KR20220117559A - Cosmetic composition comprising Aloe fermented product - Google Patents

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KR20220117559A
KR20220117559A KR1020210021051A KR20210021051A KR20220117559A KR 20220117559 A KR20220117559 A KR 20220117559A KR 1020210021051 A KR1020210021051 A KR 1020210021051A KR 20210021051 A KR20210021051 A KR 20210021051A KR 20220117559 A KR20220117559 A KR 20220117559A
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aloe
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fermented product
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KR1020210021051A
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한갑훈
김유경
오동순
김종화
강정란
김영옥
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우석대학교 산학협력단
알로에사랑 영농조합법인
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition comprising an aloe fermented product, and specifically, relates to a cosmetic composition comprising a product obtained by fermenting aloe with Lactobacillus plantarum. The cosmetic composition of the present invention utilizes aloe as a natural raw material, so that the cosmetic composition has almost no cytotoxicity to be used safely, and shows excellent antioxidant and anti-inflammatory activity to be helpful for alleviating skin aging or inflammatory skin diseases through skin aging prevention and skin inflammatory alleviation.

Description

알로에 발효물을 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising Aloe fermented product}Cosmetic composition comprising Aloe fermented product

본 발명은 알로에 발효물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 알로에를 락토바실러스 플란타럼으로 발효한 발효물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising fermented aloe, and more particularly, to a cosmetic composition comprising a fermented product of aloe with Lactobacillus plantarum.

글로벌 화장품 소재 시장은 오는 2023년 약 318억 달러 규모에 도달할 것으로 예상되며, 2017 ~ 2023년까지 연평균 성장률이 4.43%가 될 것으로 보고되고 있다. 이러한 글로벌 시장에서 한국 화장품의 존재감이 크게 높아지면서 세계 트렌드 중 하나로 주목받고 있다. 최근 한국 화장품은 기존 중국 및 아세안 시장 수출 확대와 더불어 미국, 유럽 등 선진 시장으로의 진출이 활발해짐에 따라 그 위상이 더욱 높아질 것으로 기대된다. 여기에는 한국 화장품 소재 산업의 기술적 성장과 발전으로 인한 화장품 산업에서 다양한 기술이 구현되고 이에 따른 화장품 산업의 발전이 적지 않은 영향을 미쳤다고 볼 수 있다.The global cosmetic material market is expected to reach approximately $31.8 billion in 2023, and is reported to have a CAGR of 4.43% from 2017 to 2023. As the presence of Korean cosmetics in the global market has greatly increased, it is attracting attention as one of the world trends. Recently, the status of Korean cosmetics is expected to rise further as it expands its exports to China and ASEAN markets and advances into advanced markets such as the United States and Europe. It can be said that various technologies were implemented in the cosmetic industry due to the technological growth and development of the Korean cosmetic material industry, and the development of the cosmetic industry had a considerable influence on this.

국내 천연화장품의 소비 열풍은 미국, 유럽, 일본에 이어 화장품 전성분표시제가 시행되고 웰빙 열풍과 함께 서서히 증가하기 시작했으며, 파라벤, 미네랄오일, 인공색소, 포름알데히드 등 화학성분이 피부에 유해하다는 연구결과가 발표되면서 깨끗하고 안전한 천연 원료를 사용한 제품을 찾는 고객들이 늘어나는 추세이다.The consumption craze of domestic natural cosmetics started to gradually increase along with the well-being craze following the US, Europe, and Japan, followed by the implementation of the cosmetic ingredient labeling system, and a study on the fact that chemical ingredients such as parabens, mineral oil, artificial colorants, and formaldehyde are harmful to the skin. As the results are announced, more and more customers are looking for products using clean and safe natural ingredients.

한편, 산업화로 인한 환경 공해와 화학 물질의 사용 증가 등으로 인해 아토피 피부염과 같은 피부 염증 질환의 발생이 증가하고 있으며, 산화로 인한 피부 노화 문제가 증가함에 따라 이러한 문제를 개선할 수 있는 화장료에 대한 요구가 점차 늘어나고 있다.On the other hand, the occurrence of skin inflammatory diseases such as atopic dermatitis is increasing due to environmental pollution and increased use of chemicals due to industrialization. The demand is gradually increasing.

이에 본 발명자들은 천연 원료, 특히 알로에를 사용함으로써 보다 안전하게 사용할 수 있으며, 피부의 산화와 염증을 효과적으로 개선할 수 있는 화장료를 개발하고자 하였다.Accordingly, the present inventors tried to develop a cosmetic that can be used more safely by using natural raw materials, particularly aloe, and can effectively improve oxidation and inflammation of the skin.

한국등록특허 제10-2136090호Korean Patent Registration No. 10-2136090

따라서 본 발명의 주된 목적은 천연 원료인 알로에를 사용하여 안전하게 사용할 수 있으며, 항산화, 항염증 등의 우수한 기능성을 나타낼 수 있는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.Accordingly, the main object of the present invention is to provide a cosmetic composition that can be safely used using aloe, a natural raw material, and exhibit excellent functions such as antioxidant and anti-inflammatory.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 알로에를 락토바실러스 플란타럼으로 발효한 발효물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.According to one aspect of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising a fermented product of aloe fermented with Lactobacillus plantarum.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 발효물은 알로에 분말이 함유된 배지에 상기 락토바실러스 플란타럼을 접종하고 발효한 것이 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the fermented product is preferably inoculated with the Lactobacillus plantarum in a medium containing aloe powder and fermented.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 배지는 알로에 분말이 0.1 내지 1%(w/v)로 함유되고, 수크로오스가 0.5 내지 2%(w/v), 효모 추출물이 0.05 내지 0.5%(w/v)로 함유된 수용액인 것이 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the medium contains 0.1 to 1% (w/v) of aloe powder, 0.5 to 2% (w/v) of sucrose, and 0.05 to 0.5% (w/v) of yeast extract. ) is preferably an aqueous solution containing

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 발효는 35 내지 39℃에서 1 내지 10일 동안 이루어지는 것이 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the fermentation is preferably made at 35 to 39 ℃ for 1 to 10 days.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 산화 방지 또는 피부 염증 개선용 화장료 조성물인 것이 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the cosmetic composition is preferably a cosmetic composition for preventing skin oxidation or improving skin inflammation.

본 발명의 화장료 조성물은 천연 원료인 알로에를 활용한 것으로 세포독성이 거의 없어 안전하게 사용할 수 있으며, 우수한 항산화 및 항염증 활성을 나타내어 피부 산화 방지 및 피부 염증 개선을 통해 피부 노화나 염증성 피부 질환을 개선하는데 큰 도움이 될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention utilizes aloe, a natural raw material, and has almost no cytotoxicity, so it can be used safely. It can be of great help.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 알로에 발효물(동결건조상태)을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명 알로에 발효물에 대한 DPPH 라디칼 소거 활성 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명 알로에 발효물에 대한 세포 독성 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명 알로에 발효물에 대한 NO(일산화질소) 생성 억제능 실험 결과를 나타낸 것이다. N: 정상군, C: 대조군, ***p<0.001 vs N, ###p<0.001 vs C.
1 shows an aloe fermented product (lyophilized state) according to an embodiment of the present invention.
2 shows the results of the DPPH radical scavenging activity test for the fermented aloe of the present invention.
3 shows the results of a cytotoxicity test for the fermented aloe of the present invention.
4 shows the results of a test for inhibiting NO (nitric oxide) production of fermented aloe of the present invention. N: normal group, C: control group, ***p<0.001 vs N, ###p<0.001 vs C.

본 발명의 화장료 조성물은 알로에를 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)으로 발효한 발효물을 포함하는 것을 특징으로 한다.The cosmetic composition of the present invention is characterized in that it comprises a fermented product obtained by fermenting aloe with Lactobacillus plantarum .

알로에는 식물학상으로 백합과의 알로에속에 속하는 다년생 식물로, 본 발명에서 바람직하게는 알로에 베라(Aloe vera L.)를 사용한다.Aloe is a perennial plant belonging to the genus Aloe of the Liliaceae botanically, and Aloe vera L. is preferably used in the present invention.

본 발명에서 발효를 위해 미생물, 특히 락토바실러스 속의 미생물, 특히 락토바실러스 플란타럼을 발효 미생물로 사용하는 통상적인 발효 방법을 사용할 수 있다. 바람직하게는 알로에가 함유된 발효 배지에 발효 미생물을 접종하여 발효하는 방법을 사용한다.For fermentation in the present invention, a conventional fermentation method using microorganisms, particularly microorganisms of the genus Lactobacillus, in particular Lactobacillus plantarum, as fermentation microorganisms may be used. Preferably, a method for fermentation by inoculating a fermentation medium containing aloe with a fermentation microorganism is used.

본 발명에서 바람직하게는 알로에를 분말화하여 발효에 사용한다. 이때 분말화를 위해 식물재료를 분말화하는 통상적인 방법, 예를 들어 건조 및 분쇄하여 분말화하는 방법을 사용할 수 있다. 이때 건조 방법으로는 자연 건조, 열풍 건조, 동결 건조 등의 방법을 사용할 수 있다.In the present invention, aloe is preferably powdered and used for fermentation. At this time, a conventional method of pulverizing plant materials for pulverization, for example, a method of pulverizing by drying and pulverizing may be used. In this case, as a drying method, methods such as natural drying, hot air drying, and freeze drying may be used.

본 발명에서 발효 미생물로 사용하는 락토바실러스 플란타럼은 락토바실러스 속 미생물을 배양하는 일반적인 방법으로 배양할 수 있다. 예를 들어, MRS 배지를 사용하여 배양할 수 있으며, 바람직하게는 30 내지 40℃로 배양한다. 본 발명에서 바람직하게는 락토바실러스 플란타럼 KCTC 3104 균주를 사용한다.Lactobacillus plantarum used as a fermentation microorganism in the present invention can be cultured by a general method of culturing a microorganism of the genus Lactobacillus. For example, it can be cultured using MRS medium, preferably cultured at 30 to 40 ℃. In the present invention, preferably, the Lactobacillus plantarum KCTC 3104 strain is used.

본 발명에서 접종을 위해 예를 들어 상기 발효 미생물의 배양 균체, 고체 배양물 또는 배양액을 알로에가 함유된 발효 배지에 첨가하는 방법을 사용할 수 있다. 이때 발효 미생물은 예를 들어 10 내지 1010 cell/㎖, 102 내지 109 cell/㎖, 103 내지 108 cell/㎖, 104 내지 107 cell/㎖이 되도록 첨가할 수 있다.In the present invention, for inoculation, for example, a method of adding a culture cell, a solid culture, or a culture solution of the fermenting microorganism to a fermentation medium containing aloe may be used. In this case, the fermenting microorganism may be added to be, for example, 10 to 10 10 cell/ml, 10 2 to 10 9 cell/ml, 10 3 to 10 8 cell/ml, or 10 4 to 10 7 cell/ml.

본 발명에서 알로에의 효율적인 발효와 우수한 기능성을 위해 바람직하게는 알로에 분말이 0.1 내지 1%(w/v)로 함유된 발효 배지를 사용한다. 보다 바람직하게는 알로에 분말이 0.2 내지 0.8%(w/v)로 함유된 발효 배지, 보다 바람직하게는 알로에 분말이 0.3 내지 0.7%(w/v)로 함유된 발효 배지, 보다 바람직하게는 알로에 분말이 0.4 내지 0.6%(w/v)로 함유된 발효 배지를 사용한다. 바람직하게는 알로에 분말과 함께 수크로오스 및 효모 추출물이 함유된 발효 배지를 사용한다. 이때 발효 배지 중의 수크로오스 함량은 바람직하게는 0.5 내지 2%(w/v), 보다 바람직하게는 0.6 내지 1.5%(w/v), 보다 바람직하게는 0.7 내지 1.3%(w/v), 보다 바람직하게는 0.8 내지 1.2%(w/v)로 하며, 효모 추출물의 함량은 바람직하게는 0.05 내지 0.5%(w/v), 보다 바람직하게는 0.07 내지 0.4%(w/v), 보다 바람직하게는 0.1 내지 0.3%(w/v)로 한다.In the present invention, for efficient fermentation and excellent functionality of aloe, a fermentation medium containing 0.1 to 1% (w/v) of aloe powder is preferably used. More preferably a fermentation medium containing 0.2 to 0.8% (w/v) of aloe powder, more preferably a fermentation medium containing 0.3 to 0.7% (w/v) of aloe powder, more preferably aloe powder A fermentation medium containing this 0.4 to 0.6% (w/v) is used. Preferably, a fermentation medium containing sucrose and yeast extract along with aloe powder is used. At this time, the sucrose content in the fermentation medium is preferably 0.5 to 2% (w/v), more preferably 0.6 to 1.5% (w/v), more preferably 0.7 to 1.3% (w/v), more preferably Preferably 0.8 to 1.2% (w / v), the content of the yeast extract is preferably 0.05 to 0.5% (w / v), more preferably 0.07 to 0.4% (w / v), more preferably 0.1 to 0.3% (w/v).

본 발명에서 발효를 위해 알로에 함유 발효 배지에 락토바실러스 플란타럼을 접종하고 일정한 온도로 일정한 기간 동안 유지시키는 방법을 사용할 수 있다. 바람직하게는 접종 후 35 내지 39℃에서, 보다 바람직하게는 36 내지 38℃에서, 바람직하게는 1 내지 10일 동안, 보다 바람직하게는 3 내지 9일 동안, 보다 바람직하게는 6 내지 8일 동안 유지시키는 방법으로 발효한다.In the present invention, for fermentation, a method of inoculating Lactobacillus plantarum into an aloe-containing fermentation medium and maintaining it at a constant temperature for a predetermined period may be used. Preferably at 35 to 39 ° C, more preferably at 36 to 38 ° C after inoculation, preferably for 1 to 10 days, more preferably for 3 to 9 days, more preferably for 6 to 8 days Fermented in a way

본 발명의 화장료 조성물은 상기와 같은 알로에 발효물을 포함함으로써 우수한 항산화 및 항염증 효과를 발휘할 수 있다. 이에 따라 본 발명의 화장료 조성물은 피부 산화 방지 또는 피부 염증 개선용 화장료 조성물일 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can exhibit excellent antioxidant and anti-inflammatory effects by including the fermented aloe as described above. Accordingly, the cosmetic composition of the present invention may be a cosmetic composition for preventing skin oxidation or improving skin inflammation.

본 발명에서 알로에 발효물은 기능성, 즉 항산화 또는 항염증 효과를 위한 유효성분으로, 본 발명의 화장료 조성물은 상기와 같은 알로에 발효물 그 자체일 수 있으며, 이 밖에 화장품학적으로 허용된 담체나 첨가제를 더 포함할 수 있다. 이때 담체는 약학적으로 허용된 담체도 포함된다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 다양한 형태, 예를 들어 수분크림, 화장수, 영양로션, 영양크림, 맛사지 크림, 팩 및 영양 에센스 등으로 제형화할 수 있다.In the present invention, the fermented aloe is an active ingredient for functionality, that is, an antioxidant or anti-inflammatory effect. The cosmetic composition of the present invention may be the fermented aloe itself as described above, and other cosmetically acceptable carriers or additives. may include more. In this case, the carrier also includes a pharmaceutically acceptable carrier. In addition, the cosmetic composition of the present invention can be formulated in various forms, for example, moisture cream, lotion, nutrient lotion, nutrient cream, massage cream, pack and nutrient essence.

본 발명의 화장료 조성물은 상기와 같은 알로에 발효물 이외에 다른 기능성 물질을 더 포함할 수 있다. 이때 상기 기능성 물질은 예를 들어 알로에를 다른 방법으로 가공한 물질 또는 알로에 이외의 다른 원료의 추출물 또는 발효물일 수 있다. 또한 본 발명의 화장료 조성물은 유효성분으로 알로에 발효물 만을 포함할 수 있고, 다른 기능성 물질을 포함하지 않을 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may further include other functional substances in addition to the fermented aloe as described above. In this case, the functional material may be, for example, a material processed by other methods of aloe or an extract or fermented product of a raw material other than aloe. In addition, the cosmetic composition of the present invention may include only fermented aloe as an active ingredient, and may not include other functional substances.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 알로에 발효물을 예를 들어 0.1 내지 99중량%로 포함할 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다.The cosmetic composition of the present invention may include, for example, 0.1 to 99% by weight of the fermented aloe, but is not limited thereto.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for illustrating the present invention and should not be construed as limiting the scope of the present invention by these examples.

[실시예][Example]

실시예 1. 알로에 발효물 제조Example 1. Preparation of aloe fermented product

물에 알로에 베라(Aloe vera L.) 분말(건조 분말)이 0.5%(w/v), 수크로오스가 1.0%(w/v), 효모 추출물이 0.2%(w/v)로 함유된 발효 배지를 제조하고, 여기에 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)(KCTC 3104)을 접종한 다음 37℃에서 일주일 동안 발효하여 발효물을 얻었다.Fermentation medium containing 0.5% (w/v) of Aloe vera L. powder (dry powder), 1.0% (w/v) of sucrose, and 0.2% (w/v) of yeast extract in water prepared, and then inoculated with Lactobacillus plantarum (KCTC 3104) and then fermented at 37° C. for a week to obtain a fermented product.

이때 발효균주로 사용한 락토바실러스 플란타럼은 MRS 배지에서 배양하여 접종에 사용하였다.At this time, Lactobacillus plantarum used as a fermentation strain was cultured in MRS medium and used for inoculation.

제형예 1. 크림 제조Formulation Example 1. Cream preparation

상기 실시예 1에서 제조한 알로에 발효물, 드럼스틱잎(모링가잎) 추출물, 글리세린, 병풀잎수, 올리브오일, 세테아릴알코올, 쇠비름 추출물, 해바라기씨오일, 정제수, 아보카도오일, 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드, 마트리카리아꽃수, 아이소아밀라우레이트, 칸데릴라왁스, 프로판다이올, C12-20알킬글루코사이드, C14-22알코올, 글리세릴스테아레이트, 토코페롤, 호호바씨오일, 시어버터, 해바라기씨오일, 스위트아몬드오일, 센티드제라늄오일, 만다린껍질오일, 자몽껍질오일, 라벤더오일, 웨스트오스트레일리아산달우드목부오일, 일랑일랑꽃오일, 비터오렌지잎, 잔가지오일, 캐모마일꽃오일, 썰겨추출물, 하이드로제네이티드레시틴, 황금추출물, 잔탄검, 모란뿌리추출물, 우스니아추출물, 초피나무열매추출물, 할미꽃추출물, 다이포타슘글리시리제이트, 베타인, 유용성감초추출물, 아데노신, 소듐하이알루로네이트, 리모넨, 리날룰, 시트로넬올, 제라니올, 파네솔을 혼합하여 크림 제형으로 제조한다.Aloe fermented product prepared in Example 1, drumstick leaf (moringa leaf) extract, glycerin, centella asiatica leaf water, olive oil, cetearyl alcohol, purslane extract, sunflower seed oil, purified water, avocado oil, caprylic /Capric triglyceride, Matricaria flower water, isoamyllaurate, candelilla wax, propanediol, C12-20 alkyl glucoside, C14-22 alcohol, glyceryl stearate, tocopherol, jojoba seed oil, shea butter, Sunflower Seed Oil, Sweet Almond Oil, Scented Geranium Oil, Mandarin Peel Oil, Grapefruit Peel Oil, Lavender Oil, West Australian Sandalwood Wood Oil, Ylang Ylang Flower Oil, Bitter Orange Leaf, Twig Oil, Chamomile Flower Oil, Sliced Extract, Hydrogenated Lecithin, Golden Extract, Xanthan Gum, Peony Root Extract, Usnia Extract, Chopi Tree Fruit Extract, Walnut Flower Extract, Dipotassium Glycyrrhizate, Betaine, Oil-soluble Licorice Extract, Adenosine, Sodium Hyaluronate, Limonene , linalool, citronellol, geraniol, and farnesol are mixed to prepare a cream formulation.

실험예 1. 기능성 평가Experimental Example 1. Functional evaluation

상기 실시예 1에서 제조한 알로에 발효물을 동결건조한 다음 -20℃에 냉동보관하면서 실험에 사용하였다. 실험에 사용할 시료는 100㎎/㎖의 농도로 증류수에 용해한 후 사용하였다.The fermented aloe prepared in Example 1 was freeze-dried and then stored frozen at -20°C and used in the experiment. The sample to be used in the experiment was used after dissolving in distilled water at a concentration of 100 mg/ml.

1-1. DPPH 라디칼 소거 활성1-1. DPPH radical scavenging activity

시료 용액 20㎕와 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl, Sigma-Aldrich, St Louis, USA) 용액 80㎕를 96-웰 플레이트에 혼합하여 30분간 실온에 방치시킨 후, 517nm에서 분광광도계 ELISA로 측정하고, 활성비교를 위하여 수용성 비타민의 하나인 아스코르빈산(Ascorbic acid, Sigma-Aldrich)을 양성대조구로 사용하였다.20 μl of the sample solution and 80 μl of DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl, Sigma-Aldrich, St Louis, USA) solution were mixed in a 96-well plate, left at room temperature for 30 minutes, and spectrophotometric ELISA at 517 nm , and ascorbic acid (Sigma-Aldrich), one of the water-soluble vitamins, was used as a positive control for activity comparison.

이의 결과, 도 2와 같이 알로에 발효물은 농도의존적으로 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타내었다.As a result, as shown in FIG. 2 , the fermented aloe exhibited DPPH radical scavenging activity in a concentration-dependent manner.

1-2. 실험에 사용한 세포 배양1-2. Cell culture used in the experiment

실험에 사용한 RAW 264.7(TIB-71) 대식세포는 ATCC(American type cell collection, USA)으로부터 구입하였으며, DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium; Gibco, USA) 배지에 10% FBS(Fetal Bovine Serum; Gibco, USA)와 1%의 penicillin(100U/㎖)/streptocycin(100㎍/㎖)을 첨가한 후, 37℃, 5% CO2 조건하에서 배양하여 사용하였다.RAW 264.7 (TIB-71) macrophages used in the experiment were purchased from ATCC (American type cell collection, USA), and 10% FBS (Fetal Bovine Serum; Gibco, USA) in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium; Gibco, USA) medium. ) and 1% penicillin (100U/ml)/streptocycin (100㎍/ml) were added, and then cultured at 37°C and 5% CO 2 conditions.

1-3. 세포독성1-3. cytotoxicity

시료에 대한 생존율을 MTT([3-(4,5-methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide], Sigma Chemical Co., St. Louis MO, USA) 방법으로 실험하였다. 세포를 1 × 104 cell/well의 농도로 96-웰 플레이트에 분주하고 24시간 배양 후 배지를 제거하였다. 농도별로 희석한 시료를 각각 첨가하여 24시간 배양한 다음 MTT 용액(5㎎/㎖) 10㎕를 각 웰에 첨가하고 4시간 동안 추가 배양하였다. 배지를 제거하고 100㎕/웰의 DMSO(dimethylsulfoxide; Sigma Chemical Co., St. Louis MO, USA)를 넣어 세포 내에 생성된 포마잔(formazan)을 15분간 교반하여 용출한 후, ELISA 리더를 이용하여 590nm에서 흡광도를 측정하였다.The survival rate of the sample was tested by MTT ([3-(4,5-methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide], Sigma Chemical Co., St. Louis MO, USA) method. Cells were aliquoted in a 96-well plate at a concentration of 1 × 10 4 cell/well, and the medium was removed after culturing for 24 hours. Samples diluted for each concentration were added and incubated for 24 hours, then 10 μl of MTT solution (5 mg/ml) was added to each well and further cultured for 4 hours. After removing the medium and adding 100 μl/well of DMSO (dimethylsulfoxide; Sigma Chemical Co., St. Louis MO, USA), the formazan generated in the cells was stirred for 15 minutes to elute, and then using an ELISA reader Absorbance was measured at 590 nm.

알로에 발효물의 세포독성 유무를 확인하기 위하여 RAW 264.7 세포에 각 시료를 1, 10, 50, 100, 150, 200, 500, 1000㎍/㎖의 농도로 처리한 후 세포 생존률(cell viability rate)을 측정한 결과, 도 3과 같이 1000㎍/㎖까지도 80% 이상의 세포 생존률을 나타내었다.To check the presence or absence of cytotoxicity of the aloe fermented product, RAW 264.7 cells were treated with each sample at a concentration of 1, 10, 50, 100, 150, 200, 500, and 1000 μg/ml, and then the cell viability rate was measured. As a result, as shown in FIG. 3, even up to 1000 μg/ml showed a cell viability of 80% or more.

1-4. NO(일산화질소) 생성 억제능1-4. Inhibiting NO (nitric oxide) production

RAW 264.7 세포를 5 × 105 cell/well의 농도로 6-웰 플레이트에 분주한 다음 24시간 배양 후 배지를 제거하였다. 농도별로 희석한 시료를 1시간 동안 전처리한 뒤 LPS(lipopolysaccharide, 1㎍/㎖) 처리하여 18시간 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다. 시료 처리 18시간 후에 세포배양 상등액 50㎕와 Griess 시약(1% sulfanilamide + 0.1% α-naphthylamide in 2.5% phosphoric acid) 50㎕를 혼합하여 96-웰 플레이트에서 10분 동안 반응시킨 후 ELISA 리더를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. NaNO2를 표준용액으로 사용하여 정량하였다.RAW 264.7 cells were aliquoted in a 6-well plate at a concentration of 5 × 10 5 cells/well, and the medium was removed after culturing for 24 hours. Samples diluted by concentration were pre-treated for 1 hour, treated with LPS (lipopolysaccharide, 1 μg/ml), and cultured in an incubator at 37° C., 5% CO 2 for 18 hours. After 18 hours of sample treatment, 50 μl of the cell culture supernatant and 50 μl of Griess reagent (1% sulfanilamide + 0.1% α-naphthylamide in 2.5% phosphoric acid) were mixed and reacted in a 96-well plate for 10 minutes, followed by an ELISA reader. Absorbance was measured at 540 nm. NaNO 2 was quantified using a standard solution.

알로에 발효물의 RAW 264.7 세포에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성 억제능을 측정하기 위하여 RAW 264.7 세포에 알로에 발효물을 각각 125, 250, 500㎍/㎖의 농도로 처리한 후 비교한 결과, 도 4와 같이 알로에 발효물의 농도 의존적인 억제 효능이 관찰되었다.In order to measure the ability of the aloe fermented product to inhibit LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells, RAW 264.7 cells were treated with aloe fermented at concentrations of 125, 250, and 500 μg/ml, respectively. As a result, as shown in FIG. 4 . A concentration-dependent inhibitory efficacy of the aloe ferment was observed.

Claims (5)

알로에를 락토바실러스 플란타럼으로 발효한 발효물을 포함하는 화장료 조성물.A cosmetic composition comprising a fermented product obtained by fermenting aloe with Lactobacillus plantarum. 제1항에 있어서,
상기 발효물은 알로에 분말이 함유된 배지에 상기 락토바실러스 플란타럼을 접종하고 발효한 것인, 조성물.
According to claim 1,
The composition of claim 1, wherein the fermented product is inoculated with the Lactobacillus plantarum in a medium containing aloe powder and fermented.
제2항에 있어서,
상기 배지는 알로에 분말이 0.1 내지 1%(w/v)로 함유되고, 수크로오스가 0.5 내지 2%(w/v), 효모 추출물이 0.05 내지 0.5%(w/v)로 함유된 수용액인, 조성물.
3. The method of claim 2,
The medium is an aqueous solution containing 0.1 to 1% (w/v) of aloe powder, 0.5 to 2% (w/v) of sucrose, and 0.05 to 0.5% (w/v) of yeast extract. .
제2항에 있어서,
상기 발효는 35 내지 39℃에서 1 내지 10일 동안 이루어지는, 조성물.
3. The method of claim 2,
The fermentation is made for 1 to 10 days at 35 to 39 ℃, the composition.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부 산화 방지 또는 피부 염증 개선용 화장료 조성물인, 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is a cosmetic composition for preventing skin oxidation or improving skin inflammation, the composition.
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