KR20230076923A

KR20230076923A - 신종균 락토바실러스 브레비스 ku-024 및 이를 이용한 유가식 배양으로 고농도 gaba 생산 방법

Info

Publication number: KR20230076923A
Application number: KR1020210161838A
Authority: KR
Inventors: 강성우; 노기정; 최성호
Original assignee: 강성우
Priority date: 2021-11-23
Filing date: 2021-11-23
Publication date: 2023-06-01
Also published as: KR102626196B1

Abstract

본 발명은 김치로부터 분리한 신종균 락토바실러스 브레비스 KU-024 및 이를 이용한 유가식 배양으로 고농도 GABA 생산 방법에 관한 것으로, 본 발명으로부터 생산된 배양물 및 고농도 GABA는 식품, 화장품 및 축산업에 사용될 수 있다.

Description

신종균 락토바실러스 브레비스 KU-024 및 이를 이용한 유가식 배양으로 고농도 GABA 생산 방법{New strain Lactobacillus brevis KU-024 and method for production of high concentration GABA by fed-batch cultivation of its strain}

본 발명은 신종균 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) KU-024 및 이를 이용한 유가식 배양으로 고농도 GABA 생산에 관한 것이다.

감마 아미노뷰티르산(Gamma-aminobutyric acid; GABA)은 아미노산의 일종으로 동물뿐만 아니라 식물에도 널리 분포되어 있으며, 포유류의 중추신경계에 작용하는 신경전달물질로 알려져 있다.

GABA는 억제성 신경전달물질로서 뇌 혈류개선, 산소공급 증가, 뇌세포 대사기능을 촉진시켜 신경안정작용, 스트레스 해소 기억력 증진, 혈압강하작용, 우울증 완화, 중풍과 치매 예방 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 효능을 목적으로 한 제품 개발이 연이어 이루어지고 있다.

바이오공정으로부터 생산되는 GABA는 주로 3가지 공정을 통해 생산될 수 있다. 첫 번째로는 재조합 대장균 및 락토바실러스 등의 미생물을 글루코스와 같은 탄소원으로부터 직접적으로 GABA를 생산하는 방법이다. 두 번째 방법인 글루탐산나트륨(Mono Sodium Glutamate; MSG)의 생물학적 전환을 통한 GABA의 생산 방법이 주로 이용되고 있다.

최근 GABA는 식품, 의약 분야뿐만 아니라 차세대바이오폴리머인 나일론 4(Nylon 4)의 전구체로서 새로운 관심을 얻고 있다. 나일론 4의 합성 전구체는 2-피롤리돈(2-pyrrolidone)이며, 이는 GABA로부터 화학공정을 통하여 전환할 수 있어 이를 이용하여 내열성 바이오플라스틱인 나일론 4를 합성할 수 있다.

이렇게 GABA의 수요가 증가하고 있으며 미생물을 사용한 GABA 생물전환에 많은 관심이 기울여지고 있으나, 여전히 고효율의 GABA 생산 균주 및 그 배양 방법에 대한 연구 개발이 필요한 실정이다.

한국공개특허 제10-2014-0087518호(공개일 : 2014.07.09)

본 발명은 신종균 락토바실러스 브레비스 KU-024 및 이를 이용한 유가식 배양으로 고농도의 GABA를 생산하는 방법을 제공하고자 한다.

본 발명은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)를 제공한다.

또한 본 발명은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주를 이용하여 글루탐산(glutamate)으로부터 GABA를 생산하는 방법을 제공한다.

본 발명의 일 실시예에 따라, 상기 균주는 글루탐산나트륨(monosidium glutamate; MSG)을 포함하는 배지에서 배양될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

또한 본 발명의 일 실시예에 따라, 상기 배양은 유가식 배양일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 사료첨가제 조성물을 제공한다.

본 발명은 신종균 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)는 글루탐산나트륨을 이용한 유가식 배양 방법을 통해 고농도의 GABA의 생산이 가능한 효과가 있다.

또한 본 발명에 따른 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물은 식품, 화장품 및 축산업에 사용될 수 있다.

도 1은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)의 16s rRNA 서열이다(서열번호 1).
도 2는 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)의 16s rRNA 서열에 따른 계통도이다.
도 3은 락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)를 배양한 후 API kit (50CHL) 실험결과이다.
도 4는 1.0% 내지 3.0% (w/v) MSG 첨가 농도에 따른 생산된 GABA, 표준품 GABA, 그리고 MSG의 TLC 크로마토그램 사진이다.
도 5는 표준품 GABA의 HPLC 크로마토그램이다.
도 6은 표준품 GABA의 표준곡선 그래프이다.
도 7은 5 L Jar 발효조에서 유가식 배양을 이용한 GABA 생산에서 시간에 따른 세포성장, 포도당 농도, GABA 농도, 글루탐산 농도의 변화를 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) KU-024(수탁번호 KFCC 11895P)로 제공하고 16s RNA 서열을 도 1에 기재하였으며 서열번호 1로 나타내었다.

상기 배지는 본 분야에서 미생물의 배양에 사용되는 배지라면 어떤 것이든 사용할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 특정 미생물을 배양하기 위하여 배양대상 즉 배양체가 되는 미생물이 필요로 하는 영양물질을 포함하는 것으로 특수한 목적을 위한 물질이 추가로 혼합된 것일 수 있다. 상기 배지는 배양기 또는 배양액이라고도 하며, 천연배지, 합성배지 또는 선택배지를 모두 포함하는 개념이다.

본 발명의 일 실시예에 따라, 상기 배양에 사용되는 원료들은 배양과정에서 배양물에 적절한 방식에 의해 회분식, 유가식 또는 연속식으로 첨가될 수 있으며, 바람직하게는 상기 배양은 유가식 배양일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 식품 조성물에서 유효성분의 함량은 사용 목적(예방, 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물 중 상기 균주의 배양물은, 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 60 중량%로 함유될 수 있으며, 바람직하게는 10 중량%로 함유될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

또한, 상기 식품의 종류에는 특별한 제한이 없으며, 본 발명의 식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환, 드링크제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명의 식품 조성물을 정제로 제조하는 경우, KU-024의 배양물과 부형제, 결합제, 붕해제, 및 다른 첨가제와의 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축성형할 수 있다. 또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.

본 발명의 식품 조성물을 음료 형태로 제조하는 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트릴톨 등의 당알콜이다. 또한, 상술한 것 이외의 향미제(사카린, 아스파르탐 등)을 사용할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.

상기 화장료란 화장품 또는 의약외품이 될 수 있는 물질을 말한다.

화장품이란 인체를 청결·미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부·모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 물품으로서 인체에 대한 작용이 경미한 것을 말한다. 또한 기능성화장품이란 피부의 미백에 도움을 주거나, 피부의 주름개선에 도움을 주거나, 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 제품으로 보건복지가족부령이 정한 것을 포함하며, 피부를 개선시켜주는 모든 것을 통칭한다.

의약외품은 질병을 치료하거나 예방하기 위해 쓰는 의약품보다는 인체에 대한 작용이 경미한 물품에 대해 보건복지부가 따로 정한 분류 기준에 의한 약품을 지칭한다. 약사법에 따르면 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 섬유ㆍ고무 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염병을 막기 위한 살균ㆍ살충제 등이 포함된다. 의약외품의 대표적인 예로는 치약, 기능성 비누, 기능성 샴푸 등이 있다.

유효성분의 함량은 사용 목적(예방, 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물 중 상기 균주의 배양물은, 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 60 중량%로, 바람직하게는 10 중량%로 함유될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분과 배합될 수 있다. 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 본 발명의 화장료 조성물은 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 유액, 현탁액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 젤, 파우더, 립스틱, 메이크업 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 패취, 미용액, 클렌징폼, 클렌징크림, 클렌징워터, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 샴푸, 린스, 바디세정제, 비누, 및 분무제에서 선택된 제형인 것일 수 있다.

이들 제형의 제조방법은 통상의 화장료 제형의 제조방법에 따라 제조될 수 있다.

사료 첨가제로 이용될 경우, 상기 조성물은 20 내지 90% 고농축액이거나 분말 또는 과립 형태로 제조될 수 있다. 상기 사료첨가제는 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산등의 유기산이나 인산 나트륨, 인산 칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

상기 사료첨가제 및 사료는 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩, 및 해바라기를 주성분으로 하는 사료; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조성분 등을 더 포함할 수 있으며, 이외에도 영양보충제, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제 등을 더 포함할 수 있다.

상기 사료첨가제는 동물에게 단독으로 투여하거나 식용 담체 중에서 다른 사료첨가제와 조합하여 투여할 수도 있다. 또한, 상기 사료첨가제는 탑드레싱으로서 또는 이들을 동물사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도의 경구제형으로 용이하게 동물에게 투여할 수 있다. 상기 사료첨가제를 동물사료와 별도로 투여할 경우, 당해 기술분야에 잘 알려진 바와 같이 약제학적으로 허용가능한 식용 담체와 조합하여, 즉시 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수전분, 락토오스, 수크로오스, 콩플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 사료첨가제는 정제, 캡슐제, 산제, 트로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 사료첨가제는 젤라틴 연질 캡슐제, 또는 시럽제나 현탁액, 에멀젼제, 또는 용액제의 제형일 수 있다.

또한, 상기 사료첨가제는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액촉진제 등을 함유할 수 있다. 상기 사료첨가제는 침주, 분무 또는 혼합하여 동물의 사료에 첨가하여 이용될 수 있다.

본 발명의 사료첨가제는 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물식이에 적용할 수 있다.

상기 포유류로는 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치동물, 및 실험용 설치동물뿐만 아니라, 애완동물(예: 개, 고양이) 등에게 사용할 수 있으며, 상기 가금류로서 닭, 칠면조, 오리, 거위, 꿩, 및 메추라기 등에도 사용할 수 있고, 상기 어류로서 송어 등에 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 신종균의 분리 및 동정

국내산 김치를 분쇄하고 식염수에 희석한 액으로부터 GABA 생성능이 우수한 유산균을 선별하였으며, 상기 선별된 균주를 KU-024로 명명하였다. KU-024의 16s rRNA 서열은 도 1에 나타내었다.

상기 16s rRNA 서열로부터 GenBank Data의 상동성 검사 결과 Lactobacillus brevis에 100% 상동성을 보였으며, 16s rRNA에 따른 계통수는 도 2에 나타내었다.

또한, API kit (50CHL)를 이용한 생화학적 특성 결과는 도 3과 하기 표 1에 나타내었다. 분리된 KU-024 균주의 당 대사는 L. brevis와 88.3% ID를 보였다.

번호	탄수화물	API CHL	번호	탄수화물	API CHL
0	Control	-	25	Esuline	+
1	Glycerol	-	26	Salicine	-
2	Ertythritol	-	27	Cellobiose	-
3	D-Arabinose	-	28	Maltose	+
4	L-Arabinose	-	29	Lactose	-
5	Ribose	+	30	Melibiose	+
6	D-Xylose	+	31	Saccharose	-
7	L-Xylose	-	32	Trehalose	-
8	Adonitol	-	33	Inuline	-
9	β Methyl-xyloside	-	34	Melezitose	-
10	Galactose	-	35	D-Raffinose	-
11	D-glucose	+	36	Amidon	-
12	D-Fructose	+	37	Glycogene	-
13	D-Mannose	-	38	Xylitol	-
14	L-sorbose	-	39	β Gentiobiose	-
15	Rhamnose	-	40	D-Turanose	-
16	Dulcitol	-	41	D-Lyxose	-
17	Inositol	-	42	D-Tagatose	-
18	Mannitol	-	43	D-Fucose	-
19	Sorbitol	-	44	L-Fucose	-
20	α Methyl-D-mannoside	-	45	D-Arabitol	-
21	α Methyl-D-glucoside	-	46	L-Arabitol	-
22	N Acetyl glucosamine	-	47	Gluconate	-
23	Amygdaline	-	48	2 ceto-gluconate	-
24	Arbutine	-	49	5 ceto-gluconate	-

상기 결과들로부터 분리된 KU-024 균주는 Lactobacillus brevis로 동정되어, 락토바실러스 브레비스 KU-024 (L. brevis KU-024)로 명명하고 한국미생물보존센터에 기탁하였으며(수탁번호 KFCC 11895P), 본 서열을 서열번호 1로 나타내었다.

실시예 2. 기질에 따른 GABA 전환

L. brevis KU-024 균주를 MRS 배지(DIFCO)에 접종하여 30℃에서 24시간 배양하여 종균으로 사용하였다. 기질인 글루탐산나트륨(monosidium glutamate; MSG)을 각각 1.0~3.0% (w/v)로 50 mL MRS 배지 (DIFCO)에 첨가하고, 기질이 첨가된 각각의 배지에 L. brevis KU-024 종균을 2.0% (v/v)로 접종하여 30℃에서 48시간 배양하면서 12시간 간격으로 샘플을 취하여 GABA 전환을 TLC 크로마토그램으로 확인하였다. TLC 크로마토그라피에서 TLC는 TLC Silica gel 60 F₂₅₄ (Aluminium Sheet, 20 x 20cm, Merck)를 사용하였고 n-butanol-acetic acid-water (4:1:1, v/v/v) 용매에서 전개되었다. 용매 전개 후 0.2% ninhydrin solution으로 분무한 후 열을 가하여 밴드를 확인하였고, 그 결과는 도 4에 나타내었다. 최대 2.0% MSG가 MRS 배지에 첨가되었을 때, 배양 48시간에 GABA로 모두 전환됨을 확인하였다.

실시예 3. 탄소원에 따른 GABA 생산

L. brevis KU-024 균주를 MRS 배지 (DIFCO)에 접종하여 30℃에서 24시간 배양하여 종균으로 사용하였다. 탄소원인 포도당, 말토스, 과당, 유당을 1.0% MSG (w/v)가 첨가된 변형된 MRS 배지 (50 mL)에 각각 2.0% (w/v)로 첨가하였다. 각각의 배지에 L. brevis KU-024 종균을 2.0% (v/v)로 접종하여 30℃에서 24시간 배양한 후 세포 농도는 600 nm에서 흡광도를 측정하여 OD_600nm로 나타내었다. GABA 농도 분석을 위해서는 배양액을 15,000 rpm으로 5분간 원심분리한 상등액을 0.4 M Borate buffer에서 OPA-3MP를 첨가하여 유도체시킨 후 CAPCell PAK C18 컬럼 (5 ㎛, 4.6 x 250mm, Shiseido)과 DAD Detector (Detection wavelength: 338 nm)가 장착된 HPLC (Agilent 1100 Series)에서 액체크로마토그라피로 분석하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 표준품 GABA의 HPLC 크로마토그램과 표준곡선은 도 5와 6에 나타내었다. 세포 성장에는 말토스가 좋았으며, MSG로부터 GABA 생산은 포도당이 적합한 탄소원이었다.

탄소원	pH	OD_600nm	GABA (ppm)
Glucose	6.88	5.7	6,600
Maltose	5.34	10.3	6,150
Fructose	5.48	8.7	5,930
Lactose	6.50	1.6	232

실시예 4. 글루탐산을 이용한 회분식배양과 GABA 생산

L. brevis KU-024 균주를 MRS 배지 (DIFCO)에 접종하여 30℃에서 24시간 배양하여 종균으로 사용하였다. 회분식배양은 5 L Jar 발효조에서 3.0 L로 배양하였다. 3.0% (w/v) 포도당과 2.0% (w/v) 글루탐산이 함유된 변형된 MRS 배지에 종균을 2.0% (v/v)로 접종하여 30℃에서 24시간 배양하였다. 세포 농도는 600 nm에서 흡광도로 측정하였고 GABA 생산은 HPLC 크로마토그라피로 분석하였고, 3회 반복실험한 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 상기 방법으로 기질인 글루탐산을 2.0% (w/v)로 첨가하여 30℃에서 24시간 배양하였을 때, 약 13,000 ppm이 생산된 것을 확인하였다.

반복횟수	pH	OD_600nm	GABA (ppm)
1회	6.73	5.10	13,500
2회	6.98	5.13	13,000
3회	6.88	4.91	13,000

실시예 5. 글루탐산나트륨을 이용한 유가식배양

유가식(Fed-batch) 배양은 5 L Jar 발효조에서 실시하였다. L. brevis KU-024 균을 50 mL MRS 배지 (DIFCO)에 접종하여 30℃에서 24시간 배양하여 1차 종균으로 사용하였다. 1차 종균을 MRS 배지 (DIFCO)에 2.0%로 재접종하여 30℃에서 16시간 배양하여 2차 종균으로 사용하였다.

초기 운전 배지량은 2.3 L이었다. 5.0~6.0% (w/v) 포도당과 5.0% MSG가 포함된 변형된 MRS 배지에 2차 종균을 2.0% (v/v)로 접종하여 배양을 시작하였으며, 배양 12시간부터 5.0 N 황산을 이용하여 배양액의 pH를 5.0으로 조절하였다.

한편, 배양 12시간 간격으로 기질인 MSG를 5.0%~9.0% (w/v)로 공급하면서 유가식 배양을 실시하였다. 세포 농도는 600 nm에서 흡광도로 측정하였고, 잔당 (residual glucose)은 배양액을 15,000 rpm에서 5분간 원심분리하여 회수한 상등액을 사용하여 Glucose Analyzer (YSI 2700 Select)로 즉시 분석하였다. 또한, GABA와 glutamate 농도는 HPLC 크로마토그라피로 분석하였다.

상기 시험은 2회 반복하였으며 결과는 도 6에 나타내었다. 배양이 종료된 72시간에 배양액의 부피는 약 4.0~4.2 L이었으며, GABA 농도는 약 150 g/L으로 높은 함량을 보였다.

이상과 같이 실시예를 통하여 본 발명을 설명하였다. 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 상술한 실험예들은 모든 면에서 예시적인 것이며, 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해되어야 한다. 본 발명의 범위는 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

[수탁기관]

기탁기관명 : 한국미생물보존센터(국내)

수탁번호 : KFCC11895P

수탁일자 : 20210908

<110> protigen <120> New strain Lactobacillus brevis KU-024 and method for production of high concentration GABA by fed-batch cultivation of its strain <130> DHP21-474 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1405 <212> DNA <213> Lactobacillus brevis <400> 1 ttccgttgaa tgacgtgctt gcactgattt caacaatgaa gcgagtggcg aactggtgag 60 taacacgtgg ggaatctgcc cagaagcagg ggataacact tggaaacagg tgctaatacc 120 gtataacaac aaaatccgca tggattttgt ttgaaaggtg gcttcggcta tcacttctgg 180 atgatcccgc ggcgtattag ttagttggtg aggtaaaggc ccaccaagac gatgatacgt 240 agccgacctg agagggtaat cggccacatt gggactgaga cacggcccaa actcctacgg 300 gaggcagcag tagggaatct tccacaatgg acgaaagtct gatggagcaa tgccgcgtga 360 gtgaagaagg gtttcggctc gtaaaactct gttgttaaag aagaacacct ttgagagtaa 420 ctgttcaagg gttgacggta tttaaccaga aagccacggc taactacgtg ccagcagccg 480 cggtaatacg taggtggcaa gcgttgtccg gatttattgg gcgtaaagcg agcgcaggcg 540 gttttttaag tctgatgtga aagccttcgg cttaaccgga gaagtgcatc ggaaactggg 600 agacttgagt gcagaagagg acagtggaac tccatgtgta gcggtggaat gcgtagatat 660 atggaagaac accagtggcg aaggcggctg tctagtctgt aactgacgct gaggctcgaa 720 agcatgggta gcgaacagga ttagataccc tggtagtcca tgccgtaaac gatgagtgct 780 aagtgttgga gggtttccgc ccttcagtgc tgcagctaac gcattaagca ctccgcctgg 840 ggagtacgac cgcaaggttg aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga 900 gcatgtggtt taattcgaag ctacgcgaag aaccttacca ggtcttgaca tcttctgcca 960 atcttagaga taagacgttc ccttcgggga cagaatgaca ggtggtgcat ggttgtcgtc 1020 agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt attatcagtt 1080 gccagcattc agttgggcac tctggtgaga ctgccggtga caaaccggag gaaggtgggg 1140 atgacgtcaa atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca cacgtgctac aatggacggt 1200 acaacgagtc gcgaagtcgt gaggctaagc taatctctta aagccgttct cagttcggat 1260 tgtaggctgc aactcgccta catgaagttg gaatcgctag taatcgcgga tcagcatgcc 1320 gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc acaccatgag agtttgtaac 1380 acccaaagcc ggtgagataa ccttc 1405

Claims

락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) KU-024(수탁번호 KFCC 11895P).
락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주를 이용하여 글루탐산(glutamate)으로부터 GABA를 생산하는 방법.
제 2항에 있어서,
상기 균주는 글루탐산나트륨(monosidium glutamate)을 포함하는 배지에서 배양되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 3항에 있어서,
상기 배양은 유가식 배양인 것을 특징으로 하는 방법.
락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 식품 조성물.
락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 화장료 조성물.
락토바실러스 브레비스 KU-024(수탁번호 KFCC 11895P) 균주의 배양물을 포함하는 사료첨가제 조성물.