KR20230008074A - 화합물 및 그의 용도 - Google Patents

화합물 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20230008074A
KR20230008074A KR1020227038706A KR20227038706A KR20230008074A KR 20230008074 A KR20230008074 A KR 20230008074A KR 1020227038706 A KR1020227038706 A KR 1020227038706A KR 20227038706 A KR20227038706 A KR 20227038706A KR 20230008074 A KR20230008074 A KR 20230008074A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
optionally substituted
cancer
compound
mmol
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
KR1020227038706A
Other languages
English (en)
Inventor
매튜 네터톤
프랑수아 브루셀
Original Assignee
포그혼 쎄라퓨틱스 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 포그혼 쎄라퓨틱스 인크. filed Critical 포그혼 쎄라퓨틱스 인크.
Publication of KR20230008074A publication Critical patent/KR20230008074A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

본 개시내용은 BAF 복합체-관련 장애의 치료에 유용한 화합물을 특징으로 한다.

Description

화합물 및 그의 용도
본 발명은 BRG1- 또는 BRM-연관 인자 (BAF) 복합체를 조정하는 데 유용한 화합물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 BAF 복합체 기능과 연관된 장애의 치료에 유용한 화합물에 관한 것이다.
염색질 조절은 유전자 발현에 필수적이고, ATP-의존성 염색질 재형성은 이러한 유전자 발현이 일어나는 메카니즘이다. BAF 복합체로도 공지된 인간 스위치/수크로스 비-발효성 (Switch/Sucrose Non-Fermentable) (SWI/SNF) 염색질 재형성 복합체는 BRG1 (브라마-관련 유전자-1) 및 BRM (브라마)으로 공지된 2종의 SWI2-유사 ATPase를 갖는다. ATP-의존성 염색질 재형성자 SMARCA4로 또한 공지된 전사 활성화인자 BRG1은 염색체 19 상의 SMARCA4 유전자에 의해 코딩된다. BRG1은 일부 암 종양에서 과다발현되고, 암 세포 증식에 필요하다. 가능한 전반적 전사 활성화인자 SNF2L2 및/또는 ATP-의존성 염색질 재형성자 SMARCA2로 또한 공지된 BRM은 염색체 9 상의 SMARCA2 유전자에 의해 코딩되고, BRG1 기능 돌연변이의 상실을 특징으로 하는 세포에서 종양 세포 성장에 필수적인 것으로 밝혀졌다. BRG 및/또는 BRM의 탈활성화는 세포에서 하류 효과, 예컨대 세포 주기 정지 및 종양 억제를 유발한다.
본 발명은 BAF 복합체를 조정하는 데 유용한 화합물을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 BAF 복합체에서의 변경과 연관된 장애, 예를 들어 BRG1 및 BRM 단백질 중 하나 또는 둘 다에서의 변경과 연관된 장애의 치료에 유용하다. 본 발명의 화합물은 단독으로 또는 다른 제약 활성제와 조합하여 이러한 장애를 치료하는 데 사용될 수 있다.
한 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 특징으로 한다:
Figure pct00001
여기서
X1은 O 또는 NR2이고;
각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
m은 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
R1은 할로 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R2는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
L1은 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
L은
Figure pct00002
의 구조를 포함하는 링커이고;
n은 0, 1, 2 또는 3이고;
L2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌이고;
각각의 L3은 독립적으로, -O-, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C20 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
D는 분해 모이어티이다.
일부 실시양태에서, m은 0이다. 일부 실시양태에서, m은 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, X1은 O이다. 일부 실시양태에서, X1은 NR2이다.
일부 실시양태에서, R2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, R2는 메틸 또는 에틸이다. 일부 실시양태에서, R2는 메틸이다.
일부 실시양태에서, L1은
Figure pct00003
이다.
일부 실시양태에서, L2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, L2는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌이다.
일부 실시양태에서, L2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, L2는 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌이다.
일부 실시양태에서, L2는
Figure pct00004
이다. 일부 실시양태에서, L2는
Figure pct00005
이다.
일부 실시양태에서, L2는
Figure pct00006
Figure pct00007
이다.
일부 실시양태에서, n은 1이다. 일부 실시양태에서, n은 2이다. 일부 실시양태에서, n은 3이다.
일부 실시양태에서, 각각의 L3은 독립적으로, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, 각각의 L3은 독립적으로, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, 각각의 L3은 독립적으로
Figure pct00008
Figure pct00009
이다.
일부 실시양태에서, 각각의 L3은 독립적으로
Figure pct00010
이다.
일부 실시양태에서, n은 0이다.
일부 실시양태에서, k는 0, 1, 또는 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 X2는 독립적으로 플루오린 또는 염소이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 Ib의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
Figure pct00011
.
한 측면에서, 본 발명은 화학식 II의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 특징으로 한다:
Figure pct00012
여기서
1개의 Z1 및 1개의 Z2는 조합되어 임의로 치환된 C1-C4 알킬렌을 형성하고, 나머지 Z1 및 Z2는 각각 수소이고;
각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
L은
Figure pct00013
의 구조를 갖는 링커이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
L4는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴렌이고;
각각의 L5는 독립적으로 -O-, 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
D는 분해 모이어티이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 IIa의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
Figure pct00014
.
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
Figure pct00015
여기서
L4는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌이고;
L5는 부재하거나, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌이고;
D는 분해 모이어티이다.
일부 실시양태에서, q는 1이다. 일부 실시양태에서, q는 2이다. 일부 실시양태에서, q는 3이다. 일부 실시양태에서, q는 4이다.
일부 실시양태에서, L은
Figure pct00016
이다.
일부 실시양태에서, L4는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, L4는 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌이다.
일부 실시양태에서, L4는
Figure pct00017
이다. 일부 실시양태에서, L4는
Figure pct00018
이다.
일부 실시양태에서, L5는 부재한다. 일부 실시양태에서, 각각의 L5는 독립적으로 -O-, 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, 각각의 L5는 독립적으로 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, (L5)q는
Figure pct00019
이다. 일부 실시양태에서, (L5)q는
Figure pct00020
이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
Figure pct00021
.
상기 화합물 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 유비퀴틴 리가제 결합 모이어티이다.
일부 실시양태에서, 유비퀴틴 리가제 결합 모이어티는 세레블론 리간드, IAP (아폽토시스 억제제) 리간드, 마우스 이중 미세염색체 2 상동체 (MDM2), 또는 폰 히펠-린다우(von Hippel-Lindau) 리간드, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 Y의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00022
여기서
A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이고;
v1은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
u1은 1, 2 또는 3이고;
T1는 결합 또는
Figure pct00023
이고;
T2는
Figure pct00024
이고;
R5A는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
각각의 RJ1은 독립적으로 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
JA는 부재하거나, O, 임의로 치환된 아미노, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
J는 부재하거나, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C6-C10 아릴렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴렌이다.
일부 실시양태에서, T2는
Figure pct00025
이다. 일부 실시양태에서, T2는
Figure pct00026
이다. 일부 실시양태에서, T2는
Figure pct00027
이다. 일부 실시양태에서, T2는
Figure pct00028
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 Y1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00029
.
일부 실시양태에서, T1는 결합이다. 일부 실시양태에서, T1는
Figure pct00030
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 Y2의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00031
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 Z의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00032
.
일부 실시양태에서, u1은 1이다. 일부 실시양태에서, u1은 2이다. 일부 실시양태에서, u1은 3이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA0의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00033
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AB의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00034
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AC의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00035
.
일부 실시양태에서, JA는 부재한다. 일부 실시양태에서, JA는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, JA는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이다. 일부 실시양태에서, JA는 O 또는 임의로 치환된 아미노이다.
일부 실시양태에서, JA는
Figure pct00036
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA0의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00037
.
일부 실시양태에서, v1은 0, 1, 2, 또는 3이다. 일부 실시양태에서, v1은 0이다. 일부 실시양태에서, v1은 1이다. 일부 실시양태에서, v1은 2이다. 일부 실시양태에서, v1은 3이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00038
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AB1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00039
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AC1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00040
.
일부 실시양태에서, J는 부재한다. 일부 실시양태에서, J는 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌 또는 임의로 치환된 C6-C10 아릴렌이다. 일부 실시양태에서, J는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴렌이다.
일부 실시양태에서, J는 임의로 치환된 헤테로시클릴렌이다. 일부 실시양태에서, J는 임의로 치환된 C6-C10 아릴렌이다.
일부 실시양태에서, J는
Figure pct00041
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA2의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00042
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA3의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00043
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 AA4의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00044
.
일부 실시양태에서, RA5는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA5는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이다.
일부 실시양태에서, RA5는 H 또는 메틸이다. 일부 실시양태에서, RA5는 H이다. 일부 실시양태에서, RA5는 메틸이다. 일부 실시양태에서, RA5는
Figure pct00045
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00046
여기서
Y1은
Figure pct00047
이고;
RA5는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
RA6은 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고; RA7은 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나; 또는 RA6 및 RA7은 각각이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 임의로 치환된 C3-C6 카르보시클릴 또는 임의로 치환된 C2-C5 헤테로시클릴을 형성하거나; 또는 RA6 및 RA7은 각각이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 임의로 치환된 C3-C6 카르보시클릴 또는 임의로 치환된 C2-C5 헤테로시클릴을 형성하고;
RA8은 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 임의로 치환된 -O-C3-C6 카르보시클릴, 히드록실, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 및/또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00048
을 형성하고;
Figure pct00049
은 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 또는 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이들 중 임의의 것은 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00050
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록실, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 및/또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00051
을 형성하고;
Figure pct00052
는 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 또는 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이들 중 임의의 것은 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00053
이 A2로 치환된다, 또는 그의 제약상 허용되는 염.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 -O-C3-C6 카르보시클릴, 히드록실, 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00054
을 형성하고;
Figure pct00055
은 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이는 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00056
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, F,
Figure pct00057
이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00058
을 형성하고;
Figure pct00059
은 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이는 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00060
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, RA1은 A2이다. 일부 실시양태에서, RA2는 A2이다. 일부 실시양태에서, RA3은 A2이다. 일부 실시양태에서, RA4는 A2이다. 일부 실시양태에서, RA5는 A2이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H 또는 A2이다.
일부 실시양태에서, RA1은 A2이고 각각의 RA2, RA3, 및 RA4는 H이다. 일부 실시양태에서, RA2는 A2이고 각각의 RA1, RA3, 및 RA4는 H이다. 일부 실시양태에서, RA3은 A2이고 각각의 RA1, RA2, 및 RA4는 H이다. 일부 실시양태에서, RA4는 A2이고 각각의 RA1, RA2, 및 RA3은 H이다.
일부 실시양태에서, RA5는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA5는 H 또는
Figure pct00061
이다. 일부 실시양태에서, RA5는 H이다. 일부 실시양태에서, RA5는
Figure pct00062
이다.
일부 실시양태에서, RA8은 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA8은 H 또는
Figure pct00063
이다. 일부 실시양태에서, RA8은 H이다. 일부 실시양태에서, RA8은
Figure pct00064
이다.
일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00065
이다.
일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00066
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00067
이다.
일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00068
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00069
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00070
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00071
이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA6 및 RA7은 독립적으로 H, F,
Figure pct00072
이거나; 또는 RA6 및 RA7은 각각이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00073
을 형성한다. 일부 실시양태에서, RA6은 H이고, RA7은 H이다.
일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00074
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00075
이다. 일부 실시양태에서, Y1은
Figure pct00076
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00077
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A2의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00078
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A3의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00079
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A4의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00080
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A5의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00081
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A6의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00082
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A7의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00083
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A8의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00084
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A9의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00085
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 A10의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00086
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00087
Figure pct00088
의 구조, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00089
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00090
의 구조, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00091
의 구조를 포함한다. 일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00092
의 구조를 포함한다. 일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00093
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00094
은
Figure pct00095
이고, 여기서 RA9는 H, A2, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00096
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, RA9는 H, A2, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA9는 H, A2, 또는 메틸이다. 일부 실시양태에서, R9A는 H이다. 일부 실시양태에서, R9A는 메틸이다. 일부 실시양태에서, RA9는 A2이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00097
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 B의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00098
여기서
RA5는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 임의로 치환된 -O-C3-C6 카르보시클릴, 히드록실, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 및/또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00099
을 형성하고;
Figure pct00100
은 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 또는 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이들 중 임의의 것은 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00101
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 -O-C3-C6 카르보시클릴, 히드록실, 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00102
을 형성하고;
Figure pct00103
은 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이는 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00104
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, F,
Figure pct00105
이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
Figure pct00106
을 형성하고;
Figure pct00107
은 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이는 A2로 임의로 치환되고, 여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
Figure pct00108
이 A2로 치환된다.
일부 실시양태에서, RA1은 A2이다. 일부 실시양태에서, RA2는 A2이다. 일부 실시양태에서, RA3은 A2이다. 일부 실시양태에서, RA4는 A2이다. 일부 실시양태에서, RA5는 A2이다.
일부 실시양태에서, RA5는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다.
일부 실시양태에서, RA5는 H 또는
Figure pct00109
이다. 일부 실시양태에서, RA5는 H이다. 일부 실시양태에서, RA5는
Figure pct00110
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 B1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00111
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 B2의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00112
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 B3의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00113
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 B4의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00114
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00115
의 구조를 포함한다. 일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00116
의 구조를 포함한다. 일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00117
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 유비퀴틴 리가제 결합 모이어티는 폰 히펠-린다우 리간드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 폰 히펠-린다우 리간드는
Figure pct00118
의 구조 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함하고, 여기서 A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 C의 구조를 포함한다:
Figure pct00119
여기서
L6은 -N(RB1)(RB2),
Figure pct00120
이고;
RB1은 H, A2, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
RB2는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
RB3은 A2, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
RB4는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
RB5는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
v2는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 RB6은 독립적으로 A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이고;
각각의 RB7 및 RB8은 독립적으로 H, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C6-C10 아릴이고;
RB9는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이고;
여기서 RB1, RB3, 및 RB6 중 단지 1개가 A2이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 C1의 구조를 갖는다:
Figure pct00121
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 C2의 구조를 갖는다:
Figure pct00122
.
일부 실시양태에서, RB9는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RB9는 메틸이다. 일부 실시양태에서, RB9는 (S)-입체생성 중심에 결합된다. 일부 실시양태에서, RB9는 수소이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00123
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00124
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00125
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00126
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00127
이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해제 모이어티는 화학식 D의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00128
여기서
A2는 B와 링커 사이의 결합이고;
각각의 RC1, RC2, 및 RC7은 독립적으로 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
RC3은 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
RC5는 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
v3은 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 RC8은, 독립적으로, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이고;
v4는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 RC9는, 독립적으로, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00129
의 구조, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 E의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00130
여기서
A2는 B와 링커 사이의 결합이고;
각각의 RC10 및 RC11은 독립적으로 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
v5는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 RC12는, 독립적으로, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이고;
v6은 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 R21은 독립적으로 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00131
의 구조, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 FA의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00132
여기서
Figure pct00133
은
Figure pct00134
이거나, 또는 A2로 치환되고 H, RFF1, 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 기로 치환된 비시클릭 모이어티이고;
Figure pct00135
은 단일 결합 또는 이중 결합이고;
u2는 0, 1, 2, 또는 3이고;
A2는 분해제와 링커 사이의 결합이고;
YFa는 CRFbRFc, C=O, C=S, C=CH2, SO2, S(O), P(O)O알킬, P(O)NH알킬, P(O)N(알킬)2, P(O)알킬, P(O)OH, P(O)NH2이고;
YFb는 NH, NRFF1, CH2, CHRFF1, C(RFF1)2, O 또는 S이고;
YFc는 CRFdRFe, C=O, C=S, C=CH2, SO2, S(O), P(O)O알킬, P(O)NH알킬, P(O)N(알킬)2, P(O)알킬, P(O)OH, P(O)NH2이고;
각각의 RFb, RFc, RFd, 및 RFe는 독립적으로 H, 알킬, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 카르보시클릴, 히드록실, 알콕시, 아미노, -NH알킬, 또는 -N알킬2이거나;
또는 RFb 및 RFc는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 3-, 4-, 5-, 또는 6-원 스피로카르보시클릴렌, 또는 N 및 O로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 또는 6-원 스피로헤테로시클릴렌을 형성하거나;
또는 RFd 및 RFe는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 3-, 4-, 5-, 또는 6-원 스피로카르보시클릴렌, 또는 N 및 O로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 또는 6-원 스피로헤테로시클릴렌을 형성하거나;
또는 RFd 및 RFb는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 1, 2, 3 또는 4개의 탄소 가교된 고리를 형성하고;
각각의 YFd 및 YFf는 독립적으로 CH2, CHRFF2, C(RFF2)2, C(O), N, NH, NRFF3, O, S 또는 S(O)이고;
YFe는 결합, 또는 1 내지 5개의 인접 탄소 원자를 함유하고 YFd 및 YFf에 부착된 3 내지 8-원 고리를 형성하는 2가 모이어티이고,
여기서 1, 2 또는 3개의 탄소 원자는 질소, 산소 또는 황 원자로 대체될 수 있고;
여기서 고리 원자 중 1개는 A2로 치환되고, 다른 것은 H 및 RFF1로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 기로 치환되고;
여기서 YFe의 인접 원자는 단일 또는 이중 결합을 통해 부착될 수 있고;
각각의 RFF1은 독립적으로 H, 알킬, 알케닐, 알키닐, 지방족, 헤테로지방족, 카르보시클릴, 할로겐, 히드록실, 아미노, 시아노, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 알킬아미노, 알킬히드록실 또는 할로알킬이고;
각각의 RFF2는 독립적으로 알킬, 알켄, 알킨, 할로겐, 히드록실, 알콕시, 아지드, 아미노,
-C(O)H, -C(O)OH, -C(O)(지방족, 알킬 포함), -C(O)O(지방족, 알킬 포함),
-NH(지방족, 알킬 포함), -N(지방족, 알킬 포함)(지방족, 알킬 포함), -NHSO2알킬,
-N(알킬)SO2알킬, -NHSO2아릴, -N(알킬)SO2아릴, -NHSO2알케닐, -N(알킬)SO2알케닐,
-NHSO2알키닐, -N(알킬)SO2알키닐, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 카르보시클릭, 시아노, 니트로, 니트로소, -SH, -S알킬 또는 할로알킬이고;
RFF3은 알킬, 알케닐, 알키닐, -C(O)H, -C(O)OH, -C(O)알킬, 또는 -C(O)O알킬이고,
여기서 YFd 또는 YFf가 A2로 치환된 경우에, YFe는 결합이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 FA1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00136
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 FB의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00137
여기서
Figure pct00138
은
Figure pct00139
이거나, 또는 A2로 치환되고 H, RFF1, 및 옥소로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 기로 치환된 비시클릭 모이어티이고;
A2는 분해제와 링커 사이의 결합이고;
YFa는 CRFbRFc, C=O, C=S, C=CH2, SO2, S(O), P(O)O알킬, P(O)NH알킬, P(O)N(알킬)2, P(O)알킬, P(O)OH, P(O)NH2이고;
각각의 YFb 및 YFg는 독립적으로 NH, NRFF1, CH2, CHRFF1, C(RFF1)2, O, 또는 S이고;
YFc는 CRFdRFe, C=O, C=S, C=CH2, SO2, S(O), P(O)O알킬, P(O)NH알킬, P(O)N(알킬)2, P(O)알킬, P(O)OH, P(O)NH2이고;
각각의 RFb, RFc, RFd, RFe, RFf 및 RFg는 독립적으로 H, 알킬, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 카르보시클릴, 히드록실, 알콕시, 아미노, -NH알킬 또는 -N알킬2이거나;
또는 RFb 및 RFc는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 3-, 4-, 5-, 또는 6-원 스피로카르보시클릴렌, 또는 N 및 O로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 또는 6-원 스피로헤테로시클릴렌을 형성하거나;
또는 RFd 및 RFe는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 3-, 4-, 5-, 또는 6-원 스피로카르보시클릴렌, 또는 N 및 O로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 또는 6-원 스피로헤테로시클릴렌을 형성하거나;
또는 RFf 및 RFg는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 3-, 4-, 5-, 또는 6-원 스피로카르보시클릴렌, 또는 N 및 O로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 또는 6-원 스피로헤테로시클릴렌을 형성하거나;
또는 RFd 및 RFb는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 1, 2, 3 또는 4개의 탄소 가교된 고리를 형성하거나;
또는 RFd 및 RFf는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 1, 2, 3 또는 4개의 탄소 가교된 고리를 형성하거나;
또는 RFb 및 RFg는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 1, 2, 3 또는 4개의 탄소 가교된 고리를 형성하고;
각각의 YFd 및 YFf는 독립적으로 CH2, CHRFF2, C(RFF2)2, C(O), N, NH, NRFF3, O, S 또는 S(O)이고;
YFe는 결합, 또는 1 내지 5개의 인접 탄소 원자를 함유하고 YFd 및 YFf에 부착된 3 내지 8-원 고리를 형성하는 2가 모이어티이고,
여기서 1, 2 또는 3개의 탄소 원자는 질소, 산소 또는 황 원자로 대체될 수 있고;
여기서 고리 원자 중 1개는 A2로 치환되고, 다른 것은 H 및 RFF1로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 기로 치환되고;
여기서 YFe의 인접 원자는 단일 또는 이중 결합을 통해 부착될 수 있고;
각각의 RFF1은 독립적으로 H, 알킬, 알케닐, 알키닐, 지방족, 헤테로지방족, 카르보시클릴, 할로겐, 히드록실, 아미노, 시아노, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 알킬아미노, 알킬히드록실 또는 할로알킬이고;
각각의 RFF2는 독립적으로 알킬, 알켄, 알킨, 할로겐, 히드록실, 알콕시, 아지드, 아미노,
-C(O)H, -C(O)OH, -C(O)(지방족, 알킬 포함), -C(O)O(지방족, 알킬 포함),
-NH(지방족, 알킬 포함), -N(지방족, 알킬 포함)(지방족, 알킬 포함), -NHSO2알킬,
-N(알킬)SO2알킬, -NHSO2아릴, -N(알킬)SO2아릴, -NHSO2알케닐, -N(알킬)SO2알케닐,
-NHSO2알키닐, -N(알킬)SO2알키닐, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 카르보시클릭, 시아노, 니트로, 니트로소, -SH, -S알킬 또는 할로알킬이고;
RFF3은 알킬, 알케닐, 알키닐, -C(O)H, -C(O)OH, -C(O)알킬, 또는 -C(O)O알킬이고,
여기서 YFd 또는 YFf가 A2로 치환된 경우에, YFe는 결합이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 FB1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00140
.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 화학식 F1의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00141
여기서 A2는 분해제와 링커 사이의 결합이고; RF1은 부재하거나 또는 O이다.
일부 실시양태에서, RF1은 부재한다. 일부 실시양태에서, RF1은 O이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00142
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 구조 화학식 F2 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00143
여기서 A2는 분해제와 링커 사이의 결합이고; Y2는 CH2 또는 NH이다.
일부 실시양태에서, Y2는 NH이다. 일부 실시양태에서, Y2는 CH2이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00144
의 구조를 포함한다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는 구조 화학식 G 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
Figure pct00145
여기서 A2는 분해제와 링커 사이의 결합이고; Y3은 CH2 또는 NH이다.
일부 실시양태에서, Y3은 NH이다. 일부 실시양태에서, Y3은 CH2이다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00146
의 구조를 포함한다.
분해 모이어티는 또한, 예를 들어 WO2017/197036; WO2019/204354, WO2019/236483, WO2020/010177; 및 WO2020/010227에서 발견되는 구조를 포함할 수 있으며, 이들의 구조는 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, 분해 모이어티는
Figure pct00147
의 구조 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함하고, 여기서 A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 표 1에서의 화합물 1-75 중 어느 하나의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 갖는다. 일부 실시양태에서, 화합물은 표 2의 화합물 76-104 중 어느 하나의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 표 1에서의 화합물 1-75 중 어느 하나의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 특징으로 한다.
한 측면에서, 본 발명은 표 2에서의 화합물 105-272 중 어느 하나의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 표 2에서의 화합물 76-104 중 어느 하나의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 특징으로 한다.
표 1. 본 발명의 화합물
Figure pct00148
Figure pct00149
Figure pct00150
Figure pct00151
Figure pct00152
Figure pct00153
Figure pct00154
Figure pct00155
Figure pct00156
Figure pct00157
Figure pct00158
Figure pct00159
Figure pct00160
Figure pct00161
Figure pct00162
Figure pct00163
Figure pct00164
Figure pct00165
표 2. 본 발명의 화합물
Figure pct00166
Figure pct00167
Figure pct00168
Figure pct00169
Figure pct00170
Figure pct00171
Figure pct00172
Figure pct00173
Figure pct00174
Figure pct00175
Figure pct00176
Figure pct00177
Figure pct00178
Figure pct00179
Figure pct00180
Figure pct00181
Figure pct00182
Figure pct00183
Figure pct00184
Figure pct00185
Figure pct00186
Figure pct00187
Figure pct00188
Figure pct00189
Figure pct00190
Figure pct00191
Figure pct00192
Figure pct00193
Figure pct00194
Figure pct00195
Figure pct00196
Figure pct00197
Figure pct00198
Figure pct00199
Figure pct00200
Figure pct00201
Figure pct00202
Figure pct00203
Figure pct00204
Figure pct00205
Figure pct00206
Figure pct00207
Figure pct00208
Figure pct00209
Figure pct00210
Figure pct00211
Figure pct00212
Figure pct00213
Figure pct00214
Figure pct00215
Figure pct00216
Figure pct00217
Figure pct00218
Figure pct00219
Figure pct00220
Figure pct00221
Figure pct00222
Figure pct00223
Figure pct00224
Figure pct00225
Figure pct00226
Figure pct00227
Figure pct00228
Figure pct00229
Figure pct00230
Figure pct00231
Figure pct00232
한 측면에서, 본 발명은 임의의 상기 화합물 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 BAF 복합체의 활성을 감소시키는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 BAF 복합체-관련 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BAF 복합체-관련 장애를 치료하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, BAF 복합체-관련 장애는 암이다.
추가 측면에서, 본 발명은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, BRM을 억제하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, BRG1을 억제하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
추가 측면에서, 본 발명은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, BRM 및 BRG1을 억제하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애를 치료하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애는 암이다. 다른 실시양태에서, 대상체는 BRG1 기능 상실 장애를 갖는 것으로 결정되고, 예를 들어 BRG1 기능 상실 암 (예를 들어, 암은 BRG1 기능 상실을 갖는 암 세포를 포함하는 것으로 결정됨)을 갖는 것으로 결정된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 아폽토시스를 유도하는 방법을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
추가 측면에서, 본 발명은 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 암을 치료하는 방법을 특징으로 한다.
상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 원인불명 원발성 암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암, 식도위암, 췌장암, 간담도암, 연부 조직 육종, 난소암, 두경부암, 신세포 암종, 골암, 비-호지킨 림프종, 소세포 폐암, 전립선암, 배아성 종양, 배세포 종양, 자궁경부암, 갑상선암, 타액선암, 위장 신경내분비 종양, 자궁 육종, 위장 기질 종양, CNS암, 흉선 종양, 부신피질 암종, 충수암, 소장암 또는 음경암이다.
상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 원인불명 원발성 암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암 또는 음경암이다.
상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 약물 저항성 암이거나 또는 선행 요법 (예를 들어, 베무라페닙, 다카르바진, CTLA4 억제제, PD1 억제제, 인터페론 요법, BRAF 억제제, MEK 억제제, 방사선요법, 테모졸로미드, 이리노테칸, CAR-T 요법, 헤르셉틴(Herceptin)®, 페르제타(Perjeta)®, 타목시펜, 젤로다(Xeloda)®, 도세탁솔, 백금 작용제 예컨대 카르보플라틴, 탁산 예컨대 파클리탁셀 및 도세탁셀, ALK 억제제, MET 억제제, 알림타(Alimta)®, 아브락산(Abraxane)®, 아드리아마이신(Adriamycin)®, 겜시타빈, 아바스틴(Avastin)®, 할라벤(Halaven)®, 네라티닙, PARP 억제제, ARN810, mTOR 억제제, 토포테칸, 겜자르(Gemzar)®, VEGFR2 억제제, 폴레이트 수용체 길항제, 데미시주맙, 포스브레타불린 또는 PDL1 억제제)에 반응하는데 실패하였다.
상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 BRG1 돌연변이를 갖거나 또는 갖는 것으로 결정되었다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, BRG1 돌연변이는 동형접합이다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 표피 성장 인자 수용체 (EGFR) 돌연변이를 갖지 않거나 또는 갖지 않는 것으로 결정되었다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 역형성 림프종 키나제 (ALK) 드라이버 돌연변이를 갖지 않거나 또는 갖지 않는 것으로 결정되었다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 암은 KRAS 돌연변이를 갖거나 또는 갖는 것으로 결정되었다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, BRG1 돌연변이는 단백질의 ATPase 촉매 도메인 내에 있다. 상기 방법 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, BRG1 돌연변이는 BRG1의 C-말단에서의 결실이다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 BAF와 관련된 장애 (예를 들어, 암 또는 바이러스 감염)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 상기 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 이 방법은 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 임의의 상기 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 장애는 바이러스 감염이며, 바이러스 감염은 레트로비리다에 과의 바이러스, 예컨대 렌티바이러스 (예를 들어, 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 및 델타레트로바이러스 (예를 들어, 인간 T 세포 백혈병 바이러스 I (HTLV-I), 인간 T 세포 백혈병 바이러스 II (HTLV-II)), 헤파드나비리다에 과 (예를 들어, B형 간염 바이러스 (HBV)), 플라비비리다에 과 (예를 들어, C형 간염 바이러스 (HCV)), 아데노비리다에 과 (예를 들어, 인간 아데노바이러스), 헤르페스비리다에 과 (예를 들어, 인간 시토메갈로바이러스 (HCMV), 엡스타인-바르 바이러스, 단순 포진 바이러스 1 (HSV-1), 단순 포진 바이러스 2 (HSV-2), 인간 헤르페스바이러스 6 (HHV-6), 헤르페스비투스 K*, CMV, 수두 대상포진 바이러스), 파필로마비리다에 과 (예를 들어, 인간 유두종바이러스 (HPV, HPV E1)), 파르보비리다에 과 (예를 들어, 파르보바이러스 B19), 폴리오마비리다에 과 (예를 들어, JC 바이러스 및 BK 바이러스), 파라믹소비리다에 과 (예를 들어, 홍역 바이러스), 토가비리다에 과 (예를 들어, 풍진 바이러스)로의 감염이다. 일부 실시양태에서, 장애는 코핀 시리스, 신경섬유종증 (예를 들어, NF-1, NF-2 또는 슈반세포종증) 또는 다발성 수막종이다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 바이러스 감염의 치료를 필요로 하는 대상체에서 바이러스 감염을 치료하는 방법을 제공한다. 이 방법은 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 (예를 들어, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물 또는 BRM-선택적 화합물) 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 임의의 상기 제약 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 바이러스 감염은 레트로비리다에 과의 바이러스, 예컨대 렌티바이러스 (예를 들어, 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 및 델타레트로바이러스 (예를 들어, 인간 T 세포 백혈병 바이러스 I (HTLV-I), 인간 T 세포 백혈병 바이러스 II (HTLV-II)), 헤파드나비리다에 과 (예를 들어, B형 간염 바이러스 (HBV)), 플라비비리다에 과 (예를 들어, C형 간염 바이러스 (HCV)), 아데노비리다에 과 (예를 들어, 인간 아데노바이러스), 헤르페스비리다에 과 (예를 들어, 인간 시토메갈로바이러스 (HCMV), 엡스타인-바르 바이러스, 단순 포진 바이러스 1 (HSV-1), 단순 포진 바이러스 2 (HSV-2), 인간 헤르페스바이러스 6 (HHV-6), 헤르페스비투스 K*, CMV, 수두 대상포진 바이러스), 파필로마비리다에 과 (예를 들어, 인간 유두종바이러스 (HPV, HPV E1)), 파르보비리다에 과 (예를 들어, 파르보바이러스 B19), 폴리오마비리다에 과 (예를 들어, JC 바이러스 및 BK 바이러스), 파라믹소비리다에 과 (예를 들어, 홍역 바이러스), 또는 토가비리다에 과 (예를 들어, 풍진 바이러스)로의 감염이다.
상기 측면 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 화합물은 BRM-선택적 화합물이다. 일부 실시양태에서, BRM-선택적 화합물은 화합물이 BRG1의 수준 및/또는 활성을 억제하는 것보다 적어도 10배 더 크게 BRM의 수준 및/또는 활성을 억제하고/거나 화합물은 화합물이 BRG1에 결합하는 것보다 적어도 10배 더 크게 BRM에 결합한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, BRM-선택적 화합물은 BRG1에 대한 IC50 또는 IP50보다 적어도 10배 더 낮은 IC50 또는 IP50를 갖는다. 상기 측면 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 화합물은 BRM/BRG1 이중 억제제 화합물이다. 일부 실시양태에서, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물은 BRM 및 BRG1 둘 다에 대해 유사한 활성 (예를 들어, 10배 이내 (예를 들어, 5배 미만, 2배 미만)의 BRM 및 BRG1에 대한 화합물의 활성)을 갖는다. 일부 실시양태에서, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물의 활성은 BRM에 대해 더 크다. 일부 실시양태에서, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물의 활성은 BRG1에 대해 더 크다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, BRM/BRG1 이중 억제제 화합물은 BRG1에 대한 IC50 또는 IP50의 10배 이내인 BRM에 대한 IC50 또는 IP50를 갖는다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암을 치료하는 방법을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암의 종양 성장의 감소를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암의 종양 성장을 감소시키는 방법을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암의 전이성 진행을 억제하는 방법을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암의 전이성 콜로니화를 억제하는 방법을 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액암 세포를 유효량의 임의의 상기 화합물 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 상기 세포에서 BRG1 및/또는 BRM의 수준 및/또는 활성을 감소시키는 방법을 특징으로 한다.
임의의 상기 측면의 일부 실시양태에서, 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 또는 혈액 세포는 대상체 내에 있다.
상기 측면 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRG1의 수준 및/또는 활성을 참조와 비교하여 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRG1의 수준 및/또는 활성을 참조와 비교하여 적어도 50% (예를 들어, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRG1의 수준 및/또는 활성을 적어도 90% (예를 들어, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%)만큼 감소시킨다.
일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 적어도 12시간 (예를 들어, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간, 24시간, 30시간, 36시간, 48시간, 72시간 또는 그 초과) 동안 참조와 비교하여 BRG1의 수준 및/또는 활성을 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRG1의 수준 및/또는 활성을 적어도 4일 (예를 들어, 5일, 6일, 7일, 14일, 28일 또는 그 초과) 동안 참조와 비교하여 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다.
임의의 상기 측면의 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRM의 수준 및/또는 활성을 참조와 비교하여 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRM의 수준 및/또는 활성을 참조와 비교하여 적어도 50% (예를 들어, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 유효량의 화합물은 BRM의 수준 및/또는 활성을 적어도 90% (예를 들어, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%)만큼 감소시킨다.
일부 실시양태에서, 화합물의 유효량은 BRM의 수준 및/또는 활성을 적어도 12시간 (예를 들어, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간, 24시간, 30시간, 36시간, 48시간, 72시간 또는 그 초과) 동안 참조와 비교하여 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, BRM의 수준 및/또는 활성을 적어도 4일 (예를 들어, 5일, 6일, 7일, 14일, 28일 또는 그 초과) 동안 참조와 비교하여 적어도 5% (예를 들어, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%)만큼 감소시키는 화합물의 유효량.
일부 실시양태에서, 대상체는 암을 갖는다. 일부 실시양태에서, 암은 BRG1 및/또는 BRM 단백질을 발현하고/거나 세포 또는 대상체는 BRG1 및/또는 BRM을 발현하는 것으로 확인되었다. 일부 실시양태에서, 암은 BRG1 단백질을 발현하고/거나 세포 또는 대상체는 BRG1을 발현하는 것으로 확인되었다. 일부 실시양태에서, 암은 BRM 단백질을 발현하고/거나 세포 또는 대상체는 BRM을 발현하는 것으로 확인되었다. 일부 실시양태에서, 암은 흑색종 (예를 들어, 포도막 흑색종, 점막 흑색종 또는 피부 흑색종)이다. 몇몇 실시양태에서, 암은 전립선암이다. 일부 실시양태에서, 암은 혈액암, 예를 들어 다발성 골수종, 대세포 림프종, 급성 T-세포 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 골수이형성 증후군, 이뮤노글로불린 A 람다 골수종, 미만성 혼합 조직구성 및 림프구성 림프종, B-세포 림프종, 급성 림프모구성 백혈병 (예를 들어, T-세포 급성 림프모구성 백혈병 또는 B-세포 급성 림프모구성 백혈병), 미만성 대세포 림프종 또는 비-호지킨 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암 (예를 들어, ER 양성 유방암, ER 음성 유방암, 삼중 양성 유방암 또는 삼중 음성 유방암)이다. 일부 실시양태에서, 암은 골암 (예를 들어, 유잉 육종)이다. 일부 실시양태에서, 암은 신세포 암종 (예를 들어, 소안구증 전사 인자 (MITF) 패밀리 전위 신세포 암종 (tRCC))이다. 일부 실시양태에서, 암은 전이성이다 (예를 들어, 암이 간으로 확산됨). 전이성 암은 이동 세포의 이동 및/또는 침습을 나타내는 세포를 포함할 수 있고/거나 내피 동원 및/또는 혈관신생을 나타내는 세포를 포함할 수 있다. 다른 실시양태에서, 이동하는 암은 세포 이동 암이다. 또 다른 실시양태에서, 세포 이동 암은 비-전이성 세포 이동 암이다. 전이성 암은 복막, 흉막, 심막 또는 지주막하 공간의 표면을 시딩하는 것을 통해 확산된 암일 수 있다. 대안적으로, 전이성 암은 림프계를 통해 확산된 암, 또는 혈행성으로 확산된 암일 수 있다. 일부 실시양태에서, BRG1 및/또는 BRM의 수준 및/또는 활성을 감소시키는 작용제의 유효량은 간으로의 암의 전이성 콜로니화를 억제하는 데 효과적인 양이다.
일부 실시양태에서, 암은 GNAQ에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 GNA11에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 PLCB4에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 CYSLTR2에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 BAP1에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 SF3B1에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 EIF1AX에서의 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 TFE3 전위를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 TFEB 전위를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 MITF 전위를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 EZH2 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 SUZ12 돌연변이를 보유한다. 일부 실시양태에서, 암은 EED 돌연변이를 보유한다.
일부 실시양태에서, 방법은 대상체에게 항암 요법, 예를 들어 화학요법제 또는 세포독성제, 면역요법, 수술, 방사선요법, 열요법 또는 광응고를 투여하거나 또는 세포와 접촉시키는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 항암 요법은 화학요법제 또는 세포독성제, 예를 들어 항대사물, 항유사분열제, 항종양 항생제, 아스파라긴-특이적 효소, 비스포스포네이트, 항신생물제, 알킬화제, DNA-복구 효소 억제제, 히스톤 데아세틸라제 억제제, 코르티코스테로이드, 탈메틸화제, 면역조정제, 야누스-연관 키나제 억제제, 포스피노시티드 3-키나제 억제제, 프로테아솜 억제제 또는 티로신 키나제 억제제이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 포도막 흑색종의 치료에 사용되는 또 다른 항암 요법, 예컨대 수술, MEK 억제제 및/또는 PKC 억제제와 조합되어 사용된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 방법은 본 발명의 화합물의 투여 전에, 그 후에 또는 그와 동시에 수술을 수행하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 본 발명의 화합물의 투여 전에, 그 후에 또는 그와 동시에 MEK 억제제 및/또는 PKC 억제제를 투여하는 것을 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 항암 요법 및 본 발명의 화합물은 서로 28일 이내에 함께 대상체를 치료하는 데 효과적인 양으로 각각 투여된다.
일부 실시양태에서, 대상체 또는 암은 BRG1 기능 상실 돌연변이를 갖고/거나 갖는 것으로 확인되었다. 일부 실시양태에서, 대상체 또는 암은 BRM 기능 상실 돌연변이를 갖고/거나 갖는 것으로 확인되었다.
일부 실시양태에서, 암은 1종 이상의 화학요법제 또는 세포독성제에 대해 저항성이다 (예를 들어, 암은 예컨대 유전자 마커에 의해 화학요법제 또는 세포독성제에 대해 저항성인 것으로 결정되거나, 또는 화학요법제 또는 세포독성제, 예컨대 화학요법제 또는 세포독성제에 반응하는 데 실패한 암에 대해 저항성일 가능성이 있음). 일부 실시양태에서, 암은 1종 이상의 화학요법제 또는 세포독성제에 반응하는 데 실패하였다. 일부 실시양태에서, 암은 다카르바진, 테모졸로미드, 시스플라틴, 트레오술판, 포테무스틴, IMCgp100, CTLA-4 억제제 (예를 들어, 이필리무맙), PD-1 억제제 (예를 들어, 니볼루맙 또는 펨브롤리주맙), PD-L1 억제제 (예를 들어, 아테졸리주맙, 아벨루맙 또는 두르발루맙), 미토겐-활성화 단백질 키나제 (MEK) 억제제 (예를 들어, 셀루메티닙, 비니메티닙 또는 타메티닙) 및/또는 단백질 키나제 C(PKC) 억제제 (예를 들어, 소트라스타우린 또는 IDE196)에 저항성이거나 또는 그에 반응하는 데 실패하였다.
일부 실시양태에서, 암은 포도막 흑색종, 예컨대 MEK 억제제 또는 PKC 억제제의 치료에 사용되는 이전에 투여된 치료제에 대해 저항성이거나 또는 그에 반응하는 데 실패한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 암은 미토겐-활성화 단백질 키나제 (MEK) 억제제 (예를 들어, 셀루메티닙, 비니메티닙, 또는 타메티닙), 및/또는 단백질 키나제 C(PKC) 억제제 (예를 들어, 소트라스타우린 또는 IDE196)에 저항성이거나 또는 그에 반응하는 데 실패한다.
화학적 용어
본원에 사용된 용어는 특정한 실시양태를 기재하기 위한 것이며, 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
하기 임의의 화학적 정의에서, 원자 기호 뒤의 숫자는 특정한 화학 모이어티에서 존재하는 해당 원소의 총 원자 개수를 나타낸다. 이해되는 바와 같이, 본원에 기재된 바와 같은 다른 원자, 예컨대 H 원자, 또는 치환기는 원자의 원자가를 충족시키기 위해 필요에 따라 존재할 수 있다. 예를 들어, 비치환된 C2 알킬 기는 화학식 -CH2CH3을 갖는다. 본원에 정의된 기와 함께 사용되는 경우에, 탄소 원자의 수에 대한 언급은 아세탈 및 케탈 기 내의 2가 탄소를 포함하지만, 아실, 에스테르, 카르보네이트 또는 카르바메이트 기 내의 카르보닐 탄소는 포함하지 않는다. 헤테로아릴 기 내의 산소, 질소 또는 황 원자의 개수에 대한 언급은 헤테로시클릭 고리의 일부를 형성하는 원자를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "아실"은 H, 또는 본원에 정의된 바와 같은 카르보닐 기를 통해 모 분자 기에 부착된 알킬 기를 나타내고, 포르밀 (즉, 카르복스알데히드 기), 아세틸, 트리플루오로아세틸, 프로피오닐 및 부타노일로 예시된다. 예시적인 비치환된 아실 기는 1 내지 6, 1 내지 11, 또는 1 내지 21개의 탄소를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 1 내지 20개의 탄소 원자 (예를 들어, 1 내지 16개의 탄소 원자, 1 내지 10개의 탄소 원자, 1 내지 6개의 탄소 원자 또는 1 내지 3개의 탄소 원자)의 분지쇄 또는 직쇄 1가 포화 지방족 탄화수소 라디칼을 지칭한다.
알킬렌은 2가 알킬 기이다. 본원에 단독으로 또는 다른 기와 조합되어 사용된 용어 "알케닐"은 탄소-탄소 이중 결합을 갖고 2 내지 20개의 탄소 원자 (예를 들어, 2 내지 16개의 탄소 원자, 2 내지 10개의 탄소 원자, 2 내지 6개의 탄소 원자 또는 2개의 탄소 원자)를 갖는 직쇄 또는 분지형 탄화수소 잔기를 지칭한다.
본원에 단독으로 또는 다른 기와 조합되어 사용된 용어 "알키닐"은 탄소-탄소 삼중 결합을 갖고 2 내지 20개의 탄소 원자 (예를 들어, 2 내지 16개의 탄소 원자, 2 내지 10개의 탄소 원자, 2 내지 6개의 탄소 원자 또는 2개의 탄소 원자)를 갖는 직쇄 또는 분지형 탄화수소 잔기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미노"는 -N(RN1)2를 나타내고, 여기서 각각의 RN1은 독립적으로 H, OH, NO2, N(RN2)2, SO2ORN2, SO2RN2, SORN2, N-보호기, 알킬, 알콕시, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 아실 (예를 들어, 아세틸, 트리플루오로아세틸, 또는 본원에 기재된 다른 것)을 나타내고, 여기서 각각의 이들 언급된 RN1 기는 임의로 치환될 수 있거나; 또는 2개의 RN1는 조합되어 알킬렌 또는 헤테로알킬렌을 형성하고, 여기서 각각의 RN2는 독립적으로 H, 알킬, 또는 아릴이다. 본 발명의 아미노 기는 비치환된 아미노 (즉, -NH2) 또는 치환된 아미노 (즉, -N(RN1)2)일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "아릴"은 적어도 1개의 방향족 고리를 갖는, 6 내지 12개의 탄소 원자의 방향족 모노- 또는 폴리카르보시클릭 라디칼을 지칭한다. 이러한 기의 예는 페닐, 나프틸, 1,2,3,4-테트라히드로나프틸, 1,2-디히드로나프틸, 인다닐 및 1H-인데닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "아릴알킬"은 아릴 기로 치환된 알킬 기를 나타낸다. 예시적인 비치환된 아릴알킬 기는 7 내지 30개의 탄소 (예를 들어, 7 내지 16개 또는 7 내지 20개의 탄소, 예컨대 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴, C1-C10 알킬 C6-C10 아릴, 또는 C1-C20 알킬 C6-C10 아릴), 예컨대 벤질 및 페네틸이다. 일부 실시양태에서, 알킬 및 아릴 각각은 각각의 기에 대해 본원에 정의된 바와 같은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "아지도"는 -N3 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "가교된 폴리시클로알킬"은 1 내지 3개의 가교를 함유하는 5 내지 20개의 탄소의 가교된 폴리시클릭 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "시아노"는 -CN 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "카르보시클릴"은 고리가 탄소 원자에 의해 형성된 비-방향족 C3-C12 모노시클릭, 비시클릭 또는 트리시클릭 구조를 지칭한다. 카르보시클릴 구조는 시클로알킬 기 및 불포화 카르보시클릴 라디칼을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "시클로알킬"은 3 내지 10개, 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소 원자의 포화, 비-방향족 및 1가 모노- 또는 폴리카르보시클릭 라디칼을 지칭한다. 이 용어는 추가로 라디칼 예컨대 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 노르보르닐 및 아다만틸에 의해 예시된다.
본원에 사용된 용어 "할로"는 플루오린 (플루오로), 염소 (클로로), 브로민 (브로모) 또는 아이오딘 (아이오도) 라디칼을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로알킬"은 구성성분 탄소 원자 중 1개 이상이 질소, 산소 또는 황에 의해 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬 기는 알킬 기에 대해 본원에 기재된 바와 같은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다. 헤테로알킬 기의 예는 알킬-O- (예를 들어, 메톡시 및 에톡시)를 지칭하는 본원에 사용된 "알콕시"이다. "헤테로알킬렌"은 2가 헤테로알킬 기이다. 본원에 사용된 용어 "헤테로알케닐"은 구성성분 탄소 원자 중 1개 이상이 질소, 산소 또는 황에 의해 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 알케닐 기를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 헤테로알케닐 기는 알케닐 기에 대해 본원에 기재된 바와 같이 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다. 헤테로알케닐 기의 예는 알케닐-O-를 지칭하는 본원에 사용된 "알켄옥시"이다. 헤테로알케닐렌은 2가 헤테로알케닐 기이다. 본원에 사용된 용어 "헤테로알키닐"은 구성성분 탄소 원자 중 1개 이상이 질소, 산소 또는 황에 의해 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 알키닐 기를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 헤테로알키닐 기는 알키닐 기에 대해 본원에 기재된 바와 같이 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다. 헤테로알키닐 기의 예는 알키닐-O-를 지칭하는 본원에 사용된 "알키닐옥시"이다. 헤테로알키닐렌은 2가 헤테로알키닐 기이다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 원자를 함유하는 적어도 1개의 방향족 고리를 갖고 나머지 고리 원자는 탄소인, 5 내지 12개의 원자의 모노- 또는 폴리시클릭 라디칼을 지칭한다. 헤테로아릴 기의 1 또는 2개의 고리 탄소 원자는 카르보닐 기로 대체될 수 있다. 헤테로아릴 기의 예는 피리딜, 피라조일, 벤조옥사졸릴, 벤조이미다졸릴, 벤조티아졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴 및 티아졸릴이다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴알킬"은 헤테로아릴 기로 치환된 알킬 기를 나타낸다. 예시적인 비치환된 헤테로아릴알킬 기는 7 내지 30개의 탄소 (예를 들어, 7 내지 16개 또는 7 내지 20개의 탄소, 예컨대 C1-C6 알킬 C2-C9 헤테로아릴, C1-C10 알킬 C2-C9 헤테로아릴, 또는 C1-C20 알킬 C2-C9 헤테로아릴)이다. 일부 실시양태에서, 알킬 및 헤테로아릴 각각은 각각의 기에 대해 본원에 정의된 바와 같은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "헤테로시클릴"은 N, O 또는 S로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 고리 원자를 함유하는 적어도 1개의 고리를 갖고 여기서 어떠한 고리도 방향족이 아닌, 3 내지 12개의 원자를 갖는 모노- 또는 폴리시클릭 라디칼을 지칭한다. 헤테로시클릴 기의 예는 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 푸릴, 피페라지닐, 피페리디닐, 피라닐, 피롤리디닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐 및 1,3-디옥사닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "헤테로시클릴알킬"은 헤테로시클릴 기로 치환된 알킬 기를 나타낸다. 예시적인 비치환된 헤테로시클릴알킬 기는 7 내지 30개의 탄소 (예를 들어, 7 내지 16개 또는 7 내지 20개의 탄소, 예컨대 C1-C6 알킬 C2-C9 헤테로시클릴, C1-C10 알킬 C2-C9 헤테로시클릴, 또는 C1-C20 알킬 C2-C9 헤테로시클릴)이다. 일부 실시양태에서, 알킬 및 헤테로시클릴은 각각 각각의 기에 대해 본원에 정의된 바와 같은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "히드록시알킬"은 -OH 기로 치환된 알킬 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "히드록실"은 -OH 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "N-보호기"는 합성 절차 동안 목적하지 않은 반응에 대해 아미노기를 보호하기 위한 기를 나타낸다. 통상적으로 사용되는 N-보호기는 문헌 [Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999)]에 개시되어 있다. N-보호기는 아실, 아릴로일 또는 카르바밀 기, 예컨대 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 피발로일, t-부틸아세틸, 2-클로로아세틸, 2-브로모아세틸, 트리플루오로아세틸, 트리클로로아세틸, 프탈릴, o-니트로페녹시아세틸, α-클로로부티릴, 벤조일, 4-클로로벤조일, 4-브로모벤조일, 4-니트로벤조일, 및 키랄 보조제, 예컨대 보호 또는 비보호된 D, L 또는 D, L-아미노산, 예컨대 알라닌, 류신 및 페닐알라닌; 술포닐-함유 기, 예컨대 벤젠술포닐 및 p-톨루엔술포닐; 카르바메이트 형성 기, 예컨대 벤질옥시카르보닐, p-클로로벤질옥시카르보닐, p-메톡시벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, 2-니트로벤질옥시카르보닐, p-브로모벤질옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카르보닐, 3,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 2,4-20 디메톡시벤질옥시카르보닐, 4-메톡시벤질옥시카르보닐, 2-니트로-4,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 3,4,5-트리메톡시벤질옥시카르보닐, 1-(p-비페닐릴)-1-메틸에톡시카르보닐, α, α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 벤즈히드릴옥시 카르보닐, t-부틸옥시카르보닐, 디이소프로필메톡시카르보닐, 이소프로필옥시카르보닐, 에톡시카르보닐, 메톡시카르보닐, 알릴옥시카르보닐, 2,2,2, -트리클로로에톡시카르보닐, 페녹시카르보닐, 4-니트로페녹시 카르보닐, 플루오레닐-9-메톡시카르보닐, 시클로펜틸옥시카르보닐, 아다만틸옥시카르보닐, 시클로헥실옥시카르보닐 및 페닐티오카르보닐, 아릴알킬 기, 예컨대 벤질, 트리페닐메틸 및 벤질옥시메틸, 및 실릴 기, 예컨대 트리메틸실릴을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 바람직한 N-보호기는 알록, 포르밀, 아세틸, 벤조일, 피발로일, t-부틸아세틸, 알라닐, 페닐술포닐, 벤질, t-부틸옥시카르보닐 (Boc) 및 벤질옥시카르보닐 (Cbz)이다.
본원에 사용된 용어 "니트로"는 -NO2 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "티올"은 -SH 기를 나타낸다.
알킬, 알케닐, 알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 카르보시클릴 (예를 들어, 시클로알킬), 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로시클릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 치환되는 경우에, 달리 명시되지 않는 한 일반적으로 1 내지 4개의 치환기가 존재할 것이다. 치환기는, 예를 들어 알킬 (예를 들어, 비치환 및 치환되고, 여기서 치환기는 본원에 기재된 임의의 기, 예를 들어 아릴, 할로, 히드록시를 포함함), 아릴 (예를 들어, 치환 및 비치환된 페닐), 카르보시클릴 (예를 들어, 치환 및 비치환된 시클로알킬), 할로 (예를 들어, 플루오로), 히드록실, 헤테로알킬 (예를 들어, 치환 및 비치환된 메톡시, 에톡시 또는 티오알콕시), 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 아미노 (예를 들어, NH2 또는 모노- 또는 디알킬 아미노), 아지도, 시아노, 니트로, 옥소 또는 티올을 포함한다. 일부 실시양태에서, 치환기는 알킬 (예를 들어, 비치환 및 치환되고, 여기서 치환기는 본원에 기재된 임의의 기, 예를 들어 아릴, 할로, 히드록시를 포함함), 아릴 (예를 들어, 치환 및 비치환된 페닐), 카르보시클릴 (예를 들어, 치환 및 비치환된 시클로알킬), 할로 (예를 들어, 플루오로), 히드록실, 헤테로알킬 (예를 들어, 치환 및 비치환된 메톡시, 에톡시 또는 티오알콕시), 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 아미노 (예를 들어, NH2 또는 모노- 또는 디알킬 아미노), 아지도, 시아노, 니트로 또는 티올을 포함한다. 아릴, 카르보시클릴 (예를 들어, 시클로알킬), 헤테로아릴 및 헤테로시클릴 기는 또한 알킬 (비치환 및 치환된, 예컨대 아릴알킬 (예를 들어, 치환 및 비치환된 벤질))로 치환될 수 있다.
본 발명의 화합물은 1개 이상의 비대칭 탄소 원자를 가질 수 있고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체, 거울상이성질체의 혼합물, 예컨대 예를 들어 라세미체, 광학적으로 순수한 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체 라세미체, 또는 부분입체이성질체 라세미체의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다. 광학 활성 형태는 예를 들어 라세미체의 분해에 의해, 비대칭 합성 또는 비대칭 크로마토그래피(키랄 흡착제 또는 용리액을 사용하는 크로마토그래피)에 의해 수득될 수 있다. 특정의 개시된 화합물은 다양한 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 입체이성질체는 단지 그의 공간 배열만이 상이한 화합물이다. 거울상이성질체는 거울 상이 중첩불가능한 입체이성질체의 쌍이며, 이는 가장 통상적으로 이들이 키랄 중심으로서 작용하는 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하기 때문이다. "거울상이성질체"는 서로 거울상이며 중첩불가능한 한 쌍의 분자 중 하나를 의미한다. 부분입체이성질체는 거울상과 관련되지 않는 입체이성질체이며, 이는 가장 통상적으로 이들이 2개 이상의 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하고 1개 이상의 키랄 탄소 원자 주위에 치환기의 배치를 나타내기 때문이다. 화합물의 거울상이성질체는 예를 들어 1종 이상의 잘 알려진 기술 및 방법, 예컨대 예를 들어, 키랄 크로마토그래피 및 그에 기반한 분리 방법을 사용하여 라세미체로부터 거울상이성질체를 분리함으로써 제조될 수 있다. 라세미 혼합물로부터 본원에 기재된 화합물의 거울상이성질체를 분해하기 위한 적절한 기술 및/또는 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. "라세미체" 또는 "라세미 혼합물"은 2종의 거울상이성질체를 함유하는 화합물을 의미하고, 여기서 이러한 혼합물은 광학 활성을 나타내지 않고; 즉, 이들은 편광면을 회전시키지 않는다. "기하 이성질체"는 탄소-탄소 이중 결합, 시클로알킬 고리, 또는 브릿징된 비시클릭 시스템과의 관계에서 치환기 원자의 배향이 상이한 이성질체를 의미한다. 탄소-탄소 이중 결합의 각 측 상의 원자 (H 이외의 것)는 E (치환기는 탄소-탄소 이중 결합의 반대 측 상에 있음) 또는 Z (치환기는 동일한 측 상에 배향됨) 배위일 수 있다. "R", "S", "S*", "R*", "E", "Z", "시스", 및 "트랜스"는 코어 분자에 대한 배위를 나타낸다. 특정한 개시된 화합물은 회전장애이성질체 형태로 존재할 수 있다. 회전장애이성질체는 회전에 대한 입체적 스트레인 장벽이 충분히 높아서 이형태체의 단리를 가능하게하는, 단일 결합에 대한 장애 회전으로부터 생성된 입체이성질체이다. 본 발명의 화합물은 또한 이성질체-특이적 합성에 의해 개별 이성질체로서 제조되거나 또는 이성질체 혼합물로부터 분해될 수 있다. 통상적인 분해 기술은 광학 활성 산을 사용하여 이성질체 쌍의 각각의 이성질체의 유리 염기의 염을 형성시키는 것 (뒤이어 분별 결정화 및 유리 염기의 재생), 광학 활성 아민을 사용하여 이성질체 쌍의 각각의 이성질체의 산 형태의 염을 형성시키는 것 (뒤이어 분별 결정화 및 유리 산의 재생), 광학적으로 순수한 산, 아민 또는 알콜을 사용하여 이성질체 쌍의 이성질체 각각의 에스테르 또는 아미드를 형성시키는 것 (뒤이어 크로마토그래피 분리 및 키랄 보조제의 제거), 또는 다양한 널리 공지된 크로마토그래피 방법을 사용하여 출발 물질 또는 최종 생성물의 이성질체 혼합물을 분해하는 것을 포함한다. 개시된 화합물의 입체화학이 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우에, 명명되거나 도시된 입체이성질체는 다른 입체이성질체에 대해 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량% 또는 99.9 중량%이다. 단일 거울상이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 거울상이성질체는 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량% 또는 99.9 중량% 광학적으로 순수하다. 단일 부분입체이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 부분입체이성질체는 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량% 또는 99.9 중량% 순수하다. 퍼센트 광학 순도는 거울상이성질체의 중량/거울상이성질체의 중량 플러스 그의 광학 이성질체의 중량의 비이다. 중량 기준 부분입체이성질체 순도는 1종의 부분입체이성질체의 중량/모든 부분입체이성질체의 중량의 비이다. 개시된 화합물의 입체화학이 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 명명되거나 도시된 입체이성질체는 다른 입체이성질체에 대해 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 단일 거울상이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 거울상이성질체는 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 단일 부분입체이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 부분입체이성질체는 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 몰 분율 기준 퍼센트 순도는 거울상이성질체의 몰/거울상이성질체의 몰 플러스 그의 광학 이성질체의 몰의 비이다. 유사하게, 몰 분율 기준 퍼센트 순도는 부분입체이성질체의 몰/부분입체이성질체의 몰 플러스 그의 이성질체의 몰의 비이다. 개시된 화합물이 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 구조에 의해 도시되고, 화합물이 적어도 1개의 키랄 중심을 갖는 경우에, 명칭 또는 구조는 상응하는 광학 이성질체가 없는 화합물의 거울상이성질체, 화합물의 라세미 혼합물, 또는 그의 상응하는 광학 이성질체에 비해 1종의 거울상이성질체가 풍부한 혼합물을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 개시된 화합물이 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 구조에 의해 도시되고, 2개 이상의 키랄 중심을 갖는 경우에, 명칭 또는 구조는 다른 부분입체이성질체가 없는 부분입체이성질체, 다른 부분입체이성질체 쌍이 없는 다수의 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체 쌍의 혼합물, 1종의 부분입체이성질체가 다른 부분입체이성질체(들)에 비해 풍부한 부분입체이성질체의 혼합물, 또는 1종 이상의 부분입체이성질체가 다른 부분입체이성질체에 비해 풍부한 부분입체이성질체의 혼합물을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명은 모든 이들 형태를 포괄한다.
본 개시내용의 화합물은 또한 중간체 또는 최종 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함한다. "동위원소"는 동일한 원자 번호를 갖지만 핵에서 상이한 수의 중성자로부터 생성된 상이한 질량수를 갖는 원자를 지칭한다. 예를 들어, 수소의 동위원소로는 삼중수소 및 중수소가 있다.
달리 언급하지 않는 한, 본원에 나타낸 구조는 또한 하나 이상의 동위원소-풍부 원자의 존재만이 상이한 화합물을 포함한다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 예시적인 동위원소는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린, 염소 및 아이오딘의 동위원소, 예컨대 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 32P, 33P, 35S, 18F, 36Cl, 123I 및 125I를 포함한다. 동위원소-표지된 화합물 (예를 들어, 3H 및 14C로 표지된 것)은 화합물 또는 기질 조직 분포 검정에 유용할 수 있다. 삼중수소 (즉, 3H) 및 탄소-14 (즉, 14C) 동위원소는 그의 제조 용이성 및 검출감도로 인해 유용할 수 있다. 추가로, 보다 무거운 동위원소, 예컨대 중수소 (즉, 2H)로의 치환은 보다 큰 대사 안정성으로부터 생성된 특정의 치료 이점 (예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건)을 제공할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 수소 원자는 2H 또는 3H에 의해 대체되거나, 또는 1개 이상의 탄소 원자는 13C- 또는 14C-풍부 탄소에 의해 대체된다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대 15O, 13N, 11C, 및 18F는 기질 수용체 점유율을 조사하기 위한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 연구에 유용하다. 동위원소 표지된 화합물의 제조는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다. 예를 들어, 동위원소 표지된 화합물은 일반적으로 비-동위원소 표지된 시약을 동위원소 표지된 시약으로 치환함으로써 본원에 기재된 본 발명의 화합물에 대해 개시된 것과 유사한 하기 절차에 의해 제조될 수 있다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 과학 용어들은 본 발명이 속하는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 보편적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본 개시내용에서 사용하기 위한 방법 및 물질은 본원에 기재되어 있으며; 관련 기술분야에 공지된 다른 적합한 방법 및 물질이 또한 사용될 수 있다. 물질, 방법 및 실시예는 단지 예시하는 것이며, 제한하려는 것이 아니다. 본원에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허, 서열, 데이터베이스 엔트리, 및 다른 참고문헌은 전문이 참조로 포함된다. 상충되는 경우, 정의를 포함한 본 명세서가 우선될 것이다.
정의
본 출원에서, 문맥으로부터 달리 명백하지 않는 한, (i) 단수 용어는 "적어도 하나"를 의미하는 것으로 이해될 수 있고; (ii) 용어 "또는"은 "및/또는"을 의미하는 것으로 이해될 수 있고; (iii) 용어 "포함하는" 및 "포함한"은 항목화된 성분 또는 단계 (그 자체로 제시되든지 또는 하나 이상의 추가의 성분 또는 단계와 함께 제시되든지)를 포괄하는 것으로 이해될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "약" 및 "대략"은 기재된 값의 10% 초과 또는 미만 내에 있는 값을 지칭한다. 예를 들어, 용어 "약 5 nM"은 4.5 내지 5.5 nM의 범위를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "투여"는 대상체 또는 계에 대한 조성물 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 포함하는 화합물 또는 제제)의 투여를 지칭한다. 동물 대상체 (예를 들어, 인간)에 대한 투여는 임의의 적절한 경로에 의한 것일 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 투여는 기관지 (기관지 점적주입에 의한 것 포함), 협측, 경장, 피간, 동맥내, 피내, 위내, 수질내, 근육내, 비강내, 복강내, 척수강내, 종양내, 정맥내, 뇌실내, 점막, 비강, 경구, 직장, 피하, 설하, 국소, 기관 (기관내 점적주입에 의한 것 포함), 경피, 질 및 유리체 내일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "BAF 복합체"는 인간 세포에서의 BRG1- 또는 HRBM-연관 인자 복합체를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "BAF 복합체-관련 장애"는 BAF 복합체의 활성 수준에 의해 유발되거나 또는 영향을 받는 장애를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "BRG1 기능 상실 돌연변이"는 감소된 활성 (예를 들어, BRG1 활성의 적어도 1% 감소, 예를 들어 BRG1 활성의 2%, 5%, 10%, 25%, 50%, 또는 100% 감소)을 갖는 단백질로 이어지는 BRG1에서의 돌연변이를 지칭한다. 예시적인 BRG1 기능 상실 돌연변이는 동형접합성 BRG1 돌연변이 및 BRG1의 C-말단에서의 결실을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "BRG1 기능 상실 장애"는 BRG1 활성의 감소 (예를 들어, BRG1 활성의 적어도 1% 감소, 예를 들어 BRG1 활성의 2%, 5%, 10%, 25%, 50%, 또는 100% 감소)를 나타내는 장애 (예를 들어, 암)를 지칭한다.
용어 "암"은 악성 신생물성 세포, 예컨대 종양, 신생물, 암종, 육종, 백혈병 및 림프종의 증식에 의해 유발된 상태를 지칭한다.
본원에 사용된 "조합 요법" 또는 "조합되어 투여되는"은 2종 (또는 그 초과)의 상이한 작용제 또는 치료가 특정한 질환 또는 상태에 대해 정의된 치료 요법의 일부로서 대상체에게 투여되는 것을 의미한다. 치료 요법은 대상체에 대한 개별 작용제의 효과가 중첩되도록 각각의 작용제의 투여 용량 및 주기를 정의한다. 일부 실시양태에서, 2종 이상의 작용제의 전달은 동시 또는 공동이고, 작용제는 공동-제제화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 2종 이상의 작용제는 공동-제제화되지 않고, 처방된 요법의 일부로서 순차적 방식으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 2종 이상의 작용제 또는 치료를 조합하여 투여하는 것은 증상, 또는 장애와 관련된 다른 파라미터의 감소가 단독으로 또는 다른 것의 부재 하에 전달된 1종의 작용제 또는 치료에서 관찰될 것보다 더 크도록 한다. 2종 치료의 효과는 부분적으로 상가적이거나, 완전히 상가적이거나, 또는 상가적보다 더 클 수 있다 (예를 들어, 상승작용적). 각각의 치료제를 순차적으로 투여하는 것 또는 실질적으로 동시에 투여하는 것은 경구 경로, 정맥 경로, 근육내 경로 및 점막 조직을 통한 직접 흡수가 포함되지만, 이에 제한되지 않는 임의의 적절한 경로에 의해서 수행될 수 있다. 치료제들은 동일한 경로에 의해서 또는 상이한 경로에 의해서 투여될 수 있다. 예를 들어, 조합물의 제1 치료제는 정맥내 주사에 의해 투여될 수 있는 반면, 조합물의 제2 치료제는 경구로 투여될 수 있다.
단백질 또는 RNA의 "수준 결정"은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의한 단백질 또는 RNA의 직접 또는 간접 검출을 의미한다. "직접적으로 결정하는"은 물리적 실체 또는 값을 수득하기 위해 과정을 수행하는 것 (예를 들어, 그 용어가 본원에 정의된 바와 같이 샘플에 대해 검정 또는 시험을 수행하거나 또는 샘플을 "분석하는 것")을 의미한다. "간접적으로 결정하는"은 또 다른 당사자 또는 공급원 (예를 들어, 물리적 실체 또는 값을 직접 획득한 제3자 실험실)으로부터 물리적 실체 또는 값을 받는 것을 지칭한다. 단백질 수준을 측정하는 방법은 일반적으로 웨스턴 블롯팅, 이뮤노블롯팅, 효소-연결 면역흡착 검정 (ELISA), 방사선면역검정 (RIA), 면역침전, 면역형광, 표면 플라즈몬 공명, 화학발광, 형광 편광, 인광, 면역조직화학적 분석, 매트릭스-보조 레이저 탈착/이온화 비행 시간 (MALDI-TOF) 질량 분광측정법, 액체 크로마토그래피 (LC)-질량 분광측정법, 마이크로세포측정법, 현미경검사, 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 및 유동 세포측정법, 뿐만 아니라 효소적 활성 또는 다른 단백질 파트너와의 상호작용을 포함하나 이에 제한되지는 않는 단백질의 특성에 기초한 검정을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. RNA 수준을 측정하는 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 정량적 폴리머라제 연쇄 반응 (qPCR) 및 노던 블롯 분석을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
"BAF 복합체의 활성의 감소"는 BAF 복합체와 관련된 활성의 수준 또는 관련된 하류 효과의 감소를 의미한다. BAF 복합체의 활성을 감소시키는 비제한적 예는 Sox2 활성화이다. BAF 복합체의 활성 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예를 들어 문헌 [Kadoch et al. Cell, 2013, 153, 71-85]에 기재된 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 상기 방법은 본원에 참조로 포함된다.
본원에 사용된 용어 "분해제"는 분해 모이어티를 포함하는 소분자 화합물을 지칭하고, 여기서 화합물은 단백질의 분해를 발생시키는 방식으로 단백질 (예를 들어, BRG1 및/또는 BRM)과 상호작용하며, 예를 들어 화합물의 결합은, 예를 들어 세포 또는 대상체에서 단백질의 수준의 적어도 5% 감소를 발생시킨다.
본원에 사용된 용어 "분해 모이어티"는 그의 결합이 단백질의 분해를 유발하는 모이어티, 예를 들어 BRG1 및/또는 BRM을 지칭한다. 한 예에서, 모이어티는 단백질을 대사하는 프로테아제 또는 유비퀴틴 리가제, 예를 들어 BRG1 및/또는 BRM에 결합한다.
"BAF 복합체의 활성을 조절하는"은 BAF 복합체 (예를 들어, GBAF)와 관련된 활성의 수준 또는 관련된 하류 효과를 변경시키는 것을 의미한다. BAF 복합체의 활성 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예를 들어 문헌 [Kadoch et al., Cell 153:71-85 (2013)]에 기재된 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 상기 방법은 본원에 참조로 포함된다.
"BRG1 및/또는 BRM의 활성을 감소시키는"은 BRG1 및/또는 BRM과 관련된 활성의 수준 또는 관련된 하류 효과를 감소시키는 것을 의미한다. BRG1 및/또는 BRM의 활성의 억제의 비제한적 예는 세포에서 BAF 복합체의 수준을 감소시키는 것이다. BRG1 및/또는 BRM의 활성 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, BRG1 및/또는 BRM의 활성을 감소시키는 작용제는 소분자 BRG1 및/또는 BRM 분해제이다.
"BRG1 및/또는 BRM의 수준을 감소시키는"은 세포 또는 대상체에서 BRG1 및/또는 BRM의 수준을 감소시키는 것을 의미한다. BRG1 및/또는 BRM의 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 측정될 수 있다.
"수준"은 참조와 비교한, 단백질 또는 단백질을 코딩하는 mRNA의 수준을 의미한다. 참조는 본원에 정의된 바와 같은 임의의 유용한 참조일 수 있다. 단백질의 "감소된 수준" 또는 "증가된 수준"은 참조와 비교하여 단백질 수준의 감소 또는 증가 (예를 들어, 약 5%, 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 100%, 약 150%, 약 200%, 약 300%, 약 400%, 약 500% 또는 그 초과만큼의 감소 또는 증가; 참조와 비교하여 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 50%, 약 75%, 약 100% 또는 약 200% 초과만큼의 감소 또는 증가; 약 0.01배, 약 0.02배, 약 0.1배, 약 0.3배, 약 0.5배, 약 0.8배 또는 그 미만만큼의 감소 또는 증가; 또는 약 1.2배, 약 1.4배, 약 1.5배, 약 1.8배, 약 2.0배, 약 3.0배, 약 3.5배, 약 4.5배, 약 5.0배, 약 10배, 약 15배, 약 20배, 약 30배, 약 40배, 약 50배, 약 100배, 약 1000배 또는 그 초과만큼의 증가)를 의미한다. 단백질의 수준은 질량/부피 (예를 들어, g/dL, mg/mL, μg/mL, ng/mL) 또는 샘플 내의 총 단백질 또는 mRNA에 대한 백분율로 표현될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "BRM을 억제하는"은 단백질의 ATPase 촉매 결합 도메인 또는 브로모도메인의 수준 또는 활성을 차단하거나 감소시키는 것을 지칭한다. BRM 억제는 관련 기술분야에 공지된 방법, 예를 들어 BRM ATPase 검정, 나노 DSF 검정 또는 BRM 루시페라제 세포 검정을 사용하여 결정될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "제약 조성물"은 제약상 허용되는 부형제와 함께 제제화되고 포유동물, 예를 들어 인간에게 투여하기에 적절한 본원에 기재된 화합물을 함유하는 조성물을 나타낸다. 전형적으로, 제약 조성물은 포유동물에서의 질환의 치료를 위한 치료 요법의 일부로서 정부 규제 기관의 승인 하에 제조 또는 판매된다. 제약 조성물은, 예를 들어 경구 투여를 위해 단위 투여 형태 (예를 들어, 정제, 캡슐, 캐플릿, 겔 캡 또는 시럽); 국소 투여를 위해 (예를 들어, 크림, 겔, 로션 또는 연고로서); 정맥내 투여를 위해 (예를 들어, 미립자 색전이 없는 멸균 용액으로서 및 정맥내 사용에 적합한 용매계 중에서); 또는 임의의 다른 제약상 허용되는 제제로 제제화될 수 있다.
본원에 사용된 "제약상 허용되는 부형제"는 본원에 기재된 화합물 이외의 임의의 성분 (예를 들어, 활성 화합물을 현탁 또는 용해시킬 수 있는 비히클)을 지칭하며, 환자에서 실질적으로 비독성 및 비-염증성인 특성을 갖는다. 부형제는, 예를 들어 항부착제, 항산화제, 결합제, 코팅제, 압축 보조제, 붕해제, 염료 (착색제), 연화제, 유화제, 충전제 (희석제), 필름 형성제 또는 코팅제, 향미제, 향료, 활택제 (유동 증진제), 윤활제, 보존제, 인쇄 잉크, 흡수제, 현탁 또는 분산제, 감미제, 및 수화 물을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 화합물, 예를 들어 화학식 I 또는 II의 임의의 화합물의 임의의 제약상 허용되는 염을 의미한다. 본원에 기재된 임의의 화합물의 제약상 허용되는 염은 타당한 의학적 판단의 범주 내에 있고, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉시켜 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하는 것들을 포함할 수 있다. 제약상 허용되는 염은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 제약상 허용되는 염은 문헌 [Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977 and in Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Eds. P.H. Stahl and C.G. Wermuth), Wiley-VCH, 2008]에 기재되어 있다. 염은 본원에 기재된 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 계내 제조될 수 있거나, 또는 별도로 유리 염기 기를 적합한 유기 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 제약상 허용되는 염으로서 제조될 수 있도록 이온화성 기를 가질 수 있다. 이들 염은 무기 또는 유기 산을 포함하는 산 부가염일 수 있거나, 또는 본 발명의 화합물의 산성 형태의 경우에 염은 무기 또는 유기 염기로부터 제조될 수 있다. 빈번하게, 화합물은 제약상 허용되는 산 또는 염기의 부가 생성물로서 제조된 제약상 허용되는 염으로서 제조되거나 사용된다. 적합한 제약상 허용되는 산 및 염기 및 적절한 염의 제조 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 염은 무기 및 유기 산 및 염기를 포함한 제약상 허용되는 비독성 산 및 염기로부터 제조될 수 있다.
"참조"는 단백질 또는 RNA 수준을 비교하는 데 사용되는 임의의 유용한 참조를 의미한다. 참조는 비교 목적을 위해 사용되는 임의의 샘플, 표준, 표준 곡선, 또는 수준일 수 있다. 참조는 정상 참조 샘플 또는 참조 표준 또는 수준일 수 있다. "참조 샘플"은, 예를 들어 대조군, 예를 들어 미리 결정된 음성 대조군 값, 예컨대 "정상 대조군" 또는 동일한 대상체로부터 채취한 이전 샘플; 정상의 건강한 대상체, 예컨대 정상 세포 또는 정상 조직으로부터의 샘플; 질환을 갖지 않는 대상체로부터의 샘플 (예를 들어, 세포 또는 조직); 질환으로 진단되었지만 본 발명의 화합물로 아직 치료되지 않은 대상체로부터의 샘플; 본 발명의 화합물에 의해 치료된 대상체로부터의 샘플; 또는 공지된 정상 농도의 정제된 단백질 또는 RNA (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 것)의 샘플일 수 있다. "참조 표준 또는 수준"이란, 참조 샘플로부터 유래된 값 또는 수를 의미한다. "정상 대조군 값"은 비-질환 상태를 나타내는 미리 결정된 값, 예를 들어 건강한 대조군 대상체에서 예상되는 값이다. 전형적으로, 정상 대조군 값은 소정 범위 ("X 내지 Y"), 높은 한계치 ("X" 이하), 또는 낮은 한계치 ("X" 이상)로서 표현된다. 특정 바이오마커에 대한 정상 대조군 값 내의 측정된 값을 갖는 대상체는 전형적으로 그러한 바이오마커에 대해 "정상 한계치 내"라 지칭된다. 정상 참조 표준 또는 수준은 질환 또는 장애 (예를 들어, 암)를 갖지 않는 정상 대상체; 본 발명의 화합물로 치료된 대상체로부터 유래된 값 또는 수일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 참조 샘플, 표준 또는 수준은 다음 기준: 연령, 체중, 성별, 질환 단계, 및 전반적 건강 중 적어도 하나 의해 샘플 대상체 샘플과 매칭된다. 정상 참조 범위 내의 정제된 단백질 또는 RNA, 예를 들어 본원에 기재된 임의의 것의 수준의 표준 곡선이 또한 참조로서 사용될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 본 발명에 따른 조성물이, 예를 들어 실험, 진단, 예방 및/또는 치료 목적을 위해 투여될 수 있는 임의의 유기체를 지칭한다. 전형적인 대상체는 임의의 동물 (예를 들어, 포유동물, 예컨대 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류 및 인간)을 포함한다. 대상체는 치료를 추구 또는 필요로 할 수 있거나, 치료를 요구할 수 있거나, 치료를 받고 있을 수 있거나, 향후에 치료를 받을 수 있거나, 또는 특정 질환 또는 상태에 대해 훈련된 전문가에 의한 관리 하에 있는 인간 또는 동물일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "치료하다", "치료된" 또는 "치료하는"은 치유적 치료, 또는 목적이 바람직하지 않은 생리학적 상태, 장애 또는 질환을 둔화 (경감)시키거나, 또는 유익한 또는 목적하는 임상 결과를 얻는 것인 임의의 수단을 의미한다. 유익한 또는 목적하는 임상 결과는 증상의 완화; 상태, 장애, 또는 질환의 정도의 감소; 상태, 장애, 또는 질환의 안정화된 (즉, 악화되지 않는) 상태; 상태, 장애, 또는 질환 진행의 발병 지연 또는 저속화; (부분적이든 전체적이든) 상태, 장애, 또는 질환 상태의 호전 또는 완화; 환자에 의해 반드시 식별가능한 것은 아닌 적어도 1종의 측정가능한 물리적 파라미터의 호전; 또는 상태, 장애, 또는 질환의 증진 또는 개선을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 치료는 과도한 수준의 부작용 없이 임상적으로 유의한 반응을 도출하는 것을 포함한다. 치료는 치료를 받지 않을 경우에 예상되는 것에 비해 생존을 연장시키는 것을 또한 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한, 예를 들어 장애가 발생할 위험이 증가된 대상체에서 장애를 "예방적으로 치료" 또는 "예방"하는 데 사용될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "변이체" 및 "유도체"는 상호교환가능하게 사용되고, 본원에 기재된 화합물, 펩티드, 단백질 또는 다른 물질의 자연 발생, 합성 및 반합성 유사체를 지칭한다. 본원에 기재된 화합물, 펩티드, 단백질 또는 다른 물질의 변이체 또는 유도체는 원래 물질의 생물학적 활성을 보유하거나 개선할 수 있다.
본 발명의 하나 이상의 실시양태의 세부사항이 아래의 설명에 나타나 있다. 본 발명의 다른 특징, 목적 및 이점은 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
본 개시내용은 BRG1 및/또는 BRM의 억제에 유용한 화합물을 특색으로 한다. 이들 화합물은, 예를 들어 BAF-관련 장애, 예컨대 암의 치료를 위해 BAF 복합체의 활성을 조정하는데 사용될 수 있다. 본원에 기재된 예시적인 화합물은 화학식 I 또는 II에 따른 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
화학식 I:
Figure pct00233
여기서
X1은 O 또는 NR2이고;
각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
m은 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
R1은 할로 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R2는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
L1은 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
L은
Figure pct00234
의 구조를 포함하는 링커이고;
n은 0, 1, 2 또는 3이고;
L2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌이고;
각각의 L3은 독립적으로, -O-, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C20 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
D는 분해 모이어티이다.
화학식 II:
Figure pct00235
여기서
1개의 Z1 및 1개의 Z2는 조합되어 임의로 치환된 C1-C4 알킬렌을 형성하고, 나머지 Z1 및 Z2는 각각 수소이고;
각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
L은
Figure pct00236
의 구조를 갖는 링커이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
L4는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴렌이고;
각각의 L5는 독립적으로 -O-, 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
D는 분해 모이어티이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 표 1에서의 화합물 1-75 또는 표 2에서의 76-104 중 어느 하나의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 갖는다.
다른 실시양태, 뿐만 아니라 이들 화합물의 제조를 위한 예시적인 방법이 본원에 기재된다.
제약 용도
본원에 기재된 화합물은 본 발명의 방법에 유용하며, 이론에 얽매이지는 않지만, BAF 복합체의 수준, 상태 및/또는 활성을 조정하는, 즉 포유동물에서 BAF 복합체 내의 BRG1 및/또는 BRM 단백질의 활성을 억제하는 그의 능력을 발휘하는 것으로 여겨진다. BAF 복합체-관련 장애는 BRG1 기능 상실 돌연변이-관련 장애를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 한 측면은 BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애, 예컨대 암 (예를 들어, 비소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 원인불명 원발성 암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암, 또는 음경암)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 상기 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 (a) 감소된 종양 크기, (b) 감소된 종양 성장 속도, (c) 증가된 종양 세포 사멸, (d) 감소된 종양 진행, (e) 감소된 전이 수, (f) 감소된 전이 속도, (g) 감소된 종양 재발, (h) 대상체의 증가된 생존, (i) 대상체의 증가된 무진행 생존 중 1종 이상 (예를 들어, 2종 이상, 3종 이상, 4종 이상)을 유발하는 데 효과적인 양으로 및 효과적인 시간 동안 투여된다.
암을 치료하는 것은 종양의 크기 또는 부피를 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 치료 후, 종양 크기는 치료 전 그의 크기에 비해 5% 이상 (예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상) 감소된다. 종양의 크기는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 예를 들어, 종양의 크기는 종양의 직경으로서 측정될 수 있다.
암을 치료하는 것은 추가로 종양 수의 감소를 유발할 수 있다. 예를 들어, 치료 후, 종양 수는 치료 전의 수에 비해 5% 이상 (예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상) 감소된다. 종양의 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있고, 예를 들어, 종양의 수는 육안으로 또는 명시된 배율 (예를 들어, 2x, 3x, 4x, 5x, 10x, 또는 50x)에서 가시적인 종양을 계수함으로써 측정될 수 있다.
암을 치료하는 것은 원발성 종양 부위로부터 떨어진 다른 조직 또는 기관에서 전이성 결절의 수를 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 치료 후, 전이성 결절의 수는 치료 전의 수에 비해 5% 이상 (예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상) 감소된다. 전이성 결절의 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 예를 들어, 육안으로 또는 특정 배율 (예를 들어, 2x, 10x, 또는 50x)에서 가시적인 전이성 결절을 계수함으로써 전이성 결절의 개수를 측정할 수 있다.
암을 치료하는 것은 비치료된 대상체의 집단과 비교하여 본 발명에 따라 치료된 대상체의 집단의 평균 생존 시간의 증가를 유발할 수 있다. 예를 들어, 평균 생존 시간은 30일 초과 (60일, 90일 또는 120일 초과) 증가된다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는, 예를 들어 본 발명의 화합물로의 치료 개시 후 집단에 대한 평균 생존 기간을 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 또한, 예를 들어 본 발명의 제약상 허용되는 염을 사용한 치료의 제1 라운드의 완료 후 집단에 대한 평균 생존 기간을 계산함으로써 측정될 수 있다.
암을 치료하는 것은 또한 비치료된 집단과 비교하여 치료된 대상체의 집단의 사망률의 감소를 유발할 수 있다. 예를 들어, 사망률은 2% 초과 (예를 들어, 5%, 10%, 또는 25% 초과)만큼 감소된다. 치료된 대상체의 집단의 사망률의 감소는 임의의 재현가능한 수단에 의해, 예를 들어 본 발명의 제약상 허용되는 염으로의 치료 개시 후 집단에 대해 단위 시간당 질환-관련 사망의 평균 수를 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 사망률의 감소는 또한, 예를 들어 본 발명의 제약상 허용되는 염을 사용한 치료의 제1 라운드의 완료 후 집단에 대한 단위 시간당 질환-관련 사망의 평균 수를 계산함으로써 측정될 수 있다.
본 발명에 의해 치료될 수 있는 예시적인 암은 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암, 식도위암, 췌장암, 간담도암, 연부 조직 육종, 난소암, 두경부암, 신세포 암종, 골암, 비-호지킨 림프종, 전립선암, 배아성 종양, 배세포 종양, 자궁경부암, 갑상선암, 타액선암, 위장 신경내분비 종양, 자궁 육종, 위장 기질 종양, CNS 암, 흉선 종양, 부신피질 암종, 충수암, 소장암 및 음경암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
조합 제제 및 그의 용도
본 발명의 화합물은 1종 이상의 치료제와 조합될 수 있다. 특히, 치료제는 본원에 기재된 임의의 암을 치료 또는 예방적으로 치료하는 것일 수 있다.
조합 요법
본 발명의 화합물은 단독으로 또는 추가의 치료제, 예를 들어 암 또는 그와 연관된 증상을 치료하는 다른 작용제와 조합되어, 또는 암을 치료하기 위한 다른 유형의 치료와 조합되어 사용될 수 있다. 조합 치료에서, 1종 이상의 치료 화합물의 투여량은 단독으로 투여되는 경우의 표준 투여량보다 감소될 수 있다. 예를 들어, 용량은 약물 조합 및 순열로부터 실험적으로 결정될 수 있거나, 또는 이소볼로그래픽 분석에 의해 추론될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Black et al., Neurology 65:S3-S6, 2005]). 이 경우, 조합된 경우의 화합물의 투여량은 치료 효과를 제공해야 한다.
일부 실시양태에서, 제2 치료제는 화학요법제 (예를 들어, 세포독성제 또는 암의 치료에 유용한 다른 화학적 화합물)이다. 이들은 알킬화제, 항대사물, 폴산 유사체, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체 및 관련 억제제, 빈카 알칼로이드, 에피포도필로톡신, 항생제, L-아스파라기나제, 토포이소머라제 억제제, 인터페론, 백금 배위 착물, 안트라센디온 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신피질 억제제, 아드레노코르티코스테로이드, 프로게스틴, 에스트로겐, 항에스트로겐, 안드로겐, 항안드로겐 및 고나도트로핀-방출 호르몬 유사체를 포함한다. 또한, 5-플루오로우라실 (5-FU), 류코보린 (LV), 이레노테칸, 옥살리플라틴, 카페시타빈, 파클리탁셀 및 독세탁셀이 포함된다. 화학요법제의 비제한적 예는 알킬화제, 예컨대 티오테파 및 시클로포스파미드; 알킬 술포네이트 예컨대 부술판, 임프로술판 및 피포술판; 아지리딘 예컨대 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파, 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸라멜라민 예컨대 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드 및 트리메틸올로멜라민; 아세토게닌 (특히 불라타신 및 불라타시논); 캄프토테신 (예컨대 합성 유사체 토포테칸); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065 (예컨대 그의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체); 크립토피신 (특히 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 돌라스타틴; 두오카르마이신 (예컨대 합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1); 엘레우테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕티인; 스폰지스타틴; 질소 머스타드 예컨대 클로람부실, 클로르나파진, 콜로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥시드 히드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비킨, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로스우레아 예컨대 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴, 및 라니무스틴; 항생제 예컨대 에네디인 항생제 (예를 들어, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 감마몰 및 칼리케아미신 오메갈 (예를 들어 [Agnew, Chem. Intl. Ed Engl. 33:183-186 (1994)] 참조); 디네미신, 예컨대 디네미신 A; 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트; 에스페라미신; 뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 에네디인 항생 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조- 5-옥소-L-노르류신, 아드리아마이신(Adriamycin)® (독소루비신, 예컨대 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항대사물 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실 (5- FU); 폴산 유사체 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체 예컨대 플루다라빈, 6-메르캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록수리딘; 안드로겐 예컨대 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항부신제 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 폴산 보충제 예컨대 프롤린산 산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 질산갈륨; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄시노이드 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미톡산트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로속산트론; 포도필린산 산; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; PSK® 폴리사카라이드 복합체 (JHS 내츄럴 프로덕츠(Natural Products), 오리건주 유진); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산 산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센 (특히 T- 2 독소, 베라큐린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드 ("Ara-C"); 시클로포스파미드; 티오테파; 탁소이드, 예를 들어, 탁솔(Taxol)® 파클리탁셀 (브리스톨-마이어스 스큅 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology), 뉴저지주 프린스턴), 아브락산(ABraxane)®, 파클리탁셀의 크레모포르-무함유, 알부민-조작된 나노입자 제제 (아메리칸 파마슈티칼 파트너스(American Pharmaceutical Partners), 일리노이주 샴버그), 및 탁소테레(Taxotere)® 도세탁셀 (론-프랑 로러(Rhone-Poulenc Rorer), 프랑스 안토니); 클로란부실; 겜자르(Gemzar)® 겜시타빈; 6-티오구아닌; 메르캅토퓨린; 메토트렉세이트; 백금 배위 착물 예컨대 시스플라틴, 옥살리플라틴 및 카르보플라틴; 빈블라스틴; 백금; 에토포시드 (VP-16); 이포스파미드; 미톡산트론; 빈크리스틴; 나벨빈(Navelbine)® 비노렐빈; 노반트론; 테니포시드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 젤로다; 이반드로네이트; 이리노테칸 (예를 들어, CPT-11); 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴 (DMFO); 레티노이드 예컨대 레티노산; 카페시타빈; 및 임의의 상기의 것의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체를 포함한다. 2종 이상의 화학요법제가 본원에 기재된 제1 치료제와 조합되어 투여될 칵테일에 사용될 수 있다. 조합 화학요법의 적합한 투여 요법은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌 [Saltz et al. (1999) Proc ASCO 18:233a and Douillard et al. (2000) Lancet 355:1041-7]에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 제2 치료제는 암 치료에 사용되는 생물제제 예컨대 시토카인 (예를 들어, 인터페론 또는 인터류킨 (예를 들어, IL-2))인 치료제이다. 일부 실시양태에서, 생물제제는 항혈관신생제, 예컨대 항-VEGF 작용제, 예를 들어 베바시주맙 (아바스틴(Avastin)®)이다. 일부 실시양태에서, 생물제제는 이뮤노글로불린-기반 생물제제, 예를 들어 항암 반응을 자극하는 표적에 효능작용하거나 또는 암에 중요한 항원에 길항작용하는 모노클로날 항체 (예를 들어, 인간화 항체, 완전 인간 항체, Fc 융합 단백질 또는 그의 기능적 단편)이다. 이러한 작용제는 리툭산 (리툭시맙); 제나팍스 (다클리주맙); 시뮬렉트 (바실릭시맙); 시나기스 (팔리비주맙); 레미케이드 (인플릭시맙); 헤르셉틴 (트라스투주맙); 밀로타르그 (겜투주맙 오조가미신); 캄파트 (알렘투주맙); 제발린 (이브리투모맙 티욱세탄); 휴미라 (아달리무맙); 졸레어 (오말리주맙); 벡사르 (토시투모맙-I-131); 랍티바 (에팔리주맙); 에르비툭스 (세툭시맙); 아바스틴 (베바시주맙); 티사브리 (나탈리주맙); 악템라 (토실리주맙); 벡티빅스 (파니투무맙); 루센티스 (라니비주맙); 솔리리스 (에쿨리주맙); 심지아 (세르톨리주맙 페골); 심포니 (골리무맙); 일라리스 (카나키누맙); 스텔라라 (우스테키누맙); 아르제라 (오파투무맙); 프롤리아 (데노수맙); 누막스 (모타비주맙); ABThrax (락시바쿠맙); 벤리스타 (벨리무맙); 예르보이 (이필리무맙); 애드세트리스 (브렌툭시맙 베도틴); 페르제타 (페르투주맙); 카드실라 (아도-트라스투주맙 엠탄신); 및 가지바 (오비누투주맙)를 포함한다. 또한, 항체-약물 접합체가 포함된다.
제2 작용제는 비-약물 치료인 치료제일 수 있다. 예를 들어, 제2 치료제는 방사선 요법, 동결요법, 온열요법 및/또는 종양 조직의 외과적 절제이다.
제2 작용제는 체크포인트 억제제일 수 있다. 한 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 억제 항체 (예를 들어, 단일특이적 항체, 예컨대 모노클로날 항체)이다. 항체는 예를 들어 인간화 또는 완전 인간 항체일 수 있다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 융합 단백질, 예를 들어 Fc-수용체 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 체크포인트 단백질과 상호작용하는 작용제, 예컨대 항체이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 체크포인트 단백질의 리간드와 상호작용하는 작용제, 예컨대 항체이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 CTLA-4의 억제제 (예를 들어, 억제 항체 또는 소분자 억제제) (예를 들어, 항-CTLA4 항체, 예컨대 이필리무맙/예르보이 또는 트레멜리무맙)이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 PD-1의 억제제 (예를 들어, 억제 항체 또는 소분자 억제제) (예를 들어, 니볼루맙/옵디보(Opdivo)®; 펨브롤리주맙/키트루다(Keytruda)®; 피딜리주맙/CT-011)이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 PDL1의 억제제 (예를 들어, 억제 항체 또는 소분자 억제제) (예를 들어, MPDL3280A/RG7446; MEDI4736; MSB0010718C; BMS 936559)이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 PDL2의 억제제 (예를 들어, PDL2/Ig 융합 단백질, 예컨대 AMP 224) (예를 들어, 억제 항체 또는 Fc 융합체 또는 소분자 억제제)이다. 일부 실시양태에서, 체크포인트의 억제제는 B7-H3의 억제제 (예를 들어, 억제 항체 또는 소분자 억제제) (예를 들어, MGA271), B7-H4, BTLA, HVEM, TIM3, GAL9, LAG3, VISTA, KIR, 2B4, CD160, CGEN-15049, CHK 1, CHK2, A2aR, B-7 패밀리 리간드, 또는 그의 조합이다.
본원에 기재된 임의의 조합 실시양태에서, 제1 및 제2 치료제는 동시에 또는 순차적으로 임의의 순서로 투여된다. 제1 치료제는 제2 치료제의 투여 직전, 1시간 이하, 2시간 이하, 3시간 이하, 4시간 이하, 5시간 이하, 6시간 이하, 7시간 이하, 8시간 이하, 9시간 이하, 10시간 이하, 11시간 이하, 12시간 이하, 13시간 이하, 14시간 이하, 16시간 이하, 17시간 이하, 18시간 이하, 19시간 이하, 20시간 이하, 21시간 이하, 22시간 이하, 23시간 이하, 24시간 이하 또는 1-7, 1-14, 1-21, 또는 1-30일 전 또는 후에 투여될 수 있다.
제약 조성물
본 발명의 화합물은 바람직하게는 포유동물, 바람직하게는 인간에게 투여하기 위한 제약 조성물로 생체내 투여에 적합한 생물학적으로 상용성인 형태로 제제화된다. 따라서, 한 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물을 적합한 희석제, 담체 또는 부형제와 혼합하여 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
본 발명의 화합물은 유리 염기 형태로, 염, 용매화물 형태로, 및 전구약물로서 사용될 수 있다. 모든 형태는 본 발명의 범주 내이다. 본 발명의 방법에 따라, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해되는 바와 같이, 기재된 화합물 또는 그의 염, 용매화물 또는 전구약물은 선택된 투여 경로에 따라 다양한 형태로 환자에게 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물은, 예를 들어 경구, 비경구, 협측, 설하, 비강, 직장, 패치, 펌프 또는 경피 투여로 투여될 수 있고, 제약 조성물은 그에 따라 제제화된다. 비경구 투여는 정맥내, 복강내, 피하, 근육내, 경상피, 비강, 폐내, 척수강내, 직장 및 국소 투여 방식을 포함한다. 비경구 투여는 선택된 기간에 걸친 연속 주입에 의한 것일 수 있다.
본 발명의 화합물은, 예를 들어 불활성 희석제 또는 동화성 식용 담체와 함께 경구로 투여될 수 있거나, 또는 경질- 또는 연질-쉘 젤라틴 캡슐에 봉입될 수 있거나, 또는 정제로 압축될 수 있거나, 또는 식이 식품과 직접 혼입될 수 있다. 경구 치료적 투여의 경우, 본 발명의 화합물은 부형제와 함께 혼입될 수 있으며, 섭취가능한 정제, 협측 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭시르, 현탁액, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 비경구로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물의 용액은 계면활성제, 예컨대 히드록시프로필셀룰로스와 적합하게 혼합된 물 중에서 제조될 수 있다. 분산액은 또한 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, DMSO, 및 알콜과 함께 또는 알콜 없이 그의 혼합물 중에서, 및 오일 중에서 제조될 수 있다. 통상적인 저장 및 사용의 조건 하에서 이들 제제는 미생물의 성장을 방지하기 위해 보존제를 함유할 수 있다. 적합한 제제의 선택 및 제조를 위한 통상적인 절차 및 성분은, 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences (2003, 20th ed.)] 및 문헌 [The United States Pharmacopeia: The National Formulary (USP 24 NF19), published in 1999]에 기재되어 있다. 주사가능한 용도에 적합한 제약 형태는 멸균 수용액 또는 분산액, 및 멸균 주사가능한 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 모든 경우에 상기 형태는 멸균되어야만 하며 시린지를 통해 용이하게 투여될 수 있을 정도로 유동성이어야만 한다. 비강 투여용 조성물은 에어로졸, 점적제, 겔 및 분말로서 편리하게 제제화될 수 있다. 에어로졸 제제는 전형적으로 생리학상 허용되는 수성 또는 비-수성 용매 중 활성 물질의 용액 또는 미세 현탁액을 포함하고, 통상적으로 밀봉된 용기 내에 멸균 형태로 단일 또는 다중용량의 양으로 존재하며, 이는 분무화 장치에 사용하기 위한 카트리지 또는 리필의 형태를 취할 수 있다. 대안적으로, 밀봉된 용기는 사용 후에 폐기되는 것으로 의도되는 계량 밸브가 장착된 단일 분배 장치, 예컨대 단일 용량 비강 흡입기 또는 에어로졸 분배기일 수 있다. 투여 형태가 에어로졸 분배기를 포함하는 경우, 이는 압축 기체, 예컨대 압축 공기 또는 유기 추진제, 예컨대 플루오로클로로히드로카본일 수 있는 추진제를 함유할 것이다. 에어로졸 투여 형태는 또한 펌프-아토마이저의 형태를 취할 수 있다. 협측 또는 설하 투여에 적합한 조성물은 정제, 로젠지 및 파스틸을 포함하고, 여기서 활성 성분은 담체, 예컨대 당, 아카시아, 트라가칸트, 젤라틴 및 글리세린과 함께 제제화된다. 직장 투여를 위한 조성물은 편리하게는 통상적인 좌제 베이스, 예컨대 코코아 버터를 함유하는 좌제 형태이다. 본원에 기재된 화합물은 종양내로, 예를 들어 종양내 주사로서 투여될 수 있다. 종양내 주사는 종양 혈관계 내로 직접 주사되고, 특히 별개의, 고형, 접근가능한 종양에 대해 고려된다. 국부, 국부 또는 전신 투여가 또한 적절할 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 종양에, 예를 들어 대략 1 cm 간격으로 주사 또는 다중 주사를 투여함으로써 유리하게 접촉될 수 있다. 외과적 개입의 경우에, 본 발명은 수술전에, 예컨대 수술불가능한 종양 대상체가 절제되도록 하기 위해 사용될 수 있다. 연속 투여는 또한 적절한 경우에, 예를 들어 카테터를 종양 또는 종양 혈관계 내로 이식함으로써 적용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 동물, 예를 들어 인간에게 단독으로 또는 본원에 언급된 바와 같은 제약상 허용되는 담체와 조합되어 투여될 수 있으며, 그의 비율은 화합물의 용해도 및 화학적 성질, 선택된 투여 경로, 및 표준 제약 실시에 의해 결정된다.
투여량
본 발명의 화합물 및/또는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물의 투여량은 다수의 요인, 예컨대 화합물의 약역학적 특성; 투여 방식; 수용자의 연령, 건강 및 체중; 증상의 특성 및 정도; 치료 빈도 및 존재하는 경우에 공동 치료의 유형; 및 치료될 동물에서의 화합물의 클리어런스율에 따라 달라질 수 있다. 통상의 기술자는 상기 요인에 기초하여 적절한 투여량을 결정할 수 있다. 본 발명의 화합물은 먼저 적합한 투여량으로 투여될 수 있고, 임상 반응에 따라 필요한 경우에 조절될 수 있다. 일반적으로, 인간에게 본 발명의 화합물을 예를 들어, 0.05 mg 내지 3000 mg (고체 형태로서 측정됨)의 1일 투여량으로 투여할 때 만족스러운 결과가 수득될 수 있다. 용량 범위는, 예를 들어 10-1000 mg (예를 들어, 50-800 mg)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950 또는 1000 mg의 화합물이 투여된다.
대안적으로, 투여량은 환자의 체중을 사용하여 계산될 수 있다. 예를 들어, 환자에게 투여되는 화합물 또는 그의 제약 조성물의 용량은 0.1-100 mg/kg (예를 들어, 0.25-25 mg/kg) 범위일 수 있다. 예시적인 비제한적 실시양태에서, 용량은 0.5-5.0 mg/kg (예를 들어, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5 또는 5.0 mg/kg) 또는 5.0-20 mg/kg (예를 들어, 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.5, 8.0, 8.5, 9.0, 9.5, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 mg/kg) 범위일 수 있다.
실시예
하기 약어가 하기 실시예 전반에 걸쳐 사용된다.
Figure pct00237
Figure pct00238
실시예 1. 중간체의 제조
(2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-1)의 제조
Figure pct00239
단계 1: tert-부틸 N-(9-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]노닐)카르바메이트의 제조
Figure pct00240
DCM (20.00 mL) 중 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (1.00 g, 0.002 mmol, 1.00 당량) 및 10-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]데칸산 (0.73 g, 0.003 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (0.90 g, 0.007 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 다음, HATU (1.32 g, 0.003 mmol, 1.50 당량)를 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 혼합물에 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM (100 mL x 4)으로 추출하였다. 유기 분획을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피에 의해 DCM/MeOH (100:0 DCM:MeOH 비에서 100:7 DCM:MeOH 비까지)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-(9-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]노닐)카르바메이트 (1.67g, 92.46%)를 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 700.
단계 2: (2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-1)의 제조
Figure pct00241
DCM (10 mL) 중 tert-부틸 N-(9-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]노닐)카르바메이트 (1.67 g, 2.386 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (2 mL, 26.926 mmol, 11.29 당량)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 5% K2CO3 (MeOH/물 = 5/2)의 용액을 첨가하고, pH를 8~9로 조정하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 최종 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 물질을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 0.1% 수성 NH4HCO3 중 10-35% 아세토니트릴로 20분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 (UV 254 nm에서 검출됨), (2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-1, 1.11 g, 73.68%)를 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 600.40.
표 A1의 하기 중간체를 중간체 I-1의 제조에 사용된 것과 유사한 경로에 의해 제조하였다.
표 A1.
Figure pct00242
5-(2-(4-아미노피페리딘-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 FA (I-6)의 제조
Figure pct00243
단계 1: 5-(2-브로모에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
Figure pct00244
THF (35 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-히드록시이소인돌-1,3-디온 (1.37 g, 4.996 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 2-브로모에탄올 (0.94 g, 7.494 mmol, 1.5 당량), PPh3 (1.97 g, 7.494 mmol, 1.5 당량) 및 DIAD (1.52 g, 7.494 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 5-(2-브로모에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (1.52g, 79.82%)을 흑색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 381.38.
단계 2: tert-부틸 (1-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페리딘-4-일)카르바메이트의 제조
Figure pct00245
ACN (35.00 mL) 중 5-(2-브로모에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (1.52 g, 3.988 mmol, 1.00 당량)의 용액에 tert-부틸 N-(피페리딘-4-일)카르바메이트 (0.80 g, 3.988 mmol, 1.00 당량), KI (0.66 g, 3.988 mmol, 1.00 당량) 및 K2CO3 (1.65 g, 11.963 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 30분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (1-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페리딘-4-일)카르바메이트 (1.402 g, 70.24%)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 501.
단계 3: 5-(2-(4-아미노피페리딘-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 FA (I-6)의 제조
Figure pct00246
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 (1-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페리딘-4-일)카르바메이트 (1.66 g, 3.316 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (10.00 mL, 134.630 mmol, 40.60 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 5-(2-(4-아미노피페리딘-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 포르메이트 (I-6, 840 mg, 62.52%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 401.17.
표 A2의 하기 중간체를 중간체 I-6의 제조에 사용된 것과 유사한 경로에 의해 제조하였다.
표 A2
Figure pct00247
4-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-7)의 제조
Figure pct00248
단계 1: tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00249
DCM (50.00 mL, 786.502 mmol, 78.75 당량) 중 tert-부틸 3-(히드록시메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (1.87 g, 9.987 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 0℃에서 DMAP (0.18 g, 1.498 mmol, 0.15 당량), TEA (2.53 g, 24.968 mmol, 2.50 당량) 및 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (2.86 g, 14.981 mmol, 1.50 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온으로 가온되도록 하고, 추가로 5시간 동안 교반하였다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/THF (1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (2.65 g, 77.72%)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 342.
단계 2: tert-부틸 3-([[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00250
DMF (15.00 mL) 중 tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (2.30 g, 8.387 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌린-1,3-디온 (2.86 g, 8.387 mmol, 1 당량) 및 Na2CO3 (1.33 g, 12.581 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 물로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-([[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (3.37 g,90.61%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 444.
단계 3: 4-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-7)의 제조
Figure pct00251
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 3-([[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (2.39 g, 5.389 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (10.00 mL, 134.630 mmol, 42.34 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 4-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-7, 1.712 g, 87.72%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 344.12.
표 A3의 하기 중간체를 중간체 I-7의 제조에 사용된 것과 유사한 경로에 의해 제조하였다.
표 A3.
Figure pct00252
5-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-8)의 제조
Figure pct00253
단계 1: tert-부틸 3-( [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00254
DMF (15.00 mL) 중 tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (2.50 g, 9.116 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-히드록시이소인돌린-1,3-디온 (3.11 g, 9.116 mmol, 1 당량) 및 Na2CO3 (1.45 g, 13.675 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각되도록 하고, 물로 켄칭한 다음, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. tert-부틸 3-([[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (2.15g, 53.18%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 444.
단계 2: 5-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-8)의 제조
Figure pct00255
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 3-([[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]메틸)아제티딘-1-카르복실레이트 (1.41 g, 3.180 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (10.00 mL, 134.630 mmol, 42.34 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 5-(아제티딘-3-일메톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-8, 906.2 mg, 81.38%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 344.12.
4-((3-((4-아미노부틸)술포닐)프로필)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 FA (I-9)의 제조
Figure pct00256
단계 1: tert-부틸 N-(4-히드록시부틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00257
THF (160.00 mL) 중 디-tert-부틸 데카르보네이트 (52.89 g, 242.321 mmol, 1.5 당량) 및 4-아미노부탄-1-올 (14.40 g, 161.547 mmol, 1.00 당량)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 농축 건조시키고, 유성 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (40-60% EtOAc-헥산으로 용리함)에 의해 정제하여 tert-부틸 N-(4-히드록시부틸)카르바메이트를 무색 오일로서 수득하였으며, 이는 정치 시 백색 고체로 응고되었다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 190.
단계 2: 4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸 4-메틸벤젠술포네이트의 제조
Figure pct00258
DCM (400.00 mL) 중 tert-부틸 N-(4-히드록시부틸)카르바메이트 (30.58 g, 161.581 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 0℃에서 DMAP (2.96 g, 24.237 mmol, 0.15 당량), TEA (40.88 g, 403.952 mmol, 2.5 당량) 및 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (46.21 g, 242.371 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/THF (1:1)로 용리시키면서 정제하여 4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸 4-메틸벤젠술포네이트 (45.6g, 82.17%)를 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 344.
단계 3: S-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸) 에탄티오에이트의 제조
Figure pct00259
ACN (300.00 mL) 중 4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸 4-메틸벤젠술포네이트 (45.60 g, 132.774 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 에탄티오 S-산 (15.16 g, 199.161 mmol, 1.5 당량), 및 K2CO3 (55.05 g, 398.323 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/THF (1:1)로 용리시키면서 정제하여 S-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸) 에탄티오에이트 (28.7g, 87.39%)를 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 248.
단계 4: 벤질 N-[3-( [4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부틸]술파닐)프로필]카르바메이트의 제조
Figure pct00260
MeOH (90.00 mL, 2222.902 mmol, 152.73 당량) 중 S-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)부틸) 에탄티오에이트 (3.60 g, 14.554 mmol, 1.00 당량)의 용액에 벤질 (3-브로모프로필)카르바메이트 (4.36 g, 16.010 mmol, 1.1 당량) 및 NaOMe (3.15 g, 58.217 mmol, 4 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 물로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 NH4HCO3 중 0-100% ACN으로 용리시키면서 정제하여 벤질 N-[3-([4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부틸]술파닐)프로필]카르바메이트 (4.122g, 71.42%)를 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 397.
단계 5: 벤질 N-(3-[4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부탄술포닐]프로필)카르바메이트의 제조
Figure pct00261
MeOH (60.00 mL) 중 벤질 N-[3-([4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부틸]술파닐)프로필]카르바메이트 (4.13 g, 10.415 mmol, 1.00 당량)의 용액에 옥손 ® (3.50 g, 20.840 mmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 30분에 걸쳐 물 중 NH4HCO3 중 0-100% ACN으로 용리시키면서 정제하여 벤질 N-(3-[4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부탄술포닐]프로필)카르바메이트 (2 g, 44.81%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 429.
단계 6: tert-부틸 (4-((3-아미노프로필)술포닐)부틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00262
EtOH (30.00 mL) 중 벤질 N-(3-[4-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]부탄술포닐]프로필)카르바메이트 (1.95 g, 4.550 mmol, 1.00 당량)의 용액에 포름산암모늄 (573.85 mg, 9.101 mmol, 2 당량) 및 5% Pd(OH)2/C (977.68 mg, 6.962 mmol, 1.53 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 수소 1 기압 하에 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH (3 x 30 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (4-((3-아미노프로필)술포닐)부틸)카르바메이트 (1.12g, 조 물질)를 흑색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 295.
단계 7: tert-부틸 (4-((3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)프로필)술포닐)부틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00263
NMP (30.00 mL) 중 tert-부틸 (4-((3-아미노프로필)술포닐)부틸)카르바메이트 (1.12 g, 3.804 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌-1,3-디온 (1.05 g, 3.804 mmol, 1 당량) 및 DIEA (1.48 g, 11.413 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 건조 질소의 분위기 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (4-((3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)프로필)술포닐)부틸)카르바메이트 (970 mg, 46.31%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 551.
단계 8: 4-((3-((4-아미노부틸)술포닐)프로필)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 FA (I-9)의 제조
Figure pct00264
tert-부틸 (4-((3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)프로필)술포닐)부틸)카르바메이트 (970.00 mg, 1.762 mmol, 1.00 당량)의 용액에 디옥산 중 4N 건조 HCl (5.00 mL, 164.559 mmol, 93.41 당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 0-100% ACN으로 45분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 4-((3-((4-아미노부틸)술포닐)프로필)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 FA (I-9, 712 mg, 89.17%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 451.16.
4-[[2-(2-아미노에탄술포닐)에틸]아미노]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-10)의 제조
Figure pct00265
단계 1: tert-부틸 N-(2-[[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에틸]술파닐]에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00266
ACN (10.00 mL) 중 tert-부틸 N-(2-술파닐에틸)카르바메이트 (5.00 g, 28.207 mmol, 1.00 당량) 및 N-(2-브로모에틸)프탈이미드 (7.17 g, 0.028 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 70℃에서 K2CO3 (11.70 g, 0.085 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 5시간 후, 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 300 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (5:1에서 1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-(2-[[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에틸]술파닐]에틸)카르바메이트 (8.20 g, 82.96%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 351.
단계 2: tert-부틸 N-[2-[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에탄술포닐]에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00267
DCM (100 mL) 중 tert-부틸 N-(2-[[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에틸]술파닐]에틸)카르바메이트 (8.20 g, 23.400 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 m-CPBA (12.11 g, 70.199 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 이어서 반응물을 실온에서 포화 수성 Na2S2O3 (100 mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물에 포화 수성 NaHCO3 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc (3 x 400 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (5:1에서 1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-[2-[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에탄술포닐]에틸]카르바메이트 (8.40 g, 87.30%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 383.
단계 3: tert-부틸 N-[2-(2-아미노에탄술포닐)에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00268
EtOH (100 mL) 중 tert-부틸 N-[2-[2-(1,3-디옥소이소인돌-2-일)에탄술포닐]에틸]카르바메이트 (3.40 g, 8.891 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 히드라진 수화물 (0.89 g, 17.781 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOH (100 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 N-[2-(2-아미노에탄술포닐)에틸]카르바메이트 (1.88 g, 77.94%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 253.
단계 4: tert-부틸 (2-((2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에틸)술포닐)에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00269
NMP (25.00 mL) 중 tert-부틸 N-[2-(2-아미노에탄술포닐)에틸]카르바메이트 (1.88 g, 7.451 mmol, 1.00 당량) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌-1,3-디온 (2.26 g, 8.196 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 DIEA (2.89 g, 22.352 mmol, 3.00 당량)를 90℃에서 적가하고, 용액을 12시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (2-((2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에틸)술포닐)에틸)카르바메이트 (1.58 g, 40.03%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 509.
단계 5: 4-[[2-(2-아미노에탄술포닐)에틸]아미노]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-10)의 제조
Figure pct00270
DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (2-((2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에틸)술포닐)에틸)카르바메이트 (1.54 g, 3.028 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 25℃에서 TFA (5.0 mL)를 적가하였다. 1시간 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 중간체 I-10 (1.68 g, 122.25%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 409.11.
3-[5-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-11)의 제조
Figure pct00271
단계 1: tert-부틸 (2-(2-(2-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00272
MeOH (30.00 mL) 중 4-히드록시-2,2-디메틸-3,8,11-트리옥사-5-아자트리데칸-13-알 (1.25 g, 4.995 mmol, 1 당량) 및 3-(5-아미노-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일)피페리딘-2,6-디온 (1.43 g, 4.995 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 NaBH3CN (0.63 g, 9.990 mmol, 2 당량)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 포화 수성 NH4Cl로 켄칭하고, 용매를 증발시키고, 생성된 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (9:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (2-(2-(2-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1.29g, 49.70%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 518.
단계 2: 3-[5-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-11)의 제조
Figure pct00273
DCM (6.00 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-(2-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1.29 g, 2.483 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (8.49 g, 74.481 mmol, 30 당량)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 생성된 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건 (칼럼: C18 실리카 겔; 이동상: 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm)을 사용하여 정제하여 3-[5-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-11, 1.56g, 95.13%)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 418.20.
3-[4-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-1-옥소-3H-이소인돌-2-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-12)의 제조
Figure pct00274
단계 1: tert-부틸 (2-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00275
MeOH (20.00 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-(2-옥소에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1.33 g, 0.005 mmol, 1.00 당량) 및 레날리도미드 (1.38 g, 5.323 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 NaBH3CN (0.67 g, 0.011 mmol, 2.00 당량)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이어서 반응물을 0℃에서 포화 수성 NH4Cl로 켄칭하고, 용매를 증발시키고, 생성된 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (9:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (2-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (0.92g,34.12%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 491.
단계 2: 3-[4-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-1-옥소-3H-이소인돌-2-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-12)의 제조
Figure pct00276
DCM (5.00 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1.20 g, 2.436 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (5.56 g, 48.724 mmol, 20.00 당량)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 생성된 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 10분에 걸쳐 물 중 10-50% ACN으로 용리시키면서 정제하고, UV 254 nm에서 검출하여 3-[4-([2-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]에틸]아미노)-1-옥소-3H-이소인돌-2-일]피페리딘-2,6-디온 TFA (I-12, 979mg, 93.87%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 391.19.
3-(5-((6-아미노헥실)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 트리플루오로아세테이트 (I-13)의 제조
Figure pct00277
단계 1: tert-부틸 N-(6-옥소헥실)카르바메이트의 제조
Figure pct00278
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 (6-히드록시헥실)카르바메이트 (800.00 mg, 3.681 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 PCC (1190.31 mg, 5.522 mmol, 1.50 당량) 및 산화알루미늄 (75.07 mg, 0.736 mmol, 0.20 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM / MeOH (10:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-(6-옥소헥실)카르바메이트 (500 mg, 63.09%)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: tert-부틸 (6-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)헥실)카르바메이트의 제조
Figure pct00279
MeOH (5.00 mL) 중 tert-부틸 N-(6-옥소헥실)카르바메이트 (380.00 mg, 1.765 mmol, 1.00 당량) 및 3-(5-아미노-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 (252.66 mg, 0.883 mmol, 0.50 당량)의 교반 용액에 NaBH3CN (221.84 mg, 3.530 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 정제용 TLC (DCM / MeOH, 20:1로 용리시킴)에 의해 정제하여 tert-부틸 (6-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)헥실)카르바메이트 (200 mg, 23.34%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 486.
단계 3: 3-(5-((6-아미노헥실)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 TFA (I-13)의 제조
Figure pct00280
DCM (1.00 mL) 중 tert-부틸 (6-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)헥실)카르바메이트 (100 mg)의 교반 용액에 TFA (0.50 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켜 3-(5-((6-아미노헥실)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 트리플루오로아세테이트 (80 mg, 83.98%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 386.21.
3-(5-((8-아미노옥틸)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 TFA (I-14)의 제조
Figure pct00281
단계 1: tert-부틸 (8-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)옥틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00282
MeOH 중 3-(5-아미노-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 (500.00 mg, 1.746 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 (8-옥소옥틸)카르바메이트 (850.00 mg, 3.493 mmol, 2.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 AcOH (350.00 mg, 5.828 mmol, 3.34 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, NaBH3CN (9.22 mg, 0.147 mmol, 2.00 당량)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 30분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (8-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (420 mg, 46.82%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 514.
단계 2: 3-(5-((8-아미노옥틸)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 TFA (I-14)의 제조
Figure pct00283
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 (8-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (1.54 g, 2.998 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (10.00 mL, 134.630 mmol, 44.90 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 물 중 0-100% ACN으로 35분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 3-(5-((8-아미노옥틸)아미노)-2-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 TFA (I-14, 1.4 g, 112.92%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 414.24.
3-(4-((8-아미노옥틸)아미노)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (I-15)의 제조
Figure pct00284
단계 1: tert-부틸 (8-옥소옥틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00285
MeOH (15.0 mL) 중 tert-부틸 (8-히드록시옥틸)카르바메이트 (1.00 g, 4.076 mmol, 1.00 당량) 및 PCC (878.51 mg, 4.076 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 Al2O3 (2.49 g, 24.454 mmol, 6.00 당량)을 실온에서 조금씩 첨가하고, 현탁액을 건조 질소의 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집하고, DCM (10 x 10 mL)으로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시키고, 혼합물을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 243.34.
단계 2: tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00286
MeOH (15.0 mL) 중 tert-부틸 (8-옥소옥틸)카르바메이트 (403.00 mg, 1.656 mmol, 1.00 당량) 및 3-(4-아미노-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (429.36 mg, 1.656 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 NaBH3CN (312.21 mg, 4.968 mmol, 3.00 당량) 및 AcOH (0.01 mL, 0.158 mmol, 0.10 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 12시간 동안 교반한 다음, 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH (10 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 정제용 TLC (DCM/ MeOH 40:1)에 의해 정제하여 tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (153 mg, 18.61%)를 암녹색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 486.61.
단계 3: 3-(4-((8-아미노옥틸)아미노)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (I-15)의 제조
Figure pct00287
DCM (4.00 mL) 중 tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (153.00 mg, 0.314 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 TFA (1.00 mL)를 첨가하고, 용액을 건조 질소의 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 정제용 TLC (DCM/ MeOH 40:1)에 의해 정제하여 3-(4-((8-아미노옥틸)아미노)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (I-15, 110 mg, 88.71%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 386.5.
4-((8-아미노옥틸)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-16)의 제조
Figure pct00288
단계 1: tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00289
NMP (16 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌린-1,3-디온 (1.00 g, 3.620 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 (8-아미노옥틸)카르바메이트 (973.19 mg, 3.982 mmol, 1.10 당량)의 교반 용액에 실온에서 DIEA (935.79 mg, 7.241 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물 (10 mL)로 켄칭하였다. 수성 층을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (1.19 g, 65.66%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 501.
단계 2: 4-((8-아미노옥틸)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-16)의 제조
Figure pct00290
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 (8-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)옥틸)카르바메이트 (300 mg, 0.599 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (2.00 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬에 의해 정제하여 4-((8-아미노옥틸)아미노)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 TFA (I-16, 130 mg, 54.17%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 401.15.
4-(2-([4,4'-비피페리딘]-1-일)-2-옥소에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (I-17)의 제조
Figure pct00291
단계 1: tert-부틸 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세테이트의 제조
Figure pct00292
ACN (300 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌린-1,3-디온 (10 g, 36.5 mmol, 1.0 당량) 및 K2CO3 (7.56 g, 54.7 mmol, 1.5 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 tert-부틸-2-브로모아세테이트 (7.82 g, 40.1 mmol, 1.1 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세테이트 (5.32 g, 37.56%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =389.
단계 2: 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세트산의 제조
Figure pct00293
DCM (20 mL) 중 tert-부틸 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세테이트 (5.32 g, 13.69 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 TFA (4.0 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 조 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세트산 (4.66 g, 정량적)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 333.
단계 3: tert-부틸 1'-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세틸)-[4,4'-비피페리딘]-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00294
DMF (10 mL) 중 2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세트산 (1.10 g, 3.311 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (8.54 g, 6.622 mmol, 2.00 당량) 및 HATU (1.637 g, 4.30 mmol, 1.30 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, tert-부틸[4,4-비피페리딘]-1-카르복실레이트 (0.89 g, 3.311 mmol, 1.0 당량)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 다음, 물 (20 mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 1'-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세틸)-[4,4'-비피페리딘]-1-카르복실레이트 (1.36 g, 70.51%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 583.
단계 4: 4-(2-([4,4'-비피페리딘]-1-일)-2-옥소에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (I-17)의 제조
Figure pct00295
DCM (40 mL) 중 tert-부틸 1'-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세틸)-[4,4'-비피페리딘]-1-카르복실레이트 (1.36 g, 2.334 mmol, 1.0 당량)의 교반 혼합물에 TFA (10 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 4-(2-([4,4'-비피페리딘]-1-일)-2-옥소에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (I-17, 780 mg, 69.25%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 483.
표 A4의 하기 중간체를 I-17의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A4.
Figure pct00296
(2S,4R)-1-((S)-2-(4-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)부탄아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-19)의 제조
Figure pct00297
단계 1: 메틸 (2E)-4-(2-[2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에톡시]에톡시)부트-2-에노에이트의 제조
Figure pct00298
40 mL 밀봉된 튜브에 실온에서 tert-부틸 N-[2-(2-히드록시에톡시)에틸]카르바메이트 (1.00 g, 4.872 mmol, 1.00 당량), 메틸 (2E)-4-브로모부트-2-에노에이트 (8.77 g, 48.991 mmol, 10.06 당량) 및 Ag2O (3.22 g, 13.895 mmol, 2.85 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 2일 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (2 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 메틸 (2E)-4-(2-[2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에톡시]에톡시)부트-2-에노에이트 (380 mg, 25.71%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 304.
단계 2: 메틸 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-오에이트의 제조
Figure pct00299
MeOH (10.00 mL) 중 메틸 (2E)-4-(2-[2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에톡시]에톡시)부트-2-에노에이트 (380.00 mg, 1.253 mmol, 1.00 당량)의 용액에 질소 분위기 하에 50 mL, 3구 둥근 바닥 플라스크에서 10% Pd/C (66.65 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 1 기압의 수소 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트® 패드를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 메틸 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-오에이트 (300 mg, 78.43%)를 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3: 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-산의 제조
Figure pct00300
MeOH (2.00 mL) 중 제공된 메틸 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-오에이트 (280.00 mg, 0.917 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 물 (2.00 mL) 중 LiOH (87.83 mg, 3.668 mmol, 4.00 당량)의 용액을 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 이어서 수성 층을 HCl을 사용하여 pH 6으로 산성화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 이들 합한 유기 층을 물 (30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 시, 여과물을 감압 하에 농축시켜 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-오산 (100 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.06 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.54 - 3.34 (m, 8H), 3.06 (qd, J = 6.0, 3.3 Hz, 2H), 2.25 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.79 - 1.63 (m, 2H), 1.38 (d, J = 1.3 Hz, 9H).
단계 4: tert-부틸 N-[2-[2-(3-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]프로폭시)에톡시]에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00301
DMF (10.00 mL) 중 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자펜타데칸-15-산 (400.00 mg, 1.373 mmol, 1.00 당량) 및 HATU (626.44 mg, 1.648 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (212.93 mg, 1.648 mmol, 1.20 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 실온에서 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (472.92 mg, 1.098 mmol, 0.8 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, EtOAc (20 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배하였다. 유기 상을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM/MeOH (20:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-[2-[2-(3-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]프로폭시)에톡시]에틸]카르바메이트 (300 mg, 31.04%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 704.
단계 5: (2S,4R)-1-((S)-2-(4-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)부탄아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-19)의 제조
Figure pct00302
8 mL 바이알에 실온에서 tert-부틸 N-[2-[2-(3-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]프로폭시)에톡시]에틸]카르바메이트 (300.00 mg, 0.426 mmol, 1.00 당량) 및 디옥산 중 4 M HCl (3.00 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 하에 농축시켜 (2S,4R)-1-((S)-2-(4-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)부탄아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-19, 300 mg)를 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 604.
4-(아미노메틸)-N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)벤젠술폰아미드 (I-20) 및 2-아미노-N-([4-[(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일]페닐]메틸)아세트아미드 (I-21)의 제조
Figure pct00303
단계 1: 3-클로로-7-니트로-1H-인돌의 제조
Figure pct00304
THF (100.00 mL) 및 0.1 N HCl (1.6 mL) 중 7-니트로인돌 (20.00 g, 123.344 mmol, 1.00 당량)의 혼합물에 NCS (16.47 g, 123.344 mmol, 1 당량)를 한 번에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 물 (30 mL)을 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고; 물, MeOH/물 (1:1) 및 이소프로필 에테르로 연속적으로 세척하고, 건조시켜 3-클로로-7-니트로-1H-인돌 (24.4g)을 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 198.
단계 2: 3-클로로-1H-인돌-7-아민의 제조
Figure pct00305
IPA (350.00 mL) 중 3-클로로-7-니트로-1H-인돌 (24.40 g, 124.116 mmol, 1.00 당량) 및 철 분말 (27.73 g, 496.465 mmol, 4 당량)의 현탁액에 NH4Cl (53.11 g, 992.929 mmol, 8 당량) 및 물 (350.00 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOH (3 x 500 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (500 mL)로 희석한 다음, 포화 수성 NaHCO3을 사용하여 pH 8로 염기성화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 500 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 3-클로로-1H-인돌-7-아민 (16g, 77.37%)을 흑색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 167.
단계 3: N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)-4-포르밀벤젠술폰아미드의 제조
Figure pct00306
EtOAc (20.00 mL) 중 3-클로로-1H-인돌-7-아민 (1.55 g, 9.303 mmol, 1.00 당량)에, 4-포르밀벤젠술포닐 클로라이드 (2.09 g, 10.233 mmol, 1.1 당량) 및 피리딘 (1.47 g, 18.606 mmol, 2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, EtOAc로 희석하고, 1 N HCl, 물, NaHCO3의 포화 수용액, 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 EtOAc 10%에서 60%의 구배를 사용하여 정제하여 N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)-4-포르밀벤젠술폰아미드 (1.90g, 61.01%)를 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 335.
단계 4: 4-(아미노메틸)-N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)벤젠술폰아미드 (I-20)의 제조
Figure pct00307
N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)-4-포르밀벤젠술폰아미드 (2.29 g, 6.841 mmol, 1.00 당량)를 EtOH 중 아세트산암모늄의 포화 용액 (137 mL, 하기와 같이 제조됨: EtOH 150 ml을 환류 하에 가열한 다음, 포화될 때까지 아세트산암모늄을 첨가하고, 이어서 30% 수성 수산화암모늄 (15.84 mL)을 첨가함) 중에 용해시켰다. 5시간 후, NaBH3CN (0.09 mmol, 3 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃로 15분 동안 가열하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 0.1% 포름산/물 중 0-100% 아세토니트릴로 10분에 걸쳐 용리시키면서 정제하여 4-(아미노메틸)-N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)벤젠술폰아미드 (I-20, 45mg, 40.05%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 336.10.
단계 5: tert-부틸 (2-((4-(N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일)벤질)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00308
DMF (3.00 mL) 중 4-(아미노메틸)-N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)벤젠술폰아미드 (280.0 mg, 0.834 mmol, 1.00 당량) 및 [(tert-부톡시카르보닐)아미노]아세트산 (175.28 mg, 1.001 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 HATU (412.15 mg, 1.084 mmol, 1.30 당량) 및 DIEA (323.29 mg, 2.501 mmol, 3.00 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (2-((4-(N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일)벤질)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (172 mg,40.17%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 493.
단계 6: 2-아미노-N-([4-[(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일]페닐]메틸)아세트아미드 (I-21)의 제조
Figure pct00309
DCM (4.00 mL) 중 tert-부틸 (2-((4-(N-(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일)벤질)아미노)-2-옥소에틸)카르바메이트 (162.00 mg, 0.329 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (1.00 mL, 13.463 mmol, 40.97 당량)의 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-아미노-N-([4-[(3-클로로-1H-인돌-7-일)술파모일]페닐]메틸)아세트아미드 (I-21, 112 mg, 83.28%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 393.
5-[(8-아미노옥틸)아미노]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 TFA (I-22)의 제조
Figure pct00310
단계 1: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-2,3-디히드로-1H-이소인돌-1,3-디온의 제조
Figure pct00311
AcOH (60 mL) 중 5-플루오로-1,3-디히드로-2-벤조푸란-1,3-디온 (5.6 g, 33.713 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 120℃에서 2,6-디옥소피페리딘-3-아미늄 클로라이드 (5.55 g, 33.713 mmol, 1.00 당량) 및 아세트산나트륨 (5.53 g, 67.426 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 14시간 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 대부분의 아세트산을 제거하였다. 잔류물을 물 (100 mL)에 붓고, 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여과된 케이크를 물로 세척하고, 건조시켰다. 표제 화합물 (8.03 g, 81.92%)을 분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 277.
단계 2: tert-부틸 N-(8-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-5-일]아미노]옥틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00312
NMP (50.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-2,3-디히드로-1H-이소인돌-1,3-디온 (5.00 g, 18.101 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 N-(8-아미노옥틸)카르바메이트 (6.64 g, 27.152 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 90℃에서 DIEA (7.02 g, 54.304 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 3시간 후, 혼합물에 물 (100 mL)을 첨가하고, 이어서 EtOAc (200 mL x 3)로 추출하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 0%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. 표제 화합물 (3.50 g, 36.69%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 501.
단계 3: 5-[(8-아미노옥틸)아미노]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 트리플루오로아세테이트 (I-22)의 제조
Figure pct00313
DCM (9.00 mL) 중 tert-부틸 N-(8-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-5-일]아미노]옥틸)카르바메이트 (3.85 g, 7.691 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 TFA (3.00 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬에 의해 정제하여 I-22 (2.22 g, 56.20%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.08 (s, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 1H), 7.72 - 7.67 (m, 2H), 7.55 (dd, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.88 - 6.77 (m, 1H), 5.08 - 4.98 (m, 1H), 3.21 - 3.05 (m, 1H), 2.95 - 2.75 (m, 2H), 2.66 - 2.51 (m, 2H), 2.12 - 1.94 (m, 1H), 1.63 - 1.49 (m, 3H), 1.45 - 1.31 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 401.21.
표 A5의 하기 중간체를 I-22의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A5.
Figure pct00314
4-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]부탄산 (I-29)의 제조
Figure pct00315
단계 1: tert-부틸 4-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]부타노에이트의 제조
Figure pct00316
DMF (10.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (2.00 g, 7.293 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 4-브로모부타노에이트 (1.95 g, 8.752 mmol, 1.2 당량)의 용액에 KI (0.12 g, 0.729 mmol, 0.1 당량) 및 KHCO3 (1.10 g, 10.940 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 C18 크로마토그래피 (물 중 0에서 32% ACN의 용리 구배)에 의해 정제하여 표제 생성물 (1.5 g, 49.39%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 417.
단계 2: 4-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]부탄산 (I-29)의 제조
Figure pct00317
DCM (5 mL) 중 tert-부틸 4-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]부타노에이트 (450 mg, 1.081 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 농축시켰다. I-29 (360 mg, 92.46%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 7.79 (t, J = 8.4, 7.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 5.12 (dd, J = 12.6, 5.5 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.95 - 2.66 (m, 3H), 2.60 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.25 - 2.18 (m, 3H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 361.10.
표 A6의 하기 중간체를 중간체 I-29의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A6.
Figure pct00318
3-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)프로판산 (I-34)의 제조
Figure pct00319
단계 1: tert-부틸 3-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)프로파노에이트의 제조
Figure pct00320
NMP (10.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로-2,3-디히드로-1H-이소인돌-1,3-디온 (1.00 g, 3.620 mmol, 1.00 당량)의 용액에 tert-부틸 3-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]프로파노에이트 (929.10 mg, 3.982 mmol, 1.10 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (30 mL)로 희석하였다. 유기 층을 물 (10 mL x 5)에 이어서 염수 (20 mL)로 세척하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (5:1에서 1:1까지)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 3-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)프로파노에이트 (1.14 g, 64.33%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 490.
단계 2: 3-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)프로판산 (I-34)의 제조
Figure pct00321
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 3-(2-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)에톡시)에톡시)프로파노에이트 (1.14 g, 2.329 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 TFA (0.52 mL, 4.551 mmol, 3.00 당량)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 구형 칼럼; 이동상, 물 중 ACN, 50분 내 0%에서 100% 구배; 70 mL/분 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 I-34 (896 mg, 70.28%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.15 (s, 1H), 11.09 (s, 1H), 7.63 - 7.55 (m, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.61 (t, 1H), 5.06 (dd, 1H), 3.65 - 3.44 (m, 8H), 2.87 (d, 1H), 2.59 (d, 2H), 2.43 (t, 2H), 2.04 (m, 1H);LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 434.15.
표 A7의 하기 중간체를 중간체 I-34의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A7.
Figure pct00322
Figure pct00323
4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부탄산 (K-19)의 제조
Figure pct00324
단계 1: tert-부틸 4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부타노에이트의 제조
Figure pct00325
8-mL 밀봉된 튜브에 3-(5-플루오로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일)피페리딘-2,6-디온 (100.00 mg, 0.362 mmol, 1.00 당량), NMP (1.50 mL), tert-부틸 4-아미노부타노에이트 (86.47 mg, 0.543 mmol, 1.5 당량), 및 DIEA (140.37 mg, 1.086 mmol, 3 당량)를 넣었다. 생성된 용액을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건을 사용하여 정제하였다: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeCN, 10분에 걸쳐 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm. tert-부틸 4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부타노에이트 100 mg (66.49%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =416.
단계 2: 4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부탄산 (K-19)의 제조
Figure pct00326
8-mL 밀봉된 튜브에 tert-부틸 4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부타노에이트 (90.00 mg, 0.217 mmol, 1.00 당량), DCM (5.00 mL), 및 TFA (0.50 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 4-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)부탄산 (70 mg, 정량적)을 담황색 조 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 360.
표 A8의 하기 중간체를 중간체 K-19의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A8.
Figure pct00327
5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜탄산 (K-22)의 제조
Figure pct00328
단계 1: 메틸 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜타노에이트의 제조
Figure pct00329
MeOH (2.00 mL) 중 3-(6-아미노-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일) 피페리딘-2,6-디온 (120.00 mg, 0.439 mmol, 1.00 당량) 및 메틸 5-옥소펜타노에이트 (57.15 mg, 0.439 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 AcOH (0.20 mL)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 NaBH3CN (82.79 mg, 1.317 mmol, 3.00 당량)을 1분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하였다. 수성 층을 CH2Cl2 (4x20 mL)로 추출하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켜 메틸 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜타노에이트를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =388.15.
단계 2: 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜탄산 (K-22)의 제조
Figure pct00330
25 mL 바이알에 실온에서 메틸 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜타노에이트 (120.00 mg, 0.310 mmol, 1.00 당량) 및 HCl (6 M, 5.00 mL, 0.027 mmol, 5.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-6-일)아미노)펜탄산을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =374.10.
2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실산 (I-42)의 제조
Figure pct00331
단계 1: tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세테이트의 제조
Figure pct00332
DMF (15.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-히드록시이소인돌-1,3-디온 (5.50 g, 20.056 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (3.91 g, 20.056 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 K2CO3 (8.32 g, 60.168 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물에 녹이고, EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세테이트 (3.2 g, 45.19%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 389.
단계 2: [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트산의 제조
Figure pct00333
디옥산 (15.00 mL, 493.678 mmol, 59.92 당량) 중 tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세테이트 (3.20 g, 8.239 mmol, 1.00 당량) 및 건조 HCl의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 표제 화합물 (1.12 g)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 289.
단계 3: 메틸 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00334
DMF (15.00 mL) 중 [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트산 (670.00 mg, 2.016 mmol, 1.00 당량) 및 메틸 2-(아미노메틸)시클로프로판-1-카르복실레이트 (260.44 mg, 2.016 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 HATU (1150.07 mg, 3.025 mmol, 1.50 당량) 및 DIEA (781.84 mg, 6.049 mmol, 3.00 당량)를 실온에서 2시간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. 메틸 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도) 메틸]시클로프로판-1-카르복실레이트 (778.6 mg, 78.37%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 444.
단계 4: 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실산 (I-42)의 제조
Figure pct00335
디옥산 (5.00 mL) 중 메틸 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도) 메틸]시클로프로판-1-카르복실레이트 (763.90 mg, 1.00 당량) 및 4 N 건조 HCl의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. I-42 (338.2 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.17 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 8.33 (t, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.39 (dd, 1H), 5.13 (dd, 1H), 4.74 (s, 2H), 2.96 - 2.83 (m, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.08 (s, 4H), 1.66 (td, 1H), 1.48 (h, 1H), 1.02 (td, 1H), 0.85 (dt, 1H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 430.05.
메틸 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실산 (I-43)의 제조
Figure pct00336
백색 고체로서의 I-43 (423 mg, 35.74%)을 I-42의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 12.16 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.82 (t, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.41 (d, 1H), 5.17 - 5.07 (m, 1H), 4.80 (s, 2H), 2.60 (d, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.70 - 1.60 (m, 1H), 1.47 (d, 1H), 1.03 (d, 1H), 0.84 (d, 1H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 430.12.
7-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]카르바모일]헵탄산 (I-44)의 제조
Figure pct00337
DCM (25.00 mL) 및 THF (25.00 mL) 중 옥탄디오산 (2.02 g, 11.596 mmol, 4.99 당량)의 교반 용액에 0℃에서 (2S,4R)-1-(2-아미노-3,3-디메틸-부타노일)-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (1.00 g, 2.323 mmol, 1.00 당량) 및 TEA (822.55 mg, 8.129 mmol, 3.50 당량) 및 HOAt (347.73 mg, 2.555 mmol, 1.10 당량) 및 EDCI (489.75 mg, 2.555 mmol, 1.10 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS에 의해 확인된 바와 같이 완결되었고, 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬에 의해 정제하여 I-44 (900 mg, 66.04%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 587.
3-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-옥소프로폭시)에톡시)프로판산 (I-45)의 제조
Figure pct00338
단계 1: 에틸 3-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-옥소프로폭시)에톡시)프로파노에이트의 제조
Figure pct00339
DCM (5 mL) 중 (2S,4R)-1-(2-아미노-3,3-디메틸-부타노일)-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (500 mg, 1.07 mmol, HCl), 3-[2-(3-에톡시-3-옥소-프로폭시)에톡시]프로판산 (250.79 mg, 1.07 mmol, 250.79 μL), 및 DIEA (691.84 mg, 5.35 mmol, 932.40 μL)의 용액에 EDCI (246.29 mg, 1.28 mmol) 및 HOBt (173.60 mg, 1.28 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 제공하였다. 잔류물을 역상 HPLC (ACN/ 물 중 0.1% 포름산)에 의해 정제하였다. 용액을 동결건조시켜 에틸 3-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-옥소프로폭시)에톡시)프로파노에이트 (500 mg, 70.00%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 647.6.
단계 2: 3-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-옥소프로폭시)에톡시)프로판산 (I-45)의 제조
Figure pct00340
EtOH (5 mL) 중 에틸 3-(2-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-옥소프로폭시)에톡시)프로파노에이트 (500 mg, 773.05 μm)의 용액에 물 (1 mL) 중 NaOH (77.30 mg, 1.93 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 물 (30 mL)로 희석하고, 1N HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하고, EtOAc (30 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 I-45 (470 mg, 95.02%)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+Na]+ = 641.2.
표 A9의 하기 중간체를 I-45의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A9.
Figure pct00341
Figure pct00342
Figure pct00343
(S)-13-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-카르보닐)-14,14-디메틸-11-옥소-3,6,9-트리옥사-12-아자펜타데칸-1-산 (I-57)의 제조
Figure pct00344
단계 1: 2-[2-[2-(2-벤질옥시-2-옥소-에톡시)에톡시]에톡시]아세트산의 제조
Figure pct00345
아세톤 (20 mL) 중 2-[2-[2-(카르복시메톡시)에톡시]에톡시]아세트산 (3 g, 13.50 mmol) 및 TEA (3.51 g, 34.71 mmol, 4.83 mL)의 혼합물에 브로모메틸벤젠 (2.42 g, 14.18 mmol, 1.68 mL)을 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. 농후한 침전물이 형성되었고, 이를 여과하고, 필터 케이크를 아세톤 (10 mL)으로 세척하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 물 (300 mL) 중에 용해시켰다. 혼합물을 EtOAc (50 mL x 3)에 의해 추출한 다음, 2 N HCl로 pH 3-5까지 처리하였다. 혼합물을 EtOAc (50 mL x 3)로 추출하고, 유기 층을 합하고, 염수 (50 mL)로 세척한 다음, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 2-[2-[2-(2-벤질옥시-2-옥소-에톡시)에톡시]에톡시]아세트산 (1.4 g, 33.20%)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.31 - 7.26 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.69 - 3.61 (m, 8H) ppm.
단계 2: (S)-벤질 13-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-카르보닐)-14,14-디메틸-11-옥소-3,6,9-트리옥사-12-아자펜타데칸-1-오에이트의 제조
Figure pct00346
DCM (10 mL) 중 2-[2-[2-(2-벤질옥시-2-옥소-에톡시)에톡시]에톡시]아세트산 (836.17 mg, 2.68 mmol)의 용액에 HATU (1.32 g, 3.48 mmol) 및 DIEA (900.50 mg, 6.97 mmol, 1.21 mL)를 첨가하였다. (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸-부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (1 g, 2.14 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 황색 고체를 수득하였으며, 이를 역상 플래쉬 (ACN/ 물 중 0.1% 포름산)에 의해 정제하여 (S)-벤질 13-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-카르보닐)-14,14-디메틸-11-옥소-3,6,9-트리옥사-12-아자펜타데칸-1-오에이트 (1.2 g, 1.66 mmol, 71.28%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 725.4. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 8.69 (s, 1H), 7.42 - 7.32 (m, 11H), 4.77 - 4.75 (m, 1H), 4.63 - 4.47 (m, 3H), 4.37 - 4.32 (m, 1H), 4.24 - 4.17 (m, 3H), 4.13 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.09 - 3.94 (m, 2H), 3.77 - 3.68 (m, 9H), 3.63 - 3.59 (m, 1H), 2.64 - 2.56 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.19 - 2.08 (m, 1H), 1.00 - 0.92 (m, 9H) ppm.
단계 3: (S)-13-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-카르보닐)-14,14-디메틸-11-옥소-3,6,9-트리옥사-12-아자펜타데칸-1-산 (I-57)의 제조
Figure pct00347
MeOH (20 mL) 중 (S)-벤질 13-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-카르보닐)-14,14-디메틸-11-옥소-3,6,9-트리옥사-12-아자펜타데칸-1-오에이트 (1.1 g, 1.52 mmol)의 혼합물에 10% Pd/C (500 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 15 psi의 수소 하에 교반하였다. 이어서 혼합물을 40℃에서 8시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여 Pd/C를 제거하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-57 (560 mg, 58.14%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 635.2. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ = 8.94 - 8.86 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 4H), 4.62 - 4.50 (m, 3H), 4.43 - 4.34 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.08 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 1H), 3.76 - 3.70 (m, 8H), 2.51 - 2.49 (m, 3H), 2.29 - 2.21 (m, 1H), 2.16 - 2.07 (m, 1H), 1.06 (s, 9H) ppm. 키랄 SFC: AD-3-MeOH+ACN (DEA)-40-3ML-35T.lcm, Rt= 0.419분, ee > 100%.
표 A10의 하기 중간체를 I-57의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A10
Figure pct00348
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌-1,3-디온; 포름산 (I-59) 및 5-[4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (I-60)의 제조
Figure pct00349
단계 1: tert-부틸 4-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페라진-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00350
DMF (35.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌-1,3-디온 (5.40 g, 19.549 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (3.64 g, 19.549 mmol, 1 당량)의 용액에 실온에서 DIEA (7.58 g, 58.648 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 물 (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. tert-부틸 4-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페라진-1-카르복실레이트 (7.32 g, 84.62%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 443.
단계 2: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌-1,3-디온 포름산 (I-59)의 제조
Figure pct00351
DCM 중 tert-부틸 4-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페라진-1-카르복실레이트 (900.00 mg, 2.034 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (5.00 mL, 67.315 mmol, 33.09 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물/ACN 중 0.1% 포름산, 45분에 걸쳐 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. I-59 (786.8mg, 99.41%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 343.
단계 3: 5-[4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (I-60)의 제조
Figure pct00352
DMF (20.00 mL) 중 I-59 (1.15 g, 3.359 mmol, 1.00 당량) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (0.66 g, 3.359 mmol, 1 당량)의 용액에 DIEA (1.30 g, 10.077 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건을 사용하여 정제하였다: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN 0.1% 포름산, 45분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm. I-60 (987mg, 64.08%)을 백색 고체로서 수득하였다; 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11.09 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.26 (dd, 1H), 5.08 (dd, 1H), 4.64 (t, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 2H), 3.57 - 3.38 (m, 6H), 3.33 (s, 1H), 2.98 - 2.80 (m, 1H), 2.66 - 2.59 (m, 4H), 2.56 (s, 2H), 2.48 (s, 1H), 2.09 - 1.96 (m, 1H), 1.13 (t, 6H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 459.30.
1-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]에틸)피페리딘-4-카르복실산 (I-61)의 제조
Figure pct00353
단계 1: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(프로프-2-엔-1-일옥시)이소인돌-1,3-디온의 제조
Figure pct00354
DMF (50.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-히드록시이소인돌-1,3-디온 (5.48 g, 19.983 mmol, 1.00 당량) 및 알릴 브로마이드 (3.63 g, 29.975 mmol, 1.5 당량)의 용액에 KI (331.72 mg, 1.998 mmol, 0.1 당량) 및 KHCO3 (3.00 g, 29.975 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 65℃에서 12시간 동안 교반한 다음, 물 (100mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 60 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 헥산/ EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(프로프-2-엔-1-일옥시)이소인돌-1,3-디온 (6.7 g, 조 물질)을 황색-녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 315.
단계 2: 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트알데히드의 제조
Figure pct00355
디옥산 (30.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(프로프-2-엔-1-일옥시)이소인돌-1,3-디온 (3.14 g, 9.991 mmol, 1.00 당량)의 용액에 NaIO4 (10.68 g, 49.953 mmol, 5.00 당량), 물 (3.00 mL), 및 2,6-루티딘 (3.21 g, 29.972 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물에 실온에서 K2OsO4 2수화물 (0.37 g, 0.999 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 물로 켄칭하고, 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트알데히드 (1.83 g, 57.92%)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 317.
단계 3: tert-부틸 1-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]에틸)피페리딘-4-카르복실레이트의 제조
Figure pct00356
DMF (35.00 mL) 중 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트알데히드 (1.83 g, 5.786 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 피페리딘-4-카르복실레이트 (1.07 g, 5.786 mmol, 1.00 당량)의 용액에 NaBH(OAc)3 (3.68 g, 17.359 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, ACN/ 물 중 0.1% 포름산, 45분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. tert-부틸 1-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]에틸)피페리딘-4-카르복실레이트 (1.16g,41.29%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 401.
단계 4: 1-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]에틸)피페리딘-4-카르복실산 (I-61)의 제조
Figure pct00357
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 1-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]에틸)피페리딘-4-카르복실레이트 (1.16 g, 2.389 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (10.00 mL, 134.630 mmol, 34.18 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, CAN/물 중 0.1% 포름산, 45분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. I-61 (845mg, 73.42%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11.11 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.37 (dd, 1H), 5.12 (dd, 1H), 4.31 (t, 2H), 3.02 - 2.85 (m, 3H), 2.79 (t, 2H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.59 - 2.54 (m, 1H), 2.29 - 2.12 (m, 3H), 2.15 - 1.99 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 2H), 1.66 - 1.47 (m, 2H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 430.15.
4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (K-32)의 제조
Figure pct00358
단계 1: tert-부틸 N-[3-[(4-메틸벤젠술포닐)옥시]프로필]카르바메이트의 제조
Figure pct00359
DCM (40.00 mL) 중 tert-부틸 N-(3-히드록시프로필)카르바메이트 (1.00 g, 5.707 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TsCl (1.32 g, 6.924 mmol, 1.21 당량) 및 TEA (2.00 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 수성 NaHCO3을 사용하여 pH 8로 중화시켰다. 유기 층을 단리시키고, 염수 (20 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (5:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-[3-[(4-메틸벤젠술포닐)옥시]프로필]카르바메이트 (750 mg, 39.90%)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 330.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]프로필)카르바메이트의 제조.
Figure pct00360
DMF (2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(4-메틸벤젠술포닐)옥시]프로필]카르바메이트 (225 mg), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (300 mg, 1.00 당량) 및 Na2CO3(200 mg)의 현탁액을 제조하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, H2O (2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용-TLC (PE/EtOAc 1:1로 용리)에 의해 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]프로필)카르바메이트 (70 mg, 14.83%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 432.
단계 3: 4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (K-32)의 제조
Figure pct00361
DCM (5.00 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]프로필)카르바메이트 (70.00 mg, 0.162 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (1.00 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물 4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (70 mg)을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 332.
표 A11의 하기 중간체를 K-32의 제조에 기재된 것과 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A11
Figure pct00362
4-(2-아미노에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (K-35)의 제조.
Figure pct00363
단계 1: tert-부틸 N-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)카르바메이트의 제조.
Figure pct00364
DMF (5.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (500.00 mg, 1.823 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2,2-디옥시드 (407.03 mg, 1.823 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 질소 분위기 하에 실온에서 DIEA (471.29 mg, 3.647 mmol, 2.00 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (10 mL)로 희석한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 N-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)카르바메이트 (400 mg, 52.56%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =418.
단계 2: 4-(2-아미노에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (K-35)의 제조.
Figure pct00365
DCM (4.00 mL) 중 tert-부틸 N-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)카르바메이트 (150.00 mg, 0.359 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 실온에서 TFA (0.8 mL)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 중간체 3 (100 mg)을 무색 오일로서 수득하였다. 조 생성물 4-(2-아미노에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =318.
3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알 (K-36)의 제조
Figure pct00366
단계 1: 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올의 제조.
Figure pct00367
DCM (2.00 mL) 중 tert-부틸 3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-카르복실레이트 (120.00 mg, 0.557 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (0.50 mL, 6.732 mmol, 12.08 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올 (70 mg, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =116.
단계 2: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온의 제조.
Figure pct00368
NMP (1 mL) 중 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올 (70 mg, 1.337 mmol, 1.00 당량) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌-1,3-디온 (155.12 mg, 0.562 mmol, 1.00 당량)의 용액에 DIEA (1 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 염수 (2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 정제용- TLC (PE/EtOAc, 1:1로 용리함)에 의해 정제하여 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온 (100 mg, 47.95%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 372.
단계 3: 3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알 (중간체 K-36)의 제조.
Figure pct00369
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온 (100.00 mg, 0.269 mmol, 1.00 당량) 및 데스-마르틴 퍼아이오디난 (114.20 mg, 0.269 mmol, 1.00 당량)을 DCM (4.00 mL) 중에 현탁시켰다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 정제용-TLC (1:1 PE/EtOAc로 용리함)에 의해 정제하여 3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알 (60 mg, 60.33%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =370.
표 A12의 하기 중간체를 K-36의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A12
Figure pct00370
5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄알 (K-39)의 제조
Figure pct00371
단계 1: 4-(4-(1,3-디옥솔란-2-일)부톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
Figure pct00372
DMF (5.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (500.00 mg, 1.823 mmol, 1.00 당량), 2-(4-브로모부틸)-1,3-디옥솔란 (457.46 mg, 2.188 mmol, 1.20 당량), KI (60.53 mg, 0.365 mmol, 0.20 당량) 및 NaHCO3 (306.33 mg, 3.646 mmol, 2.00 당량)의 용액을 질소 분위기 하에 70℃에서 24시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석한 다음, 포화 NaCl (3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM/MeOH= 100/1로 용리시키면서 정제하여 4-(4-(1,3-디옥솔란-2-일)부톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (600 mg, 81.78%)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 403.
단계 2: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄알 (K-39)의 제조.
Figure pct00373
HCl (4.00 mL)/THF (4.00 mL) 중 4-(4-(1,3-디옥솔란-2-일)부톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (170.00 mg, 0.422 mmol, 1.00 당량)의 용액을 10시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 염수 (20 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄알 (140 mg, 92.48%)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 359.
2-(4-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)피페라진-1-일)아세트산 (I-62)의 제조
Figure pct00374
단계 1: 에틸 2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]아세테이트의 제조
Figure pct00375
DMF (3.00 mL) 중 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (420.00 mg, 2.015 mmol, 1.00 당량) 및 에틸 2-(피페라진-1-일)아세테이트 (381.74 mg, 2.216 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 120℃에서 12시간에 걸쳐 DIEA (1.30 g, 10.059 mmol, 4.99 당량)를 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 에틸 2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]아세테이트 (340 mg, 50.66%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 299.76.
단계 2: 에틸 2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]아세테이트의 제조
Figure pct00376
디옥산:물 (5 mL, 4:1) 중 에틸 2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]아세테이트 (340.00 mg, 1.134 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (234.67 mg, 1.701 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 건조 질소의 분위기 하에 100℃에서 2시간에 걸쳐 탄산칼륨 (391.90 mg, 2.836 mmol, 2.50 당량) 및 XPhos Pd G3 (192.02 mg, 0.227 mmol, 0.20 당량)을 조금씩 첨가하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 에틸 2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]아세테이트 (253 mg,58.04%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 357.41.
단계 3: 2-(4-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)피페라진-1-일)아세트산 (I-62)의 제조
Figure pct00377
에틸 2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]아세테이트 (250.00 mg, 0.699 mmol, 1.00 당량)의 용액에 1:1 THF/물 (10 mL) 중 LiOH (348.92 mg, 14.570 mmol, 20.83 당량)의 용액을 실온에서 2시간에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-(4-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)피페라진-1-일)아세트산 (I-62, 192 mg, 76.67%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 329.36.
N-[2-[(2-아미노에틸)(메틸)아미노]에틸]-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]아세트아미드 히드로클로라이드 (I-63)의 제조
Figure pct00378
단계 1: tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세테이트의 제조
Figure pct00379
DMF (65.0 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (5.50 g, 20.056 mmol, 1.00 당량)의 용액에 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (3.91 g, 20.056 mmol, 1 당량) 및 K2CO3 (8.32 g, 60.168 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세테이트 (5.2g, 66.76%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 389.
단계 2: [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트산의 제조
Figure pct00380
디옥산 중 4 N HCl (50.0 mL, 1645.594 mmol, 120.13 당량) 중 tert-부틸 2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세테이트 (5.32 g, 13.698 mmol, 1.00 당량)의 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 35분에 걸쳐 물 중 0-100% ACN으로 용리시키면서 정제하고, UV 254 nm에서 검출하였다. [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트산 (4.66 g, 100%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 333.
단계 3: tert-부틸 N-(2-[[2-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미도)에틸](메틸)아미노]에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00381
DCM (35.00 mL) 중 [[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트산 (926.00 mg, 2.787 mmol, 1.00 당량)의 용액에 tert-부틸 N-[2-[(2-아미노에틸)(메틸)아미노]에틸]카르바메이트 (908.45 mg, 4.180 mmol, 1.5 당량), HATU (1.59 g, 4.180 mmol, 1.5 당량) 및 DIEA (1.08 g, 8.361 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc (1:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-(2-[[2-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미도)에틸](메틸)아미노]에틸)카르바메이트 (1.527g, 조 물질)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 532.
단계 4: N-[2-[(2-아미노에틸)(메틸)아미노]에틸]-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]아세트아미드 히드로클로라이드 (I-63)의 제조
Figure pct00382
디옥산 (20.00 mL) 중 tert-부틸 N-(2-[[2-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미도)에틸](메틸)아미노]에틸)카르바메이트 (600.00 mg, 1.129 mmol, 1.00 당량)의 용액을 4M HCl (123.47 mg, 3.386 mmol, 3.00 당량) 중에서 제조하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 실리카 겔 칼럼)에 의해 10분에 걸쳐 물 중 10-50% ACN으로 용리시키면서 정제하고, UV 254 nm에서 검출하여 N-[2-[(2-아미노에틸)(메틸)아미노]에틸]-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]아세트아미드 (I-63, 200 mg, 41.07%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 432.18.
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[2-(피페라진-1-일)에톡시]이소인돌-1,3-디온 (K-40)의 제조
Figure pct00383
단계 1: tert-부틸 4-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)피페라진-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00384
DMF (5.0 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (300.00 mg, 1.094 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 4-(2-클로로에틸)피페라진-1-카르복실레이트 (299.34 mg, 1.203 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 KHCO3 (219.04 mg, 2.188 mmol, 2.00 당량) 및 KI (18.16 mg, 0.109 mmol, 0.10 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 다음, 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)피페라진-1-카르복실레이트 (200 mg, 35.70%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 487.
단계 2: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[2-(피페라진-1-일)에톡시]이소인돌-1,3-디온 (K-40)의 제조.
Figure pct00385
DCM (3.0 mL) 중 tert-부틸 4-(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]에틸)피페라진-1-카르복실레이트 (200.00 mg, 0.413 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (1.0 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[2-(피페라진-1-일)에톡시]이소인돌-1,3-디온 (301 mg)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 387.
5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (K-41) 및 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (K-42)의 제조
Figure pct00386
단계 1: tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트의 제조
Figure pct00387
DMF (15.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-히드록시이소인돌-1,3-디온 (1.00 g, 3.647 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트 (0.95 g, 4.011 mmol, 1.10 당량)의 용액에 KI (0.06 g, 0.365 mmol, 0.10 당량) 및 KHCO3 (0.73 g, 7.293 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, EtOAc (100 mL x 3)로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE 중 EtOAc 0%에서 30%로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (910.0 mg, 52.1%)를 담청색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 431.
단계 2: tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-히드록시-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 및 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-히드록시-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트의 제조
Figure pct00388
AcOH (30 mL) 중 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (910.0 mg, 2.114 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 Zn (2.76 g, 42.281 mmol, 20.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 표제 화합물의 혼합물 (1.10 g, 조 물질)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =433.
단계 3: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 및 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산의 제조
Figure pct00389
TFA (30 mL) 중 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-히드록시-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 및 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-히드록시-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (1.10g 조 물질)의 교반 용액에 Et3SiH (6 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 상 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (820.0 mg, 89.5%)을 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 221.10.
단계 4: 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 및 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트의 제조.
Figure pct00390
MeOH (30 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 및 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (820.0 mg, 2.277 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 TMSCHN2 (6 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건: 칼럼: 엑스셀렉트 CSH F-페닐 OBD 칼럼, 19*250mm,5um; 이동상 A:물 (0.05%FA), 이동상 B:ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 10분 내에 24% B에서 40% B를 사용하여 정제하여 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (80.0 mg, 10.1%) 및 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (400.0 mg, 50.6%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =375.
단계 5: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (K-41) 및 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (K-42)의 제조
Figure pct00391
THF (1 mL) 중 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (80.0 mg, 0.213 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 진한 HCl (0.5 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 혼합물을 진공 하에 농축시켜 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (90.0 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =361
THF (3 mL) 중 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜타노에이트 (400.0 mg, 1.069 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 진한 HCl (1.5 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 혼합물을 진공 하에 농축시켜 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (500.0 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =361.
5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산 (K-43)의 제조
Figure pct00392
단계 1: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-히드록시-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산의 제조
Figure pct00393
AcOH (3 mL) 중 5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]펜탄산 (I-30) (70.0 mg, 0.187 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 Zn (122.3 mg, 1.870 mmol, 10.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-히드록시-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산 (117 mg, 조 물질)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =377.
단계 2: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산 (K-43)의 제조
Figure pct00394
DCM (4 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-히드록시-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산 (117.0 mg, 0.311 mmol, 1.00 당량) 및 Et3SiH (2 mL)의 교반 혼합물에 실온에서 TFA (1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 12시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: (칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 40분 내 0%에서 80% 구배; 검출기, UV 254 nm)을 사용하여 정제하여 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)옥시)펜탄산 (17.0 mg, 15.17%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =361.
5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)아미노)펜탄산 (K-44)의 제조
Figure pct00395
단계 1: 메틸 2-(브로모메틸)-4-니트로벤조에이트의 제조
Figure pct00396
CCl4 (20.00 mL) 중 메틸 2-메틸-4-니트로벤조에이트 (2.00 g, 10.247 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 NBS (1.82 g, 0.010 mmol, 1.00 당량) 및 BPO (0.21 g, 0.001 mmol, 0.08 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (10:1)로 용리시키면서 정제하여 메틸 2-(브로모메틸)-4-니트로벤조에이트 (2.1g,74.77%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 274.07.
단계 2: 3-(5-니트로-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
Figure pct00397
DMF (1.00 mL) 중 메틸 2-(브로모메틸)-4-니트로벤조에이트 (2.05 g, 7.480 mmol, 1.00 당량) 및 아미노글루타르이미드 (1.02 g, 0.009 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 DIEA (2.90 g, 0.022 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 다음, 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 30분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 3-(5-니트로-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (940 mg, 34.76%)을 흑색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 289.25.
단계 3: 3-(5-아미노-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
Figure pct00398
AcOH (10.00 mL) 중 3-(5-니트로-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (380.00 mg, 1.314 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 Zn (859.31 mg, 13.138 mmol, 10 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 H2O (3x3 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 3-(5-아미노-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (320mg,56.37%)을 흑색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 259.27.
단계 4: 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)아미노)펜타노에이트의 제조
Figure pct00399
MeOH (20.00 mL) 중 3-(5-아미노-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 (600.00 mg, 2.314 mmol, 1.00 당량) 및 메틸 5-옥소펜타노에이트 (451.77 mg, 3.471 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 NaBH3CN (436.29 mg, 6.943 mmol, 3.00 당량) 및 AcOH (0.60 mL, 9.981 mmol, 4.52 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 30분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)아미노)펜타노에이트 (630 mg, 67.80%)를 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 373.41.
단계 5: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)아미노)펜탄산 (K-44)의 제조
Figure pct00400
2N HCl (15.00 mL, 30.000 mmol, 18.67 당량) 중 메틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)아미노)펜타노에이트 (600 mg, 1.607 mmol, 1.00 당량)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN, 30분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (233mg, 38.74%)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 359.38.
4-[3-(3-아미노프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (K-45)의 제조
Figure pct00401
단계 1: 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올의 제조
Figure pct00402
DCM (4.00 mL) 중 tert-부틸 3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-카르복실레이트 (400.00 mg, 1.858 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (4.00 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올 (200mg, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온의 제조
Figure pct00403
DMSO (1 mL) 중 3-(아제티딘-3-일)프로판-1-올 (200.00 mg, 1.736 mmol, 1.00 당량) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌-1,3-디온 (479.65 mg, 1.736 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 질소 분위기 하에 실온에서 DIEA (2244.27 mg, 17.365 mmol, 10.00 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 역상 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼 C18 구형 겔; 이동상 A: 물, 이동상 B: MeOH; 유량: 40 mL/분; 구배: 20분 내에 0% B에서 100% B; 254/220 nm을 사용하여 정제하였다. 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온 (300 mg, 46.52%)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =372.
단계 3: 3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알의 제조
Figure pct00404
DCM (10.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-[3-(3-히드록시프로필)아제티딘-1-일]이소인돌-1,3-디온 (505.0 mg, 1.360 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 질소 분위기 하에 실온에서 데스-마르틴 퍼아이오디난을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 정제용-TLC (PE/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알 (322 mg, 64.2%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =370.
단계 4: 4-[3-(3-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온의 제조
Figure pct00405
MeOH (10 mL) 중 3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로판알 (200.00 mg, 0.541 mmol, 1.00 당량) 및 1-(2,4-디메톡시페닐)메탄아민 (181.07 mg, 1.082 mmol, 2.00 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 실온에서 AcOH (97.55 mg, 1.623 mmol, 3.00 당량) 및 NaBH3CN (102.08 mg, 1.623 mmol, 3.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 물/얼음으로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 20 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼 C18 구형 겔; 이동상 A: 물, 이동상 B: ACN; 유량: 40 mL/분; 구배: 20분 내에 0% B에서 100% B; 254/220 nm 하에 정제하였다. 4-[3-(3-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (150 mg, 53.22%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =521.
단계 5: tert-부틸 N-[(2,4-디메톡시페닐)메틸]-N-(3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로필)카르바메이트의 제조
Figure pct00406
DCM (4.00 mL) 중 4-[3-(3-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (70.00 mg, 0.134 mmol, 1.00 당량) 및 DIEA (52.14 mg, 0.403 mmol, 3.00 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 0℃에서 Boc2O (58.69 mg, 0.269 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬에 의해 하기 조건: 칼럼 C18 구형 겔; 이동상 A: 물, 이동상 B: ACN; 유량: 40 mL/분; 구배: 20분 내에 0% B에서 100% B; 254/220 nm을 사용하여 정제하였다. tert-부틸 N-[(2,4-디메톡시페닐)메틸]-N-(3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로필)카르바메이트 (48.0 mg, 57.51%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =621.
단계 6: 4-[3-(3-아미노프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (K-45)의 제조
Figure pct00407
순수한 트리플루오로아세트산 (1.00 mL) 중 tert-부틸 N-[(2,4-디메톡시페닐)메틸]-N-(3-[1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아제티딘-3-일]프로필)카르바메이트 (48.00 mg, 0.077 mmol, 1.00 당량)의 용액을 질소 분위기 하에 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼 C18 구형 겔; 이동상 A: 물, 이동상 B: ACN; 유량: 40 mL/분; 구배: 20분 내에 0% B에서 100% B; 254/220 nm을 사용하여 정제하였다. 4-[3-(3-아미노프로필)아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3- (21.0 mg, 73.31%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =371.
(2S,4R)-1-((S)-3,3-디메틸-2-(2-옥소아세트아미도)부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-46)의 제조
Figure pct00408
DMF (1.00 mL) 중 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (50.00 mg, 0.116 mmol, 1.00 당량) 및 글리옥살레이트 (8.60 mg, 0.116 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 HATU (66.23 mg, 0.174 mmol, 1.50 당량) 및 DIEA (45.03 mg, 0.348 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피 (0.1% 포름산을 함유하는 0-100% 아세토니트릴/물로 용리함)에 의해 정제하여 표제 화합물 (65 mg)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 487.
(2S,4R)-1-((S)-3,3-디메틸-2-(11-옥소운데칸아미도)부타노일)-4-히드록시-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-47)의 제조
Figure pct00409
단계 1: 11-옥소운데칸산의 제조
Figure pct00410
CH2Cl2 (10 mL) 중 (COCl)2 (2.51 g, 19.773 mmol, 4.00 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 -78℃에서 DMSO (1.16 g, 14.830 mmol, 3.00 당량)를 적가하였다. 이어서 CH2Cl2 (10mL) 중 11-히드록시운데칸산 (1.00 g, 4.943 mmol, 1.00 당량)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 질소 분위기 하에 -60℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서 Et3N (2.50 g, 24.717 mmol, 5.00 당량)을 -60℃에서 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (50 mL)로 희석한 다음, CH2Cl2 (50 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. 표제 화합물 (950 mg, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =200.
단계 2: (2S,4R)-1-((S)-3,3-디메틸-2-(11-옥소운데칸아미도)부타노일)-4-히드록시-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-47)의 제조
Figure pct00411
DMF (5 mL) 중 11-옥소운데칸산 (100.00 mg, 0.499 mmol, 1.00 당량) 및 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[(1S)-1-[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5일)페닐]에틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (266.38 mg, 1.20 당량)의 교반 용액에 HATU (284.78 mg, 0.748 mmol, 1.50 당량) 및 DIEA (193.60 mg, 1.497 mmol, 3.00 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 6시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (90 mg, 28.74%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =257.
(2S,4R)-1-((S)-2-아크릴아미도-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-48)의 제조
Figure pct00412
DMF (4.00 mL) 중 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (500.00 mg, 1.161 mmol, 1.00 당량) 및 아크릴산 (83.68 mg, 1.161 mmol, 1.00 당량)의 교반 실온 혼합물에 HATU (529.85 mg, 1.393 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (450.25 mg, 3.483 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피 (30분에 걸쳐 물 중 10-50% 아세토니트릴로 용리함)에 의해 정제하여 표제 화합물 (495 mg, 87.96%)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =484.21.
(2S,4R)-4-히드록시-1-((R)-3-메틸-2-(3-(2-옥소에톡시)이속사졸-5-일)부타노일)-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-49)의 제조
Figure pct00413
단계 1: 2-(3-브로모이속사졸-5-일)에탄-1-올의 제조
Figure pct00414
EtOAc (2600 mL) 및 H2O (260 mL) 중 3-부틴-1-올 (552.89 g, 7888.26 mmol, 4 당량) 및 KHCO3 (592.30 g, 5916.197 mmol, 3 당량)의 용액을 실온에서 교반하였다. 1-브로모-N-히드록시메탄카본이미도일 브로마이드 (EA (840 mL) 중 400.00 g, 1972.066 mmol, 1.00 당량)를 60분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (500 mL x 2)로 세척하고, 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (30:1)로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (338.2 g, 88.98%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =192.
단계 2: 2-(3-브로모이속사졸-5-일)아세트산의 제조
Figure pct00415
아세톤 (3600 mL) 중 2-(3-브로모이속사졸-5-일)에탄-1-올 (360.00 g)의 용액을 질소 분위기 하에 0℃에서 교반하였다. 상기 혼합물에 존스 시약 (1760.00 mL)을 0℃에서 1시간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 빙수의 첨가에 의해 켄칭하고, 생성된 혼합물을 EtOAc (1000 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (500 mL x 2)로 세척하고, 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물 (348.6 g, 조 물질)을 녹색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 추가 정제 없이 사용하였다. (LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =206.
단계 3: 에틸 2-(3-브로모이속사졸-5-일)아세테이트의 제조
Figure pct00416
EtOH (2000 mL) 중 2-(3-브로모이속사졸-5-일)아세트산 (397.6 g, 1930.144 mmol, 1.00 당량) 및 H2SO4 (18.92 g, 193.014 mmol, 0.1 당량)의 용액을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3000 mL)로 희석하고, 물 (500 mL x 2)로 세척하고, 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (35:1)로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (355 g, 78.61%)을 무색 오일로서 수득하였다. (LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =234.
단계 4: 에틸 2-(3-브로모이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트의 제조
Figure pct00417
THF (2000 mL) 중 t-BuOK (244.51 g, 2179.031 mmol, 1.5 당량) 및 에틸 2-(3-브로모이속사졸-5-일)아세테이트 (340.00 g, 1452.687 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 0℃에서 2-아이오도프로판 (321.03 g, 1888.493 mmol, 1.3 당량)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 빙수를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc (1000 mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (500 mL x 1)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/THF (10:1)로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (284.1 g, 70.82%)을 무색 오일로서 수득하였다. (LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =276.
단계 5: 2-(3-메톡시이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산의 제조
Figure pct00418
MeOH (270 mL) 중 에틸 2-(3-브로모이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트 (90.00 g, 325.933 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 0℃에서 MeOH (210 mL) 중 KOH (274.30 g, 4888.995 mmol, 15.00 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 용액을 HCl (수성)의 1M 용액을 사용하여 pH 4로 산성화시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (1800 mL)로 희석하고, 여과하였다. 필터 케이크를 EtOAc (100 mL x 3)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물 (62.9 g, 96.88%)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =200.
단계 6: 2-(3-히드록시이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산의 제조
Figure pct00419
HOAc (450.00 mL) 중 2-(3-메톡시이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산 (62.90 g, 315.754 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 48% HBr (450.00 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 C18-플래쉬 크로마토그래피에 의해 물/0.05% 포름산 중 0에서 100% MeCN으로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (43.3 g, 74.05%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 186.
단계 7: 메틸 2-(3-히드록시이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트의 제조
Figure pct00420
MeOH (72 mL) 중 2-(3-히드록시이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산 (20 g, 108.004 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 0℃에서 SOCl2 (35.26 mL, 486.059 mmol, 4.50 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 물 (30 mL)로 희석하고, EtOAc (50 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0에서 100% THF로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (15.1 g, 70.18%)을 회백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 4H), 2.32 - 2.20 (m, 1H), 0.88 (dd, J = 34.2, 6.7 Hz, 6H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 200.
단계 8: 메틸 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트의 제조
Figure pct00421
DMF (70 mL) 중 메틸 2-(3-히드록시이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트 (7 g, 35.140 mmol, 1.00 당량) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (7.62 g, 38.654 mmol, 1.1 당량)의 교반 용액에 K2CO3 (9.71 g, 70.280 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (300 mL)로 희석하였다. 유기 층을 물 (300 mL), 염수 (300 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 표제 화합물 (5.2 g, 46.92%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 316.
단계 9: 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산
Figure pct00422
MeOH (15 mL) 및 H2O (45 mL) 중 메틸 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부타노에이트 (5.2 g, 16.489 mmol, 1.00 당량) 및 LiOH (1.97 g, 82.445 mmol, 5 당량)의 용액을 제조하고, 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진한 HCl을 사용하여 pH 5로 산성화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (300 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL x 1)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 302.
단계 10: (2S,4R)-1-((R)-2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부타노일)-4-히드록시-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드의 제조
Figure pct00423
DMF (50 mL) 중 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부탄산 (4.95 g, 16.427 mmol, 1.00 당량) 및 (2S,4R)-4-히드록시-N-[(1S)-1-[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]에틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (5.44 g, 16.427 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 HATU (6.87 g, 18.070 mmol, 1.1 당량) 및 DIEA (6.37 g, 49.281 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (300 mL)로 희석하였다. 유기 층을 물 (300 mL), 염수 (300 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/ EA (1:1)로 용리시키면서 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물 (6.2 g)을 키랄-HPLC에 의해 이산화탄소 중 40% 메탄올로 용리시키면서 키랄 아트 아밀로스-SA 칼럼을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (2.8 g, 27.73%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.49 - 7.41 (m, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 2H), 6.14 (s, 1H), 5.10 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.97 - 4.87 (m, 1H), 4.81 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.32 - 4.23 (m, 1H), 4.09 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.73 - 3.49 (m, 6H), 3.45 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.46 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 2.03 (ddd, J = 11.9, 8.1, 3.0 Hz, 1H), 1.78 (ddd, J = 12.8, 8.0, 4.7 Hz, 1H), 1.41 (dd, J = 29.6, 7.0 Hz, 3H), 1.13 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 0.96 (t, J = 6.4 Hz, 3H), 0.81 (dd, J = 14.4, 6.7 Hz, 3H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 615.35.
단계 11: (2S,4R)-4-히드록시-1-((R)-3-메틸-2-(3-(2-옥소에톡시)이속사졸-5-일)부타노일)-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드 (K-49)의 제조
Figure pct00424
H2SO4 (1M) (6.00 mL) 및 THF (6.00 mL)의 교반 용액에 실온에서 (2S,4R)-1-((R)-2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)이속사졸-5-일)-3-메틸부타노일)-4-히드록시-N-((S)-1-(4-(4-메틸티아졸-5-일)페닐)에틸)피롤리딘-2-카르복스아미드 (300.00 mg, 0.499 mmol, 1.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응물을 빙수의 첨가에 의해 켄칭하고, 혼합물을 포화 NaHCO3 (수성)를 사용하여 pH 7로 염기성화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 (2S,4R)-4-히드록시-N-[(1S)-1-[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]에틸]-1-[(2R)-3-메틸-2-[3-(2-옥소에톡시)-1,2-옥사졸-5-일]부타노일]피롤리딘-2-카르복스아미드 (256 mg, 97.3%)를 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =541.
4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤조산 (I-64)의 제조
Figure pct00425
단계 1: 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드의 제조
Figure pct00426
THF (30.00 mL) 중 4-(2-히드록시에틸)-N-메틸벤즈아미드 (1.00 g, 5.580 mmol, 1.00 당량)의 용액에 건조 질소의 분위기 하에 0℃에서 NaH (333.33 mg, 8.370 mmol, 1.50 당량, 오일 중 60%)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (1.40 g, 6.696 mmol, 1.20 당량)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 가열하고, 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성NH4Cl (20 mL)에 붓고, DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM에서 20:1 DCM/MeOH로 용리시키면서 정제하여 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드 (546 mg, 28.39%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 307.
단계 2: 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드의 제조
Figure pct00427
4:1 디옥산/물 (10.00 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드 (546.00 mg, 1.780 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (368.26 mg, 2.670 mmol, 1.50 당량)의 혼합물을 질소로 5분 동안 폭기하였다. Pd(dppf)Cl2 (130.24 mg, 0.178 mmol, 0.1 당량) 및 K2CO3 (45.05 mg, 0.326 mmol, 2.0 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 정제하여 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드 (429 mg, 62.83%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 365.
단계 3: 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤조산 (I-64)의 제조
Figure pct00428
진한 HCl (10.00 mL, 12 M) 중 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)-N-메틸벤즈아미드 (429.00 mg, 1.179 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 90℃에서 8시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (5 mL)로 희석하고, NaHCO3을 사용하여 pH 3으로 중화시키고, 여과하였다. 필터 케이크를 역상 정제용 HPLC에 의해 추가로 정제하여 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤조산 (I-64, 389 mg, 90.91%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 352.20.
(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)페닐)(3-(피페리딘-4-일)아제티딘-1-일)메타논 (K-50)의 제조
Figure pct00429
단계 1: tert-부틸 4-[1-[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)벤조일]아제티딘-3-일]피페리딘-1-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00430
DMF (2.0 mL) 중 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)벤조산 (50.0 mg, 0.142 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 4-(아제티딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (34.2 mg, 0.142 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 HATU (64.9 mg, 0.171 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (36.7 mg, 0.285 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건 (칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeCN (0.1% FA), 30분 내 0에서 100% 구배; 검출기, UV 254/220 nm)을 사용하여 정제하였다. 표제 화합물 (55 mg, 57.37%)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 574.
단계 2: 2-[6-아미노-5-(2-[4-[3-(피페리딘-4-일)아제티딘-1-카르보닐]페닐]에톡시)피리다진-3-일]페놀 (K-50)의 제조.
Figure pct00431
DCM (2.0 mL) 중 tert-부틸 4-[1-[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)벤조일]아제티딘-3-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (55.0 mg, 0.096 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 TFA (1.0 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 교반하고, 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건 (칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeCN (0.1% FA), 30분 내 0에서 100% 구배; 검출기, UV 254/220 nm)을 사용하여 정제하였다. 표제 화합물 (20 mg, 44.05%)을 분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 474.
표 A13의 하기 중간체를 K-50의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A13
Figure pct00432
Figure pct00433
Figure pct00434
2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 FA (I-65)의 제조
Figure pct00435
단계 1: 2-(4-(아미노메틸)페닐)에탄-1-올의 제조
Figure pct00436
MeOH (50.0 mL) 중 4-(2-히드록시에틸)벤조니트릴 (2.00 g, 13.589 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 진한 HCl (1.0 mL) 및 습윤 10% Pd/C (1.00 g)를 첨가하였다. 반응 용기를 수소로 3회 퍼징하고, 생성된 혼합물을 수소 5 atm 하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용기를 질소로 폭기하고, 촉매를 셀라이트®를 통한 여과에 의해 제거하였다. 필터 케이크를 MeOH로 세척하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 2-(4-(아미노메틸)페닐)에탄-1-올 (2.08 g, 정량적)을 담갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 152.
단계 2: tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)카르바메이트의 제조
Figure pct00437
DCM (30.00 mL) 중 2-(4-(아미노메틸)페닐)에탄-1-올 (2.00 g, 1.00 당량, 13.23 mmol)의 교반 혼합물에 Boc2O (4.33 g, 1.50 당량, 19.840 mmol) 및 TEA (2.677 g, 2.00 당량, 26.454 mmol)를 0℃에서 여러 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 물 (10 mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피 (C18 칼럼; 이동상, 물 중 ACN, 30분 내 0%에서 80% 구배; 검출기, UV 254 nm)에 의해 정제하여 tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)카르바메이트 (2.14 g, 64.46%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 252.
단계 3: tert-부틸 N-[(4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시]에틸]페닐)메틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00438
DMF (20 mL) 중 tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)카르바메이트 (2.14 g, 8.53 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 t-BuOK (1.43 g, 12.79 mmol, 1.50 당량)를 0℃에서 여러 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 45분 동안 교반하였다. 무수 DMF (10 mL) 중 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (1.78 g, 8.53 mmol, 1.00 당량)의 용액을 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 가열한 후, 물 (50 mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 N-[(4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시]에틸]페닐)메틸]카르바메이트 (1.65 g, 51.17%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 379.
단계 4: tert-부틸 N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00439
디옥산 (12.0 mL) 및 물 (3.0 mL) 중 tert-부틸 N-[(4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시]에틸]페닐)메틸]카르바메이트 (1.00 g, 2.640 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (545 mg, 3.960 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 K2CO3 (0.729 g, 5.280 mmol, 2.0 당량) 및 Pd(PPh3)4 (305.184 mg, 0.264 mmol, 0.10 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 물 (10 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]카르바메이트 (765 mg, 66.46%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 437.
단계 5: 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 FA (I-65)의 제조
Figure pct00440
DCM (10 mL) 중 tert-부틸 N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]카르바메이트 (200.00 mg, 0.459 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 TFA (2 mL)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 I-65 (98.00 mg, 55.9%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 337.25.
표 A14의 하기 중간체를 I-65의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A14
Figure pct00441
N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-2-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)아세트아미드 (K-65)의 제조
Figure pct00442
단계 1: tert-부틸 6-(2-에톡시-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트의 제조
Figure pct00443
DMF (4.00 mL) 중 tert-부틸 2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트 헤미-옥살레이트 (200.00 mg, 0.694 mmol, 1.00 당량) 및 에틸 브로모아세테이트 (139.02 mg, 0.832 mmol, 1.20 당량)의 교반 용액에 실온에서 K2CO3 (239.69 mg, 1.734 mmol, 2.5 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (280 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =285.
단계 2: 2-(6-(tert-부톡시카르보닐)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)아세트산의 제조.
Figure pct00444
MeOH (2.00 mL) 및 H2O (0.50 mL) 중 tert-부틸 6-(2-에톡시-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트 (200.00 mg, 0.703 mmol, 1.00 당량) 및 LiOH (67.37 mg, 2.813 mmol, 4.00 당량)의 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물 (250 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =257.
단계 3: tert-부틸 6-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00445
DMF (4.00 mL) 중 2-(6-아미노-5-(4-(아미노메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (150.00 mg, 0.585 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-(tert-부톡시카르보닐)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)아세트산 (196.87 mg, 0.585 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 HATU (222.53 mg, 0.585 mmol, 1 당량) 및 DIEA (226.92 mg, 1.756 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (37 mg, 11.00%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =575.
단계 4: N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]-2-[2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일]아세트아미드 (K-65)의 제조.
Figure pct00446
DCM (1.20 mL) 중 tert-부틸 6-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트 (37.00 mg, 0.064 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 TFA (0.40 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeCN (0.1% FA), 10분 내 10%에서 50% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (26.80 mg, 87.86%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =475.
표 A15의 하기 중간체를 K-65의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A15
Figure pct00447
Figure pct00448
Figure pct00449
4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)벤조산 (I-66)의 제조
Figure pct00450
단계 1: tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00451
DMF (50.0 mL) 중 4-[2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에틸]벤조산 (5.0 g, 18.8 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 DIEA (7.3 g, 56.5 mmol, 3.0 당량) 및 HATU (1.3 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 디메틸아민 (1.02 g, 22.6 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 추가로 2시간 동안 교반한 다음, 물로 희석하고, EtOAc (3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]카르바메이트 (5.9 g)를 황색 오일로서 수득하였다. 조 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 237.1.
단계 2: tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]-N-메틸카르바메이트의 제조
Figure pct00452
250 mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]카르바메이트 (5.9 g, 20.2 mmol, 1.0 당량) 및 DMF (100.0 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물에 NaH (1.94 g, 80.8 mmol, 4.0 당량)를 0℃에서 여러 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 메틸 아이오다이드 (5.7 g, 40.4 mmol, 2.0 당량)를 적가하였다. 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 다음, 0℃에서 물로 켄칭하고, EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]-N-메틸카르바메이트 (4 g, 64.69%)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H] + = 251.1
단계 3: N,N-디메틸-4-[2-(메틸아미노)에틸]벤즈아미드의 제조
Figure pct00453
DCM (50.0 mL) 중 tert-부틸 N-[2-[4-(디메틸카르바모일)페닐]에틸]-N-메틸카르바메이트 (4.9 g, 16.0 mmol, 1.0 당량)가 들은 250 mL 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 디옥산 중 4 M HCl (50.0 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 N,N-디메틸-4-[2-(메틸아미노)에틸]벤즈아미드 (4 g, 정량적)를 황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 직접 후속 단계에 추가 정제없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 207.3
단계 4: 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노]에틸]-N,N-디메틸벤즈아미드의 제조
Figure pct00454
ACN (72.0 mL) 중 N,N-디메틸-4-[2-(메틸아미노)에틸]벤즈아미드 (4.0 g, 19.4 mmol, 1.0 당량)가 들은 250 mL 둥근 바닥 플라스크에 DIEA (12.5 g, 96.9 mmol, 5.0 당량) 및 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (4.9 g, 23.3 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노]에틸]-N,N-디메틸벤즈아미드 (2.3 g, 35.53%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 334.3
단계 5: 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)-N,N-디메틸벤즈아미드의 제조
Figure pct00455
디옥산 (60.0 mL) 및 물 (3.0 mL) 중 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노]에틸]-N,N-디메틸벤즈아미드 (1.0 g, 3.0 mmol, 1.0 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (537 mg, 3.9 mmol, 1.3 당량)의 용액에 K2CO3 (1.2 g, 9.0 mmol, 3.0 당량) 및 Pd(dppf)Cl2 (219 mg, 0.3 mmol, 0.1 당량)를 첨가하였다. 질소 분위기 하에 80℃에서 2시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)-N,N-디메틸벤즈아미드 (530 mg, 45.19%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 392.2.
단계 6: 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)벤조산 (I-66)의 제조
Figure pct00456
25 mL 둥근 바닥 플라스크에 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)-N,N-디메틸벤즈아미드 (360 mg, 0.9 mmol, 1.0 당량) 및 12 N HCl (5.0 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)벤조산 (I-66, 37 mg, 10.26%)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 365.3.
4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(에틸)아미노)에틸)벤조산 (K-79)의 제조
Figure pct00457
단계 1: tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00458
t-BuOH (20.00 mL) 중 3-(4-시아노페닐)프로판산 (2.00 g, 11.416 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 DPPA (6.28 g, 22.820 mmol, 2.00 당량) 및 TEA (2.31 g, 22.833 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시킨 다음, 시트르산에 이어서 염수로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (4:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]카르바메이트 (1.5g, 50.68%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =247.
단계 2: tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]-N-에틸카르바메이트의 제조
Figure pct00459
DMF (20.00 mL) 중 tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]카르바메이트 (1.50 g, 6.090 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 0℃에서 에틸 아이오다이드 (1.14 g, 7.309 mmol, 1.20 당량) 및 NaH (0.49 g, 12.251 mmol, 2.01 당량, 60%)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 빙수 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]-N-에틸카르바메이트 (1.1g, 60.57%)를 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =275.
단계 3: 4-[2-(에틸아미노)에틸]벤조니트릴의 제조
Figure pct00460
DCM (10.00 mL) 중 tert-부틸 N-[2-(4-시아노페닐)에틸]-N-에틸카르바메이트 (1.10 g, 4.009 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 TFA (3.67 mL, 49.409 mmol, 12.32 당량)를 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeCN (0.2% FA), 30분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. 생성물을 구배 10%에서 수집하여 4-[2-(에틸아미노)에틸]벤조니트릴 (600 mg, 77.30%)을 무색 시럽으로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H] + =175.
단계 4: 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(에틸)아미노]에틸]벤조니트릴의 제조
Figure pct00461
DMF (10.00 mL) 중 4-[2-(에틸아미노)에틸]벤조니트릴 (600.00 mg, 3.443 mmol, 1.00 당량) 및 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (1435.48 mg, 6.886 mmol, 2.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 DIEA (1335.10 mg, 10.329 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3x100 mL)로 세척한 다음, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 PE/EtOAc (3:1)로 용리시키면서 정제하여 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(에틸)아미노]에틸]벤조니트릴 (360 mg, 31.87%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H] + =302.
단계 5: 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](에틸)아미노]에틸)벤조니트릴의 제조
Figure pct00462
디옥산 (5.00 mL) 및 H2O (1.00 mL) 중 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(에틸)아미노]에틸]벤조니트릴 (360.00 mg, 1.193 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (493.62 mg, 3.579 mmol, 3.00 당량)의 용액에 Cs2CO3 (1166.03 mg, 3.579 mmol, 3.00 당량) 및 XPhos Pd G3 (100.97 mg, 0.119 mmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 질소 분위기 하에 95℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN (0.2% FA), 10분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. 생성물을 구배 30%에서 수집하여 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](에틸)아미노]에틸) 벤조니트릴 (320mg, 67.17%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H] + =360.
단계 6: 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](에틸)아미노]에틸)벤조산 (K-79)의 제조
Figure pct00463
H2O (1.00 mL) 및 MeOH (1.00 mL) 중 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](에틸)아미노]에틸)벤조니트릴 (120.00 mg, 0.334 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 KOH (32.41 mg, 0.578 mmol, 1.73 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하기 조건: 칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN (0.2% FA), 30분 내 0%에서 100% 구배; 검출기, UV 254 nm을 사용하여 정제하였다. 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](에틸)아미노]에틸) 벤조산 (61 mg, 45.87%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H] + =379.
2-[6-아미노-5-[4-(2-아미노에틸)피페라진-1-일]피리다진-3-일]페놀 (I-67)의 제조
Figure pct00464
단계 1: tert-부틸 N-[2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]에틸]카르바메이트의 제조
Figure pct00465
DMF (25.00 mL) 중 3-아미노-4-브로모-6-클로로피리다진 (4.16 g, 19.958 mmol, 1.00 당량)의 용액에 tert-부틸 N-[2-(피페라진-1-일)에틸]카르바메이트 (9.15 g, 0.040 mmol, 2 당량) 및 DIEA (9.90 mL, 56.837 mmol, 2.85 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM/MeOH (20:1)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 N-[2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]에틸]카르바메이트 (2.1329 g, 29.95%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 357.
단계 2: tert-부틸 N-(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]에틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00466
디옥산/물 (4:1, 50 mL) 중 tert-부틸 N-[2-[4-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)피페라진-1-일]에틸]카르바메이트 (1.98 g, 5.548 mmol, 1.00 당량)의 용액에 (2-히드록시페닐)보론산 (1.15 g, 8.338 mmol, 1.50 당량), K2CO3 (3 당량, 2.3 g), 및 XPhos Pd G3 (0.1 당량, 0.555 mmol, 469.64 mg)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 80℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에, 용매를 진공 하에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 상에 적용하고, DCM/MeOH (30:1)로 용리시켜 tert-부틸 N-(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]에틸)카르바메이트 (1.325 g, 57.6%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 415.
단계 3: 2-[6-아미노-5-[4-(2-아미노에틸)피페라진-1-일]피리다진-3-일]페놀 (I-67)의 제조
Figure pct00467
TFA/DCM (1:5, 108 mL) 중 tert-부틸 N-(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]에틸)카르바메이트 (1.3 g, 3.316 mmol, 1.00 당량)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거한 후, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. I-67 (0.497 g, 50.4%)을 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 315.
2-(6-아미노-5-(4-((메틸아미노)메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (I-68)의 제조
Figure pct00468
단계 1: 2-(4-((메틸아미노)메틸)페닐)에탄-1-올의 제조
Figure pct00469
THF (40 mL) 중 tert-부틸 N-[[4-(2-히드록시에틸)페닐]메틸]카르바메이트 (1.00 g, 3.979 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 건조 질소의 분위기 하에 0℃에서 LiAlH4 (906.09 mg, 23.873 mmol, 6.00 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시키고, DCM (30 mL)으로 희석하고, 물로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-(4-((메틸아미노)메틸)페닐)에탄-1-올 (1.3 g)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 166.
단계 2: tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)(메틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00470
DCM (50 mL) 중 2-(4-((메틸아미노)메틸)페닐)에탄-1-올 (800.00 mg, 4.842 mmol, 1.00 당량) 및 TEA (979.83 mg, 9.683 mmol, 2.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1585.00 mg, 7.262 mmol, 1.50 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)(메틸)카르바메이트 (380 mg, 22.18%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 266.
단계 3: tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00471
DMF (10 mL) 중 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (226.86 mg, 1.088 mmol, 0.76 당량) 및 tert-부틸 (4-(2-히드록시에틸)벤질)(메틸)카르바메이트 (380.00 mg, 1.432 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 NaH (51.89 mg, 2.162 mmol, 1.51 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시키고, 물 (20 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트 (150 mg, 26.66%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 393.
단계 4: tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트의 제조
Figure pct00472
디옥산 (2 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트
(100.00 mg, 0.255 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (52.66 mg, 0.382 mmol, 1.50 당량)의 용액에 K2CO3 (70.36 mg, 0.509 mmol, 2.00 당량) 및 Pd(PPh3)4 (29.41 mg, 0.025 mmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 건조 질소의 분위기 하에 100℃에서 4시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 TLC (DCM/MeOH 10:1)에 의해 정제하여 tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트 (140 mg)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 451.
단계 5: 2-(6-아미노-5-(4-((메틸아미노)메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (I-68)의 제조
Figure pct00473
DCM (3.0 mL) 중 tert-부틸 (4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)(메틸)카르바메이트 (140.00 mg, 0.311 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 TFA (1.00 mL)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-68 (80 mg, 73.50%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 351.
4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸) 벤즈알데히드 (K-80)의 제조
Figure pct00474
단계 1: 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤즈알데히드의 제조
Figure pct00475
무수 DCM (3.0 mL) 중 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노]에틸]벤조니트릴 (200.00 mg, 0.695 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 DIBAL-H (0.97 mL, 톨루엔 중 1.5 M, 1.459 mmol, 2.10 당량)를 질소 분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃에서 HCl (0.5 M)을 사용하여 pH 3으로 산성화시킨 다음, 포화 NaHCO3을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 DCM (3 x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤즈알데히드 (162 mg, 75.84%)를 백색 고체로서 수득하였다. 이 물질을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 291.
단계 2: 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸) 벤즈알데히드 (K-80)의 제조
Figure pct00476
디옥산 (5.00 mL) 및 H2O (1.00 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤즈알데히드 (237.20 mg, 1.720 mmol, 5.00 당량)의 교반 혼합물에 Pd(dtbpf)Cl2 (22.42 mg, 0.034 mmol, 0.10 당량) 및 Cs2CO3 (448.25 mg, 1.376 mmol, 4.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 100℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 다음, 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 하기 조건 (칼럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 ACN (0.1% FA), 40분 동안 0%에서 60% 구배; 검출기, UV 254 nm) 하에 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸) 벤즈알데히드 (29 mg, 20.57%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =349.
4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤즈알데히드 (K-81)의 제조
Figure pct00477
단계 1: 메틸 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤조에이트의 제조
Figure pct00478
질소의 불활성 분위기로 퍼징하고 유지한 40-mL 바이알에 메틸 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)아미노]에틸]벤조에이트 (250.00 mg, 0.815 mmol, 1.00 당량), 2-히드록시페닐보론산 (168.62 mg, 1.222 mmol, 1.5 당량), Xphos Pd G3 (68.99 mg, 0.081 mmol, 0.1 당량), K2CO3 (225.27 mg, 1.630 mmol, 2 당량), H2O (1.00 mL) 및 1,4-디옥산 (10.00 mL)을 넣었다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 2 x 50 mL로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬-정제용 HPLC에 의해 하기 조건 (인텔플래쉬-1)을 사용하여 정제하였다: 칼럼, 실리카 겔; 이동상, 40분 내에 ACN=0에서 ACN=30으로 증가; 검출기: 254nm. 메틸 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤조에이트 200 mg (67.34%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =365.
단계 2: 2-(6-아미노-5-((4-(히드록시메틸)페네틸)아미노)피리다진-3-일)페놀의 제조
Figure pct00479
8-mL 밀봉된 튜브에 메틸 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤조에이트 (150.00 mg, 0.412 mmol, 1.00 당량) 및 THF (2.00 mL)를 넣고, 용기를 0℃로 냉각시켰다. LAH (31.25 mg, 0.823 mmol, 2 당량)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 0.3 mL 및 10% 수성 NaOH 0.9 mL의 첨가에 의해 켄칭하였다. 고체를 여과에 의해 제거하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 2-(6-아미노-5-((4-(히드록시메틸)페네틸)아미노)피리다진-3-일)페놀 110 mg (조 물질)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =337.
단계 3: 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤즈알데히드 (K-81)의 제조
Figure pct00480
50-mL 둥근 바닥 플라스크에, 2-(6-아미노-5-((4-(히드록시메틸)페네틸)아미노)피리다진-3-일)페노 (90.00 mg, 0.268 mmol, 1.00 당량), DCM (20.00 mL), 및 MnO2 (465.19 mg, 5.351 mmol, 20 당량)을 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 에틸 아세테이트/석유 에테르 (4:1)를 사용하여 정제하였다. 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤즈알데히드 25 mg (27.95%)을 암황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =335.
4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)아미노)에틸)벤조산 (K-82)의 제조
Figure pct00481
단계 1: 메틸 4-(2-아미노에틸)벤조에이트의 제조
Figure pct00482
MeOH (20.00 mL) 중 4-[2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에틸]벤조산 (3.00 g, 11.308 mmol, 1.00 당량)의 용액에 H2SO4 (2.50 mL, 46.901 mmol, 4.15 당량)을 첨가하고, 생성된 용액을 25℃에서 20시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (20 mL)로 희석하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH 7-8로 조정하고, CH2Cl2 (50 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 4-(2-아미노에틸)벤조에이트 (1.4 g, 69.08%)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =180.
단계 2: 메틸 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)아미노]에틸]벤조에이트의 제조
Figure pct00483
DMF (10 mL) 중 메틸 4-(2-아미노에틸)벤조에이트 (1.40 g, 7.812 mmol, 1.00 당량) 및 4-브로모-6-클로로피리다진-3-아민 (1.95 g, 9.374 mmol, 1.2 당량)의 용액에 DIEA (2.02 g, 15.623 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 110℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 다음, 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 C18 크로마토그래피 (H2O 중 0에서 26% ACN의 용리 구배)에 의해 정제하여 메틸 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)아미노]에틸]벤조에이트 (305 mg, 12.73%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =307.
단계 3: 메틸 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤조에이트의 제조
Figure pct00484
디옥산 (4.00 mL) 및 H2O (1.00 mL) 중 메틸 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)아미노]에틸]벤조에이트 및 2-히드록시페닐보론산 (70.0 mg, 0.652 mmol, 2 당량)의 용액에 Xphos Pd G3 (27.6 mg, 0.033 mmol, 0.1 당량) 및 K2CO3 (90.1, 0.652 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, EtOAc (30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용- TLC (CH2Cl2 / MeOH 10:1)에 의해 정제하여 메틸 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤조에이트 (75 mg, 63.13%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =365.
단계 4: 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤조산 (K-82)의 제조
Figure pct00485
THF (0.50 mL) 및 H2O (0.10 mL) 중 메틸 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤조에이트 (55.0 mg, 0.151 mmol, 1.00 당량)의 용액에 LiOH (36.2 mg, 1.509 mmol, 10 당량)를 첨가하고, 생성된 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 C18 크로마토그래피 (H2O 중 0에서 26% ACN의 용리 구배)에 의해 정제하여 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]아미노]에틸)벤조산 (32 mg, 60.51%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =351.
2-(6-아미노-5-((4-(아미노메틸)페네틸)아미노)피리다진-3-일)페놀 (K-83)의 제조
Figure pct00486
단계 1: N4-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸]-6-클로로피리다진-3,4-디아민의 제조
Figure pct00487
THF (3 mL) 중 4-[2-[(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)아미노]에틸]벤즈아미드 (100.00 mg, 0.343 mmol, 1.00 당량)의 용액에 LiAlH4 (130.10 mg, 3.428 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (5 mL)로 조심스럽게 켄칭하고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 C18 크로마토그래피 (H2O 중 0에서 22% ACN의 용리 구배)에 의해 정제하여 N4-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸]-6-클로로피리다진-3,4-디아민 (37 mg, 38.86%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =278.
단계 2: 2-[6-아미노-5-([2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸]아미노)피리다진-3-일]페놀 (K-83)의 제조
Figure pct00488
디옥산 (1.6 mL) 및 H2O (0.4 mL) 중 N4-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸]-6-클로로피리다진-3,4-디아민 (37.00 mg, 0.133 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (36.75 mg, 0.266 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 Xphos Pd G3 (11.28 mg, 0.013 mmol, 0.1 당량) 및 K2CO3 (36.82 mg, 0.266 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 C18 크로마토그래피 (H2O 중 0에서 8% ACN의 용리 구배)에 의해 정제하여 2-[6-아미노-5-([2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸]아미노)피리다진-3-일]페놀 (19 mg, 42.52%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =336.
4-(4-(2-((4-(3-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)부탄산 (K-84)의 제조
Figure pct00489
단계 1: 메틸 5-(4-[2-[(4-[3-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일]피리딘-2-일)옥시]에틸]피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
MeOH (2.00 mL) 중 2-[6-아미노-5-(8-[2-[2-(피페라진-1-일)에톡시]피리딘-4-일]-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리다진-3-일]페놀 (20 mg, 0.040 mmol, 1.00 당량) 및 메틸 4-옥소부타노에이트 (9.24 mg, 2.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 AcOH (0.03 mL, 0.040 mmol) 및 NaBH 3 CN (12.50 mg, 0.200 mmol, 5.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반했다. 반응물을 실온에서 H 2 O로 켄칭하였다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (8.9 mg, 36.26%)을 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H] + = 603.
단계 2: 4-(4-(2-((4-(3-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)부탄산 (K-84)의 제조.
Figure pct00490
MeOH (0.60 mL) 및 H2O (0.30 mL) 중 메틸 5-(4-[2-[(4-[3-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일]피리딘-2-일)옥시]에틸]피페라진-1-일)펜타노에이트 (8.00 mg, 0.013 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 LiOH (3.18 mg, 0.130 mmol, 10.00 당량)를 첨가하였다. 4시간 후, 혼합물을 HCl (1 M)을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 589.
표 A16의 하기 중간체를 K-84의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A16
Figure pct00491
2-(6-아미노-5-(8-(2-((1r,3r)-3-(피페리딘-4-일옥시)시클로부톡시)피리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리다진-3-일)페놀 (K-86)의 제조
Figure pct00492
단계 1: tert-부틸 4-((1r,3r)-3-((4-(3-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일)옥시)시클로부톡시)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00493
1,4-디옥산 (8.00 mL) 및 H2O (2.00 mL) 중 tert-부틸 4-[(1r,3r)-3-([4-[3-(3-아미노-6-클로로피리다진-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일]피리딘-2-일]옥시)시클로부톡시]피페리딘-1-카르복실레이트 (200.00 mg, 0.341 mmol, 1.00 당량) 및 2-히드록시페닐보론산 (141.19 mg, 1.023 mmol, 3.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 XPhos Pd G3 (57.77 mg, 0.068 mmol, 0.20 당량) 및 Cs2CO3 (333.53 mg, 1.023 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (224 mg, 조 물질)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 644.
단계 2: 2-[6-아미노-5-(8-[2-[(1r,3r)-3-(피페리딘-4-일옥시)시클로부톡시]피리딘-4-일]-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리다진-3-일]페놀 (K-86)의 제조
Figure pct00494
DCM (6.00 mL) 중 tert-부틸 4-((1r,3r)-3-((4-(3-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일)옥시)시클로부톡시)피페리딘-1-카르복실레이트 (224.00 mg, 0.348 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 TFA (3.00 mL, 40.389 mmol, 116.08 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물 (373 mg, 조 물질)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 544.
2-(6-아미노-5-(4-(피페라진-1-일메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (K-87)의 제조
Figure pct00495
단계 1: tert-부틸 4-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)피페라진-1-카르복실레이트의 제조
Figure pct00496
CH2Cl2 (4 mL) 및 메탄올 (4 mL)의 혼합물 중 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)벤즈알데히드 (80.00 mg, 0.24 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (66.72 mg, 0.0368 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 용액이 pH 6에 도달할 때까지 아세트산을 첨가하였다. 이어서 NaBH3CN (60.00 mg, 0.960 mmol, 4.00 당량)을 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (60 mg, 53.27%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =506.
단계 2: 2-(6-아미노-5-(4-(피페라진-1-일메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (K-87)의 제조.
Figure pct00497
DCM (6.00 mL) 중 tert-부틸 4-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)피페라진-1-카르복실레이트 (60.00 mg, 0.12 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 TFA (2.00 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물 혼합물을 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. 표제 화합물 (68.00 mg, 조 물질)을 갈색 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =405.
표 A17의 하기 중간체를 K-87의 제조에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
표 A17
Figure pct00498
실시예 2. N-(2-[[2-(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]아세트아미도)에틸](메틸)아미노]에틸)-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-2,3-디히드로-1H-이소인돌-4-일]옥시]아세트아미드 (화합물 104)의 제조
Figure pct00499
DMF (1 mL) 중 2-(4-(3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)피페라진-1-일)아세트산 (I-62, 36.2 mg, 0.083 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (49.05 mg, 0.380 mmol, 5.00 당량) 및 HATU (37.52 mg, 0.099 mmol, 1.10 당량)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 N-(2-((2-아미노에틸)(메틸)아미노)에틸)-2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)아세트아미드 (I-63, 36.02 mg, 0.083 mmol, 1.10 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 물 (5 mL)로 켄칭하고, 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 104 (4.7 mg, 8.00%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.12 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.97 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.48 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.25 (s, 2H), 5.12 (dd, J = 12.9, 5.3 Hz, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.14 (s, 7H), 3.00 - 2.90 (m, 5H), 2.62 -2.50 (m, 9H), 2.30 (s, 3H), 2.04 (dd, J = 12.7, 6.5 Hz, 1H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 743.55.
표 B의 하기 화합물을 화합물 104의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 B.
Figure pct00500
Figure pct00501
Figure pct00502
Figure pct00503
Figure pct00504
실시예 3. 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)-N-(5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]펜틸)벤즈아미드 (화합물 21)의 제조
Figure pct00505
DMF (1.5 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤조산 (I-64, 20.00 mg, 0.057 mmol, 1.00 당량) 및 4-[(5-아미노펜틸)옥시]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (24.55 mg, 0.068 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 HATU (28.14 mg, 0.074 mmol, 1.30 당량) 및 DIEA (22.07 mg, 0.171 mmol, 3.00 당량)를 첨가하고, 반응물을 건조 질소의 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 직접 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)-N-(5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]펜틸)벤즈아미드 (화합물 21, 15.3mg, 37.7 5%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.92 - 7.81 (m, 1H), 7.78 (dd, J = 8.0, 2.9 Hz, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.53 - 7.36 (m, 4H), 7.33 - 7.20 (m, 1H), 6.90 (dt, J = 7.1, 3.2 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 5.06 (dd, J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.49 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.23 (dt, J = 21.8, 6.6 Hz, 4H), 2.94 - 2.71 (m, 1H), 2.55 - 2.40 (m, 1H), 2.10 - 1.94 (m, 1H), 1.83 - 1.74 (m, 2H), 1.68 - 1.40 (m, 4H), 1.27 - 1.06 (m, 1H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 693.30.
표 C1의 하기 화합물을 화합물 21의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 C1.
Figure pct00506
Figure pct00507
Figure pct00508
Figure pct00509
Figure pct00510
Figure pct00511
Figure pct00512
Figure pct00513
Figure pct00514
Figure pct00515
Figure pct00516
표 C2의 하기 화합물을 화합물 21의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 C2.
Figure pct00517
Figure pct00518
Figure pct00519
실시예 4. N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-10-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)아미노)데칸아미드 (화합물 75)의 제조
Figure pct00520
DMF (1 mL) 중 10-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)아미노)데칸산 (I-41, 25.00 mg, 0.056 mmol, 1.00 당량)의 용액에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 HATU (25.72 mg, 0.067 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (21.81 mg, 0.169 mmol, 3.00 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 2-(6-아미노-5-(4-(아미노메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (I-65, 18.96 mg, 0.056 mmol, 1.00 당량)을 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 다음, 물 (3 mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 3 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 75 (14.6 mg, 34.00%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d4) δ 7.76 (dd, J = 8.2, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.31 - 7.18 (m, 3H), 6.99 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 - 6.79 (m, 3H), 5.05 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.47 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.76 (dt, J = 8.4, 3.8 Hz, 2H), 3.20 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.91 - 2.77 (m, 2H), 2.64 (dd, J = 12.3, 6.8 Hz, 1H), 2.23 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.06 (q, J = 6.7, 5.9 Hz, 1H), 1.58 (d, J = 34.6 Hz, 2H), 1.30 (d, J = 2.7 Hz, 10H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 762.55.
표 D1의 하기 화합물을 화합물 75의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 D1.
Figure pct00521
Figure pct00522
Figure pct00523
Figure pct00524
Figure pct00525
Figure pct00526
Figure pct00527
Figure pct00528
Figure pct00529
Figure pct00530
Figure pct00531
Figure pct00532
Figure pct00533
실시예 5. N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]-5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아미노]펜탄아미드 (화합물 4)의 제조
Figure pct00534
단계 1: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산의 제조
Figure pct00535
NMP (1.00 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌-1,3-디온 (300.00 mg, 1.086 mmol, 1 당량) 및 5-아미노발레르산 (152.68 mg, 1.303 mmol, 1.20 당량)의 교반 용액에 DIEA (701.84 mg, 5.430 mmol, 5.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 다음, 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산 (87 mg, 20.60%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 373.
단계 2: N-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]-5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아미노]펜탄아미드 (화합물 4)의 제조
Figure pct00536
DMF (2.00 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산 (50.00 mg, 0.134 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 54.06 mg, 0.161 mmol, 1.20 당량)의 교반 용액에 DIEA (86.54 mg, 0.670 mmol, 5.00 당량) 및 HATU (101.84 mg, 0.268 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 4 (13.2 mg, 14.2%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.29 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.32 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.62 - 7.48 (m, 2H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.29 - 7.16 (m, 3H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.87 (td, J = 8.0, 7.3, 1.6 Hz, 2H), 6.63 - 6.48 (m, 3H), 5.05 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.24 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.31 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.11 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.94 - 2.80 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 2H), 2.18 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.02 (ddq, J = 10.0, 5.5, 2.7 Hz, 1H), 1.67 - 1.48 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 692.30.
실시예 6. N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 5)의 제조
Figure pct00537
단계 1: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산의 제조
Figure pct00538
DMF (1.00 mL) 중 5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]펜탄알, 40.00 mg, 0.112 mmol, 1.00 당량)의 용액에 실온에서 PDC (83.99 mg, 0.223 mmol, 2.00 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (30 mg, 66.55%)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 375.
단계 2: N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 5)의 제조
Figure pct00539
DMF (1.00 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (30.00 mg, 0.080 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 29.65 mg, 0.088 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 HATU (45.71 mg, 0.120 mmol, 1.50 당량) 및 DIEA (41.43 mg, 0.321 mmol, 4.00 당량)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 5 (6.6 mg, 11.69%)를 회백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.12 (s, 1H), 8.33 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.42 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 8.3, 2.5 Hz, 3H), 7.22 (t, J = 7.8 Hz, 3H), 6.87 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 6.51 (s, 2H), 5.12 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 4.24 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.12 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.87 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 17.8 Hz, 2H), 2.22 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.12 - 1.97 (m, 1H), 1.72 - 1.63 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 693.20.
실시예 7. N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)펜탄아미드 (화합물 1)의 제조
Figure pct00540
단계 1: 2-아미노-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로벤즈아미드의 제조
Figure pct00541
DMF (20 mL) 중 2-아미노-6-플루오로벤조산 (1.00 g, 6.446 mmol, 1.00 당량), 3-아미노피페리딘-2,6-디온 (908.57 mg, 7.091 mmol, 1.10 당량), HOBt (958.15 mg, 7.091 mmol, 1.1 당량) 및 EDC HCl (1.36 g, 7.091 mmol, 1.1 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (2.50 g, 19.339 mmol, 3.00 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반한 다음, EtOAc (100 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-아미노-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로벤즈아미드 (1.2 g, 63.16%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 266.
단계 2: 3-(5-플루오로-4-옥소벤조[d][1,2,3]트리아진-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
Figure pct00542
AcOH (10 mL) 중 2-아미노-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로벤즈아미드 (1.20 g, 4.524 mmol, 1.00 당량)의 용액에 NaNO2 (530.65 mg, 7.691 mmol, 1.70 당량)를 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반한 다음, 여과하여 3-(5-플루오로-4-옥소벤조[d][1,2,3]트리아진-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 (800 mg, 63.38%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 277.
단계 3: 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)펜탄산의 제조
Figure pct00543
DMF (5 mL) 중 3-(5-플루오로-4-옥소벤조[d][1,2,3]트리아진-3(4H)-일)피페리딘-2,6-디온 (200.00 mg, 0.724 mmol, 1.00 당량) 및 5-아미노발레르산 (127.23 mg, 1.086 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (280.73 mg, 2.172 mmol, 3.00 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 교반한 다음, EtOAc (20 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)펜탄산 (75 mg, 27.47%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 374.
단계 4: N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐) 피리다진-4-일)옥시)에틸) 벤질)-5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)펜탄아미드 (화합물 1)의 제조
Figure pct00544
DMF (1.5 mL) 중 5-((3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디히드로벤조[d][1,2,3]트리아진-5-일)아미노)펜탄산 (55.00 mg, 0.147 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 49.55 mg, 0.147 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 HATU (67.21 mg, 0.177 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (57.12 mg, 0.442 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 1 (11.4 mg, 11.2%)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.32 (brs, 1H), 11.18 (s, 1H), 8.41 - 8.09 (m, 2H), 7.97 - 7.72 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.34 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.30 - 7.10 (m, 4H), 7.05 - 6.77 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 5.87 (dd, J = 12.2, 5.3 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.24 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.25 (d, J = 5.6 Hz, 3H), 3.12 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.91 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.75 - 2.60 (m, 2H), 2.33 - 2.11 (m, 3H), 1.77 - 1.47 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 692.30.
표 D2의 하기 화합물을 화합물 1의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 D2.
Figure pct00545
실시예 8. N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄아미드 (화합물 2)의 제조
Figure pct00546
단계 1: tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜타노에이트의 제조
Figure pct00547
NMP (1.5 mL) 중 레날리도미드 (100.00 mg, 0.386 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트 (109.76 mg, 0.463 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (149.55 mg, 1.157 mmol, 3.00 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고, 이를 염수 (2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜타노에이트 (93 mg, 53.39%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 416.
단계 2: 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산의 제조
Figure pct00548
DCM 중 tert-부틸 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜타노에이트 (93.00 mg, 0.22 mmol)의 용액에 TFA (0.50 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 1 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산 (60 mg, 77.27%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 360.
단계 3: N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄아미드 (화합물 2)의 제조
Figure pct00549
DMF (1.0 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-4-일)아미노)펜탄산 (25.00 mg, 0.070 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 23.40 mg, 0.070 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 HATU (31.74 mg, 0.083 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (44.95 mg, 0.348 mmol, 5.00 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 2 (15.2 mg, 31.72%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.02 (s, 1H), 8.34 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.37 - 7.25 (m, 4H), 7.18 (d, J = 7.9 Hz, 3H), 6.95 (dd, J = 11.8, 7.6 Hz, 3H), 6.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.48 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.26 - 4.14 (m, 4H), 3.12 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 2.96 - 2.87 (m, 2H), 2.67 - 2.56 (m, 1H), 2.40 - 2.26 (m, 1H), 2.18 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.08 - 1.97 (m, 1H), 1.72 - 1.53 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 678.20.
표 D3의 하기 화합물을 화합물 2의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 D3.
Figure pct00550
실시예 9. 4-[[5-([[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]옥시]에틸)페닐]메틸]아미노)펜틸]옥시]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (화합물 9)의 제조
Figure pct00551
DMF (2.00 mL) 중 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 50.00 mg, 0.149 mmol, 1.00 당량) 및 5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]펜탄알 (63.92 mg, 0.178 mmol, 1.20 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (63.00 mg, 0.372 mmol, 2.50 당량) 및 AcOH (1 방울)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물 (10 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 9 (6.2 mg, 6.13%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.36 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 7.96 - 7.92 (m, 1H), 7.82 (dd, J = 8.5, 7.3 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.40 (m, 3H), 7.37 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.24 (td, J = 7.7, 1.6 Hz, 1H), 6.91 - 6.84 (m, 2H), 6.52 (s, 2H), 5.08 (dd, J = 12.7, 5.4 Hz, 1H), 4.47 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.15 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.97 - 2.82 (m, 2H), 2.76 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.61 (dd, J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.77 (p, J = 6.8 Hz, 2H), 1.61 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.51 (q, J = 7.1 Hz, 2H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 679.20.
표 D4의 하기 화합물을 화합물 9의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 D4.
Figure pct00552
Figure pct00553
Figure pct00554
Figure pct00555
Figure pct00556
Figure pct00557
Figure pct00558
Figure pct00559
Figure pct00560
Figure pct00561
Figure pct00562
Figure pct00563
Figure pct00564
Figure pct00565
Figure pct00566
Figure pct00567
Figure pct00568
Figure pct00569
Figure pct00570
Figure pct00571
Figure pct00572
Figure pct00573
실시예 10. 5-(4-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)에틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (화합물 3)의 제조
Figure pct00574
단계 1: 2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)아세트알데히드의 제조
Figure pct00575
디옥산 중 4 M HCl (1.50 mL) 중 5-[4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일]-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온 (I-60, 60.00 mg, 0.131 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 물 (1.50 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3을 사용하여 pH 8로 염기성화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 (50 mg, 96.22%)를 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 385.
단계 2: 5-(4-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)에틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (화합물 3)의 제조
Figure pct00576
MeOH (1.00 mL) 중 2-[4-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페라진-1-일]아세트알데히드 (2, 50.00 mg, 0.130 mmol, 1.00 당량) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 43.76 mg, 0.130 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 NaBH3CN (32.70 mg, 0.520 mmol, 4.00 당량)을 실온에서 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 3 (2.5 mg, 2.67%)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 8.57 (s, 2H), 7.78 - 7.70 (m, 1H), 7.66 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.51 - 7.31 (m, 6H), 7.29 - 6.86 (m, 4H), 5.13-5.03 (m, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.56 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.42 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.26 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.99 - 2.65 (m, 6H), 2.57 (dd, J = 13.8, 5.9 Hz, 6H), 2.17 - 2.07 (m, 1H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 705.45.
실시예 11. 1-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-3-(3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)우레아 (화합물 8)의 제조
Figure pct00577
단계 1: tert-부틸 (3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)카르바메이트의 제조
Figure pct00578
DMF (3.0 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-히드록시이소인돌-1,3-디온 (100.00 mg, 0.365 mmol, 1.00 당량) 및 tert-부틸 N-(3-브로모프로필)카르바메이트 (95.52 mg, 0.401 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 KI (6.05 mg, 0.036 mmol, 0.10 당량) 및 KHCO3 (73.01 mg, 0.729 mmol, 2.00 당량)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 65℃에서 밤새 교반한 다음, EtOAc (20 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)카르바메이트 (94 mg, 58.55%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 432.
단계 2: 4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
Figure pct00579
DCM (2.0 mL) 중 tert-부틸 (3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)카르바메이트 (94.00 mg, 0.218 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (1.00 mL)를 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (40 mg, 62.34%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 332.
단계 3: N-(3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)-1H-이미다졸-1-카르복스아미드의 제조
Figure pct00580
THF (1.0 mL) 중 4-(3-아미노프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 (40.00 mg, 0.121 mmol, 1.00 당량)의 용액을 카르보닐디이미다졸 (39.15 mg, 0.241 mmol, 2.00 당량)로 0℃에서 건조 질소의 분위기 하에 처리한 다음, TEA (12.22 mg, 0.121 mmol, 1.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조 N-(3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)-1H-이미다졸-1-카르복스아미드 (80 mg)를 백색 고체로서 수득하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 426.
단계 4: 1-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-3-(3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)우레아 (화합물 8)의 제조
Figure pct00581
DCM (4.0 mL) 중 N-(3-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)프로필)-1H-이미다졸-1-카르복스아미드 (80.00 mg, 0.188 mmol, 1.00 당량, 조 물질) 및 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (I-65, 40 mg, 0.188 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 TEA (40 mg, 0.564 mmol, 3.0 당량)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 8 (20.4 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.13 (s, 1H), 7.82 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.49 (dd, J = 13.6, 7.9 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 7.8 Hz, 4H), 7.20 (d, J = 7.7 Hz, 3H), 6.96 (q, J = 7.7 Hz, 2H), 6.20 (d, J = 39.4 Hz, 2H), 5.09 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.50 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.31 - 4.09 (m, 4H), 3.25 - 3.17 (m, 5H), 2.94 - 2.73 (m, 2H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.09 - 1.81 (m, 3H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 694.20.
실시예 12. (2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)페닐]포름아미도]데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20)의 제조
Figure pct00582
DMF (1.0 mL) 중 (2S,4R)-1-((S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-1, 48 mg, 0.08 mmol, 1.2 당량)의 교반 용액에 HATU (30 mg, 0.080 mmol, 1.20 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)벤조산 (I-66, 40 mg, 0.07 mmol, 1.0 당량) 및 DIEA (26 mg, 0.2 mmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이어서 역상 정제용 HPLC에 의해 직접 정제하여 화합물 20 (3.6 mg, 5.71%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.31 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.58 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.34 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.91 - 7.84 (m, 2H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 4H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 6.91 - 6.87 (m, 2H), 6.12 (s, 2H), 5.14 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.22-3.20 (m, 2H), 2.94 (s, 3H), 2.86 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.29 - 2.22 (m, 1H), 2.14 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 2.00 (m, 1H), 1.98 - 1.87 (m, 1H), 1.49 - 1.47 (m, 4H), 1.27 - 1.24 (m, 12H), 0.93 (s, 9H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 946.7
표 D5의 하기 화합물을 화합물 20의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 D5.
Figure pct00583
Figure pct00584
Figure pct00585
실시예 13. N-(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-일]에틸)-9-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아미노]노난아미드 (화합물 97)의 제조
Figure pct00586
DMF (2.00 mL) 중 9-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]아미노]노난산 (I-35, 110.00 mg, 0.256 mmol, 1.00 당량)의 용액에 HATU (126.60 mg, 0.333 mmol, 1.30 당량), 2-[6-아미노-5-[4-(2-아미노에틸)피페라진-1-일]피리다진-3-일]페놀 (I-67, 96.63 mg, 0.307 mmol, 1.20 당량), 및 DIEA (99.31 mg, 0.768 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서 생성된 혼합물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 97 (59.4 mg, 31.95%)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.54 - 13.60 (m, 1H), 11.11 (s, 1H), 7.92 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 1H), 7.72 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.6, 7.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.24 (td, J = 7.6, 1.5 Hz, 1H), 7.18 - 6.98 (m, 2H), 6.98 - 6.80 (m, 2H), 6.51 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 6.25 (s, 2H), 5.05 (dd, J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 3.33 - 3.20 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 3.00 - 2.82 (m, 1H), 2.72 - 2.57 (m, 5H), 2.50 - 2.40 (m, 2H), 2.06 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 1.66 - 1.37 (m, 4H), 1.39 - 1.14 (m, 9H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 726.30
표 E1의 하기 화합물을 화합물 97의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E1.
Figure pct00587
Figure pct00588
Figure pct00589
실시예 14. N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)옥시)-N-메틸펜탄아미드 (화합물 10)의 제조
Figure pct00590
DMF (1.0 mL) 중 I-68 (25.00 mg, 0.071 mmol, 1.00 당량) 및 5-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]펜탄산 (I-30, 26.71 mg, 0.071 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 건조 질소의 분위기 하에 실온에서 DIEA (46.10 mg, 0.357 mmol, 5.00 당량) 및 HATU (32.55 mg, 0.086 mmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 10 (16.5 mg, 32.87%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.05 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 7.96 - 7.74 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.57 - 7.32 (m, 4H), 7.27 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 6.89 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.74 (s, 2H), 5.08 (dd, J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 4.69 - 4.41 (m, 4H), 4.36 - 4.11 (m, 2H), 3.13 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.84 (d, J = 33.9 Hz, 4H), 2.61 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.45 (d, J = 8.9 Hz, 3H), 2.09 - 2.01 (m, 1H), 1.89 - 1.65 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 707.25.
표 E2의 하기 화합물을 화합물 10의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E2.
Figure pct00591
실시예 15. N-[(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-카르보닐]시클로프로필)메틸]-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미드 (화합물 78)의 제조
Figure pct00592
DMF (1.4 mL) 중 2-[6-아미노-5-(피페라진-1-일)피리다진-3-일]페놀 (25.60 mg, 0.094 mmol, 1.00 당량) 및 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실산 (I-42, 44.56 mg, 0.104 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 HATU (43.05 mg, 0.113 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (60.97 mg, 0.472 mmol, 5.00 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 화합물 78 (21 mg, 31.53%)을 회백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.07 (brs, 1H), 11.13 (s, 1H), 8.10 - 7.62 (m, 3H), 7.62 - 7.04 (m, 4H), 6.87 (dd, J = 12.4, 7.5 Hz, 2H), 6.44 (s, 2H), 5.11 (dd, J = 12.5, 5.5 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.83 (d, J = 18.8 Hz, 3H), 3.62-3.11 (s, 8H), 3.25 - 2.69 (m, 1H), 2.10 (d, J = 12.4 Hz, 3H), 1.53 (s, 1H), 0.95 (d, J = 25.2 Hz, 2H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 683.30.
실시예 16. N-[(2-[4-[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일]피페라진-1-카르보닐]시클로프로필)메틸]-2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미드 (화합물 77)의 제조
Figure pct00593
DMF (1.4 mL) 중 2-[6-아미노-5-(피페라진-1-일)피리다진-3-일]페놀 (25.60 mg, 0.094 mmol, 1.00 당량) 및 2-[(2-[[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-4-일]옥시]아세트아미도)메틸]시클로프로판-1-카르복실산 (I-43, 44.56 mg, 0.104 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 HATU (43.05 mg, 0.113 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (60.97 mg, 0.472 mmol, 5.00 당량)를 실온에서 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 건조 질소의 분위기 하에 1시간 동안 교반한 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 직접 정제하여 화합물 77 (12.5 mg, 18.73%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.14 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 21.1, 8.1 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.41 (s, 2H), 5.10 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.68 (s, 1H), 3.57 - 3.42 (m, 3H), 3.31-3.14 (m, 4H), 2.95 - 2.80 (m, 1H), 2.68 (d, J = 30.8 Hz, 1H), 2.10 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 1.55 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 0.99 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 0.95 - 0.74 (m, 1H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 683.15.
실시예 17. (2S,4R)-1-((S)-2-(10-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 26)의 제조
Figure pct00594
단계 1: 2-(6-아미노-5-(4-(히드록시메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀의 제조
Figure pct00595
THF (5 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤조산 (I-64, 100.00 mg, 0.28 mmol, 1.00 당량)의 용액에 THF 중 보란의 용액 (10.00 mL, 104.49 mmol, 367.14 당량)을 첨가하였다. 이를 25℃에서 8시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 물 (10 mL)로 세척하여 2-(6-아미노-5-(4-(히드록시메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (87.0 mg, 90%)을 갈색 고체로서 수득하였다. 이러한 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 337.10.
단계 2: 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤즈알데히드의 제조
Figure pct00596
DCM (10 mL) 중 2-(6-아미노-5-(4-(히드록시메틸)페네톡시)피리다진-3-일)페놀 (50.00 mg, 0.15 mmol, 1.0 당량)의 혼합물을 제조하고, DMP (12.57 mg, 0.030 mmol, 2.0 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 밤새 교반한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 이를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피에 의해 석유 에테르/EtOAc 50%에서 100%로 용리시키면서 정제하여 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤즈알데히드 (25.1 mg, 50%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 336.25.
단계 3: (2S,4R)-1-((S)-2-(10-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 26)의 제조
Figure pct00597
DMF (2 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤즈알데히드 (25.00 mg, 0.075 mmol, 1.0 당량)의 교반 용액에 건조 질소의 분위기 하에 (2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (I-1, 49.19 mg, 0.082 mmol, 1.10 당량) 및 AcOH (0.23 mg, 0.14 mmol, 0.05 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, NaBH3CN (9.42 mg, 0.15 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 물 (5 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (15 mL)로 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (2S,4R)-1-((S)-2-(10-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 26, 10.3 mg, 15%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.37(brs, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.59 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.50 - 7.31 (m, 7H), 7.30 - 7.12 (m, 1H), 6.94 - 6.81 (m, 2H), 6.50 (s, 2H), 5.12 (s, 1H), 4.78 - 4.02 (m, 7H), 3.81 (s, 1H), 3.71-3.60 (m, 1H), 3.13 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.68-2.60 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.36 - 1.79 (m, 5H), 1.60-1.46 (m, 4H), 1.24-1.03 (m, 11H), 0.94 (s, 9H). LCMS (ESI) m/z: [M+2H]2+ = 460.45.
표 E3의 하기 화합물을 화합물 26의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E3.
Figure pct00598
Figure pct00599
Figure pct00600
Figure pct00601
Figure pct00602
((2S,4R)-1-((S)-2-(10-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤질)아미노)데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 131)의 제조
Figure pct00603
단계 1: (2S,4R)-1-((S)-2-(10-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤질)아미노)데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 131)의 제조.
Figure pct00604
DMSO (1.00 mL) 중 4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)(메틸)아미노)에틸)벤즈알데히드 (20.00 mg, 0.057 mmol, 1.00 당량) 및 (2S,4R)-1-[(2S)-2-(10-아미노데칸아미도)-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (41.32 mg, 0.069 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 AcOH (10.34 mg, 0.172 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, NaBH(OAc)3 (73.00 mg, 0.344 mmol, 6.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 역 플래쉬 크로마토그래피 칼럼 (엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 칼럼, 5um,19*150mm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 10분 내에 40 B에서 50 B; 254/220 nm; RT1:9.03)에 의해 정제하였다. 표제 화합물 (2.1mg, 3.62%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.34 (br s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.56 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.79 (m, 2H), 7.47 - 7.34 (m, 5H), 7.28 - 7.15 (m, 5H), 6.91 - 6.85 (m, 2H), 6.09 (s, 2H), 5.12 (s, 1H), 4.54 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.21 (dd, J = 15.9, 5.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.58 (m, 4H), 3.47- 3.35( m, 2H) , 2.94 (s, 3H), 2.80 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.44 (s, 4H), 2.35 - 1.82 (m, 5H), 1.52 - 1.39 (m, 3H), 1.23 (s, 11H), 0.93 (s, 9H). LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =932.50.
표 E4의 하기 화합물을 화합물 131의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E4.
Figure pct00605
Figure pct00606
N'-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸)페닐]메틸]-N-[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]데칸디아미드 (화합물 132)의 제조
Figure pct00607
단계 1: N'-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸페닐]메틸]-N-[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]데칸디아미드 (화합물 132)의 제조
Figure pct00608
DMF (1.00 mL) 중 10-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-10-옥소데칸산 (9.99 mg, 0.016 mmol, 1.00 당량), EDCI (6.23 mg, 0.033 mmol, 2.00 당량), HOBt (4.39 mg, 0.033 mmol, 2.00 당량), 및 DIEA (6.30 mg, 0.049 mmol, 3.00 당량)의 용액을 25℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서 DMF (0.5 mL) 중 2-[6-아미노-5-([2-[4-(아미노메틸)페닐]에틸](메틸)아미노)피리다진-3-일]페놀 (5.68 mg, 0.016 mmol, 1.00 당량)을 25℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 엑스셀렉트 CSH 정제용 C18 OBD 칼럼, 19*250mm,5um; 이동상 A:물 (0.05%FA), 이동상 B:ACN; 유량:25 mL/분)에 의해 정제하여 N'-[[4-(2-[[3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일](메틸)아미노]에틸페닐]메틸]-N-[(2S)-1-[(2S,4R)-4-히드록시-2-([[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]카르바모일)피롤리딘-1-일]-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일]데칸디아미드 (화합물 132, 4.2 mg, 27.31%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.34 (brs, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.57 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.20 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.95 - 7.80 (m, 2H), 7.48 - 7.34 (m, 5H), 7.30 - 7.09 (m, 5H), 6.95 - 6.83 (m, 2H), 6.10 (s, 2H), 5.13 (s, 1H), 4.55 - 4.35 (m, 4H), 4.25 - 4.21 (m, 3H), 3.66 (s, 2H), 3.39 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 2.94 (s, 3H), 2.79 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.34 - 2.18 (m, 1H), 2.11 - 2.01 (m, 4H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.49 (s, 4H), 1.27 - 1.20 (m, 8H), 0.94 (s, 9H).LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 946.45.
표 E5의 하기 화합물을 화합물 132의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E5.
Figure pct00609
Figure pct00610
Figure pct00611
Figure pct00612
Figure pct00613
Figure pct00614
N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 128) 및 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 129)의 제조
Figure pct00615
단계 1: N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 128) 및 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 129)의 제조
Figure pct00616
DMF (1.00 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (20.0 mg, 0.055 mmol, 1.00 당량)의 용액에 HOBT (15.0 mg, 0.111 mmol, 2.00 당량) 및 EDCI (21.2 mg, 0.111 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (18.6 mg, 0.055 mmol, 1.00 당량) 및 DIEA (21.5 mg, 0.166 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건: 칼럼: 엑스셀렉트 CSH F-페닐 OBD 칼럼, 19*250mm,5um; 이동상 A:물 (0.05% FA), 이동상 B:ACN; 유량:25 mL/분; 구배: 10분 내에 24% B에서 40% B 254/220 nm; RT:8.60을 사용하여 정제하여 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 128, 10.4 mg, 26.2%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.37 (s, 1H), 10.98 (s, 1H), 8.32 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.20 (m, 5H), 6.87 (m, 2H), 6.51 (s, 2H), 5.11 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 4.30 - 4.18 (m, 3H), 4.11 - 4.01 (m, 2H), 3.12 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.01 - 2.82 (m, 1H), 2.66 - 2.54 (m, 1H), 2.44 - 2.30 (m, 1H), 2.22 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.05 - 1.93 (m, 1H), 1.84-1.61 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 679.35.
DMF (1.00 mL) 중 5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄산 (15.0 mg, 0.042 mmol, 1.00 당량)의 용액에 HOBT (11.2 mg, 0.083 mmol, 2.00 당량) 및 EDCI (15.9 mg, 0.083 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 2-(6-아미노-5-[2-[4-(아미노메틸)페닐]에톡시]피리다진-3-일)페놀 (14.0 mg, 0.042 mmol, 1.00 당량) 및 DIEA (16.1 mg, 0.125 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건: 칼럼: 제미니-NX C18 AXAI 패킹됨, 21.2*150mm 5um; 이동상 A:물 (0.05% FA), 이동상 B:ACN; 유량:25 mL/분; 구배:10분 내 35% B에서 53% B; 254/220 nm; RT:9.85를 사용하여 정제하여 화합물 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-5-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)옥시)펜탄아미드 (화합물 129, 10.3 mg, 35.5%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 8.35 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.69 - 7.58 (m, 3H), 7.48 (s, 1H), 7.43 - 7.29 (m, 4H), 7.24 - 7.12 (m, 3H), 7.04 (dd, J = 8.3, 2.8 Hz, 2H), 6.96 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.52 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.32 - 4.20 (m, 3H), 4.12 - 4.02 (m, 2H), 3.14 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.00 - 2.82 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 1H), 2.43-2.32 (m, 1H), 2.22 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.81-1.60 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =679.40.
표 E6의 하기 화합물을 화합물 129의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E6.
Figure pct00617
(2S,4R)-1-((S)-2-(3-(6-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)프로판아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 196)의 제조
Figure pct00618
단계 1: (2S,4R)-1-((S)-2-(3-(6-(2-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-2-옥소에틸)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)프로판아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 196)의 제조.
Figure pct00619
MeOH (3.00 mL) 중 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)-2-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)아세트아미드 (20.00 mg, 0.042 mmol, 1.00 당량) 및 (2S,4R)-1-((S)-2-아크릴아미도-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (20.42 mg, 0.042 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TEA (0.20 mL)를 60℃에서 적가하였다. 10시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 플래쉬에 의해 하기 조건 (칼럼: 엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 칼럼, 5um,19*150mm; 이동상 A:물 (10 mM NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량:25 mL/분; 구배: 10분 내 32 B에서 47 B, 분 내 47 B에서 B, 분 내 B에서 B, 분 내 B에서 B, 분 내 B에서 B; 254/220 nm/)을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (11.5 mg, 27.97%)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, D2O 한 방울) δ 9.02 - 8.88 (m, 1H), 7.96 - 7.88 (m, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 1H), 7.47 - 7.30 (m, 4H), 7.37 - 7.21 (m, 2H), 7.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.21 - 7.11 (m, 2H), 6.96 - 6.82 (m, 2H), 4.53 - 4.28 (m, 6H), 4.27 - 4.16 (m, 3H), 3.73 - 3.63 (m, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 2H), 3.34 - 3.21 (m, 4H), 3.23 - 3.10 (m, 6H), 3.10 - 2.92 (m, 2H), 2.75 - 2.52 (m, 3H), 2.49 - 2.28 (m, 2H), 2.23 - 2.00 (m, 1H), 1.99 - 1.80 (m, 1H), 0.93 (s, 9H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =959.
표 E7의 하기 화합물을 화합물 196의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E7.
Figure pct00620
Figure pct00621
Figure pct00622
Figure pct00623
Figure pct00624
Figure pct00625
Figure pct00626
Figure pct00627
Figure pct00628
Figure pct00629
Figure pct00630
(2S,4R)-1-((S)-2-(2-(9-(3-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-3-옥소프로필)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 266)의 제조.
Figure pct00631
단계 1: tert-부틸 9-(2-에톡시-2-옥소에틸)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트의 제조
Figure pct00632
DMF (6.00 mL) 중 tert-부틸 3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (200.00 mg, 0.786 mmol, 1.00 당량) 및 에틸 브로모아세테이트 (131.30 mg, 0.786 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 K2CO3 (217.33 mg, 1.572 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 물 (100.00 ml)을 첨가하였다. EtOAc (3 x 100 mL)로 추출한 후, 합한 유기 층을 염수 (2 x 30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물 (310 mg, 조 물질)을 담황색 오일로서 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계에 직접 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 340.46
단계 2: 2-(9-(tert-부톡시카르보닐)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트산의 제조
Figure pct00633
MeOH (5.00 mL) 중 tert-부틸 9-(2-에톡시-2-옥소에틸)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (312.00 mg, 0.916 mmol, 1.00 당량) 및 LiOH (219.46 mg, 9.164 mmol, 10.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 H2O (2.50 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0.5M HCl을 사용하여 pH 6으로 산성화시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EA (3 x 10 mL)로 연화처리하여 표제 화합물 (132 mg, 46.11%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 312.41.
단계 3: tert-부틸 9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-2-옥소에틸)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트의 제조
Figure pct00634
DMF (4.00 mL) 중 2-(9-(tert-부톡시카르보닐)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트산 (100.00 mg, 0.320 mmol, 1.00 당량) 및 (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디메틸부타노일]-4-히드록시-N-[[4-(4-메틸-1,3-티아졸-5-일)페닐]메틸]피롤리딘-2-카르복스아미드 (137.82 mg, 0.320 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 HATU (146.05 mg, 0.384 mmol, 1.20 당량) 및 DIEA (206.85 mg, 1.600 mmol, 5.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축시키고, 역 플래쉬 크로마토그래피 (물 중 0-100% 아세토니트릴로 20분에 걸쳐 용리시킴)에 의해 정제하여 표제 화합물 (75 mg, 17.45%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 724.96.
단계 4: (2S,4R)-1-((S)-2-(2-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드의 제조
Figure pct00635
DCM (3.00 mL) 중 tert-부틸 9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-히드록시-2-((4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)카르바모일)피롤리딘-1-일)-3,3-디메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-2-옥소에틸)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (75.00 mg, 0.103 mmol, 1.00 당량)의 교반 용액에 실온에서 TFA (1.00 mL, 13.463 mmol, 130.14 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DMF (2.00 mL) 중에 용해시키고, 역 플래쉬 크로마토그래피 (20분에 걸쳐 물 중 0-100% 아세토니트릴로 용리함)에 의해 정제하여 표제 화합물 (43 mg, 46.56%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 624.85
단계 5: (2S,4R)-1-((S)-2-(2-(9-(3-((4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아미노)-3-옥소프로필)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (화합물 266)의 제조.
Figure pct00636
MeOH (1.00 mL) 중 (2S,4R)-1-((S)-2-(2-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-4-히드록시-N-(4-(4-메틸티아졸-5-일)벤질)피롤리딘-2-카르복스아미드 (25.00 mg, 0.040 mmol, 1.00 당량) 및 N-(4-(2-((3-아미노-6-(2-히드록시페닐)피리다진-4-일)옥시)에틸)벤질)아크릴아미드 (15.62 mg, 0.040 mmol, 1.00 당량)의 교반 혼합물에 실온에서 TEA (12.15 mg, 0.120 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 여과물을 정제용 HPLC (엑스브리지 정제용 C18 OBD 칼럼, 10 mM 수성 탄산암모늄 중 35-50% 아세토니트릴로 용리)에 의해 정제하여 표제 화합물 (7.2 mg, 17.42%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.37 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.60 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.41 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.41 (q, J = 8.3 Hz, 4H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.26 - 7.18 (m, 3H), 6.86 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 6.49 (s, 2H), 5.14 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.52 - 4.33 (m, 6H), 4.26 (dd, J = 13.2, 5.7 Hz, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 2H), 3.12 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.00 - 2.84 (m, 2H), 2.60 - 2.53 (m, 2H), 2.46 - 2.42 (m, 4H), 2.42 - 2.35 (m, 3H), 2.32 - 2.23 (m, 6H), 2.09 - 2.01 (m, 1H), 1.94 - 1.85 (m, 1H), 1.48 - 1.31 (m, 8H), 0.93 (s, 9H). LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 1015.65.
표 E8의 하기 화합물을 화합물 266의 제조에 사용된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조하였다.
표 E8.
Figure pct00637
Figure pct00638
실시예 18. 본 발명의 화합물에 의한 BRM 및 BRG1의 분해
본 실시예는 세포-기반 분해 검정에서 HiBit-BRM 또는 HiBit-BRG1 융합 단백질을 분해하는 본 개시내용의 화합물의 능력을 입증한다.
절차: HiBiT-BRM을 발현하는 안정한 HeLa 세포주를 생성하였다. 제0일에, 5000개 세포를 384-웰 세포 배양 플레이트의 각각의 웰 내로 배지 40 μL 중에 시딩하였다. 제1일에, 세포를 120 nL DMSO 또는 120 nL의 3배 연속 DMSO-희석된 화합물 (최종 최고 용량으로서 30 μM을 사용하여 이중으로 10 포인트)로 처리하였다. 이어서 플레이트를 표준 조직 배양 인큐베이터에서 24시간 동안 인큐베이션하고, 실온에서 15분 동안 평형화시켰다. 나노-글로(Nano-Glo) HiBiT 용해 검출 시스템 (프로메가(Promega) N3050) 시약을 새로 제조하고, 20 ul을 각 웰에 첨가하였다. 이러한 LgBit-함유 시약의 첨가 시, HiBiT 및 LgBiT 단백질은 회합하여 발광 나노BiT 루시페라제를 형성한다. 플레이트를 실온에서 10분 동안 진탕시키고, 엔비전 플레이트 판독기 (퍼킨엘머(PerkinElmer))를 사용하여 생물발광을 판독하였다.
BRG1 분해의 측정을 위해, HiBit-BRG1 및 LgBit를 발현하는 안정한 HeLa 세포주를 생성하였다. 이어서 상기와 동일한 프로토콜을 따랐다.
분해%는 하기 식을 사용하여 계산하였다: %분해 = 100%-100% x (Lum샘플 - LumLC) / (LumHC - LumLC). DMSO 처리된 세포를 고 대조군 (HC)으로서 사용하고, 2 μM의 공지된 BRM/BRG1 분해제 표준 처리된 세포를 저 대조군 (LC)으로서 사용하였다. 데이터를 4 파라미터, 비-선형 곡선 피트에 피팅하여 표 3에 제시된 바와 같이 IC50 (μM) 값을 계산하였다.
결과: 하기 표 3에 제시된 바와 같이, 본 발명의 화합물은 BRM 및 BRG1 둘 다를 분해하였다.
표 3.
Figure pct00639
Figure pct00640
Figure pct00641
Figure pct00642
Figure pct00643
Figure pct00644
Figure pct00645
Figure pct00646
"+"는 ≥ 1000 nM의 억제 효과를 나타내고; "++"는 ≥ 100 nM의 억제 효과를 나타내고;
"+++"는 ≥ 10 nM의 억제 효과를 나타내고; "++++"는 < 10 nM의 억제 효과를 나타내고;
"NT"는 시험되지 않았음을 나타내고; "A"는 최대 분해 ≥ 75%를 나타내고;
"B"는 최대 분해 ≥ 50%를 나타내고; "C"는 최대 분해 < 50%를 나타낸다.
다른 실시양태
본 명세서에서 언급된 모든 공개, 특허 및 특허 출원은 각각의 개별 공개, 특허 또는 특허 출원이 구체적으로 및 개별적으로 그 전문이 참조로 포함되는 것으로 나타내어진 것과 동일한 정도로 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 본 출원에서의 용어가 본원에 참조로 포함된 문헌에서 상이하게 정의된 것으로 밝혀진 경우에, 본원에 제공된 정의가 용어에 대한 정의로서의 역할을 할 것이다.
본 발명이 그의 구체적 실시양태와 관련하여 기재되었지만, 이는 본 발명은 추가의 변형이 가능하고, 본 출원은 일반적으로 본 발명의 원리를 따르고, 본 발명이 속하는 기술 분야 내에서 공지되거나 통상의 실시 내에 속하고 상기 제시된 본질적인 특징에 적용될 수 있는 본 개시내용으로부터의 이탈을 포함하는 본 발명의 임의의 변경, 사용, 또는 개조를 포함하도록 의도되고, 청구범위의 범주 내에 따름이 이해된다.
기타 실시양태는 특허청구범위에 있다.

Claims (131)

  1. 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00647

    여기서
    X1은 O 또는 NR2이고;
    각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
    k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    m은 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    R1은 할로 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
    R2는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
    L1은 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌이고;
    L은
    Figure pct00648
    의 구조를 포함하는 링커이고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이고;
    L2는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌이고;
    각각의 L3은 독립적으로, -O-, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C20 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
    D는 분해 모이어티이다.
  2. 제1항에 있어서, m이 0인 화합물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, X1이 O인 화합물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, X1이 NR2인 화합물.
  5. 제4항에 있어서, R2가 임의로 치환된 C1-C6 알킬인 화합물.
  6. 제5항에 있어서, R2가 메틸 또는 에틸인 화합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, L1이
    Figure pct00649
    인 화합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, L2가 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌인 화합물.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, L2가 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌인 화합물.
  10. 제9항에 있어서, L2가
    Figure pct00650
    인 화합물.
  11. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, L2가 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌인 화합물.
  12. 제11항에 있어서, L2가
    Figure pct00651

    Figure pct00652
    인 화합물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, n이 1인 화합물.
  14. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, n이 2인 화합물.
  15. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, n이 3인 화합물.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 L3이 독립적으로, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌인 화합물.
  17. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 L3이 독립적으로, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌인 화합물.
  18. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 L3이 독립적으로
    Figure pct00653

    Figure pct00654
    인 화합물.
  19. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, n이 0인 화합물.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, k가 0, 1, 또는 2인 화합물.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 X2가 독립적으로 플루오린 또는 염소인 화합물.
  22. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 Ib의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염인 화합물:
    Figure pct00655
    .
  23. 화학식 II의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00656

    여기서
    1개의 Z1 및 1개의 Z2는 조합되어 임의로 치환된 C1-C4 알킬렌을 형성하고, 나머지 Z1 및 Z2는 각각 수소이고;
    각각의 X2는 독립적으로 할로겐이고;
    k는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    L은
    Figure pct00657
    의 구조를 갖는 링커이고;
    q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    L4는 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴렌이고;
    각각의 L5는 독립적으로 -O-, 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌, 또는 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌이고;
    D는 분해 모이어티이다.
  24. 제23항에 있어서, q가 1인 화합물.
  25. 제23항에 있어서, q가 2인 화합물.
  26. 제23항에 있어서, q가 3인 화합물.
  27. 제23항에 있어서, q가 4인 화합물.
  28. 제23항에 있어서, L이
    Figure pct00658
    인 화합물.
  29. 제23항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, L4가 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌인 화합물.
  30. 제29항에 있어서, L4가 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌인 화합물.
  31. 제30항에 있어서, L4가
    Figure pct00659
    인 화합물.
  32. 제29항에 있어서, L4가 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌인 화합물.
  33. 제32항에 있어서, L4가
    Figure pct00660
    인 화합물.
  34. 제23항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 L5가 독립적으로 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌, 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C6 알킬렌인 화합물.
  35. 제23항에 있어서, q가 0인 화합물.
  36. 제23항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, L5가 부재하는 것인 화합물.
  37. 제23항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 L5가 독립적으로 -O-, 임의로 치환된 C1-C6 알킬렌, 임의로 치환된 C1-C20 헤테로알킬렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴렌-C1-C6 알킬렌 또는 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴렌-C1-C20 알킬렌인 화합물.
  38. 제23항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, (L5)q가
    Figure pct00661
    인 화합물.
  39. 제23항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 IIa의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염인 화합물:
    Figure pct00662
    .
  40. 제23항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염인 화합물:
    Figure pct00663
    .
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, D가 유비퀴틴 리가제 결합 모이어티인 분해 모이어티인 화합물.
  42. 제41항에 있어서, 유비퀴틴 리가제 결합 모이어티가 세레블론 리간드, IAP (아폽토시스 억제제) 리간드, 마우스 이중 미세염색체 2 상동체 (MDM2) 또는 폰 히펠-린다우 리간드, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함하는 것인 화합물.
  43. 제41항 또는 제42항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00664

    여기서
    Y1은
    Figure pct00665
    이고;
    RA5는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
    RA6은 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고; RA7은 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이거나; 또는 RA6 및 RA7은 각각이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 임의로 치환된 C3-C6 카르보시클릴 또는 임의로 치환된 C2-C5 헤테로시클릴을 형성하거나; 또는 RA6 및 RA7은 각각이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어 임의로 치환된 C3-C6 카르보시클릴 또는 임의로 치환된 C2-C5 헤테로시클릴을 형성하고;
    RA8은 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
    각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4는 독립적으로 H, A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 임의로 치환된 -O-C3-C6 카르보시클릴, 히드록실, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이거나; 또는 RA1 및 RA2, RA2 및 RA3, 및/또는 RA3 및 RA4는 각각이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 조합되어
    Figure pct00666
    을 형성하고;
    Figure pct00667
    은 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 또는 C2-C9 헤테로시클릴이고, 이들 중 임의의 것은 A2로 임의로 치환되고,
    여기서 RA1, RA2, RA3, 및 RA4 중 1개가 A2이거나, 또는
    Figure pct00668
    이 A2로 치환되고;
    A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이다.
  44. 제43항에 있어서, RA5가 H 또는
    Figure pct00669
    인 화합물.
  45. 제43항에 있어서, RA5가 H인 화합물.
  46. 제43항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RA1, RA2, RA3, 및 RA4가 독립적으로 H 또는 A2인 화합물.
  47. 제46항에 있어서, RA1이 A2이고, 각각의 RA2, RA3, 및 RA4가 H인 화합물.
  48. 제46항에 있어서, RA2가 A2이고, 각각의 RA1, RA3, 및 RA4가 H인 화합물.
  49. 제46항에 있어서, RA3이 A2이고, 각각의 RA1, RA2, 및 RA4가 H인 화합물.
  50. 제46항에 있어서, RA4가 A2이고, 각각의 RA1, RA2, 및 RA3이 H인 화합물.
  51. 제43항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이
    Figure pct00670
    인 화합물.
  52. 제48항에 있어서, RA6이 H인 화합물.
  53. 제48항 또는 제49항에 있어서, RA7이 H인 화합물.
  54. 제43항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이
    Figure pct00671
    인 화합물.
  55. 제54항에 있어서, RA8이 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬인 화합물.
  56. 제55항에 있어서, RA8이 H 또는
    Figure pct00672
    인 화합물.
  57. 제56항에 있어서, RA8이
    Figure pct00673
    인 화합물.
  58. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A2의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00674
    .
  59. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A4의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00675
    .
  60. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A5의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00676
    .
  61. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A6의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00677
    .
  62. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A8의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00678
    .
  63. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 A10의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 화합물:
    Figure pct00679
    .
  64. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가
    Figure pct00680
    의 구조를 포함하는 것인 화합물.
  65. 제43항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가
    Figure pct00681
    의 구조를 포함하는 것인 화합물.
  66. 제41항 또는 제42항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 C의 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00682

    여기서
    L6은 -N(RB1)(RB2),
    Figure pct00683
    이고;
    RB1은 H, A2, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
    RB2는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
    RB3은 A2, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
    RB4는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C3-C10 카르보시클릴, 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬 C6-C10 아릴이고;
    RB5는 H, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬이고;
    v2는 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    각각의 RB6은 독립적으로 A2, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 임의로 치환된 C1-C6 헤테로알킬, 임의로 치환된 C3-C10 카르보시클릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로시클릴, 임의로 치환된 C6-C10 아릴, 임의로 치환된 C2-C9 헤테로아릴, 임의로 치환된 C2-C6 알케닐, 임의로 치환된 C2-C6 헤테로알케닐, 히드록시, 티올, 또는 임의로 치환된 아미노이고;
    각각의 RB7 및 RB8은 독립적으로 H, 할로겐, 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 또는 임의로 치환된 C6-C10 아릴이고;
    RB9는 H 또는 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고;
    A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합이고;
    여기서 RB1, RB3, 및 RB6 중 단지 1개가 A2이다.
  67. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 C1의 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00684
    .
  68. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 화학식 C2의 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00685
    .
  69. 제66항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, RB9가 임의로 치환된 C1-C6 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  70. 제69항에 있어서, RB9가 메틸인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  71. 제66항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, RB9가 (S)-입체생성 중심에 결합되는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  72. 제66항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, RB9가 수소인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  73. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 하기 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00686
    .
  74. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 하기 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00687
    .
  75. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 하기 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00688
    .
  76. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가 하기 구조를 갖는 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
    Figure pct00689
    .
  77. 제66항에 있어서, 분해 모이어티가
    Figure pct00690
    인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  78. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 분해 모이어티가
    Figure pct00691
    의 구조를 포함하고, 여기서 A2는 분해 모이어티와 링커 사이의 결합인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  79. 표 1의 화합물 1-75 및 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
  80. 표 2의 화합물 105-272 및 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
  81. 제80항에 있어서, 표 2의 화합물 76-104 중 어느 하나 또는 그의 제약상 허용되는 염인 화합물.
  82. 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  83. 세포를 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 BAF 복합체의 활성을 감소시키는 방법.
  84. 제83항에 있어서, BAF 복합체가 암 세포에 존재하는 것인 방법.
  85. BAF 복합체-관련 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BAF 복합체-관련 장애를 치료하는 방법.
  86. 제85항에 있어서, BAF 복합체-관련 장애가 암 또는 바이러스 감염인 방법.
  87. 세포를 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, BRM을 억제하는 방법.
  88. 제87항에 있어서, 세포가 암 세포인 방법.
  89. BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애를 치료하는 방법.
  90. 제89항에 있어서, BRG1 기능 상실 돌연변이와 관련된 장애가 암인 방법.
  91. 세포를 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 아폽토시스를 유도하는 방법.
  92. 제91항에 있어서, 세포가 암 세포인 방법.
  93. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 암을 치료하는 방법.
  94. 제84항, 제86항, 제88항, 제90항, 제92항 및 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 비소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 원인불명 원발성 암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암, 식도위암, 췌장암, 간담도암, 연부 조직 육종, 난소암, 두경부암, 신세포 암종, 골암, 비-호지킨 림프종, 소세포 폐암, 전립선암, 배아성 종양, 배세포 종양, 자궁경부암, 갑상선암, 타액선암, 위장 신경내분비 종양, 자궁 육종, 위장 기질 종양, CNS 암, 흉선 종양, 부신피질 암종, 충수암, 소장암 또는 음경암인 방법.
  95. 제84항, 제86항, 제88항, 제90항, 제92항 및 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 비소세포 폐암, 결장직장암, 방광암, 원인불명 원발성 암, 신경교종, 유방암, 흑색종, 비-흑색종 피부암, 자궁내막암 또는 음경암인 방법.
  96. 제84항, 제86항, 제88항, 제90항, 제92항 및 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 비소세포 폐암인 방법.
  97. 제84항, 제86항, 제88항, 제90항, 제92항 및 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 연부 조직 육종인 방법.
  98. 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 치료하는 방법.
  99. 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 종양 성장의 감소를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 종양 성장을 감소시키는 방법.
  100. 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 전이성 진행을 억제하는 방법.
  101. 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 전이성 콜로니화를 억제하는 방법.
  102. 흑색종, 전립선암, 유방암, 골암, 신세포 암종 및 혈액암 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 암 세포를 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 상기 암 세포에서 BRG1 및/또는 BRM의 수준 및/또는 활성을 감소시키는 방법.
  103. 제102항에 있어서, 세포가 대상체 내에 있는 것인 방법.
  104. 제98항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 전이성인 방법.
  105. 제98항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체에게 투여하거나 또는 세포를 항암 요법과 접촉시키는 것을 추가로 포함하는 방법.
  106. 제105항에 있어서, 항암 요법이 화학요법제 또는 세포독성제, 면역요법, 수술, 방사선요법, 열요법 또는 광응고인 방법.
  107. 제106항에 있어서, 항암 요법이 수술인 방법.
  108. 제106항에 있어서, 항암 요법이 화학요법제 또는 세포독성제인 방법.
  109. 제108항에 있어서, 화학요법제 또는 세포독성제가 항대사물, 항유사분열제, 항종양 항생제, 아스파라긴-특이적 효소, 비스포스포네이트, 항신생물제, 알킬화제, DNA-복구 효소 억제제, 히스톤 데아세틸라제 억제제, 코르티코스테로이드, 탈메틸화제, 면역조정제, 야누스-연관 키나제 억제제, 포스피노시티드 3-키나제 억제제, 프로테아솜 억제제 또는 티로신 키나제 억제제인 방법.
  110. 제108항 또는 제109항에 있어서, 1종 이상의 화학요법제 또는 세포독성제가 다카르바진, 테모졸로미드, 시스플라틴, 트레오술판, 포테무스틴, IMCgp100, CTLA-4 억제제, PD-1 억제제, PD-L1 억제제, 미토겐-활성화 단백질 키나제 억제제 및/또는 단백질 키나제 C 억제제인 방법.
  111. 제106항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, 항암 요법 및 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제56항의 제약 조성물이 서로 28일 이내에 함께 대상체를 치료하는데 효과적인 양으로 각각 투여되는 것인 방법.
  112. 제106항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체 또는 암이 BRG1 기능 상실 돌연변이를 갖고/거나 갖는 것으로 확인된 것인 방법.
  113. 제106항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체 또는 암이 BRM 기능 상실 돌연변이를 갖고/거나 갖는 것으로 확인된 것인 방법.
  114. 제106항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 하나 이상의 화학요법제 또는 세포독성제의 투여 후에 반응하지 않거나 진행된 것인 방법.
  115. 제106항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 하나 이상의 화학요법제에 대해 저항성이거나 또는 그에 대해 저항성인 것으로 예측되는 것인 방법.
  116. 제114항 또는 제115항에 있어서, 1종 이상의 화학요법제 또는 세포독성제가 다카르바진, 테모졸로미드, 시스플라틴, 트레오술판, 포테무스틴, IMCgp100, CTLA-4 억제제, PD-1 억제제, PD-L1 억제제, 미토겐-활성화 단백질 키나제 억제제 및/또는 단백질 키나제 C 억제제인 방법.
  117. 제106항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 흑색종인 방법.
  118. 제117항에 있어서, 흑색종이 포도막 흑색종인 방법.
  119. 제117항에 있어서, 흑색종이 점막 흑색종인 방법.
  120. 제117항에 있어서, 흑색종이 피부 흑색종인 방법.
  121. 제106항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 혈액암인 방법.
  122. 제106항에 있어서, 혈액암이 다발성 골수종, 대세포 림프종, 급성 T-세포 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 골수이형성 증후군, 이뮤노글로불린 A 람다 골수종, 미만성 혼합 조직구성 및 림프구성 림프종, B-세포 림프종, 급성 림프모구성 백혈병, 미만성 대세포 림프종 또는 비-호지킨 림프종인 방법.
  123. 제98항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 전립선암인 방법.
  124. 제98항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 유방암인 방법.
  125. 제124항에 있어서, 유방암이 ER 양성 유방암, ER 음성 유방암, 삼중 양성 유방암 또는 삼중 음성 유방암인 방법.
  126. 제98항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 골암인 방법.
  127. 제126항에 있어서, 골암이 유잉 육종인 방법.
  128. 제98항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 신세포 암종인 방법.
  129. 제128항에 있어서, 신세포 암종이 소안구증 전사 인자 (MITF) 패밀리 전위 신세포 암종인 방법.
  130. 바이러스 감염의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제82항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 바이러스 감염을 치료하는 방법.
  131. 제130항에 있어서, 바이러스 감염이 레트로비리다에 과, 헤파드나비리다에 과, 플라비비리다에 과, 아데노비리다에 과, 헤르페스비리다에 과, 파필로마비리다에 과, 파르보비리다에 과, 폴리오마비리다에 과, 파라믹소비리다에 과 또는 토가비리다에 과의 바이러스에 의한 감염인 방법.
KR1020227038706A 2020-04-06 2021-04-06 화합물 및 그의 용도 KR20230008074A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063005829P 2020-04-06 2020-04-06
US63/005,829 2020-04-06
PCT/US2021/026069 WO2021207291A1 (en) 2020-04-06 2021-04-06 Compounds and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230008074A true KR20230008074A (ko) 2023-01-13

Family

ID=78023494

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227038706A KR20230008074A (ko) 2020-04-06 2021-04-06 화합물 및 그의 용도

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20230150974A1 (ko)
EP (1) EP4132529A4 (ko)
JP (1) JP7508578B2 (ko)
KR (1) KR20230008074A (ko)
CN (1) CN115666575A (ko)
AU (1) AU2021251788B2 (ko)
BR (1) BR112022019991A2 (ko)
CA (1) CA3174086A1 (ko)
IL (1) IL296994A (ko)
MX (1) MX2022012474A (ko)
WO (1) WO2021207291A1 (ko)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112022012410A2 (pt) 2019-12-23 2022-08-30 Kymera Therapeutics Inc Degradadores smarca e usos dos mesmos
US20240101534A1 (en) * 2020-11-20 2024-03-28 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
WO2023018648A1 (en) 2021-08-09 2023-02-16 Genentech, Inc. Phenol derivatives for use in the modulation of brm
KR20240128955A (ko) * 2021-12-28 2024-08-27 더 보드 오브 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 암 치료제로서의 강력하고 선택적인 smarca2 분해 키메라 분자
AR128330A1 (es) 2022-01-26 2024-04-17 Genentech Inc Inductores químicos de degradación conjugados con anticuerpo y métodos de estos
WO2023220134A1 (en) * 2022-05-10 2023-11-16 Foghorn Therapeutics Inc. Pyrazine derivatives and uses thereof
WO2023220137A1 (en) * 2022-05-10 2023-11-16 Foghorn Therapeutics Inc. Pyrazine derivatives and uses thereof
TW202411225A (zh) * 2022-05-10 2024-03-16 美商福宏治療公司 化合物及其用途
WO2024179529A1 (zh) * 2023-02-28 2024-09-06 上海海雁医药科技有限公司 取代的三环衍生物及其药物组合物和用途

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2537190T3 (es) * 2010-09-01 2015-06-03 Gilead Connecticut, Inc. Piridazinonas, procedimiento de preparación y procedimientos de utilización de las mismas
US9434725B2 (en) * 2012-06-27 2016-09-06 F. Hoffmann-La Roche Ag 5-azaindazole compounds and methods of use
MA41598A (fr) * 2015-02-25 2018-01-02 Constellation Pharmaceuticals Inc Composés thérapeutiques de pyridazine et leurs utilisations
CN112771038B (zh) * 2018-04-26 2024-09-24 奥里吉恩发现科技有限公司 作为smarca2/4降解剂的哒嗪衍生物
EP3817822A4 (en) * 2018-07-06 2022-07-27 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
US20230002367A1 (en) * 2019-10-28 2023-01-05 Hoffmann-La Roche Inc. Bifunctional compounds
US20230024096A1 (en) * 2019-10-29 2023-01-26 Hoffmann-La Roche Inc. Bifunctional compounds for the treatment of cancer

Also Published As

Publication number Publication date
BR112022019991A2 (pt) 2022-11-22
EP4132529A1 (en) 2023-02-15
EP4132529A4 (en) 2024-05-01
CN115666575A (zh) 2023-01-31
CA3174086A1 (en) 2021-10-14
JP7508578B2 (ja) 2024-07-01
WO2021207291A1 (en) 2021-10-14
US20230150974A1 (en) 2023-05-18
AU2021251788B2 (en) 2024-10-03
JP2023520589A (ja) 2023-05-17
AU2021251788A1 (en) 2022-11-03
IL296994A (en) 2022-12-01
MX2022012474A (es) 2023-01-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7508578B2 (ja) 化合物及びその使用
EP4247815A1 (en) Compounds and uses thereof
EP4247381A1 (en) Compounds and uses thereof
US20220119378A1 (en) Compounds and uses thereof
AU2021213258B2 (en) Compounds and uses thereof
WO2021155264A1 (en) Compounds and uses thereof
JP7531656B2 (ja) 化合物及びその使用
EP4337211A1 (en) Compounds and uses thereof
WO2023220134A1 (en) Pyrazine derivatives and uses thereof
WO2023220129A1 (en) Benzoyparazine pyrazines ane their uses
WO2023220137A1 (en) Pyrazine derivatives and uses thereof
CN117337178A (zh) 化合物及其用途