KR20230106361A

KR20230106361A - 피부 흡수 증진을 위한 양이온성 리포좀 및 이의 제조 방법

Info

Publication number: KR20230106361A
Application number: KR1020220002164A
Authority: KR
Inventors: 김수지; 이준배; 박명삼
Original assignee: 코스맥스 주식회사
Priority date: 2022-01-06
Filing date: 2022-01-06
Publication date: 2023-07-13
Also published as: WO2023132553A1; KR20230121987A

Abstract

고압유화장치를 이용하여 양이온성 리포좀을 제조하는 방법, 상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀, 상기 양이온성 리포좀을 포함하는 화장료 조성물, 식품 조성물 및 약학적 조성물을 제공한다. 상기 양이온성 리포좀을 제조하는 방법에 따르면, 고압유화장치를 이용하여 독성 유기용매를 사용하지 않아 피부에 안전한 리포좀을 제조할 수 있으며, 리포좀의 대량생산이 가능하다. 또한, 상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀은 제형 안정성이 우수하며, 양전하를 띠므로 내부에 담지된 유효성분의 피부 흡수능을 증진시킬 수 있다. 따라서, 상기 양이온성 리포좀을 화장품, 식품, 의약품 등에 사용할 수 있다.

Description

피부 흡수 증진을 위한 양이온성 리포좀 및 이의 제조 방법{Cationic liposome for improving the skin penetration and preparation method thereof}

유효성분의 피부 흡수 증진을 위한 양이온성 리포좀, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이들의 제조 방법에 관한 것이다.

피부 장벽은 각질층 세포 사이사이의 세포 외 공간을 채우는 지질 분자로 구성되어 있는 덕분에, 피부의 항상성 유지와 다양한 외부 물리적 자극 및 수화/탈수 등에 대한 변화로부터 피부를 보호하는데 매우 중요한 역할을 한다. 하지만 유효성분을 피부 내로 전달하고자 할 때 이러한 피부 장벽은 다소 불리하게 작용한다. 특히 유효성분은 가장 보편적으로 세포 내 경로(inter cellular pathway)를 통해 피부 내로 전달된다고 알려져 있는데, 친수성 유효성분의 경우 지질 분자로 구성되어 있는 이러한 경로를 통과하기는 더욱 어렵다. 따라서 이것을 극복하기 위해서는 생체 친화성 피부 전달 시스템이 필요하다.

리포좀은 유효성분의 피부 흡수 증진을 위해 사용되는 대표적인 피부 전달체이며, 생체 내 물질인 인지질로 구성되어 있어 생체 친화성이 높아 화장품 분야에서도 활용도가 높은 편이다. 특히 친수성과 친유성 물질을 동시에 담지 할 수 있는 특징을 가지고 있어 다양한 효능 성분의 피부 전달에 유리하다. 또한, 유효성분을 이중충 또는 다중충 구조 내에 안정하게 담지 할 수 있어 유화 제형뿐만 아니라 외관이 투명한 가용화 제형까지 다양한 화장품 제형에 적용이 가능하다. 리포좀은 막의 구성성분에 따라 탄성 리포좀, 고분자 코팅 리포좀, 양이온 리포좀 등으로 제조 될 수 있다. 이중 양이온 리포좀은 양의 제타 전위를 갖는 리포좀으로, 음전하를 띠는 피부 표면과의 정전기적 인력으로 인해 피부로의 접근이 보다 용이하여 유효성분의 피부 흡수 증진에 도움이 된다.

리포좀의 원료화를 위해서는 안정성과 실제 제형에 적용되었을 때 담지된 유효성분의 효능 발휘가 잘 되는지를 평가하는 것이 가장 중요하다. 리포좀은 박막수화법(thin film hydration method)을 통해 제조되는 것이 가장 기본적인 방법이지만, 안정성이나 양산화 등에 있어서는 한계가 있다. 최근에는 리포좀 제조를 위해 고압유화기(Microfluidizer)를 활용하는 제조 방법이 보고되고 있다. 하지만 고압유화기를 통해 제조 시 리포좀 특유 입자 형태인 이중층 또는 다중층 형태의 입자가 생성되기 어려운 점이 있다. 따라서, 이렇게 제조된 리포좀의 형태 확인 및 제형 내 적용 시 유효성분의 피부 전달에 실제로 도움을 주는지에 대한 효능 평가를 통해 확인해 볼 필요가 있다.

고압유화장치를 이용하여 양이온성 리포좀을 제조하는 방법을 제공한다.

상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀을 제공한다.

상기 양이온성 리포좀을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 양이온성 리포좀을 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

상기 양이온성 리포좀을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

상기 양이온성 리포좀을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.

일 양상은 고압유화장치를 이용하여 양이온성 리포좀을 제조하는 방법을 제공한다.

상기 방법은, 인지질, 세라마이드 및 콜레스테롤을 포함하는 제1 용액을 제조하는 단계; 양이온 공여물질을 포함하는 제2 용액 및 상기 제1 용액의 혼합물을 교반하는 단계; 및 고압유화장치를 이용하여 상기 교반된 혼합물로부터 양이온성 리포좀을 제조하는 단계를 포함한다.

종래 리포좀 제조 방법 중 박막수화법은 유기 용매가 사용되며, 대량 생산이 어렵다는 문제점이 있다. 이와 달리, 상기 일 양상에 따른 양이온성 리포좀의 제조 방법은 고압유화장치를 이용하여 제조되기 때문에 유기 용매의 사용이 불필요하며, 대량 생산 또한 용이하다.

상기 방법은 인지질, 세라마이드 및 콜레스테롤을 포함하는 제1 용액을 제조하는 단계를 포함한다.

상기 제1 용액은 제1 용액에 포함되는 성분들을 가온 용해시킴으로써 제조될 수 있다. 상기 가온 용해 시 온도는 60 내지 90℃, 60 내지 85℃, 60 내지 80℃, 65 내지 90℃, 65 내지 85℃, 65 내지 80℃, 70 내지 90℃, 70 내지 85℃, 또는 70 내지 80℃일 수 있다.

상기 인지질(phospholipid)은 극성을 띠는 인산염과 비극성인 지방산을 포함하는 지질의 일종으로, 생체막의 주요 성분이다. 상기 인지질은 천연 인지질 또는 합성 인지질일 수 있다. 상기 인지질은 레시틴(lecithin), 하이드로제네이티드레시틴, 포스파티딜콜린(PC), 포스파티딜글리세롤(PG), 포스파티딜에탄올아민(PE), 포스파티딜세린(PS), 포스파티드산(PA), 포스파티딜이노시톨(PI), 달걀 포스파티딜콜린(EPC), 달걀 포스파티딜글리세롤(EPG), 달걀 포스파티딜에탄올아민(EPE), 달걀 포스파티딜세린(EPS), 달걀 포스파티드산(EPA), 달걀 포스파티딜이노시톨(EPI), 콩 포스파티딜콜린(SPC), 콩 포스파티딜글리세롤(SPG), 콩 포스파티딜에탄올아민(SPE), 콩 포스파티딜세린(SPS), 콩 포스파티드산(SPA), 콩 포스파티딜이노시톨(SPI), 다이팔미토일포스파티딜콜린(DPPC), 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스파티딜콜린(DOPC), 다이미리스토일포스파티딜콜린(DMPC), 다이팔미토일포스파티딜글리세롤(DPPG), 다이올렐포스파티딜글리세롤(DOPG), 다이미리스토일포스파티딜글리세롤(DMPG), 헥사데실포스포콜린(HEPC), 수소화된 콩 포스파티딜콜린(HSPC), 다이스테아로일포스파티딜콜린(DSPC), 다이스테아로일포스파티딜글리세롤(DSPG), 다이올레일포스파티딜에탄올아민(DOPE), 팔미토일스테아로일포스파티딜콜린(PSPC), 팔미토일스테아로일포스파티딜글리세롤(PSPG), 모노올레오일포스파티딜에탄올아민(MOPE), 1-팔미토일-2-올레오일-sn-글리세로-3-포스파티딜콜린(POPC), 폴리에틸렌글리콜 다이스테아로일포스파티딜에탄올아민(PEG-DSPE), 다이팔미토일포스파티딜세린(DPPS), 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스파티딜세린(DOPS), 다이미리스토일포스파티딜세린(DMPS), 다이스테아로일포스파티딜세린(DSPS), 다이팔미토일포스파티드산(DPPA), 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스파티드산(DOPA), 다이미리스토일포스파티드산(DMPA), 다이스테아로일포스파티드산(DSPA), 다이팔미토일포스파티딜이노시톨(DPPI), 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스파티딜이노시톨(DOPI), 다이미리스토일포스파티딜이노시톨(DMPI), 다이스테아로일포스파티딜이노시톨(DSPI), 또는 이의 조합일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 인지질은 하이드로제네이티드레시틴일 수 있다.

상기 인지질은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.1 내지 5.0 중량%, 0.1 내지 4.0 중량%, 0.1 내지 3.0 중량%, 0.1 내지 2.0 중량%, 0.1 내지 1.0 중량%, 0.1 내지 0.7 중량%, 0.3 내지 5.0 중량%, 0.3 내지 4.0 중량%, 0.3 내지 3.0 중량%, 0.3 내지 2.0 중량%, 0.3 내지 1.0 중량%, 0.3 내지 0.7 중량%, 0.4 내지 2.0 중량%, 0.4 내지 1.0 중량%, 0.4 내지 0.7 중량%, 또는 0.4 내지 0.6 중량%로 포함될 수 있다.

상기 세라마이드는 세라마이드 NS, 세라마이드 AS, 세라마이드 EOS, 세라마이드 NDS, 세라마이드 ADS, 세라마이드 EODS, 세라마이드 NP, 세라마이드 AP, 세라마이드 EOP, 세라마이드 NH, 세라마이드 AH, 세라마이드 EOH, 또는 이의 조합일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 세라마이드는 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.001 내지 0.5 중량%, 0.001 내지 0.1 중량%, 0.005 내지 0.5 중량%, 0.005 내지 0.1 중량%, 0.01 내지 0.5 중량%, 0.01 내지 0.1 중량%, 또는 0.01 내지 0.05 중량%로 포함될 수 있다. 상기 세라마이드의 함량은 생체 피부와의 유사성을 높이기 위해 통상의 기술자가 적절한 범위에서 선택할 수 있다.

상기 인지질 및 콜레스테롤의 중량비는 5:1 내지 1:1, 4.5:1 내지 1.5:1, 4:1 내지 1.5:1, 3.5:1 내지 1.5:1, 3:1 내지 1.5:1, 2.5:1 내지 1.5:1, 4.5:1 내지 2:1, 4:1 내지 2:1, 3.5:1 내지 2:1, 3:1 내지 2:1, 2.5:1 내지 2:2, 또는 2:1일 수 있다. 상기 콜레스테롤의 함량이 인지질 함량에 비해 지나치게 적거나(예: 인지질 및 콜레스테롤의 중량비가 5:1), 인지질 함량과 동등 이상으로 많을 경우(예: 인지질 및 콜레스테롤의 중량비가 1:1), 상이 분리되거나 현탁 현상이 발생할 수 있다. 따라서, 상기 인지질 및 콜레스테롤의 중량비는 5 미만:1 내지 1 초과:1일 수 있다. 상기 중량비의 인지질 및 콜레스테롤을 사용함으로써, 고압유화장치를 통한 리포좀 제조 방법을 사용하더라도 리포좀 특유의 입자 형태인 이중층 또는 다중층 형태의 입자를 얻을 수 있다. 일 실시예에서, 인지질 및 콜레스테롤의 중량비가 2:1인 경우 상온에서 5주 이상 입자 크기 및 제타 전위가 변화하지 않아 안정함을 확인하였다.

상기 콜레스테롤은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.1 내지 5.0 중량%, 0.1 내지 4.0 중량%, 0.1 내지 3.0 중량%, 0.1 내지 2.0 중량%, 0.1 내지 1.0 중량%, 0.1 내지 0.5 중량%, 0.1 내지 0.4 중량%, 0.1 내지 0.3 중량%, 0.2 내지 5.0 중량%, 0.2 내지 4.0 중량%, 0.2 내지 3.0 중량%, 0.2 내지 2.0 중량%, 0.2 내지 1.0 중량%, 0.2 내지 0.5 중량%, 0.2 내지 0.4 중량%, 또는 0.2 내지 0.3 중량%로 포함될 수 있다. 콜레스테롤의 함량이 상기 범위를 벗어날 경우 리포좀의 막 안정성이 저하될 수 있다.

상기 제1 용액은 인지질, 콜레스테롤 및 세라마이드를 용해시킬 수 있는 용매를 포함할 수 있다. 상기 제1 용액은 폴리올을 더 포함할 수 있다. 상기 제1 용액은 디프로필렌글라이콜을 더 포함할 수 있다. 상기 디프로필렌글라이콜은 지질부 또는 유상의 물질을 용해시키기 위해 사용될 수 있다. 상기 디프로필렌글라이콜은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 5 내지 20 중량%, 5 내지 15 중량%, 5 내지 12 중량%, 8 내지 20 중량%, 8 내지 15 중량%, 8 내지 12 중량%, 또는 10 중량%로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 제1 용액은 상기 양이온성 리포좀의 물성에 실질적인 영향을 미치지 않는 추가 성분을 더 포함할 수 있다. 상기 추가 성분의 함량은 목적하는 바에 따라 양이온성 리포좀의 물성에 실질적인 영향을 미치지 않는 범위 내에서 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다.

상기 제1 용액은 하이드로제네이티드레시틴, 콜레스테롤, 세라마이드 및 디프로필렌글라이콜로 구성될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 방법은 양이온 공여물질을 포함하는 제2 용액 및 상기 제1 용액의 혼합물을 교반하는 단계를 포함한다.

상기 제2 용액은 양이온 공여물질을 포함함으로써 최종적으로 제조되는 리포좀이 양전하(+)를 띠도록 만들 수 있다. 상기 양이온 공여물질은 라우르디모늄 하이드록시프로필 가수분해 밀 단백질(Laurdimonium Hydroxypropyl Hydrolyzed Wheat Protein), 구아 하이드록시프로필트리모늄 클로라이드(Guar Hydroxypropyltrimonium Chloride), 폴리쿼터늄-7(Polyquaternium-7), 폴리쿼터늄-10(Polyquaternium-10), 폴리쿼터늄-11(Polyquaternium-11), 폴리쿼터늄-22(Polyquaternium-22), 폴리쿼터늄-51(Polyquaternium-51), 폴리쿼터늄-67(Polyquaternium-67), 폴리쿼터늄-80(Polyquaternium-80), 코카미도프로필아민옥사이드(Cocamidopropylamine Oxide), 스테아르아미도프로필 디메틸아민(Stearamidopropyl Dimethylamine), 베헨트리모늄클로라이드(Behentrimonium Chloride), 및 키토산으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 양이온 공여물질은 양이온성 다당류일 수 있다. 상기 양이온성 다당류는 천연 다당류 또는 합성 다당류일 수 있다. 상기 양이온 공여물질은 키토산일 수 있다.

상기 양이온 공여물질은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.01 중량% 초과, 0.01 초과 내지 5.0 중량%, 0.01 초과 내지 4.0 중량%, 0.01 초과 내지 3.0 중량%, 0.01 초과 내지 2.0 중량%, 0.05 중량% 이상, 0.05 내지 5.0 중량%, 0.05 내지 4.0 중량%, 0.05 내지 3.0 중량%, 0.05 내지 2.0 중량%, 0.05 내지 1.5 중량%, 0.05 내지 1.0 중량%, 0.05 내지 0.5 중량%, 0.05 내지 0.2 중량%, 또는 0.05 내지 0.1 중량%로 포함될 수 있다. 상기 양이온 공여물질이 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.01 중량% 이하로 포함될 경우 리포좀의 제타 전위가 마이너스(-)일 수 있고, 그에 따라 음이온성 리포좀이 얻어질 수 있다. 따라서, 상기 양이온 공여물질은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.01 중량% 초과로 포함되는 것이 바람직하다. 상기 양이온 공여물질이 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.05 중량% 이상으로 포함될 경우 제타 전위 20 mV 이상의 양이온성 리포좀을 얻을 수 있다.

상기 제2 용액은 양이온 공여물질을 용해시킬 수 있는 용매를 포함할 수 있다. 상기 제2 용액은 친수성 용매를 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 친수성 용매는 물(예: 증류수)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 제2 용액은 부틸렌글라이콜을 더 포함할 수 있다. 상기 부틸렌글라이콜을 포함시킴으로써 리포좀 내 담지될 성분의 용해도를 향상시키거나 및/또는 피부 보습력이 향상될 수 있다. 상기 부틸렌글라이콜은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 5 내지 20 중량%, 5 내지 15 중량%, 5 내지 12 중량%, 8 내지 20 중량%, 8 내지 15 중량%, 8 내지 12 중량%, 또는 10 중량%로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 제2 용액은 친수성 유효성분을 더 포함할 수 있다. 상기 친수성 유효성분은 피부 기능성 유효성분일 수 있다. 상기 피부 기능성은 피부 미백, 보습, 피부 장벽 강화, 항산화, 항염, 항노화, 주름 개선, 피부 진정 등일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 친수성 유효성분은 공지된 것이라면 그 종류를 제한하지 않고 사용할 수 있다. 예를 들어, 상기 친수성 유효성분은 나이아신아마이드일 수 있다.

상기 친수성 유효성분의 함량은 성분의 종류 및 목적을 고려하여 양이온성 리포좀의 물성에 실질적인 영향을 미치지 않는 범위 내에서 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다. 구체적으로, 상기 친수성 유효성분은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.001 내지 30 중량%, 0.001 내지 20 중량%, 또는 0.001 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 친수성 유효성분이 나이아신아마이드인 경우, 상기 나이아신아마이드는 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.001 내지 30 중량%, 0.001 내지 20 중량%, 0.001 내지 15 중량%, 0.01 내지 30 중량%, 0.01 내지 20 중량%, 0.01 내지 15 중량%, 0.1 내지 30 중량%, 0.1 내지 20 중량%, 0.1 내지 15 중량%, 1 내지 30 중량%, 1 내지 20 중량%, 또는 1 내지 15 중량%로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 제2 용액은 상기 양이온성 리포좀의 물성에 실질적인 영향을 미치지 않는 추가 성분을 더 포함할 수 있다. 상기 추가 성분의 함량은 목적하는 바에 따라 양이온성 리포좀의 물성에 실질적인 영향을 미치지 않는 범위 내에서 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다.

상기 교반은 상기 제2 용액에 상기 제1 용액을 서서히 투입 또는 혼합하면서 수행될 수 있다.

상기 교반은 실온, 예를 들어 15 내지 35℃, 15 내지 30℃, 20 내지 35℃, 또는 20 내지 30℃에서 수행될 수 있다.

상기 교반은 1,500 내지 3,500 rpm, 1,500 내지 3,000 rpm, 2,000 내지 3,500 rpm, 또는 2,000 내지 3,000 rpm으로 수행될 수 있다. 상기 교반은 30초 내지 30분, 30초 내지 20분, 30초 내지 10분, 30초 내지 5분, 1분 내지 30분, 1분 내지 20분, 1분 내지 10분, 또는 1분 내지 5분 동안 수행될 수 있다.

상기 교반은 통상적인 방법에 따라 수행될 수 있으며, 예를 들어 호모믹서를 사용하여 수행될 수 있다.

상기 방법은 고압유화장치를 이용하여 상기 교반된 혼합물로부터 양이온성 리포좀을 제조하는 단계를 포함한다.

상기 양이온성 리포좀을 제조하는 단계에서 고압유화장치를 이용하여 상기 교반된 혼합물을 고압유화(high pressure emulsification) 처리할 수 있다.

상기 고압유화장치는 공지된 것이라면 그 종류를 제한하지 않으나, 예를 들어 마이크로플루다이저(Microfluidizer, MF) 또는 고압 균질기(high pressure homogenizer)일 수 있다.

상기 고압유화장치의 압력 조건은 800 내지 1500 bar, 800 내지 1200 bar, 800 내지 1100 bar, 800 내지 1000 bar, 900 내지 1500 bar, 900 내지 1200 bar, 900 내지 1100 bar, 900 내지 1000 bar, 1000 내지 1500 bar, 1000 내지 1200 bar, 1000 내지 1100 bar, 또는 1000 bar일 수 있다. 상기 압력이 지나치게 낮을 경우, 나노입자가 제대로 형성되지 않을 수 있다. 상기 압력이 지나치게 높을 경우 물리적 힘이 과하게 적용되어 안정도가 하락할 수 있다.

상기 고압유화장치는 2 cycle 이상, 3 cycle 이상, 2 cycle 내지 5 cycle, 2 cycle 내지 4 cycle, 3 cycle 내지 5 cycle, 또는 3 cycle의 조건으로 적용될 수 있다.

상기 고압유화장치의 압력 및 cycle 조건에서 양이온성 리포좀을 제조할 경우 제형 안정성이 우수한 양이온성 나노 리포좀을 얻을 수 있다.

상기 고압유화장치의 압력 및 cycle 조건에서 상기 양이온성 리포좀을 제조하는 경우, 리포좀 특유의 입자 형태인 이중층 또는 다중층 형태의 입자를 얻을 수 있다.

상기 양이온성 리포좀은 고압유화장치를 이용하여 제조되므로, 제조 과정에서 독성 유기용매를 사용하지 않아 안전하며, 리포좀의 대량 생산이 가능하다.

다른 양상은 상기 일 양상에 따른 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀을 제공한다.

상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀은 제조 과정에서 독성 유기용매를 사용하지 않으므로 무독성일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀 및 이를 포함하는 화장료 조성물은 피부자극지수 평가 결과 무자극으로 피부에 안전함을 확인하였다. 따라서, 상기 양이온성 리포좀은 화장품, 식품, 의약품 등에 안전하게 사용될 수 있다.

상기 양이온성 리포좀의 입자 크기는 50 내지 300 nm, 50 내지 250 nm, 100 내지 300 nm, 100 내지 250 nm, 150 내지 300 nm, 150 내지 250 nm, 200 내지 300 nm, 또는 200 내지 250 nm일 수 있다. 상기 양이온성 리포좀의 평균 입자 크기는 200 내지 250 nm일 수 있다. 따라서, 상기 양이온성 리포좀은 나노 리포좀일 수 있다. 상기 양이온성 리포좀은 나노 크기이므로 피부 투과 효능이 우수할 수 있다.

상기 양이온성 리포좀의 제타 전위는 20 내지 50 mV, 20 내지 45 mV, 25 내지 50 mV, 또는 25 내지 40 mV일 수 있다. 상기 양이온성 리포좀은 양전하(+)를 띠기 때문에 음전하(-)를 띠는 피부 표면에 정전기적 인력을 이용하여 효과적으로 흡착될 수 있고, 그에 따라 리포좀 내에 담지된 피부 효능 성분의 피부 흡수능을 향상시킬 수 있다.

상기 양이온성 리포좀은 실온에서 5주 이상 보관하여도 입자 크기 및 제타 전위가 잘 유지되므로, 제형 안정성이 우수할 수 있다.

상기 양이온성 리포좀은 이중층(bi-layer) 또는 다중층(multi-layer)의 구조를 갖는 것일 수 있다. 상기 양이온성 리포좀은 이중층 구조의 리포좀 및 다중층 구조의 리포좀이 혼합된 것일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 양이온성 리포좀은 고압유화장치를 이용하여 제조하였음에도 불구하고 이중층 또는 다중층의 리포좀 특유 형태를 가짐을 확인하였다.

상기 양이온성 리포좀은 리포좀 내에 피부 기능성 유효성분이 담지된 것일 수 있다. 상기 피부 기능성 유효성분은 친수성 유효성분일 수 있다. 상기 피부 기능성 유효성분은 나이아신아마이드일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 일 실시예에서, 상기 양이온성 리포좀 내에 나이아신아마이드를 담지하여 피부에 전달할 경우, 상기 양이온성 리포좀을 사용하지 않고 조성물 내에 나이아신아마이드를 포함시켜 피부에 전달하는 경우에 비해, 피부 밝기 변화량, 멜라닌 변화량 및 기미 변화량이 유의하게 증가함을 확인하였다. 따라서, 상기 양이온성 리포좀은 리포좀 내에 담지된 피부 기능성 유효성분의 피부 흡수능이 증진된 것일 수 있다.

다른 양상은 양이온성 리포좀을 포함하는 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 양이온성 리포좀에 담지된 유효성분을 전달하기 위한 조성물일 수 있다. 구체적으로, 상기 조성물은 양이온성 리포좀에 담지된 유효성분을 피부에 전달하기 위한 조성물일 수 있다.

상기 조성물은 조성물 총 중량에 대해 양이온성 리포좀을 0.001 내지 50 중량%, 0.001 내지 40 중량%, 0.001 내지 30 중량%, 0.001 내지 20 중량%, 0.01 내지 50 중량%, 0.01 내지 40 중량%, 0.01 내지 30 중량%, 0.01 내지 20 중량%, 0.1 내지 50 중량%, 0.1 내지 40 중량%, 0.1 내지 30 중량%, 또는 0.1 내지 20 중량%로 포함할 수 있다.

일 구체예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.

상기 화장료 조성물은 본 명세서에 개시된 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 기능성 첨가물 등을 추가로 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 분산제, 점증제, 보습제, 방부제, 비타민, 안료, 향료 등과 같은 통상적인 보조제, 그리고 화장품학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들면, 상기 화장료 조성물은 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 앰플, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 파운데이션, 립스틱, 마스카라, 또는 메이크업 베이스의 화장료 제형을 갖는 것일 수 있다.

일 구체예에서, 상기 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있다.

상기 피부 외용제는 크림, 겔, 연고, 피부 유화제, 피부 현탁액, 경피전달성 패치, 약물 함유 붕대, 로션, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 피부외용제는 통상 화장품이나 의약품 등의 피부외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제, 또는 이들의 조합과 필요에 따라서 적절하게 배합될 수 있다.

일 구체예에서, 상기 조성물은 식품 조성물일 수 있다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다.

상기 건강기능식품 조성물은 상기 양이온성 리포좀 단독, 또는 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 건강기능식품의 종류 중 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한, 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육, 또는 그 조합을 함유할 수 있다.

일 구체예에서, 상기 조성물은 약학적 조성물일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 희석제는 유당, 옥수수 전분, 대두유, 미정질 셀룰로오스, 또는 만니톨, 활택제로는 스테아린산 마그네슘, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 담체는 부형제, 붕해제, 결합제, 활택제, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 부형제는 미결정 셀룰로오즈, 유당, 저치환도 히드록시셀룰로오즈, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 붕해제는 카르복시메틸셀룰로오스 칼슘, 전분글리콜산 나트륨, 무수인산일수소 칼슘, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 결합제는 폴리비닐피롤리돈, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오즈, 히드록시프로필셀룰로오즈, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 활택제는 스테아린산 마그네슘, 이산화규소, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여 제형으로 제형화될 수 있다. 경구 투여 제형은 과립제, 산제, 액제, 정제, 캅셀제, 건조시럽제, 또는 그 조합일 수 있다. 비경구 투여 제형은 주사제일 수 있다.

중복되는 내용은 본 명세서의 복잡성을 고려하여 생락하며, 본 명세서에서 달리 정의되지 않은 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는 것이다.

일 양상에 따른 양이온성 리포좀을 제조하는 방법에 따르면, 고압유화장치를 이용하여 독성 유기용매를 사용하지 않아 피부에 안전한 리포좀을 제조할 수 있으며, 리포좀의 대량생산이 가능하다.

또한, 상기 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀은 제형 안정성이 우수하며, 양전하를 띠므로 내부에 담지된 유효성분의 피부 흡수능을 증진시킬 수 있다. 따라서, 상기 양이온성 리포좀을 화장품, 식품, 의약품 등에 사용할 수 있다.

도 1은 제조 후 5주 동안 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 크기(nm) 변화를 측정한 결과이다.
도 2는 제조 후 5주 동안 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 제타 전위(mV) 변화를 측정한 결과이다.
도 3은 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 구조를 나타낸 결과이다.
도 4는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 밝기(L-value)를 나타낸 그래프이다.
도 5는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 밝기 변화량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 멜라닌 지수(Melanin Index, M.I)를 나타낸 그래프이다.
도 7은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 멜라닌 변화량을 나타낸 그래프이다.
도 8은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 기미(mm²)를 확인한 결과이다.
도 9는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 기미 변화량을 나타낸 그래프이다.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 키토산 함량에 따른 양이온성 리포좀의 물성 평가

키토산 함량을 달리하여 양이온성 리포좀을 제조하고, 이의 제타 전위를 측정하는 실험을 하였다.

먼저, 하기 표 1의 성분 및 함량(중량%)으로 양이온성 나노 리포좀을 제조하였다. 실시예 1-1 내지 1-5의 양이온성 리포좀은 키토산의 함량에만 차이가 있다.

구체적인 제조 방법은 다음과 같다. 레시틴과 디프로필렌글라이콜로 구성된 A상을 70~80℃로 가온 용해 시켰다. 키토산이 포함된 실온의 수상부 B상에 A상을 서서히 투입하면서 호모믹서로 2,000 내지 3,000 rpm에서 5분 동안 교반하였다. 1차 교반 후 1,000 bar, 3 cycle 조건으로 고압유화 처리하여 최종적으로 리포좀을 제조하였다.

	성분	함량 (중량%)
	성분	실시예 1-1	실시예 1-2	실시예 1-3	실시예 1-4	실시예 1-5
A	하이드로제네이티드레시틴	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50
A	디프로필렌글라이콜	10.00	10.00	10.00	10.00	10.00
B	증류수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100
	부틸렌글라이콜	10.00	10.00	10.00	10.00	10.00
	키토산	-	0.01	0.05	0.10	0.50
	방부제	적량	적량	적량	적량	적량

다음으로, 키토산의 함량에 따른 양이온성 리포좀의 제타 전위(zeta potential)를 측정하였다. 측정 장치로서 동적 광산란 장치(dynamic light scattering, DLS, SZ-100 HORIBA)를 사용하였다. 키토산 함량에 따른 양이온성 리포좀의 제타 전위 측정 결과는 표 2에 나타내었다.

	실시예 1-1	실시예 1-2	실시예 1-3	실시예 1-4	실시예 1-5
제타 전위 (zeta potential, mV)	-34.9	-4.0	28.4	28.8	29.2

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 키토산이 포함되지 않은 양이온성 리포좀(실시예 1-1)의 제타 전위는 -34.9 mV였다. 키토산의 함량이 증가할수록 제타 전위 또한 증가하였으나, 키토산 함량 0.1 중량% 이상부터는 제타 전위가 더 이상 큰폭으로 증가하지 않았다. 이에 따라, 양이온성 리포좀 제조에서 키토산의 함량은 0.05 중량%로 설정하여 추후 실험을 진행하였다.

실시예 2. 콜레스테롤 함량에 따른 양이온성 리포좀의 물성 평가

키토산의 함량을 일정하게 고정하고 콜레스테롤의 함량을 달리하여 양이온성 리포좀을 제조하고, 이의 입자 크기 및 제타 전위를 측정하여 안정도를 평가하였다.

먼저, 실시예 1과 동일한 방법을 사용하여 하기 표 3의 성분 및 함량(중량%)으로 양이온성 리포좀을 제조하였다. 실시예 2-1 내지 2-3의 양이온성 리포좀은 콜레스테롤의 함량에만 차이가 있다. 생체와의 유사성 및 피부 안전성을 높이기 위해 세라마이드와 콜레스테롤을 사용하였다. 콜레스테롤의 경우 리포좀의 막 안정성 향상에 도움을 준다고 알려져 있기 때문에 콜레스테롤의 함량을 달리하여 제조하였다.

	성분	함량 (중량%)
	성분	실시예 2-1	실시예 2-2	실시예 2-3
A	하이드로제네이티드레시틴	0.50	0.50	0.50
	콜레스테롤	0.10	0.25	0.50
	세라마이드	0.01	0.01	0.01
	디프로필렌글라이콜	10.00	10.00	10.00
B	증류수	To 100	To 100	To 100
	부틸렌글라이콜	10.00	10.00	10.00
	키토산	0.05	0.05	0.05
	방부제	적량	적량	적량

다음으로, 제조 직후와 실온 보관 3일 후 육안 평가를 통해 안정도를 확인하였다.

육안 평가 결과, 레시틴보다 콜레스테롤의 함량이 너무 적거나 동일한 경우(실시예 2-1 및 2-3), 상이 분리되거나 색이 뿌옇게 되는 현탁 현상이 발생하였다. 반면 실시예 2-2의 양이온성 리포좀은 상이 분리되지 않았으며, 현탁 현상도 발생하지 않았다.

따라서, 동적 광산란 장치를 이용하여 제조 직후와 실온 보관 5주 동안 매주 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 크기 및 제타 전위를 측정하였다.

도 1은 제조 후 5주 동안 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 크기(nm) 변화를 측정한 결과이다.

도 2는 제조 후 5주 동안 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 제타 전위(mV) 변화를 측정한 결과이다.

도 1 및 2에 나타낸 바와 같이, 레시틴과 콜레스테롤의 중량비가 2:1인 실시예 2-2의 양이온성 리포좀은 입자 크기 및 제타 전위가 5주 동안 안정하였다.

한편, 상기 실시예 1의 제조 방법 중 고압유화 조건만을 달리하여 실시예 2-1 내지 2-3의 양이온성 리포좀을 각각 제조하고, 그의 입자 크기를 측정하는 실험을 별도로 진행하였다. 고압유화 조건은 다음과 같이 3가지로 설정하였다: (i) 1000 bar, 1 cycle, (ii) 1000 bar, 3 cycle, (iii) 1000 bar, 5 cycle.

통계 프로그램을 이용하여 입자 크기를 비교해본 결과, 1 cycle과 3 cycle은 유의한 차이가 있었으나, 3 cycle과 5 cycle은 유의한 차이가 없었다. 따라서, 고압유화 조건 (ii)가 가장 적합함을 확인하였다.

실험예 1. 양이온성 리포좀의 입자 구조 분석

실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 구조 분석을 수행하였다.

제조된 양이온성 리포좀 입자의 구조 분석을 위하여 Cryo-TEM (Cryogenic transmission electron microscopy)을 이용하였다. Cryo-TEM은 샘플을 초저온 상태로 유지하여 본래의 형태 구조 관찰이 가능하기 때문에 리포좀 입자의 이중층 또는 다중층 구조 확인에 적합하다. 구체적인 분석 방법은 다음과 같다. 실시예 2-2의 양이온성 리포좀 5 μL를 200 mesh carbon lacey film Cu-grid에 로딩한 뒤 Vitrobot으로 액화된(약 -170 ℃) 에탄에 담궈 낙하 동결(plunge freeze)시켰다. 만들어진 동결 시료를 가속전압 200 kV 하에서 Cryo-TEM (Tecnai F20, FEI)으로 관찰하였다.

도 3은 실시예 2-2의 양이온성 리포좀의 입자 구조를 나타낸 결과이다.

도 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 2-2의 양이온성 리포좀은 입자 크기가 약 100 내지 300 nm 정도였다. 또한, 리포좀의 특징이라 할 수 있는 이중층(bi-layer)과 다중층(multi-layer) 구조가 혼합되어 형성되어 있는 것을 확인할 수 있었다.

실시예 3. 양이온성 리포좀의 제조

실시예 1 및 2를 통해 안정도가 가장 우수한 조건으로 확인된 실시예 2-2의 양이온성 리포좀에 나이아신아마이드 10 중량%를 담지시켰다. 구체적으로, 실시예 1과 동일한 방법을 사용하여 하기 표 4의 성분 및 함량(중량%)으로 양이온성 리포좀을 제조하였다.

	성분	함량 (중량%)
	성분	실시예 3
A	하이드로제네이티드레시틴	0.50
	콜레스테롤	0.25
	세라마이드	0.01
	디프로필렌글라이콜	10.00
B	증류수	To 100
	부틸렌글라이콜	10.00
	키토산	0.05
	나이아신아마이드	10.00
	방부제	적량

제조예 및 비교예. 양이온성 리포좀 함유 에센스의 제조

제조예로서 실시예 3의 양이온성 리포좀을 함유하는 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다. 실시예 3의 양이온성 리포좀은 나이아신아마이드를 10 중량% 포함하므로, 상기 양이온성 리포좀을 20 중량% 포함하는 에센스 제형의 화장료 조성물은 최종적으로 나이아신아마이드 함량이 약 2 중량%가 된다.

비교예로서 양이온성 리포좀을 포함하지 않는 대신 나이아신아마이드를 2 중량% 포함하는 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다.

제조예 및 비교예의 에센스 제형 화장료 조성물의 성분 및 함량(중량%)은 하기 표 5에 나타내었다.

	성분	함량 (중량%)
	성분	비교예	제조예
A	실시예 3의 양이온성 리포좀	-	20.00
B	디프로필렌글라이콜	5.00	3.00
	콜레스-24	0.30	-
	하이드로제네이티드레시틴	-	0.20
C	정제수	To 100	To 100
	부틸렌글라이콜	10.00	8.00
	글리세린	5.00	5.00
	나이아신아마이드	2.00	-
	펜틸렌글라이콜	2.00	1.60
	1,2-헥산다이올	1.00	0.80
	소듐파이테이트	0.02	-
	트리에탄올아민	0.08	0.08
D	카보머	적량	적량
	잔탄검	적량	적량
	암모늄아크릴로일다이메틸타우레이트/브이피코폴리머	적량	적량
E	향료	적량	적량

실험예 2. 피부 안전성 평가

실시예 3의 양이온성 리포좀과 제조예 및 비교예의 에센스 제형에 대한 피부 안전성 평가를 수행하였다.

구체적으로, 피부 질환이 없는 성인 남녀 20명을 대상으로 하여 실시예 3의 양이온성 리포좀과 제조예 및 비교예의 에센스 제형의 자극 정도를 다음과 같이 평가하였다. 시험자들의 팔 전박에 20 μL의 시료를 도포한 후, 시험 부위를 밀폐한 후 24시간 동안 첩포하였다. 첩포를 제거한 후 30분과 24시간 후에 피부에서의 반응을 CTFA(The Cosmetic, Tioletry, and Fragrance Association) 가이드라인에 제시된 용어(terminology)에 의거하여 검사하였다. 판정기준에 의해 얻어진 시험자들의 피부자극지수(Primary Irritation Index, PII) 점수를 평균하여 1 미만이면 저자극, 2 미만이면 경자극, 3.5 미만이면 중자극, 3.5 이상이면 강자극으로 평가하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다.

실험항목	실시예 3의 양이온성 리포좀	비교예	제조예
피부자극지수(PII)	무자극	무자극	무자극

그 결과, 상기 표 6에 나타낸 바와 같이, 실시예 3의 양이온성 리포좀과 제조예 및 비교예의 에센스 제형 모두 무자극으로 제품에 안전하게 사용이 가능함을 확인하였다.

실험예 3. 미백 효능 평가

제조예(양이온성 리포좀 함유) 및 비교예(양이온성 리포좀 미함유)의 에센스 제형은 미백 유효 성분인 나이아신아마이드를 각 2 중량% 함유한다. 따라서, 각 제형을 사용하였을 때 미백 효과가 높게 나타나는 것은 피부 내로 유효 성분의 전달이 보다 효율적으로 이루어졌다고 볼 수 있다. 상기 제조예 및 비교예의 에센스 제형의 미백 효능 평가를 위해, 피부 밝기, 피부 멜라닌 및 피부 기미 3가지 항목 측정을 실시하였다.

구체적으로, 여성 21 명(만 36 ~ 58세, 평균 50.048세)의 피험자를 대상으로, 얼굴 반반에(half-test) 4주간 1일 2회(아침/저녁) 비교예와 제조예 제품을 각각 사용하게 하였다. 피부 밝기, 멜라닌 및 기미 측정을 위해 사용 2주 후와 4주 후 각각의 값이 사용 전 대비 얼마나 변화 하였는지를 측정하였다.

(1) 피부 밝기 개선 효능

피부 밝기는 Mark-Vu (PSIPLUS CO., LTD, KOREA)를 이용하여 안면부 정면을 촬영하였으며, 촬영된 이미지를 I-Max plus 프로그램을 이용하여 시험 부위의 피부 밝기 값(L-value)을 분석하였다. L-value가 증가할수록 피부 밝기가 개선됨을 의미한다.

도 4는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 밝기(L-value)를 나타낸 그래프이다. 도 5는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 밝기 변화량을 나타낸 그래프이다.

도 4 및 도 5에 나타낸 바와 같이, 제조예가 비교예보다 약 1.5배 더 우수한 피부 밝기 개선 효과를 나타내었다.

(2) 피부 멜라닌 감소 효능

피부 멜라닌은 Mexameter MX18 (Courage Khazaka electroni, Germany)을 이용하여 피부색을 나타내는 멜라닌 값을 측정하였다. Melanin Index (M.I) 값이 감소할수록 피부 멜라닌이 개선됨을 의미한다.

도 6은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 멜라닌 지수(Melanin Index, M.I)를 나타낸 그래프이다. 도 7은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 멜라닌 변화량을 나타낸 그래프이다.

도 6 및 도 7에 나타낸 바와 같이, 제조예가 비교예보다 피부 멜라닌 감소 효과가 더 우수하였다.

(3) 피부 기미 개선 효능

피부 기미 측정은 Antera 3D CS (Miravex, Ireland)를 이용하였고, Melanin-Hyperconcentration 분석 모드의 Affected area (mm²)를 평가하였다. 기미가 개선될수록 면적 Affected area (mm²)값이 감소한다.

도 8은 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 기미(mm²)를 확인한 결과이다. 도 9는 비교예 및 제조예의 에센스 제형 사용 후 피부 기미 변화량을 나타낸 그래프이다.

도 8 및 도 9에 나타낸 바와 같이, 제조예가 비교예보다 더 높은 기미 개선 효과를 나타내었다.

실험예 3의 결과를 종합하면, 제조예의 피부 밝기 변화량, 멜라닌 변화량 및 기미 변화량이 비교예 대비 사용 2주 후, 4주 후 모두 유의한 차이를 나타내었다. 이를 통해 실시예 3의 양이온성 리포좀 내 나이아신아마이드를 담지시켰을 때 미백 효능이 더 잘 발휘가 되었다고 볼 수 있다. 이는 양이온성 리포좀이 유효성분을 피부 내로 보다 잘 전달하였기 때문이라고 볼 수 있다. 따라서, 실시예 3의 양이온성 리포좀은 담지된 유효성분의 우수한 피부 전달 효능을 가짐을 알 수 있다.

Claims

인지질, 세라마이드 및 콜레스테롤을 포함하는 제1 용액을 제조하는 단계;
양이온 공여물질을 포함하는 제2 용액 및 상기 제1 용액의 혼합물을 교반하는 단계; 및
고압유화장치를 이용하여 상기 교반된 혼합물로부터 양이온성 리포좀을 제조하는 단계를 포함하는, 양이온성 리포좀을 제조하는 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 인지질은 하이드로제네이티드레시틴인 것인 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 인지질 및 콜레스테롤의 중량비는 4.5:1 내지 1.5:1인 것인 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 콜레스테롤은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.1 내지 5.0 중량%로 포함되는 것인 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 양이온 공여물질은 키토산인 것인 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 양이온 공여물질은 양이온성 리포좀 총 중량에 대해 0.05 내지 5.0 중량%로 포함되는 것인 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 고압유화장치의 압력 조건은 800 내지 1500 bar인 것인 방법.
청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 제조된 양이온성 리포좀.
청구항 1에 있어서, 상기 양이온성 리포좀의 입자 크기는 50 내지 300 nm인 것인 양이온성 리포좀.
청구항 1에 있어서, 상기 양이온성 리포좀의 제타 전위는 20 내지 50 mV인 것인 양이온성 리포좀.
청구항 1에 있어서, 상기 양이온성 리포좀은 이중층 또는 다중층의 구조를 갖는 것인 양이온성 리포좀.
청구항 8에 따른 양이온성 리포좀을 포함하는 화장료 조성물.