KR20230171468A - Bcma-지시된 t 세포 요법과의 조합 요법 - Google Patents

Bcma-지시된 t 세포 요법과의 조합 요법 Download PDF

Info

Publication number
KR20230171468A
KR20230171468A KR1020237039347A KR20237039347A KR20230171468A KR 20230171468 A KR20230171468 A KR 20230171468A KR 1020237039347 A KR1020237039347 A KR 1020237039347A KR 20237039347 A KR20237039347 A KR 20237039347A KR 20230171468 A KR20230171468 A KR 20230171468A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
days
hours
cells
administration
exactly
Prior art date
Application number
KR1020237039347A
Other languages
English (en)
Inventor
줄리 앤 리틀레브스키
지안프랑코 피타리
Original Assignee
셀진 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 셀진 코포레이션 filed Critical 셀진 코포레이션
Publication of KR20230171468A publication Critical patent/KR20230171468A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/001116—Receptors for cytokines
    • A61K39/001117—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR] or CD30
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/69—Boron compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464416—Receptors for cytokines
    • A61K39/464417—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR], CD30
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
    • A61K2039/804—Blood cells [leukemia, lymphoma]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

B 세포 성숙 항원 (BCMA)을 수반하거나 또는 그와 연관된 것과 같은 질환 및 상태를 갖는 대상체를 치료하기 위한 방법, 조성물, 및 용도가 본원에 제공된다. 일부 측면에서, 본 개시내용은 다발성 골수종을 갖는 대상체의 치료를 위한 것을 포함한, 면역조정제 및 다른 작용제, 예컨대 덱사메타손과 조합된 세포 요법, 예컨대 BCMA-표적화된 T 세포 요법을 투여하는 것을 포함하는 특정 조합 요법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 다발성 골수종은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종이다.

Description

BCMA-지시된 T 세포 요법과의 조합 요법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2021년 4월 16일에 출원된 미국 가출원 번호 63/176,196에 대한 우선권을 주장하며, 그의 내용은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
서열 목록의 참조 포함
본 출원은 전자 포맷의 서열 목록과 함께 제출된다. 서열 목록은 2022년 4월 10일에 생성된, 크기가 328 킬로바이트인 파일명 735042025340SeqList.txt로 제공된다. 전자 포맷의 서열 목록의 정보는 그 전문이 참조로 포함된다.
분야
본 개시내용은 일부 측면에서 B 세포 성숙 항원 (BCMA)을 수반하거나 또는 그와 연관된 것과 같은 질환 및 상태를 갖는 대상체를 치료하기 위한 방법, 조성물, 및 용도에 관한 것이다. 일부 측면에서, 본 개시내용은 다발성 골수종을 갖는 대상체의 치료를 위한 것을 포함한, 면역조정제 및 다른 작용제, 예컨대 덱사메타손과 조합된 세포 요법, 예컨대 BCMA-표적화된 T 세포 요법을 투여하는 것을 포함하는 특정 조합 요법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 다발성 골수종은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종이다.
면역요법을 위한 다양한 전략, 예를 들어 입양 요법을 위한 조작된 T 세포의 투여가 이용가능하다. 예를 들어, 유전자 조작된 항원 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 T 세포를 조작하고, 이러한 세포를 함유하는 조성물을 대상체에게 투여하기 위한 전략이 이용가능하다. 세포의 효능을 개선시키기 위해, 예를 들어 대상체에게 투여 시 세포의 지속성, 활성 및/또는 증식을 개선시키기 위해 개선된 전략이 필요하다. 이러한 필요를 충족시키는 방법, 조성물 및 키트가 제공된다.
일부 실시양태에서, (a) BCMA를 발현하는 암을 갖는 대상체에게, 암에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것; (b) 대상체에게 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물을 투여하는 것; 및 (c) 대상체에게 덱사메타손을 투여하는 것을 포함하는, BCMA를 발현하는 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 다발성 골수종이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)이다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 BCMA에 특이적으로 결합한다.
또한, 일부 실시양태에서, (a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것; (b) 대상체에게 하기 구조를 갖는 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온:
또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물을 투여하는 것; 및 (c) 대상체에게 덱사메타손을 투여하는 것을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손은 공동으로 투여된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여 및 덱사메타손의 투여는 공동으로 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여 및 덱사메타손의 투여는 동일한 날에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손의 용량은 동일한 날에 투여된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여는 T 세포 요법의 투여 전에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여는 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여는 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여는 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물의 투여는 T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 1일, 적어도 또는 약 적어도 2일, 적어도 또는 약 적어도 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 약 적어도 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 약 적어도 7일, 적어도 또는 약 적어도 8일, 적어도 또는 약 적어도 9일, 적어도 또는 약 적어도 10일, 적어도 또는 적어도 약 12일, 적어도 또는 약 적어도 14일, 적어도 또는 적어도 약 15일, 적어도 또는 약 적어도 21일, 적어도 또는 적어도 약 24일, 적어도 또는 약 적어도 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 약 적어도 35일 또는 적어도 또는 약 적어도 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일, 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 후에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 제약상 허용되는 염이거나 또는 이를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 수화물이거나 또는 이를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 용매화물이거나 또는 이를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온이거나 또는 이를 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법 전에, 방법 전의 대상체는 이전에 면역조정 화합물을 투여받지 않았다.
또한, 일부 실시양태에서 (a) BCMA를 발현하는 암을 갖는 대상체에게, 암에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것; 및 (b) 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 포함하는, BCMA를 발현하는 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 다발성 골수종이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)이다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 BCMA에 특이적으로 결합한다.
또한, 일부 실시양태에서 (a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것; 및 (b) 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시된다.
또한, 일부 실시양태에서, BCMA를 발현하는 암을 갖는 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 표준 삼중 요법의 투여가 개시되는 시점에, 대상체는 이전에 암에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받은 것인, BCMA를 발현하는 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 다발성 골수종이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 암은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)이다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 BCMA에 특이적으로 결합한다.
또한, 일부 실시양태에서, 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 표준 삼중 요법의 투여가 개시되는 시점에, 대상체는 이전에 BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받은 것인, 다발성 골수종을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법은 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손의 투여를 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법 전에, 대상체는 이전에 포말리도미드와 조합된 다라투무맙을 투여받지 않았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법은 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손의 투여를 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법 전에, 대상체는 이전에 보르테조밉과 조합된 포말리도미드를 투여받지 않았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여 전에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 또는 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 약 96시간, 72시간, 48시간, 24시간, 12시간, 6시간, 2시간, 또는 1시간 이하 전에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법은 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 56일 (8주) 후에 개시된다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 방법의 제1일에 투여되고, 표준 삼중 요법의 투여는 방법의 정확히 또는 약 제3개월 제1일 (M3D1)에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 1일, 적어도 또는 약 적어도 2일, 적어도 또는 약 적어도 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 약 적어도 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 약 적어도 7일, 적어도 또는 약 적어도 8일, 적어도 또는 약 적어도 9일, 적어도 또는 약 적어도 10일, 적어도 또는 적어도 약 12일, 적어도 또는 약 적어도 14일, 적어도 또는 적어도 약 15일, 적어도 또는 약 적어도 21일, 적어도 또는 적어도 약 24일, 적어도 또는 약 적어도 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 약 적어도 35일 또는 적어도 또는 약 적어도 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일, 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 후에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 1일 내지 360일, 1일 내지 240일, 1일 내지 180일, 1일 내지 120일, 1일 내지 90일, 1일 내지 60일, 2일 내지 360일, 2일 내지 240일, 2일 내지 180일, 2일 내지 120일, 2일 내지 90일, 2일 내지 60일, 3일 내지 360일, 3일 내지 240일, 3일 내지 180일, 3일 내지 120일, 3일 내지 90일, 3일 내지 60일, 4일 내지 360일, 4일 내지 240일, 4일 내지 180일, 4일 내지 120일, 4일 내지 90일, 4일 내지 60일, 5일 내지 360일, 5일 내지 240일, 5일 내지 180일, 5일 내지 120일, 5일 내지 90일, 5일 내지 60일, 6일 내지 360일, 6일 내지 240일, 6일 내지 180일, 6일 내지 120일, 6일 내지 90일, 6일 내지 60일, 7일 내지 360일, 7일 내지 240일, 7일 내지 180일, 7일 내지 120일, 7일 내지 90일, 7일 내지 60일, 14일 내지 360일, 14일 내지 240일, 14일 내지 180일, 14일 내지 120일, 14일 내지 90일, 14일 내지 60일, 21일 내지 360일, 21일 내지 240일, 21일 내지 180일, 21일 내지 120일, 21일 내지 90일, 21일 내지 60일, 28일 내지 360일, 28일 내지 240일, 28일 내지 180일, 28일 내지 120일, 28일 내지 90일, 28일 내지 60일, 35일 내지 360일, 35일 내지 240일, 35일 내지 180일, 35일 내지 120일, 35일 내지 90일, 35일 내지 60일, 42일 내지 360일, 42일 내지 240일, 42일 내지 180일, 42일 내지 120일, 42일 내지 90일, 42일 내지 60일, 49일 내지 360일, 49일 내지 240일, 49일 내지 180일, 49일 내지 120일, 49일 내지 90일, 또는 49일 내지 60일 (각각 경계값 포함) 후에 개시된다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 유전자 조작된 T 세포의 용량은 정확히 또는 약 5 x 107개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 유전자 조작된 T 세포의 용량은 정확히 또는 약 1 x 108개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 유전자 조작된 T 세포의 용량은 정확히 또는 약 4.5 x 108개 CAR+ T 세포이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법은 대상체로부터의 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법은 대상체로부터의 조직 샘플에서 인터류킨-6 (IL-6)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법은 대상체로부터의 조직 샘플에서 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 약 0.5 g/dL 이상의 혈청 M-단백질 수준 또는 약 200 mg/24시간 이상의 뇨 M-단백질 수준을 갖는다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, R/R MM은 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 약 10 mg/dL 이상의 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 수준 또는 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비를 갖는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 방법 전에, 대상체는 R/R MM을 치료하기 위한 1종 이상의 선행 요법을 제공받았다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 상기 1종 이상의 선행 요법은 면역조정제를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 면역조정제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 R/R MM을 치료하기 위한 1 내지 3종의 선행 요법을 제공받았다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 R/R MM을 치료하기 위한 적어도 3종의 선행 요법을 제공받았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 1종 이상의 선행 요법은 항-CD38 항체 및 프로테아솜 억제제를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 항-CD38 항체 및/또는 프로테아솜 억제제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법에 대해 재발성 또는 불응성이었다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법의 마지막 6개월 동안 또는 그 내에 진행성 질환 (PD)을 나타내었다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법 중 적어도 1종에 대해 최소 반응 또는 보다 양호한 반응을 나타내었다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 1종 이상의 선행 요법은 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 유전자 요법-기반 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA-표적화 요법을 포함하지 않는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체는 백혈구분리반출술 전 12주 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체는 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 대상체는 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 BCMA에 결합하는 항원 결합 도메인, 막횡단 도메인, 및 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄를 포함하는 세포내 신호전달 영역을 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 항원 결합 도메인은 단일 쇄 가변 단편 (scFv)이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, CAR, 예를 들어 항원 결합 도메인은 VH 및 VL 영역을 포함하며, 여기서 VH 영역은 서열식별번호(SEQ ID NO): 62에 제시된 CDR-H1, 서열식별번호: 63에 제시된 CDR-H2 및 서열식별번호: 64에 제시된 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 65에 제시된 CDR-L1, 서열식별번호: 66에 제시된 CDR-L2 및 서열식별번호: 67에 제시된 CDR-H3을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 항원 결합 도메인은 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 30에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VH 영역, 및 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 31에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VL 영역을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 항원 결합 도메인은 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VH 영역 및 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VL 영역을 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 항원 결합 도메인은 서열식별번호: 68에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 68에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 scFv이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 항원 결합 도메인은 서열식별번호: 68에 제시된 바와 같은 scFv이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 세포내 신호전달 영역은 공동자극 신호전달 영역을 추가로 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 공동자극 신호전달 영역은 CD28, 4-1BB 또는 ICOS의 세포내 신호전달 도메인 또는 그의 신호전달 부분을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 공동자극 신호전달 영역은 4-1BB, 임의로 인간 4-1BB의 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 공동자극 신호전달 영역은 인간 4-1BB의 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 공동자극 신호전달 영역은 막횡단 도메인과 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄의 세포질 신호전달 도메인 사이에 있다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 막횡단 도메인은 인간 CD8로부터의 막횡단 도메인이거나 또는 이를 포함한다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 항원 결합 도메인과 막횡단 도메인 사이에 세포외 스페이서를 추가로 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 스페이서는 정확히 또는 약 50개 아미노산 내지 정확히 또는 약 250개 아미노산이다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, 스페이서는 CD8 힌지이다.
제공된 방법 중 임의의 것 중 일부에서, CAR은 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열 또는 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, CAR은 서열식별번호: 152에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 152에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 ABECMA®이다.
제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 실타캅타진 오토류셀 세포를 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것의 일부에서, T 세포 요법은 CARVYKTI™이다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하는 방법에 사용하기 위한, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법, (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물, 및 덱사메타손 중 1종 이상, 예를 들어 모두를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법이 제공된다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하는 방법에서의, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법, (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물, 및 덱사메타손 중 1종 이상, 예를 들어 모두를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법의 용도가 제공된다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하기 위한 의약의 제조를 위한, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법, (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물, 및 덱사메타손 중 1종 이상, 예를 들어 모두를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법의 용도가 제공된다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온이다. 제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 제약상 허용되는 염이다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 덱사메타손은 저용량 투여를 위해 제제화된다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하는 방법에 사용하기 위한, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법 및 표준 삼중 요법 중 하나 또는 둘 다, 예를 들어 둘 다를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법이 제공된다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하는 방법에서의, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법 및 표준 삼중 요법 중 하나 또는 둘 다, 예를 들어 둘 다를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법의 용도가 제공된다.
또한, 제공된 방법 중 임의의 것에 따라 다발성 골수종을 치료하기 위한 의약의 제조를 위한, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법 및 표준 삼중 요법 중 하나 또는 둘 다, 예를 들어 둘 다를 포함하는 요법, 예를 들어 조합 요법의 용도가 제공된다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법은 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손을 포함한다. 제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 표준 삼중 요법은 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손을 포함한다.
제공된 실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 덱사메타손은 저용량 투여를 위해 제제화된다.
암 또는 증식성 질환을 갖는 대상체의 치료를 위한, 예컨대 T 세포 기능 또는 활성으로 인해 세포독성 활성을 갖는 면역 세포의 입양 요법에 의한, CAR-T 세포 요법을 포함한 세포 면역요법의 투여를 1종 이상의 조합 작용제와 조합하여 수반하는 조합 요법이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 세포 요법, 예컨대 CAR T 세포 요법은 BCMA-표적화 세포 요법이다. 일부 실시양태에서, 조합 요법은 재발성 및 불응성 (R/R) 다발성 골수종을 비롯한 다발성 골수종을 치료하는 데 사용된다. 제공된 방법 및 조합 요법은 암 또는 증식성 질환, 예컨대 다발성 골수종을 치료하기 위해 대상체에의 투여 후 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법, 예컨대 BCMA-표적화 CAR T 세포 요법)의 세포의 활성을 강화시키기 위해, 예컨대 세포 요법의 세포의 활성 및 지속성, 예컨대 지속적인 활성을 증가시키기 위해 투여되는 특정 면역조정 화합물 및 작용제를 수반하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 면역조정 화합물, 예컨대 탈리도미드의 구조적 또는 기능적 유사체 및/또는 E3-유비퀴틴 리가제의 억제제의 투여, 및 T 세포 요법, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어 예컨대 T 세포 요법을 위한 세포 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)를 포함하는 조성물의 투여를 수반한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온
또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 호변이성질체 또는 라세미 혼합물 (화합물 A)을 포함한다. (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 (화합물 A)은 세레블론 E3 리가제 조정 화합물 (CELMoD)이다. 화합물 A는 CRBN을 조정하고, 이는 전사 인자 아이올로스 및 이카로스의 유비퀴틴화를 유도하여, 그의 프로테아솜 의존성 분해를 증가시키고 T 세포 기능을 증대시킨다. 화합물 A는 CRBN에 보다 강력하게 결합하고, 레날리도미드 및 포말리도미드보다 아이올로스 및 이카로스를 분해하는 데 더 효율적이고, 림프종 세포에 대해 강력한 직접 항증식 효과를 갖는다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 덱사메타손을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 화합물 A 및 덱사메타손을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 표준 삼중 요법, 예를 들어 암 또는 증식성 질환, 예컨대 다발성 골수종의 치료를 위한 표준인 삼중 요법의 일부로서 주어지는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 표준 삼중 요법의 일부로서 또는 그에 따라 투여된다. 일부 실시양태에서, 암 또는 증식성 질환은 다발성 골수종 (MM), 예를 들어 재발성 또는 불응성 MM (R/R MM)이다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 MM, 예를 들어 R/R MM의 치료를 위한 표준인 삼중 요법의 일부로서 투여되는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 표준 삼중 요법을 위한 조합 작용제는 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손을 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 표준 삼중 요법을 위한 조합 작용제는 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손을 포함한다. 제공된 방법 중 임의의 것에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다.
제공된 실시양태 중에는 BCMA 및 BCMA-발현 세포 및 질환을 표적화하거나 또는 그에 대해 지시된 세포 면역요법, 예컨대 T 세포 요법을 수반하는 조합 치료가 있다. BCMA는 특정 질환 및 상태, 예컨대 악성종양 또는 그의 조직 또는 세포 상에서, 예를 들어 악성 형질 세포 상에서, 예컨대 모든 재발성 또는 새로이 진단된 골수종 환자로부터 발현되며, 예를 들어 이종 발현되며, 예를 들어 정상 조직 상에서는 거의 발현되지 않는 것으로 관찰된다. 제공된 실시양태 중에는 BCMA-결합 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR), 및 코딩된 수용체 예컨대 코딩된 CAR을 코딩하는 핵산 분자에 의해 조작된 면역 세포, 예컨대 T 세포 또는 NK 세포를 함유하는 세포 면역요법, 및 이를 포함하는 조성물 및 제조 물품을 투여하는 것에 의하는 것을 포함한, 이러한 질환 및 상태의 치료에 및/또는 이러한 세포 유형을 표적화하는 데 유용한 접근법이 있다. 수용체, 예컨대 CAR은 일반적으로 BCMA에 특이적인 항체 (항원-결합 항체 단편, 예컨대 중쇄 가변 (VH) 영역, 단일 도메인 항체 단편 및 단일 쇄 단편, 예컨대 scFv 포함)로부터 유래된 항원-결합 도메인을 함유할 수 있다.
치료될 질환 중에는 BCMA와 연관된 임의의 질환 또는 장애, 또는 BCMA가 특이적으로 발현되고/거나 BCMA가 치료를 위해 표적화되는 임의의 질환 또는 장애 (또한 본원에서 "BCMA-연관 질환 또는 장애"로 상호교환가능하게 지칭됨)가 있다. BCMA 발현과 연관된 암은 혈액 악성종양 예컨대 다발성 골수종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 뿐만 아니라 호지킨 및 비-호지킨 림프종 둘 다를 포함한다. BCMA의 검토를 위해 문헌 [Coquery et al., Crit Rev Immunol., 2012, 32(4):287-305]을 참조한다. BCMA는 종양 세포 생존을 매개하는 데 연루되어 왔기 때문에, 이는 암 요법에 대한 잠재적 표적이다. 마우스 항-인간 BCMA 항체를 함유하는 키메라 항원 수용체 및 이러한 키메라 수용체를 발현하는 세포는 이전에 기재된 바 있다. 문헌 [Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060]을 참조한다.
일부 측면에서, 제공된 방법은 세포 면역요법, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어 예컨대 T 세포 요법을 위한 세포 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)를 포함하는 조성물의 투여와 연관된 T 세포 활성의 증식 및/또는 활성을 증진시키거나 또는 조정한다.
일부 실시양태에서, 조합 요법은 덱사메타손의 투여를 수반한다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 면역조정 화합물 (예를 들어, 화합물 A) 및 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포)과 조합되어 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포)과 조합되어 투여되는 표준 삼중 요법의 일부로서 투여된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 DPd 요법 (예를 들어, 다라투무맙, 포말리도미드, 및 덱사메타손 포함)이다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 PVd 요법 (예를 들어, 포말리도미드, 보르테조밉, 및 덱사메타손 포함)이다.
T 세포-기반 요법, 예컨대 입양 T 세포 요법 (관심 질환 또는 장애에 특이적인 키메라 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR) 및/또는 다른 재조합 항원 수용체를 발현하는 세포의 투여를 수반하는 것, 뿐만 아니라 다른 입양 면역 세포 및 입양 T 세포 요법 포함)은 암 및 다른 질환 및 장애의 치료에 효과적일 수 있다. T 세포의 표면 상에서의 재조합 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR)의 조작된 발현은 T-세포 특이성의 재지시를 가능하게 한다.
특정 문맥에서, 입양 세포 요법에 대한 이용가능한 접근법은 항상 완전히 만족스럽지 않을 수 있다. 예를 들어, 특정 경우에, CAR T 세포 지속성이 많은 대상체에서 검출될 수 있지만, 일부 대상체에서 반응은 일시적이고, 대상체는 지속적 CAR T 세포의 존재 하에 재발하는 것으로 밝혀졌다.
일부 측면에서, 이에 대한 설명은 순환 CAR-발현 T 세포의 면역학적 소진 및/또는 T 림프구 집단의 변화이다. 일부 문맥에서, 최적 효능은 투여된 세포가 표적, 예를 들어 표적 항원을 인식하고 그에 결합하고, 대상체, 종양 및 그의 환경 내의 적절한 부위에 트래픽킹되고, 그에 국재화되고, 성공적으로 진입하는 능력에 좌우될 수 있다. 일부 문맥에서, 최적 효능은 투여된 세포가 활성화되고, 확장되고, 세포독성 사멸 및 시토카인과 같은 다양한 인자의 분비를 포함한 다양한 이펙터 기능을 발휘하고, 장기간을 포함하여 지속되고, 특정 표현형 상태 (예컨대, 장기 기억, 덜 분화된, 및 이펙터 상태)로의 재프로그래밍으로 분화, 이행 또는 관여하고, 질환의 국부 미세환경에서의 면역억제 상태를 회피하거나 감소시키고, 클리어런스 및 표적 리간드 또는 항원에 대한 재노출 후 효과적이고 강건한 회상 반응을 제공하고, 소진, 무반응, 말초 관용, 말단 분화 및/또는 억제 상태로의 분화를 회피하거나 감소시키는 능력에 좌우될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조작된 세포의 노출 및 지속성은 대상체에게의 투여 후에 감소 또는 저하된다. 그러나, 관찰은, 일부 경우에, 재조합 수용체를 발현하는 투여된 세포에 대한 대상체의 증가된 노출 (예를 들어, 시간 경과에 따른 증가된 세포의 수 또는 지속기간)이 입양 세포 요법에서 효능 및 치료 결과를 개선시킬 수 있다는 것을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 장기간 자극 또는 항원에 대한 노출 및/또는 종양 미세환경에서의 조건 하에서의 노출 후에, T 세포는 시간 경과에 따라 기능저하되고/거나 소진 상태와 연관된 특색을 나타낼 수 있다. 일부 측면에서, 이는 항원에 대한 T 세포의 지속성 및 효능을 감소시키고, 효과적인 능력을 제한한다. CAR T 세포의 효능 및 기능을 개선시키는, 특히 기능저하 또는 소진 상태를 최소화, 감소, 예방 또는 역전시키는 방법에 대한 필요가 존재한다.
화합물 A는 이카로스 패밀리 전사 인자의 분해를 통해 악성 림프구 생존에 직접적으로 영향을 미치는 것으로 나타났다. 화합물 A에 대한 분자 표적은 쿨린 4 링 E3 유비퀴틴 리가제 복합체의 기질 수용체인 단백질 세레블론 (CRBN)으로서 확인되었다. CRBN 내의 소수성 트리-트립토판 포켓에 대한 결합은 아이올로스 (IKZF3) 및 이카로스 (IKZF1)를 포함한 여러 단백질 기질의 동원, 유비퀴틴화, 및 후속 프로테아솜 분해를 촉진한다. 이카로스는 골수 분화의 미성숙 단계에서 발현되고, 초기 호중구 분화를 조절한다 (Dumortier et al., (2003) Blood 101:2219). 따라서, 일부 경우에, 예컨대 대상체에게 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A를 투여하는 것에 의한 이카로스의 고갈은 일부 경우에 호중구감소증을 유발할 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합 요법을 제공하는 것은 세포 요법 및 화합물 A의 조합의 결과로서 독성, 예컨대 호중구감소증, 및 시토카인 방출 증후군 (CRS) 또는 신경독성을 포함한 다른 독성의 위험을 감소시키거나 완화시킨다.
악성 B 세포에 대한 그의 세포 자율 활성에 더하여, E3 리가제 조정 화합물, 예컨대 화합물 A는 또한 면역 세포, 예컨대 T 및 NK-세포에 대해 공동-자극 효과를 발휘한다. 이러한 활성은 또한 활성화 분자 및 시토카인, 예컨대 인터류킨-2 (IL-2) 발현의 음성 조절제인 아이올로스 및 이카로스의 CRBN 매개된 분해를 통한 것으로 나타났다. (Gandhi, Br J Haematol. 2014 Mar;164(6):811-21, Kroenke, Oncoimmunology, 2014; 3(7): e941742.).
일부 측면에서, 제공된 방법의 일부로서 투여되는 조합 작용제는 1종 이상의 시토카인을 생산하는 능력, 세포독성, 확장, 증식 및 T 세포의 지속성과 관련된 기능을 포함한 T 세포 기능을 개선시킬 수 있다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)의 투여와 연관된 T 세포 활성의 증식 및/또는 활성을 증진시키거나 또는 조정한다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 개선된 또는 더 큰 T 세포 기능성, 및 이에 의해 개선된 항종양 효능을 달성한다.
일부 측면에서, 제공된 방법의 일부로서 투여되는 조합 작용제는 T 세포 신호전달을 증가시키고/거나 만성 (장기간) 자극 후에 차별적으로 조절되는 1종 이상의 유전자를 변경시키는 것에 의하는 것을 포함하여, T 세포 소진을 역전, 지연 또는 방지하는 효과를 나타낼 수 있다. 따라서, 일부 경우에 T 세포 활성을 증가시키거나 강화시키는 작용제가 세포를 소진 상태로 구동시킬 수 있는 한편, 일부 측면에서 T 세포 활성에 대해 강화 효과를 발휘하기 위해 제공된 방법의 일부로서 투여된 조합 작용제의 활성은 T 세포 소진으로 인해 분리될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 조합 작용제의 투여를 수반하는 제공된 방법은 나이브 T 세포의 활성을 강화시키고, 소진을 지연, 제한, 감소, 억제 또는 방지할 수 있다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 또한 특정 대안적 방법과 비교하여, 예컨대 치료된 대상체의 특정한 군에서 개선된 또는 보다 지속적인 반응을 달성할 수 있다.
일부 측면에서, 제공된 방법의 일부로서 투여되는 조합 작용제는 항원과의 마주침 후를 포함하여 활성화 후에 T 세포 요법의 세포 (예를 들어, CAR-T 세포)의 계속적인 기능 및/또는 생존을 촉진할 수 있다. 일부 측면에서, 제공된 방법의 일부로서 투여되는 조합 작용제는 예컨대 소진 또는 세포 사멸을 방지함으로써 장기간 지속되거나 기능하는 이러한 T 세포의 능력을 증가시킬 수 있다. 특정한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 조합 요법은 CAR T 세포의 지속적인 항종양 기능을 개선시킴으로써 종양 미세환경을 조정함으로써 B 세포 악성종양 전반에 걸쳐 CAR T 세포의 활성을 증진시키고 연장시키기 위한 유용한 치료 접근법을 제공할 수 있다. 일부 경우에, 본원에 제공된 방법의 일부로서 투여되는 조합 작용제는 또한 림프종 세포에 대해 직접적인 항종양 효과를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 개선은 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-T 세포) 또는 조합 작용제 단독의 투여를 수반하는 단독요법으로 치료된 대상체에서와 비교하여 개선된 전체 반응, 예를 들어, 종양 부담의 감소, 및/또는 증가된 생존을 나타내는 조합 요법을 생성할 수 있다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 전체 반응 및/또는 생존을 대안적 치료와 비교하여, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-T 세포) 또는 조합 작용제 단독의 투여를 수반하는 단독요법과 비교하여 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 10-배 초과 또는 그 초과만큼 증가시킬 수 있다.
제공된 방법은 조합 작용제를 T 세포 조정 효과를 나타내는 유효량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 예시적인 조합 작용제의 특정한 투여량은 T 세포 요법, 예를 들어 CAR-T 세포 요법의 T 세포 기능을 증가 또는 증진시킬 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제와의 조합은, 1종 이상의 결과 또는 기능적 속성을 개선시키면서, 1종 이상의 부작용 또는 T 세포에서의 원치 않는 변화에 영향을 미치지 않고, 예컨대, 조합 작용제가 부재하는 것을 제외하고는 달리 동일한 조건 하에 배양된 이러한 세포와 비교하여, 예를 들어 시험관내 검정에서 측정된 바와 같이, 세포가 활성화되고/거나, 1종 이상의 목적하는 시토카인을 분비하고/거나, 확장되고/거나, 지속되는 능력을 감소시키지 않는다. 따라서, 일부 실시양태에서, 일반적으로 기능성, 예를 들어 CAR-T 세포 기능성의 1종 이상의 다른 목적하는 특성을 손상시키지 않으면서, T 세포 기능 또는 표현형, 예를 들어 내인성 T 세포 기능성 및/또는 내인성 T 세포 표현형의 개선을 발생시키는 방법 및 조합이 제공된다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 T 세포 요법, 예를 들어 CAR-T 세포 요법을 강화시킬 수 있고, 이는 일부 측면에서 치료에 대한 결과를 개선시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법의 세포가 약한 확장을 나타내거나, 소진되거나, 대상체에서 저하되거나 감소된 지속성을 나타내는 대상체에서 및/또는 다른 요법에 대해 저항성 또는 불응성인 암, 공격성 또는 고위험 암, 및/또는 또 다른 유형의 암과 비교하여 또는 상이한 CAR-T 세포 요법으로의 투여와 비교하여 조합 작용제 없이 투여된 CAR-T 세포 요법에 대해 상대적으로 더 낮은 반응률을 나타낼 가능성이 있는 암을 갖는 대상체에서 특히 유리하다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포)이 소진의 특색을 나타낼 수 있거나 나타낼 가능성이 있는 시점에 사용된다. 일부 실시양태에서, 소진 표현형은 피크 확장에 도달한 T 세포가 대상체의 혈액에서 수적으로 감소하기 시작한 후에 명백하다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 항원에 대한 T 세포의 노출 직전의 시간 (기준선)과 비교하여 T 세포가 기능저하 또는 소진 상태의 증가를 나타내는 시간 또는 세포가 항원에 노출되었지만 계속 증식하고 아직 피크 확장에 도달하지 않은 시점에 수행된다. 일부 실시양태에서, 기능저하 또는 소진 상태의 증가는 이전의 보다 이른 시점과 비교하여 소진 마커의 증가된 발현에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 기능저하 또는 소진 상태의 증가, 예컨대 소진 마커의 발현의 증가는 T 세포 요법에 의해 표적화되는 항원과 연관된 질환 또는 상태를 갖는 대상체에게 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포)을 투여한 후의 시점이다. 대상체에게 투여 후 T 세포, 예컨대 말초 혈액 내의 T 세포는 T 세포 활성화 또는 소진의 마커, 예컨대 PD-1, TIM-3, 및 LAG-3에 대해 모니터링될 수 있다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법, 예를 들어, CAR-T 세포의 투여를 제공받은 대상체는 대상체, 예컨대 대상체의 생물학적 샘플, 예를 들어, 대상체의 혈액에서 요법의 T 세포의 존재, 부재 또는 수준에 대해 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-T 세포)을 제공받았지만 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-T), 일부 경우에 이러한 동일한 T 세포 요법 (예를 들어, 동일한 CAR-T 세포)이 투여된 복수의 대상체에서 대상체에서의 CAR-T 세포의 강력하거나 강건한 확장이 전형적으로 관찰되는 시점에 이러한 세포가 약하게 확장되고/거나 대상체의 샘플, 예를 들어 혈액 샘플에서 역치 수준이거나 그 미만인 대상체에게 투여된다.
특정 측면에서, 제공된 방법은 T 세포 요법에 대한 피크 반응이 관찰되었지만 반응, 예를 들어 T 세포의 존재 및/또는 종양 부담의 감소가 감소되거나 더 이상 검출가능하지 않은 대상체에서 T 세포 요법을 증진, 증가 또는 강화시킬 수 있다. 일부 측면에서, 조합 작용제는 (i) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가, 혈액에서 검출가능한 후에, 검출가능하지 않거나 또는 감소되고, 임의로 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점과 비교하여 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가 T 세포 요법의 투여의 개시 후에 대상체의 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 수의 세포의 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 10-배 초과 또는 그 초과만큼 감소되고/거나; (iv) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능한 후의 시점에, 대상체로부터의 혈액에서 검출가능한 T 세포의 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 내의 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로의 치료 후에 질환 진행을 나타내고/거나 완화 후에 재발하였고/거나; (iv) 대상체가 T 세포의 투여 전 또는 후 및 조합 작용제의 투여의 개시 전의 시점에서의 종양 부담과 비교하여 증가된 종양 부담을 나타낸 후 1주 내, 예컨대 1, 2 또는 3일 내에 대상체에게 투여된다.
일부 실시양태에서, 방법은 질환 또는 상태, 예를 들어 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법 단독, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어 예컨대 T 세포 요법을 위한 세포 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)를 포함하는 조성물로의 치료에 대한 반응, 예를 들어 완전 반응이 다른 T 세포 요법으로의 치료 또는 다른 질환 또는 악성종양의 치료와 비교하여 비교적 낮고/거나 (예를 들어, 이렇게 치료된 대상체의 정확히 또는 약 60% 미만, 약 50% 미만 또는 약 45% 미만의 CR) 대상체가 조합 작용제 단독으로의 치료에 반응성이지 않은 이러한 질환, 상태 또는 악성종양을 치료하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 조합 요법은 T 세포 요법, 예컨대 입양 세포 요법을 위한 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포를 포함하는 조성물의 투여의 개시 후에, 대상체가 T 세포 요법으로의 치료 후에 완화 후 재발한 암을 갖는 대상체에서 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 이러한 완화 후 재발한 대상체에게 조합 작용제가 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 조합 요법은 투여되는 조합 작용제의 양이, 단일 작용제로서 및/또는 T 세포 요법의 투여의 부재 하에서, 질환 또는 상태 또는 그의 증상 또는 결과를 호전, 감소 또는 예방하기에 불충분한, 예컨대 대상체에서 질환 또는 상태 또는 그의 증상 또는 결과를 호전, 감소 또는 예방하기에 불충분한 질환 또는 상태, 예를 들어 암을 갖는 대상체에서 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 방법은 이에 의해 질환 또는 상태의 증상 또는 결과 또는 부담을 (i) 임의로 질환 또는 상태를 갖는 대상체의 집단에서 평균적으로, 면역조정제 단독의 투여에 의해 달성되는 감소 또는 호전의 정도, 및 (ii) 임의로 질환 또는 상태를 갖는 대상체의 집단에서 평균적으로, T 세포 요법 단독의 투여에 의한 감소 또는 호전의 정도의 조합보다 더 큰 정도로 감소 또는 호전시킨다. 일부 실시양태에서, 방법은 질환의 이러한 증상, 결과 또는 부담을, 예를 들어 질환 또는 상태를 갖는 대상체 집단에서의 평균과 비교하여, 정확히 또는 약 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 6.0-배, 7.0-배, 8.0-배, 9.0-배, 10.0-배, 20.0-배, 30.0-배, 40.0-배, 50.0-배 초과 또는 그 초과로 감소 또는 호전시킨다.
제공된 방법의 일부 실시양태에서, 투여된 유전자 조작된 세포의 1종 이상의 특성은 참조 조성물의 투여된 세포와 비교하여 개선 또는 증가될 수 있거나 또는 더 클 수 있고, 예컨대 대상체에서 이러한 투여된 세포의 확장 및/또는 지속성이 증가되거나 더 길 수 있거나 또는 항원으로의 재자극 시 회상 반응이 증가되거나 또는 더 클 수 있다. 일부 실시양태에서, 증가는 참조 세포 조성물의 투여 시 동일한 특성 또는 특색과 비교하여 이러한 특성 또는 특색의 적어도 1.2-배, 적어도 1.5-배, 적어도 2-배, 적어도 3-배, 적어도 4-배, 적어도 5-배, 적어도 6-배, 적어도 7-배, 적어도 8-배, 적어도 9-배, 또는 적어도 10-배 증가일 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 특성 또는 특색 중 1종 이상의 증가는 유전자 조작된 세포의 투여 및 조합 작용제의 투여의 개시 후 7일, 14일, 21일 내에, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월 또는 12개월 내에 관찰될 수 있거나 또는 존재한다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 조합 작용제 및 림프구고갈 요법의 임의의 골수억제 효과가 최소화되도록 림프구고갈 요법을 제공받고 충분한 시간 후에 대상체에게 투여된다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은, 예컨대 특정의 다른 세포 요법 또는 면역조정 약물 요법과 비교하여, 독성 또는 독성 결과의 높은 비율 또는 가능성을 발생시키지 않거나, 또는 독성 또는 독성 결과, 예컨대 신경독성 (NT), 시토카인 방출 증후군 (CRS), 또는 혈액학적 독성, 예컨대 호중구감소증의 비율 또는 가능성을 감소시킨다.
일부 실시양태에서, 방법은 특정 혈액학적 독성, 예컨대 호중구감소증 또는 혈소판감소증을 발생시키지 않거나 또는 그의 위험을 증가시키지 않는다. 일부 실시양태에서, 대상체의 50% 이하는 등급 3보다 높은 호중구감소증, 예컨대 연장된 등급 3 호중구감소증 또는 등급 4 호중구감소증, 및/또는 등급 3보다 높은 혈소판감소증, 예컨대 등급 3 또는 등급 4 혈소판감소증을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체의 적어도 50% (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 등급 3 또는 등급 3보다 높은 중증 호중구감소증 또는 중증 혈소판감소증을 나타내지 않는다.
일부 실시양태에서, 방법은 중증 NT (sNT), 중증 CRS (sCRS), 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 3일 이상 동안 적어도 정확히 또는 약 38℃의 발열 및 적어도 정확히 또는 약 20 mg/dL의 CRP 혈장 수준을 유발하지 않거나, 또는 그의 위험을 증가시키지 않는다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 치료된 대상체의 정확히 또는 약 30%, 35%, 40%, 50%, 55%, 60% 초과 또는 그 초과는 어떠한 등급의 CRS 또는 어떠한 등급의 신경독성도 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 치료된 대상체의 50% 이하 (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 등급 2보다 높은 시토카인 방출 증후군 (CRS) 및/또는 등급 2보다 높은 신경독성을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체의 적어도 50% (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 중증 독성 결과 (예를 들어, 중증 CRS 또는 중증 신경독성)를 나타내지 않고, 예컨대 등급 3 이상의 신경독성을 나타내지 않고/거나 중증 CRS를 나타내지 않거나, 또는 치료 후 특정 기간 내에, 예컨대 세포의 투여의 1주, 2주 또는 1개월 내에 나타내지 않는다.
일부 경우에, 조합 작용제는 세포를 효율적으로/효과적으로 부스팅 또는 프라이밍할 수 있는 시점에 투여된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능한 때 또는 그 전에 개시된다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 T 세포 요법, 예를 들어 CAR-T 세포 요법을 강화시킬 수 있고, 이는 일부 측면에서 치료에 대한 결과를 개선시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법의 세포가 약한 확장을 나타내거나, 소진되거나, 대상체에서 저하되거나 감소된 지속성을 나타내는 대상체에서 및/또는 다른 요법에 대해 저항성 또는 불응성인 암 및/또는 공격성 또는 고위험 암을 갖는 대상체에서 특히 유리하다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법, 예를 들어, CAR-T 세포의 투여를 제공받은 대상체는 대상체, 예컨대 대상체의 생물학적 샘플, 예를 들어, 대상체의 혈액에서 요법의 T 세포의 존재, 부재 또는 수준에 대해 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 투여되는 대상체에서 증가된 지속성 및/또는 보다 양호한 효력을 갖는 유전자 조작된 세포를 생성한다. 일부 실시양태에서, 대상체에서 유전자 조작된 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포의 지속성은 T 세포 요법의 투여는 수반하지만 조합 작용제의 투여는 부재하는 것과 같은 대안적 방법에 의해 달성될 것과 비교하여 더 크다. 일부 실시양태에서, 지속성은 적어도 또는 약 적어도 1.5-배, 2-배, 3-배, 4-배, 5-배, 6-배, 7-배, 8-배, 9-배, 10-배, 20-배, 30-배, 50-배, 60-배, 70-배, 80-배, 90-배, 100-배 또는 그 초과로 증가된다.
일부 실시양태에서, 투여된 세포의 지속성 정도 또는 크기는 대상체에게의 투여 후에 검출 또는 정량화될 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, 정량적 PCR (qPCR)은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 기관 또는 조직 (예를 들어, 질환 부위)에서 재조합 수용체를 발현하는 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포)의 양을 평가하는 데 사용된다. 일부 측면에서, 지속성은 DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 코딩하는 DNA 또는 플라스미드의 카피로서, 또는 샘플, 예를 들어 혈액 또는 혈청 마이크로리터당, 또는 샘플 마이크로리터당 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 또는 백혈구 또는 T 세포의 총수당 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포의 수로서 정량화된다. 일부 실시양태에서, 일반적으로 수용체에 특이적인 항체를 사용하여 수용체를 발현하는 세포를 검출하는 유동 세포측정 검정이 또한 수행될 수 있다. 세포-기반 검정은 또한 기능적 세포, 예컨대 질환 또는 상태의 세포에 결합하고/거나, 그에 대한 반응, 예를 들어 세포독성 반응을 중화 및/또는 유도하거나 또는 수용체에 의해 인식되는 항원을 발현할 수 있는 세포의 수 또는 백분율을 검출하는 데 사용될 수 있다. 이러한 실시양태 중 임의의 것에서, 재조합 수용체 (예를 들어, CAR-발현 세포)와 연관된 또 다른 마커의 발현의 정도 또는 수준은 투여된 세포를 대상체의 내인성 세포와 구별하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 반응의 지속성을 증진, 증가 또는 최적화하기 위해 일정 기간 동안 투여된다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 3개월, 예컨대 일반적으로 6개월째에 완전 완화 (CR)를 달성하거나 또는 그러한 상태에 있는 대상체가 치료 종료 후 또는 조합 요법의 투여 후 완전 반응 (CR)을 처음 달성한 후 정확히 또는 약 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월 초과 또는 그 초과 동안 생존하거나 진행 없이 생존하는 것과 같은, 보다 장기간 반응을 지속할 가능성이 더 크다는 관찰에 기초한다. 일부 측면에서, 방법은 T 세포 요법의 투여의 개시 후 적어도 3개월, 예컨대 적어도 4개월, 적어도 5개월 또는 적어도 6개월인 기간 동안 조합 작용제를 투여하기 위해 수행된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 적어도 6개월 또는 적어도 180일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 기간의 말미에, 대상체가 CR을 나타내는 경우 또는 질환 또는 상태가 치료 (조합 요법)를 받은 후 완화 후에 대상체에서 진행되거나 재발된 경우에, 조합 작용제의 투여는 종료 또는 정지된다. 일부 측면에서, 조합 작용제의 연속 투여는 기간의 말미에 (예를 들어, 정확히 또는 약 6개월에) 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD)을 나타내는 대상체에서 수행될 수 있다. 다른 측면에서, 기간은 고정된 지속기간이고, 조합 작용제의 추가의 투여는 수행되지 않는다.
일부 측면에서, 제공된 방법 및 용도는 예컨대 치료되는 대상체의 특정한 군에서 특정 대안적 방법, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 T 세포 요법 또는 조합물을 단독요법으로서 투여하거나 또는 조합 요법으로서 함께 투여하지 않고 투여하는 것을 포함하는 방법과 비교하여 개선된 또는 보다 지속적인 반응 또는 효능을 제공하거나 달성한다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어 예컨대 T 세포 요법을 위한 세포 (예를 들어, CAR-발현 T 세포) 및 조합 작용제를 포함하는 조성물을 투여하는 것에 의해 유리하다. 일부 실시양태에서, 이러한 반응은 불량한 예후, 예컨대 표준 요법에 대해 재발성이거나 불응성 (R/R)이거나 불량한 예후를 갖는 다발성 골수종을 갖는 고위험 환자에서 관찰된다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품, 키트 또는 조성물로 치료된 대상체의 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 또는 적어도 75% 또는 그 초과는 완전 반응 (CR)을 달성한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 CR 상태이고, 최소 잔류 질환 (MRD)을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 대상체는 CR 상태이고, MRD-이다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품, 키트 또는 조성물로 치료된 대상체의 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%는 부분 반응 (PR)의 객관적 반응을 달성한다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품, 키트 또는 조성물로 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 초과는 세포 요법의 투여 개시 후 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 1년째에 CR 또는 PR을 달성한다.
일부 실시양태에서, 세포 요법의 투여 개시 후 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월 또는 그 초과까지, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품, 키트 또는 조성물로 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 초과에서 반응이 유지되고, 예컨대 CR 또는 객관적 반응 (OR)이 유지된다. 일부 실시양태에서, 이러한 반응, 예컨대 CR 또는 OR은 적어도 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월 또는 그 초과 동안, 예컨대 제공된 방법에 따라 치료된 대상체의 적어도 또는 약 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 초과에서 또는 CR을 3개월, 4개월, 5개월 또는 6개월 달성한 이러한 대상체에서 지속적이다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품, 키트 또는 조성물로 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 초과, 또는 CR을 3개월, 4개월, 5개월 또는 6개월 달성한 이러한 대상체는 정확히 또는 약 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월 초과 또는 그보다 긴 기간 동안 생존하거나 진행 없이 생존한다.
일부 실시양태에서, 참조 세포 조성물은 암에 걸리지 않았거나 암에 걸린 것으로 의심되지 않는 대상체의 혈액으로부터의 T 세포의 조성물일 수 있거나, 또는 조합 작용제의 존재 하에 인큐베이션되거나 또는 투여되지 않은 것을 제외하고는 동일하거나 실질적으로 이러한 조건 하에서 수득, 단리, 생성, 생산, 인큐베이션 및/또는 투여된 T 세포의 집단이다. 일부 실시양태에서, 참조 세포 조성물은 동일한 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 발현을 포함하여 실질적으로 동일한 유전자 조작된 세포를 함유한다. 일부 측면에서, 이러한 T 세포는 동일하거나 실질적으로 동일하게 처리되고, 예컨대 유사하게 제조되고, 유사하게 제제화되고, 동일한 또는 거의 동일한 투여량 및 다른 유사한 인자로 투여된다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 투여되는 대상체에서 증가된 지속성 및/또는 보다 양호한 효력을 갖는 유전자 조작된 세포를 생성한다. 일부 실시양태에서, 대상체에서 유전자 조작된 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포의 지속성은 참조 세포 조성물의 투여, 예를 들어 T 세포 요법의 투여는 수반하지만 조합 작용제의 투여는 부재하는 것과 같은 대안적 방법에 의해 달성될 것과 비교하여 더 크다. 일부 실시양태에서, 지속성은 적어도 또는 약 적어도 1.5-배, 2-배, 3-배, 4-배, 5-배, 6-배, 7-배, 8-배, 9-배, 10-배, 20-배, 30-배, 50-배, 60-배, 70-배, 80-배, 90-배, 100-배 또는 그 초과로 증가된다.
일부 실시양태에서, 투여된 세포의 지속성 정도 또는 크기는 대상체에게의 투여 후에 검출 또는 정량화될 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, 정량적 PCR (qPCR)은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 기관 또는 조직 (예를 들어, 질환 부위)에서 재조합 수용체를 발현하는 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포)의 양을 평가하는 데 사용된다. 일부 측면에서, 지속성은 DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 코딩하는 DNA 또는 플라스미드의 카피로서, 또는 샘플, 예를 들어 혈액 또는 혈청 마이크로리터당, 또는 샘플 마이크로리터당 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 또는 백혈구 또는 T 세포의 총수당 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포의 수로서 정량화된다. 일부 실시양태에서, 일반적으로 수용체에 특이적인 항체를 사용하여 수용체를 발현하는 세포를 검출하는 유동 세포측정 검정이 또한 수행될 수 있다. 세포-기반 검정은 또한 기능적 세포, 예컨대 질환 또는 상태의 세포에 결합하고/거나, 그에 대한 반응, 예를 들어 세포독성 반응을 중화 및/또는 유도하거나 또는 수용체에 의해 인식되는 항원을 발현할 수 있는 세포의 수 또는 백분율을 검출하는 데 사용될 수 있다. 이러한 실시양태 중 임의의 것에서, 재조합 수용체 (예를 들어, CAR-발현 세포)와 연관된 또 다른 마커의 발현의 정도 또는 수준은 투여된 세포를 대상체의 내인성 세포와 구별하는 데 사용될 수 있다.
또한, 세포를 조작, 제조 및 생산하는 방법, 세포 및/또는 조합 작용제를 함유하는 조성물, 및 세포 및/또는 조합 작용제를 함유하고 예컨대 제공된 조합 요법 방법에 따라 이를 사용, 생산 및 투여하기 위한 키트 및 장치가 제공된다.
본 출원에서 언급된 특허 문헌, 과학 논문 및 데이터베이스를 비롯한 모든 간행물은 각각의 개별 간행물이 개별적으로 참조로 포함된 것과 동일한 정도로 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 포함된다. 본원에 제시된 정의가 본원에 참조로 포함된 특허, 출원, 공개된 출원 및 다른 공개에 제시된 정의와 상반되거나 또는 달리 모순되는 경우에, 본원에 제시된 정의는 본원에 참조로 포함된 정의보다 우선한다.
본원에 사용된 섹션 표제는 단지 조직화 목적을 위한 것이며, 기재된 대상을 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
I. 조합 요법
암을 갖는 대상체의 치료를 위한 1종 이상의 조합 작용제와 조합된 조작된 세포, 예컨대 T 세포 (예를 들어, CAR-T 세포)의 방법 및 용도가 제공된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 면역조정 화합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 하기 화학식 I의 화합물
또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 호변이성질체 또는 라세미 혼합물 (화합물 A)이다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 덱사메타손을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 면역조정제, 예를 들어 화합물 A 및 덱사메타손을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 암의 치료를 위한 표준 삼중 요법의 일부로서 주어지는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 암의 치료를 위한 표준 삼중 요법의 일부로서 투여된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손을 포함한다. 특정한 실시양태에서, 방법은 다발성 골수종을 치료하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 다발성 골수종은 재발성 또는 불응성 다발성 골수종이다.
일부 실시양태에서, 세포 요법은 입양 세포 요법이다. 일부 실시양태에서, 세포 요법은 종양 침윤 림프구성 (TIL) 요법, 트랜스제닉 TCR 요법, 또는 임의로 키메라 항원 수용체 (CAR)-발현 세포 요법인, 재조합-수용체 발현 세포 요법 (임의로 T 세포 요법)이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 요법은 B 세포 표적화 요법이다. 일부 실시양태에서, 요법은 B 세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적화한다. 일부 실시양태에서, 세포 및 세포를 투여하기 위한 투여 요법은 섹션 I-A에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물을 투여하기 위한 투여 요법은 섹션 I-B-2에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물 및 세포 요법과 조합된 덱사메타손을 포함한, 덱사메타손을 투여하기 위한 투여 요법은 섹션 I-B-3에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법을 투여하기 위한 투여 요법은 섹션 I-B-4에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포) 및 조합 작용제는 대상체에게 투여하기 위한 제약 조성물로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 기재된 바와 같은 세포 요법을 위한 T 세포 및 조합 작용제 중 하나 또는 둘 다의 치료 유효량을 함유한다. 일부 실시양태에서, 세포 요법을 위한 T 세포 및 조합 작용제는 투여를 위해 개별 제약 조성물로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 제약 조성물 중 임의의 것은 각각의 투여 경로에 적절한 투여 형태로 제제화될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조작된 세포를 포함하는 T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법 및 조합 작용제를 투여하는 것을 포함하는 조합 요법은 치료될 질환 또는 상태 (예를 들어, 암)를 갖거나 또는 질환 또는 상태 (예를 들어, 암)를 가질 위험이 있는 대상체 또는 환자에게 투여된다. 일부 측면에서, 방법은 예컨대 면역요법 또는 면역요법제에 의해 인식되는, 예를 들어 조작된 T 세포에 의해 인식되는 항원을 발현하는 암에서 종양 부담을 감소시킴으로써 질환 또는 상태를 치료하고, 예를 들어 그의 1종 이상의 증상을 호전시킨다.
일부 실시양태에서, 치료되는 질환 또는 상태는 항원의 발현이 질환 상태 또는 장애의 병인과 연관되고/거나 그에 수반되는, 예를 들어 이러한 질환, 상태 또는 장애를 유발하거나, 악화시키거나 또는 달리 그에 수반되는 임의의 것일 수 있다. 예시적인 질환 및 상태는 세포의 악성종양 또는 형질전환과 연관된 질환 또는 상태 (예를 들어, 암), 자가면역 또는 염증성 질환, 또는 예를 들어 박테리아, 바이러스 또는 다른 병원체에 의해 유발된 감염성 질환을 포함할 수 있다. 치료될 수 있는 다양한 질환 및 상태와 연관된 항원을 포함하는 예시적인 항원은 본원에 기재된 항원 중 임의의 것을 포함한다. 특정한 실시양태에서, 키메라 항원 수용체 또는 트랜스제닉 TCR을 포함한 조합 요법의 조작된 세포 상에서 발현된 재조합 수용체는 질환 또는 상태와 연관된 항원에 특이적으로 결합한다.
일부 실시양태에서 암 또는 증식성 질환은 BCMA를 발현한다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 BCMA를 표적화하는 재조합 수용체-발현 T 세포 (예를 들어, CAR-T 세포)를 사용한다.
특정한 실시양태에서, 항-BCMA CAR T 세포 요법은 이데캅타진 비클류셀, ABECMAⓒ, BCMA02, JCARH125, JNJ-68284528 (LCAR-B38M; 실타캅타진 오토류셀; CARVYKTI™) (얀센(Janssen)/레전드(Legend)), P-BCMA-101 (포세이다(Poseida)), PBCAR269A (포세이다), P-BCMA-Allo1 (포세이다), Allo-715 (화이자(Pfizer)/알로젠(Allogene)), CT053 (카르스젠(Carsgen)), 데스카르테스-08 (카르테시안(Cartesian)), PHE885 (노파르티스(Novartis)), ARI-002 (호스피탈 클리닉 바르셀로나(Hospital Clinic Barcelona), IDIBAPS), 또는 CTX120 (CRISPR 테라퓨틱스(CRISPR Therapeutics))이다. 특정한 실시양태에서, 항-BCMA CAR T 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정한 실시양태에서, 항-BCMA CAR T 세포는 ABECMA® 세포 (ABECMA® 면역요법에 사용되는 세포)이다. 특정한 실시양태에서, 항-BCMA CAR T 세포는 실타캅타진 오토류셀 세포이다. 특정한 실시양태에서, 항-BCMA CAR T 세포는 CARVYKTI™ 세포 (CARVYKTI™ 면역요법에 사용되는 세포)이다.
일부 실시양태에서, 방법 및 용도는 1) 일반적으로 BCMA에 대해 지시되거나 이를 표적화하는 키메라 수용체 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR)인 유전자 조작된 세포 표면 수용체 (예를 들어, 재조합 항원 수용체)를 발현하는 T 세포를 수반하는 T 세포 요법을 대상체에게 투여하는 것, 및 2) 1종 이상의 조합 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 T 세포 요법을 투여한 후에 (후속적으로) 또는 T 세포 요법의 투여를 개시한 후에 (후속적으로) 개시된다. 일부 경우에, 조합 작용제는 T 세포 요법의 투여를 제공받는 대상체에게 투여된다. 방법은 일반적으로 하나 이상의 용량의 세포 및 하나 초과의 용량의 조합 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 수반한다.
예를 들어 재조합 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 조작된 세포 및 조합 작용제 또는 본원에 기재된 조작된 세포 및/또는 조합 작용제를 포함하는 조성물을 포함한 조합 요법은 다양한 치료, 진단 및 예방 적응증에 유용하다. 예를 들어, 조합물은 대상체에서 다양한 질환 및 장애를 치료하는 데 유용하다. 이러한 방법 및 용도는, 예를 들어 질환, 상태 또는 장애, 예컨대 종양 또는 암을 갖는 대상체에게 조작된 세포 및 조합 작용제 및/또는 하나 또는 둘 다를 함유하는 조성물을 투여하는 것을 수반하는 치료 방법 및 용도를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조작된 세포 및 조합 작용제 및/또는 하나 또는 둘 다를 함유하는 조성물은 질환 또는 장애의 치료를 실시하기 위한 유효량으로 투여된다. 용도는 이러한 방법 및 치료에서의, 및 이러한 치료 방법을 수행하기 위한 의약의 제조에서의 조작된 세포 및 조합 작용제 및/또는 하나 또는 둘 다를 함유하는 조성물의 용도를 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 조작된 세포 및 조합 작용제, 및/또는 하나 또는 둘 다를 함유하는 조성물을 질환 또는 상태를 갖거나 갖는 것으로 의심되는 대상체에게 투여하는 것에 의해 수행된다. 일부 실시양태에서, 방법은 이에 의해 대상체에서 질환 또는 상태 또는 장애를 치료한다.
치료될 질환 중에는 BCMA와 연관된 임의의 질환 또는 장애, 또는 BCMA가 특이적으로 발현되고/거나 BCMA가 치료를 위해 표적화되는 임의의 질환 또는 장애 (또한 본원에서 "BCMA-연관 질환 또는 장애"로 상호교환가능하게 지칭됨)가 있다. BCMA 발현과 연관된 암은 혈액 악성종양 예컨대 다발성 골수종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 뿐만 아니라 호지킨 및 비-호지킨 림프종 둘 다를 포함한다. BCMA의 검토를 위해 문헌 [Coquery et al., Crit Rev Immunol., 2012, 32(4):287-305]을 참조한다. BCMA는 종양 세포 생존을 매개하는 데 연루되어 왔기 때문에, 이는 암 요법에 대한 잠재적 표적이다. 마우스 항-인간 BCMA 항체를 함유하는 키메라 항원 수용체 및 이러한 키메라 수용체를 발현하는 세포는 이전에 기재된 바 있다. 문헌 [Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060]을 참조한다.
일부 실시양태에서, BCMA와 연관된 질환 또는 장애는 B 세포-관련 장애이다. 일부 실시양태에서, BCMA와 연관된 질환 또는 장애는 교모세포종, 림프종성 육아종증, 이식후 림프증식성 장애, 면역조절 장애, 중쇄 질환, 원발성 또는 면역세포-연관 아밀로이드증, 또는 의미 불명의 모노클로날 감마글로불린병증 중으로부터의 1종 이상의 질환 또는 상태이다.
일부 실시양태에서, BCMA와 연관된 질환 또는 장애는 자가면역 질환 또는 장애이다. 이러한 자가면역 질환 또는 장애는 전신 홍반성 루푸스 (SLE), 루푸스 신염, 염증성 장 질환, 류마티스 관절염 (예를 들어, 소아 류마티스 관절염), ANCA 연관 혈관염, 특발성 혈소판감소증 자반증 (ITP), 혈전성 혈소판감소증 자반증 (TTP), 자가면역 혈소판감소증, 샤가스병, 그레이브스병, 베게너 육아종증, 결절성 다발동맥염, 쇼그렌 증후군, 심상성 천포창, 경피증, 다발성 경화증, 건선, IgA 신병증, IgM 다발신경병증, 혈관염, 당뇨병, 레이노 증후군, 항-인지질 증후군, 굿패스쳐병, 가와사키병, 자가면역 용혈성 빈혈, 중증 근무력증 또는 진행성 사구체신염을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
BCMA와 연관된 질환, 장애 또는 상태 중에는 암 (예를 들어, BCMA-발현 암)이 있고, 치료될 수 있는 암, 예를 들어 BCMA-발현 암은 신경모세포종, 신세포 암종, 결장암, 결장직장암, 유방암, 상피 편평 세포암, 흑색종, 골수종 (예를 들어, 다발성 골수종), 위암, 뇌암, 폐암, 췌장암, 자궁경부암, 난소암, 간암, 방광암, 전립선암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 부신암 및 두경부암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
특정 질환 및 상태에서, BCMA는 악성 세포 및 암 상에서 발현된다. 일부 실시양태에서, 암 (예를 들어, BCMA-발현 암)은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암 (예를 들어, BCMA-발현 암)은 림프종, 백혈병 또는 형질 세포 악성종양이다. 본원에서 고려되는 림프종은 버킷 림프종 (예를 들어, 풍토성 버킷 림프종 또는 산발성 버킷 림프종), 비-호지킨 림프종 (NHL), 호지킨 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 여포성 림프종, 비분할 소세포 림프종, 점막-연관 림프 조직 림프종 (MALT), 변연부 림프종, 비장 림프종, 결절성 단핵구성 B 세포 림프종, 면역모세포성 림프종, 대세포 림프종, 미만성 혼합 세포 림프종, 폐 B 세포 혈관중심성 림프종, 소림프구성 림프종, 원발성 종격 B 세포 림프종, 림프형질세포성 림프종 (LPL), 또는 외투 세포 림프종 (MCL)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 본원에서 고려되는 백혈병은 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 형질 세포 백혈병 또는 급성 림프구성 백혈병 (ALL)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 다발성 골수종 (예를 들어, 비-분비성 다발성 골수종, 무증상 다발성 골수종) 또는 형질세포종을 포함하나 이에 제한되지는 않는 형질 세포 악성종양이 본원에서 고려된다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 형질세포종, 예컨대 수질외 형질세포종이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 형질세포종, 예컨대 수질외 형질세포종을 갖지 않는다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 다발성 골수종 (MM), 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)이다.
일부 실시양태에서, 방법은 BCMA-연관 질환 또는 장애를 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 그의 발생 위험이 있는 대상체를 확인할 수 있다. 따라서, 상승된 BCMA 발현과 연관된 질환 또는 장애를 갖는 대상체를 확인하고, BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포)으로의 치료를 위해 이들을 선택하는 방법이 제공된다.
일부 측면에서, 예를 들어, 대상체는 상승된 BCMA 발현과 연관된 질환 또는 장애, 예컨대 BCMA-발현 암의 존재에 대해 스크리닝될 수 있다. 일부 실시양태에서, 방법은 BCMA-연관 질환, 예를 들어 종양 또는 암, 예컨대 다발성 골수종의 존재를 스크리닝하거나 검출하는 것을 포함한다. 따라서, 일부 측면에서, 샘플은 상승된 BCMA 발현과 연관된 질환 또는 장애를 갖는 것으로 의심되는 환자로부터 수득될 수 있고 BCMA의 발현 수준에 대해 검정될 수 있다. 일부 측면에서, BCMA-연관 질환 또는 장애에 대해 양성으로 시험된 대상체는 본 방법에 의한 치료를 위해 선택될 수 있고, 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포) 또는 그의 제약 조성물이 투여될 수 있다.
일부 측면에서, 대상체는, 예를 들어 대상체로부터의 생물학적 샘플, 예컨대 혈액 또는 혈청으로부터 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준에 대해 스크리닝될 수 있다. 일부 측면에서, 대상체는 세포 요법으로의 치료 전에 sBCMA의 수준에 대해 스크리닝될 수 있다. 일부 측면에서, 방법은 BCMA 발현과 연관된 질환 또는 장애, 예를 들어 종양 또는 암, 예컨대 다발성 골수종을 갖는 대상체에서 sBCMA의 수준 또는 양을 스크리닝하거나 검출하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 샘플은 BCMA와 연관된 질환 또는 장애를 갖는 것으로 의심되는 환자로부터 수득될 수 있고, 예를 들어 가용성 단백질 수준을 검출하는 검정, 예컨대 효소-연결 면역흡착 검정 (ELISA)을 사용하여 sBCMA의 수준 또는 양에 대해 검정될 수 있다. 일부 측면에서, 다발성 골수종 (MM)을 갖는 대상체에서, sBCMA 수준은 골수 생검에서의 형질 세포의 비율과 상관될 수 있다. 일부 측면에서, 다발성 골수종 (MM)을 갖는 대상체에서, sBCMA 수준은 치료에 대한 감소된 반응 또는 보다 짧은 전체 생존 또는 무진행 생존과 상관될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Ghermezi et al., Haematologica 2017, 102(4): 785-795] 참조). 일부 측면에서, 낮은 sBCMA 수준을 나타내는 대상체는 본 방법에 의한 치료를 위해 선택될 수 있고, 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포) 또는 그의 제약 조성물이 투여될 수 있다.
일부 측면에서, 방법은 가용성 BCMA 수준에 기초하여 대상체를 스크리닝하는 단계를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체로부터의 샘플에서 가용성 BCMA 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체로부터의 조직 샘플에서 가용성 BCMA 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는다.
일부 실시양태에서, BCMA와 연관된 질환 또는 상태는 대상체에서 질환을 치료하기 위한 1종 이상의 선행 요법에 대해 재발된 것이고/거나 대상체가 질환을 치료하기 위한 1종 이상의 다른 선행 요법에 반응하지 않았고 따라서 1종 이상의 선행 요법을 사용한 치료에 불응성인 것이다. 특정한 실시양태에서, 질환 또는 상태는 재발성 또는 불응성 질환인 다발성 골수종 (이하 또한 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 또는 R/R 다발성 골수종으로도 불림)이다. 일부 실시양태에서, 대상체는, 예를 들어 또 다른 BCMA-특이적 항체 및/또는 BCMA-표적화 키메라 수용체를 발현하는 세포 및/또는 화학요법, 방사선 및/또는 조혈 줄기 세포 이식 (HSCT), 예를 들어 동종 HSCT 또는 자가 HSCT를 포함한 다른 요법을 사용한 치료 후에 지속성 또는 재발성 질환을 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 또 다른 BCMA-특이적 항체 및/또는 BCMA-표적화 키메라 수용체를 발현하는 세포 및/또는 다른 요법을 사용한 치료에 저항성 또는 불응성이고, 즉 치료 후에 반응하지 않는다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에서 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포)의 투여는 대상체가 또 다른 BCMA-표적화 요법에 저항성 또는 불응성이 되었음에도 불구하고 대상체를 효과적으로 치료한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 재발하지 않았지만, 재발 위험이 있는 것으로, 예컨대 재발 위험이 높은 것으로 결정되며, 따라서 조합물은, 예를 들어 재발 가능성을 감소시키거나 또는 재발을 방지하기 위해 예방적으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 대상체는 이식에 적격인 것, 예컨대 조혈 줄기 세포 이식 (HSCT), 예를 들어 동종 HSCT 또는 자가 HSCT에 적격인 것이다. 일부 이러한 실시양태에서, 대상체는 본원에 제공된 바와 같은 BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포) 및/또는 그를 포함하는 조성물의 투여 전에, 적격임에도 불구하고, 이전에 이식을 받지 않았다.
일부 실시양태에서, 대상체는 이식에 적격이 아닌 것, 예컨대 조혈 줄기 세포 이식 (HSCT), 예를 들어 동종 HSCT 또는 자가 HSCT에 적격이 아닌 것이다. 일부 이러한 실시양태에서, 이러한 대상체에게 본원에 제공된 실시양태에 따른 BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포) 및/또는 그를 포함하는 조성물이 투여된다.
일부 실시양태에서, 조작된 세포의 투여 개시 전에, 대상체는 질환 또는 장애, 예를 들어 다발성 골수종을 치료하기 위한 1종 이상의 선행 요법을 제공받았다. 일부 실시양태에서, 대상체는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20종 또는 그 초과의 선행 요법을 제공받았다. 일부 실시양태에서, 대상체는 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10종 또는 그 초과의 선행 요법을 제공받았다. 일부 실시양태에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법으로의 치료에 대해 재발성 또는 불응성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 1 내지 3종의 선행 요법으로의 치료에 대해 재발성 또는 불응성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 2종 이상의 선행 요법으로의 치료에 대해 재발성 또는 불응성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 3종 이상의 선행 요법으로의 치료에 대해 재발성 또는 불응성이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 4종 이상의 선행 요법으로의 치료에 대해 재발성 또는 불응성이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 선행 요법은 면역조정제를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 선행 요법은 항-CD38 항체를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 선행 요법은 프로테아솜 억제제를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 선행 요법은 면역조정제, 프로테아솜 억제제 및 항-CD38 항체를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 선행 요법으로의 적어도 2회의 연속 주기의 치료를 받았어야 한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법 각각으로의 적어도 2회의 연속 주기의 치료를 받았어야 한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 진행성 질환이 요법에 대한 최상의 반응이 아닌 한, 1종 이상의 선행 요법 각각으로의 적어도 2회의 연속 주기의 치료를 받았어야 한다. 일부 측면에서, 대상체는 1종 이상의 선행 요법에 대해 재발성 또는 불응성이었다. 예를 들어, 대상체는 R/R 다발성 골수종을 갖는다.
일부 실시양태에서, 방법은 특정한 기준, 진단 또는 적응증에 기초하여, BCMA-지시된 T 세포 요법 (예를 들어, 항-BCMA CAR T 세포) 또는 그를 포함하는 조성물을 사용한 요법을 위한 특정한 대상체를 포함시키거나 배제하는 것을 수반할 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포 용량의 투여 또는 치료전 림프구고갈 화학요법 시점에, 대상체는 형질 세포 백혈병 (PCL)의 활성 또는 병력을 갖지 않았다. 일부 실시양태에서, 대상체가 투여 시점에 PCL의 활성 또는 병력을 갖는 경우에, 대상체는 제공된 방법에 따라 치료되는 것으로부터 배제될 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여 시점에 대상체에서 PCL, 예컨대 속발성 PCL이 발생한 경우에, 대상체는 제공된 방법에 따라 치료되는 것으로부터 배제될 수 있다. 일부 실시양태에서, 기준, 진단 또는 적응증에 대한 평가는 제공된 방법에 따른 치료의 적격성 또는 적합성에 대해 대상체를 스크리닝하는 시점에, 치료 요법의 다양한 단계에서, 림프구고갈 요법을 받는 시점에, 및/또는 조작된 세포 또는 그의 조성물의 투여의 개시 시 또는 그 직전에 수행될 수 있다.
질환의 예방 또는 치료를 위해, 조합 작용제 및/또는 면역요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)의 적절한 투여량은 치료될 질환의 유형, 특정한 조합 작용제, 세포 및/또는 세포 상에 발현된 재조합 수용체, 질환의 중증도 및 경과, 투여 경로, 조합 작용제 및/또는 T 세포 요법이 예방 또는 치료 목적으로 투여되는지 여부, 선행 요법, 투여 빈도, 대상체의 임상 병력 및 세포에 대한 반응, 및 담당의의 판단에 좌우될 수 있다. 조성물 및 세포는 일부 실시양태에서 대상체에게 1회 또는 일련의 치료에 걸쳐 적합하게 투여된다. 제공된 조합 요법에 대한 예시적인 투여 요법 및 스케줄이 기재된다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법 및 조합 작용제는 또 다른 치료적 개입과 동시에 또는 임의의 순서로 순차적으로 투여될 수 있는 추가의 조합 치료의 일부로서 투여된다. 일부 문맥에서, T 세포 요법, 예를 들어 조작된 T 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포는 T 세포 요법이 1종 이상의 추가의 치료제의 효과를 증진시키도록, 또는 그 반대이도록 시간상 충분히 가깝게 또 다른 요법과 공-투여된다. 일부 실시양태에서, 세포는 1종 이상의 추가의 치료제 전에 투여된다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법, 예를 들어 조작된 T 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포는 1종 이상의 추가의 치료제 후에 투여된다. 일부 실시양태에서, 조합 요법 방법은 림프구고갈 요법, 예컨대 화학요법제의 투여를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 요법은 또 다른 치료제, 예컨대 항암제, 체크포인트 억제제 또는 또 다른 면역 조정제를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 용도는 이러한 방법 및 치료에서의 조합 요법의 용도, 및 이러한 조합 요법 방법을 수행하기 위한 의약의 제조에서의 이러한 조성물의 용도를 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법 및 용도는 이에 의해 대상체에서 질환 또는 상태 또는 장애, 예컨대 암 또는 증식성 질환을 치료한다.
면역요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법) 및/또는 조합 작용제의 투여 전에, 그 동안 또는 그 후에, T 세포 요법의 생물학적 활성, 예를 들어 조작된 세포 집단의 생물학적 활성이 일부 실시양태에서 예를 들어 다수의 공지된 방법 중 임의의 것에 의해 측정된다. 평가하기 위한 파라미터는 예컨대 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법, 예컨대 하기 섹션 III에 추가로 기재된 검정을 사용하여 측정되는, 표적 세포를 파괴하는 조작된 세포의 능력, T 세포 활성의 지속성 및 다른 척도를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어 T 세포의 생물학적 활성은, 예컨대 항원으로의 재자극 시, 세포독성 세포 사멸, 1종 이상의 시토카인의 발현 및/또는 분비, 증식 또는 확장을 검정함으로써 측정된다. 일부 측면에서, 생물학적 활성은 질환 부담 및/또는 임상 결과, 예컨대 종양 부담 또는 부하의 감소를 평가함으로써 측정된다. 일부 실시양태에서, 조합 요법의 작용제 중 하나 또는 둘 다의 투여 및/또는 요법의 임의의 반복 투여는 조합 요법의 작용제 중 하나 또는 둘 다의 투여 전, 그 동안, 그 과정 동안, 또는 그 후의 검정의 결과에 기초하여 결정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 세포 요법과 조합된 조합 작용제의 조합 효과는 조합 작용제만 또는 세포 요법에 의하는 단독요법을 수반하는 치료와 비교하여 상승작용적일 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 목적하는 치료 효과의 증가 또는 개선, 예컨대 암과 연관된 1종 이상의 증상의 감소 또는 억제의 증가 또는 개선을 발생시킨다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 조작된 T 세포, 예컨대 CAR T-세포의 확장 또는 증식을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 확장 또는 증식의 증가는 대상체에게 투여 시 생체내에서 관찰된다. 일부 실시양태에서, 조작된 T 세포, 예를 들어, CAR-T 세포의 수의 증가는 정확히 또는 약 1.2-배, 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 6.0-배, 7.0-배, 8.0-배, 9.0-배, 10.0배 초과 또는 그 초과만큼 증가된다.
A. T 세포 요법의 투여
본원에 제공된 방법, 조성물, 조합물, 키트 및 용도의 일부 실시양태에서, 조합 요법은 대상체에게 면역 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)을 투여하는 것을 포함한다. 특정한 실시양태에서, 세포 요법은 BCMA에 대해 지시된 T 세포 요법이다. 예를 들어, T 세포 요법은 항-BCMA CAR T 세포 요법이다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법에 사용하기 위한 또는 그와 관련하여 투여되는 세포는 조작된 수용체, 예를 들어 조작된 항원 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR), 또는 T 세포 수용체 (TCR)를 함유하거나 또는 함유하도록 조작된다. 조성물 중에는 예컨대 입양 세포 요법을 위한 투여를 위한 제약 조성물 및 제제가 있다. 또한, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 대상체, 예를 들어 환자에게 세포 및 조성물을 투여하는 치료 방법이 제공된다.
일부 실시양태에서, 세포-기반 요법은 병변, 예컨대 종양 또는 암의 표면 상에서 발현된 분자를 표적화하는 세포, 예컨대 면역 세포, 예를 들어 T 세포 또는 NK 세포의 투여이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 항원에 특이적으로 결합하는 세포외 리간드-결합 도메인을 함유하는 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현한다. 일부 실시양태에서, 재조합 수용체는 항원에 특이적으로 결합하는 세포외 항원-인식 도메인을 함유하는 CAR이다. 일부 실시양태에서, 재조합 수용체는 항원, 예컨대 질환 또는 상태와 연관된 것, 예를 들어 종양 또는 암 세포와 연관되거나 또는 종양 또는 암 세포 상에서 발현되는 것에 특이적으로 결합한다. 특정한 실시양태에서, 항원은 BCMA이다. 일부 실시양태에서, 면역 세포는 재조합 수용체, 예컨대 트랜스제닉 TCR 또는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현한다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법은 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하도록 조작된 T 세포를 투여하는 것을 포함한다. 특정한 실시양태에서, 세포 요법, 예를 들어 항-BCMA CAR T 세포 요법은 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 (R/R 다발성 골수종)을 치료하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 세포는 대상체에 대해 자가이다. 일부 실시양태에서, 세포는 대상체에 대해 동종이다. 제공된 방법에서 세포 요법으로서 투여하기 위한 예시적인 조작된 세포는 섹션 II에 기재되어 있다.
입양 세포 요법을 위한 세포의 투여 방법은 공지되어 있고, 제공된 방법, 조성물 및 제조 물품 및 키트와 관련하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 입양 T 세포 요법 방법은, 예를 들어 미국 특허 출원 공개 번호 2003/0170238 (Gruenberg et al.); 미국 특허 번호 4,690,915 (Rosenberg); 문헌 [Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)]에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Themeli et al., (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933; Tsukahara et al., (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9; Davila et al., (2013) PLoS ONE 8(4): e61338]을 참조한다.
일부 실시양태에서, 세포 요법, 예를 들어 입양 T 세포 요법은 자가 전달에 의해 수행되며, 여기서 세포는 세포 요법을 제공받을 대상체로부터, 또는 이러한 대상체로부터 유래된 샘플로부터 단리되고/거나 달리 제조된다. 따라서, 일부 측면에서, 세포는 치료를 필요로 하는 대상체, 예를 들어 환자로부터 유래되고, 세포는 단리 및 가공 후에 동일한 대상체에게 투여된다.
일부 실시양태에서, 세포 요법, 예를 들어 입양 T 세포 요법은 동종 전달에 의해 수행되며, 여기서 세포는 세포 요법을 제공받을 대상체 또는 궁극적으로 제공받는 대상체 이외의 대상체, 예를 들어 제1 대상체로부터 단리되고/거나 달리 제조된다. 이러한 실시양태에서, 세포는 이어서 상이한 대상체, 예를 들어 동일한 종의 제2 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 제1 및 제2 대상체는 유전적으로 동일하다. 일부 실시양태에서, 제1 및 제2 대상체는 유전적으로 유사하다. 일부 실시양태에서, 제2 대상체는 제1 대상체와 동일한 HLA 부류 또는 상위유형을 발현한다.
T 세포 요법의 세포는 투여를 위해 제제화된 조성물로, 또는 대안적으로, 개별 투여를 위해 제제화된 1종 초과의 조성물 (예를 들어, 2종의 조성물)로 투여될 수 있다. 세포의 용량(들)은 세포 또는 조작된 세포의 특정한 수 또는 상대 수, 및/또는 조성물 내의 2종 이상의 하위-유형의 규정된 비 또는 조성물, 예컨대 CD4 대 CD8 T 세포를 포함할 수 있다.
세포는 임의의 적합한 수단에 의해, 예를 들어 볼루스 주입에 의해, 주사, 예를 들어 정맥내 또는 피하 주사, 안내 주사, 안구주위 주사, 망막하 주사, 유리체내 주사, 경중격 주사, 공막하 주사, 맥락막내 주사, 전방내 주사, 결막밑 주사, 결막하 주사, 테논낭하 주사, 안구후 주사, 안구주위 주사 또는 후공막근접 전달에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이는 비경구, 폐내 및 비강내로 투여되고, 목적하는 경우에 국부 치료를 위해 병변내 투여된다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 주어진 용량은 세포의 단일 볼루스 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 이는 예를 들어 3일 이하의 기간에 걸친 세포의 다중 볼루스 투여에 의해, 또는 세포의 연속 주입 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 세포 용량 또는 임의의 추가의 요법, 예를 들어 림프구고갈 요법, 개입 요법 및/또는 조합 요법의 투여는 외래환자 전달을 통해 수행된다.
질환의 치료를 위해, 적절한 투여량은 치료될 질환의 유형, 세포 또는 재조합 수용체의 유형, 질환의 중증도 및 경과, 선행 요법, 대상체의 임상 병력 및 세포에 대한 반응, 및 담당 의사의 판단에 좌우될 수 있다. 조성물 및 세포는 일부 실시양태에서 대상체에게 1회 또는 일련의 치료에 걸쳐 적합하게 투여된다.
특정 실시양태에서, 세포, 또는 세포의 하위-유형의 개별 집단은 대상체에게 약 1백만 내지 약 1000억개 세포의 범위 및/또는 체중 킬로그램당 세포의 그러한 양, 예컨대 예를 들어, 1백만 내지 약 500억개 세포 (예를 들어, 약 5백만개 세포, 약 25백만개 세포, 약 500백만개 세포, 약 10억개 세포, 약 50억개 세포, 약 200억개 세포, 약 300억개 세포, 약 400억개 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개에 의해 규정되는 범위), 예컨대 약 10백만 내지 약 1000억개 세포 (예를 들어, 약 20백만개 세포, 약 30백만개 세포, 약 40백만개 세포, 약 60백만개 세포, 약 70백만개 세포, 약 80백만개 세포, 약 90백만개 세포, 약 100억개 세포, 약 250억개 세포, 약 500억개 세포, 약 750억개 세포, 약 900억개 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개에 의해 규정되는 범위), 및 일부 경우에 약 100백만개 세포 내지 약 500억개 세포 (예를 들어, 약 120백만개 세포, 약 250백만개 세포, 약 350백만개 세포, 약 450백만개 세포, 약 650백만개 세포, 약 800백만개 세포, 약 900백만개 세포, 약 30억개 세포, 약 300억개 세포, 약 450억개 세포) 또는 이들 범위 사이 및/또는 체중 킬로그램당 임의의 값으로 투여된다. 투여량은 질환 또는 장애 및/또는 환자 및/또는 다른 치료에 대해 특정한 속성에 따라 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 약 1 x 108개 미만의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 예를 들어, 약 1 x 106 내지 1 x 108개의 이러한 세포, 예컨대 2 x 106, 5 x 106, 1 x 107, 5 x 107, 또는 1 x 108개 또는 총 이러한 세포의 범위, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위를 포함한다. 제공된 방법에 따른 사용 또는 투여를 위한 예시적인 투여량은 하기 섹션 I-A-2에 제공된다.
세포는 임의의 적합한 수단에 의해 투여될 수 있다. 세포는 치료 효과, 예컨대 종양 부담의 감소를 달성하기 위해 투여 요법으로 투여된다. 투약 및 투여는 부분적으로, T 세포 요법의 투여의 개시 전에, 그에 후속하여 및/또는 그와 동시에 투여될 수 있는 조합 작용제의 투여 스케줄에 좌우될 수 있다. T 세포 요법의 다양한 투여 스케줄은 단일 또는 다양한 시점에 걸친 다중 투여, 볼루스 투여, 및 펄스 주입을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 측면에서 면역고갈 (예를 들어, 림프구고갈) 요법으로 대상체를 사전조건화하는 것은 입양 세포 요법 (ACT)의 효과를 개선시킬 수 있다.
따라서, 일부 실시양태에서, 방법은 세포 요법의 개시 전에 사전조건화제, 예컨대 림프구고갈제 또는 화학요법제, 예컨대 시클로포스파미드, 플루다라빈, 또는 그의 조합을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 대상체에게 세포 요법의 개시의 적어도 2일 전, 예컨대 적어도 3, 4, 5, 6, 또는 7일 전에 사전조건화제가 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 세포 요법 개시의 7일 이하 전, 예컨대 6, 5, 4, 3, 또는 2일 이하 전에 사전조건화제가 투여된다.
일부 실시양태에서, 대상체는 정확히 또는 약 20 mg/kg 내지 100 mg/kg, 예컨대 정확히 또는 약 40 mg/kg 내지 80 mg/kg의 용량의 시클로포스파미드로 사전조건화된다. 일부 측면에서, 대상체는 정확히 또는 약 60 mg/kg의 시클로포스파미드로 사전조건화된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 예컨대 매일, 격일로 또는 3일마다 주어지는 복수의 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 1 또는 2일 동안 1일 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 림프구고갈제가 시클로포스파미드를 포함하는 경우에, 대상체에게 정확히 또는 약 100 mg/m2 내지 500 mg/m2, 예컨대 정확히 또는 약 200 mg/m2 내지 400 mg/m2, 또는 250 mg/m2 내지 350 mg/m2 (경계값 포함)의 용량의 시클로포스파미드가 투여된다. 일부 예에서, 대상체에게 약 300 mg/m2의 시클로포스파미드가 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 예컨대 매일, 격일로 또는 3일마다 주어지는 복수의 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 매일, 예컨대 1-5일 동안, 예를 들어 3 내지 5일 동안 투여된다. 일부 예에서, 세포 요법의 개시 전에 3일 동안 매일 대상체에게 약 300mg/m2의 시클로포스파미드가 투여된다.
일부 실시양태에서, 림프구고갈제가 플루다라빈을 포함하는 경우에, 대상체에게 정확히 또는 약 1 mg/m2 내지 100 mg/m2, 예컨대 정확히 또는 약 10 mg/m2 내지 75 mg/m2, 15 mg/m2 내지 50 mg/m2, 20 mg/m2 내지 40 mg/m2, 또는 24 mg/m2 내지 35 mg/m2 (경계값 포함)의 용량의 플루다라빈이 투여된다. 일부 경우에, 대상체에게 약 30 mg/m2의 플루다라빈이 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 예컨대 매일, 격일로 또는 3일마다 주어지는 복수의 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 매일, 예컨대 1-5일 동안, 예를 들어 3 내지 5일 동안 투여된다. 일부 경우에, 세포 요법의 개시 전에 3일 동안 매일 대상체에게 약 30 mg/m2의 플루다라빈이 투여된다.
일부 실시양태에서, 림프구고갈제는 작용제의 조합물, 예컨대 시클로포스파미드 및 플루다라빈의 조합물을 포함한다. 따라서, 작용제의 조합물은 상기 기재된 것과 같은 임의의 용량 또는 투여 스케줄의 시클로포스파미드, 및 상기 기재된 것과 같은 임의의 용량 또는 투여 스케줄의 플루다라빈을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, 대상체에게 제1 또는 후속 용량 전에 60 mg/kg (~2 g/m2)의 시클로포스파미드 및 3 내지 5회 용량의 25 mg/m2 플루다라빈이 투여된다.
세포의 투여 후에, 일부 실시양태에서 조작된 세포 집단의 생물학적 활성은, 예를 들어 다수의 공지된 방법 중 임의의 것에 의해 측정된다. 평가할 파라미터는 생체내에서, 예를 들어 영상화에 의한, 또는 생체외에서, 예를 들어 ELISA 또는 유동 세포측정법에 의한, 항원에 대한 조작된 또는 천연 T 세포 또는 다른 면역 세포의 특이적 결합을 포함한다. 특정 실시양태에서, 표적 세포를 파괴하는 조작된 세포의 능력은 임의의 적합한 공지된 방법, 예컨대 예를 들어 문헌 [Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009), 및 Herman et al., J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)]에 기재된 세포독성 검정을 사용하여 측정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 세포의 생물학적 활성은 1종 이상의 시토카인, 예컨대 CD107a, IFNγ, IL-2 및 TNF의 발현 및/또는 분비를 검정함으로써 측정된다. 일부 측면에서, 생물학적 활성은 임상 결과, 예컨대 종양 부담 또는 부하의 감소를 평가함으로써 측정된다.
1. 조성물 및 제제
일부 실시양태에서, T 세포 요법, 예컨대 재조합 항원 수용체, 예를 들어, CAR 또는 TCR로 조작된 세포를 포함하는 T 세포 요법의 세포의 용량은 조성물 또는 제제, 예컨대 제약 조성물 또는 제제로서 제공된다. 이러한 조성물은 제공된 방법에 따라, 예컨대 질환, 상태 및 장애의 예방 또는 치료에서, 예컨대 다발성 골수종, 예를 들어 재발성 또는 불응성 다발성 골수종의 치료에서 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법, 예컨대 조작된 T 세포 (예를 들어, CAR T 세포)는 제약상 허용되는 담체와 함께 제제화된다. 일부 측면에서, 담체의 선택은 부분적으로 특정한 세포 또는 작용제에 의해 및/또는 투여 방법에 의해 결정된다. 따라서, 다양한 적합한 제제가 존재한다. 예를 들어, 제약 조성물은 보존제를 함유할 수 있다. 적합한 보존제는, 예를 들어 메틸파라벤, 프로필파라벤, 벤조산나트륨 및 벤즈알코늄 클로라이드를 포함할 수 있다. 일부 측면에서, 2종 이상의 보존제의 혼합물이 사용된다. 보존제 또는 그의 혼합물은 전형적으로 전체 조성물의 약 0.0001 중량% 내지 약 2 중량%의 양으로 존재한다. 담체는, 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]에 기재되어 있다. 제약상 허용되는 담체는 일반적으로 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 완충제 예컨대 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기 산; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 보존제 (예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 이뮤노글로불린; 친수성 중합체 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 비롯한 다른 탄수화물; 킬레이트화제 예컨대 EDTA; 당 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 반대-이온 예컨대 나트륨; 금속 착물 (예를 들어, Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 측면에서 완충제가 조성물에 포함된다. 적합한 완충제는, 예를 들어 시트르산, 시트르산나트륨, 인산, 인산칼륨, 및 다양한 다른 산 및 염을 포함한다. 일부 측면에서, 2종 이상의 완충제의 혼합물이 사용된다. 완충제 또는 그의 혼합물은 전형적으로 총 조성물의 약 0.001 중량% 내지 약 4 중량%의 양으로 존재한다. 투여가능한 제약 조성물의 제조 방법은 공지되어 있다. 예시적인 방법은, 예를 들어 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 21st ed. (May 1, 2005)]에 보다 상세하게 기재되어 있다.
제제는 수용액을 포함할 수 있다. 제제 또는 조성물은 또한 세포 또는 작용제로 예방 또는 치료되는 특정한 적응증, 질환 또는 상태에 유용한 1종 초과의 활성 성분을 함유할 수 있으며, 여기서 각각의 활성은 서로 유해한 영향을 미치지 않는다. 이러한 활성 성분은 의도된 목적에 유효한 양으로 조합되어 적합하게 존재한다. 따라서, 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 다른 제약 활성제 또는 약물, 예컨대 화학요법제, 예를 들어, 아스파라기나제, 부술판, 카르보플라틴, 시스플라틴, 다우노루비신, 독소루비신, 플루오로우라실, 겜시타빈, 히드록시우레아, 메토트렉세이트, 파클리탁셀, 리툭시맙, 빈블라스틴, 빈크리스틴 등을 추가로 포함한다.
제약 조성물은 일부 실시양태에서 세포를 질환 또는 상태를 치료 또는 예방하는 데 효과적인 양, 예컨대 치료 유효량 또는 예방 유효량으로 함유한다. 일부 실시양태에서 치료 또는 예방 효능은 치료된 대상체의 주기적 평가에 의해 모니터링된다. 수일 이상에 걸친 반복 투여의 경우에, 상태에 따라, 치료는 질환 증상의 목적하는 억제가 발생할 때까지 반복된다. 그러나, 다른 투여 요법이 유용할 수 있고 결정될 수 있다. 목적하는 투여량은 조성물의 단일 볼루스 투여에 의해, 조성물의 다중 볼루스 투여에 의해, 또는 조성물의 연속 주입 투여에 의해 전달될 수 있다.
세포는 표준 투여 기술, 제제 및/또는 장치를 사용하여 투여될 수 있다. 조성물의 저장 및 투여를 위한 제제 및 장치, 예컨대 시린지 및 바이알이 제공된다. 세포와 관련하여, 투여는 자가 또는 이종일 수 있다. 예를 들어, 면역반응성 세포 또는 전구세포는 1명의 대상체로부터 수득되고, 동일한 대상체 또는 상이한 상용성 대상체에게 투여될 수 있다. 말초 혈액 유래 면역반응성 세포 또는 그의 자손 (예를 들어, 생체내, 생체외 또는 시험관내 유래)은 카테터 투여, 전신 주사, 국부 주사, 정맥내 주사 또는 비경구 투여를 포함한 국부 주사를 통해 투여될 수 있다. 치료 조성물 (예를 들어, 유전자 변형된 면역반응성 세포를 함유하는 제약 조성물)을 투여하는 경우에, 이는 일반적으로 단위 투여량의 주사가능한 형태 (용액, 현탁액, 에멀젼)로 제제화될 것이다.
제제는 경구, 정맥내, 복강내, 피하, 폐, 경피, 근육내, 비강내, 협측, 설하 또는 좌제 투여를 위한 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 작용제 또는 세포 집단은 비경구로 투여된다. 본원에 사용된 용어 "비경구"는 정맥내, 근육내, 피하, 직장, 질 및 복강내 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 작용제 또는 세포 집단은 정맥내, 복강내 또는 피하 주사에 의한 말초 전신 전달을 사용하여 대상체에게 투여된다.
일부 실시양태에서 조성물은 멸균 액체 제제, 예를 들어 등장성 수용액, 현탁액, 에멀젼, 분산액 또는 점성 조성물로서 제공되며, 이는 일부 측면에서 선택된 pH로 완충될 수 있다. 액체 제제는 통상적으로 겔, 다른 점성 조성물 및 고체 조성물보다 제조하기가 더 용이하다. 추가적으로, 액체 조성물은 특히 주사에 의해 투여하기가 다소 더 편리하다. 다른 한편으로는, 점성 조성물은 적절한 점도 범위 내에서 제제화되어 특정 조직과의 보다 긴 접촉 기간을 제공할 수 있다. 액체 또는 점성 조성물은, 예를 들어 물, 염수, 포스페이트 완충 염수, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 액체 폴리에틸렌 글리콜) 및 그의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있는 담체를 포함할 수 있다.
멸균 주사가능한 용액은 세포를 용매 중에, 예컨대 적합한 담체, 희석제 또는 부형제, 예컨대 멸균수, 생리 염수, 글루코스, 덱스트로스 등과 혼합하여 혼입시킴으로써 제조될 수 있다. 조성물은 또한 동결건조될 수 있다. 조성물은 투여 경로 및 목적하는 제제에 따라 보조 물질, 예컨대 습윤제, 분산제 또는 유화제 (예를 들어, 메틸셀룰로스), pH 완충제, 겔화제 또는 점도 증진 첨가제, 보존제, 향미제, 착색제 등을 함유할 수 있다. 일부 측면에서 적합한 제제를 제조하기 위해 표준 교재가 참고될 수 있다.
항미생물 보존제, 항산화제, 킬레이트화제 및 완충제를 비롯한, 조성물의 안정성 및 멸균성을 증진시키는 다양한 첨가제가 첨가될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산 등에 의해 보장될 수 있다. 주사가능한 제약 형태의 지속 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 사용에 의해 이루어질 수 있다.
생체내 투여에 사용되는 제제는 일반적으로 멸균된다. 멸균은, 예를 들어 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성될 수 있다.
질환의 예방 또는 치료를 위해, 적절한 투여량은 치료될 질환의 유형, 작용제 또는 작용제들의 유형, 세포 또는 재조합 수용체의 유형, 질환의 중증도 및 경과, 작용제 또는 세포가 예방 또는 치료 목적으로 투여되는지 여부, 선행 요법, 대상체의 임상 병력 및 작용제 또는 세포에 대한 반응, 및 담당 의사의 판단에 좌우될 수 있다. 조성물은 일부 실시양태에서 대상체에게 1회 또는 일련의 치료에 걸쳐 적합하게 투여된다.
일부 경우에, 세포 요법은 세포를 포함하는 단일 제약 조성물로서 투여된다. 일부 실시양태에서, 주어진 용량은 세포 또는 작용제의 단일 볼루스 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 이는 예를 들어 3일 이하의 기간에 걸친 세포 또는 작용제의 다중 볼루스 투여에 의해, 또는 세포 또는 작용제의 연속 주입 투여에 의해 투여된다.
2. 투여 스케줄 및 투여
일부 실시양태에서, 세포의 용량은 제공된 조합 요법 방법에 따라 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량의 크기 또는 시기는 대상체에서 특정한 질환 또는 상태의 함수로서 결정된다. 제공된 설명을 고려하여 특정한 질환에 대한 용량의 크기 또는 시기를 실험적으로 결정할 수 있다.
특정 실시양태에서, 세포, 또는 세포의 하위-유형의 개별 집단은 대상체에게 약 0.1백만 내지 약 1000억개 세포의 범위 및/또는 대상체의 체중 킬로그램당 세포의 그러한 양, 예컨대 예를 들어, 0.1백만 내지 약 500억개 세포 (예를 들어, 약 5백만개 세포, 약 25백만개 세포, 약 500백만개 세포, 약 10억개 세포, 약 50억개 세포, 약 200억개 세포, 약 300억개 세포, 약 400억개 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개에 의해 규정되는 범위), 1백만 내지 약 500억개 세포 (예를 들어, 약 5백만개 세포, 약 25백만개 세포, 약 500백만개 세포, 약 10억개 세포, 약 50억개 세포, 약 200억개 세포, 약 300억개 세포, 약 400억개 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개에 의해 규정되는 범위), 예컨대 약 10백만 내지 약 1000억개 세포 (예를 들어, 약 20백만개 세포, 약 30백만개 세포, 약 40백만개 세포, 약 60백만개 세포, 약 70백만개 세포, 약 80백만개 세포, 약 90백만개 세포, 약 100억개 세포, 약 250억개 세포, 약 500억개 세포, 약 750억개 세포, 약 900억개 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개에 의해 규정되는 범위), 및 일부 경우에 약 100백만개 세포 내지 약 500억개 세포 (예를 들어, 약 120백만개 세포, 약 250백만개 세포, 약 350백만개 세포, 약 450백만개 세포, 약 650백만개 세포, 약 800백만개 세포, 약 900백만개 세포, 약 30억개 세포, 약 300억개 세포, 약 450억개 세포) 또는 이들 범위 사이 및/또는 대상체의 체중 킬로그램당 임의의 값으로 투여된다. 투여량은 질환 또는 장애 및/또는 환자 및/또는 다른 치료에 대해 특정한 속성에 따라 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 값은 재조합 수용체-발현 세포의 수를 지칭하고; 다른 실시양태에서, 이는 투여된 T 세포 또는 PBMC 또는 전체 세포의 수를 지칭한다.
일부 실시양태에서, 세포 요법은 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 0.1 x 106개 세포/kg 대상체의 체중, 0.2 x 106개 세포/kg, 0.3 x 106개 세포/kg, 0.4 x 106개 세포/kg, 0.5 x 106개 세포/kg, 1 x 106개 세포/kg, 2.0 x 106개 세포/kg, 3 x 106개 세포/kg 또는 5 x 106개 세포/kg인 다수의 세포를 포함하는 용량의 투여를 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포 요법은 정확히 또는 약 0.1 x 106개 세포/kg 대상체의 체중 내지 1.0 x 107개 세포/kg, 정확히 또는 약 0.5 x 106개 세포/kg 내지 5 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 0.5 x 106개 세포/kg 내지 3 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 0.5 x 106개 세포/kg 내지 2 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 0.5 x 106개 세포/kg 내지 1 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 1.0 x 106개 세포/kg 대상체의 체중 내지 5 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 1.0 x 106개 세포/kg 내지 3 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 1.0 x 106개 세포/kg 내지 2 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 2.0 x 106개 세포/kg 대상체의 체중 내지 5 x 106개 세포/kg, 정확히 또는 약 2.0 x 106개 세포/kg 내지 3 x 106개 세포/kg, 또는 정확히 또는 약 3.0 x 106개 세포/kg 대상체의 체중 내지 5 x 106개 세포/kg (각각 경계값 포함)인 다수의 세포를 포함하는 용량의 투여를 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량은 정확히 또는 약 2 x 105개 세포/kg 내지 정확히 또는 약 2 x 106개 세포/kg, 예컨대 정확히 또는 약 4 x 105개 세포/kg 내지 정확히 또는 약 1 x 106개 세포/kg 또는 정확히 또는 약 6 x 105개 세포/kg 내지 정확히 또는 약 8 x 105개 세포/kg을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량은 대상체의 킬로그램 체중당 2 x 105개 이하의 세포 (예를 들어, 항원-발현, 예컨대 CAR-발현 세포) (세포/kg), 예컨대 정확히 또는 약 3 x 105 개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 4 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 5 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 6 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 7 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 8 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 9 x 105개 이하의 세포/kg, 정확히 또는 약 1 x 106개 이하의 세포/kg, 또는 정확히 또는 약 2 x 106개 이하의 세포/kg을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량은 대상체의 킬로그램 체중당 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 2 x 105개 세포 (예를 들어, 항원-발현, 예컨대 CAR-발현 세포) (세포/kg), 예컨대 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 3 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 4 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 5 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 6 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 7 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 8 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 9 x 105개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 1 x 106개 세포/kg, 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 2 x 106개 세포/kg을 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량은 세포의 용량이 대상체의 체표면적 또는 체중에 얽매이지 않거나 또는 그에 기초하지 않도록 한, 세포의 균일 용량 또는 세포의 고정 용량이다.
일부 실시양태에서, 세포 요법은 정확히 또는 약 1 x 105 내지 2 x 109개의 총 재조합 수용체-발현 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 정확히 또는 약 5 x 105 내지 1 x 109개의 총 재조합 수용체-발현 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 또는 정확히 또는 약 1 x 106 내지 1 x 109개의 총 재조합 수용체-발현 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) (각각 경계값 포함)의 다수의 세포를 포함하는 용량의 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포 요법은 적어도 또는 약 적어도 1 x 105개의 총 재조합 수용체-발현 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 예컨대 적어도 또는 적어도 1 x 106, 적어도 또는 약 적어도 1 x 107, 적어도 또는 약 적어도 1 x 108, 적어도 또는 약 적어도 1 x 109개의 이러한 세포의 다수의 세포를 포함하는 세포의 용량의 투여를 포함한다.
일부 실시양태에서, 유전자 조작된 세포의 용량은 적어도 또는 적어도 약 1 x 105개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 2.5 x 105개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 5 x 105개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 1 x 106개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 2.5 x 106개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 5 x 106개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 1 x 107개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 2.5 x 107개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 5 x 107개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 1 x 108개의 CAR-발현 세포, 적어도 또는 적어도 약 2.5 x 108개의 CAR-발현 세포, 또는 적어도 또는 적어도 약 5 x 108개의 CAR-발현 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1 x 106개 초과의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 (CAR+) 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 정확히 또는 약 2 x 109개 미만의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 예를 들어, 정확히 또는 약 1.0 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 이러한 세포의 범위, 예컨대 정확히 또는 약 1.0 x 107, 1.5 x 107, 2.0 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 1.5 x 108, 3 x 108, 4.5 x 108, 6 x 108, 8 x 108 또는 1.2 x 109개의 총 이러한 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1 x 106개 초과의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 (CAR+) 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 정확히 또는 약 2 x 109개 미만의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 예를 들어, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 이러한 세포의 범위, 예컨대 정확히 또는 약 2.5 x 107, 5 x 107, 1.5 x 108, 3 x 108, 4.5 x 108, 6 x 108, 8 x 108 또는 1.2 x 109개의 총 이러한 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1.5 x 107개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 2.0 x 107개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1.5 x 108개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 3 x 108개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 6 x 108개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 8 x 108개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량은 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 유전자 조작된 세포의 용량은 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 2 x 109개의 총 CAR-발현 (CAR+) T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 1 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 5 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 2.5 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 105 내지 정확히 또는 약 1 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106　내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 106개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 106 내지 정확히 또는 약 1 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 107 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 107 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 107 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 107 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 107 내지 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 5 x 107개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 107 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 107 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 5 x 107 내지 정확히 또는 약 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 108 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 1 x 108 내지 정확히 또는 약 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 정확히 또는 약 또는 2.5 x 108 내지 정확히 또는 약 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 유전자 조작된 세포의 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107 내지 정확히 또는 약 8 x 108개의 총 CAR-발현 (CAR+) T 세포, 정확히 또는 약 1.0 x 107 내지 정확히 또는 약 6.5 x 108개의 총 CAR+ T 세포, 정확히 또는 약 1.5 x 107 내지 정확히 또는 약 6.5 x 108개의 총 CAR+ T 세포, 정확히 또는 약 1.5 x 107 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 총 CAR+ T 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 총 CAR+ T 세포, 또는 정확히 또는 약 5.0 x 107 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 총 CAR+ T 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 유전자 조작된 세포의 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 CAR-발현 (CAR+) T 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CAR-발현 T 세포, 총 T 세포, 또는 총 PBMC, 정확히 또는 약 5.0 x 107개의 CAR-발현 T 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 CAR-발현 T 세포, 총 T 세포, 또는 총 PBMC, 정확히 또는 약 5.0 x 107 CAR-발현 T 세포 내지 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 CAR-발현 T 세포, 총 T 세포, 또는 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 정확히 또는 약 1.5 x 108 CAR-발현 T 세포 내지 정확히 또는 약 3.0 x 108개의 CAR-발현 T 세포, 총 T 세포, 또는 총 PBMC (각각 경계값 포함)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 수는 CD3+ 또는 CD8+의 총수에 대한 것이고, 일부 경우에 또한 CAR-발현 (예를 들어, CAR+) 세포에 대한 것이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 5.0 x 107 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 5.0 x 107 내지 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포, 또는 정확히 또는 약 1.5 x 108 내지 정확히 또는 약 3.0 x 108개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포 (각각 경계값 포함)의 세포의 수를 포함한다.
일부 실시양태에서, 유전자 조작된 세포의 용량은 CD3+ CAR-발현 (CAR+) 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 (CAR+) 세포의 총수에 대한 것이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 1.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 2.0 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 5.0 x 107 내지 정확히 또는 약 6.0 x 108개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 정확히 또는 약 5.0 x 107 내지 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포, 또는 정확히 또는 약 1.5 x 108 내지 정확히 또는 약 3.0 x 108개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+CAR-발현 세포 (각각 경계값 포함)의 유전자 조작된 세포의 수를 포함한다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107, 1.5 x 107, 2.0 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 1.5 x 108, 3 x 108, 4.5 x 108, 6 x 108, 8 x 108 또는 1.2 x 109개의 CD3+ 또는 CD4+/CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ CAR-발현 또는 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107, 5 x 107, 1.5 x 108, 3 x 108, 4.5 x 108, 6 x 108, 8 x 108 또는 1.2 x 109개의 CD3+ CAR-발현 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107, 1.5 x 107, 2.0 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 1.5 x 108, 3 x 108, 4.5 x 108, 6 x 108, 8 x 108 또는 1.2 x 109개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.0 x 107개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.5 x 107개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 2.0 x 107개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 5 x 107개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.5 x 108개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 3 x 108개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 6 x 108개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 8 x 108개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD4+/CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 2.5 x 107개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 5 x 107개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.5 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 3 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 6 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 6.5 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 8 x 108개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다. 일부 실시양태에서, 용량은 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 CD4+ 또는 CD8+ CAR-발현 세포이다.
일부 실시양태에서, 용량의 T 세포는 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 용량의 총 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포는 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 2 x 109개의 총 CAR-발현　 CD4+ 세포 및 CAR-발현 CD8+ 세포, 예를 들어 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 범위의 이러한 세포, 예를 들어 정확히 또는 약 5 x 107 내지 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 범위의 이러한 세포; 예컨대 정확히 또는 약 1.0 x 107, 정확히 또는 약 2.5 x 107, 정확히 또는 약 2.0 x 107, 정확히 또는 약 2.5 x 107, 정확히 또는 약 5 x 107, 정확히 또는 약 1.5 x 108, 정확히 또는 약 3 x 108, 정확히 또는 약 4.5 x 108, 정확히 또는 약 6 x 108, 정확히 또는 약 6.5 x 108, 정확히 또는 약 8 x 108, 또는 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 총 이러한 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위를 포함한다.　 일부 실시양태에서, 예를 들어 대상체가 인간인 경우에, 예컨대 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포를 포함하는 용량에서 용량 중 CD8+ T 세포는 정확히 또는 약 1 x 106 내지 정확히 또는 약 2 x 109개의 총 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현　 CD8+ 세포, 예를 들어 정확히 또는 약 2.5 x 107 내지 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 범위의 이러한 세포, 예를 들어 정확히 또는 약 5 x 107 내지 정확히 또는 약 4.5 x 108개의 범위의 이러한 세포; 예컨대 정확히 또는 약 2.5 x 107, 정확히 또는 약 5 x 107, 정확히 또는 약 1.5 x 108, 정확히 또는 약 3 x 108, 정확히 또는 약 4.5 x 108, 정확히 또는 약 6 x 108, 정확히 또는 약 8 x 108, 또는 정확히 또는 약 1.2 x 109개의 총 이러한 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위를 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포, 예를 들어 재조합 수용체-발현 T 세포의 용량은 대상체에게 단일 용량으로서 투여되거나, 또는 2주, 1개월, 3개월, 6개월, 1년 또는 그 초과의 기간 내에 단지 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 환자에게 다중 용량이 투여되고, 각각의 용량 또는 총 용량은 상기 값 중 임의의 것 이내일 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여를 위한 조작된 세포 또는 투여를 위한 조작된 세포의 조성물은 세포 건강을 나타내거나 이와 일치하는 특성을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 이러한 용량의 정확히 또는 약 또는 적어도 정확히 또는 약 70, 75, 80, 85, 또는 90%의 CAR+ 세포는 세포 건강 또는 생물학적 활성 CAR 세포를 나타내는 1종 이상의 특성 또는 표현형, 예컨대 아폽토시스 마커 발현의 부재를 나타낸다.
특정한 실시양태에서, 표현형은 아폽토시스 및/또는 세포가 아폽토시스 과정을 겪고 있다는 표시의 부재이거나 또는 이를 포함한다. 아폽토시스는 수포화, 세포 수축, 핵 단편화, 염색질 응축, 염색체 DNA 단편화 및 전반적 mRNA 붕괴를 포함한 특징적인 세포 변화 및 사멸로 이어지는 일련의 상동증적 형태학적 및 생화학적 사건을 포함하는 프로그램화된 세포 사멸의 과정이다. 일부 측면에서, 아폽토시스의 초기 단계는 특정 카스파제, 예를 들어 2, 8, 9 및 10의 활성화에 의해 지시될 수 있다. 일부 측면에서, 아폽토시스의 중간 내지 후기 단계는 막 완전성의 추가의 상실, 염색질 응축 및 DNA 단편화를 특징으로 하고, 생화학적 사건, 예컨대 카스파제3, 6 및 7의 활성화를 포함한다.
특정한 실시양태에서, 표현형은 프로그램화된 세포 사멸과 연관된 1종 이상의 인자, 예를 들어 아폽토시스를 개시하는 것으로 공지된 아폽토시스촉진 인자, 예를 들어 사멸 수용체 경로의 구성원, 미토콘드리아 (내인성) 경로의 활성화된 구성원, 예컨대 Bcl-2 패밀리 구성원, 예를 들어 Bax, Bad 및 Bid, 및 카스파제의 음성 발현이다. 특정 실시양태에서, 표현형은 세포 조성물과 함께 인큐베이션되거나 또는 접촉될 때 아폽토시스를 겪고 있는 세포에 우선적으로 결합할 지표, 예를 들어 아넥신 V 분자의 부재이거나 또는 TUNEL 염색에 의한다. 일부 실시양태에서, 표현형은 세포에서의 아폽토시스 상태를 나타내는 1종 이상의 마커의 발현이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 표현형은 카스파제, 예컨대 카스파제 3의 발현 및/또는 활성화의 결여이다. 일부 측면에서, 카스파제-3의 활성화는 아폽토시스의 증가 또는 회복을 나타낸다. 특정 실시양태에서, 카스파제 활성화는 공지된 방법에 의해 검출될 수 있다. 일부 실시양태에서, 활성화된 카스파제에 특이적으로 결합하는 (즉, 절단된 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는) 항체는 카스파제 활성화를 검출하는 데 사용될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 표현형은 활성 카스파제 3-이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 아폽토시스의 마커는 아폽토시스와 연관된 세포에서의 특색을 검출하는 시약이다. 특정 실시양태에서, 시약은 아넥신 V 분자이다.
일부 실시양태에서, 투여를 위한 조작된 세포를 함유하는 조성물은 세포 건강을 표시하거나 이와 일치하는 표현형을 나타내는 특정 수 또는 양의 세포를 함유한다. 임의의 실시양태 중 일부에서, 조작된 T 세포의 용량 중 약 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% 또는 1% 미만의 CAR-발현 T 세포가 아폽토시스의 마커, 임의로 아넥신 V 또는 활성 카스파제 3을 발현한다. 임의의 실시양태 중 일부에서, 조작된 T 세포의 용량 중 5%, 4%, 3%, 2% 또는 1% 미만의 CAR-발현 T 세포가 아넥신 V 또는 활성 카스파제 3을 발현한다.
입양 세포 요법의 문맥에서, 주어진 "용량"의 세포의 투여는 단일 조성물 및/또는 단일 비중단 투여로서, 예를 들어 단일 주사 또는 연속 주입으로서 주어진 양 또는 수의 세포의 투여를 포괄하고, 또한 3일 이하인 명시된 기간에 걸쳐 다중 개별 조성물 또는 주입으로 제공되는 분할 용량으로서 주어진 양 또는 수의 세포의 투여를 포괄한다. 따라서, 일부 문맥에서, 용량은 단일 시점에 주어지거나 개시되는, 명시된 수의 세포의 단일 또는 연속 투여이다. 그러나, 일부 문맥에서, 용량은 3일 이하의 기간에 걸쳐 다중 주사 또는 주입으로, 예컨대 3일 동안 또는 2일 동안 1일 1회 또는 하루의 기간에 걸쳐 다중 주입에 의해 투여된다.
따라서, 일부 측면에서, 용량의 세포는 단일 제약 조성물로 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량의 세포는 용량의 세포를 집합적으로 함유하는 복수의 조성물로 투여된다.
용어 "분할 용량"은 1일 초과에 걸쳐 투여되도록 분할된 용량을 지칭한다. 이러한 유형의 투여는 본 방법에 포괄되며, 단일 용량인 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 분할 용량의 세포는 용량의 세포를 집합적으로 포함하는 복수의 조성물로 3일 이하의 기간에 걸쳐 투여된다.
따라서, 세포의 용량은 분할 용량으로서 투여될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 용량은 2일 또는 3일에 걸쳐 대상체에게 투여될 수 있다. 분할 투여를 위한 예시적인 방법은 제1일에 용량의 25%를 투여하고, 제2일에 용량의 나머지 75%를 투여하는 것을 포함한다. 다른 실시양태에서, 용량의 33%가 제1일에 투여될 수 있고, 나머지 67%가 제2일에 투여될 수 있다. 일부 측면에서, 용량의 10%가 제1일에 투여되고, 용량의 30%가 제2일에 투여되고, 용량의 60%가 제3일에 투여된다. 일부 실시양태에서, 분할 용량은 3일 초과에 걸쳐 전개되지 않는다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량은 일반적으로 질환 부담을 감소시키는 데 효과적이도록 충분히 크다.
일부 실시양태에서, 세포는 일부 측면에서 목적하는 용량 또는 수의 세포 또는 세포 유형(들) 및/또는 목적하는 비의 세포 유형을 포함하는 목적하는 투여량으로 투여된다. 따라서, 일부 실시양태에서 세포의 투여량은 세포의 총수 (또는 kg 체중당 수) 및 개별 집단 또는 하위-유형의 목적하는 비, 예컨대 CD4+ 대 CD8+ 비를 기초로 한다. 일부 실시양태에서, 세포의 투여량은 개별 집단 또는 개별 세포 유형에서의 세포의 목적하는 총수 (또는 체중 kg당 수)에 기초한다. 일부 실시양태에서, 투여량은 이러한 특색, 예컨대 개별 집단 내의 목적하는 총 세포의 수, 목적하는 비, 및 목적하는 세포의 총수의 조합에 기초한다.
일부 실시양태에서, 세포의 집단 또는 하위-유형, 예컨대 CD8+ 및 CD4+ T 세포는 총 세포의 목적하는 용량, 예컨대 T 세포의 목적하는 용량의 허용되는 차이로 또는 그 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 목적하는 용량은 세포의 목적하는 수 또는 세포가 투여되는 대상체의 체중 단위당 세포의 목적하는 수, 예를 들어 세포/kg이다. 일부 측면에서, 목적하는 용량은 세포의 최소 수 또는 체중 단위당 세포의 최소 수 이상이다. 일부 측면에서, 목적하는 용량으로 투여되는 총 세포 중에서, 개별 집단 또는 하위유형은 목적하는 산출 비 (예컨대 CD4+ 대 CD8+ 비)로 또는 그 근처로, 예를 들어 이러한 비의 특정 허용되는 차이 또는 오차 내로 존재한다.
일부 실시양태에서, 세포는 세포의 개별 집단 또는 하위-유형 중 1종 이상의 목적하는 용량, 예컨대 CD4+ 세포의 목적하는 용량 및/또는 CD8+ 세포의 목적하는 용량의 허용되는 차이로 또는 그 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 목적하는 용량은 하위유형 또는 집단의 세포의 목적하는 수, 또는 세포가 투여되는 대상체의 체중 단위당 이러한 세포의 목적하는 수, 예를 들어 세포/kg이다. 일부 측면에서, 목적하는 용량은 집단 또는 하위유형의 세포의 최소 수, 또는 체중 단위당 집단 또는 하위유형의 세포의 최소 수 이상이다.
따라서, 일부 실시양태에서, 투여량은 총 세포의 목적하는 고정 용량 및 목적하는 비에 기초하고/거나, 1종 이상, 예를 들어 개별 하위유형 또는 하위집단 각각의 목적하는 고정 용량에 기초한다. 따라서, 일부 실시양태에서, 투여량은 T 세포의 목적하는 고정 또는 최소 용량 및 CD4+ 대 CD8+ 세포의 목적하는 비에 기초하고/거나, CD4+ 및/또는 CD8+ 세포의 목적하는 고정 또는 최소 용량에 기초한다.
일부 실시양태에서, 세포는 다중 세포 집단 또는 하위유형, 예컨대 CD4+ 및 CD8+ 세포 또는 하위유형의 목적하는 산출 비의 허용되는 범위로 또는 그 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 목적하는 비는 특정 비일 수 있거나 또는 비의 범위일 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 목적하는 비 (예를 들어, CD4+ 대 CD8+ 세포의 비)는 정확히 또는 약 5:1 내지 정확히 또는 약 5:1 (또는 약 1:5 초과 및 약 5:1 미만), 또는 정확히 또는 약 1:3 내지 정확히 또는 약 3:1 (또는 약 1:3 초과 및 약 3:1 미만), 예컨대 정확히 또는 약 2:1 내지 정확히 또는 약 1:5 (또는 약 1:5 초과 및 약 2:1 미만, 예컨대 정확히 또는 약 5:1, 4.5:1, 4:1, 3.5:1, 3:1, 2.5:1, 2:1, 1.9:1, 1.8:1, 1.7:1, 1.6:1, 1.5:1, 1.4:1, 1.3:1, 1.2:1, 1.1:1, 1:1, 1:1.1, 1:1.2, 1:1.3, 1:1.4, 1:1.5, 1:1.6, 1:1.7, 1:1.8, 1:1.9: 1:2, 1:2.5, 1:3, 1:3.5, 1:4, 1:4.5, 또는 1:5이다. 일부 측면에서, 허용되는 차이는 목적하는 비의 약 1%, 약 2%, 약 3%, 약 4%, 약 5%, 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50% 내 (이들 범위 사이의 임의의 값 포함)이다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량 또는 조성물은 대략 1:1이거나 또는 대략 1:3 내지 대략 3:1, 예컨대 대략 1:1인, 재조합 수용체를 발현하는 CD4+ 세포 대 재조합 수용체를 발현하는 CD8+ 세포 및/또는 CD4+ 세포 대 CD8+ 세포의 규정된 또는 표적 비를 포함한다.
특정한 실시양태에서, 세포의 수 및/또는 농도는 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포의 수를 지칭한다. 다른 실시양태에서, 세포의 수 및/또는 농도는 투여된 모든 세포, T 세포 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 수 또는 농도를 지칭한다.
일부 측면에서, 용량의 크기는 1종 이상의 기준, 예컨대 선행 치료, 예를 들어 화학요법에 대한 대상체의 반응, 대상체에서의 질환 부담, 예컨대 종양 부하, 벌크, 크기, 또는 전이의 정도, 범위, 또는 유형, 병기, 및/또는 대상체에서의 독성 결과, 예를 들어 CRS, 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 신경독성, 및/또는 투여되는 세포 및/또는 재조합 수용체에 대한 숙주 면역 반응의 발생 가능성 또는 발생률에 기초하여 결정된다.
일부 실시양태에서, 세포와 조합된 조합 작용제의 투여는 세포의 확장 또는 증식을 유의하게 증가시킬 수 있고, 따라서 보다 낮은 용량의 세포가 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, 제공된 방법은 보다 낮은 용량, 예컨대 조합 작용제 투여의 부재 하에 세포 요법이 투여되는 방법에서의 용량보다 적어도 1.5-배, 2-배, 3-배, 4-배, 5-배 또는 10-배 더 적은 용량의 이러한 세포가 투여되어, 조합 작용제 투여의 부재 하에 세포 요법이 투여되는 방법에서의 용량과 동일하거나 보다 양호한 치료 효능을 달성하도록 한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어, 용량은 정확히 또는 약 5.0 x 106 내지 2.25 x 107, 5.0 x 106 내지 2.0 x 107, 5.0 x 106 내지 1.5 x 107, 5.0 x 106 내지 1.0 x 107, 5.0 x 106 내지 7.5 x 106, 7.5 x 106 내지 2.25 x 107, 7.5 x 106 내지 2.0 x 107, 7.5 x 106 내지 1.5 x 107, 7.5 x 106 내지 1.0 x 107, 1.0 x 107 내지 2.25 x 107, 1.0 x 107 내지 2.0 x 107, 1.0 x 107 내지 1.5 x 107, 1.5 x 107 내지 2.25 x 107, 1.5 x 107 내지 2.0 x 107, 2.0 x 107 내지 2.25 x 107개를 함유한다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량은 적어도 또는 적어도 약 5 x 106, 6 x 106, 7 x 106, 8 x 106, 9 x 106, 10 x 106 내지 약 15 x 106개의 재조합-수용체 발현 세포, 예컨대 CD8+인 재조합-수용체 발현 세포인 다수의 세포를 함유한다. 일부 실시양태에서, 이러한 용량, 예컨대 세포의 이러한 표적 수는 투여된 조성물 중 총 재조합-수용체 발현 세포를 지칭한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어, 보다 낮은 용량은 대상체의 킬로그램 체중당 약 5 x 106개 미만의 세포, 재조합 수용체 (예를 들어, CAR)-발현 세포, T 세포, 및/또는 PBMC, 예컨대 대상체의 킬로그램 체중당 약 4.5 x 106, 4 x 106, 3.5 x 106, 3 x 106, 2.5 x 106, 2 x 106, 1.5 x 106, 1 x 106, 5 x 105, 2.5 x 105, 또는 1 x 105개 미만의 이러한 세포를 함유한다. 일부 실시양태에서, 보다 낮은 용량은 대상체의 킬로그램 체중당 약 1 x 105, 2 x 105, 5 x 105, 또는 1 x 106개 미만의 이러한 세포, 또는 상기 값 중 임의의 2개 사이의 범위 내의 값을 함유한다. 일부 실시양태에서, 이러한 값은 재조합 수용체-발현 세포의 수를 지칭하고; 다른 실시양태에서, 이는 투여된 T 세포 또는 PBMC 또는 전체 세포의 수를 지칭한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 세포의 다중 용량, 예를 들어 2회 이상의 용량 또는 다중 연속 용량을 제공받는다. 일부 실시양태에서, 2회 용량이 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 대상체는 연속 용량을 제공받고, 예를 들어 제1 용량의 대략 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 21일 후에 제2 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 다중 연속 용량이 제1 용량 후에 투여되어, 추가의 용량 또는 용량들이 연속 용량의 투여 후에 투여된다. 일부 측면에서, 추가의 용량으로 대상체에게 투여되는 세포의 수는 제1 용량 및/또는 연속 용량과 동일하거나 유사하다. 일부 실시양태에서, 추가의 용량 또는 용량들은 이전 용량보다 더 크다. 일부 실시양태에서, 세포의 1회 이상의 후속 용량이 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포의 후속 용량은 세포의 제1 용량의 투여의 개시의 정확히 또는 약 7일, 14일, 21일, 28일 또는 35일 초과 후에 투여된다. 세포의 후속 용량은 제1 용량 초과, 대략 동일 또는 그 미만일 수 있다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법의 투여, 예컨대 세포의 제1 및/또는 제2 용량의 투여는 반복될 수 있다.
일부 실시양태에서, 세포 요법, 예를 들어 세포의 용량 또는 세포의 분할 용량의 제1 용량의 투여의 개시는 조합 작용제의 투여 전에 (선행하여), 그와 공동으로 또는 그 후에 (후속적으로 또는 그에 후속하여) 투여된다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량 또는 세포의 후속 용량은 조합 요법 방법에 따라 조합 작용제의 투여를 개시하는 것과 공동으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량 또는 세포의 후속 용량은 조합 요법 방법에 따라 조합 작용제의 투여를 개시하는 것과 동일한 날에 투여된다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량 또는 세포의 후속 용량은 조합 요법 방법에 따라 조합 작용제의 투여 개시의 1일 내, 2일 내, 3일 내, 4일 내, 5일 내, 6일 내 또는 7일 내에 투여된다.
일부 실시양태에서, 세포의 용량 또는 세포의 후속 용량은 제공된 조합 요법에 따라 조합 작용제의 투여를 시작하거나 개시하기 전에 투여된다. 일부 실시양태에서, 세포의 용량은 제공된 조합 요법에 따라 조합 작용제를 투여하기 적어도 또는 적어도 약 1시간, 적어도 또는 적어도 약 2시간, 적어도 또는 적어도 약 3시간, 적어도 또는 적어도 약 6시간, 적어도 또는 적어도 약 12시간, 적어도 또는 적어도 약 1일, 적어도 또는 적어도 약 2일, 적어도 또는 적어도 약 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 적어도 약 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 적어도 약 7일, 적어도 또는 약 적어도 12일, 적어도 또는 적어도 약 14일, 적어도 또는 약 적어도 15일, 적어도 또는 적어도 약 21일, 적어도 또는 적어도 약 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 적어도 약 35일, 적어도 또는 적어도 약 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 전에 투여된다.
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법에 따른 조합 작용제의 투여는 면역요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법)의 이전 투여가 면역요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법)의 개시 직전 또는 T 세포 요법의 개시 후 선행 시점에서의 T 세포의 기능성과 비교하여 T 세포의 감소된 기능성과 연관되거나 또는 연관될 가능성이 있는 시점에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법, 예를 들어 입양 T 세포 요법의 세포의 용량의 투여에 후속하여, 그러나 조합 작용제의 투여 전에, 예를 들어 혈액 중 수준 또는 양에 의해 결정되는 바와 같은 T 세포의 1종 이상의 기능, 예컨대 세포의 확장 또는 지속성, 또는 본원에 기재된 바와 같은 다른 표현형 또는 목적하는 결과, 예를 들어 예컨대 섹션 III에 기재된 것에 대해 대상체로부터의 샘플을 평가하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법, 예를 들어 입양 T 세포 요법의 세포의 용량의 투여에 후속하여, 그러나 조합 작용제의 투여 전에, 1종 이상의 소진 마커의 발현에 대해 대상체로부터의 샘플을 평가하는 것을 수반한다. 조합 요법의 양생법을 결정 또는 평가하기 위한 다양한 파라미터가 섹션 III에 기재되어 있다.
B. 조합 작용제의 투여
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법, 조성물, 조합물, 키트, 및 용도는 T 세포 요법의 투여, 예를 들어 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 T 세포의 투여 전에, 그에 후속하여, 그 동안, 동시에 또는 거의 동시에, 순차적으로, 및/또는 간헐적으로 투여될 수 있는 조합 작용제의 투여를 수반한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 면역조정 화합물, 예컨대 탈리도미드의 구조적 또는 기능적 유사체 또는 유도체 및/또는 E3 유비퀴틴 리가제의 억제제, 예를 들어 화합물 A (이베르도미드, (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 면역조정제, 예를 들어 화합물 A 및 스테로이드, 예를 들어 덱사메타손을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 표준 삼중 요법, 예를 들어 암 또는 증식성의 치료를 위한, 예를 들어 MM 치료를 위한 그러한 표준의 일부로서 주어지는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손을 포함하고, 표준 삼중 요법은 DPd 요법이다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제는 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손을 포함하고, 표준 삼중 요법은 PVd 요법이다.
1. 조성물 및 제제
본원에 제공된 조합 요법 방법, 조성물, 조합물, 키트 및 용도의 일부 실시양태에서, 조합 요법은 1종 이상의 조성물, 예를 들어 조합 작용제를 함유하는 1종 이상의 제약 조성물로 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제를 함유하는 조성물은 조합 작용제와 함께 투여되는 담체, 예컨대 희석제, 아주반트, 부형제 또는 비히클을 포함할 수 있다. 적합한 제약 담체의 예는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E. W. Martin]에 기재되어 있다. 이러한 조성물은 환자에게 적절한 투여를 위한 형태를 제공하기 위해 적합한 양의 담체와 함께, 일반적으로 정제된 형태의 치료 유효량의 조합 작용제를 함유할 것이다. 이러한 제약 담체는 멸균 액체, 예컨대 물 및 오일, 예컨대 석유, 동물, 식물 또는 합성 기원의 것, 예컨대 땅콩 오일, 대두 오일, 미네랄 오일 및 참깨 오일일 수 있다. 염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 또한 액체 담체로서, 특히 주사가능한 용액을 위해 사용될 수 있다. 제약 조성물은 희석제(들), 아주반트(들), 부착방지제(들), 결합제(들), 코팅(들), 충전제(들), 향미제(들), 착색제(들), 윤활제(들), 활택제(들), 보존제(들), 세제(들), 흡착제(들), 유화제(들), 제약 부형제(들), pH 완충제(들), 또는 감미제(들) 중 임의의 1종 이상 및 그의 조합을 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 액체, 고체, 동결건조된 분말, 겔 형태 및/또는 그의 조합일 수 있다. 일부 측면에서, 담체의 선택은 부분적으로 특정한 억제제에 의해 및/또는 투여 방법에 의해 결정된다.
제약상 허용되는 담체는 일반적으로 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 완충제 예컨대 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기 산; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 보존제 (예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 이뮤노글로불린; 친수성 중합체 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 비롯한 다른 탄수화물; 킬레이트화제 예컨대 EDTA; 당 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 반대-이온 예컨대 나트륨; 금속 착물 (예를 들어, Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 안정화제 및/또는 보존제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 조합 작용제를 함유하는 조성물은 또한 동결건조될 수 있다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물은 근육내, 정맥내, 피내, 병변내, 복강내 주사, 피하, 종양내, 경막외, 비강, 경구, 질, 직장, 국소, 국부, 귀, 흡입, 협측 (예를 들어, 설하), 및 경피 투여 또는 임의의 경로를 포함한 임의의 공지된 경로에 의한 투여를 위해 제제화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 다른 투여 방식이 또한 고려된다. 일부 실시양태에서, 투여는 볼루스 주입에 의해, 주사, 예를 들어 정맥내 또는 피하 주사, 안내 주사, 안구주위 주사, 망막하 주사, 유리체내 주사, 경중격 주사, 공막하 주사, 맥락막내 주사, 전방내 주사, 결막밑 주사, 결막하 주사, 테논낭하 주사, 안구후 주사, 안구주위 주사 또는 후공막근접 전달에 의해 이루어진다. 일부 실시양태에서, 투여는 비경구, 폐내 및 비강내에 의하고, 목적하는 경우에 국부 치료를 위해 병변내 투여에 의한다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 주어진 용량은 단일 볼루스 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 이는 예를 들어 3일 이하의 기간에 걸친 다중 볼루스 투여에 의해, 또는 연속 주입 투여에 의해 투여된다.
일부 실시양태에서, 투여는 치료 위치에 따라 국부, 국소 또는 전신일 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료를 필요로 하는 부위로의 국부 투여는, 예를 들어, 비제한적으로, 수술 동안 국부 주입, 예를 들어, 수술 후 상처 드레싱과 함께 국소 적용, 주사, 카테터, 좌제, 또는 이식물에 의해 달성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 또한 다른 생물학적 활성제와 함께 순차적으로, 간헐적으로 또는 동일한 조성물로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여는 또한 제어 방출 제제 및 장치 제어 방출을 포함하는 제어 방출 시스템, 예컨대 펌프에 의하는 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여는 경구이다.
일부 실시양태에서, 제약 및 치료 활성 화합물 및 그의 유도체는 전형적으로 단위 투여 형태 또는 다중 투여 형태로 제제화되고 투여된다. 각각의 단위 용량은 요구되는 제약 담체, 비히클 또는 희석제와 함께, 목적하는 치료 효과를 생성하기에 충분한 치료 활성 화합물의 미리 결정된 양을 함유한다. 일부 실시양태에서, 단위 투여 형태는 적합한 양의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 유도체를 함유하는 정제, 캡슐, 환제, 분말, 과립, 멸균 비경구 용액 또는 현탁액, 및 경구 용액 또는 현탁액, 및 오일 물 에멀젼을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 단위 투여 형태는 앰플 및 시린지 또는 개별적으로 포장된 정제 또는 캡슐에 함유될 수 있다. 단위 투여 형태는 그의 분획으로 또는 다중으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 다중 투여 형태는 분리된 단위 투여 형태로 투여될 단일 용기에 포장된 복수의 동일한 단위 투여 형태이다. 다중 투여 형태의 예는 바이알, 정제 또는 캡슐 병 또는 파인트 또는 갤런 병을 포함한다.
활성 성분은 마이크로캡슐, 콜로이드성 약물 전달 시스템 (예를 들어, 리포솜, 알부민 마이크로구체, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼 내에 포획될 수 있다. 특정 실시양태에서, 조합 작용제를 함유하는 제약 조성물은 포접 복합체, 예컨대 시클로덱스트린 포접 복합체로서, 또는 리포솜으로서 제제화된다. 리포솜은 숙주 세포 (예를 들어, T-세포 또는 NK 세포)를 특정한 조직에 표적화하는 역할을 할 수 있다. 리포솜을 제조하기 위한 많은 방법, 예컨대 예를 들어 문헌 [Szoka et al., Ann. Rev. Biophys. Bioeng., 9: 467 (1980)], 및 미국 특허 4,235,871, 4,501,728, 4,837,028, 및 5,019,369에 기재된 방법이 이용가능하다.
일부 측면에서 조합 작용제를 함유하는 제약 조성물은 조성물의 전달이 치료할 부위의 감작 전에 및 감작을 유발하기에 충분한 시간으로 일어나도록 시한-방출, 지연 방출 및 지속 방출 전달 시스템을 사용할 수 있다. 많은 유형의 방출 전달 시스템이 이용가능하고 공지되어 있다. 이러한 시스템은 조성물의 반복 투여를 피할 수 있고, 이에 의해 대상체 및 의사의 편의성을 증가시킨다.
조합 작용제를 함유하는 조성물은 또한 동결건조될 수 있다. 조성물은 투여 경로 및 목적하는 제제에 따라 보조 물질, 예컨대 습윤제, 분산제 또는 유화제 (예를 들어, 메틸셀룰로스), pH 완충제, 겔화제 또는 점도 증진 첨가제, 보존제, 향미제, 착색제 등을 함유할 수 있다. 일부 측면에서 적합한 제제를 제조하기 위해 표준 교재가 참고될 수 있다.
항미생물 보존제, 항산화제, 킬레이트화제 및 완충제를 비롯한, 조성물의 안정성 및 멸균성을 증진시키는 다양한 첨가제가 첨가될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산 등에 의해 보장될 수 있다. 주사가능한 제약 형태의 지속 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 사용에 의해 이루어질 수 있다.
지속-방출 제제가 제조될 수 있다. 지속-방출 제제의 적합한 예는 항체를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함하며, 매트릭스는 성형품, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐의 형태이다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제를 함유하는 조성물은 염, 예를 들어 제약상 허용되는 염의 형태로 투여된다. 적합한 제약상 허용되는 산 부가염은 무기 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 인산, 메타인산, 질산, 및 황산, 및 유기 산, 예컨대 타르타르산, 아세트산, 시트르산, 말산, 락트산, 푸마르산, 벤조산, 글리콜산, 글루콘산, 숙신산, 및 아릴술폰산, 예를 들어, p-톨루엔술폰산으로부터 유도된 것을 포함한다.
2. 면역조정 화합물 투여 스케줄
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법은 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A, 및 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)을 투여하는 것을 수반한다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여는 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)의 투여 전에, 그에 후속하여, 그 동안, 그 과정 동안, 동시에, 거의 동시에, 순차적으로 및/또는 간헐적으로 개시된다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법의 투여 전에 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여를 개시하는 것을 수반한다. 다른 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법의 투여 후에 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여를 개시하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 투여 스케줄은 T 세포 요법의 투여와 공동으로 또는 동시에 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여를 개시하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 주기로 투여된다. 일부 실시양태에서, 주기는 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A가 투여되는 투여 기간 후 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A가 투여되지 않는 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 예를 들어 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여 개시를 시작하는 것으로부터 주기의 총 일수는 정확히 또는 약 21일, 28일, 30일, 40일, 50일, 60일 초과 또는 그 초과이거나 또는 약 21일, 28일, 30일, 40일, 50일, 60일 또는 그 초과이다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 적어도 1회의 주기에서 수행되고, T 세포 요법의 투여의 개시는 동일한 날에, 임의로 공동으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 적어도 1회의 주기에서 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시 전이다. 일부 실시양태에서, 적어도 1회의 주기에서 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시와 공동으로 또는 동일한 날에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 개시의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 또는 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 투여된다. 일부 측면에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 개시의 약 96시간, 72시간, 48시간, 24시간, 12시간, 6시간, 2시간 또는 1시간 이하 전에 투여된다.
면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A가 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법) 전에 주어지는 임의의 이러한 실시양태 중 일부에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 개시까지 및/또는 세포 요법의 개시 후의 시간 동안 규칙적 간격으로 계속된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법)의 투여 후에 투여되거나 또는 추가로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법)의 투여 개시 후 정확히 또는 약 1시간, 2시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 96시간, 4일, 5일, 6일 또는 7일, 14일, 15일, 21일, 24일, 28일, 30일, 36일, 42일, 60일, 72일 또는 90일 내에 투여된다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 세포 요법의 투여의 개시 후에 면역조정 화합물을, 예컨대 규칙적 간격으로, 계속 투여하는 것을 수반한다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법)의 투여의 개시의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일 또는 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 투여된다.
임의의 이러한 상기 실시양태 중 일부에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법, 예컨대 CAR-T 세포 요법)의 투여의 개시 전 및 후에 투여된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 (i) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가, 혈액에서 검출가능한 후에, 검출가능하지 않거나 또는 감소되고, 임의로 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점과 비교하여 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가 T 세포 요법의 투여의 개시 후에 대상체의 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 수의 세포의 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 10-배 초과 또는 그 초과만큼 감소되고/거나; (iv) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능한 후의 시점에, 대상체로부터의 혈액에서 검출가능한 T 세포의 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 내의 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로의 치료 후에 질환 진행을 나타내고/거나 완화 후에 재발하였고/거나; (iv) 대상체가 T 세포의 투여 전 또는 후 및 면역조정 화합물의 투여의 개시 전의 시점에서의 종양 부담과 비교하여 증가된 종양 부담을 나타낸 때 또는 그 후, 임의로 직후 또는 그 후 1 내지 3일 내에 수행된다.
일부 실시양태에서, 적어도 1회의 주기에서 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시 후이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시의 적어도 또는 약 적어도 1일, 적어도 또는 약 적어도 2일, 적어도 또는 약 적어도 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 약 적어도 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 약 적어도 7일, 적어도 또는 약 적어도 8일, 적어도 또는 약 적어도 9일, 적어도 또는 약 적어도 10일, 적어도 또는 적어도 약 12일, 적어도 또는 약 적어도 14일, 적어도 또는 적어도 약 15일, 적어도 또는 약 적어도 21일, 적어도 또는 적어도 약 24일, 적어도 또는 약 적어도 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 약 적어도 35일 또는 적어도 또는 약 적어도 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일, 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 후이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시의 적어도 2일 후, 적어도 1주 후, 적어도 2주 후, 적어도 3주 후, 또는 적어도 4주 후에 수행된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시의 2 내지 28일 또는 7 내지 21일 후에 수행된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 투여의 개시는 T 세포 요법의 투여의 개시의 정확히 또는 약 14일, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 21일, 24일, 또는 28일 초과 후의 시점에 수행된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 세포 요법의 개시 후에 1일 수회, 1일 2회, 매일, 격일, 1주 3회, 1주 2회 또는 1주 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 매일 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 1일 2회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 1일 3회 투여된다. 다른 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 격일로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 매일 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 투여 기간 동안 복수의 연속일, 예컨대 최대 약 연속 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30일, 또는 30일 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 정확히 또는 약 연속 7일 초과, 정확히 또는 약 연속 14일 초과, 정확히 또는 약 연속 21일 초과, 정확히 또는 약 연속 21일 초과, 또는 정확히 또는 약 연속 28일 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 투여 기간 동안 최대 연속 21일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 투여 기간 동안 최대 연속 21일 동안 투여되며, 여기서 주기는 면역조정 화합물의 투여의 개시 시 시작되는 30일 초과를 포함한다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 투여 기간 동안 약 연속 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30일 이하, 또는 30일 이하 동안 투여된다. 특정 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 21일 치료 주기에 걸쳐 14일 동안 1일 1회 투여된다. 특정 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 28일 치료 주기에 걸쳐 21일 동안 1일 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 투여 기간 동안 연속 14일 이하 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 주기로 투여되며, 여기서 주기는 복수의 연속일 동안 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A를 투여한 후 면역조정 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 휴지 기간은 약 1일 초과, 약 연속 3일 초과, 약 연속 5일 초과, 약 연속 7일 초과, 약 연속 8일 초과, 약 연속 9일 초과, 약 연속 10일 초과, 약 연속 11일 초과, 약 연속 12일 초과, 약 연속 13일 초과, 약 연속 14일 초과, 약 연속 15일 초과, 약 연속 16일 초과, 약 연속 17일 초과, 약 연속 18일 초과, 약 연속 19일 초과, 약 연속 20일 초과, 또는 약 연속 21일 초과 또는 그 초과이다. 일부 실시양태에서, 휴지 기간은 연속 7일 초과, 연속 14일 초과, 21일 초과, 또는 28일 초과이다. 일부 실시양태에서, 휴지 기간은 약 연속 14일 초과이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물의 투여 주기는 휴지 기간을 함유하지 않는다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 주기로 투여되며, 여기서 주기는 적어도 1회 반복된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 적어도 2 주기, 적어도 3 주기, 적어도 4 주기, 적어도 5 주기, 적어도 6 주기, 적어도 7 주기, 적어도 8 주기, 적어도 9 주기, 적어도 10 주기, 적어도 11 주기, 또는 적어도 12 주기 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24 주기 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 투여의 개시 전에 또는 그에 후속하여 매일 6회, 매일 5회, 매일 4회, 매일 3회, 매일 2회, 매일 1회, 격일, 3일마다, 매주 2회, 매주 1회 또는 단지 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 투여 기간 전에, 그 동안, 그 과정 동안, 및/또는 그 후에 규칙적 간격으로 다중 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 투여 전에 규칙적 간격으로 1회 이상의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 T 세포 요법의 투여 후에 규칙적 간격으로 1회 이상의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 용량 중 1회 이상은 T 세포 요법의 용량의 투여와 동시에 이루어질 수 있다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 용량, 빈도, 지속기간, 시기 및/또는 투여 순서는 본원에 기재된 스크리닝 단계의 결과 및/또는 치료 결과의 평가의 특정한 역치 또는 기준, 예를 들어 본원의 섹션 III에 기재된 것에 기초하여 결정된다.
일부 실시양태에서, 방법은 치료 유효량의 면역조정 화합물을 이전에 투여받은 대상체에게 세포 요법을 투여하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 재조합 수용체를 발현하는 세포의 용량을 대상체에게 투여하기 전에 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물을 사용한 치료는 세포의 용량의 투여와 동시에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 세포의 용량의 투여 후에 투여된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 또는 21일 초과 동안 매일 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 또는 21일 초과 동안 1일 2회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 또는 21일 초과 동안 1일 3회 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 또는 21일 초과 동안 격일 투여된다.
본원에 제공된 방법의 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A, 및 T 세포 요법은 동시에 또는 거의 동시에 투여된다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 약 100 mg, 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 50 mg, 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 25 mg, 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 10 mg, 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 5 mg, 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 1 mg, 정확히 또는 약 1 mg 내지 100 mg, 정확히 또는 약 1 mg 내지 50 mg, 정확히 또는 약 1 mg 내지 25 mg, 정확히 또는 약 1 mg 내지 10 mg, 정확히 또는 약 1 mg 내지 5 mg, 정확히 또는 약 5 mg 내지 100 mg, 정확히 또는 약 5 mg 내지 50 mg, 정확히 또는 약 5 mg 내지 25 mg, 정확히 또는 약 5 mg 내지 10 mg, 정확히 또는 약 10 mg 내지 100 mg, 정확히 또는 약 10 mg 내지 50 mg, 정확히 또는 약 10 mg 내지 25 mg, 정확히 또는 약 25 mg 내지 100 mg, 정확히 또는 약 25 mg 내지 50 mg 또는 정확히 또는 약 50 mg 내지 100 mg (각각 경계값 포함)의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 양은 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 1일 1회 양이다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 약 1 mg 내지 약 20 mg, 예를 들어 약 1 mg 내지 약 10 mg, 약 2.5 mg 내지 약 7.5 mg, 약 5 mg 내지 약 15 mg, 예컨대 약 5 mg, 10 mg, 15 mg 또는 20 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 약 10 μg/kg 내지 5 mg/kg, 예를 들어, 약 100 μg/kg 내지 약 2 mg/kg, 약 200 μg/kg 내지 약 1 mg/kg, 약 400 μg/kg 내지 약 600 μg/kg, 예컨대 약 500 μg/kg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 양은 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 1일 1회 양이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 A이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 B이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 적어도 또는 적어도 약 1일에 0.1 mg, 1일에 0.5 mg, 1일에 1.0 mg, 1일에 2.5 mg, 1일에 5 mg, 1일에 10 mg, 1일에 25 mg, 1일에 50 mg 또는 1일에 100 mg의 총 1일 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 용량은 1일에 정확히 또는 약 25 mg이다. 특정한 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A의 용량은 1일에 정확히 또는 약 10 mg이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 A이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 B이다.
일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 정확히 또는 약 1 mg, 2.5 mg, 5 mg, 7.5 mg, 10 mg, 15 mg 초과 및 25 mg 미만의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 정확히 또는 약 1일에 1 mg, 1일에 2.5 mg, 1일에 5 mg, 1일에 7.5 mg, 1일에 10 mg, 1일에 15 mg 초과 및 1일에 25 mg 미만의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 A이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 화합물 B이다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 1일에 유효량의 화합물 A를 대상체에게 투여하여 T 세포 요법의 활성 및/또는 기능을 조정하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 정확히 또는 약 1 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 양은 정확히 또는 약 0.1 mg, 정확히 또는 약 0.2 mg, 정확히 또는 약 0.3 mg, 정확히 또는 약 0.4 mg, 정확히 또는 약 0.5 mg, 정확히 또는 약 0.6 mg, 정확히 또는 약 0.7 mg, 정확히 또는 약 0.8 mg, 정확히 또는 약 0.9 mg 또는 정확히 또는 약 1.0 mg, 또는 상기 중 임의의 것 사이의 임의의 값이다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 양은 4주 기간 또는 주기에서 3주 동안 매일 투여를 수반하는 주기 요법으로 투여된다. 화합물 A의 투여는 소정의 기간 동안, 예컨대 일반적으로 1주 초과 동안, 예컨대 1개월 이상, 2개월 이상, 3개월 이상, 4개월 이상, 5개월 이상 또는 6개월 이상 동안 수행된다. 예시적인 투여 요법은 본원에 기재되어 있다.
일부 측면에서, 제공된 방법은 대상체에게 T 세포 요법 및/또는 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A를 투여한 후에 독성을 최소화하거나 피한다. 일부 측면에서, 본원에 제공된 방법은 화합물에 대해 MTD인 것으로 확인된 용량보다 실질적으로 더 낮은 용량을 투여하는 것을 수반한다.
실시양태 중 임의의 것의 일부에서, 방법 및 용도는 화합물 A의 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)의 개시 후에 (그에 후속하여) 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능한 때 또는 그 후에 개시된다. 일부 경우에, 화합물 A 투여의 개시는 (i) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가, 혈액에서 검출가능한 후에, 검출가능하지 않거나 또는 감소되고, 임의로 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점과 비교하여 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 세포의 수가 T 세포 요법의 투여의 개시 후에 대상체의 혈액에서 검출가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 수의 세포의 1.5-배, 2.0-배, 3.0-배, 4.0-배, 5.0-배, 10-배 초과 또는 그 초과만큼 감소되고/거나; (iv) T 세포 요법의 세포의 피크 또는 최대 수준이 대상체의 혈액에서 검출가능한 후의 시점에, 대상체로부터의 혈액에서 검출가능한 세포의 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 내의 총 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로의 치료 후에 질환 진행을 나타내고/거나 완화 후에 재발하였고/거나; (iv) 대상체가 세포의 투여 전 또는 후 및 화합물 A의 투여의 개시 전의 시점에서의 종양 부담과 비교하여 증가된 종양 부담을 나타낸 후 1주째 또는 그 내, 예컨대 1, 2 또는 3일 내에 수행된다. 특정 측면에서, 제공된 방법은 T 세포 요법에 대한 피크 반응이 관찰되었지만 반응, 예를 들어 T 세포의 존재 및/또는 종양 부담의 감소가 감소되거나 더 이상 검출가능하지 않은 대상체에서 T 세포 요법을 증진, 증가 또는 강화시키기 위해 수행된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시의 정확히 또는 약 14 내지 약 35일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시의 약 21 내지 약 35일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시의 약 21 내지 약 28일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시의 정확히 또는 약 14일, 정확히 또는 약 15일, 정확히 또는 약 16일, 정확히 또는 약 17일, 정확히 또는 약 18일, 정확히 또는 약 19일, 정확히 또는 약 20일, 정확히 또는 약 21일, 정확히 또는 약 22일, 정확히 또는 약 23일, 정확히 또는 약 24일, 정확히 또는 약 25일, 정확히 또는 약 26일, 정확히 또는 약 27일, 정확히 또는 약 28일, 정확히 또는 약 29일, 정확히 또는 약 30일, 정확히 또는 약 31일, 정확히 또는 약 32일, 정확히 또는 약 33일, 정확히 또는 약 34일, 또는 정확히 또는 약 35일 후에 개시된다.
일부 실시양태에서, 대상체가 화합물 A를 처음 투여받는 시점에 및/또는 투여의 개시 후 임의의 후속 시점에, 대상체는 중증 독성, 예컨대 중증 시토카인 방출 증후군 (CRS) 또는 중증 독성의 징후 또는 증상을 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 대상체가 중증 CRS의 징후 또는 증상을 나타내지 않고/거나 등급 3 이상의 CRS, 예컨대 연장된 등급 3 CRS 또는 등급 4 또는 5 CRS를 나타내지 않는 시점에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 대상체가 중증 신경독성의 징후 또는 증상을 나타내지 않고/거나 등급 3 이상의 신경독성, 예컨대 연장된 등급 3 신경독성 또는 등급 4 또는 등급 5 신경독성을 나타내지 않는 시점에 이루어진다. 일부 측면에서, T 세포 요법의 투여 개시 시간과 화합물 A의 투여 시간 사이에, 대상체는 중증 CRS를 나타내지 않았고/거나 등급 3 이상의 CRS, 예컨대 연장된 등급 3 CRS 또는 등급 4 또는 5 CRS를 나타내지 않았다. 일부 경우에, T 세포 요법의 투여 개시 시간과 화합물 A의 투여 시간 사이에, 대상체는 중증 신경독성을 나타내지 않았고/거나 등급 3 이상의 신경독성, 예컨대 연장된 등급 3 신경독성 또는 등급 4 또는 5 신경독성을 나타내지 않았다.
일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 정확히 또는 약 0.1 mg 내지 5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 0.1 mg 내지 약 5 mg, 약 0.5 mg 내지 약 5 mg, 약 1 mg 내지 약 5 mg, 약 1.5 mg 내지 약 5 mg, 약 2 mg 내지 약 5 mg, 약 2.5 mg 내지 약 5 mg, 약 3 mg 내지 약 5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 4 mg, 약 0.1 mg 내지 약 4 mg, 약 1 mg 내지 약 4 mg, 약 1.5 mg 내지 약 4 mg, 약 2 mg 내지 약 4 mg, 약 2.5 mg 내지 약 4 mg, 약 3 mg 내지 약 4 mg, 약 0.1 mg 내지 약 3.5 mg, 약 0.5 mg 내지 약 3.5 mg, 약 1 mg 내지 약 3.5 mg, 약 1.5 mg 내지 약 3.5 mg, 약 2 mg 내지 약 3.5 mg, 약 2.5 mg 내지 약 3.5 mg, 약 3 mg 내지 약 3.5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 3 mg, 약 0.5 mg 내지 약 3 mg, 약 1 mg 내지 약 3 mg, 약 1.5 mg 내지 약 3 mg, 약 2 mg 내지 약 3 mg, 약 2.5 mg 내지 약 3 mg, 약 0.1 mg 내지 약 2.5 mg, 약 0.5 mg 내지 약 2.5 mg, 약 1 mg 내지 약 2.5 mg, 약 1.5 mg 내지 약 2.5 mg, 약 2 mg 내지 약 2.5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 2 mg, 약 0.5 mg 내지 약 2 mg, 약 1 mg 내지 약 2 mg, 약 1.5 mg 내지 약 2 mg, 약 0.1 mg 내지 약 1.5 mg, 약 0.5 mg 내지 약 1.5 mg, 약 1 mg 내지 약 1.5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 0.5 mg 내지 약 1 mg의 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 0.5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 1 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 1.5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 2 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 2.5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 또는 적어도 약, 또는 정확히 또는 적어도 3 mg의 양으로 투여된다. 임의의 이러한 실시양태 중 일부에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 5 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 4.5 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 4 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 3.5 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 3 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 2.5 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 2 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 1.5 mg 이하의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 약 1 mg 이하의 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 정확히 또는 약 3 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 정확히 또는 약 2.5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 정확히 또는 약 2 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 정확히 또는 약 1.5 mg의 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 1일에 화합물 A의 투여는 1일에 정확히 또는 약 1 mg의 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 최대 농도 (Cmax)를 약 10 nM 내지 약 500 nM, 약 40 nM 내지 약 500 nM, 약 60 nM 내지 약 500 nM, 약 80 nM 내지 약 500 nM, 약 100 nM 내지 약 500 nM, 약 150 nM 내지 약 500 nM, 약 200 nM 내지 약 500 nM, 약 250 nM 내지 약 500 nM, 약 300 nM 내지 약 500 nM, 약 350 nM 내지 약 500 nM, 약 400 nM 내지 약 500 nM, 10 nM 내지 약 400nM, 약 40 nM 내지 약 400 nM, 약 60 nM 내지 약 400 nM, 약 80 nM 내지 약 400 nM, 약 100 nM 내지 약 400 nM, 약 150 nM 내지 약 400 nM, 약 200 nM 내지 약 400 nM, 약 250 nM 내지 약 400 nM, 약 300 nM 내지 약 400 nM, 약 350 nM 내지 약 400 nM, 10 nM 내지 약 350 nM, 약 40 nM 내지 약 350 nM, 약 60 nM 내지 약 350 nM, 약 80 nM 내지 약 350 nM, 약 100 nM 내지 약 350 nM, 약 150 nM 내지 약 350 nM, 약 200 nM 내지 약 350 nM, 약 250 nM 내지 약 350 nM, 약 300 nM 내지 약 350 nM, 약 10 nM 내지 약 300 nM, 약 40 nM 내지 약 300 nM, 약 60 nM 내지 약 300 nM, 약 80 nM 내지 약 300 nM, 약 100 nM 내지 약 300 nM, 약 150 nM 내지 약 300 nM, 약 200 nM 내지 약 300 nM, 약 250 nM 내지 약 250 nM, 약 10 nM 내지 약 250 nM, 약 40 nM 내지 약 250 nM, 약 60 nM 내지 약 250 nM, 약 80 nM 내지 약 250 nM, 약 100 nM 내지 약 250 nM, 약 150 nM 내지 약 250 nM, 약 200 nM 내지 약 250 nM, 약 10 nM 내지 약 200 nM, 약 40 nM 내지 약 200 nM, 약 60 nM 내지 약 200 nM, 약 80 nM 내지 약 200 nM, 약 100 nM 내지 약 200 nM, 약 150 nM 내지 약 200 nM, 약 10 nM 내지 약 150 nM, 약 40 nM 내지 약 150 nM, 약 60 nM 내지 약 150 nM, 약 80 nM 내지 약 150 nM, 약 100 nM 내지 약 150 nM, 약 10 nM 내지 약 100 nM, 약 40 nM 내지 약 100 nM, 약 60 nM 내지 약 100 nM, 또는 약 80 nM 내지 약 100 nM의 범위로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 Cmax를 적어도 약 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 16시간 또는 24시간 동안의 범위로 유지시키는 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A는 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 또는 적어도 약 40 nM로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 또는 적어도 약 60 nM로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 또는 적어도 약 80 nM로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 또는 적어도 약 90 nM로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 또는 적어도 약 100 nM로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 Cmax를 적어도 약 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 16시간 또는 24시간 동안 유지시키는 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 500 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 400 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 350 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 300 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 250 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 200 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 예컨대 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안 혈액 중 화합물 A의 Cmax를 약 150 nM 이하로 달성하는 양으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A는 명시된 기간 또는 지속기간 동안 화합물의 반복 투여를 수반하는 주기 요법으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A는 주기 요법으로 투여되며, 여기서 주기 요법의 각각의 주 동안 또는 주기 요법의 적어도 1주 동안, 화합물은 유효량, 예컨대 상기 기재된 양으로, 각각 1주 초과의 기간 동안 주당 5일 이하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 또는 투여되는 1일당 화합물 A의 양은 3 mg 이하 (예를 들어, 3 mg, 2.5 mg, 2 mg, 1.5 mg, 1 mg, 0.5 mg 이하)이다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 또는 투여되는 1일당 화합물 A의 양은 정확히 또는 약 3 mg, 정확히 또는 약 2.5 mg, 정확히 또는 약 2 mg, 정확히 또는 약 1.5 mg, 정확히 또는 약 1 mg, 정확히 또는 약 0.5 mg이다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 또는 투여되는 1일당 화합물 A의 양은 약 1 mg 내지 약 2 mg (예를 들어, 정확히 또는 약 1 mg, 정확히 또는 약 2 mg)이다.
일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 각각 1주에 5일 이하로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 각각 1주에 4일 이하 동안 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 각각 1주에 3일 이하 동안 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 1주에 3 내지 5일 동안 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 1주에 4 내지 5일 동안 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 화합물 A를 1주에 3 내지 4일 동안 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주, 또는 주기 요법의 적어도 1주는 화합물 A를 1주에 연속 5일 이하로 각각 투여한 후, 주의 나머지 동안에는 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주, 또는 주기 요법의 적어도 1주는 화합물 A를 1주에 연속 3 내지 5일 동안 투여한 후, 주의 나머지 동안에는 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주, 또는 주기 요법의 적어도 1주는 화합물 A를 1주에 연속 3일 각각에 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 4일의 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주, 또는 주기 요법의 적어도 1주는 화합물 A를 1주에 연속 4일 각각에 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 3일의 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주, 또는 주기 요법의 적어도 1주는 화합물 A를 1주에 연속 5일 각각에 1회 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 2일의 휴지 기간을 포함한다.
일부 실시양태에서, 화합물 A를 투여하는 주기 요법은 T 세포 요법의 투여의 개시에 후속하는 기간 동안 수행된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 1주 초과의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 약 또는 적어도 약 1개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 약 또는 적어도 약 2개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 약 또는 적어도 약 3개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 약 또는 적어도 약 4개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 약 또는 적어도 약 5개월의 기간 동안 연장된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 적어도 3개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 90일, 정확히 또는 약 100일, 정확히 또는 약 105일, 정확히 또는 약 110일, 정확히 또는 약 115일, 정확히 또는 약 120일, 정확히 또는 약 125일, 정확히 또는 약 130일, 정확히 또는 약 135일, 정확히 또는 약 140일, 정확히 또는 약 145일, 정확히 또는 약 150일, 정확히 또는 약 155일, 정확히 또는 약 160일, 정확히 또는 약 165일, 정확히 또는 약 170일, 정확히 또는 약 175일, 정확히 또는 약 180일, 정확히 또는 약 185일, 정확히 또는 약 190일, 정확히 또는 약 195일, 정확히 또는 약 200일 또는 그 초과의 기간 동안 연장된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 90일 또는 정확히 또는 약 3개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 120일 또는 4개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 150일 또는 5개월의 기간 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 180일 또는 6개월의 기간 동안 연장된다.
일부 실시양태에서, T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 기간의 말미에 (예를 들어, 정확히 또는 약 3, 4, 5, 또는 6개월에), 대상체가 정확히 또는 약 6개월 전에 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성하였거나 또는 암 (예를 들어, B 세포 악성종양)이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발된 경우에, 화합물 A의 투여는 종료되거나 정지된다. 일부 실시양태에서, 기간은 대상체가 기간의 말미 전의 시점에 완전 반응 (CR)을 달성한 경우에도 화합물 A의 투여가 기간 동안 계속되도록 하는 고정된 지속기간이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 최소 잔류 질환 (MRD)을 갖는 CR을 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 MRD-인 CR을 갖는다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는, 대상체가 치료 후 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD)을 나타내는 경우에, 기간의 말미 후에 계속되고, 예를 들어 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 3, 4, 5 또는 6개월보다 길게 계속된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 6개월 초과 동안 계속된다. 일부 실시양태에서, 초기 기간의 말미에 PR 또는 SD를 나타낸 대상체의 경우에, 화합물 A의 투여는 대상체가 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성할 때까지 또는 암 (예를 들어 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종)이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발될 때까지 계속된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 화합물 A를 1주 초과의 기간 동안 1주에 5일 이하 (예를 들어, 3일, 4일 또는 5일) 동안 1일에 약 3 mg 이하 (예를 들어, 1 내지 3 mg, 1 mg, 2 mg 또는 3 mg)의 양으로 투여하는 것을 포함하는 주기 요법으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 연속 3일, 연속 4일 또는 연속 5일 각각 동안 화합물을 투여한 후, 주의 나머지 동안에는 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 수반한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 5일 동안 화합물을 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 2일의 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 투여의 개시의 약 14일 초과 내지 약 35일 (예를 들어, 약 21 내지 약 35일) 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A를 투여하는 시점에, 대상체는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포)의 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법)의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 3개월 또는 그 초과, 정확히 또는 약 4개월 또는 그 초과, 정확히 또는 약 5개월 또는 그 초과 또는 정확히 또는 약 6개월 또는 그 초과로 연장된 기간 동안 1주에 5일 이하 (예를 들어, 3일, 4일 또는 5일) 동안 유효량의 화합물 A를 투여하는 것을 포함하는 주기 요법으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 기간은 정확히 또는 약 3개월, 정확히 또는 약 4개월, 정확히 또는 약 5개월 또는 정확히 또는 약 6개월 동안 연장된다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 연속 3일, 연속 4일 또는 연속 5일 각각 동안 화합물을 투여한 후, 주의 나머지 동안에는 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 수반한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 연속 5일 각각에 화합물을 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 2일의 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 투여의 개시의 약 14일 초과 내지 약 35일 (예를 들어, 약 21 내지 약 35일, 예컨대 정확히 또는 약 28일) 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A를 투여하는 시점에, 대상체는 세포 요법의 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 대상체가 정확히 또는 약 기간의 말미 전에 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성하였거나 또는 암, 예를 들어 B 세포 악성종양이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발된 경우에, 화합물 A의 투여는 종료되거나 정지된다. 일부 실시양태에서, 대상체가 기간의 말미 전의 시점에 완전 반응 (CR)을 달성한 경우에도 화합물 A의 투여는 기간 동안 계속된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는, T 세포 요법의 투여의 개시 후에 대상체가 치료 후 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD)을 나타내는 경우에, 초기 기간의 말미 후에 계속된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 대상체가 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성할 때까지 또는 암, 예를 들어 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발될 때까지 반복된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법 (예를 들어, CAR T 세포 요법)의 투여의 개시 후 약 3개월 또는 그 초과의 기간 동안 (예를 들어, 정확히 또는 약 3개월, 4개월, 5개월, 또는 6개월의 기간 동안) 1주에 5일 이하 (예를 들어, 3일, 4일 또는 5일) 각각에 1일에 약 3 mg 이하 (예를 들어, 1 내지 3 mg, 1 mg, 2 mg, 또는 3 mg)의 양으로 화합물 A를 투여하는 것을 포함하는 주기 요법으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 연속 3일, 연속 4일 또는 연속 5일 각각에 화합물을 투여한 후, 주의 나머지 동안에는 화합물을 투여하지 않는 휴지 기간을 수반한다. 일부 실시양태에서, 주기 요법의 각각의 주는 5일 각각에 화합물을 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 2일의 휴지 기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 투여의 개시의 약 14일 초과 내지 약 35일 (예를 들어, 약 21 내지 약 35일, 예를 들어 정확히 또는 약 28일) 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A를 투여하는 시점에, 대상체는 세포 요법의 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 암은 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 6개월째에, 대상체가 정확히 또는 약 6개월 전에 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성하였거나 또는 암, 예를 들어 B 세포 악성종양이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발된 경우에, 화합물 A의 투여는 종료되거나 정지된다. 일부 실시양태에서, 주기 요법은 대상체가 기간의 말미 전의 시점에 완전 반응 (CR)을 달성한 경우에도 전체 기간 동안 계속된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 기간의 말미 후에 추가로 계속되고, 예컨대 정확히 또는 약 6개월째에, 대상체가 치료 후 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD)을 나타내는 경우에, 세포 요법의 투여의 개시 후 6개월 초과 동안 계속된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 대상체가 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성할 때까지 또는 암, 예를 들어 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발될 때까지 계속된다.
일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법)의 개시 후 정확히 또는 약 6개월 또는 그 초과의 기간 동안 화합물 A를 1주에 연속 5일 각각에 1일에 약 1 mg 내지 약 3 mg (예를 들어, 1 mg, 2 mg 또는 3 mg)의 양으로 투여한 후, 화합물을 투여하지 않는 2일의 휴지 기간을 포함하는 주기 요법으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 투여의 개시의 약 14일 초과 내지 약 35일 (예를 들어, 약 21 내지 약 35일, 예를 들어 정확히 또는 약 28일) 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A를 투여하는 시점에, 대상체는 세포 요법의 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 대상체가 정확히 또는 약 6개월째에 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성하였거나 또는 암, 예를 들어 B 세포 악성종양이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발된 경우에, 화합물 A의 투여는 세포 요법의 투여의 개시 후 정확히 또는 약 6개월째에 종료되거나 정지된다. 일부 실시양태에서, 대상체가 정확히 또는 약 6개월 전의 시점에 완전 반응 (CR)을 달성한 경우에도 화합물 A의 투여는 기간 동안 계속된다. 일부 실시양태에서, 정확히 또는 약 6개월째에, 대상체가 치료 후 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD)을 나타내는 경우에, 화합물 A의 투여는 T 세포 요법의 투여의 개시 후 6개월 초과 동안 추가로 투여된다. 일부 실시양태에서, 투여는 대상체가 치료 후 완전 반응 (CR)을 달성할 때까지 또는 질환 또는 상태, 예를 들어 다발성 골수종, 예컨대 재발성/불응성 다발성 골수종이 치료 후 완화 후에 진행되거나 재발될 때까지 계속된다.
일부 경우에, 주기 요법은 임의의 시점에 및/또는 1회 이상 중단될 수 있다. 일부 경우에, 대상체에서 1종 이상의 유해 사건, 용량-제한 독성 (DLT), 호중구감소증 또는 열성 호중구감소증, 혈소판감소증, 시토카인 방출 증후군 (CRS) 및/또는 신경독성 (NT), 예컨대 섹션 IV에 기재된 것이 발생하면, 주기 요법은 중단 또는 변형된다. 일부 실시양태에서, 1주의 특정 일의 각각의 투여 동안 또는 1일당 화합물 A의 양은 대상체에서 1종 이상의 유해 사건, 용량-제한 독성 (DLT), 호중구감소증 또는 열성 호중구감소증, 혈소판감소증, 시토카인 방출 증후군 (CRS) 및/또는 신경독성 (NT)이 발생한 후에 변경된다.
상기 언급된 실시양태 중 임의의 것에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 경구로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 정제 또는 캡슐로서 투여된다.
일부 실시양태에서, 투여량, 예컨대 1일 투여량은 1회 이상의 분할 용량, 예컨대 2, 3 또는 4회 용량으로, 또는 단일 제제로 투여된다. 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A는 단독으로, 제약상 허용되는 담체의 존재 하에, 또는 다른 치료제의 존재 하에 투여될 수 있다.
예를 들어 특정한 작용제 및 투여 경로에 따라, 더 높거나 더 낮은 투여량의 면역조정 화합물이 사용될 수 있는 것으로 이해된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 단독으로 또는 제약 조성물의 형태로 투여될 수 있으며, 여기서 화합물은 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와의 혼합물 또는 배합물로 존재한다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 전신으로 또는 치료할 기관 또는 조직에 국부로 투여될 수 있다. 예시적인 투여 경로는 국소, 주사 (예컨대 피하, 근육내, 피내, 복강내, 종양내, 및 정맥내), 경구, 설하, 직장, 경피, 비강내, 질 및 흡입 경로를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 투여 경로는 경구, 비경구, 직장, 비강, 국소 또는 안구 경로, 또는 흡입에 의한 것이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 경구로 투여된다. 일부 실시양태에서, 면역조정 화합물은 고체 투여 형태, 예컨대 캡슐, 정제 및 분말로, 또는 액체 투여 형태, 예컨대 엘릭시르, 시럽 및 현탁액으로 경구로 투여된다.
환자의 질환의 개선이 일어나면, 용량은 조정될 수 있다. 예를 들어, 투여량 또는 투여 빈도, 또는 둘 다는 증상의 함수로서 목적하는 치료 또는 예방 효과가 유지되는 수준으로 감소될 수 있다. 증상이 적절한 수준으로 완화되면, 치료를 중단할 수 있다. 그러나, 환자는 증상의 임의의 재발 시 장기간에 걸쳐 간헐적 치료를 필요로 할 수 있다. 환자는 또한 장기간에 걸쳐 만성 치료를 필요로 할 수 있다.
3. 덱사메타손 투여 스케줄
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법은 대상체에게 덱사메타손을 투여하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법은 대상체에게 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여에 더하여 덱사메타손 및 면역조정 화합물 (예를 들어, 화합물 A)을 투여하는 것을 수반한다.
면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여와 관련하여, 덱사메타손 투여는 섹션 I-B-2에 기재된 임의의 시점에 개시될 수 있다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 면역조정 화합물 (예를 들어, 화합물 A)과 공동으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손 투여는 면역조정 화합물 (예를 들어, 화합물 A)의 투여가 개시되는 것과 동시에 개시된다.
일부 실시양태에서, 덱사메타손은 섹션 I-B-2에 기재된 바와 같은 임의의 빈도로 투여된다.
일부 실시양태에서, 덱사메타손은 섹션 I-B-2에 기재된 바와 같은 임의의 지속기간 동안 투여된다.
치료를 위한 권장 덱사메타손 용량을 제공하는 것은 처방 의사의 기술 내에 있을 것이다. 일부 실시양태에서, 저용량 덱사메타손 치료가 투여된다. 덱사메타손에 대한 (예를 들어, 저용량 덱사메타손 치료에 대한) 예시적인 용량 및 치료 주기는 WO 2012/078492; 문헌 [Siegel et al., (2020), Br J Haematol 188(4):501-519; San Miguel et al., (2013), Lancet Oncol 14(11):1055-1066; Dimopoulos et al., (2016), Blood 128(4):497-503; Hanaizi et al., (2015), Oncologist 20(3):329-34; 및 Weisel et al., (2015), Clin Lymphoma Myeloma Leuk 15(9):519-30]에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 덱사메타손의 투여는 섹션 I-B-2에 기재된 임의의 기준에 기초하여 정지 또는 조정된다.
4. 표준 삼중 요법
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법은 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여와 조합하여 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 다발성 골수종, 예를 들어 R/R 다발성 골수종의 치료를 위한 표준인 치료 요법이다. 표준 삼중 요법의 일부로서 투여되는 예시적인 요법 및 조합 작용제는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 문헌 [Kawano et al., (2015), Immunol Rev 263(1):160-72; Krejcik et al., (2016), Blood 128(3):384-94; Quach et al., (2010), Leukemia 2010 24(1):22-32; Dimopoulos et al., (2020), Leukemia; Abdallah et al., (2018), Blood 132 (Supplement 1): 5642; 및 Lacy et al., (2014), Blood 124(21): 304]에 기재된 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손의 투여를 포함한다 (예를 들어, 표준 삼중 요법은 DPd 요법임). 일부 실시양태에서, DPd를 위한 조합 작용제는 28-일 주기로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 다라투무맙은 정확히 또는 약 16 mg/kg으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 다라투무맙은 매주 1회 이하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 포말리도미드는 정확히 또는 약 4 mg 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 포말리도미드는 28-일 주기의 제1일-제21일에 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 매주 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 정확히 또는 약 40 mg 용량으로 투여된다. 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법과 조합하여 치료를 위한 권장 표준 삼중 요법을 제공하는 것은 처방 의사의 기술 내에 있을 것이다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손의 투여를 포함한다 (예를 들어, 표준 삼중 요법은 PVd 요법임). 일부 실시양태에서, PVd를 위한 조합 작용제는 21-일 또는 28-일 주기로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 포말리도미드는 정확히 또는 약 4 mg 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 포말리도미드는 21-일 주기의 제1일-제14일에 투여된다. 일부 실시양태에서, 포말리도미드는 28-일 주기의 제1일-제21일에 투여된다. 일부 실시양태에서, 보르테조밉은 정확히 또는 약 1.3 mg/m2으로 매주 2회 이하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 저용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 20 mg 또는 40 mg 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 덱사메타손은 매주 2회 이하로 투여된다. 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법과 조합하여 치료를 위한 권장 표준 삼중 요법을 제공하는 것은 처방 의사의 기술 내에 있을 것이다.
면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여와 관련하여, 표준 삼중 요법의 투여는 섹션 I-B-2에 기재된 임의의 시점에 개시될 수 있다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여 전에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여의 약 96시간, 72시간, 48시간, 24시간, 12시간, 6시간, 2시간, 또는 1시간 이하 전에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 720일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 360일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 240일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 120일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 90일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 최대 또는 최대 약 60일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 정확히 또는 약 56일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법은 제공된 방법 중 임의의 것의 제1일에 투여되고, 표준 삼중 요법의 투여는 제공된 방법 중 임의의 것의 정확히 또는 약 제3개월 제1일 (M3D1)에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 1일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 2일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 3일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 4일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 5일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 6일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 7일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 8일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 9일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 10일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 12일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 14일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 15일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 21일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 24일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 28일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 30일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 35일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 42일 후에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 1일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 2일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 3일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 4일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 5일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 6일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 7일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 14일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 21일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 28일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 35일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 42일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 360일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 240일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 180일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 120일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 90일 (경계값 포함) 사이에 개시된다. 일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 정확히 또는 약 49일 내지 60일 (경계값 포함) 사이에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 정확히 또는 약 56일 후에 개시된다. 일부 실시양태에서, 면역요법, 예를 들어 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법은 제공된 방법 중 임의의 것의 제1일에 투여되고, 표준 삼중 요법의 투여는 제공된 방법 중 임의의 것의 정확히 또는 약 제3개월 제1일 (M3D1)에 개시된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법은 섹션 I-B-2에 기재된 바와 같은 임의의 지속기간 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 표준 삼중 요법의 투여는 섹션 I-B-2에 기재된 기준 중 임의의 것에 기초하여 정지 또는 조정된다.
C. 림프구고갈 치료
일부 측면에서, 제공된 방법은 1종 이상의 림프구고갈 요법을, 예컨대 T 세포 요법의 투여의 개시 전에 또는 그와 동시에 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 림프구고갈 요법은 포스파미드, 예컨대 시클로포스파미드의 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 림프구고갈 요법은 플루다라빈의 투여를 포함할 수 있다.
일부 측면에서, 면역고갈 (예를 들어, 림프구고갈) 요법으로 대상체를 사전조건화하는 것은 입양 세포 요법 (ACT)의 효과를 개선시킬 수 있다. 시클로스포린 및 플루다라빈의 조합을 포함한 림프구고갈제를 사용한 사전조건화는 세포 요법에서 전달된 종양 침윤 림프구 (TIL) 세포의 효능을 개선시키는 데, 예컨대 전달된 세포의 반응 및/또는 지속성을 개선시키는 데 효과적이었다. 예를 들어, 문헌 [Dudley et al., Science, 298, 850-54 (2002); Rosenberg et al., Clin Cancer Res, 17(13):4550-4557 (2011)]을 참조한다. 마찬가지로, CAR+ T 세포와 관련하여, 여러 연구는 림프구고갈제, 가장 통상적으로는 시클로포스파미드, 플루다라빈, 벤다무스틴, 또는 그의 조합을 혼입하였고, 때때로 저용량 방사선조사를 동반하였다. 문헌 [Han et al., Journal of Hematology & Oncology, 6:47 (2013); Kochenderfer et al., Blood, 119: 2709-2720 (2012); Kalos et al., Sci Transl Med, 3(95):95ra73 (2011)]; 임상 시험 연구 기록 번호: NCT02315612; NCT01822652를 참조한다.
이러한 사전조건화는 요법의 효능을 약화시킬 수 있는 다양한 결과 중 1종 이상의 위험을 감소시킬 목적으로 수행될 수 있다. 이는 T 세포, B 세포, NK 세포가 TIL과 항상성 및 시토카인, 예컨대 IL-2, IL-7, 및/또는 IL-15를 활성화시키는 것에 대해 경쟁하는 "시토카인 싱크"로 공지된 현상; 조절 T 세포, NK 세포, 또는 면역계의 다른 세포에 의한 TIL의 억제; 종양 미세환경에서의 음성 조절제의 영향을 포함한다. 문헌 [Muranski et al., Nat Clin Pract Oncol. December; 3(12): 668-681 (2006)].
따라서, 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 대상체에게 림프구고갈 요법을 투여하는 것을 추가로 수반한다. 일부 실시양태에서, 방법은 세포 용량의 투여 전에 대상체에게 림프구고갈 요법을 투여하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 림프구고갈 요법은 화학요법제, 예컨대 플루다라빈 및/또는 시클로포스파미드를 함유한다. 일부 실시양태에서, 세포의 투여 및/또는 림프구고갈 요법은 외래환자 전달을 통해 수행된다.
일부 실시양태에서, 방법은 세포 용량의 투여 전에 사전조건화제, 예컨대 림프구고갈제 또는 화학요법제, 예컨대 시클로포스파미드, 플루다라빈, 또는 그의 조합을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 대상체에게 제1 또는 후속 용량의 적어도 2일 전, 예컨대 적어도 3, 4, 5, 6, 또는 7일 전에 사전조건화제가 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 세포 용량의 투여의 7일 이하 전, 예컨대 6, 5, 4, 3, 또는 2일 이하 전에 사전조건화제가 투여된다.
일부 실시양태에서, 대상체는 정확히 또는 약 20 mg/kg 내지 100 mg/kg, 예컨대 정확히 또는 약 40 mg/kg 내지 80 mg/kg의 용량의 시클로포스파미드로 사전조건화된다. 일부 측면에서, 대상체는 정확히 또는 약 60 mg/kg의 시클로포스파미드로 사전조건화된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 예컨대 매일, 격일로 또는 3일마다 주어지는 복수의 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 1 또는 2일 동안 1일 1회 투여된다.
일부 실시양태에서, 림프구고갈제가 플루다라빈을 포함하는 경우에, 대상체에게 정확히 또는 약 1 mg/m2 내지 100 mg/m2, 예컨대 정확히 또는 약 10 mg/m2 내지 75 mg/m2, 15 mg/m2 내지 50 mg/m2, 20 mg/m2 내지 30 mg/m2, 또는 24 mg/m2 내지 26 mg/m2의 용량의 플루다라빈이 투여된다. 일부 경우에, 대상체에게 25 mg/m2의 플루다라빈이 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 예컨대 매일, 격일로 또는 3일마다 주어지는 복수의 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 매일, 예컨대 1-5일 동안, 예를 들어 3 내지 5일 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 림프구고갈제는 작용제의 조합물, 예컨대 시클로포스파미드 및 플루다라빈의 조합물을 포함한다. 따라서, 작용제의 조합물은 상기 기재된 것과 같은 임의의 용량 또는 투여 스케줄의 시클로포스파미드, 및 상기 기재된 것과 같은 임의의 용량 또는 투여 스케줄의 플루다라빈을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, 대상체에게 세포의 용량 전에 60 mg/kg (~2 g/m2)의 시클로포스파미드 및 3 내지 5회 용량의 25 mg/m2 플루다라빈이 투여된다.
일부 실시양태에서, 세포 용량의 주입 전의 사전조건화제의 투여는 치료 결과를 개선시킨다. 예를 들어, 일부 측면에서, 사전조건화는 용량에 의한 치료 효능을 개선시키거나 또는 대상체에서 재조합 수용체-발현 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포)의 지속성을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 사전조건화 치료는 무질환 생존, 예컨대 세포의 용량 후 소정의 기간 후에 생존하고 최소의 잔류하는 또는 분자적으로 검출가능한 질환을 나타내지 않는 대상체의 퍼센트를 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 중앙 무질환 생존까지의 시간은 증가된다.
세포가 대상체 (예를 들어, 인간)에게 투여되면, 일부 측면에서 조작된 세포 집단의 생물학적 활성은 다수의 공지된 방법 중 임의의 것에 의해 측정된다. 평가할 파라미터는 생체내에서, 예를 들어 영상화에 의한, 또는 생체외에서, 예를 들어 ELISA 또는 유동 세포측정법에 의한, 항원에 대한 조작된 또는 천연 T 세포 또는 다른 면역 세포의 특이적 결합을 포함한다. 특정 실시양태에서, 표적 세포를 파괴하는 조작된 세포의 능력은 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법, 예컨대 예를 들어 문헌 [Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009), 및 Herman et al., J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)]에 기재된 세포독성 검정을 사용하여 측정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 세포의 생물학적 활성은 또한 특정 시토카인, 예컨대 CD107a, IFNγ, IL-2 및 TNF의 발현 및/또는 분비를 검정함으로써 측정될 수 있다. 일부 측면에서, 생물학적 활성은 임상 결과, 예컨대 종양 부담 또는 부하의 감소를 평가함으로써 측정된다. 일부 측면에서, 독성 결과, 세포의 지속성 및/또는 확장, 및/또는 숙주 면역 반응의 존재 또는 부재가 평가된다.
일부 실시양태에서, 세포 용량의 주입 전 사전조건화제의 투여는 예컨대 용량에 의한 치료 효능을 개선시키거나 또는 대상체에서 재조합 수용체-발현 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포, 예컨대 CAR-발현 T 세포)의 지속성을 증가시킴으로써 치료의 결과를 개선시킨다. 따라서, 일부 실시양태에서, 조합 작용제 및 세포 요법과의 조합 요법인 방법에서 제공되는 사전조건화제의 용량은 조합 작용제가 없는 방법에서 제공되는 용량보다 더 높다.
II. 세포 요법 및 세포 조작
일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법 방법에 따라 사용하기 위한 세포 면역요법, 예컨대 T 세포 요법은 질환 또는 상태, 예컨대 암, 예를 들어 다발성 골수종, 예를 들어 재발성 또는 불응성 다발성 골수종과 연관된 분자를 인식하고/거나 이에 특이적으로 결합하도록 설계된 재조합 수용체를 발현하는 조작된 세포를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항원에 대한 결합은 이러한 분자에 대한 결합 시 이러한 분자에 대한 반응, 예컨대 면역 반응을 발생시킨다. 일부 실시양태에서, 세포는 조작된 수용체, 예를 들어 조작된 항원 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR), 또는 T 세포 수용체 (TCR)를 함유하거나 또는 함유하도록 조작된다. 재조합 수용체, 예컨대 CAR은 일반적으로 BCMA에 대해 지시되고, 일부 측면에서 링커 및/또는 막횡단 도메인(들)을 통해 1종 이상의 세포내 신호전달 성분에 연결된 세포외 항원 (또는 리간드) 결합 도메인을 포함한다. 일부 측면에서, 조작된 세포는 대상체에게 투여하기에, 예컨대 입양 세포 요법에 적합한 제약 조성물 및 제제로서 제공된다. 또한, 세포 및 조성물을 대상체, 예를 들어 환자에게 투여하는 치료 방법이 제공된다.
일부 실시양태에서, 세포는 유전자 조작을 통해 도입된 1개 이상의 핵산을 포함하고, 이에 의해 이러한 핵산의 재조합 또는 유전자 조작된 산물을 발현한다. 일부 실시양태에서, 유전자 전달은 먼저 세포를 자극하는 것에 의해, 예컨대 이를 반응을 유도하는, 예컨대 예를 들어 시토카인 또는 활성화 마커의 발현에 의해 측정되는 바와 같은 증식, 생존 및/또는 활성화를 유도하는 자극과 조합한 다음, 활성화된 세포를 형질도입하고, 배양물 중에서 임상 적용에 충분한 수로 확장시키는 것에 의해 달성된다.
A. 재조합 수용체, 예를 들어, 키메라 항원 수용체 (CAR)
세포는 일반적으로 재조합 수용체, 예컨대 기능적 비-TCR 항원 수용체, 예를 들어 키메라 항원 수용체 (CAR)를 비롯한 항원 수용체, 및 다른 항원-결합 수용체, 예컨대 트랜스제닉 T 세포 수용체 (TCR)를 발현한다. 또한 수용체 중에는 다른 키메라 수용체가 있다.
제공된 방법 및 용도의 일부 실시양태에서, 조작된 세포, 예컨대 T 세포는 목적하는 항원 (예를 들어, 종양 항원)에 대한 특이성을 제공하는 리간드-결합 도메인 (예를 들어, 항체 또는 항체 단편으로부터 유래됨)을 세포내 신호전달 도메인과 조합하는 1개 이상의 도메인을 함유하는 키메라 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현한다. 일부 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인은 1차 활성화 신호를 제공하는 활성화 세포내 도메인 부분, 예컨대 T 세포 활성화 도메인이다. 일부 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인은 이펙터 기능을 용이하게 하는 공동자극 신호전달 도메인을 함유하거나 또는 추가적으로 함유한다. 분자, 예를 들어, 항원에 대한 특이적 결합 시, 수용체는 일반적으로 면역자극 신호, 예컨대 ITAM-전달된 신호를 세포 내로 전달하고, 이에 의해 질환 또는 상태에 표적화된 면역 반응을 촉진한다. 일부 실시양태에서, 키메라 수용체는 면역 세포 내로 유전자 조작된 경우에, T 세포 활성을 조정할 수 있고, 일부 경우에, T 세포 분화 또는 항상성을 조정할 수 있으며, 이에 의해 예컨대 입양 세포 요법 방법에 사용하기 위한, 생체내에서 개선된 장수명, 생존 및/또는 지속성을 갖는 유전자 조작된 세포가 생성된다.
일부 실시양태에서, CAR은 특정한 항원 (또는 마커 또는 리간드), 예컨대 입양 요법에 의해 표적화될 특정한 세포 유형에서 발현되는 항원, 예를 들어 암 마커, 및/또는 약화 반응을 유도하도록 의도되는 항원, 예컨대 정상 또는 비-이환 세포 유형 상에서 발현되는 항원에 대해 특이성을 갖도록 구축된다. 따라서, CAR은 전형적으로 그의 세포외 부분에 1개 이상의 항원 결합 분자, 예컨대 1개 이상의 항원-결합 단편, 도메인, 또는 부분, 또는 1개 이상의 항체-유래 가변 도메인, 및/또는 항체-유래 분자를 포함한다.
본원에서 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 폴리클로날 및 모노클로날 항체, 예를 들어 무손상 항체 및 기능적 (항원-결합) 항체 단편, 예를 들어 단편 항원 결합 (Fab) 단편, F(ab')2 단편, Fab' 단편, Fv 단편, 재조합 IgG (rIgG) 단편, 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 중쇄 가변 (VH) 영역, 단일 쇄 항체 단편, 예를 들어 단일 쇄 가변 단편 (scFv), 및 단일 도메인 항체 (예를 들어, sdAb, sdFv, 나노바디) 단편을 포함한다. 상기 용어는 유전자 조작된 및/또는 달리 변형된 형태의 이뮤노글로불린, 예컨대 인트라바디, 펩티바디, 키메라 항체, 완전 인간 항체, 인간화 항체 및 이종접합체 항체, 다중특이적, 예를 들어 이중특이적 또는 삼중특이적 항체, 디아바디, 트리아바디 및 테트라바디, 탠덤 디-scFv, 탠덤 트리-scFv를 포괄한다. 달리 언급되지 않는 한, 용어 "항체"는 본원에서 "항원-결합 단편"으로도 지칭되는 그의 기능적 항체 단편을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 상기 용어는 또한 IgG 및 그의 하위부류, IgM, IgE, IgA 및 IgD를 포함한 임의의 부류 또는 하위부류의 항체를 포함한 무손상 또는 전장 항체를 포괄한다.
"초가변 영역" 또는 "HVR"과 동의어인 용어 "상보성 결정 영역" 및 "CDR"은 항원 특이성 및/또는 결합 친화성을 부여하는 항체 가변 영역 내의 아미노산의 비-인접 서열을 지칭하는 것으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 일반적으로, 각각의 중쇄 가변 영역에 3개의 CDR (CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3) 및 각각의 경쇄 가변 영역에 3개의 CDR (CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3)이 존재한다. "프레임워크 영역" 및 "FR"은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 비-CDR 부분을 지칭하는 것으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 일반적으로, 각각의 전장 중쇄 가변 영역에 4개의 FR (FR-H1, FR-H2, FR-H3, 및 FR-H4), 및 각각의 전장 경쇄 가변 영역에 4개의 FR (FR-L1, FR-L2, FR-L3, 및 FR-L4)이 존재한다.
주어진 CDR 또는 FR의 정확한 아미노산 서열 경계는 문헌 [Kabat et al., (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD ("카바트" 넘버링 스킴); Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 ("코티아" 넘버링 스킴); MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), "Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography," J. Mol. Biol. 262, 732-745." ("접촉" 넘버링 스킴); Lefranc MP et al., "IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains," Dev Comp Immunol, 2003 Jan;27(1):55-77 ("IMGT" 넘버링 스킴); Honegger A and Plueckthun A, "Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool," J Mol Biol, 2001 Jun 8;309(3):657-70, ("Aho" 넘버링 스킴); 및 Martin et al., "Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm," PNAS, 1989, 86(23):9268-9272, ("AbM" 넘버링 스킴)]에 기재된 것을 포함한, 다수의 널리 공지된 스킴 중 임의의 것을 사용하여 용이하게 결정될 수 있다.
주어진 CDR 또는 FR의 경계는 확인에 사용된 스킴에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 카바트 스킴은 구조적 정렬에 기초하는 반면, 코티아 스킴은 구조적 정보에 기초한다. 카바트 및 코티아 스킴 둘 다에 대한 넘버링은 가장 통상적인 항체 영역 서열 길이에 기초하며, 삽입은 삽입 문자, 예를 들어 "30a"에 의해 수용되고, 일부 항체에서 결실이 나타난다. 2개의 스킴은 상이한 위치에 특정 삽입 및 결실 ("indel")을 배치하여, 차등 넘버링을 생성한다. 접촉 스킴은 복잡한 결정 구조의 분석을 기초로 하고, 많은 측면에서 코티아 넘버링 스킴과 유사하다. AbM 스킴은 옥스포드 몰레큘라(Oxford Molecular)의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된 것을 기초로 하는 카바트와 코티아 정의 사이의 절충안이다.
하기 표 1은 각각 카바트, 코티아, AbM 및 접촉 스킴에 의해 확인된 바와 같은 CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3 및 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3의 예시적인 위치 경계를 열거한다. CDR-H1의 경우, 잔기 넘버링은 카바트 및 코티아 넘버링 스킴 둘 다를 사용하여 열거된다. FR은 CDR 사이에 위치하고, 예를 들어, FR-L1은 CDR-L1 앞에 위치하고, FR-L2는 CDR-L1과 CDR-L2 사이에 위치하고, FR-L3은 CDR-L2와 CDR-L3 사이에 위치하는 등이다. 제시된 카바트 넘버링 스킴은 H35A 및 H35B에 삽입을 배치하기 때문에, 제시된 카바트 넘버링 관례를 사용하여 넘버링하는 경우 코티아 CDR-H1 루프의 말단은 루프의 길이에 따라 H32와 H34 사이에서 달라진다는 것을 주목한다.
따라서, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 그의 영역, 예컨대 그의 가변 영역의 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역" 또는 개별 명시된 CDR (예를 들어, CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3)은 상기 언급된 스킴 또는 다른 공지된 스킴 중 임의의 것에 의해 정의된 바와 같은 (또는 특정) 상보성 결정 영역을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 특정한 CDR (예를 들어, CDR-H3)이 주어진 VH 또는 VL 영역 아미노산 서열에서 상응하는 CDR의 아미노산 서열을 함유하는 것으로 언급되는 경우에, 이러한 CDR은 상기 언급된 스킴 또는 다른 공지된 스킴 중 임의의 것에 의해 정의된 바와 같은 가변 영역 내의 상응하는 CDR (예를 들어, CDR-H3)의 서열을 갖는 것으로 이해된다. 일부 실시양태에서, 특정 CDR 서열이 명시된다. 제공된 항체의 예시적인 CDR 서열은 다양한 넘버링 스킴을 사용하여 기재되지만, 제공된 항체는 다른 상기 언급된 넘버링 스킴 또는 통상의 기술자에게 공지된 다른 넘버링 스킴 중 임의의 것에 따라 기재된 바와 같은 CDR을 포함할 수 있는 것으로 이해된다.
마찬가지로, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 그의 영역, 예컨대 그의 가변 영역의 FR 또는 개별 명시된 FR(들) (예를 들어, FR-H1, FR-H2, FR-H3, FR-H4)은 공지된 스킴 중 임의의 것에 의해 정의된 바와 같은 (또는 특정) 프레임워크 영역을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 예에서, 특정한 CDR, FR, 또는 FR들 또는 CDR들의 확인을 위한 스킴, 예컨대 카바트, 코티아, AbM, IMGT 또는 접촉 방법, 또는 다른 공지된 스킴에 의해 정의된 바와 같은 CDR이 명시된다. 다른 경우에, CDR 또는 FR의 특정한 아미노산 서열이 주어진다.
용어 "가변 영역" 또는 "가변 도메인"은 항체를 항원에 결합시키는 데 수반되는 항체 중쇄 또는 경쇄의 도메인을 지칭한다. 천연 항체의 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 (각각 VH 및 VL)은 일반적으로 유사한 구조를 갖고, 각각의 도메인은 4개의 보존된 프레임워크 영역 (FR) 및 3개의 CDR을 포함한다. (예를 들어, 문헌 [Kindt et al., Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007] 참조). 단일 VH 또는 VL 도메인이 항원-결합 특이성을 부여하기에 충분할 수 있다. 또한, 특정한 항원에 결합하는 항체는 각각 상보성 VL 또는 VH 도메인의 라이브러리를 스크리닝하기 위해 항원에 결합하는 항체로부터의 VH 또는 VL 도메인을 사용하여 단리될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)]을 참조한다.
CAR에 포함된 항원 결합 도메인 중에는 항체 단편으로부터 유래된 것이 있다. "항체 단편" 또는 "항원-결합 단편"은 무손상 항체가 결합하는 항원에 결합하는 무손상 항체의 일부를 포함하는 무손상 항체 이외의 분자를 지칭한다. 항체 단편의 예는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2; 디아바디; 선형 항체; 중쇄 가변 (VH) 영역, 단일-쇄 항체 분자, 예컨대 scFv 및 VH 영역만을 포함하는 단일-도메인 항체; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 특정한 실시양태에서, CAR이 유래된 항체는 중쇄 가변 (VH) 영역 및/또는 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하는 단일-쇄 항체 단편, 예컨대 scFv이다.
단일-도메인 항체 (sdAb)는 항체의 중쇄 가변 영역의 전부 또는 일부 또는 경쇄 가변 영역의 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 실시양태에서, 단일-도메인 항체는 인간 단일-도메인 항체이다.
항체 단편은 무손상 항체의 단백질분해적 소화뿐만 아니라 재조합 숙주 세포에 의한 생산을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체는 재조합적으로 생산된 단편, 예컨대 자연적으로 발생하지 않는 배열, 예컨대 합성 링커, 예를 들어 펩티드 링커에 의해 연결된 2개 이상의 항체 영역 또는 쇄를 갖는 것 및/또는 자연 발생 무손상 항체의 효소 소화에 의해 생산되지 않을 수 있는 배열을 포함하는 단편이다. 일부 측면에서, 항체 단편은 scFv이다.
일부 실시양태에서, CAR은 항체 분자의 항원-결합 부분 또는 부분들, 예컨대 모노클로날 항체 (mAb)의 가변 중쇄 (VH) 및 가변 경쇄 (VL)로부터 유래된 단일-쇄 항체 단편 (scFv), 또는 단일 도메인 항체 (sdAb), 예컨대 sdFv, 나노바디, VHH 및 VNAR을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 단편은 가요성 링커에 의해 연결된 항체-유래 가변 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 단일-쇄 항체 단편, 예컨대 단일 쇄 가변 단편 (scFv) 또는 디아바디 또는 단일 도메인 항체 (sdAb)이다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 항원-결합 단편은 VH 영역만을 포함하는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하는 scFv이다.
"인간화" 항체는 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 아미노산 잔기가 비-인간 CDR로부터 유래되고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 아미노산 잔기가 인간 FR로부터 유래된 항체이다. 인간화 항체는 임의로 인간 항체로부터 유래된 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 비-인간 항체의 "인간화 형태"는 모 비-인간 항체의 특이성 및 친화도를 보유하면서 전형적으로 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화를 겪은 비-인간 항체의 변이체를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 인간화 항체 내의 일부 FR 잔기는, 예를 들어 항체 특이성 또는 친화도를 회복 또는 개선시키기 위해 비-인간 항체 (예를 들어, CDR 잔기가 유래된 항체)로부터의 상응하는 잔기로 치환된다.
제공되는 CAR이 유래하는 항-BCMA 항체 중에는 인간 항체가 있다. "인간 항체"는 인간 또는 인간 세포, 또는 인간 항체 라이브러리를 포함하여 인간 항체 레퍼토리 또는 다른 인간 항체-코딩 서열을 이용하는 비-인간 공급원에 의해 생산된 항체의 것에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 항체이다. 상기 용어는 비-인간 항원-결합 영역을 포함하는 비-인간 항체의 인간화 형태, 예컨대 모든 또는 실질적으로 모든 CDR이 비-인간인 것은 배제한다. 상기 용어는 인간 항체의 항원-결합 단편을 포함한다.
인간 항체는 항원 챌린지에 반응하여 무손상 인간 항체 또는 인간 가변 영역을 갖는 무손상 항체를 생산하도록 변형된 트랜스제닉 동물에게 면역원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 이러한 동물은 전형적으로 내인성 이뮤노글로불린 유전자좌를 대체하거나 또는 염색체외에 존재하거나 또는 동물의 염색체 내로 무작위로 통합된 인간 이뮤노글로불린 유전자좌의 전부 또는 일부를 함유한다. 이러한 트랜스제닉 동물에서, 내인성 이뮤노글로불린 유전자좌는 일반적으로 불활성화되었다. 인간 항체는 또한 인간 레퍼토리로부터 유래된 항체-코딩 서열을 함유하는, 파지 디스플레이 및 무세포 라이브러리를 비롯한 인간 항체 라이브러리로부터 유래될 수 있다.
제공되는 CAR이 유래하는 항체 중에는 모노클로날 항체 단편을 비롯한 모노클로날 항체가 있다. 본원에 사용된 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 또는 집단 내에서 수득된 항체를 지칭하며, 즉 집단을 구성하는 개별 항체는 자연 발생 돌연변이를 함유하거나 또는 모노클로날 항체 제제의 생산 동안 발생하는 가능한 변이체를 제외하고는 동일하고, 이러한 변이체는 일반적으로 소량으로 존재한다. 전형적으로 상이한 에피토프에 대해 지시된 상이한 항체를 포함하는 폴리클로날 항체 제제와 대조적으로, 모노클로날 항체 제제의 각각의 모노클로날 항체는 항원 상의 단일 에피토프에 대해 지시된다. 상기 용어는 임의의 특정한 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안된다. 모노클로날 항체는 하이브리도마로부터의 생성, 재조합 DNA 방법, 파지-디스플레이 및 다른 항체 디스플레이 방법을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.
일부 실시양태에서, CAR은 항체 분자의 BCMA-결합 부분 또는 부분들, 예컨대 항체, 예를 들어 scFv 항체 단편의 중쇄 가변 (VH) 영역 및/또는 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함한다. 키메라 수용체, 예컨대 CAR은 일반적으로 세포외 항원 결합 도메인, 예컨대 항체 분자의 부분, 일반적으로 항체, 예를 들어 scFv 항체 단편의 가변 중쇄 (VH) 영역 및/또는 가변 경쇄 (VL) 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제공된 BCMA-결합 CAR은 제공된 CAR의 BCMA-결합 특성을 부여하는 항체, 예컨대 항-BCMA 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 항원-결합 도메인은 기재된 임의의 항-BCMA 항체일 수 있거나 또는 기재된 임의의 항-BCMA 항체로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060]; 미국 특허 번호 9,034,324; 미국 특허 번호 9,765,342; 미국 특허 공개 번호 US2016/0046724, US20170183418; 및 국제 공개 PCT 출원 번호 WO 2016090320, WO2016090327, WO2016094304, WO2016014565, WO106014789, WO2010104949, WO2017/025038, 또는 WO2017173256을 참조한다. 이러한 항-BCMA 항체 또는 항원-결합 단편 중 임의의 것은 제공된 CAR에 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-BCMA CAR은 가변 중쇄 (VH) 및/또는 가변 경쇄 (VL) 영역을 함유하는 scFv인 항원-결합 도메인을 함유한다. 일부 실시양태에서, 가변 중쇄 (VH) 및/또는 가변 경쇄 (VL) 영역을 함유하는 scFv는 WO 2016090320 또는 WO2016090327에 기재된 항체로부터 유래된다.
일부 실시양태에서, 항체, 예를 들어 항-BCMA 항체 또는 항원-결합 단편은 기재된 바와 같은 중쇄 및/또는 경쇄 가변 (VH 또는 VL) 영역 서열 또는 그의 충분한 항원-결합 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항-BCMA 항체, 예를 들어 항원-결합 단편은 기재된 바와 같은 CDR-H1, CDR-H2 및/또는 CDR-H3을 함유하는 VH 영역 서열 또는 그의 충분한 항원-결합 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항-BCMA 항체, 예를 들어 항원-결합 단편은 기재된 바와 같은 CDR-L1, CDR-L2 및/또는 CDR-L3을 함유하는 VL 영역 서열 또는 충분한 항원-결합 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항-BCMA 항체, 예를 들어 항원-결합 단편은 기재된 바와 같은 CDR-H1, CDR-H2 및/또는 CDR-H3을 함유하는 VH 영역 서열을 함유하고, 기재된 바와 같은 CDR-L1, CDR-L2 및/또는 CDR-L3을 함유하는 VL 영역 서열을 함유한다. 또한, 항체 중에는 이러한 서열과 적어도 정확히 또는 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 또는 약 99% 동일한 서열을 갖는 것이 있다.
일부 실시양태에서, 항체는 VH 영역 서열만을 포함하는 단일 도메인 항체 (sdAb) 또는 그의 충분한 항원-결합 부분, 예컨대 상기 기재된 VH 서열 중 임의의 것 (예를 들어, CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3 및/또는 CDR-H4)이다.
일부 실시양태에서, VH 영역을 포함하는 본원에 제공된 항체 (예를 들어, 항-BCMA 항체) 또는 그의 항원-결합 단편은 경쇄 또는 그의 충분한 항원 결합 부분을 추가로 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 VH 영역 및 VL 영역, 또는 VH 및 VL 영역의 충분한 항원-결합 부분을 함유한다. 이러한 실시양태에서, VH 영역 서열은 상기 기재된 VH 서열 중 임의의 것일 수 있다. 일부 이러한 실시양태에서, 항체는 항원-결합 단편, 예컨대 Fab 또는 scFv이다. 일부 이러한 실시양태에서, 항체는 불변 영역을 또한 함유하는 전장 항체이다.
일부 실시양태에서, CAR은 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA에 특이적인 항-BCMA CAR이다. 마우스 항-인간 BCMA 항체 및 인간 항-인간 BCMA 항체를 포함한 항-BCMA 항체로부터 유래된 키메라 항원 수용체, 및 이러한 키메라 수용체를 발현하는 세포는 이전에 기재되었다. 문헌 [Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060], US 9,765,342, WO 2016/090320, WO2016090327, WO2010104949A2, WO2016/0046724, WO2016/014789, WO2016/094304, WO2017/025038, 및 WO2017173256을 참조한다. 일부 실시양태에서, 항-BCMA CAR은 WO 2016/090320 또는 WO2016090327에 기재된 항체로부터 유래된 가변 중쇄 (VH) 및/또는 가변 경쇄 (VL) 영역을 함유하는 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv를 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인은 가변 중쇄 (VH) 및 가변 경쇄 (VL) 영역을 함유하는 항체 단편이다. 일부 측면에서, VH 영역은 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 47, 49, 51, 53, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109 및 111 중 임의의 것에 제시된 VH 영역 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함하고/거나; VL 영역은 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 48, 50, 52, 54, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110 및 112 중 임의의 것에 제시된 VL 영역 아미노산 서열에 대해 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-BCMA CAR 내의 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 VH 및 VL 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 30에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 31에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 32에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 33에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 34에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 35에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 36에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 37에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 38에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 39에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 40에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 41에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 42에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 43에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 77에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 78에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 79에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 80에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 81에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 82에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 83에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 84에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 85에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 86에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 87에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 88에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 89에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 90에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 91에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 92에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 93에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 94에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 95에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 96에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 97에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 98에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 99에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 100에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 101에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 102에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 103에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 104에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 105에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 106에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 107에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 106에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 30에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 108에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 109에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 110에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 111에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 112에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 47에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 48에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 49에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 50에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 51에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 52에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 53에 제시된 VH 내에 함유된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 54에 제시된 VL 내에 함유된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 30에 제시된 VH 및 서열식별번호: 31에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 32에 제시된 VH 및 서열식별번호: 33에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 34에 제시된 VH 및 서열식별번호: 35에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 36에 제시된 VH 및 서열식별번호: 37에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 38에 제시된 VH 및 서열식별번호: 39에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 40에 제시된 VH 및 서열식별번호: 41에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 42에 제시된 VH 및 서열식별번호: 43에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 77에 제시된 VH 및 서열식별번호: 78에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 79에 제시된 VH 및 서열식별번호: 80에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 81에 제시된 VH 및 서열식별번호: 82에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 83에 제시된 VH 및 서열식별번호: 84에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 85에 제시된 VH 및 서열식별번호: 86에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 87에 제시된 VH 및 서열식별번호: 88에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 89에 제시된 VH 및 서열식별번호: 90에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 91에 제시된 VH 및 서열식별번호: 92에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 93에 제시된 VH 및 서열식별번호: 94에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 95에 제시된 VH 및 서열식별번호: 96에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 97에 제시된 VH 및 서열식별번호: 98에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 99에 제시된 VH 및 서열식별번호: 100에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 101에 제시된 VH 및 서열식별번호: 102에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 103에 제시된 VH 및 서열식별번호: 104에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 105에 제시된 VH 및 서열식별번호: 106에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 107에 제시된 VH 및 서열식별번호: 106에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 30에 제시된 VH 및 서열식별번호: 108에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 109에 제시된 VH 및 서열식별번호: 110에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 111에 제시된 VH 및 서열식별번호: 112에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 47에 제시된 VH 및 서열식별번호: 48에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 49에 제시된 VH 및 서열식별번호: 50에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 51에 제시된 VH 및 서열식별번호: 52에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 서열식별번호: 53에 제시된 VH 및 서열식별번호: 54에 제시된 VL을 함유한다. 일부 실시양태에서, VH 또는 VL은 상기 VH 또는 VL 서열 중 임의의 것에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산의 서열을 갖고, BCMA에 대한 결합을 보유한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 아미노-말단이다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 카르복시-말단이다. 일부 실시양태에서, 가변 중쇄 및 가변 경쇄는 링커에 의해 연결된다. 일부 실시양태에서, 링커는 서열식별번호: 55, 70, 72, 73, 또는 74에 제시된다.
일부 실시양태에서, 항체는 2개의 항체 도메인 또는 영역, 예컨대 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 연결하는 1개 이상의 링커를 포함하는 항원-결합 단편, 예컨대 scFv이다. 따라서, 항체는 전형적으로 2개의 항체 도메인 또는 영역, 예컨대 VH 및 VL 영역을 연결하는 링커(들)를 포함하는 단일-쇄 항체 단편, 예컨대 scFv 및 디아바디, 특히 인간 단일-쇄 항체 단편을 포함한다. 링커는 전형적으로 펩티드 링커, 예를 들어 가요성 및/또는 가용성 펩티드 링커, 예컨대 글리신 및 세린이 풍부한 것이다. 링커 중에는 글리신 및 세린 및/또는 일부 경우에 트레오닌이 풍부한 것이 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 용해도를 개선시킬 수 있는 하전된 잔기, 예컨대 리신 및/또는 글루타메이트를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 링커는 1개 이상의 프롤린을 추가로 포함한다.
일부 측면에서, 글리신 및 세린 (및/또는 트레오닌)이 풍부한 링커는 적어도 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%의 이러한 아미노산(들)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이는 적어도 정확히 또는 약 50%, 55%, 60%, 70% 또는 75%, 글리신, 세린 및/또는 트레오닌을 포함한다. 일부 실시양태에서, 링커는 실질적으로 전적으로 글리신, 세린 및/또는 트레오닌으로 구성된다. 링커는 일반적으로 약 5 내지 약 50개 아미노산 길이, 전형적으로 정확히 또는 약 10 내지 정확히 또는 약 30개, 예를 들어 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개, 및 일부 예에서 10 내지 25개 아미노산 길이이다. 예시적인 링커는 서열 GGGGS (4GS; 서열식별번호: 19) 또는 GGGS (3GS; 서열식별번호: 71)의 다양한 수의 반복부, 예컨대 이러한 서열의 2, 3, 4 및 5개의 반복부를 갖는 링커를 포함한다. 예시적인 링커는 서열식별번호: 72 (GGGGSGGGGSGGGGS), 서열식별번호: 55 (ASGGGGSGGRASGGGGS), 서열식별번호: 73 (GSTSGSGKPGSGEGSTKG) 또는 서열식별번호: 74 (SRGGGGSGGGGSGGGGSLEMA)에 제시된 서열을 갖거나 또는 이로 이루어진 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-BCMA CAR 내의 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 VH 및 VL 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 56에 제시된 CDR-H1, 서열식별번호: 57에 제시된 CDR-H2 및 서열식별번호: 58에 제시된 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 59에 제시된 CDR-L1, 서열식별번호: 60에 제시된 CDR-L2 및 서열식별번호: 61에 제시된 CDR-H3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 36에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 36에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖고, VL 영역은 서열식별번호: 37에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 37에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 36에 제시된 아미노산 서열을 갖고, VL 영역은 서열식별번호: 37에 제시된 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 아미노-말단이다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 카르복시-말단이다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인은 서열식별번호: 180에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 180에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 scFv이다. 특정한 실시양태에서, 상기 항원-결합 도메인 중 임의의 것은 BCMA에 결합한다.
일부 실시양태에서, 항-BCMA CAR 내의 항원-결합 도메인, 예컨대 scFv는 VH 및 VL 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 CDR-H1, 서열식별번호: 63에 제시된 CDR-H2 및 서열식별번호: 64에 제시된 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 65에 제시된 CDR-L1, 서열식별번호: 66에 제시된 CDR-L2 및 서열식별번호: 67에 제시된 CDR-H3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 30에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖고, VL 영역은 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 31에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열을 갖고, VL 영역은 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 아미노-말단이다. 일부 실시양태에서, VH 영역은 VL 영역에 대해 카르복시-말단이다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 도메인은 서열식별번호: 68에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 68에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 scFv이다. 특정한 실시양태에서, 상기 항원-결합 도메인 중 임의의 것은 BCMA에 결합한다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예컨대 CAR, 예컨대 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 항체 부분은 이뮤노글로불린 불변 영역 또는 그의 변이체 또는 변형된 버전의 적어도 한 부분일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있는 스페이서, 예컨대 힌지 영역, 예를 들어 IgG4 힌지 영역, IgG1 힌지 영역, CH1/CL, 및/또는 Fc 영역을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 재조합 수용체는 스페이서 및/또는 힌지 영역을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 불변 영역 또는 부분은 인간 IgG, 예컨대 IgG4 또는 IgG1의 것이다. 일부 측면에서, 불변 영역의 부분은 항원-인식 성분, 예를 들어 scFv와 막횡단 도메인 사이에서 스페이서 영역으로서의 역할을 한다. 스페이서는 스페이서의 부재 하의 경우와 비교하여 항원 결합 후에 세포의 증가된 반응성을 제공하는 길이일 수 있다.
예시적인 스페이서, 예를 들어 힌지 영역은 국제 특허 출원 공개 번호 WO2014031687에 기재된 것을 포함한다. 일부 예에서, 스페이서는 정확히 또는 약 12개 아미노산 길이이거나, 또는 12개 이하의 아미노산 길이이다. 예시적인 스페이서는 적어도 약 10 내지 229개 아미노산, 약 10 내지 200개 아미노산, 약 10 내지 175개 아미노산, 약 10 내지 150개 아미노산, 약 10 내지 125개 아미노산, 약 10 내지 100개 아미노산, 약 10 내지 75개 아미노산, 약 10 내지 50개 아미노산, 약 10 내지 40개 아미노산, 약 10 내지 30개 아미노산, 약 10 내지 20개 아미노산, 또는 약 10 내지 15개 아미노산을 갖고 열거된 범위 중 임의의 것의 종점 사이의 임의의 정수를 포함하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서 영역은 약 12개 이하의 아미노산, 약 119개 이하의 아미노산, 또는 약 229개 이하의 아미노산을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 적어도 특정한 길이를 갖는, 예컨대 적어도 100개 아미노산, 예컨대 적어도 110, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 또는 250개 아미노산 길이인 길이를 갖는 스페이서이다. 예시적인 스페이서는 IgG4 힌지 단독, CH2 및 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지, 또는 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지를 포함한다. 예시적인 스페이서는 IgG4 힌지 단독, CH2 및 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지, 또는 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지를 포함한다. 예시적인 스페이서는 문헌 [Hudecek et al., Clin. Cancer Res., 19:3153 (2013), Hudecek et al., (2015) Cancer Immunol Res. 3(2): 125-135], 국제 특허 출원 공개 번호 WO2014031687, 미국 특허 번호 8,822,647 또는 공개 출원 번호 US2014/0271635에 기재된 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 이뮤노글로불린 힌지 영역, CH2 및 CH3 영역의 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 힌지, CH2 및 CH3 중 1개 이상은 IgG4 또는 IgG2로부터 전부 또는 부분적으로 유래된다. 일부 경우에, 힌지, CH2 및 CH3은 IgG4로부터 유래된다. 일부 측면에서, 힌지, CH2 및 CH3 중 1개 이상은 키메라이고, IgG4 및 IgG2로부터 유래된 서열을 함유한다. 일부 예에서, 스페이서는 IgG4/2 키메라 힌지, IgG2/4 CH2, 및 IgG4 CH3 영역을 함유한다.
일부 실시양태에서, 이뮤노글로불린의 불변 영역 또는 그의 부분일 수 있는 스페이서는 인간 IgG, 예컨대 IgG4 또는 IgG1의 것이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열 ESKYGPPCPPCP (서열식별번호: 1에 제시됨)를 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 3에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 4에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 코딩된 스페이서는 서열식별번호: 29에 제시된 서열이거나 또는 이를 함유한다. 일부 실시양태에서, 불변 영역 또는 부분은 IgD의 것이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 5에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 125에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 IgG4 및/또는 IgG2로부터 전부 또는 부분적으로 유래될 수 있고, 1개 이상의 도메인에 돌연변이, 예컨대 1개 이상의 단일 아미노산 돌연변이를 함유할 수 있다. 일부 예에서, 아미노산 변형은 IgG4의 힌지 영역에서의 세린 (S)의 프롤린 (P)으로의 치환이다. 일부 실시양태에서, 아미노산 변형은 글리코실화 불균질성을 감소시키기 위한 아스파라긴 (N)의 글루타민 (Q)으로의 치환, 예컨대 전장 IgG4 Fc 서열의 CH2 영역 내의 위치 177에서의 N177Q 돌연변이 또는 전장 IgG4 Fc 서열의 CH2 영역 내의 위치 176에서의 N176Q이다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 스페이서의 부재 하의 경우 및/또는 상이한 스페이서, 예컨대 길이만 상이한 것의 존재 하의 경우와 비교하여 항원 결합 후에 세포의 증가된 반응성을 제공하는 길이일 수 있다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 적어도 100개 아미노산 길이, 예컨대 적어도 110, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 또는 250개 아미노산 길이이다. 일부 예에서, 스페이서는 정확히 또는 약 12개 아미노산 길이이거나, 또는 12개 이하의 아미노산 길이이다. 예시적인 스페이서는 적어도 약 10 내지 300개 아미노산, 약 10 내지 200개 아미노산, 약 50 내지 175개 아미노산, 약 50 내지 150개 아미노산, 약 10 내지 125개 아미노산, 약 50 내지 100개 아미노산, 약 100 내지 300개 아미노산, 약 100 내지 250개 아미노산, 약 125 내지 250개 아미노산, 또는 약 200 내지 250개 아미노산을 갖고 열거된 범위 중 임의의 것의 종점 사이의 임의의 정수를 포함하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서 또는 스페이서 영역은 적어도 약 12개 아미노산, 적어도 약 119개 아미노산 이하, 적어도 약 125개 아미노산, 적어도 약 200개 아미노산, 또는 적어도 약 220개 아미노산, 또는 적어도 약 225개 아미노산 길이이다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 125 내지 300개 아미노산 길이, 125 내지 250개 아미노산 길이, 125 내지 230개 아미노산 길이, 125 내지 200개 아미노산 길이, 125 내지 180개 아미노산 길이, 125 내지 150개 아미노산 길이, 150 내지 300개 아미노산 길이, 150 내지 250개 아미노산 길이, 150 내지 230개 아미노산 길이, 150 내지 200개 아미노산 길이, 150 내지 180개 아미노산 길이, 180 내지 300개 아미노산 길이, 180 내지 250개 아미노산 길이, 180 내지 230개 아미노산 길이, 180 내지 200개 아미노산 길이, 200 내지 300개 아미노산 길이, 200 내지 250개 아미노산 길이, 200 내지 230개 아미노산 길이, 230 내지 300개 아미노산 길이, 230 내지 250개 아미노산 길이 또는 250 내지 300개 아미노산 길이의 길이를 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 적어도 또는 적어도 약 또는 정확히 또는 약 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228 또는 229개 아미노산 길이, 또는 상기 중 임의의 것 사이의 길이이다.
예시적인 스페이서는 이뮤노글로불린 불변 영역의 부분(들)을 함유하는 것, 예컨대 Ig 힌지, 예컨대 IgG 힌지 도메인을 함유하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 스페이서는 IgG 힌지 단독, CH2 및 CH3 도메인 중 1개 이상에 연결된 IgG 힌지, 또는 CH3 도메인에 연결된 IgG 힌지를 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG 힌지, CH2 및/또는 CH3은 IgG4 또는 IgG2로부터 전부 또는 부분적으로 유래될 수 있다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 IgG4, IgG2, 및/또는 IgG2 및 IgG4로부터 유래된 힌지, CH2 및/또는 CH3 서열(들) 중 1개 이상을 함유하는 키메라 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시양태에서, 힌지 영역은 IgG4 힌지 영역 및/또는 IgG2 힌지 영역의 전부 또는 일부를 포함하고, 여기서 IgG4 힌지 영역은 임의로 인간 IgG4 힌지 영역이고, IgG2 힌지 영역은 임의로 인간 IgG2 힌지 영역이고; CH2 영역은 IgG4 CH2 영역 및/또는 IgG2 CH2 영역의 전부 또는 일부를 포함하고, 여기서 IgG4 CH2 영역은 임의로 인간 IgG4 CH2 영역이고, IgG2 CH2 영역은 임의로 인간 IgG2 CH2 영역이고/거나; CH3 영역은 IgG4 CH3 영역 및/또는 IgG2 CH3 영역의 전부 또는 일부를 포함하고, 여기서 IgG4 CH3 영역은 임의로 인간 IgG4 CH3 영역이고, IgG2 CH3 영역은 임의로 인간 IgG2 CH3 영역이다. 일부 실시양태에서, 힌지, CH2 및 CH3은 IgG4로부터의 힌지 영역, CH2 및 CH3 각각의 전부 또는 일부를 포함한다. 일부 실시양태에서, 힌지 영역은 키메라이고, 인간 IgG4 및 인간 IgG2로부터의 힌지 영역을 포함하고/거나; CH2 영역은 키메라이고, 인간 IgG4 및 인간 IgG2로부터의 CH2 영역을 포함하고/거나; CH3 영역은 키메라이고, 인간 IgG4 및 인간 IgG2로부터의 CH3 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 인간 IgG4 힌지 영역과 비교하여 적어도 1개의 아미노산 대체를 포함하는 IgG4/2 키메라 힌지 또는 변형된 IgG4 힌지; 인간 IgG2/4 키메라 CH2 영역; 및 인간 IgG4 CH3 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 IgG4 및/또는 IgG2로부터 전부 또는 부분적으로 유래될 수 있고, 1개 이상의 도메인에 돌연변이, 예컨대 1개 이상의 단일 아미노산 돌연변이를 함유할 수 있다. 일부 예에서, 아미노산 변형은 IgG4의 힌지 영역에서의 세린 (S)의 프롤린 (P)으로의 치환이다. 일부 실시양태에서, 아미노산 변형은 글리코실화 불균질성을 감소시키기 위한 아스파라긴 (N)의 글루타민 (Q)으로의 치환, 예컨대 서열식별번호: 182에 제시된 전장 IgG4 Fc 서열의 CH2 영역 내의 위치 177에서의 N177Q 돌연변이 또는 서열식별번호: 181에 제시된 전장 IgG2 Fc 서열의 CH2 영역 내의 위치 176에서의 N176Q이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 IgG4/2 키메라 힌지 또는 변형된 IgG4 힌지; IgG2/4 키메라 CH2 영역; 및 IgG4 CH3 영역이거나 또는 이를 포함하고, 임의로 약 228개 아미노산 길이이거나; 또는 서열식별번호: 29에 제시된 스페이서이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 하기 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 코돈 발현을 위해 및/또는 스플라이스 부위, 예컨대 잠재 스플라이스 부위를 제거하기 위해 최적화된 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된다. 일부 실시양태에서, 스페이서에 대한 코딩 서열은 서열식별번호: 183에 제시된 핵산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서에 대한 코딩 서열은 서열식별번호: 179에 제시된 핵산 서열을 포함한다.
다른 예시적인 스페이서 영역은 CD8a, CD28, CTLA4, PD-1, 또는 FcγRIIIa로부터 유래된 힌지 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 CD8a, CD28, CTLA4, PD-1, 또는 FcγRIIIa의 말단절단된 세포외 도메인 또는 힌지 영역을 함유한다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 말단절단된 CD28 힌지 영역이다. 일부 실시양태에서, 짧은 올리고- 또는 폴리펩티드 링커, 예를 들어 2 내지 10개 아미노산 길이의 링커, 예컨대 알라닌 또는 알라닌 및 아르기닌, 예를 들어 알라닌 트리플렛 (AAA) 또는 RAAA (서열식별번호: 46)를 함유하는 것이 존재하고, 이는 CAR의 scFv와 스페이서 영역 사이에 연결을 형성한다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 CD28로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 CD28 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 114에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 116에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 CD8로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 CD8 힌지 서열이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 117에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 118에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 119에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 CTLA-4로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 CD28 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 120에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 PD-1로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 PD-1 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 122에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 Fc(감마)RIIIa로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 Fc(감마)RIIIa 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 124에 제시된 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 스페이서는 서열식별번호: 1, 3, 4, 5, 29, 114, 116, 117, 118, 119, 120, 122, 124, 또는 125 중 임의의 것에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다.
이러한 항원 인식 도메인은 일반적으로 1개 이상의 세포내 신호전달 성분, 예컨대 항원 수용체 복합체, 예컨대 CAR의 경우에 TCR 복합체를 통한 자극 및/또는 활성화를 모방하고/거나 또 다른 세포 표면 수용체를 통해 신호를 전달하는 신호전달 성분에 연결된다. 따라서, 일부 실시양태에서, 항원-결합 성분 (예를 들어, 항체)은 1개 이상의 막횡단 및 세포내 신호전달 도메인에 연결된다. 일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 세포외 도메인에 융합된다. 한 실시양태에서, 수용체, 예를 들어 CAR 내의 도메인 중 하나와 천연적으로 회합된 막횡단 도메인이 사용된다. 일부 경우에, 막횡단 도메인은 이러한 도메인이 동일하거나 상이한 표면 막 단백질의 막횡단 도메인에 결합하는 것을 피하여 수용체 복합체의 다른 구성원과 상호작용하는 것을 최소화하도록 선택되거나 또는 아미노산 치환에 의해 변형된다.
일부 실시양태에서 막횡단 도메인은 천연 또는 합성 공급원으로부터 유래된다. 공급원이 천연인 경우에, 도메인은 일부 측면에서 임의의 막-결합 또는 막횡단 단백질로부터 유래된다. 막횡단 영역은 T-세포 수용체, CD28, CD3 엡실론, CD45, CD4, CD5, CD8, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137 (4-1BB), CD154, CTLA-4, 또는 PD-1의 알파, 베타 또는 제타 쇄로부터 유래된 것을 포함한다 (즉, 적어도 그의 막횡단 영역(들)을 포함함). 대안적으로, 일부 실시양태에서 막횡단 도메인은 합성이다. 일부 측면에서, 합성 막횡단 도메인은 소수성 잔기, 예컨대 류신 및 발린을 우세하게 포함한다. 일부 측면에서, 페닐알라닌, 트립토판 및 발린의 트리플렛이 합성 막횡단 도메인의 각각의 말단에서 발견될 것이다. 일부 실시양태에서, 연결은 링커, 스페이서 및/또는 막횡단 도메인(들)에 의한다. 막횡단 도메인의 예시적인 서열은 서열식별번호: 8, 44, 45, 115, 121, 123 또는 178에 제시된 서열이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 CD8로부터의 막횡단 도메인이다. 일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 서열식별번호: 44에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 서열식별번호: 45에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 서열식별번호: 115에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 막횡단 도메인은 서열식별번호: 178에 제시된 서열을 갖는다.
세포내 신호전달 도메인 중에는 천연 항원 수용체를 통한 신호, 공동자극 수용체와 조합된 이러한 수용체를 통한 신호, 및/또는 공동자극 수용체 단독을 통한 신호를 모방하거나 근사하는 것이 있다. 일부 실시양태에서, 짧은 올리고- 또는 폴리펩티드 링커, 예를 들어 2 내지 10개 아미노산 길이의 링커, 예컨대 글리신 및 세린, 예를 들어 글리신-세린 듀플렛을 함유하는 것이 존재하고, 이는 CAR의 막횡단 도메인과 세포질 신호전달 도메인 사이에 연결을 형성한다.
수용체, 예를 들어 CAR은 일반적으로 적어도 1개의 세포내 신호전달 성분 또는 성분들을 포함한다. 일부 실시양태에서, 수용체는 TCR 복합체의 세포내 성분, 예컨대 T-세포 자극 및/또는 활성화 및 세포독성을 매개하는 TCR CD3 쇄, 예를 들어 CD3 제타 쇄를 포함한다. 따라서, 일부 측면에서, 항원-결합 부분은 1개 이상의 세포 신호전달 모듈에 연결된다. 일부 실시양태에서, 세포 신호전달 모듈은 CD3 막횡단 도메인, CD3 세포내 신호전달 도메인, 및/또는 다른 CD 막횡단 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 수용체, 예를 들어 CAR은 1개 이상의 추가의 분자, 예컨대 Fc 수용체 γ, CD8, CD4, CD25 또는 CD16의 부분을 추가로 포함한다. 예를 들어, 일부 측면에서, CAR 또는 다른 키메라 수용체는 CD3-제타 (CD3-ζ) 또는 Fc 수용체 γ와 CD8, CD4, CD25 또는 CD16 사이에 키메라 분자를 포함한다.
일부 실시양태에서, CAR 또는 다른 키메라 수용체의 라이게이션 시, 수용체의 세포질 도메인 또는 세포내 신호전달 도메인은 면역 세포, 예를 들어 CAR을 발현하도록 조작된 T 세포의 정상 이펙터 기능 또는 반응 중 적어도 1종을 자극 및/또는 활성화시킨다. 예를 들어, 일부 문맥에서, CAR은 T 세포의 기능, 예컨대 세포용해 활성 또는 T-헬퍼 활성, 예컨대 시토카인 또는 다른 인자의 분비를 유도한다. 일부 실시양태에서, 항원 수용체 성분 또는 공동자극 분자의 세포내 신호전달 도메인의 말단절단된 부분은, 예를 들어 이펙터 기능 신호를 전달하는 경우에, 무손상 면역자극 쇄 대신 사용된다. 일부 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인 또는 도메인들은 T 세포 수용체 (TCR)의 세포질 서열, 및 일부 측면에서 또한 천연 맥락에서 항원 수용체 결속 후에 신호 전달을 개시하도록 이러한 수용체와 협력하여 작용하는 보조-수용체의 것, 및/또는 이러한 분자의 임의의 유도체 또는 변이체, 및/또는 동일한 기능적 능력을 갖는 임의의 합성 서열을 포함한다.
천연 TCR과 관련하여, 완전한 활성화는 일반적으로 TCR을 통한 신호전달 뿐만 아니라 공동자극 신호를 필요로 한다. 따라서, 일부 실시양태에서, 완전한 활성화를 촉진하기 위해, 2차 또는 공동-자극 신호를 생성하기 위한 성분이 또한 CAR에 포함된다. 다른 실시양태에서, CAR은 공동자극 신호를 생성하기 위한 성분을 포함하지 않는다. 일부 측면에서, 추가의 CAR은 동일한 세포에서 발현되고, 2차 또는 공동자극 신호를 생성하기 위한 성분을 제공한다.
T 세포 자극 및/또는 활성화는 일부 측면에서 2가지 부류의 세포질 신호전달 서열에 의해 매개되는 것으로 기재된다: TCR을 통해 항원-의존성 1차 자극 및/또는 활성화를 개시하는 것 (1차 세포질 신호전달 영역, 도메인 또는 서열), 및 항원-비의존성 방식으로 작용하여 2차 또는 공동-자극 신호를 제공하는 것 (2차 세포질 신호전달 영역, 도메인 또는 서열). 일부 측면에서, CAR은 이러한 신호전달 성분 중 하나 또는 둘 다를 포함한다.
일부 측면에서, CAR은 TCR 복합체의 1차 활성화를 조절하는 1차 세포질 신호전달 영역, 도메인 또는 서열을 포함한다. 자극 방식으로 작용하는 1차 세포질 신호전달 영역, 도메인 또는 서열은 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프 또는 ITAM으로 공지된 신호전달 모티프를 함유할 수 있다. 1차 세포질 신호전달 서열을 함유하는 ITAM의 예는 TCR 제타, FcR 감마, FcR 베타, CD3 감마, CD3 델타, CD3 엡실론, CD8, CD22, CD79a, CD79b 및 CD66d로부터 유래된 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, CAR 내의 세포질 신호전달 분자(들)는 세포질 신호전달 도메인, 그의 부분, 또는 CD3 제타로부터 유래된 서열을 함유한다. 일부 실시양태에서, CAR은 공동자극 수용체, 예컨대 CD28, 4-1BB, OX40 (CD134), CD27, DAP10, DAP12, ICOS 및/또는 다른 공동자극 수용체의 신호전달 영역 및/또는 막횡단 부분을 포함한다. 일부 측면에서, 동일한 CAR은 1차 세포질 신호전달 영역 및 공동자극 신호전달 성분 둘 다를 포함한다.
일부 실시양태에서, 1개 이상의 상이한 재조합 수용체는 1개 이상의 상이한 세포내 신호전달 영역(들) 또는 도메인(들)을 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1차 세포질 신호전달 영역은 하나의 CAR 내에 포함되는 반면, 공동자극 성분은 또 다른 수용체, 예를 들어 또 다른 항원을 인식하는 또 다른 CAR에 의해 제공된다. 일부 실시양태에서, CAR은 활성화 또는 자극 CAR, 및 공동자극 CAR을 포함하며, 둘 다는 동일한 세포 상에서 발현된다 (WO2014/055668 참조).
일부 측면에서, 세포는 1종 이상의 자극 또는 활성화 CAR 및/또는 공동자극 CAR을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 억제 CAR (iCAR, 문헌 [Fedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215) (2013)] 참조), 예컨대 질환 또는 상태와 연관되고/거나 그에 특이적인 것 이외의 항원을 인식하는 CAR을 추가로 포함하며, 이에 의해 질환-표적화 CAR을 통해 전달되는 활성화 신호는, 예를 들어 오프-타겟 효과를 감소시키기 위해 억제 CAR이 그의 리간드에 결합하는 것에 의해 감소되거나 억제된다.
특정 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인은 CD3 (예를 들어, CD3-제타) 세포내 도메인에 연결된 CD28 막횡단 및 신호전달 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인은 CD3 제타 세포내 도메인에 연결된 키메라 CD28 및 CD137 (4-1BB, TNFRSF9) 공동-자극 도메인을 포함한다.
일부 실시양태에서, CAR은 세포질 부분에 1개 이상, 예를 들어 2개 이상의 공동자극 도메인 및 1차 세포질 신호전달 영역을 포괄한다. 예시적인 CAR은 CD3-제타, CD28, CD137 (4-1BB), OX40 (CD134), CD27, DAP10, DAP12, NKG2D 및/또는 ICOS의 세포내 성분, 예컨대 세포내 신호전달 영역(들) 또는 도메인(들)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 일부 경우에 막횡단 도메인과 세포내 신호전달 영역 또는 도메인 사이에, 예를 들어 CD28, CD137 (4-1BB), OX40 (CD134), CD27, DAP10, DAP12, NKG2D 및/또는 ICOS로부터의 T 세포 공동자극 분자의 세포내 신호전달 영역 또는 도메인을 함유한다. 일부 측면에서, T 세포 공동자극 분자는 CD28, CD137 (4-1BB), OX40 (CD134), CD27, DAP10, DAP12, NKG2D 및/또는 ICOS 중 1종 이상이다.
일부 경우에, CAR은 제1, 제2, 및/또는 제3 세대 CAR로 지칭된다. 일부 측면에서, 제1 세대 CAR은 항원 결합 시 CD3-쇄 유도된 신호만을 제공하는 것이고; 일부 측면에서, 제2-세대 CAR은 이러한 신호 및 공동자극 신호를 제공하는 것, 예컨대 공동자극 수용체, 예컨대 CD28 또는 CD137로부터의 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 것이고; 일부 측면에서, 제3 세대 CAR은 상이한 공동자극 수용체의 다중 공동자극 도메인을 포함하는 것이다.
일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 항체 또는 항체 단편을 포함하는 세포외 부분을 포함한다. 일부 측면에서, 키메라 항원 수용체는 항체 또는 단편을 함유하는 세포외 부분 및 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 단편은 scFv를 포함하고, 세포내 도메인은 ITAM을 함유한다. 일부 측면에서, 세포내 신호전달 도메인은 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄의 제타 쇄의 신호전달 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 세포외 도메인과 세포내 신호전달 도메인을 연결하는 막횡단 도메인을 포함한다. 일부 측면에서, 막횡단 도메인은 CD28의 막횡단 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 T 세포 공동자극 분자의 세포내 도메인을 함유한다. 세포외 도메인 및 막횡단 도메인은 직접적으로 또는 간접적으로 연결될 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포외 도메인 및 막횡단 도메인은 스페이서, 예컨대 본원에 기재된 임의의 것에 의해 연결된다. 일부 실시양태에서, 수용체는 막횡단 도메인이 유래된 분자의 세포외 부분, 예컨대 CD28 세포외 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 예컨대 막횡단 도메인과 세포내 신호전달 도메인 사이에, T 세포 공동자극 분자 또는 그의 기능적 변이체로부터 유래된 세포내 도메인을 함유한다. 일부 측면에서, T 세포 공동자극 분자는 CD28 또는 4-1BB이다.
예를 들어, 일부 실시양태에서, CAR은 항체, 예를 들어 항체 단편, CD28의 막횡단 부분 또는 그의 기능적 변이체이거나 이를 함유하는 막횡단 도메인, 및 CD28의 신호전달 부분 또는 그의 기능적 변이체 및 CD3 제타의 신호전달 부분 또는 그의 기능적 변이체를 함유하는 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, CAR은 항체, 예를 들어 항체 단편, CD28의 막횡단 부분 또는 그의 기능적 변이체이거나 이를 함유하는 막횡단 도메인, 및 4-1BB의 신호전달 부분 또는 그의 기능적 변이체 및 CD3 제타의 신호전달 부분 또는 그의 기능적 변이체를 함유하는 세포내 신호전달 도메인을 함유한다. 일부 이러한 실시양태에서, 수용체는 Ig 분자, 예컨대 인간 Ig 분자의 부분을 함유하는 스페이서, 예컨대 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지, 예컨대 힌지-단독 스페이서를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 막횡단 도메인은 인간 CD28 (예를 들어, 수탁 번호 P10747.1) 또는 CD8a (수탁 번호 P01732.1) 또는 그의 변이체의 막횡단 도메인, 예컨대 서열식별번호: 8, 115, 44 또는 45에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 8, 115, 44 또는 45에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함하는 막횡단 도메인이거나 또는 이를 포함하고; 일부 실시양태에서, 재조합 수용체의 막횡단-도메인 함유 부분은 서열식별번호: 9에 제시된 아미노산 서열 또는 그에 대해 적어도 정확히 또는 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 세포내 신호전달 성분(들)은 인간 CD28의 세포내 공동자극 신호전달 도메인 또는 그의 기능적 변이체 또는 부분, 예컨대 천연 CD28 단백질의 위치 186-187에서 LL에서 GG로의 치환을 갖는 도메인을 함유한다. 예를 들어, 세포내 신호전달 도메인은 서열식별번호: 10 또는 11에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 10 또는 11에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 공동자극 신호전달 도메인은 서열식별번호: 10에 제시된다. 일부 실시양태에서, 공동자극 신호전달 도메인은 서열식별번호: 11에 제시된다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 세포내 신호전달 성분(들)은 인간 4-1BB의 세포내 공동자극 신호전달 도메인 또는 그의 기능적 변이체 또는 부분을 함유한다. 일부 실시양태에서, 세포내 도메인은 4-1BB (예를 들어, 수탁 번호 Q07011.1)의 세포내 공동자극 신호전달 도메인 또는 그의 기능적 변이체 또는 부분, 예컨대 서열식별번호: 12에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 12에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 공동자극 신호전달 도메인은 서열식별번호: 12에 제시된다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예를 들어 CAR의 세포내 신호전달 도메인은 인간 CD3 제타 자극 신호전달 도메인 또는 그의 기능적 변이체, 예컨대 인간 CD3ζ (수탁 번호 P20963.2)의 이소형 3의 112 AA 세포질 도메인 또는 미국 특허 번호 7,446,190 또는 미국 특허 번호 8,911,993에 기재된 바와 같은 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 세포내 신호전달 도메인은 서열식별번호: 13, 14 또는 15에 제시된 바와 같은 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 13, 14 또는 15에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, CD3 제타 신호전달 도메인은 서열식별번호: 13에 제시된다. 일부 실시양태에서, CD3 제타 신호전달 도메인은 서열식별번호: 14에 제시된다. 일부 실시양태에서, CD3 제타 신호전달 도메인은 서열식별번호: 15에 제시된다.
일부 측면에서, 스페이서는 IgG의 힌지 영역만을, 예컨대 IgG4 또는 IgG1의 힌지만을, 예컨대 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 125에 제시된 힌지 단독 스페이서를 함유한다. 다른 실시양태에서, 스페이서는 CH2 및/또는 CH3 도메인에 임의로 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4-유래 힌지이거나 또는 이를 함유한다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 예컨대 서열식별번호: 4에 제시된, CH2 및 CH3 도메인에 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 예컨대 서열식별번호: 3에 제시된, CH3 도메인에만 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지이다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 글리신-세린 풍부 서열 또는 다른 가요성 링커, 예컨대 공지된 가요성 링커이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 스페이서는 예컨대 서열식별번호: 117-119 중 임의의 것에 제시된 CD8a 힌지, 예컨대 서열식별번호: 124에 제시된 FcγRIIIa 힌지, 예컨대 서열식별번호: 120에 제시된 CTLA4 힌지, 또는 예컨대 서열식별번호: 122에 제시된 PD-1 힌지이다.
예를 들어, 일부 실시양태에서, CAR은 항체, 예컨대 항체 단편, 예컨대 scFv, 스페이서, 예컨대 이뮤노글로불린 분자의 부분, 예컨대 힌지 영역 및/또는 중쇄 분자의 1개 이상의 불변 영역을 함유하는 스페이서, 예컨대 Ig-힌지 함유 스페이서, CD28-유래 막횡단 도메인의 전부 또는 일부를 함유하는 막횡단 도메인, CD28-유래 세포내 신호전달 도메인, 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함한다. 이러한 서열은 본원에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 161에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 161에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 161에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 항체 또는 단편, 예컨대 scFv, 스페이서, 예컨대 Ig-힌지 함유 스페이서 중 임의의 것, CD28-유래 막횡단 도메인, 4-1BB-유래 세포내 신호전달 도메인 및 CD3 제타-유래 신호전달 도메인을 포함한다. 이러한 서열은 본원에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 160에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 160에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 160에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 69에 제시된 뉴클레오티드의 서열에 의해 코딩된다.
일부 실시양태에서, CAR은 항체, 예컨대 항체 단편, 예컨대 scFv, 스페이서, 예컨대 CD8 힌지를 함유하는 스페이서, CD8-유래 막횡단 도메인의 전부 또는 일부를 함유하는 막횡단 도메인, 4-1BB-유래 세포내 신호전달 도메인, 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함한다. 이러한 서열은 본원에 기재된 바와 같은 임의의 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 152에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 152에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 152에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 168에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 168에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 168에 제시된 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 171에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 171에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, CAR은 서열식별번호: 171에 제시된 서열을 갖는다.
대상체에게 투여된 세포에 의해 발현되는 재조합 수용체, 예컨대 CAR은 일반적으로 치료될 질환 또는 상태 또는 그의 세포에서 발현되고/거나, 그와 연관되고/거나, 그에 특이적인 분자를 인식하거나 또는 그에 특이적으로 결합한다. 분자, 예를 들어, 항원에 대한 특이적 결합 시, 수용체는 일반적으로 면역자극 신호, 예컨대 ITAM-전달된 신호를 세포 내로 전달하고, 이에 의해 질환 또는 상태에 표적화된 면역 반응을 촉진한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 세포는 질환 또는 상태의 세포 또는 조직에 의해 발현되거나 또는 질환 또는 상태와 연관된 항원에 특이적으로 결합하는 CAR을 발현한다. 비제한적 예시적인 CAR 서열은 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 제시된다.
일부 실시양태에서, 코딩된 CAR은 CAR이 발현되는 세포의 표면에 CAR을 지시하거나 전달하는 신호 서열 또는 신호 펩티드를 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 신호 펩티드는 막횡단 단백질로부터 유래된다. 일부 예에서, 신호 펩티드는 CD8a, CD33, 또는 IgG로부터 유래된다. 예시적인 신호 펩티드는 서열식별번호: 21, 75 및 76에 제시된 서열 또는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 이러한 CAR 구축물은, 예를 들어 CAR의 하류에 T2A 리보솜 스킵 요소 및/또는 tEGFR 서열을 추가로 포함한다.
B. 유전자 조작을 위한 세포 및 세포의 제조
수용체를 발현하고 제공된 방법에 의해 투여되는 세포 중에는 조작된 세포가 있다. 유전자 조작은 일반적으로 재조합 또는 조작된 성분을 코딩하는 핵산을, 예컨대 레트로바이러스 형질도입, 형질감염 또는 형질전환에 의해 세포를 함유하는 조성물 내로 도입하는 것을 수반한다.
일부 실시양태에서, 핵산은 이종이며, 즉, 정상적으로 세포 또는 세포로부터 수득된 샘플에는 존재하지 않는 것이고, 예컨대 또 다른 유기체 또는 세포로부터 수득된 것으로, 예를 들어 조작되는 세포 및/또는 이러한 세포가 유래된 유기체에서는 통상적으로 발견되지 않는 것이다. 일부 실시양태에서, 핵산은 자연 발생이 아니며, 예컨대 자연에서 발견되지 않는 핵산, 예컨대 다수의 상이한 세포 유형으로부터의 다양한 도메인을 코딩하는 핵산의 키메라 조합을 포함하는 것이다.
세포는 일반적으로 진핵 세포, 예컨대 포유동물 세포이고, 전형적으로 인간 세포이다. 일부 실시양태에서, 세포는 혈액, 골수, 림프 또는 림프성 기관으로부터 유래되고, 면역계의 세포, 예컨대 선천성 또는 적응성 면역의 세포, 예를 들어 골수성 또는 림프성 세포, 예컨대 림프구, 전형적으로 T 세포 및/또는 NK 세포이다. 다른 예시적인 세포는 줄기 세포, 예컨대 유도된 만능 줄기 세포 (iPSC)를 비롯한 다능 및 만능 줄기 세포를 포함한다. 세포는 전형적으로 1차 세포, 예컨대 대상체로부터 직접 단리되고/거나 대상체로부터 단리되고 동결된 것이다. 일부 실시양태에서, 세포는 T 세포 또는 다른 세포 유형의 1종 이상의 하위세트, 예컨대 전체 T 세포 집단, CD4+ 세포, CD8+ 세포, 및 그의 하위집단, 예컨대 기능, 활성화 상태, 성숙, 분화 잠재력, 확장, 재순환, 국재화, 및/또는 지속 능력, 항원-특이성, 항원 수용체의 유형, 특정한 기관 또는 구획에서의 존재, 마커 또는 시토카인 분비 프로파일, 및/또는 분화 정도에 의해 정의되는 것을 포함한다. 치료될 대상체에 관하여, 세포는 동종 및/또는 자가일 수 있다. 방법 중에는 기성품 방법이 포함된다. 일부 측면에서, 예컨대 기성품 기술의 경우, 세포는 만능 및/또는 다능, 예컨대 줄기 세포, 예컨대 유도된 만능 줄기 세포 (iPSC)이다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체로부터 세포를 단리하고, 그를 제조, 가공, 배양 및/또는 조작하고, 그를 동결보존 전 또는 후에 동일한 대상체 내로 재도입하는 것을 포함한다.
T 세포 및/또는 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포의 하위유형 및 하위집단 중에는 나이브 T (TN) 세포, 이펙터 T 세포 (TEFF), 기억 T 세포 및 그의 하위유형, 예컨대 줄기 세포 기억 T (TSCM), 중심 기억 T (TCM), 이펙터 기억 T (TEM), 또는 말단 분화 이펙터 기억 T 세포, 종양-침윤 림프구 (TIL), 미성숙 T 세포, 성숙 T 세포, 헬퍼 T 세포, 세포독성 T 세포, 점막-연관 불변 T (MAIT) 세포, 자연 발생 및 적응 조절 T (Treg) 세포, 헬퍼 T 세포, 예컨대 TH1 세포, TH2 세포, TH3 세포, TH17 세포, TH9 세포, TH22 세포, 여포성 헬퍼 T 세포, 알파/베타 T 세포, 및 델타/감마 T 세포가 있다.
일부 실시양태에서, 세포는 자연 킬러 (NK) 세포이다. 일부 실시양태에서, 세포는 단핵구 또는 과립구, 예를 들어 골수 세포, 대식세포, 호중구, 수지상 세포, 비만 세포, 호산구 및/또는 호염기구이다.
일부 실시양태에서, 세포는 유전자 조작을 통해 도입된 1개 이상의 핵산을 포함하고, 이에 의해 이러한 핵산의 재조합 또는 유전자 조작된 산물을 발현한다. 일부 실시양태에서, 핵산은 이종이며, 즉, 정상적으로 세포 또는 세포로부터 수득된 샘플에는 존재하지 않는 것이고, 예컨대 또 다른 유기체 또는 세포로부터 수득된 것으로, 예를 들어 조작되는 세포 및/또는 이러한 세포가 유래된 유기체에서는 통상적으로 발견되지 않는 것이다. 일부 실시양태에서, 핵산은 자연 발생이 아니며, 예컨대 자연에서 발견되지 않는 핵산, 예컨대 다수의 상이한 세포 유형으로부터의 다양한 도메인을 코딩하는 핵산의 키메라 조합을 포함하는 것이다.
일부 실시양태에서, 조작된 세포의 제조는 1회 이상의 배양 및/또는 제조 단계를 포함한다. 트랜스제닉 수용체, 예컨대 CAR을 코딩하는 핵산의 도입을 위한 세포는 샘플, 예컨대 생물학적 샘플, 예를 들어 대상체로부터 수득되거나 유래된 것으로부터 단리될 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포가 단리되는 대상체는 질환 또는 상태를 갖거나 또는 세포 요법을 필요로 하거나 또는 세포 요법이 투여될 대상체이다. 일부 실시양태에서 대상체는 특정한 치료적 개입, 예컨대 세포가 단리, 가공 및/또는 조작되는 입양 세포 요법을 필요로 하는 인간이다.
따라서, 일부 실시양태에서 세포는 1차 세포, 예를 들어 1차 인간 세포이다. 샘플은 대상체로부터 직접 채취한 조직, 유체 및 다른 샘플, 뿐만 아니라 1종 이상의 가공 단계, 예컨대 분리, 원심분리, 유전자 조작 (예를 들어, 바이러스 벡터로의 형질도입), 세척 및/또는 인큐베이션으로부터 생성된 샘플을 포함한다. 생물학적 샘플은 생물학적 공급원으로부터 직접 수득된 샘플 또는 가공된 샘플일 수 있다. 생물학적 샘플은 체액, 예컨대 혈액, 혈장, 혈청, 뇌척수액, 활액, 뇨 및 땀, 조직 및 기관 샘플, 예컨대 그로부터 유래된 가공된 샘플을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 측면에서, 세포가 유래되거나 단리되는 샘플은 혈액 또는 혈액-유래 샘플이거나, 또는 분리반출술 또는 백혈구분리반출술 산물이거나 또는 이로부터 유래된다. 예시적인 샘플은 전혈, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), 백혈구, 골수, 흉선, 조직 생검, 종양, 백혈병, 림프종, 림프절, 장 연관 림프성 조직, 점막 연관 림프성 조직, 비장, 다른 림프성 조직, 간, 폐, 위, 장, 결장, 신장, 췌장, 유방, 골, 전립선, 자궁경부, 고환, 난소, 편도 또는 다른 기관, 및/또는 그로부터 유래된 세포를 포함한다. 샘플은 세포 요법, 예를 들어 입양 세포 요법과 관련하여 자가 및 동종 공급원으로부터의 샘플을 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포는 세포주, 예를 들어 T 세포주로부터 유래된다. 일부 실시양태에서 세포는 이종 공급원, 예를 들어 마우스, 래트, 비-인간 영장류 및 돼지로부터 수득된다.
일부 실시양태에서, 세포의 단리는 1회 이상의 제조 및/또는 비-친화도 기반 세포 분리 단계를 포함한다. 일부 예에서, 예를 들어, 원치 않는 성분을 제거하고, 목적하는 성분을 풍부화하고, 특정한 시약에 대해 감수성인 세포를 용해시키거나 제거하기 위해, 세포는 세척, 원심분리 및/또는 1종 이상의 시약의 존재 하에 인큐베이션된다. 일부 예에서, 세포는 1종 이상의 특성, 예컨대 밀도, 부착 특성, 크기, 감수성 및/또는 특정한 성분에 대한 저항성에 기초하여 분리된다.
일부 예에서, 대상체의 순환 혈액으로부터의 세포는, 예를 들어 분리반출술 또는 백혈구분리반출술에 의해 수득된다. 일부 측면에서, 샘플은 T 세포, 단핵구, 과립구, B 세포, 다른 유핵 백혈구, 적혈구 및/또는 혈소판을 비롯한 림프구를 함유하고, 일부 측면에서 적혈구 및 혈소판 이외의 세포를 함유한다.
일부 실시양태에서, 대상체로부터 수집된 혈액 세포는, 예를 들어 혈장 분획을 제거하고 후속 가공 단계를 위해 세포를 적절한 완충제 또는 배지에 두기 위해 세척된다. 일부 실시양태에서, 세포는 포스페이트 완충 염수 (PBS)로 세척된다. 일부 실시양태에서, 세척 용액은 칼슘 및/또는 마그네슘 및/또는 많은 또는 모든 2가 양이온이 결여되어 있다. 일부 측면에서, 세척 단계는 제조업체의 지침에 따라 반자동화 "관통형" 원심분리기 (예를 들어, 코브(Cobe) 2991 세포 프로세서, 백스터(Baxter))에 의해 달성된다. 일부 측면에서, 세척 단계는 제조업체의 지침에 따라 접선 흐름 여과 (TFF)에 의해 달성된다. 일부 실시양태에서, 세포는 세척 후에 다양한 생체적합성 완충제, 예컨대, 예를 들어 Ca++/Mg++ 유리 PBS 중에 재현탁된다. 특정 실시양태에서, 혈액 세포 샘플의 성분이 제거되고, 세포는 배양 배지에 직접 재현탁된다.
일부 실시양태에서, 방법은 밀도-기반 세포 분리 방법, 예컨대 적혈구를 용해시키고 퍼콜 또는 피콜 구배를 통해 원심분리함으로써 말초 혈액으로부터 백혈구를 제조하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 단리 방법은 1종 이상의 특이적 분자, 예컨대 표면 마커, 예를 들어 표면 단백질, 세포내 마커 또는 핵산의 세포 내 발현 또는 존재에 기초하여 상이한 세포 유형을 분리하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이러한 마커에 기초한 분리를 위한 임의의 공지된 방법이 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 분리는 친화도- 또는 면역친화도-기반 분리이다. 예를 들어, 일부 측면에서 단리는, 예를 들어 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 결합 파트너와의 인큐베이션에 이어, 일반적으로 세척 단계, 및 항체 또는 결합 파트너에 결합되지 않은 세포로부터 항체 또는 결합 파트너에 결합된 세포의 분리에 의한, 세포의 발현 또는 1종 이상의 이러한 마커, 전형적으로 세포 표면 마커의 발현 수준에 기초한 세포 및 세포 집단의 분리를 포함한다.
이러한 분리 단계는 시약에 결합된 세포가 추가의 사용을 위해 보유되는 양성 선택, 및/또는 항체 또는 결합 파트너에 결합되지 않은 세포가 보유되는 음성 선택에 기초할 수 있다. 일부 예에서, 둘 다의 분획은 추가 사용을 위해 보유된다. 일부 측면에서, 음성 선택은 이종 집단에서 세포 유형을 특이적으로 확인하는 항체가 이용가능하지 않아서, 분리가 목적하는 집단 이외의 세포에 의해 발현된 마커에 기초하여 가장 잘 수행되는 경우에 특히 유용할 수 있다.
분리는 특정한 세포 집단 또는 특정한 마커를 발현하는 세포의 100% 풍부화 또는 제거를 발생시킬 필요는 없다. 예를 들어, 특정한 유형의 세포, 예컨대 마커를 발현하는 세포의 양성 선택 또는 그에 대한 풍부화는 이러한 세포의 수 또는 백분율을 증가시키는 것을 지칭하지만, 마커를 발현하지 않는 세포의 완전한 부재를 발생시킬 필요는 없다. 마찬가지로, 특정한 유형의 세포, 예컨대 마커를 발현하는 세포의 음성 선택, 제거 또는 고갈은 이러한 세포의 수 또는 백분율을 감소시키는 것을 지칭하지만, 모든 이러한 세포의 완전한 제거를 발생시킬 필요는 없다.
일부 예에서, 다중 라운드의 분리 단계가 수행되며, 여기서 하나의 단계로부터 양성 또는 음성 선택된 분획은 또 다른 분리 단계, 예컨대 후속 양성 또는 음성 선택에 적용된다. 일부 예에서, 단일 분리 단계는 예컨대 세포를 음성 선택을 위해 표적화된 마커에 각각 특이적인 복수의 항체 또는 결합 파트너와 함께 인큐베이션함으로써 다중 마커를 발현하는 세포를 동시에 고갈시킬 수 있다. 마찬가지로, 다중 세포 유형은 세포를 다양한 세포 유형 상에서 발현된 복수의 항체 또는 결합 파트너와 함께 인큐베이션함으로써 동시에 양성 선택될 수 있다.
예를 들어, 일부 측면에서, T 세포의 특정 하위집단, 예컨대 1종 이상의 표면 마커에 대해 양성이거나 또는 이를 높은 수준으로 발현하는 세포, 예를 들어, CD28+, CD62L+, CCR7+, CD27+, CD127+, CD4+, CD8+, CD45RA+, 및/또는 CD45RO+ T 세포는 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 단리된다.
예를 들어, CD3+, CD28+ T 세포는 항-CD3/항-CD28 접합된 자기 비드 (예를 들어, 디나비즈(DYNABEADS)® M-450 CD3/CD28 T 세포 확장제)를 사용하여 양성 선택될 수 있다.
일부 실시양태에서, 단리는 양성 선택에 의한 특정한 세포 집단의 풍부화, 또는 음성 선택에 의한 특정한 세포 집단의 고갈에 의해 수행된다. 일부 실시양태에서, 양성 또는 음성 선택은 각각 양성 또는 음성 선택된 세포 상에서 발현되거나 (마커+) 또는 비교적 더 높은 수준으로 발현되는 (마커고) 1종 이상의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 1종 이상의 항체 또는 다른 결합제와 세포를 함께 인큐베이션함으로써 달성된다.
일부 실시양태에서, T 세포는 비-T 세포, 예컨대 B 세포, 단핵구, 또는 다른 백혈구 상에서 발현된 마커, 예컨대 CD14의 음성 선택에 의해 PBMC 샘플로부터 분리된다. 일부 측면에서, CD4+ 또는 CD8+ 선택 단계가 CD4+ 헬퍼 및 CD8+ 세포독성 T 세포를 분리하는 데 사용된다. 이러한 CD4+ 및 CD8+ 집단은 1종 이상의 나이브, 기억, 및/또는 이펙터 T 세포 하위집단에서 발현되거나 또는 비교적 더 높은 정도로 발현된 마커에 대한 양성 또는 음성 선택에 의해 하위집단으로 추가로 분류될 수 있다.
일부 실시양태에서, CD8+ 세포는 예컨대 각각의 하위집단과 연관된 표면 항원에 기초한 양성 또는 음성 선택에 의해 나이브, 중심 기억, 이펙터 기억, 및/또는 중심 기억 줄기 세포에 대해 추가로 풍부화되거나 또는 고갈된다. 일부 실시양태에서, 중심 기억 T (TCM) 세포에 대한 풍부화는 효능을 증가시키기 위해, 예컨대 투여 후 장기간 생존, 확장 및/또는 생착을 개선시키기 위해 수행되며, 이는 일부 측면에서 이러한 하위-집단에서 특히 강건하다. 문헌 [Terakura et al., Blood.1:72-82 (2012); Wang et al., J Immunother. 35(9):689-701 (2012)] 참조. 일부 실시양태에서, TCM-풍부화된 CD8+ T 세포와 CD4+ T 세포를 조합하는 것은 효능을 추가로 증진시킨다.
실시양태에서, 기억 T 세포는 CD8+ 말초 혈액 림프구의 CD62L+ 및 CD62L- 하위세트 둘 다에 존재한다. PBMC는 예컨대 항-CD8 및 항-CD62L 항체를 사용하여 CD62L-CD8+ 및/또는 CD62L+CD8+ 분획이 풍부화되거나 고갈될 수 있다.
일부 실시양태에서, 중심 기억 T (TCM) 세포에 대한 풍부화는 CD45RO, CD62L, CCR7, CD28, CD3, 및/또는 CD 127의 양성 또는 높은 표면 발현에 기초하고; 일부 측면에서, 이는 CD45RA 및/또는 그랜자임 B를 발현하거나 또는 고도로 발현하는 세포에 대한 음성 선택에 기초한다. 일부 측면에서, TCM 세포가 풍부한 CD8+ 집단의 단리는 CD4, CD14, CD45RA를 발현하는 세포의 고갈, 및 CD62L을 발현하는 세포에 대한 양성 선택 또는 풍부화에 의해 수행된다. 한 측면에서, 중심 기억 T (TCM) 세포에 대한 풍부화는 CD4 발현에 기초하여 선택된 세포의 음성 분획으로 출발하여 수행되며, 이는 CD14 및 CD45RA의 발현에 기초한 음성 선택 및 CD62L에 기초한 양성 선택에 적용된다. 이러한 선택은 일부 측면에서 동시에 수행되고, 다른 측면에서 순차적으로, 어느 하나의 순서로 수행된다. 일부 측면에서, CD8+ 세포 집단 또는 하위집단을 제조하는 데 사용되는 동일한 CD4 발현-기반 선택 단계는 또한 CD4+ 세포 집단 또는 하위집단을 생성하는 데 사용되어, CD4-기반 분리로부터의 양성 및 음성 분획 둘 다가 보유되고, 임의로 1개 이상의 추가의 양성 또는 음성 선택 단계 후에 방법의 후속 단계에 사용된다.
특정한 예에서, PBMC의 샘플 또는 다른 백혈구 샘플이 CD4+ 세포의 선택에 적용되며, 여기서 음성 및 양성 분획 둘 다가 보유된다. 이어서, 음성 분획이 CD14 및 CD45RA 또는 CD19의 발현에 기초한 음성 선택, 및 중심 기억 T 세포의 특징적인 마커, 예컨대 CD62L 또는 CCR7에 기초한 양성 선택에 적용되며, 여기서 양성 및 음성 선택은 어느 하나의 순서로 수행된다.
CD4+ T 헬퍼 세포는 세포 표면 항원을 갖는 세포 집단을 확인함으로써 나이브, 중심 기억 및 이펙터 세포로 분류된다. CD4+ 림프구는 표준 방법에 의해 수득될 수 있다. 일부 실시양태에서, 나이브 CD4+ T 림프구는 CD45RO-, CD45RA+, CD62L+, CD4+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 중심 기억 CD4+ 세포는 CD62L+ 및 CD45RO+이다. 일부 실시양태에서, 이펙터 CD4+ 세포는 CD62L- 및 CD45RO-이다.
한 예에서, 음성 선택에 의해 CD4+ 세포를 풍부화하기 위해, 모노클로날 항체 칵테일은 전형적으로 CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR, 및 CD8에 대한 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 결합 파트너는 양성 및/또는 음성 선택을 위한 세포의 분리를 가능하게 하기 위해 고체 지지체 또는 매트릭스, 예컨대 자기 비드 또는 상자성 비드에 결합된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 세포 및 세포 집단은 면역자기 (또는 친화도자기) 분리 기술을 사용하여 분리 또는 단리된다 (문헌 [Methods in Molecular Medicine, vol. 58: Metastasis Research Protocols, Vol. 2: Cell Behavior In vitro and In vivo, p 17-25 Edited by: S. A. Brooks and U. Schumacher ⓒ Humana Press Inc., Totowa, NJ]에서 검토됨).
일부 측면에서, 분리될 세포의 샘플 또는 조성물은 작은, 자화성 또는 자기 반응성 물질, 예컨대 자기 반응성 입자 또는 마이크로입자, 예컨대 상자성 비드 (예를 들어, 예컨대 디날비드 또는 MACS 비드)와 함께 인큐베이션된다. 자기 반응성 물질, 예를 들어 입자는 일반적으로 분리가 요망되는, 예를 들어 음성 또는 양성 선택이 요망되는 세포, 세포들 또는 세포 집단 상에 존재하는 분자, 예를 들어 표면 마커에 특이적으로 결합하는 결합 파트너, 예를 들어 항체에 직접적으로 또는 간접적으로 부착된다.
일부 실시양태에서, 자기 입자 또는 비드는 특이적 결합 구성원, 예컨대 항체 또는 다른 결합 파트너에 결합된 자기 반응성 물질을 포함한다. 자기 분리 방법에 사용되는 많은 널리 공지된 자기 반응성 물질이 존재한다. 적합한 자기 입자는 미국 특허 번호 4,452,773 (Molday) 및 유럽 특허 명세서 EP 452342 B에 기재된 것을 포함하며, 이들은 본원에 참조로 포함된다. 미국 특허 번호 4,795,698 (Owen) 및 미국 특허 번호 5,200,084 (Liberti et al.)에 기재된 것과 같은 콜로이드 크기의 입자는 다른 예이다.
인큐베이션은 일반적으로 자기 입자 또는 비드에 부착된 항체 또는 결합 파트너에 특이적으로 결합하는 항체 또는 결합 파트너, 또는 분자, 예컨대 2차 항체 또는 다른 시약이 샘플 내의 세포 상의 세포 표면 분자 (존재하는 경우)에 특이적으로 결합하는 조건 하에 수행된다.
일부 측면에서, 샘플은 자기장에 배치되고, 자기 반응성 또는 자화성 입자가 부착된 세포는 자석에 유인되어 비표지된 세포로부터 분리될 것이다. 양성 선택의 경우, 자석에 유인된 세포가 보유되고; 음성 선택의 경우, 유인되지 않은 세포 (비표지된 세포)가 보유된다. 일부 측면에서, 양성 및 음성 선택의 조합은 동일한 선택 단계 동안 수행되며, 여기서 양성 및 음성 분획은 보유되고 추가로 가공되거나 또는 추가의 분리 단계에 적용된다.
특정 실시양태에서, 자기 반응성 입자는 1차 항체 또는 다른 결합 파트너, 2차 항체, 렉틴, 효소 또는 스트렙타비딘으로 코팅된다. 특정 실시양태에서, 자기 입자는 1종 이상의 마커에 특이적인 1차 항체의 코팅을 통해 세포에 부착된다. 특정 실시양태에서, 비드보다는 세포가 1차 항체 또는 결합 파트너로 표지되고, 이어서 세포-유형 특이적 2차 항체- 또는 다른 결합 파트너 (예를 들어, 스트렙타비딘)-코팅된 자기 입자가 첨가된다. 특정 실시양태에서, 스트렙타비딘-코팅된 자기 입자는 비오티닐화 1차 또는 2차 항체와 함께 사용된다.
일부 실시양태에서, 자기 반응성 입자는 후속적으로 인큐베이션, 배양 및/또는 조작될 세포에 부착된 채로 남아있고; 일부 측면에서, 입자는 환자에게 투여하기 위한 세포에 부착된 채로 남아있다. 일부 실시양태에서, 자화성 또는 자기 반응성 입자는 세포로부터 제거된다. 세포로부터 자화성 입자를 제거하는 방법은 공지되어 있고, 예를 들어 경쟁 비-표지된 항체, 및 자화성 입자 또는 절단가능한 링커에 접합된 항체의 사용을 포함한다. 일부 실시양태에서, 자화성 입자는 생분해성이다.
일부 실시양태에서, 친화도-기반 선택은 자기-활성화 세포 분류 (MACS) (밀테니 바이오텍(Miltenyi Biotec), 캘리포니아주 오번)를 통한 것이다. 자기 활성화 세포 분류 (MACS) 시스템은 자화된 입자가 부착된 세포의 고순도 선택이 가능하다. 특정 실시양태에서, MACS는 비-표적 및 표적 종이 외부 자기장의 인가 후에 순차적으로 용리되는 방식으로 작동한다. 즉, 자화된 입자에 부착된 세포는 제자리에 유지되는 한편, 비부착된 종은 용리된다. 이어서, 이러한 제1 용리 단계가 완료된 후에, 자기장에 포획되고 용리되는 것이 방지된 종은 이들이 용리되고 회수될 수 있도록 하는 일부 방식으로 유리된다. 특정 실시양태에서, 비-표적 세포는 표지되고, 이종 세포 집단으로부터 고갈된다.
특정 실시양태에서, 단리 또는 분리는 방법의 단리, 세포 제조, 분리, 가공, 인큐베이션, 배양 및/또는 제제화 단계 중 1가지 이상을 수행하는 시스템, 장치 또는 장비를 사용하여 수행된다. 일부 측면에서, 시스템은 예를 들어 오류, 사용자 취급 및/또는 오염을 최소화하기 위해 폐쇄 또는 멸균 환경에서 각각의 이들 단계를 수행하는 데 사용된다. 한 예에서, 시스템은 PCT 공개 번호 WO2009/072003, 또는 US 20110003380 A1에 기재된 바와 같은 시스템이다.
일부 실시양태에서, 시스템 또는 장치는 단리, 가공, 조작 및 제제화 단계 중 1가지 이상, 예를 들어 모두를 통합 또는 독립 시스템에서 및/또는 자동화 또는 프로그램가능한 방식으로 수행한다. 일부 측면에서, 시스템 또는 장치는 시스템 또는 장치와 통신하는 컴퓨터 및/또는 컴퓨터 프로그램을 포함하며, 이는 사용자가 가공, 단리, 조작 및 제제화 단계의 다양한 측면을 프로그래밍, 제어, 결과 평가 및/또는 조정하는 것을 가능하게 한다.
일부 측면에서, 분리 및/또는 다른 단계는, 예를 들어 폐쇄 및 멸균 시스템에서 임상-규모 수준으로의 세포의 자동화 분리를 위해 클리니MACS(CliniMACS) 시스템 (밀테니 바이오텍)을 사용하여 수행된다. 구성요소는 통합 마이크로컴퓨터, 자기 분리 유닛, 연동 펌프 및 다양한 핀치 밸브를 포함할 수 있다. 일부 측면에서, 통합 컴퓨터는 기기의 모든 구성요소를 제어하고, 시스템이 반복되는 절차를 표준화된 순서로 수행하도록 지시한다. 일부 측면에서, 자기 분리 유닛은 이동식 영구 자석 및 선택 칼럼을 위한 홀더를 포함한다. 연동 펌프는 배관 세트 전반에 걸쳐 유량을 제어하고, 핀치 밸브와 함께, 시스템을 통한 완충제의 제어된 유동 및 세포의 연속 현탁을 보장한다.
클리니MACS 시스템은 일부 측면에서 멸균, 비-발열성 용액으로 공급되는 항체-커플링된 자화성 입자를 사용한다. 일부 실시양태에서, 세포를 자기 입자로 표지한 후, 세포를 세척하여 과량의 입자를 제거한다. 이어서, 세포 제조 백을 배관 세트에 연결하고, 이어서 이를 완충제를 함유하는 백 및 세포 수집 백에 연결한다. 배관 세트는 사전-칼럼 및 분리 컬럼을 포함하는 사전-조립된 멸균 배관으로 이루어지고, 단지 단일 사용을 위한 것이다. 분리 프로그램의 개시 후, 시스템은 세포 샘플을 분리 칼럼 상에 자동으로 적용한다. 표지된 세포는 칼럼 내에 보유되는 반면, 비표지된 세포는 일련의 세척 단계에 의해 제거된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 세포 집단은 비표지되고, 칼럼에 보유되지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 세포 집단은 표지되고, 칼럼에 보유된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 세포 집단은 자기장의 제거 후에 칼럼으로부터 용리되고, 세포 수집 백 내에 수집된다.
특정 실시양태에서, 분리 및/또는 다른 단계는 클리니MACS 프로디지 시스템 (밀테니 바이오텍)을 사용하여 수행된다. 일부 측면에서 클리니MACS 프로디지 시스템은 원심분리에 의한 세포의 자동화된 세척 및 분획화를 허용하는 세포 가공 장치가 장착되어 있다. 클리니MACS 프로디지 시스템은 또한 공급원 세포 산물의 거시적 층을 식별함으로써 최적의 세포 분획화 종점을 결정하는 온보드 카메라 및 영상 인식 소프트웨어를 포함할 수 있다. 예를 들어, 말초 혈액은 적혈구, 백혈구 및 혈장 층으로 자동적으로 분리된다. 클리니MACS 프로디지 시스템은 또한, 예를 들어 세포 분화 및 확장, 항원 로딩, 및 장기간 세포 배양과 같은 세포 배양 프로토콜을 달성하는 통합된 세포 배양 챔버를 포함할 수 있다. 투입 포트는 배지의 멸균 제거 및 보충을 가능하게 할 수 있고, 세포는 통합 현미경을 사용하여 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Klebanoff et al., J Immunother. 35(9): 651-660 (2012), Terakura et al., Blood.1:72-82 (2012), 및 Wang et al., J Immunother. 35(9):689-701 (2012)]을 참조한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 세포 집단은 다수의 세포 표면 마커에 대해 염색된 세포가 유체 스트림으로 운반되는 유동 세포측정법을 통해 수집되고 풍부화된다 (또는 고갈됨). 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 세포 집단은 정제용 규모 (FACS)-분류를 통해 수집되고 풍부화된다 (또는 고갈됨). 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 세포 집단은 FACS-기반 검출 시스템과 조합된 마이크로전기기계 시스템 (MEMS) 칩의 사용에 의해 수집되고 풍부화된다 (또는 고갈됨) (예를 들어, WO 2010/033140, 문헌 [Cho et al., Lab Chip 10, 1567-1573 (2010); 및 Godin et al., J Biophoton. 1(5):355-376 (2008)] 참조). 둘 다의 경우에, 세포는 다중 마커로 표지되어, 잘-규정된 T 세포 하위세트의 고순도로의 단리를 가능하게 할 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체 또는 결합 파트너는 양성 및/또는 음성 선택을 위한 분리를 용이하게 하기 위해 1종 이상의 검출가능한 마커로 표지된다. 예를 들어, 분리는 형광 표지된 항체에 대한 결합에 기초할 수 있다. 일부 예에서, 1종 이상의 세포 표면 마커에 특이적인 항체 또는 다른 결합 파트너의 결합에 기초한 세포의 분리는 유체 스트림으로, 예컨대 형광-활성화 세포 분류 (FACS), 예를 들어 정제 규모 (FACS) 및/또는 예를 들어 유동 세포측정 검출 시스템과 조합된 마이크로전기기계 시스템 (MEMS) 칩에 의해 수행된다. 이러한 방법은 다중 마커에 기초하여 동시에 양성 및 음성 선택을 가능하게 한다.
일부 실시양태에서, 제조 방법은 단리, 인큐베이션 및/또는 조작 전 또는 후에 세포를 동결, 예를 들어 동결보존하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 동결 및 후속 해동 단계는 세포 집단에서 과립구를 제거하고, 어느 정도의 단핵구를 제거한다. 일부 실시양태에서, 세포는 예를 들어 혈장 및 혈소판을 제거하기 위한 세척 단계 후에 동결 용액 중에 현탁된다. 일부 측면에서 다양한 공지된 동결 용액 및 파라미터 중 임의의 것이 사용될 수 있다. 한 예는 20% DMSO 및 8% 인간 혈청 알부민 (HSA)을 함유하는 PBS, 또는 다른 적합한 세포 동결 배지를 사용하는 것을 수반한다. 이어서, 이는 DMSO 및 HSA의 최종 농도가 각각 10% 및 4%가 되도록 배지에 의해 1:1 희석된다. 이어서, 세포는 일반적으로 분당 1°의 속도로 -80℃로 동결되고, 액체 질소 저장 탱크의 증기 상에 저장된다.
일부 실시양태에서, 세포는 유전자 조작 전에 또는 그와 관련하여 인큐베이션 및/또는 배양된다. 인큐베이션 단계는 배양, 양식, 자극, 활성화 및/또는 증식을 포함할 수 있다. 인큐베이션 및/또는 조작은 배양 용기, 예컨대 유닛, 챔버, 웰, 칼럼, 튜브, 배관 세트, 밸브, 바이알, 배양 접시, 백, 또는 세포 배양 또는 양식을 위한 다른 용기에서 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물 또는 세포는 자극 조건 또는 자극제의 존재 하에 인큐베이션된다. 이러한 조건은 집단에서 세포의 증식, 확장, 활성화 및/또는 생존을 유도하고/거나, 항원 노출을 모방하고/거나, 유전자 조작, 예컨대 재조합 항원 수용체의 도입을 위해 세포를 프라이밍하도록 설계된 것을 포함한다.
조건은 특정한 배지, 온도, 산소 함량, 이산화탄소 함량, 시간, 작용제, 예를 들어 영양소, 아미노산, 항생제, 이온, 및/또는 자극 인자, 예컨대 시토카인, 케모카인, 항원, 결합 파트너, 융합 단백질, 재조합 가용성 수용체, 및 세포를 활성화시키도록 설계된 임의의 다른 작용제 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 자극 조건 또는 작용제는 TCR 복합체의 세포내 신호전달 도메인을 활성화시킬 수 있는 1종 이상의 작용제, 예를 들어 리간드를 포함한다. 일부 측면에서, 작용제는 T 세포에서 TCR/CD3 세포내 신호전달 캐스케이드를 켜거나 개시한다. 이러한 작용제는 항체, 예컨대 TCR에 특이적인 것, 예를 들어 항-CD3을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 자극 조건은 공동자극 수용체를 자극할 수 있는 1종 이상의 작용제, 예를 들어 리간드, 예를 들어 항-CD28을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이러한 작용제 및/또는 리간드는 고체 지지체, 예컨대 비드, 및/또는 1종 이상의 시토카인에 결합될 수 있다. 임의로, 확장 방법은 항-CD3 및/또는 항 CD28 항체를 배양 배지에 (예를 들어, 적어도 약 0.5 ng/ml의 농도로) 첨가하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 자극제는 IL-2, IL-15 및/또는 IL-7을 포함한다. 일부 측면에서, IL-2 농도는 적어도 약 10 유닛/mL이다.
일부 측면에서, 인큐베이션은 미국 특허 번호 6,040,177 (Riddell et al.), 문헌 [Klebanoff et al., J Immunother. 35(9): 651-660 (2012), Terakura et al., Blood.1:72-82 (2012), 및/또는 Wang et al., J Immunother. 35(9):689-701 (2012)]에 기재된 것과 같은 기술에 따라 수행된다.
일부 실시양태에서, 배양-개시 조성물에 피더 세포, 예컨대 비-분열 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 첨가하고 (예를 들어, 생성되는 세포 집단이 확장 대상 초기 집단 내의 각각의 T 림프구에 대해 적어도 약 5, 10, 20, 또는 40개 또는 그 초과의 PBMC 피더 세포를 함유하도록); 배양물을 (예를 들어, T 세포의 수를 확장시키는 데 충분한 시간 동안) 인큐베이션하는 것에 의해 T 세포가 확장된다. 일부 측면에서, 비-분열 피더 세포는 감마-조사된 PBMC 피더 세포를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, PBMC는 세포 분열을 방지하기 위해 약 3000 내지 3600 rad 범위의 감마선으로 조사된다. 일부 측면에서, 피더 세포는 T 세포의 집단의 첨가 전에 배양 배지에 첨가된다.
일부 실시양태에서, 자극 조건은 인간 T 림프구의 성장에 적합한 온도, 예를 들어, 적어도 약 25℃, 일반적으로 적어도 약 30℃, 및 일반적으로 정확히 또는 약 37℃를 포함한다. 임의로, 인큐베이션은 피더 세포로서 비-분열 EBV-형질전환된 림프모구성 세포 (LCL)를 첨가하는 것을 추가로 포함할 수 있다. LCL은 약 6000 내지 10,000 rad 범위의 감마선으로 조사될 수 있다. 일부 측면에서 LCL 피더 세포는 임의의 적합한 양, 예컨대 적어도 약 10:1의 LCL 피더 세포 대 초기 T 림프구의 비로 제공된다.
실시양태에서, 항원-특이적 T 세포, 예컨대 항원-특이적 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포는 나이브 또는 항원 특이적 T 림프구를 항원으로 자극하는 것에 의해 수득된다. 예를 들어, 항원-특이적 T 세포주 또는 클론은 감염된 대상체로부터 T 세포를 단리하고 동일한 항원으로 시험관내에서 세포를 자극함으로써 시토메갈로바이러스 항원에 대해 생성될 수 있다.
C. 유전자 조작을 위한 핵산, 벡터 및 방법
일부 실시양태에서, 세포, 예를 들어 T 세포는 재조합 수용체를 발현하도록 유전자 조작된다. 일부 실시양태에서, 조작은 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 분자를 도입함으로써 수행된다. 또한, 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 분자, 및 이러한 핵산 및/또는 핵산 분자를 함유하는 벡터 또는 구축물이 제공된다.
일부 경우에, 재조합 수용체, 예를 들어, 키메라 항원 수용체 (CAR)를 코딩하는 핵산 서열은 신호 펩티드를 코딩하는 신호 서열을 함유한다. 일부 측면에서, 신호 서열은 천연 폴리펩티드로부터 유래된 신호 펩티드를 코딩할 수 있다. 다른 측면에서, 신호 서열은 이종 또는 비-천연 신호 펩티드를 코딩할 수 있다. 일부 실시양태에서, 신호 펩티드는 막횡단 단백질로부터 유래된다. 일부 예에서, 신호 펩티드는 CD8a, CD33, 또는 IgG로부터 유래된다. 신호 펩티드의 비제한적 예시적인 예는 예를 들어 서열식별번호: 21에 제시된 CD33 신호 펩티드, 서열식별번호: 75에 제시된 CD8a 신호 펩티드, 또는 서열식별번호: 76에 제시된 신호 펩티드 또는 그의 변형된 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 분자는 재조합 수용체의 발현을 제어하도록 작동가능하게 연결된 적어도 1개의 프로모터를 함유한다. 일부 예에서, 핵산 분자는 재조합 수용체의 발현을 제어하도록 작동가능하게 연결된 2, 3개 또는 그 초과의 프로모터를 함유한다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 적절한 경우에, 핵산 분자가 DNA- 또는 RNA-기반인지를 고려하여, 핵산 분자가 도입될 숙주의 유형 (예를 들어, 박테리아, 진균, 식물 또는 동물)에 특이적인 조절 서열, 예컨대 전사 및 번역 개시 및 종결 코돈을 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 조절/제어 요소, 예컨대 프로모터, 인핸서, 인트론, 폴리아데닐화 신호, 코작 컨센서스 서열, 및 스플라이스 수용자 또는 공여자를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 재조합 수용체 및/또는 1종 이상의 추가의 폴리펩티드(들)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열에 작동가능하게 연결된 비천연 프로모터를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 RNA pol I, pol II 또는 pol III 프로모터 중에서 선택된다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 RNA 폴리머라제 II에 의해 인식된다 (예를 들어, CMV, SV40 초기 영역 또는 아데노바이러스 주요 후기 프로모터). 또 다른 실시양태에서, 프로모터는 RNA 폴리머라제 III에 의해 인식된다 (예를 들어, U6 또는 H1 프로모터). 일부 실시양태에서, 프로모터는 비-바이러스 프로모터 또는 바이러스 프로모터, 예컨대 시토메갈로바이러스 (CMV) 프로모터, SV40 프로모터, RSV 프로모터, 및 뮤린 줄기 세포 바이러스의 긴-말단 반복부에서 발견되는 프로모터일 수 있다. 다른 공지된 프로모터가 또한 고려된다.
일부 실시양태에서, 프로모터는 구성적 프로모터이거나 또는 이를 포함한다. 예시적인 구성적 프로모터는, 예를 들어 원숭이 바이러스 40 초기 프로모터 (SV40), 시토메갈로바이러스 극초기 프로모터 (CMV), 인간 유비퀴틴 C 프로모터 (UBC), 인간 신장 인자 1α 프로모터 (EF1α), 마우스 포스포글리세레이트 키나제 1 프로모터 (PGK), 및 CMV 초기 인핸서와 커플링된 닭 β-액틴 프로모터 (CAGG)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 구성적 프로모터는 합성 또는 변형된 프로모터이다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 골수증식성 육종 바이러스 인핸서를 갖는 변형된 MoMuLV LTR의 U3 영역을 함유하는 합성 프로모터인 MND 프로모터이거나 또는 이를 포함한다 (문헌 [Challita et al., (1995) J. Virol. 69(2):748-755] 참조). 일부 실시양태에서, 프로모터는 조직-특이적 프로모터이다. 또 다른 실시양태에서, 프로모터는 바이러스 프로모터이다. 또 다른 실시양태에서, 프로모터는 비-바이러스 프로모터이다.
또 다른 실시양태에서, 프로모터는 조절성 프로모터 (예를 들어, 유도성 프로모터)이다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 유도성 프로모터 또는 억제성 프로모터이다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 Lac 오퍼레이터 서열, 테트라시클린 오퍼레이터 서열, 갈락토스 오퍼레이터 서열 또는 독시시클린 오퍼레이터 서열을 포함하거나, 또는 그의 유사체이거나, 또는 Lac 리프레서 또는 테트라시클린 리프레서, 또는 그의 유사체에 의해 결합되거나 인식될 수 있다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 조절 요소, 예를 들어 프로모터를 포함하지 않는다.
일부 실시양태에서, 재조합 수용체, 예를 들어 CAR 또는 다른 항원 수용체를 코딩하는 핵산 분자는 마커를 코딩하는 핵산 서열을 추가로 포함하고/거나 CAR 또는 다른 항원 수용체를 발현하는 세포는 마커, 예를 들어 대용물 마커, 예컨대 세포 표면 마커를 추가로 포함하며, 이는 수용체, 예컨대 말단절단된 버전의 세포 표면 수용체, 예컨대 말단절단된 EGFR (tEGFR)을 발현하는 세포의 형질도입 또는 조작을 확인하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 마커(들)는 형질도입 마커, 대용물 마커 및/또는 선택 마커이다.
일부 실시양태에서, 마커는 형질도입 마커 또는 대용물 마커이다. 형질도입 마커 또는 대용물 마커는 핵산 분자, 예를 들어 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 분자가 도입된 세포를 검출하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 형질도입 마커는 세포의 변형을 나타내거나 확인시켜 줄 수 있다. 일부 실시양태에서, 대용물 마커는 세포 표면 상에서 재조합 수용체, 예를 들어, CAR과 공동-발현되도록 제조된 단백질이다. 특정한 실시양태에서, 이러한 대용물 마커는 활성을 거의 또는 전혀 갖지 않도록 변형된 표면 단백질이다. 특정 실시양태에서, 대용물 마커는 재조합 수용체를 코딩하는 동일한 핵산 분자 상에서 코딩된다. 일부 실시양태에서, 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 서열은 내부 리보솜 진입 부위 (IRES), 또는 자기-절단 펩티드 또는 리보솜 스키핑을 유발하는 펩티드, 예컨대 2A 서열, 예컨대 T2A, P2A, E2A 또는 F2A를 코딩하는 핵산에 의해 임의로 분리되어, 마커를 코딩하는 핵산 서열에 작동가능하게 연결된다. 외인성 마커 유전자는 일부 경우에 세포의 검출 또는 선택을 허용하고, 일부 경우에 또한 세포 자살을 촉진하기 위해, 조작된 세포와 관련하여 이용될 수 있다.
예시적인 대용물 마커는 세포 표면 폴리펩티드의 말단절단된 형태, 예컨대 비-기능적이고 신호전달하지 않거나 신호 또는 세포 표면 폴리펩티드의 전장 형태에 의해 통상적으로 전달되는 신호를 전달할 수 없고/거나, 내재화하지 않거나 내재화할 수 없는 말단절단된 형태를 포함할 수 있다. 예시적인 말단절단된 세포 표면 폴리펩티드는 말단절단된 형태의 성장 인자 또는 다른 수용체, 예컨대 말단절단된 인간 표피 성장 인자 수용체 2 (tHER2), 말단절단된 표피 성장 인자 수용체 (tEGFR, 서열식별번호: 11 또는 76에 제시된 예시적인 tEGFR 서열) 또는 전립선-특이적 막 항원 (PSMA) 또는 그의 변형된 형태를 포함한다. tEGFR은 항체 세툭시맙 (에르비툭스(Erbitux)®) 또는 다른 치료 항-EGFR 항체 또는 결합 분자에 의해 인식되는 에피토프를 함유할 수 있으며, 이는 tEGFR 구축물 및 코딩된 외인성 단백질로 조작된 세포를 확인 또는 선택하고/거나, 코딩된 외인성 단백질을 발현하는 세포를 제거 또는 분리하는 데 사용될 수 있다. 미국 특허 번호 8,802,374 및 문헌 [Liu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434)]을 참조한다. 일부 측면에서, 마커, 예를 들어, 대용물 마커는 CD34, NGFR, CD19 또는 말단절단된 CD19, 예를 들어, 말단절단된 비-인간 CD19, 또는 표피 성장 인자 수용체 (예를 들어, tEGFR)의 전부 또는 일부 (예를 들어, 말단절단된 형태)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 마커는 형광 단백질, 예컨대 녹색 형광 단백질 (GFP), 증강 녹색 형광 단백질 (EGFP), 예컨대 슈퍼-폴드 GFP (sfGFP), 적색 형광 단백질 (RFP), 예컨대 tdTomato, mCherry, mStrawberry, AsRed2, DsRed 또는 DsRed2, 시안 형광 단백질 (CFP), 청색 녹색 형광 단백질 (BFP), 증강 청색 형광 단백질 (EBFP), 및 황색 형광 단백질 (YFP), 및 형광 단백질의 종 변이체, 단량체 변이체, 및 코돈-최적화 및/또는 증강 변이체를 포함한 그의 변이체이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 마커는 효소, 예컨대 루시페라제, 이. 콜라이(E. coli)로부터의 lacZ 유전자, 알칼리성 포스파타제, 분비된 배아 알칼리성 포스파타제 (SEAP), 클로람페니콜 아세틸 트랜스퍼라제 (CAT)이거나 또는 이를 포함한다. 예시적인 발광 리포터 유전자는 루시페라제 (luc), β-갈락토시다제, 클로람페니콜 아세틸트랜스퍼라제 (CAT), β-글루쿠로니다제 (GUS) 또는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 마커는 선택 마커이다. 일부 실시양태에서, 선택 마커는 외인성 작용제 또는 약물에 대한 저항성을 부여하는 폴리펩티드이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 선택 마커는 항생제 저항성 유전자이다. 일부 실시양태에서, 선택 마커는 포유동물 세포에 항생제 저항성을 부여하는 항생제 저항성 유전자이다. 일부 실시양태에서, 선택 마커는 퓨로마이신 저항성 유전자, 히그로마이신 저항성 유전자, 블라스티시딘 저항성 유전자, 네오마이신 저항성 유전자, 제네티신 저항성 유전자 또는 제오신 저항성 유전자 또는 그의 변형된 형태이거나 또는 이를 포함한다.
일부 측면에서, 마커, 예를 들어, 대용물 마커는 CD34, NGFR, 또는 표피 성장 인자 수용체 (예를 들어, tEGFR)의 전부 또는 일부 (예를 들어, 말단절단된 형태)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 마커를 코딩하는 핵산은 링커 서열, 예컨대 절단가능한 링커 서열, 예를 들어 T2A를 코딩하는 폴리뉴클레오티드에 작동가능하게 연결된다. 예를 들어, 마커, 및 임의로 링커 서열은 PCT 공개 번호 WO2014031687에 개시된 바와 같은 임의의 것일 수 있다. 예를 들어, 마커는 임의로 링커 서열, 예컨대 T2A 절단가능한 링커 서열에 연결된 말단절단된 EGFR (tEGFR)일 수 있다. 말단절단된 EGFR (예를 들어, tEGFR)에 대한 예시적인 폴리펩티드는 서열식별번호: 7 또는 28에 제시된 아미노산의 서열, 또는 서열식별번호: 7 또는 28에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산의 서열을 포함한다. 예시적인 T2A 링커 서열은 서열식별번호: 6에 제시된 아미노산의 서열 또는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산의 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이러한 CAR 구축물을 코딩하는 핵산 분자는, 예를 들어 CAR을 코딩하는 서열의 하류에 T2A 리보솜 스킵 요소 및/또는 tEGFR 서열을 코딩하는 서열을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 서열은 서열식별번호: 6에 제시된 T2A 리보솜 스킵 요소, 또는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산의 서열을 코딩한다. 일부 실시양태에서, 항원 수용체 (예를 들어, CAR)를 발현하는 T 세포는 또한 비-면역원성 선택 에피토프로서 말단절단된 EGFR (EGFRt)을 발현하도록 생성될 수 있고 (예를 들어, 동일한 구축물로부터 2개의 단백질을 발현시키기 위해 T2A 리보솜 스위치에 의해 분리된 CAR 및 EGFRt를 코딩하는 구축물의 도입에 의함), 이는 이어서 이러한 세포를 검출하기 위한 마커로서 사용될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 8,802,374 참조). 일부 실시양태에서, 서열은 서열식별번호: 7 또는 28에 제시된 tEGFR 서열, 또는 서열식별번호: 7 또는 28에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 나타내는 아미노산의 서열을 코딩한다.
일부 실시양태에서, 단일 프로모터는 단일 오픈 리딩 프레임 (ORF) 내의, 자기-절단 펩티드를 코딩하는 서열 (예를 들어, 2A 서열) 또는 프로테아제 인식 부위 (예를 들어, 푸린)에 의해 서로 분리된 2 또는 3개의 유전자 (예를 들어, 대사 경로를 조정하는 데 수반되는 분자를 코딩하는 것 및 재조합 수용체를 코딩하는 것)를 함유하는 RNA의 발현을 지시할 수 있다. 따라서, ORF는 (2A의 경우) 번역 동안 또는 번역 후에 개별 단백질로 프로세싱되는 단일 폴리펩티드를 코딩한다. 일부 경우에, 펩티드, 예컨대 T2A는 리보솜이 2A 요소의 C-말단에서의 펩티드 결합의 합성을 건너뛰도록 하여 (리보솜 스키핑), 2A 서열의 말단과 다음 펩티드 하류 사이의 분리를 유도할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [de Felipe. Genetic Vaccines and Ther. 2:13 (2004) 및 deFelipe et al., Traffic 5:616-626 (2004)] 참조). 많은 2A 요소가 관련 기술분야에 공지되어 있다. 본원에 개시된 방법 및 핵산에 사용될 수 있는 2A 서열의 예는 비제한적으로 미국 특허 공개 번호 20070116690에 기재된 바와 같은 구제역 바이러스 (F2A, 예를 들어 서열식별번호: 27), 말 비염 A 바이러스 (E2A, 예를 들어 서열식별번호: 26), 토세아 아시그나(Thosea asigna) 바이러스 (T2A, 예를 들어 서열식별번호: 6 또는 23), 및 돼지 테스코바이러스-1 (P2A, 예를 들어 서열식별번호: 24 또는 25)로부터의 2A 서열이다.
일부 실시양태에서, 마커는 T 세포 상에서 자연적으로 발견되지 않거나 T 세포의 표면 상에서 자연적으로 발견되지 않는 분자, 예를 들어 세포 표면 단백질, 또는 그의 부분이다. 일부 실시양태에서, 분자는 비-자기 분자, 예를 들어 비-자기 단백질, 즉 세포가 입양 전달될 숙주의 면역계에 의해 "자기"로 인식되지 않는 것이다.
일부 실시양태에서, 마커는 치료 기능을 제공하지 않고/거나, 예를 들어 성공적으로 조작된 세포를 선택하기 위한, 유전자 조작에 대한 마커로서 사용되는 것 이외의 효과를 생성하지 않는다. 다른 실시양태에서, 마커는 치료 분자 또는 달리 일부 목적하는 효과를 발휘하는 분자, 예컨대 생체내에서 마주치게 될 세포에 대한 리간드, 예컨대 입양 전달 및 리간드와의 마주침 시 세포의 반응을 증진시키고/거나 약화시키는 공동자극 또는 면역 체크포인트 분자일 수 있다.
세포에서의 재조합 수용체를 코딩하는 핵산 분자의 도입은 다수의 공지된 벡터 중 임의의 것을 사용하여 수행될 수 있다. 이러한 벡터는 렌티바이러스 및 감마레트로바이러스 시스템, 뿐만 아니라 트랜스포손-기반 시스템, 예컨대 피기백(PiggyBac) 또는 슬리핑 뷰티(Sleeping Beauty)-기반 유전자 전달 시스템을 비롯한 바이러스 및 비-바이러스 시스템을 포함한다. 예시적인 방법은 바이러스, 예를 들어 레트로바이러스 또는 렌티바이러스, 형질도입, 트랜스포손 및 전기천공을 통한 것을 포함한, 수용체를 코딩하는 핵산의 전달을 위한 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 유전자 전달은 먼저 세포를 자극하는 것에 의해, 예컨대 이를 반응을 유도하는, 예컨대 예를 들어 시토카인 또는 활성화 마커의 발현에 의해 측정되는 바와 같은 증식, 생존 및/또는 활성화를 유도하는 자극과 조합한 다음, 활성화된 세포를 형질도입하고, 배양물 중에서 임상 적용에 충분한 수로 확장시키는 것에 의해 달성된다.
일부 문맥에서, 자극 인자 (예를 들어, 림포카인 또는 시토카인)의 과다발현은 대상체에게 독성일 수 있다. 따라서, 일부 문맥에서, 조작된 세포는 세포가 생체내에서, 예컨대 입양 면역요법으로의 투여 시 음성 선택에 감수성이도록 하는 유전자 절편을 포함한다. 예를 들어, 일부 측면에서, 세포는 이들이 투여되는 환자의 생체내 상태의 변화의 결과로서 제거될 수 있도록 조작된다. 음성 선택 표현형은 투여된 작용제, 예를 들어 화합물에 대한 감수성을 부여하는 유전자의 삽입으로부터 생성될 수 있다. 음성 선택 유전자는 간시클로비르 감수성을 부여하는 단순 포진 바이러스 유형 I 티미딘 키나제 (HSV-I TK) 유전자 (Wigler et al., Cell 2:223, 1977); 세포 하이포크산틴 포스포리보실트랜스퍼라제 (HPRT) 유전자, 세포 아데닌 포스포리보실트랜스퍼라제 (APRT) 유전자, 박테리아 시토신 데아미나제 (Mullen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:33 (1992)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 재조합 핵산은 재조합 감염성 바이러스 입자, 예컨대 예를 들어, 원숭이 바이러스 40 (SV40), 아데노바이러스, 아데노-연관 바이러스 (AAV)로부터 유래된 벡터를 사용하여 세포 내로 전달된다. 일부 실시양태에서, 재조합 핵산은 재조합 렌티바이러스 벡터 또는 레트로바이러스 벡터, 예컨대 감마-레트로바이러스 벡터를 사용하여 T 세포 내로 전달된다 (예를 들어, 문헌 [Koste et al., (2014) Gene Therapy 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25; Carlens et al., (2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46; Alonso-Camino et al., (2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93; Park et al., Trends Biotechnol. 2011 November 29(11): 550-557] 참조).
일부 실시양태에서, 레트로바이러스 벡터는 긴 말단 반복부 서열 (LTR), 예를 들어, 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스 (MoMLV), 골수증식성 육종 바이러스 (MPSV), 뮤린 배아 줄기 세포 바이러스 (MESV), 뮤린 줄기 세포 바이러스 (MSCV), 비장 초점 형성 바이러스 (SFFV), 또는 아데노-연관 바이러스 (AAV)로부터 유래된 레트로바이러스 벡터를 갖는다. 대부분의 레트로바이러스 벡터는 뮤린 레트로바이러스로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 레트로바이러스는 임의의 조류 또는 포유동물 세포 공급원으로부터 유래된 것을 포함한다. 레트로바이러스는 전형적으로 양생이며, 이는 인간을 비롯한 여러 종의 숙주 세포를 감염시킬 수 있음을 의미한다. 한 실시양태에서, 발현될 유전자는 레트로바이러스 gag, pol 및/또는 env 서열을 대체한다. 다수의 예시적인 레트로바이러스 시스템이 기재되어 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,219,740; 6,207,453; 5,219,740; 문헌 [Miller and Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990; Miller, A. D. (1990) Human Gene Therapy 1:5-14; Scarpa et al., (1991) Virology 180:849-852; Burns et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037; 및 Boris-Lawrie and Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109]).
렌티바이러스 형질도입 방법은 공지되어 있다. 예시적인 방법은 예를 들어 문헌 [Wang et al., (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701; Cooper et al., (2003) Blood. 101:1637-1644; Verhoeyen et al., (2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114; 및 Cavalieri et al., (2003) Blood. 102(2): 497-505]에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 재조합 핵산은 전기천공을 통해 T 세포 내로 전달된다 (예를 들어, 문헌 [Chicaybam et al., (2013) PLoS ONE 8(3): e60298 및 Van Tedeloo et al., (2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437] 참조). 일부 실시양태에서, 재조합 핵산은 전위를 통해 T 세포 내로 전달된다 (예를 들어, 문헌 [Manuri et al., (2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437; Sharma et al., (2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74; 및 Huang et al., (2009) Methods Mol Biol 506: 115-126] 참조). 면역 세포에 유전 물질을 도입하고 이를 발현시키는 다른 방법은 인산칼슘 형질감염 (예를 들어, 문헌 [Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.]에 기재된 바와 같음), 원형질체 융합, 양이온성 리포솜-매개 형질감염; 텅스텐 입자-촉진 마이크로입자 충격 (Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990)); 및 스트론튬 포스페이트 DNA 공-침전 (Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987))을 포함한다.
재조합 산물을 코딩하는 핵산의 전달을 위한 다른 접근법 및 벡터는, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 번호 WO2014055668, 및 미국 특허 번호 7,446,190에 기재된 것이 있다.
일부 실시양태에서, 세포, 예를 들어 T 세포는 확장 동안 또는 후에, 예를 들어 T 세포 수용체 (TCR) 또는 키메라 항원 수용체 (CAR)로 형질감염될 수 있다. 목적하는 수용체의 유전자의 도입을 위한 이러한 형질감염은 예를 들어 임의의 적합한 레트로바이러스 벡터로 수행될 수 있다. 이어서, 유전자 변형된 세포 집단은 초기 자극 (예를 들어, CD3/CD28 자극)으로부터 유리되고, 후속적으로 예를 들어 신생 도입된 수용체를 통해 제2 유형의 자극으로 자극될 수 있다. 이러한 제2 유형의 자극은 펩티드/MHC 분자 형태의 항원 자극, 유전자 도입된 수용체의 동족 (가교) 리간드 (예를 들어, CAR의 천연 리간드) 또는 (예를 들어, 수용체 내의 불변 영역을 인식함으로써) 새로운 수용체의 프레임워크 내에 직접 결합하는 임의의 리간드 (예컨대 항체)를 포함할 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Cheadle et al., "Chimeric antigen receptors for T-cell based therapy" Methods Mol Biol. 2012; 907:645-66 또는 Barrett et al., Chimeric Antigen Receptor Therapy for Cancer Annual Review of Medicine Vol. 65: 333-347 (2014)]을 참조한다.
일부 경우에, 세포, 예를 들어 T 세포가 활성화되는 것을 필요로 하지 않는 벡터가 사용될 수 있다. 일부 이러한 경우에, 세포는 활성화 전에 선택 및/또는 형질도입될 수 있다. 따라서, 세포는 세포의 배양 전에 또는 그에 후속하여, 및 일부 경우에 배양의 적어도 한 부분과 동시에 또는 그 동안 조작될 수 있다.
일부 측면에서, 세포는 시토카인 또는 다른 인자의 발현을 촉진하도록 추가로 조작된다. 추가의 핵산, 예를 들어 도입을 위한 유전자 중에는, 예컨대 전달된 세포의 생존율 및/또는 기능을 촉진함으로써 요법의 효능을 개선시키는 것; 세포의 선택 및/또는 평가를 위한, 예컨대 생체내 생존 또는 국재화를 평가하기 위한 유전자 마커를 제공하는 유전자; 예를 들어 문헌 [Lupton S. D. et al., Mol. and Cell Biol., 11:6 (1991); 및 Riddell et al., Human Gene Therapy 3:319-338 (1992)]에 기재된 바와 같이 세포를 생체내 음성 선택에 감수성이게 함으로써 안전성을 개선시키는 유전자가 있고; 또한 우성 양성 선택 마커를 음성 선택 마커와 융합시키는 것으로부터 유래된 이중기능적 선택 융합 유전자의 사용을 기재하는 PCT/US91/08442 및 PCT/US94/05601 (Lupton et al.) 공개를 참조한다. 예를 들어, 미국 특허 번호 6,040,177 (Riddell et al.) 칼럼 14-17을 참조한다.
III. 예시적인 치료 결과 및 그의 평가 방법
본원에 제공된 방법, 조성물, 조합물, 키트 및 용도의 일부 실시양태에서, 제공된 조합 요법은 1종 이상의 치료 결과, 예컨대 하기 기재된 바와 같은 요법 또는 치료와 연관된 파라미터 중 어느 1종 이상과 연관된 특색을 발생시킨다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포, 예를 들어 T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 노출, 지속성 및 증식의 평가를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에서 세포의 노출, 또는 연장된 확장 및/또는 지속성, 및/또는 세포 표현형 또는 세포, 예를 들어 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 세포의 기능적 활성의 변화는 시험관내 또는 생체외에서 T 세포의 특징을 평가함으로써 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 검정은 본원에 제공된 조합 요법을 투여하기 전 또는 후에 T 세포, 예를 들어 T 세포 요법의 기능을 결정 또는 확인하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 요법은 조합 요법으로 치료하고/거나 조합 요법을 계속할 대상체를 확인하기 위한 하나 이상의 스크리닝 단계, 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위한 단계를 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 평가를 위한 단계는 치료를 평가하고/거나 모니터링하고/거나 요법의 추가 또는 나머지 단계의 투여 및/또는 반복 요법을 위한 대상체를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 본원에 제공된 조합 요법의 용량, 빈도, 지속기간, 시기 및/또는 순서를 결정하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가 중 임의의 것은 제공된 조합 요법의 1회 이상의 단계의 투여, 예를 들어 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포) 및/또는 조합 작용제의 투여 전에, 그 동안, 그 과정 동안 또는 그에 후속하여 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 평가는 본원에 제공된 방법 중 임의의 것을 수행하기 전에, 그 동안, 그 과정 동안, 또는 그 후에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 평가는 본원에 제공된 방법을 수행하기 전에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 평가는 본원에 제공된 방법의 1개 이상의 단계를 수행한 후에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 평가는, 예를 들어 조합 요법을 제공받는 데 적합하고/거나 감수성인 환자를 스크리닝하고 확인하기 위해, 제공된 조합 요법의 1개 이상의 단계의 투여 전에 수행된다. 일부 실시양태에서, 평가는, 예를 들어 중간 또는 최종 치료 결과를 평가하기 위해, 예를 들어 치료의 효능을 결정하고/거나 치료를 계속할지 또는 반복할지 결정하고/거나 조합 요법의 나머지 단계를 투여할지 결정하기 위해, 제공된 조합 요법의 1개 이상의 단계의 투여 동안, 그 과정 동안, 또는 그에 후속하여 수행된다.
일부 실시양태에서, 치료 결과는 개선된 면역 기능, 예를 들어, 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포 및/또는 신체 내의 내인성 T 세포의 면역 기능을 포함한다. 일부 실시양태에서, 예시적인 치료 결과는 증진된 T 세포 증식, 증진된 T 세포 기능적 활성, 면역 세포 표현형 마커 발현의 변화, 예컨대 대상체에게 투여된 조작된 T 세포, 예를 들어 CAR-T 세포와 연관된 이러한 특색을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 예시적인 치료 결과는 감소된 질환 부담, 예를 들어 종양 부담, 개선된 임상 결과 및/또는 요법의 증진된 효능을 포함한다.
일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 생존 및/또는 기능을 평가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 시토카인 또는 성장 인자의 수준을 평가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 질환 부담 및/또는 개선을 평가하는 것, 예를 들어 종양 부담 및/또는 임상 결과를 평가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 본원에 기재되고/거나 관련 기술분야에 공지된 평가 방법 및/또는 검정 중 임의의 것을 포함할 수 있고, 1회 이상, 예를 들어 조합 요법의 1개 이상의 단계의 투여 전에, 그 동안, 그 과정 동안, 또는 그에 후속하여 수행될 수 있다. 본원에 제공된 방법의 일부 실시양태에서 평가될 수 있는, 치료 결과와 연관된 예시적인 파라미터 세트는 말초 혈액 면역 세포 집단 프로파일 및/또는 종양 부담을 포함한다.
일부 실시양태에서, 방법은 대상체에서 세포 요법의 효능에 영향을 미친다. 일부 실시양태에서, 조합 요법을 사용한 방법에서 세포의 용량의 투여 후에 대상체에서 재조합 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포의 지속성, 확장 및/또는 존재는 조합 작용제의 투여가 없는 방법을 통해 달성된 것과 비교하여 더 크다. 본원에 제공된 면역요법 방법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)의 일부 실시양태에서, 파라미터의 평가는 면역요법이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법에 대해 투여된 T 세포의 대상체에서의 확장 및/또는 지속성을 평가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 T 세포 요법이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여, 투여된 T 세포가 대상체에서 증가되거나 연장된 확장 및/또는 지속성을 나타내도록 한다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 재조합 수용체를 발현하는 세포의 용량이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여 대상체에서 질환 부담, 예를 들어 종양 부담을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 재조합 수용체를 발현하는 세포의 용량이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여 대상체에서 골수 모구를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 재조합 수용체를 발현하는 세포의 용량이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여 개선된 임상 결과, 예를 들어 객관적 반응률 (ORR), 무진행 생존 (PFS) 및 전체 생존 (OS)을 발생시킨다.
일부 실시양태에서, 대상체는 조합 요법의 1개 이상의 단계의 투여 전에 스크리닝될 수 있다. 예를 들어, 대상체는 조합 요법의 투여에 대한 적합성, 반응성 및/또는 감수성을 결정하기 위해 조합 요법의 투여 전에 질환 및/또는 질환 부담, 예를 들어 종양 부담의 특징에 대해 스크리닝된다. 일부 실시양태에서, 치료 결과의 스크리닝 단계 및/또는 평가는 본원에 제공된 조합 요법의 용량, 빈도, 지속기간, 시기 및/또는 순서를 결정하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상체는 조합 요법의 나머지 단계를 제공받을 대상체를 결정 및 확인하고/거나 요법의 효능을 모니터링하기 위해 조합 요법의 단계 중 1개의 투여 후에 스크리닝될 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여된 T 세포의 수, 수준 또는 양 및/또는 투여된 T 세포의 증식 및/또는 활성은 조합 작용제의 투여 전 및/또는 투여 후에 평가된다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 대상체의 혈액 내의 조작된 세포의 농도 또는 수가 (i) 마이크로리터당 적어도 정확히 또는 약 10개의 조작된 세포일 때까지, (ii) 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 총수의 적어도 20%, 30%, 40% 또는 50%일 때까지, (iii) 적어도 또는 적어도 약 1 x 105개의 조작된 세포일 때까지; 또는 (iv) 마이크로그램 DNA당 적어도 5,000 카피의 재조합 수용체-코딩 DNA일 때까지; 및/또는 (a)에서 투여의 개시 후 제90일에, CAR-발현 세포가 대상체의 혈액 또는 혈청에서 검출가능하고/거나; (a)에서 투여 개시 후 제90일에, 대상체의 혈액이 마이크로리터당 적어도 20% CAR-발현 세포, 적어도 10개의 CAR-발현 세포 또는 적어도 1 x 104개의 CAR-발현 세포를 함유할 때까지 투여된다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제는 6개월 초과 또는 1년 초과 또는 그 초과 동안, 치료에 대한 임상 이익, 예컨대 총 종양 부피의 적어도 50% 또는 그 초과의 감소 또는 검출가능한 종양이 사라진 완전 반응 (CR), 무진행 생존 또는 무질환 생존이 존재할 때까지 투여된다.
일부 실시양태에서, 상이한 평가 시점, 상이한 상태, 기준점 및/또는 상이한 대상체에서의 동일한 파라미터 또는 결과의 수준, 값 또는 측정치와 비교하여 파라미터 또는 결과의 수준, 값 또는 측정치에서의 변화 및/또는 변경, 예를 들어 증가, 상승, 감소 또는 저하가 결정 또는 평가된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 예를 들어 조합 작용제의 투여 전 또는 후 상이한 조건에서의 동일한 파라미터와 비교하여 특정한 파라미터, 예를 들어 샘플 내 조작된 T 세포의 수에서의 배수 변화, 예를 들어 증가 또는 감소가 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 파라미터의 수준, 값 또는 측정치가 결정되고, 상대 수준이 비교된다. 일부 실시양태에서, 파라미터의 결정된 수준, 값 또는 측정치는 대조군 샘플 또는 비처리 샘플로부터의 수준, 값 또는 측정치와 비교된다. 일부 실시양태에서, 파라미터의 결정된 수준, 값 또는 측정치는 동일한 대상체로부터의 것이지만 상이한 시점에서의 샘플로부터의 수준과 비교된다. 개별 파라미터의 정량화에서 수득된 값은 질환 평가의 목적을 위해, 예를 들어, 다중파라미터 분석을 사용하여 파라미터의 수준, 값 또는 측정치에 대해 산술 또는 논리 연산을 형성하는 것에 의해 조합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 특정 파라미터의 비가 계산될 수 있다.
A. T 세포 노출, 지속성, 및 증식
일부 실시양태에서, 스크리닝 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 연관된 파라미터는 T 세포, 예를 들어 T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 노출, 지속성 및 증식의 평가이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에서 세포의 증가된 노출, 또는 연장된 확장 및/또는 지속성, 및/또는 세포 표현형 또는 세포, 예를 들어 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 세포의 기능적 활성의 변화는 시험관내 또는 생체외에서 T 세포의 특징을 평가함으로써 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 검정은 본원에 제공된 조합 요법의 1개 이상의 단계를 투여하기 전 또는 후에 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 사용된 T 세포의 기능을 결정 또는 확인하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 예컨대 시간 경과에 따른 확장 및/또는 지속성을 촉진함으로써 T 세포 기반 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어 T 세포에 대한 대상체의 노출을 촉진하도록 설계된다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법은 T 세포 요법이 조합 작용제의 부재 하에 대상체에게 투여되는 방법과 비교하여, 대상체에서 증가되거나 연장된 확장 및/또는 지속성을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 투여된 세포에 대한 대상체의 노출을 증가시키고/거나 (예를 들어, 시간 경과에 따른 세포 수 또는 지속기간 증가), 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법의 효능 및 치료 결과를 개선시킨다. 일부 측면에서, 방법은 재조합 수용체를 발현하는 세포, 예를 들어 CAR-발현 세포에 대한 보다 큰 및/또는 보다 긴 정도의 노출이 다른 방법과 비교하여 치료 결과를 개선시킨다는 점에서 유리하다. 이러한 결과는 심지어 중증 종양 부담을 갖는 개체에서도 환자 생존 및 완화를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 조합 작용제의 부재 하의 T 세포 단독의 투여와 비교하여 대상체에서 T 세포 기반 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어 T 세포에 대한 최대, 총 노출 및/또는 그의 지속기간을 증가시킬 수 있다. 일부 측면에서, 세포의 확장 및/또는 지속성을 방지할 수 있는 면역억제, 무반응 및/또는 소진을 발생시킬 수 있는 높은 질환 부담 (및 따라서 보다 높은 항원의 양) 및/또는 보다 공격성 또는 저항성 암의 맥락에서 조합 작용제의 투여는 동일한 맥락에서 조합 작용제의 부재 하의 T 세포 단독의 투여와 비교하여 효능을 증진시킨다.
일부 실시양태에서, T 세포의 투여 후 및 조합 작용제의 투여 전, 그 동안 및/또는 그 후에 대상체에서 재조합 수용체를 발현하는 세포 (예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 CAR-발현 세포)의 존재 및/또는 양이 검출된다. 일부 측면에서, 정량적 PCR (qPCR)은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 기관 또는 조직 샘플 (예를 들어, 질환 부위, 예를 들어 종양 샘플)에서 재조합 수용체를 발현하는 세포 (예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 CAR-발현 세포)의 양을 평가하는 데 사용된다. 일부 측면에서, 지속성은 DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 코딩하는 DNA 또는 플라스미드의 카피로서, 또는 샘플, 예를 들어 혈액 또는 혈청 마이크로리터당, 또는 샘플 마이크로리터당 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 또는 백혈구 또는 T 세포의 총수당 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포의 수로서 정량화된다.
일부 실시양태에서, 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여의 정확히 또는 적어도 4, 14, 15, 27, 또는 28일 후에 대상체에서 검출된다. 일부 측면에서, 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여의 정확히 또는 적어도 2, 4, 또는 6주 후, 또는 3, 6, 또는 12, 18, 또는 24, 또는 30 또는 36개월, 또는 1, 2, 3, 4, 5년 또는 그 초과 후에 검출된다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 후에 방법에 의한 대상체에서의 수용체-발현 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포)의 지속성은 조합 작용제의 부재 하에 면역요법 단독의 투여, 예를 들어 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여를 수반하는 것과 같은 대안적 방법에 의해 달성될 것과 비교하여 더 크다.
확장 및/또는 지속성을 나타내는, T 세포 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어, T 세포의 노출, 예를 들어 수는 대상체가 노출된 세포의 최대 수, 검출가능한 세포 또는 특정 수 또는 백분율을 초과하는 세포의 지속기간, 시간 경과에 따른 세포의 수에 대한 곡선하 면적, 및/또는 그의 조합 및 그의 지표의 관점에서 언급될 수 있다. 이러한 결과는 공지된 방법, 예컨대 특정한 샘플, 예를 들어 혈액, 혈청, 혈장 또는 조직, 예컨대 종양 샘플에서 핵산 또는 DNA의 총량과 비교하여 재조합 수용체를 코딩하는 핵산의 카피수를 검출하기 위한 qPCR, 및/또는 일반적으로 수용체에 특이적인 항체를 사용하여 수용체를 발현하는 세포를 검출하는 유동 세포측정 검정을 사용하여 평가될 수 있다. 세포-기반 검정은 또한 기능적 세포, 예컨대 질환 또는 상태의 세포에 결합하고/거나, 그에 대한 반응, 예를 들어 세포독성 반응을 중화 및/또는 유도하거나 또는 수용체에 의해 인식되는 항원을 발현할 수 있는 세포의 수 또는 백분율을 검출하는 데 사용될 수 있다.
일부 측면에서, 세포에 대한 대상체의 증가된 노출은 세포의 증가된 확장을 포함한다. 일부 실시양태에서, 수용체 발현 세포, 예를 들어 CAR-발현 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여 후 및/또는 조합 작용제의 투여 후에 대상체에서 확장된다. 일부 측면에서, 방법은 다른 방법, 예컨대 조합 작용제의 투여의 부재 하에 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여를 수반하는 것과 비교하여 세포의 보다 큰 확장을 발생시킨다.
일부 측면에서, 방법은, 예를 들어 유동 세포측정법에 의해 측정된 바와 같이, 투여된 세포의 높은 생체내 증식을 발생시킨다. 일부 측면에서, 세포의 높은 피크 비율이 검출된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 대상체의 혈액 또는 질환-부위 또는 그의 백혈구 분획, 예를 들어 PBMC 분획 또는 T 세포 분획에서 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 후의 피크 또는 최대 수준에서, 세포의 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90%는 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현한다.
일부 실시양태에서, 방법은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 다른 체액 또는 기관 또는 조직에서 DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 코딩하는 핵산의 적어도 100, 500, 1000, 1500, 2000, 5000, 10,000 또는 15,000 카피, 또는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 총수, 단핵 세포의 총수, T 세포의 총수, 또는 마이크로리터의 총수당 적어도 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 또는 0.9 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포의 최대 농도를 발생시킨다. 일부 실시양태에서, 수용체를 발현하는 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제 후 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36, 48 또는 52주 동안, 또는 이러한 투여 후 1, 2, 3, 4 또는 5년 또는 그 초과 동안 대상체의 혈액 내의 총 PBMC의 적어도 10, 20, 30, 40, 50 또는 60%, 및/또는 이러한 수준으로 검출된다.
일부 측면에서, 방법은, 예를 들어 대상체의 혈청, 혈장, 혈액 또는 조직, 예를 들어 종양 샘플에서 DNA의 마이크로그램당 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 코딩하는 핵산의 카피의 적어도 2-배, 적어도 4-배, 적어도 10-배, 또는 적어도 20-배 증가를 발생시킨다.
일부 실시양태에서, 수용체를 발현하는 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여의 적어도 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 또는 60일 또는 그 초과 후에, 또는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 후 적어도 정확히 또는 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24주 또는 그 초과 동안 조합 작용제의 투여 후에, 예를 들어 명시된 방법, 예컨대 qPCR 또는 유동 세포측정-기반 검출 방법에 의해 대상체의 혈청, 혈장, 혈액 또는 조직, 예를 들어 종양 샘플에서 검출가능하다.
일부 측면에서, 적어도 약 1 x 102, 적어도 약 1 x 103, 적어도 약 1 x 104, 적어도 약 1 x 105, 또는 적어도 약 1 x 106 또는 적어도 약 5 x 106 또는 적어도 약 1 x 107 또는 적어도 약 5 x 107 또는 적어도 약 1 x 108개의 재조합 수용체-발현, 예를 들어 CAR-발현 세포, 및/또는 마이크로리터당 적어도 10, 25, 50, 100, 200, 300, 400, 또는 500, 또는 1000개의 수용체-발현 세포, 예를 들어 마이크로리터당 적어도 10개가 대상체 또는 그의 유체, 혈장, 혈청, 조직, 또는 구획, 예컨대 그의 혈액, 예를 들어 말초 혈액, 또는 질환 부위, 예를 들어 종양에서 검출가능하거나 또는 존재한다. 일부 실시양태에서, 이러한 세포의 수 또는 농도는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여 후 및/또는 조합 작용제의 투여 후 적어도 약 20일, 적어도 약 40일, 또는 적어도 약 60일, 또는 적어도 약 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개월, 또는 적어도 2 또는 3년 동안 대상체에서 검출가능하다. 이러한 세포 수는 유동 세포측정법-기반 또는 정량적 PCR-기반 방법 및 공지된 방법을 사용한 총 세포 수에 대한 외삽에 의해 검출될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Brentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177), Park et al., Molecular Therapy 15(4):825-833 (2007), Savoldo et al., JCI 121(5):1822-1826 (2011), Davila et al., (2013) PLoS ONE 8(4):e61338, Davila et al., Oncoimmunology 1(9):1577-1583 (2012), Lamers, Blood 2011 117:72-82, Jensen et al., Biol Blood Marrow Transplant 2010 September; 16(9): 1245-1256, Brentjens et al., Blood 2011 118(18):4817-4828]을 참조한다.
일부 측면에서, 면역조직화학, PCR, 및/또는 유동 세포측정법에 의해 측정된 바와 같은, 예를 들어 말초 혈액 또는 골수 또는 다른 구획 내의 100개의 세포당 재조합 수용체를 코딩하는 핵산의 카피수, 예를 들어 벡터 카피수는 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포, 및/또는 조합 작용제의 투여 후 적어도 0.01, 적어도 0.1, 적어도 1, 또는 적어도 10, 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 또는 적어도 약 6주, 또는 적어도 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개월 또는 적어도 2 또는 3년이다. 일부 실시양태에서, 게놈 DNA의 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 발현하는 벡터의 카피수는 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 또는 조합 작용제의 투여 후 약 1주, 약 2주, 약 3주 또는 적어도 약 4주 또는 이러한 투여 후 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개월 또는 적어도 2 또는 3년의 시점에 적어도 100, 적어도 1000, 적어도 5000 또는 적어도 10,000 또는 적어도 15,000 또는 적어도 20,000개이다.
일부 측면에서, 세포에 의해 발현된 수용체, 예를 들어 CAR은 세포의 투여 후, 예를 들어 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여의 개시 후 적어도 약 3개월, 적어도 약 6개월, 적어도 약 12개월, 적어도 약 1년, 적어도 약 2년, 적어도 약 3년, 또는 3년 초과인 시점에 대상체, 혈장, 혈청, 혈액, 조직 및/또는 그의 질환 부위, 예를 들어 종양 부위에서 정량적 PCR (qPCR)에 의해 또는 유동 세포측정법에 의해 검출가능하다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 후 시간 경과에 따른 대상체의 유체, 혈장, 혈청, 혈액, 조직, 기관 및/또는 질환 부위, 예를 들어 종양 부위에서의 수용체- (예를 들어, CAR-) 발현 세포의 농도에 대한 곡선하 면적 (AUC)은 대상체가 조합 작용제의 투여의 부재 하에 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포를 투여받는 대안적 투여 요법을 통해 달성되는 것과 비교하여 더 크다.
일부 측면에서, 방법은, 예를 들어 유동 세포측정법에 의해 측정된 바와 같이, 투여된 세포의 높은 생체내 증식을 발생시킨다. 일부 측면에서, 세포의 높은 피크 비율이 검출된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 대상체의 혈액, 혈장, 혈청, 조직 또는 질환 부위 또는 그의 백혈구 분획, 예를 들어 PBMC 분획 또는 T 세포 분획에서 T 세포, 예를 들어 CAR-발현 T 세포 및/또는 조합 작용제 후 피크 또는 최대 수준에서, 세포의 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90%는 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현한다.
일부 측면에서, 조합 작용제와 함께 투여된 대상체에서의 세포 용량의 증가 또는 연장된 확장 및/또는 지속성은 대상체의 종양 관련 결과에서의 이익과 연관된다. 일부 실시양태에서, 종양 관련 결과는 대상체에서 종양 부담의 감소 또는 골수 모구의 감소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 종양 부담은 방법의 투여 후 정확히 또는 적어도 또는 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100퍼센트만큼 감소된다. 일부 실시양태에서, 질환 부담, 종양 크기, 종양 부피, 종양 질량, 및/또는 종양 부하 또는 벌크는 세포의 용량 후에 조합 작용제의 투여를 수반하지 않는 방법으로 치료된 대상체와 비교하여 적어도 또는 약 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과만큼 감소된다.
B. T 세포 기능적 활성
일부 실시양태에서, 스크리닝 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 연관된 파라미터는 T 세포의 활성, 표현형, 증식 또는 기능 중 1종 이상을 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능을 평가하기 위한 관련 기술분야에 공지된 검정 중 임의의 것이 사용될 수 있다. 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 전 및/또는 그에 후속하여, 일부 실시양태에서 조작된 세포 집단의 생물학적 활성은, 예를 들어 다수의 공지된 방법 중 임의의 것에 의해 측정된다. 평가할 파라미터는 생체내에서, 예를 들어 영상화에 의한, 또는 생체외에서, 예를 들어 ELISA 또는 유동 세포측정법에 의한, 항원에 대한 조작된 또는 천연 T 세포 또는 다른 면역 세포의 특이적 결합을 포함한다. 특정 실시양태에서, 표적 세포를 파괴하는 조작된 세포의 능력은 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법, 예컨대 예를 들어 문헌 [Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009), 및 Herman et al., J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)]에 기재된 세포독성 검정을 사용하여 측정될 수 있다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예컨대 재조합-발현 (예를 들어, CAR) T 세포는 T 세포가 소진의 특색을 나타내는지를 평가 또는 결정하기 위해 세포 및/또는 조합 작용제의 투여 전 및/또는 그에 후속하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 소진은 T 세포 기능의 상실, 예컨대 항원-특이적 또는 항원 수용체-구동 활성의 감소 또는 저하, 예컨대 시토카인을 생산하거나 또는 표적 항원에 대한 세포용해 활성을 구동하는 능력의 감소 또는 저하를 모니터링함으로써 평가될 수 있다. 일부 경우에, 소진은 또한 소진 표현형과 연관된 T 세포 (예를 들어, CD4 및/또는 CD4 T 세포) 상의 표면 마커의 발현을 모니터링함으로써 평가될 수 있다. 소진 마커 중에는 억제 수용체, 예컨대 PD-1, CTLA-4, LAG-3 및 TIM-3이 있다.
일부 실시양태에서, 이러한 활성의 감소 또는 저하는 대상체에게의 투여 후 및/또는 항원에 대한 장기간의 노출 후에 시간 경과에 따라 관찰된다.
특정한 실시양태에서, 제공된 방법은 (i) 항원-특이적 또는 항원 수용체-구동 활성의 상기 증가를 달성하고, (ii) 소진 표현형의 상기 개시를 예방, 억제 또는 지연시키고/거나 상기 소진 표현형을 역전시키는 것이다. 일부 실시양태에서, 양, 지속기간 및/또는 빈도는 (i) 항원-특이적 또는 항원 수용체-구동 활성의 상기 증가를 달성하고, (ii) 소진 표현형의 상기 개시를 예방, 억제 또는 지연시키는 데 효과적이다. 다른 실시양태에서, 양, 지속기간 및/또는 빈도는 (i) 항원-특이적 또는 항원 수용체-구동 활성의 상기 증가를 달성하고, (ii) 소진 표현형의 상기 개시를 예방, 억제 또는 지연시키고 상기 소진 표현형을 역전시키는 데 효과적이다.
소진 표현형은, T 세포 또는 T 세포의 집단과 관련하여, 동일한 조건 하의 참조 T 세포 집단과 비교하여 1종 이상의 소진 마커, 임의로 2, 3, 4, 5 또는 6종의 소진 마커의 T 세포 또는 T 세포들 상에서의 표면 발현의 수준 또는 정도, 또는 상기 T 집단 중 그의 표면 발현을 나타내는 T 세포의 백분율의 증가; 또는 동일한 조건 하의 참조 T 세포 집단과 비교하여 항원 또는 항원 수용체-특이적 작용제에 대한 노출 시 상기 T 세포 또는 T 세포의 집단에 의해 나타나는 활성의 수준 또는 정도의 감소를 포함한다. 동일한 조건 하의 참조 T 세포 집단과 비교하여 1종 이상의 소진 마커, 임의로 2, 3, 4, 5 또는 6종의 소진 마커의 T 세포 또는 T 세포들 상에서의 표면 발현의 수준 또는 정도, 또는 상기 T 집단 중 그의 표면 발현을 나타내는 T 세포의 백분율의 증가; 또는 동일한 조건 하의 참조 T 세포 집단과 비교하여 항원 또는 항원 수용체-특이적 작용제에 대한 노출 시 상기 T 세포 또는 T 세포의 집단에 의해 나타나는 활성의 수준 또는 정도의 감소.
특정 실시양태에서, 세포의 생물학적 활성은 1종 이상의 시토카인, 예컨대 CD107a, IFNγ, IL-2, GM-CSF 및 TNFα의 발현 및/또는 분비를 검정함으로써 및/또는 세포용해 활성을 평가함으로써 측정된다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능에 대한 검정은 ELISPOT, ELISA, 세포 증식, 세포독성 림프구 (CTL) 검정, T 세포 에피토프, 항원 또는 리간드에 대한 결합, 또는 세포내 시토카인 염색, 증식 검정, 림포카인 분비 검정, 직접 세포독성 검정, 및 제한 희석 검정을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, T 세포의 증식 반응은, 예를 들어, 3H-티미딘, BrdU (5-브로모-2'-데옥시우리딘) 또는 2'-데옥시-5-에티닐우리딘 (EdU)의 그의 DNA 내로의 혼입, 또는 염료 예컨대 카르복시플루오레세인 디아세테이트 숙신이미딜 에스테르 (CFSE), 셀트레이스 바이올렛, 또는 막 염료 PKH26을 사용한 염료 희석 검정에 의해 측정될 수 있다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능을 평가하는 것은 T 세포로부터 시토카인 생산을 측정하는 것, 및/또는 대상체로부터의 생물학적 샘플, 예를 들어, 혈장, 혈청, 혈액, 및/또는 조직 샘플, 예를 들어, 종양 샘플에서 시토카인 생산을 측정하는 것을 포함한다. 일부 경우에, 이러한 측정된 시토카인은, 비제한적으로, 인터류킨-2 (IL-2), 인터페론-감마 (IFNγ), 인터류킨-4 (IL-4), TNF-알파 (TNFα), 인터류킨-6 (IL-6), 인터류킨-10 (IL-10), 인터류킨-12 (IL-12), 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자 (GM-CSF), CD107a, 및/또는 TGF-베타 (TGFβ)를 포함할 수 있다. 시토카인을 측정하기 위한 검정은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, ELISA, 세포내 시토카인 염색, 세포측정 비드 어레이, RT-PCR, ELISPOT, 유동 세포측정법, 및 관련 시토카인에 반응성인 세포를 시험 샘플의 존재 하에 반응성 (예를 들어, 증식)에 대해 시험하는 생물-검정을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능을 평가하는 것은 세포 표현형, 예를 들어 특정한 세포 표면 마커의 발현을 평가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포는 T 세포 활성화 마커, T 세포 소진 마커 및/또는 T 세포 분화 마커의 발현에 대해 평가된다. 일부 실시양태에서, 세포 표현형은 투여 전에 평가된다. 일부 실시양태에서, 세포 표현형은 투여 후에 평가된다. 평가를 위한 T 세포 활성화 마커, T 세포 소진 마커, 및/또는 T 세포 분화 마커는 T 세포의 특정한 하위세트에 대해 관련 기술분야에 공지된 임의의 마커, 예를 들어 CD25, CD38, 인간 백혈구 항원-DR (HLA-DR), CD69, CD44, CD137, KLRG1, CD62L저, CCR7저, CD71, CD2, CD54, CD58, CD244, CD160, 프로그램화된 세포 사멸 단백질 1 (PD-1), 림프구 활성화 유전자 3 단백질 (LAG-3), T-세포 이뮤노글로불린 도메인 및 뮤신 도메인 단백질 3 (TIM-3), 세포독성 T 림프구 항원-4 (CTLA-4), 밴드 T 림프구 감쇠자 (BTLA) 및/또는 T-세포 이뮤노글로불린 및 면역수용체 티로신-기재 억제 모티프 도메인 (TIGIT)을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Liu et al., Cell Death and Disease (2015) 6, e1792] 참조). 일부 실시양태에서, 소진 마커는 PD-1, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, BTLA, 2B4, CD160, CD39, VISTA 및 TIGIT 중 어느 하나 이상이다. 일부 실시양태에서, 평가된 세포 표면 마커는 CD25, PD-1 및/또는 TIM-3이다. 일부 실시양태에서, 평가된 세포 표면 마커는 CD25이다.
일부 측면에서, 발현 수준을 검출하는 것은 시험관내 검정을 수행하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 시험관내 검정은 면역검정, 압타머-기반 검정, 조직학적 또는 세포학적 검정, 또는 mRNA 발현 수준 검정이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 인자, 이펙터, 효소 및/또는 표면 마커 각각 중 1종 이상에 대한 파라미터 또는 파라미터들은 효소 연결 면역흡착 검정 (ELISA), 이뮤노블롯팅, 면역침전, 방사선면역검정 (RIA), 면역염색, 유동 세포측정 검정, 표면 플라즈몬 공명 (SPR), 화학발광 검정, 측방 유동 면역검정, 억제 검정 또는 결합력 검정에 의해 검출된다. 일부 실시양태에서, 시토카인 및/또는 표면 마커의 검출은 적어도 1종의 바이오마커에 특이적으로 결합하는 결합 시약을 사용하여 결정된다. 일부 경우에, 결합 시약은 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 압타머 또는 핵산 프로브이다.
일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 순환 CAR T 세포의 수준을 증가시킨다.
C. 질환 부담
일부 실시양태에서, 스크리닝 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 연관된 파라미터는 종양 또는 질환 부담을 포함한다. 면역요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포) 및/또는 조합 작용제의 투여는 대상체에서 질환 또는 상태의 확장 또는 부담을 감소시키거나 방지할 수 있다. 예를 들어, 질환 또는 상태가 종양인 경우에, 방법은 일반적으로 종양 크기, 벌크, 전이, 골수 또는 분자적으로 검출가능한 암에서 모구의 백분율을 감소시키고/거나 예후 또는 생존 또는 종양 부담과 연관된 다른 증상을 개선시킨다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은 면역요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포)이 조합 작용제의 투여 없이 제공된 대안적 방법과 비교하여 치료된 대상체에서 감소된 종양 부담을 발생시킨다. 종양 부담은 조합 요법을 제공받는 모든 대상체에서 실제로 감소될 필요는 없지만, 종양 부담은 치료된 대상체에서, 예컨대 임상 데이터에 기초하여 평균적으로 감소되며, 이러한 조합 요법으로 치료된 대부분의 대상체는 감소된 종양 부담을 나타내고, 예컨대 조합 요법으로 치료된 대상체의 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 그 초과가 감소된 종양 부담을 나타낸다.
질환 부담은 대상체에서의 또는 대상체의 기관, 조직 또는 체액, 예컨대 종양, 또는 예를 들어 전이를 나타내는 것일 또 다른 위치의 기관 또는 조직에서의 질환 세포의 총수를 포괄할 수 있다. 예를 들어, 종양 세포는 특정 혈액 악성종양과 관련하여 혈액, 림프 또는 골수에서 검출 및/또는 정량화될 수 있다. 질환 부담은, 일부 실시양태에서, 종양의 질량, 전이의 수 또는 정도 및/또는 골수에 존재하는 모구 세포의 백분율을 포함할 수 있다.
MM의 경우에, 질환 부담의 정도를 평가하기 위한 예시적인 파라미터는 클론 형질 세포의 수 (예를 들어, 골수 생검 상 >10% 또는 다른 조직으로부터의 생검; 형질세포종에서 임의의 양), 혈청 또는 뇨 중 모노클로날 단백질 (파라단백질)의 존재, 형질 세포 장애와 관련된 것으로 느껴지는 말단-기관 손상의 증거 (예를 들어, 고칼슘혈증 (보정된 칼슘 >2.75 mmol/l); 골수종에 기인하는 신기능부전; 빈혈 (헤모글로빈 <10 g/dl); 및/또는 골 병변 (용해 병변 또는 압박 골절 동반 골다공증))와 같은 파라미터를 포함한다.
질환 상태 또는 질환 부담을 평가하기 위한 예시적인 방법은 전기영동 및 면역고정에 의한 생물학적 유체, 예컨대 혈액 및/또는 뇨 중 M 단백질의 측정; 혈액 중 sFLC (κ 및 λ)의 정량화; 골격 조사; 및 골수외 질환을 갖는 대상체에서의 양전자 방출 단층촬영 (PET)/컴퓨터 단층촬영 (CT)에 의한 영상화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환 상태는 골수 검사에 의해 평가될 수 있다. 일부 예에서, 대상체에게 투여된 후 T 세포 요법의 효능은 혈액 및/또는 골수에서의 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포)의 확장 및 지속성에 의해 결정된다. 일부 실시양태에서, T 세포 요법의 효능은 투여된 세포 (예를 들어, CAR-발현 세포)의 항종양 활성에 기초하여 결정된다. 일부 실시양태에서, 항종양 활성은 전체 반응률 (ORR) 및/또는 국제 골수종 연구 그룹 (IMWG) 균일 반응 기준에 의해 결정된다 (문헌 [Kumar et al., (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346] 참조). 일부 실시양태에서, 반응은 최소 잔류 질환 (MRD) 평가를 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, MRD는 유동 세포측정법 및 고처리량 서열분석, 예를 들어 심층 서열분석과 같은 방법에 의해 평가될 수 있다. 일부 측면에서, MRD-음성 질환을 갖는 대상체는 105개의 유핵 세포 중 1 이상의 최소 민감도 (즉, 10-5 민감도)를 갖는 검정, 예컨대 유동 세포측정법 (차세대 유동 세포측정법; NGF) 또는 고처리량 서열분석, 예를 들어, 심층 서열분석 또는 차세대 서열분석 (NGS)에 의해 배제되는, 골수 흡인물 상 이상 클론 형질 세포의 부재를 나타내는 대상체를 포함한다.
일부 측면에서, 지속적인 MRD-음성은 골수에서 MRD 음성 (NGF 또는 NGS, 또는 둘 다)을 나타내고 하기 정의된 바와 같은 영상화에 의해 최소 1년 간격으로 확인된 대상체를 포함한다. 음성의 지속기간 (예를 들어, 5년째 MRD-음성)을 추가로 명시하기 위해 후속 평가가 사용될 수 있다. 일부 측면에서, 유동 MRD-음성은 105개의 유핵 세포 중 1 이상의 최소 민감도로 다발성 골수종에서의 MRD 검출을 위한 유로플로우(EuroFlow) 표준 작업 절차 (또는 검증된 등가 방법)를 사용하여 골수 흡인물 상 NGF에 의한 표현형적 이상 클론 형질 세포의 부재를 나타내는 대상체를 포함한다. 일부 측면에서, 서열분석 MRD-음성은 골수 흡인물 상 NGS에 의한 클론 형질 세포의 부재를 나타내는 대상체를 포함하며, 여기서 클론의 존재는 105개의 유핵 세포 중 1 이상의 최소 민감도로 림포사이트(LymphoSIGHT) 플랫폼 (또는 검증된 등가 방법)을 사용하여 골수 흡인물의 DNA 서열분석 후 수득된 2개 미만의 동일한 서열분석 판독물로서 정의된다. 일부 측면에서, 영상화 플러스 MRD-음성은 NGF 또는 NGS 플러스 기준선에서 또는 선행 PET/CT에서 관찰된 증가된 추적자 흡수의 모든 면적의 소멸 또는 보다 적은 종격 혈액 풀 SUV로의 감소 또는 주위 정상 조직의 것보다 더 낮은 감소에 의해 평가된 바와 같은 MRD 음성을 나타내는 대상체를 포함한다 (문헌 [Kumar et al., (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346] 참조).
일부 측면에서, 대상체의 생존, 특정 기간 내의 생존, 생존의 정도, 무사건 또는 무증상 생존의 존재 또는 지속기간, 또는 무재발 생존이 평가된다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태의 임의의 증상이 평가된다. 일부 실시양태에서, 종양 부담의 측정치가 명시된다. 일부 실시양태에서, 결정을 위한 예시적인 파라미터는 종양의 호전 또는 개선을 나타내는 특정한 임상 결과를 포함한다. 이러한 파라미터는 객관적 반응 (OR), 완전 반응 (CR), 엄격한 완전 반응 (sCR), 매우 우수한 부분 반응 (VGPR), 부분 반응 (PR), 최소 반응 (MR), 안정 질환 (SD), 진행성 질환 (PD) 또는 재발 (예를 들어, 국제 골수종 연구 그룹 (IMWG) 균일 반응 기준 참조; 문헌 [Kumar et al., (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346] 참조), 객관적 반응률 (ORR), 무진행 생존 (PFS) 및 전체 생존 (OS)을 포함한 질환 제어의 지속기간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 반응은 최소 잔류 질환 (MRD) 평가를 사용하여 평가된다. 파라미터에 대한 특정 역치는 본원에 제공된 방법의 효능을 결정하기 위해 설정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료될 질환 또는 장애는 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, 다발성 골수종에 대한 측정가능한 질환 기준은 (1) 혈청 M-단백질 1 g/dL 이상; (2) 뇨 M-단백질 200 mg 이상/24시간; (3) 수반되는 무혈청 경쇄 (sFLC) 수준 10 mg/dL 이상, 비정상적 κ 대 λ 비를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 경쇄 질환은 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 대상체에 대해서만 허용된다.
일부 실시양태에서, 반응은 T 세포 요법, 예를 들어 CAR-발현 T 세포의 투여 후 반응 지속기간에 기초하여 평가된다. 일부 측면에서, 예를 들어 제공된 실시양태에 따른 요법에 대한 반응은 세포 요법의 투여의 개시 후 지정된 시점에 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 1, 2, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30 또는 36개월 후, 또는 상기 중 임의의 것에 의해 규정된 범위 내이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 48 또는 52주 개월 후, 또는 상기 중 임의의 것에 의해 규정된 범위 내이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 1개월 후이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 3개월 후이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 6개월 후이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 9개월 후이다. 일부 실시양태에서, 지정된 시점은 투여의 개시의 정확히 또는 약 12개월 후이다.
일부 실시양태에서, 지정된 시점으로부터 정확히 또는 약 3, 6, 9 또는 12개월 후에 결정된 반응 또는 결과는 초기 지정된 시점에 결정된 반응 또는 결과와 동등하거나 또는 그와 비교하여 개선된다. 예를 들어, 일부 측면에서, 초기 지정된 시점에 결정된 반응 또는 결과가 안정 질환 (SD), 진행성 질환 (PD) 또는 재발인 경우에, 제공된 실시양태에 따라 치료된 대상체는 후속 시점에, 초기 지정된 시점 후 정확히 또는 약 3, 6, 9 또는 12개월 후에, 초기 지정된 시점의 반응 또는 결과와 동등하거나, 또는 객관적 반응 (OR), 완전 반응 (CR), 엄격한 완전 반응 (sCR), 매우 우수한 부분 반응 (VGPR) 또는 부분 반응 (PR)인 반응 또는 결과인, 동등하거나 개선된 반응 또는 결과를 나타낼 수 있다 (예를 들어, 국제 골수종 연구 그룹 (IMWG) 균일 반응 기준에 따라 보다 양호한 반응 결과를 나타냄; 문헌 [Kumar et al., (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346] 참조). 일부 측면에서, 제공된 실시양태에 따라 치료된 대상체는 2개의 결정 시점 사이에 개선된 반응 또는 결과를 나타낼 수 있다. 일부 측면에서, 대상체는 평가를 위한 초기 지정된 시점에, 예를 들어 투여의 개시 후 4주에 PR 또는 VGPR을 나타낼 수 있고, 이어서 이후 시점에, 예를 들어 투여의 개시 후 12주에 개선된 반응, 예컨대 CR 또는 sCR을 나타낼 수 있다. 일부 측면에서, 무진행 생존 (PFS)은 대상체가 질환을 가지고 생존하지만 악화되지 않는, 질환, 예컨대 암의 치료 동안 및 그 후의 시간의 길이로서 기재된다. 일부 측면에서, 객관적 반응 (OR)은 측정가능한 반응으로서 기재된다. 일부 측면에서, 객관적 반응률 (ORR; 또한 일부 경우에 전체 반응률로도 공지됨)은 CR 또는 PR을 달성한 환자의 비율로서 기재된다. 일부 측면에서, 전체 생존 (OS)은 질환, 예컨대 암에 대한 진단일 또는 치료 시작일로부터 질환으로 진단된 대상체가 여전히 살아있는 시간의 길이로서 기재된다. 일부 측면에서, 무사건 생존 (EFS)은 암에 대한 치료가 종료된 후 대상체가 특정 합병증 또는 예방 또는 지연을 위해 치료가 의도되는 사건 없이 유지되는 시간의 길이로서 기재된다. 이들 사건은 암의 복귀 또는 특정 증상, 예컨대 골로 확산된 암으로 인한 골통의 발생, 또는 사망을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 반응 지속기간 (DOR)의 측정치는 종양 반응의 문서화로부터 질환 진행까지의 시간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 반응을 평가하기 위한 파라미터는 지속적인 반응, 예를 들어 요법의 개시로부터 일정 기간 후에 지속되는 반응을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 지속적인 반응은 요법의 개시의 대략 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18 또는 24개월 후에 반응률로 표시된다. 일부 실시양태에서, 반응 또는 결과는 정확히 또는 약 3, 6, 9 또는 12개월 초과 동안 지속된다.
일부 실시양태에서, 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태 지표는 치료를 위한 대상체, 예를 들어 선행 요법으로부터 불량한 수행을 갖는 대상체를 평가하거나 선택하는 데 사용될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Oken et al., (1982) Am J Clin Oncol. 5:649-655] 참조). 수행 상태의 ECOG 척도는 스스로를 돌보는 능력, 일상 활동, 및 신체 능력 (예를 들어, 보행, 작업 등)의 관점에서 환자의 기능 수준을 기재한다. 일부 실시양태에서, ECOG 수행 상태 0은 대상체가 정상 활동을 수행할 수 있음을 나타낸다. 일부 측면에서, ECOG 수행 상태가 1인 대상체는 신체 활동에서 일부 제한을 나타내지만, 대상체는 완전히 보행가능하다. 일부 측면에서, ECOG 수행 상태가 2인 환자는 50% 초과로 보행가능하다. 일부 경우에, ECOG 수행 상태가 2인 대상체는 또한 자기 관리가 가능할 수 있고; 예를 들어, 문헌 [Sφrensen et al., (1993) Br J Cancer 67(4) 773-775]을 참조한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법 또는 치료 요법에 따라 투여될 대상체는 ECOG 수행 상태가 0 또는 1인 대상체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 면역요법, 예컨대 T 세포 요법 (예를 들어, CAR-발현 T 세포) 및/또는 조합 작용제의 방법 및/또는 투여는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및/또는 조합 작용제의 투여 직전의 시점에서의 질환 부담과 비교하여 질환 부담을 감소시킨다.
일부 측면에서, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및/또는 조합 작용제의 투여는 질환 부담의 증가를 예방할 수 있고, 이는 질환 부담의 변화가 없는 것에 의해 입증될 수 있다.
일부 실시양태에서, 이러한 방법은 대상체가 조합 작용제의 투여의 부재 하에 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 단독을 제공받는 요법과 같은 대안적 요법을 사용한 대등한 방법에 의해 관찰될 감소와 비교하여, 질환 또는 상태의 부담, 예를 들어, 종양 세포의 수, 종양의 크기, 환자 생존 또는 무사건 생존의 지속기간을 더 큰 정도로 감소시키고/거나 더 긴 기간 동안 이어지게 한다. 일부 실시양태에서, 질환 부담은 각각의 작용제 단독을 투여하는 것, 예를 들어, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법을 제공받지 않은 대상체에게 조합 작용제를 투여하는 것; 또는 조합 작용제를 제공받지 않은 대상체에게 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법을 투여하는 것에 의해 이루어질 감소와 비교하여 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 조합 작용제의 투여의 조합 요법 후에 더 큰 정도로 또는 더 긴 지속기간 동안 감소된다.
일부 실시양태에서, 대상체에서 질환 또는 상태의 부담이 검출, 평가 또는 측정된다. 질환 부담은 일부 측면에서 대상체에서, 또는 대상체의 기관, 조직 또는 체액, 예컨대 혈액 또는 혈청에서 질환 또는 질환-연관 세포, 예를 들어 종양 세포의 총수를 검출함으로써 검출될 수 있다. 일부 실시양태에서, 질환 부담, 예를 들어 종양 부담은 고형 종양의 질량 및/또는 전이의 수 또는 정도를 측정함으로써 평가된다. 일부 측면에서, 대상체의 생존, 특정 기간 내의 생존, 생존의 정도, 무사건 또는 무증상 생존의 존재 또는 지속기간, 또는 무재발 생존이 평가된다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태의 임의의 증상이 평가된다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태 부담의 측정치가 명시된다. 일부 실시양태에서, 결정을 위한 예시적인 파라미터는 질환 또는 상태, 예를 들어 종양의 호전 또는 개선을 나타내는 특정한 임상 결과를 포함한다. 이러한 파라미터는 완전 반응 (CR), 부분 반응 (PR) 또는 안정 질환 (SD) (예를 들어, 고형 종양의 반응 평가 기준 (RECIST) 가이드라인 참조), 객관적 반응률 (ORR), 무진행 생존 (PFS) 및 전체 생존 (OS)을 포함한 질환 제어의 지속기간을 포함한다. 파라미터에 대한 특정 역치는 본원에 제공된 조합 요법의 방법의 효능을 결정하기 위해 설정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체는 보다 지속적인 반응을 달성한다. 일부 경우에, 반응 지속기간 (DOR)의 측정치는 종양 반응의 문서화로부터 질환 진행까지의 시간을 포함한다. 일부 실시양태에서, 반응을 평가하기 위한 파라미터는 지속적인 반응, 예를 들어 요법의 개시로부터 일정 기간 후에 지속되는 반응을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 지속적인 반응은 요법의 개시의 대략 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18 또는 24개월 후에 반응률로 표시된다. 일부 실시양태에서, 반응은 3개월 초과, 6개월 초과, 또는 12개월 초과 동안 지속된다. 일부 특정한 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체는 유전자 조작된 세포의 투여에 반응한 완화 후에 대상체가 이전에 재발한 후 보다 지속적인 반응을 달성한다.
일부 측면에서, 질환 부담은 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 전, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후 그러나 조합 작용제의 투여 전, 조합 작용제의 투여 후 그러나 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 전, 및/또는 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 조합 작용제 둘 다의 투여 후에 측정 또는 검출된다. 조합 요법의 1개 이상의 단계의 다중 투여와 관련하여, 일부 실시양태에서 질환 부담은 단계, 용량 및/또는 투여 주기 중 임의의 것의 투여 전 또는 후에, 또는 단계, 용량 및/또는 투여 주기 중 임의의 것의 투여 사이의 시점에 측정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 부담은, 조합 작용제 및 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 직전과 비교하여, 제공된 방법에 의해 정확히 또는 적어도 정확히 또는 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 또는 100 퍼센트만큼 감소된다. 일부 실시양태에서, 질환 부담, 종양 크기, 종양 부피, 종양 질량, 및/또는 종양 부하 또는 벌크는, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및/또는 조합 작용제의 투여 직전과 비교하여, 면역요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 조합 작용제의 투여 후에 적어도 정확히 또는 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% 또는 그 초과만큼 감소된다.
일부 실시양태에서, 방법에 의한 질환 부담의 감소는 조합 요법의 투여, 예를 들어 그의 개시의 예를 들어 1개월, 2개월, 3개월, 또는 3개월 초과 후에 평가된 바와 같은, 형태학적 완전 완화의 유도를 포함한다.
일부 측면에서, 예를 들어 다중파라미터 유동 세포측정법에 의해 측정된 바와 같은 최소 잔류 질환에 대한 검정은 음성이거나, 또는 최소 잔류 질환의 수준은 약 0.3% 미만, 약 0.2% 미만, 약 0.1% 미만, 또는 약 0.05% 미만이다.
일부 실시양태에서, 대상체의 무사건 생존율 또는 전체 생존율은 다른 방법과 비교하여 본 방법에 의해 개선된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 조합 요법의 방법 후 6개월째에, 방법에 의해 치료된 대상체에 대한 무사건 생존율 또는 확률은 약 40% 초과, 약 50% 초과, 약 60% 초과, 약 70% 초과, 약 80% 초과, 약 90% 초과, 또는 약 95% 초과이다. 일부 측면에서, 전체 생존율은 약 40% 초과, 약 50% 초과, 약 60% 초과, 약 70% 초과, 약 80% 초과, 약 90% 초과, 또는 약 95% 초과이다. 일부 실시양태에서, 방법으로 치료된 대상체는 적어도 6개월, 또는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10년의 무사건 생존, 무재발 생존 또는 생존을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 진행까지의 시간은 개선되며, 예컨대 진행까지의 시간은 정확히 또는 약 6개월 초과, 또는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10년이다.
일부 실시양태에서, 방법에 의한 치료 후에, 재발 확률은 다른 방법과 비교하여 감소된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 조합 요법의 방법 후 6개월째의 재발 확률은 약 80% 미만, 약 70% 미만, 약 60% 미만, 약 50% 미만, 약 40% 미만, 약 30% 미만, 약 20% 미만 또는 약 10% 미만이다.
일부 실시양태에서, 투여는 대상체가 또 다른 요법에 대해 저항성이 되었음에도 불구하고 대상체를 치료할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 실시양태에 따라 대상체에게 투여되는 경우에, 용량 또는 조성물은 투여된 대상체의 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 적어도 95%에서 객관적 반응 (OR)을 달성할 수 있다. 일부 실시양태에서, OR은 엄격한 완전 반응 (sCR), 완전 반응 (CR), 매우 우수한 부분 반응 (VGPR), 부분 반응 (PR) 및 최소 반응 (MR)을 달성한 대상체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 실시양태에 따라 대상체에게 투여되는 경우에, 용량 또는 조성물은 투여된 대상체의 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 85%에서 엄격한 완전 반응 (sCR), 완전 반응 (CR), 매우 우수한 부분 반응 (VGPR) 또는 부분 반응 (PR)을 달성할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 실시양태에 따라 대상체에게 투여되는 경우에, 용량 또는 조성물은 투여된 대상체의 적어도 20%, 30%, 40%, 50%, 60% 또는 70%에서 엄격한 완전 반응 (sCR) 또는 완전 반응 (CR)을 달성할 수 있다. 일부 실시양태에서, 예시적인 용량은 약 1.0 x 107, 1.5 x 107, 2.0 x 107, 2.5 x 107, 5.0 x 107, 1.5 x 108, 3.0 x 108, 4.5x 108, 6.0 x 108 또는 8.0 x 108개의 CAR-발현 (CAR+) T 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예시적인 용량은 약 5.0 x 107, 1.5 x 108, 3.0 x 108, 4.5x 108, 6.0 x 108 또는 8.0 x 108개의 CAR-발현 (CAR+) T 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 예시적인 용량은 약 5.0 x 107, 1.5 x 108, 3.0 x 108 또는 4.5 x 108개의 CAR-발현 (CAR+) T 세포를 포함한다. 일부 측면에서, 예를 들어 본원에 제공된 방법에 따른 치료에 대한 특정한 반응은 국제 골수종 연구 그룹 (IMWG) 균일 반응 기준에 기초하여 평가될 수 있다 (문헌 [Kumar et al., (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346] 참조).
IV. 독성 및 유해 결과
제공된 방법의 실시양태에서, 대상체는 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법) 및 조합 작용제를 포함하는 제공된 조합 요법을 투여받은 대상체에서 독성 또는 다른 유해 결과, 예컨대 치료 관련 결과, 예를 들어 호중구감소증, 시토카인 방출 증후군 (CRS) 또는 신경독성 (NT)의 발생에 대해 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 독성 결과 또는 증상, 독성-촉진 프로파일, 인자 또는 특성, 예컨대 중증 호중구감소증, 중증 시토카인 방출 증후군 (CRS) 또는 중증 신경독성과 연관되거나 또는 이를 나타내는 증상 또는 결과의 위험을 감소시키기 위해 수행된다.
일부 실시양태에서, 방법은 특정 혈액학적 독성, 예컨대 호중구감소증 또는 혈소판감소증을 발생시키지 않거나 또는 그의 위험을 증가시키지 않는다. 일부 실시양태에서, 대상체의 50% 이하는 등급 3보다 높은 호중구감소증, 예컨대 연장된 등급 3 호중구감소증 또는 등급 4 호중구감소증, 및/또는 등급 3보다 높은 혈소판감소증, 예컨대 등급 3 또는 등급 4 혈소판감소증을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체의 적어도 50% (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 등급 3 또는 등급 3보다 높은 중증 호중구감소증 또는 중증 혈소판감소증을 나타내지 않는다.
일부 실시양태에서, 제공된 방법은, 예컨대 특정의 다른 세포 요법과 비교하여, 독성 또는 독성 결과의 높은 비율 또는 가능성을 발생시키지 않거나, 또는 독성 또는 독성 결과, 예컨대 중증 신경독성 (NT) 또는 중증 시토카인 방출 증후군 (CRS)의 비율 또는 가능성을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 방법은 중증 NT (sNT), 중증 CRS (sCRS), 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 3일 이상 동안 적어도 정확히 또는 약 38℃의 발열 및 적어도 정확히 또는 약 20 mg/dL의 CRP 혈장 수준을 유발하지 않거나, 또는 그의 위험을 증가시키지 않는다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따라 치료된 대상체의 정확히 또는 약 30%, 35%, 40%, 50%, 55%, 60% 초과 또는 그 초과는 어떠한 등급의 CRS 또는 어떠한 등급의 신경독성도 나타내지 않는다. 일부 실시양태에서, 치료된 대상체의 50% 이하 (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 등급 2보다 높은 시토카인 방출 증후군 (CRS) 및/또는 등급 2보다 높은 신경독성을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 방법에 따라 치료된 대상체의 적어도 50% (예를 들어, 치료된 대상체의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)는 중증 독성 결과 (예를 들어, 중증 CRS 또는 중증 신경독성)를 나타내지 않고, 예컨대 등급 3 이상의 신경독성을 나타내지 않고/거나 중증 CRS를 나타내지 않거나, 또는 치료 후 특정 기간 내에, 예컨대 세포의 투여의 1주, 2주 또는 1개월 내에 나타내지 않는다.
A. 시토카인 방출 증후군 (CRS) 및 신경독성
일부 측면에서, 대상체는 시토카인 방출 증후군 (CRS) 또는 중증 CRS (sCRS)이거나 또는 이와 연관되거나 또는 이를 나타내는 독성 결과에 대해 모니터링되고/거나 방법은 그에 대한 위험을 감소시킨다. CRS, 예를 들어 sCRS는 일부 경우에 입양 T 세포 요법 및 다른 생물학적 산물을 대상체에게 투여한 후에 발생할 수 있다. 문헌 [Davila et al., Sci Transl Med 6, 224ra25 (2014); Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 5, 177ra38 (2013); Grupp et al., N. Engl. J. Med. 368, 1509-1518 (2013); 및 Kochenderfer et al., Blood 119, 2709-2720 (2012); Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78]을 참조한다.
전형적으로, CRS는 예를 들어 T 세포, B 세포, NK 세포, 단핵구 및/또는 대식세포에 의해 매개되는 과도한 전신 면역 반응에 의해 유발된다. 이러한 세포는 다량의 염증 매개체, 예컨대 시토카인 및 케모카인을 방출할 수 있다. 시토카인은 급성 염증 반응을 촉발하고/거나 내피 기관 손상을 유도할 수 있으며, 이는 미세혈관 누출, 심부전 또는 사망을 유발할 수 있다. 중증의 생명을 위협하는 CRS는 폐 침윤 및 폐 손상, 신부전 또는 파종성 혈관내 응고로 이어질 수 있다. 다른 중증의 생명을 위협하는 독성은 심장 독성, 호흡 곤란, 신경계 독성 및/또는 간부전을 포함할 수 있다. CRS는 항염증 요법 예컨대 항-IL-6 요법, 예를 들어, 항-IL-6 항체, 예를 들어, 토실리주맙, 또는 항생제 또는 기재된 바와 같은 다른 작용제를 사용하여 치료될 수 있다.
CRS의 결과, 징후 및 증상은 공지되어 있고, 본원에 기재된 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 특정한 투여 요법 또는 투여가 주어진 CRS-연관 결과, 징후 또는 증상에 영향을 미치거나 또는 영향을 미치지 않는 경우에, 특정한 결과, 징후 및 증상 및/또는 그의 양 또는 정도가 명시될 수 있다.
CAR-발현 세포를 투여하는 것과 관련하여, CRS는 전형적으로 CAR을 발현하는 세포의 주입 6-20일 후에 발생한다. 문헌 [Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78]을 참조한다. 일부 경우에, CRS는 CAR T 세포 주입 후 6일 미만 또는 20일 초과에 발생한다. CRS의 발생률 및 시기는 주입 시점의 기준선 시토카인 수준 또는 종양 부담과 관련될 수 있다. 통상적으로, CRS는 인터페론 (IFN)-γ, 종양 괴사 인자 (TNF)-α 및/또는 인터류킨 (IL)-2의 상승된 혈청 수준을 수반한다. CRS에서 신속하게 유도될 수 있는 다른 시토카인은 IL-1β, IL-6, IL-8 및 IL-10이다.
CRS와 연관된 예시적인 결과는 발열, 경직, 오한, 저혈압, 호흡곤란, 급성 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 뇌병증, ALT/AST 상승, 신부전, 심장 장애, 저산소증, 신경계 장애 및 사망을 포함한다. 신경계 합병증은 섬망, 발작-유사 활동, 혼란, 단어-발견 곤란, 실어증, 및/또는 둔감화를 포함한다. 다른 CRS-관련 결과는 피로, 오심, 두통, 발작, 빈맥, 근육통, 발진, 급성 혈관 누출 증후군, 간 기능 장애 및 신부전을 포함한다. 일부 측면에서, CRS는 혈청-페리틴, d-이량체, 아미노트랜스퍼라제, 락테이트 데히드로게나제 및 트리글리세리드와 같은 1종 이상의 인자의 증가, 또는 저섬유소원혈증 또는 간비장비대와 연관된다.
일부 실시양태에서, CRS와 연관된 결과는 하기 중 1종 이상을 포함한다: 지속적 발열, 예를 들어 2일 이상, 예를 들어 3일 이상, 예를 들어 4일 이상 동안 또는 적어도 연속 3일 동안 예를 들어 정확히 또는 약 38℃ 초과의 명시된 체온의 발열; 정확히 또는 약 38℃ 초과의 발열; 적어도 2종의 시토카인 (예를 들어, 인터페론 감마 (IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈카인, 및 IL-5, 및/또는 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)로 이루어진 군 중 적어도 2종)의 치료전 수준과 비교하여, 예를 들어 적어도 또는 약 75의 최대 배수 변화, 또는 이러한 시토카인 중 적어도 1종의, 예를 들어 적어도 또는 약 250의 최대 배수 변화와 같은 시토카인의 상승; 및/또는 독성의 적어도 1종의 임상 징후, 예컨대 저혈압 (예를 들어, 적어도 1종의 정맥내 혈관활성 승압제에 의해 측정된 바와 같음); 저산소증 (예를 들어, 정확히 또는 약 90% 미만의 혈장 산소 (PO2) 수준); 및/또는 1종 이상의 신경계 장애 (정신 상태 변화, 둔감 및 발작 포함).
예시적인 CRS-관련 결과는 시토카인 및 케모카인 및 CRS와 연관된 다른 인자를 비롯한 1종 이상의 인자의 증가된 또는 높은 혈청 수준을 포함한다. 예시적인 결과는 이러한 인자 중 1종 이상의 합성 또는 분비의 증가를 추가로 포함한다. 이러한 합성 또는 분비는 T 세포 또는 T 세포와 상호작용하는 세포, 예컨대 선천성 면역 세포 또는 B 세포에 의한 것일 수 있다.
일부 실시양태에서, CRS-연관 혈청 인자 또는 CRS-관련 결과는 염증성 시토카인 및/또는 케모카인, 예컨대 인터페론 감마 (IFN-γ), TNF-a, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, sIL-2Ra, 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF), 대식세포 염증성 단백질 (MIP)-1, 종양 괴사 인자 알파 (TNFα), IL-6, 및 IL-10, IL-1β, IL-8, IL-2, MIP-1, Flt-3L, 프랙탈카인, 및/또는 IL-5를 포함한다. 일부 실시양태에서, 인자 또는 결과는 C 반응성 단백질 (CRP)을 포함한다. CRS에 대한 초기의, 용이하게 측정가능한 위험 인자인 것에 더하여, CRP는 또한 세포 확장에 대한 마커이다. 일부 실시양태에서, 높은 수준의 CRP, 예컨대 ≥ 15 mg/dL을 갖는 것으로 측정된 대상체는 CRS를 갖는다. 일부 실시양태에서, 높은 수준의 CRP를 갖는 것으로 측정된 대상체는 CRS를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, CRS의 측정치는 CRP의 측정치 및 CRS를 나타내는 또 다른 인자를 포함한다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 염증성 시토카인 또는 케모카인은 CAR 치료 및/또는 조합 작용제로의 치료 전, 그 동안 또는 그 후에 모니터링된다. 일부 측면에서, 1종 이상의 시토카인 또는 케모카인은 IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-1β, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, sIL-2Rα, 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF), 또는 대식세포 염증성 단백질 (MIP)을 포함한다. 일부 실시양태에서, IFN-γ, TNF-α 및 IL-6이 모니터링된다.
어떤 환자가 sCRS 발생 위험이 있을 가능성이 더 큰지 예측하기 위해 CRS의 발병과 상관관계가 있는 것으로 보이는 CRS 기준이 개발되었다 (문헌 [Davilla et al., Science translational medicine. 2014;6(224):224ra25] 참조). 인자는 발열, 저산소증, 저혈압, 신경계 변화, 염증성 시토카인, 예컨대 치료-유도된 상승이 치료전 종양 부담 및 sCRS 증상 둘 다와 잘 상관될 수 있는 7종의 시토카인 세트 (IFNγ, IL-5, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈카인 및 GM-CSF)의 상승된 혈청 수준을 포함한다. CRS의 진단 및 관리에 대한 다른 가이드라인이 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Lee et al., Blood. 2014;124(2):188-95] 참조). 일부 실시양태에서, CRS 등급을 반영하는 기준은 하기 표 2에 상술된 것이다.
일부 실시양태에서, 투여 후에 대상체가 (1) 적어도 3일 동안 적어도 38℃의 발열; (2) (a) 투여 직후의 수준과 비교하여 하기 7종의 시토카인 군: 인터페론 감마 (IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈카인, 및 IL-5 중 적어도 2종에 대해 적어도 75의 최대 배수 변화 및/또는 (b) 투여 직후의 수준과 비교하여 하기 7종의 시토카인 군: 인터페론 감마 (IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈카인, 및 IL-5 중 적어도 1종에 대해 적어도 250의 최대 배수 변화를 포함하는 시토카인 상승; 및 (c) 독성의 적어도 1종의 임상 징후, 예컨대 저혈압 (적어도 1종의 정맥내 혈관활성 승압제를 필요로 함) 또는 저산소증 (PO2 < 90%) 또는 1종 이상의 신경계 장애(들) (정신 상태 변화, 둔감, 및/또는 발작 포함)를 나타내는 경우에, 대상체는 세포 요법 또는 그의 세포의 용량의 투여에 반응하여 또는 그에 속발하여 "중증 CRS" ("sCRS")가 발생한 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 중증 CRS는 표 2에 제시된 바와 같은 3 이상의 등급을 갖는 CRS를 포함한다.
일부 실시양태에서, 중증 CRS 또는 등급 3 이상의 CRS, 예컨대 등급 4 이상과 연관된 결과는 하기 중 1종 이상을 포함한다: 지속적 발열, 예를 들어 2일 이상, 예를 들어 3일 이상, 예를 들어 4일 이상 동안 또는 적어도 연속 3일 동안 예를 들어 정확히 또는 약 38℃ 초과의 명시된 체온의 발열; 정확히 또는 약 38℃ 초과의 발열; 적어도 2종의 시토카인 (예를 들어, 인터페론 감마 (IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈카인, 및 IL-5, 및/또는 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)로 이루어진 군 중 적어도 2종)의 치료전 수준과 비교하여, 예를 들어 적어도 또는 약 75의 최대 배수 변화, 또는 이러한 시토카인 중 적어도 1종의, 예를 들어 적어도 또는 약 250의 최대 배수 변화와 같은 시토카인의 상승; 및/또는 독성의 적어도 1종의 임상 징후, 예컨대 저혈압 (예를 들어, 적어도 1종의 정맥내 혈관활성 승압제에 의해 측정된 바와 같음); 저산소증 (예를 들어, 정확히 또는 약 90% 미만의 혈장 산소 (PO2) 수준); 및/또는 1종 이상의 신경계 장애 (정신 상태 변화, 둔감 및 발작 포함). 일부 실시양태에서, 중증 CRS는 집중 치료실 (ICU)에서의 관리 또는 치유를 필요로 하는 CRS를 포함한다.
일부 실시양태에서, CRS, 예컨대 중증 CRS는 (1) 지속적 발열 (적어도 3일 동안 적어도 38℃의 발열) 및 (2) 적어도 정확히 또는 약 20 mg/dL의 CRP의 혈청 수준의 조합을 포괄한다. 일부 실시양태에서, CRS는 2종 이상의 혈관수축제의 사용을 필요로 하는 저혈압 또는 기계적 환기를 필요로 하는 호흡 부전을 포괄한다. 일부 실시양태에서, 혈관수축제의 투여량은 제2 또는 후속 투여에서 증가된다.
일부 실시양태에서, 중증 CRS 또는 등급 3 CRS는 알라닌 아미노트랜스퍼라제의 증가, 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제의 증가, 오한, 열성 호중구감소증, 두통, 좌심실 기능장애, 뇌병증, 수두증 및/또는 진전을 포괄한다.
다양한 결과를 측정 또는 검출하는 방법이 명시될 수 있다.
일부 측면에서, 요법, 예컨대 세포 요법의 독성 결과는 신경독성 또는 중증 신경독성이거나 또는 그와 연관되거나 또는 그를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 신경독성의 임상 위험과 연관된 증상은 혼란, 섬망, 표현 실어증, 둔감, 근간대성경련, 기면, 변경된 정신 상태, 경련, 발작-유사 활동, 발작 (임의로 뇌파도 [EEG]에 의해 확인된 바와 같음), 상승된 수준의 베타 아밀로이드 (Aβ), 상승된 수준의 글루타메이트, 및 상승된 수준의 산소 라디칼을 포함한다. 일부 실시양태에서, 신경독성은 중증도에 기초하여 (예를 들어, 등급 1-5 척도를 사용하여) 등급화된다 (예를 들어, 문헌 [Guido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010); National Cancer Institute-Common Toxicity Criteria version 4.03 (NCI-CTCAE v4.03] 참조).
일부 경우에, 신경계 증상은 sCRS의 가장 초기 증상일 수 있다. 일부 실시양태에서, 신경계 증상은 세포 요법 주입의 5 내지 7일 후에 시작되는 것으로 보인다. 일부 실시양태에서, 신경계 변화의 지속기간은 3 내지 19일의 범위일 수 있다. 일부 경우에, 신경계 변화의 회복은 sCRS의 다른 증상이 해소된 후에 발생한다. 일부 실시양태에서, 신경계 변화의 해소 시간 또는 정도는 항-IL-6 및/또는 스테로이드(들)를 사용한 치료에 의해 촉진되지 않는다.
일부 실시양태에서, 투여 후에 대상체가 1) 말초 운동 신경의 염증 또는 변성을 포함한 말초 운동 신경병증의 증상; 2) 말초 감각 신경의 염증 또는 변성, 이상감각, 예컨대 비정상적이고 불쾌한 감각, 신경통, 예컨대 신경 또는 신경 군을 따른 강한 통증성 감각을 초래하는 감각 지각의 왜곡, 및/또는 감각이상, 예컨대 자극의 부재 하에 자통, 무감각, 압력, 추위 및 온감의 비정상적 피부 감각을 초래하는 감각 뉴런의 기능적 장애를 포함한 말초 감각 신경병증의 증상 중 자기-관리 (예를 들어, 목욕, 착의 및 탈의, 식사, 화장실 사용, 의약 복용)를 제한하는 증상을 나타내는 경우에, 대상체는 세포 요법 또는 그의 세포의 용량의 투여에 반응하여 또는 그에 속발하여 "중증 신경독성"이 발생한 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 중증 신경독성은 표 3에 제시된 바와 같은 3 이상의 등급의 신경독성을 포함한다. 일부 실시양태에서, 중증 신경독성은 증상 또는 등급 3 신경독성이 10일 이상 동안 지속되는 경우에 연장된 등급 3인 것으로 간주된다.
일부 실시양태에서, 방법은 다른 방법과 비교하여 CRS 또는 신경독성과 연관된 증상을 감소시킨다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 다른 방법과 비교하여 중증 CRS 또는 등급 3 이상의 CRS와 연관된 증상, 결과 또는 인자를 포함한, CRS와 연관된 증상, 결과 또는 인자를 감소시킨다. 예를 들어, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 기재된 임의의 것, 예를 들어 표 2에 제시된 바와 같은 검출가능한 CRS, 예를 들어 중증 CRS 또는 등급 3 이상의 CRS가 결여될 수 있고/거나 그의 감소된 증상, 결과 또는 인자를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 다른 방법에 의해 치료된 대상체와 비교하여 신경독성의 증상, 예컨대 사지 약화 또는 무감각, 기억, 시각 및/또는 지능 상실, 제어불가능한 강박 및/또는 광적 행동, 망상, 두통, 운동 제어의 상실을 포함한 인지 및 행동 문제, 인지 악화, 및 자율 신경계 기능장애, 및 성 기능장애의 감소를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 말초 운동 신경병증, 말초 감각 신경병증, 이상감각, 신경통 또는 감각이상과 연관된 증상의 감소를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, 방법은 신경계 및/또는 뇌에 대한 손상, 예컨대 뉴런의 사멸을 포함한 신경독성과 연관된 결과를 감소시킨다. 일부 측면에서, 방법은 신경독성과 연관된 인자, 예컨대 베타 아밀로이드 (Aβ), 글루타메이트 및 산소 라디칼의 수준을 감소시킨다.
일부 실시양태에서, 독성 결과는 용량-제한 독성 (DLT)이다. 일부 실시양태에서, 독성 결과는 용량-제한 독성의 부재이다. 일부 실시양태에서, 용량-제한 독성 (DLT)은 특정한 독성을 평가하기 위한 임의의 공지되거나 공개된 가이드라인, 예컨대 상기 기재되고 국립 암 연구소 (NCI) 유해 사건에 대한 통상 용어 기준 (CTCAE) 버전 4.0을 포함한 임의의 것에 기재되거나 그에 의해 평가된 바와 같은, 임의의 등급 3 이상의 독성으로서 정의된다. 일부 실시양태에서, 용량-제한 독성 (DLT)은 하기 논의된 사건 중 임의의 것이 세포 요법 (예를 들어, T 세포 요법) 및/또는 조합 작용제의 투여 후에 발생하는 경우에 정의되며, 사건은 a) 열성 호중구감소증; b) 약 7일 또는 약 7일 초과로 지속되는 등급 4 호중구감소증; c) 임상적으로 유의한 출혈을 동반한 등급 3 또는 4 혈소판감소증; 및 d) 24시간 초과로 지속되는 등급 4 혈소판감소증을 포함한다.
일부 실시양태에서, 제공된 실시양태는, 예컨대 제공된 조합 요법에 따른 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 의한 T 세포의 용량의 투여에 의해 관찰되는 바와 같이, 독성, 예를 들어 CRS 또는 신경독성 또는 중증 CRS 또는 신경독성, 예를 들어 등급 3 이상의 CRS 또는 신경독성이 발생할 낮은 비율 또는 위험을 발생시킨다. 일부 경우에, 이는 외래환자 기준으로 세포 요법의 투여를 허용한다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법에 따른 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 의한 세포 요법, 예를 들어 T 세포 (예를 들어, CAR+ T 세포)의 용량의 투여는 외래환자 기준으로 수행되거나, 또는 대상체가 병원에 입원하는 것, 예컨대 밤샘 체류를 필요로 하는 병원에의 입원을 필요로 하지 않는다.
일부 측면에서, 외래환자 기준으로 치료된 대상체를 포함하여, 제공된 방법에 따른 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 의한 세포 요법, 예를 들어 T 세포 (예를 들어, CAR+ T 세포)의 용량이 투여된 대상체에는, 대상체가 독성, 예컨대 신경독성 또는 CRS의 징후 또는 증상을 나타내지 않는 한 또는 나타낼 때까지, 세포 용량의 투여 전에 또는 투여와 함께 임의의 독성을 치료하기 위한 개입이 투여되지 않는다.
일부 실시양태에서, 외래환자 기준으로 치료된 대상체를 포함하여, 세포 요법, 예를 들어 T 세포 (예를 들어, CAR+ T 세포)의 용량이 투여된 대상체가 발열을 나타내는 경우에, 대상체에게 발열을 감소시키기 위한 치료의 제공 또는 투여가 주어지거나 또는 그에 대해 지시된다. 일부 실시양태에서, 대상체에서의 발열은 특정 역치 온도 또는 수준이거나 또는 그 초과인 (또는 그렇게 측정되는) 대상체의 체온을 특징으로 한다. 일부 측면에서, 역치 온도는 적어도 저등급 발열, 적어도 중등도 발열, 및/또는 적어도 고등급 발열과 연관된 것이다. 일부 실시양태에서, 역치 온도는 특정한 온도 또는 범위이다. 예를 들어, 역치 온도는 정확히 또는 약 또는 적어도 정확히 또는 약 38, 39, 40, 41, 또는 42℃일 수 있고/거나, 정확히 또는 약 38℃ 내지 정확히 또는 약 39℃의 범위, 정확히 또는 약 39℃ 내지 정확히 또는 약 40℃의 범위, 정확히 또는 약 40℃ 내지 정확히 또는 약 41℃의 범위, 또는 정확히 또는 약 41℃ 내지 정확히 또는 약 42℃의 범위일 수 있다.
일부 실시양태에서, 발열을 감소시키도록 설계된 치료는 해열제를 사용한 치료를 포함한다. 해열제는 발열을 감소시키는 임의의 작용제, 조성물, 또는 성분, 예컨대 해열 효과를 갖는 것으로 공지된 임의의 수의 작용제 중 하나, 예컨대 NSAID (예컨대 이부프로펜, 나프록센, 케토프로펜, 및 니메술리드), 살리실레이트, 예컨대 아스피린, 콜린 살리실레이트, 마그네슘 살리실레이트, 및 소듐 살리실레이트, 파라세타몰, 아세트아미노펜, 메타미졸, 나부메톤, 페낙손, 안티피린, 페브리퓨즈를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 해열제는 아세트아미노펜이다. 일부 실시양태에서, 아세트아미노펜은 12.5 mg/kg의 용량으로 경구로 또는 정맥내로 최대 4시간마다 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이는 이부프로펜 또는 아스피린이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 발열이 지속적인 발열인 경우, 대상체에게 독성을 치료하기 위한 대안적 치료를 투여한다. 외래환자 기준으로 치료된 대상체에 대해, 대상체가 지속적인 발열을 갖고/거나 지속적인 발열을 갖거나 갖는 것으로 결정된 경우에 대상체는 병원으로 복귀하도록 지시받는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 관련 역치 온도 이상의 발열을 나타내는 경우에, 대상체의 발열 또는 체온이 명시된 치료, 예컨대 발열을 감소시키도록 설계된 치료, 예컨대 해열제, 예를 들어, NSAID 또는 살리실레이트, 예를 들어, 이부프로펜, 아세트아미노펜 또는 아스피린을 사용한 치료 후에 감소되지 않거나, 또는 명시된 양 또는 그 초과만큼 (예를 들어, 1℃ 초과만큼, 일반적으로 약 0.5℃, 0.4℃, 0.3℃, 또는 0.2℃ 또는 약 그 초과만큼 변동하지는 않음) 감소되지 않는 경우에, 지속적인 발열을 갖고/거나, 갖는 것으로 결정되거나, 또는 갖는 것으로 간주된다. 예를 들어, 대상체는 해열제, 예컨대 아세트아미노펜을 사용한 치료 후에도 6시간의 기간에 걸쳐, 8시간의 기간에 걸쳐, 또는 12시간의 기간에 걸쳐, 또는 24시간의 기간에 걸쳐 정확히 또는 약 0.5℃, 0.4℃, 0.3℃, 또는 0.2℃, 또는 정확히 또는 약 1%, 2%, 3%, 4%, 또는 5%만큼 감소되지 않거나 그 초과만큼 감소되지 않고 적어도 정확히 또는 약 38 또는 39℃의 발열을 나타내거나 나타내는 것으로 결정된 경우에, 지속적인 발열을 갖는 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 해열제의 투여량은 통상적으로 예컨대 대상체에서 발열 또는 특정한 유형의 발열 예컨대 박테리아 또는 바이러스 감염, 예를 들어 국부 또는 전신 감염과 연관된 발열을 감소시키는 데 효과적인 투여량이다.
일부 실시양태에서, 대상체는 관련 역치 온도 이상의 발열을 나타내는 경우에, 대상체의 발열 또는 체온이 약 1℃ 또는 약 그 초과만큼 변동하지 않고, 일반적으로 약 0.5℃, 0.4℃, 0.3℃, 또는 0.2℃ 또는 약 그 초과만큼 변동하지 않는 경우에, 지속적인 발열을 갖고/거나, 갖는 것으로 결정되거나, 또는 갖는 것으로 간주된다. 이러한 특정 양 이상의 변동의 부재는 일반적으로 주어진 기간에 걸쳐 (예컨대 24-시간, 12-시간, 8-시간, 6-시간, 3-시간, 또는 1-시간 기간에 걸쳐, 이는 발열의 제1 징후 또는 표시된 역치 초과의 제1 온도로부터 측정될 수 있음) 측정된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 대상체는 6시간의 기간에 걸쳐, 8시간의 기간에 걸쳐, 또는 12시간의 기간에 걸쳐, 또는 24시간의 기간에 걸쳐 정확히 또는 약 0.5℃, 0.4℃, 0.3℃, 또는 0.2℃ 초과만큼 온도의 변동없이 적어도 정확히 또는 약 또는 적어도 정확히 또는 약 38 또는 39℃의 발열을 나타내는 경우에, 지속적인 발열을 나타내는 것으로 간주되거나 결정된다.
일부 실시양태에서, 발열은 지속적인 발열이고; 일부 측면에서, 대상체는 대상체가 지속적인 발열을 갖는 것으로 결정된 시점, 예컨대 독성을 유도할 잠재력이 있는 초기 요법, 예컨대 세포 요법, 예컨대 T 세포, 예를 들어, CAR+ T 세포의 용량 후 이러한 결정 또는 처음의 이러한 결정의 1, 2, 3, 4, 5, 6시간 또는 그 미만 내에 치료된다.
일부 실시양태에서, 독성을 치료하기 위한 1종 이상의 개입 또는 작용제, 예컨대 독성-표적화 요법은, 예를 들어 상기 언급된 실시양태 중 임의의 것에 따라 측정된 바와 같이, 대상체가 지속적인 발열을 나타내는 것으로 결정되거나 또는 확인된 (예컨대 처음으로 결정되거나 또는 확인된) 시점에 또는 그 직후에 투여된다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 독성-표적화 요법은 이러한 확인 또는 결정의 특정 기간 내에, 예컨대 그의 30분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 6시간 또는 8시간 내에 투여된다.
B. 혈액학적 독성
일부 측면에서, 대상체는 혈액학적 독성, 예컨대 혈소판감소증 및/또는 호중구감소증이거나 또는 이와 연관되거나 또는 이를 나타내는 독성 결과에 대해 모니터링되고/거나 방법은 그에 대한 위험을 감소시킨다. 일부 경우에, 혈소판감소증 및 호중구감소증을 포함한 혈액학적 독성은 유해 사건에 대한 통상 용어 기준 (버전 4.03; 미국 국립 암 연구소, 미국 메릴랜드주 베데스다)에 따라 등급화된다. 일부 경우에, 혈액학적 독성, 예컨대 혈소판감소증 및/또는 호중구감소증은 조합 작용제의 투여(들) 전에, 그 동안 및 그 후에 모니터링된다. 일부 경우에, 혈액학적 독성, 예컨대 혈소판감소증 및/또는 호중구감소증은 조합 작용제의 각각의 투여 전에 모니터링된다. 일부 경우에, 혈액학적 독성, 예컨대 혈소판감소증 및/또는 호중구감소증은 조합 작용제의 투여 후 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일마다 모니터링된다.
일부 실시양태에서, 전혈구 계수는 호중구 및 혈소판을 포함한 대상체에서의 백혈구 (백혈구 세포)의 수준을 모니터링하기 위해 수행된다. 완전 혈액 세포 (CBC) 계수 및/또는 백혈구 감별 계수를 수행하는 다양한 방법이 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 혈액학 분석기가 사용된다.
호중구감소증은 혈액 호중구 수의 감소를 특징으로 하며, 이는 종종 박테리아 및 진균 감염에 대한 증가된 감수성으로 이어진다. 환자에서 호중구감소증의 흔한 증상은, 예를 들어 발열, 구강염 및 귀 감염을 포함한다. 극심한 호중구감소증을 갖는 환자는 종종 화농성 감염 예컨대 균혈증, 피부 연조직염, 간 농양, 종기증, 폐렴, 구내염, 치은염, 직장주위 염증, 결장염, 부비동염, 및 중이염을 앓는다.
일부 실시양태에서, 절대 호중구 계수 (ANC)는 호중구감소증의 수준을 정의하는 데 사용된다. ANC는 전혈구 계수의 성분으로부터 계산될 수 있다. 일부 실시양태에서, 호중구감소증의 중증도는 혈액 마이크로리터당 세포에서 측정되는 절대 호중구 계수 (ANC)에 기초하여 분류된다: a) 경도 호중구감소증 (1000 내지 1500개 세포/mL); b) 중등도 호중구감소증 (등급 3; 500 내지 1000개 세포/mL); c) 중증 호중구감소증 (등급 4; < 500개 세포/mL). 일부 실시양태에서, 호중구감소증은 표 4에 제시된 기준에 따라 등급화될 수 있다. 중증 호중구감소증을 갖는 대상체는 종종 중증 감염 위험을 갖는다.
일부 경우에, 호중구감소증은 열성 호중구감소증 (또한 호중구감소성 발열 또는 호중구감소성 패혈증으로도 불림)이다. 열성 호중구감소증은 환자가 38℃ 초과의 체온 및 낮은 수준의 호중구 또는 호중구감소증을 갖는 경우에 발생한다. 일부 실시양태에서, 열성 호중구감소증은 표 5에 제시된 기준에 따라 등급화될 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상체는 혈소판감소증에 대해 모니터링된다. 혈소판감소증은 마이크로리터 (μL)당 150,000개 미만의 세포의 혈소판 계수를 특징으로 한다. 특히 보다 중증 등급을 갖는 환자 중에서 혈소판감소증의 제시는 출혈, 반상출혈, 점상출혈, 자반증 및 비장기능항진증을 포함할 수 있다. 혈소판감소증은 등급 1 혈소판감소증 (즉, 75,000 내지 150,000/μL의 혈소판 계수), 등급 2 (즉, 50,000 내지 <75,000/μL의 혈소판 계수), 등급 3 (25,000 내지 <50,000/μL의 혈소판 계수), 또는 등급 4 (즉, 25,000/μL 미만의 혈소판 계수)를 특징으로 할 수 있다.
제공된 방법의 일부 실시양태에서, 대상체가 혈액학적 독성, 예컨대 혈소판감소증 및/또는 호중구감소증 또는 그의 특정한 등급을 나타내는 것으로 결정된 경우에, 조합 작용제를 사용한 주기 요법은 변경될 수 있다. 일부 측면에서, 조합 작용제의 투여 후, 대상체가 등급 3 이상의 혈소판감소증; 등급 3 호중구감소증; 지속되는 등급 3 호중구감소증 (예컨대 적어도 3, 5, 또는 7일 초과); 등급 4 호중구감소증; 등급 3 이상의 열성 호중구감소증을 갖는 경우에, 주기 요법은 변경된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 독성의 징후 또는 증상이 해소되거나, 줄어들거나 또는 감소될 때까지 영구적으로 중단되거나 또는 중지된다. 대상체의 계속적인 모니터링은 예컨대 CBC 또는 감별 백혈구 분석에 의해 독성의 1종 이상의 징후 또는 증상을 평가하기 위해 수행될 수 있다. 일부 경우에, 독성이 해소되거나 감소되는 경우에, 조합 작용제의 투여는 주기 요법을 중단하기 전과 동일한 용량 또는 투여 요법으로, 보다 낮거나 감소된 용량으로, 및/또는 덜 빈번한 투여를 수반하는 투여 요법으로 재개될 수 있다. 일부 실시양태에서, 주기 요법을 재개하는 경우에, 용량은 적어도 또는 적어도 약 또는 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50% 또는 60% 낮아지거나 감소된다. 일부 실시양태에서, 세포 요법의 중지 전의 용량이 2 mg (예를 들어, 5/7일 제공)인 경우에, 용량은 1 mg (5/7일 제공)으로 감소된다. 일부 측면에서, 혈액학적 독성이, 주기 요법의 중지가 4주 초과인 이러한 중증도를 갖는 경우에, 주기 요법은 영구적으로 중단될 수 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 작용제는 혈액학적 독성과 연관된 1종 이상의 증상을 치료, 호전 또는 경감시키기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, 골수성 성장 인자, 예컨대 G-CSF 또는 GM-CSF는 혈액학적 독성이 개선될 때까지 대상체에게 투여된다. 이러한 요법의 예는 필그라스팀 또는 페그필그라스팀을 포함한다. 일부 측면에서, 이러한 작용제는 임의의 지속기간의 임의의 등급 3 이상의 호중구감소증을 포함한 중증 호중구감소증 또는 열성 호중구감소증을 겪고 있는 대상체에게 투여된다.
C. 비-혈액학적 독성
일부 측면에서, 독성 결과는 조합 작용제의 투여 후 1종 이상의 비-혈액학적 독성이거나 또는 이와 연관되거나 또는 이를 나타낸다. 비-혈액학적 독성의 예는 종양 플레어 반응, 감염, 종양 용해 증후군, 심장 실험실 이상, 혈전색전성 사건(들) (예컨대 심부 정맥 혈전증 및 폐 색전증), 및/또는 폐장염을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 측면에서, 비-혈액학적 독성은 종양 플레어 반응 (TFR) (때때로 또한 가성진행으로도 지칭됨)이다. TFR은 종종 저등급 발열, 압통 및 종창, 미만성 발진을 동반하는 림프절, 비장 및/또는 간을 포함한 질환-보유 부위의 크기의 갑작스러운 증가, 및 일부 경우에, 말초 혈액 림프구 계수의 증가이다. 일부 실시양태에서, TFR은 유해 사건에 대한 통상 용어 기준 (버전 3.0; 미국 국립 암 연구소, 미국 메릴랜드주 베데스다)에 따라 등급화된다. 일부 실시양태에서, TFR은 하기와 같이 등급화된다: 등급 1, 기능을 방해하지 않는 경도 통증; 등급 2, 중등도 통증, 기능을 방해하지만 일상 생활 활동 (ADL)을 방해하지 않는 통증 또는 진통; 등급 3, 중증 통증, 기능을 방해하고 ADL을 방해하는 통증 또는 진통; 등급 4, 장애초래; 등급 5, 사망. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 작용제, 예컨대 코르티코스테로이드, NSAID 및/또는 마약성 진통제는 TFR과 연관된 1종 이상의 증상을 치료, 호전 또는 경감시키기 위해 대상체에게 투여될 수 있다.
일부 측면에서, 비-혈액학적 독성은 종양 용해 증후군 (TLS)이다. 일부 실시양태에서, TLS는 카이로-비솝(Cairo-Bishop) 등급화 시스템에 의해 명시된 기준에 따라 등급화될 수 있다 (Cairo and Bishop (2004) Br J Haematol, 127:3-11). 일부 실시양태에서, 대상체는 고요산혈증을 감소시키기 위해 정맥내 수화를 제공받을 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상체는 예컨대 ECGS, LVEF를 모니터링하고 트로포닌-T 및 BNP의 수준을 모니터링함으로써 심장 독성에 대해 모니터링될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 심장 증상과 함께 상승된 수준의 트로포닌-T 및/또는 BNP가 관찰되는 경우에, 잠재적으로 조합 작용제의 유지 또는 중지를 필요로 할 수 있는 심장 독성이 발생할 수 있다.
제공된 방법의 일부 실시양태에서, 대상체가 비-혈액학적 독성, 예컨대 TFR 또는 다른 비-혈액학적 독성 또는 그의 특정한 등급을 나타내는 것으로 결정된 경우에, 조합 작용제를 사용한 주기 요법은 변경될 수 있다. 일부 측면에서, 조합 작용제의 투여 후, 대상체가 등급 3 이상의 비-혈액학적 독성, 예컨대 등급 3 이상의 TFR을 갖는 경우에, 주기 요법은 변경된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 투여는 독성의 징후 또는 증상이 해소되거나, 줄어들거나 또는 감소될 때까지 영구적으로 중단되거나 또는 중지된다. 대상체의 계속적인 모니터링은 독성의 1종 이상의 징후 또는 증상을 평가하기 위해 수행될 수 있다. 일부 경우에, 독성이 해소되거나 감소되는 경우에, 조합 작용제의 투여는 주기 요법을 중단하기 전과 동일한 용량 또는 투여 요법으로, 보다 낮거나 감소된 용량으로, 및/또는 덜 빈번한 투여를 수반하는 투여 요법으로 재개될 수 있다. 일부 실시양태에서, 주기 요법을 재개하는 경우에, 용량은 적어도 또는 적어도 약 또는 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50% 또는 60% 낮아지거나 감소된다. 일부 실시양태에서, 조합 작용제의 경우에, 세포 요법의 중지 전의 용량이 2 mg (예를 들어, 5/7일 제공)인 경우에, 용량은 1 mg (5/7일 제공)으로 감소된다. 일부 실시양태에서, 등급 3 독성이 심지어 용량 감소 후에도 재발하는 경우에, 용량은 추가로 감소될 수 있다. 일부 실시양태에서, 등급 4 독성이 심지어 용량 감소 후에도 재발하는 경우에, 주기 요법은 영구적으로 중단될 수 있다. 일부 측면에서, 혈액학적 독성이, 주기 요법의 중지가 4주 초과인 이러한 중증도를 갖는 경우에, 주기 요법은 영구적으로 중단될 수 있다.
V. 제조 물품 및 키트
또한, 조합 작용제 및 면역요법을 위한 성분, 예를 들어 항체 또는 그의 항원 결합 단편 또는 T 세포 요법을 위한 성분, 예를 들어 조작된 세포, 및/또는 그의 조성물을 함유하는 제조 물품이 제공된다. 일부 실시양태에서, 제조 물품은 면역조정 화합물, 예를 들어, 화합물 A를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제조 물품은 또한 스테로이드, 예를 들어 덱사메타손을 포함한다. 표준 삼중 요법을 위한 성분 (예를 들어, DPd 또는 PVd 요법을 위한 성분) 및 면역요법을 위한 성분, 예를 들어 항체 또는 그의 항원 결합 단편 또는 T 세포 요법을 위한 성분, 예를 들어 조작된 세포, 및/또는 그의 조성물을 함유하는 제조 물품이 또한 제공된다.
제조 물품은 용기, 및 용기 상에 또는 용기와 회합된 라벨 또는 패키지 삽입물을 포함할 수 있다. 적합한 용기는, 예를 들어 병, 바이알, 시린지, IV 용액 백 등을 포함한다. 용기는 다양한 물질, 예컨대 유리 또는 플라스틱으로 형성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 용기는 조성물을 그 자체로 또는 상태를 치료, 예방 및/또는 진단하는 데 효과적인 또 다른 조성물과 조합하여 보유한다. 일부 실시양태에서, 용기는 멸균 접근 포트를 갖는다. 예시적인 용기는 정맥내 용액 백, 주사용 바늘로 뚫을 수 있는 마개가 있는 것을 포함한 바이알, 또는 경구로 투여되는 작용제를 위한 병 또는 바이알을 포함한다. 라벨 또는 패키지 삽입물은 조성물이 질환 또는 상태를 치료하는 데 사용됨을 나타낼 수 있다.
제조 물품은 (a) 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법에 사용되는 항체 또는 조작된 세포를 포함하는 조성물이 함유된 제1 용기; 및 (b) 조합 작용제 (예를 들어, 화합물 A, 덱사메타손, 다라투무맙, 포말리도미드 및 보르테조밉)를 포함하는 조성물이 함유된 1개 이상의 추가의 용기를 포함할 수 있다. 제조 물품은 조성물이 특정한 상태를 치료하는 데 사용될 수 있음을 나타내는 패키지 삽입물을 추가로 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 제조 물품은 제약상 허용되는 완충제를 포함하는 또 다른 또는 동일한 용기를 추가로 포함할 수 있다. 이는 다른 물질, 예컨대 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘 및/또는 시린지를 추가로 포함할 수 있다.
VI. 정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어, 표기법 및 다른 기술 과학 용어 또는 용어는 청구된 주제가 속하는 기술분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는 것으로 의도된다. 일부 경우에, 통상적으로 이해되는 의미를 갖는 용어는 명확성을 위해 및/또는 용이한 참조를 위해 본원에 정의되며, 본원에서의 이러한 정의의 포함은 반드시 관련 기술분야에서 일반적으로 이해되는 것에 비해 실질적인 차이를 나타내는 것으로 해석되어서는 안된다.
본원에 사용된 "대상체"는 포유동물, 예컨대 인간 또는 다른 동물이고, 전형적으로 인간이다. 일부 실시양태에서, 면역조정 폴리펩티드, 조작된 세포 또는 조성물이 투여되는 대상체, 예를 들어 환자는 포유동물, 전형적으로 영장류, 예컨대 인간이다. 일부 실시양태에서, 영장류는 원숭이 또는 유인원이다. 대상체는 남성 또는 여성일 수 있고, 유아, 소아, 청소년, 성인 및 노인 대상체를 비롯한 임의의 적합한 연령일 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-영장류 포유동물, 예컨대 설치류이다.
본원에 사용된 "치료" (및 그의 문법적 변형, 예컨대 "치료하다" 또는 "치료하는")는 질환 또는 상태 또는 장애, 또는 그와 연관된 증상, 유해 효과 또는 결과, 또는 표현형의 완전한 또는 부분적인 호전 또는 감소를 지칭한다. 바람직한 치료 효과는 질환의 발생 또는 재발의 예방, 증상의 완화, 질환의 임의의 직접적 또는 간접적 병리학적 결과의 감소, 전이의 예방, 질환 진행 속도의 감소, 질환 상태의 호전 또는 완화, 및 진정 또는 개선된 예후를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 상기 용어는 질환의 완전한 치유 또는 모든 증상 또는 결과에 대한 임의의 증상 또는 효과(들)의 완전한 제거를 의미하지는 않는다.
본원에 사용된 "질환의 발생을 지연시키는 것"은 질환 (예컨대 암)의 발생을 연기, 저해, 둔화, 지체, 안정화, 억제 및/또는 늦추는 것을 의미한다. 이러한 지연은 치료될 질환 및/또는 개체의 병력에 따라 다양한 시간 길이일 수 있다. 명백한 바와 같이, 충분한 또는 유의한 지연은 사실상 개체에서 질환이 발생하지 않는다는 점에서 예방을 포괄할 수 있다. 예를 들어, 후기 암, 예컨대 전이의 발생이 지연될 수 있다.
본원에 사용된 "예방하는"은 질환에 대한 소인이 있을 수 있지만 아직 질환으로 진단되지 않은 대상체에서 질환의 발생 또는 재발과 관련하여 예방을 제공하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제공된 세포 및 조성물은 질환의 발생을 지연시키거나 또는 질환의 진행을 늦추는 데 사용된다.
본원에 사용된 바와 같이, 기능 또는 활성을 "저해하는" 것은 관심 조건 또는 파라미터를 제외한 다른 것은 동일한 조건과 비교하였을 때, 또는 대안적으로 또 다른 조건과 비교하였을 때, 기능 또는 활성을 감소시키는 것이다. 예를 들어, 종양 성장을 저해하는 세포는 세포의 부재 하의 종양의 성장 속도와 비교하여 종양의 성장 속도를 감소시킨다.
투여와 관련하여 작용제, 예를 들어 제약 제제, 세포 또는 조성물의 "유효량"은 목적하는 결과, 예컨대 치료 또는 예방 결과를 달성하기 위해, 필요한 투여량/양에서 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다.
작용제, 예를 들어 제약 제제 또는 조작된 세포의 "치료 유효량"은 목적하는 치료 결과, 예컨대 질환, 상태 또는 장애의 치료, 및/또는 치료의 약동학적 또는 약역학적 효과를 달성하기 위해, 필요한 투여량에서 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 치료 유효량은 대상체의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중, 및 투여되는 면역조정 폴리펩티드 또는 조작된 세포와 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 제공된 방법은 면역조정 폴리펩티드, 조작된 세포 또는 조성물을 유효량, 예를 들어 치료 유효량으로 투여하는 것을 수반한다.
"예방 유효량"은 목적하는 예방 결과를 달성하기 위해, 필요한 투여량에서 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 반드시는 아니지만 전형적으로, 예방 용량은 질환의 초기 단계 전에 또는 초기 단계에서 대상체에 사용되기 때문에, 예방 유효량은 치료 유효량 미만일 것이다.
용어 "제약 제제"는 그 안에 함유된 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적이도록 하는 형태로 존재하고, 제제가 투여될 대상체에게 허용되지 않는 독성인 추가의 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다.
"제약상 허용되는 담체"는 대상체에게 비독성인, 활성 성분 이외의 제약 제제 내의 성분을 지칭한다. 제약상 허용되는 담체는 완충제, 부형제, 안정화제 또는 보존제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "대상체" 또는 "개체"는 포유동물이다. 일부 실시양태에서, "포유동물"은 인간, 비-인간 영장류, 가축 및 농장 동물, 및 동물원, 스포츠 또는 애완 동물, 예컨대 개, 말, 토끼, 소, 돼지, 햄스터, 저빌, 마우스, 페릿, 래트, 고양이, 원숭이 등을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
본원에 사용된 바와 같이 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치가 예컨대 서열 목록에 제시된, 개시된 서열 내의 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치"에 상응한다"는 언급은 표준 정렬 알고리즘, 예컨대 GAP 알고리즘을 사용하여 동일성을 최대화하기 위해 개시된 서열과의 정렬 시에 확인된 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치를 지칭한다. 서열을 정렬함으로써, 예를 들어 가이드로서 보존되고 동일한 아미노산 잔기를 사용하여 상응하는 잔기를 확인할 수 있다. 일반적으로, 상응하는 위치를 확인하기 위해, 아미노산의 서열은 최고 차수의 매칭이 수득되도록 정렬된다 (예를 들어, 문헌 [Computational Molecular Biology, Lesk, A.M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M., and Griffin, H.G., eds., Humana Press, New.Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; 및 Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991; Carrillo et al., (1988) SIAM J Applied Math 48: 1073] 참조).
본원에 사용된 용어 "벡터"는 그에 연결된 또 다른 핵산을 증식시킬 수 있는 핵산 분자를 지칭한다. 상기 용어는 자기-복제 핵산 구조로서의 벡터뿐만 아니라 그것이 도입된 숙주 세포의 게놈 내로 혼입된 벡터를 포함한다. 특정 벡터는 작동가능하게 연결된 핵산의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "발현 벡터"로 지칭된다. 벡터 중에는 바이러스 벡터, 예컨대 레트로바이러스, 예를 들어 감마레트로바이러스 및 렌티바이러스 벡터가 있다.
용어 "숙주 세포", "숙주 세포주" 및 "숙주 세포 배양물"은 상호교환가능하게 사용되고, 외인성 핵산이 도입된 세포를, 이러한 세포의 자손을 포함하여 지칭한다. 숙주 세포는 "형질전환체" 및 "형질전환된 세포"를 포함하며, 이는 1차 형질전환된 세포 및 계대 횟수와 관계없이 그로부터 유래된 자손을 포함한다. 자손은 모 세포와 핵산 함량이 완전히 동일하지 않을 수 있지만, 돌연변이를 함유할 수 있다. 원래의 형질전환된 세포에 대해 스크리닝 또는 선택된 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 돌연변이체 자손이 본원에 포함된다.
본원에 사용된, 세포 또는 세포의 집단이 특정 마커에 대해 "양성"이라는 언급은 특정한 마커, 일반적으로 표면 마커의 세포 상의 또는 세포 내의 검출가능한 존재를 의미한다. 표면 마커를 언급하는 경우에, 상기 용어는 유동 세포측정법에 의해, 예를 들어 마커에 특이적으로 결합하는 항체로 염색하고 상기 항체를 검출함으로써 검출되는 바와 같은 표면 발현의 존재를 지칭하며, 여기서 염색은 다른 것은 동일한 조건 하에 이소형-매칭된 대조군을 사용하여 동일한 절차를 수행하여 검출된 염색을 실질적으로 초과하는 수준에서 및/또는 마커에 대해 양성인 것으로 공지된 세포에 대한 것과 실질적으로 유사한 수준에서, 및/또는 마커에 대해 음성인 것으로 공지된 세포에 대한 것보다 실질적으로 더 높은 수준에서 유동 세포측정법에 의해 검출가능하다.
본원에 사용된, 세포 또는 세포의 집단이 특정한 마커에 대해 "음성"이라는 언급은 세포 상에 또는 세포 내에 특정한 마커, 일반적으로 표면 마커가 실질적으로 검출가능하게 존재하지 않는 것을 의미한다. 표면 마커를 언급하는 경우에, 상기 용어는 유동 세포측정법에 의해, 예를 들어 마커에 특이적으로 결합하는 항체로 염색하고 상기 항체를 검출함으로써 검출된 바와 같은 표면 발현의 부재를 지칭하며, 여기서 염색은 달리 동일한 조건 하에 이소형-매칭된 대조군을 사용하여 동일한 절차를 수행하는 검출된 염색을 실질적으로 초과하는 수준에서, 및/또는 마커에 대해 양성인 것으로 공지된 세포에 대한 것보다 실질적으로 더 낮은 수준에서, 및/또는 마커에 대해 음성인 것으로 공지된 세포에 대한 것과 비교하여 실질적으로 유사한 수준에서 유동 세포측정법에 의해 검출되지 않는다.
아미노산 치환은 폴리펩티드 내의 하나의 아미노산을 또 다른 아미노산으로 대체하는 것을 포함할 수 있다. 치환은 보존적 아미노산 치환 또는 비-보존적 아미노산 치환일 수 있다. 아미노산 치환은 관심 결합 분자, 예를 들어 항체 내로 도입될 수 있고, 산물은 목적하는 활성, 예를 들어 보유/개선된 항원 결합, 감소된 면역원성 또는 개선된 ADCC 또는 CDC에 대해 스크리닝될 수 있다.
아미노산은 일반적으로 하기 공통 측쇄 특성에 따라 분류될 수 있다:
(1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) 산성: Asp, Glu;
(4) 염기성: His, Lys, Arg;
(5) 쇄 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro;
(6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
일부 실시양태에서, 보존적 치환은 이들 부류 중 하나의 구성원을 동일한 부류의 또 다른 구성원으로 교환하는 것을 수반할 수 있다. 일부 실시양태에서, 비-보존적 아미노산 치환은 이들 부류 중 하나의 구성원을 또 다른 부류로 교환하는 것을 수반할 수 있다.
본원에 사용된 "퍼센트 (%) 아미노산 서열 동일성" 및 "퍼센트 동일성"은, 아미노산 서열 (참조 폴리펩티드 서열)과 관련하여 사용되는 경우에, 서열을 정렬하고 필요한 경우에 갭을 도입하여 최대 퍼센트 서열 동일성을 달성한 후에 임의의 보존적 치환은 서열 동일성의 일부로서 고려하지 않으면서 참조 폴리펩티드 서열 내의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 (예를 들어, 대상 항체 또는 단편) 내의 아미노산 잔기의 백분율로서 정의된다. 퍼센트 아미노산 서열 동일성을 결정하기 위한 목적의 정렬은 다양한 방식으로, 예를 들어 공중 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어, 예컨대 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 메갈라인(Megalign) (DNASTAR) 소프트웨어를 사용하여 달성될 수 있다. 비교되는 서열의 전장에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여, 서열을 정렬하기 위한 적절한 파라미터가 결정될 수 있다.
본원에 사용된 단수 형태는 문맥이 달리 명백하게 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다. 예를 들어, 단수형은 "적어도 하나" 또는 "하나 이상"을 의미한다. 본원에 기재된 측면 및 변형은 측면 및 변형으로 "이루어진" 및/또는 "본질적으로 이루어진" 것을 포함하는 것으로 이해된다.
본 개시내용 전반에 걸쳐, 청구된 대상의 다양한 측면은 범위 포맷으로 제시된다. 범위 포맷의 기재는 단지 편의 및 간결성을 위한 것이며, 청구된 대상의 범주에 대한 융통성 없는 제한으로 해석되어서는 안된다는 것이 이해되어야 한다. 따라서, 범위의 기재는 구체적으로 개시된 모든 가능한 하위-범위뿐만 아니라 그 범위 내의 개별 수치 값을 갖는 것으로 간주되어야 한다. 예를 들어, 값의 범위가 제공되는 경우에, 그 범위의 상한과 하한 사이의 각각의 개재 값 및 그 언급된 범위 내의 임의의 다른 언급된 값 또는 개재 값이 청구된 대상 내에 포괄되는 것으로 이해된다. 이들 보다 작은 범위의 상한치 및 하한치는 독립적으로 보다 작은 범위에 포함될 수 있고, 또한 언급된 범위에서 임의의 구체적으로 배제된 한계를 조건으로 청구된 대상 내에 포괄된다. 언급된 범위가 한계 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우에, 이들 포함된 한계 중 하나 또는 둘 다를 배제하는 범위가 또한 청구된 대상에 포함된다. 이는 범위의 폭과 상관없이 적용된다.
본원에 사용된 용어 "약"은 본 기술 분야에 용이하게 공지된 각각의 값에 대한 통상의 오차 범위를 지칭한다. 본원에서 "약" 값 또는 파라미터에 대한 언급은 그러한 값 또는 파라미터 자체에 관한 실시양태를 포함 (및 기재)한다. 예를 들어, "약 X"를 언급하는 기재는 "X"의 기재를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 조성물은 세포를 포함한 2종 이상의 생성물, 물질 또는 화합물의 임의의 혼합물을 지칭한다. 이는 용액, 현탁액, 액체, 분말, 페이스트, 수성, 비-수성 또는 그의 임의의 조합일 수 있다.
VII. 예시적인 실시양태
제공된 실시양태 중에는 하기의 것이 있다:
1.
(a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것;
(b) 대상체에게 하기 구조를 갖는 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온:
또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 공-결정, 클라트레이트 또는 다형체인 면역조정 화합물을 투여하는 것; 및
(c) 대상체에게 덱사메타손을 투여하는 것
을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법.
2. 실시양태 1에 있어서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손이 공동으로 투여되는 것인 방법.
3. 실시양태 1 또는 실시양태 2에 있어서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손의 용량이 동일한 날에 투여되는 것인 방법.
4. 실시양태 1-3 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여 전에 개시되는 것인 방법.
5. 실시양태 1-4 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 또는 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시되는 것인 방법.
6. 실시양태 1-3 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물이 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여되는 것인 방법.
7. 실시양태 1-3 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시되는 것인 방법.
8. 실시양태 1-3 및 7 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시되는 것인 방법.
9. 실시양태 1-8 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 제약상 허용되는 염이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
10. 실시양태 1-8 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 수화물이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
11. 실시양태 1-8 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 용매화물이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
12. 실시양태 1-8 중 어느 하나에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
13. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, 덱사메타손이 저용량으로 투여되는 것인 방법.
14. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 면역조정 화합물을 투여받지 않은 것인 방법.
15.
(a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것;
(b) 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것
을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법.
16. 실시양태 15에 있어서, 표준 삼중 요법이 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손의 투여를 포함하는 것인 방법.
17. 실시양태 16에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 포말리도미드와 조합된 다라투무맙을 투여받지 않은 것인 방법.
18. 실시양태 15에 있어서, 표준 삼중 요법이 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손의 투여를 포함하는 것인 방법.
19. 실시양태 18에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 보르테조밉과 조합된 포말리도미드를 투여받지 않은 것인 방법.
20. 실시양태 15-19 중 어느 하나에 있어서, 덱사메타손이 저용량으로 투여되는 것인 방법.
21. 실시양태 15-20 중 어느 하나에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여 전에 개시되는 것인 방법.
22. 실시양태 15-21 중 어느 하나에 있어서,
표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 또는 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시되고/거나;
표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 약 96시간, 72시간, 48시간, 24시간, 12시간, 6시간, 2시간, 또는 1시간 이하 전에 개시되는 것인 방법.
23. 실시양태 15-20 중 어느 하나에 있어서, 표준 삼중 요법이 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여되는 것인 방법.
24. 실시양태 15-20 중 어느 하나에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시되는 것인 방법.
25. 실시양태 15-20 및 24 중 어느 하나에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시되는 것인 방법.
26. 실시양태 15-20, 24, 및 25 중 어느 하나에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 56일 (8주) 후에 개시되는 것인 방법.
27. 실시양태 15-20 및 24-26 중 어느 하나에 있어서, T 세포 요법이 방법의 제1일에 투여되고, 표준 삼중 요법의 투여는 방법의 정확히 또는 약 제3개월 제1일 (M3D1)에 개시되는 것인 방법.
28. 실시양태 1-27 중 어느 하나에 있어서, 유전자 조작된 T 세포의 용량이 정확히 또는 약 5 x 107개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포인 방법.
29. 실시양태 1-28 중 어느 하나에 있어서, 유전자 조작된 T 세포의 용량이 정확히 또는 약 1 x 108개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포인 방법.
30. 실시양태 1-29 중 어느 하나에 있어서, 유전자 조작된 T 세포의 용량이 정확히 또는 약 4.5 x 108개 CAR+ T 세포인 방법.
31. 실시양태 1-30 중 어느 하나에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
32. 실시양태 1-31 중 어느 하나에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 인터류킨-6 (IL-6)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
33. 실시양태 1-32 중 어느 하나에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
34. 실시양태 1-33 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 약 0.5 g/dL 이상의 혈청 M-단백질 수준 또는 약 200 mg/24시간 이상의 뇨 M-단백질 수준을 갖는 것인 방법.
35. 실시양태 1-33 중 어느 하나에 있어서, R/R MM이 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM인 방법.
36. 실시양태 35에 있어서, 대상체가 약 10 mg/dL 이상의 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 수준 또는 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비를 갖는 것인 방법.
37. 실시양태 1-36 중 어느 하나에 있어서, 방법 전에, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 1종 이상의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
38. 실시양태 37에 있어서, 상기 1종 이상의 선행 요법이 면역조정제를 포함하는 것인 방법.
39. 실시양태 38에 있어서, 대상체가 면역조정제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받은 것인 방법.
40. 실시양태 37-39 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 1 내지 3종의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
41. 실시양태 37-39 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 적어도 3종의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
42. 실시양태 37-41 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 선행 요법이 항-CD38 항체 및 프로테아솜 억제제를 포함하는 것인 방법.
43. 실시양태 42에 있어서, 대상체가 항-CD38 항체 및/또는 프로테아솜 억제제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받은 것인 방법.
44. 실시양태 37-43 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법에 대해 재발하였거나 또는 불응성인 것인 방법.
45. 실시양태 37-44 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법의 마지막 6개월 동안 또는 그 내에 진행성 질환 (PD)을 나타낸 것인 방법.
46. 실시양태 37-45 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법 중 적어도 1종에 대해 최소 반응 또는 보다 양호한 반응을 나타낸 것인 방법.
47. 실시양태 37-46 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 선행 요법이 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 유전자 요법-기반 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA-표적화 요법을 포함하지 않는 것인 방법.
48. 실시양태 1-47 중 어느 하나에 있어서, T 세포 요법이 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체가 백혈구분리반출술 전 12주 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않은 것인 방법.
49. 실시양태 1-48 중 어느 하나에 있어서, T 세포 요법이 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체가 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않은 것인 방법.
50. 실시양태 1-49 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1인 방법.
51. 실시양태 1-50 중 어느 하나에 있어서, CAR이 BCMA에 결합하는 항원 결합 도메인, 막횡단 도메인, 및 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄를 포함하는 세포내 신호전달 영역을 포함하는 것인 방법.
52. 실시양태 51에 있어서, 항원 결합 도메인이 단일 쇄 가변 단편 (scFv)인 방법.
53. 실시양태 51 또는 실시양태 52에 있어서, CAR이 VH 및 VL 영역을 포함하며, 여기서 VH 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 CDR-H1, 서열식별번호: 63에 제시된 CDR-H2 및 서열식별번호: 64에 제시된 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 65에 제시된 CDR-L1, 서열식별번호: 66에 제시된 CDR-L2 및 서열식별번호: 67에 제시된 CDR-H3을 포함하는 것인 방법.
54. 실시양태 51-53 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 30에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VH 영역, 및 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 31에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VL 영역을 포함하는 것인 방법.
55. 실시양태 51-54 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VH 영역 및 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VL 영역을 포함하는 것인 방법.
56. 실시양태 51-55 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 68에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 68에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 scFv인 방법.
57. 실시양태 51-56 중 어느 하나에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 68에 제시된 바와 같은 scFv인 방법.
58. 실시양태 51-57 중 어느 하나에 있어서, 세포내 신호전달 영역이 공동자극 신호전달 영역을 추가로 포함하는 것인 방법.
59. 실시양태 58에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 CD28, 4-1BB 또는 ICOS의 세포내 신호전달 도메인 또는 그의 신호전달 부분을 포함하는 것인 방법.
60. 실시양태 58 또는 실시양태 59에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 4-1BB, 임의로 인간 4-1BB의 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 것인 방법.
61. 실시양태 58-60 중 어느 하나에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 막횡단 도메인과 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄의 세포질 신호전달 도메인 사이에 있는 것인 방법.
62. 실시양태 51-61 중 어느 하나에 있어서, 막횡단 도메인이 인간 CD8로부터의 막횡단 도메인이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
63. 실시양태 51-62 중 어느 하나에 있어서, CAR이 항원 결합 도메인과 막횡단 도메인 사이에 세포외 스페이서를 추가로 포함하는 것인 방법.
64. 실시양태 63에 있어서, 스페이서가 정확히 또는 약 50개 아미노산 내지 정확히 또는 약 250개 아미노산인 방법.
65. 실시양태 63 또는 실시양태 64에 있어서, 스페이서가 CD8 힌지인 방법.
66. 실시양태 1-65 중 어느 하나에 있어서, CAR이 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열 또는 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는 것인 방법.
67. 실시양태 1-66 중 어느 하나에 있어서, CAR이 서열식별번호: 152에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 152에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는 것인 방법.
VIII. 실시예
하기 실시예는 단지 예시적 목적을 위해 포함되며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
실시예 1 재발성/불응성 다발성 골수종을 갖는 대상체에서 화합물 A 및 덱사메타손과 조합된 항-BCMA CAR T 세포의 투여
본 실시예는 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 (화합물 A) ± 저용량 덱사메타손과 조합된 예시적인 항-BCMA CAR T 세포 요법의 투여를 기재한다. 항-BCMA CAR은 항-BCMA scFv 항원-결합 도메인 (예를 들어, 서열식별번호: 68에 제시됨), CD3제타 신호전달 도메인, 및 4-1BB 공동자극 신호전달 도메인을 함유한다 (예시적인 CAR의 서열은 서열식별번호: 152에 제시됨). T 세포 요법은 대상체로부터 수득된 자가 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함하며, 이는 이어서 CAR을 발현하도록 조작된다. 시험되는 조합 작용제는 항-BCMA CAR T 세포 주입 전에, 그와 공동으로, 및/또는 그 후에 (즉, 유지) 투여된다.
화합물 A ± 저용량 덱사메타손과 조합된 항-BCMA CAR T 세포를 시험하기 위해, 항-BCMA CAR T 세포 요법을 450 x 106개 CAR+ T 세포의 표적 용량으로 투여한다. 조합 작용제는 용량 제한 독성 (DLT) 평가에 따라 상이한 용량 및/또는 스케줄로 투여한다.
본 연구의 대상체는 (a) M-단백질 (혈청 단백질 전기영동 [sPEP] 또는 뇨 단백질 전기영동 [uPEP]): sPEP ≥ 0.5 g/dL 또는 uPEP ≥ 200 mg/24시간; 및/또는 (b) 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM: 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL (100 mg/L) 및 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비로 정의되는, 다발성 골수종 (MM) 및 측정가능한 질환으로 문서적으로 진단되었다.
일부 경우에, 대상체는 적어도 3종의 선행 MM 요법을 제공받았다. 이들 대상체는 적어도 2회의 연속 주기 동안 면역조정제, 프로테아솜 억제제 및 항-CD38 항체-함유 요법으로의 선행 치료를 제공받았다. 다른 경우에, 대상체는 적어도 1종, 그러나 3종 이하의 선행 MM 요법을 제공받았다. 이들 대상체는 적어도 2회의 연속 주기 동안 면역조정제로의 선행 치료를 제공받았다.
대상체는 조합 치료 전에 마지막 항골수종 요법으로의 치료 동안 또는 치료 완료의 6개월 내에 (요법 내의 임의의 약물의 마지막 용량으로부터 측정됨) 진행성 질환의 증거를 나타내었다. 대상체는 적어도 1종의 선행 치료 요법에 대해 반응 (최소 반응 또는 보다 양호한 반응)을 달성하였다. 대상체는 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1이다.
대상체는 비-분비성 MM, 또는 활성 형질 세포 백혈병, 발덴스트롬 마크로불린혈증, POEMS 증후군 (다발신경병증, 기관비대, 내분비병증, 모노클로날 단백질, 및 피부 변화) 또는 아밀로이드증의 병력을 갖지 않는다. 대상체는 하기 실험실 이상 중 어떠한 것도 갖지 않는다: (a) 특정 역치 미만의 ANC 및 혈소판 계수; (b) 헤모글로빈 < 8 g/dL (< 4.9 mmol/L) (스크리닝의 21일 내에 수혈은 허용되지 않음); (c) 특정 역치 미만의 크레아티닌 클리어런스 (CrCl); (d) 보정된 혈청 칼슘 > 13.5 mg/dL (> 3.4 mmol/L); (e) 혈청 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) > 2.5 x 정상 상한치 (ULN); (f) 문서화된 길버트 증후군을 갖는 참가자의 경우 혈청 총 빌리루빈 > 1.5 x ULN 또는 > 3.0 mg/dL; 및 (g) 국제 정규화 비 (INR) 또는 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) 1.5 x ULN, 또는 30일 내에 등급 ≥ 2 출혈의 병력, 또는 참가자가 항응고제 (예를 들어, 와파린, 저분자량 헤파린, 인자 Xa 억제제)의 만성, 치료적 투여를 사용한 계속적인 치료를 필요로 함. 대상체는 실내 공기 중 산소 포화 (SaO2) < 92%로 정의되는 부적절한 폐 기능을 갖지 않는다. 대상체는 1초간 강제 호기량 (FEV1)이 예측 정상치의 50%인 공지된 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD)을 갖지 않는다.
대상체는 그의 가장 최근의 항골수종 치료 요법의 일부로서 화합물 A (± 저용량 덱사메타손)에 대한 사전 노출을 갖지 않았다. 대상체는 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 임의의 유전자 요법-기반 치료로의 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA 표적화 요법의 이전 이력을 갖지 않는다. 일부 경우에, 대상체는 백혈구분리반출술 전 12주 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다. 다른 경우에, 대상체는 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다.
실시예 2 재발성/불응성 다발성 골수종을 갖는 대상체에서 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손 (DPd)과 조합된 항-BCMA CAR T 세포의 투여
본 실시예는 포말리도미드 (POM) 및 저용량 덱사메타손과 조합된 다라투무맙 (DARA)의 표준 삼중 요법 (DPd)과 조합된 예시적인 항-BCMA CAR T 세포 요법의 투여를 기재한다. 항-BCMA CAR은 항-BCMA scFv 항원-결합 도메인 (예를 들어, 서열식별번호: 68에 제시됨), CD3제타 신호전달 도메인, 및 4-1BB 공동자극 신호전달 도메인을 함유한다 (예시적인 CAR의 서열은 서열식별번호: 152에 제시됨). T 세포 요법은 대상체로부터 수득된 자가 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함하며, 이는 이어서 CAR을 발현하도록 조작된다. 시험되는 조합 작용제는 항-BCMA CAR T 세포 주입 전에, 그와 공동으로, 및/또는 그 후에 (즉, 유지) 투여된다.
DPd 요법과 조합된 항-BCMA CAR T 세포를 시험하기 위해, 항-BCMA CAR T 세포 요법을 450 x 106개 CAR+ T 세포의 표적 용량으로 투여한다. DARA, POM 및 덱사메타손을 질환 진행까지 M3D1에 투여한다.
본 연구의 대상체는 (a) M-단백질 (혈청 단백질 전기영동 [sPEP] 또는 뇨 단백질 전기영동 [uPEP]): sPEP ≥ 0.5 g/dL 또는 uPEP ≥ 200 mg/24시간; 및/또는 (b) 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM: 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL (100 mg/L) 및 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비로 정의되는, MM 및 측정가능한 질환으로 문서적으로 진단되었다.
대상체는 적어도 1종, 그러나 3종 이하의 선행 MM 요법을 제공받았다. 이들 대상체는 적어도 2회의 연속 주기 동안 면역조정제로의 선행 치료를 제공받았다.
대상체는 조합 치료 전에 마지막 항골수종 요법으로의 치료 동안 또는 치료 완료의 6개월 내에 (요법 내의 임의의 약물의 마지막 용량으로부터 측정됨) 진행성 질환의 증거를 나타내었다. 대상체는 적어도 1종의 선행 치료 요법에 대해 반응 (최소 반응 또는 보다 양호한 반응)을 달성하였다. 대상체는 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1이다.
대상체는 비-분비성 MM, 또는 활성 형질 세포 백혈병, 발덴스트롬 마크로불린혈증, POEMS 증후군 (다발신경병증, 기관비대, 내분비병증, 모노클로날 단백질, 및 피부 변화) 또는 아밀로이드증의 병력을 갖지 않는다. 대상체는 하기 실험실 이상 중 어떠한 것도 갖지 않는다: (a) 특정 역치 미만의 ANC 및 혈소판 계수; (b) 헤모글로빈 < 8 g/dL (< 4.9 mmol/L) (스크리닝의 21일 내에 수혈은 허용되지 않음); (c) 특정 역치 미만의 크레아티닌 클리어런스 (CrCl); (d) 보정된 혈청 칼슘 > 13.5 mg/dL (> 3.4 mmol/L); (e) 혈청 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) > 2.5 x 정상 상한치 (ULN); (f) 문서화된 길버트 증후군을 갖는 참가자의 경우 혈청 총 빌리루빈 > 1.5 x ULN 또는 > 3.0 mg/dL; 및 (g) 국제 정규화 비 (INR) 또는 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) 1.5 x ULN, 또는 30일 내에 등급 ≥ 2 출혈의 병력, 또는 참가자가 항응고제 (예를 들어, 와파린, 저분자량 헤파린, 인자 Xa 억제제)의 만성, 치료적 투여를 사용한 계속적인 치료를 필요로 함. 대상체는 실내 공기 중 산소 포화 (SaO2) < 92%로 정의되는 부적절한 폐 기능을 갖지 않는다. 대상체는 1초간 강제 호기량 (FEV1)이 예측 정상치의 50%인 공지된 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD)을 갖지 않는다.
대상체는 그의 가장 최근의 항골수종 치료 요법의 일부로서 덱사메타손의 존재 또는 부재 하에 POM과 조합된 DARA (DP±d)에 대한 사전 노출을 갖지 않았다. 대상체는 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 임의의 유전자 요법-기반 치료로의 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA 표적화 요법의 이전 이력을 갖지 않는다. 대상체는 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다.
실시예 3 재발성/불응성 다발성 골수종을 갖는 대상체에서 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손 (PVd)과 조합된 항-BCMA CAR T 세포의 투여
본 실시예는 보르테조밉 (BTZ) 및 저용량 덱사메타손과 조합된 포말리도미드 (POM)의 표준 삼중 요법 (PVd)과 조합된 예시적인 항-BCMA CAR T 세포 요법의 투여를 기재한다. 항-BCMA CAR은 항-BCMA scFv 항원-결합 도메인 (예를 들어, 서열식별번호: 68에 제시됨), CD3제타 신호전달 도메인, 및 4-1BB 공동자극 신호전달 도메인을 함유한다 (예시적인 CAR의 서열은 서열식별번호: 152에 제시됨). T 세포 요법은 대상체로부터 수득된 자가 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함하며, 이는 이어서 CAR을 발현하도록 조작된다. 시험되는 조합 작용제는 항-BCMA CAR T 세포 주입 전에, 그와 공동으로, 및/또는 그 후에 (즉, 유지) 투여된다.
PVd 요법과 조합된 항-BCMA CAR T 세포를 시험하기 위해, 항-BCMA CAR T 세포 요법을 450 x 106개 CAR+ T 세포의 표적 용량으로 투여한다. POM, BTZ 및 덱사메타손을 질환 진행까지 M3D1에 투여한다.
본 연구의 대상체는 (a) M-단백질 (혈청 단백질 전기영동 [sPEP] 또는 뇨 단백질 전기영동 [uPEP]): sPEP ≥ 0.5 g/dL 또는 uPEP ≥ 200 mg/24시간; 및/또는 (b) 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM: 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL (100 mg/L) 및 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비로 정의되는, MM 및 측정가능한 질환으로 문서적으로 진단되었다.
대상체는 적어도 1종, 그러나 3종 이하의 선행 MM 요법을 제공받았다. 이들 대상체는 적어도 2회의 연속 주기 동안 면역조정제로의 선행 치료를 제공받았다.
대상체는 조합 치료 전에 마지막 항골수종 요법으로의 치료 동안 또는 치료 완료의 6개월 내에 (요법 내의 임의의 약물의 마지막 용량으로부터 측정됨) 진행성 질환의 증거를 나타내었다. 대상체는 적어도 1종의 선행 치료 요법에 대해 반응 (최소 반응 또는 보다 양호한 반응)을 달성하였다. 대상체는 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1이다.
대상체는 비-분비성 MM, 또는 활성 형질 세포 백혈병, 발덴스트롬 마크로불린혈증, POEMS 증후군 (다발신경병증, 기관비대, 내분비병증, 모노클로날 단백질, 및 피부 변화) 또는 아밀로이드증의 병력을 갖지 않는다. 대상체는 하기 실험실 이상 중 어떠한 것도 갖지 않는다: (a) 특정 역치 미만의 ANC 및 혈소판 계수; (b) 헤모글로빈 < 8 g/dL (< 4.9 mmol/L) (스크리닝의 21일 내에 수혈은 허용되지 않음); (c) 특정 역치 미만의 크레아티닌 클리어런스 (CrCl); (d) 보정된 혈청 칼슘 > 13.5 mg/dL (> 3.4 mmol/L); (e) 혈청 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) > 2.5 x 정상 상한치 (ULN); (f) 문서화된 길버트 증후군을 갖는 참가자의 경우 혈청 총 빌리루빈 > 1.5 x ULN 또는 > 3.0 mg/dL; 및 (g) 국제 정규화 비 (INR) 또는 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) 1.5 x ULN, 또는 30일 내에 등급 ≥ 2 출혈의 병력, 또는 참가자가 항응고제 (예를 들어, 와파린, 저분자량 헤파린, 인자 Xa 억제제)의 만성, 치료적 투여를 사용한 계속적인 치료를 필요로 함. 대상체는 실내 공기 중 산소 포화 (SaO2) < 92%로 정의되는 부적절한 폐 기능을 갖지 않는다. 대상체는 1초간 강제 호기량 (FEV1)이 예측 정상치의 50%인 공지된 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD)을 갖지 않는다.
대상체는 그의 가장 최근의 항골수종 치료 요법의 일부로서 덱사메타손의 존재 또는 부재 하에 BTZ와 조합된 POM (PV± d)에 대한 사전 노출을 갖지 않았다. 대상체는 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 임의의 유전자 요법-기반 치료로의 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA 표적화 요법의 이전 이력을 갖지 않는다. 대상체는 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않았다.
본 발명은 범위가, 예를 들어 본 발명의 다양한 측면을 예시하기 위해 제공된 특정한 개시된 실시양태로 제한되는 것으로 의도되지 않는다. 기재된 조성물 및 방법에 대한 다양한 변형은 본원의 설명 및 교시로부터 명백해질 것이다. 이러한 변형은 본 개시내용의 진정한 범주 및 취지로부터 벗어나지 않으면서 실시될 수 있고, 본 개시내용의 범주 내에 속하는 것으로 의도된다.
서열
SEQUENCE LISTING <110> Juno Therapeutics, Inc. Celgene Corporation <120> COMBINATION THERAPIES WITH BCMA-DIRECTED T CELL THERAPY <130> 735042025340 <140> Not Yet Assigned <141> Concurrently Herewith <150> US 63/176,196 <151> 2021-04-16 <160> 183 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> spacer (IgG4hinge) <400> 1 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 <210> 2 <211> 36 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <223> spacer (IgG4hinge) <400> 2 gaatctaagt acggaccgcc ctgcccccct tgccct 36 <210> 3 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Hinge-CH3 spacer <400> 3 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Gly Gln Pro Arg 1 5 10 15 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 20 25 30 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 35 40 45 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 50 55 60 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 65 70 75 80 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 85 90 95 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 100 105 110 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 115 <210> 4 <211> 229 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Hinge-CH2-CH3 spacer <400> 4 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe 1 5 10 15 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 20 25 30 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 35 40 45 Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 50 55 60 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser 65 70 75 80 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 85 90 95 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser 100 105 110 Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 115 120 125 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 130 135 140 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 145 150 155 160 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 165 170 175 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu 180 185 190 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 195 200 205 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 210 215 220 Leu Ser Leu Gly Lys 225 <210> 5 <211> 282 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> IgD-hinge-Fc <400> 5 Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro Thr Ala 1 5 10 15 Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala Pro Ala 20 25 30 Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys Glu Lys 35 40 45 Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu Cys Pro 50 55 60 Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala Val Gln 65 70 75 80 Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val Val Gly 85 90 95 Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly Lys Val 100 105 110 Pro Thr Gly Gly Val Glu Glu Gly Leu Leu Glu Arg His Ser Asn Gly 115 120 125 Ser Gln Ser Gln His Ser Arg Leu Thr Leu Pro Arg Ser Leu Trp Asn 130 135 140 Ala Gly Thr Ser Val Thr Cys Thr Leu Asn His Pro Ser Leu Pro Pro 145 150 155 160 Gln Arg Leu Met Ala Leu Arg Glu Pro Ala Ala Gln Ala Pro Val Lys 165 170 175 Leu Ser Leu Asn Leu Leu Ala Ser Ser Asp Pro Pro Glu Ala Ala Ser 180 185 190 Trp Leu Leu Cys Glu Val Ser Gly Phe Ser Pro Pro Asn Ile Leu Leu 195 200 205 Met Trp Leu Glu Asp Gln Arg Glu Val Asn Thr Ser Gly Phe Ala Pro 210 215 220 Ala Arg Pro Pro Pro Gln Pro Gly Ser Thr Thr Phe Trp Ala Trp Ser 225 230 235 240 Val Leu Arg Val Pro Ala Pro Pro Ser Pro Gln Pro Ala Thr Tyr Thr 245 250 255 Cys Val Val Ser His Glu Asp Ser Arg Thr Leu Leu Asn Ala Ser Arg 260 265 270 Ser Leu Glu Val Ser Tyr Val Thr Asp His 275 280 <210> 6 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> T2A <400> 6 Leu Glu Gly Gly Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp 1 5 10 15 Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Arg 20 <210> 7 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> tEGFR <400> 7 Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu 1 5 10 15 Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile 20 25 30 Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe 35 40 45 Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr 50 55 60 Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn 65 70 75 80 Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg 85 90 95 Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile 100 105 110 Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val 115 120 125 Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp 130 135 140 Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn 145 150 155 160 Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu 165 170 175 Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser 180 185 190 Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu 195 200 205 Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln 210 215 220 Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly 225 230 235 240 Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro 245 250 255 His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr 260 265 270 Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His 275 280 285 Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro 290 295 300 Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala 305 310 315 320 Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met 325 330 335 <210> 8 <211> 27 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD28 (amino acids 153-179 of Accession No. P10747) <400> 8 Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu 1 5 10 15 Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 20 25 <210> 9 <211> 66 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD28 (amino acids 114-179 of Accession No. P10747) <400> 9 Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn 1 5 10 15 Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu 20 25 30 Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly 35 40 45 Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe 50 55 60 Trp Val 65 <210> 10 <211> 41 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD28 (amino acids 180-220 of P10747) <400> 10 Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 1 5 10 15 Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 20 25 30 Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser 35 40 <210> 11 <211> 41 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD28 (LL to GG) <400> 11 Arg Ser Lys Arg Ser Arg Gly Gly His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 1 5 10 15 Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 20 25 30 Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser 35 40 <210> 12 <211> 42 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> 4-1BB (amino acids 214-255 of Q07011.1) <400> 12 Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met 1 5 10 15 Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe 20 25 30 Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 35 40 <210> 13 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD3 zeta <400> 13 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly 1 5 10 15 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 50 55 60 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 65 70 75 80 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 100 105 110 <210> 14 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD3 zeta <400> 14 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln Gly 1 5 10 15 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 50 55 60 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 65 70 75 80 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 100 105 110 <210> 15 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CD3 zeta <400> 15 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly 1 5 10 15 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 50 55 60 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 65 70 75 80 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 100 105 110 <210> 16 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <220> <221> REPEAT <222> (5)...(9) <223> SGGGG is repeated 5 times <400> 16 Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Pro 1 5 10 <210> 17 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 17 Gly Ser Ala Asp Asp Ala Lys Lys Asp Ala Ala Lys Lys Asp Gly Lys 1 5 10 15 Ser <210> 18 <211> 54 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Extracellular domain of human BCMA (GenBank No. NP_001183.2) <400> 18 Met Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser 1 5 10 15 Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr 20 25 30 Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser 35 40 45 Val Lys Gly Thr Asn Ala 50 <210> 19 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 19 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 20 <211> 231 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Modified Human IgG1 Fc <400> 20 Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 1 5 10 15 Glu Ala Glu Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 25 30 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 40 45 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 55 60 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 75 80 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 90 95 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 100 105 110 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 115 120 125 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 130 135 140 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 145 150 155 160 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 165 170 175 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 180 185 190 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 195 200 205 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 210 215 220 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 225 230 <210> 21 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD33 Signal peptide <400> 21 Met Pro Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Leu Trp Ala Gly Ala Leu Ala 1 5 10 15 <210> 22 <211> 306 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-Fc construct <400> 22 Met Pro Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Leu Trp Ala Gly Ala Leu Ala 1 5 10 15 Met Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser 20 25 30 Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr 35 40 45 Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser 50 55 60 Val Lys Gly Thr Asn Ala Gly Gly Gly Gly Ser Pro Lys Ser Ser Asp 65 70 75 80 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Glu Gly Ala 85 90 95 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 100 105 110 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 115 120 125 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 130 135 140 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 145 150 155 160 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 165 170 175 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ser Ser Ile Glu 180 185 190 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 195 200 205 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 210 215 220 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 225 230 235 240 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 245 250 255 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 260 265 270 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 275 280 285 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 290 295 300 Gly Lys 305 <210> 23 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> T2A <400> 23 Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro 1 5 10 15 Gly Pro <210> 24 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> P2A <400> 24 Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp Val 1 5 10 15 Glu Glu Asn Pro Gly Pro 20 <210> 25 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> P2A <400> 25 Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp Val Glu Glu Asn 1 5 10 15 Pro Gly Pro <210> 26 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> E2A <400> 26 Gln Cys Thr Asn Tyr Ala Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser 1 5 10 15 Asn Pro Gly Pro 20 <210> 27 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F2A <400> 27 Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val 1 5 10 15 Glu Ser Asn Pro Gly Pro 20 <210> 28 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> tEGFR <400> 28 Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu 1 5 10 15 Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile 20 25 30 Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe 35 40 45 Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr 50 55 60 Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn 65 70 75 80 Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg 85 90 95 Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile 100 105 110 Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val 115 120 125 Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp 130 135 140 Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn 145 150 155 160 Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu 165 170 175 Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser 180 185 190 Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu 195 200 205 Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln 210 215 220 Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly 225 230 235 240 Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro 245 250 255 His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr 260 265 270 Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His 275 280 285 Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro 290 295 300 Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala 305 310 315 320 Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met 325 330 335 <210> 29 <211> 228 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Hinge-CH2-CH3 spacer <400> 29 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val 1 5 10 15 Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 20 25 30 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 35 40 45 Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 50 55 60 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Gln Ser Thr 65 70 75 80 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 85 90 95 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser 100 105 110 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 115 120 125 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val 130 135 140 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 145 150 155 160 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 165 170 175 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr 180 185 190 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 195 200 205 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 210 215 220 Ser Leu Gly Lys 225 <210> 30 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 30 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 31 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 31 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu 20 25 30 Gly Ser His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 32 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 32 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Phe Lys Trp Met 35 40 45 Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Tyr Phe Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Val Glu Thr Ser Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Glu Ile Tyr Tyr Gly Tyr Asp Gly Gly Phe Ala Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 33 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 33 Asp Val Val Met Thr Gln Ser His Arg Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Phe Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys 100 105 <210> 34 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 34 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 35 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 35 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu 85 90 95 Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 36 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 36 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr 20 25 30 Tyr Val Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 37 <211> 105 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 37 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 <210> 38 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 38 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gly Tyr Ser Lys Ser Ile Val Ser Tyr Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 39 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 39 Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Thr Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Val Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Val Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val 35 40 45 Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Val Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 40 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 40 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu Asp Ser Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 41 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 41 Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Ala Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 42 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 42 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Ile Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Ser Asn Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Thr Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 43 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 43 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Phe Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser 85 90 95 Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 44 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a TM <400> 44 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 1 5 10 15 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn 20 25 <210> 45 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a TM <400> 45 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 1 5 10 15 Ser Leu Val Ile Thr 20 <210> 46 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linking Peptide <400> 46 Arg Ala Ala Ala 1 <210> 47 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 47 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Val Asp Gly Asp Tyr Thr Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 48 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 48 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Lys Tyr 20 25 30 Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln Pro Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Ile Ile Tyr Asp Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Gly Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Gly Gly Ser 85 90 95 Arg Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210> 49 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 49 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ile 65 70 75 80 Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Ala Trp Ser Ala Pro Thr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 50 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 50 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Val Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly 50 55 60 Thr Gly Tyr Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile Asp Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Thr Ser Arg Gln 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Arg Leu Asp Ile Lys 100 105 <210> 51 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 51 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Val Asp Gly Pro Pro Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 52 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 52 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Met Leu Val Val Tyr 35 40 45 Asp Asp Asp Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Ala Gly 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys His Leu Trp Asp Arg Ser Arg Asp His 85 90 95 Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 53 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 53 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gly Tyr Ser Lys Ser Ile Val Ser Tyr Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 54 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 54 Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Thr Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Val Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Val Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val 35 40 45 Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Val Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 55 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 55 Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Arg Ala Ser Gly Gly Gly Gly 1 5 10 15 Ser <210> 56 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-H1 (aa) - Kabat numbering <400> 56 Asp Tyr Tyr Val Tyr 1 5 <210> 57 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-H2 (aa) - Kabat numbering <400> 57 Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 58 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-H3 (aa) - Kabat, Chothia, and AbM numbering <400> 58 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr 1 5 <210> 59 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-L1 (aa) - Kabat, Chothia, and AbM numbering <400> 59 Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly 1 5 <210> 60 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-L2 (aa) - Kabat, Chothia, and AbM numbering <400> 60 Glu Asp Ser Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 61 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 CDR-L3 (aa) - Kabat, Chothia, and AbM numbering <400> 61 Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val 1 5 10 <210> 62 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H1 <400> 62 Asp Tyr Ser Ile Asn 1 5 <210> 63 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H2 <400> 63 Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe Arg 1 5 10 15 Gly <210> 64 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H3 <400> 64 Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 65 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L1 <400> 65 Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu Gly Ser His Leu Ile His 1 5 10 15 <210> 66 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L2 <400> 66 Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr 1 5 <210> 67 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L3 <400> 67 Leu Gln Ser Arg Thr Ile Pro Arg Thr 1 5 <210> 68 <211> 246 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> scFv <400> 68 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu 20 25 30 Gly Ser His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe 210 215 220 Cys Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Ser Val Thr Val Ser Ser 245 <210> 69 <211> 1962 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 69 cagtctgccc tgacacagcc tgccagcgtt agtgctagtc ccggacagtc tatcgccatc 60 agctgtaccg gcaccagctc tgacgttggc tggtatcagc agcaccctgg caaggcccct 120 aagctgatga tctacgagga cagcaagagg cccagcggcg tgtccaatag attcagcggc 180 agcaagagcg gcaacaccgc cagcctgaca attagcggac tgcaggccga ggacgaggcc 240 gattactact gcagcagcaa cacccggtcc agcacactgg tttttggcgg aggcaccaag 300 ctgacagtgc tgggatctag aggtggcgga ggatctggcg gcggaggaag cggaggcggc 360 ggatctcttg aaatggctga agtgcagctg gtgcagtctg gcgccgagat gaagaaacct 420 ggcgcctctc tgaagctgag ctgcaaggcc agcggctaca ccttcatcga ctactacgtg 480 tactggatgc ggcaggcccc tggacaggga ctcgaatcta tgggctggat caaccccaat 540 agcggcggca ccaattacgc ccagaaattc cagggcagag tgaccatgac cagagacacc 600 agcatcagca ccgcctacat ggaactgagc cggctgagat ccgacgacac cgccatgtac 660 tactgcgcca gatctcagcg cgacggctac atggattatt ggggccaggg aaccctggtc 720 accgtgtcca gcgagtctaa atacggaccg ccttgtcctc cttgtcccgc tcctcctgtt 780 gccggacctt ccgtgttcct gtttcctcca aagcctaagg acaccctgat gatcagcagg 840 acccctgaag tgacctgcgt ggtggtggat gtgtcccaag aggatcccga ggtgcagttc 900 aactggtatg tggacggcgt ggaagtgcac aacgccaaga ccaagcctag agaggaacag 960 ttccagagca cctacagagt ggtgtccgtg ctgacagtgc tgcaccagga ttggctgaac 1020 ggcaaagagt acaagtgcaa ggtgtccaac aagggcctgc ctagcagcat cgagaaaacc 1080 atctccaagg ccaagggcca gccaagagag ccccaggttt acacactgcc tccaagccaa 1140 gaggaaatga ccaagaatca ggtgtccctg acatgcctgg tcaagggctt ctacccctcc 1200 gatatcgccg tggaatggga gagcaatggc cagcctgaga acaactacaa gaccacacct 1260 cctgtgctgg acagcgacgg cagtttcttc ctgtatagta gactcaccgt ggataaatca 1320 agatggcaag agggcaacgt gttcagctgc agcgtgatgc acgaggccct gcacaaccac 1380 tacacccaga aaagcctgag cctgtctctg ggcaagatgt tctgggtgct cgtggtcgtt 1440 ggcggagtgc tggcctgtta cagcctgctg gttaccgtgg ccttcatcat cttttgggtc 1500 aagcggggca gaaagaagct gctctacatc ttcaagcagc ccttcatgcg gcccgtgcag 1560 accacacaag aggaagatgg ctgctcctgc agattccccg aggaagaaga aggcggctgc 1620 gagctgagag tgaagttcag cagatccgcc gacgctccag cctatcagca gggccaaaac 1680 cagctgtaca acgagctgaa cctggggaga agagaagagt acgacgtgct ggataagcgg 1740 agaggcagag atcctgaaat gggcggcaag cccagacgga agaatcctca agagggcctg 1800 tataatgagc tgcagaaaga caagatggcc gaggcctaca gcgagatcgg aatgaagggc 1860 gagcgcagaa gaggcaaggg acacgatgga ctgtaccagg gcctgagcac cgccaccaag 1920 gatacctatg acgcactgca catgcaggcc ctgccaccta ga 1962 <210> 70 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 70 Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr 1 5 10 15 Lys Gly <210> 71 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 71 Gly Gly Gly Ser 1 <210> 72 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 72 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 73 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 73 Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr 1 5 10 15 Lys Gly <210> 74 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 74 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Glu Met Ala 20 <210> 75 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a signal peptide <400> 75 Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 His Ala Ala Arg Pro 20 <210> 76 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> signal peptide <400> 76 Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 1 5 10 15 Gly Ser Thr Gly 20 <210> 77 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 77 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 78 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 78 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 79 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 79 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu Trp 100 105 110 Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 80 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 80 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Leu Gly Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 81 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 81 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 82 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 82 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 83 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 83 Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser 20 25 30 Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe Asp Ile Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 84 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 84 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg His Val Trp Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 85 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 85 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 86 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 86 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 87 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 87 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 88 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 88 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 89 <211> 126 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 89 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp His Tyr Tyr Tyr Gly 100 105 110 Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 90 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 90 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 91 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 91 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly Met Asp Val 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 92 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 92 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His His Val Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 93 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 93 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp Ser Glu Asp Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 94 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 94 Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Arg Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Pro Gly Val Pro Val Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu 85 90 95 Asn Val His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 <210> 95 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 95 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 96 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 96 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Val Ile 20 25 30 Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ala Glu Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 97 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 97 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 98 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 98 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 99 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 99 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gly Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Arg Ser Gly Glu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Pro Ala His Tyr Tyr Gly Gly Met Asp Val Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 100 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 100 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Ser 20 25 30 Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Ser Ser Pro 85 90 95 Ser Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 101 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 101 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 102 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 102 Asp Ile Arg Leu Thr Gln Ser Pro Ser Pro Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asp Ile Asn Lys Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr His Gln Thr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Gln Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Glu Ser Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 103 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 103 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 104 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 104 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Ser 20 25 30 Ser Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Met Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Gly Ser Pro 85 90 95 Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 105 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 105 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Arg His Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Thr Glu Ser Gly Val Pro Ile Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Val Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Val Ile Asn Asn Leu Lys Asp Glu Asp Thr Ala Ser Tyr Phe Cys 85 90 95 Ser Asn Asp Tyr Leu Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Ala 100 105 110 Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 106 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 106 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu 20 25 30 Gly Ser His Leu Ile Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 107 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 107 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr His Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Leu Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Val Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Phe Phe Cys 85 90 95 Ser Asn Asp Tyr Leu Tyr Ser Cys Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 108 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 108 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Val Ile 20 25 30 Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Ile Tyr Ser Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 109 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 109 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 110 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 110 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Ser Ile Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 111 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable heavy (VH) Anti-BCMA <400> 111 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 112 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Variable light (VL) Anti-BCMA <400> 112 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Glu Thr 85 90 95 Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 113 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-BCMA sdAb <400> 113 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asp Tyr Tyr 20 25 30 Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val 35 40 45 Ile Cys Ile Ser Arg Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ile Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Gly Ala Asp Cys Ser Gly Tyr Leu Arg Asp Tyr Glu Phe Arg 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 114 <211> 39 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD28 spacer <400> 114 Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn 1 5 10 15 Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu 20 25 30 Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro 35 <210> 115 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a TM <400> 115 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 1 5 10 15 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn 20 25 <210> 116 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD28 spacer (truncated) <400> 116 Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys 1 5 10 15 His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro 20 25 30 <210> 117 <211> 46 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a hinge <400> 117 Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile 1 5 10 15 Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala 20 25 30 Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 35 40 45 <210> 118 <211> 45 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a hinge <400> 118 Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala 1 5 10 15 Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly 20 25 30 Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 35 40 45 <210> 119 <211> 55 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8a hinge <400> 119 Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro 1 5 10 15 Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu 20 25 30 Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg 35 40 45 Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 50 55 <210> 120 <211> 39 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CTLA4 hinge <400> 120 Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro 1 5 10 15 Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn Gly Thr Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro 20 25 30 Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp 35 <210> 121 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CTLA4 TM <400> 121 Phe Leu Leu Trp Ile Leu Ala Ala Val Ser Ser Gly Leu Phe Phe Tyr 1 5 10 15 Ser Phe Leu Leu Thr Ala Val Ser 20 <210> 122 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> PD-1 hinge <400> 122 Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg 1 5 10 15 Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly 20 25 30 Gln Phe Gln Thr Leu Val 35 <210> 123 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> PD-1 TM <400> 123 Val Gly Val Val Gly Gly Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp 1 5 10 15 Val Leu Ala Val Ile 20 <210> 124 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FcgRIIIa hinge <400> 124 Gly Leu Ala Val Ser Thr Ile Ser Ser Phe Phe Pro Pro Gly Tyr Gln 1 5 10 15 <210> 125 <211> 231 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> IgG1 hinge <400> 125 Glu Pro Lys Ser Pro Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 10 15 Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 25 30 Asp Thr Leu Met Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 40 45 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 55 60 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 75 80 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 90 95 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 100 105 110 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 115 120 125 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 130 135 140 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 145 150 155 160 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 165 170 175 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 180 185 190 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 195 200 205 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 210 215 220 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 225 230 <210> 126 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 126 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly 115 120 125 Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro 130 135 140 Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg 145 150 155 160 Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175 Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr 180 185 190 Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 195 200 205 Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 210 215 220 Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 225 230 235 240 Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr 245 250 255 Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro 260 265 270 Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu 275 280 285 Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 290 295 300 Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 305 310 315 320 Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 325 330 335 Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 340 345 350 Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu 355 360 365 Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 370 375 380 Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln 385 390 395 400 Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 405 410 415 Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 420 425 430 Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala 435 440 445 Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 <210> 127 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 127 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser 100 105 110 Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val 115 120 125 Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu 130 135 140 Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met 145 150 155 160 Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala 165 170 175 Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 180 185 190 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 195 200 205 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr 245 250 255 Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro 260 265 270 Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu 275 280 285 Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 290 295 300 Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 305 310 315 320 Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 325 330 335 Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 340 345 350 Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu 355 360 365 Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 370 375 380 Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln 385 390 395 400 Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 405 410 415 Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 420 425 430 Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala 435 440 445 Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 <210> 128 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 128 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu Trp 100 105 110 Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser 115 120 125 Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Asp Ile Val Met 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser 145 150 155 160 Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn 165 170 175 Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu 180 185 190 Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 195 200 205 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu 210 215 220 Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly Leu Gly Leu Pro 225 230 235 240 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala 245 250 255 Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys 260 265 270 His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp 275 280 285 Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val 290 295 300 Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 305 310 315 320 Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 325 330 335 Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 340 345 350 Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 129 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 129 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Leu Gly Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 130 135 140 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 145 150 155 160 Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 165 170 175 Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala 180 185 190 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 195 200 205 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp Tyr Phe 225 230 235 240 Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala 245 250 255 Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys 260 265 270 His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp 275 280 285 Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val 290 295 300 Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 305 310 315 320 Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 325 330 335 Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 340 345 350 Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 130 <211> 454 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 130 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly 115 120 125 Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr 130 135 140 Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser 145 150 155 160 Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 165 170 175 Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile 180 185 190 Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 195 200 205 Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 210 215 220 Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 225 230 235 240 Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His 245 250 255 Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser 260 265 270 Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr 275 280 285 Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys 290 295 300 Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg 305 310 315 320 Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp 325 330 335 Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala 340 345 350 Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu 355 360 365 Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp 370 375 380 Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu 385 390 395 400 Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile 405 410 415 Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr 420 425 430 Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met 435 440 445 Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 <210> 131 <211> 454 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 131 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser Gly 100 105 110 Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Val Gln 115 120 125 Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys 130 135 140 Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His 145 150 155 160 Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile 165 170 175 Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg 180 185 190 Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu 195 200 205 Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu 210 215 220 Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 225 230 235 240 Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His 245 250 255 Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser 260 265 270 Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr 275 280 285 Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys 290 295 300 Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg 305 310 315 320 Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp 325 330 335 Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala 340 345 350 Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu 355 360 365 Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp 370 375 380 Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu 385 390 395 400 Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile 405 410 415 Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr 420 425 430 Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met 435 440 445 Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 <210> 132 <211> 461 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 132 Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser 20 25 30 Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe Asp Ile Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser 115 120 125 Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val Leu 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr 145 150 155 160 Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr 165 170 175 Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser 180 185 190 Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg His Val Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gly 225 230 235 240 Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys 245 250 255 Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser 260 265 270 Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val 275 280 285 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 290 295 300 Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 305 310 315 320 Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 325 330 335 Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 340 345 350 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 355 360 365 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 370 375 380 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 385 390 395 400 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 405 410 415 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 420 425 430 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 435 440 445 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 133 <211> 461 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 133 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg His Val Trp Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser 100 105 110 Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Leu 115 120 125 Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu 130 135 140 Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser Ser Tyr 145 150 155 160 Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 165 170 175 Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 180 185 190 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 195 200 205 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 210 215 220 Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys 245 250 255 Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser 260 265 270 Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val 275 280 285 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 290 295 300 Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 305 310 315 320 Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 325 330 335 Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 340 345 350 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 355 360 365 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 370 375 380 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 385 390 395 400 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 405 410 415 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 420 425 430 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 435 440 445 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 134 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 134 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro 115 120 125 Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser 130 135 140 Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 145 150 155 160 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175 Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala 180 185 190 Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 195 200 205 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr 210 215 220 Cys Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240 Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 245 250 255 Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 260 265 270 Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 275 280 285 Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 290 295 300 Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met 305 310 315 320 Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 325 330 335 Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 340 345 350 Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 355 360 365 Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 370 375 380 Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 385 390 395 400 Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 405 410 415 Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 420 425 430 Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 435 440 445 Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 <210> 135 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 135 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser 100 105 110 Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu 130 135 140 Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met 145 150 155 160 Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Thr 165 170 175 Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 180 185 190 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln 195 200 205 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 225 230 235 240 Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 245 250 255 Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 260 265 270 Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 275 280 285 Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 290 295 300 Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met 305 310 315 320 Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 325 330 335 Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 340 345 350 Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 355 360 365 Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 370 375 380 Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 385 390 395 400 Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 405 410 415 Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 420 425 430 Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 435 440 445 Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 <210> 136 <211> 461 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 136 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser 115 120 125 Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Asp Ile Gln Leu 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr 145 150 155 160 Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala Trp Tyr 165 170 175 Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser 180 185 190 Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala 210 215 220 Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro Phe Thr Phe Gly Gly 225 230 235 240 Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys 245 250 255 Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser 260 265 270 Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val 275 280 285 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 290 295 300 Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 305 310 315 320 Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 325 330 335 Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 340 345 350 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 355 360 365 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 370 375 380 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 385 390 395 400 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 405 410 415 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 420 425 430 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 435 440 445 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 137 <211> 461 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 137 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser 100 105 110 Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Val 115 120 125 Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu 130 135 140 Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met 145 150 155 160 His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val 165 170 175 Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 180 185 190 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 195 200 205 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys 245 250 255 Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser 260 265 270 Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val 275 280 285 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 290 295 300 Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 305 310 315 320 Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 325 330 335 Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 340 345 350 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 355 360 365 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 370 375 380 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 385 390 395 400 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 405 410 415 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 420 425 430 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 435 440 445 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 138 <211> 471 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 138 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp His Tyr Tyr Tyr Gly 100 105 110 Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Ser 115 120 125 Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 145 150 155 160 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 165 170 175 Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 180 185 190 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 195 200 205 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 210 215 220 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 225 230 235 240 Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 245 250 255 Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile 260 265 270 His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro 275 280 285 Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys 290 295 300 Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser 305 310 315 320 Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg 325 330 335 Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg 340 345 350 Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp 355 360 365 Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn 370 375 380 Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg 385 390 395 400 Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly 405 410 415 Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu 420 425 430 Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu 435 440 445 Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His 450 455 460 Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 139 <211> 471 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 139 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly 115 120 125 Ser Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr 145 150 155 160 Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr 180 185 190 Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp His 225 230 235 240 Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 245 250 255 Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile 260 265 270 His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro 275 280 285 Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys 290 295 300 Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser 305 310 315 320 Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg 325 330 335 Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg 340 345 350 Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp 355 360 365 Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn 370 375 380 Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg 385 390 395 400 Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly 405 410 415 Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu 420 425 430 Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu 435 440 445 Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His 450 455 460 Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 140 <211> 462 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 140 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly Met Asp Val 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly 115 120 125 Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val 130 135 140 Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala 145 150 155 160 Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp 165 170 175 Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Ser Ala 180 185 190 Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 195 200 205 Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His His Val Trp Pro Leu Thr Phe Gly 225 230 235 240 Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu 245 250 255 Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro 260 265 270 Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val 275 280 285 Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe 290 295 300 Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 305 310 315 320 Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 325 330 335 Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 340 345 350 Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 355 360 365 Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380 Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 385 390 395 400 Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415 Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430 Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445 Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 141 <211> 462 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 141 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His His Val Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser 100 105 110 Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Val 115 120 125 Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu 130 135 140 Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met 145 150 155 160 His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val 165 170 175 Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 180 185 190 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 195 200 205 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Lys 210 215 220 Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 225 230 235 240 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu 245 250 255 Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro 260 265 270 Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val 275 280 285 Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe 290 295 300 Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 305 310 315 320 Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 325 330 335 Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 340 345 350 Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 355 360 365 Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380 Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 385 390 395 400 Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415 Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430 Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445 Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 142 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 142 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu 130 135 140 Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val 145 150 155 160 Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp 165 170 175 Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 180 185 190 Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu 195 200 205 Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr 245 250 255 Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys 260 265 270 His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp 275 280 285 Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val 290 295 300 Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 305 310 315 320 Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 325 330 335 Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 340 345 350 Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 143 <211> 473 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 143 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Phe Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser 85 90 95 Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 145 150 155 160 Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Arg Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Ile Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser 195 200 205 Ser Asn Thr Gly Tyr Met Glu Leu Thr Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys 225 230 235 240 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu 245 250 255 Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr 260 265 270 Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro 275 280 285 Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu 290 295 300 Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 305 310 315 320 Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 325 330 335 Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 340 345 350 Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 355 360 365 Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu 370 375 380 Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 385 390 395 400 Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln 405 410 415 Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 420 425 430 Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 435 440 445 Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala 450 455 460 Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 144 <211> 470 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 144 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu 85 90 95 Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser 100 105 110 Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser 145 150 155 160 Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr 180 185 190 Ser Pro Ser Phe Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala 210 215 220 Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr 245 250 255 Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His 260 265 270 Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser 275 280 285 Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr 290 295 300 Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys 305 310 315 320 Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg 325 330 335 Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp 340 345 350 Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala 355 360 365 Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu 370 375 380 Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp 385 390 395 400 Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu 405 410 415 Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile 420 425 430 Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr 435 440 445 Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met 450 455 460 Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 145 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 145 Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Arg Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Pro Gly Val Pro Val Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu 85 90 95 Asn Val His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly 145 150 155 160 Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser 195 200 205 Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp 225 230 235 240 Ser Glu Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala 245 250 255 Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser 260 265 270 Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro 275 280 285 Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly 290 295 300 Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile 305 310 315 320 Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met 325 330 335 Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro 340 345 350 Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe 355 360 365 Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu 370 375 380 Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp 385 390 395 400 Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys 405 410 415 Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala 420 425 430 Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys 435 440 445 Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr 450 455 460 Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 475 <210> 146 <211> 475 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 146 Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Ala Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly 145 150 155 160 Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser 195 200 205 Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu 225 230 235 240 Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala 245 250 255 Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn 260 265 270 Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu 275 280 285 Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly 290 295 300 Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe 305 310 315 320 Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn 325 330 335 Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr 340 345 350 Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser 355 360 365 Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr 370 375 380 Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys 385 390 395 400 Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn 405 410 415 Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu 420 425 430 Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly 435 440 445 His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr 450 455 460 Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 475 <210> 147 <211> 482 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 147 Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Arg Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Pro Gly Val Pro Val Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu 85 90 95 Asn Val His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly 145 150 155 160 Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser 195 200 205 Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp 225 230 235 240 Ser Glu Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala 245 250 255 Ala Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr 260 265 270 Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala 275 280 285 Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile 290 295 300 Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser 305 310 315 320 Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 325 330 335 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 340 345 350 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 355 360 365 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln 370 375 380 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 385 390 395 400 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 405 410 415 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 420 425 430 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 435 440 445 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 450 455 460 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 465 470 475 480 Pro Arg <210> 148 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 148 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu 85 90 95 Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser 100 105 110 Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser 145 150 155 160 Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr 180 185 190 Ser Pro Ser Phe Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala 210 215 220 Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Pro Thr Thr Thr Pro 245 250 255 Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu 260 265 270 Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His 275 280 285 Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu 290 295 300 Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr 305 310 315 320 Cys Asn Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro 325 330 335 Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys 340 345 350 Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe 355 360 365 Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu 370 375 380 Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp 385 390 395 400 Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys 405 410 415 Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala 420 425 430 Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys 435 440 445 Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr 450 455 460 Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 475 <210> 149 <211> 481 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 149 Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Ala Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly 145 150 155 160 Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser 195 200 205 Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu 225 230 235 240 Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala 245 250 255 Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile 260 265 270 Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala 275 280 285 Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr 290 295 300 Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu 305 310 315 320 Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr 325 330 335 Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu 340 345 350 Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu 355 360 365 Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln 370 375 380 Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu 385 390 395 400 Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly 405 410 415 Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln 420 425 430 Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu 435 440 445 Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr 450 455 460 Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro 465 470 475 480 Arg <210> 150 <211> 479 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 150 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Phe Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser 85 90 95 Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 130 135 140 Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 145 150 155 160 Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln 165 170 175 Arg Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn 180 185 190 Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Ile Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser 195 200 205 Ser Asn Thr Gly Tyr Met Glu Leu Thr Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr 210 215 220 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys 225 230 235 240 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Pro Thr 245 250 255 Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser 260 265 270 Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly 275 280 285 Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp 290 295 300 Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile 305 310 315 320 Thr Leu Tyr Cys Asn Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe 325 330 335 Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly 340 345 350 Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg 355 360 365 Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 370 375 380 Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp 385 390 395 400 Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 405 410 415 Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp 420 425 430 Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg 435 440 445 Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr 450 455 460 Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 475 <210> 151 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 151 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu 130 135 140 Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val 145 150 155 160 Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp 165 170 175 Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 180 185 190 Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu 195 200 205 Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro 245 250 255 Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro 260 265 270 Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu 275 280 285 Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys 290 295 300 Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn Lys Arg 305 310 315 320 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 325 330 335 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 340 345 350 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 355 360 365 Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 370 375 380 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 385 390 395 400 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 405 410 415 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 420 425 430 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 435 440 445 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 450 455 460 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 152 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 152 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu 20 25 30 Gly Ser His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe 210 215 220 Cys Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg 245 250 255 Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg 260 265 270 Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly 275 280 285 Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr 290 295 300 Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg 305 310 315 320 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 325 330 335 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 340 345 350 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 355 360 365 Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 370 375 380 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 385 390 395 400 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 405 410 415 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 420 425 430 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 435 440 445 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 450 455 460 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 153 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 153 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Val Ile 20 25 30 Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ala Glu Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 210 215 220 Cys Ala Arg Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg 245 250 255 Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg 260 265 270 Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly 275 280 285 Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr 290 295 300 Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg 305 310 315 320 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 325 330 335 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 340 345 350 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 355 360 365 Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 370 375 380 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 385 390 395 400 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 405 410 415 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 420 425 430 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 435 440 445 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 450 455 460 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 154 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 154 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Val Ile 20 25 30 Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ala Glu Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 210 215 220 Cys Ala Arg Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys 245 250 255 Lys Val Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn 260 265 270 Gly Thr Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp 275 280 285 Phe Leu Leu Trp Ile Leu Ala Ala Val Ser Ser Gly Leu Phe Phe Tyr 290 295 300 Ser Phe Leu Leu Thr Ala Val Ser Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 305 310 315 320 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 325 330 335 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 340 345 350 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 155 <211> 464 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 155 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Val Ile 20 25 30 Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ala Glu Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 210 215 220 Cys Ala Arg Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg 245 250 255 Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His 260 265 270 Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Val 275 280 285 Gly Val Val Gly Gly Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp Val 290 295 300 Leu Ala Val Ile Cys Ser Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile 305 310 315 320 Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp 325 330 335 Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 340 345 350 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly 355 360 365 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 370 375 380 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 385 390 395 400 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 405 410 415 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 420 425 430 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 435 440 445 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 156 <211> 653 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 156 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Val Asp Gly Asp Tyr Thr Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser 130 135 140 Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser 145 150 155 160 Asp Val Gly Lys Tyr Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln Pro Pro Gly 165 170 175 Lys Ala Pro Lys Leu Ile Ile Tyr Asp Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly 180 185 190 Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu 195 200 205 Thr Ile Ser Gly Leu Gln Gly Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser 210 215 220 Ser Tyr Gly Gly Ser Arg Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255 Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 260 265 270 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 275 280 285 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 290 295 300 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 305 310 315 320 Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 325 330 335 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 340 345 350 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 355 360 365 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 370 375 380 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 385 390 395 400 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 405 410 415 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 420 425 430 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 435 440 445 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 450 455 460 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly 465 470 475 480 Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile 485 490 495 Phe Trp Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln 500 505 510 Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser 515 520 525 Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys 530 535 540 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 545 550 555 560 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 565 570 575 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 580 585 590 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 595 600 605 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 610 615 620 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 625 630 635 640 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 <210> 157 <211> 650 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 157 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Phe Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ile 65 70 75 80 Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Ala Trp Ser Ala Pro Thr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu 130 135 140 Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Val Thr Cys Arg Ala Ser Gln 145 150 155 160 Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala 165 170 175 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro 180 185 190 Ser Arg Phe Arg Gly Thr Gly Tyr Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile 195 200 205 Asp Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser 210 215 220 Tyr Thr Ser Arg Gln Thr Phe Gly Pro Gly Thr Arg Leu Asp Ile Lys 225 230 235 240 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val 245 250 255 Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 260 265 270 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285 Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 290 295 300 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Gln Ser Thr 305 310 315 320 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 325 330 335 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser 340 345 350 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 355 360 365 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val 370 375 380 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 385 390 395 400 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 405 410 415 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr 420 425 430 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 435 440 445 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu 465 470 475 480 Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 485 490 495 Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met 500 505 510 Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe 515 520 525 Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg 530 535 540 Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 545 550 555 560 Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 565 570 575 Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 580 585 590 Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 595 600 605 Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 610 615 620 Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 625 630 635 640 Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 <210> 158 <211> 651 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 158 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Val Asp Gly Pro Pro Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser 130 135 140 Val Ala Pro Gly Gln Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Asn Asn Ile 145 150 155 160 Gly Ser Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 165 170 175 Met Leu Val Val Tyr Asp Asp Asp Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205 Gly Val Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys His Leu Trp Asp 210 215 220 Arg Ser Arg Asp His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val 225 230 235 240 Leu Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro 245 250 255 Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 260 265 270 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 275 280 285 Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 290 295 300 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Gln Ser 305 310 315 320 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 325 330 335 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser 340 345 350 Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 355 360 365 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 370 375 380 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 385 390 395 400 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 405 410 415 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu 420 425 430 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 435 440 445 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 450 455 460 Leu Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 465 470 475 480 Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 485 490 495 Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe 500 505 510 Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg 515 520 525 Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser 530 535 540 Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr 545 550 555 560 Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys 565 570 575 Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn 580 585 590 Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu 595 600 605 Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly 610 615 620 His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr 625 630 635 640 Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 <210> 159 <211> 658 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 159 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu 85 90 95 Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser 100 105 110 Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser 145 150 155 160 Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr 180 185 190 Ser Pro Ser Phe Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala 210 215 220 Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys 245 250 255 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 260 265 270 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 275 280 285 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 290 295 300 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 305 310 315 320 Arg Glu Glu Gln Phe Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 325 330 335 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 340 345 350 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 355 360 365 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln 370 375 380 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 385 390 395 400 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 405 410 415 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 420 425 430 Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu 435 440 445 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 450 455 460 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val 465 470 475 480 Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr 485 490 495 Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 500 505 510 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 515 520 525 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 530 535 540 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 545 550 555 560 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 565 570 575 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 580 585 590 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 595 600 605 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 610 615 620 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 625 630 635 640 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 645 650 655 Pro Arg <210> 160 <211> 654 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 160 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu 130 135 140 Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val 145 150 155 160 Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp 165 170 175 Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 180 185 190 Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu 195 200 205 Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 245 250 255 Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 305 310 315 320 Phe Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 340 345 350 Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val Leu Val Val Val 465 470 475 480 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 485 490 495 Ile Phe Trp Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys 500 505 510 Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys 515 520 525 Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val 530 535 540 Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 545 550 555 560 Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 565 570 575 Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 580 585 590 Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 595 600 605 Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 610 615 620 Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 625 630 635 640 Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 <210> 161 <211> 653 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 161 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu 130 135 140 Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val 145 150 155 160 Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp 165 170 175 Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 180 185 190 Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu 195 200 205 Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 245 250 255 Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 305 310 315 320 Phe Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 340 345 350 Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Met Phe Trp Val Leu Val Val Val 465 470 475 480 Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile 485 490 495 Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 500 505 510 Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 515 520 525 Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 530 535 540 Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 545 550 555 560 Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 565 570 575 Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 580 585 590 Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 595 600 605 Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 610 615 620 Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 625 630 635 640 Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 <210> 162 <211> 462 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 162 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Arg Ala Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 130 135 140 Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser 145 150 155 160 Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 165 170 175 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr 210 215 220 Ser Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr 225 230 235 240 Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser 245 250 255 Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly 260 265 270 Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp 275 280 285 Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile 290 295 300 Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys 305 310 315 320 Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys 325 330 335 Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val 340 345 350 Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn 355 360 365 Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380 Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 385 390 395 400 Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415 Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430 Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445 Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 163 <211> 469 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 163 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gly Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Arg Ser Gly Glu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Pro Ala His Tyr Tyr Gly Gly Met Asp Val Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Arg Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser 130 135 140 Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 145 150 155 160 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 165 170 175 Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Arg Arg 180 185 190 Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 195 200 205 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr 210 215 220 Tyr Cys Gln Gln Tyr His Ser Ser Pro Ser Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr 245 250 255 Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala 260 265 270 Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe 275 280 285 Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val 290 295 300 Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys 305 310 315 320 Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr 325 330 335 Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu 340 345 350 Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 355 360 365 Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 370 375 380 Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 385 390 395 400 Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr 405 410 415 Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 420 425 430 Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 435 440 445 Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 450 455 460 Ala Leu Pro Pro Arg 465 <210> 164 <211> 462 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 164 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Arg Ala Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Leu Thr Gln Ser Pro Ser Pro Leu Ser 130 135 140 Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asp 145 150 155 160 Ile Asn Lys Phe Leu Asn Trp Tyr His Gln Thr Pro Gly Lys Ala Pro 165 170 175 Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Gln Thr Gly Val Pro Ser 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 195 200 205 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Glu 210 215 220 Ser Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr 225 230 235 240 Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser 245 250 255 Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly 260 265 270 Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp 275 280 285 Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile 290 295 300 Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys 305 310 315 320 Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys 325 330 335 Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val 340 345 350 Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn 355 360 365 Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380 Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 385 390 395 400 Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415 Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430 Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445 Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 165 <211> 464 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 165 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ala Leu Ser Asn His 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Val Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Gly Gly Glu Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Arg Ala Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 145 150 155 160 Ile Gly Ser Ser Ser Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 165 170 175 Pro Arg Leu Leu Met Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Ile Pro 180 185 190 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 195 200 205 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 210 215 220 Ala Gly Ser Pro Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 225 230 235 240 Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile 245 250 255 Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala 260 265 270 Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr 275 280 285 Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu 290 295 300 Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile 305 310 315 320 Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp 325 330 335 Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 340 345 350 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly 355 360 365 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 370 375 380 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 385 390 395 400 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 405 410 415 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 420 425 430 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 435 440 445 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460 <210> 166 <211> 467 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 166 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Phe Lys Trp Met 35 40 45 Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Tyr Phe Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Val Glu Thr Ser Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Glu Ile Tyr Tyr Gly Tyr Asp Gly Gly Phe Ala Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Ser 130 135 140 His Arg Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys 145 150 155 160 Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175 Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Phe Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr 180 185 190 Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe 195 200 205 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr 210 215 220 Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240 Leu Asp Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala 245 250 255 Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg 260 265 270 Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys 275 280 285 Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu 290 295 300 Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu 305 310 315 320 Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln 325 330 335 Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly 340 345 350 Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 355 360 365 Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 370 375 380 Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met 385 390 395 400 Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 405 410 415 Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys 420 425 430 Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 435 440 445 Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu 450 455 460 Pro Pro Arg 465 <210> 167 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 167 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr 145 150 155 160 Phe Thr Asp Tyr Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly 165 170 175 Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr 180 185 190 Ala Tyr Asp Phe Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala 210 215 220 Thr Tyr Phe Cys Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly 225 230 235 240 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg 245 250 255 Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg 260 265 270 Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly 275 280 285 Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr 290 295 300 Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg 305 310 315 320 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 325 330 335 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 340 345 350 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 355 360 365 Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 370 375 380 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 385 390 395 400 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 405 410 415 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 420 425 430 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 435 440 445 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 450 455 460 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470 <210> 168 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 168 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala 130 135 140 Met Ser Leu Gly Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser 145 150 155 160 Val Ser Val Ile Gly Ala His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175 Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Thr 180 185 190 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 195 200 205 Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Ile Tyr Ser Cys 210 215 220 Leu Gln Ser Arg Ile Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 225 230 235 240 Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 245 250 255 Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro 260 265 270 Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 275 280 285 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 290 295 300 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 305 310 315 320 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 325 330 335 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 340 345 350 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 169 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 169 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Arg His Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Thr Glu Ser Gly Val Pro Ile Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Val Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Val Ile Asn Asn Leu Lys Asp Glu Asp Thr Ala Ser Tyr Phe Cys 85 90 95 Ser Asn Asp Tyr Leu Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Ala 100 105 110 Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala 130 135 140 Met Ser Leu Gly Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser 145 150 155 160 Val Thr Ile Leu Gly Ser His Leu Ile Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175 Gly Gln Pro Pro Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr 180 185 190 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr 195 200 205 Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys 210 215 220 Leu Gln Ser Arg Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 225 230 235 240 Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 245 250 255 Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro 260 265 270 Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 275 280 285 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 290 295 300 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 305 310 315 320 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 325 330 335 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 340 345 350 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 170 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 170 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr His Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Leu Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Val Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Phe Phe Cys 85 90 95 Ser Asn Asp Tyr Leu Tyr Ser Cys Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala 130 135 140 Met Ser Leu Gly Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser 145 150 155 160 Val Thr Ile Leu Gly Ser His Leu Ile Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175 Gly Gln Pro Pro Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr 180 185 190 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr 195 200 205 Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys 210 215 220 Leu Gln Ser Arg Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 225 230 235 240 Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 245 250 255 Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro 260 265 270 Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 275 280 285 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 290 295 300 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu 305 310 315 320 Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu 325 330 335 Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys 340 345 350 Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys 355 360 365 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 385 390 395 400 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460 Pro Arg 465 <210> 171 <211> 482 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 171 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu 20 25 30 Gly Ser His Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Thr Leu Leu Ile Gln Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg 85 90 95 Thr Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly 100 105 110 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly 130 135 140 Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 145 150 155 160 Tyr Ser Ile Asn Trp Val Lys Arg Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp 165 170 175 Met Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp 180 185 190 Phe Arg Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala 195 200 205 Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Tyr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe 210 215 220 Cys Ala Leu Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Ser Val Thr Val Ser Ser Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro 245 250 255 Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala 260 265 270 Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly 275 280 285 Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile 290 295 300 Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val 305 310 315 320 Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 325 330 335 Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 340 345 350 Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 355 360 365 Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 370 375 380 Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 385 390 395 400 Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 405 410 415 Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 420 425 430 Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 435 440 445 Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 450 455 460 Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 465 470 475 480 Pro Arg <210> 172 <211> 440 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 172 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser Ser Ile Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Leu Ala Val Ser Thr Ile Ser Ser Phe 245 250 255 Phe Pro Pro Gly Tyr Gln Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr 260 265 270 Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg 275 280 285 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 290 295 300 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 305 310 315 320 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 325 330 335 Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 340 345 350 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 355 360 365 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 370 375 380 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 385 390 395 400 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 405 410 415 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 420 425 430 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 435 440 <210> 173 <211> 469 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 173 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser Ser Ile Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr 245 250 255 Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala 260 265 270 Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe 275 280 285 Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val 290 295 300 Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys 305 310 315 320 Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr 325 330 335 Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu 340 345 350 Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 355 360 365 Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 370 375 380 Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 385 390 395 400 Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr 405 410 415 Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 420 425 430 Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 435 440 445 Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 450 455 460 Ala Leu Pro Pro Arg 465 <210> 174 <211> 655 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 174 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser Ser Ile Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Glu Pro Lys Ser Pro Asp Lys Thr His Thr 245 250 255 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu 260 265 270 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ala Arg Thr Pro Glu 275 280 285 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 290 295 300 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 305 310 315 320 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 325 330 335 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 340 345 350 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 355 360 365 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 370 375 380 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 385 390 395 400 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 405 410 415 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 420 425 430 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 435 440 445 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 450 455 460 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Ile Tyr Ile 465 470 475 480 Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val 485 490 495 Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe 500 505 510 Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly 515 520 525 Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg 530 535 540 Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 545 550 555 560 Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp 565 570 575 Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 580 585 590 Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp 595 600 605 Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg 610 615 620 Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr 625 630 635 640 Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 655 <210> 175 <211> 440 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 175 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ala Glu Thr Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Leu Ala Val Ser Thr Ile Ser Ser Phe 245 250 255 Phe Pro Pro Gly Tyr Gln Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr 260 265 270 Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg 275 280 285 Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro 290 295 300 Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu 305 310 315 320 Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 325 330 335 Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 340 345 350 Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 355 360 365 Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 370 375 380 Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 385 390 395 400 Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 405 410 415 Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu 420 425 430 His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 435 440 <210> 176 <211> 469 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 176 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ala Glu Thr Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr 245 250 255 Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala 260 265 270 Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe 275 280 285 Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val 290 295 300 Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys 305 310 315 320 Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr 325 330 335 Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu 340 345 350 Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 355 360 365 Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 370 375 380 Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 385 390 395 400 Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr 405 410 415 Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 420 425 430 Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 435 440 445 Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 450 455 460 Ala Leu Pro Pro Arg 465 <210> 177 <211> 655 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA CAR <400> 177 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Phe Ala Ser Gly Asn Ser Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 145 150 155 160 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu 165 170 175 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala 195 200 205 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ala Glu Thr Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Glu Pro Lys Ser Pro Asp Lys Thr His Thr 245 250 255 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu 260 265 270 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ala Arg Thr Pro Glu 275 280 285 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 290 295 300 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 305 310 315 320 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 325 330 335 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 340 345 350 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 355 360 365 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 370 375 380 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 385 390 395 400 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 405 410 415 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 420 425 430 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 435 440 445 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 450 455 460 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Ile Tyr Ile 465 470 475 480 Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val 485 490 495 Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe 500 505 510 Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly 515 520 525 Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg 530 535 540 Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 545 550 555 560 Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp 565 570 575 Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 580 585 590 Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp 595 600 605 Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg 610 615 620 Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr 625 630 635 640 Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 645 650 655 <210> 178 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD8 TM <400> 178 Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 1 5 10 15 Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys 20 <210> 179 <211> 684 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Modified IgG4 hinge- IgG2/IgG4 CH2- IgG4 CH3 spacer <400> 179 gaatctaagt acggaccgcc ctgccctccc tgccctgctc ctcctgtggc tggaccaagc 60 gtgttcctgt ttccacctaa gcctaaagat accctgatga tttcccgcac acctgaagtg 120 acttgcgtgg tcgtggacgt gagccaggag gatccagaag tgcagttcaa ctggtacgtg 180 gacggcgtgg aagtccacaa tgctaagact aaaccccgag aggaacagtt tcagtcaact 240 taccgggtcg tgagcgtgct gaccgtcctg catcaggatt ggctgaacgg gaaggagtat 300 aagtgcaaag tgtctaataa gggactgcct agctccatcg agaaaacaat tagtaaggca 360 aaagggcagc ctcgagaacc acaggtgtat accctgcccc ctagccagga ggaaatgacc 420 aagaaccagg tgtccctgac atgtctggtc aaaggcttct atccaagtga catcgccgtg 480 gagtgggaat caaatgggca gcccgagaac aattacaaga ccacaccacc cgtgctggac 540 tctgatggaa gtttctttct gtattccagg ctgaccgtgg ataaatctcg ctggcaggag 600 ggcaacgtgt tctcttgcag tgtcatgcac gaagccctgc acaatcatta tacacagaag 660 tcactgagcc tgtccctggg caaa 684 <210> 180 <211> 244 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BCMA-55 scFv <400> 180 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr 20 25 30 Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly 50 55 60 Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala 65 70 75 80 Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly 85 90 95 Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val 115 120 125 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu 130 135 140 Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val 145 150 155 160 Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp 165 170 175 Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 180 185 190 Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu 195 200 205 Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 210 215 220 Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 225 230 235 240 Thr Val Ser Ser <210> 181 <211> 326 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Human IgG2 Fc (Uniprot P01859) <400> 181 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 115 120 125 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 130 135 140 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 145 150 155 160 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 165 170 175 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 180 185 190 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 195 200 205 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 210 215 220 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 225 230 235 240 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 245 250 255 Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 260 265 270 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 275 280 285 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 290 295 300 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 305 310 315 320 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 <210> 182 <211> 327 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Human IgG4 Fc (Uniprot P01861) <400> 182 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 183 <211> 684 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> optimized SSE modified IgG4 hinge- IgG2/IgG4 CH2- IgG4 CH3 spacer <400> 183 gagtctaaat acggaccgcc ttgtcctcct tgtcccgctc ctcctgttgc cggaccttcc 60 gtgttcctgt ttcctccaaa gcctaaggac accctgatga tcagcaggac ccctgaagtg 120 acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaagag gatcccgagg tgcagttcaa ctggtatgtg 180 gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc aagcctagag aggaacagtt ccagagcacc 240 tacagagtgg tgtccgtgct gacagtgctg caccaggatt ggctgaacgg caaagagtac 300 aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgcct agcagcatcg agaaaaccat ctccaaggcc 360 aagggccagc caagagagcc ccaggtttac acactgcctc caagccaaga ggaaatgacc 420 aagaatcagg tgtccctgac atgcctggtc aagggcttct acccctccga tatcgccgtg 480 gaatgggaga gcaatggcca gcctgagaac aactacaaga ccacacctcc tgtgctggac 540 agcgacggca gtttcttcct gtatagtaga ctcaccgtgg ataaatcaag atggcaagag 600 ggcaacgtgt tcagctgcag cgtgatgcac gaggccctgc acaaccacta cacccagaaa 660 agcctgagcc tgtctctggg caag 684

Claims (71)

  1. (a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것;
    (b) 대상체에게 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 면역조정 화합물을 투여하는 것; 및
    (c) 대상체에게 덱사메타손을 투여하는 것
    을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손이 공동으로 투여되는 것인 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 면역조정 화합물 및 덱사메타손의 용량이 동일한 날에 투여되는 것인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여 전에 개시되는 것인 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시되는 것인 방법.
  6. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물이 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여되는 것인 방법.
  7. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시되는 것인 방법.
  8. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시되는 것인 방법.
  9. 제1항 내지 제3항, 제7항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 1일, 적어도 또는 약 적어도 2일, 적어도 또는 약 적어도 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 약 적어도 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 약 적어도 7일, 적어도 또는 약 적어도 8일, 적어도 또는 약 적어도 9일, 적어도 또는 약 적어도 10일, 적어도 또는 적어도 약 12일, 적어도 또는 약 적어도 14일, 적어도 또는 적어도 약 15일, 적어도 또는 약 적어도 21일, 적어도 또는 적어도 약 24일, 적어도 또는 약 적어도 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 약 적어도 35일 또는 적어도 또는 약 적어도 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일, 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 후에 개시되는 것인 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 제약상 허용되는 염인 방법.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물이 (S)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온인 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 덱사메타손이 저용량으로 투여되는 것인 방법.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 면역조정 화합물을 투여받지 않은 것인 방법.
  14. (a) 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게, BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하는 것; 및
    (b) 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것
    을 포함하는, 다발성 골수종을 치료하는 방법.
  15. 재발성 또는 불응성 다발성 골수종 (R/R MM)을 갖는 대상체에게 표준 삼중 요법을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 표준 삼중 요법의 투여가 개시되는 시점에, 대상체는 이전에 BCMA에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 용량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받은 것인, 다발성 골수종을 치료하는 방법.
  16. 제14항 또는 제15항에 있어서, 표준 삼중 요법이 다라투무맙, 포말리도미드 및 덱사메타손의 투여를 포함하는 것인 방법.
  17. 제16항에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 포말리도미드와 조합된 다라투무맙을 투여받지 않은 것인 방법.
  18. 제14항 또는 제15항에 있어서, 표준 삼중 요법이 포말리도미드, 보르테조밉 및 덱사메타손의 투여를 포함하는 것인 방법.
  19. 제18항에 있어서, 방법 전에, 대상체가 이전에 보르테조밉과 조합된 포말리도미드를 투여받지 않은 것인 방법.
  20. 제16항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 덱사메타손이 저용량으로 투여되는 것인 방법.
  21. 제14항 및 제16항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여 전에 개시되는 것인 방법.
  22. 제14항 및 제16항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 0 내지 30일, 0 내지 15일, 0 내지 6일, 0 내지 96시간, 0 내지 24시간, 0 내지 12시간, 0 내지 6시간, 0 내지 2시간, 2시간 내지 15일, 2시간 내지 6일, 2시간 내지 96시간, 2시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 2시간 내지 6시간, 6시간 내지 30일, 6시간 내지 15일, 6시간 내지 6일, 6시간 내지 96시간, 6시간 내지 24시간, 6시간 내지 12시간, 12시간 내지 30일, 12시간 내지 15일, 12시간 내지 6일, 12시간 내지 96시간, 12시간 내지 24시간, 24시간 내지 30일, 24시간 내지 15일, 24시간 내지 6일, 24시간 내지 96시간, 96시간 내지 30일, 96시간 내지 15일, 96시간 내지 6일, 6일 내지 30일, 6일 내지 15일, 또는 15일 내지 30일 전에 개시되고/거나;
    표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 약 96시간, 72시간, 48시간, 24시간, 12시간, 6시간, 2시간, 또는 1시간 이하 전에 개시되는 것인 방법.
  23. 제14항 및 제16항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법이 T 세포 요법의 투여와 공동으로 투여되는 것인 방법.
  24. 제14항 및 제16항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여에 후속하여 개시되는 것인 방법.
  25. 제14항 내지 제20항 및 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 최대 또는 최대 약 1일, 최대 또는 최대 약 2일, 최대 또는 최대 약 3일, 최대 또는 최대 약 4일, 최대 또는 최대 약 5일, 최대 또는 최대 약 6일, 최대 또는 최대 약 7일, 최대 또는 최대 약 12일, 최대 또는 최대 약 14일, 최대 또는 최대 약 21일, 최대 또는 최대 약 24일, 최대 또는 최대 약 28일, 최대 또는 최대 약 30일, 최대 또는 최대 약 35일, 최대 또는 최대 약 42일, 최대 또는 최대 약 60일, 최대 또는 최대 약 90일, 최대 또는 최대 약 120일, 최대 또는 최대 약 180일, 최대 또는 최대 약 240일, 최대 또는 최대 약 360일, 또는 최대 또는 최대 약 720일 또는 그 초과 후에 개시되는 것인 방법.
  26. 제14항 내지 제20항, 제24항 및 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 면역조정 화합물의 투여가 T 세포 요법의 투여의 적어도 또는 약 적어도 1일, 적어도 또는 약 적어도 2일, 적어도 또는 약 적어도 3일, 적어도 또는 약 적어도 4일, 적어도 또는 약 적어도 5일, 적어도 또는 약 적어도 6일, 적어도 또는 약 적어도 7일, 적어도 또는 약 적어도 8일, 적어도 또는 약 적어도 9일, 적어도 또는 약 적어도 10일, 적어도 또는 적어도 약 12일, 적어도 또는 약 적어도 14일, 적어도 또는 적어도 약 15일, 적어도 또는 약 적어도 21일, 적어도 또는 적어도 약 24일, 적어도 또는 약 적어도 28일, 적어도 또는 약 적어도 30일, 적어도 또는 약 적어도 35일 또는 적어도 또는 약 적어도 42일, 적어도 또는 약 적어도 60일, 또는 적어도 또는 약 적어도 90일 후에 개시되는 것인 방법.
  27. 제14항 내지 제20항 및 제24항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 1일 내지 360일, 1일 내지 240일, 1일 내지 180일, 1일 내지 120일, 1일 내지 90일, 1일 내지 60일, 2일 내지 360일, 2일 내지 240일, 2일 내지 180일, 2일 내지 120일, 2일 내지 90일, 2일 내지 60일, 3일 내지 360일, 3일 내지 240일, 3일 내지 180일, 3일 내지 120일, 3일 내지 90일, 3일 내지 60일, 4일 내지 360일, 4일 내지 240일, 4일 내지 180일, 4일 내지 120일, 4일 내지 90일, 4일 내지 60일, 5일 내지 360일, 5일 내지 240일, 5일 내지 180일, 5일 내지 120일, 5일 내지 90일, 5일 내지 60일, 6일 내지 360일, 6일 내지 240일, 6일 내지 180일, 6일 내지 120일, 6일 내지 90일, 6일 내지 60일, 7일 내지 360일, 7일 내지 240일, 7일 내지 180일, 7일 내지 120일, 7일 내지 90일, 7일 내지 60일, 14일 내지 360일, 14일 내지 240일, 14일 내지 180일, 14일 내지 120일, 14일 내지 90일, 14일 내지 60일, 21일 내지 360일, 21일 내지 240일, 21일 내지 180일, 21일 내지 120일, 21일 내지 90일, 21일 내지 60일, 28일 내지 360일, 28일 내지 240일, 28일 내지 180일, 28일 내지 120일, 28일 내지 90일, 28일 내지 60일, 35일 내지 360일, 35일 내지 240일, 35일 내지 180일, 35일 내지 120일, 35일 내지 90일, 35일 내지 60일, 42일 내지 360일, 42일 내지 240일, 42일 내지 180일, 42일 내지 120일, 42일 내지 90일, 42일 내지 60일, 49일 내지 360일, 49일 내지 240일, 49일 내지 180일, 49일 내지 120일, 49일 내지 90일, 또는 49일 내지 60일 (각각 경계값 포함) 후에 개시되는 것인 방법.
  28. 제14항 내지 제20항 및 제24항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 표준 삼중 요법의 투여가 T 세포 요법의 투여의 정확히 또는 약 56일 (8주) 후에 개시되고, 임의로 여기서 T 세포 요법은 방법의 제1일에 투여되고, 표준 삼중 요법의 투여는 방법의 정확히 또는 약 제3개월 제1일 (M3D1)에 개시되는 것인 방법.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 유전자 조작된 T 세포의 용량이 정확히 또는 약 5 x 107개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포 또는 정확히 또는 약 1 x 108개 CAR+ T 세포 내지 정확히 또는 약 1 x 109개 CAR+ T 세포인 방법.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 유전자 조작된 T 세포의 용량이 정확히 또는 약 4.5 x 108개 CAR+ T 세포인 방법.
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 인터류킨-6 (IL-6)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
  33. 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체로부터의 조직 샘플에서 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)의 수준을 결정하는 것을 포함하지 않는 방법.
  34. 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 0.5 g/dL 이상의 혈청 M-단백질 수준 또는 약 200 mg/24시간 이상의 뇨 M-단백질 수준을 갖는 것인 방법.
  35. 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, R/R MM이 혈청 또는 뇨에서 측정가능한 질환이 없는 경쇄 MM인 방법.
  36. 제35항에 있어서, 대상체가 약 10 mg/dL 이상의 혈청 이뮤노글로불린 유리 경쇄 수준 또는 비정상적 혈청 이뮤노글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비를 갖는 것인 방법.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 방법 전에, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 1종 이상의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
  38. 제37항에 있어서, 1종 이상의 선행 요법이 면역조정제를 포함하는 것인 방법.
  39. 제38항에 있어서, 대상체가 면역조정제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받은 것인 방법.
  40. 제37항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 1 내지 3종의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
  41. 제37항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 R/R MM을 치료하기 위한 적어도 3종의 선행 요법을 제공받은 것인 방법.
  42. 제37항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 선행 요법이 항-CD38 항체 및 프로테아솜 억제제를 포함하는 것인 방법.
  43. 제42항에 있어서, 대상체가 항-CD38 항체 및/또는 프로테아솜 억제제의 적어도 2회의 연속 주기를 제공받은 것인 방법.
  44. 제37항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법에 대해 재발하였거나 또는 불응성인 것인 방법.
  45. 제37항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법의 마지막 6개월 동안 또는 그 내에 진행성 질환 (PD)을 나타낸 것인 방법.
  46. 제37항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 1종 이상의 선행 요법 중 적어도 1종에 대해 최소 반응 또는 보다 양호한 반응을 나타낸 것인 방법.
  47. 제37항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 선행 요법이 동종 조혈 줄기 세포 이식, 암에 대한 유전자 요법-기반 치료, 암에 대한 임상시험용 세포 요법, 또는 BCMA-표적화 요법을 포함하지 않는 것인 방법.
  48. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체가 백혈구분리반출술 전 12주 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않은 것인 방법.
  49. 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 백혈구분리반출술 산물로부터 제조되고, 대상체가 백혈구분리반출술 전 12개월 내에 자가 줄기 세포 이식 (ASCT)을 제공받지 않은 것인 방법.
  50. 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 동부 협동 종양학 그룹 (ECOG) 수행 상태가 0 또는 1인 방법.
  51. 제1항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, CAR이 BCMA에 결합하는 항원 결합 도메인, 막횡단 도메인, 및 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄를 포함하는 세포내 신호전달 영역을 포함하는 것인 방법.
  52. 제51항에 있어서, 항원 결합 도메인이 단일 쇄 가변 단편 (scFv)인 방법.
  53. 제51항 또는 제52항에 있어서, 항원 결합 도메인이 VH 및 VL 영역을 포함하며, 여기서 VH 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 CDR-H1, 서열식별번호: 63에 제시된 CDR-H2 및 서열식별번호: 64에 제시된 CDR-H3을 포함하고, VL 영역은 서열식별번호: 65에 제시된 CDR-L1, 서열식별번호: 66에 제시된 CDR-L2 및 서열식별번호: 67에 제시된 CDR-H3을 포함하는 것인 방법.
  54. 제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이
    서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 30에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VH 영역, 및
    서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 31에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 VL 영역
    을 포함하는 것인 방법.
  55. 제51항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 30에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VH 영역 및 서열식별번호: 31에 제시된 아미노산 서열을 갖는 VL 영역을 포함하는 것인 방법.
  56. 제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 68에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 68에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99%를 나타내는 아미노산 서열을 갖는 scFv인 방법.
  57. 제51항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 서열식별번호: 68에 제시된 바와 같은 scFv인 방법.
  58. 제51항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 세포내 신호전달 영역이 공동자극 신호전달 영역을 추가로 포함하는 것인 방법.
  59. 제58항에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 CD28, 4-1BB 또는 ICOS의 세포내 신호전달 도메인 또는 그의 신호전달 부분을 포함하는 것인 방법.
  60. 제58항 또는 제59항에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 4-1BB, 임의로 인간 4-1BB의 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 것인 방법.
  61. 제58항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 공동자극 신호전달 영역이 막횡단 도메인과 CD3-제타 (CD3ζ) 쇄의 세포질 신호전달 도메인 사이에 있는 것인 방법.
  62. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 막횡단 도메인이 인간 CD8로부터의 막횡단 도메인이거나 또는 이를 포함하는 것인 방법.
  63. 제51항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, CAR이 항원 결합 도메인과 막횡단 도메인 사이에 세포외 스페이서를 추가로 포함하는 것인 방법.
  64. 제63항에 있어서, 스페이서가 정확히 또는 약 50개 아미노산 내지 정확히 또는 약 250개 아미노산인 방법.
  65. 제63항 또는 제64항에 있어서, 스페이서가 CD8 힌지인 방법.
  66. 제1항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, CAR이 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열 또는 서열식별번호: 126-177 중 어느 하나에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는 것인 방법.
  67. 제1항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, CAR이 서열식별번호: 152에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 152에 대해 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는 것인 방법.
  68. 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 것인 방법.
  69. 제1항 내지 제51항 및 제68항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 ABECMA®인 방법.
  70. 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 실타캅타진 오토류셀 세포를 포함하는 것인 방법.
  71. 제1항 내지 제51항 및 제70항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포 요법이 CARVYKTI™인 방법.
KR1020237039347A 2021-04-16 2022-04-15 Bcma-지시된 t 세포 요법과의 조합 요법 KR20230171468A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163176196P 2021-04-16 2021-04-16
US63/176,196 2021-04-16
PCT/US2022/025115 WO2022221726A2 (en) 2021-04-16 2022-04-15 Combination therapies with bcma-directed t cell therapy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230171468A true KR20230171468A (ko) 2023-12-20

Family

ID=81846411

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237039347A KR20230171468A (ko) 2021-04-16 2022-04-15 Bcma-지시된 t 세포 요법과의 조합 요법

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP4322959A2 (ko)
JP (1) JP2024514163A (ko)
KR (1) KR20230171468A (ko)
AU (1) AU2022258832A1 (ko)
CA (1) CA3214683A1 (ko)
IL (1) IL307612A (ko)
WO (1) WO2022221726A2 (ko)

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4452773A (en) 1982-04-05 1984-06-05 Canadian Patents And Development Limited Magnetic iron-dextran microspheres
US4501728A (en) 1983-01-06 1985-02-26 Technology Unlimited, Inc. Masking of liposomes from RES recognition
US5019369A (en) 1984-10-22 1991-05-28 Vestar, Inc. Method of targeting tumors in humans
US4690915A (en) 1985-08-08 1987-09-01 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Adoptive immunotherapy as a treatment modality in humans
US4795698A (en) 1985-10-04 1989-01-03 Immunicon Corporation Magnetic-polymer particles
US4837028A (en) 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5219740A (en) 1987-02-13 1993-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy
AU4746590A (en) 1988-12-28 1990-08-01 Stefan Miltenyi Methods and materials for high gradient magnetic separation of biological materials
US5200084A (en) 1990-09-26 1993-04-06 Immunicon Corporation Apparatus and methods for magnetic separation
US5827642A (en) 1994-08-31 1998-10-27 Fred Hutchinson Cancer Research Center Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes
DE19608753C1 (de) 1996-03-06 1997-06-26 Medigene Gmbh Transduktionssystem und seine Verwendung
US7939059B2 (en) 2001-12-10 2011-05-10 California Institute Of Technology Method for the generation of antigen-specific lymphocytes
US20030170238A1 (en) 2002-03-07 2003-09-11 Gruenberg Micheal L. Re-activated T-cells for adoptive immunotherapy
US7446190B2 (en) 2002-05-28 2008-11-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors
ES2640216T3 (es) 2007-12-07 2017-11-02 Miltenyi Biotec Gmbh Sistemas y métodos para procesamiento de células
US20120164718A1 (en) 2008-05-06 2012-06-28 Innovative Micro Technology Removable/disposable apparatus for MEMS particle sorting device
ES2961498T3 (es) 2008-08-26 2024-03-12 Hope City Método y composiciones para el funcionamiento mejorado del efecto antitumoral de las células T
PT2406284T (pt) 2009-03-10 2016-09-29 Biogen Ma Inc Anticorpos anti-bcma
JP5956342B2 (ja) 2009-11-03 2016-07-27 シティ・オブ・ホープＣｉｔｙ ｏｆ Ｈｏｐｅ 形質導入Ｔ細胞選択のためのトランケート上皮増殖因子レセプタ（ＥＧＦＲｔ）
US20140031325A1 (en) 2010-12-06 2014-01-30 Celgene Corporation Combination therapy with lenalidomide and a cdk inhibitor for treating multiple myeloma
BR122021026169B1 (pt) 2010-12-09 2023-12-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Uso de uma célula
EP3689383A1 (en) 2012-04-11 2020-08-05 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen
WO2014031687A1 (en) 2012-08-20 2014-02-27 Jensen, Michael Method and compositions for cellular immunotherapy
CN112430580A (zh) 2012-10-02 2021-03-02 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 用于免疫疗法的组合物和方法
CN104781789B (zh) 2012-12-20 2018-06-05 三菱电机株式会社 车载装置
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
US9108442B2 (en) 2013-08-20 2015-08-18 Ricoh Company, Ltd. Image forming apparatus
EP3131927B8 (en) 2014-04-14 2020-12-23 Cellectis Bcma (cd269) specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
MX2017001011A (es) 2014-07-21 2018-05-28 Novartis Ag Tratamiento de cancer de usando un receptor quimerico de antigeno anti-bcma.
CA2956002C (en) 2014-07-24 2023-06-27 Bluebird Bio, Inc. Bcma chimeric antigen receptors
MX2017003709A (es) 2014-09-22 2017-06-26 Sacmi Coop Mecc Imola Societa' Coop Linea para la produccion de productos individuales en sucesion en un ciclo continuo.
RS61781B1 (sr) 2014-12-05 2021-06-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antitela koja ciljaju antigen za sazrevanje b-ćelija i postupci upotrebe
SG11201704549UA (en) 2014-12-05 2017-07-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen and uses thereof
BR112017012502B1 (pt) 2014-12-12 2020-09-15 Bluebird Bio, Inc. Polinucleotídeo, polipeptídeo de car codificado pelo dito polinucleotídeo, vetor compreendendo o dito polinucleotídeo, composição compreendendo o dito vetor e método para geração de uma célula imune efetora compreendendo um car
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
KR102584280B1 (ko) 2016-04-01 2023-10-04 카이트 파마 인코포레이티드 키메라 항원 및 t 세포 수용체 및 사용 방법
CN106014789A (zh) 2016-06-25 2016-10-12 郭远军 一种悬吊式一体化反装斜击式水轮发电机及其做功方法
SG11202005005YA (en) * 2017-11-30 2020-06-29 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
EP3820515A1 (en) * 2018-07-11 2021-05-19 Celgene Corporation Uses of anti-bcma chimeric antigen receptors
CA3117978A1 (en) * 2018-11-08 2020-05-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and combinations for treatment and t cell modulation
BR112022021788A2 (pt) * 2020-04-28 2023-01-17 Juno Therapeutics Inc Combinação de terapia com células t direcionada para bcma e um composto imunomodulador

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022221726A2 (en) 2022-10-20
EP4322959A2 (en) 2024-02-21
AU2022258832A1 (en) 2023-10-19
JP2024514163A (ja) 2024-03-28
WO2022221726A3 (en) 2023-01-05
CA3214683A1 (en) 2022-10-20
IL307612A (en) 2023-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102644950B1 (ko) 입양 세포 치료법을 이용한 b 세포 악성종양의 치료 방법
US20220008477A1 (en) Methods and combinations for treatment and t cell modulation
US20210393690A1 (en) Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
US20210121466A1 (en) Combination therapy of a chimeric antigen receptor (car) t cell therapy and a kinase inhibitor
JP7383620B2 (ja) 養子細胞療法およびチェックポイント阻害剤を使用する併用療法
JP2024016134A (ja) 細胞療法に関連する毒性に関する製造物品および方法
US20230165872A1 (en) Combination of bcma-directed t cell therapy and an immunomodulatory compound
US20230087953A1 (en) Bcma-directed chimeric antigen receptor t cell compositions and methods and uses thereof
US20220401483A1 (en) Combination of a t cell therapy and (s)-3-[4-(4-morpholin-4-ylmethyl-benzyloxy)-l-oxo-l,3-dihydro-isoindol-2-yl]-piperidine-2,6-dione
KR20230171468A (ko) Bcma-지시된 t 세포 요법과의 조합 요법
WO2023081735A1 (en) Chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen for use in treating myeloma
KR20240004390A (ko) 림프종의 치료를 위한 car t 세포 요법 및 면역조정 화합물의 조합