KR20220170521A - 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 유효성분인 목단피 추출물은 세포 독성이 거의 없으며, 근관세포로의 분화를 유도 및 촉진할 수 있으며, 근세포 사멸 관련 유전자의 발현량을 억제시키는 효과가 있다. 또한 갱년기에 의해 감소된 근육의 단면적을 증가시키고 근력을 증가시키는 효과가 있는 것이다. 따라서 본 발명의 조성물은 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품과 근육질환의 예방 또는 치료용 의약품으로 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
우리 몸의 근육은 뼈에 붙어 뼈를 보호하고 체형을 바르게 유지시켜 주는 등의 여러 가지 기능을 한다. 또한, 근육은 칼슘 유입을 촉진시켜 골 밀도를 높여 주기도 한다. 그러나 신체는 노화하면서 구성성분의 변화로써 체지방과 체단백질의 재분포가 일어나며, 약 50세가 되면 근 세포 내 단백질의 합성속도가 분해속도보다 느려져 근육이 급격하게 퇴화를 시작하게 되며, 근육 감소 질환에 노출될 수 있다.
근육 감소 질환의 하나인 근육 감소증은 평소 자기 체질량의 약 13~24%가 감소한 상태를 말하는 것으로, 근육 감소증이 있으면 행동량이 현격하게 줄어 정신건강을 해칠 뿐만 아니라 생활의 만족도도 떨어지며, 용이한 일상 생활에서도 쉽게 부상을 입고 심각한 중상에 이르기도 한다. 근육 감소증의 원인 중 하나는 노화가 진행됨에 따라 일어나는 골격근의 양과 질의 점진적 감소 및 부적절한 식이 에너지 섭취에 따른 지방과 체지방성분을 포함하는 체중감소 등을 원인으로 꼽을 수 있다.
전구세포(precursor cell)의 분열과 결정 과정을 통해 형성된 근모세포(myoblast)는 근세포(myocyte)로 분화하고, 인접한 세포들과 융합하여 근관세포(myotube)로 분화한다. 분화된 근관세포는 근원섬유(myofibril)를 형성하는 과정을 통해 근육이 형성된다. 근모세포의 일부는 줄기 위성세포(satellite cell)로서 정지 상태로 있다가, 근육조직이 외상 또는 근육위축병(muscular dystrophy)과 같은 질병에 노출되면, 위성세포로 알려진 근육 줄기세포들은 손상된 부위의 근육을 치유하고 재생시킨다. 근육위축병과 같은 질환에 있어서, 이들 세포들은 근육의 안정성과 치유에 있어 특히 중요하다.
한편, 목단피(Moutan Radicis Cortex)는 '모란(Paeonia suffruticosa) 뿌리의 껍질'을 약재로 이르는 말로, 성분으로는 패오노사이드(paeonoside; paeonol glucoside), 패오노라이드(paeonolide; paeonol-rhamnoglucoside) 및 패오놀(paeonol)을 함유하며, 패오노사이드는 저장중에 분해되어 당과 패오놀을 생성한다. 또한, 패오니플로린(paeoniflorin), 옥시패오니플로린(oxypaeoniflorin), 벤조일페오니플로린 (benzoylpaeoniflorin), 패오노라이드 탄닌(paeonolide tannin), 프로시아니딘 B1 (procyanidin B1), 벤조일옥시패오니플로린(benzoyloxypaeoniflorin), 패오닌 (paeonin), 아스트라갈린(astragalin), 페라고닌(pelargonin) 등의 성분이 함유되어 있다. 이러한 성분은 근피뿐만 아니라 목심부에도 존재함이 조직화학적으로 확인되었다. 구어혈약으로서의 항염증 작용은 모노페르펜 글리코사이드(Monoterpene glycosides) 성분이 관여하는 것으로 추측되고 있다. 목단피는 성질이 차서 한방에서 소염성 구어혈약으로서 이용되며, 그 약효는 하복부 장기의 혈관계의 염증, 울혈에 의한 동통, 발열, 화농, 출혈등을 대상으로, 특히 부인과 영역에서 월경불순, 자궁 및 부속기의 염증, 울혈, 견인통에 대해서 소염, 진통, 진경의 효과가 있으며, 치질, 충수염에도 응용되고 있다.
목단피 추출물 관련 기술로서, 한국등록특허 제1256273호에 목단피 추출물을 포함하는 간질환 예방 또는 치료용 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1528190호에 목단피로부터 분리된 2,5-디하이드록시-4-메톡시아세토페논을 유효성분으로 함유하는 세포 노화 억제용 조성물이 개시되어 있으나, 아직까지 본 발명의 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대해 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고, 본 발명의 유효성분인 목단피 추출물이 세포 독성이 거의 없고, 근관 세포로의 분화를 유도 및 촉진할 수 있으며, 근세포 사멸 관련 유전자의 발현량을 억제시키는 효과가 있을 뿐만 아니라, 갱년기에 의해 감소된 근육의 단면적을 증가시키고 근력을 증가시키는 효과가 있다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 유효성분인 목단피 추출물이 세포 독성이 거의 없고, 근관 세포로의 분화를 유도 및 촉진할 수 있으며, 근세포 사멸 관련 유전자의 발현량을 억제시키는 효과가 있을 뿐만 아니라, 갱년기에 의해 감소된 근육의 단면적을 증가시키고 근력을 증가시키는 효과가 있는 것이다.
도 1은 본 발명의 목단피 추출물의 세포 생존율을 확인한 결과이다.
도 2는 본 발명의 목단피 추출물의 처리에 따른 근모세포의 분화정도를 나타낸 것이다. PS는 목단피 추출물을 의미하고, E2는 에스트라디올을 의미한다.
도 3은 본 발명의 목단피 추출물의 처리에 따른 근관세포의 직경을 확인한 결과이다. ###은 정상군 대비 TNFα 처리군의 근관세포 직경이 통계적으로 유의미하게 감소한 것을 의미하며, p<0.001이고, ***은 TNFα 처리군 대비 목단피 추출물 처리군 또는 양성대조군(에스트라디올, 10nM)의 근관세포 직경이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이다.
도 4는 근모세포(myoblast)에서 근관세포(myotube)로 분화시킨 근육 세포에 TNFα를 처리한 근육세포에서는 Cleaved PARP 단백질 및 Cleaved caspase 3의 발현이 증가되었으나, 본 발명의 목단피 추출물을 처리한 근육세포에서의 Cleaved PARP 단백질 및 Cleaved caspase 3 단백질의 발현이 감소한 것을 확인한 웨스턴 블랏 결과이다.
도 5는 갱년기 동물모델에 목단피 추출물을 경구투여한 후, 동물 모델의 뒷다리 근육 중에서 Tibialis anterior 근육만 분리하여 면역조직화학염색기법으로, 근육의 단면적에 대한 변화를 확인한 결과이다. ###은 Control군 대비 OVX군의 근육 단면적이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이고, ***은 OVX군 대비 본 발명의 목단피 추출물 투여군 또는 양성대조군(에스트라디올) 투여군의 근육 단면적이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로 p<0.001이다. n.s.은 통계적으로 유의미한 차이가 없다는 것이다.
도 6은 갱년기 모델에 목단피 추출물을 경구투여한 후, 동물 모델의 행동분석 결과로, (A)는 로타로드 테스트 결과이고, (B)는 인버티드 그립 테스트 결과이다. ###은 Control군 대비 OVX군의 로타로드에 매달려 있는 시간 또는 인버티드 그립에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이고, *, **은 OVX군 대비 본 발명의 목단피 추출물 투여군 또는 양성대조군(에스트라디올) 투여군의 로타로드에 매달려 있는 시간 또는 인버티드 그립에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로 *은 p<0.05이고, **은 p<0.01이다. n.s.은 통계적으로 유의미한 차이가 없다는 것이다.
도 2는 본 발명의 목단피 추출물의 처리에 따른 근모세포의 분화정도를 나타낸 것이다. PS는 목단피 추출물을 의미하고, E2는 에스트라디올을 의미한다.
도 3은 본 발명의 목단피 추출물의 처리에 따른 근관세포의 직경을 확인한 결과이다. ###은 정상군 대비 TNFα 처리군의 근관세포 직경이 통계적으로 유의미하게 감소한 것을 의미하며, p<0.001이고, ***은 TNFα 처리군 대비 목단피 추출물 처리군 또는 양성대조군(에스트라디올, 10nM)의 근관세포 직경이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이다.
도 4는 근모세포(myoblast)에서 근관세포(myotube)로 분화시킨 근육 세포에 TNFα를 처리한 근육세포에서는 Cleaved PARP 단백질 및 Cleaved caspase 3의 발현이 증가되었으나, 본 발명의 목단피 추출물을 처리한 근육세포에서의 Cleaved PARP 단백질 및 Cleaved caspase 3 단백질의 발현이 감소한 것을 확인한 웨스턴 블랏 결과이다.
도 5는 갱년기 동물모델에 목단피 추출물을 경구투여한 후, 동물 모델의 뒷다리 근육 중에서 Tibialis anterior 근육만 분리하여 면역조직화학염색기법으로, 근육의 단면적에 대한 변화를 확인한 결과이다. ###은 Control군 대비 OVX군의 근육 단면적이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이고, ***은 OVX군 대비 본 발명의 목단피 추출물 투여군 또는 양성대조군(에스트라디올) 투여군의 근육 단면적이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로 p<0.001이다. n.s.은 통계적으로 유의미한 차이가 없다는 것이다.
도 6은 갱년기 모델에 목단피 추출물을 경구투여한 후, 동물 모델의 행동분석 결과로, (A)는 로타로드 테스트 결과이고, (B)는 인버티드 그립 테스트 결과이다. ###은 Control군 대비 OVX군의 로타로드에 매달려 있는 시간 또는 인버티드 그립에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이고, *, **은 OVX군 대비 본 발명의 목단피 추출물 투여군 또는 양성대조군(에스트라디올) 투여군의 로타로드에 매달려 있는 시간 또는 인버티드 그립에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로 *은 p<0.05이고, **은 p<0.01이다. n.s.은 통계적으로 유의미한 차이가 없다는 것이다.
본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
상기 목단피 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 건조한 목단피에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 에탄올이며, 더욱더 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올이지만 이에 한정하지 않는다. 상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 목단피 중량의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이고, 더욱더 바람직하게는 10배 첨가하는 것이다. 추출온도는 20~100℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 1~48시간인 것이 바람직하며, 1~24시간이 더욱 바람직하고, 3시간이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 농축은 진공 회전 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 동결건조이나 이에 한정하지 않는다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 중에 포함되는 상기 유효성분의 양은 전체 건강기능식품 중량의 0.1~90 중량부로 가할 수 있다. 하지만, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취하는 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 음료, 환, 정제(tablet), 캡슐제(capsule) 및 산제 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있으며, 음료로 사용되는 경우, 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 유효성분을 함유하는 것 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 상기 유효성분 이외에 추가로, 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 증진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 및 탄산음료에 사용되는 탄산화제 중에서 선택된 하나 이상을 더 첨가하여 함유할 수 있다. 이외에도 본 발명의 건강기능식품 조성물은 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 상기 과육은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기 다양한 첨가제의 비율은 중요하진 않지만, 본 발명의 목단피 추출물 100 중량부 당 0.1~20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
상기 근육질환은 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근경직증, 근디스트로피, 근위축성 축삭경화증, 근무력증, 악액질(cachexia) 및 근육감소증(sarcopenia) 중에서 선택된 어느 하나인 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 상기 조성물을 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 담체, 부형제 또는 희석제를 사용하여 조제할 수 있으나 이에 한정하는 것은 아니다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제 또는 좌제 등이 포함된다. 비수성용제 및 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제(base)로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여시 피부 외용 또는 복강 내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사 방식을 선택하는 것이 바람직하지만 이에 제한하지 않는다. 본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, 약학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하며, 일일 투여량은 목단피 추출물의 양을 기준으로 0.01~1000㎎/㎏이고, 바람직하게는 30~500㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50~300㎎/㎏이며, 하루 1~6회 투여될 수 있으나, 투여 경로, 근육질환의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
실시예 1. 목단피 에탄올 추출물의 제조
500g의 목단피를 50℃에서 7일 동안 열풍 건조한 후, 10배의 70%(v/v) 에탄올을 첨가하여 3시간씩 2회에 걸쳐 환류 냉각 추출 및 여과하였다. 이후 상기 목단피 추출액을 45℃에서 감압농축하여 에탄올을 제거한 후, -80℃에서 7일 동안 동결건조하여 목단피 추출물을 획득하였다. 상기 목단피(Moutan Radicis Cortex)는 '모란(Paeonia suffruticosa) 뿌리의 껍질이다.
실시예 2. 목단피 추출물의 처리에 따른 세포 생존율 분석
세포 생존율 분석을 위해, 1×104 cells/㎖의 C2C12 세포를 96웰 플레이트에 깔아주고, 24~72시간 동안 배양한 후 1, 10, 25, 50, 100 및 500㎍/㎖의 목단피 추출물을 각 웰에 처리하고 48시간 동안 배양하였다. 이후, 490nm에서 흡광도를 측정하여 세포 생존율을 분석하였으며, 3번 반복실험하여 평균±표준편차로 나타냈다.
그 결과 도 1에 개시한 바와 같이, 본 발명의 목단피 추출물은 세포 독성이 거의 없는 것으로 나타났다.
실시예 3. 목단피 추출물의 처리에 따른 근모세포(myoblast)로부터 근관세포(myotube)로의 분화 효과 확인
2×105 cells/㎖의 C2C12 세포를 6웰 플레이트에서 24시간 동안 배양한 후, 목단피 추출물을 처리하고 5일 동안 배양하였다. 이후, 목단피 추출물을 처리하고, 30분 후 근손실을 유도하는 10ng/㎖의 TNFα를 처리하면서 근관세포로의 분화를 3일 동안 유도하였다. 이후, 근육의 두께를 정량하였고, TNFα에 의한 근소실은 세포 사멸을 유도하므로 본 발명의 목단피 추출물이 이를 극복하는지를 확인하기 위하여 웨스턴 블랏으로 PARP(Poly(ADP-ribose)polymerase) 및 Caspase 3 단백질의 발현량을 확인하였다.
그 결과, 본 발명의 목단피 추출물을 처리한 경우, 근모세포가 근관세포로 분화하는 것을 촉진하며(도 2), 근관세포의 두께가 TNFα만 처리한 군에 비해 두껍고(도 3), PARP 단백질의 발현량이 상대적으로 감소된(도 4) 것으로부터, 근육세포의 사멸을 억제한다는 것을 알 수 있었다.
실시예 4. 갱년기 모델에서 목단피 추출물의 경구투여에 따른 뒷다리 근육의 변화 확인
난소적출 후 5개월이 지난 마우스(C57BL/6, n=8)에 100 및 300mg/kg의 목단피 추출물을 2개월 동안 경구투여하고 마우스를 희생시킨 후, 마우스의 뒷다리 근육 중에서 Tibialis anterior 근육만 분리하여 면역조직화학(immunohistochemistry: IHC) 분석을 실시하였다. 이미지 분석은 이미지 J 분석프로그램을 이용하여 근육의 단면적(Cross sectional area)을 분석하였다.
그 결과, 난소 절제에 의해 유도된 갱년기 군(OVX)은 정상대조군(Control)에 비해 근육의 단면적이 통계적으로 유의미하게 감소하였고, 300mg/kg의 목단피 추출물 투여군 및 에스트라디올 투여군(양성 대조군, 0.1mg/kg)은 OVX 군에 대비하여 통계적으로 유의미하게 근육의 단면적이 증가하였다(도 5).
실시예 5. 갱년기 모델에 목단피 추출물의 경구투여에 따른 행동분석
(1) 로타로드 테스트(Rotarod Test)
난소를 절제하여 갱년기를 유도한 후, 2개월 동안 목단피 추출물을 경구 투여하거나, 1개월 동안 에스트라디올을 복강 내 주사한 마우스(C57BL/6, n=8)를 로타로드 머신의 봉에 올려놓고, 20rpm의 회전속도로 회전하여 마우스가 떨어질 때까지의 시간을 측정하였다. 상기 로타로드 테스는 3번 반복하여 평균 값을 실험값으로 채택하였고, 각 군의 평균과 표준편차를 구하였다.
그 결과 도 6(A)에 개시한 바와 같이, 정상군(N) 대비 OVX군이 로타로드에 매달려 있는 시간이 통계적으로 유의미하게 감소하였고, 이에 대비하여 본 발명의 목단피 추출물 투여군과 양성 대조군인 에스트라디올 투여군이 로타로드에 매달려 있는 시간이 통계적으로 유의미하게 증가하였다.
(2) Inverted grip test
그물망에 마우스를 올려 좋고, 그 그물망을 뒤집은 후 마우스가 얼마나 오래 버티는지를 확인하였다.
그 결과, 정상대조군(Control) 대비 OVX군이 그물망에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 감소하였고, 이에 대비하여 본 발명의 목단피 추출물 투여군과 양성 대조군인 에스트라디올 투여군이 그물망에서 버티는 시간이 통계적으로 유의미하게 증가하였다(도 6B).
Claims (6)
- 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 목단피 추출물의 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 목단피 추출물은 음료, 환, 정제(tablet), 캡슐제(capsule) 및 산제 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 근육성장 촉진 또는 갱년기에 의한 근 손실의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 근육질환은 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근경직증, 근디스트로피, 근위축성 축삭경화증, 근무력증, 악액질(cachexia) 및 근육감소증(sarcopenia) 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 목단피 추출물 이외에 추가로 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 근육질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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KR20130037029A (ko) * | 2011-10-05 | 2013-04-15 | 부경대학교 산학협력단 | 항염증 효과를 갖는 1-(5-브로모-2-하이드록시-4-메톡시페닐)에타논 및 이를 함유하는 약학 조성물 |
KR20150001039A (ko) * | 2013-06-26 | 2015-01-06 | 주식회사 휴먼허브 | 갱년기 장애 예방 및 개선을 위한 식물성 조성물 및 이의 제조방법 |
KR20200085395A (ko) * | 2019-01-04 | 2020-07-15 | 위영만 | 신경계 질환의 예방, 개선 및 치료용 조성물 |
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- 2021-06-23 KR KR1020210081465A patent/KR102670918B1/ko active IP Right Grant
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