KR20230127504A - 피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 및 이의 용도 - Google Patents

피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 피부 미백 효능 및 주름개선 효능이 우수하므로 기능성 화장료 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.

Description

피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 및 이의 용도{Oat sprout postbiotic composition having skin whitening and wrinkle improvement activity and use thereof}
본 발명은 피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.
사람의 피부는 신체의 가장 외부에 위치하여 외모의 큰 비율을 차지하고 있으며, 지속적으로 외부로부터의 자극에 노출된다. 최근 소비자의 소득 및 지적 수준이 높아짐에 따라 피부 미용 건강에 대한 관심이 다양한 연령층에서 높은 수준으로 증가하고 있으며, 미백, 주름개선, 자외선 차단 등 보다 전문적이고 구체적인 기능이 부각된 화장품이 다양하게 개발되고 있다.
사람의 피부색은 검은 색소인 멜라닌(melanin)의 피부 내 농도 및 분포에 따라 결정되는데, 멜라닌은 피부 표피 층에 있는 멜라노사이트에서 합성된다. 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하면 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 멜라닌이 생성된다. 멜라닌의 과잉 생산이 이루어지면 피부색이 짙어지고, 기미, 주근깨 등을 발생시키므로, 피부 내의 티로시나아제 활성을 저해함으로써 멜라닌의 생성 및 축적을 억제하면 피부 미백을 실현할 수 있다.
피부 노화는 크게 내적 노화와 외적 노화에 의해 발생하며, 내적 노화는 나이가 들어감에 따라 신진대사를 조절하는 각종 호르몬 분비의 감소, 면역 세포의 기능 및 세포 활성 저하 등이 원인이며, 외적 노화는 자외선, 환경오염 등 외부적인 요인에 의해 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 발생한다. 이러한 피부노화는 생체 내에서 콜라겐, 엘라스틴과 같은 세포외기질의 합성과 분해가 적절하게 조절되지 못하거나, 노화가 진행되면서 그 합성이 감소하며, 세포외 기질에 존재하는 콜라겐 섬유를 분해하는 효소인 콜라게나제(collagenase) 및 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제(elastase)의 발현이 촉진됨에 따라 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성될 수 있다.
귀리(Avena sativa)는 다른 곡류에 비해 단백질, 필수아미노산, 수용성 섬유질이 풍부하며, 폴리페놀류 중 하나인 아베난쓰라마이드(avenanthramide) 성분은 특이적으로 귀리에만 존재하는 것으로 알려져 있다. 아베난쓰라마이드는 A, B, C, D 4가지 타입이 존재하며 최근 연구결과에서 아베난쓰라마이드 C의 미백 효능이 검증된 바 있다. 귀리가 발아하면서 자란 녹색 새싹인 새싹귀리는 귀리보다 폴리페놀의 함량이 증가한다고 알려져 있으며, 아베난쓰라마이드 또한 발아 전에 비해 발아 후에 농도가 월등히 높아진다고 알려져 있으나, 새싹귀리를 사용한 미백 및 주름완화 효능에 대한 연구결과는 미미한 실정이다.
한편, 유산균은 자연계에 널리 존재하며 탄수화물을 혐기적으로 이용하여 유산을 생산할 수 있는 미생물로, 포스트바이오틱스(postbiotics)는 유산균이 발효 과정 등에서 만들어내는 부산물이나 유산균의 균체 성분이다. 최근 포스트바이오틱스는 식품, 영양제, 건강기능식품 및 의약품 등 다양한 상업적 용도로 개발되고 있으나, 화장료로써 새싹귀리의 발효를 위한 구체적인 균주 및 발효 조건 등에 대한 연구는 전무한 실정이다.
이에 따라, 본 발명자들은 새싹귀리 추출물에 유산균을 접종하여 배양한 뒤, 새싹귀리 발효액을 사용하여 우수한 피부 미백 및 주름개선 활성을 나타내는 포스트바이오틱스 조성물을 제조하기 위한 연구를 수행하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 특허등록 제10-2016027호
본 발명의 목적은 새싹귀리 발효물을 포함하는 미백 및 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 양상은 새싹귀리 발효물을 포함하는 미백 및 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 새싹귀리는 귀리(Avena sativa)의 어린잎으로, 발아 후 7 내지 10일에 수확한 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 새싹귀리 발효물은 새싹귀리 추출물을 발효한 것일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 추출물은 새싹귀리 분말을 적절한 양의 용매에 첨가하여, 100 내지 140℃에서 10 내지 20분간 추출하여 수득될 수 있다.
상기 새싹귀리 분말은 발아 후 7 내지 10일에 수확한 새싹귀리를 건조 후 분쇄하여 사용하거나, 시판되는 새싹귀리 분말을 구매하여 사용할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 새싹귀리 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 용매로 추출될 수 있다.
상기 용매는 바람직하게는 물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 증류수일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 새싹귀리 발효물은 35 내지 40℃에서 40 내지 80시간 동안 배양된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 발효는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 및 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 균주로 이루어질 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 새싹귀리 발효물은 화장료 조성물 100 중량부에 대하여 0.01 내지 30.0 중량부로 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계의 통상적인 제형으로 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이의 제형일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은, 예를 들어, 하이드로겔, 접착용 패치, 비-접착용 패치, 마이크로전자 패치 또는 얼굴 마스크와 같은 다른 종류의 고체 용구에 당해 분야의 기술자에게 알려진 사용 기술을 사용하여 포함될 수 있거나, 메이크업 파운데이션, 예를 들어, 유체 파운데이션 및 콤팩트 파운데이션, 메이크업 제거용 로션, 메이크업 제거용 우유, 컨실러, 아이섀도, 립스틱, 립 프로텍터, 립 글로스 및 파우더와 같은 기타 메이크업 제품에 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속 이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종 기제 및/또는 첨가물을 포함할 수 있으며, 그 효과를 떨어트리지 않는 범위 내에서 비이온 계면활성제, 실리콘 폴리머, 체질안료, 향료, 방부제, 살균제, 산화 안정화제, 유기 용매, 이온성 또는 비이온성 증점제, 유연화제, 산화방지제, 자유 라디칼 파괴제, 불투명화제, 안정화제, 에몰리언트(emollient), 실리콘, α-히드록시산, 소포제, 보습제, 비타민, 곤충 기피제, 향료, 보존제, 계면활성제, 소염제, 물질 P 길항제, 충전제, 중합체, 추진제, 염기성화 또는 산성화제, 또는 착색제 등 공지의 화합물을 더 포함하여 제조될 수 있다.
본 발명의 유산균을 이용해 발효되어 피부 미백 및 주름개선 활성을 갖는 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물은 피부 미백 효능 및 주름개선 효능이 우수하므로, 기능성 화장료 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) KCTC3104 및 락토바실러스 플란타룸 KCTC3108를 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 티로시나아제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 2는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) KCTC3237 및 락토바실러스 람노서스 KCTC5033를 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 티로시나아제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 3은 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) KCTC3109을 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 티로시나아제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 4는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) KCTC3143을 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 티로시나아제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 5은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) KCTC3104, 락토바실러스 플란타룸 KCTC3108 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) KCTC3237를 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 엘타스타제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 6는 락토바실러스 람노서스 KCTC3237, 락토바실러스 람노서스 KCTC5033 및 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) KCTC3109을 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 콜라게나제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
도 7은 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) KCTC3143을 배양하여 발효한 포스트바이오틱스 조성물의 콜라게나제 활성저해율을 나타낸 그래프이다.
이하 본 발명을 하나 이상의 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 및 2. 락토바실러스 플란타룸( Lactobacillus plantarum )으로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 제조
농도별 새싹귀리(Avena sativa) 추출물을 제조하고, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) KCTC3104 및 락토바실러스 플란타룸 KCTC3108을 각각 배양하여 포스트바이오틱스 조성물을 제조하였다.
구체적으로, 발아 후 10일이 경과한 새싹귀리 분말을 2.5% w/w(a), 5% w/w(b), 10% w/w(c) 농도로 증류수에 넣은 후, 고압멸균기로 121℃에서 15분간 추출 및 살균하여 새싹귀리 열수추출물을 수득하였다.
증류수에 세척한 1.0×109 CFU/㎖의 락토바실러스 플란타룸 KCTC3104 및 락토바실러스 플란타룸 KCTC3108을 주입하고 진탕배양기로 37℃, 75rpm에서 48시간 동안 배양하였다. 균주의 영양분으로 포도당 일수화물(glucose monohydrate, 7.5% w/w) 및 황산암모늄(ammonium sulfate, 3% w/w)를 첨가하였다. 배양 후 상층액을 Whatman Grade No.2 여과지 및 pore size 0.2㎛의 시린지필터(syringe filter)로 여과하여 실시예 1 및 2를 제조하였다. 음성대조군으로는 포도당 일수화물 및 황산암모늄을 넣은 증류수를 사용하였다.
2.5% w/w 5% w/w 10% w/w
락토바실러스 플란타룸 KCTC3104 실시예 1(a) 실시예 1(b) 실시예 1(c)
락토바실러스 플란타룸 KCTC3108 실시예 2(a) 실시예 2(b) 실시예 2(c)
실시예 3 및 4. 락토바실러스 람노서스( Lactobacillus rhamnosus )로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 제조
락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) KCTC3237 및 락토바실러스 람노서스 KCTC5033 균주를 사용하여 72시간 배양한 것을 제외하면 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다. 음성대조군으로는 포도당 일수화물 및 황산암모늄을 넣은 증류수를 사용하였다.
2.5% w/w 5% w/w 10% w/w
락토바실러스 람노서스KCTC3237 실시예 3(a) 실시예 3(b) 실시예 3(c)
락토바실러스 람노서스 KCTC5033 실시예 4(a) 실시예 4(b) 실시예 4(c)
실시예 5. 락토바실러스 카세이( Lactobacillus casei )로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 제조
락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) KCTC3109를 사용한 것을 제외하면 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다. 음성대조군으로는 포도당 일수화물 및 황산암모늄을 넣은 증류수를 사용하였다.
2.5% w/w 5% w/w 10% w/w
락토바실러스 카세이KCTC3109 실시예 5(a) 실시예 5(b) 실시예 5(c)
실시예 6 및 7. 락토바실러스 가세리( Lactobacillus gasseri )로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 제조
락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) KCTC3143 균주를 사용하여 48시간(실시예 6) 또는 72시간(실시예 7) 배양한 것을 제외하면 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다. 음성대조군으로는 포도당 일수화물 및 황산암모늄을 넣은 증류수를 사용하였다.
2.5% w/w 5% w/w 10% w/w
락토바실러스 가세리KCTC3143
(48h)		 실시예 6(a) 실시예 6(b) 실시예 6(c)
락토바실러스 가세리KCTC3143
(72h)		 실시예 7(a) 실시예 7(b) 실시예 7(c)
비교예 1 내지 6. 비발효 새싹귀리 추출물 제조
발아 후 10일이 경과한 새싹귀리 분말을 2.5% w/w(a), 5% w/w(b), 10% w/w(c) 농도로 증류수에 넣은 후, 고압멸균기로 121℃에서 15분간 추출 및 살균하여 새싹귀리 열수추출물을 수득하였다. 증류수에 세척한 1.0×109 CFU/㎖의 락토바실러스 플란타룸 KCTC3104, 락토바실러스 플란타룸 KCTC3108, 락토바실러스 람노서스 KCTC3237, 락토바실러스 람노서스 KCTC5033, 락토바실러스 카세이 KCTC3109 및 락토바실러스 가세리 KCTC3143를 실험 직전 새싹귀리 추출물에 혼합하여 사용하였다(비교예 1 내지 6).
2.5% w/w 5% w/w 10% w/w
락토바실러스 플란타룸 KCTC3104 비교예 1(a) 비교예 1(b) 비교예 1(c)
락토바실러스 플란타룸 KCTC3108 비교예 2(a) 비교예 2(b) 비교예 2(c)
락토바실러스 람노서스KCTC3237 비교예 3(a) 비교예 3(b) 비교예 3(c)
락토바실러스 람노서스 KCTC5033 비교예 4(a) 비교예 4(b) 비교예 4(c)
락토바실러스 카세이KCTC3109 비교예 5(a) 비교예 5(b) 비교예 5(c)
락토바실러스 가세리KCTC3143 비교예 6(a) 비교예 6(b) 비교예 6(c)
실험예 1. 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 우수한 티로시나아제 활성 저해능 측정
실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 피부 미백 효능을 확인하기 위하여, 멜라닌의 생합성에 관여하는 주요 효소인 티로시나아제 활성 저해 시험(Tyrosinase Inhibitory Assay)을 수행하였다.
구체적으로, 각 e-tube에 pH 6.8의 0.1M 인산염완충액 660㎕를 주입하고, 각 e-tube에 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6를 60㎕씩 처리한 뒤 각 e-tube에 티로시나아제(750U/㎖)를 90㎕씩 처리하였다. 이후에 각 e-tube에 1.5mM L-tyrosine을 90㎕씩 처리하고 37℃에서 12분 동안 반응시켰다. 양성대조군으로는 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6 대신 미백 고시원료인 누룩산(Kojic acid) 또는 알부틴(arbutin) 60㎕을 동일한 방법으로 처리하여 준비하였으며, 음성대조군으로는 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6 대신 pH 6.8의 0.1M 인산염완충액 60㎕를 추가로 주입하여 동일한 방법으로 처리하여 준비하였다.
반응이 완료된 후, 96well plate에 150ul씩 분주하여 490㎚에서 멜라닌 생합성 기전에서 티로시나아제에 의해 생성되는 중간체인 도파크롬(Dopachrome)의 흡광도를 측정하여 하기의 식에 따라 티로시나아제 활성저해율을 측정하였다.
티로시나아제 활성저해율(%) =
a: 공시료액의 반응 후의 흡광도
b: 샘플의 반응 후의 흡광도
a', b': 티로시나아제 대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도
분석 결과, 실시예 1 내지 5는 모든 농도에서 동일한 농도의 비교예보다 높은 티로시나아제 활성저해율을 보였으며, 모든 농도에서 양성대조군인 누룩산보다 티로시나아제 활성저해율이 높은 것으로 나타났다. 또한, 실시예 6 내지 7은 모든 농도에서 동일한 농도의 비교예 6보다 높은 티로시나아제 활성저해율을 보였으며, 모든 농도에서 양성대조군인 알부틴보다 티로시나아제 활성저해율이 높은 것으로 나타났다.
특히, 실시예 1(c) 는 비교예 1(c) 대비 1.75배, 실시예 2(c)는 비교예 2(c) 대비 1.84배 증가하였으며(도 1), 실시예 3(c)는 3.02배, 실시예 4(c)는 비교예 4(c) 대비 2.86배 높은 저해율을 보였고(도 2), 실시예 5(b)는 비교예 5(b) 보다 1.64배 높은 저해율을 나타내었다(도 3). 또한, 실시예 6(c)는 저해율이 비교예 6(c) 대비 2.86배, 알부틴 대비 1.99배 높게 나타났으며, 실시예 7(c)는 비교예 6(c) 대비 2.58배, 알부틴 대비 1.92배 저해율이 증가한 것(도 4)을 확인할 수 있었다.
이와 같은 결과를 통하여, 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 피부 미백효능이 우수하며, 다양한 유산균으로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 중 락토바실러스 람노서스 KCTC5033을 주입하여 72시간 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 피부 미백 효능이 특히 우수한 것으로 확인되었다.
실험예 2. 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 우수한 엘라스타제 활성 저해능 측정
실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3의 주름개선 효능을 확인하기 위하여, 자외선에 의한 피부 탄성도 감소 및 주름 생성의 주요원인인 엘라스타제 활성 저해 시험(Elastase Inhibitory Assay)을 수행하였다.
구체적으로, 96 well plate에 pH 8의 0.1232M Tris-HCl(2-Amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol)에 용해한 1.015mM N-succinyl Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide를 200㎕씩 처리하였다. 각 well에 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3를 10㎕씩 처리한 뒤 25℃에서 10분 동안 방치하였다. 이후 각 well에 엘라스타제(3U/㎖)를 10㎕씩 처리하여 25℃에서 10분 동안 반응시켰다. 양성대조군으로는 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3 대신 항산화능이 우수한 것으로 알려진 EGCG(Epigallocatechin-3-gallate) 10㎕를 동일한 방법으로 처리하여 준비하였다.
반응이 완료된 후, 410㎚에서 파라-니트로아닐린(4-nitroaniline)의 흡광도(B)를 측정하여 하기의 식에 따라 엘라스타제 활성저해율을 측정하였다. 완충액은 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3과 동일하게 pH 8의 0.1232M Tris-HCl을 사용하였다.
엘라스타제 활성저해율(%) =
A: 시료 대신 완충액을 넣고 엘라스타제를 첨가하여 반응한 후의 흡광도
B: 엘라스타제를 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도
C: 엘라스타제 대신 완충액을 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도
D: 시료와 엘라스타제 대신 각각 완충액을 첨가해 반응한 후의 흡광도
분석 결과, 실시예 1 내지 3은 모든 농도에서 동일한 농도의 비교예보다 엘라스타제 활성저해율이 높은 것으로 나타났으며, 실시예 2(c) 및 실시예 3(a) 내지 3(c)는 양성대조군인 EGCG보다 높은 저해율을 나타내는 것을 확인할 수 있었다(도 5). 특히, 실시예 3(c)는 실시예 1 내지 3 중 엘라스타제 활성저해율이 가장 높게 나타났으며, 비교예 3(c) 대비 2배 증가하였다.
이와 같은 결과를 통하여, 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 주름개선 효능이 우수하며, 다양한 유산균으로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 중 락토바실러스 람노서스 KCTC3237을 주입하여 72시간 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 주름개선 효능이 특히 우수한 것으로 확인되었다.
실험예 3. 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 우수한 콜라게나제 활성 저해능 측정
실시예 3 내지 7 및 비교예 3 내지 6의 주름개선 효능을 확인하기 위하여, 세포외 기질에 존재하는 콜라겐 섬유를 분해하여 주름 생성의 주요 원인이 되는 콜라게나제 활성 저해 시험(Collagenase Inhibitory Assay)을 수행하였다.
구체적으로, 각 e-tube에 pH 7의 0.1M Tris-HCl 800㎕를 주입하고, 1㎎의 아조콜(azocoll, azo-dye impregnated collagen)을 첨가하여 녹였다. 각 e-tube에 실시예 3 내지 7 및 비교예 3 내지 6를 100㎕를 처리한 뒤, 100㎕의 콜라게나제(0.2㎎/㎖)를 처리하고 37℃에서 1시간 동안 교반하여 반응시켰다. 양성대조군으로는 실시예 3 내지 7 및 비교예 3 내지 6 대신 EGCG 100㎕를 동일한 방법으로 처리하여 준비하였다.
반응이 완료된 후, 각 e-tube를 10,000rpm에서 10분 동안 원심분리하고, 96 well plate에 상등액을 200㎕씩 분주하여 550nm에서 흡광도를 측정하였다. 상등액에는 분해된 콜라겐이 함유되어 있으며, 하기의 식에 따라 콜라게나제 활성저해율을 측정하였다. 완충액은 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3과 동일하게 pH 7의 0.1M Tris-HCl을 사용하였다.
콜라게나제 활성저해율(%) =
A: 시료 대신 완충액을 넣고 콜라게나제를 첨가하여 반응한 후의 흡광도
B: 콜라게나제를 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도
C: 콜라게나제 대신 완충액을 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도
D: 시료와 콜라게나제 대신 각각 완충액을 첨가해 반응한 후의 흡광도
분석 결과, 실시예 3 내지 7은 모든 농도에서 동일한 농도의 비교예보다 높은 콜라게나제 활성저해율을 보였으며, 모든 농도에서 양성대조군인 EGCG보다 콜라게나제 활성저해율이 높은 것으로 나타났다(도 6 및 7). 특히, 실시예 6(c)는 콜라게나제 활성저해율이 약 69%로 실시예 3 내지 7 중 가장 높게 나타났다.
이와 같은 결과를 통하여, 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 피부 주름개선 효능이 우수하며, 다양한 유산균으로 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물 중 락토바실러스 가세리 KCTC3143을 주입하여 48시간 발효한 새싹귀리 포스트바이오틱스 조성물의 주름개선 효능이 특히 우수한 것으로 확인되었다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (7)

  1. 새싹귀리(Avena sativa) 발효물을 포함하는 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 새싹귀리 발효물은 새싹귀리 추출물을 발효한 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 새싹귀리 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 용매로 추출되는 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 새싹귀리 발효물은 35 내지 40℃에서 40 내지 80시간 동안 배양된 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 발효는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 및 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 균주로 이루어지는 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 새싹귀리 발효물은 화장료 조성물 100 중량부에 대하여 0.01 내지 30.0 중량부로 포함되는 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 미백 및 주름개선용 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것인 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20210137739A (ko) * 2020-05-11 2021-11-18 주식회사 위드바이오코스팜 포스트바이오틱 발효 산물의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 포스트바이오틱 발효 산물
KR20220006892A (ko) * 2020-07-09 2022-01-18 주식회사 유렌코리아 피부 보습 및 주름 개선용 화장품 조성물의 제조 방법

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