KR20230029293A - Method for producing aloe supercritical extract oil and cosmetic composition comprising the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 알로에 분말과 초임계 유체를 이용하여 오일 성분을 추출하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법 및 상기 방법에 따라 제조된 알로에 초임계 추출 오일을 포함하여 피부 주름 및 피부 탄력 개선 등 활성이 우수한 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention provides a method for preparing supercritical aloe extract oil by extracting an oil component using aloe powder and a supercritical fluid, and the aloe supercritical extract oil prepared according to the method has excellent activities such as improving skin wrinkles and skin elasticity. It relates to a cosmetic composition for skin improvement.
알로에(Aloe genus)는 백합과(Liliaceae) 알로에 속에 속하는 식물로서, 다년생 상록 다육질 초본으로 분류되며, 전 세계적으로 약 500 여종이 존재하는데 그 중 식품으로 사용할 수 있는 것은 알로에 베라(Aloe vera), 알로에 아보레센스(Aloe aboresences), 알로에 사포나리아(Aloe saponaria)가 있다. 예로부터 외국의 민간약초로서 오랫동안 이용되어 왔으며 알로에를 최초로 치료용으로 사용한 기록은 기원전 2100년경 수메리아 의사가 기록한 석판에 나타나 있으며 중국의 개보본초, 우리나라의 동의보감 및 대한약전에 사용기록이 있다. 화상, 피부질환 등의 치료목적으로 사용되어 왔으며, 최근에는 건강식품뿐 아니라 화장품에도 그 사용영역이 확대되어 있다. Aloe genus is a plant belonging to the genus Aloe of the Liliaceae family and is classified as a perennial evergreen succulent herb. There are about 500 species worldwide, of which Aloe vera and Aloe that can be used as food are There are Aloe aboresences and Aloe saponaria. Since ancient times, it has been used as a foreign folk herb for a long time, and the first record of using aloe for treatment appears on a stone tablet recorded by a Sumerian doctor around 2100 B.C. It has been used for treatment purposes such as burns and skin diseases, and recently, its use has been expanded not only to health foods but also to cosmetics.
이와 관련하여, 알로에 아보레센스와 관련된 종래 기술은 변비 개선 및 예방기능을 갖는 식품 조성물(한국공개특허 제2010-0064120호), 피부 보습과 피부탄력 증강, 주름 및 혈행개선, 셀룰라이트 분해 등의 효과를 갖는 알로에 추출물 및 캡사이신을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물(한국등록특허 제10-1764131호)이 개시되어 있다. In this regard, the prior art related to aloe arborescens is a food composition having a function of improving and preventing constipation (Korean Patent Publication No. 2010-0064120), skin moisturizing and skin elasticity enhancement, wrinkles and blood circulation improvement, cellulite decomposition, etc. A composition for external application for skin containing an aloe extract and capsaicin as active ingredients (Korean Patent Registration No. 10-1764131) is disclosed.
또한, 알로에 아보레센스의 항산화 활성을 이용하여 산화적 스트레스로부터의 세포 보호 효능 효과가 확인되었고(Beppu H et al., J Ethnopharmacol, 89(1): 37-45, 2003), 알로에 아보레센스 즙을 환부에 도포 시 피부 재생과 탄력을 촉진시키며 및 상처 치유에 효과적임이 확인되었다(Jia Y et al., J Ethnopharmacol, 120(2): 181-9, 2008). 상처 치유에 효과적인 이유는 알로에 아보레센스 추출물의 항진균 효과 및 항염증 효과에서 기인하는 것으로 Fujita K 등이 수행한 Trichophyton mentagrophytes의 증식을 효과적으로 억제하는 항진균 효과 연구와(Fujita K et al., Antimicrob Agents Chemother, 14(1): 132-6, 1978) Masatoshi 등이 항염증 연구(Masatoshi YM et al., Agric Biol Chem, 1627-1629, 1991)를 보고하였다. In addition, the cell protection effect from oxidative stress was confirmed using the antioxidant activity of Aloe arborescens (Beppu H et al., J Ethnopharmacol, 89(1): 37-45, 2003), and Aloe arborescens juice When applied to the affected area, it was confirmed that it promotes skin regeneration and elasticity and is effective in wound healing (Jia Y et al., J Ethnopharmacol, 120(2): 181-9, 2008). The reason why it is effective in wound healing is due to the antifungal and anti-inflammatory effects of Aloe arborescens extract. A study on the antifungal effect of effectively inhibiting the proliferation of Trichophyton mentagrophytes conducted by Fujita K et al., Antimicrob Agents Chemother, 14(1): 132-6, 1978) Masatoshi et al reported an anti-inflammatory study (Masatoshi YM et al., Agric Biol Chem, 1627-1629, 1991).
상기 여러 연구와 같이 알로에 아보레센스의 대해 기존에 여러 논문들이 보고되었으나, 알로에 아보레센스를 이용한 피부 탄력 및 주름 개선 효능 등에 관한 연구는 미비한 실정이다. 즉, 알로에 아보레센스 추출물을 이용한 피부 탄력 및 주름 개선을 제공하기 위한 기능성 화장품 조성물에 대해서는 현재까지 제공된 바가 없다.As in the above studies, several papers have been previously reported on Aloe arborescens, but studies on skin elasticity and wrinkle improvement effects using Aloe arborescens are insufficient. That is, a functional cosmetic composition for providing skin elasticity and wrinkle improvement using an aloe arborescens extract has not been provided to date.
본 발명은 알로에 분말과 초임계 유체를 이용하여 오일 성분을 추출하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법 및 상기 방법에 따라 제조된 알로에 초임계 추출 오일을 포함하여 피부 주름 및 피부 탄력 개선 등 활성이 우수한 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.The present invention provides a method for preparing supercritical aloe extract oil by extracting an oil component using aloe powder and a supercritical fluid, and the aloe supercritical extract oil prepared according to the method has excellent activities such as improving skin wrinkles and skin elasticity. It is intended to provide a cosmetic composition for skin improvement.
상기 과제를 해결하기 위하여, In order to solve the above problems,
본 발명은 일실시예에서, (a) 알로에를 세척 및 세절하는 전처리 단계; (b) 상기 전처리된 알로에를 건조 및 분쇄하여 알로에 분말을 취득하는 단계; (c) 초임계 추출조에 상기 알로에 분말 및 초임계 이산화탄소 유체를 투입하여 초임계 추출하는 단계; (d) 상기 초임계 추출이 끝난 추출물을 초원심분리하는 단계; 및, (e) 상기 추출물의 상등액을 취한 후 여과하여 알로에 초임계 추출 오일을 수득하는 단계;를 포함하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법을 제공한다.In one embodiment, the present invention includes (a) a pretreatment step of washing and cutting aloe; (b) obtaining an aloe powder by drying and pulverizing the pretreated aloe; (c) supercritical extraction by introducing the aloe powder and supercritical carbon dioxide fluid into a supercritical extraction tank; (d) ultracentrifuging the supercritical extraction-completed extract; and (e) obtaining an aloe supercritical extraction oil by filtering after taking the supernatant of the extract.
상기 전처리된 알로에는 100 내지 250 mesh 범위로 분쇄하는 것일 수 있다.The pretreated aloe may be pulverized in the range of 100 to 250 mesh.
상기 초임계 추출은 초임계 추출조에서 70 내지 450 bar 및 30 내지 60℃에서 수행하는 것일 수 있다.The supercritical extraction may be performed at 70 to 450 bar and 30 to 60 °C in a supercritical extraction tank.
상기 여과는, 상기 추출물의 상등액을 취한 후 8 ㎛ 이하 크기의 필터를 이용하여 여과하는 것일 수 있다.The filtration may be performed by taking the supernatant of the extract and then filtering it using a filter having a size of 8 μm or less.
상기 알로에 초임계 추출 오일은 0.02 중량% 이상의 지방산 함량을 가지는 것일 수 있다.The aloe supercritical extraction oil may have a fatty acid content of 0.02% by weight or more.
상기 알로에는 알로에 아보레센스, 알로에 베라 또는 알로에 사포나리아를 포함하는 것일 수 있다.The aloe may include aloe arborescens, aloe vera, or aloe saponaria.
또한, 본 발명은 일실시예에서, 상기 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법에 따라 제조되는 알로에 초임계 추출 오일을 포함하고, 피부 주름 또는 피부 탄력을 개선시키는 것인 화장료 조성물을 제공한다.In addition, in one embodiment, the present invention provides a cosmetic composition comprising an aloe supercritical extraction oil prepared according to the manufacturing method of the aloe supercritical extraction oil and improving skin wrinkles or skin elasticity.
상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여, 상기 알로에 초임계 추출 오일을 1 내지 10 중량% 포함하는 것일 수 있다.The cosmetic composition may contain 1 to 10% by weight of the aloe supercritical extraction oil based on the total weight of the cosmetic composition.
상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨 토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누, 파우더 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형인 것일 수 있다.The cosmetic composition is skin, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrient lotion, massage cream, nutrient cream, eye cream, moisture cream, hand cream, essence, nutrient essence, pack, cleansing foam , It may be one or more formulations selected from the group consisting of cleansing water, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, soap, powder, and combinations thereof.
본 발명에 따른 알로에 초임계 추출 오일은 알로에 분말과 초임계 유체를 이용하여 초임계 추출함으로써, 알로에의 주요성분으로 알려진 알로인(aloin), 알로에-에모딘(aloeemodin), 알로에닌(aloenin), 알로에신(aloesin) 등 안트라퀴논(anthraquinone)류와 지용성 지방산, 토코페롤, 피토스테롤 및 인지질 등의 기능성 성분들을 포함하여 추출할 수 있으며, 이를 가공공정 고도화로 경제적이고 수율 90% 이상의 알로에 지용성 물질을 추출할 수 있다. The aloe supercritical extraction oil according to the present invention is obtained by supercritical extraction using aloe powder and a supercritical fluid, so that aloin, aloe-emodin, aloenin, Anthraquinones such as aloesin and functional ingredients such as fat-soluble fatty acids, tocopherols, phytosterols and phospholipids can be extracted, and it is economical to extract fat-soluble substances from aloe with a yield of over 90% by upgrading the processing process. can
또한, 본 발명에 따른 알로에 초임계 추출 오일은 피부 주름 및 피부 탄력 개선 등 활성이 우수하여 피부 개선 효능을 갖는 화장료 조성물을 제조할 수 있다. In addition, the aloe supercritical extraction oil according to the present invention is excellent in activities such as improving skin wrinkles and skin elasticity, so that a cosmetic composition having a skin improvement effect can be prepared.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 제조과정을 나타낸 순서도이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 시간에 따른 추출물 수율을 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 지방산 함량 분석 결과의 시험성적서를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 지방산 함량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 희석 비율에 따른 NIH-3T3, HaCaT, B16F10 세포의 세포생존율을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 알로에 열수추출물 또는 아임계 추출물에 대한 희석 비율에 따른 NIH-3T3, HaCaT, B16F10 세포의 세포생존율을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 DPPH radical 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 알로에 열수추출물 또는 아임계 추출물의 DPPH radical 소거능을 나타낸 그래프이다.1 is a flow chart showing a manufacturing process of aloe supercritical extraction oil according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 shows the extract yield over time of the aloe supercritical extraction oil according to an embodiment of the present invention.
3 shows a test report of the results of analyzing the fatty acid content of the aloe supercritical extraction oil according to an embodiment of the present invention.
4 shows the results of analyzing the fatty acid content of the aloe supercritical extraction oil according to an embodiment of the present invention.
5 is a graph showing the cell viability of NIH-3T3, HaCaT, and B16F10 cells according to the dilution ratio of supercritical aloe extract oil according to an embodiment of the present invention.
6 is a graph showing the cell viability of NIH-3T3, HaCaT, and B16F10 cells according to the dilution ratio with respect to the hot water extract or subcritical extract of aloe according to an embodiment of the present invention.
7 is a graph showing DPPH radical scavenging ability of aloe supercritical extraction oil according to an embodiment of the present invention.
8 is a graph showing the DPPH radical scavenging ability of an aloe hot water extract or subcritical extract according to an embodiment of the present invention.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 구체적으로 설명하고자 한다.Since the present invention can make various changes and have various embodiments, specific embodiments will be illustrated in the drawings and described in detail in the detailed description.
그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. However, this is not intended to limit the present invention to specific embodiments, and should be understood to include all modifications, equivalents, and substitutes included in the spirit and scope of the present invention.
본 발명에서, "포함한다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.In the present invention, the term "comprises" or "has" is intended to designate that there is a feature, number, step, operation, component, part, or combination thereof described in the specification, but one or more other features It should be understood that the presence or addition of numbers, steps, operations, components, parts, or combinations thereof is not precluded.
이하, 본 발명에 대하여 구체적으로 설명하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은 (a) 알로에를 세척 및 세절하는 전처리 단계; (b) 상기 전처리된 알로에를 건조 및 분쇄하여 알로에 분말을 취득하는 단계; (c) 초임계 추출조에 상기 알로에 분말 및 초임계 이산화탄소 유체를 투입하여 초임계 추출하는 단계; (d) 상기 초임계 추출이 끝난 추출물을 초원심분리하는 단계; 및, (e) 상기 추출물의 상등액을 취한 후 여과하여 알로에 초임계 추출 오일을 수득하는 단계;를 포함하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법을 제공한다.The present invention includes (a) a pretreatment step of washing and cutting aloe; (b) obtaining an aloe powder by drying and pulverizing the pretreated aloe; (c) supercritical extraction by introducing the aloe powder and supercritical carbon dioxide fluid into a supercritical extraction tank; (d) ultracentrifuging the supercritical extraction-completed extract; and (e) obtaining an aloe supercritical extraction oil by filtering after taking the supernatant of the extract.
본 발명에 따른 알로에 초임계 추출 오일은 알로에 분말과 초임계 유체를 이용하여 초임계 추출함으로써, 알로에의 주요성분으로 알려진 알로인(aloin), 알로에-에모딘(aloeemodin), 알로에닌(aloenin), 알로에신(aloesin) 등 안트라퀴논(anthraquinone)류와 지용성 지방산, 토코페롤, 피토스테롤 및 인지질 등의 기능성 성분들을 포함하여 추출할 수 있으며, 이를 가공공정 고도화로 경제적이고 수율 90% 이상의 알로에 지용성 물질을 추출할 수 있다. The aloe supercritical extraction oil according to the present invention is obtained by supercritical extraction using aloe powder and a supercritical fluid, so that aloin, aloe-emodin, aloenin, Anthraquinones such as aloesin and functional ingredients such as fat-soluble fatty acids, tocopherols, phytosterols and phospholipids can be extracted, and it is economical to extract fat-soluble substances from aloe with a yield of over 90% by upgrading the processing process. can
이를 통하여 기존의 유기용매 추출 또는 아임계 추출방법 등보다 훨씬 많은 유효성분을 대량으로 추출할 수 있는 장점이 있으며, 그 유효성분들의 약리효과인 보습강화, 주름개선, 피부탄력 증가, 진통, 항알러지, 항균, 강장작용, 항염작용, 항종양작용, 혈당강하, 카드뮴 독성 완화 등을 증대시킬 수 있다.Through this, it has the advantage of being able to extract much more active ingredients in large quantities than conventional organic solvent extraction or subcritical extraction methods. , antibacterial, tonic, anti-inflammatory, antitumor, hypoglycemic, cadmium toxicity alleviation, etc. can be increased.
본 발명에서 초임계 유체란, 임계점 이상의 온도와 압력 하에 있는 비압축성 유체로서 기존의 유기 용매에서 나타나지 않는 독특한 특성을 나타낸다. 초임계 유체는 액체에 가까운 큰 밀도와 점도 기체에 가까운 낮은 표면 장력과 높은 확산계수 등 우수한 물성의 특성을 동시에 지니고 있는 물질이다. 초임계 유체는 밀도를 이상기체에 가까운 희박 상태에서부터 액체 밀도에 가까운 고밀도 상태까지 연속으로 변화시킬 수 있기 때문에, 유체의 평형물성, 전달물성, 분자 뭉침 상태 등을 조절할 수 있다.In the present invention, the supercritical fluid is an incompressible fluid at a temperature and pressure above the critical point, and exhibits unique characteristics not found in existing organic solvents. Supercritical fluid is a material that has excellent physical properties such as high density close to liquid, low surface tension close to gas, and high diffusion coefficient. Since supercritical fluid can continuously change its density from a lean state close to ideal gas to a high density state close to liquid density, it is possible to control the equilibrium properties, transport properties, and molecular agglomeration state of the fluid.
즉, 본 발명은 초임계 유체로 이산화탄소를 사용하여 알로에를 추출함으로써, 기존의 유기용매를 이용한 추출방법의 단점(최종산물 내에 유기용매의 잔존, 용매 제거의 어려움, 환경오염의 문제, 낮은 추출수율, 긴 추출시간)을 해소하면서, 알로에로부터 정유 성분들을 선택적으로 고순도로 추출할 수 있다. That is, the present invention extracts aloe using carbon dioxide as a supercritical fluid, which has the disadvantages of the existing extraction method using an organic solvent (remaining organic solvent in the final product, difficulty in removing the solvent, environmental pollution, and low extraction yield). , long extraction time), it is possible to selectively extract essential oil components from aloe with high purity.
구체적으로, 본 발명에 따른 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법에서 (a)단계에서는 알로에를 세척 및 세절하여 전처리한다. 이 때, 상기 알로에는 알로에 아보레센스, 알로에 베라 또는 알로에 사포나리아를 포함하는 것일 수 있으며, 알로에 품종에 국한되지 않고 적용할 수 있다. Specifically, in step (a) in the method for producing supercritical aloe extract oil according to the present invention, aloe is pretreated by washing and slicing. In this case, the aloe may include aloe arborescens, aloe vera, or aloe saponaria, and may be applied without being limited to aloe varieties.
(b)단계에서는 상기 전처리된 알로에를 건조 및 분쇄하여 알로에 분말을 취득한다.In step (b), the pretreated aloe is dried and pulverized to obtain an aloe powder.
상기 전처리된 알로에는 건조기에서 60 내지 100℃로 건조하는 것일 수 있고, 100 내지 250 메쉬(mesh) 범위로 분쇄하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 분쇄는 100 내지 200 메쉬, 100 내지 150 메쉬, 150 내지 250 메쉬 또는 200 내지 250 메쉬 범위로 수행하는 것일 수 있다.The pretreated aloe may be dried in a dryer at 60 to 100° C., and may be pulverized to a size in the range of 100 to 250 mesh. For example, the grinding may be performed in the range of 100 to 200 mesh, 100 to 150 mesh, 150 to 250 mesh, or 200 to 250 mesh.
(c)단계에서는 초임계 추출조에 상기 알로에 분말 및 초임계 이산화탄소 유체를 투입하여 초임계 추출한다. In step (c), supercritical extraction is performed by introducing the aloe powder and supercritical carbon dioxide fluid into a supercritical extraction tank.
상기 초임계 이산화탄소 유체는, 이산화탄소 가스를 칠러(chiller)에 통과시켜 액화한 후, 액화된 이산화탄소를 초임계 압력과 온도를 형성하여 초임계 유체 상태로 전환하여 초임계 추출에 사용하는 것일 수 있다.The supercritical carbon dioxide fluid may be liquefied by passing carbon dioxide gas through a chiller, and then converting the liquefied carbon dioxide into a supercritical fluid state by forming supercritical pressure and temperature to be used for supercritical extraction.
상기 초임계 추출은 초임계 추출조에서 70 내지 450 bar 및 30 내지 60℃에서 수행하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 초임계 추출은 초임계 추출조에서 70 내지 400 bar, 70 내지 300 bar, 70 내지 200 bar, 70 내지 100 bar, 100 내지 450 bar, 200 내지 450 bar, 300 내지 450 bar 또는 400 내지 450 bar로, 30 내지 60℃, 30 내지 50℃, 30 내지 40℃, 40 내지 60℃ 또는 50 내지 60℃에서 수행하는 것일 수 있다. The supercritical extraction may be performed at 70 to 450 bar and 30 to 60 °C in a supercritical extraction tank. For example, the supercritical extraction is 70 to 400 bar, 70 to 300 bar, 70 to 200 bar, 70 to 100 bar, 100 to 450 bar, 200 to 450 bar, 300 to 450 bar or 400 bar in a supercritical extraction tank to 450 bar, and may be performed at 30 to 60°C, 30 to 50°C, 30 to 40°C, 40 to 60°C or 50 to 60°C.
또한 상기 초임계 추출은 30 내지 120 분, 60 내지 120 분, 90 내지 120 분, 30 내지 90 분 또는 30 내지 60 분 동안 수행하는 것일 수 있다. In addition, the supercritical extraction may be performed for 30 to 120 minutes, 60 to 120 minutes, 90 to 120 minutes, 30 to 90 minutes, or 30 to 60 minutes.
(d)단계에서는 상기 초임계 추출이 끝난 추출물을 초원심분리한다.In step (d), the supercritical extraction is completed by ultracentrifugation.
상기 초원심분리는 10,000~20,000×g 조건에서 30 내지 60 분 동안 수행하는 것일 수 있다.The ultracentrifugation may be performed for 30 to 60 minutes under conditions of 10,000 to 20,000 × g.
(e)단계에서는 상기 추출물의 상등액을 취한 후 여과하여 알로에 초임계 추출 오일을 수득한다.In step (e), the supernatant of the extract is taken and filtered to obtain supercritical aloe extract oil.
상기 여과는, 상기 추출물의 상등액을 취한 후 8 ㎛ 이하 크기의 필터를 이용하여 여과하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 필터는 1 내지 8 ㎛, 2 내지 8 ㎛, 4 내지 8 ㎛ 또는 6 내지 8 ㎛ 크기일 수 있다.The filtration may be performed by taking the supernatant of the extract and then filtering it using a filter having a size of 8 μm or less. For example, the filter may have a size of 1 to 8 μm, 2 to 8 μm, 4 to 8 μm, or 6 to 8 μm.
상기 알로에 초임계 추출 오일은 오일 내에 0.02 중량% 이상의 지방산 함량을 가지는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 알로에 초임계 추출 오일은 0.02 내지 0.05 중량%, 0.02 내지 0.04 중량% 또는 0.02 내지 0.03 중량%의 지방산 함량을 가지는 것일 수 있다.The aloe supercritical extraction oil may have a fatty acid content of 0.02% by weight or more in the oil. For example, the aloe supercritical extraction oil may have a fatty acid content of 0.02 to 0.05% by weight, 0.02 to 0.04% by weight, or 0.02 to 0.03% by weight.
본 발명은 초임계 추출방법을 이용하여 추출한 알로에 초임계 추출 오일에 관한 것이나, 초임계 추출방법에 국한하지 않고 초임계의 포괄적인 추출방법인 아임계 추출방법을 포함하는 제조방법 및 이에 따른 제조방법으로 제조된 알로에 오일을 포함할 수 있다. The present invention relates to an aloe supercritical extraction oil extracted using a supercritical extraction method, but is not limited to the supercritical extraction method, and a manufacturing method including a subcritical extraction method, which is a comprehensive supercritical extraction method, and a manufacturing method according thereto It may contain aloe oil made with.
또한, 본 발명은 일실시예에서, 상기 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법에 따라 제조되는 알로에 초임계 추출 오일을 포함하고, 피부 주름 또는 피부 탄력을 개선시키는 것인 화장료 조성물을 제공한다.In addition, in one embodiment, the present invention provides a cosmetic composition comprising an aloe supercritical extraction oil prepared according to the manufacturing method of the aloe supercritical extraction oil and improving skin wrinkles or skin elasticity.
본 발명의 알로에 초임계 추출 오일은 알로에 분말로부터 초임계 유체를 활용하여 오일 성분을 추출함으로써 피부 주름 및 피부 탄력 개선 등 활성이 우수하여 피부 개선 효능을 갖는 화장료 조성물을 제조할 수 있다. 특히, 본 발명에 따라 제조된 알로에 초임계 추출 오일은 종래에 보고된 바가 없으며 다수의 알로에 추출방법이나 발효방법, 아임계 추출방법 보다 나타나는 피부에 미치는 효과와 특징에 있어서 기능이 우수하다는 특징을 가진다.The aloe supercritical extraction oil of the present invention is excellent in activities such as improving skin wrinkles and skin elasticity by extracting an oil component from aloe powder using a supercritical fluid, so that a cosmetic composition having skin improving efficacy can be prepared. In particular, the aloe supercritical extraction oil prepared according to the present invention has not been reported in the prior art, and is characterized by superior function in terms of effects and characteristics on the skin compared to a number of aloe extraction methods, fermentation methods, and subcritical extraction methods. .
상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여, 상기 알로에 초임계 추출 오일을 1 내지 10 중량% 포함하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물은 상기 알로에 초임계 추출 오일을 1 내지 8 중량%, 1 내지 6 중량%, 1 내지 4 중량%, 1 내지 2 중량%, 2 내지 10 중량%, 4 내지 10 중량%, 6 내지 10 중량% 또는 8 내지 10 중량% 포함하는 것일 수 있다.The cosmetic composition may contain 1 to 10% by weight of the aloe supercritical extraction oil based on the total weight of the cosmetic composition. For example, the cosmetic composition contains 1 to 8% by weight, 1 to 6% by weight, 1 to 4% by weight, 1 to 2% by weight, 2 to 10% by weight, 4 to 10% by weight of the aloe supercritical extraction oil. , It may be one containing 6 to 10% by weight or 8 to 10% by weight.
상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨 토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누, 파우더 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형인 것일 수 있다.The cosmetic composition is skin, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrient lotion, massage cream, nutrient cream, eye cream, moisture cream, hand cream, essence, nutrient essence, pack, cleansing foam , It may be one or more formulations selected from the group consisting of cleansing water, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, soap, powder, and combinations thereof.
이하 본 발명에 따르는 실시예 등을 통해 본 발명을 보다 상세히 설명하나, 본 발명의 범위가 하기 제시된 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples and the like according to the present invention, but the scope of the present invention is not limited by the examples presented below.
[실시예] [Example]
실시예: 알로에 초임계 추출 오일(알로에 오일)의 제조Example: Preparation of Aloe Supercritical Extraction Oil (Aloe Oil)
우선, 알로에 분말을 취득하기 위하여, 3 내지 5 년 생육한 알로에 아보레센스 생잎을 (주)김정문알로에 제주 농공장으로부터 채취하여 KGMP 시설에서 정제수로 버블세척과 브러쉬 롤러로 3 회 세척 후 커터기에 투입하여 일정 크기로 세절하여 전처리 하였다. 상기 전처리된 알로에를 건조기에 60 내지 100℃로 2 시간 간격으로 뒤집으며 충분히 건조하고 분쇄기에 넣어 분쇄한 후, 타공망 100 내지 250 메쉬(mesh), 자석봉(6,500 가우스)에 통과시켜 이물질을 제거하였다. 이후 분쇄된 분말을 85℃에서 24 시간 동안 멸균 후 알로에 아보레센스 분말을 취득하였다(품목신고 및 제조번호: 제201500100216호, 알로에 전잎). First, in order to obtain aloe powder, fresh leaves of aloe arborescens grown for 3 to 5 years are collected from Kim Jeong-moon Aloe Jeju Farm, washed with purified water in KGMP facilities, bubble-washed with purified water and washed three times with a brush roller, and then put into a cutter. It was cut to a certain size and pretreated. The pretreated aloe was inverted in a dryer at 60 to 100 ° C. at intervals of 2 hours, sufficiently dried, put in a grinder and pulverized, and then passed through a perforated net of 100 to 250 mesh and a magnetic bar (6,500 Gauss) to remove foreign substances. . Thereafter, the pulverized powder was sterilized at 85° C. for 24 hours to obtain aloe arborescens powder (item notification and production number: No. 201500100216, whole aloe leaves).
상기 수득한 알로에 아보레센스 분말을 초임계 추출장비인 SC-CO2 추출 시스템(모델명: ISA-SCCO-S-100-500, 일신, 대한민국)을 활용하여 초임계 추출하였다. The obtained Aloe arborescens powder was subjected to supercritical extraction using a supercritical extraction equipment, SC-CO 2 extraction system (model name: ISA-SCCO-S-100-500, Ilshin, Korea).
도 1은 알로에 초임계 추출 오일의 제조과정을 나타낸 순서도이다.1 is a flow chart showing a manufacturing process of aloe supercritical extraction oil.
도 1을 참조하면, 1-1) CO2 gas를 chiller에 통과 시켜 액화한다.Referring to Figure 1, 1-1) CO 2 gas is liquefied by passing it through a chiller.
1-2) 액화된 CO2를 차례로 pump(73.8 bar)와 heater(31.1℃)에 통과시키며 초임계 압력과 온도를 형성하여 초임계 유체 상태로 전환한다.1-2) The liquefied CO 2 is sequentially passed through a pump (73.8 bar) and a heater (31.1 ° C) to form a supercritical pressure and temperature to convert into a supercritical fluid state.
2. 추출조에 준비된 알로에 분말 700 g에 초임계 CO2를 투입한다.2. Add supercritical CO 2 to 700 g of aloe powder prepared in the extraction tank.
3. 압력 70 내지 450 bar, 온도 30~60℃ 조건에서 총 120 분간 CO2 유량은 120 g/min의 조건으로 초임계 추출을 진행한다.3. Supercritical extraction is performed under the conditions of a CO 2 flow rate of 120 g/min for a total of 120 minutes under conditions of a pressure of 70 to 450 bar and a temperature of 30 to 60° C.
4. 초임계 추출이 끝난 추출물을 회수하고 CO2는 기체 상태로 배출한다.4. The extract after supercritical extraction is recovered and CO 2 is discharged in a gaseous state.
5. 회수한 추출물은 4℃, 10,000~20,000×g 조건에서 30 내지 60 분 동안 초원심분리를 진행한다.5. The recovered extract is subjected to ultracentrifugation for 30 to 60 minutes at 4°C and 10,000 to 20,000×g conditions.
6. 상등액을 회수한 후 8 ㎛ 이하 사이즈의 필터를 이용하여 여과한다.6. After recovering the supernatant, filter it using a filter with a size of 8 μm or less.
7. 여과액을 회수하여 알로에 오일을 수득한다.7. Recover the filtrate to obtain aloe oil.
8. 최종 알로에 오일을 포장 후 저장 혹은 출고처리 한다.8. After packaging the final aloe oil, store or ship it out.
제조예 1: 피부주름 개선용 화장품 조성물의 제조Preparation Example 1: Preparation of cosmetic composition for improving skin wrinkles
정제수에 동백나무씨 오일 및 호호바씨 오일 중 일부를 40~80℃에서 균질화시키고, 이를 제조 가마에 넣은 후 상기 실시예에서 제조된 알로에 초임계 추출 오일, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드, 세테아릴 알코올, 비즈왁스, 올리보일하이드롤라이즈드 밀 단백질, 동백나무씨 오일, 호호바씨 오일을 넣고 40~80℃에서 얻어진 유상을 제조 가마에 넣은 후 균질화시키고, 나머지 첨가제를 정제수에 용해시켜 제조 가마에 넣은 후 35~40℃로 냉각시키고, 여과, 충전, 포장하여 피부주름 개선용 크림제를 얻었다.Some of the camellia seed oil and jojoba seed oil were homogenized in purified water at 40-80 ° C, put into a manufacturing kiln, and then the aloe supercritical extraction oil, caprylic / capric triglyceride, and cetea prepared in the above example Lil alcohol, beeswax, oligoyl hydrolyzed wheat protein, camellia seed oil, and jojoba seed oil were added, and the oil phase obtained at 40 to 80 ° C was placed in a manufacturing kiln, homogenized, and the remaining additives were dissolved in purified water to prepare a manufacturing kiln and then cooled to 35-40 ° C., filtered, filled, and packaged to obtain a cream for improving skin wrinkles.
상기 피부주름 개선용 크림제의 구성성분은 다음과 같다:The components of the cream for improving skin wrinkles are as follows:
- 알로에 초임계 추출 오일(주원료) 1~80%- Aloe supercritical extraction oil (main ingredient) 1-80%
- 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 5~25%- Caprylic/capric triglyceride (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 5~25%
- 세테아릴 알코올 비즈왁스(유화 안정제; 점도증가제) 1~20%- Cetearyl alcohol beeswax (emulsion stabilizer; viscosity increasing agent) 1-20%
- 비즈왁스(유화 안정제; 점도증가제) 1~20%- Beeswax (emulsion stabilizer; viscosity increaser) 1-20%
- 올리보일하이드롤라이즈드 밀 단백질(피부컨디셔닝제) 0.1~10% - Olivoyl hydrolyzed wheat protein (skin conditioning agent) 0.1~10%
- 동백나무씨 오일(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 0.1~20% - Camellia seed oil (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 0.1~20%
- 호호바씨 오일(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 0.1~20% - Jojoba seed oil (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 0.1~20%
- 리즈베라 추출물(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 0.1~5%- Risvera extract (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 0.1~5%
- 산수유 열매 추출물(피부컨디셔닝제) 0.1~5%- Cornus officinalis fruit extract (skin conditioning agent) 0.1~5%
- 비타민 E(천연 방부제) 0.1~ 2% - Vitamin E (natural preservative) 0.1~2%
- 향료(감미제) 0.01~2% - Flavor (sweetener) 0.01~2%
- 정제수 1~60%-
제조예 2: 피부탄력 개선용 화장품 조성물의 제조Preparation Example 2: Preparation of cosmetic composition for improving skin elasticity
정제수에 서양 산사자 추출물 및 구기자 추출물의 일부를 넣고 실온(25℃) 내지 80℃에서 분산시킨 후, 이를 제조 가마에 넣고, 상기 실시예에서 제조된 알로에 초임계 추출 오일, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드, 시어버터, 디메티콘 및 사이클로핵사실록세인을 넣고 40~80℃에서 얻어진 유상을 제조 가마에 넣은 후 균질화시키고, 나머지 첨가제를 정제수에 용해시켜 제조 가마에 넣은 후 35~40℃로 냉각시키고 여과, 충전, 포장하여 피부탄력 개선용 크림제를 얻었다.After adding some of the western hawthorn extract and wolfberry extract to purified water and dispersing at room temperature (25 ° C) to 80 ° C, it was put into a manufacturing kiln, and the aloe supercritical extraction oil prepared in the above example, caprylic / capric triglyceride Seride, shea butter, dimethicone and cyclohexansiloxane were added, the oil phase obtained at 40-80 ° C was put into a manufacturing kiln and homogenized, and the remaining additives were dissolved in purified water, placed in a manufacturing kiln, cooled to 35-40 ° C and filtered , filling and packaging to obtain a cream for improving skin elasticity.
상기 피부탄력 개선용 크림제의 구성성분은 다음과 같다:The components of the cream for improving skin elasticity are as follows:
- 알로에 초임계 추출 오일(주원료) 1~80% - Aloe supercritical extraction oil (main ingredient) 1-80%
- 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 5~25%- Caprylic/capric triglyceride (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 5~25%
- 시어버터(수분차단제; 피부컨디셔닝제) 1~25%- Shea butter (moisture blocking agent; skin conditioning agent) 1~25%
- 디메티콘/비닐다이메티콘크로스폴리머(점도증가제) 0.1~5%- Dimethicone/Vinyl Dimethicone Crosspolymer (viscosity increasing agent) 0.1~5%
- 서양 산사자 열매 추출물(피부컨디셔닝제; 산화방지제) 0.1~5%- Western hawthorn fruit extract (skin conditioning agent; antioxidant) 0.1~5%
- 구기자 추출물(피부컨디셔닝제) 0.1~5% - Goji berry extract (skin conditioning agent) 0.1~5%
- 토코페릴아세테이트(피부컨디셔닝제; 산화방지제) 0.1~5% - Tocopheryl acetate (skin conditioning agent; antioxidant) 0.1~5%
- 사이클로핵사실록세인(피부컨디셔닝제; 유연제) 0.1~ 5% - Cyclohexasiloxane (skin conditioning agent; softening agent) 0.1~5%
- 비타민 E(천연 방부제) 0.1~ 2% - Vitamin E (natural preservative) 0.1~2%
- 향료(감미제) 0.01~2% - Flavor (sweetener) 0.01~2%
- 정제수(용제) 1~60% - Purified water (solvent) 1~60%
실험예 1: 알로에 오일의 수율 및 지방산 분석Experimental Example 1: Yield and Fatty Acid Analysis of Aloe Oil
상기 실시예를 통해 수득한 알로에 오일은 도 2와 같이 초임계 추출 시간에 따른 초원심분리를 거쳐 수득된 알로에 오일의 수율로 표시되었고, 최종 처리시간인 120 분 후에는 약 2.0 내지 4.0%의 수율을 확보하였다. 이때 알로에 오일의 색깔은 짙은 담갈색의 오일이었으며, 총 50 g의 알로에 오일을 수득하였다. 한편, 알로에 오일의 정량분석은 국가공인시험기관인 코티티시험연구원(KOTITI, 대한민국)에 의뢰하여 실시하였으며, 표준물질은 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 조제 및 희석하여 사용하였다. n-Hexane, dichloromethane, N,N-dimethylformamide(DMF), acetonitrile 등은 HPLC용으로 Merck사(Darmstadt, Germany)에서 구입하였고, sodium sulfide nonhydrate는 Sigma-Aldrich Chemical Co.에서 구입하여 사용하였다. 또한 Sep-Pak Florisil Vac Cartridge 3cc/500mg(Waters, MA, USA)를 사용하였다. 그 결과, 도 3 및 도 4와 같은 분석 결과를 나타내었고, 조지방 함량 0.03g/100g, 지방산 함량 0.02g/100g으로 나타났으며, 개별 지방산 함량은 각각 베헨산(Behenic acid) 17%, 팔미트산(Palmitic acid) 17%, 알파리놀렌산(Alpha-Linolenic acid) 16%, 올레산(Oleic acid) 15%, 리놀레산(Linoleic acid) 14%, 엘라이드산(Elaidic acid) 12%로 나타났다.The aloe oil obtained through the above example was expressed as the yield of aloe oil obtained through ultracentrifugation according to the supercritical extraction time as shown in FIG. 2, and after 120 minutes, the final treatment time, the yield was about 2.0 to 4.0%. has been secured. At this time, the color of the aloe oil was dark brown oil, and a total of 50 g of aloe oil was obtained. On the other hand, quantitative analysis of aloe oil was conducted by requesting a nationally accredited test institute, KOTITI (Korea), and standard materials were purchased from Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, USA) and prepared and prepared. diluted and used. n-Hexane, dichloromethane, N,N-dimethylformamide (DMF), acetonitrile, etc. were purchased from Merck (Darmstadt, Germany) for HPLC, and sodium sulfide nonhydrate was purchased from Sigma-Aldrich Chemical Co. and used. Also, Sep-Pak Florisil Vac Cartridge 3cc/500mg (Waters, MA, USA) was used. As a result, the analysis results shown in FIGS. 3 and 4 were shown, and the crude fat content was 0.03g/100g and the fatty acid content was 0.02g/100g, and the individual fatty acid contents were 17% of Behenic acid and 17% of palmitic acid, respectively.
실험예 2: 알로에 오일의 색도 측정Experimental Example 2: Measurement of chromaticity of aloe oil
상기 실시예의 알로에 초임계 추출 오일을 5 회 반복 제조하여 각각의 시료 3 g을 취한 후 색차계(Colorimeter, CM-3500d, Konica Minolta, Japan)를 이용하여 Lsample(명도), asample(적색도), bsample(황색도)값을 측정하였으며, 색도값 ΔE는 다음 식에 의하여 계산하였다. After taking 3 g of each sample by repeatedly preparing the aloe supercritical extraction oil of the above example 5 times, L sample (brightness) and a sample (redness) were measured using a colorimeter (Colorimeter, CM-3500d, Konica Minolta, Japan). ), the b sample (yellowness) value was measured, and the chromaticity value ΔE was calculated by the following equation.
ΔE=[(Lsample-Lstandard)2+(asample-astandard)2+(bsample-bstandard)2]×0.5 ΔE=[(L sample -L standard )2+(a sample -a standard )2+(b sample -b standard )2]×0.5
흰색표준판의 기준 표준값은 다음과 같다: L=92.93, a=-0.83 및 b=-0.89.The reference standard values for the white standard plate are as follows: L=92.93, a=-0.83 and b=-0.89.
그 결과, 하기 표 1과 같이 총 5 회의 평균값은 L=12.46±2.15, a=3.73±0.26, b=10.35±0.51, ΔE=81.37906426으로 나타났다.As a result, as shown in Table 1 below, the average values of a total of 5 times were L = 12.46 ± 2.15, a = 3.73 ± 0.26, b = 10.35 ± 0.51, and ΔE = 81.37906426.
실험예 3: 세포생존율 측정(MTT assay)Experimental Example 3: Cell viability measurement (MTT assay)
세포생존율 측정은 H2O2, Rotenone, Paraquat를 사용하여 세포의 산화적 스트레스에 대한 반응을 측정하였다. 96 well plate에 각 세포주(NIH-3T3, HaCaT, B16F10)를 well당 1×104 cell/well로 분주하고, 24 시간 배양하여 부착, 안정화를 시행하였다. 24 시간의 배양이 끝난 후 과산화수소(Hydrogen peroxide, H2O2), Rotenone, Paraquat 배양액에 희석하여 24 시간 동안 반응시킨 다음, Mosmann의 방법에 의한 MTT assay로 생존율을 측정하였다(Mosmann, 1983). 시료를 처리한 후 24 시간 배양된 세포 배양액을 제거하고, MTT의 최종농도가 0.5 mg/mL이 되도록 배지에 희석하여 100 μL를 가하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 4 시간 동안 배양하였다. 4 시간 후 배양액을 제거하고, formazan crystal을 용해시키기 위하여 DMSO 100 μL 가한 후 540 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 생존율을 확인하였다.Cell viability was measured using H 2 O 2 , Rotenone, and Paraquat to measure the response of cells to oxidative stress. Each cell line (NIH-3T3, HaCaT, B16F10) was dispensed at 1×10 4 cell/well per well in a 96-well plate, and adherence and stabilization were performed by culturing for 24 hours. After 24 hours of incubation, it was diluted in hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), Rotenone, and Paraquat culture medium, reacted for 24 hours, and then the survival rate was measured by MTT assay according to Mosmann's method (Mosmann, 1983). After processing the sample, the cell culture medium cultured for 24 hours was removed, 100 μL of the diluted MTT was added to the medium so that the final concentration was 0.5 mg/mL, and cultured for 4 hours in a 37°C, 5% CO 2 incubator. After 4 hours, the culture medium was removed, and 100 μL of DMSO was added to dissolve the formazan crystal, and the cell viability was confirmed by measuring the absorbance at 540 nm.
본 실험예에서 각 세포주들을 96 well plate에서 배양 후 상기 실시예에서 제조된 (120분 추출 후 초원심분리하여 수득한)알로에 초임계 추출 오일을 0, 1, 5, 10, 50, 100, 200, 300 ㎍/mL 로 희석하여 24 시간 동안 처리한 후 세포 생존율 변화를 관찰하였다. In this experimental example, after culturing each cell line in a 96 well plate, the aloe supercritical extraction oil (obtained by ultracentrifugation after 120 minutes of extraction) prepared in the above example was 0, 1, 5, 10, 50, 100, 200 , After diluting to 300 μg/mL and treating for 24 hours, changes in cell viability were observed.
그 결과, 알로에 오일에 대한 희석 비율에 따른 NIH-3T3, HaCaT, B16F10 세포의 생존율 변화는 도 5와 하기 표 2에 나타내었다. As a result, changes in the viability of NIH-3T3, HaCaT, and B16F10 cells according to the dilution ratio with respect to aloe oil are shown in FIG. 5 and Table 2 below.
도 5와 하기 표 2에 나타낸 바와 같이, 세포 생존율 변화는 10 ㎍/mL까지는 각 세포주의 세포 생존율에서 큰 변화를 나타내지는 않았으나, 50 ㎍/mL 이상에서는 희석 비율이 증가할수록 NIH-3T3, HaCaT, B16F10의 세포 생존율이 급격하게 감소하는 것을 확인할 수 있었다. As shown in Figure 5 and Table 2 below, the change in cell viability did not show a significant change in the cell viability of each cell line up to 10 μg / mL, but as the dilution ratio increased at 50 μg / mL or more, NIH-3T3, HaCaT, It was confirmed that the cell viability of B16F10 rapidly decreased.
한편, 알로에 오일의 추출 방법에 따른 차이를 실험하기 위해, 상기 실시예에서 추출 방법을 열수추출법 또는 아임계 추출법을 이용하는 것을 제외하고, 동일한 물질을 이용하여 알로에 오일을 추출하였다. Meanwhile, in order to test the difference according to the extraction method of aloe oil, the aloe oil was extracted using the same material except that the hot water extraction method or the subcritical extraction method was used as the extraction method in the above example.
알로에 열수추출물 또는 아임계 추출물 각각에 대한 희석 비율에 따른 NIH-3T3, HaCaT, B16F10 세포의 생존율 변화는 도 6와 하기 표 3에 나타내었다.Changes in viability of NIH-3T3, HaCaT, and B16F10 cells according to the dilution ratio for each of the hot water extract or the subcritical extract of Aloe are shown in FIG. 6 and Table 3 below.
도 6와 하기 표 3에 나타낸 바와 같이, 세포 생존율 변화는 5 ㎍/mL까지는 각 세포주의 세포 생존율에서 큰 변화를 나타내지는 않았으나, 10 ㎍/mL 이상에서는 희석 비율이 증가할수록 NIH-3T3, HaCaT, B16F10의 세포 생존율이 감소하는 것으로 나타났다. 즉, 본 실시예에 따른 초임계 추출법을 이용하여 추출한 알로에 오일이 열수추출물 또는 아임계 추출물 보다 각 세포별 생존율의 농도가 높은 것으로 나타나 독성이 낮은 것을 알 수 있었다.As shown in Figure 6 and Table 3, the change in cell viability did not show a significant change in the cell viability of each cell line up to 5 μg / mL, but as the dilution ratio increased at 10 μg / mL or more, NIH-3T3, HaCaT, Cell viability of B16F10 was shown to decrease. That is, it was found that the aloe oil extracted using the supercritical extraction method according to this Example showed a higher concentration of cell survival rate than the hot water extract or the subcritical extract, indicating low toxicity.
실험예 4: 항산화 활성 측정(DPPH radical scavenging activity)Experimental Example 4: Measurement of antioxidant activity (DPPH radical scavenging activity)
항산화 활성은 DPPH법을 이용하여 시료의 free radical 소거능을 측정하였다(Brand-Wiliams et al., 1995). DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)는 자신이 가지고 있는 홀수의 전자 때문에 517 nm에서 강한 흡수 스펙트럼를 보이나, 페놀성 화합물과 같이 수소에 전자를 제공해 주는 전자공여체와 반응하게 되면 전자 Hydrogen radical을 받아 Phenoxy radical을 생성하게 되며, 흡수 Band도 사라지게 되고 안정한 분자가 된다. 또한 공여된 전자는 비가역적으로 결합하며 그 수에 비례하여 진보라색의 DPPH의 색깔은 점점 옅어지게 된다. 각 추출물의 전자공여능(Electron donating ability)은 Blois의 방법에 준하여 각 시료의 DPPH에 대한 전자공여 효과로서 시료의 환원력을 측정하였다. Antioxidant activity was measured by the free radical scavenging ability of the sample using the DPPH method (Brand-Wiliams et al., 1995). DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) shows a strong absorption spectrum at 517 nm because of the odd number of electrons it has, but when it reacts with an electron donor that provides electrons to hydrogen, such as phenolic compounds, it generates hydrogen radicals. Phenoxy radical is generated, and the absorption band disappears and becomes a stable molecule. In addition, donated electrons combine irreversibly, and the color of deep purple DPPH gradually fades in proportion to the number. For the electron donating ability of each extract, the reducing power of the sample was measured as an electron donating effect for DPPH of each sample according to Blois' method.
농도별로 준비한 추출물 1 mL에 4×10-4 M DPPH 용액 5 mL를 가하여 혼합한 다음 암소에서 30 분간 반응시켜 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. IC50값은 각 시료가 DPPH radical 형성을 50% 억제하는데 필요한 시료의 양(IC50, ㎍/mL)으로 나타낸다. 3 가지 농도의 Absorbance를 X%로 변환 후 y=ax+b(일차방정식)을 이용해서 기울기와 절편을 구하여 IC50[(0.5-절편)/기울기] 값을 구하였다. 양성대조 물질로 Ascorbic acid를 사용하였다. 5 mL of a 4×10 -4 M DPPH solution was added to 1 mL of the extract prepared for each concentration, mixed, and reacted for 30 minutes in the dark to measure absorbance at 517 nm. The IC 50 value is expressed as the amount of sample (IC 50 , μg/mL) required for each sample to inhibit DPPH radical formation by 50%. After converting the absorbance of the three concentrations to X%, the slope and intercept were obtained using y = ax + b (linear equation) to obtain the IC 50 [(0.5-intercept)/slope] value. Ascorbic acid was used as a positive control.
전자 공여능(Electron donating ability)(%) = [1-(A-B)/C]×100Electron donating ability (%) = [1-(A-B)/C]×100
A : 시료 첨가구의 흡광도A: Absorbance of sample addition port
B : Blank의 흡광도B: absorbance of blank
C : 시료 무 첨가구의 흡광도C: Absorbance of sample-free area
상기 실시예에서 제조된 알로에 초임계 추출 오일, 알로에 열수추출물(상기 실험예 3 참조), 알로에 아임계 추출물(상기 실험예 3 참조)에 대한 DPPH radical 소거 효과를 양성대조군인 Ascorbic Acid와 비교 분석한 결과, 알로에 초임계 추출 오일의 DPPH radical 소거 효과는 농도 50 ㎍/mL에서 42.58%, 100 ㎍/mL에서 63.18%, 300 ㎍/mL에서 70.38%, 500 ㎍/mL에서 84.28%로 나타났으며, 농도 의존적으로 DPPH radical 소거능이 증가하였다. The DPPH radical scavenging effect of the aloe supercritical extraction oil, the aloe hot water extract (see Experimental Example 3 above), and the aloe subcritical extract (see Experimental Example 3 above) prepared in the above example was compared and analyzed with Ascorbic Acid, a positive control group. As a result, the DPPH radical scavenging effect of the supercritical aloe extract oil was 42.58% at 50 μg/mL, 63.18% at 100 μg/mL, 70.38% at 300 μg/mL, and 84.28% at 500 μg/mL. DPPH radical scavenging activity increased in a concentration-dependent manner.
특히 천연 항산화제인 Ascorbic Acid 농도 50 ㎍ /mL은 DPPH radical 소거능이 약 80%로 나타났는데, 상기 알로에 초임계 추출 오일 농도 300 내지 500 ㎍/mL에서 Ascorbic Acid 농도 50 ㎍/mL과 비슷한 결과를 나타냈다. 항산화 효과가 IC50(㎍/mL) 값이 67.03±0.39 ㎍/mL로 free radical 소거능을 보였다(표 4 및 도 7 참조). In particular, ascorbic acid concentration of 50 μg / mL, a natural antioxidant, showed about 80% DPPH radical scavenging ability, and the aloe supercritical extraction oil concentration of 300 to 500 μg / mL showed similar results to Ascorbic Acid concentration of 50 μg / mL. Antioxidant effect showed free radical scavenging ability with an IC 50 (μg/mL) value of 67.03±0.39 μg/mL (see Table 4 and FIG. 7).
반면, 알로에 열수추출물 또는 아임계 추출물의 DPPH radical 소거 효과는 농도 50 ㎍/mL에서 39.75%, 100 ㎍/mL에서 53.81%, 300 ㎍/mL에서 68.38%, 500 ㎍/mL에서 79.49%로 항산화 효과가 IC50(㎍/mL) 71.08±0.23 ㎍/mL으로 free radical 소거능을 보여 알로에 초임계 추출 오일 보다 DPPH radical 소거 효과가 훨씬 낮은 것으로 나타났다(표 5 및 도 8 참조). On the other hand, the DPPH radical scavenging effect of the aloe hot water extract or subcritical extract was 39.75% at 50 μg/mL, 53.81% at 100 μg/mL, 68.38% at 300 μg/mL, and 79.49% at 500 μg/mL, respectively. showed free radical scavenging activity with an IC 50 (μg/mL) of 71.08±0.23 μg/mL, indicating that the DPPH radical scavenging effect was much lower than that of aloe supercritical extract oil (see Table 5 and FIG. 8).
실험예 5: 피부주름개선 효능 평가시험Experimental Example 5: Skin wrinkle improvement efficacy evaluation test
제조예 1의 크림 제품과 대조물질(제조예 1 중 알로에 초임계 추출 오일 성분을 제외한 크림)을 인체에 적용하여 피부주름개선 효능 평가시험을 수행하였다(시험기관: ㈜대한피부과학연구소, 시험기간: 2020.06.22~2020.08.19). 피험자들은 시험자의 관리 감독 하에 시료의 적당량을 매일 1 회 자가 사용하였고 이중맹검법 사용 및 무작위 배정으로 실시하였다. 사용 장비는 스킨 비지오미터(Skin-Visiometer SV600; CK electronic GmbH, Germany)이고 실리콘 레플리카(Silicone repilica)를 이용하여 피부 표면 주름 등을 분석할 수 있는 장비로 내장된 광원이 투과할 때 발생하는 음영을 분석하여 R1~R5의 값으로 산출할 수 있다. R1(Skin Roughness), R2(Maximum Roughness), R3(Average Roughness), R4(Smoothness Depth) 및 R5(Arithmetic Average Roughness)를 산출한 결과, 하기 표 6과 같이 시험부위의 R1, R2, R3 수치는 시험 2 주 후부터, R4, R5 수치는 시험 4주 후부터 통계적으로 유의한 수준으로 개선된 것을 확인할 수 있었다. A skin wrinkle improvement efficacy evaluation test was performed by applying the cream product of Preparation Example 1 and the control material (Cream excluding the supercritical aloe extract oil component of Preparation Example 1) to the human body (Test Institution: Korea Dermatological Research Institute, test period : 2020.06.22~2020.08.19). Subjects used an appropriate amount of the sample once a day under the supervision of the investigator, and it was conducted in a double-blind and randomized manner. The equipment used is a Skin-Visiometer SV600 (CK electronic GmbH, Germany), and it is a device that can analyze wrinkles on the skin surface using a silicon replica. It can be analyzed and calculated as the values of R1 to R5. As a result of calculating R1 (Skin Roughness), R2 (Maximum Roughness), R3 (Average Roughness), R4 (Smoothness Depth), and R5 (Arithmetic Average Roughness), as shown in Table 6 below, the R1, R2, and R3 values of the test area are After 2 weeks of the test, it was confirmed that the R4 and R5 values were improved to a statistically significant level after 4 weeks of the test.
또한 시험부위와 대조부위와의 비교분석에서도 대조부위에 비해 시험부위의 R2, R3 수치가 시험 8주 후부터 통계적으로 유의하게 개선된 것을 확인할 수 있었다.In addition, in the comparative analysis between the test site and the control site, it was confirmed that the R2 and R3 values of the test site were statistically significantly improved after 8 weeks of the test compared to the control site.
결론적으로 총 23 명의 피험자들을 대상으로 본 발명의 크림제품(제조예 1)의 피부주름 개선 효능 시험을 시행하였으며, 중도탈락 없이 23 명의 피험자들이 모두 시험을 완료하였다. 시험은 이중맹검법을 이용하여 진행하였으며, 시험 종료일까지 시험자와 피험자 모두 A 및 B로 표기된 시료의 내용물을 봉인 제거 이전까지 알 수 없도록 하였다. 평가는 전문가에 의한 육안평가 및 비지오미터(Visiometer-SV600)을 이용한 기기평가를 실시하였으며 시험 종료 후 피험자 설문을 통한 평가가 추가적으로 이루어졌다.In conclusion, a skin wrinkle improvement efficacy test of the cream product (Preparation Example 1) of the present invention was conducted on a total of 23 subjects, and all 23 subjects completed the test without dropping out. The test was conducted using a double-blind method, and until the end of the test, both the tester and the subject did not know the contents of the samples marked A and B until the seal was removed. The evaluation was performed by visual evaluation by experts and instrument evaluation using a visiometer (Visiometer-SV600), and after the test was completed, evaluation was additionally conducted through questionnaires of subjects.
육안평가는 Visual analog scale[0-9]을 이용하여 피부과전문의를 포함한 숙련된 전문가 2 인이 동시에 실시하였으며 평가가 서로 다를 경우 더 높은 수치를 채택하였다. 평가 결과, 시험부위 주름 지수 개선정도가 대조부위에 비해 통계적으로 유의하게 감소한 것을 확인할 수 있었다.Visual evaluation was conducted simultaneously by two skilled experts including a dermatologist using a visual analog scale [0-9], and a higher value was adopted if the evaluations were different. As a result of the evaluation, it was confirmed that the degree of wrinkle index improvement in the test area decreased statistically significantly compared to the control area.
기기평가는 비지오미터(Visiometer)의 Roughness 측정을 이용하여 이루어졌다. 그 결과, 각 주름지수의 최종 개선율은 상기 표 6과 같이 R1, R2, R3, R4, R5 각각 33.63%, 37.54%, 36.13%, 27.32%, 36.90%였으며, 시험부위의 R1, R2, R3 수치는 시험 2 주 후부터, R4, R5 수치는 시험 4 주 후부터 통계적으로 유의한 수준으로 개선된 것을 확인할 수 있었다. 또한 시험부위와 대조부위와의 비교분석에서도 대조부위에 비해 시험부위의 Roughness R2, R3 수치가 시험 8 주 후부터 통계적으로 유의하게 개선된 것을 확인하였다.Device evaluation was performed using the roughness measurement of a visiometer. As a result, the final improvement rate of each wrinkle index was 33.63%, 37.54%, 36.13%, 27.32%, and 36.90% for R1, R2, R3, R4, and R5, respectively, as shown in Table 6 above, and the R1, R2, and R3 values of the test area It was confirmed that the values of R4 and R5 improved at a statistically significant level after 2 weeks of the test and 4 weeks after the test. In addition, in the comparative analysis between the test area and the control area, it was confirmed that the roughness R2 and R3 values of the test area were statistically significantly improved after 8 weeks of testing compared to the control area.
피험자 설문평가는 마지막 시험일에 이루어졌으며 시료 도포 부위의 호전 정도를 네 단계로 나누어 평가하였는데, '조금 호전'되었다고 답한 사람이 시험군에서 3 명 더 많았으나, '변화 없음' 이라고 답한 사람이 또한 시험군에서 2 명이 더 많았다. '매우 호전' 되었다고 답한 사람 수는 시험군과 대조군이 같았다. 또한 본 시험에 이용된 시험부위와 대조부위 모두 총 8 주간의 시료 도포 기간 동안 모든 피험자들에서 특별한 이상 반응이 관찰되지 않아 안전한 시험부위로 판단된다.The subject questionnaire evaluation was conducted on the last test day, and the degree of improvement of the sample application area was evaluated by dividing it into four stages. There were 3 more people in the test group who answered 'a little improvement', but the person who answered 'no change' was also tested. There were 2 more in the military. The number of people who answered 'very improved' was the same in the test group and the control group. In addition, both the test site and the control site used in this test are judged to be safe test sites as no special adverse reactions were observed in all subjects during the sample application period of 8 weeks.
따라서, 본 발명의 알로에 초임계 추출 오일을 포함한 크림(제조예 1)을 사용한 시험부위는 대조부위에 비해 통계적으로 유의한 수준의 피부주름 개선 효과를 보였으며, 사용기간 동안 특별한 이상반응을 유발하지 않아 안전하고 효과적인 주름 기능성 시험 시료인 것으로 판단되었다.Therefore, the test site using the cream (Preparation Example 1) containing the supercritical aloe extract oil of the present invention showed a statistically significant level of skin wrinkle improvement compared to the control site, and did not cause any particular adverse reaction during the period of use. It was judged to be a safe and effective wrinkle functional test sample.
Claims (9)
(b) 상기 전처리된 알로에를 건조 및 분쇄하여 알로에 분말을 취득하는 단계;
(c) 초임계 추출조에 상기 알로에 분말 및 초임계 이산화탄소 유체를 투입하여 초임계 추출하는 단계;
(d) 상기 초임계 추출이 끝난 추출물을 초원심분리하는 단계; 및,
(e) 상기 추출물의 상등액을 취한 후 여과하여 알로에 초임계 추출 오일을 수득하는 단계;를 포함하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.
(a) a pretreatment step of washing and cutting aloe;
(b) obtaining an aloe powder by drying and pulverizing the pretreated aloe;
(c) supercritical extraction by introducing the aloe powder and supercritical carbon dioxide fluid into a supercritical extraction tank;
(d) ultracentrifuging the supercritical extraction-completed extract; and,
(e) obtaining an aloe supercritical extraction oil by filtering the supernatant of the extract;
상기 전처리된 알로에는 100 내지 250 mesh 범위로 분쇄하는 것을 특징으로 하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.
According to claim 1,
The method for producing aloe supercritical extraction oil, characterized in that the pretreated aloe is pulverized in the range of 100 to 250 mesh.
상기 초임계 추출은 초임계 추출조에서 70 내지 450 bar 및 30 내지 60℃에서 수행하는 것을 특징으로 하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.According to claim 1,
The method for producing supercritical extraction oil of aloe, characterized in that the supercritical extraction is performed at 70 to 450 bar and 30 to 60 ° C in a supercritical extraction tank.
상기 여과는,
상기 추출물의 상등액을 취한 후 8 ㎛ 이하 크기의 필터를 이용하여 여과하는 것을 특징으로 하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.
According to claim 1,
The filtration,
A method for producing an aloe supercritical extraction oil, characterized in that the supernatant of the extract is filtered using a filter having a size of 8 μm or less.
상기 알로에 초임계 추출 오일은 0.02 중량% 이상의 지방산 함량을 가지는 것을 특징으로 하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.
According to claim 1,
The method for producing aloe supercritical extraction oil, characterized in that the aloe supercritical extraction oil has a fatty acid content of 0.02% by weight or more.
상기 알로에는 알로에 아보레센스, 알로에 베라 또는 알로에 사포나리아를 포함하는 것을 특징으로 하는 알로에 초임계 추출 오일의 제조방법.
According to claim 1,
The method for producing an aloe supercritical extraction oil, characterized in that the aloe contains aloe arborescens, aloe vera or aloe saponaria.
피부 주름 또는 피부 탄력을 개선시키는 것인 화장료 조성물.Aloe supercritical extraction oil prepared according to any one of claims 1 to 6,
A cosmetic composition that improves skin wrinkles or skin elasticity.
상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여,
상기 알로에 초임계 추출 오일을 1 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 7,
With respect to the total weight of the cosmetic composition,
A cosmetic composition comprising 1 to 10% by weight of the aloe supercritical extraction oil.
상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨 토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누, 파우더 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.According to claim 7,
The cosmetic composition is skin, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrient lotion, massage cream, nutrient cream, eye cream, moisture cream, hand cream, essence, nutrient essence, pack, cleansing foam , A cosmetic composition, characterized in that at least one formulation selected from the group consisting of cleansing water, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, soap, powder, and combinations thereof.
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