KR20220140527A - 치료용 기체 충전 미세소포 - Google Patents

치료용 기체 충전 미세소포 Download PDF

Info

Publication number
KR20220140527A
KR20220140527A KR1020227028178A KR20227028178A KR20220140527A KR 20220140527 A KR20220140527 A KR 20220140527A KR 1020227028178 A KR1020227028178 A KR 1020227028178A KR 20227028178 A KR20227028178 A KR 20227028178A KR 20220140527 A KR20220140527 A KR 20220140527A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
suspension
microvesicles
gas
administered
filled
Prior art date
Application number
KR1020227028178A
Other languages
English (en)
Inventor
빅터 장노트
알렉상드르 헬베르트
Original Assignee
브라코 스위스 에스.에이.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 브라코 스위스 에스.에이. filed Critical 브라코 스위스 에스.에이.
Publication of KR20220140527A publication Critical patent/KR20220140527A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/16—Fluorine compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0028—Disruption, e.g. by heat or ultrasounds, sonophysical or sonochemical activation, e.g. thermosensitive or heat-sensitive liposomes, disruption of calculi with a medicinal preparation and ultrasounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0002—Galenical forms characterised by the drug release technique; Application systems commanded by energy
    • A61K9/0009—Galenical forms characterised by the drug release technique; Application systems commanded by energy involving or responsive to electricity, magnetism or acoustic waves; Galenical aspects of sonophoresis, iontophoresis, electroporation or electroosmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

치료적 방법에서 포스파티딜콜린 (PC)의 지방산 다이에스테르, 페길화된 포스파티딜에탄올아민 (PE-PEG) 및 지방산을 포함하는 기체 충전 미세기포의 형탁액의 용도로서, 상기 현탁액은 후속 볼루스로서 투여된다.

Description

치료용 기체 충전 미세소포
본 발명은 기체 충전 미세소포 분야 및 특히 그러한 미세소포의 치료적 치료를 위한 용도에 관한 것이다.
기체 충전 미세소포의 현탁액과 조합된 초음파의 치료적 용도는 많은 치료적 치료에서 적용되는 부상하는 방식이다. 특정 치료에 따르면, 기체 충전 미세소포는 혈류로 전신적으로 주사된다. 이들 치료는 예를 들어 초음파와 함께 혈관 투과도를 증가시키기 위하여, 예컨대 의약품 또는 유전자의 전달을 촉진/증가시키기 위하여 (참고문헌 1: Wang et al.), 혈액 응고물의 파괴를 돕고 (참고문헌 2: Auboire et al.), 혈액 뇌 장벽을 개방하고 (참고문헌 3: Huang et al.), 면역 조절 (참고문헌 4: Tu et al.), 신경 조절 (참고문헌5: Blackmore et al.), 방사선 감작 (참고문헌 6: Deng et al.)을 위하여, 또는 또한 비열성 조직 절제를 돕기 위하여 (참고문헌 7: Arvanitis et al.) 사용될 수 있다.
치료적 치료가 수분 동안 (예컨대 치료될 영역의 위치 및/또는 크기에 따라 약 10분 내지 1시간 이상) 지속될 수 있기 때문에, 치료의 전체 기간 동안 환자에게 기체 충전 미세소포의 현탁액의 지속적인 투여를 제공할 필요가 있다. 그러한 지속적인 투여는 현탁액의 연속 주입으로 또는 특정 부피의 현탁액의 2회 이상의 후속 볼루스의 주사에 의해 이루어질 수 있다.
일반적으로, 볼루스 투여는 대상체에게 특정 부피의 기체 충전 미세소포의 현탁액을, 예컨대 주사기 및 말초 정맥에 배치된 카테터를 사용함으로써 수초 내에 투여하는 것을 포함하는 상대적으로 간단한 과정이다. 주입은 전용 장치, 예컨대 현탁액을 주사하기 위한 인젝터 또는 펌프의 사용, 치료 전 더 긴 준비 시간 및 장기간 (치료 전/후) 중의 숙련된 작동자의 존재를 필요로 하는 보다 복잡한 과정이다. 나아가, 장시간 동안의 주입은 전용 장치 (예컨대 회전하는 주사기) 또는 전용 절차 (예컨대 미세소포 현탁액을 함유하는 식염수 주머니의 수동 교반)를 필요로 하는, 주사기의 기체 미세소포의 경사분리 현상(decantation phenomenon)을 고려해야 한다. 대체로, 이것은 실질적인 추가 비용을 나타낸다. 출원인의 기체 충전 미세소포의 종래 제제에 의해 관찰된 바, 치료 적용시 볼루스로서 투여될 때 치료 중인 해부학적 영역에 충분한 양의 미세소포의 존재를 허용하기 위해 상대적으로 빈번한 간격으로 투여될 필요가 있다. 예를 들어, Thomas 등은 리포솜의 전달을 향상시키기 위하여 SonoVue® (45초 내에 투여된 2회의 볼루스)의 사용을 기술하였다 (참고문헌 8: Thomas et al., 2018). 나아가, 참고문헌 9 (Dimcevski et al. 2016)는 항암 의약품 (겜시타빈)으로의 초음파 매개 전달 치료적 치료에서 SonoVue®의 사용을 개시하였다; 이 목적에 대해, SonoVue®의 볼루스가 3.5분마다 주사되었다.
참고문헌 10 (Schneider et al.)은 이미징 초음파 조영제로서 사용하기 위하여, 질소와 과플르오르부탄의 혼합물로 충전된, PEG4000, DSPC, DPPE-MPEG5000 및 팔미트산을 포함하는 동결 건조된 조성물의 재구성에 의해 얻어진 인지질-안정화 미세소포의 현탁액을 개시하였다.
출원인은 이제 상기 구성요소를 포함하는 기체 충전 미세소포의 현탁액을 사용함으로써, 더 짧은 간격으로 투여된 다른 공지된 제제와 실질적으로 동일한 치료 효과를 유지하면서 한 번의 볼루스와 후속 볼루스 사이의 간격을 증가시키는 것이 가능한 것을 발견하였다. 유리하게, 후속 볼루스의 투여 사이의 더 긴 간격은 특정 기간이 필요한 치료를 위해 투여될 필요가 있는 미세소포의 총량의 실질적인 감소를 허용한다.
본 발명의 측면은 대상체의 치료적 치료 방법에 사용하기 위한 포스파티딜콜린 (PC)의 지방산 다이에스테르, 페길화된 포스파티딜에탄올아민 (PE-PEG) 및 지방산을 포함하는 기체 충전 미세소포의 현탁액에 관한 것이며, 상기 현탁액은 후속 볼루스로서 투여된다.
바람직하게, 상기 후속 볼루스는 제1 볼루스와 제2 볼루스 사이의 적어도 4분의 간격으로 투여된다.
바람직하게 상기 조성물은 DSPC, DSPE-MPEG5000 및 팔미트산을 포함한다. 상기 미세거품은 실질적으로 물에 불용성인 생리적으로 허용되는 기체, 바람직하게 과불화 탄화수소, 보다 바람직하게 과불화부탄으로 채워진다.
본 발명의 또 다른 측면은 상기 구성요소를 60-90/2-10/5-30, 바람직하게 70-80/3-9/10-25 및 보다 바람직하게 약 72-78/5-8/15-20의 상대적인 몰비 (PC/PE-PEG/팔미트산)로 포함하는 기체 충전 미세소포에 관한 것이다.
도 1은 실시예 2a (고주파, 높은 음압)의 유출 실험의 결과를 도시하며, 칼럼 a는 Sonovue®로의 볼루스 치료의 효능을 나타내고, 칼럼 b는 Definity®로의 볼루스 치료의 효능을 나타내며 칼럼 c는 본 발명에 따르는 제제로의 볼루스 치료의 효능을 나타낸다.
도 2는 실시예 2b (저주파, 낮은 음압)의 유출 실험의 결과를 도시하며, 칼럼 a는 Definity®로의 볼루스 치료의 효능을 나타내고 칼럼 b는 본 발명에 따르는 제제로의 볼루스 치료의 효능을 나타낸다.
상기에서 언급된 것과 같이, 본 발명은 기체 충전 미세소포의 특정 제제가 공지의 제제와 관련하여 유리하게 더 긴 시간 간격으로 후속 볼루스로서 투여될 수 있다는 발견을 토대로 한다.
출원인에 의해 관찰된 바와 같이, 선행 기술 제제는 상대적으로 짧은 간격으로 볼루스로서 주사되었을 때 만족스럽게 작용할 수 있었고, 그런 간격이 증가되면 (예컨대 4분 이상) 치료의 유효성은 떨어질 수 있었다.
출원인은 이제 포스파티딜콜린의 지방산 다이에스테르, 페길화된 포스파티딜에탄올아민 및 지방산 (바람직하게 DSPC, DPPE-MPEG5000 및 팔미트산)을 포함하며, 불화 기체 (바람직하게 질소와 과불화부탄의 혼합물)를 포함하는 기체로 채워진 미세소포 제제가, 실질적으로 치료적 치료의 유효성을 떨어뜨리지 않으면서, 서로의 사이에서 4분 이상의 간격으로 후속 볼루스로서 투여될 수 있는 것을 발견하였다. 그러한 간격은 바람직하게 적어도 5분 내지 최대 예컨대 15분, 바람직하게 최대 10분이다.
유리하게, 더 긴 투여 볼루스 간격의 사용은 실질적으로 주사된 물질의 총량의 감소뿐만 아니라 치료적 치료의 유효성을 유지하면서 필요한 투여 횟수를 감소시키는 것을 허용한다.
제제
포스파티딜콜린의 지방산 다이에스테르의 예로는 다이라우로일-포스파티딜-콜린 (DLPC), 다이미리스토일-포스파티딜콜린 (DMPC), 다이팔미토일-포스파티딜-콜린 (DPPC), 다이아라키도일-포스파티딜콜린 (DAPC), 다이스테아로일-포스파티딜-콜린 (DSPC), 다이올레오일-포스파티딜콜린 (DOPC), 1,2 다이스테아로일-sn-글리세로-3-에틸포스포콜린 (에틸-DSPC), 다이펜타데카노일-포스파티딜콜린 (DPDPC), 1-미리스토일-2-팔미토일-포스파티딜콜린 (MPPC), 1-팔미토일-2-미리스토일-포스파티딜콜린 (PMPC), 1-팔미토일-2-스테아로일-포스파티딜콜린 (PSPC), 1-스테아로일-2-팔미토일-포스파티딜콜린 (SPPC), 1-팔미토일-2-올레일-포스파티딜-콜린 (POPC), 1-올레일-2-팔미토일-포스파티딜콜린 (OPPC)이 포함된다. 바람직한 것은 DPPC, DAPC, DSPC, 및 DOPC이고, 특히 바람직한 것은 DSPC이다.
페길화된 포스파티딜에탄올아민의 예로는 친수성 에탄올아민 모이어티가 가변적인 분자량 (예컨대 1000 내지 5000 g/mol)의 폴리에틸렌글리콜 (PEG) 분자에 연결되어 있는 포스파티딜에탄올아민, 예컨대 페길화된 다이팔미토일 포스파티딜에탄올아민 (DPPE-PEG) 또는 다이스테아로일 포스파티딜-에탄올아민 (DSPE-PEG)을 들 수 있다. 바람직하게 PEG는 또한 MPEG로도 표시되는 메톡시-종결 PEG이다. 다르게 표시되지 않는 경우, 본원에서 사용되는 PE-PEG라는 표현은 그것의 의미에 또한 PE-MPEG 화합물을 포함한다. 바람직한 것은 분자량이 약 5000 g/mol인 PE-PEG (또는 PE-MPEG), 예컨대 DPPE-MPEG5000 또는 DSPE-MPEG5000이다.
지방산의 예로는 (C10-C22)-알킬 카르복실산, 예컨대 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 아라키드산, 베헨산, 올레산, 리놀레산 및 리놀렌산을 들 수 있고; 바람직하게는 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산 및 아라키드산과 같은 포화 지방산; 보다 바람직하게는 팔미트산이다.
최적화된 제제에서, 상기 구성요소는 바람직하게 60-90/2-10/5-30의 상대적 몰비 (PC/PE-PEG/팔미트산) (즉 60 내지 90% 몰량의 PC, 예컨대 DSPC; 2 내지 10% 몰량의 PE-PEG, 예컨대 DPPE-PEG5000; 및 5 내지 30% 몰량의 지방산, 예컨대 팔미트산; 구성요소의 총량은 100%임), 보다 바람직하게 70-80/3-9/10-25 및 보다 더 바람직하게 약 72-78/5-8/15-20의 상대적 몰비로 존재한다.
특히 바람직한 것은 상기 상대적 몰비로 DSPC, DPPE-PEG5000 및 팔미트산을 포함하는 제제이다.
미세소포의 제조
본 발명에 따르는 미세소포는 기술분야에 알려져 있는 임의의 방법에 따라 제조될 수 있다. 전형적으로, 제조 방법은, 바람직하게 상기 조성물을 포함하는 수성 또는 유기 현탁액의 동결건조 (냉동 건조)에 의한, 발명의 조성물을 포함하는 건조된 분말 물질의 제조를 포함한다. 그런 다음 미세소포는 기체의 존재 하에 부드럽게 교반하면서 동결건조된 조제물의 수성 담체에서의 재구성에 의해 얻어질 수 있다.
바람직하게, 예를 들어 국제 특허 출원 WO2004/069284에서 개시된 것과 같이, 인지질과 지방산의 혼합물을 포함하는 조성물은 물과 혼합할 수 없는 유기 용매 (예컨대 분지형 또는 선형 알칸, 알켄, 환형 알칸, 방향족 탄화수소, 알킬 에테르, 케톤, 할로겐화된 탄화수소, 과불화 탄화수소 또는 그것들의 혼합물)와 물의 에멀션에, 바람직하게 냉동 건조 첨가제 (예컨대 탄수화물, 당 알코올, 폴리글리콜, 폴리옥시알킬렌 글리콜 및 그것들의 혼합물; 바람직하게 폴리에틸렌글리콜, 특히 PEG4000이 냉동 건조제로서 사용됨)와의 혼합물 상태로, 교반 하에 분산될 수 있다. 에멀션은 인지질 및 지방산의 존재 하에 수성 매질 및 용매를 기술분야에 알려져 있는 임의의 적절한 에멀션 생성 기법, 예를 들면 초음파 처리, 흔들기, 고압 균질환, 미세혼합, 막 유화, 흐름 집중 유화, 고속 교반 또는 고전단 혼합을 받게 함으로써 얻어질 수 있다. 바람직하게, 인지질 및 지방산을 함유하는 유기 용액이 먼저 제조되고; 별도로, 페길화된 인지질이 냉동 건조제를 함유한 수성 용액에 용해되며; 그런 다음 유기 및 수성 상이 혼합되고 상기 기술된 것과 같이 유화된다. 그렇게 얻어진 마이크로에멀션은 냉동 건조제를 함유한 용액으로 선택적으로 희석될 수 있다. 그런 다음, 인지질 및 지방산을 포함하는 안정화 층에 둘러싸인 용매의 미세액적을 함유하는 마이크로에멀션은 종래 기법에 따라 동결건조되어 동결건조 물질이 얻어진다.
냉동 건조된 생성물은 일반적으로 분말 또는 케이크의 형태이며 원하는 기체와 접촉하면서 (전형적으로 밀봉 바이알에) 보관될 수 있다. 냉동 건조제 (예컨대 PEG4000)는 전형적으로 조성물의 최대량, 예컨대 미세소포의 구성요소 (즉 PC/PE-PEG/팔미트산)의 양의 약 500 내지 약 1000배를 나타낸다. 생성물은 적절한 생리적으로 허용되는 수성 액체 담체, 예컨대 식염수에, 부드러운 흔들기에 의해 쉽게 재구성된다.
기체
임의의 생체적합 기체, 기체 전구물질 또는 그것들의 혼합물이 본 발명의 미세소포를 형성하기 위해 사용될 수 있다 (본원에서 또한 "미세소포 형성 기체"로서 확인됨).
기체는 예를 들어, 공기: 질소; 산소; 이산화탄소; 수소; 아산화질소; 헬륨, 아르곤, 제논 또는 크립톤과 같은 희기체 또는 비활성 기체; 저분자량 탄화수소 (예컨대 최대 7개의 탄소 원자 함유), 예를 들어 메탄, 에탄, 프로판, 부탄, 아이소부탄, 펜탄 또는 아이소펜탄과 같은 알칸, 사이클로부탄 또는 사이클로펜탄과 같은 사이클로알칸, 프로펜, 부텐 또는 아이소부텐과 같은 알켄, 또는 아세틸렌과 같은 알킨; 에테르; 케톤; 에스테르; 할로겐화된 기체, 바람직하게 불화 기체, 예컨대 또는 할로겐화된, 불화된 또는 과불화된 저분자량 탄화수소 (예컨대 최대 7개의 탄소 원자 함유); 또는 전술한 것 중 어느 것의 혼합물을 포함할 수 있다. 할로겐화된 탄화수소가 사용되는 경우, 바람직하게 상기 화합물의 적어도 일부의, 보다 바람직하게 모든 할로겐 원자는 불소 원자이다.
불화된 기체, 특히 과불화된 기체가 바람직하다. 불화된 기체는 적어도 하나의 불소 원자를 함유하는 물질, 예를 들어 불화된 탄화수소 (하나 이상의 탄소 원자 및 불소를 함유하는 유기 화합물); 육불화 황; 불화된, 바람직하게 과불화된 케톤, 예컨대 퍼플루오로아세톤; 및 불화된, 바람직하게 과불화된 에테르, 예컨대 퍼플루오로다이에틸 에테르를 들 수 있다. 바람직한 화합물은 과불화 기체, 예컨대 SF6 또는 퍼플루오로카본 (과불화된 탄화수소), 즉 모든 수소 원자가 불소 원자에 의해 대체된 탄화수소이며, 이것은 예를 들어 참고문헌으로 본원에 포함된 EP　0554 213에서 개시된 것과 같이 특히 안정한 미세기포 현탁액을 형성하는 것으로 알려져 있다.
용어 퍼플루오로카본은 포화, 불포화, 및 환형 퍼플루오로카본을 포함한다. 생체적합성, 생리학적으로 허용되는 퍼플루오로카본의 예는: 퍼플루오로알칸, 예컨대 퍼플루오로메탄, 퍼플루오로에탄, 퍼플루오로프로판, 퍼플루오로부탄 (예컨대 퍼플루오로-n-부탄, 선택적으로 퍼플루오로-아이소부탄과 같은 다른 이성질체와 혼합된 상태로), 퍼플루오로펜탄, 퍼플루오로헥산 또는 퍼플루오로헵탄; 퍼플루오로알켄, 예컨대 퍼플루오로프로펜, 퍼플루오로부텐 (예컨대 퍼플루오로부트-2엔) 또는 퍼플루오로부타다이엔; 퍼플루오로알킨 (예컨대 퍼플루오로부트-2-인); 및 퍼플루오로사이클로알칸 (예컨대 퍼플루오로사이클로부탄, 퍼플루오로메틸사이클로부탄, 퍼플루오로다이메틸사이클로부탄, 퍼플루오로트라이메틸사이클로부탄, 퍼플루오로사이클로펜탄, 퍼플루오로메틸사이클로펜탄, 퍼플루오로다이메틸사이클로펜탄, 퍼플루오로사이클로헥산, 퍼플루오로메틸사이클로헥산 및 퍼플루오로사이클로헵탄)이다. 바람직한 포화 퍼플루오로카본으로는, 예를 들어, CF4, C2F6, C3F8, C4F8, C4F10 및 C5F12, 바람직하게 C4F10을 들 수 있다.
또한 상기 기체들 중 임의의 것의 임의의 비율의 혼합물을 사용하는 것이 유리할 수 있다. 예를 들어, 혼합물은 종래의 기체, 예컨대 질소, 공기 또는 이산화탄소 및 안정한 미세기포 현탁액을 형성하는 기체, 예컨대 육불화황 또는 위에서 표시된 퍼플루오로카본을 포함할 수 있다. 적합한 기체 혼합물의 예는, 예를 들어, 본원에 참고문헌으로 포함된 WO　94/09829에서 찾아볼 수 있다. 다음의 조합이 특히 바람직하다: 기체 (A) 및 (B)의 혼합물로, 기체 (B)는 앞서 예시된 것들과 그것들의 혼합물 중에서 선택된 불화된 기체이며, (A)는 공기, 산소, 질소, 이산화탄소 또는 그것들의 혼합물로부터 선택된다. 기체 (B)의 양은 총 혼합물의 약 0.5% 내지 약 95% 부피/부피, 바람직하게 약 5% 내지 80%를 나타낼 수 있다.
특히 바람직한 기체는, 선택적으로 공기, 산소, 질소, 이산화탄소 또는 그것들의 혼합물과 혼합된 상태의 SF6, C3F8, C4F10 또는 그것들의 혼합물이다. 특히 바람직한 것은 C4F10이며 보다 더 바람직한 것은, 바람직하게 35/65 부피/부피 비율의 질소와 C4F10의 혼합물이다.
제약학적 키트 및 투여
본 발명에 따르는 미세소포 현탁액은 그대로 또는 바람직하게는 수성 담체로 재구성될 수 있는 동결 건조된 전구물질의 형태로 보관될 수 있다. 발명에 따르면, 미세소포 현탁액의 전구물질은 그러므로 바람직하게 건조된 분말 형태로 보관되고 그로써 바람직하게 주사에 의한 투여를 위해 유리하게 2 구성요소 진단 및/또는 치료용 키트에 포장될 수 있다. 키트는 바람직하게 선택된 미세소포 형성 기체와 접촉하는 동결건조된 전구물질 조성물을 함유하는 제1 용기 및 미세소포의 현탁액을 재구성하기 위한 생리적으로 허용되는 수성 담체, 특히 식염수를 함유하는 제2 용기를 포함한다. 상기 2 구성요소 키트는 2개의 별도의 용기 또는 이중 챔버 용기를 포함할 수 있다. 전자의 경우 용기는 바람직하게 종래의 격막 밀봉 바이알이며, 동결건조된 잔류물을 함유한 바이알은 격막으로 밀봉되고 격막을 통해 담체 액체가 선택적으로 사전 충전된 주사기를 사용하여 주입될 수 있다. 그러한 경우에 제2 구성요소의 용기로서 사용된 주사기는 또한 나중에 미세소포의 현탁액을 주입하기 위해 사용된다. 후자의 경우에, 이중 챔버 용기는 바람직하게 이중 챔버 주사기이며 동결 건조된 생성물이 재구성된 후에 그리고 적합하게 혼합되거나 부드럽게 흔들어준 후에, 용기는 직접 미세소포의 현탁액을 주입하기 위해 사용될 수 있다.
그렇게 재구성된 현탁액은 상기 언급된 구성요소 (PC, PE-PEG 및 지방산)를, 바람직하게 상기 표시된 상대적 몰 비율로 포함하는 안정화 층을 가지며, 바람직하게 질소와 퍼플루오로부탄의 혼합물 (65/35 부피/부피)을 함유한 기체 충전 미세소포를 함유한다. 전형적으로, 재구성된 기체 충전 미세소포는 약 2.5 내지 4 마이크론, 바람직하게 3.0 내지 3.5 마이크론의 부피 농도 중앙값 (Dv50), 및 약 1 내지 2 마이크론, 바람직하게 1.2 내지 1.8 마이크론의 수평균 직경 (Dn)을 가진다. 전형적으로, 실질적으로 모든 미세소포 (예컨대 적어도 98%, 바람직하게 99%, 보다 바람직하게 100%)는 8 마이크론 미만의 직경을 가진다. 일반적으로, 2 내지 8 마이크론의 기체 충전 미세소포의 양은 현탁액 중의 미세소포의 총 수의 약 5% 내지 약 40% (바람직하게 10-30%)일 수 있다. 재구성의 부피에 따라, 현탁액 중의 기체 충전 미세소포의 농도는 약 1x108 내지 약 2x109 미세소포/mL로 다를 수 있다.
본 발명의 미세소포 현탁액은 초음파와 함께 용기 투과도를 증가시키기 위하여 다양한 치료 기법에 사용될 수 있다. 그러한 치료적 치료로는, 예를 들어, 의약품의 전달의 촉진/증가 (예컨대, 예를 들어 종양 또는 신경학적 장애의 치료에서 약물 또는 유전자의 치료적 효능을 증강시키기 위하여), 혈액 응고물의 파괴, 면역조절, 신경조절, 방사선 감작 또는 비열성 조직 절제를 들 수 있다.
바람직한 구체예에 따르면, 유효량의 미세소포는, 바람직하게 후속 볼루스로서 의약품, 예컨대 항종양 약물과 함께, 전형적으로 그것의 현탁액의 주사에 의해 환자에게 투여된다. 미세소포의 현탁액의 투여는 의약의 투여와 관련하여 동시에 또는 후속적일 수 있다.
본원에서 사용되는 바 "볼루스 투여"라는 표현은, 예컨대 주사기 및 말초 정맥에 배치된 카테터에 의한, 특정 부피의 기체 충전 미세소포의 현탁액의 단일 정맥내 주사를 나타낸다. 볼루스의 투여는 일반적으로 수초 이내에 (예컨대 5 내지 120초, 바람직하게 60초 이하) 수행된다. "후속적인" 또는 "반복된" 볼루스는 특정 기간 후, 예컨대, 발명에 따르면 적어도 4분 후 반복되는 볼루스 주사를 나타낸다.
현탁액 (볼루스)의 각각의 주사된 부피에 대한 미세소포의 총량은 환자의 kg당 6x105 내지 2x109 미세소포, 바람직하게 kg당 1x107 내지 1x109 미세소포, 보다 더 바람직하게 kg당 2x107 내지 4x108 미세소포로 다를 수 있다.
각각의 주사된 볼루스의 부피는 주사된 현탁액의 미세소포의 농도 및 환자의 체중을 고려하여 주사될 미세소포의 필요한 총량 (일반적으로 수행될 특정 치료에 따름)에 대해 적응된다. 일반적으로, 약 1x108 내지 약 2x109 미세소포/mL의 현탁액 중의 미세소포의 농도의 경우, 볼루스 부피는 0.01 내지 120 mL, 바람직하게 0.2 내지 60 mL, 및 보다 더 바람직하게 0.4 내지 20 mL로 다를 수 있다.
본 발명의 조성물이 후속 볼루스로서 임의의 시간 간격으로 투여될 수 있는 한편으로, 출원인은 공지의 미세소포 제제와 관련하여 더 긴 간격으로 투여함으로써 초음파와 함께 제제가 치료적 치료에 사용될 수 있음을 관찰하였다. 특히, 두 후속 볼루스 사이의 상기 시간 간격은 적어도 4분, 바람직하게 5분 내지 최대 예컨대 15분, 바람직하게 최대 10분일 수 있다. 다른 한편으로, 숙련된 사람은 볼루스와 후속 볼루스 사이에 더 짧은 간격으로 발명의 제제를 사용함으로써, 그럼에도 불구하고 치료 효능이 동일한 조건 (즉 미세소포의 농도 및 시간 간격)에서 주사되는 기체 충전 미세소포의 다른 공지의 제제에 의해 생성되는 치료 효능과 관련하여 개선되는 것을 인정할 것이다.
미세소포의 존재 하에 치료될 신체 부분의 적합한 인소네이션(insonation)은, 예컨대 기체 충전 미세소포의 현탁액과 함께 투여된 의약의 치료 효능을 증가시킴으로써 원하는 향상된 치료 효과를 제공할 것이다. 인소네이션은 통상의 조건에서 수행될 수 있다. 예를 들어, 0.1 MHz 내지 15 MHz, 바람직하게 0.15 - 5 MHz, 보다 바람직하게 0.2 - 2.5 MHz의 주파수에서 인소네이션이 사용될 수 있다. 음압은 50 kPa 내지 10 MPa, 바람직하게 100 kPa 내지 5 MPa, 보다 바람직하게 100 kPa 내지 3.5 MPa일 수 있다. 펄스 길이는 특정 치료 및 치료될 장기에 적응되며 1초 내지 120초, 바람직하게 최대 60초, 보다 바람직하게 최대 1초로 다를 수 있다.
다음의 실시예는 발명을 추가로 예시하는 것을 도울 것이다.
실시예
물질
Figure pct00001
실시예 1
실험 제형 (F01)의 제조
후속 실험에 사용하기 위한 실험 제형 (FO1)을 제조하기 위하여 WO2004/069284의 작업 실시예에 예시된 과정을 사용하였다.
간단히 설명하면, 약 90 mg/l의 DSPC, 7 mg/l의 팔미트산, 60 mg/l의 DPPE-PEG5000 및 100 g/l의 PEG4000을 함유한 사이클로옥탄과 물 (약 1.5/100 부피/부피)의 에멀션을 제조하고 (Megatron MT3000, Kinematica; 10'000 rpm) DIN8R 바이알에 샘플링하였다 (약 1 ml/바이알).
바이알을 -50℃에서 진공 하에 냉각한 다음 동결건조를 적용한 후, 물과 용매가 완전히 제거될 때까지 (0.5 중량% 미만으로) 실온보다 높은 온도에서에서 이차 건조를 수행하였다. 동결건조 과정이 끝났을 때, 바이알의 헤드 공간은 C4F10/N2의 35/65 혼합물로 포화되며 바이알의 마개를 닫고 밀봉하였다.
실험 전에, 바이알을 1 ml의 식염수로 재구성하였다.
실시예 2
실험 제형 F01의 치료적 효능
일반 설정
CYⓒ5.5 모노 NHS 에스테르를 이전에 염기성 완충액 (포스페이트 100 mM, 식염수 150 mM, pH 8)을 사용하여 밤새 실온에서 가수분해하였다. 마취된 동물 (수컷 스프라그 다울리 래트)에게 가수분해된 Cyⓒ5.5 (Cy5.5h)를 정맥내 주사하여 3.3 μM의 초기 혈장 농도를 얻었다. 그런 다음, 기체 충전 미세소포 (후속 실시예에서 명시된 것과 같음)의 일련의 볼루스 주사를 수행하였고 좌측 뒷다리 근육에 치료적 인소네이션을 시행하였다 (주파수, 음압 및 펄스 특징은 후속 실시예에서 명시된 것과 같음).
볼루스를 5분의 간격을 두었고 절차의 총 기간은 10 내지 20분이었다.
다음의 실시예 2a 및 2b에서, 발명의 기체 충전 미세소포 (F01, DSPC, DPPE-MPEG5000 및 팔미트산의 혼합물을 포함함)의 Cy5.5h 유출을 유도하는 능력을 동일한 조건 하에서 Sonovue® (DSPC, DPPG, 팔미트산 혼합물) 및 상이한 조건 (주파수 0.5 MHz 내지 1.6 MHz; 음압 170 kPa 내지 800 kPa) 하에서 Definity® (DPPC, DPPA, DPPE-MPEG5000 혼합물)와 비교하였다.
기체 충전 미세소포와 초음파의 조합의 치료 효과를, 그것의 주사 후 120분 후에 뒷다리 근육에서 Cy5.5h의 유출 수준을 측정함으로써 평가하였다. 이것은 신선한 조직에 대한 근적외선 형광 이미징 (Fluobeam®700 Fluoptics Grenoble)에 의해 Cy5.5h 형광 신호의 생체외 정량적 측정에 의해 달성하였다. 치료 효능은 처리된 근육과 대조군 근육 (우측 뒷다리, 인소네이션을 받지 않았음) 사이의 평균 형광 신호 비율이 1.5보다 높을 때 양성인 것으로 간주하였다.
실시예 2a
각각의 동물 (위의 "일반 설정" 섹션 참고)에게 F01, Sonovue 또는 Definity의 4회의 후속 볼루스 주사를, 각 볼루스에 대해 동물 kg당 약 6x107 미세소포의 농도로, 서로에 대해 5분의 간격을 두고 제공하였다.
각 제제에 대해 5마리의 동물을 테스트하였다.
좌측 뒷다리 근육에 20분 동안 800 kPa, 1.6 MHz, 1분 온 - 4초 오프의 초음파 처리를 실행하였다.
도 1의 결과로부터 관찰되는 바 (칼럼 c), FO1과 조합된 초음파로 처리된 근육에서 형광 신호는 대조군 근육에서 측정된 신호와 관련하여 적어도 2배였다. 대조적으로, SonoVue 또는 Definity 기체 충전 미세소포는 동일한 조건에서 각각 5분 주사되었을 때 Cy5.5h 유출을 유도할 수 없었다 (각각 칼럼 a 및 b).
실시예 2b
F01 및 Definity를 사용하여, 각각 동물 kg당 약 1x109 미세소포의 농도로 2개의 후속 볼루스 (5분 간격임)를 투여함으로써 실시예 2a와 동일한 실험을 반복하였다.
F01 및 Definity에 대하여 각각 3마리 및 4마리 동물을 테스트하였다.
좌측 뒷다리 근육에 10분 동안 170 KPa 및 0.5 MHz (1분 온 - 4초 오프)로 초음파 처리를 적용하였다.
도 2의 결과는 FO1 및 초음파로 처리된 근육의 형광 신호 (칼럼 b)가 대조군 근육에서 측정된 신호와 관련하여 2배 이상이었음을 보여준다. 대조적으로, Definity 기체 충전 미세소포는 동일한 조건에서 각각 5분 주사되었을 때 Cy5.5h 유출을 유도할 수 없었다 (칼럼 a).
상기 실험 결과는 후속 볼루스로서 투여되었을 때, 상이한 초음파 인소네이션 조건에서, 초음파 처리와 함께 혈관 투과도를 증가시키는데 본 발명의 조성물의 더 높은 (상업적 미세소포 조성물과 관련하여) 효능을 보여준다.
인용된 참고문헌의 목록
참고문헌 1: Wang, Y. et al. (2018). "Clinical study of ultrasound and microbubbles for enhancing chemotherapeutic sensitivity of malignant tumors in digestive system". Chin J Cancer Res 30(5): 553-563
참고문헌 2: Auboire, L. et al. (2018). "Microbubbles combined with ultrasound therapy in ischemic stroke: A systematic review of in-vivo preclinical studies". PLoS One 13(2): e0191788.
참고문헌 3: Huang, Y. et al. (2017). "Opening the Blood-Brain Barrier with MR Imaging-guided Focused Ultrasound: Preclinical Testing on a Trans-Human Skull Porcine Model". Radiology: Volume 282: Number 1, 123-130.
참고문헌 4: Tu, J. et al. (2018). "Ultrasound-mediated microbubble destruction: a new method in cancer immunotherapy". OncoTargets and Therapy Vol. 11: 5763-5775.
참고문헌 5: Blackmore, J. et al. (2019). "Ultrasound Neuromodulation: A Review of Results, Mechanisms and Safety". Ultrasound Med Biol 45(7): 1509-1536.
참고문헌 6: Deng, H. et al. (2018). "Ultrasound-Stimulated Microbubbles Enhance Radiosensitization of Nasopharyngeal Carcinoma". Cell Physiol Biochem 48(4): 1530-1542.
참고문헌 7: Arvanitis c et al. (2016). "Cavitation-enhanced nonthermal ablation in deep brain targets: feasibility in a large animal model". J Neurosurg.; 124(5): 1450-1459.
참고문헌 8: Thomas, E. et al. (2019). "Ultrasound-mediated cavitation enhances the delivery ofan EGFR-targeting liposomal formulation designed for chemo-radionuclide therapy". Theranostics 2019, Vol. 9, Issue 19, 5595-5609
참고문헌 9: Dimcevski, G. et al. (2011). "A human clinical trial using ultrasound and microbubbles to enhance gemcitabine treatment of inoperable pancreatic cancer". J. Controlled Release 243 (2016) 172-181
참고문헌 10: Schneider, M. et al. (2011). "BR38, a New Ultrasound Blood Pool Agent". Inv. Radiology · Vol. 46, Number 8, 486-494.

Claims (22)

  1. 치료적 방법에 사용하기 위한, 포스파티딜콜린 (PC)의 지방산 다이에스테르, 페길화된 포스파티딜에탄올아민 (PE-PEG) 및 지방산을 포함하는 기체 충전 미세소포의 현탁액으로서, 상기 현탁액은 적어도 2개의 후속 볼루스로서 투여되는, 현탁액.
  2. 제1항에 있어서, 상기 적어도 2개의 후속 볼루스는 서로의 사이에 적어도 4분의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  3. 제1항에 있어서, 상기 적어도 2개의 후속 볼루스는 서로의 사이에 적어도 5분의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, PC/PE-PEG/팔미트산의 상대적인 몰비는 60-90/2-10/5-30인 것을 특징으로 하는 현탁액.
  5. 제4항에 있어서, 상기 비율은 70-80/3-9/10-25인 것을 특징으로 하는 현탁액.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기체 충전 미세소포는 DSPC, DPPE-MPEG-5000 및 팔미트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기체 충전 미세소포는 불화된 기체를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 초음파를 적용하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  9. 제8항에 있어서, 상기 방법은 상기 치료 방법이 진행되는 대상체에서 혈관 투과도를 증가시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액의 각각의 주사된 부피에 대한 미세소포의 총량은 상기 치료 방법이 진행되는 대상체의 kg당 6x105 내지 2x109 미세소포인 것을 특징으로 하는 현탁액.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 주사된 현탁액 중의 미세소포의 농도는 1x108 내지 2x109 미세소포/mL인 것을 특징으로 하는 현탁액.
  12. 환자의 치료적 치료 방법으로서, 상기 환자에게 포스파티딜콜린 (PC)의 지방산 다이에스테르, 페길화된 포스파티딜에탄올아민 (PE-PEG) 및 지방산을 포함하는 기체 충전 미세소포의 현탁액의 2개의 후속 볼로수를 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 적어도 2개의 후속 볼루스는 서로의 사이에 적어도 4분의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 적어도 2개의 후속 볼루스는 서로의 사이에 적어도 5분의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, PC/PE-PEG/팔미트산의 상대적인 몰비는 60-90/2-10/5-30인 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 비율은 70-80/3-9/10-25인 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제12항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기체 충전 미세소포는 DSPC, DPPE-MPEG-5000 및 팔미트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기체 충전 미세소포는 불화된 기체를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 제12항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 초음파를 적용하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 방법은 치상기 치료적 치료가 진행되는 환자에서 혈관 투과도를 증가시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  21. 제12항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액의 각각의 주사된 부피에 대한 미세소포의 총량은 환자의 kg당 6x105 내지 2x109 미세소포인 것을 특징으로 하는 방법.
  22. 제12항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 주사된 현탁액 중의 미세소포의 농도는 1x108 내지 2x109 미세소포/mL인 것을 특징으로 하는 방법.
KR1020227028178A 2020-02-11 2021-02-10 치료용 기체 충전 미세소포 KR20220140527A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202062975005P 2020-02-11 2020-02-11
US62/975,005 2020-02-11
PCT/EP2021/053183 WO2021160659A1 (en) 2020-02-11 2021-02-10 Gas-filled microvesicles for therapeutic use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220140527A true KR20220140527A (ko) 2022-10-18

Family

ID=74625954

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227028178A KR20220140527A (ko) 2020-02-11 2021-02-10 치료용 기체 충전 미세소포

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20230057224A1 (ko)
EP (1) EP4103152A1 (ko)
JP (1) JP2023512943A (ko)
KR (1) KR20220140527A (ko)
CN (1) CN115103667A (ko)
CA (1) CA3165200A1 (ko)
WO (1) WO2021160659A1 (ko)

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5445813A (en) 1992-11-02 1995-08-29 Bracco International B.V. Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography
IL104084A (en) 1992-01-24 1996-09-12 Bracco Int Bv Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them
KR101076053B1 (ko) 2003-02-04 2011-10-21 브라코 인터내셔날 비.브이. 초음파 조영제 및 그것의 제조방법
CA2748995C (en) * 2008-10-07 2018-01-16 Bracco Suisse Sa Targeting construct comprising anti-polymer antibody and liposomes or microvesicles binding to the same
WO2014096165A2 (en) * 2012-12-21 2014-06-26 Bracco Suisse Sa Gas-filled microvesicles
JP6803839B2 (ja) * 2014-12-18 2020-12-23 ブラッコ・スイス・ソシエテ・アノニムＢｒａｃｃｏ Ｓｕｉｓｓｅ ＳＡ 標的化されたガス入りの微小胞の製剤
JP2017537907A (ja) * 2014-12-22 2017-12-21 ブラッコ・スイス・ソシエテ・アノニムＢｒａｃｃｏ Ｓｕｉｓｓｅ ＳＡ ワクチンとしての使用のためのガス入りの微小胞

Also Published As

Publication number Publication date
WO2021160659A1 (en) 2021-08-19
CA3165200A1 (en) 2021-08-19
JP2023512943A (ja) 2023-03-30
US20230057224A1 (en) 2023-02-23
CN115103667A (zh) 2022-09-23
EP4103152A1 (en) 2022-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101076053B1 (ko) 초음파 조영제 및 그것의 제조방법
RU2204415C2 (ru) Комбинированный препарат для использования в качестве контрастного агента и способ получения изображения
US20010051131A1 (en) Methods for delivering bioactive agents
KR102626600B1 (ko) 동결 건조 제품 및 가스 충전된 미세소포 현탁액
PT1323434E (pt) Método para imagiologia de diagnóstico da região renal utilizando um agente de contraste e um vasodilatador
JP2005504756A (ja) 注射可能な泡製剤および新規な医薬的適用
EP3308779B1 (en) Theranostic bubble preparation (tb), and method for using same
BR112017011258B1 (pt) Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e kit farmacêutico
CN105026030B (zh) 充气微泡
US20230057224A1 (en) Gas-filled microvesicles for therapeutic use
JP2003508126A (ja) 重力によって分離する分散物の連続的注入による投与
US20230226184A1 (en) Improvements in ultrasound-mediated therapy
EP4241763A1 (en) Emulsion for non-invasive blood-brain barrier transient opening and controlled drug release into the brain
Bellary et al. Perfusion-Guided Monitoring of Tumor Response to Sonoporation and Prediction of Liposomal Doxorubicin Uptake Using Microbubble Contrast Agents
WO2006076826A1 (fr) Composition de contraste pour ultrasons utilisant un phospholipide filmogene et procede de preparation de celle-ci
WO2001024705A1 (en) Improved methods for delivering bioactive agents
WO2024050075A2 (en) Methods and compositions for treatment of vascular obstruction
WO2024033540A1 (en) Freeze-dried nanodroplets with fluorinated compound
AU6188501A (en) Improved methods for diagnostic imaging by regulating the administration rate of a contrast agent