 대량 생산이 가능하다. 상기 스피룰리나는 청록색으로 나선형이며 길이 300~500㎛, 너비 8㎛ 이다. 약 30종이 알려져 있으며, 구성 성분은 단백질 60~70%, 지질 6~9%, 탄수화물 15~20%로 이루어져 있다.The "Spirulina" is the oldest algae on Earth and is a multi-celled organism with thin walls. The spirulina is naturally grown in a highly salted alkaline environment, and can be mass-produced in an artificial form. The spirulina is spiral in a cyan green color and has a length of 300 to 500 탆 and a width of 8 탆. Approximately 30 species are known and consist of 60 ~ 70% protein, 6 ~ 9% lipid and 15 ~ 20% carbohydrate.

상기 스피룰리나는 공지된 다양한 스피룰리나 종을 포함하며, Spirulina platensis, Spirulina maxima, Spirulina subsalsa , Spirulina major, Spirulina geitleri, Spirulina siamese, Spirulina princeps , Spirulina laxissima , Spirulina curta , Spirulina spirulinoides , Spirulina platensis , Spirulina maxima, Spirulina geitleriSpirulina siamese로 구성된 종에서 선택될 수 있다.The spirulina includes a variety of known spirulina species, including Spirulina platensis, Spirulina maxima, Spirulina subsalsa , Spirulina major, Spirulina geitleri, Spirulina siamese, Spirulina princeps , Spirulina laxissima , Spirulina curta , Spirulina spirulinoides , Spirulina platensis , Spirulina maxima, Spirulina geitleri and Spirulina siamese .

상기 스피룰리나는 단백질, 탄수화물, 수용성 식이섬유를 비롯하여 항산화성 색소 성분(클로로필, 카로티노이드, 피코사이아닌), 항산화 효소(SOD)를 함유한다. 비타민으로는 베타카로틴, 비타민 B1, B2, B6, B12, 비타민 E, 이노시톨, 엽산 등이 함유되어 있다. 칼슘, 철, 칼륨, 마그네슘, 아연, 망간, 셀레늄, 게르마늄 등 무기질 성분을 다량 함유하고 있다. 필수아미노산을 모두 함유하고 있으며, 필수지방산인 리놀렌산, 감마리놀렌산도 풍부하다.The Spirulina contains proteins, carbohydrates, water-soluble dietary fibers as well as antioxidant coloring matter components (chlorophyll, carotenoid, picocyanin) and antioxidant enzyme (SOD). Vitamins include beta carotene, vitamin B1, B2, B6, B12, vitamin E, inositol, and folic acid. Calcium, iron, potassium, magnesium, zinc, manganese, selenium and germanium. It contains all the essential amino acids, linolenic acid and gamma linolenic acid are essential fatty acids.

상기 “발효” 는 발효 균주 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 의미한다. The term " fermentation " refers to a process of decomposing an organic substance using an enzyme possessed by the fermentation strain itself.

상기 발효과정을 거친 원료는 발효 전보다 최소 2배에서 최대 수 십배의 효과가 증대되는 것으로 알려져 있다. 발효를 거친 대사물질은 피부에 좋은 각종 아미노산, 유기산, 항산화물질을 함유하여 피부대사를 촉진시켜 피부결을 매끄럽게 가꿔준다. 또한, 발효과정을 거치면서 입자가 작아지고 중금속 등의 독성이 분해되어 흡수율이 좋을 뿐 아니라 피부트러블이나 알레르기 부작용을 완화해준다.It is known that the fermented raw material has an effect of at least 2 times to several tens of times greater than before fermentation. Fermented metabolites contain various amino acids, organic acids, and antioxidants that are good for skin, promoting skin metabolism and smooth skin texture. In addition, as the fermentation process proceeds, the particles become smaller and the toxicity such as heavy metals is decomposed, so that the absorption rate is good and the skin troubles and allergy side effects are alleviated.

상기 스피룰리나 발효 추출물은 멸균, 발효, 추출, 여과, 농축 과정을 순차적으로 거쳐 수득될 수 있다.The Spirulina fermented extract may be obtained by successively sterilizing, fermenting, extracting, filtering, and concentrating.

구체적으로, 스피룰리나를 건조 후 분쇄하고, 정제수와 혼합하고 120~125℃ 온도 범위에서 10~20분간 가열 멸균한다. 스피룰리나를 멸균함으로써 이후에 있는 발효 단계에 발효 균주를 제외한 다른 오염균의 침입을 방지할 수 있다. 스피룰리나에는 다양한 영양성분이 고농도로 함축되어 있기 때문에 발효되는 과정에서 독성 물질을 생산하는 미생물에 오염될 수 있다.Specifically, Spirulina is dried, pulverized, mixed with purified water, and sterilized by heating at 120 to 125 ° C for 10 to 20 minutes. By sterilizing the spirulina, it is possible to prevent intrusion of other contaminants other than the fermentation strain in the subsequent fermentation step. Because spirulina has a high concentration of various nutrients, it can be contaminated with microorganisms that produce toxic substances during fermentation.

따라서 대부분의 미생물의 포자가 파괴 되면서 스피룰리나의 함유된 유용 성분이 파괴되지 않는 온도 범위에서 10~20분간 멸균할 수 있다.Therefore, spores of most microorganisms can be destroyed and sterilized for 10 to 20 minutes at a temperature range where the useful components contained in Spirulina are not destroyed.

125℃보다 높은 온도로 멸균하거나 멸균 기간이 20분보다 길어지는 경우 스피룰리나의 함유된 유용 성분이 파괴될 수 있다. 또한 120℃보다 낮은 온도로 멸균하거나 멸균 기간이 10분보다 짧은 경우 유해 미생물 및 포자가 파괴되지 않아 이후의 발효 단계에서 오염될 수 있다.If the sterilization is done at a temperature higher than 125 ° C or if the sterilization period is longer than 20 minutes, the useful ingredient contained in Spirulina may be destroyed. Also, if the sterilization time is less than 120 ° C or the sterilization period is shorter than 10 minutes, the harmful microorganisms and spores are not destroyed and may be contaminated in the subsequent fermentation step.

상기 멸균된 스피룰리나에 발효 균주를 접종하고 소정의 조건에서 발효시킬 수 있다.The sterilized spirulina may be inoculated with a fermentation strain and fermented under predetermined conditions.

구체적으로, 상기 발효 추출물의 발효 조건이 특별히 제한되는 것은 아니나, 바람직하게는 23 내지 27℃에서 발효시켜 수득할 수 있고, 96 내지 144시간 동안 발효시켜 수득할 수 있다.Concretely, the fermentation conditions of the fermentation extract are not particularly limited, but can be obtained by fermentation at 23 to 27 캜, and fermentation can be obtained at 96 to 144 hours.

상기 발효 추출물은 발효 온도 및 발효 시간에 따라 추출물 내 유효성분의 함량이 변화할 수 있으며, 이로 인해 피부 개선 활성도 현저히 상이해질 수 있으므로 발효 조건을 적절히 제어하는 것이 바람직하다.The content of the active ingredient in the extract may vary according to the fermentation temperature and the fermentation time of the fermentation extract, and thus the skin improving activity may significantly differ, so that the fermentation conditions are suitably controlled.

상기 “추출물”은 각종 천연물을 추출 원료로 사용하는 천연 추출물로, 용매와 추출 원료를 특정 조건 하에서 접촉시킴으로써 추출 원료에 함유된 유효성분으로 천연물로부터 원료에 함유된 성분을 분리해낸 물질이라면, 추출 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함할 수 있다.The "extract" is a natural extract using various natural products as an extraction raw material. If the extract is a substance in which a solvent and an extraction raw material are brought into contact with each other under specific conditions to separate the components contained in the raw material from the natural product as an active ingredient contained in the extraction raw material, Regardless of the kind of the component or the component.

예컨대, 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출한 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함할 수 있다. 상기 추출물은 건조 후 분말화하거나, 열수추출법, 에탄올 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득할 수 있다.For example, it may include extracts of components dissolved in a solvent from natural products by using water or an organic solvent, and specific components of natural products, such as oils obtained by extracting only specific components such as oil. The extract may be dried and pulverized, or may be obtained by various extraction methods known in the art such as a hot water extraction method and an ethanol extraction method.

상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 석유에테르, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 트리클로로메탄, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 1,3-부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 추출 용매로 추출될 수 있고, 구체적으로 에탄올에 의해 추출될 수 있다.Wherein the extract is selected from the group consisting of water, an anhydrous or lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, petroleum ether, ethyl acetate, butyl acetate, trichloromethane, dichloromethane, chloroform, hexane and 1,3-butylene glycol , And can be extracted with ethanol in particular.

상기 원료에 포함된 유효성분은 용매의 극성에 따라 추출 비율이 상이해질 수 있으며, 상기 에탄올은 천연 원료의 생리 활성 물질 추출에 있어서 선택성이 뛰어나므로 상기 에탄올 추출에 의해 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있다.The extraction ratio of the active ingredient contained in the raw material may be different depending on the polarity of the solvent. Since the ethanol is excellent in selectivity for extracting a physiologically active substance from a natural raw material, the ethanol extract can realize an optimal skin improving effect .

물과 에탄올은 극성이 상이하고 각 극성에 따라 추출되는 유효성분이 달라질 수 있으므로 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있도록 상기 에탄올의 농도를 적절히 제어할 수 있다.Since the water and ethanol have different polarities and the effective components to be extracted depend on the polarity, the concentration of ethanol can be appropriately controlled so that an optimal skin improving effect can be realized.

상기 추출물은 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 추출물은 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획물을 포함할 수 있다.The extract may also contain an extract which has been subjected to a conventional purification process. For example, the extract may be subjected to various purification methods such as separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity) Lt; RTI ID = 0.0 > fractions. ≪ / RTI >

상기 화장료 조성물은 스킨, 로션, 크림, 세럼, 에멀젼, 에센스, 파우더, 파운데이션, 스프레이, 마스크팩, 시트팩, 수면팩, 워시오프팩 및 필오프팩으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.The cosmetic composition may be formulated into at least one member selected from the group consisting of a skin, a lotion, a cream, a serum, an emulsion, an essence, a powder, a foundation, a spray, a mask pack, a sheet pack, a sleep pack, have.

상기 화장료 조성물은 통상의 방법에 의해 제형화될 수 있다. 피부 외용제의 제형화에 있어서 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있고, 화장료 조성물의 제형화에 있어서 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed(The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995)에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다.The cosmetic composition may be formulated by a conventional method. The contents disclosed in Remington ' s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton PA in the formulation of the external preparation for skin can be referred to, and in the formulation of the cosmetic composition, International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed (The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association , Inc., Washington, 1995).

구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징 폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 피부 외용제는, 연고, 패치, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.Specifically, the cosmetic composition may be prepared into a general emulsified formulation and a solubilized formulation. For example, lotion such as soft lotion or nutrition lotion; Lotion such as facial lotion, body lotion; Nourishing cream, moisture cream, cream such as eye cream; essence; Makeup ointment; spray; Gel; pack; Sunscreen; Makeup base; A foundation such as a liquid type, a solid type or a spray type; powder; Make-up removers such as cleansing creams, cleansing lotions and cleansing oils; Or a cleansing agent such as a cleansing foam, a soap, a body wash, and the like, but is not limited thereto. In addition, the external preparation for skin may be formulated into ointments, patches, gels, creams or sprays, but is not limited thereto.

상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be appropriately blended with other ingredients within the range of not compromising the object of the present invention depending on the kind of the formulation or the purpose of use, in addition to the essential ingredients in each formulation.

상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.The cosmetic composition may contain a conventional acceptable carrier and may appropriately contain, for example, oil, water, a surfactant, a moisturizer, a lower alcohol, a thickener, a chelating agent, a colorant, no.

상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 추출물이 사용될 수 있다.The acceptable carrier may vary according to the formulation. For example, when formulated into ointments, pastes, creams or gels, there may be used an animal oil, a vegetable oil, a wax, a paraffin, a starch, a tracer, a cellulose derivative, polyethylene glycol, silicon, bentonite, silica, talc, zinc oxide, Extracts may be used.

상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 추출물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.When the cosmetic composition is formulated with a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder or an extract thereof may be used as a carrier component. In the case of a spray, Propellants such as carbon, propane, butane or dimethyl ether.

상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-브틸글리콜 오일이 사용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.When the cosmetic composition is formulated into a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent may be used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl benzoate, 1,3-butyl glycol oil may be used, and in particular, fatty acid esters of cottonseed oil, peanut oil, corn oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan may be used.

상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.When formulated into a suspension, the cosmetic composition may contain, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

상기 화장료 조성물이 비누로 제형화될 때, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 사용될 수 있다.When the cosmetic composition is formulated into soap, it is preferable to use, as a carrier component, an alkali metal salt of a fatty acid, a fatty acid hemiester salt, a fatty acid protein hydrolizate, isethionate, a lanolin derivative, an aliphatic alcohol, a vegetable oil, Can be used.

상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.The cosmetic composition may be a cosmetic or dermatological composition which is generally used in the art depending on the quality or function of the final product, such as a lipid, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, Surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, And may further contain adjuvants conventionally used in the field of cosmetics or dermatology, such as any other ingredient.

다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.However, the adjuvant and the mixing ratio thereof can be appropriately selected so as not to affect the preferable properties of the cosmetic composition according to the present invention.

이하 실시예를 통해, 본 발명을 더욱 상술하나 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.The present invention will be further described with reference to the following examples, but it should be apparent that the present invention is not limited by the following examples.

제조예 : 스피룰리나 발효 추출물Production Example: Spirulina Fermented Extract

스피룰리나를 상온에서 완전히 건조시킨 후 분쇄하였다. 상기 스피룰리나 분쇄물과 20배 부피의 정제수를 혼합하고 121°C의 온도에서 15분간 멸균 추출 하였다.Spirulina was completely dried at room temperature and then pulverized. The above Spirulina pulverized product and 20 times volume of purified water were mixed and sterilized and extracted at a temperature of 121 ° C for 15 minutes.

멸균된 스피룰리나에 제주 용암해수에서 분리한 마리노박터 센글리엔시스(Marinobacter shengliensis)를 1%(w/v)로 접종하였다. The sterilized Spirulina was inoculated with 1% (w / v) of Marinobacter shengliensis isolated from Jeju Lava Seawater.

발효 균주가 접종된 스피룰리나를 액상발효기에 넣어 온도 및 시간을 달리하여 발효하였다.Spirulina was inoculated into a liquid fermenter and fermented at different temperatures and times.

발효가 완료된 스피룰리나 발효물을 250메쉬 및 3㎛ 필터로 여과하고, 60℃에서 감압농축 후 동결 건조하여 추출물의 고형분을 수득하였다.The fermented spirulina fermented material was filtered through a 250 mesh and 3 탆 filter, concentrated under reduced pressure at 60 캜 and lyophilized to obtain a solid content of the extract.

비교제조예 1 : 스피룰리나 추출물Comparative Preparation Example 1: Spirulina extract

스피룰리나를 상온에서 완전히 건조시키고 분쇄하여 분쇄물을 수득하였다.Spirulina was completely dried at room temperature and pulverized to obtain a pulverized product.

상기 스피룰리나 분쇄물에 20배 부피의 정제수를 혼합하고 121°C의 온도에서 15분간 추출하였다. Twenty times as much volume of purified water was mixed with the above Spirulina pulverized product and extracted at a temperature of 121 ° C for 15 minutes.

상기 추출물을 250메쉬 및 3㎛ 필터로 여과하고, 60℃에서 감압농축 후 동결 건조하여 추출물의 고형분을 수득하였다.The extract was filtered through 250 mesh and 3 mu m filters, concentrated under reduced pressure at 60 DEG C, and lyophilized to obtain a solid content of the extract.

비교제조예 2 : 스피룰리나 발효 추출물Comparative Preparation Example 2: Spirulina fermentation extract

제조예와 동일한 방법으로 발효 추출물을 제조하되, 발효 균주만을 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 달리하였다.The fermented extract was prepared in the same manner as in the preparation example except that only the fermentation strain was changed to Bacillus subtilis .

비교제조예 3 : 스피룰리나 발효 추출물Comparative Preparation Example 3: Spirulina fermented extract

제조예와 동일한 방법으로 발효 추출물을 제조하되, 발효 균주만을 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 달리하였다.The fermentation extract was prepared in the same manner as in the production example except that only the fermentation strain was changed to Lactobacillus plantarum .

제조예 설정Manufacturing example setting

하기와 같이 발효 조건을 달리하고, 스피룰리나 발효 추출물(1000μg/mL)의 기능성을 평가하였다.The fermentation conditions of the Spirulina fermented extract (1000 μg / mL) were evaluated with different fermentation conditions as described below.

구분division 온도(℃)Temperature (℃) 발효 시간(h)Fermentation time (h) 제조예 1Production Example 1 2525 2424 제조예 2Production Example 2 2525 4848 제조예 3Production Example 3 2525 7272 제조예 4Production Example 4 2525 9696 제조예 5Production Example 5 2525 120120 제조예 6Production Example 6 2525 144144 제조예 7Production Example 7 3030 2424 제조예 8Production Example 8 3030 4848 제조예 9Production Example 9 3030 7272 제조예 10Production Example 10 3030 9696 제조예 11Production Example 11 3030 120120 제조예 12Production Example 12 3030 144144 제조예 13Production Example 13 3535 2424 제조예 14Production Example 14 3535 4848 제조예 15Production Example 15 3535 7272 제조예 16Production Example 16 3535 9696 제조예 17Production Example 17 3535 120120 제조예 18 Production Example 18 3535 144144

실험예Experimental Example 1 : 발효 조건에 따른 기능성 평가 1: Functional evaluation according to fermentation condition

실험예Experimental Example 1-1.  1-1. ABTSABTS 측정법을 통한 자유라디칼 소거 활성 평가 Evaluation of free radical scavenging activity by measuring method

제조예의 시료를 정제수에 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하였다.Samples of the preparation examples were suspended in purified water to evaluate free radical scavenging activity.

ABTS 측정법은 항산화제가 청녹색의 라디칼 ABTS(2,2'-azinodi [3-ethlbenzthiazolne-6-sulfonic acid])을 소거하여 무색의 ABTS로 전환되는 정도를 732 nm에서 측정하는 방법이다.The ABTS method measures the degree of conversion of the antioxidant to a colorless ABTS at 732 nm by dissolving the blue-green radical, ABTS (2,2'-azinodi [3-ethylbenzthiazolne-6-sulfonic acid]).

1000 μg/mL 농도로 희석된 시료의 라디칼 ABTS 소거능을 측정하였다(표 2).The radical ABTS scavenging activity of the diluted samples at the concentration of 1000 μg / mL was measured (Table 2).

구분division ABTSABTS 소거능Scatters (1000 (1000 μgμg /mL)/ mL) 제조예 1Production Example 1 83.66 %83.66% 제조예 2Production Example 2 90.23 %90.23% 제조예 3Production Example 3 96.45 %96.45% 제조예 4Production Example 4 98.09 %98.09% 제조예 5Production Example 5 98.47 %98.47% 제조예 6Production Example 6 98.32 %98.32% 제조예 7Production Example 7 85.99 %85.99% 제조예 8Production Example 8 91.45 %91.45% 제조예 9Production Example 9 95.70 %95.70% 제조예 10Production Example 10 95.34 %95.34% 제조예 11Production Example 11 97.39 %97.39% 제조예 12Production Example 12 95.23 %95.23% 제조예 13Production Example 13 89.30 %89.30% 제조예 14Production Example 14 90.62 %90.62% 제조예 15Production Example 15 93.48 %93.48% 제조예 16Production Example 16 93.87 %93.87% 제조예 17Production Example 17 95.58 %95.58% 제조예 18 Production Example 18 94.13 %94.13%

표 2를 참조하면, 제조예의 시료는 25℃의 조건에서 96 내지 144시간 배양했을 때 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 평가되었으며, 배양 조건을 달리하는 경우 항산화 활성이 일부 감소하였다. As shown in Table 2, the antioxidative activity of the samples of the present invention was evaluated to be the most excellent when cultured at 25 ° C for 96 to 144 hours, and the antioxidative activity was partially reduced when the culture conditions were different.

실험예Experimental Example 1-2.  1-2. 콜라게나제Collagenase 저해 활성을 통한 항노화 활성 평가 Evaluation of anti-aging activity through inhibitory activity

제조예의 시료를 정제수에 농도별로 현탁하여 콜라게나제 저해 활성(collagenase inhibition activity)을 평가하였다.The sample of the preparation example was suspended in purified water by concentration to evaluate the collagenase inhibition activity.

0.1 M tris-HCl buffer(pH 7.5)에 4 mM CaCl2를 첨가하여, 0.3mg/mL의 4-phenylazobenzyl oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg(sigma, U.S.A)를 녹인 기질액 125 μL에 시료 50 μL를 혼합하였다.Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (Sigma, USA) dissolved in 0.3 mg / mL of 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (Sigma, USA) was added to 4 mM CaCl 2 in 0.1 M tris- μL was mixed with 50 μL of the sample.

0.2mg/mL의 collagenase(sigma, U.S.A) 75 μL를 첨가하고 실온에서 20분간 반응시킨 후 6%(w/w)의 citric acid 250μL을 첨가하여 반응을 정지시켰다.After adding 75 μL of 0.2 mg / mL collagenase (Sigma, U.S.A) for 20 min at room temperature, 250 μL of 6% (w / w) citric acid was added to stop the reaction.

Ethyl acetate 1.5 mL을 첨가하여 320nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라게나제 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다(표 3).1.5 mL of ethyl acetate was added and absorbance was measured at 320 nm. The inhibitory activity of collagenase was expressed by the absorbance reduction rate of the sample solution added and the non-added sample (Table 3).

구분division 콜라게나제Collagenase 저해활성(1000  Inhibitory activity (1000 μgμg /mL)/ mL) 제조예 1Production Example 1 52.09 %52.09% 제조예 2Production Example 2 53.23 %53.23% 제조예 3Production Example 3 55.94 %55.94% 제조예 4Production Example 4 59.54 %59.54% 제조예 5Production Example 5 60.80 %60.80% 제조예 6Production Example 6 59.29 %59.29% 제조예 7Production Example 7 52.28 %52.28% 제조예 8Production Example 8 52.32 %52.32% 제조예 9Production Example 9 55.06 %55.06% 제조예 10Production Example 10 53.52 %53.52% 제조예 11Production Example 11 52.30 %52.30% 제조예 12Production Example 12 50.21 %50.21% 제조예 13Production Example 13 50.13 %50.13% 제조예 14Production Example 14 51.64 %51.64% 제조예 15Production Example 15 57.78 %57.78% 제조예 16Production Example 16 54.21 %54.21% 제조예 17Production Example 17 52.65 %52.65% 제조예 18 Production Example 18 51.95 %51.95%

표 3을 참조하면, 제조예의 시료는 25℃의 조건에서 96 내지 144시간 배양했을 때 콜라게나제 저해활성이 가장 우수한 것으로 평가되었으며, 배양 조건을 달리하는 경우 주름 개선 활성이 일부 감소하였다.The results are shown in Table 3. As shown in Table 3, the collagenase inhibitory activity of the samples of the Examples was found to be the best when cultured at 25 ° C for 96 to 144 hours.

실험예Experimental Example 2 :  2 : 비교예Comparative Example 설정에 따른 기능성 평가 Functional evaluation based on setting

발효 조건을 달리하여 수득한 발효 추출물 중 피부 개선 활성이 가장 우수한 시료를 선별하였다.Among the fermented extracts obtained by different fermentation conditions, the samples having the best skin - improving activity were selected.

실험예 1을 참조하면, 제조예 4 내지 6의 시료가 우수한 피부 개선 활성을 나타내었으며, 제조예 5(25℃, 120시간 발효)의 시료는 농도에 비례하여 피부 개선 활성이 증대되었다(도 1 및 2).Referring to Experimental Example 1, the samples of Preparation Examples 4 to 6 exhibited excellent skin improving activity, and the samples of Preparation Example 5 (fermentation at 25 ° C for 120 hours) increased the skin improving activity in proportion to the concentration (FIG. 1 And 2).

한편, 비교제조예 2 및 3 시료를 실험예 1과 동일한 방식으로 발효 조건을 달리하여 활성이 가장 우수한 시료를 선별하고, 하기와 같이 실시예 및 비교예를 설정하였다(표 4).On the other hand, the samples of Comparative Production Examples 2 and 3 were selected in the same manner as in Experimental Example 1, and the samples having the highest activity were selected by varying the fermentation conditions, and the following examples and comparative examples were set as shown in Table 4.

구분division 내용Contents 실시예 1Example 1 제조예 4Production Example 4 실시예 2Example 2 제조예 5Production Example 5 실시예 3Example 3 제조예 6Production Example 6 비교예 1Comparative Example 1 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교제조예 2Comparative Production Example 2 비교예 3Comparative Example 3 비교제조예 3Comparative Production Example 3

실험예Experimental Example 2-1. 주름 개선 활성 평가 2-1. Wrinkle improvement activity evaluation

피부 주름 개선 효과를 평가하기 위하여 하기와 같이 실험을 하였다.In order to evaluate the effect of improving the wrinkles of the skin, the following experiment was conducted.

30세 이상의 성인 여성을 대상으로 6개의 그룹으로 나누고, 피시험자는 4주 동안 매일 아침, 저녁 세안 후 크림 타입으로 제형화한 화장료를 안면에 고르게 도포하여 충분히 흡수시켰다.Adult women over 30 years old were divided into 6 groups. The subjects were uniformly applied cosmetics formulated in cream form after morning and evening cleansing for 4 weeks.

주름개선 평가를 위하여 ANTERA 3D(Miravex, Ireland)를 적용하였으며, 기기측정은 시험물질 사용 전과 2주 사용 후, 4주 사용 후의 시점에서 이루어졌다. ANTERA 3D (Miravex, Ireland) was applied for evaluation of wrinkle improvement. Instrumentation was performed before the test material was used, after 2 weeks, and after 4 weeks use.

동일한 시험담당자가 모든 피시험자의 왼쪽 눈꼬리부위를 측정하였고, 측정의 재현성을 위하여 시험 물질 사용 전에 측정한 이미지와 오버랩시켜 동일부위를 측정하였다.The same test person measured the left part of the left eye of each subject and the same area was measured by overlapping with the image measured before the test material for the reproducibility of the measurement.

촬영된 이미지는 ANTERA 3D 전용 소프트웨어인 ANTERA pro software를 이용하여 매칭시킨 후 일치된 측정부위를 분석에 사용하였다.The captured images were matched using ANTERA pro software, which is dedicated to ANTERA 3D, and the matched measurement sites were used for analysis.

측정값은 측정변수인 Indentation index를 이용하여 피부의 주름을 나타내는 Wrinkles small값을 분석하였다.The measured values were analyzed using the Indentation index, which is a measurement variable.

표 5에서 실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 사용에 따른 피시험자의 4주 후 Wrinkles small값의 변화량을 나타내었다. 주름 개선 효과가 우수할수록 Wrinkles small 값의 변화량은 크다.Table 5 shows the variation of the Wrinkles small value of the testees after 4 weeks according to the use of the cosmetics formulated into the samples of the examples and the comparative examples. The better the wrinkle improvement effect is, the larger the variation of the wrinkles small value is.

구분division Wrinkles small 평균값Wrinkles small average 실시예 1Example 1 1.561.56 실시예 2Example 2 1.591.59 실시예 3Example 3 1.571.57 비교예 1Comparative Example 1 0.870.87 비교예 2Comparative Example 2 1.021.02 비교예 3Comparative Example 3 0.980.98

표 5를 참조하면, 실시예의 시료를 제형화한 화장료 조성물은 비교예 대비 피부 주름 개선 효과가 현저히 우수하였다. 상기 결과는 스피룰리나 추출물은 마리노박터 센글리엔시스 발효에 의해 피부 주름 개선 활성이 현저히 개선될 수 있음을 시사한다.Referring to Table 5, the cosmetic composition in which the samples of the examples were formulated exhibited remarkably excellent skin wrinkle-improving effect as compared with the comparative example. The above results suggest that the spirulina extract can be remarkably improved in skin wrinkle improving activity by fermentation of Marinobacter aglynisis.

실험예 2-2. 항산화 활성 평가Experimental Example 2-2. Antioxidant activity evaluation

실시예 및 비교예의 추출물을 정제수에 농도별로 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하였다.The extracts of Examples and Comparative Examples were suspended in purified water by concentration to evaluate free radical scavenging activity.

DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540 nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다.The DPPH assay measures absorbance at 540 nm to the extent that the inhibitor decolorizes the stable radical DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical).

실시예 및 비교예의 시료를 1000 μg/mL 농도로 희석하였다. 희석된 용액 100 μL에 5×10-4 M의 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) 100 μL 를 넣고, 1 분간 교반한 후, 25℃ 인큐베이터에서 30 분간 반응시킨 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하였다(표 6).Samples of Examples and Comparative Examples were diluted to a concentration of 1000 μg / mL. 100 μL of 5 × 10 -4 M DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) was added to 100 μL of the diluted solution, stirred for 1 minute, reacted at 25 ° C. for 30 minutes, (Table 6).

구분division DPPHDPPH 소거능Scatters (1000 (1000 μgμg /mL)/ mL) 실시예 1Example 1 78.9 %78.9% 실시예 2Example 2 81.4 %81.4% 실시예 3Example 3 79.5 %79.5% 비교예 1Comparative Example 1 62.1 %62.1% 비교예 2Comparative Example 2 64.6 %64.6% 비교예 3Comparative Example 3 63.4 %63.4%

표 6을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 자유라디컬 소거능이 현저히 우수하였다. 상기 결과는 발효 균주의 차이로 인해 발효된 스피룰리나 추출물의 항산화 활성이 유의적으로 변화하였으며, 마리노박터 센글리엔시스 발효에 의해 항산화 활성이 현저히 개선될 수 있음을 시사한다.Referring to Table 6, the samples of the examples showed remarkably excellent free radical scavenging ability as compared with the comparative examples. The above results indicate that the antioxidant activity of the fermented Spirulina extract was significantly changed due to the difference of fermentation strains and that the antioxidant activity could be remarkably improved by fermentation of Marinobacter aglynisis.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.It will be understood by those skilled in the art that the foregoing description of the present invention is for illustrative purposes only and that those of ordinary skill in the art can readily understand that various changes and modifications may be made without departing from the spirit or essential characteristics of the present invention. will be. It is therefore to be understood that the above-described embodiments are illustrative in all aspects and not restrictive. For example, each component described as a single entity may be distributed and implemented, and components described as being distributed may also be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is defined by the appended claims, and all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims and their equivalents should be construed as being included within the scope of the present invention.

Claims (5)

마리노박터 센글리엔시스(Marinobacter shengliensis)를 접종하여 수득한 스피룰리나 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물. Marinobacter shengliensis ) as an active ingredient. 제1항에 있어서,
상기 발효 추출물은 23 내지 27℃에서 발효시켜 수득한 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The fermented extract is obtained by fermenting at 23 to 27 占 폚.
제2항에 있어서,
상기 발효 추출물은 96 내지 144시간 동안 발효시켜 수득한 화장료 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein the fermentation extract is fermented for 96 to 144 hours.
제3항에 있어서,
항산화용 또는 주름 개선용인 화장료 조성물.
The method of claim 3,
Cosmetic composition for antioxidant or wrinkle improvement.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
스킨, 로션, 크림, 세럼, 에멀젼, 에센스, 파우더, 파운데이션, 스프레이, 마스크팩, 시트팩, 수면팩, 워시오프팩 및 필오프팩으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화된 화장료 조성물.
5. The method according to any one of claims 1 to 4,
The cosmetic composition is formulated as at least one selected from the group consisting of skin, lotion, cream, serum, emulsion, essence, powder, foundation, spray, mask pack, sheet pack, sleep pack, wash off pack and peel off pack.
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