KR20220169183A - 보리 추출물을 포함하는 간세포 보호용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물; 간질환 예방 또는 치료용 약학 조성물; 간 기능 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물; 사료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 보리 추출물은 식물 유래 추출물로서 부작용이나 안전성에 대한 문제가 없고, 산화스트레스에 의한 간세포 보호, 간질환 또는 간 기능 손상을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 효과가 있으며, 피로회복 또는 숙취해소와 같은 다양한 용도로의 응용이 가능하다.

Description

보리 추출물을 포함하는 간세포 보호용 조성물{A composition for hepatocellular protection comprising extracts of Barley}
본 발명은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물; 간질환 예방 또는 치료용 약학 조성물; 간 기능 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물; 사료 조성물에 관한 것이다.
간은 인간의 신체 장기 중 생체 내 대사가 가장 활발하게 일어나는 장기로 인체 내 장기 중 가장 큰 장기이기도 하다. 간은 소화기계와 전신순환계 사이에 위치하면서 외부에서 들어온 생체 외 물질로부터 전신을 방어하는 기능을 수행하고 있다. 또한, 각종 대사작용, 해독, 분해, 합성 및 분비를 담당하는 매우 중요한 장기이다.
간은 우리 체내에서 독소로 인식될 수 있는 각종 약물이나 술, 기타 독성물질을 분해, 대사하여 배설될 수 있는 형태로 만들어 소변이나 담즙을 통해서 배출하는 작용을 한다. 간경변증 환자에서는 이러한 해독작용이 저하되어 약물, 술, 독성물질에 의한 위험성이 증가될 수 있으므로 유의하여야 한다. 그리고 간은 중요한 면역기관이며 동시에 체내의 살균작용을 담당한다. 대장 점막을 통해서 혈액에 흡수되어 몸으로 들어간 균은 간을 거치면서 쿠퍼 세포라는 대식작용을 하는 세포에 의해 다 죽기 때문에 약 1% 미만의 세균만이 무사히 간을 통과해서 나갈 수 있다
한편, 인체는 산화촉진물질과 산화억제물질이 균형을 이루고 있으나, 여러 가지 요인들로 인하여 이러한 균형 상태를 잃고 산화를 촉진하는 방향으로 기울게 되면, 생체 내에 산화스트레스(oxidative stress)가 유발되어 세포손상 및 병리적 질환을 유발하게 된다. 이러한 산화스트레스의 직접적 원인이 되는 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 화학적으로 불안정하고 반응성이 높아 DNA, 단백질, 지질 및 탄수화물과 같은 여러 생체물질과 쉽게 반응할 수 있으며, 생체 내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 암 등을 초래하게 된다. 실제로 많은 임상 질환에서 산화스트레스가 증가되는 것이 확인되었으며, 이러한 산화스트레스를 줄이기 위해 새로운 항산화 물질에 대한 다양한 연구가 이루어지고 있다.
특히, 천연물을 대상으로 항산화 물질을 검색하여, 항산화 활성과 안전성을 동시에 도모하려는 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 한국특허등록 제1022705호에는 항산화 활성효능을 가진 감태(Ecklonia cava)의 에탄올 추출물이 개시되어 있다. 그러나 아직까지는 항산화 활성과 안전성을 동시에 도모할 수 있는 천연물에 대한 연구결과가 많이 보고되고 있지 않아, 추가적인 연구가 필요한 실정이다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 인체에 안정성이 확보된 천연물로부터 간세포 보호에 효과적인 물질을 찾고자 예의 연구 노력한 결과, 보리 추출물이 산화스트레스로부터 간세포 보호 및 간 기능 개선 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는, 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "보리(Hordeum vulgare var. hexastichon)"는 외떡잎 식물의 벼목 화분과에 속하는 1년생 혹은 2년생 초본식물로 대맥이라고도 한다. 보리는 세계 4대 작물 중 하나로, 우리나라의 경우 오곡(五穀: 쌀, 보리, 조, 콩, 기장) 중 하나이며, 쌀 다음가는 주식 곡물이다. 보리의 주요 성분은 탄수화물 75%, 단백질 10%, 지방 0.5% 정도이며, 그 외 섬유질, 회분, 비타민, 무기질 등도 포함되어 있다. 특히 보리는 다른 곡물에 비해 섬유질을 많이 함유하고 있으며, 보리의 식이섬유인 베타글루칸은 혈중 지질수치를 낮추며 혈당 조절에도 도움을 주는 것으로 알려졌다.
본 발명에 있어서, 상기 보리는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에 있어서, 상기 보리의 품종은 흰찰쌀 또는 새찰쌀일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다. 이에 따라, 본 발명에서 제공하는 보리의 추출물은 이를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명의 보리의 추출물에 있어서 이의 추출 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 추출에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있으며, 구체적으로 물이 사용될 수 있다. 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다.
또한, 상기 추출물은 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있지만, 이제 제한되는 것은 아니다
본 발명의 일 실시예에서는, 분말로 파쇄한 보리에 핵산을 가하여 추출 후 여과된 보리 분말에 주정을 가하여 추출한 여과액을 농축함으로써 주정 추출물을 제조하였다. 또한, 주정 추출 후 여과된 보리 분말에 물을 가하여 추출한 여과액을 모아 동결 건조함으로써 갈색 분말의 물 추출물을 제조하였다.
본 발명에 있어서, 상기 보리 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 최종 조성물 총 중량을 기준으로 구체적으로, 0.0001 내지 80 중량%, 보다 구체적으로, 0.0001 내지 50 중량%, 더욱 구체적으로, 0.01 내지 20 중량%의 함량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 용어, "간"은 우리 체내에서 독소로 인식될 수 있는 각종 약물이나 술, 기타 독성물질을 분해, 대사하여 배설될 수 있는 형태로 만들어 소변이나 담즙을 통해서 배출하는 작용을 한다. 또한, 간은 중요한 면역기관이며 동시에 체내의 살균작용을 담당한다. 대장 점막을 통해서 혈액에 흡수되어 몸으로 들어간 균은 간을 거치면서 쿠퍼 세포라는 대식작용을 하는 세포에 의해 다 죽기 때문에 약 1% 미만의 세균만이 무사히 간을 통과해서 나갈 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 보리의 주정 추출물 또는 물 추출물은 산화스트레스에 의한 간세포를 보호하는데 사용할 수 있다. 이때, 상기 간세포 보호는 활성산소종 (reactive oxygen species; ROS)의 생성을 억제하여 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 산화스트레스에 대한 세포 보호 효과를 확인하기 위하여, TBHP를 처리함으로써 산화스트레스를 유도한 HepG2 세포에 보리 주정 추출물을 처리한 결과, 세포 생존율이 TBHP 처리시 31%이었지만 보리 추출물을 처리하였을 경우 72~109%까지 현저히 상승한 것을 확인하였다(도 2).
또한, 본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 산화스트레스 유도제에 의해 증가된 ROS가 보리 주정 추출물을 처리한 결과, TBHP 처리에 의해 ROS가 171%까지 증가하였으나, 보리 추출물을 처리한 경우의 ROS는 흰찰 주정 추출물 및 새찰 주정 추출물에서 각각 104% 및 92%로 억제되어, 대조군 수준의 우수한 ROS 제거능을 보였다(도 3).
이러한 실험 결과는, 보리 추출물의, 특히 보리 주정 추출물의 체내 산화스트레스에 의한 세포 손상을 억제 또는 예방하는 역할을 할 수 있을 것으로 기대할 수 있다.
상기 용어, "산화스트레스"는 인체의 에너지 생성과정(섭취한 음식물이 산소와 반응하는 산화과정을 거침) 중에 유해산소가 급격히 증가해 인체에 나쁜 영향을 일으키거나 그러한 상황을 의미한다.
또한, 상기 용어, "활성산소종(Reactive oxygen species; ROS)"은 세포 내의 미토콘드리아에서 호흡과 면역 반응에 의한 산소의 산화와 환원 과정을 통해 끊임없이 생성된다. 유해한 ROS는 일반적으로 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase), 카탈라아제(catalase), 글루타티온 과산화효소(glutathione peroxidase), 글루타민 환원효소(glutamine reductase), 비타민 C, 비타민 E, 요산, 빌리루빈(bilirubin)과 같은 항산화 체계의 작용으로 제거된다. 그러나 자유기의 생성과 소거의 균형이 무너지게 되면 산화스트레스가 발생하게 되어 염증, 노화 또는 암과 같은 다양한 병리학적인 변화를 일으킨다. 실제로 많은 임상 질환에서 산화스트레스가 증가되는 것이 확인되었으며, 이러한 산화스트레스를 줄이기 위해 새로운 항산화 물질에 대한 다양한 연구가 이루어지고 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는, 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 용어, "보리", "추출물" 및 "간"은 상기에서 서술한 바와 같다.
본 발명에 있어서, 상기 "간질환"은 간장(肝臟)의 기능에 장애가 생기는 것으로서, 구체적으로, 상기 간질환은 간 기능 손상에 의한 것으로, 이는 산화스트레스에 의한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "예방"은 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여에 의해 간 기능의 손상을 억제시키거나 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 용어, "치료"는 상기 약학 조성물의 투여에 의해 산화스트레스에 의한 간 기능이 손상된 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 약학 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 보리 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 최종 조성물 총 중량을 기준으로 구체적으로, 0.0001 내지 80 중량%, 보다 구체적으로, 0.0001 내지 50 중량%, 더욱 구체적으로, 0.01 내지 20 중량%의 함량으로 포함될 수 있다.
또한, 상기 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있고, 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
또한, 상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 경피흡수제, 겔제, 로션제, 연고제, 크림제, 첩부제, 카타플라스마제, 페이스트제, 스프레이, 피부 유화액, 피부 현탁액, 경피 전달성 패치, 약물 함유 붕대 또는 좌제의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 구체적으로, 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제로는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제 등도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 첨가하여 조제될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제를 포함한다. 비수성 용제 및 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는, 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 용어, "보리", "추출물", "간" 및 "예방"은 상기에서 서술한 바와 같다.
본 발명에 있어서, 상기 간 기능 손상은 산화스트레스에 의한 것일 수 있고, 상기 조성물은 산화스트레스로부터 간 세포를 보호하는 것일 수 있으며, 상기 보호는 활성산소종의 생성을 억제하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "개선"은 본 발명의 조성물의 섭취에 의해 간 기능 손상의 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물을 건강기능식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 보리 추출물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 본 발명의 조성물은 안정성 면에서 문제가 없기 때문에 혼합량에 큰 제한은 없다.
본 발명의 식품 조성물은 일상적으로 섬취하는 것이 가능하기 때문에 간 기능 손상의 예방, 치료, 또는 개선 효과를 기대할 수 있으므로, 건강 증진 목적으로 매우 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 용어 "식품"이란, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합체, 건강기능식품 및 건강식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
상기 용어, "건강기능식품"은 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 '기능'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나므로, 본 발명의 건강기능식품은 간 기능 손상의 개선 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
상기 건강기능식품은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강기능식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 호용된다.
구체적으로, 상기 건강기능식품은 본 발명의 조성물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.
상기 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐 산(panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu) 등의 미네랄; 및 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 방부제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품학적으로 허용 가능한 식품 첨가물(food additives)을 포함할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물의 일 예로 건강음료 조성물로 사용될 수 있으며, 이 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.04 g, 구체적으로 약 0.02 내지 0.03 g이 될 수 있다.
상기 외에 건강음료 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다.
이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강음료 조성물 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는, 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
상기 용어, "보리", "추출물", "간", "예방" 및 "개선"은 상기에서 서술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "사료"란, 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다.
상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박 류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물 성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 사료 조성물에 포함되는 본 발명의 보리 추출물은 사료의 사용목적 및 사용조건에 따라 달라질 수 있으며, 일 예로 가축 사료 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%, 보다 구체적으로는 1 내지 80 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은, 산화스트레스로부터 간세포를 보호할 수 있으며, 이로 인한 간질환 또는 간 기능 손상을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 효과가 있다.
도 1A는 20 μg/mL 농도 보리 추출물의 품종별 및 용매별 세포독성을 나타낸 그래프이다 (1~6: 주정추출물(P), 7~12: 물추출물(W), 1,7: 귀리껍질, 2,8: 흰찰, 3,9: 흑수정, 4,10: 베타원, 5,11: 강호청, 6,12: 새찰).
도 1B 및 도 1C는 각각 50 μg/mL 및 100 μg/mL 농도 보리 추출물의 품종별 및 용매별 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 2A 및 도 2B는 각각 50 μg/mL 및 100 μg/mL 농도 보리 추출물의 품종별 및 용매별 산화스트레스에 대한 보호 효과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 50 μg/mL 농도 보리 추출물의 ROS 생성 억제 효과를 나타내는 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 품종별 보리 주정 및 물 추출물의 제조
분쇄한 보리 분말 1 kg에 핵산 2 L를 가하여 실온에서 24시간 교반하여 추출하고, 여과지로 여과한 후 여액은 버리는 과정을 3회 반복하였다. 이후 여과된 보리분말에 주정을 2 L 가하고 실온에서 24시간 교반 추출하고, 여과지로 여과한 여액을 수집하는 과정을 3회 반복하고, 수집한 여액을 감압 농축기로 농축하여 주정 추출물을 제조하였다. 주정 추출물을 얻고 남은 여과된 보리분말 잔여물에 물 2 L를 가하여 24시간 교반 추출하고, 모든 여액을 모아서 동결건조하여 갈색 분말의 물 추출물을 제조하였다 (표 1).
No. Sample Name No. Sample Name
1 귀리껍질/P 7 귀리껍질/W
2 흰찰/P 8 흰찰/W
3 흑수정/P 9 흑수정/W
4 베타원/P 10 베타원/W
5 강호청/P 11 강호청/W
6 새찰/P 12 새찰/W
* P: 주정 추출물, W: 물 추출물
실시예 2. 보리 추출물의 세포 독성 평가
인체유래 간세포인 HepG2 세포를 이용하여, 보리 품종별 주정 추출물 및 물 추출물의 세포 독성을 측정하였다.
보다 구체적으로, HepG2 세포는 ATCC(American Type Culture Collection)에서 구입하여 사용하였으며 10% FBS, 100 units/mL penicillin/streptomycin이 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2로 조절된 incubator에서 배양하였다. 이후, 20, 50 및 100 μg/mL 각 농도에 대한 보리 품종별 주정 추출물 및 물 추출물의 세포 독성을 MTT assay 방법을 이용하여 측정하였다.
그 결과, 도 1에서 볼 수 있듯이, HepG2 세포에서 보리 품종별, 주정 추출물 및 물 추출물은 100 μg/mL 이하에서 모두 세포 독성을 나타내지 않았다.
실시예 3. 보리 추출물의 간세포 내 산화스트레스 보호 효과
실시예 3-1. MTT assay
인체유래 간세포인 HepG2 세포를 이용하여, 산화스트레스에 의한 세포 생존율을 측정하고, 보리 품종별 주정 추출물 및 물 추출물에 의한 산화스트레스로부터의 세포 보호 효과를 확인하였다.
구체적으로, 세포 배양은 실시예 2와 동일하게 배양하였다. 또한, 96 well plate에 1.5Х104 cells/well 농도로 각 well에 분주하고, 24시간 배양하였다. 각 추출물을 50 및 100 μg/mL 의 농도로 처리하고, 18시간 후 500 μM TBHP 를 3시간 처리하여 산화 스트레스를 유도하였다. 배양이 끝난 후 각 well에 MTT 용액을 넣고 4시간 반응시킨 후 배양액을 제거하고, DMSO에 재용해하여 550 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 2에서 볼 수 있듯이, HepG2 세포에서 산화 스트레스를 유도하는 TBHP 처리에 의해 감소된 세포 생존율이 보리 추출물 처리 시 농도 의존적으로 세포 보호 효과를 나타냄을 확인하였으며, 특히, 흰찰(No. 2) 및 새찰(No. 6) 보리의 주정 추출물에서 현저히 우수한 간세포 보호 효능이 있음을 확인하였다.
실시예 3-2. DCFH-DA assay
인체유래 간세포인 HepG2 세포를 이용하여, 산화스트레스에 의한 활성산 소(Reactive oxygen species; ROS) 생성 억제 효과를 측정하였다.
구체적으로, 실시예 3-1과 동일하게 실험한 뒤, HepG2 세포에 대한 50 μg/mL 흰찰 및 새찰 보리 주정 추출물의 ROS 생성 억제 효과는 DCFH-DA assay 방법을 이용하였다.
그 결과, 도 3에서 볼 수 있듯이, TBHP 처리에 의해 증가된 ROS 생성이 흰찰 및 새찰 보리 주정 추출물에 의해 억제됨을 확인하였다
종합하면, 보리 추출물의 간세포 보호 활성은 품종마다 차이를 보였으며, 특히 흰찰 및 새찰 품종의 주정 추출물은 TBHP에 의해 유도된 산화적 스트레스를 효과적으로 제거하는 효과가 있으며, 이는 체내에서 산화적 스트레스에 의한 세포손상을 억제 또는 예방하는 역할을 할 수 있을 것으로 기대된다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (10)

  1. 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간세포 보호용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 보리의 품종이 흰찰쌀 또는 새찰쌀인 것인, 간세포 보호용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 1종으로 추출한 것인, 간세포 보호용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 산화스트레스로부터 간세포를 보호하는 것인, 간세포 보호용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 보호는 활성산소종 (reactive oxygen species; ROS)의 생성을 억제하여 달성되는 것인, 간세포 보호용 조성물.
  6. 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 간질환은 산화스트레스에 의해 간 기능이 손상되어 유발된 것인, 약학 조성물.
  8. 제6항에 있어서,
    상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함하는 것인, 약학 조성물.
  9. 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  10. 보리 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 손상 예방 또는 개선용 사료 조성물.
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