KR20220129554A - Enl/af9 yeats의 억제제 - Google Patents

Enl/af9 yeats의 억제제 Download PDF

Info

Publication number
KR20220129554A
KR20220129554A KR1020227024539A KR20227024539A KR20220129554A KR 20220129554 A KR20220129554 A KR 20220129554A KR 1020227024539 A KR1020227024539 A KR 1020227024539A KR 20227024539 A KR20227024539 A KR 20227024539A KR 20220129554 A KR20220129554 A KR 20220129554A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
mmol
methyl
equiv
alkyl
heterocycle
Prior art date
Application number
KR1020227024539A
Other languages
English (en)
Inventor
탄위어 에이. 칸
나이젤 리버튼
요시유키 후카세
마야코 미치노
앤드류 더블유. 스탬포드
마이클 더블유. 밀러
데이비드 허긴스
피터 마인케
씨. 데이비드 앨리스
릴링 완
태미 래두와헤티
조셉 바카
Original Assignee
더 락커펠러 유니버시티
브리지 메디슨, 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 더 락커펠러 유니버시티, 브리지 메디슨, 엘엘씨 filed Critical 더 락커펠러 유니버시티
Publication of KR20220129554A publication Critical patent/KR20220129554A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Abstract

백혈병을 치료하기 위한 방법 및 조성물을 개시한다. 하기 화학식의 아실화된 6-아미노인돌, 아실화된 6-아미노피롤로피리딘 및 아실화된 3-아미노피롤로[3,2-c]피리다진은 ENL/AF9 YEATS를 억제하며 따라서 백혈병 치료에 유용하다.

Description

ENL/AF9 YEATS의 억제제
관련 출원에 대한 상호참조
본원은 2019년 12월 17일자로 출원된 미국 가 출원 제 62/949,160 호로부터 우선권을 주장하며, 이 출원은 내용 전체가 본원에 참고로 포함된다.
정부 권리 진술
본 발명은 국립보건원이 수여한 교부금 번호 K99 CA226399-01 하에 정부 지원으로 이루어졌다. 정부는 발명에 대한 특정 권리를 갖고 있다.
발명의 분야
본원은 일반적으로, ENL/AF9 YEATS를 억제하고 따라서 백혈병 치료에 유용한 화합물에 관한 것이다. 화합물은 아실화된 6-아미노인돌 및 아실화된 6-아미노피롤로피리딘이다.
암 세포는 비정상적인 후성 유전적 지형을 특징으로 하며 종종 종양형성 유전자 발현 프로그램을 활성화하기 위해 염색질 기구를 이용한다. "리더" 단백질에 의한 변형된 히스톤의 인식은 이러한 과정의 기초가 되는 핵심 기전을 구성하며; 따라서 이와 같은 경로를 표적으로 하는 것은 BET(브로모- 및 추가-말단 도메인) 브로모도메인 억제제의 개발에 의해 예시된 바와 같이 임상적 가능성을 보유한다. YEATS 도메인은 아세틸리신-결합 모듈이다. 최근에 문헌[Wan et al. Nature 543, 265-269 (2017)]은 YEATS 도메인-함유 단백질 ENL이 급성 골수성 백혈병(AML)의 질병 유지에 필요하다는 것을 입증하였다. ENL의 고갈은 증가된 말단 골수 분화 및 백혈병 성장의 억제를 포함하는 항-백혈병 효과로 이어졌다. ENL은 아세틸화된 히스톤 H3에 결합하고, 백혈병에 필수적인 능동적으로 전사된 유전자의 프로모터상에 H3K27ac 및 H3K9ac와 함께 위치한다. 구조-기반 돌연변이유발을 통해 YEATS 도메인과 히스톤 아세틸화 사이의 상호 작용을 방해하여, ENL 표적 유전자에 대한 RNA 폴리머라제 II 모집이 감소하여 종양형성 유전자 발현 프로그램이 억제된다. 중요하게는, ENL의 기능이 중단되면 백혈병 세포가 BET 억제제에 더욱 민감해진다. 따라서 ENL 억제제는 단독으로 또는 BET 억제제와 함께 AML에 대한 유망한 치료법을 나타낸다.
다수의 BET 억제제가 현재 또는 최근에 임상 시험 중에 있다. 예를 들어, 경구 BET 억제제인 비라브레십(Birabresib)(OTX015)(CAS No. 202590-98-5)은 현재 급성 백혈병 환자와 일부 진행성 고형 종양 환자를 대상으로 임상 시험 중이다. BET-d246(CAS No. 2140289-17-2)은 마우스의 전임상 연구에서 강력한 항종양 활성을 나타내는 것으로 보고되고 있다. 미베브레십(Mivebresib)(ABBV-075)(CAS No. 1445993-26-9)은 고형 종양(파트 1) 및 급성 골수성 백혈병(AML, 파트 2) 환자를 대상으로 한 2-부로 구성된 1상 연구에서 내약성이 우수했으며 재발성 및 불응성 AML 환자에서 항백혈병 효과를 보였다. 마우스에서 I-BET 151(CAS 번호 1300031-49-5)은 골수종 종양을 감소시켰고; 생체 내 I-BET 151 처리는 환자-유래된 1차 샘플의 백혈병 생착을 손상시키며 마우스의 질병 부담을 낮춘다. RO6870810/TEN-010(CAS 번호 1349719-98-7)은 AML 및 골수이형성 증후군 환자에 대한 임상 시험 중에 있다. CPI-0610(CAS No. 1380087-89-7)은 진행성 림프종 및 다발성 골수종 환자를 대상으로 임상 시험 중이다. 몰리브레십(Molibresib)(I-BET-762)(CAS No. 1260907-17-2)은 NUT 암종에 대한 임상 시험 중이다. CPI 203(CAS No. 1446144-04-2)은 골수 섬유증 환자를 대상으로 하는 임상 2상 시험 중이다. PFI-1(CAS No. 1403764-72-6)은 고형 종양에 대한 임상 1상 시험 중이었다. JQ1(CAS 번호 1268524-70-4)은 브로모도메인 단백질의 BET 계열의 강력한 억제제이다. 실험실 응용 분야에서 널리 사용되는 JQ1은 반감기가 짧아 인간 치료제로 사용할 수 없다.
본 발명은 YEATS/ENL의 억제, 및 이에 의한 다양한 암, 특히 백혈병과 같은 혈액암의 치료를 위한 화합물, 약학 조성물 및 방법에 관한 것이다.
하나의 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 Ia의 화합물에 관한 것이다:
[화학식 Ia]
Figure pct00001
여기서:
X1, X2, 및 X3은 N 및 CR4 중에서 독립적으로 선택되나, 단
(1) X1, X2, 및 X3 중 2개 이하는 N이고;
(2) X1　및/또는 X2가 CR4일 때, X3은 N이 아니고;
R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택되고;
R4는 H, CH3, 및 Cl 중에서 선택되고;
R5는 5- 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클; 상기 헤테로사이클의 질소에 부착되지 않은, 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클은 (C1-8)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CONH(C0-3H1-7), -SO2NH(C1-6)옥사알킬, -CN, CH2CN, CH2NH2, -NH2, NR14 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환될 수 있고, 이때 R14는 수소, (C1-6)플루오로알킬, 및 (C1-3)옥사알킬, -CH2OH, 벤질옥시, -C(=NH)-NH2, -A-Het 및 추가로, R5가 5- 또는 6-원 헤테로사이클일 때, 비사이클릭 5:6 헤테로사이클, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴나졸린, 또는 벤조[b][1,4]옥사진, =O 중에서 독립적으로 선택되고; 여기서 A는 직접 결합, -(C1-6)알킬-, -(C1-10)옥사알킬-, -CO(C1-6)알킬-, -SO2(C1-6)알킬-, -SO2NH(C1-6)알킬-, 및 -CONH(C1-6)알킬- 중에서 선택되고; Het는 (C1-6)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, (C1-10)옥사알킬(C=O)-, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴이나; 단
(1) X1, X2, 및 X3이 모두 탄소이고 R5가 임의로 치환된 페닐일 때,
R5는
Figure pct00002
이고;
(2) R5는 1,3-이치환된 피라졸 또는 5-옥사알킬인다졸이 아니고;
R6은 H, Me, F, 및 Cl 중에서 선택되고;
R7은 수소 또는 할로겐이고;
R8은 (C1-10)옥사알킬, 헤테로사이클릴, 및 헤테로사이클릴(C1-10)옥사알킬 중에서 선택되고;
R11, R12 및 R13은 하기 3개의 그룹 중에서 선택된다:
(a) R11은 H 또는 CH3이고;
R12는 H, (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌, 및 5- 또는 6-원 모노사이클릭 헤테로사이클릴 중에서 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있고;
R13은 수소 또는 메틸이거나; 또는
(b) R11 및 R12가 함께 질소를 통해 부착된 임의로 치환된 질소함유 헤테로사이클을 형성하고, 상기 질소함유 헤테로사이클은 (a) 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (b) 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (c) 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, 및 (d) 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄 중에서 선택되고, 여기서 상기 임의의 치환체는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 독립적으로 선택되고;
R13은 H, (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택되거나; 또는
(c) R11은 H이고;
R12 및 R13이 함께 3- 내지 7-원 지방족 카보사이클을 형성하고, 여기서 상기 카보사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 Ib의 화합물에 관한 것이다:
[화학식 Ib]
Figure pct00003
여기서 R11 및 R12는 함께 임의로 치환된 질소함유 헤테로사이클, Q를 형성하고, Q는 (a) 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (b) 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (c) 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, 및 (d) 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄 중에서 선택되고, 여기서 상기 임의의 치환체는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 독립적으로 선택되고;
R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택된다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
화학식 I
Figure pct00004
여기서:
X1, X2, 및 X3은 N 및 CR4 중에서 독립적으로 선택되나, 단 X1, X2, 및 X3 중 2개 이하는 N이고;
n은 1, 2 또는 3이고;
R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택되고;
R2a 및 R2b는 독립적으로 H 및 (C1-6)알킬 중에서 선택되거나, 또는 R2a 및 R2b가 함께 스피로 4, 5 또는 6원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하고;
R3은 각각의 경우에 독립적으로 CHCOOH, NR10, O, 및 CR10aR10b 중에서 선택되고;
R10, R10a 및 R10b는 독립적으로 H 및 (C1-6)알킬 중에서 선택되거나, 또는 R10a 및 R10b가 함께 스피로 4, 5, 또는 6원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
R2a 및 R10a가 함께 축합된 4, 5 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하고;
R4는 H, CH3, F 및 Cl 중에서 선택되고;
R5는 5- 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클; 비사이클릭 5-6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6-6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클은 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CONH(C0-3H1-7), -CN, -NH2, -CH2OH, 벤질옥시, 및 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환될 수 있으나; 단
X1, X2, 및 X3이 모두 탄소이고 R5가 임의로 치환된 페닐일 때,
R5는
Figure pct00005
이고;
R6은 H, Me, F, 및 Cl 중에서 선택되고;
R7은 수소 또는 할로겐이고;
R8은 헤테로사이클릴이다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 세포를 본원에 기재된 바와 같은 화합물에 노출시킴을 포함하는, 세포에서 종양유전자 발현을 억제하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 유효 용량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여함을 포함하는, 백혈병 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 약학적으로 허용가능한 담체 및 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 상술한 바와 같은 하기의 구조 Ia 또는 Ib 또는 I를 갖는 사이클릭 화합물을 제공한다:
화학식 Ia
Figure pct00006
화학식 Ib
Figure pct00007
화학식 I
Figure pct00008
화학식 I, Ia 및 Ib의 화합물은 백혈병 치료에 유용하다. 유형 Ia는 중심 고리 시스템에 기반하여 5개의 하위유형으로 나뉘어질 수 있다.
제1 하위유형에서, X2는 질소이고, 화합물은 하기 화학식 II의 피롤로[3,2-c]피리딘이다:
[화학식 II]
Figure pct00009
제2 하위유형에서, X1은 질소이고, 화합물은 하기 화학식 III의 피롤로[3,2-b]피리딘이다:
[화학식 III]
Figure pct00010
제3 하위유형에서, X3은 질소이고, 화합물은 하기 화학식 IV의 피롤로[2,3-b]피리딘이다:
[화학식 IV]
Figure pct00011
제4 하위유형에서, X1, X2 및 X3은 모두 탄소이고, 화합물은 하기 화학식 V의 인돌이다:
[화학식 V]
Figure pct00012
제5 하위유형에서, X1 및 X2는 질소이고 X3은 탄소이고, 화합물은 하기 화학식 VI의 피롤로[3,2-c]피리다진이다:
[화학식 VI]
Figure pct00013
유형 Ib는 Q에 기반하여 4개의 하위유형으로 나뉘어질 수 있다. 화학식 Ib의 구현예에서, Q는 (a) 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (b) 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (c) 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, 및 (d) (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH로 임의로 치환된 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄일 수 있다.
화학식 Ib의 일부 구현예에서, Q는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환된 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클이다.
화학식 Ib의 일부 구현예에서, Q는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환된 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클이다.
화학식 Ib의 일부 구현예에서, Q는 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클이다.
화학식 I-VI의 구현예에서, R5는 페닐, 인다졸, 피리딘, 이미다졸로피리딘, 피라졸로피리미딘, 이미다졸로피라진, 트리아졸로피리딘, 및 벤즈옥사진, 또는 이들의 환원된 형태 중에서 선택된 카보사이클 또는 헤테로사이클일 수 있다. 카보사이클 또는 헤테로사이클 R5는 임의로 치환될 수 있지만, 상기에 나타낸 바와 같이, X1, X2 및 X3이 모두 탄소이고(즉 화학식 V), R5가 페닐일 때, 상기 페닐은 헤테로사이클릴로 치환되어야 한다. 특정한 구현예에서, R5는 메틸로 치환된 인다졸이다.
X1, X2 및 X3이 모두 탄소인 구현예에서, 인돌은 하기 화학식 Vb를 가질 수 있다:
[화학식 Vb]
Figure pct00014
여기서:
R5a는 5- 또는 6-원 헤테로사이클 또는 지방족 카보사이클; 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택된다. 상기 카보사이클, 헤테로사이클 또는 지방족 카보사이클은 (C1-6)알킬, (C1-6)알콕시, 할로겐, 및 (C1-6)할로알킬 중에서 선택된 기로 임의로 치환될 수 있다.
R5가 페닐일 때, 화합물은 하기 화학식 Vc의 인돌일 수 있다:
[화학식 Vc]
Figure pct00015
여기서:
R5b는
Figure pct00016
이고;
R7은 수소 또는 할로겐이고;
R8은 헤테로사이클릴이다.
화학식 Vc의 일부 구현예에서, R8은 피라진, 피리미딘, 피리다진 및 피리딘 중에서 선택될 수 있다.
화학식 I-V의 화합물에서, 일부 구현예에서, R11은 수소이다. 일부 구현예에서, R12 및 R13은 함께 3- 내지 7-원 지방족 카보사이클을 형성하고, 여기서 상기 카보사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있다.
화학식 I-V의 화합물에서, 일부 구현예에서, R11 및 R13은 수소, 메틸 또는 이들의 조합이다. 일부 구현예에서, R12는 수소, (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌, 및 5- 또는 6-원 모노사이클릭 헤테로사이클릴이고, 여기서 상기 헤테로사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있다.
화학식 I의 일부 구현예에서, R1은 수소일 수 있다. 일부 구현예에서 n은 2일 수 있다. 일부 구현예에서, R2a, R2b, R10a, 및 R10b 중 하나는 메틸 또는 카복시이고 나머지 경우는 수소일 수 있다. 일부 구현예에서, R3은 CHCOOH이고, R2a, R2b, R10a, 및 R10b 중 나머지 경우는 수소일 수 있다. R2a가 메틸이고, R3이 CR10aR10b이고, R2b, R10a, 및 R10b가 수소일 때, R2a 및 R2b가 부착된 탄소는 (S) 절대 배열을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, R4는 수소이다. 일부 구현예에서, R6은 수소 또는 메틸이고; 다른 구현예에서, R6은 클로로이다. 일부 구현예에서, R5는 임의로 치환된 헤테로사이클, -CN 또는 -SO2NHCH3으로 치환된 피리딘이다.
화학식 I-IV의 화합물에서, 일부 구현예에서, R5는 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CN, -NH2, -CH2OH, 벤질옥시, 및 메틸, 하이드록시, =O 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴 중에서 선택된 하나 이상의 기로 치환된 페닐이다. 특히, 페닐은 플루오로 및/또는 임의로 치환된 헤테로사이클로 치환될 수 있다.
방법 태양에서, 본 발명은 상술한 화합물로 백혈병 환자를 치료하는 것에 관한 것이다. 상기 방법은 BET 억제제를 투여함을 포함한다. BET 억제제는 주지된 부류의 화합물이며, 이의 예로는 OTX015, BET-d246, ABBV-075, I-BET 151, RO6870810, TEN-010, CPI-0610, I-BET-762, CPI 203, PFI-1, 및 JQ1이 있다. 투여는 동반될 수 있으며, 이는 본원에서 사용되는 바와 같이, 약제 중 적어도 하나의 부분적인 또는 완전한 제거에 불충분한 기간 내에 2개의 별도의 약제를 투여하는 것을 지칭한다. 일부 구현예에서, 동반 투여는 첫 번째 투여된 약물의 t½ 내에 두 번째 약물의 투여를 포함한다. 본원에 사용되는 바와 같은 "병용 치료"란 용어는 2개의 작용제 및/또는 이들의 활성 대사산물이 동시에 피실험자에 존재하도록 상기 피실험자에게 2개 이상의 작용제를 투여하는 것을 포함한다. 병용 치료는 별도의 조성물의 동시 투여, 별도의 조성물의 상이한 시간의 투여, 또는 2개의 작용제가 모두 존재하는 조성물의 투여를 포함할 수 있다.
다양한 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제, 예를 들어 비제한적으로, 하나 이상의 결합제, 벌크화제, 완충제, 안정제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 희석제, 붕해제, 점도 향상 또는 감소제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활주제, 가공 보조제, 착색제, 감미제, 맛-가림제, 방향제, 풍미제, 희석제, 연마제, 중합체 기질 시스템, 가소제, 및 본 발명의 조성물을 포함하는 약제 또는 약품의 제조에서 약물 또는 보조제의 엘리건트한 외형을 제공하는 것으로 공지된 기타 첨가제를 포함한다. 담체 및 부형제의 예는 당업자에게 주지되어 있으며 예를 들어 하기의 문헌에 상세히 기재되어 있다: Ansel, Howard C., et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; 및 Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005.
다양한 구현예에서, 부형제의 비제한적인 예는 비제한적으로, 옥수수 전분, 감자 전분, 또는 다른 전분, 젤라틴, 천연 및 합성 검, 예를 들어 아카시아, 나트륨 알기네이트, 알긴산, 다른 알기네이트, 분말화된 트라가칸트, 구아 검, 셀룰로스 및 그의 유도체(예를 들어 에틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 카복시메틸 셀룰로스 칼슘, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스), 폴리비닐 피롤리돈, 메틸 셀룰로스, 예비-젤라틴화된 전분, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, (예를 들어 Nos. 2208, 2906, 2910), 하이드록시프로필 셀룰로스, 이산화 티타늄, 활석, 칼슘 카보네이트(예를 들어 과립 또는 분말), 미정질 셀룰로스, 분말화된 셀룰로스, 덱스트레이트, 카올린, 규산, 솔비톨, 전분, 예비-젤라틴화된 전분, 아가-아가, 알긴산, 칼슘 카보네이트, 미정질 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨, 크로스포비돈, 폴라크릴린 칼륨, 나트륨 전분 글리콜레이트, 감자 또는 타피오카 전분, 다른 전분, 예비-젤라틴화된 전분, 다른 전분류, 점토, 다른 알긴류, 다른 셀룰로스, 검류, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 미네랄 오일, 라이트 미네랄 오일, 글리세린, 솔비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 스테아르산, 나트륨 라우릴 설페이트, 활석, 수소화된 식물성 오일(예를 들어 땅콩유, 면실유, 해바라기유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유), 아연 스테아레이트, 에틸 올리에이트, 에틸 라우리에이트, 아가, 실로이드 실리카젤(AEROSIL200, W.R. Grace Co. of Baltimore, MD 제조), 합성 실리카의 응고된 에어로졸(Degussa Co. of Plano, TX에 의해 시판됨), CAB-O-SIL(Cabot Co. of Boston, MA에 의해 판매되는 발열성 이산화 규소 제품), 착색제 및 이들의 혼합물을 포함한다.
"피실험자" 또는 "~가 필요한 피실험자"란 용어는 본원에서 호환가능하게 사용된다. 이들 용어는 치료되어야 하는 기저 장애가 진단된 환자를 지칭한다. 피실험자는 현재 장애와 관련된 증상을 경험하고 있거나 또는 과거에 증상을 경험했을 수도 있다. 추가로, "~가 필요한 피실험자"는 특정 질병이 진단된 적이 없을 수도 있지만, 이 질병이 발병할 위험이 있는 환자, 또는 질병의 생리학적 체계 중 하나 이상을 보고하는 환자일 수 있다.
본원에 사용되는 바와 같이, "치료" 또는 "치료하는"이란 용어는 호환가능하게 사용된다. 이들 용어는 이롭거나 목적하는 결과, 예를 들어 비제한적으로 치료 이득을 획득하기 위한 접근법을 지칭한다. 치료 이득은 치료되는 기저 장애의 근절 또는 개선을 포함하며; 이는 또한 환자가 여전히 기저 장애를 앓고 있을 수 있음에도 불구하고 환자에서 개선이 관찰되도록 하는 기저 장애와 관련된 하나 이상의 증상의 근절 또는 개선을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "임의로 치환된"이란 용어는 "치환되지 않은 또는 치환된"과 호환가능하게 사용될 수 있다. "치환된"이란 용어는 명시된 기 중의 하나 이상의 수소 원자의, 명시된 라디칼에 의한 교체를 지칭한다. 예를 들어, 치환된 아릴, 헤테로사이클릴 등은 각 잔기 중의 하나 이상의 H 원자가 할로겐, 할로알킬, 알킬, 아실, 알콕시알킬, 하이드록시저급알킬, 카보닐, 페닐, 헤테로아릴, 벤젠설포닐, 하이드록시, 저급알콕시, 할로알콕시, 옥사알킬, 카복시, 알콕시카보닐[-C(=O)O-알킬], 카복스아미도[-C(=O)NH2], 알킬아미노카보닐[-C(=O)NH-알킬], 시아노, 아세톡시, 니트로, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 디알킬아미노알킬, 디알킬아미노알콕시, 헤테로사이클릴알콕시, 아릴알킬, (사이클로알킬)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬, 알킬아미노알킬, 헤테로사이클릴아미노알킬, 헤테로사이클릴알킬아미노알킬, 사이클로알킬아미노알킬, 사이클로알킬알킬아미노알킬, 아릴아미노알킬, 및 아릴알킬아미노알킬, 머캅토, 알킬티오, 알킬설피닐, 벤질, 헤테로사이클릴, 페녹시, 벤질옥시, 헤테로아릴옥시, 아미노설포닐, 아미디노, 구아니디노, 및 우레이도. (C1-6)하이드로카빌, -SO2알킬, -SO2NH2, 또는 -SO2NH알킬로 교체된 아릴 또는 헤테로사이클릴을 지칭한다.
달리 명시되지 않는 한, 알킬은 선형 또는 분지된 탄화수소 구조를 포함하고자 한다. 저급 알킬은 1 내지 6개의 탄소 원자의 알킬 기를 지칭한다. 저급 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, s- 및 t-부틸 등을 포함한다. 바람직한 알킬 기는 C20 이하의 기이다.
C1 내지 C20 탄화수소 또는 하이드로카빌(치환체로서)은 알킬, 사이클로알킬, 폴리사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 및 이들의 조합을 포함한다. 예로는 사이클로프로필메틸, 벤질, 펜에틸, 사이클로헥실메틸, 캄포릴 및 나프틸에틸이 있다. 탄화수소는 유일한 원소 구성성분으로서 수소 및 탄소로 구성된 임의의 치환체를 지칭한다. 사이클로알킬은 하이드로카빌의 부분집합이며 3 내지 8개의 탄소 원자의 사이클릭 탄화수소 기를 포함한다. 사이클로알킬 기의 예는 c-프로필, c-부틸, c-펜틸, 노르보닐 등을 포함한다.
달리 명시되지 않는 한, "카보사이클"이란 용어는 고리 원자가 모두 탄소이지만 임의의 산화 상태를 갖는 고리 시스템을 포함하고자 한다. 따라서 (C3-C8) 카보사이클은 사이클로프로판, 벤젠 및 사이클로헥센과 같은 시스템을 포함하여, 비-방향족 및 방향족 시스템을 모두 지칭하며; (C8-C12) 카보폴리사이클은 노르보난, 데칼린, 인단 및 나프탈렌과 같은 시스템을 지칭한다. 카보사이클은 달리 제한되지 않는 한, 모노사이클, 비사이클 및 폴리사이클을 지칭한다.
알콕시 또는 알콕실은 산소를 통해 모 구조에 부착된 직쇄, 분지된 또는 사이클릭 배열 및 이들의 조합의 1 내지 8개의 탄소 원자의 기를 지칭한다. 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 사이클로프로필옥시, 사이클로헥실옥시 등을 포함한다. 저급-알콕시는 1 내지 4개의 탄소를 함유하는 기를 지칭한다. 본원의 목적을 위해서, 알콕시 및 저급 알콕시는 메틸렌디옥시 및 에틸렌디옥시를 포함한다.
옥사알킬은 하나 이상의 탄소(및 그의 회합된 수소)가 산소에 의해 교체된 알킬 잔기를 지칭한다. 예로는 메톡시프로폭시, 3,6,9-트리옥사데실 등이 있다. 알콕시(선행 단락 참조)는 부착 지점의 탄소가 산소에 의해 교체된 옥사알킬의 부분집합이다. 옥사알킬이란 용어는 당해 분야에서 이해되는 바와 같이 의도되며[미국 화학 협회, 196에 의해 공개된, 127(a)의 제한은 없는 문헌[Naming and Indexing of Chemical Substances for Chemical Abstracts]을 참조하시오], 즉 산소가 단일 결합을 통해 그의 인접한 원자에 결합된(에테르 결합을 형성한다) 화합물을 지칭하며; 카보닐 기에서 발견되는 바와 같이, 이중 결합된 산소를 지칭하는 것은 아니다. 유사하게, 티아알킬 및 아자알킬은 하나 이상의 탄소가 각각 황 또는 질소에 의해 교체된 알킬 잔기를 지칭한다. 예로는 에틸아미노에틸 및 메틸티오프로필을 포함한다.
달리 명시되지 않는 한, 아실은 포르밀, 및 카보닐 작용기를 통해 모 구조에 부착된, 직쇄, 분지된, 사이클릭 배열의, 포화된, 불포화된 및 방향족 및 이들의 조합의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8개의 탄소 원자의 기를 지칭한다. 아실 잔기 중 하나 이상의 탄소는 모 구조에 대한 부착 지점이 카보닐에 남아있는 한 질소, 산소 또는 황에 의해 교체될 수 있다. 예로는 아세틸, 벤조일, 프로피오닐, 이소부티릴, t-부톡시카보닐, 벤질옥시카보닐 등이 있다. 저급-아실은 1 내지 4개의 탄소를 함유하는 기를 지칭한다. 이중 결합된 산소는 치환체 자체로서 지칭되는 경우 "옥소"라 지칭된다.
아릴 및 헤테로아릴은 (i) O, N 또는 S 중에서 선택된 1-4개의 헤테로원자를 함유하는 페닐 기(또는 벤젠) 또는 모노사이클릭 5- 또는 6-원 헤테로방향족 고리; (ii) O, N 또는 S 중에서 선택된 0-4개의 헤테로원자를 함유하는 비사이클릭 9- 또는 10-원 방향족 또는 헤테로방향족 고리 시스템; 또는 (iii) O, N 또는 S 중에서 선택된 0-5개의 헤테로원자를 함유하는 트리사이클릭 13- 또는 14-원 방향족 또는 헤테로방향족 고리 시스템을 의미한다. 방향족 6- 내지 14-원 카보사이클릭 고리는 예를 들어 벤젠, 나프탈렌, 인단, 테트랄린, 및 플루오렌을 포함하고, 5- 내지 10-원 방향족 헤테로사이클릭 고리는 예를 들어 이미다졸, 피리딘, 인돌, 티오펜, 벤조피라논, 티아졸, 푸란, 벤즈이미다졸, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴녹살린, 피리미딘, 피라진, 테트라졸 및 피라졸을 포함한다. 본원에 사용되는 바와 같이 아릴 및 헤테로아릴은 하나 이상의 고리가 방향족이나, 모두 방향족일 필요는 없는 잔기를 지칭한다.
아릴알킬은 아릴 잔기가 알킬을 통해 모 구조에 부착된 치환체를 지칭한다. 예로는 벤질, 펜에틸 등이 있다. 헤테로아릴알킬은 헤테로아릴 잔기가 알킬을 통해 모 구조에 부착된 치환체를 지칭한다. 하나의 구현예에서, 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬의 알킬 기는 1 내지 6개의 탄소의 알킬 기이다. 예로는 예를 들어 피리디닐메틸, 피리미디닐에틸 등을 포함한다.
헤테로사이클은 1 내지 4개의 탄소가 N, O 및 S로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 헤테로원자에 의해 교체된 사이클로알킬 또는 아릴 카보사이클 잔기를 의미한다. 질소 및 황 헤테로원자는 임의로 산화될 수 있으며, 질소 헤테로원자는 임의로 4급화될 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 헤테로사이클은 비-방향족 또는 방향족일 수 있다. 본 발명의 범위내에 있는 헤테로사이클의 예는 피롤리딘, 피라졸, 피롤, 인돌, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 테트라하이드로이소퀴놀린, 벤조푸란, 벤조디옥산, 벤조디옥솔(치환체로서 존재하는 경우, 통상적으로 메틸렌디옥시페닐이라 칭한다), 테트라졸, 모르폴린, 티아졸, 피리딘, 피리다진, 피리미딘, 티오펜, 푸란, 옥사졸, 옥사졸린, 이속사졸, 디옥산, 테트라하이드로푸란 등을 포함한다. 헤테로아릴은 헤테로사이클이 방향족인 헤테로사이클의 부분집합임에 유의해야 한다. 헤테로방향족 고리의 예는 푸란, 벤조푸란, 이소벤조푸란, 피롤, 인돌, 이소인돌, 티오펜, 벤조티오펜, 이미다졸, 벤즈이미다졸, 퓨린, 피라졸, 인다졸, 옥사졸, 벤즈옥사졸, 이속사졸, 벤즈이속사졸, 티아졸, 벤조티아졸, 트리아졸, 테트라졸, 피리딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 피라진, 퀴녹살린, 아크리딘, 피리미딘, 퀴나졸린, 피리다진, 신놀린, 프탈라진 및 트리아진을 포함한다. 헤테로사이클릴 잔기의 예는 피페라지닐, 2-옥소피페라지닐, 2-옥소피페리디닐, 2-옥소-피롤리디닐, 2-옥소아제피닐, 아제피닐, 4-피페리디닐, 피라졸리디닐, 이미다졸릴, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피라지닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 티아졸리디닐, 이소티아졸릴, 퀴누클리디닐, 이소티아졸리디닐, 벤즈이미다졸릴, 티아디아졸릴, 벤조피라닐, 벤조티아졸릴, 테트라하이드로푸릴, 테트라하이드로피라닐, 티에닐, 벤조티에닐, 티아모르폴리닐, 티아모르폴리닐설폭사이드, 티아모르폴리닐설폰, 옥사디아졸릴, 트리아졸릴 및 테트라하이드로퀴놀리닐을 추가로 포함한다.
산소 헤테로사이클은 고리 중에 적어도 하나의 산소를 함유하는 헤테로사이클이며; 추가적인 산소뿐만 아니라 다른 헤테로원자를 함유할 수 있다. 황 헤테로사이클은 고리 중에 적어도 하나의 황을 함유하는 헤테로사이클이며; 추가적인 황뿐만 아니라 다른 헤테로원자를 함유할 수 있다. 산소 헤테로아릴은 산소 헤테로사이클의 부분집합이며; 예로는 푸란 및 옥사졸을 포함한다. 황 헤테로아릴은 황 헤테로사이클의 부분집합이며; 예로는 티오펜 및 티아진을 포함한다. 질소 헤테로사이클은 고리 중에 적어도 하나의 질소를 함유하는 헤테로사이클이며; 추가적인 질소뿐만 아니라 다른 헤테로원자를 함유할 수 있다. 예로는 피페리딘, 피페라진, 모르폴린, 피롤리딘 및 티오모르폴린을 포함한다. 질소 헤테로아릴은 질소 헤테로사이클의 부분집합이며; 예로는 피리딘, 피롤 및 티아졸을 포함한다.
비사이클릭 질소함유 헤테로사이클은 (1) 축합된 비사이클, 예를 들어 옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤; (2) 아자스피로헥산, 헵탄 및 옥탄, 예를 들어 6-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄, 2,6-디아자스피로[3.4]옥탄, 2-아자스피로[3.3]헵탄, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄, 및 7-옥사-2-아자스피로[3.5]노난; 및 (3) 아자비사이클로알칸: 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄을 포함한다. 본원에 기재된 화합물에서, 이들 비사이클릭 질소함유 헤테로사이클은 질소를 통해 화학식 I 중의 R1을 갖는 탄소에 부착될 수 있다.
본원에 사용되고 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, "화합물"이란 용어는(달리 명백히 추가로 제한되지 않는 경우) 상기 화합물의 염을 포함하고자 한다. 따라서, 예를 들어 상기에 묘사된 바와 같이 "화학식 I의 화합물"이란 인용은 하기의 염을 포함할 것이다:
Figure pct00017
여기서 X는 임의의 대이온이다. 특정한 구현예에서, "화학식 I의 화합물"이란 용어는 상기 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 지칭한다. "약학적으로 허용가능한 염"이란 용어는 무기 산 및 염기 및 유기 산 및 염기를 포함한 약학적으로 허용가능한 무독성 산 또는 염기로부터 제조된 염을 지칭한다. 본 발명의 화합물이 염기성인 경우, 대개 그러하듯이, 염은 무기 및 유기 산을 포함한 약학적으로 허용가능한 무독성 산으로부터 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물에 대해 적합한 약학적으로 허용가능한 산 부가염은 아세트산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, 아스파트산, 벤젠설폰산(베실레이트), 벤조산, 붕산, 부티르산, 캄포르산, 캄포르설폰산, 카본산, 시트르산, 에탄디설폰산, 에탄설폰산, 에틸렌디아민테트라아세트산, 포름산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 브롬화수소산, 염산, 요오드화수소산, 하이드록시나프토산, 이세티온산, 락트산, 락토비온산, 라우릴설폰산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 점액산, 나프틸렌설폰산, 질산, 올레산, 파모산, 판토텐산, 인산, 피발산, 폴리갈락투론산, 살리실산, 스테아르산, 숙신산, 황산, 탄닌산, 타타르산, 테오클라트산, p-톨루엔설폰산 등을 포함한다. 화합물이 산성 측쇄를 함유하는 경우, 예를 들어 R3이 CHCOOH인 경우, 본 발명의 화합물에 대해 적합한 약학적으로 허용가능한 염기 부가염은 비제한적으로 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨 및 아연으로부터 제조된 금속 염 또는 리신, 아르기닌, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민(N-메틸글루카민) 및 프로카인으로부터 제조된 유기 염을 포함한다. 추가의 약학적으로 허용가능한 염은 적합한 경우, 1 내지 20개의 탄소 원자를 갖는 알킬에 부착된 무독성 암모늄 양이온 및 카복실레이트, 설포네이트 및 포스포네이트 음이온을 포함한다.
다양한 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제, 예를 들어 비제한적으로 하나 이상의 결합제, 벌크화제, 완충제, 안정제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 희석제, 붕해제, 점도 향상 또는 감소제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활주제, 가공 보조제, 착색제, 감미제, 맛-가림제, 방향제, 풍미제, 희석제, 연마제, 중합체 기질 시스템, 가소제, 및 본 발명의 조성물을 포함하는 약제 또는 약품의 제조에서 약물 또는 보조제의 엘리건트한 외형을 제공하는 것으로 공지된 기타 첨가제를 포함한다. 담체 및 부형제의 예는 당업자에게 주지되어 있으며 예를 들어 하기의 문헌에 상세히 기재되어 있다: Ansel, Howard C., et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; 및 Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005.
달리 서술되거나 묘사되지 않는 한, 본원에 묘사된 구조는 또한 구조의 모든 입체이성질체(예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 시스-트랜스 이성질체) 형태; 예를 들어, 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배열, (Z) 및 (E) 이중 결합 이성질체, 및 (Z) 및 (E) 입체형태 이성질체를 포함하고자 한다. 따라서, 본 발명의 화합물의 단일의 입체화학 이성질체뿐만 아니라, 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 시스-트랜스 이성질체(또는 입체형태) 혼합물은 본 발명의 범위내에 있다. 달리 서술되지 않는 한, 본 발명의 화합물의 모든 토오토머 형태는 본 발명의 범위내에 있다. 추가로, 달리 서술되지 않는 한, 본원에 묘사된 구조는 또한 하나 이상의 동위원소 풍부 원자의 존재만이 상이한 화합물을 포함하고자 한다. 예를 들어, 중수소 또는 삼중수소에 의한 수소의 교체, 또는 13C- 또는 14C-풍부 탄소에 의한 탄소의 교체를 제외하고, 본 발명의 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 범위내에 있다. 이와 같은 화합물은 예를 들어 생물학적 분석에서 분석 도구 또는 탐침으로서 유용하다.
"용매화물"이란 용어는 고체 상태의 화학식 I의 화합물을 지칭하며, 여기서 적합한 용매의 분자가 화학식 I 화합물과 함께 결정 격자 중에 포함된다. 치료학적 투여에 적합한 용매는 투여되는 투여량에서 생리학적으로 허용가능하다. 치료학적 투여에 적합한 용매의 예는 에탄올 및 수이다. 물이 용매인 경우, 용매화물을 수화물이라 칭한다. 일반적으로, 용매화물은 적합한 용매 중에 화합물을 용해시키고 냉각에 의해 또는 안티용매를 사용하여 용매화물을 단리함으로써 형성된다. 용매화물을 전형적으로는 주변 조건하에서 건조시키거나 공비증류시킨다.
화학 합성 동안, 본 발명의 화합물을 생성시키기 위해서 다양한 보호기가 사용되고 후속적으로 제거될 수 있다. 예시적인 보호기 및 이의 제거 조건은 문헌[Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis P. G. M. Wuts, T. W. Greene, Fourth Edition, Wiley, New York, 2006]에 기재되어 있다.
실시예
하기의 화합물을 본원에 개시된 방법을 사용하여 제조하고, 단리하고 특성화하였다. 이들 화합물은 본 발명의 부분적인 범위를 나타내며 본 발명의 범위를 제한하고자 하지 않는다.
일반적인 합성 반응식
본 발명의 화합물을 합성 유기 화학 분야에 주지된 방법에 의해 제조하였다. 합성 시퀀스 동안 때때로 관련 분자 중 어느 한 분자상의 민감성 또는 반응성 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있었다. 이는 통상적인 보호기에 의해, 예를 들어 문헌[T. W. Greene and P. G. M. Wuts Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth edition, John Wiley and Sons, 2006]에 기재된 것에 의해 성취되었다. 보호기는 당해 분야에 주지된 방법을 사용하여 편리한 후속 단계에서 제거되었다.
일반적으로, 본 발명의 화합물을 하기에 기재된 일반적인 반응식에 예시된 방법에 의해, 또는 그의 변형에 의해, 쉽게 입수할 수 있는 출발 물질, 시약 및 통상적인 합성 과정에 의해 제조할 수 있다. 그러나, 당업자는 다른 방법이 또한 적합할 수도 있음을 알 것이다. 또한, 이들 반응에서, 그 자체가 공지되어 있지만 여기에 언급되지 않은 변이체를 사용할 수 있다.
[반응식 A]
Figure pct00018
알데히드 A.1을 환원적 아민화 조건(예를 들어 적합한 아민과 함께 Na(AcO)3BH 또는 NaCNBH4)을 사용하여 아민 A.2로 전환시킬 수 있다. 아민 A.2를 BOC 또는 SEM과 같은 적합한 작용기로 보호하여 보호된 중간체 A.3을 생성시킬 수 있다. 니트로 중간체 A.3을 아민 A.4(NH4Cl/Fe)로 환원시킬 수 있다. 아민 A.4를 전형적인 아미드 커플링 조건(예를 들어 HATU/염기/R5CO2H)을 통해 작용화시켜 중간체 A.5를 생성시킬 수 있다. A.5에서 보호기를 산 조건(예를 들어 HCl 또는 TFA)을 사용하여 제거하여 명세서에 예시된 전형적인 예를 생성시킬 수 있다.
[반응식 B]
Figure pct00019
메틸 에스테르 B.1을 당업자에 표준적인 조건(예를 들어 LiAlH4)을 사용하여 알콜 B.2로 환원시킬 수 있다. 알콜 B.2를 데스-마틴 퍼요오디난과 같은 시약으로 알데히드 B.3으로 산화시킬 수 있다. 알데히드 B.3을 환원적 아민화 조건(예를 들어 적합한 아민과 함께 Na(AcO)3BH 또는 NaCNBH4)을 사용하여 아민 B.4로 전환시킬 수 있다. B.4 중의 NH를 적합한 기(예를 들어 Boc 또는 SEM)로 보호시켜 보호된 중간체 B.5를 제공할 수 있다. B.5 중의 염소를 적합한 Pd(0) 촉매화된 조건(예를 들어 Pd(0)/리간드/NH2BOC)을 통해 BOC 보호된 중간체 B.6으로 전환시킬 수 있다. B.6 중의 보호기를 산 조건(예를 들어 HCl 또는 TFA)하에서 제거하여 아민 B.7을 제공할 수 있다. 아민 B.7을 표준 아미드 커플링 조건(예를 들어 HATU/염기/R5CO2H)을 통해 전형적인 실시예로 전환시킬 수 있다.
[반응식 C]
Figure pct00020
에스테르 C.1을 적합한 환원 시약(예를 들어 LiAlH4)을 사용하여 알콜 C.2로 전환시킬 수 있다. 알콜 C.2를 적합한 산화 조건(예를 들어 데스-마틴 퍼요오디난)을 사용하여 알데히드 C.3으로 전환시킬 수 있다. 알데히드 C.3을 환원적 아민화 조건(예를 들어 적합한 아민과 함께 Na(AcO)3BH 또는 NaCNBH4)을 사용하여 아민 C.4로 전환시킬 수 있다. 아민 C.4를 적합한 보호기로 보호시켜 C.5를 제공할 수 있다(예를 들어 SEM). 염소 중간체 C.5를 벤조페논 이민 및 적합한 리간드와 함께 Pd(0) 촉매작용을 사용하여 이민 중간체 C.6으로 전환시킬 수 있다. C.6 중의 이민을 아민 C.7로 가수분해시킬 수 있다(예를 들어 수성 HCl). 아민 C.7을 표준 아미드 커플링 조건(예를 들어 HATU/염기/R5CO2H)을 사용하여 SEM 보호된 C.8로 전환시킬 수 있다. C.8 중의 SEM 기를 제거하여 TFA와 같은 산성 조건을 사용하여 전형적인 실시예를 제공할 수 있다.
하기의 약어가 합성 경로에 사용된다: DCE(1,2-디클로로에탄), THF(테트라하이드로푸란), MeOH(메탄올), DCM(디클로로메탄), HBTU((2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트), 데스 마틴 퍼요오디난(3-옥소-1,3-디하이드로-1λ5,2-벤즈요오독솔-1,1,1-트리일 트리아세테이트), DMF(N,N-디메틸포름아미드), BINAP((2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프틸)), ACN(아세토니트릴), TEA(트리에틸아민), AcOH(아세트산), EtOH(에탄올), EtOAc(에틸 아세테이트), DMAP(N,N-디메틸피리딘-4-아민), XPhos(2-디사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐), TFA(트리플루오로아세트산), HATU(1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트), SEMCl((2-클로로메톡시에틸)트리메틸실란), dba((1E,4E)-1,5-디페닐펜타-1,4-디엔-3-온), 및 PPh3(트리페닐포스핀).
예비 HPLC 정제는 적합한 소수성 정지상을 사용하는, HCl, 포름산, TFA 또는 NH4HCO3와 같은 첨가제의 존재 또는 부재하의 수/아세토니트릴 구배의 사용을 지칭한다.
사용된 하기의 산을 표 A에 묘사한다. 공지된 산의 경우, CAS 번호를 참조 컬럼에 나타낸다. 다른 모든 산에 대한 합성 반응식은 명세서에 묘사한다.
[표 A]
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
산 B의 제조
Figure pct00035
메틸 4-하이드록시-3-[(1E)-1-(하이드록시이미노)에틸]벤조에이트(B-2)
질소의 불활성 분위기하에서 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-아세틸-4-하이드록시벤조에이트(B-1, 4.80 g, 24.7 mmol, 1.0 당량), EtOH(50.4 ㎖), H2O(21.6 ㎖), 하이드록실아민 하이드로클로라이드(3.4 g, 49.504 mmol, 2.00 당량), 나트륨 아세테이트(5.1 g, 61.804 mmol, 2.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 생성 용액을 100 ㎖의 H2O로 희석하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. LCMS: [M+H]+ = 210.
백색 고체로서 메틸 3-메틸벤조[d]이속사졸-5-카복실레이트(B-3)
질소의 불활성 분위기하에서 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 (E)-4-하이드록시-3-(1-(하이드록시이미노)에틸)벤조에이트(B-2, 3.5 g, 16.8 mmol, 1.00 당량), 디옥산(19.3 ㎖), DMF-DMA(9.2 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 85℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼상에 적용하고 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)로 용출시켰다. LCMS: [M+H]+ = 192.
백색 고체로서 3-메틸-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실산(산 B)
50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실레이트(1-3, 1.0 g, 5.23 mmol, 1.0 당량), MeOH(10.0 ㎖), H2O(3.0 ㎖), 수산화 나트륨(1.05 g, 26.3 mmol, 5.02 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하고 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 pH 3으로 조절하고 생성 고체를 여과에 의해 수집하였다.
Figure pct00036
산 E의 제조
Figure pct00037
6-브로모-1,3-디메틸인다졸(E-2)
100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 6-브로모-3-메틸-1H-인다졸(E-1, 2.90 g, 13.74 mmol, 1.00 당량) 및 DMF(60 ㎖), Cs2CO3(8.95 g, 27.48 mmol, 2.0 당량)을 실온에서 가하였다. 상기 혼합물에 MeI(2.34 g, 16.49 mmol, 1.2 당량)를 실온에서 적가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 추가로 2h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(200 ㎖)로 희석하고 생성 혼합물을 3 x 100 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(3:1)로 용출시켜, 백색 고체로서 6-브로모-1,3-디메틸인다졸(E-2, 2.25 g, 72.75%), 및 백색 고체로서 6-브로모-2,3-디메틸인다졸(0.8 g, 25.9%)을 제공하였다.
Figure pct00038
1,3-디메틸인다졸-6-카복실산(산 E)
질소의 불활성 분위기하에서 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, -78℃에서 Ar 하에 6-브로모-1,3-디메틸인다졸(E-2)을 넣고, n-BuLi(5.86 ㎖, 2 M 용액, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서 드라이 아이스(20.0 g)를 서서히 가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 생성 용액을 -78℃에서 추가로 2시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 100 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. HCl(3 mol/L)을 사용하여 pH를 3으로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 1.4 g(75.31%)의 1,3-디메틸인다졸-6-카복실산(산 E)이 생성되었다.
산 F의 제조
질소의 불활성 분위기하에서 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, -78℃에서 Ar 하에 5-브로모-1,3-디메틸인다졸(1.90 g, 8.48 mmol, 1.0 당량), THF(57 ㎖)를 넣고, n-BuLi(8.5 ㎖, 2.5 M 용액, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 30분간 교반하였다. 이어서 드라이 아이스(20.00 g)를 서서히 가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 추가로 2시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 수/빙을 가하여 반응을 급냉시키고 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1 g(62.5%)의 1,3-디메틸인다졸-5-카복실산(산 F)이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 191.
산 H의 제조
Figure pct00039
메틸 2,3-디메틸인다졸-6-카복실레이트(H-2)
50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모-2,3-디메틸인다졸(H-1, 650.0 ㎎, 2.89 mmol, 1.0 당량), CH3OH(6.5 ㎖), Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(117.9 ㎎, 0.14 mmol, 0.05 당량), NaOAc(710.68 ㎎, 8.66 mmol, 3.0 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 95℃에서 24h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 농축시켰다. LCMS: [M+H]+ = 205.
2,3-디메틸인다졸-6-카복실산(산 H)
100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2,3-디메틸인다졸-6-카복실레이트(H-2, 700.0 ㎎, 3.43 mmol, 1.0 당량), MeOH(21 ㎖), H2O(7 ㎖), 수산화 나트륨(685.5 ㎎, 17.14 mmol, 5.0 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시키고 2 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고, 이어서 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 500 ㎎(76.7%)의 2,3-디메틸인다졸-6-카복실산(산 H)이 생성되었다.
Figure pct00040
산 J의 제조
Figure pct00041
1-(4-브로모페닐)-1-(피리딘-2-일)에탄올(J-2)
에테르(200 ㎖) 중의 디브로모벤젠(10.0 g, 42.39 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 n-BuLi(16.96 ㎖, 42.39 mmol, 1.00 당량)를 질소 분위기 하에 -78℃에서 적가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기 하에 -78℃에서 30분간 교반하였다. 상기 혼합물에 -78℃에서 50 ㎖의 에테르 중의 2-아세틸피리딘(J-1, 5.65 g, 46.63 mmol, 1.10 당량)의 혼합물을 적가하였다. 생성 혼합물을 -78℃에서 추가로 30분간 교반하였다. 이어서 실온으로 서서히 가온되게 하였다. 5℃에서 포화된 NH4Cl(수성)(100 ㎖)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 혼합물을 EtOAc(3 x 50 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(1 x 100 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(2:1)로 용출시켜 황색 고체로서 1-(4-브로모페닐)-1-(피리딘-2-일)에탄올(J-2, 4.5 g, 38.2%)을 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 278.
2-[1-(4-브로모페닐)에테닐]피리딘(J-3)
100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에 1-(4-브로모페닐)-1-(피리딘-2-일)에탄올(J-2, 1.10 g, 3.96 mmol, 1.00 당량), DCM, 트리에틸실란(4.60 g, 39.55 mmol, 10.00 당량), 및 TFA(9.02 g, 79.1 mmol, 20.0 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기 하에 실온에서 48h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 혼합물을 CH2Cl2(50 ㎖)로 희석하였다. 생성 혼합물을 3 x 30 ㎖의 NaHCO3(포화)로 세척하였다. 생성 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(1:1)로 용출시켜 밝은 황색 오일로서 2-[1-(4-브로모페닐)-에테닐]피리딘(J-3, 900 ㎎, 78.74%)을 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 260.
메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에테닐]벤조에이트(J-4)
30 ㎖ 압력 탱크 반응기에 2-[1-(4-브로모페닐)-에테닐]피리딘(J-3, 900 ㎎, 3.46 mmol, 1.00 당량), MeOH(20 ㎖), NaOAc(851 ㎎, 10.38 mmol, 3.00 당량) 및 Pd(dppf)Cl2(253 ㎎, 0.346 mmol, 0.10 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 CO(20 atm) 분위기 하에 90 ℃에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 EtOAc(100 ㎖)에 용해시켰다. 생성 혼합물을 1 x 30 ㎖의 수로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(1:1)로 용출시켜 황색 고체로서 메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에테닐]벤조에이트(J-4, 660 ㎎, 74.94%)를 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 240.
메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조에이트(J-5)
50 ㎖ 환저 플라스크에 메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에테닐]벤조에이트(J-4, 660.0 ㎎, 2.76 mmol, 1.00 당량), MeOH(20 ㎖) 및 Pd/C(530.0 ㎎, 10%)를 실온에서 가하였다. 반응물을 1 atm의 H2(g) 하에 실온에서 24h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(2 x 20 ㎖)로 세척하였다. 여액을 감압하에서 농축시켰다. 이에 의해 짙은 색 오일로서 메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조에이트(J-5, 600 ㎎, 90%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 242.
4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조산(산 J)
50 ㎖ 환저 플라스크에 메틸 4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조에이트(J-5, 600.0 ㎎, 2.49 mmol, 1.00 당량) 및 MeOH(10 ㎖)를 실온에서 가하였다. 상기 혼합물에 H2O(5 ㎖) 중의 NaOH(198.92 ㎎, 4.97 mmol, 2.00 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(1 x 50 ㎖)로 추출하였다. 수성층을 2 M HCl로 pH 4로 산성화하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조산(산 J, 700 ㎎, 86.71%)이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 228.
산 K의 제조
Figure pct00042
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 3-플루오로-4-(메톡시카보닐)페닐보론산(K-1, 0.97 g, 4.9 mmol, 1.00 당량), 디옥산(10 ㎖), H2O(10 ㎖), 2-브로모-5-메틸피리미딘(K-2, 0.85 g, 4.9 mmol, 1.00 당량), 팔라듐 클로라이드; 비스(트리페닐포스핀)(0.34 g, 0.484 mmol, 0.10 당량), 나트륨 카보네이트(1.58 g, 14.77 mmol, 3.0 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시켰다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 3 M HCl로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 0.85 g(75%)의 2-플루오로-4-(5-메틸피리미딘-2-일)벤조산(산 K)이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 233.
산 O의 제조
Figure pct00043
메틸 4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조에이트(O-2)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, DMF(10 ㎖) 중의 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트(O-1, 400.0 ㎎, 1.98 mmol, 1.00 당량)의 용액, 2-(2-브로모에톡시)옥산(537.7 ㎎, 2.57 mmol, 1.30 당량) 및 세슘 카보네이트(1.3 g, 3.96 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 반응물을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하고 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 생성 혼합물을 2 x 10 ㎖의 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 400 ㎎(61.21%)의 메틸 4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조에이트(O-2)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 331.
4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조산(산 O)
20 ㎖ 바이알에, MeOH(10 ㎖) 중의 메틸 4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조에이트(O-2, 400.0 ㎎, 1.21 mmol, 1.00 당량)의 용액, 수산화 나트륨(193.70 ㎎, 4.844 mmol, 4.00 당량), H2O(5.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하고 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 2 M HCl로 2로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 200 ㎎(52.22%)의 4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조산(산 O)이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 317.
산 P의 제조
Figure pct00044
메틸 4-(1-메틸피라졸-4-일)벤조에이트(P-1)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 환저 플라스크에, DMF(10 ㎖) 중의 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트(O-1, 400.0 ㎎, 1.978 mmol, 1.00 당량), MeI(365.00 ㎎, 2.572 mmol, 1.30 당량), Cs2CO3(1.3 g, 3.956 mmol, 2 당량)을 넣었다. 생성 용액을 60℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 15 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 300 ㎎(70%)의 메틸 4-(1-메틸피라졸-4-일)벤조에이트(P-1)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 217.
20 ㎖ 바이알에, MeOH(10 ㎖) 중의 메틸 4-(1-메틸피라졸-4-일)벤조에이트(P-1, 300.0 ㎎, 1.39 mmol, 1.00 당량)의 용액, H2O(5 ㎖) 중의 수산화 나트륨(221.96 ㎎, 5.549 mmol, 4.00 당량)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 2 M HCl을 가하여 pH를 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 200 ㎎(71.3%)의 4-(1-메틸피라졸-4-일)벤조산(산 P)이 생성되었다.
산 R의 제조
Figure pct00045
메틸 2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실레이트(R-2).
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 바이알에, CH3CN(12 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-4-하이드록시벤조에이트(R-1, 1 g, 5.98 mmol, 1.00 당량)의 용액, CDI(3.0 g, 17.95 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 920 ㎎(79.62%)의 메틸 2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실레이트(R-2)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 194.
2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실산(산 R)
12 ㎖ 바이알에, MeOH(3 ㎖) 중의 메틸 2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실레이트(200.00 ㎎, 1.035 mmol, 1.00 당량), H2O(1 ㎖) 중의 수산화 나트륨(82.8 ㎎, 2.071 mmol, 2.00 당량)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 2 M HCl(수성)을 가하여 pH를 2로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 150 ㎎(81%)의 2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실산(산 R)이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 180.
산 S의 제조
Figure pct00046
4-메톡시부트-2-인-1-올(S-2)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 3-메톡시-프로핀(S-1, 4.90 g, 69.909 mmol, 1.00 당량)을 넣었다. 이어서 -78℃에서 THF(100.00 ㎖)를 나누어 가하였다. 여기에 20분간 -78℃에서 교반하면서 n-BuLi(33.60 ㎖, 83.880 mmol, 1.2 당량)를 적가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물에 -78℃에서 파라포름알데히드(10.08 g, 111.855 mmol, 1.60 당량)를 가하였다. 생성 용액을 실온에서 20h 동안 교반하였다. 이어서 50 ㎖의 NH4Cl(수성)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼 상에 적용시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 3.4 g(48.58%)의 4-메톡시부트-2-인-1-올(S-2)이 생성되었다. GC-MS: (ES, m/z): M = 100.
1-브로모-4-메톡시부트-2-인(S-3)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-메톡시부트-2-인-1-올(S-2, 1.10 g, 10.987 mmol, 1.00 당량), Et2O(20.00 ㎖, 192.791 mmol, 17.55 당량), 피리딘(0.20 ㎖, 2.485 mmol, 0.23 당량)을 넣었다. 이어서 0℃에서 PBr3(1.19 g, 4.395 mmol, 0.40 당량)을 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 35℃에서 1h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 NaCl(수성)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 Et2O로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 밝은 황색 오일로서 1.24 g(69.23%)의 1-브로모-4-메톡시부트-2-인(S-3)이 생성되었다. GC-MS: [M+H]+ = 162.
메틸 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(S-4)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 1-브로모-4-메톡시부트-2-인(S-3, 1.20 g, 7.361 mmol, 1.34 당량), 메틸 1H-인다졸-5-카복실레이트(970.00 ㎎, 5.506 mmol, 1.00 당량), KI(90.00 ㎎, 0.542 mmol, 0.10 당량), K2CO3(2.16 g, 15.692 mmol, 2.84 당량), DMF(10.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 90℃에서 8h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 고체로서 418 ㎎(29.39%)의 메틸 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(S-4)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 259.
1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(산 S)
50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(S-4, 218.00 ㎎, 0.844 mmol, 1.00 당량), LiOH(30.32 ㎎, 1.266 mmol, 1.50 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 50℃에서 3h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 207 ㎎(98.03%)의 리티오 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(산 S)가 생성되었다. LCMS: [M+2H-Li] = 245.
산 T의 제조
Figure pct00047
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(실시예 27, 200.00 ㎎, 0.774 mmol, 1.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), PtO2(50.00 ㎎, 0.220 mmol, 0.28 당량)를 넣었다. 혼합물을 수소 분위기(60 psi) 하에 40℃에서 12h 동안 교반하였다. 촉매를 여과하고 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 157 ㎎(77.29%)의 메틸 1-(4-메톡시부틸)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 263.
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-(4-메톡시부틸)인다졸-5-카복실레이트(160.00 ㎎, 0.610 mmol, 1.00 당량), LiOH(21.91 ㎎, 0.915 mmol, 1.50 당량), MeOH(5.00 ㎖), H2O(1.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 50℃에서 20분간 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 150 ㎎(96.74%)의 리티오 1-(4-메톡시부틸)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+2H-Li] = 249.
산 U의 제조
Figure pct00048
메틸 4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조에이트(U-2)
100 ㎖ 환저 플라스크에, 4-아세틸피리딘(U-1, 611.0 ㎎, 5.044 mmol, 1.00 당량), 디옥산(40.0 ㎖) 및 4-톨루엔설포닐 하이드라지드(1409 ㎎, 7.566 mmol, 1.50 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 80℃에서 3h 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 80℃에서 4-(메톡시카보닐)페닐보론산(1007.6 ㎎, 5.6 mmol, 1.11 당량) 및 K2CO3(2091.2 ㎎, 15.131 mmol, 3.00 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 110℃에서 추가로 4h 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되게 하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(60 ㎖)로 희석하였다. 이어서 60 ㎖의 수를 가하였다. 혼합물을 분리시키고 수성상을 EtOAc(3 x 30 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(1 x 50 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(3:2)로 용출시켜 황색 오일로서 메틸 4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조에이트(U-2, 270 ㎎, 22.19%)를 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 242.
4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조산(산 U)
8 ㎖ 바이알에, H2O(2 ㎖) 중의 메틸 4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조에이트(U-2, 250.00 ㎎, 1.036 mmol, 1.00 당량), MeOH(4 ㎖) 및 NaOH(124.32 ㎎, 3.108 mmol, 3.00 당량)를 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 4h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 수(20 ㎖)에 용해시켰다. 수성층을 EtOAc(3 x 10 ㎖)로 추출하였다. 수성상을 수집하고, HCl(수성 1 M)로 pH 5로 산성화하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집하고 수로 세척하였다. 생성 고체를 적외선 하에서 건조시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조산(산 U, 190 ㎎, 80.69%)이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 228.
산 V의 제조
U-1을 3-아세틸피리딘(1.00 g, 8.255 mmol, 1.00 당량)으로 교체함을 제외하고, 산 U와 동일한 방식으로 제조하였다.
산 W의 제조
Figure pct00049
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 5-브로모-1-메틸피라졸(500.18 ㎎, 3.107 mmol, 1.00 당량), 디옥산(5.00 ㎖), H2O(5.00 ㎖), 3-플루오로-4-(메톡시카보닐)페닐보론산(615.00 ㎎, 3.107 mmol, 1.00 당량), Na2CO3(987.81 ㎎, 9.320 mmol, 3.00 당량), Pd(PPh3)2Cl2(218.06 ㎎, 0.311 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 50 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 600 ㎎(87.71%)의 2-플루오로-4-(2-메틸피라졸-3-일)벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 221.
하기 표 B의 산을 산 W와 동일한 방식으로, 그러나 표시된 W-1을 사용하여 제조하였다.
[표 B]
Figure pct00050
Figure pct00051
산 AC의 제조
Figure pct00052
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1H-인다졸-5-카복실레이트(2.0 g, 11.35 mmol, 1.00 당량), 디옥산(40.00 ㎖), 4-요오도피리딘(2.33 g, 11.366 mmol, 1.00 당량), CuI(2.16 g, 11.342 mmol, 1.00 당량), DMEDA(0.20 g, 2.269 mmol, 0.20 당량), Cs2CO3(11.10 g, 34.068 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 2일 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 40 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 1.6 g(36.95%)의 메틸 1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 254.
단계 2. 100 ㎖ 바이알에, 메틸 1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복실레이트(1.60 g, 6.318 mmol, 1.00 당량), CH3OH(32.00 ㎖), H2O(10.00 ㎖), 수산화 나트륨(1.26 g, 31.590 mmol, 5.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 회색 고체로서 350 ㎎(23.16%)의 1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 240.
산 AE의 제조
30 ㎖의 밀봉된 튜브에, 6-브로모신놀린(600.00 ㎎, 2.870 mmol, 1.00 당량), MeOH(12.00 L), Pd(dppf)Cl2(210.01 ㎎, 0.287 mmol, 0.10 당량), TEA(871.30 ㎎, 8.611 mmol, 3.00 당량), 일산화 탄소(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 60℃에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 적색 고체로서 600 ㎎(95.34%)의 메틸 신놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS(PH-PUK): [M+H]+ = 189.
산 AF의 제조
Figure pct00053
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린-6-카복실레이트(350.0 ㎎, 1.830 mmol, 1.00 당량), DMF(15.00 ㎖)를 넣었다. 이어서 0℃에서 NaH(109.80 ㎎, 2.745 mmol, 1.50 당량, 60%)을 나누어 가하였다. 여기에 CH3I(285.76 ㎎, 2.013 mmol, 1.10 당량)를 0℃에서 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 0℃ 내지 실온에서 1h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 260 ㎎(69.21%)의 메틸 1-메틸-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 206.
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-메틸-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복실레이트(260.0 ㎎, 1.27 mmol, 1.00 당량), LiOH(60.7 ㎎, 2.53 mmol, 2.0 당량), MeOH(10.0 ㎖), H2O(5.0 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 50℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산으로 4로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 207 ㎎(85.5%)의 1-메틸-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 192.
산 AG의 제조
Figure pct00054
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 4-목 환저 플라스크에, 1-(옥산-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피라졸(10.0 g, 35.95 mmol, 1.00 당량), 디옥산(100.0 ㎖), Pd2(dba)3(1646.03 ㎎, 1.8 mmol, 0.05 당량), (포스포퍼옥시)칼륨; 이칼륨(22893.12 ㎎, 107.852 mmol, 3.00 당량), PCy3.HBF4(661.92 ㎎, 1.798 mmol, 0.05 당량), 메틸 4-브로모벤조에이트(11596.53 ㎎, 53.926 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 용액을 100 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 이에 의해 황색 오일로서 6 g(58.29%)의 메틸 4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 287.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 4-목 환저 플라스크에, 메틸 4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조에이트(400.00 ㎎, 1.397 mmol, 1.00 당량), H2O(4.00 ㎖), MeOH(4.00 ㎖), 수산화 나트륨(223.50 ㎎, 5.588 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCL(1 mol/L)로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 300 ㎎(78.9%)의 4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 273.
산 AH의 제조
Figure pct00055
단계 1. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 3-브로모-1H-피라졸(1.50 g, 10.206 mmol, 1.00 당량), DCM(30.00 ㎖), 디하이드로피란(1.29 g, 15.336 mmol, 1.50 당량), TsOH(0.05 g, 0.510 mmol, 0.05 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성 용액을 50 ㎖의 NaHCO3(5%)로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 2 g(84.8%)의 3-브로모-1-(옥산-2-일)피라졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 231.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 3-플루오로-4-(메톡시카보닐)페닐보론산(0.86 g, 4.327 mmol, 1.00 당량), 디옥산(12.00 ㎖), H2O(12.00 ㎖), 3-브로모-1-(옥산-2-일)피라졸(1.00 g, 4.327 mmol, 1.00 당량), Na2CO3(1.38 g, 13.02 mmol, 3.01 당량), Pd(PPh3)2Cl2(0.30 g, 0.427 mmol, 0.10 당량), BINAP(0.54 g, 0.867 mmol, 0.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1 g(62.38%)의 2-플루오로-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 291.
산 AI의 제조
Figure pct00056
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 4-브로모-2-플루오로-5-메톡시벤즈알데히드(1.00 g, 4.29 mmol, 1.00 당량), 아세톤(43.00 ㎖), 존스 시약(10.3 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 빙/염 욕에서 0℃에서 4시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 40 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 0.7 g(65.5%)의 4-브로모-2-플루오로-5-메톡시벤조산이 생성되었다. LCMS: [M-H]+ = 247.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 4-브로모-2-플루오로-5-메톡시벤조산(0.70 g, 2.811 mmol, 1.00 당량), 디옥산(20.0 ㎖), 1-(옥산-2-일)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피라졸(0.78 g, 2.804 mmol, 1.00 당량), Pd2(dba)3(0.13 g, 0.141 mmol, 0.05 당량), PCy3 .HBF4(0.08 g, 0.217 mmol, 0.08 당량), K3PO4(1.79 g, 8.433 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 600 ㎎(66.64%)의 2-플루오로-5-메톡시-4-[2-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 321.
산 AJ의 제조
Figure pct00057
단계 1. 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 5-브로모-3-메틸-1H-인다졸(2.00 g, 9.48 mmol, 1.00 당량), DHP(1.20 g, 14.214 mmol, 1.50 당량), DCM(20.00 ㎖), TsOH(163.18 ㎎, 0.948 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하였다. 이어서 50 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1.6 g(57.20%)의 5-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 295.
단계 2. 100 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸(1.60 g, 5.420 mmol, 1.00 당량), TEA(1.65 g, 16.260 mmol, 3.00 당량), Pd(dppf)Cl2(793.22 ㎎, 1.084 mmol, 0.20 당량), MeOH(20.00 ㎖)를 넣었다. 플라스크를 흡출하고 질소로 3회 플러싱한 다음, CO(기체)로 플러싱하였다. 혼합물을 CO(0.3 MPa)의 분위기하에 60℃에서 6h 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1.25 g(84.07%)의 메틸 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 275.
단계 3. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트(600.0 ㎎, 2.187 mmol, 1.00 당량), H2O(2.0 ㎖), MeOH(10.0 ㎖), LiOH(157.1 ㎎, 6.56 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 40℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 510 ㎎(87.58%)의 리티오 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+2H-Li] = 275.
산 AK의 제조
Figure pct00058
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1H-인다졸-5-카복실레이트(2 g, 11.352 mmol, 1.00 당량), K2CO3(4.71 g, 34.056 mmol, 3.00 당량), DMF(60.00 ㎖)를 넣었다. 이어서 0℃에서 I2(8.64 g, 34.056 mmol, 3.00 당량)를 나누어 가하였다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 이어서 100 ㎖의 NaHSO3(수성)를 가하여 반응을 급냉시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 황색 고체로서 2.9 g(84.57%)의 메틸 3-요오도-1H-인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 387.
단계 2. 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1H-인다졸-5-카복실레이트(2.40 g, 7.945 mmol, 1.00 당량), DHP(1.00 g, 11.918 mmol, 1.50 당량), TsOH(273.63 ㎎, 1.589 mmol, 0.20 당량), DCM(50.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하였다. 이어서 50 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 고체로서 2.4 g(78.22%)의 메틸 3-요오도-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 387.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트(1.40 g, 3.625 mmol, 1.00 당량), 사이클로프로필보론산(0.62 g, 7.250 mmol, 2.00 당량), Pd(PPh3)4(418.91 ㎎, 0.363 mmol, 0.10 당량), K3PO4(3.08 g, 14.500 mmol, 4.00 당량), 톨루엔(36.00 ㎖), H2O(2.40 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 110℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 910 ㎎(83.57%)의 메틸 3-사이클로프로필-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS [M+H]+ = 301.
단계 4. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-사이클로프로필-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실레이트(510.00 ㎎, 1.698 mmol, 1.00 당량), NaOH(135.83 ㎎, 3.396 mmol, 2.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 4로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 400 ㎎(82.27%)의 3-사이클로프로필-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 287.
산 AL의 제조
Figure pct00059
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 4-목 환저 플라스크에, 메틸 4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조에이트(6.00 g, 20.955 mmol, 1.00 당량), DCM(60.00 ㎖), 트리플루오로아세트산(8216.28 ㎎, 83.819 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 4 g(94.40%)의 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 203.
Figure pct00060
단계 2. 40 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트(400.00 ㎎, 1.978 mmol, 1.00 당량), DCE(10.00 ㎖), 2,2(370.30 ㎎, 2.374 mmol, 1.20 당량), Cu(AcO)2(431.15 ㎎, 2.374 mmol, 1.20 당량), 사이클로프로필보론산(424.80 ㎎, 4.945 mmol, 2.50 당량)을 넣었다. 생성 용액을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 300 ㎎(62.60%)의 메틸 4-(1-사이클로프로필피라졸-4-일)벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 243.
Figure pct00061
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 4-목 환저 플라스크에, 메틸 4-(1-사이클로프로필피라졸-4-일)벤조에이트(300.00 ㎎, 1.238 mmol, 1.00 당량), H2O(3.00 ㎖), MeOH(3.00 ㎖), 수산화 나트륨(198.10 ㎎, 4.953 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCl(1 M)로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 150 ㎎(53.07%)의 4-(1-사이클로프로필피라졸-4-일)벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 229.
산 AM의 제조
Figure pct00062
단계 1. 20 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트(400.00 ㎎, 1.978 mmol, 1.00 당량), CH3CN(4.00 ㎖), 칼륨 플루오라이드(229.84 ㎎, 3.956 mmol, 2.00 당량), 디에틸 브로모디플루오로메틸포스포네이트(792.25 ㎎, 2.967 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 이에 의해 황색 오일로서 400 ㎎(80.17%)의 메틸 4-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 253.
단계 2. 40 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]벤조에이트(400.00 ㎎, 1.586 mmol, 1.00 당량), H2O(4.00 ㎖), MeOH(4.00 ㎖), 수산화 나트륨(253.73 ㎎, 6.344 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCL(1 M)로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 260 ㎎(68.83%)의 4-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 239.
산 AN의 제조
Figure pct00063
메틸 4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조에이트(AN-3)
40 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-(1H-피라졸-4-일)벤조에이트(AN-1, 400.00 ㎎, 1.978 mmol, 1.00 당량), 세슘 카보네이트(1939.50 ㎎, 5.934 mmol, 3.0 당량), DMF(10.00 ㎖), 2-브로모에틸 메틸 에테르(AN-2, 412.41 ㎎, 2.967 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 400 ㎎(77.69%)의 메틸 4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조에이트(AN-3)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 261.
4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조산(산 AN)
40 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조에이트(400.00 ㎎, 1.537 mmol, 1.00 당량), MeOH(4.00 ㎖), H2O(4.00 ㎖), 수산화 나트륨(245.86 ㎎, 6.147 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCL(1 M)로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 260 ㎎(68.70%)의 4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조산(산 AN)이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 247.
산 AO의 제조
AN-2를 브로모아세토니트릴로 교체하는 것을 제외하고, 산 AN과 동일한 방식으로 제조하였다.
산 AP의 제조
Figure pct00064
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 500 ㎖ 환저 플라스크에, 5-브로모-2-플루오로벤조니트릴(5.5 g, 27.499 mmol, 1.00 당량), 테트라하이드로푸란(110.00 ㎖)을 넣었다. 브로모(사이클로프로필)마그네슘(THF 중의 1 M)(68.75 ㎖, 68.748 mmol, 2.50 당량)을 가하고 생성 용액을 -78℃에서 2h 동안 교반하였다. 생성 용액을 25℃에서 추가로 30분 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 100 ㎖의 HCl(10%)을 가하여 반응을 급냉시키고 추가로 6h 동안 교반하였다. 생성 용액을 3 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 50 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:10)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 3.3 g(49.37%)의 (5-브로모-2-플루오로페닐)(사이클로프로필)메탄온이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 243.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, (5-브로모-2-플루오로페닐)(사이클로프로필)메탄온(1.50 g, 6.171 mmol, 1.00 당량), NH2OH.HCl(3001.77 ㎎, 0.042 mmol, 7.00 당량), 피리딘(15.00 ㎖, 186.353 mmol, 30.20 당량)을 넣었다. 생성 용액을 115℃에서 3h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(1 mol/L)로 3으로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 1.25 g(78.49%)의 (E)-N-[(5-브로모-2-플루오로페닐)(사이클로프로필)메틸리덴]하이드록실아민이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 258.
단계 3. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, (E)-N-[(5-브로모-2-플루오로페닐)(사이클로프로필)메틸리덴]하이드록실아민(1.25 g, 4.843 mmol, 1.00 당량), TEA(1470.27 ㎎, 14.529 mmol, 3.00 당량), Pd(dppf)Cl2(354.38 ㎎, 0.484 mmol, 0.10 당량), MeOH(20.00 ㎖), CO(20 atm)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:2)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 850 ㎎(73.98%)의 메틸 3-[(1E)-사이클로프로필(하이드록시이미노)메틸]-4-플루오로벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 238.
단계 4. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 바이알에, 메틸 3-[(1E)-사이클로프로필(하이드록시이미노)메틸]-4-플루오로벤조에이트(450.00 ㎎, 1.897 mmol, 1.00 당량), 테트라하이드로푸란(8 ㎖), 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]운데크-7-엔(1433.25 ㎎, 5.691 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 75℃에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 20 ㎖의 수성 시트르산(5%)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:2)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 140 ㎎(33.98%)의 메틸 3-사이클로프로필-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 218.
단계 5. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 바이알에, 메틸 3-사이클로프로필-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실레이트(140.00 ㎎, 0.644 mmol, 1.00 당량), H2O(1.00 ㎖), 메탄올(4.00 ㎖), 수산화 나트륨(51.56 ㎎, 1.289 mmol, 2 당량)을 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 2h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(37%)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 220 ㎎(조 물질)의 3-사이클로프로필-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 204.
산 AR의 제조
Figure pct00065
100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1H-인다졸-6-카복실레이트(4.00 g, 22.705 mmol, 1.00 당량), K2CO3(6275.83 ㎎, 45.410 mmol, 2.00 당량), DMF(100.00 ㎖)를 넣었다. 이어서 0℃에서 I2(8643.98 ㎎, 34.058 mmol, 1.50 당량)를 나누어 가하였다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 이어서 100 ㎖의 Na2S2O3(수성)를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 이에 의해 황색 고체로서 7.4 g(조 물질)의 메틸 3-요오도-1H-인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 303.
단계 2. 1 L 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1H-인다졸-6-카복실레이트(7.40 g, 24.498 mmol, 1.00 당량), K2CO3(10.16 g, 73.494 mmol, 3.00 당량), DMF(740.00 ㎖)를 넣었다. 이어서 0℃에서 CH3I(6.95 g, 48.996 mmol, 2.00 당량)를 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 5.34 g(68.96%)의 메틸 3-요오도-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 317.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-에테닐-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(500.00 ㎎, 2.312 mmol, 1.00 당량), 트리플루오로(비닐)-14-보란, 칼륨 염(1238.90 ㎎, 0.000 mmol, 4.00 당량), 톨루엔(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖), K3PO4(1963.25 ㎎, 9.248 mmol, 4.00 당량), Pd(PPh3)4(267.19 ㎎, 0.231 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 110℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼 상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 240 ㎎(32.8%)의 메틸 3-요오도-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 217.
단계 4. 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-에테닐-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(750.00 ㎎, 3.468 mmol, 1.00 당량), H2O(4.00 ㎖), CH3CN(20.00 ㎖), NaIO4(1483.71 ㎎, 6.936 mmol, 2.00 당량), RuCl3.H2O(78.19 ㎎, 0.347 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 이어서 100 ㎖의 Na2S2O3(수성)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 240 ㎎(31.7%)의 메틸 3-포르밀-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 219.
단계 5. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-포름일-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(240.00 ㎎, 1.100 mmol, 1.00 당량), DCM(20.00 ㎖)을 넣었다. 이어서 0℃에서 DAST(709.13 ㎎, 4.399 mmol, 4.00 당량)를 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 이어서 20 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼 상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 180 ㎎(68.1%)의 메틸 3-(디플루오로메틸)-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 241.
단계 6. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-(디플루오로메틸)-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(180.00 ㎎, 0.749 mmol, 1.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(10.00 ㎖), NaOH(59.94 ㎎, 1.498 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 150 ㎎(88.50%)의 3-(디플루오로메틸)-1-메틸인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 227.
산 AS의 제조
Figure pct00066
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(1.00 g, 3.164 mmol, 1.00 당량), 사이클로프로필보론산(815.25 ㎎, 9.492 mmo, 3.00 당량), Pd(PPh3)4(365.57 ㎎, 0.316 mmol, 0.10 당량), 톨루엔(20.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖), K3PO4(2.69 g, 12.656 mmol, 4.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 110℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 590 ㎎(81%)의 메틸 3-사이클로프로필-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 231.
Figure pct00067
50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-사이클로프로필-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(590.00 ㎎, 2.56 mmol, 1.00 당량), LiOH(184.08 ㎎, 3.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 450 ㎎의 3-사이클로프로필-1-메틸인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 217.
산 AT의 제조
Figure pct00068
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 500 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 2-아미노-벤조니트릴(11.00 g, 93.111 mmol, 1.00 당량), 테트라하이드로푸란(220 ㎖)을 넣었다. 에틸마그네슘 브로마이드(Et2O 중의 2 mol/L)(139.67 ㎖, 279.33 mmol, 3.00 당량)를 가하고 생성 용액을 -10℃에서 30분간 교반하였다. 생성 용액을 25℃에서 추가로 12h 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 300 ㎖의 HCl(10%)을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 100 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:10)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 11 g(79.19%)의 1-(2-아미노페닐)프로판-1-온이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 150.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 500 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 1-(2-아미노페닐)프로판-1-온(11.0 g, 73.730 mmol, 1.00 당량), TEA(22.38 g, 221.190 mmol, 3.00 당량), DCM(220.00 ㎖), 염화 아세틸(8.68 g, 110.595 mmol, 1.50 당량)을 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 3h 동안 교반하였다. 이어서 600 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 500 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 400 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:10)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 10 g(70.9%)의 N-(2-프로파노일페닐)아세트아미드가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 192.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, N-(2-프로파노일페닐)아세트아미드(10.0 g, 52.293 mmol, 1.00 당량), DMF(150.00 ㎖), NBS(11168.79 ㎎, 62.752 mmol, 1.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 40℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 생성 용액을 3 x 150 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 150 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 고체로서 13 g(92.03%)의 N-(4-브로모-2-프로파노일페닐)아세트아미드가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 270.
단계 4. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 환저 플라스크에, N-(4-브로모-2-프로파노일페닐)아세트아미드(5.50 g, 0.020 mmol, 1.00 당량), THF(60.00 ㎖), H2O(12.00 ㎖), HCl(12.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 70℃에서 1h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 5.8 g(조 물질)의 1-(2-아미노-5-브로모페닐)프로판-1-온 하이드로클로라이드가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 228.
단계 5. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 1-(2-아미노-5-브로모페닐)프로판-1-온(5.00 g, 21.921 mmol, 1.00 당량), H2O(24.00 ㎖, 222.033 mmol), HCl(37%)(12.00 ㎖, 0.058 mmol), 나트륨 나이트라이트(1.81 g, 26.305 mmol, 1.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 생성 용액을 100℃에서 추가로 10h 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 반응 혼합물을 수/빙욕으로 25℃로 냉각시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 고체로서 2.8 g(53.43%)의 6-브로모-3-메틸신놀린-4-올이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 239.
단계 6. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 6-브로모-3-메틸신놀린-4-올(2.8 g, 11.76 mmol, 1.00 당량), POCl3(20 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 2h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 2.8 g(92.84%)의 6-브로모-4-클로로-3-메틸신놀린이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 257.
단계 7. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 6-브로모-4-클로로-3-메틸신놀린(2.80 g, 10.873 mmol, 1.00 당량), 에탄올(56 ㎖), NH2NH2.H2O(10.89 g, 217.460 mmol, 20.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 3일 동안 교반하였다. 이어서 200 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 2.3 g(83.58%)의 6-브로모-4-하이드라지닐-3-메틸신놀린이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 253.
단계 8. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 6-브로모-4-하이드라지닐-3-메틸신놀린(2.30 g, 9.087 mmol, 1.00 당량), 수(40.00 ㎖), 디옥소(설포닐리덴)구리(2.90 ㎎, 18.174 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 2h 동안 교반하였다. 이어서 100 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaOH(1 mol/L)로 8로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:3)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 1 g(49.33%)의 6-브로모-3-메틸신놀린이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 223.
단계 9. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모-3-메틸신놀린(500.00 ㎎, 2.241 mmol, 1.00 당량), 메탄올(10.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2(164.00 ㎎, 0.224 mmol, 0.10 당량), TEA(680.43 ㎎, 6.723 mmol, 3.00 당량), 일산화 탄소(20 atm)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:3)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 400 ㎎(88.3%)의 메틸 3-메틸신놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 203.
단계 10. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸신놀린-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1.978 mmol, 1.00 당량), 메탄올(10.00 ㎖), 수(2.00 ㎖), 수산화 나트륨(158.24 ㎎, 3.96 mmol, 2.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 16h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(37%)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 400 ㎎(조 물질)의 3-메틸신놀린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 189.
산 AU의 제조
Figure pct00069
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 메틸 2-클로로퀴놀린-6-카복실레이트(1.20 g, 5.414 mmol, 1.00 당량), 디옥산(24.00 ㎖), BocNH2(0.95 g, 8.110 mmol, 1.50 당량), BINAP(0.34 g, 0.541 mmol, 0.10 당량), Cs2CO3(5.29 g, 16.242 mmol, 3.00 당량), Pd2(dba)3(0.25 g, 0.271 mmol, 0.05 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 20시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 700 ㎎(63.9%)의 메틸 2-아미노퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 303.
단계 2. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-아미노퀴놀린-6-카복실레이트(700.00 ㎎, 3.462 mmol, 1.00 당량), DCM(21.00 ㎖), Boc2O(1511.01 ㎎, 6.92 mmol, 2.00 당량), Et3N(1050.9 ㎎, 10.385 mmol, 3.00 당량), DMAP(84.58 ㎎, 0.692 mmol, 0.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 1.5 g(69.76%)의 메틸 2-[비스(3급-부톡시카보닐)아미노]퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 403.
단계 3. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-[비스(3급-부톡시카보닐)아미노]퀴놀린-6-카복실레이트(1.50 g, 3.727 mmol, 1.00 당량), CH3OH(30.00 ㎖), H2O(10.00 ㎖), 수산화 나트륨(0.45 g, 11.251 mmol, 3.02 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 800 ㎎(62.18%)의 2-[(3급-부톡시카보닐)아미노]퀴놀린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 289.
산 AV의 제조
Figure pct00070
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-포름일-4-니트로벤조에이트(1.10 g, 5.26 mmol, 1.00 당량), AcOH(5.50 ㎖), EtOH(5.50 ㎖), Fe(881.10 ㎎, 15.78 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 700 ㎎(74.28%)의 메틸 4-아미노-3-포름일벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 180.
단계 2. 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-아미노-3-포름일벤조에이트(700.00 ㎎, 3.907 mmol, 1.00 당량), 우레아(1173.13 ㎎, 19.534 mmol, 5.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 145℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 황색 고체로서 400 ㎎(50.14%)의 메틸 2-옥소-1H-퀴나졸린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 205.
단계 3. 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-옥소-1H-퀴나졸린-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1 당량), 옥시염화 인(1.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 250 ㎎(57.32%)의 메틸 2-클로로퀴나졸린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 223.
단계 4. 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-클로로퀴나졸린-6-카복실레이트(140.00 ㎎, 0.629 mmol, 1.00 당량), ACN(2.00 ㎖), 칼륨 카보네이트(262.63 ㎎, 1.887 mmol, 3.0 당량), 1-(2,4-디메톡시페닐)벤질아민(157.72 ㎎, 0.943 mmol, 1.50 당량)을 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 20시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 120 ㎎(54.00%)의 메틸 2-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]퀴나졸린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 354.
단계 5. 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]퀴나졸린-6-카복실레이트(120.00 ㎎, 0.340 mmol, 1.00 당량), MeOH(2.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖), 수산화 나트륨(54.33 ㎎, 1.358 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCL(1 mol/L)로 1-2로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 90 ㎎(78.10%)의 2-[[(2,4-디메톡시페닐)메틸]아미노]퀴나졸린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 340.
산 AW의 제조
Figure pct00071
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(1.00 g, 3.164 mmol, 1.00 당량), 3급-부틸 카바메이트(1111.82 ㎎, 0.000 mmol, 3.00 당량), Pd2(dba)3(289.69 ㎎, 0.316 mmol, 0.10 당량), Xantphos(366.10 ㎎, 0.633 mmol, 0.20 당량), Cs2CO3(4123.02 ㎎, 12.656 mmol, 4.00 당량), 디옥산(20.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 20h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 850 ㎎의 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 306.
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1.310 mmol, 1.00 당량), LiOH(94.12 ㎎, 3.930 mmol, 3.00 당량), MeOH(20.00 ㎖), H2O(5.00 ㎎)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 회색 고체로서 280 ㎎(73.37%)의 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 292.
산 AX의 제조
Figure pct00072
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-아미노-3-니트로페놀(10.00 g, 64.882 mmol, 1.00 당량), 디메틸포름아미드(100.00 ㎖), t-BuOK(7.28 g, 64.882 mmol, 1 당량)를 넣었다. 생성 용액을 수/빙욕에서 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. BnBr(11.10 g, 64.882 mmol, 1 당량)을 플라스크에 넣었다. 생성 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 200 ㎖의 NH4Cl로 희석하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 8 g(50.48%)의 4-(벤질옥시)-2-니트로아닐린이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 245.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-(벤질옥시)-2-니트로아닐린(2.00 g, 8.188 mmol, 1.00 당량), CH3OH(40.00 ㎖), 염화 제1주석(4.71 g, 24.579 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 1.5 g(75.40%)의 4-(벤질옥시)벤젠-1,2-디아민이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 215.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖에, 4-(벤질옥시)벤젠-1,2-디아민(800.00 ㎎, 3.734 mmol, 1.00 당량), 메틸 2-하이드록시아세테이트(8.00 ㎖), LiBr(64.85 ㎎, 0.747 mmol, 0.2 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 500 ㎎(44.89%)의 [5-(벤질옥시)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메탄올이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 255.
단계 4. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, [(5-벤질옥시)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메탄올(500.00 ㎎, 1.966 mmol, 1.00 당량), 아세톤(20.00 ㎖), H2O(5.00 ㎖), NaOH(165.15 ㎎, 4.129 mmol, 2.10 당량), KMnO4(466.11 ㎎, 2.949 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시켰다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 고체를 여과하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 260 ㎎(49.29%)의 5-(벤질옥시)-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 269.
산 AY의 제조
Figure pct00073
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 2-아미노-4-니트로아닐린(5.00 g, 32.650 mmol, 1.00 당량), HCl(6 M)(50.00 ㎖), 글리콜산(2.48 g, 32.650 mmol, 1.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 2 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 NaHCO3으로 pH 8로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 4 g(63.42%)의 (5-니트로-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메탄올이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 194.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, (5-니트로-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메탄올(4.00 g, 20.708 mmol, 1.00 당량), H2O(60.00 ㎖), NaOH(1.74 g, 0.044 mmol, 2.10 당량), KMnO4(4.91 g, 31.069 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 50 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 40 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 고체를 여과하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 3.5 g(81.59%)의 5-니트로-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 208.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-니트로-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산(3.25 g, 15.689 mmol, 1.00 당량), CH3OH(32 ㎖), Pd/C(2.00 g, 18.827 mmol, 1.20 당량), H2(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 2.3 g(82.75%)의 5-아미노-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 178.
단계 4. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 5-아미노-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산(2.30 g, 12.982 mmol, 1.00 당량), DCM(23.00 ㎖), H2O(23.00 ㎖), Boc2O(5.67 g, 25.980 mmol, 2.00 당량), NaHCO3(3.27 g, 38.947 mmol, 3 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 2.3 g(63.9%)의 5-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1H-1,3-벤조디아졸-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 278.
산 BA의 제조
Figure pct00074
50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모-1-클로로이소퀴놀린(2.00 g, 8.247 mmol, 1.00 당량), TEA(4.17 g, 0.040 mmol, 5.00 당량), MeOH(20.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 내부 압력이 0.3 MPa이도록 CO(기체)로 충전하고 이어서 60℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 1.52 g(75.15%)의 1,6-디메틸 이소퀴놀린-1,6-디카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 246.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 1,6-디메틸 이소퀴놀린-1,6-디카복실레이트(1.52 g, 6.198 mmol, 1.00 당량), MeOH(30.00 ㎖), CaCl2(687.90 ㎎, 6.198 mmol, 1.00 당량), NaBH4(281.39 ㎎, 7.438 mmol, 1.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 0℃에서 3h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 고체를 여과하였다. 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 1.2 g(89.13%)의 메틸 1-(하이드록시메틸)이소퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 218.
단계 3. 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1-(하이드록시메틸)이소퀴놀린-6-카복실레이트(300.00 ㎎, 1.381 mmol, 1.00 당량), DCM(20.00 ㎖), TsOH(23.78 ㎎, 0.138 mmol, 0.10 당량), DHP(232.34 ㎎, 2.762 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 40h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 400 ㎎(96.11%)의 메틸 1-[(옥산-2-일옥시)메틸]이소퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 302.
단계 4. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-[(옥산-2-일옥시)메틸]이소퀴놀린-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1.327 mmol, 1.00 당량), NaOH(106.18 ㎎, 2.654 mmol, 2.00 당량), THF(10.00 ㎖), H2O(10.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 253 ㎎(66.34%)의 1-[(옥산-2-일옥시)메틸]이소퀴놀린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 288.
산 BB의 제조
Figure pct00075
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 보호된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 6-브로모-3-메틸-1H-인다졸(1.00 g, 4.738 mmol, 1.00 당량), DHP(478.25 ㎎, 5.686 mmol, 1.20 당량), DCM(10.00 ㎖), TsOH(81.59 ㎎, 0.474 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1.2 g(85.80%)의 6-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 295.
단계 2. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 메틸 6-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-6-카복실레이트(1.20 g, 4.374 mmol, 1.00 당량), TEA(2.21 g, 0.022 mmol, 5 당량), MeOH(20.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(0.36 g, 0.000 mmol, 0.1 당량)를 넣었다. 생성 용액을 0.3 MPa CO(기체) 분위기하에 80℃에서 12h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 900 ㎎(69.70%)의 6-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸 중의 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 275.
단계 3. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1.458 mmol, 1.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖, 0.111 mmol), LiOH(69.84 ㎎, 2.916 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 40℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 회색 고체로서 260 ㎎(68.50%)의 3-메틸-1-(옥산-2-일)이미다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 261.
산 BC의 제조
Figure pct00076
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 6-브로모-1H-인돌-3-카브알데히드(2.00 g, 8.926 mmol, 1.00 당량), THF(20.00 ㎖), LAH(914.73 ㎎, 24.101 mmol, 2.70 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수/빙욕으로 0-5℃로 냉각시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 1 g(53.3%)의 6-브로모-3-메틸-1H-인돌이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 210.
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 6-브로모-3-메틸-1H-인돌(1.00 g, 4.760 mmol, 1.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), TEA(1445.06 ㎎, 14.281 mmol, 3.00 당량), Pd(dppf)Cl2(174.15 ㎎, 0.238 mmol, 0.05 당량), CO를 넣었다. 생성 용액을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 700 ㎎(77.72%)의 메틸 3-메틸-1H-인돌-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 190.
단계 3. 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸-1H-인돌-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 2.114 mmol, 1.00 당량), H2O(1.00 ㎖), MeOH(1.00 ㎖), 수산화 나트륨(169.11 ㎎, 4.228 mmol, 2.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCL(1 M)로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 300 ㎎(81.01%)의 3-메틸-1H-인돌-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 176.
산 BE의 제조
Figure pct00077
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 4-브로모-1-(2-메톡시에틸)피라졸(1.00 g, 4.88 mmol, 1.00 당량), 3-플루오로-4-(메톡시카보닐)페닐보론산(1158.48 ㎎, 5.85 mmol, 1.20 당량), Pd(dppf)Cl2(356.83 ㎎, 0.488 mmol, 0.10 당량), K3PO4(3105.50 ㎎, 14.63 mmol, 3.00 당량), 디옥산(20.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 5h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:3)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 1.2 g(88.42%)의 메틸 2-플루오로-4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 279.
Figure pct00078
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-플루오로-4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조에이트(1.20 g, 4.31 mmol, 1.00 당량), 수산화 나트륨(344.95 ㎎, 0.008 mol, 2.00 당량), MeOH(12.00 ㎖), H2O(3.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 16h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(37%)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 1.7 g(조 물질)의 2-플루오로-4-[1-(2-메톡시에틸)피라졸-4-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 265.
산 BG의 제조
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 5-브로모피리딘-2-카복실레이트(1.00 g, 4.629 mmol, 1.00 당량), 이미다졸(630.26 ㎎, 9.258 mmol, 2.00 당량), CuI(88.16 ㎎, 0.463 mmol, 0.1 당량), 1,10-펜안트롤린(166.83 ㎎, 0.926 mmol, 0.20 당량), K2CO3(1919.22 ㎎, 13.887 mmol, 3.00 당량), DMF(20.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 75℃에서 3일 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 생성 고체를 20 ㎖의 수로 희석하였다. 용액의 pH 값을 HCl(1 M)로 5로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 조 생성물을 MeOH로부터 재결정화에 의해 정제하였다. 이에 의해 회색 고체로서 400 ㎎(조 물질)의 5-(이미다졸-1-일)피리딘-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 204.
산 BH의 제조
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-요오도-1-(트리페닐메틸)이미다졸(1.00 g, 2.292 mmol, 1.00 당량), 메틸 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘-2-카복실레이트(0.90 g, 0.003 mmol, 1.50 당량), Pd(dppf)Cl2(167.71 ㎎, 0.229 mmol, 0.10 당량), K2CO3(1.58 g, 11.432 mmol, 4.99 당량), 디옥산(20.00 ㎖), H2O(5.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 20h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 이어서 30 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에톡시에탄으로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 352 ㎎(35.59%)의 5-[1-(트리페닐메틸)이미다졸-4-일]피리딘-2-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 432.
산 BN의 제조
Figure pct00079
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모이소퀴놀린-1-아민(1.20 g, 5.379 mmol, 1.00 당량), CH3OH(24.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2(0.39 g, 0.000 mmol, 0.10 당량), NaOAc(1.77 g, 21.576 mmol, 4.01 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 0.9 g(82.7%)의 메틸 1-아미노이소퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 203.
단계 2. 단계 2. 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1-아미노이소퀴놀린-6-카복실레이트(0.90 g, 4.45 mmol, 1.00 당량), DCM(18.00 ㎖), Boc2O(2.43 g, 11.13 mmol, 2.50 당량), TEA(1.80 g, 17.80 mmol, 4.00 당량), DMAP(0.05 g, 0.45 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 오일로서 1 g(55.8%)의 메틸 1-[비스(3급-부톡시카보닐)아미노]이소퀴놀린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 403
단계 3. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-[비스(3급-부톡시카보닐)아미노]이소퀴놀린-6-카복실레이트(1.00 g, 2.49 mmol, 1.00 당량), CH3OH(20.00 ㎖), H2O(7.00 ㎖), NaOH(0.30 g, 7.501 mmol, 3.02 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 1 g(139.59%)의 1-[(3급-부톡시카보닐)아미노]이소퀴놀린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 289.
산 BO의 제조
Figure pct00080
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-브로모-2-플루오로벤조니트릴(10.0 g, 50 mmol, 1.00 당량), t-BuOH(100.00 ㎖), NH2NH2.H2O(7.51 g, 150.02 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 6.5 g(61.3%)의 6-브로모-1H-인다졸-3-아민이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 212.
단계 2. 100 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모-1H-인다졸-3-아민(6.50 g, 30.65 mmol, 1.00 당량), CH3OH(65 ㎖), Pd(dppf)Cl2(2.24 g, 3.07 mmol, 0.10 당량), 트리에틸아민(9.31 g, 91.959 mmol, 3.00 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 생성 용액을 100 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 60 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 60 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 3.5 g(59.7%)의 메틸 3-아미노-1H-인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 192.
단계 3. 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-아미노-1H-인다졸-6-카복실레이트(3.50 g, 18.31 mmol, 1.00 당량), DCM(70.0 ㎖), Boc2O(11.99 g, 54.94 mmol, 3.00 당량), 트리에틸아민(7.41 g, 73.226 mmol, 4 당량), DMAP(0.22 g, 1.831 mmol, 0.1 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 60 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 60 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 60 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 3 g(41.9%)의 1-3급-부틸 6-메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]인다졸-1,6-디카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 492.
단계 4. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 1-3급-부틸 6-메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]인다졸-1,6-디카복실레이트(3.00 g, 7.67 mmol, 1.00 당량), CH3OH(60.00 ㎖), H2O(20.00 ㎖), NaOH(0.92 g, 23.002 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 2 g의 1-(3급-부톡시카보닐)-3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M-H]+ = 376.
산 BP의 제조
Figure pct00081
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 1H-인다졸-6-카복실레이트(2.00 g, 11.352 mmol, 1.00 당량), DMF(40.00 ㎖), K2CO3(3.14 g, 22.704 mmol, 2.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 빙/염 욕에서 0℃에서 교반하였다. 이어서 I2(24.32 g, 17.021 mmol, 1.50 당량)를 플라스크에 가하였다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 생성 용액을 80 ㎖의 Na2S2O3으로 희석하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 황색 고체로서 3 g(87.48%)의 메틸 3-요오도-1H-인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 303.
Figure pct00082
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 메틸 3-요오도-1H-인다졸-6-카복실레이트(3.00 g, 9.93 mmol, 1.00 당량), DCE(60.00 ㎖), 사이클로프로필보론산(1.71 g, 19.86 mmol, 2.00 당량), Cu(OAc)2(1.80 g, 9.93 mmol, 1.00 당량), 2-(피리딘-2-일)피리딘(1.55 g, 9.92 mmol, 1.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 70℃에서 10시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 90 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 60 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 60 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:5)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 1 g(29.43%)의 메틸 1-사이클로프로필-3-요오도인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 343.
Figure pct00083
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 메틸 1-사이클로프로필-3-요오도인다졸-6-카복실레이트(900.0 ㎎, 2.63 mmol, 1.00 당량), 디옥산(18.0 ㎖), 3급-부틸 카바메이트(616.32 ㎎, 5.26 mmol, 2.00 당량), Pd2(dba)3(240.88 ㎎, 0.263 mmol, 0.10 당량), XantPhos(304.41 ㎎, 0.53 mmol, 0.20 당량), Cs2CO3(2571.24 ㎎, 7.89 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 20시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함게 실리카젤상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 190 ㎎(21.80%)의 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-사이클로프로필인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 332.
Figure pct00084
단계 4. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-사이클로프로필인다졸-6-카복실레이트(190.00 ㎎, 0.573 mmol, 1.00 당량), CH3OH(3.80 ㎖), H2O(1.30 ㎖), 수산화 리튬(41.20 ㎎, 1.720 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH를 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 150 ㎎(82.4%)의 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-사이클로프로필인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 318.
산 BQ의 제조
Figure pct00085
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(200.00 ㎎, 0.66 mmol, 1.00 당량), CH3I(139.46 ㎎, 0.983 mmol, 1.50 당량), Cs2CO3(533.55 ㎎, 1.64 mmol, 2.50 당량), DMF(3.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 빙/염을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 5 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:3)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 120 ㎎(57.36%)의 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)(메틸)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 320.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)(메틸)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(120.0 ㎎, 0.376 mmol, 1.00 당량), 수산화 리튬(18.00 ㎎, 0.752 mmol, 2.00 당량), MeOH(1.20 ㎖), H2O(0.30 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 회색 고체로서 110 ㎎(95.88%)의 3-[(3급-부톡시카보닐)(메틸)아미노]-1-메틸인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 306.
산 BR의 제조
Figure pct00086
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 디옥산(20 ㎖) 중의 메틸 3-요오도-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(800 ㎎, 2.53 mmol, 1.00 당량)의 용액, 디메틸아민(2.53 ㎖, 5.06 mmol, 2.00 당량), Pd2(dba)3(23.18 ㎎, 0.025 mmol, 0.01 당량), XantPhos(14.64 ㎎, 0.025 mmol, 0.01 당량), Cs2CO3(2473.81 ㎎, 7.59 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 400 ㎎(67.8%)의 메틸 3-(디메틸아미노)-1-메틸인다졸-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 234.
단계 2. 40 ㎖ 바이알에, MeOH(10 ㎖) 중의 메틸 3-(디메틸아미노)-1-메틸인다졸-6-카복실레이트(400.00 ㎎, 1.715 mmol, 1.00 당량)의 용액, H2O(5 ㎖) 중의 수산화 리튬(82.14 ㎎, 3.430 mmol, 2.00 당량)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. HCl(1 M)을 사용하여 pH를 2로 조절하였다. 조 생성물을 C18 실리카젤과 함께 플래시-예비-HPLC에 의해 정제하였다. 이에 의해 황색 고체로서 200 ㎎(53.20%)의 3-(디메틸아미노)-1-메틸인다졸-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: 220[M+H]+.
산 BT의 제조
Figure pct00087
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 4-브로모-3-메틸-1H-피라졸(5.00 g, 31.06 mmol, 1.00 당량), DCM(100.00 ㎖), DHP(3.92 g, 46.584 mmol, 1.50 당량), TsOH(0.27 g, 1.568 mmol, 0.05 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 100 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 100 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 6.5 g의 4-브로모-5-메틸-1-(옥산-2-일)피라졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 245.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 4-(메톡시카보닐)페닐보론산(1.50 g, 8.34 mmol, 1.00 당량), 디옥산(24.00 ㎖), 4-브로모-3-메틸-1-(옥산-2-일)피라졸(2.04 g, 8.32 mmol, 1.00 당량), Pd(dppf)Cl2(0.61 g, 0.834 mmol, 0.10 당량), K3PO4(5.31 g, 25.02 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 5시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 1.3 g의 메틸 4-[3-메틸-1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 301.
단계 3. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-[3-메틸-1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조에이트(1.30 g, 4.328 mmol, 1.00 당량), CH3OH(26.00 ㎖), H2O(9.00 ㎖), 수산화 나트륨(0.52 g, 12.984 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 0.9 g(72.6%)의 4-[3-메틸-1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 287.
산 BU의 제조
Figure pct00088
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, THF(12.00 ㎖), 메틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(600.00 ㎎, 3.33 mmol, 1.00 당량), CDI(1619.62 ㎎, 9.99 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 70℃에서 4h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 400 ㎎(58.26%)의 메틸 1-메틸-2-옥소-3H-1,3-벤조디아졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 207.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 메틸 1-메틸-2-옥소-3H-1,3-벤조디아졸-5-카복실레이트(200.00 ㎎, 0.97 mmol, 1.00 당량), 디메틸포름아미드(4.00 ㎖), Cs2CO3(632.04 ㎎, 1.940 mmol, 2.00 당량), MeI(206.51 ㎎, 1.46 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 18h 동안 교반하였다. 이어서 15 ㎖의 빙/수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 4 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 4 ㎖의 염수로 세척하였다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 180 ㎎(84.27%)의 메틸 1,3-디메틸-2-옥소-1,3-벤조디아졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 221.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 메틸 1,3-디메틸-2-옥소-1,3-벤조디아졸-5-카복실레이트(180.00 ㎎, 0.817 mmol, 1.00 당량), 수산화 나트륨(65.38 ㎎, 1.634 mmol, 2.00 당량), MeOH(1.60 ㎖), H2O(0.40 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 16h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(37%)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 250 ㎎(조 물질)의 1,3-디메틸-2-옥소-1,3-벤조디아졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 207.
산 BW의 제조
Figure pct00089
단계 1. EtOH(60.00 ㎖) 중의 메틸 하이드라진; 황산(7.21 g, 49.998 mmol, 5 당량) 및 K2CO3(11.06 g, 79.996 mmol, 8 당량)의 교반된 용액에 질소 분위기하에 5℃에서 메틸 하이드라진; 황산(7.21 g, 49.998 mmol, 5 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되게 하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 EtOAc(100 ㎖)에 용해시켰다. 생성 혼합물을 3 x 20 ㎖의 수로 세척하였다. 생성되는 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(2:3)로 용출시켜 황색 고체로서 5-브로모-1-메틸인다졸-3-아민(1.1 g, 48.66%)을 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 226.
Figure pct00090
단계 2. THF(30.00 ㎖) 중의 5-브로모-1-메틸인다졸-3-아민(0.95 g, 4.202 mmol, 1.00 당량) 및 디-3급-부틸 디카보네이트(2.29 g, 10.505 mmol, 2.50 당량)의 교반된 용액에 질소 분위기하에 0℃에서 NaHMDS(2 mol/L, 5.67 ㎖, 11.345 mmol, 2.70 당량)를 가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 0℃에서 4h 동안 교반하였다. 0℃에서 반응을 수로 급냉시켰다. 혼합물을 실온으로 가온되게 하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(3 x 30 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(1 x 50 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 헥산/에틸 아세테이트 = 50/1(50 ㎖)로 습성화시켜 정제하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 3급-부틸 N-(5-브로모-1-메틸인다졸-3-일)-N-(3급-부톡시카보닐)카바메이트(1.5 g, 66.99%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 426.
Figure pct00091
단계 3. 30 ㎖ 압력 탱크 반응기에 실온에서 3급-부틸 N-(5-브로모-1-메틸인다졸-3-일)-N-(3급-부톡시카보닐)카바메이트(500.0 ㎎, 1.173 mmol, 1.00 당량), Pd(dppf)Cl2(85.82 ㎎, 0.117 mmol, 0.10 당량), MeOH(10.00 ㎖) 및 트리에틸아민(593.40 ㎎, 5.865 mmol, 5.00 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 CO(10 atm) 분위기하에 110℃에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(1:1)에 의해 용출시켜 황색 고체로서 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-5-카복실레이트(290 ㎎, 80.98%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 306.
Figure pct00092
단계 4. 25 ㎖ 환저 플라스크에 실온에서 메틸 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-5-카복실레이트(290.00 ㎎, 0.950 mmol, 1.00 당량), MeOH(5.00 ㎖), 수(2.00 ㎖) 및 NaOH(151.95 ㎎, 3.800 mmol, 4.00 당량)를 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 수(15 ㎖)에 용해시켰다. 혼합물을 HCl(수성 1 M)로 pH 5로 산성화하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집하고 수(2 x 10 ㎖)로 세척하였다. 생성 고체를 적외선하에서 건조시켰다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 3-[(3급-부톡시카보닐)아미노]-1-메틸인다졸-5-카복실산(138 ㎎, 49.88%)이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 292.
산 BY의 제조
Figure pct00093
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, THF(20 ㎖) 중의 7-브로모-3-클로로이소퀴놀린(1.00 g, 4.124 mmol, 1.00 당량)의 용액을 넣었다. 이어서 -78℃에서 n-BuLi(0.58 ㎖, 6.157 mmol, 1.49 당량)를 교반하면서 적가하였다. 여기에 DMF(0.60 g, 8.209 mmol, 1.99 당량)를 -78℃에서 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 생성 용액을 실온에서 추가로 1시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:5)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 230 ㎎(29.11%)의 3-클로로이소퀴놀린-7-카브알데히드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 192.
Figure pct00094
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 디옥산(5 ㎖) 중의 3-클로로이소퀴놀린-7-카브알데히드(230.00 ㎎, 1.200 mmol, 1.00 당량)의 용액, 3급-부틸 카바메이트(421.86 ㎎, 3.600 mmol, 3.00 당량), Xantphos(69.45 ㎎, 0.120 mmol, 0.10 당량), Pd2(dba)3(109.92 ㎎, 0.120 mmol, 0.10 당량), Cs2CO3(782.20 ㎎, 2.400 mmol, 2.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 100 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 생성 혼합물을 3 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 100 ㎎(30.59%)의 3급-부틸 N-(7-포름일이소퀴놀린-3-일)카바메이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 273.
Figure pct00095
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8-㎖ 바이알에, DMF(2 ㎖) 중의 3급-부틸 N-(7-포름일이소퀴놀린-3-일)카바메이트(100.00 ㎎, 0.367 mmol, 1.00 당량)의 용액, CH3I(104.25 ㎎, 0.734 mmol, 2 당량), K2CO3(101.51 ㎎, 0.734 mmol, 2 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성 혼합물을 3 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 52 ㎎(49.45%)의 3급-부틸 N-(7-포름일이소퀴놀린-3-일)-N-메틸카바메이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 287.
Figure pct00096
단계 4. 8 ㎖ 바이알에, CH3CN(5 ㎖) 중의 3급-부틸 N-(7-포름일이소퀴놀린-3-일)-N-메틸카바메이트(52.00 ㎎, 0.182 mmol, 1.00 당량)의 용액, KMnO4(71.75 ㎎, 0.455 mmol, 2.50 당량), H2O(5 ㎖) 중의 KOH(30.57 ㎎, 0.546 mmol, 3.00 당량)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 시트르산(3 mol/L)을 사용하여 pH를 3-4로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 21 ㎎(38.25%)의 3-[(3급-부톡시카보닐)(메틸)아미노]이소퀴놀린-7-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 303.
산 CA의 제조
Figure pct00097
단계 1. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 5-브로모-3-메틸-1H-인다졸(1.00 g, 4.738 mmol, 1.00 당량), 3-요오도옥세탄(1.05 g, 0.000 mmol, 1.20 당량), Cs2CO3(3087.43 ㎎, 9.476 mmol, 2.00 당량), DMF(20.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 2h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 907 ㎎(71.66%)의 5-브로모-3-메틸-1-(옥세탄-3-일)인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 267.
Figure pct00098
단계 2. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-브로모-3-메틸-1-(옥세탄-3-일)인다졸(700.00 ㎎, 2.620 mmol, 1.00 당량), Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(213.47 ㎎, 0.262 mmol, 0.10 당량), 트리에틸아민(1325.83 ㎎, 0.000 mmol, 5.00 당량), MeOH(20.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 CO(3.0 MPa) 분위기하에 실온에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 380 ㎎(58.88%)의 메틸 3-메틸-1-(옥세탄-3-일)인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 247.
Figure pct00099
단계 3. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-메틸-1-(옥세탄-3-일)인다졸-5-카복실레이트(380.00 ㎎, 1.543 mmol, 1.00 당량), LiOH(147.81 ㎎, 6.172 mmol, 4.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 10 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 323 ㎎(90.13%)의 3-메틸-1-(옥세탄-3-일)인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 233.
산 CB의 제조
Figure pct00100
단계 1. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-하이드록시티에탄 1,1-디옥사이드(600.00 ㎎, 4.912 mmol, 1.00 당량), MsCl(675.26 ㎎, 5.894 mmol, 1.20 당량), DCM(5.00 ㎖), TEA(1491.26 ㎎, 14.736 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 1h 동안 교반하였다. 50 ㎖ 환저 플라스크에, DCM 중의 조 티에탄 1,1-디옥사이드 3-메탄설포네이트, 5-브로모-3-메틸-1H-인다졸(933.14 ㎎, 4.421 mmol, 0.90 당량), Cs2CO3(4801.67 ㎎, 14.736 mmol, 3.00 당량), DMF(5.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 이어서 50 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 820 ㎎(52.96%)의 3-(5-브로모-3-메틸-1H-인다졸-1-일)티에탄 1,1-디옥사이드가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 315.
Figure pct00101
단계 2. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 3-(5-브로모-3-메틸-1H-인다졸-1-일)티에탄 1,1-디옥사이드(500.00 ㎎, 1.586 mmol, 1.00 당량), TEA(802.61 ㎎, 7.930 mmol, 5.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(129.23 ㎎, 0.159 mmol, 0.10 당량)을 넣었다. 생성 용액을 CO(3 MPa) 분위기하에 100℃에서 3h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:3)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 360 ㎎(77.10%)의 메틸 1-(1,1-디옥시도티에탄-3-일)-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 295.
Figure pct00102
단계 3. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-(1,1-디옥시도티에탄-3-일)-3-메틸인다졸-5-카복실레이트(360.00 ㎎, 1.223 mmol, 1.00 당량), LiOH(58.58 ㎎, 2.446 mmol, 2.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 247 ㎎(72.05%)의 1-(1,1-디옥시도티에탄-3-일)-3-메틸인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 281.
산 CC의 제조
Figure pct00103
단계 1. 100 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 5-브로모-3-메틸-1H-인다졸(1.00 g, 4.74 mmol, 1.00 당량), 디에틸 브로모디플루오로메틸포스포네이트(1265.06 ㎎, 1.00 당량), MeCN(35.00 ㎖), KF(550.52 ㎎, 9.476 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 3h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1.0 g(80.84%)의 5-브로모-1-(디플루오로메틸)-3-메틸인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 261.
Figure pct00104
단계 2. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-브로모-1-(디플루오로메틸)-3-메틸인다졸(550.00 ㎎, 2.107 mmol, 1.00 당량), 트리에틸아민(1065.89 ㎎, 0.000 mmol, 5.00 당량), MeOH(20.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(171.62 ㎎, 0.211 mmol, 0.10 당량)을 넣었다. 생성 용액을 CO(3.0 MPa) 분위기하에 105℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 420 ㎎(83.00%)의 메틸 1-(디플루오로메틸)-3-메틸인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 241.
Figure pct00105
단계 3. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-(디플루오로메틸)-3-메틸인다졸-5-카복실레이트(420.00 ㎎, 1.748 mmol, 1.00 당량), MeOH(10.00 ㎖), H2O(1.00 ㎖), LiOH(125.62 ㎎, 5.24 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산(수성)으로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 343 ㎎(86.73%)의 1-(디플루오로메틸)-3-메틸인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H] = 227.
산 CE의 제조
Figure pct00106
단계 1. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-브로모-6-플루오로-3-메틸-1H-인다졸(550.0 ㎎, 2.4 mmol, 1.00 당량), MeOH(20.0 ㎖), Pd(dppf)Cl2(175.7 ㎎, 0.24 mmol, 0.10 당량), TEA(971.9 ㎎, 9.61 mmol, 4.00 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 50 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 오렌지색 고체로서 280 ㎎(56%)의 메틸 6-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 209.
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 6-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실레이트(280.0 ㎎, 1.35 mmol, 1.00 당량), CH3OH(9.00 ㎖), H2O(3.00 ㎖), 수산화 나트륨(161.38 ㎎, 4.0 mmol, 3.0 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 회색 고체로서 210 ㎎의 6-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실산에 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 195.
산 CF의 제조
Figure pct00107
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 3-브로모-2,6-디플루오로벤즈알데히드(5.5 g, 24.89 mmol, 1.00 당량), 테트라하이드로푸란(110.0 ㎖)을 넣었다. MeMgBr(Et2O 중의)(20.70 ㎖, 62.2 mmol, 2.50 당량)을 가하고 생성 용액을 -75℃에서 30분간 교반하였다. 생성 용액을 실온에서 추가로 2.5h 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 이어서 300 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 100 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 용액을 농축시켰다. 이에 의해 밝은 황색 오일로서 5.5 g(93.23%)의 1-(3-브로모-2,6-디플루오로페닐)에탄올이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 237.
Figure pct00108
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 1-(3-브로모-2,6-디플루오로페닐)에탄올(5.50 g, 23.202 mmol, 1.00 당량), DCM(110.0 ㎖), DMP(14.76 g, 34.80 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 18h 동안 교반하였다. 이어서 250 ㎖의 포화된 Na2S2O3를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 100 ㎖의 포화된 NaHCO3로 세척하였다. 생성 혼합물을 2 x 100 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 PE/THF(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 오일로서 5.5 g(100%)의 1-(3-브로모-2,6-디플루오로페닐)에탄온이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 235.
Figure pct00109
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3-목 환저 플라스크에, 1-(3-브로모-2,6-디플루오로페닐)에탄온(5.50 g, 23.40 mmol, 1.00 당량), DME(110.0 ㎖), NH2NH2.H2O(11.7 g, 0.23 mmol, 10.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 90℃에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 500 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 회색 고체로서 670 ㎎(12.50%)의 5-브로모-4-플루오로-3-메틸-1H-인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 229.
Figure pct00110
단계 4. 50 ㎖ 밀봉 튜브에, 5-브로모-4-플루오로-3-메틸-1H-인다졸(600.0 ㎎, 2.62 mmol, 1.00 당량), Pd(dppf)Cl2(383 ㎎, 0.52 mmol, 0.20 당량), TEA(795.20 ㎎, 7.86 mmol, 3.00 당량), MeOH(20.00 ㎖), CO(5 atm)를 넣었다. 생성 용액을 80℃에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 고체로서 450 ㎎(83%)의 메틸 4-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 209.
Figure pct00111
단계 5. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실레이트(450.00 ㎎, 2.161 mmol, 1.00 당량), 가성 소다(172.90 ㎎, 4.323 mmol, 2.00 당량), MeOH(8.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 용액의 pH 값을 HCl(37%)로 3으로 조절하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 600 ㎎(조 물질)의 4-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 195.
산 CH의 제조
Figure pct00112
단계 1. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-옥소-2,4-디하이드로-1,4-벤즈옥사진-7-카복실산(CAS: 214848-62-1, 500.0 ㎎, 2.59 mmol, 1.00 당량), MeI(808.32 ㎎, 5.696 mmol, 2.20 당량), K2CO3(1073.26 ㎎, 7.767 mmol, 3.00 당량), DMF(10.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 373 ㎎(65%)의 메틸 4-메틸-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 222.
단계 2. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 4-메틸-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복실레이트(373.00 ㎎, 1.686 mmol, 1.00 당량), NaOH(134.88 ㎎, 3.372 mmol, 2.00 당량), MeOH(5.00 ㎖) 및 H2O(1.00 ㎖, 0.056 mmol, 0.03 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 시트르산으로 5로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 회색 고체로서 277 ㎎(79.3%)의 4-메틸-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 208.
산 CI의 제조
Figure pct00113
단계 1. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 7-브로모-2H-이소퀴놀린-1-온(200.00 ㎎, 0.893 mmo, 1.00 당량), MeOH(5.0 ㎖), TEA(270.98 ㎎, 2.678 mmol, 3 당량), Pd(dppf)Cl2(32.66 ㎎, 0.045 mmol, 0.05 당량)를 넣었다. 이어서 CO(5 atm)를 가하였다. 생성 용액을 120℃에서 3h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 120 ㎎(66.16%)의 메틸 1-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 204.
Figure pct00114
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 1-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실레이트(120.0 ㎎, 0.591 mmol, 1.00 당량), H2O(3.0 ㎖), MeOH(3.0 ㎖) 및 수산화 나트륨(94.5 ㎎, 2.362 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH를 1 M HCl로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 80 ㎎(72%)의 1-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 190.
산 CJ의 제조
Figure pct00115
단계 1. 40 ㎖ 환저 플라스크에, 4-브로모페닐아세토니트릴(1.10 g, 5.611 mmol, 1.00 당량), 파라포름알데히드(556 ㎎, 6.172 mmol, 1.10 당량), PPA(6.5 g, 56.1 mmol, 10.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 160℃에서 24h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 용액의 pH 값을 1 M NaHCO3로 7-8로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 고체로서 600 ㎎(47%)의 7-브로모-2,4-디하이드로-1H-이소퀴놀린-3-온이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 226.
Figure pct00116
단계 2. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 7-브로모-2,4-디하이드로-1H-이소퀴놀린-3-온(600.0 ㎎, 2.65 mmol, 1.00 당량), MeOH(12.0 ㎖), TEA(805.7 ㎎, 7.962 mmol, 3.00 당량), Pd(dppf)Cl2(97 ㎎, 0.133 mmol, 0.05 당량), CO(5 atm)를 넣었다. 생성 용액을 120℃에서 16h 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 짙은 갈색 고체로서 450 ㎎(82.62%)의 메틸 3-옥소-2,4-디하이드로-1H-이소퀴놀린-7-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 206.
Figure pct00117
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-옥소-2,4-디하이드로-1H-이소퀴놀린-7-카복실레이트(450.0 ㎎, 2.19 mmol, 1.00 당량), MeOH(9 ㎖), H2O(9 ㎖), 수산화 나트륨(350.83 ㎎, 8.77 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 1 x 20 ㎖의 DCM으로 세척하였다. 고체를 여과하였다. 이에 의해 백색 고체로서 200 ㎎(47.71%)의 3-옥소-2,4-디하이드로-1H-이소퀴놀린-7-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 192.
산 CK의 제조
Figure pct00118
메틸 2-옥소-1H-퀴놀린-6-카복실레이트(CK-2)
50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 6-브로모-1H-퀴놀린-2-온(CK-1, 2.00 g, 8.926 mmol, 1.00 당량), CH3OH(20.00 ㎖), Pd(dppf)Cl2(0.65 g, 0.888 mmol, 0.10 당량), TEA(3.61 g, 35.675 mmol, 4.00 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 40 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 30 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 적색 고체로서 1.9 g(73.45%)의 메틸 2-옥소-1H-퀴놀린-6-카복실레이트(CK-2)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 204.
2-옥소-1H-퀴놀린-6-카복실산(산 CK)
100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 2-옥소-1H-퀴놀린-6-카복실레이트(1.90 g, 9.351 mmol, 1.00 당량), CH3OH(38.00 ㎖), H2O(12.00 ㎖), 수산화 나트륨(1.12 g, 28.002 mmol, 2.99 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 M)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 적색 고체로서 1.2 g(67.84%)의 2-옥소-1H-퀴놀린-6-카복실산(산 CK)이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 190.
산 CL의 제조
Figure pct00119
단계 1. 100 ㎖ 4-목 환저 플라스크에, DMF(30 ㎖) 중의 메틸 3-시아노-4-플루오로벤조에이트(2.00 g, 11.164 mmol, 1.00 당량)의 용액, 칼륨 카보네이트(4662.45 ㎎, 33.491 mmol, 3.00 당량), CH3NH2HCl(2261.28 ㎎, 33.492 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 이어서 100 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1800 ㎎(84.77%)의 메틸 3-시아노-4-(메틸아미노)벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 191.
Figure pct00120
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 압력 탱크 반응기에, MeOH(50 ㎖) 중의 메틸 3-시아노-4-(메틸아미노)벤조에이트(1800.00 ㎎, 9.464 mmol, 1.00 당량)의 용액, Pd/C(500.00 ㎎, 4.698 mmol, 0.50 당량), Boc2O(6196.22 ㎎, 28.391 mmol, 3 당량)를 넣었다. H2(g)를 도입시키고 생성 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 1.67 g(59.95%)의 메틸 3-[[(3급-부톡시카보닐)아미노]메틸]-4-(메틸아미노)벤조에이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 295.
Figure pct00121
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-[[(3급-부톡시카보닐)아미노]메틸]-4-(메틸아미노)벤조에이트(1.67 g, 5.67 mmol, 1.00 당량), 에틸 아세테이트(20 ㎖) 중의 염화 수소(2 M)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 황색 고체로서 1.1 g(84.05%)의 메틸 3-(아미노메틸)-4-(메틸아미노)벤조에이트 하이드로클로라이드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 19.
Figure pct00122
단계 4. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, THF(10 ㎖) 중의 메틸 3-(아미노메틸)-4-(메틸아미노)벤조에이트 하이드로클로라이드(1100.00 ㎎, 4.768 mmol, 1.00 당량)의 용액, 트리에틸아민(1447.51 ㎎, 14.304 mmol, 3.00 당량), CDI(1159.76 ㎎, 7.152 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서 30 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 680 ㎎(64.8%)의 메틸 1-메틸-2-옥소-3,4-디하이드로퀴나졸린-6-카복실레이트가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 221.
Figure pct00123
단계 5. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 바이알에, MeOH(5 ㎖) 중의 메틸 1-메틸-2-옥소-3,4-디하이드로퀴나졸린-6-카복실레이트(680.00 ㎎, 3.09 mmol, 1.00 당량)의 용액, H2O(5 ㎖) 중의 수산화 나트륨(247.00 ㎎, 6.18 mmol, 2.00 당량)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. HCl(1 M)을 사용하여 pH를 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 510 ㎎(80.10%)의 1-메틸-2-옥소-3,4-디하이드로퀴나졸린-6-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 207.
산 CM의 제조
8 ㎖ 환저 플라스크에, 메틸 3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실레이트(CAS: 1416713-96-6, 100.0 ㎎, 0.492 mmol, 1.00 당량), H2O(1 ㎖), MeOH(1 ㎖), 수산화 나트륨(78.7 ㎎, 1.97 mmol, 4.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 용액의 pH 값을 1 M HCl로 2-3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 70 ㎎(75%)의 3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실산이 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 190.
산 CN의 제조
CK-1을 6-브로모퀴놀린-2(1H)-온으로 교체함을 제외하고, 산 CK와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS: [M+1]+ = 190.
사용된 하기의 아민을 표 C에 묘사한다. 합성 반응식을 명세서에 묘사한다.
[표 C]
Figure pct00124
아민 D의 합성
[반응식 D]
Figure pct00125
2-[[6-클로로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-1-일]메톡시]에틸-트리메틸-실란(D.2)
THF(30 ㎖) 중의 6-클로로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘(1.30 g, 5.21 mmol, 1 eq)의 용액에 0℃에서 NaH(D.1, 625 ㎎, 15.6 mmol, 60 중량% 오일 분산액, 3 eq)를 가하였다. 0℃에서 1시간 동안 교반 후에, SEM-Cl(868 ㎎, 5.21 mmol, 0.921 ㎖, 1 eq)을 0℃에서 가하였다. 생성 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. H2O(10 ㎖)를 가하여 반응 혼합물을 급냉시켰다. 혼합물을 EtOAc(10 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(10 ㎖ x 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 1:0 내지 2:1의 석유 에테르/에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제시켜 2-[[6-클로로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-1-일]메톡시]에틸-트리메틸실란을 제공하였다.
N-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민(D.3)
톨루엔(15 ㎖) 중의 2-[[6-클로로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-1-일]메톡시]에틸-트리메틸실란(D.1, 0.600 g, 1.58 mmol, 1 eq), 디페닐메탄이민(429 ㎎, 2.37 mmol, 0.397 ㎖, 1.5 eq), Pd2(dba)3(145 ㎎, 0.158 mmol, 0.1 eq), BINAP(98 ㎎, 0.16 mmol, 0.1 eq), 및 t-BuONa(303 ㎎, 3.16 mmol, 2 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2(3X)로 퍼징하였다. 혼합물을 110℃에서 N2 분위기하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압하에서 농축시켜 N-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민을 제공하였다.
2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-c]-피리딘-6-아민(아민 D)
THF(10 ㎖) 중의 N-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민(D.2, 0.900 g, 1.72 mmol, 1 eq)의 용액에 HCl(10 ㎖)을 가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 수(15 ㎖) 및 EtOAc(15 ㎖)를 반응 혼합물에 가하였다. 층을 분리시키고, 수성 상을 수성 1 N NaOH를 가하여 pH = 9-10으로 조절하였다. 수성 층을 EtOAc(15 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압하에서 농축시켜 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민을 제공하였다.
아민 E의 합성
[반응식 E]
Figure pct00126
6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산(E.2)
DMF(120 ㎖) 중의 2,5-디브로모피리딘-3-아민(5.00 g, 19.9 mmol, 1 eq)의 용액에 TEA(8.84 g, 87.3 mmol, 12.2 ㎖, 4.4 eq), PPh3(4.58 g, 17.5 mmol, 0.88 eq), Pd(OAc)2(980 ㎎, 4.37 mmol, 0.22 eq), 및 2-옥소프로판산(4.63 g, 52.6 mmol, 3.71 ㎖, 2.65 eq)을 가하였다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 H2O(50 ㎖) 및 EtOAc(50 ㎖)로 희석하였다. 고체를 여과하고 건조시켜 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산을 제공하였다.
Figure pct00127
메틸 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실레이트(E.3)
MeOH(30 ㎖) 및 DCM(30 ㎖) 중의 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산(4.00 g, 16.6 mmol, 1 eq)의 용액에 TMSCHN2(2 M, 32.61 ㎖)를 적가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 아세트산(3 ㎖)을 혼합물에 가하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용액을 감압하에서 농축시켜 메틸 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실레이트를 제공하였다.
Figure pct00128
(6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-일)메탄올(E.4)
THF(25 ㎖) 중의 LiAlH4(565 ㎎, 14.9 mmol, 2 eq)의 혼합물에 0℃에서 메틸 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실레이트(1.90 g, 7.45 mmol, 1 eq)를 가하였다. 혼합물을 25℃로 가온하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 수성 NaOH(20 ㎖, 10%) 및 H2O(30 ㎖)를 가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 EtOAc(20 ㎖ x 3)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켜 (6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-일)메탄올을 제공하였다. LCMS: M+H+ = 149.0
6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카브알데히드(E.5)
DCM(100 ㎖) 중의 (6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-일)메탄올(1.55 g, 6.83 mmol, 1 eq)의 용액에 데스-마틴(8.69 g, 20.5 mmol, 3 eq)을 가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응을 포화된 수성 NaHCO3(50 ㎖)로 희석하고 EtOAc(20 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50 ㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켜 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카브알데히드를 제공하였다.
Figure pct00129
6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘(E.6)
DCE(20 ㎖) 중의 6-브로모-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카브알데히드(1.59 g, 7.07 mmol, 1 eq)의 용액에 (2S)-2-메틸피롤리딘(602 ㎎, 7.07 mmol, 1 eq) 및 AcOH(424 ㎎, 7.07 mmol, 0.404 ㎖, 1 eq)를 가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반 후에, NaBH(OAc)3(2.99 g, 14.1 mmol, 2 eq)를 가하였다. 혼합물을 25℃에서 11.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화된 수성 NaHCO3로 희석하고 EtOAc(20 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50 ㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 1/0 내지 0/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제시켜 6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘을 제공하였다.
2-[[6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-1-일]메톡시]-에틸-트리메틸-실란(E.7)
THF(10 ㎖) 중의 6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘(0.400 g, 1.36 mmol, 1 eq)의 용액에 0℃에서 NaH(163 ㎎, 4.08 mmol, 60 중량% 오일 분산액, 3 eq)를 가하였다. 0℃에서 1시간 동안 교반 후에, SEM-Cl(227 ㎎, 1.36 mmol, 0.241 ㎖, 1 eq)을 가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(50 ㎖)로 희석하고 EtOAc(20 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50 ㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 1/0 내지 1/2의 석유 에테르/에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제시켜 2-[[6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-1-일]메톡시]-에틸-트리메틸-실란을 제공하였다. LCMS: M+H+: 426.2
N-[2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-b]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민(E.8)
톨루엔(4 ㎖) 중의 2-[[6-브로모-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-1-일]메톡시]-에틸-트리메틸실란(0.200 g, 0.471 mmol, 1 eq), 디페닐메탄이민(128 ㎎, 0.707 mmol, 0.119 ㎖, 1.5 eq.), Pd2(dba)3(43 ㎎, 0.047 mmol, 0.1 eq), BINAP(29 ㎎, 0.047 mmol, 0.1 eq) 및 t-BuONa(91 ㎎, 0.94 mmol, 2 eq)의 혼합물을 110℃에서 극초단파 조사하에 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 1/0 내지 0/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제시켜 N-[2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-b]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민을 제공하였다.
2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-b]피리딘-6-아민(아민 E)
THF(5 ㎖) 중의 N-[2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-b]피리딘-6-일]-1,1-디페닐-메탄이민(0.140 g, 0.267 mmol, 1 eq)의 용액에 수성 HCl(1 M, 140 ㎖)을 가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 H2O(5 ㎖)로 희석하고 EtOAc(15 ㎖)로 추출하였다. 수성을 포화된 수성 NaHCO3로 pH = 8로 조절하고, EtOAc(15 ㎖ x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(20 ㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하였다. 용액을 감압하에서 농축시켜 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피롤로[3,2-b]피리딘-6-아민을 제공하였다. LCMS: M+H+ = 361.2
아민 F의 합성
[반응식 F]
Figure pct00130
3,6-디클로로-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(F.2)
MeCN(30 ㎖) 중의 3,4,6-트리클로로피리다진(3 g, 16.36 mmol, 1 eq), PMBNH2(2.24 g, 16.36 mmol, 2.12 ㎖, 1 eq), K2CO3(2.26 g, 16.36 mmol, 1 eq)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 3회 퍼징하고, 이어서 혼합물을 N2 분위기하에 95℃에서 4h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 100/1 내지 4/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켰다. 화합물 3,6-디클로로-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(4 g, 85% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00131
6-클로로-3-(3,3-디에톡시프로프-1-이닐)-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(F.3)
MeCN(7 ㎖) 중의 3,6-디클로로-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(1 g x 4, 3.52 mmol, 1 eq), 3,3-디에톡시프로프-1-인(473.63 ㎎ x 4, 3.70 mmol, 529.78 uL, 1.05 eq), Pd(PPh3)2Cl2(74.11 ㎎ x 4, 105.58 umol, 0.03 eq), TEA(1.78 g x 4, 17.60 mmol, 2.45 ㎖, 5 eq) 및 CuI(40.22 ㎎ x 4, 211.16 umol, 0.06 eq)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 퍼징하고, 이어서 혼합물을 65℃에서 극초단파하에 5h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 50/1 내지 3/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켰다. 6-클로로-3-(3,3-디에톡시프로프-1-이닐)-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(3.6 g, 조 물질)을 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
3-클로로-6-(디에톡시메틸)-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(F.4)
무수 DMF(20 ㎖) 중의 6-클로로-3-(3,3-디에톡시프로프-1-이닐)-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피리다진-4-아민(2.8 g, 4.47 mmol, 1 eq)의 용액에 CuI(170.26 ㎎, 893.98 umol, 0.2 eq)를 가하였다. 반응 혼합물을 12h 동안 130℃로 가열하였다. 혼합물을 수(50 ㎖)에 붓고 에틸 아세테이트(30 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(50 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 50/1 내지 3/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켰다. 화합물 3-클로로-6-(디에톡시메틸)-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(0.9 g, 조 물질)을 갈색 오일로서 수득하였다.
3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-6-카브알데히드(F.5)
THF(10 ㎖) 및 H2O(2 ㎖) 중의 3-클로로-6-(디에톡시메틸)-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(0.9 g, 2.39 mmol, 1 eq), TsOH.H2O(683.25 ㎎, 3.59 mmol, 1.5 eq)의 혼합물을 45℃에서 1h 동안 교반하였다. 혼합물을 NaHCO3(50 ㎖)에 붓고 에틸 아세테이트(30 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(30 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축시켰다. 화합물 3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-6-카브알데히드(0.8 g, 조 물질)를 갈색 고체로서 수득하였다.
3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(F.6)
DCE(20 ㎖) 중의 3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-6-카브알데히드(950 ㎎, 1.57 mmol, 1 eq) 및 (2S)-2-메틸피롤리딘(160.85 ㎎, 1.89 mmol, 1.2 eq)의 용액에 AcOH(94.53 ㎎, 1.57 mmol, 90.03 uL, 1 eq)를 가하였다 혼합물을 15℃에서 0.5h 동안 교반하였다. NaBH(OAc)3(667.30 ㎎, 3.15 mmol, 2 eq)를 용액에 가하였다. 혼합물을 15℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 20/1 내지 0/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켰다. 화합물 3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(800 ㎎, 조 물질)을 갈색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00132
N-[5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-일]-1,1-디페닐-메탄이민(F.7)
THF(20 ㎖) 중의 3-클로로-5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진(850 ㎎, 2.29 mmol, 1 eq), 디페닐메탄이민(498.44 ㎎, 2.75 mmol, 461.51 uL, 1.2 eq), tBuONa(440.50 ㎎, 4.58 mmol, 2 eq) 및 [2-(2-아미노페닐)페닐]-메틸설포닐옥시-팔라듐; 디사이클로헥실-[3,6-디메톡시-2-(2,4,6-트리이소프로필페닐)페닐]포스판(207.76 ㎎, 229.19 umol, 0.1 eq)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 3회 퍼징시키고, 이어서 혼합물을 100℃에서 5h 동안 N2 분위기하에 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 3/1 내지 0/1의 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제시켰다. 화합물 N-[5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-일]-1,1-디페닐-메탄이민(조 물질)(0.5 g)을 갈색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00133
Figure pct00134
5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-아민(아민 F)
HCl(4 ㎖) 및 THF(4 ㎖) 중의 N-[5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-일]-1,1-디페닐-메탄이민(400 ㎎, 775.72 umol, 1 eq)을 탈기시키고 N2로 3회 퍼징시키고, 이어서 혼합물을 15℃에서 N2 분위기하에 0.5h 동안 교반하였다. H2O(20 ㎖) 및 EtOAc(10 ㎖)를 혼합물에 가하고, 이어서 유기상을 분리시켰다. 수성상을 NaHCO3를 사용하여 염기화하여 pH = 8로 조절하였다. 수성층을 EtOAc(15 ㎖ x 3)로 추출하고 합한 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압하에서 농축시켰다. 화합물 5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-아민(0.27 g, 553.15 umol, 71.31% 수율, 72% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LCMS: [M+H]+ = 352.
본 발명에 따른 실시예의 합성
실시예 1의 제조
Figure pct00135
3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-6-카복스아미드(1-1)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]페닐]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 170.0 ㎎, 0.471 mmol, 1.0 당량), 3-메틸-1,2-벤즈옥사졸-6-카복실산(산 A, CAS: 478169-72-1, 91.9 ㎎, 0.52 mmol, 1.10 당량), EDCI(135. 6 ㎎, 0.71 mmol, 1.5 당량) 및 피리딘(2.0 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 50℃에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 8 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 3 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 3 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 액체로서 280 ㎎(조 물질)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-6-카복스아미드(1-1)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 520.
(S)-3-메틸-N-(2-((2-메틸피롤리딘-1-일)메틸)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤조[d]이속사졸-6-카복스아미드(실시예 1)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-6-카복스아미드(1-1, 280.0 ㎎, 0.54 mmol, 1.0 당량), TFA(2.0 ㎖, 50 당량), DCM(2.0 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3.H2O) 및 ACN(7분간 12% 상 B에서 34%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 회색 고체로서 40.9 ㎎(19.5%)의 (S)-3-메틸-N-(2-((2-메틸피롤리딘-1-일)메틸)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤조[d]이속사졸-6-카복스아미드(실시예 1)가 생성되었다.
Figure pct00136
하기 표 D의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 1에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 D]
Figure pct00137
Figure pct00138
Figure pct00139
Figure pct00140
실시예 2의 제조
Figure pct00141
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 150.0 ㎎, 0.42 mmol, 1.0 당량), 피리딘(3.00 ㎖), 3-메틸-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실산(81.1 ㎎, 0.46 mmol, 1.10 당량), EDCI(119.6 ㎎, 0.62 mmol, 1.5 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시키고 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 300 ㎎(조 물질)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 520.
Figure pct00142
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드(300.00 ㎎, 0.577 mmol, 1.00 당량), DCM(3.00 ㎖), TFA(3 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(110 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 25% 상 B에서 50%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 47.3 ㎎(21.04%)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00143
하기 표 E의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 2에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 E]
Figure pct00144
Figure pct00145
Figure pct00146
실시예 3의 제조
Figure pct00147
50 ㎖ 환저 플라스크에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 150.0 ㎎, 0.42 mmol, 1.0 당량), 2-메틸-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실산(CAS: 90322-32-0, 81.07 ㎎, 0.458 mmol, 1.10 당량), EDCI(119.6 ㎎, 0.62 mmol, 1.5 당량), 피리딘(1.5 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서 5 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시키고 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 300 ㎎(조 물질)의 2-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 506.
Figure pct00148
50 ㎖ 환저 플라스크에, 2-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드(300.0 ㎎, 조물질), TFA(0.50 ㎖), DCM(0.50 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 32% 상 B에서 63%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 33.6 ㎎(2 단계에 대해 21%)의 2-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00149
하기 표 F의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 3에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 F]
Figure pct00150
Figure pct00151
실시예 10의 제조
Figure pct00152
8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 111 ㎎, 0.308 mmol, 1.00 당량), 4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤조산(100 ㎎, 0.308 mmol, 1.00 당량), 피리딘(3.00 ㎖) 및 EDCI(89 ㎎, 0.462 mmol, 1.50 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 용액을 질소 분위기하에 50℃에서 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 EtOAc(50 ㎖)에 용해시키고 생성 혼합물을 3 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤즈아미드(100 ㎎, 48.43%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 570.
Figure pct00153
8 ㎖ 바이알에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤즈아미드(100.00 ㎎, 0.175 mmol, 1.00 당량), DCM(2.00 ㎖) 및 TFA(2.00 ㎖)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 DMF(3 ㎖)에 용해시켰다. 혼합물을 수산화 암모늄으로 pH 9로 염기화하고, 이어서 이를 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하여(컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상 A: 수(0.05% NH3H2O), 이동상 B: ACN; 유량: 20 ㎖/분; 구배: 7분간 44 B에서 66 B, 220 ㎚), 백색 고체로서 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-2-일)에틸]벤즈아미드(24.7 ㎎, 35.8%)를 제공하였다.
Figure pct00154
실시예 14의 제조
Figure pct00155
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 124.22 ㎎, 0.345 mmol, 1.00 당량), 피리딘(2.5 ㎖), 2-플루오로-4-(5-메틸피리미딘-2-일)벤조산(80.0 ㎎, 0.345 mmol, 1.00 당량), EDCI(99.06 ㎎, 0.517 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 50℃에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 200 ㎎(70.5%)의 2-플루오로-4-(5-메틸피리미딘-2-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 575.
Figure pct00156
8 ㎖ 바이알에, 2-플루오로-4-(5-메틸피리미딘-2-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드(200 ㎎, 0.348 mmol, 1.00 당량), DCM(2.0 ㎖), TFA(2.0 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 25% 상 B에서 50%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 황색 고체로서 38.3 ㎎(24.76%)의 2-플루오로-4-(5-메틸피리미딘-2-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00157
실시예 16의 제조
Figure pct00158
8 ㎖ 밀봉 바이알에, 3-옥소-2,4-디하이드로-1,4-벤즈옥사진-7-카복실산(CAS: 214848-62-1, 35.36 ㎎, 0.183 mmol, 1.10 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 60.00 ㎎, 0.166 mmol, 1.00 당량), EDCI(47.85 ㎎, 0.249 mmol, 1.50 당량), 및 피리딘(1.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 1h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 200 ㎎(조 물질)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2,4-디하이드로-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 536.
Figure pct00159
8 ㎖ 밀봉 튜브에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2,4-디하이드로-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드(200.0 ㎎, 0.373 mmol, 1.00 당량), TFA(0.5 ㎖), DCM(0.5 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 2h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 7로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 15% 상 B에서 45%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 갈색 고체로서 21.7 ㎎(2 단계에 대해서 17.3%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2,4-디하이드로-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00160
실시예 17의 제조
Figure pct00161
8 ㎖ 밀봉 튜브에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 145.00 ㎎, 0.402 mmol, 1.00 당량), 4-메틸-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복실산(99.98 ㎎, 0.483 mmol, 1.20 당량), EDCI(115.63 ㎎, 0.603 mmol, 1.50 당량) 및 피리딘(5.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 50℃에서 20h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 200 ㎎(조 물질)의 4-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 550.
Figure pct00162
50 ㎖ 환저 플라스크에, 4-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드(200.00 ㎎, 0.364 mmol, 1.00 당량), TFA(2 ㎖), DCM(1 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 7로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(130 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 27% 상 B에서 60%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 25.1 ㎎(2 단계에 대해서 12.41%)의 4-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-1,4-벤즈옥사진-7-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00163
실시예 20의 제조
Figure pct00164
40 ㎖ 바이알에, 피리딘(10 ㎖) 중의 4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤조산(120.00 ㎎, 0.379 mmol, 1.00 당량)의 용액, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 136.77 ㎎, 0.379 mmol, 1.00 당량) 및 EDCI(109.07 ㎎, 0.569 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 EA로 희석하였다. 생성 혼합물을 2 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 100 ㎎(40.01%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: 659.
Figure pct00165
20 ㎖ 바이알에, DCM(5 ㎖) 중의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-[2-(옥산-2-일옥시)에틸]피라졸-4-일]벤즈아미드(100.0 ㎎, 0.152 mmol, 1.00 당량), 및 TFA(2.00 ㎖, 26.926 mmol, 177.42 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 5h 동안 교반하고 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3.H2O) 및 ACN(7분간 29% 상 B에서 46%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 23 ㎎의 4-[1-(2-하이드록시에틸)피라졸-4-일]-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00166
실시예 21의 제조
Figure pct00167
20 ㎖ 바이알에, 피리딘(10 ㎖) 중의 4-(1-메틸피라졸-4-일)벤조산(100.00 ㎎, 0.495 mmol, 1.00 당량)의 용액, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 178.32 ㎎, 0.495 mmol, 1.00 당량), EDCI(142.20 ㎎, 0.742 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 EA로 희석하였다. 생성 혼합물을 3 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 150 ㎎(조 물질)의 4-(1-메틸피라졸-4-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 545.
Figure pct00168
20 ㎖ 바이알에, 4-(1-메틸피라졸-4-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드(150.00 ㎎, 0.275 mmol, 1.00 당량), DCM(5.00 ㎖, 78.650 mmol, 285.64 당량), TFA(5.00 ㎖, 0.044 mmol, 0.16 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3.H2O) 및 ACN(7분간 33% 상 B에서 55%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 26 ㎎의 4-(1-메틸피라졸-4-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00169
하기 표 G의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 21에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 G]
Figure pct00170
Figure pct00171
Figure pct00172
Figure pct00173
Figure pct00174
Figure pct00175
Figure pct00176
Figure pct00177
Figure pct00178
Figure pct00179
Figure pct00180
Figure pct00181
Figure pct00182
Figure pct00183
Figure pct00184
실시예 23의 제조
Figure pct00185
8 ㎖ 환저 플라스크에, 3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복실산(60.00 ㎎, 0.317 mmol, 1.00 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 114.37 ㎎, 0.317 mmol, 1.00 당량), DMF(2.00 ㎖), HATU(180.90 ㎎, 0.476 mmol, 1.5 당량) 및 DIEA(163.97 ㎎, 1.269 mmol, 4 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 15h 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 80 ㎎(47.43%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 532.
Figure pct00186
8 ㎖ 환저 플라스크에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복스아미드(60.00 ㎎, 0.113 mmol, 1.00 당량), DCM(2.00 ㎖), TFA(55.30 ㎎, 0.564 mmol, 5.00 당량)를 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: HPH C18, 50 x 3.0 ㎜, 2.6 um; 이동상 A: 수/0.05% NH3.H2O, 이동상 B: ACN; 유량: 1.2 ㎖/분; 구배: 1.1분간 5% B에서 100% B, 0.7분 유지), 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 19 ㎎(42%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-옥소-2H-이소퀴놀린-7-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00187
실시예 24의 제조
Figure pct00188
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 12 ㎖ 바이알에, 피리딘(5 ㎖) 중의 2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복실산(100.0 ㎎, 0.558 mmol, 1.00 당량)의 용액, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 201.29 ㎎, 0.558 mmol, 1.00 당량), EDCI(160.53 ㎎, 0.837 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 DCM으로 희석하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 H2O로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 조 오일로서 150 ㎎(51.50%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 522.
Figure pct00189
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 10 ㎖ 바이알에, DCM(2 ㎖) 및 TFA(2 ㎖) 중의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드(150.00 ㎎, 0.288 mmol, 1.00 당량, 조물질)의 용액을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3.H2O) 및 ACN(7분간 15% 상 B에서 55%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 2 ㎎의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-2-옥소-3H-1,3-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00190
하기 표 H의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 24에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 H]
Figure pct00191
Figure pct00192
Figure pct00193
Figure pct00194
Figure pct00195
실시예 27의 제조
Figure pct00196
8 ㎖ 밀봉 튜브에, 리티오 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)인다졸-5-카복실레이트(87.42 ㎎, 0.350 mmol, 1.40 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 90.00 ㎎, 0.250 mmol, 1.00 당량), HATU(170.83 ㎎, 0.450 mmol, 1.80 당량), DIPEA(96.78 ㎎, 0.750 mmol, 3.00 당량), DMF(1.00 ㎖, 12.922 mmol, 51.77 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 20h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 200 ㎎(조 물질)의 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 587.
Figure pct00197
50 ㎖ 환저 플라스크에, 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(200.00 ㎎, 0.341 mmol, 1.00 당량), CF3COOH(1.00 ㎖), DCM(2.00 ㎖)을 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 2h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 7로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(120 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 41% 상 B에서 54%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 12.2 ㎎(2 단계에 대해서 12%)의 1-(4-메톡시부트-2-인-1-일)-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00198
하기 표 I의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 27에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 I]
Figure pct00199
Figure pct00200
실시예 29의 제조
Figure pct00201
8 ㎖ 바이알에, 4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤조산(83.20 ㎎, 0.366 mmol, 1.20 당량), 피리딘(2.50 ㎖) 및 EDCI(87.72 ㎎, 0.458 mmol, 1.50 당량)를 실온에서 가하였다. 상기 혼합물에 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 110.00 ㎎, 0.305 mmol, 1.00 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 50℃에서 추가로 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤즈아미드(260 ㎎, 조 물질)가 생성되었다. 조 생성물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: [M+1]+ = 570.
Figure pct00202
20 ㎖ 바이알에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤즈아미드(240.00 ㎎, 0.421 mmol, 1.00 당량, 50%), DCM(4.00 ㎖) 및 CF3COOH(4.00 ㎖)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 DMF(3 ㎖)에 용해시켰다. 혼합물을 수산화 암모늄으로 pH 10으로 염기화하였다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제시켜(컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상 A: 수(0.05% NH3H2O), 이동상 B: ACN; 유량: 20 ㎖/분; 구배: 7분간 25B에서 50B, 220 ㎚), 백색 고체로서 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(피리딘-4-일)에틸]벤즈아미드(60 ㎎, 64.82%)를 제공하였다.
Figure pct00203
하기 표 J의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 29에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 J]
Figure pct00204
Figure pct00205
실시예 37의 제조
Figure pct00206
8 ㎖ 바이알에, 1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복실산(70.00 ㎎, 0.293 mmol, 1.00 당량), 피리딘(2.00 ㎖), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 105.51 ㎎, 0.293 mmol, 1.00 당량), EDCI(84.14 ㎎, 0.439 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 15 ㎖의 에틸 아세테아트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 150 ㎎(76.11%)의 갈색 오일로서 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 582.
Figure pct00207
8 ㎖ 바이알에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복스아미드(150.00 ㎎, 0.258 mmol, 1 당량), DCM(2.00 ㎖), CF3COOH(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(110 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 31% 상 B에서 48%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 38.1 ㎎(32.73%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-(피리딘-4-일)인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00208
하기 표 K의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 37에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 K]
Figure pct00209
Figure pct00210
Figure pct00211
Figure pct00212
Figure pct00213
Figure pct00214
Figure pct00215
실시예 40의 제조
Figure pct00216
8 ㎖ 밀봉 튜브에, 1-메틸-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복실산(50.00 ㎎, 0.261 mmol, 1.00 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 94.28 ㎎, 0.261 mmol, 1.00 당량), 피리딘(1.00 ㎖), EDCI(75.19 ㎎, 0.392 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 50℃에서 12h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 150 ㎎(조 물질)의 1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 534.
Figure pct00217
50 ㎖ 환저 플라스크에, 1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복스아미드(150.0 ㎎, 0.281 mmol, 1.00 당량), CF3COOH(1.0 ㎖), DCM(5.0 ㎖)를 가하였다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 8로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(120 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 50% 상 B에서 75%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 25.7 ㎎(2 단계에 대해서 22%)의 1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-6-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00218
Figure pct00219
실시예 42의 제조
Figure pct00220
8 ㎖ 환저 플라스크에, 2-[[(2R)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 264.83 ㎎, 0.734 mmol, 1.00 당량), 피리딘(2.00 ㎖), EDCI(563.20 ㎎, 2.938 mmol, 4.00 당량), 4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤조산(200.00 ㎎, 0.734 mmol, 1.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 100 ㎎(22.14%)의 N-(2-[[(2R)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 615.
Figure pct00221
8 ㎖ 환저 플라스크에, N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]벤즈아미드(100.00 ㎎, 0.163 mmol, 1.00 당량), DCM(2.00 ㎖), CF3COOH(79.71 ㎖, 0.813 mmol, 5.00 당량)를 가하였다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(1 mol/L)로 7-8로 조절하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: HPH C18, 50 x 3.0 ㎜, 2.6 um; 이동상 A: 수/0.05% NH3.H2O, 이동상 B: ACN; 유량: 1.2 ㎖/분; 구배: 1.1분간 5% B에서 100% B, 0.7분 유지), 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 8.6 ㎎(13.20%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-(1H-피라졸-4-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00222
실시예 43의 제조
Figure pct00223
8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 104.93 ㎎, 0.291 mmol, 1.00 당량), 피리딘(2.10 ㎖), 2-플루오로-4-(1H-피라졸-3-일)벤조산(상기 실시예 43, 단계 2에 따라 제조됨, 60.00 ㎎, 0.291 mmol, 1.00 당량), EDCI(83.68 ㎎, 0.437 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 50℃에서 6시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 15 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테아트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 160 ㎎(81.41%)의 갈색 오일로서 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-(1H-피라졸-3-일)벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 549.
Figure pct00224
8 ㎖ 바이알에, 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-(1H-피라졸-3-일)벤즈아미드(160.00 ㎎, 0.292 mmol, 1 당량), DCM(2.00 ㎖), CF3COOH(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(90 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 36% 상 B에서 59%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 25.8 ㎎(21.14%)의 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-4-(1H-피라졸-3-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00225
실시예 53의 제조
Figure pct00226
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 3-사이클로프로필-1,2-벤즈옥사졸-5-카복실산(54.10 ㎎, 0.266 mmol, 1.20 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(아민 D, 80.00 ㎎, 0.222 mmol, 1.00 당량), EDCI(63.80 ㎎, 0.333 mmol, 1.5 당량), 피리딘(3.00 ㎖)을 가하였다. 생성 용액을 25℃에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 15 ㎖의 수/빙을 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테아트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이에 의해 100 ㎎(조 물질)의 갈색 오일로서 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 546.
Figure pct00227
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드(100.00 ㎎, 0.183 mmol, 1.00 당량), DCM(2.00 ㎖), CF3COOH(2.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 25℃에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3.H2O) 및 ACN(7분간 41% 상 B에서 66%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 24 ㎎(31.52%)의 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,2-벤즈옥사졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00228
하기 표 L의 실시예를 아민 D 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 53에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 L]
Figure pct00229
Figure pct00230
Figure pct00231
Figure pct00232
실시예 69의 제조
Figure pct00233
8 ㎖ 환저 플라스크에, 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1H-인돌-6-카복스아미드(실시예 61, 40.00 ㎎, 0.103 mmol, 1.00 당량), 염화 수소(1.00 ㎖), DMSO(2.00 ㎖)를 넣었다. 이어서 H2O(1.00 ㎖)를 ℃에서 5분간 교반하면서 적가하였다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: HPH C18, 50 x 3.0 ㎜, 2.6 um; 이동상 A: 수/0.05% NH3.H2O, 이동상 B: ACN; 유량: 1.2 ㎖/분; 구배: 1.1분간 5% B에서 100% B, 0.7분 유지), 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 12.5 ㎎(30.01%)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-2-옥소-1,3-디하이드로인돌-6-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00234
실시예 87의 제조
Figure pct00235
8 ㎖ 밀봉 튜브에, 3급-부틸 N-[1-메틸-6-[(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)카바모일]인다졸-3-일]카바메이트(200.00 ㎎, 0.316 mmol, 1.00 당량), DCM(5.00 ㎖), ZnBr2(213.18 ㎎, 0.947 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)으로 8로 조절하였다. 고체를 여과하고 생성 용액을 2 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 156 ㎎(조 물질)의 3-아미노-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 534.
Figure pct00236
50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-아미노-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드(150.00 ㎎, 0.281 mmol, 1.00 당량), 아세트산(20.25 ㎎, 0.337 mmol, 1.20 당량), DMF(10.00 ㎖), HATU(160.28 ㎎, 0.422 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 6h 동안 교반하였다. 이어서 20 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 200 ㎎(조 물질)의 3-아세트아미도-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 576.
Figure pct00237
50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-아세트아미도-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드(200.00 ㎎, 1 당량, 조 물질), CF3COOH(10.00 ㎖), DCM(10.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 9로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(110 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 19% 상 B에서 44%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 22.4 ㎎(2 단계에 대해서 18%)의 3-아세트아미도-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00238
실시예 94의 제조
Figure pct00239
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 메톡시 아세트알데히드(51.41 ㎎, 0.692 mmol, 4.00 당량), 3-아미노-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드(실시예 87, 단계 2, 70.00 ㎎, 0.173 mmol, 1.00 당량), DCE(5.00 ㎖), NaBH(AcO)3(367.69 ㎎, 1.730 mmol, 10.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(40 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 20% 상 B에서 45%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 9.4 ㎎(11.74%)의 3-[(2-메톡시에틸)아미노]-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00240
실시예 95의 제조
Figure pct00241
50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-아미노-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드(실시예 87, 단계 1, 95 ㎎, 0.178 mmol, 1.00 당량), 1-에톡시-2,2-디플루오로에탄올(44.89 ㎎, 0.000 mmol, 2.00 당량), DCM(6.00 ㎖), CF3COOH(40.59 ㎎, 0.356 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 이어서 0℃에서 NaBH(AcO)3(377.22 ㎎, 1.780 mmol, 10.00 당량)를 나누어 가하였다. 생성 혼합물을 0℃에서 1h 동안 교반하였다. 이어서 10 ㎖의 수를 가하여 반응을 급냉시켰다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 120 ㎎(조 물질)의 3-[(2,2-디플루오로에틸)아미노]-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H] = 598.
Figure pct00242
8 ㎖ 밀봉 튜브에, 3-[(2,2-디플루오로에틸)아미노]-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드(120.00 ㎎), CF3COOH(1.00 ㎖), DCM(1.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 농축시켰다. 용액의 pH 값을 NaHCO3(수성)로 8로 조절하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 농축시켰다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 26% 상 B에서 50%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 19.1(2 단계에 대해서 23%)의 3-[(2,2-디플루오로에틸)아미노]-1-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-6-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00243
실시예 99의 제조
Figure pct00244
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 3-메틸이미다조[1,5-a]피리딘-7-카복실산(80.00 ㎎, 0.454 mmol, 1.00 당량), 피리딘(4.00 ㎖), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(163.74 ㎎, 0.454 mmol, 1.00 당량), EDCI(130.58 ㎎, 0.681 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 100 ㎎(42.5%)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)이미다조[1,5-a]피리딘-7-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 519.
Figure pct00245
50 ㎖ 환저 플라스크에, 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)이미다조[1,5-a]피리딘-7-카복스아미드(100.00 ㎎, 1 당량), CF3COOH(3.00 ㎖), DCM(3.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 4 ㎖의 DMF로 희석하였다. 용액의 pH 값을 NH3/H2O로 8로 조절하였다. 조 생성물(80 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 25% 상 B에서 45%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 31.3 ㎎(41.80%)의 3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)이미다조[1,5-a]피리딘-7-카복스아미드를 제공하였다.
Figure pct00246
실시예 41의 제조
Figure pct00247
단계 1. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 3-브로모-1H-피라졸(1.50 g, 10.206 mmol, 1.00 당량), DCM(30.00 ㎖), 디하이드로피란(1.29 g, 15.336 mmol, 1.50 당량), TsOH(0.05 g, 0.510 mmol, 0.05 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성 용액을 50 ㎖의 NaHCO3(5%)로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 2 g(84.8%)의 3-브로모-1-(옥산-2-일)피라졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 231.
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 3-플루오로-4-(메톡시카보닐)페닐보론산(0.86 g, 4.327 mmol, 1.00 당량), 디옥산(12.00 ㎖), H2O(12.00 ㎖), 3-브로모-1-(옥산-2-일)피라졸(1.00 g, 4.327 mmol, 1.00 당량), Na2CO3(1.38 g, 13.02 mmol, 3.01 당량), Pd(PPh3)2Cl2(0.30 g, 0.427 mmol, 0.10 당량), BINAP(0.54 g, 0.867 mmol, 0.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 30 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 HCl(3 mol/L)로 3으로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 백색 고체로서 1 g(62.38%)의 2-플루오로-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤조산이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 291.
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 2-플루오로-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤조산(산 AH, 100.00 ㎎, 0.344 mmol, 1.00 당량), DMF(2.50 ㎖), HATU(157.18 ㎎, 0.413 mmol, 1.20 당량), DIEA(89.04 ㎎, 0.689 mmol, 2.00 당량), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-6-아민(아민 E, 124.21 ㎎, 0.344 mmol, 1.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 15 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 4 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 고체로서 200 ㎎(76.18%)의 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤즈아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 633.
단계 4. 8 ㎖ 바이알에, 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-4-[1-(옥산-2-일)피라졸-3-일]벤즈아미드(200.00 ㎎, 0.316 mmol, 1.00 당량), DCM(2.00 ㎖), CF3COOH(2 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 30% 상 B에서 55%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 26 ㎎(19.66%)의 2-플루오로-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]에틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-4-(1H-피라졸-3-일)벤즈아미드가 생성되었다.
Figure pct00248
실시예 105의 제조
Figure pct00249
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, 6-플루오로-3-메틸-1H-인다졸-5-카복실산(70.0 ㎎, 0.36 mmol, 1.0 당량), 피리딘(3.00 ㎖), 2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-아민(83.0 ㎎, 0.361 mmol, 1.00 당량), EDCI(103.67 ㎎, 0.541 mmol, 1.50 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테아트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 100 ㎎(51.68%)의 오렌지색 고체로서 6-플루오로-3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-1H-인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 537.
Figure pct00250
50 ㎖ 환저 플라스크에, 6-플루오로-3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-1H-인다졸-5-카복스아미드(100.0 ㎎, 0.186 mmol, 1.00 당량), DCM(3.00 ㎖), CF3COOH(3.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 4 ㎖의 DMF로 희석하였다. 용액의 pH 값을 NH3/H2O로 8로 조절하였다. 조 생성물(70 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 26% 상 B에서 39%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 고체로서 16.6 ㎎(21.92%)의 6-플루오로-3-메틸-N-(2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-일)-1H-인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00251
하기 표 N의 실시예를 아민 E 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 105에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 N]
Figure pct00252
실시예 18의 제조
Figure pct00253
DMF(3 ㎖) 중의 2-플루오로-4-피라진-2-일-벤조산(46.56 ㎎, 213.41 umol, 1.5 eq), HATU(81.14 ㎎, 213.41 umol, 1.5 eq) 및 TEA(43.19 ㎎, 426.81 umol, 59.41 uL, 3 eq)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 3회 퍼징하고, 30분 후에, 5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-아민(50 ㎎, 142.27 umol, 1 eq)을 혼합물에 가하고, 15℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 예비-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제시켰다. 2-플루오로-N-[5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-일]-4-피라진-2-일-벤즈아미드(15 ㎎, 20.28 umol, 14.26% 수율, 90% 순도, TFA)를 황색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00254
TFA(0.5 ㎖) 중의 2-플루오로-N-[5-[(4-메톡시페닐)메틸]-6-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]피롤로[3,2-c]피리다진-3-일]-4-피라진-2-일-벤즈아미드(10 ㎎, 18.13 mmol, 1 eq)에 ANISOLE(196.04 ug. 1.81 umol, 1.97 uL, 0.1 eq)을 가하고 이어서 혼합물을 극초단파하에 130℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물(ET16082-1478과 합하여)을 감압하에서 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 예비-HPLC에 의해 정제하였다. 화합물 (S)-2-플루오로-N-(6-((2-메틸피롤리딘-1-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-c]피리다진-3-일)-4-(피라진-2-일)벤즈아미드(1.4 ㎎, 100% 순도, HCl)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00255
하기 표 O의 실시예를 아민 F 및 적합한 시약 및 조건을 사용하여 상기 실시예 18에 대해 나타낸 바와 유사한 방식으로 제조하였다.
[표 O]
Figure pct00256
실시예 45의 제조
Figure pct00257
1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-2)
100 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 1-메틸인다졸-5-카복실산(1.80 g, 10.22 mmol, 1.00 당량), DMF(36.0 ㎖, 465.183 mmol, 45.53 당량), HATU(5.83 g, 15.326 mmol, 1.50 당량), DIEA(3.96 g, 30.65 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서 NH4Cl(1.09 g, 20.434 mmol, 2.00 당량)을 플라스크에 넣었다. 생성 용액을 실온에서 추가로 12시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 생성 용액을 50 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 4 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 1.6 g(89.4%)의 1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-2)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 176.
6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(45-4)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 250 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 6-클로로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(45-3, 2.60 g, 14.397 mmol, 1.00 당량), DMF(78.00 ㎖), Cs2CO3(14.07 g, 43.191 mmol, 3.00 당량)을 넣었다. 생성 용액을 빙/염 욕에서 0℃에서 교반하였다. SEMCl(3.12 g, 18.174 mmol, 1.30 당량)을 플라스크에 넣었다. 생성 용액을 실온에서 추가로 4시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 생성 용액을 70 ㎖의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 고체를 여과하였다. 생성 용액을 3 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 4 x 50 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 밝은 갈색 고체로서 2.5 g(55.9%)의 6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(45-2)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 311.
N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-5)
질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(45-4, 2.40 g, 7.721 mmol, 1.00 당량), 디옥산(36.00 ㎖), 1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-2, 1487.87 ㎎, 0.000 mmol, 1.10 당량), 세슘 카보네이트(7570.06 ㎎, 23.163 mmol, 3.00 당량), Pd2(dba)3(707.01 ㎎, 0.772 mmol, 0.10 당량), Xantphos(893.48 ㎎, 1.544 mmol, 0.20 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 110℃에서 5시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 50 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 고체로서 1.8 g의 N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-5)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 450.
1-메틸-N-(2-[[(2R)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(45-6)
8 ㎖ 바이알에, N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-메틸인다졸-5-카복스아미드(45-5, 150 ㎎, 0.334 mmol, 1.00 당량), DCM(3.00 ㎖, 47.190 mmol, 141.44 당량), (2R)-2-메틸아제티딘 하이드로클로라이드(43.07 ㎎, 0.401 mmol, 1.20 당량), 아세트산(2.00 ㎎, 0.033 mmol, 0.10 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. NaBH(OAc)3(106.07 ㎎, 0.501 mmol, 1.50 당량)를 바이알에 가하고, 생성 용액을 실온에서 11시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 15 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 고체로서 160 ㎎(68.05%)의 1-메틸-N-(2-[[(2R)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(45-6)가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 505.
1-메틸-N-(2-[[(2R)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(실시예 45)
8 ㎖ 바이알에, 1-메틸-N-(2-[[(2R)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(160.00 ㎎, 0.317 mmol, 1.00 당량), DCM(1.60 ㎖), CF3COOH(1.60 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 용액의 pH 값을 Et2NH로 8로 조절하였다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 27% 상 B에서 45%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 39.7 ㎎(33.44%)의 1-메틸-N-(2-[[(2R)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)인다졸-5-카복스아미드(실시예 45)가 생성되었다.
Figure pct00258
실시예 46의 제조
Figure pct00259
실시예 45와 동일한 방식으로 제조되었으나, 상기에 나타낸 바와 같이 변형되었다.
Figure pct00260
실시예 104의 제조
Figure pct00261
N-(2-포름일-1-((2-트리메틸실릴)에톡시)메틸-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-카복스아미드 (6-클로로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드 및 상응하는 카복스아미드로부터 실시예 45에 따라 제조됨) 및 7-옥사-2-아자스피로[3.5]노난으로부터 제조.
Figure pct00262
실시예 73의 제조
Figure pct00263
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 20 ㎖ 바이알에, 6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(350.00 ㎎, 1.126 mmol, 1.00 당량), DCM(7.00 ㎖), (2S)-2-메틸아제티딘 하이드로클로라이드(145.35 ㎎, 1.351 mmol, 1.20 당량), AcOH(6.76 ㎎, 0.113 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서 NaBH(OAc)3(357.95 ㎎, 1.689 mmol, 1.50 당량)를 바이알에 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하고 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:5)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 오일로서 270 ㎎(65.52%)의 (2S)-1-[(6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-일)메틸]-2-메틸아제티딘이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 366.
Figure pct00264
단계 2. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, (2S)-1-[(6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-일)메틸]-2-메틸아제티딘(270.00 ㎎, 0.738 mmol, 1.00 당량), 톨루엔(15.00 ㎖), 벤젠메탄이민-페닐(267.41 ㎎, 1.475 mmol, 2.00 당량), Pd2(dba)3(67.56 ㎎, 0.074 mmol, 0.10 당량), Cs2CO3(721.12 ㎎, 2.213 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 110℃에서 5시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 갈색 오일로서 180 ㎎(47.77%)의 N-(2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,1-디페닐메탄이민이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 511.
Figure pct00265
단계 3. 100 ㎖ 환저 플라스크에, N-(2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1,1-디페닐메탄이민(180.00 ㎎, 0.352 mmol, 1.00 당량), THF(4.00 ㎖), H2O(2.00 ㎖), HCl(0.5 M)(2.00 ㎖)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였따. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 2 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 합하였다. 용액의 pH 값을 NaHCO3로 8로 조절하였다. 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이에 의해 황색 고체로서 100 ㎎(54.81%)의 2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 347.
Figure pct00266
단계 4. 8 ㎖ 바이알에, 2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-아민(100.00 ㎎, 0.289 mmol, 1.00 당량), 피리딘(2.50 ㎖), 3-사이클로프로필-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실산(82.62 ㎎, 0.289 mmol, 1.00 당량), EDCI(82.98 ㎎, 0.434 mmol, 1.50 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 10 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 갈색 오일로서 150 ㎎(62.35%)의 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 615.
Figure pct00267
단계 5. 100 ㎖ 환저 플라스크에, 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(150.00 ㎎, 0.244 mmol, 1.00 당량), DCM(3.00 ㎖), CF3COOH(3.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 3 ㎖의 DMF로 희석하였다. 용액의 pH 값을 NH3H2O로 8로 조절하였다. 조 생성물(100 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 18% 상 B에서 39%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 23.3 ㎎(23.85%)의 3-사이클로프로필-N-(2-[[(2S)-2-메틸아제티딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-1H-인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00268
실시예 107의 제조
Figure pct00269
단계 1. 250 ㎖ 바이알에, 6-클로로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(1.0 g, 5.54 mmol, 1.00 당량), DMF(50.00 ㎖) 및 Selectfluor(3.00 g, 8.468 mmol, 1.53 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(250 ㎖)로 희석하였다. 이어서 250 ㎖의 NaHCO3(포화, 수성)를 가하였다. 생성 혼합물을 분리시키고 수성층을 EtOAc(2 x 50 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(1:1)로 용출시켜 황색 고체로서 6-클로로-3-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(100 ㎎, 9.0%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 199.
Figure pct00270
단계 2. 20 ㎖ 바이알에, 6-클로로-3-플루오로-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(100 ㎎, 0.504 mmol, 1.00 당량), DMF(10.00 ㎖), Cs2CO3(328.15 ㎎, 1.008 mmol, 2.00 당량) 및 [2-(클로로메톡시)에틸]트리메틸실란(125.93 ㎎, 0.756 mmol, 1.50 당량)을 실온에서 넣었다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 실온에서 4h 동안 교반하였다. 실온에서 NaHCO3(포화)로 반응을 급냉시켰다. 생성 혼합물을 EtOAc(3 x 40 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 하기의 조건으로 역 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켰다: 컬럼, C18 실리카젤; 이동상, A: 수(0.5% TFA); B: ACN, 30분간 40%에서 85% B 구배; 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 황색 오일로서 6-클로로-3-플로오로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(90 ㎎, 54.35%)가 생성되었다. LCMS: [M+1]+ = 329.
Figure pct00271
단계 3. 8 ㎖ 바이알에, 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복실산(100.0 ㎎, 0.384 mmol, 1.00 당량), NH4Cl(61.7 ㎎, 1.15 mmol, 3.00 당량), DMF(2.00 ㎖), DIEA(248.26 ㎎, 1.92 mmol, 5 당량) 및 HATU(219.12 ㎎, 0.58 mmol, 1.5 당량)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(30 ㎖)로 희석하였다. 생성 혼합물을 2 x 10 ㎖의 염수로 세척하였다. 생성 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 예비-TLC(PE/EtOAc 1:2)에 의해 정제시켜 밝은 갈색 고체로서 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(80 ㎎, 80.3%)를 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 260.
Figure pct00272
단계 4. 8 ㎖ 바이알에, 6-클로로-3-플로오로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(90.0 ㎎, 0.274 mmol, 1.00 당량), 3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(80.0 ㎎, 0.309 mmol, 1.13 당량), 디옥산(3.00 ㎖), Pd2(dba)3(25.06 ㎎, 0.027 mmol, 0.10 당량), XantPhos(31.67 ㎎, 0.055 mmol, 0.20 당량) 및 Cs2CO3(267.52 ㎎, 0.822 mmol, 3.00 당량)를 실온에서 가하였다. 질소를 용액에 서서히 발포시켰다. 생성 혼합물을 질소 분위기하에 100℃에서 6h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 EtOAc(50 ㎖)로 희석하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc(1 x 10 ㎖)로 세척하였다. 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시키고, PE/EtOAc(3:1)로 용출시켜 황색 고체로서 N-(3-플루오로-2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(75 ㎎, 38.7%)를 제공하였다. LCMS: [M+1]+ = 552.
Figure pct00273
단계 5. 8 ㎖ 바이알에, N-(3-플루오로-2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(75.0 ㎎, 0.106 mmol, 1.00 당량, 78%), DCE(4.00 ㎖), AcOH(6.37 ㎎, 0.106 mmol, 1.00 당량) 및 (2S)-2-메틸피롤리딘(18.06 ㎎, 0.212 mmol, 2.00 당량)을 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 NaBH(OAc)3(67.42 ㎎, 0.318 mmol, 3.00 당량)를 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 실온에서 NaHCO3(포화)로 반응을 급냉시켰다. 생성 혼합물을 DCM(3 x 20 ㎖)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(1 x 130 ㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후에, 여액을 감압하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 N-(3-플루오로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(60 ㎎, 64%)가 생성되었다. 조 생성물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: [M+1]+ = 621.
Figure pct00274
단계 6. 8 ㎖ 바이알에, N-(3-플루오로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(옥산-2-일)인다졸-5-카복스아미드(60.00 ㎎, 0.068 mmol, 1.00 당량, 70%), DCM(2.00 ㎖) 및 TFA(2.00 ㎖)를 실온에서 가하였다. 생성 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 DMF(5 ㎖)에 용해시켰다. 혼합물을 수산화 암모늄으로 pH 10으로 염기화하였다. 조 생성물을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하여(컬럼: X-Bridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상 A: 수(0.05% NH3H2O), 이동상 B: ACN; 유량: 20 ㎖/분; 구배: 7분간 33% B에서 50% B, 50% B; 파장: 220 ㎚) 백색 고체로서 N-(3-플루오로-2-[[(2S)-2-메틸피롤리딘-1-일]메틸]-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1H-인다졸-5-카복스아미드(17.2 ㎎, 62.55%)를 제공하였다.
Figure pct00275
Figure pct00276
실시예 108의 제조
Figure pct00277
단계 1. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 100 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 5-브로모-3-메틸-1H-인다졸(1.20 g, 5.68 mmol, 1.00 당량), DMF(15.0 ㎖), Cs2CO3(4.63 g, 0.015 mmol, 2.50 당량), SEMCl(1.23 g, 7.38 mmol, 1.30 당량)을 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 50 ㎖의 빙/수로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 3 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:5)과 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 밝은 황색 오일로서 1 g(51.53%)의 5-브로모-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸이 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 341.
Figure pct00278
단계 2. 50 ㎖ 압력 탱크 반응기에, 5-브로모-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸(1.00 g, 2.930 mmol, 1.00 당량), CH3CN(20.00 ㎖), PdCl2(51.95 ㎎, 0.293 mmol, 0.10 당량), XantPhos(339.04 ㎎, 0.586 mmol, 0.20 당량), NH4HCO3(2.32 g, 29.3 mmol, 10.0 당량), CO(10 atm)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 120℃에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 반-고체로서 270 ㎎(30%)의 3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 30.6.
Figure pct00279
단계 3. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 40 ㎖ 바이알에, 3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드(270.0 ㎎, 0.884 mmol, 1.00 당량), 디옥산(10.0 ㎖), 6-클로로-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-2-카브알데히드(274.77 ㎎, 0.884 mmol, 1.00 당량), Xantphos(102.29 ㎎, 0.177 mmol, 0.20 당량), Pd2(dba)3(80.94 ㎎, 0.088 mmol, 0.10 당량), Cs2CO3(864.0 ㎎, 2.65 mmol, 3.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 오일 욕에서 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 20 ㎖의 H2O로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/1)와 함께 실리카젤 컬럼상에 적용하였다. 이에 의해 황색 오일로서 300 ㎎의 N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 580.
Figure pct00280
단계 4. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 8 ㎖ 바이알에, N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드(150.0 ㎎, 0.259 mmol, 1.00 당량), DCE(3.00 ㎖), 7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난; 트리플루오로아세트알데히드(134.11 ㎎, 0.518 mmol, 2.00 당량), AcOH(1.55 ㎎, 0.026 mmol, 0.10 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어서 바이알에 NaBH(OAc)3(109.7 ㎎, 0.517 mmol, 2.00 당량)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 추가로 16시간 동안 교반하면서 반응되게 하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 NaHCO3(5%)로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 10 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 황색 오일로서 120 ㎎(63.98%)의 N-[2-([7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸)-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다. LCMS: [M+H]+ = 725.
Figure pct00281
단계 6. 질소의 불활성 분위기로 퍼징되고 유지된 50 ㎖ 3목 환저 플라스크에, 3급-부틸 7-옥소-2-아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(320.0 ㎎, 1.337 mmol, 1.00 당량), DCM(25.0 ㎖), DAST(1.08 g, 6.700 mmol, 5.01 당량)를 넣었다. 생성 용액을 수/빙욕에서 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 20 ㎖의 NaHCO3로 희석하였다. 생성 용액을 3 x 20 ㎖의 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 합하였다. 생성 혼합물을 2 x 20 ㎖의 염수로 세척하였다. 혼합물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 이에 의해 고체로서 320 ㎎(91.6%)의 3급-부틸 7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트가 생성되었다.
Figure pct00282
Figure pct00283
단계 7. 50 ㎖ 환저 플라스크에, 3급-부틸 7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(320.0 ㎎, 1 당량), DCM(5.0 ㎖), CF3COOH(5.0 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 Et2O로부터의 슬러리에 의해 정제시켰다. 이에 의해 백색 고체로서 150 ㎎(47%)의 7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난; 트리플루오로아세트알데히드가 생성되었다.
Figure pct00284
Figure pct00285
단계 5. 50 ㎖ 환저 플라스크에, N-[2-([7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸)-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드(120.00 ㎎), DCM(3.00 ㎖), CF3COOH(3.00 ㎖)를 넣었다. 생성 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 생성 용액을 4 ㎖의 DMF로 희석하였다. 용액의 pH 값을 NH3H2O로 8로 조절하였다. 조 생성물(80 ㎎)을 하기의 조건으로 예비-HPLC에 의해 정제하였다: 컬럼, XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 ㎜; 이동상, 수(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분간 20% 상 B에서 45%까지); 검출기, UV 254 ㎚. 이에 의해 백색 고체로서 16.7 ㎎의 N-[2-([7,7-디플루오로-2-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-6-일]-3-메틸-1H-인다졸-5-카복스아미드가 생성되었다.
Figure pct00286
실시예 109의 제조
Figure pct00287
N-(2-포름일-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸]피롤로[3,2-c]피리딘-6-일)-3-메틸-1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]인다졸-5-카복스아미드 및 6,6-디플루오로-2-아자스피로[3.3]헵탄을 사용하여 실시예 108에 따라 제조하였다.
Figure pct00288
FRET 분석
본 발명의 화합물을 TR-FRET ENL 스크리닝 분석에서 시험하였다. TR-FRET(시간-분해 형광 에너지 전달)를 사용하여 크로토닐화된 히스톤 펩티드(H3K9cr, aa1-20)에 결합하는 ENL YEATS 도메인을 정량분석하였다. 스트렙트아비딘-유로피움(Eu) 킬레이트는 비오틴화된 펩티드에 결합하는 반면, Anti-6xHIS ULightTM는 6xHIS-ENL에 결합한다. Eu 킬레이트가 320 ㎚에서 여기될 때, 형광 공명 에너지 전달(FRET)은 Eu 및 ULight가 아실-펩티드에 결합하는 ENL에 의해 근접하게 되는 경우 발생한다. ULight 방출(FRET)을 665 ㎚에서 측정하고 615 ㎚에서의 Eu 방출에 정규화하여 웰간의 변동성을 감소시킨다.
FRET 분석 - 프로토콜 1.
본 발명의 화합물을 3 mM의 농도로 DMSO에 용해시키고 후속적으로 분석이 1% DMSO를 함유하도록 분석 완충제(50 mM HEPES PH7.0, 150 mM NaCl, 0.05% BSA, 0.2% Pluronic F-127)에서 희석하였다. 백색 384 얕은 웰 마이크로플레이트(Proxiplate-384 Plus, PerkinElmer, 6008280)에서, 높은 대조용(HC)의 150 nL의 화합물 또는 비히클(분석 완충제 중의 1% DMSO) 및 5 uL의 30 nM ENL 단백질(6xHIS ENL YEATS Domain, EpiCypher, 15-0069)을 합하고 RT에서 15분 배양하였다. 낮은 대조용(LC) 웰에는 ENL 단백질 대신에 5 uL의 분석 완충제를 제공하였다. 이어서 분석 완충제 중의 5 ㎕의 15 nM H3K9cr 펩티드(H3 aa1-20, 비오틴화된; EpiCypher, 12-0099)를 가하고 RT에서 30분 배양하였다. 최종적으로 45 nM Anti-6HIS ULight(PerkinElmer, TRF0105) 및 1.5 nM 스트렙트아비딘-유로피움 킬레이트(PerkinElmer, AD0060)의 5 ㎕ 혼합물을 가하고 RT에서 추가로 30분 동안 배양하였다. TR-FRET 신호(665 ㎚ 신호/615 ㎚ 신호 x 10,000)를 PerkinElmer 2104 EnVision(Xenon Flash Lamp 여기, 320 ㎚ ± 37.5 ㎚ 여기 필터, 407 ㎚ 컷 오프 다이크로익(dichroic) 거울, 615 ㎚ ± 4.25(Europium) ㎚ 및 665 ㎚ ± 3.75 nM(ULight) 방출 필터)을 사용하여 측정하였다. 화합물 농도 반응 곡선을 0.15 nM - 30 uM의 농도 범위에 걸쳐 중복 수행하였다. 각 화합물 농도에서의 반응 - LC 값을 비히클 대조군 반응(HC - LC)의 억제 퍼센트로 전환시켰다. 억제%와 화합물 농도간의 관계를 4 매개변수 로지스틱 방정식을 사용하여 분석하여 하한 및 상한 점근선, 50% 억제를 생성시키는 화합물 농도(IC50 값) 및 중간-점 위치에서의 기울기를 평가하였다.
FRET 분석 - 프로토콜 2.
본 발명의 화합물을 DMSO에 용해시키고 분석 완충제(50 mM Tris-HCl pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.5% 카제인, 및 0.1% NP-40) 중에 500 μM로 희석하였다. 화합물 희석액을 5% DMSO가 보충된 분석 완충제에서 제조하였다. 백색 384-웰 Optiplate(PerkinElmer, 6007299)에서, 4 ㎕의 화합물 및 4 uL의 625 nM 인간 ENL YEATS(수탁 Q03111; aa1-150; EpiCypher, 15-0069)를 합하고 23℃에서 15분 배양하였다. 이어서 분석 완충제 중의 4 ㎕의 25 nM H3K9cr 펩티드(H3 aa1-20, 비오틴화된; EpiCypher, 12-0099)를 가하고 23℃에서 30분 배양하였다. 선행 연구(도시 안 됨)에서, 1000 내지 1 nM(1:2 희석)로 각 결합 상대를 적정하여 분석 전개를 위한 최적의 농도를 결정하였다. 37.5 nM Anti-6HIS ULight(PerkinElmer, TRF0105) 및 1.25 nM 스트렙트아비딘-유로피움 킬레이트(PerkinElmer, AD0060)의 8 ㎕ 혼합물을 가하고 23℃에서 60분 동안 배양하였다. TR-FRET 신호(665 ㎚ 신호/615 ㎚ 신호 x 10,000)를 PerkinElmer 2104 EnVision(Xenon Flash Lamp 여기, 320 ㎚ ± 37.5 ㎚ 여기 필터, 407 ㎚ 컷 오프 다이크로익 거울, 615 ㎚ ± 4.25(Europium) ㎚ 및 665 ㎚ ± 3.75 nM(ULight) 방출 필터)을 사용하여 측정하였다. 각각의 겉보기 IC50을 10-포인트 데이터 곡선에 의해 측정하여(중복) 상부 및 하부 평탄역을 확인하였으며, 이때 값은 신호의 ≥50%를 억제하는 화합물에 대해 계산되었다. 필요한 경우(GraphPad Prism에서 계산 오류를 피하기 위해), 바닥 신호 제한을 적용하여 최저 신호(최대 억제)의 평균과 같게 하였다. 결과는 화합물이 후생적 단백질의 그룹과 아실화된 히스톤과의 상호작용을 차단할 수 있고 넓은 생물학적 맥락에서 이들 단백질에 대한 억제제로서 사용될 수 있음을 가리킨다.
[표 P]
Figure pct00289
Figure pct00290
†FRET 분석 -프로토콜 2를 통해 분석된 실시예.
세포 분석
세포-기반 분석을 사용하여, 10% FBS를 함유하는 Iscove의 변형된 Dulbecco 배지(Gibco, 12440061)에서 배양된 MV4:11(MLL-AF4 MLL) 및 K562 세포 모두에서 세포 생육력을 감소시키는 시험 화합물의 능력을 평가하였다. 분석을 12일에 걸쳐 수행하였으며 세포를 4일 및 8일째에 분할하였다. 화합물 농도 반응 곡선을 0.15 nM - 30 uM의 농도 범위에 걸쳐 중복 작성하였다. 0일째에, 화합물 또는 비히클을, 100 uL 부피의 5000 세포/웰이 있는 96웰 세포 배양 플레이트(Corning, 3599)에서 직접 300 nL로 도말하였다. 블랭크 웰에는 세포 배양 배지를 제공하였다. 플레이트를 5% CO2와 함께 37℃에서 4일간 배양하였다. 4일 및 8일째에, 세포를 분할하고 추가로 4일 동안 배양하였으며 이러는 동안 CTG 판독을 위해 세포 분액을 채취하였다. 세포 분할을 위해서, 270 nL의 화합물 또는 DMSO를 새로운 96웰 세포 배양 플레이트에 가하고, 여기에 90 uL의 배지 + 원래 분석 플레이트로부터의 10 uL의 세포(혼합 후) 또는 100 uL의 배지(블랭크 웰)를 가하였다. 8일째에 이를 반복하였다.
세포 생육력을 제조사의 설명에 따라 CellTiter-Glo® 동종 발광 분석 키트(Promega, G9243)를 사용하여 평가하였다. 이는 ATP를 정량분석하며, 이는 대사적으로 활성인 세포의 존재를 가리킨다. 4, 8 및 12일째에, 20 ul의 나머지 세포 현탁액을 384-웰 플레이트(Corning 3570)내로 흡출하였으며 여기에 같은 부피의 CellTiter-Glo 시약이 있었다. 플레이트를 RT에서 10분 배양으로 배양한 후에 EnVision 플레이트 판독기(PE, 2104)를 사용하여 발광 신호를 기록하였다. 생성 데이터를 하기와 같이 분석하였다:
억제(%) = 100% x (Lum비히클 - Lum샘플)/(Lum비히클 - Lum블랭크)
여기서 비히클은 0.3% DMSO로 처리된 세포이고, 블랭크는 배양 배지이다. IC50 계산은 XLfit(v5.3.1.3): Y = 바닥 + (상부 - 바닥)/(1 + 10^((LogIC50 - X)*HillSlope))을 사용하여 곡선을 적합시킴으로써 계산되었다.
[표 Q]
Figure pct00291
Figure pct00292

Claims (40)

  1. 하기 화학식 Ia의 화합물:
    화학식 Ia
    Figure pct00293

    여기서:
    X1, X2, 및 X3은 N 및 CR4 중에서 독립적으로 선택되나, 단
    (1) X1, X2, 및 X3 중 2개 이하는 N이고;
    (2) X1　및/또는 X2가 CR4일 때, X3은 N이 아니고;
    R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택되고;
    R4는 H, CH3, 및 Cl 중에서 선택되고;
    R5는 5- 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클; 상기 헤테로사이클의 질소에 부착되지 않은, 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클은 (C1-8)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CONH(C0-3H1-7), -SO2NH(C1-6)옥사알킬, -CN, CH2CN, CH2NH2, -NH2, NR14 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환될 수 있고, 이때 R14는 수소, (C1-6)플루오로알킬, 및 (C1-3)옥사알킬, -CH2OH, 벤질옥시, -C(=NH)-NH2, -A-Het 및 추가로, R5가 5- 또는 6-원 헤테로사이클일 때, 비사이클릭 5:6 헤테로사이클, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴나졸린, 또는 벤조[b][1,4]옥사진, =O 중에서 독립적으로 선택되고; 여기서 A는 직접 결합, -(C1-6)알킬-, -(C1-10)옥사알킬-, -CO(C1-6)알킬-, -SO2(C1-6)알킬-, -SO2NH(C1-6)알킬-, 및 -CONH(C1-6)알킬- 중에서 선택되고; Het는 (C1-6)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, (C1-10)옥사알킬(C=O)-, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴이나; 단
    (1) X1, X2, 및 X3이 모두 탄소이고 R5가 임의로 치환된 페닐일 때,
    R5는
    Figure pct00294
    이고;
    (2) R5는 1,3-이치환된 피라졸 또는 5-옥사알킬인다졸이 아니고;
    R6은 H, Me, F, 및 Cl 중에서 선택되고;
    R7은 수소 또는 할로겐이고;
    R8은 (C1-10)옥사알킬, 헤테로사이클릴, 및 헤테로사이클릴(C1-10)옥사알킬 중에서 선택되고;
    R11, R12 및 R13은 하기 3개의 그룹 중에서 선택된다:
    (a) R11은 H 또는 CH3이고;
    R12는 H, (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌, 및 5- 또는 6-원 모노사이클릭 헤테로사이클릴 중에서 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있고;
    R13은 수소 또는 메틸이거나; 또는
    (b) R11 및 R12가 함께 질소를 통해 부착된 임의로 치환된 질소함유 헤테로사이클을 형성하고, 상기 질소함유 헤테로사이클은 (a) 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (b) 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (c) 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, 및 (d) 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄 중에서 선택되고, 여기서 상기 임의의 치환체는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, =NH, 및 추가로, R11 및 R12가 함께 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클을 형성할 때, 할로겐 중에서 독립적으로 선택되고;
    R13은 H, (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택되거나; 또는
    (c) R11은 H이고;
    R12 및 R13이 함께 3- 내지 7-원 지방족 카보사이클을 형성하고, 여기서 상기 카보사이클은 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있다.
  2. 제1항에 있어서,
    하기 화학식 Ib의 화합물:
    화학식 Ib
    Figure pct00295

    여기서 R11 및 R12는 함께 임의로 치환된 질소함유 헤테로사이클, Q를 형성하고, Q는 (a) 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (b) 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, (c) 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클, 및 (d) 8-아자비사이클로[3.2.1]옥탄 중에서 선택되고, 여기서 상기 임의의 치환체는 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, =NH, 및 추가로, R11 및 R12가 함께 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클을 형성할 때, 할로겐 중에서 독립적으로 선택되고;
    R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택된다.
  3. 제1항에 있어서,
    R11이 H이고;
    R12 및 R13이 함께 3- 내지 7-원 지방족 카보사이클을 형성하고, 여기서 상기 카보사이클이 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록실, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있는, 화합물.
  4. 제1항에 있어서,
    R11이 H 또는 CH3이고;
    R12가 H, (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌, 및 5- 또는 6-원 모노사이클릭 헤테로사이클릴 중에서 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클이 (C1-C6)하이드로카빌, 하이드록시, 또는 하이드록시(C1-C6)하이드로카빌로 임의로 치환될 수 있고;
    R13이 수소 또는 메틸인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    R5가 헤테로사이클의 질소에 부착되지 않은, 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클이 (C1-6)알킬, (C1-6)알콕시, 할로겐, (C1-6)할로알킬, CH2CN, CH2NH2, -NH2, NR14 중에서 선택된 기로 임의로 치환될 수 있고, 이때 R14가 수소, (C1-6)플루오로알킬, 및 (C1-3)옥사알킬, -CH2OH, 및 -A-Het, 및 추가로, R5가 5- 또는 6-원 헤테로사이클일 때, 비사이클릭 5:6 헤테로사이클, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴나졸린, 또는 벤조[b][1,4]옥사진, =O 중에서 독립적으로 선택되고; 여기서 A가 직접 결합, -(C1-6)알킬-, -(C1-10)옥사알킬-, -CO(C1-6)알킬-, -SO2(C1-6)알킬-, -SO2NH(C1-6)알킬-, 및 -CONH(C1-6)알킬- 중에서 선택되고; Het가 (C1-6)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, (C1-10)옥사알킬(C=O)-, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴인, 화합물.
  6. 제1항에 있어서,
    R5가 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클이 (C1-6)알킬, (C1-6)알콕시, 할로겐 및 (C1-6)할로알킬 중에서 선택된 기로 임의로 치환될 수 있는, 화합물.
  7. 제2항에 있어서,
    Q가 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환된 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클인, 화합물.
  8. 제2항에 있어서,
    Q가 (C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌, 할로(C1-10)하이드로카빌옥시, -(C1-10)옥사알킬, COOH, -SO2(C1-6)알킬, =O, =S, 및 =NH 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환된 5:5 또는 5:6 비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클인, 화합물.
  9. 제2항에 있어서,
    Q가 스피로비사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클인, 화합물.
  10. 제1항에 있어서,
    R5가 (C1-8)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CONH(C0-3H1-7), -SO2NH(C1-6)옥사알킬, -CN, -NH2, -CH2OH, 벤질옥시, 및 -A-Het 중에서 선택된 하나 이상의 기로 치환된 페닐이고, 여기서 A가 직접 결합, -(C1-6)알킬-, -(C1-10)옥사알킬-, -CO(C1-6)알킬-, -SO2(C1-6)알킬-, -SO2NH(C1-6)알킬-, 및 -CONH(C1-6)알킬- 중에서 선택되고; Het가 (C1-6)하이드로카빌, (C1-10)옥사알킬, (C1-10)옥사알킬(C=O)-, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴인, 화합물.
  11. 제4항에 있어서,
    R11이 H이고;
    R12가 임의로 치환된 피라졸, 트리아졸, 옥사디아졸, 및 피리딘 중에서 선택되고, 이때 임의의 치환체가 하이드록시 또는 메틸일 수 있으며;
    R13이 수소인, 화합물.
  12. 제7항에 있어서,
    Q가 메틸 및 =O 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환된 모노사이클릭 지방족 질소함유 헤테로사이클인, 화합물.
  13. 제9항에 있어서,
    Q가 아자스피로헥산, 헵탄 및 옥탄 및 옥사아자스피로헥산, 헵탄 및 옥탄으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는, 화합물.
  14. 제1항에 있어서,
    하기 화학식 I의 화합물:
    화학식 I
    Figure pct00296

    여기서:
    X1, X2, 및 X3은 N 및 CR4 중에서 독립적으로 선택되나, 단 X1, X2, 및 X3 중 2개 이하는 N이고;
    n은 1, 2 또는 3이고;
    R1은 H, (C1-6)알킬, 아릴(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬, (C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴아미노(C1-6)알킬, 헤테로사이클릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬아미노(C1-6)알킬, (C3-12)사이클로알킬(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬, 아릴아미노(C1-6)알킬, 및 아릴(C1-6)알킬아미노(C1-6)알킬 중에서 선택되고;
    R2a 및 R2b는 독립적으로 H 및 (C1-6)알킬 중에서 선택되거나, 또는 R2a 및 R2b가 함께 스피로 4, 5 또는 6원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    R3은 각각의 경우에 독립적으로 CHCOOH, NR10, O, 및 CR10aR10b 중에서 선택되고;
    R10, R10a 및 R10b는 독립적으로 H 및 (C1-6)알킬 중에서 선택되거나, 또는 R10a 및 R10b가 함께 스피로 4, 5, 또는 6원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
    R2a 및 R10a가 함께 축합된 4, 5 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    R4는 H, CH3, F 및 Cl 중에서 선택되고;
    R5는 5- 또는 6-원 카보사이클 또는 헤테로사이클; 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클은 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CONH(C0-3H1-7), -CN, -NH2, -CH2OH, 벤질옥시, 및 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 하이드록시, =O, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴 중에서 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환될 수 있으나; 단
    X1, X2, 및 X3이 모두 탄소이고 R5가 임의로 치환된 페닐일 때,
    R5는
    Figure pct00297
    이고;
    R6은 H, Me, F, 및 Cl 중에서 선택되고;
    R7은 수소 또는 할로겐이고;
    R8은 헤테로사이클릴이다.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
    X1, X2 또는 X3 중 하나가 N이고, X의 다른 두 경우가 C인, 화합물.
  16. 하기 화학식의 제6항에 따른 피롤로[3,2-c]피리딘:
    Figure pct00298
  17. 하기 화학식의 제15항에 따른 피롤로[3,2-b]피리딘:
    Figure pct00299
  18. 하기 화학식의 제15항에 따른 피롤로[2,3-b]피리딘:
    Figure pct00300
  19. 하기 화학식의 제1항에 따른 피롤로[3,2-c]피리다진:
    Figure pct00301
  20. 하기 화학식의 제1항에 따른 인돌:
    Figure pct00302
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 페닐, 인다졸, 피리딘, 이미다졸로피리딘, 피라졸로피리미딘, 이미다졸로피라진, 트리아졸로피리딘, 및 벤즈옥사진 또는 이들의 환원된 형태 중에서 선택된 카보사이클 또는 헤테로사이클이고, 여기서 상기 카보사이클 또는 헤테로사이클이 임의로 치환될 수 있는, 화합물.
  22. 하기 화학식 Vb의 제11항에 따른 인돌:
    화학식 Vb
    Figure pct00303

    여기서:
    R5a는 5- 또는 6-원 헤테로사이클 또는 지방족 카보사이클; 비사이클릭 5:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 및 비사이클릭 6:6 카보사이클 또는 헤테로사이클 중에서 선택되고, 여기서 상기 카보사이클, 헤테로사이클 또는 지방족 카보사이클은 (C1-6)알킬, (C1-6)알콕시, 할로겐, 및 (C1-6)할로알킬 중에서 선택된 기로 임의로 치환될 수 있다.
  23. 하기 화학식 Vc의 제16항에 따른 인돌:
    화학식 Vc
    Figure pct00304

    여기서:
    R5b는
    Figure pct00305
    이고;
    R7은 수소 또는 할로겐이고;
    R8은 헤테로사이클릴이다.
  24. 제23항에 있어서,
    R8이 피라진, 피리미딘, 피리다진 및 피리딘 중에서 선택되는, 인돌.
  25. 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 수소인, 화합물.
  26. 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    n이 2인, 화합물.
  27. 제26항에 있어서,
    R2a, R2b, R10a, 및 R10b 중 하나가 메틸 및 카복시 중에서 선택되고, 나머지 경우가 수소인, 화합물.
  28. 제26항에 있어서,
    R3이 CHCOOH이고, R2a, R2b, R10a, 및 R10b가 수소인, 화합물.
  29. 제27항에 있어서,
    R2a가 메틸이고, R3이 CR10aR10b이고, R2b, R10a, 및 R10b가 수소일 때, R2a 및 R2b가 부착된 탄소가 (S) 절대 배열을 갖는, 화합물.
  30. 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 수소인, 화합물.
  31. 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6이 수소 또는 메틸인, 화합물.
  32. 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 임의로 치환된 헤테로사이클, -CN 또는 -SO2NHCH3으로 치환된, 임의로 치환된 피리딘, 인다졸, 피라진, 피라졸, 티아졸, 및 피리미딘 중에서 선택되는, 화합물.
  33. 제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 할로겐, (C1-6)할로알킬, -SO2(C1-6)알킬, -SO2NH(C0-3H1-7), -CN, -NH2, -CH2OH, 벤질옥시, 및 (C1-6)하이드로카빌, (C1-6)알콕시, 하이드록시, =O 또는 할로겐으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴 중에서 선택된 하나 이상의 기로 치환된 페닐인, 화합물.
  34. 제33항에 있어서,
    R5가 플루오로 및 임의로 치환된 헤테로사이클로 치환된 페닐인, 화합물.
  35. 제21항에 있어서,
    R5가 메틸로 치환된 인다졸인, 화합물.
  36. 세포를 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 따른 화합물에 노출시킴을 포함하는, 상기 세포에서 종양유전자 발현을 억제하는 방법.
  37. 제36항에 따른 시험관내 방법.
  38. 제36항에 따른 생체내 방법.
  39. 유효 용량의 제1항 내지 제20항 또는 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 투여함을 포함하는, 백혈병이 있는 환자의 치료 방법.
  40. 제39항에 있어서,
    BET 억제제를 투여함을 추가로 포함하는 방법.

KR1020227024539A 2019-12-17 2020-12-17 Enl/af9 yeats의 억제제 KR20220129554A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962949160P 2019-12-17 2019-12-17
US62/949,160 2019-12-17
PCT/US2020/065593 WO2021127166A1 (en) 2019-12-17 2020-12-17 Inhibitors of enl/af9 yeats

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220129554A true KR20220129554A (ko) 2022-09-23

Family

ID=76476792

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227024539A KR20220129554A (ko) 2019-12-17 2020-12-17 Enl/af9 yeats의 억제제

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20230027198A1 (ko)
EP (1) EP4076440A4 (ko)
JP (1) JP2023527487A (ko)
KR (1) KR20220129554A (ko)
CN (1) CN115427035A (ko)
AU (1) AU2020407589A1 (ko)
BR (1) BR112022012273A2 (ko)
CA (1) CA3162253A1 (ko)
CO (1) CO2022009852A2 (ko)
CR (1) CR20220326A (ko)
IL (1) IL293839A (ko)
MX (1) MX2022007442A (ko)
WO (1) WO2021127166A1 (ko)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117580944A (zh) * 2021-08-03 2024-02-20 苏州沙砾生物科技有限公司 一种修饰的免疫细胞及其用途
WO2024002377A1 (zh) * 2022-07-01 2024-01-04 上海赛岚生物科技有限公司 一类prmt5抑制剂及其用途
GB202213163D0 (en) 2022-09-08 2022-10-26 Cambridge Entpr Ltd Novel compounds, compositions and therapeutic uses thereof
WO2024054749A2 (en) * 2022-09-08 2024-03-14 Bridge Medicines Inhibitors of enl/af9 yeats and flt3
GB202213164D0 (en) 2022-09-08 2022-10-26 Cambridge Entpr Ltd Novel compounds, compositions and therapeutic uses thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE466013T1 (de) * 2004-09-03 2010-05-15 Yuhan Corp Pyrroloä3,2-cüpyridinderivate und verfahren zu deren herstellung
EP2261213A1 (en) * 2008-04-01 2010-12-15 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compound
US8642770B2 (en) * 2010-01-06 2014-02-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Indole derivative
EP2818472A1 (en) * 2013-06-27 2014-12-31 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Imidazo[4,5-c]pyridine and pyrrolo[3,2-c]pyridine compounds as G-protein-coupled receptor kinase 5 (GRK5) modulators

Also Published As

Publication number Publication date
AU2020407589A1 (en) 2022-07-21
BR112022012273A2 (pt) 2022-08-30
CO2022009852A2 (es) 2022-10-11
WO2021127166A1 (en) 2021-06-24
EP4076440A1 (en) 2022-10-26
CN115427035A (zh) 2022-12-02
IL293839A (en) 2022-08-01
EP4076440A4 (en) 2023-11-08
MX2022007442A (es) 2023-02-13
JP2023527487A (ja) 2023-06-29
CA3162253A1 (en) 2021-06-24
CR20220326A (es) 2023-02-10
US20230027198A1 (en) 2023-01-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20220129554A (ko) Enl/af9 yeats의 억제제
TWI601727B (zh) 三環雜環化合物及ｊａｋ（傑納斯激酶）抑制劑
JP6510068B2 (ja) 新規なビフェニル化合物又はその塩
CA2861160C (en) 3,4-dihydro-2(1h)-isoquinolinyl carbonyl compounds, a process for their preparation, and their use as anti-apoptotic activity inhibitors
KR101961500B1 (ko) 세린/트레오닌 키나제 억제제
CN113061132B (zh) 一类稠环内酰胺类化合物、制备方法和用途
KR102514914B1 (ko) 카르바졸 유도체
WO2014078372A1 (en) Pyrrolidinyl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
BRPI0609887A2 (pt) composto, composição farmacêutica, métodos para tratar uma infecção bacteriana, e para inibir dna girase bacteriana em um animal de sangue quente, e, processo para fabricar um composto
MXPA06002017A (es) Pirazolil-amidil-bencimidazolilo n-sustituidos, ibnhibidores de c-kit.
TW201726675A (zh) M4毒蕈鹼乙醯膽鹼受體之異位調節劑6,7-二氫-5h-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮
JP2003533524A (ja) ホスホジエステラーゼ阻害剤として有効な置換ピロロピリジノン誘導体
AU2006245517A1 (en) Quinoline derivatives as neurokinin receptor antagonists
CA3029305A1 (en) 2-(piperidin-1-yl)-pyrimidin-4(3h)-ones useful as tankyrase inhibitors
AU2018334272A1 (en) Tetrahydro-imidazo quinoline compositions as CBP/p300 inhibitors
CN112292374B (zh) 一种新型磷酸肌醇3-激酶抑制剂及其制备方法和用途
KR20140077916A (ko) 티로신 키나제로서의 6-치환된 3-(퀴놀린-6-일티오)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피라딘
KR20190020343A (ko) 벤조디옥산 유도체 및 이의 약제학적 용도
JP2022547777A (ja) ヒダントイン誘導体
KR20160086930A (ko) 피롤로피롤론 유도체 및 bet 억제제로서의 그의 용도
KR20240047955A (ko) Enl/af9 yeats의 c-연결된 억제제
TW202334167A (zh) 作為ｅｒｂｂ２抑制劑之稠合四環喹唑啉衍生物
AU2020380828A1 (en) WDR5 inhibitors and modulators
WO2024054749A2 (en) Inhibitors of enl/af9 yeats and flt3
CN116113416A (zh) 四环类衍生物、其制备方法和其医药上的用途