KR20220024191A

KR20220024191A - 항암제 조합 요법

Info

Publication number: KR20220024191A
Application number: KR1020217042813A
Authority: KR
Inventors: 미셸 그마흘; 마르코 한스 호프만
Original assignee: 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하
Priority date: 2019-06-19
Filing date: 2020-06-17
Publication date: 2022-03-03
Also published as: JP2022537044A; BR112021024532A2; EP3986408A1; CN114375202A; CA3142239A1; US20220249492A1; TW202114683A; WO2020254451A1; CL2021003353A1; AU2020296914A1; MX2021016137A

Abstract

본 발명은 본원에 기재된 SOS1 억제제를 본원에 기재된 MEK 억제제와 조합하여 사용하는 것을 포함하는 항암 요법을 기재한다.

Description

항암제 조합 요법

KRAS (V-Ki-ras2 커스틴 래트 육종 바이러스 종양 유전자 동족체), NRAS (신경모세포종 RAS 바이러스 종양 유전자 동족체) 및 HRAS (하비 뮤린 육종 바이러스 종양 유전자) 및 이들의 임의의 돌연변이체를 포함하는 RAS 패밀리 단백질은 GTP-결합 또는 GDP-결합 상태로 세포에 존재하는 소형 GTPase이다 (McCormick et al., J. Mol. Med. (Berl)., 2016, 94(3):253-8; Nimnual et al., Sci. STKE., 2002, 2002(145):pe36). RAS 패밀리 단백질은 약한 고유 GTPase 활성 및 느린 뉴클레오티드 교환 속도를 갖고 있다 (Hunter et al., Mol. Cancer Res., 2015, 13(9):1325-35). NF1과 같은 GTPase 활성화 단백질 (GAP)의 결합은 RAS 패밀리 단백질의 GTPase 활성을 증가시킨다. SOS1 (Son of Sevenless 1)과 같은 구아닌 뉴클레오티드 교환 인자 (GEF)의 결합은 GTP 결합을 가능케 하는 RAS 패밀리 단백질로부터 GDP 방출을 촉진한다 (Chardin et al., Science, 1993, 260(5112):1338-43). GTP-결합 상태에 있을 때, RAS-패밀리 단백질은 활성적이고 RAF/미토겐 또는 세포 외 신호 조절 키나제 (MEK/ERK) 경로, 라파마이신 (mTOR) 경로의 PI3K/AKT/포유동물 표적 및 RalGDS (Ral 구아닌 뉴클레오티드 해리 자극제) 경로를 촉진하기 위한 C-RAF 및 포스포이노시티드 3-키나제 (PI3K)를 포함하는 이펙터 단백질에 관여한다 (McCormick et al., J. Mol. Med. (Berl)., 2016, 94(3):253-8; Rodriguez-Viciana et al., Cancer Cell. 2005, 7(3):205-6). 이들 경로는 증식, 생존, 대사, 운동성, 혈관 형성, 면역 및 성장과 같은 다양한 세포 과정에 영향을 미친다 (Young et al., Adv. Cancer Res., 2009, 102:1-17; Rodriguez-Viciana et al., Cancer Cell. 2005, 7(3):205-6).

RAS 패밀리 단백질에서 암 관련 돌연변이는 고유한 GAP 유발 GTPase 활성을 억제하여 GTP-결합/활성 RAS 패밀리 단백질의 집단을 증가시키게 된다 (McCormick et al., Expert Opin. Ther. Targets., 2015, 19(4):451-4; Hunter et al., Mol. Cancer Res., 2015, 13(9):1325-35). 이는 RAS 패밀리 단백질의 하류에 이펙터 경로 (예를 들어, MEK/ERK, PI3K/AKT/mTOR, RalGDS 경로)의 지속적인 활성화로 이어진다. KRAS 돌연변이 (예: 아미노산 G12, G13, Q61, A146)는 폐암, 결장직장암 및 췌장암을 포함한 비롯한 다양한 인간 암에서 발견된다 (Cox et al., Nat. Rev. Drug Discov., 2014, 13(11):828-51). HRAS (예: 아미노산 G12, G13, Q61) 및 NRAS (예: 아미노산 G12, G13, Q61, A146)에서의 돌연변이는 또한 다양한 인간 암 유형에서도 발견되지만 전형적으로는 KRAS 돌연변이에 비해 빈도가 낮다 (Cox et al., Nat. Rev. Drug Discov., 2014, 13(11):828-51). RAS 패밀리 단백질에서의 변경 (예를 들어, 돌연변이, 과발현, 유전자 증폭)은 또한 암 약물, 예컨대 EGFR 항체 세툭시맙 및 파니투무맙 (Leto et al., J. Mol. Med. (Berl). 2014 Jul;92(7):709-22) 및 EGFR 티로신 키나제 억제제 오시머티닙/AZD9291 (Ortiz-Cuaran et al., Clin. Cancer Res., 2016, 22(19):4837-47; Eberlein et al., Cancer Res., 2015, 75(12):2489-500)에 대한 내성 메커니즘으로 기술되어 있다

SOS1 (Son of Sevenless 1)는 최초 동정된 초파리 단백질 SOS (Son of Sevenless)의 인간 상동체이다 (Pierre et al., Biochem. Pharmacol., 2011, 82(9):1049-56; Chardin et al., Cytogenet. Cell. Genet., 1994, 66(1):68-9). SOS1 단백질은 1333 개의 아미노산 (150 kDa)으로 구성되어 있다. SOS1은 2 개의 탠덤 N-말단 히스톤 도메인 (HD)에 이어진 Dbl 상동성 도메인 (DH), 플렉스트린 상동성 도메인 (PH), 나선형 링커 (HL), RAS 교환 모티프 (REM), CDC25 상동성 도메인 및 C-말단 프롤린 풍부 도메인 (PR)을 가지는 다중 도메인 단백질이다. SOS1은 RAS 패밀리 단백질에 대한 2 개의 결합 부위; GDP-결합 RAS 패밀리 단백질에 결합하여 구아닌 뉴클레오티드 교환을 촉진하는 촉매 부위 및 SOS1의 촉매 GEF 기능의 추가 증가를 야기하는 GTP-결합 RAS-패밀리 단백질에 결합하는 알로스테릭 부위를 가진다 (Freedman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U S A., 2006, 103(45):16692-7; Pierre et al., Biochem. Pharmacol., 2011, 82(9):1049-56). 공개된 데이터는 암에서 돌연변이 KRAS 활성화 및 종양성 신호전달에 SOS1의 결정적인 관여를 제시한다 (Jeng et al., Nat. Commun., 2012, 3:1168). SOS1 수준을 고갈시키면 KRAS 돌연변이를 갖는 종양 세포의 증식 속도 및 생존을 감소시켰지만, KRAS 야생형 세포주에서는 효과가 관찰되지 않았다. SOS1의 소실 효과는 촉매 부위 돌연변이화 SOS1의 도입에 의해 구제될 수 없었으며, 이는 KRAS 돌연변이 암 세포에서 SOS1 GEF 활성의 필수적인 역할을 입증한다.

SOS1은 RAS 패밀리 단백질의 돌연변이 이외의 메커니즘을 통해 암에서 RAS 패밀리 단백질 신호전달의 활성화에 결정적으로 관여한다. SOS1은 어댑터 단백질 Grb2와 상호작용하고, 생성된 SOS1/Grb2 복합체는 활성화/인산화 수용체 티로신 키나제 (예: EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4, PDGFR-A/B, FGFR1/2/3, IGF1R, INSR, ALK, ROS, TrkA, TrkB, TrkC, RET, c-MET, VEGFR1/2/3, AXL)에 결합한다 (Pierre et al., Biochem. Pharmacol., 2011, 82(9):1049-56). SOS1은 또한 T 세포 수용체 (TCR), B 세포 수용체 (BCR) 및 단핵구 콜로니 자극 인자 수용체와 같은 다른 인산화된 세포 표면 수용체로 동원된다 (Salojin et al., J. Biol. Chem. 2000, 275(8):5966-75). RAS 패밀리 단백질에 근접한 원형질막에 대한 이러한 SOS1의 국소화는 SOS1이 RAS 패밀리 단백질 활성화를 촉진할 수 있게 한다. RAS 패밀리 단백질의 SOS1-활성화는 또한 만성 골수성 백혈병에서 흔히 발견되는 BCR-ABL 종양 단백질과 SOS1/Grb2의 상호작용에 의해 매개될 수 있다 (Kardinal et al., 2001, Blood, 98:1773-81; Sini et al., Nat. Cell Biol., 2004, 6(3):268-74).

또한, SOS1의 변경이 암에 연루되어 있다. SOS1 돌연변이는 배아 횡문근육종, 세르톨니 세포 고환 종양, 피부의 과립 세포 종양 (Denayer et al., Genes Chromosomes Cancer, 2010, 49(3):242-52) 및 폐 선암종 (Cancer Genome Atlas Research Network., Nature. 2014, 511(7511):543-50)에서 발견된다. 한편, SOS1의 과발현은 방광암 (Watanabe et al., IUBMB Life., 2000, 49(4):317-20) 및 전립선암 (Timofeeva et al., Int. J. Oncol., 2009, 35(4):751-60)에서 기술되었다. 암 이외에 유전성 SOS1 돌연변이는 예를 들어 RAS 증 (RASopathy), 예를 들면 누난 증후군 (NS), CFC (cardio-facio-cutaneous) 증후군 및 유전성 치은섬유종증 1 형 등의 발병기전에 연루된다 (Pierre et al., Biochem. Pharmacol., 2011, 82(9):1049-56).

SOS1은 또한 GTPase RAC1 (Ras-관련 C3 보툴리눔 독소 기질 1)의 활성화를 위한 GEF이다 (Innocenti et al., J. Cell Biol., 2002, 156(1):125-36). RAC1은 RAS-패밀리 단백질과 같이 다양한 인간 암 및 다른 질환의 발병에 연루되어 있다 (Bid et al., Mol. Cancer Ther. 2013, 12(10):1925-34).

포유동물 세포에서 SOS1의 상동체인 SOS2는 RAS 패밀리 단백질의 활성화를 위한 GEF로도 작용한다 (Pierre et al., Biochem. Pharmacol., 2011, 82(9):1049-56; Buday et al., Biochim. Biophys. Acta., 2008, 1786(2):178-87). 마우스 녹아웃 모델로부터 공개된 데이터는 성체 마우스의 항상성에서 SOS1 및 SOS2에 대한 과다 역할을 제안한다. 마우스에서 SOS1의 생식계 녹아웃은 배아중간 수태에 치명적이지만 (Qian et al., EMBO J., 2000, 19(4):642-54), 전신 조건부 SOS1 녹아웃 성체 마우스는 살아남을 수 있다 (Baltanas et al., Mol. Cell. Biol., 2013, 33(22):4562-78). SOS2 유전자 표적화는 마우스에서 명시적인 표현형을 초래하지 않았다 (Esteban et al., Mol. Cell. Biol., 2000, 20(17):6410-3). 대조적으로, 이중 SOS1 및 SOS2 녹아웃은 성체 마우스에서 급성 치사를 초래한다 (Baltanas et al., Mol. Cell. Biol., 2013, 33(22):4562-78). 이들 공개된 데이터는 개별 SOS 이소형의 선택적 표적화 (예를 들어, 선택적 SOS1 표적화)가 SOS1/RAS 패밀리 단백질 유도 암 (또는 다른 SOS1/RAS 패밀리 단백질 병리)과 정상 세포 조직 사이의 치료 지수를 달성하기 위해 적절하게 허용될 수 있음을 시사한다.

RAS 패밀리 단백질에 대한 SOS1의 촉매 부위 결합의 선택적인 약리학적 억제는 GTP-결합 형태로 RAS-패밀리 단백질의 SOS1-매개 활성화를 방지할 것으로 예상된다. 이러한 SOS1 억제제는 결과적으로 RAS-패밀리 단백질의 하류 세포에서 신호전달 (예를 들어, ERK 인산화)을 억제할 것으로 예상된다. RAS 패밀리 단백질에 의존하는 암 세포 (예를 들어, KRAS 돌연변이체 암 세포주)에서, SOS1 억제제는 항암 효능 (예를 들어, 증식 억제, 생존, 전이 등의 억제)을 제공할 것으로 예상된다. SOS1:RAS 패밀리 단백질 결합의 억제에 대한 높은 효능 (나노몰 수준의 IC₅₀값) 및 세포에서의 ERK 인산화 (나노몰 수준의 IC₅₀ 값)는 SOS1 억제제에 바람직한 특성이다.

종양학적 표적으로서의 MEK (미토겐 활성화 단백질 키나제 키나제) 및 암 치료 옵션으로서의 MEK 억제제는 오랫동안 알려져 왔다 (예를 들어, Cheng et al., Molecules 2017, 22, 1551의 리뷰 및 거기에 인용된 저널 기사 참조).

치료제의 효능은 다른 화합물과의 조합 요법 (특히 종양학)을 사용하고/하거나 투여 일정을 개선함으로써 향상될 수 있다. 여러 치료제를 조합하는 개념이 이미 제시되고 다양한 조합 요법이 연구되고 임상 시험 중에 있지만, 암 질환, 예를 들면 고형 종양의 치료를 위해서는 더 나은 치료 결과, 유익한 효과, 우수한 효능 및/또는 조합 치료의 부작용 감소와 같이 개선된 내약성과 같은 표준 요법에 비해 이점을 나타내는 여전히 새롭고 효율적인 치료 개념이 필요하다. 특히, 예를 들어, 췌장암, 폐암 (예를 들어, NSCLC), 결장직장암 또는 담관암종과 같은 암 환자를 위한 추가 치료 옵션이 필요하다.

따라서, 본 발명의 목적은 현재 사용 및/또는 선행 기술에 공지된 치료제/치료 방법과 비교하여 특정 이점을 제공하는 조합 치료제/조합 치료 방법을 제공하는 것이다. 이러한 이점에는 생체 내 효능 (예를 들면, 개선된 임상 반응, 반응 연장, 증가된 반응 속도, 반응 기간, 질환 안정화 속도, 안정화 기간, 질환 진행으로의 시간, 무진행 생존율 (PFS) 및/ 또는 전체 생존율 (OS), 나중에 내성 발생 등), 안전하고 내약성이 높은 투여, 부작용의 빈도 및 중증도 감소가 포함될 수 있다.

이러한 맥락에서, 본 출원의 발명자들은 놀랍게도, SOS1과 RAS-패밀리 단백질 간 상호작용의 특정 억제제 (본원에서 "SOS1 억제제"로 지칭됨)를 특정 MEK (미토겐 활성화 단백질 키나제 키나제) 억제제와 사용하게 되면 SOS1 억제제 또는 MEK 억제제 단독 사용에 비해 임상 결과를 개선할 가능성이 있는 것을 발견하였다.

따라서, 본 발명은 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제의 조합 투여를 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암의 치료 및/또는 예방 방법, 및 이러한 치료제를 포함하는 의학적 용도, 사용, 약학 조성물 또는 조합물 및 키트에 관한 것이다.

추가로, 본 발명은 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제를 조합하여 사용하는 것을 포함하는 항암 요법에 관한 것이다.

종양학적 성질의 질환을 치료하기 위해, 단일 요법 또는 복수 약제를 포함하는 조합 요법 (예를 들어 이중 또는 삼중 조합 요법)으로 사용될 수 있고/거나, 방사선 요법 (예를 들어 방사선 치료), 방사선 면역 요법 및/또는 수술과 조합될 수 있는 다수의 항암제 (표적 특이적 및 비표적 특이적 항암제 포함)가 이미 제안되었다.

본 발명의 목적은 다양한 악성 종양을 치료하거나 조절하기 위해 (예를 들어, 조합에 관련된 활성 성분의 협력적, 상보적, 상호 작용적 또는 개선 효과에 기초해) 본원에 기재된 치료제와의 조합 요법을 제공하는 것이다.

발명의 상세한 설명

(의학적) 용도 - 치료 방법 - 조합물 - 조성물 - 키트

따라서, 한 측면에서 본 발명은 각각 본원에 기재된 바와 같은, 치료적 유효량의 SOS1 억제제 및 치료적 유효량의 MEK 억제제를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

이러한 조합 치료는 물질의 비고정 (예: 자유) 조합 또는 부품 키트 (kit-of parts)를 포함한 고정 조합의 형태로 제공될 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한, 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제의 조합물에 관한 것으로, 여기서 방법은 치료적 유효량의 조합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 SOS1 억제제에 관한 것으로, 여기서 방법은 SOS1 억제제를 본원에 기재된 바와 같은 MEK와 조합하여 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 MEK 억제제에 관한 것으로, 여기서 방법은 MEK 억제제를 본원에 기재된 바와 같은 SOS1와 조합하여 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은

· 본원에 기재된 SOS1 억제제, 및 임의로, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 제1 약학 조성물 또는 투여 형태, 및

· 본원에 기재된 MEK 억제제, 및 임의로, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 제2 약학 조성물 또는 투여 형태를 포함하는 키트에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은

· 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 환자에서 상기 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암의 치료 및/또는 예방에 동시, 동반, 순차, 연속, 교대 또는 개별 사용을 위한 인쇄된 설명서를 포함하는 패키지 삽입물을 추가로 포함하는 상기 언급된 키트에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 상기 언급된 키트에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은

· 본원에 기재된 SOS1 억제제,

· 본원에 기재된 MEK 억제제, 및

· 임의로, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물의 제조를 위한 본원에 기재된 SOS1 억제제의 용도에 관한 것으로, 여기서 SOS1 억제제는 본원에 기재된 MEK 억제제와 조합하여 사용된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물의 제조를 위한 본원에 기재된 MEK 억제제의 용도에 관한 것으로, 여기서 MEK 억제제는 본원에 기재된 SOS1 억제제와 조합하여 사용된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물의 제조를 위한, 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제의 용도에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한, 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제를 포함하거나, 이들로 이루어지거나 본질적으로 이루어진, 각각 본원에 기재된 바와 같은 본 발명에 따른 조합물, 약학 조성물 또는 키트에 관한 것이다.

SOS1 억제제

바람직하게는, 본 발명 내의 SOS1 억제제 및 그의 모든 실시양태 (치료 방법, (의학적) 용도, 조합물, 조성물 등 포함)는 그 개시 내용 전체가 본원에 참고로 포함되는 PCT 출원 번호 PCT/EP2018/086197 (WO 2019/122129)에 개시된 바와 같은 실시예 화합물 1-1 내지 1-179 또는 그의 염 및 본원에 개시된 [A0]으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

보다 바람직하게는, 본 발명 내의 SOS1 억제제 및 그의 모든 실시양태 (치료 방법, (의학적) 용도, 조합물, 조성물 등 포함)는 하기 특정 SOS1 억제제 또는 그의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다 (표 A) [A1]

표 A

본원에 사용된 용어 "SOS1 억제제"는 또한 호변이성질체, 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 (약학적으로 허용되는 염의 수화물 또는 용매화물 포함)의 형태로 상기 열거된 SOS1 억제제를 포함한다. 이는 또한 그의 모든 고체, 바람직하게는 결정질 형태 및 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 및 용매화물 (약학적으로 허용되는 염의 수화물 및 용매화물 포함)의 모든 결정질 형태의 SOS1 억제제를 포함한다.

상기 열거된 모든 SOS1 억제제는 PCT 출원 번호 PCT/EP2018/086197 (WO 2019/122129)에 기재되어 있으며, 그 개시내용은 전체가 참조로 포함되며, 각각의 합성 및 특성과 함께 본원에 포함된다.

일 실시양태에서 SOS1 억제제는 표 A의 화합물 1-1 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A2]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-2 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A3]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-3 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A4]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 1-21 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A5]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-52 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A6]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-53 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A7]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-54 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A8]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-55 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A9]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-58 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A10]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-77 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A11]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-82 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A12]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-97 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A13]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-98 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A14]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 I-99 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A15]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 1-102 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A16]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 A의 화합물 1-103 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [A17]이다.

모든 실시양태 [A1] 내지 [A17]은 SOS1 억제제의 성질과 관련하여 실시양태 [A0]의 바람직한 실시양태이다.

MEK 억제제

바람직하게는, 본 발명 내의 MEK 억제제 및 그의 모든 실시양태 (치료 방법, (의학적) 용도, 조합물, 조성물 등 포함)는 WO 2013/136249에 개시된 실시예 화합물 1 내지 79 또는 그의 염 및 WO 2013/136254의 실시예 화합물 1 내지 21 또는 그의 염으로 이루어진 군으로부터 선택되고, WO 2013/136249 및 WO 2013/136254의 개시내용은 그 전체가 참조로 포함되고 또한 본원에 개시된다 (표 B)[B0]:

표 B

본원에 사용된 용어 "MEK 억제제"는 또한 호변이성질체, 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 (약학적으로 허용되는 염의 수화물 또는 용매화물 포함)의 형태로 상기 열거된 MEK 억제제를 포함한다. 이는 또한 그의 모든 고체, 바람직하게는 결정질 형태 및 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 및 용매화물 (약학적으로 허용되는 염의 수화물 및 용매화물 포함)의 모든 결정질 형태의 MEK 억제제를 포함한다.

상기 열거된 모든 MEK 억제제는 각각의 합성 및 특성과 함께 WO 2013/136249 및 WO 2013/136254에 개시되어 있다.

보다 바람직하게는, 본 발명 내의 MEK 억제제 및 그의 모든 실시양태 (치료 방법, (의학적) 용도, 조합물, 조성물 등 포함)는 하기 특정 MEK1 억제제 또는 그의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다 (표 B) [B1]: 1-2, 1-5, 1-9, 1-16, 1-29, 1-35, 1-37, 1-57, 1-77, 1-78, 2-1, 2-8 , 2-11, 2-12, 2-14, 2-15, 2-17.

보다 더 바람직하게는, 본 발명 내의 MEK 억제제 및 그의 모든 실시양태 (치료 방법, (의학적) 용도, 조합물, 조성물 등 포함)는 하기 특정 MEK1 억제제 또는 그의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다 (표 B) [B2]: 1-2, 1-5, 1-9, 1-35.

일 실시양태에서 MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-2 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B3]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-5 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B4]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-9 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B5]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK1 억제제는 표 B의 화합물 1-16 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B6]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-29 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B7]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-35 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B8]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-37 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B9]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-57 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B10]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-77 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B11]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 1-78 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B12]이다.

또 다른 실시양태에서, SOS1 억제제는 표 B의 화합물 2-1 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B13]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-8 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B14]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-11 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B15]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-12 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B16]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-14 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B17]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-15 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B18]이다.

또 다른 실시양태에서, MEK 억제제는 표 B의 화합물 2-17 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 [B19]이다.

모든 실시양태 [B1] 내지 [B19]는 MEK 억제제의 성질과 관련하여 실시양태 [BO]의 바람직한 실시양태이다.

실시양태 [AO] 내지 [A17] (SOS 억제제 유형과 관련)과 실시양태 [BO] 내지 [B19] (MEK 억제제 유형과 관련)의 조합은 모두 구체적으로 개시되고 본 발명 및 사용을 위한 그의 모든 조합물, 조성물, 키트, 방법, 용도 및 화합물의 실시양태인 것으로 간주될 특정 이중 조합 또는 이중 조합의 그룹으로 이어진다.

치료에 사용하기 위해, SOS1 억제제 및 MEK 억제제는 개별적으로 또는 공동으로 동물 또는 인간에 대한 투여를 용이하게 하기에 적절한 약학 조성물에 포함된다.

SOS1 억제제 및 MEK 억제제를 개별적으로 또는 공동으로 투여하기 위한 전형적인 약학 조성물은 예를 들어 정제, 캡슐제, 좌제, 용액제, 예를 들어 주사 (s.c., i.v., i.m.) 및 주입용 용액, 엘릭시르, 에멀젼 또는 분산성 분말을 포함한다. 약학적 활성 화합물(들)의 함량은 예를 들어, 원하는 투여량 범위를 달성하기에 충분한 양으로, 전체 조성물의 0.1 내지 90 중량%, 바람직하게는 40 내지 60 중량% 범위일 수 있다. 단일 투여량은 필요한 경우 원하는 총 일일 용량을 전달하기 위해 하루에 수 회 제공될 수 있다.

전형적인 정제는 예를 들어 활성 물질(들)을 임의로 공지된 부형제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘, 셀룰로스 또는 락토스와 같은 불활성 희석제, 옥수수 전분 또는 알긴산 또는 크로스포비돈과 같은 붕해제, 전분 또는 젤라틴과 같은 결합제, 스테아르산마그네슘 또는 탈크와 같은 윤활제 및/또는 카복시메틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트 또는 폴리비닐 아세테이트와 같은 방출 지연제와 조합하여 혼합함으로써 얻을 수 있다. 정제는 예를 들면 직접 압축 또는 롤러 압축과 같은 일반적인 방법으로 제조할 수 있다. 정제는 또한 다수의 층을 포함할 수 있다.

코팅 정제는 정제와 유사하게 생성된 코어를 정제 코팅에 일반적으로 사용되는 물질, 예를 들어 콜리돈 또는 셸락, 아라비아 검, 활석, 이산화티탄 또는 당으로 코팅함으로써 제조될 수 있다. 지연 방출을 달성하거나 비호환성을 방지하기 위해, 코어는 또한 다수의 층으로 구성될 수도 있다. 유사하게, 정제 코팅은 지연 방출을 달성하기 위해 가능하게는 정제에 대해 상기 언급된 부형제를 사용하여 다수의 층으로 구성될 수 있다.

활성 물질(들)을 함유하는 시럽 또는 엘릭서는 추가로 사카린, 사이클라메이트, 글리세롤 또는 당과 같은 감미료 및 풍미 증강제, 예를 들어, 바닐린 또는 오렌지 추출물과 같은 향미제를 함유할 수 있다. 이들은 또한 소듐 카복시메틸 셀룰로스와 같은 현탁 보조제 또는 증점제, 예를 들어 지방 알콜과 에틸렌 옥사이드의 축합 생성물과 같은 습윤제, 또는 p-하이드록시벤조에이트와 같은 보존제를 함유할 수 있다.

주사 및 주입용 용액제는 통상적인 방법에 의해서, 예를 들어, 등장제, p-하이드록시벤조에이트와 같은 보존제, 또는 에틸렌디아민 테트라아세트산의 알칼리 금속염과 같은 안정화제를 첨가하고, 임의로 유화제 및/또는 분산제를 사용하여 제조되며, 물을 희석제로서 사용하는 경우, 예를 들어, 유기 용매는 임의로 용매화제 또는 용해 보조제로서 사용될 수 있고 주사용 바이알 또는 앰풀 또는 주입병으로 옮겨질 수 있다.

활성 물질(들)을 함유하는 캡슐은 예를 들어 활성 물질(들)을 락토스 또는 소르비톨과 같은 불활성 담체와 혼합하고 이를 젤라틴 캡슐에 포장함으로써 제조될 수 있다.

전형적인 좌제는 예를 들어, 활성 물질(들)을 이러한 목적으로 제공되는 담체, 예컨대 중성 지방 또는 폴리에틸렌글리콜 또는 이의 유도체와 혼합하여 제조될 수 있다.

사용될 수 있는 부형제로는, 예를 들어 물, 약학적으로 허용되는 유기 용매, 예를 들어 파라핀 (예: 석유 분획물), 식물성 오일 (예: 땅콩유 또는 참기름), 일작용성 또는 다작용성 알콜 (예: 에탄올 또는 글리세롤); 담체, 예를 들어, 천연 미네랄 분말 (예: 카올린, 점토, 탈크, 초크), 합성 미네랄 분말 (예: 고분산 규산 및 규산염), 당 (예: 사탕수수 당, 락토스 및 글루코스), 유화제 (예: 리그닌, 아황산 폐용액 (spent sulphite liquors), 메틸셀룰로스, 전분 및 폴리비닐피롤리돈) 및 윤활제 (예: 스테아르산마그네슘, 탈크, 스테아르산 및 소듐 라우릴 설페이트) 등을 들 수 있다.

본 발명의 SOS1 억제제 및 MEK 억제제 및 그의 모든 실시양태는 통상적인 방법, 바람직하게는 경구 또는 비경구 경로, 가장 바람직하게는 경구 경로로 투여된다. 경구 투여의 경우, 정제는, 위에 언급된 담체 외에도, 시트르산나트륨, 탄산칼슘 및 인산이칼슘과 같은 첨가제를 전분, 바람직하게는 감자 전분, 젤라틴 등과 같은 각종 첨가제들과 함께 포함할 수 있다. 또한, 타정 공정에서 스테아르산마그네슘, 소듐 라우릴 설페이트 및 탈크와 같은 윤활제가 동시에 사용될 수 있다. 수성 현탁액의 경우, 활성 물질은 위에 언급된 부형제 외에도 각종 풍미 증진제 또는 착색제와 배합될 수 있다.

비경구 사용을 위해, 적합한 액상 담체를 갖는 활성 물질 용액이 사용될 수 있다.

SOS1 억제제, 특히 표 A의 SOS1 억제제에 대한 경구 사용을 위한 투여량은 용량당 1 mg 내지 2000 mg (예를 들어, 용량당 10 mg 내지 1000 mg; 보다 바람직한 실시양태에서 용량당 200 mg 내지 600 mg)이며; 가장 바람직한 것은 용량당 400 mg 내지 500 mg이다. 일 실시양태에서 단일 용량은 50 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단일 용량은 100 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단일 용량은 200 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 단일 용량은 400 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단일 용량은 800 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단일 용량은 1600 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단일 용량은 2000 mg의 SOS1 억제제를 포함한다. 주어진 모든 양은 SOS1 억제제의 유리 염기를 나타내며 약학적으로 허용되는 염 또는 기타 고체 형태가 사용되는 경우 비례하여 더 높아질 수 있다.

일 실시양태에서, SOS1 억제제, 특히 표 A의 SOS1 억제제는 1일 1회 (q.d.) 투여된다.

정맥내 사용을 위한 투여량은 시간당 1 mg 내지 1000 mg, 바람직하게는 시간당 5 내지 500 mg이다.

그러나, 때로는 체중, 투여 경로, 개개인의 약물 반응, 제형의 성질, 및 약물이 투여되는 시간 또는 간격에 따라, 명시된 양에서 벗어나는 것이 필요할 수도 있다. 따라서, 일부의 경우에는 상기 제시된 최저 용량 미만을 사용하는 것으로도 충분할 수도 있고, 다른 경우에는, 상한선을 초과해야 할 수도 있다. 다량으로 투여되는 경우, 소량으로 나누어 하루에 여러 번 투여하는 것이 권장된다.

조합 요법

본 발명 내에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 방법, 용도 또는 화합물은 활성 성분 또는 구성요소의 동시 (simultaneous), 동반 (concurrent), 순차, 연속, 교대 또는 분리 투여가 구상될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제는 의존적으로 또는 독립적으로 제형화될 수 있으며, 예를 들면, SOS1 억제제 및 MEK 억제제는 동일한 약학 조성물/투여 형태의 일부로서 또는 바람직하게는 별도의 약학 조성물/투여 형태로 투여될 수 있음이 이해될 것이다.

이러한 맥락에서, 본 발명의 의미내의 "조합" 또는 "조합된"은 1종 초과의 활성 성분의 혼합 또는 조합으로 생성되는 생성물을 포함하지만 이에 한정되는 것은 아니며, 고정 및 비고정 (예를 들어, 유리) 조합 (키트 포함)과, 예를 들어, 구성요소 또는 성분의 동시적, 동반적, 순차적, 연속적, 교대적 또는 분리적 사용과 같은 사용을 모두 포함한다. "고정 조합"이라는 용어는, 활성 성분 둘 다가 단일 단위체 (entity) 또는 투약량의 형태로 환자에게 동시에 투여된다는 것을 의미한다. "비고정 조합"이라는 용어는, 활성 성분 둘 다가 어떠한 특정 시간의 제한 없이 동시에, 동반하여 또는 순차적으로 개별 단위로서 환자에게 투여된다는 것을 의미하며, 여기서, 이러한 투여는 환자의 체내에서 두 화합물의 치료적 유효 수준을 제공한다.

SOS1 억제제 및 MEK 억제제의 투여는 활성 구성요소 또는 성분을 공동 투여함으로써, 예를 들어, 이들을 1개의 단일 또는 2개 이상의 개별 제형 또는 투여 형태로 동시에 또는 동반 투여함으로써 일어날 수 있다. 대안적으로, SOS1 억제제 및 MEK 억제제의 투여는 활성 구성요소 또는 성분을, 예를 들어, 2개 이상의 개별 제형 또는 투여 형태로 순차적으로 또는 교대로 투여함으로써 일어날 수 있다.

예를 들어, 동시 투여는 실질적으로 동일 시간에 투여하는 것을 포함한다. 이러한 형태의 투여는 또한 "공동적 (concomitant)" 투여로서 지칭될 수 있다. 동반 투여는 활성제를 동일한 일반적인 기간내에, 예를 들어, 동일 날짜(들)에 투여하는 것을 포함하지만, 반드시 동시에는 아니다. 교대적 투여는, 특정 기간 동안, 예를 들어, 수일 또는 일주일 동안 하나의 제제를 투여한 후, 후속 기간 동안, 예를 들어, 수일 또는 일주일 동안 나머지 제제를 투여하고, 이어서 1 이상의 주기 동안 상기 패턴을 반복하는 것을 포함한다. 순차적 또는 연속적 투여는, 1 이상의 용량을 사용하여 제1 기간 동안 (예를 들어, 수일 또는 일주일 동안) 하나의 제제를 투여한 후, 1 이상의 용량을 사용하여 제2 및/또는 추가 기간 동안 (예를 들어, 수일 또는 일주일 동안) 나머지 제제(들)을 투여하는 것을 포함한다. 반드시 규칙적인 순서에 따르지 않고 치료 기간 동안 상이한 날에 활성제를 투여하는 것을 포함하는 중복 스케줄도 또한 사용할 수 있다. 예를 들어, 사용되는 제제 및 대상의 상태에 따라 이러한 일반적인 지침에 대한 변형이 또한 사용할 수 있다.

본 발명의 조합의 요소는 당업자에게 관례적인 방법에 의해, 예를 들어, 경구, 장, 비경구 (예를 들어, 근육내, 복강내, 정맥내, 경피 또는 피하 주사, 또는 이식), 비강, 질, 직장 또는 국소 투여 경로에 의해 (의존적으로 또는 독립적으로) 투여될 수 있으며, 단독으로 또는 함께, 각 투여 경로에 적절한 통상적인 무독성의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 함유하는 적합한 투여 단위 제형으로 제형화될 수 있다.

따라서, 본 발명의 한 측면에서, 본 발명은 치료적 유효량의 SOS1 억제제 및 치료적 유효량의 MEK 억제제를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 이때 SOS1 억제제는 MEK 억제제과 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 SOS1 억제제를 본원에 기재된 MEK 억제제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 SOS1 억제제를 제공하며, 여기서 SOS1 억제제는 MEK 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 MEK 억제제를 본원에 기재된 SOS1 억제제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 MEK 억제제를 제공하며, 여기서 MEK 억제제는 SOS1 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물의 제조를 위한 본원에 기재된 SOS1 억제제의 용도를 제공하며, 여기서 SOS1 억제제는 본원에 기재된 MEK 억제제와 조합하여 사용되며, 여기서 SOS1 억제제는 MEK 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은

· SOS1 억제제 및 임의로 하나의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 제1 약학 조성물 또는 투여 형태 및

· MEK 억제제 및 임의로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 적어도 제2 약학 조성물 또는 투여 형태를 포함하고;

상기 제1 약학 조성물 또는 투여 형태는 제2 약학 조성물 또는 투여 형태와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여되는,

본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 키트를 제공한다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 동시에 투여된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 동반 투여된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 순차적으로 투여된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 연속적으로 투여된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 교대로 투여된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, (모든 실시양태를 포함하여) 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 키트, 용도, 방법 및 화합물의 구성요소들 (즉, 조합 파트너)은 별도로 투여된다.

본 발명의 조합물은 치료적으로 유효한 단일 또는 분할 일일 용량으로 투여될 수 있다. 조합의 활성 구성요소는, 단일 요법에서 치료적으로 유효한 용량으로, 또는 단일 요법에서 사용되는 용량보다 낮거나 높지만 조합될 때 목적하는 (공동) 치료적 유효량을 생성하는 용량으로 투여될 수 있다.

각각 본원에 기재된 SOS1 억제제 및 MEK 억제제를 포함하는 본 발명 (모든 실시양태 포함)에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, (의학적) 용도, 방법 및 화합물은 임의로 하나 이상의 추가 치료제(들)를 포함할 수 있다.

종양학적 또는 과증식성 질환/암

본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 종양학적 및 과증식성 장애의 치료 및/또는 예방에 유용하다.

특정 실시양태에서, 과증식성 장애는 암이다.

암은 다음과 같이 두 가지 방식으로 분류된다: 즉, 암이 기원한 조직의 유형(조직학적 유형)과 원발성 부위 또는 암이 처음 발생한 신체의 위치. 암이 발생하는 가장 흔한 부위는 혈액 구획뿐만 아니라 피부, 폐, 유방, 전립선, 결장 및 직장, 자궁경부 및 자궁을 포함한다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 예를 들어 하기를 포함하지만 이들에 한정되지 않는 다양한 종양학적 및 과증식성 장애, 특히 암의 치료에 유용할 수 있다:

· 두경부의 암/종양/암종: 예를 들어, 비강, 부비동, 비인두, 구강 (입술, 치은, 치조 융선, 구치후 삼각, 입 바닥, 혀, 경구개, 볼 점막 포함) 또는 구강인두 (혓바닥, 편도, 편도 기둥, 연구개, 편도와, 인두벽 포함), 중이, 후두 (상문상, 성문, 성문하, 성대 포함), 하인두, 침샘 (작은 침샘 포함)의 종양/암종/암;

· 폐의 암/종양/암종: 예를 들어, 비-소세포 폐암 (non-small cell lung cancer: NSCLC) (편평 세포 암종, 방추 세포 암종, 선암종, 대세포 암종, 투명 세포 암종, 기관지 폐포), 소세포 폐암 (small cell lung cancer: SCLC) (귀리 세포 암, 중간 세포 암, 복합 귀리 세포 암);

· 종격의 신생물: 예를 들어, 신경성 종양 (신경섬유종, 신경집종, 악성 신경초종, 신경 육종, 신경절신경모세포종, 신경절신경종, 신경모세포종, 크롬친화세포종, 부신경절종 포함), 생식 세포 종양 (정상피종, 기형종, 비정상피종 포함), 흉선 종양 (흉선종, 흉선 지방종, 흉선 암종, 흉선 유암종 포함), 중간엽 종양 (섬유종, 섬유 육종, 지방종, 지방 육종, 점액종, 중피종, 평활근종, 평활근 육종, 횡문근 육종, 황색 육아종, 중간엽종, 혈관종, 혈관 내피종, 혈관주위세포종, 림프관종, 림프관주위세포종, 림프관근종 포함);

· 위장 (gastrointestinal: GI) 관의 암/종양/암종: 예를 들어, 식도, 위 (위암), 췌장, 간 및 담도계 (간세포 암종 (epatocellular carcinoma: HCC), 예를 들어, 소아 HCC, 섬유층판성 HCC, 복합 HCC, 방추 세포 HCC, 투명 세포 HCC, 거대 세포 HCC, 암육종 HCC, 경화성 HCC; 간모세포종; 담관암종; 담관 세포 암종; 간 낭선암종, 혈관 육종 (angiosarcoma), 혈관 내피종, 평활근 육종, 악성 신경초종, 섬유 육종, 담관 종양 포함), 담낭, 간외 담관, 소장 (십이지장, 공장, 회장 포함), 대장 (맹장, 결장, 직장, 항문; 대장암, 위장관 기질 종양 (gastrointestinal stroma tumor: GIST) 포함), 비뇨생식계 (신장, 예를 들어, 신우, 신세포 암종 (renal cell carcinoma: RCC), 신모세포종 (윌름스 종양), 부신종, 그라비츠 종양; 요관; 방광, 예를 들어, 요막관 암, 요로상피 암; 요도, 예를 들어, 원위, 구막양부, 전립선성; 전립선 (안드로겐 의존성, 안드로겐 비의존성, 거세 저항성, 호르몬 비의존성, 호르몬 불응성), 음경 포함)의 종양/암종/암;

· 고환의 암/종양/암종: 예를 들어, 정상피종, 비정상피종;

· 부인과 암/종양/암종: 예를 들어, 난소, 난관, 복막, 자궁 경부, 외음부, 질, 자궁체 (자궁내막, 자궁저 포함)의 종양/암종/암;

· 유방의 암/종양/암종: 예를 들어, 유방 암종 (침윤성 관, 콜로이드, 소엽 침습성, 관상, 선낭성, 유두상, 수질성, 점액성), 호르몬 수용체 양성 유방암 (에스트로겐 수용체 양성 유방암, 프로게스테론 수용체 양성 유방암), Her2 양성 유방암, 삼중 음성 유방암, 유방의 파제트병;

· 내분비계의 암/종양/암종: 예를 들어, 내분비선의 종양/암종/암, 갑상선의 종양/암종/암 (갑상선 암종/종양; 유두상, 여포성, 역형성, 수질성), 부갑상선의 종양/암종/암 (부갑상선 암종/종양), 부신 피질의 종양/암종/암 (부신 피질 암종/종양), 뇌하수체의 종양/암종/암 (프로락틴종, 두개인두종 포함), 흉선, 부신, 송과선, 경동맥체, 섬 세포 종양, 부신경절, 췌장 내분비 종양 (pancreatic endocrine tumor: PET; 비기능성 PET, PP종 (PPoma), 가스트린종, 인슐린종, VIP종 (VIPoma), 글루카곤종, 소마토스타틴종, GRF종 (GRFoma), ACTH종 (ACTHoma)), 카르시노이드 종양;

· 연조직의 육종: 예를 들어, 섬유 육종, 섬유성 조직구종, 지방 육종, 평활근 육종, 횡문근 육종, 혈관 육종 (angiosarcoma), 림프관 육종, 카포시 육종, 사구 종양, 혈관주위세포종, 윤활막 육종, 건초의 거대 세포 종양, 흉막과 복막의 고립성 섬유성 종양, 미만성 중피종, 악성 말초 신경초 종양 (malignant peripheral nerve sheath tumor: MPNST), 과립 세포 종양, 투명 세포 육종, 멜라닌 세포성 신경초종, 위장관의 자율신경 종양 (plexosarcoma), 신경모세포종, 신경절신경모세포종, 신경상피종, 골외성 유잉 육종, 부신경절종, 골외성 연골 육종, 골외성 골육종, 중간엽종, 포상 연부 육종, 상피모양 육종, 신외성 횡문성 종양, 결합조직 형성 소세포 종양;

· 뼈의 육종: 예를 들어, 골수종, 세망 세포 육종, 연골 육종 (중심성, 말초성, 투명 세포, 중간엽 연골 육종 포함), 골육종 (방골성, 골막성, 고등급 표면, 소세포, 방사선-유발성 골육종, 파제트 육종 포함), 유잉 종양, 악성 거대 세포 종양, 법랑종, (섬유성) 조직구종, 섬유 육종, 척삭종, 소원형세포 육종, 혈관 내피종, 혈관주위세포종, 골연골종, 유골 골종, 골모세포종, 호산구성 육아종, 연골모세포종;

· 중피종: 예를 들어, 흉막 중피종, 복막 중피종;

· 피부의 암: 예를 들어, 기저 세포 암종, 편평 세포 암종, 메르켈 세포 암종, 흑색종 (피부성, 표재 확산성, 악성 흑자성, 말단 흑자성, 결절성, 안구내 흑색종 포함), 광선 각화증, 눈꺼풀 암;

· 중추 신경계 및 뇌의 신생물: 예를 들어, 성상세포종 (대뇌, 소뇌, 미만성, 원섬유성, 역형성, 모양세포성, 원형질성, 팽대세포성), 교모세포종, 신경교종, 핍지교종, 핍지교성상세포종, 뇌실막세포종, 뇌실막모세포종, 맥락얼기 종양, 수모세포종, 수막종, 신경초종, 혈관모세포종, 혈관종, 혈관주위세포종, 신경종, 신경절신경종, 신경모세포종, 망막모세포종, 신경집종 (예를 들어, 청각), 척추 종양;

· 림프종 및 백혈병: 예를 들어, B-세포 비호지킨 림프종 (non-Hodgkin lymphoma: NHL) (소림프구 림프종 (small lymphocytic lymphoma: SLL), 림프형질세포모양 림프종 림프종 (lymphoplasmacytoid lymphoma: LPL), 외투 세포 림프종 (mantle cell lymphoma: MCL), 여포성 림프종 (follicular lymphoma: FL), 미만성 대세포 림프종 (diffuse large cell lymphoma: DLCL), 버킷 림프종 (Burkitt´s lymphoma: BL) 포함), T-세포 비호지킨 림프종 (역형성 대세포 림프종 (anaplastic large cell lymphoma: ALCL), 성인 T-세포 백혈병/림프종 (adult T-cell leukemia/lymphoma: ATLL), 피부 T-세포 림프종 (cutaneous T-cell lymphoma: CTCL), 말초 T-세포 림프종 (cutaneous T-cell lymphoma: PTCL) 포함), 림프아구성 T-세포 림프종 (lymphoblastic T-cell lymphoma: T-LBL), 성인 T-세포 림프종, 림프아구성 B-세포 림프종 (lymphoblastic B-cell lymphoma: B-LBL), 면역세포종, 만성 B-세포 림프구성 백혈병 (chronic B-cell lymphocytic leukemia: B-CLL), 만성 T-세포 림프구성 백혈병 (chronic T-cell lymphocytic leukemia: T-CLL) B-세포 소림프구성 림프종 (B-cell small lymphocytic lymphoma: B-SLL), 피부 T-세포 림프종 (cutaneous T-cell lymphoma: CTLC), 원발성 중추 신경계 림프종 (primary central nervous system lymphoma: PCNSL), 면역모세포종, 호지킨병 (Hodgkin's disease: HD) (결절성 림프구 우세형 HD (nodular lymphocyte predominance HD: NLPHD), 결절 경화형 HD (nodular sclerosis HD: NSHD), 혼합 세포형 HD (mixed-cellularity HD: MCHD), 림프구-풍부 클래식형 HD, 림프구-고갈형 HD (lymphocyte-depleted HD: LDHD), 거대 과립 림프구 백혈병 (large granular lymphocyte leukemia: LGL), 만성 골수성 백혈병 (chronic myelogenous leukemia: CML), 급성 골수성/골수모양 백혈병 (acute myelogenous/myeloid leukemia: AML), 급성 림프성/림프아구성 백혈병 (acute lymphatic/lymphoblastic leukemia: ALL), 급성 전골수성 백혈병 (acute promyelocytic leukemia: APL), 만성 림프구성/림프성 백혈병 (chronic lymphocytic/lymphatic leukemia: CLL), 전림프구성 백혈병 (prolymphocytic leukemia: PLL), 모발상 세포 백혈병, 만성 골수성/골수모양 백혈병 (chronic myelogenous/myeloid leukemia: CML), 골수종, 형질세포종, 다발성 골수종 (multiple myeloma: MM), 형질세포종, 골수이형성 증후군 (myelodysplastic syndromes: MDS), 만성 골수단구성 백혈병 (chronic myelomonocytic leukemia: CMML);

· 불명확한 원발 부위 (unknown primary site: CUP)의 암.

체내의 특정 위치/기원을 특징으로 하는 상기에서 언급된 모든 암/종양/암종은 원발성 종양과 이로부터 유도되는 전이성 종양 둘 다를 포함하는 것을 의미한다.

상기에서 언급된 모든 암/종양/암종은 이들의 병리조직학적 분류에 의해 추가로 구별될 수 있다:

상피암, 예를 들어, 편평 세포 암종 (squamous cell carcinoma: SCC) (제자리 암종, 표면 침습성, 사마귀모양 암종, 가성 육종, 역형성, 전이 세포, 림프상피), 선암종 (adenocarcinoma: AC) (고분화, 점액성, 유두상, 다형성 거대 세포, 관, 소세포, 반지 세포, 방추 세포, 투명 세포, 귀리 세포, 콜로이드, 선편평, 점막표피모양, 선양 낭성), 점액성 낭선암종, 세엽 세포 암종, 대세포 암종, 소세포 암종, 신경 내분비 종양 (소세포 암종, 부신경절종, 유암종); 종양세포성 암종;

비상피암, 예를 들어, 육종 (섬유 육종, 연골 육종, 횡문근 육종, 평활근 육종, 혈관 육종 (hemangiosarcoma), 거대 세포 육종, 림프 육종, 섬유성 조직구종, 지방 육종, 혈관 육종 (angiosarcoma), 림프관 육종, 신경섬유 육종), 림프종, 흑색종, 생식 세포 종양, 혈액학적 신생물, 혼합 및 미분화 암종.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 비-소세포성 폐암 (NSCLC)(예를 들어, 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC (IIIB/IV 기), NSCLC 선암종, 편평 조직이 있는 NSCLC, 비편평 조직이 있는 NSCLC 포함)을 치료하는데 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 비-소세포성 폐암 (NSCLC), 특히 NSCLC 선암종의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 결장직장암의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 췌장암의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 담관암종의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 췌장암, 폐암, 대장암, 담관암, 다발성 골수종, 흑색종, 자궁암, 자궁내막암, 갑상선암, 급성 골수성 백혈병, 방광암, 요로상피암, 위암, 자궁경부암, 두경부 편평세포암, 미만성 대형 B 세포 림프종, 식도암, 만성 림프구성 백혈병, 간세포암, 유방암, 난소암, 전립선암, 교모세포종, 신장암 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된 질환의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 바람직하게는 제1형 신경섬유종증 (NF1), 누난 증후군 (NS), 다발성 흑자를 동반한 누난 증후군 (NSML) (LEOPARD 증후군이라고도 함), 모세관 기형-동정맥 기형 증후군 (CM-AVM), 코스텔로 증후군 (Costello Syndrome: CS), 심장-얼굴-피부 증후군 (CFC), 레기우스 증후군 (NF1 유사 증후군이라고도 함) 및 유전성 치은 섬유종증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 RAS병증(RASopathy)의 치료에 사용된다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 다음과 같은 분자 특징 증 하나 이상을 나타내는 것으로 정의되는 질환/상태/암의 치료에 사용된다:

1. KRAS 변경:

a. KRAS 증폭 (야생형 또는 돌연변이);

b. KRAS 과발현 (야생형 또는 돌연변이);

c. KRAS 돌연변이(들):

i. G12 돌연변이 (예: G12C, G12V, G12S, G12A, G12V, G12R, G12F, G12D);

ii. G13 돌연변이 (예: G13C, G13D, G13R, G13V, G13S, G13A)

iii. T35 돌연변이 (예: T35I);

iv. I36 돌연변이 (예: I36L, I36M);

v. E49 돌연변이 (예: E49K);

vi. Q61 돌연변이 (예: Q61H, Q61R, Q61P, Q61E, Q61K, Q61L, Q61K);

vii. K117 돌연변이 (예: K117N);

viii. A146 돌연변이 (예: A146T, A146V);

2. NRAS 변경:

a. NRAS 증폭 (야생형 또는 돌연변이);

b. NRAS 과발현 (야생형 또는 돌연변이);

c. NRAS 돌연변이(들):

i. G12 돌연변이 (예: G12A, G12V, G12D, G12C, G12S, G12R);

ii. G13 돌연변이 (예: G13V, G13D, G13R, G13S, G13C, G13A);

iii. Q61 돌연변이 (예: Q61K, Q61L, Q61H, Q61P, Q61R);

iv. A146 돌연변이 (예: A146T, A146V);

3. HRAS 변경:

a. HRAS 증폭 (야생형 또는 돌연변이);

b. HRAS 과발현 (야생형 또는 돌연변이);

c. HRAS 돌연변이(들);

i. G12 돌연변이 (예: G12C, G12V, G12S, G12A, G12V, G12R, G12F, G12D);

ii. G13 돌연변이 (예: G13C, G13D, G13R, G13V, G13S, G13A);

iii. Q61 돌연변이 (예: Q61K, Q61L, Q61H, Q61P, Q61R);

4. EGFR 변경:

a. EGFR 증폭 (야생형 또는 돌연변이);

b. EGFR 과발현 (야생형 또는 돌연변이);

c. EGFR 돌연변이(들)

i. 예: 엑손 20 삽입, 엑손 19 결실 (Del19), G719X (예: G719A, G719C, G719S), T790M, C797S, T854A, L858R, L861Q, 또는 이들의 임의의 조합;

5. ErbB2 (Her2) 변경:

a. ErbB2 증폭;

b. ErbB2 과발현;

c. ErbB2 돌연변이(들)

i. 예: R678, G309, L755, D769, D769, V777, P780, V842, R896, c.2264_2278del (L755_T759del), c.2339_2340ins (G778_P780dup), S310;

6. c-MET 변경:

a. c-MET 증폭;

b. c-MET 과발현;

c. c-MET 돌연변이(들)

i. 예: E168, N375, Q648, A887, E908, T1010, V1088, H1112, R1166, R1188, Y1248, Y1253, M1268, D1304, A1357, P1382;

7. AXL 변경:

a. AXL 증폭;

b. AXL 과발현;

8. BCR-ABL 변경:

a. ABL 유전자 관여 염색체 재배열;

9. ALK 변경:

a. ALK 증폭;

b. ALK 과발현;

c. ALK 돌연변이(들)

i. 예: 1151Tins, L1152R, C1156Y, F1174L, L1196M, L1198F, G1202R, S1206Y, G1269A;

d. ALK 유전자 관여 염색체 재배열;

10. FGFR1 변경:

a. FGFR1 증폭;

b. FGFR1 과발현;

11. FGFR2 변경:

a. FGFR2 증폭;

b. FGFR2 과발현;

12. FGFR3 변경:

a. FGFR3 증폭;

b. FGFR3 과발현;

c. FGFR3 유전자 관여 염색체 재배열;

13. NTRK1 변경:

a. NTRK1 유전자 관여 염색체 재배열;

14. NF1 변경:

a. NF1 돌연변이(들);

b NF1 기능 돌연변이(들) 소실

c. NF1 결실(들)

15. RET 변경:

a. RET 증폭;

b. RET 과발현;

c. RET 유전자 관여 염색체 재배열

16. ROS1 변경:

a. ROS1 증폭;

b. ROS1 과발현;

c. ROS1 돌연변이(들)

i. 예: G2032R, D2033N, L2155S;

d. ROS1 유전자 관여 염색체 재배열;

17. SOS1 변경:

a. SOS1 증폭;

b. SOS1 과발현;

c. SOS1 돌연변이(들);

18. RAC1 변경:

a. RAC1 증폭;

b. RAC1 과발현;

c. RAC1 돌연변이(들);

19. MDM2 변경:

a. MDM2 증폭

b. MDM2 과발현

c. 기능성 p53과 함께 MDM2 증폭

d. 야생형 p53과 함께 MDM2 증폭

20. RAS 야생형:

a. KRAS 야생형

b. HRAS 야생형

c. NRAS 야생형

21. V600E 이외의 B-Raf 돌연변이(들)

바람직하게는, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 KRAS 돌연변이를 나타내는 것으로 정의되는 질환/상태/암의 치료에 사용된다.

특히 바람직하게는, 본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)은 다음의 치료에 사용된다:

· G12C, G12V, G12D 및 G12R로 이루어진 군으로부터 선택된 KRAS 돌연변이를 보유하는 폐 선암종;

· G12D, G12V, G12C, G12R 및 G13D로 이루어진 군으로부터 선택된 KRAS 돌연변이를 보유하는 결장직장 선암종; 및

· G12D, G12V, G12R, G12C 및 Q61H로 이루어진 군으로부터 선택된 KRAS 돌연변이를 보유하는 췌장 선암종.

본 발명에 따른 조합 요법의 치료적 적용 가능성은 환자의 1차, 2차, 3차 또는 추가 치료를 포함할 수 있다. 암은 하나 이상의 항암 치료에 대해 전이성, 재발성, 악화성, 내성 또는 불응성일 수 있다. 따라서, 환자는 치료 경험이 없을 수도 있고, 질환을 완전히 치유하지 못한 하나 이상의 항암 요법을 이전에 받았을 수도 있다.

재발 및/또는 하나 이상의 항암제 (예: 조합의 단일 성분 또는 표준 화학요법제)에 내성이 있는 환자도 본 발명에 따른 조합 치료, 예를 들어 2차 또는 3차 치료 주기 (선택적으로 하나 이상의 다른 항암제와 추가 조합)에 대해 예를 들어 추가 조합 또는 대체 치료로 치료가 가능하다.

따라서, 본 발명의 개시된 조합 요법 중 일부는 암이 재발했거나, 암이 약물 내성 또는 다제 내성이 되었거나, 암이 단일 또는 하나 이상의 항암제 (예를 들어, 조합의 단일 성분, 또는 표준 화학요법제)와의 조합의 1차, 2차 또는 그 이상의 치료로 치료되지 않은 대상을 치료하는 데 효과적이다.

초기에 항암 약물에 반응한 암은 항암 약물이 증량된 항암제의 투여에도 불구하고 암을 가진 대상을 치료하는 데 더 이상 효과적이지 않을 때 재발하여 항암 약물에 내성이 될 수 있다. 두 가지 이상의 항암제에 내성이 생긴 암을 다제내성 암이라고 한다.

따라서, 본 발명의 조합 치료의 일부 방법에서, 환자가 처음 또는 이전에 투여된 하나 이상의 약제에 대해 내성이 있거나 내성이 발생하는 경우, 2차 또는 3차 투여되는 본 발명에 따른 조합을 사용한 치료가 시작된다. 환자는 각 약제로 단일 치료 과정만 받거나 1, 2 또는 그 이상의 약제로 여러 과정을 받을 수 있다.

따라서 특정 경우, 본 발명에 따른 조합 요법은 초기 또는 추가 조합, 대체 또는 유지 치료를 포함할 수 있다.

본 발명은 본원에 기술된 특정 실시양태에 의해 범위가 제한되지 않는다. 본원에 기재된 것 이외에 본 발명의 다양한 변형이 본 개시로부터 당업자에게 명백해질 수 있다. 이러한 변형은 이어지는 청구범위에 속하는 것으로 의도된다.

정의

본원에서 달리 정의되지 않는 용어는 개시 및 문맥에 비추어 당업자들에게 자명한 의미를 가진다. 그러나, 본원에서는 달리 언급되지 않으면 다음 용어들은 명시된 의미를 가지며 다음의 관례가 적용된다:

접두사 C_x-y(여기에서, x 및 y는 각각 자연수 (x < y)를 나타낸다)는 전체로서 직접 조합에 기술되고 언급된 쇄 또는 환 구조, 또는 쇄 및 환 구조의 조합이 전체적으로 최대 y개 및 최소 x개의 탄소 원자로 구성될 수 있음을 의미한다.

하나 이상의 헤테로원자(들)를 가지는 그룹 (예를 들어 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬)내에 표시된 멤버의 수는 모든 환 멤버의 총 원자 수 또는 모든 환 및 쇄 멤버의 총 수를 가리킨다.

탄소 쇄 및 탄소 환 구조의 조합으로 구성된 그룹 (예를 들어 사이클로알킬알킬, 아릴알킬)에서 표시된 탄소 원자수는 모든 탄소 환 및 탄소 쇄 멤버의 총 탄소 원자 수를 가리킨다. 명백히, 환 구조는 적어도 3개의 멤버를 갖는다.

일반적으로, 2개 이상의 서브그룹을 포함하는 그룹 (예를 들어, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클알킬, 사이클로알킬알킬, 아릴알킬)의 경우, 마지막으로 명명된 서브그룹은 라디칼 부착점이며, 예를 들어, 치환체 아릴-C_1-6 알킬은 C_1-6 알킬 그룹에 결합된 아릴 그룹을 의미하고, C_1-6 알킬은 코어 또는 치환체가 부착된 그룹에 결합되어 있다.

HO, H₂N, (O)S, (O)₂S, NC (시아노), HOOC, F₃C 등의 그룹에서, 당업자는 그룹 자체의 자유 원자가로부터 분자에 대한 라디칼 부착점(들)을 알 수 있다.

알킬은 직쇄(비분지) 및 분지형으로 존재할 수 있는 1가의 포화 탄화수소 쇄를 나타낸다. 알킬이 치환된 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다.

용어 "C_1-5알킬"은 예를 들어 H₃C-, H₃C-CH₂-, H₃C-CH₂-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-, H₃C-CH₂-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-CH(CH₃)-, H₃C-CH(CH₃)-CH₂-, H₃C-C(CH₃)₂-, H₃C-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-CH₂-CH(CH₃)-, H₃C-CH₂-CH(CH₃)-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-C(CH₃)₂-, H₃C-C(CH₃)₂-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-CH(CH₃)- 및 H₃C-CH₂-CH(CH₂CH₃)-을 포함한다.

알킬의 추가예는 메틸 (Me; -CH₃), 에틸 (Et; -CH₂CH₃), 1-프로필 (n-프로필; n-Pr; -CH₂CH₂CH₃), 2-프로필 (i-Pr; 이소-프로필; -CH(CH₃)₂), 1-부틸 (n-부틸; n-Bu; -CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-메틸-1-프로필 (이소-부틸; i-Bu; -CH₂CH(CH₃)₂), 2-부틸 (sec-부틸; sec-Bu; -CH(CH₃)CH₂CH₃), 2-메틸-2-프로필 (tert-부틸; t-Bu; -C(CH₃)₃), 1-펜틸 (n-펜틸; -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-펜틸 (-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃), 3-펜틸 (-CH(CH₂CH₃)₂), 3-메틸-1-부틸 (이소-펜틸; -CH₂CH₂CH(CH₃)₂), 2-메틸-2-부틸 (-C(CH₃)₂CH₂CH₃), 3-메틸-2-부틸 (-CH(CH₃)CH(CH₃)₂), 2,2-디메틸-1-프로필 (네오-펜틸; -CH₂C(CH₃)₃), 2-메틸-1-부틸 (-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃), 1-헥실 (n-헥실; -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-헥실 (-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃), 3-헥실 (-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃)), 2-메틸-2-펜틸 (-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃), 3-메틸-2-펜틸 (-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃), 4-메틸-2-펜틸 (-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂), 3-메틸-3-펜틸 (-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂), 2-메틸-3-펜틸 (-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂), 2,3-디메틸-2-부틸 (-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂), 3,3-디메틸-2-부틸 (-CH(CH₃)C(CH₃)₃), 2,3-디메틸-1-부틸 (-CH₂CH(CH₃)CH(CH₃)CH₃), 2,2-디메틸-1-부틸 (-CH₂C(CH₃)₂CH₂CH₃), 3,3-디메틸-1-부틸 (-CH₂CH₂C(CH₃)₃), 2-메틸-1-펜틸 (-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃), 3-메틸-1-펜틸 (-CH₂CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃), 1-헵틸 (n-헵틸), 2-메틸-1-헥실, 3-메틸-1-헥실, 2,2-디메틸-1-펜틸, 2,3-디메틸-1-펜틸, 2,4-디메틸-1-펜틸, 3,3-디메틸-1-펜틸, 2,2,3-트리메틸-1-부틸, 3-에틸-1-펜틸, 1-옥틸 (n-옥틸), 1-노닐 (n-노닐); 1-데실 (n-데실) 등이다.

용어 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수의 포화 탄화수소 그룹을 의미하며, 여기에서는 모든 이성질체가 포함된다.

알킬이 예를 들어 C_x-y알킬아미노 또는 C_x-y알킬옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알킬에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

용어 알킬렌이 또한 알킬로부터 파생될 수 있다. 알킬렌은 알킬과 달리 2가이며, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 알킬에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 -CH₃ 및 -CH₂-, -CH₂CH₃ 및 -CH₂CH₂- 또는 >CHCH₃ 등이다.

용어 "C_1-4알킬렌"은 예를 들어 -(CH₂)-, -(CH₂-CH₂)-, -(CH(CH₃))-, -(CH₂-CH₂-CH₂)-, -(C(CH₃)₂)-, -(CH(CH₂CH₃))-, -(CH(CH₃)-CH₂)-, -(CH₂-CH(CH₃))-, -(CH₂-CH₂-CH₂-CH₂)-, -(CH₂-CH₂-CH(CH₃))-, -(CH(CH₃)-CH₂-CH₂)-, -(CH₂-CH(CH₃)-CH₂)-, -(CH₂-C(CH₃)₂)-, -(C(CH₃)₂-CH₂)-, -(CH(CH₃)-CH(CH₃))-, -(CH₂-CH(CH₂CH₃))-, -(CH(CH₂CH₃)-CH₂)-, -(CH(CH₂CH₂CH₃))-, -(CHCH(CH₃)₂)- 및 -C(CH₃)(CH₂CH₃)-을 포함한다.

알킬렌의 다른 예는 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 1-메틸에틸렌, 부틸렌, 1-메틸프로필렌, 1,1-디메틸에틸렌, 1,2-디메틸에틸렌, 펜틸렌, 1,1-디메틸프로필렌, 2,2-디메틸프로필렌, 1,2-디메틸프로필렌, 1,3-디메틸프로필렌, 헥실렌 등이다.

일반 용어 프로필렌, 부틸렌, 펜틸렌, 헥실렌 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수를 가지는 모든 가능한 이성질체를 의미하며, 즉 프로필렌은 1-메틸에틸렌을 포함하고, 부틸렌은 1-메틸프로필렌, 2-메틸프로필렌, 1,1-디메틸에틸렌 및 1,2-디메틸에틸렌을 포함한다.

알킬렌이 예를 들어 HO-C_x-y알킬렌아미노 또는 H₂N-C_x-y알킬렌옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알킬렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

알킬과 달리, 알케닐은 적어도 2개의 탄소 원자로 구성되며, 여기에서 적어도 2개의 인접 탄소 원자는 C-C 이중결합에 의해 함께 연결되며, 탄소 원자는 하나의 C-C 이중결합 부분에서만 존재할 수 있다. 적어도 2개의 탄소 원자를 가지는 상기 정의된 바와 같은 알킬에서, 인접 탄소 원자상의 두 수소 원자가 공식적으로 제거되고 자유 원자가가 포화되어 제2 결합을 형성하는 경우, 상응하는 알케닐이 생긴다.

알케닐의 예는 비닐 (에테닐), 프로프-1-에닐, 알릴 (프로프-2-에닐), 이소프로페닐, 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 2-메틸-프로프-2-에닐, 2-메틸-프로프-1-에닐, 1-메틸-프로프-2-에닐, 1-메틸-프로프-1-에닐, 1-메틸리덴프로필, 펜트-1-에닐, 펜트-2-에닐, 펜트-3-에닐, 펜트-4-에닐, 3-메틸-부트-3-에닐, 3-메틸-부트-2-에닐, 3-메틸-부트-1-에닐, 헥스-1-에닐, 헥스-2-에닐, 헥스-3-에닐, 헥스-4-에닐, 헥스-5-에닐, 2,3-디메틸-부트-3-에닐, 2,3-디메틸-부트-2-에닐, 2-메틸리덴-3-메틸부틸, 2,3-디메틸-부트-1-에닐, 헥사-1,3-디에닐, 헥사-1,4-디에닐, 펜타-1,4-디에닐, 펜타-1,3-디에닐, 부타-1,3-디에닐, 2,3-디메틸부타-1,3-디엔 등이다.

일반 용어 프로페닐, 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 부타디에닐, 펜타디에닐, 헥사디에닐, 헵타디에닐, 옥타디에닐, 노나디에닐, 데카디에닐 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수의 모든 가능한 이성질체를 의미하며, 즉 프로페닐은 프로프-1-에닐 및 프로프-2-에닐을 포함하고, 부테닐은 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 1-메틸-프로프-1-에닐, 1-메틸-프로프-2-에닐 등을 포함한다.

알케닐은 임의로 이중결합(들)에 대해 시스 또는 트랜스 또는 E 또는 Z 배향으로 존재할 수 있다.

알케닐이 예를 들어 C_x-y알케닐아미노 또는 C_x-y알케닐옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알케닐에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

알킬렌과 달리, 알케닐렌은 적어도 2개의 탄소 원자로 구성되며, 여기에서 적어도 2개의 인접 탄소 원자는 C-C 이중결합에 의해 함께 연결되며, 탄소 원자는 하나의 C-C 이중결합 부분에서만 존재할 수 있다. 적어도 2개의 탄소 원자를 가지는 상기 정의된 바와 같은 알킬렌에서, 인접 탄소 원자에서 두 수소 원자가 공식적으로 제거되고 자유 원자가가 포화되어 제2 결합을 형성하는 경우, 상응하는 알케닐렌이 생긴다.

알케닐렌의 예는 에테닐렌, 프로페닐렌, 1-메틸에테닐렌, 부테닐렌, 1-메틸프로페닐렌, 1,1-디메틸에테닐렌, 1,2-디메틸에테닐렌, 펜테닐렌, 1,1-디메틸프로페닐렌, 2,2-디메틸프로페닐렌, 1,2-디메틸프로페닐렌, 1,3-디메틸프로페닐렌, 헥세닐렌 등이다.

일반 용어 프로페닐렌, 부테닐렌, 펜테닐렌, 헥세닐렌 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수의 모든 가능한 이성질체를 의미하며, 즉 프로페닐렌은 1-메틸에테닐렌을 포함하고, 부테닐렌은 1-메틸프로페닐렌, 2-메틸프로페닐렌, 1,1-디메틸에테닐렌 및 1,2-디메틸에테닐렌을 포함한다.

알케닐렌은 임의로 이중결합(들)에 대해 시스 또는 트랜스 또는 E 또는 Z 배향으로 존재할 수 있다.

알케닐렌이 예를 들어 HO-C_x-y알케닐렌아미노 또는 H₂N-C_x-y알케닐렌옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알케닐렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

알킬과 달리, 알키닐은 적어도 2개의 탄소 원자로 구성되며, 여기에서 적어도 2개의 인접 탄소 원자는 C-C 삼중결합에 의해 함께 연결된다. 적어도 2개의 탄소 원자를 가지는 상기 정의된 바와 같은 알킬에서, 인접 탄소 원자에서 두 수소 원자가 공식적으로 제거되고 자유 원자가가 포화되어 2개의 추가 결합을 형성하는 경우, 상응하는 알키닐이 생긴다.

알키닐의 예는 에티닐, 프로프-1-이닐, 프로프-2-이닐, 부트-1-이닐, 부트-2-이닐, 부트-3-이닐, 1-메틸-프로프-2-이닐, 펜트-1-이닐, 펜트-2-이닐, 펜트-3-이닐, 펜트-4-이닐, 3-메틸-부트-1-이닐, 헥스-1-이닐, 헥스-2-이닐, 헥스-3-이닐, 헥스-4-이닐, 헥스-5-이닐 등이다.

일반 용어 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥닐, 노니닐, 데시닐 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수의 모든 가능한 이성질체를 의미하며, 즉 프로피닐은 프로프-1-이닐 및 프로프-2-이닐을 포함하고, 부티닐은 부트-1-이닐, 부트-2-이닐, 부트-3-이닐, 1-메틸-프로프-1-이닐,1-메틸-프로프-2-이닐 등을 포함한다.

탄화수소 쇄가 적어도 하나의 이중결합 및 또한 적어도 하나의 삼중 결합을 모두 가지는 경우에는, 정의에 의해 알키닐 서브그룹에 속한다.

알키닐이 예를 들어 C_x-y알키닐아미노 또는 C_x-y알키닐옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알키닐에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

알킬렌과 달리, 알키닐렌은 적어도 2개의 탄소 원자로 구성되며, 여기에서 적어도 2개의 인접 탄소 원자는 C-C 삼중 결합에 의해 함께 연결된다. 적어도 2개의 탄소 원자를 가지는 상기 정의된 바와 같은 알킬렌에서, 인접 탄소 원자에서 두 수소 원자가 공식적으로 제거되고 자유 원자가가 포화되어 2개의 추가의 결합을 형성하는 경우, 상응하는 알키닐렌이 생긴다.

알키닐렌의 예는 에티닐렌, 프로피닐렌, 1-메틸에티닐렌, 부티닐렌, 1-메틸프로피닐렌, 1,1-디메틸에티닐렌, 1,2-디메틸에티닐렌, 펜티닐렌, 1,1-디메틸프로피닐렌, 2,2-디메틸프로피닐렌, 1,2-디메틸프로피닐렌, 1,3-디메틸프로피닐렌, 헥시닐렌 등이다.

일반 용어 프로피닐렌, 부티닐렌, 펜티닐렌, 헥시닐렌 등은 추가적인 정의가 없으면 상응하는 탄소 원자수의 모든 가능한 이성질체를 의미하며, 즉 프로피닐렌은 1-메틸에티닐렌을 포함하고, 부티닐렌은 1-메틸프로피닐렌, 2-메틸프로피닐렌, 1,1-디메틸에티닐렌 및 1,2-디메틸에티닐렌을 포함한다.

알키닐렌이 예를 들어 HO-C_x-y알키닐렌아미노 또는 H₂N-C_x-y알키닐렌옥시와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 알키닐렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

헤테로원자는 산소, 질소 및 황 원자를 의미한다.

할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)은 탄화수소 쇄의 하나 이상의 수소 원자가 서로 독립적으로 동일하거나 상이할 수 있는 할로겐 원자로 대체되어 앞서 정의한 알킬 (알케닐, 알키닐)로부터 파생된다. 할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)이 추가 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다.

할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)의 예는 -CF₃, -CHF₂, -CH₂F, -CF₂CF₃, -CHFCF₃, -CH₂CF₃, -CF₂CH₃, -CHFCH₃, -CF₂CF₂CF₃, -CF₂CH₂CH₃, -CF=CF₂, -CCl=CH₂, -CBr=CH₂, -C≡C-CF₃, -CHFCH₂CH₃, -CHFCH₂CF₃ 등이다.

앞서 정의된 바와 같은 할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)로부터 용어 할로알킬렌 (할로알케닐렌, 할로알키닐렌)이 또한 파생된다. 할로알킬렌 (할로알케닐렌, 할로알키닐렌)은 할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)과 달리 2가이며, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 할로알킬 (할로알케닐, 할로알키닐)에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다.

상응하는 그룹은 예를 들어 -CH₂F 및 -CHF-, -CHFCH₂F 및 -CHFCHF- 또는 >CFCH₂F 등이다.

상응하는 할로겐-함유 그룹이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 상기 정의가 또한 적용된다.

할로겐은 불소, 염소, 브롬 및/또는 요오드 원자를 나타낸다.

사이클로알킬은 서브그룹 모노사이클릭 탄화수소 환, 바이사이클릭 탄화수소 환 및 스피로-탄화수소 환으로 구성된다. 시스템은 포화이다. 바이사이클릭 탄화수소 환에서는 2개의 환이 함께 결합하고 따라서 적어도 2개의 탄소 원자를 공통으로 가진다. 스피로-탄화수소 환에서는 하나의 탄소 원자 (스피로원자)가 두 환에 함께 속한다.

사이클로알킬이 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다. 사이클로알킬 자체가 환 시스템의 모든 적당한 위치에서 치환체로서 분자에 연결될 수 있다.

사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 바이사이클로[2.2.0]헥실, 바이사이클로[3.2.0]헵틸, 바이사이클로[3.2.1]옥틸, 바이사이클로[2.2.2]옥틸, 바이사이클로[4.3.0]노닐 (옥타하이드로인데닐), 바이사이클로[4.4.0]데실 (데카하이드로나프틸), 바이사이클로[2.2.1]헵틸 (노보닐), 바이사이클로[4.1.0]헵틸 (노카라닐), 바이사이클로[3.1.1]헵틸 (피나닐), 스피로[2.5]옥틸, 스피로[3.3]헵틸 등이다.

사이클로알킬이 예를 들어 C_x-y사이클로알킬아미노, C_x-y사이클로알킬옥시 또는 C_x-y사이클로알킬알킬에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 사이클로알킬에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

사이클로알킬의 자유 원자가가 포화되면, 알리사이클릭 그룹이 얻어진다.

따라서, 용어 사이클로알킬렌은 앞서 정의한 사이클로알킬로부터 파생된다. 사이클로알킬렌은 사이클로알킬과 달리 2가이고, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 사이클로알킬에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 사이클로헥실 및

(사이클로헥실렌)이다.

사이클로알킬렌이 예를 들어 HO-C_x-y사이클로알킬렌아미노 또는 H₂N-C_x-y사이클로알킬렌옥시에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 사이클로알킬렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

사이클로알케닐은 또한 서브그룹 모노사이클릭 탄화수소 환, 바이사이클릭 탄화수소 환 및 스피로-탄화수소 환으로 구성된다. 그러나, 시스템은 불포화이며, 즉 적어도 하나의 C-C 이중결합이 존재하나 방향족 시스템은 아니다. 상기 정의된 바와 같은 사이클로알킬에서, 인접 탄소 원자상의 두 수소 원자가 공식적으로 제거되고 자유 원자가가 포화되어 제2 결합을 형성하는 경우, 상응하는 사이클로알케닐이 생긴다.

사이클로알케닐이 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다. 사이클로알케닐 자체가 환 시스템의 모든 적당한 위치에서 치환체로서 분자에 연결될 수 있다.

사이클로알케닐의 예는 사이클로프로프-1-에닐, 사이클로프로프-2-에닐, 사이클로부트-1-에닐, 사이클로부트-2-에닐, 사이클로펜트-1-에닐, 사이클로펜트-2-에닐, 사이클로펜트-3-에닐, 사이클로헥스-1-에닐, 사이클로헥스-2-에닐, 사이클로헥스-3-에닐, 사이클로헵트-1-에닐, 사이클로헵트-2-에닐, 사이클로헵트-3-에닐, 사이클로헵트-4-에닐, 사이클로부타-1,3-디에닐, 사이클로펜타-1,4-디에닐, 사이클로펜타-1,3-디에닐, 사이클로펜타-2,4-디에닐, 사이클로헥사-1,3-디에닐, 사이클로헥사-1,5-디에닐, 사이클로헥사-2,4-디에닐, 사이클로헥사-1,4-디에닐, 사이클로헥사-2,5-디에닐, 바이사이클로[2.2.1]헵타-2,5-디에닐 (노보나-2,5-디에닐), 바이사이클로[2.2.1]헵트-2-에닐 (노보네닐), 스피로[4,5]덱-2-에닐 등이다.

사이클로알케닐이 예를 들어 C_x-y사이클로알케닐아미노, C_x-y사이클로알케닐옥시 또는 C_x-y사이클로알케닐알킬에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 사이클로알케닐에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

사이클로알케닐의 원자가가 포화이면, 불포화된 알리사이클릭 그룹이 얻어진다.

따라서, 용어 사이클로알케닐렌은 앞서 정의한 사이클로알킬로부터 파생된다. 사이클로알케닐렌은 사이클로알케닐과 달리 2가이고, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 사이클로알케닐에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 사이클로펜테닐 및

또는

(사이클로펜테닐렌) 등이다.

사이클로알케닐렌이 예를 들어 HO-C_x-y사이클로알케닐렌아미노 또는 H₂N-C_x-y사이클로알케닐렌옥시에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 사이클로알케닐렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

아릴은 적어도 하나의 방향족 카보사이클을 가지는 모노-, 바이- 또는 트리사이클릭 카보사이클을 나타낸다. 바람직하게, 이는 6개의 탄소 원자를 가지는 모노사이클릭 그룹 (페닐) 또는 9개 또는 10개의 탄소 원자를 가지는 바이사이클릭 그룹 (2개의 6-원 환 또는 5-원 환을 가지는 1개의 6-원 환)을 나타내고, 여기에서 제2 환은 또한 방향족일 수 있으나, 또한 부분 포화일 수도 있다.

아릴이 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다. 아릴 자체가 환 시스템의 모든 적당한 위치에서 치환체로서 분자에 연결될 수 있다.

아릴의 예는 페닐, 나프틸, 인다닐 (2,3-디하이드로인데닐), 인데닐, 안트라세닐, 페난트레닐, 테트라하이드로나프틸 (1,2,3,4-테트라하이드로나프틸, 테트랄리닐), 디하이드로나프틸 (1,2-디하이드로나프틸), 플루오레닐 등이다. 페닐이 가장 바람직하다.

아릴이 예를 들어 아릴아미노, 아릴옥시 또는 아릴알킬에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 아릴에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

아릴의 자유 원자가가 포화이면, 방향족 그룹이 얻어진다.

용어 아릴렌이 또한 앞서 정의한 아릴로부터 파생된다. 아릴렌은 아릴과 달리 2가이고, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 아릴에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 페닐 및

(o, m, p-페닐렌), 나프틸 및

또는

또는

등이다.

아릴렌이 예를 들어 HO-아릴렌아미노 또는 H₂N-아릴렌옥시에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 아릴렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

헤테로사이클릴은 탄화수소 환에서 하나 이상의 그룹 -CH₂-가 서로 독립적으로 그룹 -O-, -S- 또는 -NH-에 의해 대체되거나, 또는 하나 이상의 그룹 =CH-가 그룹 =N-에 의해 대체됨으로써 앞서 정의한 사이클로알킬, 사이클로알케닐 및 아릴로부터 유도되는 환 시스템을 나타내는데, 여기에서는 총 5개 이하의 헤테로원자가 존재할 수 있고, 두 산소 원자 사이 및 두 황 원자 사이 또는 하나의 산소 및 하나의 황 원자 사이에 적어도 하나의 탄소 원자가 존재하여야 하며, 환은 전체로서 화학적으로 안정성을 가져야 한다. 헤테로원자는 임의로 모든 가능한 산화 단계로 존재할 수 있다 (황 →설폭사이드 -SO-, 설폰-SO₂-; 질소 → N-옥사이드). 헤테로사이클릴에는 헤테로방향족 환이 없으며, 즉 헤테로원자는 방향족 시스템의 일부가 아니다.

사이클로알킬, 사이클로알케닐 및 아릴로부터 유도의 직접적인 결과는 헤테로사이클릴이 포화 또는 불포화 형태로 존재할 수 있는 서브그룹 모노사이클릭 헤테로환, 바이사이클릭 헤테로환, 트리사이클릭 헤테로환 및 스피로-헤테로환으로 구성될 수 있다는 것이다.

불포화란 해당 환 시스템내에 적어도 하나의 이중결합이 있으나, 헤테로방향족 시스템이 형성되지는 않음을 의미한다. 바이사이클릭 헤테로환에서 2개의 환이 함께 연결되어 적어도 2개의 (헤테로)원자를 공동으로 가진다. 스피로-헤테로환에서는 하나의 탄소 원자 (스피로원자)가 두 환에 함께 속한다.

헤테로사이클릴이 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 및/또는 질소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다. 헤테로사이클릴 자체가 환 시스템의 모든 적당한 위치를 통해 치환체로서 분자에 연결될 수 있다. 헤테로사이클릴 상의 치환체는 헤테로사이클릴 구성원의 수로 계산되지 않는다.

헤테로사이클릴의 예는 테트라하이드로푸릴, 피롤리닐, 피롤리닐, 이미다졸리디닐, 티아졸리디닐, 이미다졸닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥시라닐, 아지리디닐, 아제티디닐, 1,4-디옥사닐, 아제파닐, 디아제파닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 호모모르폴리닐, 호모피페리디닐, 호모피페라지닐, 호모티오모르폴리닐, 티오모르폴리닐-S-옥사이드, 티오모르폴리닐-S,S-디옥사이드, 1,3-디옥솔라닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, [1,4]-옥사제파닐, 테트라하이드로티에닐, 호모티오모르폴리닐-S,S-디옥사이드, 옥사졸리디노닐, 디하이드로피라졸릴, 디하이드로피롤릴, 디하이드로피라지닐, 디하이드로피리딜, 디하이드로-피리미디닐, 디하이드로푸릴, 디하이드로피라닐, 테트라하이드로티에닐-S-옥사이드, 테트라하이드로티에닐-S,S-디옥사이드, 호모티오모르폴리닐-S-옥사이드, 2,3-디하이드로아제트, 2H-피롤릴, 4H-피라닐, 1,4-디하이드로피리디닐, 8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 8-아자-바이사이클로[5.1.0]옥틸, 2-옥사-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 8-옥사-3-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 3,8-디아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 2,5-디아자-바이사이클로[2.2.1]헵틸, 1-아자-바이사이클로[2.2.2]옥틸, 3,8-디아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 3,9-디아자-바이사이클로[4.2.1]노닐, 2,6-디아자-바이사이클로[3.2.2]노닐, 1,4-디옥사-스피로[4.5]데실, 1-옥사-3,8-디아자-스피로[4.5]데실, 2,6-디아자-스피로[3.3]헵틸, 2,7-디아자-스피로[4.4]노닐, 2,6-디아자-스피로[3.4]옥틸, 3,9-디아자-스피로[5.5]운데실, 2.8-디아자-스피로[4,5]데실 등이다.

추가 예를 이하 구조에 나타내었으며, 이들은 각각 수소를 가지는 원자를 통해 부착될 수 있다 (수소 교환):

바람직하게는, 헤테로사이클릴은 4 내지 8 원의 모노사이클릭이고 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 헤테로 원자를 가진다. 피페라지닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 아제티디닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐이 바람직한 헤테로사이클릴이다.

헤테로사이클릴이 예를 들어 헤테로사이클릴아미노, 헤테로사이클릴옥시 또는 헤테로사이클릴알킬에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 헤테로사이클릴에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

헤테로사이클릴의 자유 원자가가 포화이면, 헤테로사이클릭 그룹이 얻어진다.

용어 헤테로사이클릴렌은 또한 앞서 정의한 헤테로사이클릴로부터 파생된다. 헤테로사이클릴렌은 헤테로사이클릴과 달리 2가이고, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 헤테로사이클릴에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 피페리디닐 및

또는

2,3-디하이드로-1H-피롤릴 및

또는

등이다.

헤테로사이클릴렌이 예를 들어 HO-헤테로사이클릴렌아미노 또는 H₂N-헤테로사이클릴렌옥시에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 헤테로사이클릴렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

헤테로아릴은 상응하는 아릴 또는 사이클로알킬 (사이클로알케닐)과 비교하여 하나 이상의 탄소 원자 대신 질소, 황 및 산소중에서 서로 독립적으로 선택되는 하나 이상의 동일하거나 상이한 헤테로원자를 함유하고 생성된 그룹이 화학적으로 안정하여야 하는 적어도 하나의 헤테로방향족 환을 가지는 모노사이클릭 헤테로방향족 환 또는 폴리사이클릭 환을 나타낸다. 헤테로아릴의 존재에 대한 전제조건은 헤테로원자 및 헤테로방향족 시스템이다.

헤테로아릴이 치환되는 경우, 치환은 수소를 가지는 모든 탄소 및/또는 질소 원자상에서 각 경우 일- 또는 다치환 형태로 서로 독립적으로 일어날 수 있다. 헤테로아릴 자체가 환 시스템의 모든 적당한 위치를 통해, 탄소 및 질소 모두에서 치환체로서 분자에 연결될 수 있다. 헤테로사이클릴 상의 치환체는 헤테로사이클릴 구성원의 수로 계산되지 않는다.

헤테로아릴의 예는 푸릴, 티에닐, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐, 피리딜-N-옥사이드, 피롤릴-N-옥사이드, 피리미디닐-N-옥사이드, 피리다지닐-N-옥사이드, 피라지닐-N-옥사이드, 이미다졸릴-N-옥사이드, 이속사졸릴-N-옥사이드, 옥사졸릴-N-옥사이드, 티아졸릴-N-옥사이드, 옥사디아졸릴-N-옥사이드, 티아디아졸릴-N-옥사이드, 트리아졸릴-N-옥사이드, 테트라졸릴-N-옥사이드, 인돌릴, 이소인돌릴, 벤조푸릴, 벤조티에닐, 벤족사졸릴, 벤조티아졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 인다졸릴, 이소퀴놀리닐, 퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 벤조트리아지닐, 인돌리지닐, 옥사졸로피리딜, 이미다조피리딜, 나프티리디닐, 벤족사졸릴, 피리도피리딜, 피리미도피리딜, 퓨리닐, 프테리디닐, 벤조티아졸릴, 이미다조피리딜, 이미다조티아졸릴, 퀴놀리닐-N-옥사이드, 인돌릴-N-옥사이드, 이소퀴놀릴-N-옥사이드, 퀴나졸리닐-N-옥사이드, 퀴녹살리닐-N-옥사이드, 프탈라지닐-N-옥사이드, 인돌리지닐-N-옥사이드, 인다졸릴-N-옥사이드, 벤조티아졸릴-N-옥사이드, 벤즈이미다졸릴-N-옥사이드 등이다.

바람직하게는, 헤테로아릴은 5-6 원 모노사이클릭 또는 9-10 원 바이사이클릭이며, 각각 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 가진다.

헤테로아릴이 예를 들어 헤테로아릴아미노, 헤테로아릴옥시 또는 헤테로아릴알킬에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 헤테로아릴에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

헤테로아릴의 자유 원자가가 포화이면, 헤테로방향족 그룹이 얻어진다.

용어 헤테로아릴렌은 또한 앞서 정의한 헤테로아릴로부터 파생된다. 헤테로아릴렌은 헤테로아릴과 달리 2가이고, 2개의 결합 파트너를 필요로 한다. 공식적으로, 헤테로아릴에서의 수소 원자 제거로 제2 원자가가 생성된다. 상응하는 그룹은 예를 들어 피롤릴 및

등이다.

헤테로아릴렌이 예를 들어 HO-헤테로아릴렌아미노 또는 H₂N-헤테로아릴렌옥시에서와 같이 다른 (조합) 그룹의 일부인 경우, 헤테로아릴렌에 대한 상기 정의가 또한 적용된다.

치환된이란 대상 원자에 직접 결합된 수소 원자가 다른 원자 또는 다른 원자 그룹 (치환체)으로 대체됨을 의미한다. 출발 조건 (수소 원자 수)에 따라, 하나의 원자상에서 일- 또는 다치환이 일어날 수 있다. 치환체 및 치환되는 원자의 허용 원자가가 서로 일치하고 치환으로 안정한 화합물 (즉, 예를 들면 재배열, 폐환 또는 제거에 의해 자발적으로 전환되지 않는 화합물)로 된다면, 특정 치환체로의 치환만이 가능하다.

=S, =NR, =NOR, =NNRR, =NN(R)C(O)NRR, =N₂ 등과 같은 2가 치환체는 오직 탄소 원자 상에서의 치환체일 수 있고, 반면에 2가 치환체 =O 및 =NR은 또한 황 상에서의 치환체일 수 있다. 일반적으로, 치환은 환 시스템에서만 2가 치환체로 일어날 수 있으며, 2개의 제미널 (geminal) 수소 원자, 즉 치환전에 포화되는 동일한 탄소 원자에 결합된 수소 원자의 대체를 필요로 한다. 따라서, 2가 치환체에 의한 치환은 환 시스템의 그룹 -CH₂- 또는 황 원자 (=O 만)에서만 가능하다 (=O 그룹 또는 =NR 그룹만, 1 또는 2 개의 =O 그룹, 예를 들어 하나의 =O 그룹 및 하나의 =NR 그룹이 가능, 각 그룹이 자유 전자쌍 대체)

입체화학/용매화물/수화물:

달리 특정되지 않으면, 본원 명세서 및 청구범위에서 주어진 화학식 또는 명칭은 호변이성질체 및 모든 입체, 광학 및 기하 이성질체(예를 들면, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, E/Z 이성질체 등) 및 이들의 라세메이트뿐 아니라 상이한 비율의 별개 거울상이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체의 혼합물, 또는 이성질체 및 거울상이성질체가 존재하는 상기 임의 형태의 혼합물, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염 및 예컨대 자유 화합물의 용매화물 및 수화물 또는 해당 화합물의 염의 용매화물 및 수화물을 포함하는 수화물과 같은 이들의 용매화물을 비롯한 염을 망라한다.

일반적으로, 실질적으로 순수한 입체이성질체는 당업자에게 공지된 합성 원리에 따라, 예를 들어 상응하는 혼합물을 분리하고, 입체화학적으로 순수한 출발 물질을 사용하고/거나, 입체선택적 합성에 의해 수득할 수 있다. 예를 들어 라세미 형태의 분할 또는 예를 들어 광학 활성 출발 물질로부터 출발하고/거나 키랄 시약을 사용하는 합성에 의한 것과 같이 광학 활성 형태를 제조하는 방법은 당 업계에 공지되어 있다.

본 발명의 거울상이성질체적으로 순수한 화합물 또는 중간체는 비대칭 합성을 통해, 예를 들어 공지된 방법으로 분리될 수 있는 적절한 부분입체이성질체 화합물 또는 중간체의 제조 및 후속 분리에 의해 (예를 들어 크로마토그래피 분리 또는 결정화에 의해) 및/또는 키랄 시약, 예컨대 키랄 출발 물질, 키랄 촉매 또는 키랄 보조제를 사용하여 제조할 수 있다.

또한, 키랄 정지상에서 상응하는 라세미 혼합물의 크로마토그래피 분리에 의해, 또는 적절한 분할제를 사용한 라세미 혼합물의 분할에 의해, 예를 들어 광학 활성 산 또는 염기로 라세미 화합물의 부분입체이성질체 염의 형성, 염의 후속 분할 및 염으로부터 목적 화합물의 방출에 의해, 또는 광학 활성 키랄 보조 시약으로 상응하는 라세미 화합물의 유도체화, 후속 부분입체이성질체 분리 및 키랄 보조 그룹의 제거에 의해, 또는 라세미체의 동역학적 분할 (예를 들면, 효소 분할)에 의해; 적합한 조건 하에서 거울상이성질체 결정 집단으로부터 거울상선택적 결정화에 의해, 또는 광학 활성 키랄 보조제의 존재 하에 적합한 용매로부터 (분획) 결정화에 의해, 상응하는 라세미 혼합물로부터 거울상이성질체적으로 순수한 화합물을 제조하는 방법이 당업자에게 공지되어 있다.

염: "약학적으로 허용되는"이란 문구는 본원에서 전문의의 판단 범위내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제나 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고 합당한 유익/위험비에 알맞는 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투여 형태를 가리키기 위해 사용된다.

본원에 사용된 "약학적으로 허용되는 염"은 모 화합물이 이의 산 또는 염기 염을 만들어 변형된 개시된 화합물의 유도체를 가리킨다. 약학적으로 허용되는 염의 예에는 아민과 같은 염기성 잔기의 무기산 또는 유기산 염; 카복실산과 같은 산성 잔기의 알칼리 또는 유기 염 등이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다.

예를 들어, 상기 염은 벤젠설폰산, 벤조산, 시트르산, 에탄설폰산, 푸마르산, 젠티신산, 하이드로브롬산, 염산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 4-메틸벤젠설폰산, 인산, 살리실산, 숙신산, 황산 및 타르타르산으로부터의 염을 포함한다.

추가의 약학적으로 허용되는 염은 암모니아, L-아르기닌, 칼슘, 2,2'-이미노비스에탄올, L-리신, 마그네슘, N-메틸-D-글루카민, 칼륨, 나트륨 및 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄으로부터의 양이온과 형성될 수 있다.

본 발명의 약학적으로 허용되는 염은 통상적인 화학 방법에 의해 염기성 또는 산성 부분을 가지는 모화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 자유 산 또는 염기 형태를 물 또는 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올, 또는 아세토니트릴, 또는 이들의 혼합물 등의 유기 희석제중에서 충분한 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물을 정제 또는 분리하는데 유용한 상기 언급된 것 이외의 다른 산의 염 (예를 들어, 트리플루오로 아세테이트 염) 또한 본 발명의 일부로 포함된다.

본 발명의 목적상 치료적 유효량이란 질환 증상을 없애거나, 이들 증상을 예방 또는 완화시킬 수 있거나, 또는 치료 환자의 생존을 연장하는 물질의 양을 의미한다.

RAS 패밀리 단백질은 KRAS (V-Ki-ras2 커스틴 래트 육종 바이러스 종양 유전자 동족체), NRAS (신경모세포종 RAS 바이러스 종양 유전자 동족체) 및 HRAS (하비 뮤린 육종 바이러스 종양 유전자) 및 이의 임의의 돌연변이체를 포함하도록 의도된다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)에 사용되는 모든 SOS1 억제제는 하기 화합물 (I) 또는 그의 염류에 속한다:

상기 식에서,

R¹은 R^a1이고;

R^a1은 C_1-6알킬, C_1-6할로알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, C_3-10사이클로알킬, C_4-10사이클로알케닐, 3-10 원 헤테로사이클릴, C_6-10아릴 및 5-10 원 헤테로아릴로 구성된 그룹중에서 선택되고, 여기서 C_1-6알킬, C_1-6할로알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, C_3-10사이클로알킬, C_4-10사이클로알케닐, 3-10 원 헤테로사이클릴, C_6-10아릴 및 5-10 원 헤테로아릴은 모두 하나 이상의 동일하거나 상이한 R^b1 및/또는 R^c1으로 임의로 치환되고;

각 R^b1은 독립적으로 -OR^c1, -NR^c1R^c1, 할로겐, -CN, -C(O)R^c1, -C(O)OR^c1, -C(O)NR^c1R^c1, -S(O)₂R^c1, -S(O)₂NR^c1R^c1, -NHC(O)R^c1, -N(C_1-4알킬)C(O)R^c1, -NHC(O)OR^c1 및 -N(C_1-4알킬)C(O)OR^c1로 구성된 그룹중에서 선택되고;

각 R^c1은 독립적으로 수소, C_1-6알킬, C_1-6할로알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, C_3-10사이클로알킬, C_4-10사이클로알케닐, 3-10 원 헤테로사이클릴, C_6-10아릴 및 5-10 원 헤테로아릴로 구성된 그룹중에서 선택되고, 여기서 C_1-6알킬, C_1-6할로알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, C_3-10사이클로알킬, C_4-10사이클로알케닐, 3-10 원 헤테로사이클릴, C_6-10아릴 및 5-10 원 헤테로아릴은 모두 하나 이상의 동일하거나 상이한 R^d1 및/또는 R^e1으로 임의로 치환되고;

각 R^d1은 독립적으로 -OR^e1, -NR^e1R^e1, 할로겐, -CN, -C(O)R^e1, -C(O)OR^e1, -C(O)NR^e1R^e1, -S(O)₂R^e1, -S(O)₂NR^e1R^e1, -NHC(O)R^e1, -N(C_1-4알킬)C(O)R^e1, -NHC(O)OR^e1 및 -N(C_1-4알킬)C(O)OR^e1로 구성된 그룹중에서 선택되고;

각 R^e1은 독립적으로 수소, C_1-6알킬, C_1-6할로알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, C_3-10사이클로알킬, C_4-10사이클로알케닐, 3-10 원 헤테로사이클릴, C_6-10아릴 및 5-10 원 헤테로아릴로 구성된 그룹중에서 선택되고;

R²는 수소, C_1-4알킬, C_3-6사이클로알킬, 3-6 원 헤테로사이클릴 및 할로겐으로 구성된 그룹중에서 선택되고;

R³은 수소, C_1-4알킬 및 C_1-4할로알킬로 구성된 그룹중에서 선택되고;

환 시스템 A는 C_6-10아릴, 5-10 원 헤테로아릴 및 9-10 원 바이사이클릭 헤테로사이클릴로 구성된 그룹중에서 선택되고;

p는 1, 2 또는 3을 나타내고;

각 R⁴는 독립적으로 C_1-4알킬, C_2-4알케닐, C_2-4알키닐, C_1-4할로알킬, 하이드록시-C_1-4알킬, 하이드록시-C_1-4할로알킬, C_3-6사이클로알킬, 3-6 원 헤테로사이클릴, 하이드록시-C_3-6사이클로알킬, 3-6 원 헤테로사이클릴에 의해 치환된 C_1-4할로알킬, 하이드록시로 치환된 3-6 원 헤테로사이클릴, 할로겐, -NH₂, -SO₂-C_1-4알킬 및 이가 치환체 =O로 구성된 그룹중에서 선택되고, =O는 비방향족 환에서만 치환체일 수 있다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 조합물, 조성물, 키트, 용도, 방법 및 화합물 (모든 실시양태 포함)에 사용되는 모든 SOS1 억제제는 다음과 같이 합성될 수 있다:

약어 목록

Ac 아세틸

AcCN 아세토니트릴

amphos 비스(디-tert-부틸(4-디메틸아미노페닐)포스핀)

aq. 수중, 수성

ATP 아데노신 트리포스페이트

Bn 벤질

Boc tert-부틸옥시카보닐

Bu 부틸

c 농도

Cbz 카복시벤질

CH₂Cl₂ 디클로로메탄

d 일

dba 디벤질리덴아세톤

TLC 박층 크로마토그래피

DAST 디에틸아미노 설퍼트리플루오라이드

Davephos 2-디메틸아미노-2'-디사이클로헥실아미노포스피노바이페닐

DBA 디벤질리덴 아세톤

DBU 1,8-디아자바이사이클로(5.4.0)운덱-7-엔

DCE 디클로로에탄

DCM 디클로로메탄

DEA 디에틸 아민

DEAD 디에틸 아조디카복실레이트

DIPEA N-에틸-N,N-디이소프로필아민 (휘니히(Huenig) 염기)

DMAP 4-N,N-디메틸아미노피리딘

DME 1,2-디메톡시에탄

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMSO 디메틸설폭사이드

DPPA 디페닐포스포릴아지드

dppf 1.1'-비스(디페닐포스피노)페로센

EDTA 에틸렌디아민테트라아세트산

EGTA 에틸렌글리콜테트라아세트산

eq 당량

equiv. 당량

ESI 전자 분무 이온화

Et 에틸

Et₂O 디에틸 에테르

EtOAc 에틸 아세테이트

EtOH 에탄올

h 시간

HATU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄 헥사플루오로포스페이트

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

IBX 2-요오독시 벤조산

i 이소

conc. 농축

LC 액체 크로마토그래피

LiHMDS 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드

sln. 용액

Me 메틸

MeOH 메탄올

min 분

MPLC 중압 액체 크로마토그래피

MS 질량 분석법

MTBE 메틸 tert-부틸 에테르

NBS N-브로모-숙신이미드

NIS N-요오도-숙신이미드

NMM N-메틸모르폴린

NMP N-메틸피롤리돈

NP 순상(normal phase)

n.a. 해당 없음

PBS 포스페이트-완충 염수

Ph 페닐

Pr 프로필

PTSA p-톨루엔설폰산

Py 피리딘

rac 라세믹

red. 환원

Rf (R_f) 체류 인자

RP 역상

RRLC 고속 분할 액체 크로마토그래피

rt 주변 온도

SFC 초임계 유체 크로마토그래피

S_N 친핵성 치환

TBAF 테트라부틸암모늄 플루오라이드

TBDMS tert-부틸디메틸실릴

TBME tert-부틸메틸에테르

TBTU O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄 테트라플루오로보레이트

tBu tert-부틸

TEA 트리에틸아민

temp. 온도

tert 삼차

Tf 트리플레이트

TFA 트리플루오로아세트산

THF 테트라하이드로푸란

TMS 트리메틸실릴

t_Ret. 체류 시간 (HPLC)

TRIS 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄

TsOH p-톨루엔설폰산

UPLC 초고성능 액체 크로마토그래피

UV 자외선

wt 중량

SOS1 억제제의 제조

일반사항

다른 언급이 없는 한, 모든 반응은 시중에서 입수할 수 있는 장비에서 화학 실험실에서 통상 사용되는 방법을 사용하여 실시하였다. 공기 및/또는 수분에 민감한 출발 물질은 보호 가스 하에 보관하고 상응하는 반응 및 이들을 사용하는 조작은 보호 가스 (질소 또는 아르곤) 하에서 실시하였다.

마이크로웨이브 반응은 밀폐 용기 (바람직하게는 2, 5 또는 20 mL) 내에서 바람직하게는 교반하에 Biotage제 개시제/반응기, 또는 CEM제 Explorer 또는 Anton Paar제 Synthos 3000 또는 Monowave 3000에서 수행하였다.

크로마토그래피

박층 크로마토그래피는 Merck사에서 제조한 (형광성 지시약 F-254을 포함하는) 유리 상에 미리 준비된 실리카겔 60 TLC 플레이트에서 수행하였다.

SOS1 억제제의 분취용 고압 크로마토그래피 (RP HPLC)은 Waters 제 컬럼 (제품명: SunFire™ Prep C18, OBD™ 10 ㎛, 50 x 150 mm 또는 SunFire™ Prep C18 OBD™ 5 ㎛, 30 x 50 mm 또는 XBridge™ Prep C18, OBD™ 10 ㎛, 50 x 150 mm 또는 XBridge™ Prep C18, OBD™ 5 ㎛, 30 x 150 mm 또는 XBridge™ Prep C18, OBD™ 5 ㎛, 30 x 50 mm) 및 YMC (제품명: Actus-Triart Prep C18, 5 ㎛, 30 x 50 mm)을 구비한 Agilent 또는 Gilson 시스템에서 수행하였다.

화합물 용출을 위해 상이한 구배의 H₂O/아세토니트릴이 사용되었고 Agilent 시스템에는 5% 산성 개질제 (20 mL HCOOH 대 1 L H₂O/아세토니트릴 (1/1))가 물에 첨가되었다 (산성 조건). Gilson 시스템에는 0.1% HCOOH가 물에 첨가되었다.

염기성 조건하의 크로마토그래피를 위해 H₂O/아세토니트릴 구배가 마찬가지로 이용되었으며, 이 경우에는 5% 염기성 개질제를 첨가하여 물을 알칼리성으로 만들었다 (50 g NH₄HCO₃ + 50 mL NH₃ (H₂O 중 25%)을 H₂O로 1 L가 되도록). Gilson 시스템의 경우에는 5 mL NH₄HCO₃용액 (1 L H₂O 중 158 g) 및 2 mL NH₃ (H₂O 중 28%)에 H₂O를 1 L가 되도록 채웠다.

중간체 및 SOS1 억제제의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)는 다음의 컬럼을 사용하여 JASCO SFC-시스템에서 수행하였다: Chiralcel OJ (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralpak AD (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralpak AS (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralpak IC (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralpak IA (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralcel OJ (250 x 20 mm, 5 ㎛), Chiralcel OD (250 x 20 mm, 5 ㎛), Phenomenex Lux C2 (250 x 20 mm, 5 ㎛).

중간체 및 최종 화합물의 분석 HPLC (반응 제어)는 Waters제 컬럼 (제품명: XBridge^TM C18, 2.5 ㎛, 2.1 x 20 mm 또는 XBridge^TM C18, 2.5 ㎛, 2.1 x 30 mm 또는 Aquity UPLC BEH C18, 1.7 ㎛, 2.1 x 50 mm) 및 YMC (제품명: Triart C18, 3.0 ㎛, 2.0 x 30 mm) 및 Phenomenex (제품명: Luna C18, 5.0 ㎛, 2.0 x 30 mm)을 사용하여 수행하였다. 분석 장비에는 각각 질량 검출기가 장착되어 있다.

HPLC-질량 분광법/UV-분광분석

SOS1 억제제를 특성화하기 위한 체류 시간/MS-ESI⁺는 HPLC-MS 장치 (질량 검출기를 구비한 고성능 액체 크로마토그래피)를 사용하여 얻었다. 주입 피크에서 용출하는 화합물의 체류 시간을 t_Ret. = 0.00으로 하였다.

HPLC-방법 (분취용)

분취용 HPLC1

HPLC: 333 및 334 Pumps

컬럼: Waters X-Bridge C18 OBD, 10 μm, 30 x 100 mm, Part.No. 186003930

용매: A: H₂O 중 10 mM NH₄HCO₃; B: 아세토니트릴 (HPLC 등급)

검출: UV/Vis-155

유량: 50 mL/분

구배: 0.00 - 1.50 분: 1.5% B

1.50 - 7.50 분: 변화

7.50 - 9.00 분: 100% B

분취용 HPLC2

HPLC: 333 및 334 Pumps

컬럼: Waters Sunfire C18 OBD, 10 μm, 30 x 100 mm, Part.No. 186003971

용매: A: H₂O + 0.2% HCOOH; B: 아세토니트릴 (HPLC 등급) + 0.2% HCOOH

검출: UV/Vis-155

유량: 50 mL/분

구배: 0.00 - 1.50 분: 1.5% B

1.50 - 7.50 분: 변화

7.50 - 9.00 분: 100% B

HPLC-방법 (분석용)

LCMSBAS1

HPLC: Agilent 1100 Series

MS: Agilent LC/MSD SL

컬럼: Phenomenex Mercury Gemini C18, 3 μm, 2 x 20 mm, Part.No. 00M-4439-B0-CE

용매: A: 5 mM NH₄HCO₃/H₂O 중 20 mM NH₃; B: 아세토니트릴 (HPLC 등급)

검출: MS: 양 및 음 모드

질량 범위: 120 - 900 m/z

유량: 1.00 mL/분

컬럼 온도: 40 ℃

구배: 0.00 - 2.50 분: 5% B→95% B

2.50 - 2.80 분: 95% B

2.81 - 3.10 분: 95% B→5% B

VAB

HPLC: Agilent 1100/1200 Series

MS: Agilent LC/MSD SL

컬럼: Waters X-Bridge BEH C18, 2.5 μm, 2.1 x 30 mm XP

용매: A: 5 mM NH₄HCO₃/H₂O 중 19 mM NH₃; B: 아세토니트릴 (HPLC 등급)

검출: MS: 양 및 음 모드

질량 범위: 100 - 1200 m/z

유량: 1.40 mL/분

컬럼 온도: 45 ℃

구배: 0.00 - 1.00 분: 5% B→100% B

1.00 - 1.37 분: 100% B

1.37 - 1.40 분: 100% B→5% B

RND-FA-3.5

HPLC: Agilent Infinity-1290 Series

MS: Agilent SQD-6150 (API-ES +/- 3000 V)

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1000, Scan neg 100 - 1000

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 물 중 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV 215 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.025 분 (0.5 S)

주입: 0.5 μL 주입, 플러시 포트에서 니들 세척

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 45 ℃

구배: 0.0 - 0.2 분: 2% B

0.2 - 1.5 분: 2% B→98% B

1.5 - 2.6 분: 98% B

2.6 - 2.61 분: 98% B→2% B

2.61 - 3.2 분: 2% B

GVK_LCMS_18

HPLC: Agilent Infinity-1290 Series

MS: Agilent SQD -6130 (API-ES + 3500 V/ -3000 V)

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1200, Scan neg 100 - 1200

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50mm, 1.7㎛

용리제: A: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산; B: 물 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV 215/254 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.025 분 (0.5 S)

주입: 0.5 μL 주입, 플러시 포트에서 니들 세척.

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 60 ℃

구배: 0.0 - 0.4 분: 97% B

0.4 - 2.2 분: 97% B→2% B

2.2 - 2.6 분: 2% B

2.6 - 2.61 분: 2% B→97% B

2.61 - 3.0 분: 97% B

GVK_LCMS_02

UPLC: Waters UPLC

MS: Micromass Triple quad (ESI)

모세관 전압: 3500

콘 전압: 25 - 50V

디솔베이션 가스: 600 L/h

디솔베이션 온도: 350 ℃

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1000, Scan neg 100 - 1000

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 물 중 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV-다이오드 어레이

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 분할: 1.2 nm

샘플링 속도: 10 포인트/초

주입: 0.5 μL 주입, 니들 세척

유량: 0.4 mL/분

컬럼 온도: 35 ℃

구배: 0.0 - 0.5 분: 5% B

0.5 - 2.0 분: 50% B

2.0 - 3.5 분: 100% B

3.5 - 5.0 분: 100% B→5% B

5.0 - 5.50 분: 5% B

GVK_LCMS_31

HPLC: Agilent Infinity-1290 Series

MS: Agilent-6130 사중극자 LCMS (ESI/APCI, multi-mode + 3500 V/ - 3000 V)

충전 전압: 2000

Fragmenter: 50 - 70

코로나 전압: 4 μamp

디솔베이션 온도: 300 ℃

디솔베이션 가스: 600 L/h

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1200, Scan neg 100 - 1200

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산; B: 물 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV 215 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프); UV 254 nm (밴드 폭 4, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.025 분 (0.5 S)

주입: 0.5 μL 주입, 플러시 포트에서 니들 세척

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 50 ℃

구배: 0.0 - 0.2 분: 2% A

0.2 - 2.3 분: 98% A

2.3 - 3.4 분: 98% A→2% A

3.4 - 3.41 분: 2% A

3.41 - 3.5 분: 2% A

GVK_LCMS_34

HPLC: Agilent Infinity-1290 Series

MS: Agilent-6130 사중극자 LCMS (APCI-ES + 3500 V/- 3500 V)

콘 전압: 25 - 50 V

디솔베이션 가스: 600 L/h

디솔베이션 온도: 350 ℃

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1000, Scan neg 100 - 1000

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 물 중 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV 215 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프); UV 254 nm (밴드 폭 16, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 190 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.05 분 (0.5 S)

주입: 0.5 μL 주입, 플러시 포트에서 니들 세척

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 60 ℃

구배: 0.0 - 0.4 분: 2% B

0.4 - 2.2 분: 2% B→98% B

2.2 - 2.6 분: 98% B

2.6 - 2.61 분: 98% B→2% B

2.61 - 3.0 분: 2% B

GVK_LCMS_35

UPLC: Waters Acquity UPLC H-Class System

MS: Waters SQ Detector 2 (ESI);

모세관 전압: 3.50 kV

콘 전압: 50 V

디솔베이션 가스: 750 L/h

디솔베이션 온도: 350 ℃

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1200, Scan neg 100 - 1200

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 아세토니트릴 중 0.05% 포름산; B: 물 중 0.05% 포름 산

검출 신호: UV-다이오드 어레이

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 분할: 1.2 nm

샘플링 속도: 10 포인트/초

주입: 0.5 μL 주입, 주입 전 15 초 세촉 및 주입 후 20 초 세 척

유량: 0.6 mL/분

컬럼 온도: 35 ℃

구배: 0.0 - 0.3 분: 97% B

0.3 - 2.2 분: 97% B→2% B

2.2 - 3.30 분: 2% B

3.30 - 4.50 분: 2% B→97% B

4.51 - 5.50 분: 97% B

GVK_LCMS_21

LC: Agilent Infinity 1290 series

MS: Agilent 6130 Quadruple lcms(SQ)

MSD 신호 설정: Scan pos/neg 80-1200

컬럼: Aquity BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm

용리제: A: 물 + 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 (HPLC 등급) +

0.1% 포름산

검출 신호: UV 215/254 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 스텝: 2.0 nm

피크 폭: > 0.01 분 (0.2 s)

주입: 0.5 μL 표준 주입

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 60 ℃

구배: 0.0 - 0.2 분: 3% B

0.2 - 1.5 분: 3% B→95% B

1.5 - 2.5 분: 95% B

2.5 - 2.6 분: 95% B→3% B

2.6 - 3.2 분: 3% B

GVK_LCMS_22

HPLC: Agilent Infinity-1290 Series

MS: Agilent SQD-6150 (API-ES +/- 3000 V)

MSD 신호 설정: Scan pos 100 - 1000, Scan neg 100 - 1000

컬럼: Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛

용리제: A: 물 중 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산

검출 신호: UV 215 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 오프)

스펙트럼: 범위: 200 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.025 분 (0.5 S)

주입: 0.5 μL 주입, 플러시 포트에서 니들 세척

유량: 0.8 mL/분

컬럼 온도: 45 ℃

구배: 0.0 - 0.2 분: 2% B

0.2 - 1.5 분: 2% B→98% B

1.5 - 2.6 분: 98% B

2.6 - 2.61 분: 98% B→2% B

2.61 - 3.2 분: 2% B

D_LC_SSTD

HPLC: Agilent 1100/1200 (binary Pump 1)

컬럼: (Waters) XBridge BEH C18, 30 x 3.0 mm; 2.5 ㎛

용리제: A: 물 중 0.2% 포름산; B: 아세토니트릴

검출 신호: UV 254 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 550 nm, 밴드폭 100)

스펙트럼: 범위: 190 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.01 분

주입: 1.0 μL

유량: 2.30 mL/분

컬럼 온도: 50 ℃

구배: 0.1 - 1.4 분: 97% A→100% B

1.4 - 1.6 분: 100% B

1.6 - 1.8 분: 100% B→97% A

D_LC_BSTD

HPLC: Agilent 1100/1200 (binary Pump 1)

컬럼: (Waters) XBridge BEH C18, 30 x 3.0 mm; 2.5 ㎛

용리제: A: 물 중 0.2% 암모니아 (25%); B: 아세토니트릴

검출 신호: UV 254 nm (밴드폭 4, 레퍼런스 550 nm, 밴드폭 100)

스펙트럼: 범위: 190 - 400 nm; 스텝: 2 nm

피크 폭: > 0.01 분

주입: 1.0 μL

유량: 2.00 mL/분

컬럼 온도: 50 ℃

구배: 0.1 - 1.4 분: 97% A→100% B

1.4 - 1.6 분: 100% B

1.6 - 1.8 분: 100% B→97% A

GVK_LCMS_19

RRLC: Agilent RRLC

MS: Agilent SQD

모세관 전압: 3.50 kV

콘 전압: 25 - 50 V

디솔베이션 가스: 600 L/h

디솔베이션 온도: 350 ℃

컬럼: XBridge C18, 4.6 x 75 mm, 3.5 ㎛

용리제: A: 10 mM 암모늄 아세테이트; B: 아세토니트릴

유량: 2.0 mL/분

컬럼 온도: 35 ℃

구배: [분으로의 시간/B의 %]: 0/10, 0.2/10, 2.5/75, 3.0/100, 4.8/100, 5.0/10

GVK_LCMS_41

UPLC: Waters Acquity-UPLC

MS: SQ Detector-2

모세관 전압: 3.50 kV

콘 전압: 50 V

디솔베이션 가스: 750 L/h

디솔베이션 온도: 350 ℃

컬럼: AQUITY UPLC BEH C18 1.7 ㎛, 2.1 x 50 mm

용리제: A: 아세토니트릴 중 0.07%; B: 물 중 0.07% 포름산

유량: 0.6 mL/분

컬럼 온도: 35 ℃

구배: [분으로의 시간/B의 %]: 0/97, 0.3/97, 2.2/2, 3.3/2, 4.5/2, 4.51/97

SOS1 억제제 및 중간체는 이하에 기술된 합성 방법에 의해 제조하였으며, 화학식의 치환체들은 앞서 기술한 의미를 가진다. 출발 화합물의 제법이 기술되지 않은 경우에는, 상업적으로 입수할 수 있거나, 이의 합성은 선행 기술에 기재되어 있거나, 공지된 선행 화합물 또는 본원에 기술된 방법과 유사하게 제조될 수 있으며, 즉 이들 화합물을 합성하는 것은 유기 화학자의 기술 내에 있다. 문헌에 기술된 물질들은 공개된 합성 방법에 따라 제조할 수 있다.

SOS1 억제제 (I)에 대한 일반 반응식 및 합성 경로의 개요

반응식 1:

본 발명에 따른 SOS1 억제제 (I)는 반응식 1에 도시된 합성 경로에 의해 단계적으로 제조될 수 있다.

아세탈 A-2는 상응하는 알데히드 A1의 아세탈화를 통해 제조될 수 있다.

A-7은 상이한 경로를 통해 제조될 수 있다:

하나의 접근법은 중간체 A-3 (R²의 도입)의 제공을 위해 치환되거나 비치환된 말론산 에스테르로 A-2의 친핵성 방향족 치환으로 시작한다. 중간체 A-3의 탈카복실화로 A-4를 제공하고, 이는 친핵성 방향족 치환에서 빌딩 블록 B-5로 전환된다 (하기 참조). 생성된 에스테르 A-5의 비누화 및 빌딩 블록 C-1에 의한 후속 아미드화 (R¹의 도입)에 의해 단일 단계로 중간체 A-7을 제공한다.

대안적인 접근법에서, 화합물 A-2를 치환되거나 비치환된 말론산 에스테르로 전환시킨 후 (R²의 도입) 빌딩 블록 B-5로 처리하여 (하기 참조) 단일 단계로 화합물 A-5를 제공한다. 생성된 에스테르 A-5의 비누화 및 빌딩 블록 C1에 의한 후속 아미드화 (R¹의 도입)로 중간체 A-7을 제공한다.

또 다른 경로는 A-2를 치환되거나 비치환된 말론산 에스테르로 친핵성 방향족 치환한 후 (R²의 도입) 빌딩 블록 B-5로 친핵성 방향족 치환하여 (아래 참조) 단일 단계로 화합물 A-6을 제공하는 것으로 시작한다. A-6을 A-7로 직접 전환시키는 것은 디에스테르 A-6의 비누화, 동소 탈카복실화 및 빌딩 블록 C-1에 의한 후속 아미드화 (R¹의 도입)에 의해 단일 단계로 달성될 수 있다.

최종 화합물 (I)은 아세탈 A-7의 탈보호 및 폐환에 의해 제조될 수 있다. 화합물 (I)을 반응식 1에 도시되지 않은 임의적인 단계에서 추가로 유도체화하여 (특히 R¹및 R²에서) 또 다른/추가 화합물 (I)을 수득할 수 있다.

반응식 2

대안적으로, SOS1 억제제 (I)는 반응식 2에 도시된 합성 경로로 단계적으로 제조될 수 있다.

β-옥소 디에스테르 E-1로부터 출발하여, DMF-아세탈과의 반응에 의해 수득된 중간체 E-2를 통해 상응하는 α,β-디옥소 에스테르 E-3을 제조할 수 있다. 아민 C-1으로 폐환시켜 하이드록시 피리돈 환 E-4를 얻는다. 아미드를 사용하여 하이드록시 그룹을 상응하는 설포네이트 (예를 들어 토실레이트, 트리플레이트 등, E 5)로 전환시킨 후 팔라듐 촉매화 교차 커플링으로 피리돈 아미드 E-6을 생성하고, 이차 폐환으로 목적하는 바이사이클릭 피리도피리딘-디온 스캐폴드 (E-7)를 얻는다. 이와 같이 수득된 E-7을 빌딩 블록 B-5와 반응하도록 활성화시켜 (예를 들어 헥사클로로사이클로트리포스파젠, SOCl₂, POCl₃등을 사용) 최종 화합물 (I)을 생성할 수 있다 (이는 또한 추가 단계에서 유도체화될 수 있음).

반응식 3

빌딩 블록 B-5는 반응식 3에 도시된 합성으로 시작하여 단계적으로 제조될 수 있다.

(헤테로)아릴 에틸아민계 B-5는 (헤테로)아릴브로마이드 B-1로부터 금속 촉매화 교차 커플링을 통해 상응하는 아세틸(헤테로)아릴 B-2로 전환시켜 제조될 수 있다. 키랄 설핀아미드 B-3의 형성 후 입체선택적 환원으로 B-4를 제공한다. 마지막으로 설핀아미드의 절단으로 목적하는 키랄 (헤테로)아릴 에틸아민 B-5를 제공한다.

대안적으로, 아세틸 (헤테로)아릴 B-2를 상응하는 알콜 B-6으로 거울상선택적으로 환원시킨 후, 아지드 B-7로 전환시키고, 수소화하여 키랄 빌딩 블록 B-5를 수득할 수 있다.

중간체 A-2의 합성

A-2a의 합성을 위한 실험 절차

벤젠 (1500 mL) 중 A-1a (150.00 g, 785.28 mmol, 1.0 equiv)의 교반 용액에 에틸렌 글리콜 (48.69 g, 785.28 mmol, 1.0 equiv.) 및 촉매량의 p-톨루엔설폰산 (13.51 g, 78.53 mmol, 0.1 equiv.)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 환류시켰다. 용매를 감압 하에서 증발시키고, 잔류물을 DCM으로 희석한 뒤, 중탄산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압 하에 농축시켰다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (용리제: 헥산 중 10% 에틸 아세테이트)로 추가 정제하여 목적 생성물 A-2a를 수득하였다.

하기 중간체 A-2 (표 1)를 상이한 피리미딘 A-1로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-2를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 A-3의 합성

A-3a의 합성을 위한 실험 절차

A-2a (80.00 g, 340.33 mmol, 1.0 equiv.)를 DMSO (400 mL)에 용해시키고, 탄산세슘 (220.53 g, 680.66 mmol, 2.0 equiv.) 및 디메틸 말로네이트 (49.42 g, 374.36 mmol, 1.1 equiv.)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 10 시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 빙냉수에 부었다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합쳐 0.1 N 포름산의 수용액으로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄) 감압 하에 농축시켰다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (용리제: 헥산 중 30% 에틸 아세테이트)로 추가 정제하여 목적 생성물 A-3a를 수득하였다.

하기 중간체 A-3 (표 2)을 상이한 피리미딘 A-2로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-3을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

A-3c의 합성을 위한 실험 절차

무수 DMF (300 mL) 중 2-플루오로-말론산 디메틸 에스테르 (72.30 g, 481.99 mmol, 1.1 equiv.)의 교반 용액을 5 ℃로 냉각시키고 수소화나트륨 (20.16 g , 876.35 mmol, 2.0 equiv.)으로 조금씩 처리하였다. 실온에서 10 분 동안 교반한 후, DMF (50 mL)에 용해된 A-2a (103.00 g, 438.17 mmol, 1.0 equiv.)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 2 시간 더 교반하였다. 완전 전환 후, 반응 혼합물을 빙냉수에 붓고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압 하에 농축시켰다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (용리제: 헥산 중 15% 에틸 아세테이트)로 추가 정제하여 목적 생성물 A-3c를 수득하였다 (HPLC 방법: GVK_LCMS_31; t_ret= 1.756 분; [M+H]⁺= 350).

중간체 A-4의 합성

A-4a의 합성을 위한 실험 절차

DMSO (120 mL) 중 A-3a (40.00 g, 120.95 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액을 염화리튬 (20.32 g, 483.79 mmol, 4.0 equiv.)으로 처리하고 2 시간 동안 120 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 생성된 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고 빙냉수에 부었다. 수성층을 디에틸 에테르로 추출하고, 유기층을 합쳐 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압 하에 농축시켰다. 염기성 역상 크로마토그래피 (용리제: 물 중 20% 아세토니트릴) 및 순상 (헥산 중 18% 에틸 아세테이트)로 추가 정제하여 목적 생성물 A-4a를 수득하였다.

하기 중간체 A-4 (표 3)를 상이한 피리미딘 A-3으로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-4를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 A-5의 합성

A-5a의 합성을 위한 실험 절차

A-4a (3135 mg, 11.50 mmol, 1.5 equiv.) 및 B-5a (1450 mg, 7.67 mmol, 1.0 equiv.)를 무수 DMSO (10 mL)에 용해시키고, DIPEA (2670 μL, 15.33 mmol, 2.0 equiv.)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 B-5a의 완전한 전환이 달성될 때까지 80 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 염기성 역상 크로마토그래피 (구배 용출: 물 중 25% - 65% 아세토니트릴)로 정제하여 목적 생성물 A-5a를 수득하였다.

하기 중간체 A-5 (표 4)를 상이한 피리미딘 A-4 및 아민 B-5로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-5를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

A-5v의 합성을 위한 실험 절차

무수 DMSO (4.0 mL) 중 A-2b (500 mg, 2.262 mmol, 1.0 equiv.)의 용액을 2-플루오로-말론산 디메틸 에스테르 (281 μL, 2.262 mmol, 1.0 equiv.) 및 탄산나트륨 (360 mg, 3.393 mmol, 1.5 equiv.)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 실온에서 4 일 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (627 μL, 4.524 mmol, 2.0 equiv.) 및 B-5a (642 mg, 3.393 mmol, 1.5 equiv.)를 첨가하고 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 더 교반하였다. 전환이 완료된 후, 반응을 NaHCO₃ 수용액으로 켄칭하고 수성층을 DCM으로 추출하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (Na₂SO₄) 감압 하에 농축시켰다. 염기성 역상 크로마토그래피 (구배 용출: 물 중 15% - 85% 아세토니트릴)로 추가 정제하여 목적 생성물 A-5v를 수득하였다 (HPLC 방법: VAB, t_ret = 0.945 분; [M+H] ⁺ = 430.3).

중간체 A-6의 합성

A-6a의 합성을 위한 실험 절차

A-2a (50 mg, 0.213 mmol, 1.0 equiv.)를 DMSO (0.5 mL)에 용해시키고 2 플루오로-말론산 디메틸 에스테르 (27 μL, 0.221 mmol, 1.0 equiv.) 및 탄산칼륨 (58.8 mg, 0.425 mmol, 2.0 equiv.)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 출발 혼합물의 완전한 전환이 관찰될 때까지 100 ℃에서 5 분 동안 교반하였다. 트리에틸아민 89 μL, 0.639 mmol, 3.0 equiv.) 및 B-5a (60.2 mg, 0.318 mmol, 1.5 equiv.)를 첨가하고, 반응 혼합물을 60 ℃에서 3 시간 더 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 염기성 역상 크로마토그래피 (구배 용출: 물 중 35% - 75% 아세토니트릴)로 정제하여 목적 생성물 A-6a를 수득하였다.

하기 중간체 A-6 (표 5)을 상이한 피리미딘 A-5로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-6을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 A-7의 합성

A-7a의 합성을 위한 실험 절차

A-5a (200.0 mg, 0.470 mmol, 1.0 equiv.)를 DMSO (2 mL) 및 ACN (1 mL)에 용해시켰다. 수산화나트륨 수용액 (20%, 313 μL, 1.881 mmol, 4 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 30 분 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (130 μL, 0.933 mmol, 2.0 equiv.), 1-메틸-사이클로프로필아민 하이드로클로라이드 (62.8 mg, 0.583 mmol, 1.3 equiv.) 및 HATU (266.3 mg, 0.700 mmol, 1.5 equiv.)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 완전한 전환이 관찰될 때까지 20 분 동안 교반하였다. 물을 첨가하고 혼합물을 DCM으로 희석하였다. 수성층을 DCM으로 추출하고, 유기층을 합해 황산마그네슘으로 건조시켰다. 생성된 조 생성물 A-7a는 다음 단계에서 추가 정제없이 사용될 수 있다.

하기 중간체 A-7 (표 6)을 상이한 피리미딘 A-5로부터 출발하여 다양한 아민 C-1 또는 이의 상응하는 염과 커플링시켜 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-7을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

A-7dp의 합성을 위한 실험 절차

A-6a (16.0 mg, 0.032 mmol, 1.0 equiv.)를 DMSO (1.5 mL)에 용해시켰다. 수산화나트륨 수용액 (20 %, 16 μL, 0.096 mmol, 3.0 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 30 분 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (8.5 μL, 0.061 mmol, 2.0 equiv.), 1-플루오로메틸-사이클로프로필아민 하이드로클로라이드 (4.8 mg, 0.038 mmol, 1.3 equiv.) 및 HATU (17.3 mg, 0.045 mmol, 1.5 equiv.)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 완전한 전환이 관찰될 때까지 20 분 동안 교반하였다. 물을 첨가하고 혼합물을 DCM으로 희석하였다. 수성층을 DCM으로 추출하고, 유기층을 합쳐 황산마그네슘으로 건조시켰다. 생성된 조 생성물 A-7dp는 다음 단계에서 추가 정제없이 사용될 수 있다.

하기 중간체 A-7 (표 7)을 상이한 피리미딘 A-6으로부터 출발하여 다양한 아민 C-1 또는 이의 상응하는 염과 커플링시켜 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 A-7을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 B-1의 합성

D-2a의 합성을 위한 실험 절차

DCM (200 mL) 중 D-1a (20.00 g, 172.24 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 EDCI (49.35 g, 258.37 mmol, 1.5 equiv.), 트리에틸아민 (26.14 g, 258.37 mmol, 1.5 equiv.), DMAP (0.21 g, 1.72 mmol, 0.01 equiv.) 및 N,O-디메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드 (25.20 g, 258.37 mmol, 1.5 equiv.)를 0 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 1N HCl을 반응 혼합물에 첨가하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고, 합쳐진 유기층을 포화 수성 NaHCO₃로 세척하여 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 5% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-2a를 수득하였다.

하기 중간체 D-2 (표 8)를 상이한 산 D-1로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 D-2를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

D-3a의 합성을 위한 실험 절차

THF (5 mL) 중 D-2a (150 mg, 0.942 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 3-브로모페닐마그네슘 브로마이드 (0.5 N, 2.26 mL, 1.130 mmol, 1.2 equiv)를 -15 ℃에서 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 3 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물을 첨가하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시킨 후 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (용리제: 헥산 중 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-3a를 수득하였다.

D-3b의 합성을 위한 실험 절차

무수 THF (100 mL) 중 1,3-디브로모-2-플루오로-벤젠 (15.95 g, 62.82 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬 (1.6 N, 47.1 mL, 75.36 mmol, 1.2 equiv.)을 적가하고 생성된 혼합물을 -78 ℃에서 30 분 동안 교반하였다. THF (40 mL)에 용해된 D-2b (10.00 g, 62.82 mmol, 1.0 equiv.)를 천천히 첨가하였다. 완전히 전환된 후, 포화 수성 염화암모늄을 첨가하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 10% - 20% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-3b를 수득하였다.

하기 중간체 D-3 (표 9)을 상이한 아미드 D-2로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 D-3을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

B-1a의 합성을 위한 실험 절차

DCM (1.5 L) 중 D-3d (150 g, 738.89 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 디에틸아미노설퍼 트리플루오라이드 (178.64 g, 1108.33 mmol, 1.5 equiv)를 0 ℃에서 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수를 첨가하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물 B-1a를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다.

하기 중간체 B-1 (표 10)을 상이한 브로모벤젠 D-3으로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 B-1을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

D-5a의 합성을 위한 실험 절차

DMSO (225 mL) 중 에틸 브로모디플루오로아세테이트 (126.50 g, 623 mmol, 2.5 equiv.)의 교반 용액에 구리 분말 (39.26 g, 623 mmol, 2.5 equiv)을 실온에서 첨가하였다. 1 시간 후 B-1f (75.00 g, 249.26 mmol, 1.0 equiv)를 첨가하고 생성된 혼합물을 70 ℃로 가열한 뒤 3 시간 더 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하였다. 불용물을 여과로 제거하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 10% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D4a를 수득하였다.

B-1g의 합성을 위한 실험 절차

무수 톨루엔 (1 L) 중 D-4a (100.00 g, 336.62 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (1 N, 1.34 L, 1340 mmol, 4.0 equiv)를 0 ℃에서 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 포화 수성 염화암모늄을 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피 (헥산 중 25% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-1g을 수득하였다.

D-5a의 합성을 위한 실험 절차

B-1h (480.00 g, 2274 mmol, 1.0 equiv.) 및 에탄-1,2-디티올 (213.78 g, 2274 mmol, 1.0 equiv.)을 톨루엔 (5 L)에 용해시키고, TsOH (78.24 g, 454.9 mmol, 0.2 equiv.)를 실온에서 첨가한 후, 생성된 혼합물을 24 시간 동안 가열 환류시켰다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 10% NaOH 수용액을 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-5a를 수득하였다.

B-1i의 합성을 위한 실험 절차

DCM (1.5 L) 중 1,3-디브로모-5,5-디메틸이미다졸리딘-2,4-디온 (793.8 g, 2785 mmol, 4.0 equiv.)의 교반 용액에 HF-피리딘 (70%, 800 mL, 30800 mmol, 44 equiv.)을 -70 ℃에서 첨가하였다. 이 혼합물에 DCM (0.5 L)에 용해된 D-5a (200.00 g, 696.28 mmol, 1.0 equiv.)를 적가하였다. 온도를 4 시간 동안 -60 ℃ 미만으로 유지한 다음, 생성된 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 더 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 2N NaOH 수용액 및 30% NaHSO₃수용액을 첨가하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 3% 에틸 아세테이트)로 정제하여, 목적 생성물 B-1i를 수득하였다.

B-1j의 합성을 위한 실험 절차

B-1i (140.00 g, 448.79 mmol, 1.0 equiv.)를 DCM (1.5 L)에 용해시키고 DBU (102.32 g, 673.19 mmol, 1.5 equiv.)를 0 ℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 0.5 N 수성 HCl, 물 및 염수로 세척한 후, Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하였다. 조 생성물을 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-1j를 수득하였다.

B-1k의 합성을 위한 실험 절차

아세토니트릴 (1.3 L) 중 B-1j (130.00 g, 562.68 mmol, 1.0 equiv.) 및 2-니트로벤젠설포닐 클로라이드 (124.35 g, 562.68 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 K₃PO₄ (23.86 g, 112.54 mmol, 0.2 equiv) 및 히드라진 수화물 (56.27 g, 1125.36 mmol, 2.0 equiv)을 0 ℃에서 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물을 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 5% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-1k를 수득하였다.

중간체 B-2의 합성

B-2a의 합성을 위한 실험 절차

B-1a (125.0 g, 555.54 mmol, 1.0 equiv.)를 무수 1,4-디옥산 (1.2L)에 용해시켰다. 트리에틸아민 (140.27 mL, 1388.85 mmol, 2.5 equiv.) 및 트리부틸(1-에톡시비닐)주석 (240.66 g, 666.65 mmol, 1.2 equiv.)을 첨가하고, 생성된 용액을 아르곤으로 15 분 동안 퍼지하였다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)클로라이드 (3.90 g, 5.6 mmol, 0.01 equiv.)를 첨가하고, 반응 혼합물을 오토클레이브에서 16 시간 동안 100 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 1N HCl로 처리한 뒤 16 시간 더 교반하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고, 합쳐진 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시킨 뒤, 여과하고, 감압 하에 제거하였다. 조 생성물 B-2a를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다.

하기 중간체 B-2 (표 11)를 상이한 브로모벤젠 B-1로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 B-2를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

D-6a의 합성을 위한 실험 절차

THF (800 mL) 중 B-2i (80.00 g, 368.60 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 TMS-아세틸렌 (54.31 g, 552.94 mmol, 1.5 equiv.), 트리에틸아민 (111.69 g, 1105.84 mmol, 3.0 equiv.), CuI (4.034 g, 36.86 mmol, 0.1 equiv.) 및 Pd(PPh₃)₂Cl₂ (25.88 g, 36.87 mmol, 0.1 equiv.)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16 시간 동안 가열 환류시켰다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 헥산 중 0% - 10% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-6a를 수득하였다.

B-2j의 합성을 위한 실험 절차

DCM (1.2 L) 및 메탄올 (1.2 L) 중 D-6a (60.00 g, 256.04 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 탄산칼륨 (353.87 g, 2560.38 mmol, 10.0 equiv.)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수를 첨가하고 수성층을 DCM으로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 헥산 중 20% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-2j를 수득하였다.

B-2k의 합성을 위한 실험 절차

B-2j (98.00 g, 604.34 mmol, 1.0 equiv.)를 테플론 플라스크에서 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로 프로판올 (500 mL)에 용해시켰다. HF-피리딘 (70%, 250 mL, 9625 mmol, 16 equiv.)을 첨가하고 플라스크를 밀봉하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3 일 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 포화 NaHCO₃수용액 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시킨 후 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (구배 용출: 헥산 중 0% - 20% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-2k를 수득하였다.

D-8a의 합성을 위한 실험 절차

THF (1.2 L) 중 D-7a (120.00 g, 479.98 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (1 N, 720 mL, 720.00 mmol, 1.5 equiv)를 -78 ℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 동일 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-8a를 수득하였다.

B-2l의 합성을 위한 실험 절차

아세토니트릴 (240 mL) 중 D-8a (24.00 g, 90.21 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 테트라프로필암모늄 퍼루테네이트 (3.166 g, 9.01 mmol, 0.1 당량) 및 4-메틸모르폴린 N-옥사이드 (15.83 g, 135.30 mmol, 1.5 equiv.)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 동일 온도에서 4 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 불용물을 여과로 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 5% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-2l을 수득하였다.

D-9a의 합성을 위한 실험 절차

DMSO (220 mL) 중 B-2l (22.00 g, 83.32 mmol, 1.0 equiv)의 교반 용액에 에틸 브로모디플루오로아세테이트 (50.74 g, 249.95 mmol, 3.0 equiv.) 및 구리 분말 (15.75 g, 250.00 mmol, 3.0 equiv)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃로 가열하고 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 디에틸 에테르를 첨가하였다. 불용물을 여과로 제거하고 수성층을 디에틸 에테르로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 3% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D-9a를 수득하였다.

B-2m의 합성을 위한 실험 절차

D-10a (20.00 g, 121.98 mmol, 1.0 equiv.) 및 2,2,2-트리플루오로에틸 요오다이드 (51.23 g, 243.95 mmol, 2.0 equiv.)를 아르곤 분위기 하에서 THF (200 mL) 중 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐 (7.819 g, 8.54 mmol, 0.1 equiv.), xantphos (7.05 g, 12.20 mmol, 0.1 equiv.) 및 탄산세슘 (118.93 g, 365.94 mmol, 3.0 equiv.)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1 분 동안 교반한 다음 밀봉된 튜브에서 12 시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 생성물 B-2m을 수득하였다.

중간체 B-3의 합성

B-3a의 합성을 위한 실험 절차

B-2a (170.00 g, 903.53 mmol; 1.0 equiv.)를 THF (1.7 L)에 용해시켰다. (R)-(+)-2-메틸-2-프로판설핀아미드 (164.13 g; 1355.33 mmol; 1.5 equiv.) 및 티타늄 테트라에톡사이드 (618.03 g, 2710.66 mmol; 3.0 equiv.)를 실온에서 첨가하고, 생성된 반응 혼합물 16 시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물 B-3a를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다.

하기 중간체 B-3 및 D-10 (표 12)을 상이한 아세토페논 B-2 및 D-9로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 B-4의 합성

B-4a의 합성을 위한 실험 절차

B-3a ((170.00 g, 583.53 mmol; 1.0 equiv.) 용액을 THF (1.7 L)에 용해시키고 0 ℃로 냉각시켰다. 소듐 보로하이드라이드 (21.59 g; 583.51 mmol; 1.0 equiv.)를 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 33% 에틸 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 B-4a를 수득하였다.

하기 중간체 B-4 (표 13)를 상이한 설핀아미드 B-3으로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 B-4를 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

B-4n의 합성을 위한 실험 절차

D-11a (26.00 g, 71.55 mmol; 1.0 equiv.) 용액을 -78 ℃로 냉각시킨 THF (260 mL) 및 물 (5 mL)에 용해시켰다. 소듐 보로하이드라이드 (8.156 g; 214.63 mmol; 3.0 equiv.)를 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 실온으로 가온한 후 4 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 빙수 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 생성물 B-4n을 수득하였다.

B-4o의 합성을 위한 실험 절차

THF (50 mL) 중 B-4n (5.00 g, 15.46 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 탄산세슘 (15.12 g, 46.38 mmol, 3.0 equiv.) 및 18-크라운-6 (2.04 g, 7.73 mmol, 0.5 equiv.)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16 시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 80% EtOAc) 및 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 생성물 B-4o를 수득하였다.

B-4p의 합성을 위한 실험 절차

THF (10 mL) 중 B-4n (1.00 g, 3.09 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 포타슘 tert-부톡사이드 (0.52 g, 4.64 mmol, 1.5 equiv.) 및 18-크라운-6 (2.04 g, 7.73 mmol, 0.5 equiv.)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16 시간 동안 80 ℃로 가온하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물 및 EtOAc를 첨가하고 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 HPLC로 정제하여 목적 생성물 B-4p를 수득하였다.

중간체 B-6의 합성

B-6a의 합성을 위한 실험 절차

아세토페논 B-2n (5.00 g, 24.3 mmol, 1.0 equiv.)을 톨루엔 (15 mL) 및 2-메틸테트라하이드로푸란 (5.0 mL)에 용해시켰다. 소듐 tert-아밀레이트 (281 μL, 톨루엔 중 50%, 1.21 mmol, 5 mol%)를 첨가하고 반응 혼합물을 Ar 분위기로 퍼지하였다. 반응 혼합물에 (R)-RUCY-Xyl-BINAP (58.0 mg, 49.0 μmol, 0.2 mol%)를 첨가하였다. 반응 혼합물에 수소 분위기 (3 bar)를 채우고 B-2n의 완전한 전환이 달성될 때까지 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 반응물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고 물 (1 × 50 mL), 수성 HCl (1 × 10 mL, 1.0 M) 및 물 (1 × 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과하고 진공 중에서 농축시켜 목적 생성물을 수득하였다.

하기 중간체 B-6 (표 14)을 상이한 아세토페논 B-2로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

중간체 B-5의 합성

B-5a의 합성을 위한 실험 절차

1,4-디옥산 (100 mL) 중 B-4a (13.20 g, 45.00 mmol; 1.0 equiv.)의 용액을 0 ℃로 냉각시키고 1,4-디옥산 중 4N HCl (50.00 mL, 200.00 mmol, 4.4 equiv.)로 처리하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 침전물을 여과하고 디에틸 에테르로 세척하여 HCl 염으로서 목적 생성물 B-5a를 수득하였다.

하기 벤질 아민 B-5 (표 15)을 상이한 설핀아미드 B-4로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 B-5를 크로마토그래피에 의해 정제하고 HCl 염으로 분리하였다.

B-5k의 합성을 위한 실험 절차 (대안)

알콜 B-6a (2.00 g, 9.61 mmol, 1.0 equiv.)를 무수 톨루엔 (20 mL)에 용해시켰다. 이어 디아자바이사이클로운데센 (1.73 mL, 11.5 mmol, 1.2 equiv.) 및 디페닐포스폰산 아지드 (2.28 mL, 10.6 mmol, 1.1 equiv.)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 B-6a의 완전한 전환이 달성될 때까지 40 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 유기층을 Na₂CO₃ 수용액 (2 × 10 mL)으로 세척하였다. 이렇게 하여 얻은 아지드 B-7a를 분리 없이 다음 단계에서 직접 전환시켰다. Pd/C (200 mg, 10% w/w, 10% Pd)를 유기층에 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂ 분위기 (10 bar)로 채우고 B-7a의 완전한 전환이 달성될 때까지 24 시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 휘발물을 진공 중에서 제거하였다. 잔류물을 tert-부틸 에테르 (30 mL)에 용해시키고 디옥산 중의 HCl (4.8 mL, 4 M)로 처리하였다. 백색 침전물을 여과하고, tert-부틸 에테르 (20 mL)로 세척한 후, 진공 중에서 추가로 건조시켜 목적 생성물 B-5k를 제공하였다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

하기 중간체 B-5 (표 16)를 상이한 알콜 B-6으로부터 출발하여 아지드 B-7을 거쳐 유사한 방식으로 수득할 수 있다.

중간체 C-1의 합성

D-13a의 합성을 위한 실험 절차

DCM (100 mL) 중 D-12a (6.50 g, 35.093 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 디에틸아미노설퍼 트리플루오라이드 (8.48 g, 52.67 mmol, 1.5 equiv)를 0 ℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 천천히 실온으로 가온하고 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 포화 NaHCO₃ 수용액을 첨가하였다. 수성층을 DCM으로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔상에서 크로마토그래피 (구배 용출: 석유 에테르 중 0% - 12% 아세테이트)로 정제하여 목적 생성물 D13a를 수득하였다.

C-1a의 합성을 위한 실험 절차

1,4-디옥산 (5.0 mL) 중 D-13a (2.40 g, 11.582 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 1,4-디옥산 중 4N HCl (10 mL, 40.00 mmol, 3.5 당량)을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. n-펜탄을 조 생성물에 첨가하였다. 고체 물질을 여과하고 n-펜탄으로 세척하여 목적 생성물 C-1a를 HCl 염으로서 수득하였다.

D-15a의 합성을 위한 실험 절차

아미노산 D-14a (2.00 g, 19.7 mmol, 1.0 equiv.) 및 프탈산 무수물 (2.92 g, 19.7 mmol, 1.0 equiv.)을 아세트산 (20 mL)에 현탁시켰다. 반응 혼합물을 환류시키고, 얻은 용액을 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시켰고 이동안 생성물 D-15a가 결정화되었다. 물 (20 mL)을 첨가하고 반응 혼합물을 이 온도에서 1 시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척한 후, 진공 중에서 추가 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하였다 (t_ret = 1.03 분; [M-H]⁺ = 230.0; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

D-16a의 합성을 위한 실험 절차

산 D-15a (2.00 g, 8.6 mmol, 1.0 equiv.)를 톨루엔 (10 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드 (0.1 mL)에 현탁시켰다. 티오닐 클로라이드 (1.08 g, 9.1 mmol, 1.05 equiv.)를 실온에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 환류로 설정하고, 얻은 용액을 D-15a의 완전한 전환이 달성될 때까지 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다 (벤질아민으로 켄칭). 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고 이동안 생성물 D-16a가 결정화되었다. 헵탄 (10 mL)을 첨가하고 반응 혼합물을 5 ℃로 추가 냉각시킨 뒤 이 온도에서 1 시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척한 후 진공 중에서 추가 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하였다 (t_ret = 1.27 분; [M+H]⁺ = 246/247/248; 벤질 아민으로 켄칭 후 벤질 아미드로서 HPLC 방법 D_LC_SSTD; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.70-1.85 (m, 2 H), 2.10-2.31 (m, 2 H), 7.64-8.11 (m, 4 H).

D-17a의 합성을 위한 실험 절차

아실 클로라이드 D-16a (2.00 g, 8.0 mmol, 1.0 equiv.) 및 10% Pd/C (건조, 100 mg, 5% w/w)를 테트라하이드로푸란 (12 mL) 및 2,6-루티딘 (1.03 g, 9.6 mmol, 1.2 equiv.)에 현탁시켰다. 반응 혼합물을 3 bar 및 30 ℃에서 수소화시켰다. 20 시간 후, 추가의 촉매를 첨가하고 (25 mg), 24 시간 더 수소화를 계속하였다. 이 시간 후, 반응 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔과 NaHCO₃ 수용액 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리하여 NaHCO₃용액으로 다시 세척하고 마지막으로 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압 하에 농축시켰다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하였다 (t_ret = 1.26 분; [M+H]⁺ = 216; HPLC 방법 D_LC_BSTD).

D-18a의 합성을 위한 실험 절차

알데히드 D-17a (2.00 g, 9.3 mmol, 1.0 equiv.)를 디클로로메탄 (12 mL)에 용해시키고, 비스(2-메톡시에틸)아미노설퍼 트리플루오라이드 (9.90 g, 22.3 mmol, 2.4 equiv.)의 50% 톨루엔 용액을 실온에서 천천히 첨가하였다. 2 일간 교반을 수행한 후, 반응 혼합물을 NaHCO₃ 수용액으로 주의하여 처리하고 추가의 디클로로메탄 (15 mL)으로 처리하였다. 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압 하에 농축시켰다. 필요하면 조 생성물 D-18a를 크로마토그래피 또는 결정화에 의해 추가로 정제하였다 (t_ret = 1.24 분; [M+H]⁺ = 238; HPLC 방법 D_LC_SSTD). (D-17a의 전환에 사용되는 가능한 대안적인 불소화제는 예를 들어 (디에틸아미노)디플루오로설포늄 테트라플루오로보레이트 및 사불화황이다)

C-1a의 합성을 위한 실험 절차

이미드 D-18a (15.0 g, 63.2 mmol, 1.0 equiv.)를 N-(2-하이드록시에틸)에틸렌디아민 (45 mL)에 현탁시키고 혼합물을 80 ℃로 가열하였다. 이 온도에서 2 시간 후, 반응 혼합물을 40 ℃로 냉각시키고 메탄올 (30 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 다시 80 ℃로 가열하고 생성물 C-1a를 60-70 ℃ 및 대기압에서 메탄올 용액으로서 증류 제거하였다. 메탄올 첨가 및 증류 단계를 2 회 반복하였다. 생성물 C-1a는 다음 단계에서 메탄올 용액으로서 직접 사용될 수 있다 (¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ (ppm) = 0.44-0.81 (m, 4 H), 5.64 (t, J = 57.1 Hz, 1 H). δ (ppm) = 3.18 (d, 3H), 4.08 (q, 1H)에서의 메탄올 양성자는 보고되지 않음)

D-20a의 합성을 위한 실험 절차

DCM (50 mL) 중 D-19a (5.00 g, 58.08 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 (S)-(-)-1-페닐에틸아민 (6.21 g, 58.08 mmol, 1.0 equiv) 및 황산마그네슘 (13.94 g, 116.16 mmol, 2.0 equiv.)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 불용물을 여과로 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물 D-20a를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다.

D-21a 및 D-21b의 합성을 위한 실험 절차

아세토니트릴 (80 mL) 및 DMF (8 mL) 중 D-20a (8.00 g, 42.27 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 불화수소칼륨 (2.64 g, 33.85 mmol, 0.8 equiv) 및 트리플루오로아세트산 (5.30 g, 46.49 mmol, 1.1 equiv)을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 10 분 동안 교반한 다음, 트리메틸-트리플루오로메틸-실란 (9.02 g, 63.43 mmol, 1.5 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온하여 16 시간 더 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 추출한 다음, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고 Na₂SO₄상에서 건조시킨 뒤 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 SFC로 정제하여 목적 생성물 D-21a 및 D-21b를 수득하였다.

C-1b의 합성을 위한 실험 절차

D-21a (2.00 g, 7.714 mmol, 1.0 equiv.)를 메탄올 중 3N HCl (6.00 mL, 18.00 mmol, 2.3 당량)에 용해시키고, 실온에서 5 분 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 생성된 고체 물질을 메탄올 (20 mL)에 용해시켰다. 알루미나상의 팔라듐 (10 wt-%, 200.00 mg, 0.188 mmol, 0.025 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 완전이 전환된 후, 불용물을 여과로 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켰다. 디에틸 에테르를 조 생성물에 첨가하였다. 고체 물질을 여과하고 디에틸 에테르로 세척하여 목적 생성물 C-1b를 HCl 염으로서 수득하였다.

하기 아민 C-1 (표 17)을 상이한 중간체 D-21로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 C-1을 크로마토그래피에 의해 정제하고 HCl 염으로서 분리하였다.

D-23a의 합성을 위한 실험 절차

THF (1.0 mL) 중 D-22a (330 mg, 1.293 mmol, 1.0 equiv.)의 교반 용액에 트리에틸아민 (99%, 544 μL, 3.875 mmol, 3.0 equiv) 및 TBTU (518.8 g, 1.616 mmol, 1.3 equiv.)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15 분 동안 교반 한 다음, 디메틸아민 하이드로클로라이드 (110.7 mg, 1.358 mmol, 1.1 equiv.)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2 시간 더 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 물 및 DCM을 첨가하고 수성층을 DCM으로 추출하였다. 유기층을 합쳐 MgSO₄상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물 D-23a를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다.

하기 아미드 D-23 (표 18)을 상이한 산 D-22로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 D-23을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

C-1d의 합성을 위한 실험 절차

D-23a (360 mg, 1.275 mmol, 1.0 equiv.)를 DCM (5.0 mL)에 용해시키고 1,4-디옥산 중 4N HCl (2.55 mL, 10.200 mmol, 8.0 당량)로 처리하였다. 반응 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완전히 전환된 후, 용매를 감압 하에서 부분적으로 제거하였다. 고체 물질을 여과하고 건조시켜 목적 생성물 C-1d를 HCl 염으로서 수득하였다.

하기 아미드 C-1 (표 19)을 상이한 중간체 D-23으로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물 C-1을 크로마토그래피에 의해 정제하고 HCl 염으로서 분리하였다.

중간체 E-3의 합성

E-3a의 합성을 위한 실험 절차

0 ℃에서 디메틸 3-옥소펜탄디오에이트 E-1a (10.0 g, 57.4 mmol, 1.0 equiv.)를 2-메틸테트라하이드로푸란 (75 mL) 중에 N,N-디메틸포름아미드 디메틸 아세탈 (7.60 mL, 57.4 mmol, 1.0 equiv.)과 합하였다. 0-4 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 수성 염산 (4N, 26 mL)을 천천히 첨가하였다 (중간체 E-2a는 분리하지 않음). 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 유기층을 분리하고, 물 및 이어서 염수로 세척하고 감압 하에 농축시켰다. 필요에 따라 조 생성물 E-3a를 증류 또는 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하였다 (t_ret = 0.99/1.04 분; [M+H]⁺ = 203; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

중간체 E-4의 합성

E-4a의 합성을 위한 실험 절차

디메틸 2-포르밀-3-옥소펜탄디오에이트 E-3a (4.34 g, 21.5 mmol, 1.15 equiv.)와 아민 C-1a의 메탄올 용액 (2.00 g 18.7 mmol, 14.5 mL 메탄올 중 1.0 equiv.)을 실온에서 메탄올 (5.5 mL) 중에서 합쳤다. 이 온도에서 밤새 교반한 후, NaOMe (3.8 mL, 21.5 mmol, 1.15 equiv. 30% w/w 메탄올)을 첨가하고, 추가 메탄올 (2 mL)로 헹구었다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 물 (24 mL)을 천천히 첨가하고, 이어 진한 염산 (4.7 mL)을 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척한 뒤, 진공 중에서 추가 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (t_ret = 1.06 분; [M-H]⁺ = 258; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

중간체 E-5의 합성

E-5a의 합성을 위한 실험 절차

4-하이드록시피리디논 E-4a (2.00 g, 7.7 mmol, 1.0 equiv.)를 아세토니트릴 (16 mL)에 현탁시켰다. 트리에틸아민 (1.61 mL, 11.6 mmol, 1.5 equiv.)을 실온에서 첨가한 후, p-톨루엔설포닐 클로라이드 (1.47 g, 7.7 mmol, 1.0 equiv.)를 나누어서 첨가하고 아세토니트릴 (4 mL)로 헹구었다. 반응 혼합물을 완전한 전환이 달성될 때까지 실온에서 2 시간 동안 교반한 다음 회전 증발기에서 농축하고 물 (20 mL)로 처리하였다. 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 침전물을 여과하고, 물로 세척한 다음, 진공 중에서 추가로 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (t_ret = 1.34 분; [M-H]⁺ = 414; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

중간체 E-6의 합성

E-6a의 합성을 위한 실험 절차

토실레이트 E-5a (4.00 g, 9.78 mmol, 1.0 equiv.), 아세트아미드 (686 mg, 11.6 mmol, 1.0 equiv.), K₃PO₄ (2.26 g, 10.6 mmol, 1.1 equiv.), 팔라듐 (π-신나밀) 클로라이드 이량체 (75.2 mg, 145 μmol, 1.5 mol%) 및 Xantphos (168 mg, 290 μmol, 3.0 mol%)를 디옥산 (20 mL)에 현탁시켰다. 반응 혼합물을 Ar 분위기로 퍼지하고 완전히 전환될 때까지 2 시간 동안 환류 하에 교반하였다. 50 ℃에서 HCl (36%, 83 μL, 968 mmol, 0.1 당량) 및 물 (40 mL)을 첨가하였다. 반응물을 추가로 냉각시키고 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척한 뒤 진공 중에서 추가로 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물 E-6a를 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (t_ret = 1.123 분; [M+H]⁺ = 301.0; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

중간체 E-7의 합성

E-7a의 합성을 위한 실험 절차

아세트아미드 E-6a (2.50 g, 8.33 mmol, 1.0 equiv.)를 메탄올성 NH₃ (7 M, 20 mL)에 현탁시키고, E-6a의 완전한 전환이 달성될 때까지 실온에서 5 일동안 교반하였다. 용매를 진공 중에서 제거하고 고체 잔류물을 메탄올 (10 mL)에 용해시켰다. NaOH 수용액 (1M, 10 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 반응물을 50 ℃에서 20 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 잔류 고체를 메탄올 (5 mL)로 세척한 다음, 여액을 수성 HCl (1M, 약 10 mL)을 사용하여 중화시켰다. 침전물을 여과하고, 물 및 아세토니트릴로 세척한 후, 진공 중에서 추가로 건조시켜 목적 생성물을 제공하였다. 필요하면 조 생성물 E-7a를 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (t_ret = 0.885 분; [M+H]⁺ = 268.0; HPLC 방법 D_LC_SSTD).

본 발명에 따른 화합물 (I)의 합성

I-1의 합성을 위한 실험 절차

A-7a (272.0 mg, 0.586 mmol, 1.0 equiv.)를 2-프로판올 (0.5 mL)에 용해시켰다. 5N HCl 수용액 (586 μL, 2.928 mmol, 5.0 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 50 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 암모니아로 염기화하고, 여과한 후, 여액을 염기성 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 용출: 물 중 20% - 60% 아세토니트릴) 목적 생성물을 수득하였다.

I-97의 합성을 위한 실험 절차

E-7a (1.00 g, 3.74 mmol, 1.0 equiv.)를 MeCN (20 mL)에 현탁시켰다. K₃PO₄ (2.00 g, 9.42 mmol, 2.5 equiv.) 및 헥사클로로사이클로트리포스파젠 (1.30 g, 3.74 mmol, 1.0 equiv.)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 펜에틸아민 하이드로클로라이드 B-5k (930 mg, 4.12 mmol, 1.1 equiv.)를 첨가하고 반응 혼합물을 1 시간 더 교반하였다. NH₃수용액 (25%, 2.0 mL)을 첨가하고 1 시간 후 포화 K₂CO₃ 용액 (20 mL)을 첨가하였다. 2 상 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하고 유기층을 진공 중에서 농축시켰다. 필요하면 조 생성물 I-97을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

하기 화합물 I (표 20)를 상이한 아세탈 A-7로부터 출발하거나, 또는 상이한 빌딩 블록 E-7 및 B-5로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

I-104 및 I-105의 합성을 위한 실험 절차

A-7ct (90 mg, 0.196 mmol, 1.0 equiv.)를 2-프로판올 (0.5 mL)에 용해시켰다. 2N HCl 수용액 (500 μL, 1.000 mmol, 5.1 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 50 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 암모니아로 염기화하고, 여과한 후, 여액을 염기성 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 용출: 물 중 15% - 85% 아세토니트릴) 목적 생성물을 수득하였다.

하기 화합물 I (표 21)를 상이한 피리미딘 A-7로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

I-110의 합성을 위한 실험 절차

A-7ak (56.0 mg, 0.120 mmol, 1.0 equiv.)를 2-프로판올 (0.5 mL)에 용해시켰다. 2N HCl 수용액 (500 μL, 1.000 mmol, 8.3 equiv.)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 50 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 수성 2M NaOH (500 μL, 1.000 mmol, 8.3 equiv.)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 중간체의 완전한 전환이 관찰될 때까지 실온에서 1 시간 더 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 염기성 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 용출: 물 중 30% - 70% 아세토니트릴) 목적 생성물을 수득하였다.

하기 화합물 I (표 22)을 상이한 피리미딘 A-7로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 일부 화합물의 제조에서는, 수성 NaOH 대신 수성 암모니아와 같은 다른 염기가 사용되었다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

I-131의 합성을 위한 실험 절차

I-1 (179.0 mg, 0.445 mmol, 1.0 equiv.)을 아세토니트릴 (1.5 mL)에 용해시켰다. 아세토니트릴 (0.5 mL) 중 NBS (80.8 mg, 0.454 mmol, 1.0 equiv.)의 용액을 적가한 후, 생성된 혼합물을 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (MgSO₄), 감압 하에 농축시켜 목적 생성물 I-131을 제공하였다.

하기 화합물 I (표 23)를 상이한 화합물 I로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

'

I-155의 합성을 위한 실험 절차

I-131 (23.0 mg, 0.048 mmol, 1.0 equiv.)을 디옥산 (0.75 mL) 및 물 (0.25 mL)에 용해시켰다. 탄산세슘 (90%, 26.0 mg, 0.072 mmol, 1.5 equiv.), 비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐 (II) (DCM과의 복합체) (3.9 mg, 0.005 mmol, 0.1 equiv.) 및 트리메틸보록신 (99%, 7.5 μL, 0.054 mmol, 1.1 equiv.)을 첨가하였다. 플라스크를 아르곤으로 플러싱하고 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응 혼합물을 100 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 수성 NaHCO₃로 세척하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (MgSO₄), 감압 하에 농축시켰다. 염기성 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 용출: 물 중 25% - 85% 아세토니트릴) 목적 생성물을 제공하였다.

하기 화합물 I (표 24)를 상이한 화합물 I로부터 출발하여 유사한 방식으로 수득할 수 있다. 필요하면 조 생성물을 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

I-179의 합성을 위한 실험 절차

I-137 (50.0 mg, 0.107 mmol, 1.0 equiv.)을 디옥산 (0.8 mL) 및 물 (0.2 mL)에 용해시켰다. 탄산칼륨 (90%, 33.0 mg, 0.214 mmol, 2.0 equiv.), 비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) (DCM과의 복합체) (9.0 mg, 0.011 mmol, 0.1 equiv.) 및 사이클로프로필보론산 (14.0 mg, 0.161 mmol, 1.5 equiv.)을 첨가하였다. 플라스크를 아르곤으로 플러싱하고 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응 혼합물을 100 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 수성 NaHCO₃로 세척하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (MgSO₄), 감압 하에 농축시켰다. 염기성 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 용출: 물 중 25% - 85% 아세토니트릴) 목적 생성물을 제공하였다 (HPLC 방법: LCMSBAS1, t_ret. = 1.27 분; [M+H]⁺= 429; IC₅₀ = 11 nM).

하기 실시예는 본 발명에 따른 화합물의 생물학적 활성을 설명하나, 본 발명이 이들 실시예로 제한되지 않는다.

화학식 (I)의 화합물은 치료 분야에서 많은 가능한 적용을 특징으로 한다.

KRAS::SOS1 AlphaScreen 결합 분석

본 분석은 SOS1과 KRAS G12D 사이의 단백질-단백질 상호작용을 억제하는 화합물의 효능을 검사하는데 사용될 수 있다. 이는 화합물의 분자 작용 방식을 입증한다. 이 분석 환경에서 낮은 IC₅₀ 값은 SOS1 억제제의 높은 효능을 나타낸다:

시약:

· 자체 제작한 GST 태그 SOS1 (564_1049_GST_TEV_ECO)

· GST-TEV-SOS1 (564-1049)은 Viva Biotech Ltd.에서 구입하였다.

· 6xHis-Tev-K-RasG12D(1-169)Avi는 Xtal Biostructures, Inc. (Lot# X129-110)에서 구입하였다.

· GDP (Sigma Cat No G7127)

· AlphaLISA 글루타티온 수용체 비드 (PerkinElmer, Cat No AL109)

· AlphaScreen 스트렙타비딘 공여체 비드 (PerkinElmer Cat No 6760002)

· 분석 플레이트: Proxiplate-384 PLUS, 백색 (PerkinElmer, Cat No 6008289)

분석 완충액:

· 1 × PBS

· 0.1% BSA

· 100 μM EDTA 또는 EDTA 부재 (표의 IC₅₀은 별표로 표시되지 않은 경우 EDTA 부재 하에 측정됨)

· 0.05% Tween 20

KRAS::SOS1 GDP 믹스:

10 nM (최종 분석 농도) KRAS G12D, 10 μM (최종 분석 농도) GDP 및 5 nM (최종 분석 농도) GST-SOS1을 사용 전에 분석 완충액에서 혼합하고 실온에서 유지하였다.

비드 믹스:

AlphaLISA 글루타티온 수용체 비드 및 AlphaScreen 스트렙타비딘 공여체 비드를 각각 사용 전에 10 ㎍/mL (최종 분석 농도)의 농도로 분석 완충액에서 혼합하고 실온에서 유지하였다.

분석 프로토콜:

화합물을 100 μM의 최종 시작 농도로 희석하고 중복 시험하였다. Labcyte Echo 550 또는 555 어쿠스틱 디스펜서를 갖춘 Access Labcyte Workstation을 사용하여 ARP (Assay-ready plate)를 생성하였다. 화합물은 100 μM을 출발 농도로 하여 1:5 연속 희석에 의해 11 개 농도로 웰당 150 nL의 화합물 용액으로 중복 전달되었다.

100 럭스 아래의 어두운 방에서 전자동 로봇 시스템을 사용하여 분석을 수행하였다. 10 μL의 KRAS::SOS1 GDP 믹스를 칼럼 1-24에 150 nL의 화합물 용액으로 첨가하였다 (분석에서 최종 1:100 희석, 최종 DMSO 농도 1%).

30 분의 인큐베이션 시간 후, 5 μL의 비드 믹스를 칼럼 1-23에 첨가하였다. 플레이트를 어두운 인큐베이터에서 실온으로 유지시켰다. 추가 60 분 인큐베이션 후, PerkinElmer의 AlphaScreen 사양을 채용한 PerkinElmer Envision HTS Multilabel Reader를 사용하여 신호를 측정하였다. 각 플레이트는 다음과 같은 대조군을 가지고 있다.

· 희석된 DMSO + KRAS::SOS1 GDP 믹스 + 비드 믹스

· 희석된 DMSO + KRAS::SOS1 GDP 믹스

결과 계산:

4 파라미터 로지스틱 모델을 사용하여 IC₅₀ 값을 계산하고 분석하였다.

본원에 개시된 실시예 화합물의 표에는 상기 분석을 사용하여 측정된 IC₅₀ 값이 포함되어 있다.

세포 증식 분석

세포 증식 분석을 이용하여 시험관 내에서 암 세포주의 SOS1-매개 증식, 성장 및 아폽토시스를 억제하기 위한 화합물의 효능을 조사하였다. 이는 화합물의 분자 작용 방식을 입증한다. 이 분석 설정에서 낮은 IC₅₀ 값은 SOS1 억제제의 높은 효능을 나타낸다. 특히, SOS1 억제제는 BRAF V600E 돌연변이 암 세포주 또는 중독되지 않은 KRAS 야생형 인간 암 세포주가 아닌 KRAS 돌연변이 인간 암 세포주의 증식에 대해 강력한 억제 효과를 나타내는 것으로 관찰되었다. 이는 RAS 패밀리 단백질 기능에 의존하는 암 세포를 선택적으로 표적화하는 것으로서 SOS1 억제제의 분자 작용 방식을 확인시켜 준다.

하기 인간 세포주를 이용하여 삼차원 (3D) 앵커리지 독립적 연한천 조건에서 세포 증식 분석을 수행하였다:

NCI-H358: KRAS G12C 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

PC-9: 야생형 KRAS 및 EGFR del 19 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

NCI-H1792: KRAS G12C 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

SW900: KRAS G12V 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

A-549: KRAS G12S 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

NCI-H2122: KRAS G12C 돌연변이를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

NCI-H520: 야생형 KRAS를 갖는 인간 비소세포 폐암 (NSCLC);

MIA PaCa-2: KRAS G12C 돌연변이를 갖는 인간 췌장암 세포 (PAC);

DLD-1: KRAS G13D 돌연변이를 갖는 인간 결장암;

A-375: SOS1 억제제로 처리 후 비반응성 세포주로서 사용되는, 야생형 KRAS를 가지나 BRAFV600E 돌연변이는 갖지 않는 인간 흑색종 암;

PC-9 외 모든 세포주는 American Type Culture Collection (ATCC)에서 입수할 수 있다. PC-9는 ECACC (European Collection of Authenticated Cell Cultures)로부터 입수할 수 있다.

사용된 재료:

코닝 (Corning) (CLS2474-24EA) 제인 96-웰 초저 결합 플레이트;

Gibco (18300-012) 제인 4% 아가로스 겔 1 × 액체 40 mL;

RPMI-1640 배지 (ATCC^® 30-2001™);

Leibovitz's L-15 (Gibco, Cat# 11415);

F-12K (ATCC, 카탈로그 번호 30-2004);

DMEM (Lonza BE12-604F); HyClone (SH30071.03) 제인 소태아혈청 (FBS); Invitrogen (DAL1100CSTM1) 제인 알라마르 블루 (Alamar Blue)

세포 배양:

NCI-H358 세포 (ATCC HTB-182), DLD-1 세포 (ATCC CCL-221), NCI-H520 세포 (ATCC HTB-182), PC-9 세포 (ECACC 90071810), NCI-H1792 세포 (ATCC CRL-5895) 및 NCI-H2122 세포 (ATCC CRL-5985)를 RPMI 배지를 사용하여 세포 배양 플라스크 (175 cm²)에서 성장시켰다. SW900 세포 (ATCC HTB-59)는 Leibovitz의 L-15 배지에서, A-549 세포 (ATCC CCL-185)는 F12K 배지에서, MIA PaCa-2 세포 (ATCC CRL-1420) 및 A-375 (ATCC-CRL-1619)는 DMEM 배지에서 성장시켰다. 열거된 모든 세포주에 대한 세포 배양 배지에는 10% FBS가 보충되었다. 배양물을 가습 분위기 하에 37 ℃ 및 5% CO₂에서 배양하고, 주 2-3 회 배지 교환 또는 계대 배양을 수행하였다. SW900 세포는 CO₂ 첨가없이 배양하였다.

분석 조건:

분석 환경은 다음과 같이 구성된다:

· 1.2% 아가로스를 포함한 90 μL 배지로 구성된 바닥층

· 0.3% 아가로스를 포함한 60 μL 배지로 구성된 세포층

· 시험 화합물을 포함한 30 μL 배지로 구성된 최상층 (아가로스 부재)

바닥층 제조를 위해, 4% 아가로스 (마이크로파 가열)를 배지에서 최종 1.2% 아가로스 희석으로 배양 배지 (SW900를 제외한 모든 세포주에 대해 2% FBS를 포함시키고 SW900에 대해서는 10% FCS를 사용하여 세포 성장을 달성하였다)와 혼합하였다. 각 웰에 바닥층 현탁액 90 μL를 채우고 1 시간 동안 실온으로 냉각시켰다. 세포층에 대해서는 세포를 트립신 처리하고, 계수한 후, 0.3% 아가로스 (웰당 1500 세포)를 포함하는 60 μL 배양 배지 (2% FBS)에 플레이팅하였다. 1 시간 동안 실온으로 냉각한 후, 플레이트를 가습 분위기 하에 37 ℃ 및 5% CO₂에서 밤새 인큐베이션하였다. 다음날 화합물 (연속 희석액 30 μL)을 3 회 첨가하였다. 시험 화합물의 농도는 10 마이크로몰 내지 최소 0.13 나노몰 범위를 포함하였다. 화합물 (스톡: 100% DMSO 중 10 mM)을 배지에 희석시켰다. 세포를 가습 분위기 하에 37 ℃ 및 5% CO₂에서 14 일 동안 인큐베이션하였다.

검출:

알라마르 블루 현탁액을 웰당 20 μL/웰로 첨가하고 인큐베이터에서 4-24 시간 동안 인큐베이션하였다. 형광 판독기 (2030 VICTOR X5, Perkin Elmer)를 사용하여 형광 강도를 결정하였다. 여기 파장은 544/15 nm, 방출 파장은 590 nm이다. 단일요법에서 가변 힐 기울기를 갖는 S 자형 곡선 분석 프로그램 (GraphPAD Prism)을 사용하여 반복 계산으로 데이터를 적합화하여 IC₅₀값을 알아내었다.

ERK 인산화 분석

ERK 인산화 분석을 이용하여 시험관 내 KRAS 돌연변이 인간 암 세포주에서 SOS1-매개 신호전달을 억제하기 위한 화합물의 효능을 조사하였다. 이는 RAS 패밀리 단백질 신호전달 캐스케이드에 개입함으로써 화합물의 분자 작용 방식을 입증한다. 이 분석 환경에서 낮은 IC₅₀ 값은 SOS1 억제제의 높은 효능을 나타낸다. SOS1 억제제는 KRAS 돌연변이 인간 암 세포주에서 ERK 인산화에 대한 억제 효과를 입증함으로써 RAS 패밀리 단백질 신호전달에 대한 SOS1 억제제의 분자 작용 방식을 확인시켰음이 관찰되었다.

다음과 같은 인간 세포주를 사용하여 ERK 인산화 분석을 수행하였다:

DLD-1 (ATCC CCL-221): KRAS G13D 돌연변이를 갖는 인간 결장암;

사용된 재료:

RPMI-1640 배지 (ATCC^® 30-2001™)

HyClone 제인 소태아혈청 (FBS) (SH30071.03)

Thermo Fischer Scientific 제인 필수 아미노산 (11140035)

Thermo Fischer Scientific 제인 피루베이트 (11360039)

Thermo Fischer Scientific 제인 글루타맥스 (Glutamax) (35050061)

Greiner Bio-One 제인 384 플레이트 (781182)

PerkinElmer Inc. 제인 Proxiplate™ 384 (6008280)

Sigma 제인 AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK1/2 (Thr202/Tyr204) 분석 키트 (ALSU-PERK-A500)

수용체 믹스: PerkinElmer 제인 단백질 A 수용체 비드 (6760137M)

공여체 믹스: PerkinElmer 제인 AlphaScreen 스트렙타비딘 코팅 공여체 비드 (6760002)

트라메티닙

Sigma Aldrich 제인 스타우로스포린 (S6942)

분석 설정:

DLD-1 세포 (ATCC CCL-221)를 Greiner TC 384 플레이트에서 10% FBS, 비필수 아미노산, 피루베이트 및 글루타맥스를 함유한 60 μL의 RPMI에서 웰당 50,000 개의 세포로 시딩하였다. 세포를 실온에서 1 시간 동안 인큐베이션한 다음, 가습 분위기 하에 37 ℃ 및 5% CO₂의 인큐베이터에서 밤새 인큐베이션하였다. 이어서, Labcyte Echo 550 장치를 사용하여 60 nL 화합물 용액 (10 mM DMSO 스톡 용액)을 첨가하였다. 상기 인큐베이터에서 1 시간 동안 인큐베이션한 후, 3 μL의 표피 성장 인자 (EGF, 최종 농도 50 ng/mL)를 첨가하였다. 10 분 후에 배지를 제거하고, 프로테아제 억제제, 100 nM 트라메티닙 + 100 nM 스타우로스포린이 첨가된 AlphaLISA SureFire Ultra pERK1/2 (Thr202/Tyr204) 분석 키트로부터 20 μL의 1.6 배 용해 완충제를 첨가하여 세포를 용해시켰다. 진탕하면서 실온에서 20 분 인큐베이션 후, 6 μL의 각 용해물 샘플을 384-웰 프록시플레이트 (Proxiplate)로 옮기고 AlphaLISA SureFire Ultra pERK1/2 (Thr202/Tyr204) 분석 키트로 pERK (Thr202/Tyr204)에 대해 분석하였다. 3 μL 수용체 믹스 및 3 μL 공여체 믹스를 은은한 조명 하에 첨가하고 암소에서 2 시간 동안 실온에서 인큐베이션한 후 프록시플레이트에 대해 384 AlphaScreen 설정을 사용하여 Perkin Elmer Envision 플레이트 판독기로 신호를 측정하였다. 가변 힐 기울기를 사용한 반복 계산으로 데이터를 적합화하였다. 디폴트 피팅 곡선을 사용하여 S 자형 곡선 기울기를 적합화하여 IC₅₀ 값을 알아내었다.

표 25는 선택된 본 발명에 따른 화합물 (I)에 대해 개시된 분석으로 얻은 데이터를 나타낸다.

대사 (마이크로솜) 안정성 분석:

시험 화합물의 대사 분해를 풀링된 간 마이크로솜 (마우스 (MLM), 래트 (RLM) 또는 인간 (HLM))으로 37 ℃에서 분석하였다. 시점 당 최종 74 μL의 인큐베이션 부피는 TRIS 완충액 (pH 7.5; 0.1 M), 염화마그네슘 (6.5 mM), 마이크로솜 단백질 (마우스/래트의 경우 0.5 mg/mL, 인간 표본의 경우 1 mg/mL) 및 1 μM의 최종 농도로 시험 화합물을 포함하였다. 37 ℃에서 짧은 예비 인큐베이션 기간 후, 8 μL의 베타-니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트 환원형 (NADPH, 10 mM)을 첨가하여 반응을 개시하고, 상이한 시점 후에 분취량을 용매에 전달하여 반응을 종결시켰다. 또한, NADPH가 없고 아세토니트릴의 첨가에 의해 마지막 시점에 종결된 인큐베이션에서의 NADPH-비의존적 분해도 모니터링하였다. 켄칭된 배양물을 원심분리 (1811 g, 5 분)하여 펠렛화하였다. 상등액의 분취량을 LC-MS/MS에 의해 모 화합물의 양에 대해 분석하였다.

마이크로솜 인큐베이션 동안 시험 약물의 소실 시간 경과로부터 시험관 내 고유 클리어런스 (CL_int, _{in vitro} )를 계산하였다. 각 플롯을 C(t) = C ₀ ^*exp(-ke ^* t)로서 1 차 제거 속도 상수에 적합화하였다 (여기서, C(t) 및 C ₀ 는 인큐베이션 시간 t 및 예비 인큐베이션에서 변하지 않은 시험 약물의 농도이고, ke는 변하지 않은 약물의 소실 속도 상수이다). 이어서, CL_int, _{in vitro} (μL 분^-1·단백질 양) 값을 전신에 대한 CL_int, _{in vitro} (mL 분^-1·kg^-1)로 변환시켰다. CL_int, _{in vitro} 데이터를 생리학적 파라미터를 사용하여 스케일업하였다. 종간 비교를 더 잘하기 위해, 예측 클리어런스를 개별 종에서 간 혈류의 백분율 (% QH)로 표현하였다. 일반적으로, 종 간 화합물의 높은 안정성 (낮은% QH에 해당)이 바람직하다.

표 26은 선택된 본 발명에 따른 화합물 (I)에 대해 개시된 분석으로 얻은 대사 안정성 데이터를 보여준다.

시간 의존성 CYP3A4의 억제 분석 (TDI 3A4):

CYP3A4에 대한 시간 의존적 억제를 미다졸람 (15 μM)을 기질로 하여 인간 간 마이크로솜 (0.02 mg/mL)에서 분석하였다. 시험 화합물을 NADPH의 존재 하에 인간의 간 마이크로솜 (0.2 mg/mL)과 25 uM의 농도로 0 분 및 30 분 동안 예비인큐베이션하였다. 예비인큐베이션 후, 인큐베이션물을 1:10으로 희석하고 기질 미다졸람을 주 인큐베이션 (15 분) 동안 첨가하였다. 주 인큐베이션을 아세토니트릴로 켄칭하고, 형성된 하이드록시-미다졸람을 LC/MS-MS를 통해 정량화하였다. 0 분의 예비인큐베이션으로부터의 하이드록시-미다졸람의 형성에 대한 30 분의 예비인큐베이션으로부터의 하이드록시-미다졸람의 형성을 판독값으로 사용하였다. 100% 미만의 값은 기질 미다졸람이 0 분의 예비인큐베이션에 비해 30 분의 예비인큐베이션시 더 낮은 범위로 대사됨을 의미한다. 일반적으로 30 분 예비인큐베이션시 낮은 효과가 요구된다 (100%에 가까운 값에 해당).

표 27은 선택된 본 발명에 따른 화합물 (I)에 대해 개시된 분석으로 얻은 데이터를 나타낸다.

표적외 책임 (off-target liability) 결정

공개된 Reducing safety-related drug attrition: the use of in vitro pharmacological profiling, Nature Review Drug Discovery 11, 909-922 (December 2012)에 언급된 바와 같이 모두 생체 내 부작용 약물 반응과 강력하게 연관된 것으로 간주되는 특정 표적 (44)이 있다. 이 논문은 시험관 내 약리학적 분석의 핵심 패널을 구축하기 위한 목적으로 여러 대형 제약사의 안전성 약리학 그룹들이 공동 협력한 결과물이다. Eurofins Cerep (프랑스)는 예비 안전성 평가시 합리적인 첫 단계를 위한 SafetyScreen44^TM 패널 (이들 표적외 포함)에서의 측정을 상업적으로 제공한다. 본 발명에 따른 화합물 (I)은 표적외 책임 조사를 위해 상기 패널에 대해 분석될 수 있다.

Claims

종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 SOS1 억제제로서, 상기 방법은 SOS1 억제제를 MEK 억제제와 조합하여 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서
· SOS1 억제제는 다음으로 구성된 그룹 중에서 선택되고:

또는 이들의 약학적으로 허용되는 염; 및
· MEK 억제제는 다음으로 구성된 그룹 중에서 선택되는, SOS1 억제제:

또는 이들의 약학적으로 허용되는 염.
제1항에 있어서, MEK 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여되는 SOS1 억제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 치료 및/또는 예방할 종양성 또는 과증식성 질환은 하기로부터 선택되는 SOS1 억제제:
· 췌장암, 폐암, 결장직장암, 담관암종, 다발성 골수종, 흑색종, 자궁암, 자궁내막암, 갑상선암, 급성 골수성 백혈병, 방광암, 요로상피암, 위암, 자궁경부암, 두경부 편평 세포 암종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 식도암, 만성 림프구성 백혈병, 간세포암, 유방암, 난소암, 전립선암, 교모세포종, 신장암 및 육종으로 구성된 그룹 중에서 선택되는 암; 및
· 바람직하게는 신경섬유종증 제1형 (Neurofibromatosis type 1: NF1), 누난 증후군 (Noonan Syndrome: NS), 다발성 흑자를 동반한 누난 증후군 (Noonan Syndrome with Multiple Lentigines: NSML) (LEOPARD 증후군이라고도 함), 모세관 기형-동정맥 기형 증후군 (CM-AVM), 코스텔로 증후군 (Costello Syndrome: CS), 심장-얼굴-피부 증후군 (Cardio-Facio-Cutaneous Syndrome: CFC), 레기우스 증후군 (NF1 유사 증후군이라고도 함) 및 유전성 치은 섬유종증 (Hereditary gingival fibromatosis)으로 구성된 그룹 중에서 선택되는 RAS병증 (RASopathy).
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 및/또는 예방할 종양학적 또는 과증식성 질환은 폐암, 바람직하게는 비소세포 폐암 (NSCLC), 특히 NSCLC 선암종, 결장직장암, 췌장암 및 담관암종으로부터 선택되는, SOS1 억제제.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 및/또는 예방할 암은 KRAS 돌연변이를 보유하는, SOS1 억제제.
· 제1항에 정의된 SOS1 억제제 또는 그의 약학적으로 허용되는 염,
· 제1항에 정의된 MEK 억제제 또는 그의 약학적으로 허용되는 염,
· 및 임의로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 약학 조성물.
제6항에 있어서, 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물.
· 제1항에 정의된 SOS1 억제제 및 임의로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 제1 약학 조성물 또는 투여 형태,
· 제1항에 정의된 MEK 억제제 및 임의로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 비히클을 포함하는 제2 약학 조성물 또는 투여 형태를 포함하는 키트.
제8항에 있어서, 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 키트.
제9항에 있어서, 제1 약학 조성물 또는 투여 형태는 제2 약학 조성물 또는 투여 형태와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여되는, 키트.
제8항에 있어서,
· 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암의 치료나 예방을 필요로 하는 환자에서 상기 질환, 특히 암의 치료 및/또는 예방에 동시, 동반, 순차적, 연속, 교대 또는 개별 사용을 위한 인쇄된 설명서를 포함하는 패키지 삽입물을 더 포함하는 키트.
치료적 유효량의 제1항에 정의된 SOS1 억제제 및 치료적 유효량의 제1항에 정의된 MEK 억제제를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법.
제12항에 있어서, SOS1 억제제는 MEK 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여되는, 방법.
종양학적 또는 과증식성 질환, 특히 암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 약학 조성물의 제조를 위한 SOS1 억제제의 용도로서, 여기서 SOS1 억제제는 MEK 억제제와 조합되어 사용되고, 상기 SOS1 억제제 및 MEK 억제제는 제1항에 정의된 바와 같은, 용도.
제14항에 있어서, SOS1 억제제는 MEK 억제제와 동시에, 동반하여, 순차적으로, 연속적으로, 교대로 또는 별도로 투여되는, 용도.
제12항 또는 제13항에 따른 방법, 제14항 또는 제15항에 따른 SOS1 억제제의 용도, 제7항에 따라 사용하기 위한 약학 조성물, 및 제9항 또는 제10항에 따라 사용하기 위한 키트로서, 치료 및/또는 예방할 종양학적 또는 과증식성 질환이 하기로부터 선택되는 방법, 용도, 약학 조성물 및 키트.
· 췌장암, 폐암, 결장직장암, 담관암종, 다발성 골수종, 흑색종, 자궁암, 자궁내막암, 갑상선암, 급성 골수성 백혈병, 방광암, 요로상피암, 위암, 자궁경부암, 두경부 편평 세포 암종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 식도암, 만성 림프구성 백혈병, 간세포암, 유방암, 난소암, 전립선암, 교모세포종, 신장암 및 육종으로 구성된 그룹 중에서 선택되는 암; 및
· 바람직하게는 신경섬유종증 제1형(NF1), 누난 증후군 (NS), 다발성 흑자를 동반한 누난 증후군 (NSML) (LEOPARD 증후군이라고도 함), 모세관 기형-동정맥 기형 증후군 (CM-AVM), 코스텔로 증후군 (CS), 심장-얼굴-피부 증후군 (CFC), 레기우스 증후군 (NF1 유사 증후군이라고도 함) 및 유전성 치은 섬유종증으로 구성된 그룹 중에서 선택되는 RAS병증 (RASopathy).
제12항, 제13항 및 제16항 중 어느 한 항에 따른 방법, 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 SOS1 억제제의 용도, 제7항 또는 제16항에 따라 사용하기 위한 약학 조성물, 및 제9항, 제10항 및 제16항 중 어느 한 항에 따라 사용하기 위한 키트로서, 치료 및/또는 예방할 종양학적 또는 과증식성 질환이 폐암, 바람직하게는 비소세포폐암 (NSCLC), 특히 NSCLC 선암종, 결장직장암, 췌장암 및 담관암으로부터 선택되는, 방법, 용도, 약학 조성물 및 키트.
제12항, 제13항, 제16항 및 제17항 중 어느 한 항에 따른 방법, 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따른 SOS1 억제제의 용도, 제7항, 제16항 및 제17항 중 어느 한 항에 따른 약학 조성물. 및 제9항, 제10항, 제16항 및 제17항 중 어느 한 항에 따라 사용하기 위한 키트로서, 치료 및/또는 예방될 암이 KRAS 돌연변이를 보유하는, 방법, 용도, 약학 조성물 및 키트.