KR20230161776A - 산천어 추출 pdrn을 함유하는 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품에 관한 것으로서, 상세하게는 산천어에서 추출된 PDRN 함유물을 이용한 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품을 제시한다.
Description
본 발명은 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품에 관한 것으로서, 상세하게는 산천어에서 추출된 PDRN 함유물을 이용한 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품과 관련된다.
PDRN(Polydeoxyribonucleotide)는 핵산조각 물질로서, 일반적으로 연어의 정액에서 추출, 가공한 DNA조각으로 이루어지며, 인대 힘줄 피부 등 우리 몸 속 조직의 재생과 염증완화에 특별한 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.
이에 따라 PDRN은 손상된 조직을 재생하는 원인 개선 치료제로 개발되어 다양한 질환에 널리 쓰이고 있고, 유럽 등지에는 이미 의약품으로 허가받아 널리 사용되고 있으며, 국내에서도 전문의약품으로 상처치료와 수술 후 조직재생을 촉진해 주는 용도로 사용되고 있다.
한편 이와 같이 의약품으로 사용되는 PDRN을 기능성 화장품에 적용하고자 하는 연구가 있다. 하지만 연어의 경우 국내에서 잡히는 물량이 많지 않아 연어에서 추출할 수 있는 PDRN의 양은 소량에 불과하다. 따라서 연어를 대체하여 국내에서 확보하기 용이한 PDRN 제공원을 발굴할 필요가 있으며 이를 통해 PDRN을 대량으로 추출하여 화장품 분야에 적용하는 방안을 고려할 수 있다.
본 발명은 상처치료와 수술 후 조직재생을 촉진해 주는 것으로 알려진 PDRN을 함유하는 물질을 산천어로부터 추출하고, 이와 같이 추출된 PDRN 함유물이 화장품 원료로서 적합한 것을 규명하며, 산천어로부터 추출된 PDRN 함유물을 유효성분으로 포함하는 화장품 조성물과 이를 이용하는 화장품을 제시한다.
그 외 본 발명의 세부적인 목적은 이하에 기재되는 구체적인 내용을 통하여 이 기술분야의 전문가나 연구자에게 자명하게 파악되고 이해될 것이다.
위 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 실시예로, 산천어로부터 추출된 PDRN을 유효성분으로 포함하는 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품을 제시한다.
한편 위 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 실시예로, 산천어의 정소부분만을 분리하여, 정제수에 넣고 분쇄하는 제1단계, 상기 제1단계에서 얻어진 물질에 리소자임(Lysozyme), 리보뉴클레아제(RNAse) 및 EDTA(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid)를 첨가하여 교반하는 제2단계, 상기 제2단계에서 얻어진 물질에 SDS(sodium dodecyl sulfate)를 투입하여 지방성분을 제거하는 제3단계, 상기 제3단계에서 얻어진 물질을 원심분리기를 이용하여 분리하고 불용성분을 제거하는 제4단계, 상기 제4단계에서 불용성분이 제거되고 얻어진 상등액에 페놀-클로로포름(Phenol-Chloloform) 용액을 처리하여 중간층의 단백질 불용성분을 제거하는 제5단계 및 상기 제5단계에서 얻어진 물질에 에탄올을 추가하여 정제된 산천어 PDRN 함유물을 얻는 제6단계를 포함하는 산천어 추출 PDRN 함유 화장품 조성물 제조방법을 제시한다.
본 발명의 실시예에 따른 화장품 조성물과 이를 포함하는 화장품은, 산천어를 통해 PDRN 함유물을 추출하므로 제조 비용을 절감할 수 있음과 동시에 PDRN의 작용으로 피부 조직 재생에 우수한 효과를 기대할 수 있다.
그 외 본 발명의 효과들은 이하에 기재되는 구체적인 내용을 통하여, 또는 본 발명을 실시하는 과정 중에 이 기술분야의 전문가나 연구자에게 자명하게 파악되고 이해될 것이다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 화장품 조성물의 원료인 산천어 추출 PDRN 함유물의 전기영동결과를 나타내는 도면.
도 2는 본 발명의 탈모 방지용 화장품 조성물의 유효성분인 PDRN 함유물과 다른 탈모방지 성분의 RT-PCR을 이용한 mRNA 발현 및 웨스턴 블롯 실험을 이용한 단백질 발현 수준 결과를 비교하여 나타낸 도면.
도 2는 본 발명의 탈모 방지용 화장품 조성물의 유효성분인 PDRN 함유물과 다른 탈모방지 성분의 RT-PCR을 이용한 mRNA 발현 및 웨스턴 블롯 실험을 이용한 단백질 발현 수준 결과를 비교하여 나타낸 도면.
상술한 본 발명의 특징 및 효과는 첨부된 도면과 관련한 다음의 상세한 설명을 통하여 보다 분명해 질 것이며, 그에 따라 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 기술적 사상을 용이하게 실시할 수 있을 것이다. 본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 형태를 가질 수 있는 바, 특정 실시 예들을 도면에 예시하고 본문에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 개시형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시 예들을 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다.
이하, 본 발명의 일 실시예에 따른 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품에 대해 상세하게 설명한다.
본 발명의 실시예에 따른 화장품 조성물과 이를 이용한 화장품은 산천어에서 추출된 PDRN(polydeoxyribonucleotide) 함유물을 유효성분으로 포함한다. 이에 산천어로부터 PDRN 함유물을 추출하고 이와 같이 추출된 PDRN 함유물이 세포에 유해하지는 않는지 확인할 필요가 있다.
1) 산천어 PDRN 함유물의 추출 및 추출된 PDRN 함유물의 특징
산천어로부터 PDRN 함유물의 추출
산천어로부터 PDRN 함유물을 추출하기 위하여 냉동보관된 산천어(화천군청 구입) 10마리의 정소부분만을 수동으로 분리하여, 1리터의 정제수에 넣고 고압분쇄기를 이용하여 미세하게 분쇄한 다음, 리소자임(Lysozyme) 5㎛/ml, 리보뉴클레아제(RNAse) 5㎛/ml 및 0.02%의 EDTA(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid)를 첨가하여 30℃에서 1시간 동안 교반하였다.
여기에 지방성분을 제거하기 위하여 10% SDS(sodium dodecyl sulfate)를 넣고 추가적으로 5시간 정도 보관하였다.
이들 시료를 6,000 rpm의 고속원심분리기를 이용하여 불용성분을 제거한 다음, 상등액에 페놀-클로로포름(Phenol-Chloloform)(1:1) 용액을 처리하여 중간층의 단백질 불용성분을 제거하였다. 상등액에 95% 에탄올을 추가하여 정제된 산천어 PDRN 함유물을 얻었다.
도 1은 산천어 PDRN 함유물에 대하여 1% 아가로스 겔(agarose gel)을 이용한 전기영동결과를 나타내고 있다. 레인(lane) 1은 DNA 표준 시료, 레인 2는 정제된 산천어 PDRN 함유물, 레인 3은 정소부분을 분리하여 분쇄한 결과물을 나타내고 있다.
도면에서 알 수 있듯이 위 방법을 통해 DNA 구조로 이루어진 산천어 PDRN 함유물을 얻을 수 있었고 정제된 산천어 PDRN 함유물은 분자량이 큰 DNA 구조를 하고 있음을 알 수 있다. 반면에 정소에서 분리하여 분쇄한 것에서는 DNA가 함유되지 않음을 알 수 있다.
추출된 산천어 PDRN 함유물의 세포독성실험
위와 같이 추출된 산천어 PDRN 함유물의 세포독성을 알아보기 위하여, 인간 섬유아세포(ATCC, CRL-2076)를 5×104 cells/ml의 농도로 24웰 배양판에 접종하였다. 배지는 소혈청 10%를 함유한 IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium, GIBCO)을 사용하였다.
접종 24시간 후 혈청이 없는 배지로 교체하고 양성대조군 PDRN 함유물 시료(5 ㎍/ml, Sigma, 미국)과 추출된 산천어 PDRN 함유물을 0, 1, 5 및 10 ㎍/ml의 농도별로 첨가한 후, 1일 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다.
배양이 끝난 후 상등액을 제거하고 다시 5% PBS(phosphate buffered saline) 200 ㎕씩을 가하여 세척하고, MTT(microtetrazoline; Sigma) 용액을 시료 웰당 1.0 ㎖씩 가한 후 4시간 후에 MTT를 제거하고, DMSO(dimethylsulphoxide; Sigma)를 웰당 1.0 ㎖씩 가한 후 37℃에서 12시간 인큐베이션 후 570 nm에서 흡광도(OD, Optical Density)를 측정하였다. 세포 생존율은 하기 수학식 1에 의해 계산되었으며 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
수학식 1에서 대조군은 표 1의 음성대조군으로서 PDRN이 들어있지 않음(0 ㎍/ml)을 의미한다.
| 시료명 | 세포생존율(%) |
| 양성대조군(5 ㎍/ml) | 99.7 |
| 음성대조군(0 ㎍/ml) | 100.0 |
| 산천어 PDRN 함유물(1 ㎍/ml) | 103.2 |
| 산천어 PDRN 함유물(5 ㎍/ml) | 101.0 |
| 산천어 PDRN 함유물(10 ㎍/ml) | 100.7 |
표 1에서 알 수 있듯이 다소간의 차이는 있지만 측정 결과 사용된 시료의 전체 농도에서 세포독성이 없는 것으로 확인되었다. 따라서 상술한 방법으로 추출된 산천어 PDRN 함유물은 인체에 사용할 수 있을 것으로 예상된다.
추출된 산천어 PDRN 함유물의 MMP-1 mRNA 발현 저해 효과
피부 내의 콜라겐 붕괴를 촉진하는 기질 단백질인 매트릭스 메탈로프로티나아제(Matrix Metalloproteinase-1, MMP-1)는 UVA(자외선 A)에 의해 발현이 촉진된다. 위와 같이 추출된 산천어 PDRN 함유물에 의한 MMP-1의 유전자 발현 저해 효과를 확인하기 위해 RT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)을 실시하였다.
구체적으로, 섬유아세포를 60 mm 배양접시(Petri dish)에 1×106 cells/ml의 농도로 분주한 후 37℃에서 24시간 동안 배양하였다.
UVA를 6J로 조사한 후 산천어 PDRN 함유물을 농도별(1, 5, 10 ㎍/ml)로 첨가하여 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 세포의 배지를 제거하고 트리졸(Trizol, invitrogen, USA) 1 ml을 첨가하여 인비트론(Invitron)사의 RNA 분리법에 따라 분리하였다.
분광 광도계를 이용하여 260 nm에서 RNA양을 정량한 후, RT-PCR을 실시하였다. RT-PCR은 올인원 RT-PCR 키트(All-in-one RT-PCR kit, SuperBio, Korea)를 사용하였고, 사용된 프라이머 쌍을 이용하여, 올인원 RT-PCR 키트의 방법에 따라 실험을 진행하였다.
이에 대한 결과를 표 2에 나타내었다. 이때 대조군은 UVA로 처리하지 않은 섬유아세포에 해당한다.
하기 표 2에서 알 수 있듯이 산천어 PDRN 함유물은 UVA에 의해 유도된 MMP-1의 활성을 대조군 수준 이하로 저해하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 산천어 PDRN 함유물의 MMP-1 발현 억제 효과를 MMP-1 발현 억제물질로 알려져 있는 EGCG(Epigalocatechin-3-gallate)와 비교하였으며, 그 결과 일부 농도에서 더 높은 저해효과를 나타내었다.
| 시료명 | 농도(㎛/ml) | MMP-1 발현량(%, 액틴보정값) |
| 대조군 | 63.1 | |
| UVA 6J | 100 | |
| UVA 6J + PDRN | 1 | 71.5 |
| 5 | 62.1 | |
| 10 | 36.2 | |
| UVA 6J + EGCG | 10 | 40.7 |
따라서 상술한 방법으로 추출된 산천어 PDRN 함유물은 인체에 사용할 때 우수한 피부 재생 능력을 가질 수 있을 것으로 예상된다.
산천어 추출 PDRN 함유물의 탈모 억제 실험
산천어 추출 PDRN 함유물의 탈모 억제 유전자 발현을 확인하기 위하여 Hepa1c1c7 세포를 산천어 추출 PDRN 함유물과 비오틴, 덱스판테놀 및 L-멘톨의 혼합물 농도에 따라 처리한 후 아래와 같이 RT-PCR과 웨스턴 블롯(Western Blot)을 수행하였다.
이때 산천어 추출 PDRN 함유물은 단독으로 최종 농도 2.5, 5, 10, 20μM로 하여 Hepa1c1c7 세포에 투입하였고, 비오틴, 덱스판테놀, L-멘톨은 혼합물로 만들어서 최종 농도 2.5, 5, 10, 20μM로 하여 Hepa1c1c7 세포에 투입하였다.
(1) RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)
Hepa1c1c7 세포의 전체 RNA를 분리하였다(RNeasy Mini kit, Qiagen, Germany). 분리된 RNA는 수퍼스크립트 역전사 효소(Intron power cDNA synthesis kit, 인트론바이오테크놀러지사, Korea)와 올리고 dT 프라이머(oligo dT primer)를 이용하여 역전사하였다. RT-PCR은 제조업체의 지침에 따라 재조합 Taq DNA 중합 효소를 사용하여 수행되었다(2xPCR 마스터 믹스 솔루션, 인트론바이오테크놀러지사, Korea). GAPDH mRNA 수준은 대조군으로 사용되었다. 사용된 프라이머 서열은 아래의 표 1에 나타내었다.
PCR 조건은 30초 동안 94℃ 변성, 30초 동안 60℃ 어닐링, 30초 동안 72℃ 연장의 30 사이클이었다. PCR 산물은 레드세이프(RedSafe) 염색용액(인트론바이오테크놀러지사, Korea)으로 염색한 2% 아가로스겔을 전기영동하여 분석하였다.
| Gene description | Primers | Sequences (5'-> 3') |
| Akr1c2 | F | AATGGCCCTGAAACCAGGAG |
| R | GACCACAATCCCACGCTGTA | |
| Dhrs9 | F | GGAAACTTAGCAGCCAGAAC |
| R | AACACGCCAAGAACACCAG | |
| GAPDH | F | ACCACAGTCCATGCCATCAC |
| R | CACCACCCTGTTGCTGTAGCC |
(2) 웨스턴 블롯(Western blot)
Hepa1c1c7 세포의 세포 추출물을 도데실황산나트륨폴리아크릴아미드겔전기영동법(SodiμM Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis, SDS-PAGE)으로 분해하고, 폴리비닐리덴플루오라이드(PVDF) 막으로 옮기고, DHRS9 폴리클로날항체(DHRS9 Rabbit Polyclonal, MyBioSource, MBS768606), AKR1C2 폴리클로날항체(Invitrogen, PA5)로 면역 블롯팅한 후 항β액틴항체(Anti-beta Actin antibody, Ab8227, Abcam, Elgland)를 사용한 후 2차로 HRP항체(Goat Anti-Rabbit IgG H&L, Ab6721, Abcam, Elgland)와 함께 배양하였다. 반응성 밴드는 웨스턴라이팅 시약(clarityTM western ECL substrate, Bio Rad)을 사용하여 화학발광에 의해 검출되었다.
(3) 실험결과
먼저 PDRN 함유물에서 각 농도(2.5, 5, 10, 20μM)에 따라 PCR 산물(RNA수준)과 웨스턴 블롯(단백질 수준) 결과를 통해 Akr1c2와 Dhrs9의 유전자를 확인해 보았다.
이때 PDRN 함유물의 농도가 증가될수록 RNA수준과 단백질수준에서 모두 Akr1c2의 유전자 수준이 증가됨을 확인하였다. 다만 Dhrs9의 경우 농도에 따라 RNA수준에서는 큰 차이가 나타나지 않았고, 단백질수준에서는 농도가 증가될수록 단백질 수준도 증가됨을 확인할 수 있었다(도 3a 참조).
특히 PDRN 함유물의 농도가 10μM 내지 20μM인 경우 RNA수준과 단백질수준에서 모두 우수한 Akr1c2와 Dhrs9의 유전자의 발현이 확인되었다.
한편 탈모증상 완화 고시물질로 알려진 비오틴(Biotin), 덱스판테놀 및 L-멘톨의 혼합물에 대하여 PDRN 함유물과 동일한 농도(2.5, 5, 10, 20μM)로 처리하여 확인해 보았다. 이때는 PDRN 함유물과 달리 RNA수준과 단백질수준에서 Akr1c2와 Dhrs9의 유전자 수준이 농도가 증가되어도 큰 차이가 나타나지 않음을 확인하였다(그림 3b).
이에 따라 PDRN 함유물은 DHT의 분해 효소인 Akr1c2 및 Dhrs9의 수준을 증가시키는 것으로 확인되었고, 이러한 효소의 발현을 촉진하여 DHT가 안드로겐 수용체 (AR)에 결합하여 호르몬 수용체 복합체를 형성하는 것을 방해하여 탈모 증상이 완화되도록 촉진할 수 있을 것으로 예상할 수 있다.
비오틴, 덱스판테놀 및 L-멘톨의 경우 다른 작용을 통해 탈모 방지에 관여하는 것으로 생각되며 PDRN 함유물과 함께 사용할 경우 서로 다른 작용을 통해 상승 효과를 낼 수 있을 것으로 예상된다.
이와 같이 세포독성실험과 MMP-1 mRNA 발현 저해 효과 및 탈모 억제 실험으로부터 산천어로부터 추출된 PDRN 함유물은 기능성 화장품 조성물로서 기능할 수 있다.
2) 산천어 추출 PDRN 함유물을 이용한 화장품의 제조
제형예 1. 유연 화장품(스킨로션)의 제조
산천어 추출 PDRN을 함유한 유연 화장품을 제조하였다. 화장품의 성분 비율은 하기 표 4에 나타낸 바와 같다.
| 번호 | 원료명 | 함량(중량%) |
| 1 | 산천어 PDRN 함유물 | 0.1 |
| 2 | 글리세린 | 3.0 |
| 3 | 1,3 부틸렌 글리콜 | 2.0 |
| 4 | PEG(60) 경화 피마자유 | 1.0 |
| 5 | 에틸알콜 | 10.0 |
| 6 | 트리에탄올아민 | 0.1 |
| 7 | 향 | 적량 |
| 8 | 정제수 | to 100 |
제조공정은 정제수에 상기 표 3에 제시된 원료들을 순서대로 투입하여 60℃정도에서 가열하여 용해시킨 후 교반기(아지믹서)로 교반하여 제조하였다.
제형예 2. 영양 화장품(로션)의 제조
한편 산천어 추출 PDRN을 함유한 영양 화장품을 제조하였다. 화장품의 성분 비율은 하기 표 5에 나타낸 바와 같다.
| 번호 | 원료명 | 단위(중량%) |
| 1 | 산천어 PDRN 함유물 | 0.1 |
| 2 | 시토스테롤 | 1.7 |
| 3 | 폴리글리세릴 올레이트 | 1.5 |
| 4 | 세테아레스 | 1.2 |
| 5 | 콜레스테롤 | 1.5 |
| 6 | 디세틸포스페이트 | 0.4 |
| 7 | 글리세린 | 5.0 |
| 8 | 새플라워 오일 | 10.0 |
| 9 | 카보머 | 0.12 |
| 10 | 잔탄검 | 0.3 |
| 11 | 헥산디올 | 1.5 |
| 12 | 향 | 적량 |
| 13 | 정제수 | to 100 |
제조공정은, 상기의 표 4에서 소수성 성분인 원료물질 2, 3, 4, 5 및 8을 70℃까지 가온하여 균질하게 용해시켰다. 이들과 친수성성분인 원료물질 1과 6, 7 및 13을 혼합하고 70℃에서 균질화하여 교반기(호모믹서)를 이용하여 3,000-4,000rpm에서 3분 동안 교반하였다. 그리고, 여기에 원료물질 9, 10, 11 및 12를 투입하여 분산시키고 호모믹서를 이용하여 3,000rpm에서 3분 동안 교반하여 안정화하고 숙성시켰다.
제형예 3. 젤형 화장품의 제조
위와 같은 실험을 기초로 하여 PDRN 함유물을 포함하는 젤형 화장품을 제조하였다. 제조공정은 일반적인 젤형 화장품을 제조하는 공정을 채용하였다.
화장품의 성분으로는 산천어 추출 PDRN 함유물을 포함하여 정제수, 에탄올, 글리세린, 피이지-60하이드로제네이티드캐스터오일, 트로메타민, 카보머, 트라이데세스-10, 멘톨, 향료, 살리실릭애씨드, 판테놀, 부틸렌글라이콜, 1,2-헥산 다이올, 카프릴릴글라이콜, 스타아니스추출물, 소듐하이알루로네이트, 제라니올, 리날룰, 시트로넬올, 헥실신남알, 나모넨이 사용되었다.
3) 산천어 추출 PDRN 함유물을 원료로하는 화장품의 피부 자극 테스트
산천어 추출 PDRN을 함유하는 화장품에 대한 피부 자극 정도를 알아보기 위하여, 피부 첩포 시험을 실시하였다. 피검자는 20-50세의 시험 부위에 피부 질환이 없는 사람으로 선정하였으며 총 15명에게 실시하였다.
첩포 부위인 상박부를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 후, 핀챔버(fin chamber)를 사용하여 바셀린을 블랭크로, 유연 화장품(제형예 1), 영양 화장품(제형예 2), 젤형 화장품(제형예 3)을 각각 0.02g씩 가하여 인체 상박부에 24시간 첩포하고, 첩포 제거 후 1시간 이내에 피부반응을 검사하고, 다음날(48시간 후) 다시 검사하였다.
피부 반응 판정은 하기 표 6의 검사기준에 의해 판정하고, 피부 자극 유발 가능성의 평가는 하기 수학식 2로부터 계산된 평균반응률로 하였으며, 산천어 추출 PDRN 함유물을 포함하는 화장품에 대한 피부 첩포시험 결과를 하기 표 7에 나타내었다. 실험결과에 의하면 본 발명의 산천어 추출 PDRN을 함유하는 화장품의 여러 제형 예들은 피부자극이 없는 것으로 나타났다.
| 피부반응 | 점수 | 기준 |
| － | 0 | 반응없음 |
| ± | 1 | 미약한 양성 반응 (홍반) |
| ＋ | 2 | 양성 반응 (홍반) |
| ＋＋ | 3 | 강한 양성 반응 (홍반, 부종) |
| ＋＋＋ | 4 | 심한 양성 반응 (홍반, 부종, 수포) |
| 시험물질 |
24시간 후 반응 있는 피검자수(명) |
48시간 후 반응 있는 피검자수(명) |
평균반응률 (%) |
||||||||
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | ||
| 제형예 1 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 제형예 2 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 제형예 3 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
이와 같이 본 발명의 PDRN을 함유하는 화장품 조성물 및 이를 포함하는 화장품은 산천어에서 추출한 PDRN을 유효성분으로 채택함으로써 재료의 확보가 용이한 한편, 피부에 자극이 없으며 피부 조직 재생에 우수한 효과를 기대할 수 있다.
앞서 설명한 본 발명의 상세한 설명에서는 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만, 해당 기술분야의 숙련된 당업자 또는 해당 기술분야에 통상의 지식을 갖는 자라면 후술될 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 기술 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
Claims (3)
- 산천어에서 추출된 PDRN(polydeoxyribonucleotide)을 유효성분으로 포함하는 화장품 조성물.
- 산천어에서 추출된 PDRN(polydeoxyribonucleotide)을 유효성분으로 포함하는 화장품.
- 산천어의 정소부분만을 분리하여, 정제수에 넣고 분쇄하는 제1단계,
상기 제1단계에서 얻어진 물질에 리소자임(Lysozyme), 리보뉴클레아제(RNAse) 및 EDTA(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid)를 첨가하여 교반하는 제2단계,
상기 제2단계에서 얻어진 물질에 SDS(sodium dodecyl sulfate)를 투입하여 지방성분을 제거하는 제3단계,
상기 제3단계에서 얻어진 물질을 원심분리기를 이용하여 분리하고 불용성분을 제거하는 제4단계,
상기 제4단계에서 불용성분이 제거되고 얻어진 상등액에 페놀-클로로포름(Phenol-Chloloform) 용액을 처리하여 중간층의 단백질 불용성분을 제거하는 제5단계 및
상기 제5단계에서 얻어진 물질에 에탄올을 추가하여 정제된 산천어 PDRN 함유물을 얻는 제6단계
를 포함하는 산천어 추출 PDRN 함유 화장품 조성물 제조방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220061556A KR20230161776A (ko) | 2022-05-19 | 2022-05-19 | 산천어 추출 pdrn을 함유하는 화장품 조성물 및 이를 이용한 화장품 |
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|---|---|
| KR20230161776A true KR20230161776A (ko) | 2023-11-28 |
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ID=88957372
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| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230161776A (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102657166B1 (ko) | 2024-01-02 | 2024-04-15 | 유엔케이코리아 주식회사 | Pdrn 및 구리 트리펩티드-1을 유효성분으로 포함하는 주름 감소 및 탄력 개선용 화장료 조성물 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101722181B1 (ko) | 2016-07-06 | 2017-03-31 | 주식회사 리온메디코스 | PDRN(Polydeoxyribonucleotide)을 포함하는 화장품 조성물 |
-
2022
- 2022-05-19 KR KR1020220061556A patent/KR20230161776A/ko unknown
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| KR102657166B1 (ko) | 2024-01-02 | 2024-04-15 | 유엔케이코리아 주식회사 | Pdrn 및 구리 트리펩티드-1을 유효성분으로 포함하는 주름 감소 및 탄력 개선용 화장료 조성물 |
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