KR20220005465A - 작용화된 히알루론산의 가교결합 중합체 및 염증 상태의 치료에서의 이의 용도 - Google Patents

작용화된 히알루론산의 가교결합 중합체 및 염증 상태의 치료에서의 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20220005465A
KR20220005465A KR1020217034184A KR20217034184A KR20220005465A KR 20220005465 A KR20220005465 A KR 20220005465A KR 1020217034184 A KR1020217034184 A KR 1020217034184A KR 20217034184 A KR20217034184 A KR 20217034184A KR 20220005465 A KR20220005465 A KR 20220005465A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hyaluronic acid
moiety
group
aliphatic
solution
Prior art date
Application number
KR1020217034184A
Other languages
English (en)
Inventor
지울리오 비안키니
란프란코 칼레가로
Original Assignee
조인테라퓨틱스 에스알엘
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 조인테라퓨틱스 에스알엘 filed Critical 조인테라퓨틱스 에스알엘
Publication of KR20220005465A publication Critical patent/KR20220005465A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca

Abstract

작용화된 히알루론산(functionalized hyaluronic acid) 또는 이의 유도체의 가교결합 중합체 뿐만 아니라, 이의 제조 방법, 및 생체재료(biomaterial) 및 약학 조성물의 성분으로서의 이의 용도가 개시된다. 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료에서의 상기 가교결합 중합체의 용도도 개시된다.

Description

작용화된 히알루론산의 가교결합 중합체 및 염증 상태의 치료에서의 이의 용도
본 발명은 작용화된 히알루론산(functionalized hyaluronic acid) 또는 이의 유도체의 가교결합 중합체(crosslinked polymer) 뿐만 아니라, 이의 제조 방법, 및 생체재료(biomaterial) 및 약학 조성물의 성분으로서의 이의 용도에 관한 것이다.
수용체 CD44는 세포외 기질의 히알루론산 및 기타 당단백질에 결합하는 기능을 가지는 고도로 글리코실화된 막횡단 단백질이다. CD44와 히알루론산 간의 결합은 고정에만 기여하는 것뿐만 아니라 신호를 세포 안으로 전달하는 역할도 한다. 수용체의 또 다른 중요한 패밀리는 β-갈락토시드 당에 대한 결합 특이성으로 정의되는 단백질인 갈렉틴과, 또한 N-글리코실화 또는 O-글리코실화를 통해 단백질에 결합될 수 있는 N-아세틸락토사민 패밀리(family)이다. 현재 증거는 갈렉틴이 급성 및 만성 염증 반응과 다양한 병리학적 과정에서 중요한 역할을 수행한다고 제시한다. 최근 연구에서는 CD44와 갈렉틴 간의 상호작용이 세포 기전의 조절에서 어떻게 적극적인 역할을 하는지를 입증하였다(Immunity 2014, 41 (2), 270-282; The Journal of Immunology 2007, 179 (2), 1225-1235). 갈렉틴의 오 조절(poor regulation), 예를 들어 과발현은 전형적으로 염증성 장애에서 발생하므로 이들 수용체의 올바른 조절이 염증성 캐스케이드(cascade)의 현저한 감소를 결정할 수 있다.
연구 단계 동안의 갈렉틴의 억제제/조절제와 관련된 가장 큰 일부 문제는 표적 부위 인식 및 지속성에 대한 능력 감소를 포함한다.
따라서, 본 발명의 목적은 갈렉틴 수용체 및 수용체 CD44와의 동시 상호작용을 통해 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애를 치료할 수 있게 하는 동시에 의학적 및 약학적 관점에서, 그리고 표적 부위에서 개선된 지속 시간 측면에서 높은 수준의 수용성을 제공하는 산물을 제공하는 것이다.
발명의 요약
상기 목적은 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체가 청구범위 제1항에 기재된 것과 같이 적어도 부분적으로 가교결합된 가교결합 중합체를 통해 달성된다.
추가 측면에서, 본 발명은 상기 가교결합 중합체의 제조 방법에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료에서의 가교결합 중합체의 용도에 관한 것이다. 이들 수용체의 과다/과소 조절과 관련된 장애의 비제한적인 예는 비-알콜성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis), 판상형 건선(plaque psoriasis), 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물(neoplasm), 유착(adhesion) 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 바람직하게는 정형외과 장애의 치료에서 세포 성장을 위한 생체재료 또는 스캐폴드(scaffold)로서의 상기 가교결합 중합체의 용도에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 성형/미용 수술(plastic/aesthetic surgery), 혈액 투석(hemodialysis), 순환기내과(cardiology), 혈관의학과(angiology), 안과(ophthalmology), 이비인후과(otorhinolaryngology), 치과(dentistry), 부인과(gynecology), 비뇨기과(urology), 피부과(dermatology), 종양내과(oncology), 및 조직 수복(tissue repair)에서, 세포 성장을 위한 생체재료 또는 스캐폴드로서의 상기 가교결합 중합체의 용도에 관한 것이다.
추가 측면에서, 본 발명은 적어도 하나의 가교결합 중합체 및 적어도 하나의 약리학적 활성 물질 및/또는 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 적어도 하나의 물질을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료에서의 이러한 약학 조성물의 용도에 관한 것이다. 이들 수용체의 과다/과소 조절과 관련된 장애의 비제한적인 예는 비알코올성 지방간염, 판상형 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물, 유착, 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정이다.
추가 측면에서, 본 발명은 류마티스내과(rheumatology), 정형외과(orthopedics), 종양학과(oncology), 성형/미용 수술, 혈액 투석, 순환기내과, 혈관의학과, 안과, 이비인후과, 치과, 부인과, 비뇨기과, 피부과, 종양내과 및 조직 수복(tissue repair)에서의 이러한 약학 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 특징 및 이점은 하기 상세한 설명 및 비제한적이고 예시적인 실시예로서 제공된 실시양태로부터 명백해질 것이다.
발명의 상세한 설명
따라서, 본 발명은 하기 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-90% 포함하는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체를 포함하는 가교결합 중합체에 관한 것이다:
Figure pct00001
상기 식에서,
R1, R2, R3, R4는, 서로 독립적으로, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족(arylaliphatic), 지환족(cycloaliphatic), 복소환식 계열(heterocyclic series)의 카르복실산으로부터 유도된 아실기(acyl group), -CO-(CH2)2-COOY이고, 여기서 Y는 음전하(negatice charge) 또는 H이며,
R은 Z(1) 또는 Z(2)이고,
R5는 -CO-CH3, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, 히알루론산의 아실기이고,
여기서 Z(1)은 화학식 (1)의 모이어티(moiety)이고:
Figure pct00002
여기서 Z1은 -NR6CH2-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류(oligosaccharide)이거나,
Z(2)는 화학식 (2)의 모이어티이고:
Figure pct00003
여기서 Z4는 -NR6CH-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
R5는 Z(3) 또는 Z(4)이고, R은 NR6R7, 또는 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 알코올기, OH, O-, 히알루론산의 알코올기, 히알루론산의 아미노기이고, R6, R7은, 서로 독립적으로, H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
여기서 Z(3)은 화학식 (3)의 모이어티이고:
Figure pct00004
여기서 Z1은 -CH2- 또는 -CO-이고,
Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
Z(4)는 화학식 (4)의 모이어티이고:
Figure pct00005
여기서 Z4는 -CH-이고,
Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
R은 Z(1) 또는 Z(2)이고, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이며,
상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 동일한 쇄의 카르복실기와 하이드록실기 사이, 및/또는 상이한 쇄의 카르복실기와 하이드록실기 사이에 에스테르 결합 또는 락톤 결합에 의해 적어도 부분적으로 직접 가교결합되거나, 카르복실기와의 에스테르 결합 및/또는 하이드록실기와의 에테르 결합 및/또는 카르복실기와의 아미드 결합을 형성하는 스페이서(spacer) 모이어티에 의해 적어도 부분적으로 간접 가교결합되고, 상기 스페이서 모이어티는 비스카르보디이미드 모이어티 또는 비스비닐설폰 모이어티, 또는 C2-C20 지방족 에폭사이드, 이의 할로겐하이드론(halogenhydron), 에피알로겐하이드린(epialogenhydrin), 및 할라이드에서 선택된 이작용성 또는 다작용성 에폭사이드로부터 유도된 에폭시 모이어티, 또는 이들의 조합이다.
상기 기재된 바와 같은 가교결합 중합체는 갈렉틴 수용체 및 수용체 CD44와의 동시 상호작용을 통해 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료 용도에 특히 적합한 것으로 입증되었다.
또한, 기계적 및 물리화학적 특성 개선 외에도, 효소 분해에 대한 저항성이 높은 특징을 가져 의학적 및 약학적 관점과 표적 부위에서의 지속 시간 개선 측면에서 높은 수준의 수용성을 나타내는 것이 입증되었다.
바람직하게는, 본 발명의 가교결합 중합체에서, 상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-60% 포함한다.
가교결합에 관여하지 않는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 카르복실기 및 하이드록실기는 임의로는, 예를 들어 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄 또는 이들 혼합물의 양이온으로 염화될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 가교결합 중합체에서, 가교결합에 관여하지 않는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 카르복실기 및 하이드록실기의 20-70%가 염화된다.
바람직하게는, 스페이서 모이어티와 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체 간 결합의 5-40%, 보다 바람직하게는 10-30%는 에스테르 결합이다.
제1 실시양태에서, 가교결합된 중합체에 존재하는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위의 20-60%, 보다 바람직하게는 30-50%에서, R은 Z(1) 또는 Z(2)이다. 바람직하게는, 이들 제1 실시양태에서, R5는 -COCH3이다.
제2 실시양태에서, 가교결합 중합체에 존재하는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위의 5 내지 30%, 보다 바람직하게는 10 내지 20%에서, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이다. 바람직하게는, 이들 제2 실시양태에서, R5의 10-20%는 Z(3)이고, R5의 90-80%는 -COCH3인 반면, R은 O-이다.
추가 실시양태에서, 본 발명의 가교결합 중합체는 상기 제1 실시양태의 화학식 (I)를 갖는 반복 단위 및 상기 제2 실시양태의 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 둘 다 포함한다.
상기 언급된 바와 같이, 본 발명의 중합체의 가교결합은 직접적으로, 즉 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 유리 카르복실산 및/또는 하이드록실 작용기 사이의 분자내 반응 및/또는 분자간 반응에 의해, 또는 간접적으로, 즉 작용화된 히알루론산, 또는 이의 유도체의 유리 카르복실산 및/또는 하이드록실 작용기 사이의 스페이서 모이어티에 의한 분자내 반응 및/또는 분자간 반응에 의해 일어날 수 있다.
따라서, 본 발명의 가교결합 중합체는 하기 유형의 직접 가교결합(여기서 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 사실상 "HYD"로 지칭됨):
Figure pct00006
또는 스페이서 모이어티에 의한 간접 가교결합(사실상 "SPC"로 지칭됨)를 포함할 수 있다:
Figure pct00007
일부 실시양태에서, 상기 스페이서 모이어티는 에피클로로하이드린, 1,4-부탄디올 디글리시딜 에테르, 1,2-에틸렌디올 디글리시딜 에테르, 1-(2,3-에폭시프로필)-2,3-에폭시사이클로헥산, N,N-디글리시딜아닐린, 에폭시-치환된 펜타에리트리톨, 및 이들의 혼합물 중에서 선택된 이작용성 또는 다작용성 에폭시로부터 유도된다.
바람직하게는, 상기 스페이서 모이어티는 1,4-부탄디올 디글리시딜 에테르로부터 유도된다. 이 경우, 본 발명의 가교결합 중합체는 하기 유형의 가교결합 중 하나 이상을 포함할 수 있다:
Figure pct00008
다른 실시양태에서, 상기 스페이서 모이어티는 디비닐 설폰으로부터 유도된다. 이 경우, 본 발명의 가교결합 중합체는 하기 유형의 가교결합을 포함할 수 있다:
Figure pct00009
다른 실시양태에서, 상기 스페이서 모이어티는 화학식 Y1-N=C=N-Y2-N=C=N-Y3의 비스카르보디이미드로부터 유도되며, 여기서 Y1 및 Y3은, 서로 독립적으로, 수소, 선형 또는 분지형 C1-C10 지방족 기, C1-C10 알콕시기, C1-C10 지환족 기, C1-C10 아릴, C1-C10 헤테로아릴, C1-C10 아랄킬, C1-C10 헤테로아랄킬이고, Y2는 선형 또는 분지형 C1-C10 지방족 기, C1-C10 알콕시기, C1-C10 지환족 기, C1-C10 아릴, C1-C10 헤테로아릴, C1-C10 아랄킬, C1-C10 헤테로아랄킬로부터 유도된 이작용성 모이어티이다.
이 경우, 본 발명의 가교 중합체는 하기 유형의 가교:
Figure pct00010
또는
Figure pct00011
또한, 치환기 Y3를 포함하는 스페이서 모이어티의 이미드 작용기에 대해 거울상 형태의 가교결합을 포함할 수 있다.
바람직하게는, 상기 비스카르보디이미드는 1,6-헥사메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,8-옥타메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,10 데카메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,12 도데카메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), PEG-비스(프로필(에틸카르보디이미드)), 2,2'-디티오에틸 비스(에틸카르보디이미드), 1,1'-디티오-p-페닐렌 비스(에틸카르보디이미드), 파라-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드), 1,1'-디티오-m-페닐렌 비스(에틸카르보디이미드) 및 이들의 혼합물로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, 상기 비스카르보디이미드는 파라-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드)이다.
추가 측면에서, 본 발명은 또한 하기 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-90% 포함하는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체에 관한 것이다:
Figure pct00012
상기 식에서,
R1, R2, R3, R4는, 서로 독립적으로, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, -CO-(CH2)2-COOY이고, 여기서 Y는 음전하 또는 H이며,
R은 Z(1) 또는 Z(2)이고,
R5는 -CO-CH3, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, 히알루론산의 아실기이고,
여기서 Z(1)은 화학식 (1)의 모이어티이고:
Figure pct00013
여기서 Z1은 -NR6CH2-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
Z(2)는 화학식 (2)의 모이어티이고:
Figure pct00014
여기서 Z4는 -NR6CH-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
R5는 Z(3) 또는 Z(4)이고, R은 NR6R7, 또는 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 알코올기, OH, O-, 히알루론산의 알코올기, 히알루론산의 아미노기이고, R6, R7은, 서로 독립적으로, H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
여기서 Z(3)은 화학식 (3)의 모이어티이고:
Figure pct00015
여기서 Z1은 -CH2- 또는 -CO-이고,
Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
Z(4)는 화학식 (4)의 모이어티이고:
Figure pct00016
여기서 Z4는 -CH-이고,
Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
R은 Z(1) 또는 Z(2)이고, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이다.
바람직하게는, 상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-60% 포함한다.
용어 "지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식"은 바람직하게는 C1-C10 알킬, 치환된 C1-C10 알킬, C2-C10 알케닐, 치환된 C2-C10 알케닐, C4-C10 디에닐, 치환된 C4-C10 디에닐, C2-C10 알키닐, 치환된 C2-C10 알키닐, 페닐, 치환된 페닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, C1-C10 알킬티오, 치환된 C1-C10 알킬티오, 페닐티오, 치환된 페닐티오, 아릴티오, 치환된 아릴티오, 카르보닐, 치환된 C1-C6 카르보닐, 카르복실, 치환된 C1-C6 카르복실, 아미노, 치환된 C1-C6 아미노, 아미드, 치환된 C1-C6 아미드, 설포닐, 치환된 C1-C6 설포닐, 설폰산, 포스포닐, 치환된 C1-C6 포스포닐, 폴리아릴, 치환된 폴리아릴, C3-C20 사이클로알킬, 치환된 C3-C20 사이클로알킬, C3-C20 헤테로사이클로알킬, 치환된 C3-C20 헤테로사이클로알킬, C2-C10 사이클로알케닐, 치환된 C2-C10 사이클로알케닐, C4-C10 사이클로디에닐, 치환된 C4-C10 사이클로디에닐, 또는 아미노산으로부터 선택되는 선형, 분지형 또는 고리형, 포화 또는 불포화, 지방족 또는 방향족인 모이어티를 의미한다. 용어 "치환된"은 적어도 하나의 할로겐, 하이드록실, C1-C4 알킬, 카르복실, 또는 이들의 조합을 의미한다.
바람직하게는, Z3, Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 글루코스, 갈락토스, 아라비노스, 자일로스, 만노스, 락토스, 트레할로스, 겐티오비오스, 셀로비오스, 셀로트리오스, 말토스, 말토트리오스, 키토비오스, 키토트리오스, 만노비오스, 멜리비오스, 프럭토스, N-아세틸 글루코사민, N-아세틸 갈락토사민의 모이어티, 또는 이들의 조합이다.
보다 바람직하게는, Z3은 H, 글루코스, 갈락토스, 만노스, N-아세틸글루코사민, N-아세틸 갈락토사민의 모이어티, 또는 이들의 조합이다.
특히 바람직한 실시양태에서, 화학식 Z의 모이어티는 락토스 또는 갈락토스의 모이어티이고, 여기서 Z는 Z(1), Z(2), Z(3) 및 Z(4) 중 어느 하나이다.
제1 실시양태에서, 가교결합된 중합체에 존재하는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위의 20-60%, 보다 바람직하게는 30-50%에서, R은 Z(1) 또는 Z(2)이다. 바람직하게는, 이들 제1 실시양태에서, R5는 -COCH3이다.
제2 실시양태에서, 가교결합 중합체에 존재하는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위의 5 내지 30%, 보다 바람직하게는 10 내지 20%에서, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이다. 바람직하게는, 이러한 제2 실시양태에서, R5의 10-20%는 Z(3)이고 R5의 90-80%는 -COCH3인 반면, R은 O-이다.
추가 실시양태에서, 본 발명의 가교결합 중합체는 상기 제1 실시양태의 화학식 (I)를 갖는 반복 단위 및 상기 제2 실시양태의 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 둘 다 포함한다.
상기 구조식에서 알 수 있는 바와 같이, 히알루론산 또는 이의 유도체는 Z(1), Z(2), Z(3) 또는 Z(4)인 화학식 Z의 잔기와 하기에 의한 접합을 통해 작용화된다:
1) 1차 아민 또는 암모니아 공급원(source)으로의 Z의 전구체의 환원적 아민화(reuctive amination)를 통한, 히알루론산 또는 이의 유도체의 카르복실기와 아민 간의 아미드 결합,
2) 환원적 아민화를 통한, 사전 탈아세틸화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 아민기와 모이어티 Z 간의 아민 결합,
3) 사전 탈아세틸화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 아민기와 모이어티 Z의 전구체의 카르복실기 간의 아미드 결합.
따라서, 추가 측면에서, 본 발명은 하기 단계를 포함하는, 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 제조 방법에 관한 것이다:
i) 부분 또는 완전 탈아세틸화된 히알루론산 또는 이의 유도체를 제공하는 단계;
ii) 환원적 아민화 반응에 의해 단당류, 이당류, 올리고당류의 아민 유도체를 제공하는 단계;
iii) a) 카르보디이미드의 존재하에서 및/또는 카르복시기 활성화제의 존재하에서 상기 단계 i)로부터의 히알루론산을 단계 ii)로부터의 아민 유도체와 반응시키거나,
b) 아미노보란의 존재하에서 상기 단계 i)로부터의 부분 또는 완전 탈아세틸화된 유도체를 단당류, 이당류, 올리고당류와 반응시키거나;
c) 카르보디이미드의 존재하에서 및/또는 카르복시기 활성화제의 존재하에서 단계 i)로부터의 부분 또는 완전 탈아세틸화된 유도체를 단당류, 이당류, 올리고당류의 카르복실 유도체와 반응시키거나;
d) 카르보디이미드의 존재하에서 및/또는 카르복시기 활성화제의 존재하에서 단계 iii-b)에서 수득된 유도체를 단계 ii)로부터의 아민 유도체와 반응시키거나;
e) 카르보디이미드의 존재하에서 및/또는 카르복시기 활성화제의 존재하에서 단계 iii-c)에서 수득된 유도체를 단계 ii)로부터의 아민 유도체와 반응시키는 단계; 및
iv) 상기 수득한 작용와 히알루론산 또는 이의 유도체를 유기 용매로 침전시키는 단계.
놀랍게도, 아미노보란은 카르보닐기에 비해 이민기의 환원에서 현저한 선택성을 가지며 수성 환경과 양립가능(compatible)하므로, 1차 아민, 암모니아 공급원, 및 다당류의 아민 잔기의 존재하에서, 환원 당의 효과적인 아민 환원을 가능케 한다는 것이 발견되었다. 동시에, 카르보디이미드 및/또는 카르복실기 활성화제의 존재는 에스테르 유도체의 형성에 비해 뛰어난 선택성으로 히알루론산의 아미드 유도체의 형성을 효과적으로 촉진한다. 따라서, 전 공정은 유리직하게는 화학적 스페이서의 첨가 필요없이 히알루론산의 주쇄에 단당류, 이당류, 및 올리고당류의 접합 가능성을 제공한다.
본 발명에 따른 작용화된 유도체의 제조에 사용될 수 있는 히알루론산의 유도체는 바람직하게는 다음과 같다:
- 히알루론산나트륨, 히알루론산칼륨, 히알루론산칼슘, 히알루론산마그네슘, 히알루론산아연, 히알루론산코발트, 히알루론산암모늄, 히알루론산테트라부틸암모늄, 및 이들의 혼합물과 같은 히알루론산 염,
- EP0216453B1에 또한 기술된 것과 같은, 카르복실기의 부분 또는 전체가 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 또는 복소환식 계열 알코올로 에스테르화된, 히알루론산 에스테르,
- EP0341745B1에 또한 기술된 것과 같은, 카르복실기의 부분 또는 전체가 동일한 다당류 쇄 또는 기타 쇄의 알코올기로 에스테르화된, 자기-가교결합된 히알루론산 에스테르,
- EP0265116B1에 또한 기술된 것과 같은, 카르복실기의 부분 또는 전체가 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 또는 복소환식 계열 폴리알코올로 에스테르화되고, 스페이서 쇄을 통해 가교결합을 형성하는, 가교결합된 히알루론산 화합물,
- WO96/357207에 또한 기술된 것과 같은, 숙신산 또는 숙신산 중금속 염과 히알루론산, 또는 부분 또는 전체 히알루론산 에스테르와의 세미-에스테르,
- WO95/25751에 또한 기술된 것과 같은 O-황산화 유도체, 또는 WO1998/045335에 또한 기술된 것과 같은 N-황산화 유도체.
상기 단당류, 이당류, 또는 올리고당류는 모이어티 Z에 대해 상기 정의된 것에 상응한다.
상기 아미노보란은 바람직하게는 2-메틸피리딘 보란, 5-에틸-2-메틸피리딘 보란, 피리딘 보란, 트리메틸아민 보란, 트리에틸아민 보란, 디메틸아민 보란, tert-부틸아민 보란, 또는 이들의 혼합물이다. 보다 바람직하게는, 상기 아미노보란은 2-메틸피리딘 보란, 5-에틸-2-메틸피리딘 보란, 또는 이들의 혼합물이다.
아미노보란은 천연 상태로 사용될 수 있거나 알코올과 같은 수-혼화성 유기 용매에 미리 용해되거나 분산될 수 있으며, 상기 알코올 중 가장 바람직한 것은 메탄올, 에탄올, 2-프로판올, 또는 이들의 혼합물이다.
용어 "유기 용매”는 반응 수용액의 유전 상수(dielectric constant)를 낮출 수 있는 유기 수-혼화성 용매를 의미한다. 적합한 유기 용매는 아세톤, 메탄올, 에탄올, 2-프로판올, 또는 이들의 혼합물이며, 유기 용매는 바람직하게는 에탄올 또는 2-프로판올 또는 이들의 혼합물이다.
상기 용어 "카르복실기 활성화제”는 상기 기의 하이드록실 작용성을 변경시켜 치환 반응에서 이의 제거를 촉진하는 시약을 의미한다. 카르복실기의 활성화제는 하이드록시벤조트리아졸, 1,1'-카르보디이미다졸, p-니트로페놀, N-하이드록시설포숙신이미드의 나트륨 염, N-하이드록시숙신이미드, 및 이들의 혼합물을 포함한다.
적합한 카르보디이미드는 디사이클로헥실카르보디이미드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드, N,N'-디이소프로필카르보디이미드 및 이들의 혼합물을 포함한다.
선택적으로, 단계 iv)에서 분리된 침전물은 물의 퍼센트가 최대 30%, 보다 바람직하게는 최대 10%인, 물과 유기 용매의 혼합물로 세척된다.
바람직하게는, 단계 iii)에서, 히알루론산 또는 이의 유도체에 대한 단당류, 이당류, 또는 올리고당류의 몰비는 0.5 내지 30, 더욱 바람직하게는 1 내지 20, 보다 더 바람직하게는 1 내지 10이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 가교결합 중합체의 제조를 위한, 상기 기재된 바와 같은 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 용도에 관한 것이다.
이 경우, 추가 측면에서, 본 발명은 상기 기재된 가교결합 중합체의 제조 방법에 관한 것으로,
a) 상기 기재된 바와 같은 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체를 제공하는 단계,
b) 염기의 존재하에서 상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체를 비스카르보디이미드 또는 디비닐 설폰, 또는 C2-C20 지방족 에폭시, 이의 할로하이드린, 에피할로하이드린, 및 할라이드 중에서 선택되는 에폭시 화합물, 또는 메틸피리디늄의 할라이드, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 가교결합제와 반응시키는 단계, 및
c) 가교결합 중합체 겔을 수득하는 단계를 포함한다.
추가 측면에서, 본 발명은 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료에서의 이러한 가교결합 중합체의 용도에 관한 것이다. 이들 수용체의 과다/과소 조절과 관련된 장애의 비제한적인 예는 비알코올성 지방간염, 판상형 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물, 유착, 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정이다.
신생물 및 섬유화 과정의 예는 급성 림프모구 백혈병(acute lymphoblastic leukaemia), 특발성 폐섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis), 간 섬유증(hepatic fibrosis), 심장 섬유증(cardiac fibrosis), 신장 섬유증(renal fibrosis), 및 난소, 전립선, 폐, 위, 피부, 갑상선 및 췌장 종양을 포함한다.
다른 측면에서, 본 발명은 바람직하게는 정형외과적 장애의 치료에서 세포 성장을 위한 생체재료 또는 스캐폴드로서의 상기 가교결합 중합체 또는 이의 유도체의 용도에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 성형/미용 수술, 혈액 투석, 순환기내과, 혈관의학과, 안과, 이비인후과, 치과, 부인과, 비뇨기과, 피부과, 종양내과, 및 조직 수복에서 세포 성장을 위한 생체재료 또는 스캐폴드로서의 상기 가교결합 중합체 또는 이의 유도체의 용도에 관한 것이다.
가교결합 중합체는 또한 사용되는 대상물의 표면에 새로운 생물학적 특성을 제공하여 의료 분야 및 기타 산업 분야 모두에 사용되는 코팅 대상물의 생체 재료로 사용될 수 있다.
코팅될 수 있는 대상물은, 예를 들어, 카테터, 캐뉼라, 프로브, 심장 판막, 연조직 보철물, 동물 기원의 보철물, 인공 힘줄, 뼈 및 심혈관 보철물, 콘텍트 렌즈, 혈액, 신장, 심장, 췌장, 간용 인공 산소 공급 장치, 혈액 백, 주사기, 수술 기구, 여과 시스템, 실험실 기구, 세포 및 조직 배양 및 재생용 용기, 펩티드, 단백질 및 항체용 배지를 포함한다.
가교결합 중합체는 화장품 및 피부과에서도 사용할 수 있다.
추가 측면에서, 본 발명은 적어도 하나의 가교결합 중합체 및 적어도 하나의 약리학적 활성 물질 및/또는 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 적어도 하나의 물질을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
적합한 약리학적 활성 물질은 항생제, 항감염제, 항미생물제, 항바이러스제, 세포증식억제제, 세포독성제, 항종양제, 항염증제, 상처치유제(cicatrizant), 마취제, 진통제, 혈관수축제, 콜린성 또는 아드레날린성 작용제 및 길항제, 항혈전제, 항응고제, 지혈제, 섬유소용해제, 혈전용해제, 단백질 및 이의 단편, 펩티드, 폴리뉴클레오티드, 성장 인자, 효소, 백신, 또는 이들의 조합이다.
바람직하게는, 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 상기 물질은 콜라겐, 피브리노겐, 피브린, 알긴산, 알긴산나트륨, 알긴산칼륨, 알긴산마그네슘, 셀룰로스, 황산콘드로이틴, 황산더마탄, 황산케라탄, 헤파린, 황산헤파란, 라미닌, 피브로넥틴, 엘라스틴, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 폴리(락트산-코-글리콜)산, 폴리카프로락톤, 젤라틴, 알부민, 폴리(글리콜라이드-코-카프로락톤), 폴리(글리콜라이드-코-트리메틸렌 카보네이트), 하이드록시아파타이트, 인산삼칼슘, 인산이칼슘, 탈회골기질(demineralized bone matrix), 및 이들의 혼합물로부터 선택된다.
바람직하게는, 상기 적어도 하나의 가교결합 중합체 및 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 상기 적어도 하나의 물질은 100:1 내지 1:150의 중량비를 갖는다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 장애의 치료에서의 상기 약학 조성물의 용도에 관한 것이다. 이들 수용체의 과다/과소 조절과 관련된 장애의 비제한적인 예는 비알코올성 지방간염, 판상형 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물, 유착, 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 류마티스내과, 정형외과, 종양학과, 성형/미용 수술, 혈액 투석, 순환기내과, 혈관의학과, 안과, 이비인후과, 치과, 부인과, 비뇨기과, 종양내과, 피부과 및 조직 수복에서의 이러한 약학 조성물의 용도에 관한 것이다.
바람직하게는, 본 발명의 약학 조성물은 약학 조성물의 중량을 기준으로 10 중량% 이하의 상기 적어도 하나의 가교결합 중합체, 보다 바람직하게는 최대 5 중량%의 상기 적어도 하나의 가교결합 중합체를 포함한다. 상기 적어도 하나의 가교결합 중합체가 조성물의 중량을 기준으로 0.1 내지 5 중량%에 해당하는 약학 조성물이 특히 바람직하다.
특히 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 상기 기재된 바와 같은 적어도 하나의 가교결합 중합체, 및 하이드록시아파타이트, 인산삼칼슘 또는 이들의 혼합물을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 이들 조성물은 골격계 관련 정형외과 응용분야에서 유리하게 사용된다.
상기 약학 조성물은 흡입, 경구, 또는 근육내, 정맥내, 관절내, 경피, 피하, 또는 외부 또는 내부 국소 수단, 예를 들어 수술에 의해 투여될 수 있다.
바람직하게는, 상기 약학 조성물은 관절내, 피하, 경피 또는 국소 수단에 의해 투여된다.
일부 실시양태에서, 약학 조성물은 바람직하게는 피내, 피하, 근육내, 관절내 또는 안내 수단에 의해 장기, 지방, 점막, 잇몸, 연골 및 뼈 조직과 같은 신체의 경조직 또는 연조직 내로 주사가능한 형태이다.
다른 실시양태에서, 약학 조성물은 조직 수복 또는 재건, 바람직하게는 생물학적 조직의 생성 또는 치환, 또는 생물학적 조직의 충전, 예컨대 피부 충전 및 함몰부, 뼈 연골 또는 관절 충전에 사용하기 위한 것이다.
추가 실시양태에서, 약학 조성물은 피부과 제품 또는 화장품에 사용하기 위한 것이거나, 또는 의약으로서, 바람직하게는 생체 흡수성 임플란트로 사용하기 위한 것이다.
약학 조성물은 약학적으로 허용되는 부형제를 더 포함할 수 있다.
적합한 약학적으로 허용되는 부형제는 예를 들어, pH 조절제, 등장성 조절제, 용매, 안정제, 킬레이트제, 희석제, 결합제, 붕해제, 윤활제, 활택제, 착색제, 현탁제, 계면활성제, 동결보호제, 보존제, 및 산화방지제를 포함한다.
본 발명은 또한, 단독으로 또는 상술한 약리학적 활성 및/또는 생체활성 물질의 적어도 하나와 조합하여, 상술한 가교결합 중합체를 포함하는 생체재료에 관한 것이다. 상기 생체재료는 마이크로스피어, 나노스피어, 멤브레인, 스폰지, 와이어, 필름, 거즈, 가이드 웨이(guide way), 패드, 겔, 하이드로겔, 직물, 부직포, 캐뉼라, 또는 이들 조합의 형태일 수 있다.
가교결합 중합체에 대해 유리하고 이점이 있는 것으로 확인된 모든 측면은 상기 보고된 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체, 제조 방법, 조성물, 생체재료 및 용도에 대해서도 마찬가지로 바람직하고 유리한 것으로 간주되어야 하는 것으로 이해해야 한다.
또한, 상기 기재된 가교결합 중합체, 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체, 제조 방법, 조성물, 생체재료 및 용도의 바람직한 측면의 모든 가능한 조합도 마찬가지로 바람직한 것으로 이해해야 한다.
다음은 예시 목적으로 제공된 본 발명의 작업 실시예이다.
실시예
실시예 1. 환원 당(reducing sugar)의 벤질아민 유도체 합성
물 및 메탄올(3:1) 중의 락토스(3% w/v), 벤질아민(5% w/v) 및 5-에틸-2-메틸피리딘 보란(6% w/v)의 용액을 55℃의 온도에서 교반하에 두고 20시간 동안 반응시켰다. 이어, 혼합물을 냉각하고, 디클로로메탄으로 추출한 후, 마지막으로 수상을 저압에서 증발시켜 결정질 백색 고체를 얻은 다음, 이를 디에틸 에테르로 세척하고 마지막으로 경사분리(decantation)에 의해 회수하고 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 90%.
실시예 2. 환원 당의 1차 아민 유도체 합성
메탄올 및 물(1:1) 중의 실시예 2에 따라 수득한 유도체(4% w/v)의 용액을 실온에서 자기 교반하에 두었다. 이어, 탄소 매질 상에 Pd를 첨가하고(금속 매질 상에 0.4% w/v 10%), 생성된 시스템을 수소로 가압하였다. 48시간 후, 시스템을 감압하고, 동일 부피의 물을 첨가한 후, 고체를 경사분리한 다음, 셀라이트 여과하여 용액을 얻었다. 얻어진 용액을 감압 건조하여 백색 고체를 얻었다. 이렇게 얻은 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 96%.
실시예 3. 락토비온산의 이미다졸 아미드에 기반한 아실화 용액의 합성
디메틸 설폭사이드 중의 락토비온산(10% w/v) 용액을 1,1-카보디미다졸(1 eq.)과 혼합하고, 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 이어 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 4. 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨의 합성(48시간)
히알루론산나트륨(2% w/v)을 하이드라진 일수화물 중의 황산하이드라진(1% w/v) 용액에 첨가하고, 생성된 시스템을 55℃로 가열한 다음, 48시간 동안 교반하에 반응하도록 두었다. 이어, 조 반응 생성물을 냉각하고, 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 분리한 다음, 에탄올로 세척하고, 감압하에서 24시간 동안 건조시켰다. 그 후, 얻은 생성물(5% w/v)을 아세트산 수용액(5% V/V)에 용해시키고, 용액을 4℃로 냉각한 뒤, HIO3 수용액(0.5 M, 60% V/V)을 적가하였다. 혼합물을 동일한 조건에서 1시간 동안 반응하도록 둔 다음, 요오드화수소산 용액(57% w/v, 용액의 11% V/V)을 첨가하고, 시스템을 15분 더 반응하도록 두었다. 이후 용액을 완전 탈색될 때까지 디에틸 에테르로 추출하고, 수상의 pH를 NaOH(1N, 0.1N)로 7-7.5로 조정하고, 마지막으로 생성물을 에탄올로 침전시킨 다음, 에탄올로 세척하고, 건조시켰다. 생성물을 1H-NMR 및 IR 분광법을 통해 특성화하였다. 반응 수율: 83%, 탈아세틸화도: 11%.
실시예 5. 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨의 합성(72시간)
하이드라진 수화물 중의 히알루론산나트륨(2% w/v) 및 황산하이드라진(1% w/v) 용액을 55℃의 온도에서 72시간 동안 자기 교반하에 두었다. 반응 시간이 끝나면, 에탄올을 첨가하여 중합체를 침전시키고, 얻은 고체를 추가 에탄올로 세척하고 질소 흐름하에 건조시켰다. 생성물을 아세트산 수용액(6% w/v, 5% 아세트산)에 재용해시킨 후, 0-5℃로 온도 조절하고, 수중 요오드산 용액(7.5% w/v)의 부피(부피로 0.8 eq.)를 첨가하였다. 생성된 시스템을 1시간 동안 교반한 다음, 수성 요오드화수소산(57%)의 부피(부피로 0.11 eq.)를 첨가하고 15분 더 반응하도록 두었다. 이어, NaOH 1M 수용액을 첨가하여 pH를 9로 만들고, 용액을 완전히 탈색될 때까지 디에틸 에테르로 추출하였다. 그 후, 생성물을 에탄올로 침전시키고, 에탄올로 세척한 다음, 감압 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 86%, 탈아세틸화도: 20%.
실시예 6. 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨의 합성(96시간)
히알루론산나트륨(2% w/v)을 하이드라진 일수화물 중의 황산하이드라진(1% w/v) 용액에 첨가하고, 생성된 시스템을 55℃로 가열한 뒤, 96시간 동안 교반하에 반응하도록 두었다. 이어, 조 반응 생성물을 냉각하고, 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 분리한 다음, 에탄올로 세척하고, 감압하에서 24시간 동안 건조시켰다. 그 후, 얻은 생성물(5% w/v)을 아세트산 수용액(5% V/V)에 용해시키고, 용액을 4℃로 냉각시킨 후, HIO3 수용액(0.5 M, 60% V/V)을 적가하였다. 혼합물을 동일한 조건에서 1시간 동안 반응시킨 다음, 요오드화수소산 용액(57% w/v, 용액의 11% V/V)을 첨가하고 15분 더 반응하도록 두었다. 그 다음 용액을 완전히 탈색될 때까지 디에틸 에테르로 추출하고, 수상의 pH를 NaOH(1N, 0.1N)로 7-7.5로 조정한 다음, 마지막으로 생성물을 에탄올로 침전시키고, 에탄올로 세척한 뒤, 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 86%, 탈아세틸화도: 21%.
실시예 7. 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨의 합성(120시간)
히알루론산나트륨(2% w/v)을 하이드라진 일수화물 중의 황산하이드라진(1% w/v) 용액에 첨가하고, 생성된 시스템을 55℃로 가열한 다음, 120시간 동안 교반하에 반응하도록 두었다. 이어서, 조 반응 생성물을 냉각하고 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 분리한 다음, 에탄올로 세척하고, 감압하에서 24시간 동안 건조시켰다. 그 후, 얻은 생성물(5% w/v)을 아세트산 수용액(5% V/V)에 용해시키고, 용액을 4℃로 냉각한 뒤, HIO3 수용액(0.5 M, 60% V/V)을 적가하였다. 혼합물을 동일한 조건에서 1시간 동안 반응시킨 다음, 요오드화수소산 용액(57% w/v, 용액의 11% V/V)을 첨가하고 시스템을 15분 더 반응하도록 두었다. 그 다음, 용액을 완전히 탈색될 때까지 디에틸 에테르로 추출하고, 수상의 pH를 NaOH(1N, 0.1N)로 7-7.5로 조정한 다음, 마지막으로 생성물을 에탄올로 침전시키고, 에탄올로 세척한 뒤, 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 89%, 탈아세틸화도: 26%.
실시예 8. 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨의 합성(24시간)
하이드라진 수화물 중의 히알루론산나트륨(2% w/v) 및 요오드화암모늄(0.7% w/v) 용액을 24시간 동안 60℃의 온도에서 자기 교반하에 두었다. 반응 시간이 끝나면, 에탄올을 첨가하여 중합체를 침전시키고, 얻은 고체를 에탄올로 세척한 다음, 질소 흐름하에서 건조시켰다. 생성물을 아세트산 수용액(6% w/v, 5% 아세트산)에 재용해시키고, 0-5℃로 온도 조절한 다음, 수중 요오드산(7.5% w/v) 용액의 부피(부피로 0.8 eq.)를 첨가하였다. 생성된 시스템을 1시간 동안 교반한 다음, 수성 요오드화수소산(57%)의 부피(부피로 0.11 eq.)를 첨가하고 15분 더 반응하도록 두었다. 이어, NaOH 1M 수용액을 첨가하여 pH를 9로 만들고 용액을 완전히 탈색될 때까지 디에틸 에테르로 추출하였다. 그 후, 생성물을 에탄올로 침전시키고, 에탄올로 세척한 다음, 감압 건조시켰다. 이렇게 얻은 고체를 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 88%, 탈아세틸화도: 15%.
실시예 9. 히알루론산 또는 이의 유도체의 테트라부틸암모늄염의 제조
테트라부틸암모늄 용액(40% w/v)으로 미리 활성화시킨 테트라부틸암모늄 염(용액의 50% V/V) 형태의 설폰 수지로 채워진 컬럼에 히알루론산나트륨 또는 이의 유도체의 수용액(1.6% w/v)을 통과시켰다. 이어, 용출된 용액을 동결건조시켰다.
실시예 10. 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 아민 유도체로의 아미드화(amidation))
히알루론산나트륨(0.3% w/v), 하이드록시벤조트리아졸(0.4% w/v), N-에틸-N-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드(0.6% w/v) 및 실시예 2에 따라 수득한 락토스의 아민 유도체(2% w/v)를 함유하는 수용액을 0.1M NaOH 또는 0.1M HCl의 수용액을 첨가하여 pH를 6.8로 유지하면서 22시간 동안 교반하에 두었다. 이어, NaCl(5 g/100 ml)을 첨가하고, 생성물을 메탄올로 침전시켰다. 얻은 고체를 경사분리에 의해 회수하고 메탄올과 물(4:1), 순수 메탄올로 세척하고 마지막으로 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 86%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 50%.
실시예 11. 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 아민 유도체로의 아미드화)
히알루론산나트륨(0.5% w/v), N-하이드록시숙신이미드(1.3% w/v), N-에틸-N-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드(1.0% w/v) 및 실시예 2에서 수득한 락토스의 아민 유도체(2.1% w/v)를 함유하는 물과 디옥산(1:1)의 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하에 두었다. 반응 시간이 끝나면, 탄산수소나트륨을 첨가하여 pH를 대략 9-10으로 만들고, 용액을 3시간 더 교반하에 두었다. 아세트산(50%, V/V)을 첨가하여 혼합물의 pH를 7까지 조정한 다음, 염화나트륨(5 g/100 ml)을 첨가하고, 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 에탄올과 에테르로 세척하고, 마지막으로 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 85%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 21%.
실시예 12. 유기 매질 상에서 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 아민 유도체로의 아미드화)
디메틸설폭사이드 중의 히알루론산의 테트라부틸암모늄염(2% w/v) 용액을 수성 염산으로 pH 3까지 처리한 후. 1,1-카보닐디이미다졸(1.5 eq.)을 첨가하여 12시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 용액을 구치 도가니(Gooch crucible)에서 여과하여 고체 부분을 제거하고, 실시예 2에서 수득한 아민 유도체(2 eq.)를 첨가한 뒤, 생성된 혼합물을 48시간 동안 반응하도록 두었다. 그 후, 염화나트륨 포화 용액을 염화나트륨 중 5% w/v의 최종 역가가 얻어지기에 충분한 부피로 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하에 두고, 마지막으로 아세톤을 첨가하여 생성물을 침전시키고, 얻은 고체를 분리한 다음, 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 80%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 10%.
실시예 13. 유기 매질 상에서 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 아민 유도체로의 아미드화)
디메틸포름아미드 중의 히알루론산나트륨(2% w/v) 용액을 1,1-카르보닐디이미다졸(1 eq.)과 혼합하였다. 생성된 용액을 6시간 동안 반응하도록 둔 후, 실시예 2에서 수득한 아민 유도체(5 eq.)를 첨가하고, 시스템을 36시간 동안 더 반응하도록 두었다. 이어, 생성물을 아세톤으로 침전시킨 후 분리하고, 아세톤으로 세척한 다음, 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 80%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 57%.
실시예 14. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아민 유도체(환원 당으로의 환원적 아미드화)
실시예 6에 따라 수득한 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 수용액(1.5% w/v)을 락토스(10 eq.)와 혼합하고, pH를 아세트산(100%)으로 5.5에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하였다. 생성된 시스템을 60℃로 가열한 다음, 메탄올 중의 2-메틸피리딘 보란(10 eq., 10% w/v) 용액을 첨가하고, 동일한 조건에서 2시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 용액의 pH를 수성 염산(4N)으로 2-3에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하고, 시스템을 동일한 조건에서 15분 동안 유지한 후, 시스템을 냉각하고, pH를 NaOH(1N)로 7-7.5까지 조정한 다음, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 마지막으로, 용액의 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 용액을 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 80%, 환원 당을 사용한 아미드화: 21%.
실시예 15. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아민 유도체(환원 당으로의 환원적 아미드화)
실시예 6에 따라 수득한 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 수용액(1.5% w/v)을 락토스(10 eq.)와 혼합하고, pH를 아세트산(100%)으로 5.5에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하였다. 생성된 시스템을 60℃로 가열한 다음, 메탄올 중의 2-메틸피리딘 보란(10 eq., 10% w/v) 용액을 첨가하고, 동일한 조건에서 2시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 염산 수용액(4N)으로 용액의 pH를 2-3에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하고, 시스템을 동일한 조건에서 15분 동안 유지하였다. 그 후, 시스템을 냉각하고, NaOH(1N)를 사용하여 pH를 7-7.5로 조정하고, 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 염화나트륨을 첨가하였다. 이어서, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시키고, 건조시킨 다음, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 84%, 환원 당을 사용한 아미드화: 21%.
실시예 16. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아민 유도체(환원 당으로의 환원적 아미드화)
실시예 4에 따라 수득한 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 수용액(1.5% w/v)을 락토스(10 eq.)와 혼합하고, pH를 아세트산(100%)으로 5.5에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하였다. 생성된 시스템을 60℃로 가열한 다음, 메탄올 중의 2-메틸피리딘 보란(10 eq., 10% w/v) 용액을 첨가하고, 동일한 조건에서 2시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 염산 수용액(4N)으로 용액의 pH를 2-3에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하고, 시스템을 동일한 조건에서 15분 동안 유지하였다. 그 후, 시스템을 냉각하고, NaOH(1N)로 pH를 7-7.5로 조정한 뒤, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 마지막으로, 용액의 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 용액을 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시키고, 건조시킨 다음, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 78%, 환원 당에 의한 아미드화: 11%.
실시예 17. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아민 유도체(환원 당으로의 환원적 아미드화)
실시예 5에 따라 수득한 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 수용액(2% w/v)을 락토스(3 eq.)와 혼합하고, pH를 아세트산(100%)으로 5.5에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하였다. 생성된 시스템을 60℃로 가열한 다음, 이소프로판올 중의 2-메틸피리딘 보란(1 eq., 10% w/v) 용액을 첨가하고, 동일한 조건에서 3시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 반응 pH를 2-3에 가까운 값에 도달할 때까지 수성 염산(4N)으로 조정하고, 시스템을 동일한 조건에서 15분 동안 유지하였다. 이후, 시스템을 냉각하고 이소프로판올을 첨가하여 생성물을 침전시킨 뒤, 이소프로판올 및 물(80:20 및 90:10)로 세척하고, 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 95%, 환원 당에 의한 아미드화: 20%.
실시예 18. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아민 유도체(환원 당으로의 환원적 아미드화)
실시예 8에 따라 수득한 부분 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 수용액(2% w/v)을 락토스(3 eq.)와 혼합하고, pH를 아세트산(100%)으로 5.5에 가까운 값에 도달할 때까지 조정하였다. 생성된 시스템을 60℃로 가열한 다음, 이소프로판올 중의 2-메틸피리딘 보란(1 eq., 10% w/v) 용액을 첨가하고, 동일한 조건에서 3시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 반응 pH를 2-3에 가까운 값에 도달할 때까지 수성 염산(4N)으로 조정하고, 시스템을 동일한 조건에서 15분 동안 유지하였다. 그 후, 시스템을 냉각하고, 이소프로판올을 첨가하여 생성물을 침전시킨 뒤, 이소프로판올 및 물(80:20 및 90:10)로 세척하고, 감압 건조하였다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 95%, 환원 당에 의한 아미드화: 15%.
실시예 19. 실시예 14-18에 따라 수득한 화합물의 아미드 유도체(환원 당으로 히알루론산을 환원적 아미드화시켜 수득한 유도체의 아미드화)
실시예 17에 따라 수득한 히알루론산의 아민 유도체(0.25% w/v) 수용액을 실시예 1에서 수득한 아민 유도체(30 eq.)와 혼합하고, 생성된 용액을 수산화나트륨(1N, 0.1N) 또는 염산(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 pH 6.8로 만들었다. 이어, 물:디메틸 설폭사이드(1.1:1)에 미리 용해시킨 (3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드(5 eq., 11% w/v) 및 하이드록시벤조트리아졸(3.5 eq., 6% w/v) 용액을 적가하였다. 수산화나트륨(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 용액의 pH를 6.8로 조절하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 수산화나트륨/염산(0.1N)을 사용하여 pH를 7로 적절히 만들고, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 그 후, 용액을 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시킨 다음, 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 90%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 90%.
실시예 20. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 카르복실산 유도체로의 아실화)
수중 실시예 6에 따라 수득한 탈아세틸화된 히알루론산나트륨 용액(0.30% w/v)을 락토비온산(30 eq.)과 혼합하고, 생성된 용액을 수산화나트륨(1N, 0.1N) 또는 염산(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 pH 6.8로 만들었다. 이어, 미리 물:디메틸 설폭사이드(1.1:1)에 용해시킨 (3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드(5 eq., 11% w/v) 및 하이드록시벤조트리아졸(3.5 eq., 6% w/v) 용액을 적가하였다. 수산화나트륨(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 용액의 pH를 6.8로 조절하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 수산화나트륨/염산(0.1N)을 사용하여 pH를 7로 적절히 만들고, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 그 후, 용액을 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 79%, 락토비온산에 의한 아실화: 5%.
실시예 21. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 카르복실산 유도체로의 아실화)
실시예 6에 따라 수득한 탈아세틸화 히알루론산나트륨 용액(0.5 eq., 0.30% w/v)에 실시예 3에 따라 제조된 락토비온산 용액을 첨가하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 수산화나트륨/염산(0.1N)을 사용하여 pH를 7로 적절히 만들고, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 그 후, 용액을 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 87%, 락토비온산에 의한 아실화: 16%.
실시예 22. 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 카르복실산 유도체로의 아실화)
실시예 6에 따라 수득한 탈아세틸화 히알루론산나트륨 용액(0.5 eq., 30% w/v)에 실시예 3에 따라 제조된 락토비온산 용액을 첨가하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 염화나트륨 포화 용액을 염화나트륨 중 5% w/v의 최종 역가가 얻어지기에 충분한 부피로 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하에 두고, 마지막으로 아세톤을 첨가하여 생성물을 침전시켰다; 얻은 고체를 분리한 다음 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 85%, 락토비온산에 의한 아실화: 16%.
실시예 23. 유기 매질 상에서 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 카르복실산 유도체로의 아실화)
디메틸 설폭사이드 중의 실시예 9에 따라 수득한 탈아세틸화 테트라부틸암모늄 히알루로네이트(0.5 eq., 2% w/v) 용액에 실시예 3에 따라 제조된 락토비온산 용액을 첨가하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 염화나트륨 포화 용액을 염화나트륨 중 5% w/v의 최종 역가가 얻어지기에 충분한 부피로 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하에 두고, 마지막으로 아세톤을 첨가하여 생성물을 침전시켰다; 얻은 고체를 분리한 다음 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 80%, 락토비온산에 의한 아실화: 10%.
실시예 24. 유기 매질 상에서 부분 탈아세틸화된 히알루론산의 아미드 유도체(환원 당의 카르복실산 유도체로의 아실화)
디메틸포름아미드 중의 실시예 6에 따라 수득한 탈아세틸화 히알루론산나트륨 용액(0.5 eq., 2% w/v)에 실시예 3에 따라 제조한 락토비온산 용액을에 첨가하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 염화나트륨 포화 용액을 염화나트륨 중 5% w/v의 최종 역가가 얻어지기에 충분한 부피로 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하에 두고, 마지막으로 아세톤을 첨가하여 생성물을 침전시키고, 얻은 고체를 분리한 다음 건조시켰다. 생성물을 IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 88%, 락토비온산에 의한 아실화: 19%.
실시예 25. 실시예 20 내지 24에 따라 수득한 화합물의 아미드 유도체(환원 당의 아민 유도체로 히알루론산을 아실화시켜 수득한 유도체의 아미드화)
수중 실시예 24에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(0.25% w/v)을 실시예 1에서 수득한 아민 유도체(30 eq.)와 혼합하고, 수산화나트륨(1N, 0.1N) 또는 염산(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 생성된 용액의 pH를 6.8로 만들었다. 이어, 미리 물:디메틸 설폭사이드(1.1:1)에 용해시킨 (3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드(5 eq., 11% w/v) 및 하이드록시벤조트리아졸(3.5 eq., 6% w/v) 용액을 적가하였다. 수산화나트륨(1N, 0.1N)을 적절히 첨가하여 용액의 pH를 6.8로 조절하고, 생성된 조 생성물을 실온에서 16시간 동안 반응하도록 두었다. 이어, 수산화나트륨/염산(0.1N)을 사용하여 pH를 7로 적절히 만들고, 생성된 용액을 물에 대해 반복적으로 투석하였다(컷오프 12-14000). 그 후, 용액을 역가가 5% w/v에 도달할 때까지 염화나트륨과 혼합하고, 목적하는 생성물을 에탄올로 침전시킨 뒤, 건조시키고, IR 및 1H-NMR 분광법으로 특성화하였다. 반응 수율: 84%, 환원 당의 아민 유도체에 의한 아미드화: 93%.
실시예 26. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
디메틸 설폭사이드 중의 실시예 10 및 9에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(2.5%, w/v)에 트리에틸아민(히알루론산의 아미드 유도체 4%)을 25℃에서 교반하에 첨가하고, 생성된 용액을 30분 더 교반하였다. 디메틸 설폭사이드(1% w/v) 중의 2-클로로-1-메틸피리디늄 요오다이드(히알루론산의 아미드 유도체의 10.2%) 용액을 20분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 30℃에서 15시간 더 교반하였다. 이어, 총 부피의 30%에 해당하는 염화나트륨(2.5% w/v) 용액을 조 반응 생성물에 천천히 첨가하고, 형성된 혼합물을 도달된 부피의 약 200%에 해당하는 부피의 아세톤으로 서서히 옮겼다. 형성된 침전물을 분리하고, 아세톤:물(5:1) 혼합물로 3회 세척한 다음 아세톤만으로 1회 세척하였다. 이어서, 생성물을 30℃에서 24시간 동안 감압 건조시킨 다음, 4℃에서 보관하였다.
[아미드 50%, 에스테르 25%, 나트륨 25%]
실시예 27. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
디메틸 설폭사이드 중의 실시예 10 및 9에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(2.5%, w/v)에 트리에틸아민(히알루론산의 아미드 유도체 1.6%)을 25℃에서 교반하에 첨가하고, 생성된 용액을 30분 더 교반하였다. 디메틸 설폭사이드(1% w/v) 중의 2-클로로-1-메틸피리디늄 요오다이드(히알루론산의 아미드 유도체의 4.1%) 용액을 20분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 30℃에서 15시간 더 교반하였다. 이어, 총 부피의 30%에 해당하는 염화나트륨(2.5% w/v) 용액을 조 반응 생성물에 천천히 첨가하고, 형성된 혼합물을 도달된 부피의 약 200%에 해당하는 부피의 아세톤으로 서서히 옮겼다. 형성된 침전물을 분리하고, 아세톤:물(5:1) 혼합물로 3회 세척한 다음 아세톤만으로 1회 세척하였다. 이어서, 생성물을 30℃에서 24시간 동안 감압 건조시킨 다음, 4℃에서 보관하였다.
[아미드 50%, 에스테르 10%, 나트륨 40%]
실시예 28. 히알루론산의 아민 유도체의 가교결합 생성물.
디메틸 설폭사이드 중의 실시예 15 및 9에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(2.5%, w/v)에 트리에틸아민(히알루론산의 아미드 유도체 4%)을 25℃에서 교반하에 첨가하고, 생성된 용액을 30분 더 교반하였다. 디메틸 설폭사이드(1% w/v) 중의 2-클로로-1-메틸피리디늄 요오다이드(히알루론산의 아미드 유도체의 10.2%) 용액을 20분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 30℃에서 15시간 더 교반하였다. 이어, 총 부피의 30%에 해당하는 염화나트륨(2.5% w/v) 용액을 조 반응 생성물에 천천히 첨가하고, 형성된 혼합물을 도달된 부피의 약 200%에 해당하는 부피의 아세톤으로 서서히 옮겼다. 형성된 침전물을 분리하고, 아세톤:물(5:1) 혼합물로 3회 세척한 다음 아세톤만으로 1회 세척하였다. 이어서, 생성물을 30℃에서 24시간 동안 감압 건조시킨 다음, 4℃에서 보관하였다.
[에스테르 30%, 나트륨 70%]
실시예 29. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
디메틸 설폭사이드 중의 실시예 21 및 9에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(2.5%, w/v)에 트리에틸아민(히알루론산의 아미드 유도체 4%)을 25℃에서 교반하에 첨가하고, 생성된 용액을 30분 더 교반하였다. 디메틸 설폭사이드(1% w/v) 중의 2-클로로-1-메틸피리디늄 요오다이드(히알루론산의 아미드 유도체의 10.2%) 용액을 20분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 30℃에서 15시간 더 교반하였다. 이어, 총 부피의 30%에 해당하는 염화나트륨(2.5% w/v) 용액을 조 반응 생성물에 천천히 첨가하고, 형성된 혼합물을 도달된 부피의 약 200%에 해당하는 부피의 아세톤으로 서서히 옮겼다. 형성된 침전물을 분리하고, 아세톤:물(5:1) 혼합물로 3회 세척한 다음 아세톤만으로 1회 세척하였다. 이어서, 생성물을 30℃에서 24시간 동안 감압 건조시킨 다음, 4℃에서 보관하였다.
[에스테르 30%, 나트륨 70%]
실시예 30. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
실시예 10에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 수용액(12% w/v)에 수성 NaOH(5N)를 첨가하여 pH 12-13으로 만들었다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 1,4-부탄디올디글리시딜에테레(BDDE, 히알루론산의 아미드 유도체의 18%)를 첨가하고 시스템을 실온에서 2시간 동안 교반하에 두었다. 이어, 수성 HCl(2N)을 사용하여 pH를 7로 만들고 시스템을 동일한 조건에서 15시간 동안 두었다. 이어, 얻어진 겔을 잘게 부수고, 탈이온수로 세척한 다음, 인산염 염수 용액(1×)에서 8시간 동안 환류시킨 후, 건조시켰다. 마지막으로, 얻은 화합물을 잘게 부수고 8℃에서 보관하였다.
실시예 31. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
실시예 10에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 수용액(12% w/v)에 수성 HCl(2 N)을 첨가하여 pH 3으로 만들었다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 1,4-부탄디올디글리시딜에테레(BDDE, 히알루론산의 아미드 유도체의 18%)를 첨가하고 시스템을 실온에서 2시간 동안 교반하에 두었다. 이어, 수성 NaOH(5N)를 사용하여 pH를 7로 만들고 시스템을 동일한 조건에서 15시간 동안 두었다. 이어, 얻어진 겔을 잘게 부수고, 탈이온수로 세척한 다음, 인산염 염수 용액(1×)에서 8시간 동안 환류시킨 후, 건조시켰다. 마지막으로, 얻은 화합물을 잘게 부수고 8℃에서 보관하였다.
실시예 32. 히알루론산의 아민 유도체의 가교결합 생성물.
실시예 15에 따라 수득한 히알루론산의 아민 유도체 수용액(12% w/v)에 수성 HCl(2 N)을 첨가하여 pH 3으로 만들었다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 1,4-부탄디올디글리시딜에테레(BDDE, 히알루론산의 아미드 유도체의 18%)를 첨가하고 시스템을 실온에서 2시간 동안 교반하에 두었다. 이어, 수성 NaOH(5N)를 사용하여 pH를 7로 만들고 시스템을 동일한 조건에서 15시간 동안 두었다. 이어, 얻어진 겔을 잘게 부수고, 탈이온수로 세척한 다음, 인산염 염수 용액(1×)에서 8시간 동안 환류시킨 후, 건조시켰다. 마지막으로, 얻은 화합물을 잘게 부수고 8℃에서 보관하였다.
실시예 33. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물.
실시예 21에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 수용액(12% w/v)에 수성 HCl(2 N)을 첨가하여 pH 3으로 만들었다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 1,4-부탄디올디글리시딜에테레(BDDE, 히알루론산의 아미드 유도체의 18%)를 첨가하고 시스템을 실온에서 2시간 동안 교반하에 두었다. 이어, 수성 NaOH(5N)를 사용하여 pH를 7로 만들고 시스템을 동일한 조건에서 15시간 동안 두었다. 이어, 얻어진 겔을 잘게 부수고, 탈이온수로 세척한 다음, 인산염 염수 용액(1×)에서 8시간 동안 환류시킨 후, 건조시켰다. 마지막으로, 얻은 화합물을 잘게 부수고 8℃에서 보관하였다.
실시예 34. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물
실시예 10에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 수용액(4% w/v)에 수성 NaOH(5N)를 첨가하여 pH 12-13으로 만들고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어, 디비닐 설폰(DVS, 히알루론산의 아미드 유도체의 20%)을 용액에 천천히 첨가하였더니 약 15분 내에 겔이 형성되었다. 형성된 겔을 동일한 조건에서 추가로 1시간 동안 방치한 다음, 출발 부피의 100배에 해당하는 부피의 물로 옮겼다. 그 후, 겔을 15시간 동안 팽윤시킨 후 분쇄하고, 물로 반복하여 세척하고 투명한 입자 형태로 분리하였다.
실시예 35. 히알루론산의 아민 유도체의 가교결합 생성물
실시예 15에 따라 수득한 히알루론산의 아민 유도체 수용액(4% w/v)에 수성 NaOH(5N)를 첨가하여 pH 12-13으로 만들고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어, 디비닐 설폰(DVS, 히알루론산의 아미드 유도체의 20%)을 용액에 천천히 첨가하였더니 약 15분 내에 겔이 형성되었다. 형성된 겔을 동일한 조건에서 추가로 1시간 동안 방치한 다음, 출발 부피의 100배에 해당하는 부피의 물로 옮겼다. 그 후, 겔을 15시간 동안 팽윤시킨 후 분쇄하고, 물로 반복하여 세척하고 투명한 입자 형태로 분리하였다.
실시예 36. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물
실시예 21에 따라 수득한 히알루론산 아미드 유도체 수용액(4% w/v)에 수성 NaOH(5N)를 첨가하여 pH 12~13으로 만들고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어, 디비닐 설폰(DVS, 히알루론산의 아미드 유도체의 20%)을 용액에 천천히 첨가하였더니 약 15분 내에 겔이 형성되었다. 형성된 겔을 동일한 조건에서 추가로 1시간 동안 방치한 다음, 출발 부피의 100배에 해당하는 부피의 물로 옮겼다. 그 후 겔을 15시간 동안 팽윤시킨 후 분쇄하고, 물로 반복하여 세척하고 투명한 입자 형태로 분리하였다.
실시예 37. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물
MES 완충액(2-[N-모르폴리노]에탄설폰산 수용액 1.5% w/v, pH 5.5) 중의 실시예 10에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(1.5% w/v)을 p-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드)(1.5% w/v 아세톤 용액 중 히알루론산의 아미드 유도체 20%)와 혼합하였다. 생성된 반응 혼합물을 교반한 다음 추가로 72시간 동안 실온에서 방치하였다. 이어, 염화나트륨(히알루론산의 아미드 유도체의 325%)을 첨가하고, 겔을 실온에서 추가로 1시간 동안 방치하였다. 그 다음, 강한 교반하에 에탄올(MES 완충액의 900% v/v)을 첨가하여 가교결합 생성물을 침전시키고, 분리한 다음, 감압 건조시키고, 8℃에서 보관하였다.
실시예 38. 히알루론산의 아민 유도체의 가교결합 생성물
MES 완충액(2-[N-모르폴리노]에탄설폰산의 수용액 1.5% w/v, pH 5.5) 중의 실시예 15에 따라 수득한 히알루론산의 아민 유도체 용액(1.5% w/v)을 p-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드)(1.5% w/v 아세톤 용액 중 히알루론산의 아미드 유도체 20%)와 혼합하였다. 생성된 반응 혼합물을 교반한 다음 추가로 72시간 동안 실온에서 방치하였다. 이어, 염화나트륨(히알루론산의 아미드 유도체의 325%)을 첨가하고, 겔을 실온에서 추가로 1시간 동안 방치하였다. 그 다음, 강한 교반하에 에탄올(MES 완충액의 900% v/v)을 첨가하여 가교결합 생성물을 침전시키고, 분리한 다음, 감압 건조시키고, 8℃에서 보관하였다.
실시예 39. 히알루론산의 아미드 유도체의 가교결합 생성물
MES 완충액(2-[N-모르폴리노]에탄설폰산의 수용액 1.5% w/v, pH 5.5) 중의 실시예 21에 따라 수득한 히알루론산의 아미드 유도체 용액(1.5% w/v)을 p-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드)(1.5% w/v 아세톤 용액 중 히알루론산의 아미드 유도체 20%)와 혼합하였다. 생성된 반응 혼합물을 교반한 다음 추가로 72시간 동안 실온에서 방치하였다. 이어, 염화나트륨(히알루론산의 아미드 유도체의 325%)을 첨가하고, 겔을 실온에서 추가로 1시간 동안 방치하였다. 그 다음, 강한 교반하에 에탄올(MES 완충액의 900% v/v)을 첨가하여 가교결합 생성물을 침전시키고, 분리한 다음, 감압 건조시키고, 8℃에서 보관하였다.

Claims (19)

  1. 하기 화학식 (I)를 갖는 반복 단위(repeating unit)를 10-90% 포함하는 작용화된 히알루론산(functionalized hyaluronic acid) 또는 이의 유도체를 포함하는 가교결합 중합체(crosslinked polymer):
    Figure pct00017

    상기 식에서,
    R1, R2, R3, R4는, 서로 독립적으로, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열(heterocyclic series)의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, -CO-(CH2)2-COOY이고, 여기서 Y는 음전하 또는 H이며,
    R은 Z(1) 또는 Z(2)이고,
    R5는 -CO-CH3, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, 히알루론산의 아실기이고,
    여기서 Z(1)은 화학식 (1)의 모이어티(moiety)이고:
    Figure pct00018

    여기서 Z1은 -NR6CH2-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
    Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류(oligosaccharide)이거나,
    Z(2)는 화학식 (2)의 모이어티이고:
    Figure pct00019

    여기서 Z4는 -NR6CH-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    R5는 Z(3) 또는 Z(4)이고, R은 NR6R7, 또는 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 알코올기, OH, O-, 히알루론산의 알코올기, 히알루론산의 아미노기이고, R6, R7은, 서로 독립적으로, H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    여기서 Z(3)은 화학식 (3)의 모이어티이고:
    Figure pct00020

    여기서 Z1은 -CH2- 또는 -CO-이고,
    Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
    Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    Z(4)는 화학식 (4)의 모이어티이고:
    Figure pct00021

    여기서 Z4는 -CH-이고,
    Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    R은 Z(1) 또는 Z(2)이고, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이며,
    상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 동일한 쇄의 카르복실기와 하이드록실기 사이, 및/또는 상이한 쇄의 카르복실기와 하이드록실기 사이에 에스테르 결합 또는 락톤 결합에 의해 적어도 부분적으로 직접 가교결합되거나, 카르복실기와의 에스테르 결합 및/또는 하이드록실기와의 에테르 결합 및/또는 카르복실기와의 아미드 결합을 형성하는 스페이서(spacer) 모이어티에 의해 적어도 부분적으로 간접 가교결합되고, 상기 스페이서 모이어티는 비스카르보디이미드 모이어티 또는 비스비닐설폰 모이어티, 또는 C2-C20 지방족 에폭사이드, 이의 할로겐하이드론(halogenhydron), 에피알로겐하이드린(epialogenhydrin), 및 할라이드 중에서 선택된 이작용성 또는 다작용성 에폭사이드로부터 유도된 에폭시 모이어티, 또는 이들의 조합이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체는 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-60% 포함하는, 가교결합 중합체.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 이작용성 또는 다작용성 에폭사이드는 에피클로로하이드린, 디비닐설폰, 1,4-부탄디올 디글리시딜 에테르, 1,2-에틸렌디올 디글리시딜 에테르, 1-(2,3-에폭시프로필)-2,3-에폭시사이클로헥산, N,N-디글리시딜아닐린, 에폭시-치환된 펜타에리트리톨 및 이들의 혼합물로부터 선택되는, 가교결합 중합체.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 비스카르보디이미드 모이어티는 화학식 Y1-N=C=N-Y2-N=C=N-Y3의 비스카르보디이미드로부터 유도되고, 여기서 Y1 및 Y3은, 서로 독립적으로, 수소, 선형 또는 분지형 C1-C10 지방족 기, C1-C10 알콕시기, C1-C10 지환족 기, C1-C10 아릴, C1-C10 헤테로아릴, C1-C10 아랄킬, C1-C10 헤테로아랄킬이고, Y2는 선형 또는 분지형 C1-C10 지방족 기, C1-C10 알콕시기, C1-C10 지환족 기, C1-C10 아릴, C1-C10 헤테로아릴, C1-C10 아랄킬, C1-C10 헤테로아랄킬로부터 유도된 이작용성 모이어티인, 가교결합 중합체.
  5. 제4항에 있어서, 상기 비스카르보디이미드 모이어티는 1,6-헥사메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,8-옥타메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,10 데카메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), 1,12 도데카메틸렌 비스(에틸카르보디이미드), PEG-비스(프로필(에틸카르보디이미드)), 2,2'-디티오에틸 비스(에틸카르보디이미드), 1,1'-디티오-p-페닐렌 비스(에틸카르보디이미드), 파라-페닐렌-비스(에틸카르보디이미드), 1,1'-디티오-m-페닐렌 비스(에틸카르보디이미드) 및 이들의 혼합물 중에서 선택된 비스카르보디이미드로부터 유도되는, 가교결합 중합체.
  6. 하기 화학식 (I)를 갖는 반복 단위를 10-90% 포함하는 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체:
    Figure pct00022

    상기 식에서,
    R1, R2, R3, R4는, 서로 독립적으로, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, -CO-(CH2)2-COOY이고, 여기서 Y는 음전하 또는 H이며,
    R은 Z(1) 또는 Z(2)이고,
    R5는 -CO-CH3, H, SO3 -, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 카르복실산으로부터 유도된 아실기, 히알루론산의 아실기이고,
    여기서 Z(1)은 화학식 (1)의 모이어티이고:
    Figure pct00023

    여기서 Z1은 -NR6CH2-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
    Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    Z(2)는 화학식 (2)의 모이어티이고:
    Figure pct00024

    여기서 Z4는 -NR6CH-이고, R6은 H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    R5는 Z(3) 또는 Z(4)이고, R은 NR6R7, 또는 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 계열의 알코올기, OH, O-, 히알루론산의 알코올기, 히알루론산의 아미노기이고, R6, R7은, 서로 독립적으로, H, 또는 치환되거나 비치환된, 지방족, 방향족, 아릴지방족, 지환족, 복소환식 기이고,
    여기서 Z(3)은 화학식 (3)의 모이어티이고:
    Figure pct00025

    여기서 Z1은 -CH2- 또는 -CO-이고,
    Z2는 -OH, 또는 -NHCOCH3이고,
    Z3은 H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    Z(4)는 화학식 (4)의 모이어티이고:
    Figure pct00026

    여기서 Z4는 -CH-이고,
    Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 단당류, 이당류, 또는 올리고당류이거나,
    R은 Z(1) 또는 Z(2)이고, R5는 Z(3) 또는 Z(4)이다.
  7. 제6항에 있어서, Z3, Z5 및 Z6은, 서로 독립적으로, H, 글루코스, 갈락토스, 아라비노스, 자일로스, 만노스, 락토스, 트레할로스, 겐티오비오스, 셀로비오스, 셀로트리오스, 말토스, 말토트리오스, 키토비오스, 키토트리오스, 만노비오스, 멜리비오스, 프럭토스, N-아세틸 글루코사민, N-아세틸 갈락토사민의 모이어티, 또는 이들의 조합인, 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, Z3은 H, 글루코스, 갈락토스, 만노스, N-아세틸 글루코사민, N-아세틸 갈락토사민의 잔기, 또는 이들의 조합인, 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체.
  9. 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 락토스 또는 갈락토스의 모이어티이고, 여기서 Z는 Z(1), Z(2), Z(3) 및 Z(4) 중 어느 하나인, 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체.
  10. 제1항의 가교결합 중합체의 제조를 위한, 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항의 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체의 용도.
  11. a) 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항의 작용화된 히알루론산 또는 이의 유도체를 제공하는 단계,
    b) 염기의 존재하에서 비스카르보디이미드, 또는 디비닐 설폰, 또는 C2-C20 지방족 에폭사이드, 이의 할로겐하이드론, 에피할로겐하이드린 및 할라이드 중에서 선택되는 에폭시 화합물, 또는 메틸피리디늄 할라이드, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 가교결합제와 반응시키는 단계, 및
    c) 가교결합 중합체 겔을 수득하는 단계를 포함하는,
    제1항의 가교결합 중합체의 제조 방법.
  12. 제1항에 있어서, 갈렉틴의 발현 변화(altered expression)에 기인하는 병리(pathology)의 치료에 사용하기 위한 가교결합 중합체로서, 상기 병리는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis), 판상형 건선(plaque psoriasis), 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물(neoplasia), 유착(adhesion), 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정을 포함하는 가교결합 중합체.
  13. 제1항에 있어서, 세포 성장을 위한 생체재료(biomaterial) 또는 스캐폴드(scaffold)로서 사용하기 위한 가교결합 중합체.
  14. 적어도 하나의 제1항의 가교결합 중합체, 및 적어도 하나의 약리학적 활성 물질 및/또는 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 적어도 하나의 물질을 포함하는 약학 조성물로서,
    - 상기 약리학적 활성 물질은 항생제, 항감염제, 항미생물제, 항바이러스제, 세포증식억제제, 세포독성제, 항종양제, 항염증제, 상처치유제(cicatrizant), 마취제, 진통제, 혈관수축제, 콜린성 또는 아드레날린성 작용제 및 길항제, 항혈전제, 항응고제, 지혈제, 섬유소용해제(fibrinolytic), 혈전용해제, 단백질 및 이의 단편, 펩티드, 폴리뉴클레오티드, 성장 인자, 효소, 백신, 및 이들의 조합으로부터 선택되고,
    - 선택적으로 생물학적 기능을 갖는 상기 물질은 콜라겐, 피브리노겐, 피브린, 알긴산, 알긴산나트륨, 알긴산칼륨, 알긴산마그네슘, 셀룰로스, 황산콘드로이틴, 황산더마탄(dermatan sulfate), 황산케라탄, 헤파린, 황산헤파란, 라미닌, 피브로넥틴, 엘라스틴, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 폴리(락트산-코-글리콜산), 폴리카프로락톤, 젤라틴, 알부민, 폴리(글리콜라이드-코-카프로락톤), 폴리(글리콜라이드-코-트리메틸렌 카보네이트), 하이드록시아파타이트, 인산삼칼슘, 인산이칼슘, 탈회골기질(demineralized bone matrix), 및 이들의 혼합물로부터 선택되는,
    약학 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 갈렉틴의 발현 변화에 기인하는 병리의 치료에 사용하기 위한 약학 조성물로서, 상기 병리는 비알코올성 지방간염, 판상형 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 신생물, 유착, 및 피부, 폐, 신장 및 심혈관 섬유화 과정을 포함하는 약학 조성물.
  16. 제14항 또는 제15항에 있어서, 장기(organ), 지방 조직, 점막, 잇몸, 연골 및 뼈와 같은 신체의 경조직 또는 연조직에 적합한, 바람직하게는 피내, 피하, 근육내, 관절내 또는 안내 경로를 통한 주사 가능 형태의 약학 조성물.
  17. 제14항 또는 제15항에 있어서, 조직 수복(tissue repair) 또는 재건(reconstruction), 바람직하게는 생물학적 조직의 생성 또는 치환, 또는 피부, 함몰부, 뼈 연골 또는 관절의 충전과 같은 생물학적 조직의 충전에 사용하기 위한 약학 조성물.
  18. 제14항 또는 제15항에 있어서, 피부과 제품 또는 화장품에 사용하기 위하거나, 의료 기기, 바람직하게는 생체 흡수성 임플란트(bio-resorbable implant)로 사용하기 위한 약학 조성물.
  19. 제14항 또는 제15항에 있어서, 류마티스내과(rheumatology), 정형외과(orthopedics), 종양학과(oncology), 성형-미용 수술(plastic-aesthetic surgery), 혈액 투석(hemodialysis), 순환기내과(cardiology), 혈관의학과(angiology), 안과(ophthalmology), 이비인후과(otorhinolaryngology), 치과(dentistry), 부인과(gynecology), 비뇨기과(urology), 피부과(dermatology), 종양내과(oncology) 및 조직 수복에 사용하기 위한 약학 조성물.
KR1020217034184A 2019-04-19 2020-04-17 작용화된 히알루론산의 가교결합 중합체 및 염증 상태의 치료에서의 이의 용도 KR20220005465A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT201900006146 2019-04-19
IT102019000006146 2019-04-19
PCT/IB2020/053643 WO2020212920A1 (en) 2019-04-19 2020-04-17 Crosslinked polymer of functionalized hyaluronic acid and its use in the treatment of inflammatory states

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220005465A true KR20220005465A (ko) 2022-01-13

Family

ID=67660638

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217034184A KR20220005465A (ko) 2019-04-19 2020-04-17 작용화된 히알루론산의 가교결합 중합체 및 염증 상태의 치료에서의 이의 용도

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20220213233A1 (ko)
EP (1) EP3956367A1 (ko)
JP (1) JP2022529953A (ko)
KR (1) KR20220005465A (ko)
CN (1) CN113906055B (ko)
CA (1) CA3135919A1 (ko)
WO (1) WO2020212920A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113045760B (zh) * 2021-04-12 2022-03-25 华南理工大学 一种基于透明质酸和α-D-半乳糖的聚合物刷及其制备方法和应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1198449B (it) * 1986-10-13 1988-12-21 F I D I Farmaceutici Italiani Esteri di alcoli polivalenti di acido ialuronico
ITPD980169A1 (it) * 1998-07-06 2000-01-06 Fidia Advanced Biopolymers Srl Ammidi dell'acido ialuronico e dei suoi derivati e processo per la loro preparazione.
IT1303735B1 (it) * 1998-11-11 2001-02-23 Falorni Italia Farmaceutici S Acidi ialuronici reticolati e loro usi medici.
ITMI20061726A1 (it) * 2006-09-11 2008-03-12 Fidia Farmaceutici Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry
US11564971B2 (en) * 2012-09-05 2023-01-31 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Hyaluronic acid derivative having amino acid and steryl group introduced thereinto
CZ305153B6 (cs) * 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
IT201700122135A1 (it) * 2017-10-26 2019-04-26 Jointherapeutics S R L Acido ialuronico funzionalizzato o suo derivato nel trattamento di stati infiammatori

Also Published As

Publication number Publication date
CN113906055B (zh) 2023-09-26
CN113906055A (zh) 2022-01-07
JP2022529953A (ja) 2022-06-27
US20220213233A1 (en) 2022-07-07
EP3956367A1 (en) 2022-02-23
CA3135919A1 (en) 2020-10-22
WO2020212920A1 (en) 2020-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10653814B2 (en) Preparation and/or formulation of proteins cross-linked with polysaccharides
US20220177655A1 (en) Method for deacetylation of biopolymers
KR100674177B1 (ko) 교차 결합된 히알루론산과 그것의 의학적 용도
ES2244198T3 (es) Amidas de acido hialuronico y derivados de las mismas y procedimiento para su fabricacion.
AU2007296939B9 (en) Hyaluronic acid derivatives obtained via "click chemistry" crosslinking
JP2004507588A (ja) ヒアルロン酸の新規架橋誘導体
US11191870B2 (en) Gel of sodium hyaluronate cross-linked by polyethylene glycol epoxy derivative for injection and preparation method thereof
US11203649B2 (en) Functionalized hyaluronic acid or a derivative thereof in the treatment of inflammatory states
EP4063400A1 (en) Sulfhydryl modified hyaluronic acid, preparation method therefor and use thereof
CN113906055B (zh) 官能化的透明质酸的交联的聚合物及其在炎症状态的治疗中的用途
WO2021205294A1 (en) A crosslinked polymeric material, comprising at least one functionalized chitosan, and use thereof in the treatment of inflammatory states
CN113929792A (zh) 一种醛基化修饰的透明质酸（钠）及其合成方法和应用
CN112812200A (zh) 巯基改性高分子化合物及其制备方法和用途
RU2792001C2 (ru) Функционализированная гиалуроновая кислота или ее производное для лечения воспалительных состояний
WO2024057154A1 (en) Process for conjugation of hyaluronic acid and conjugates of hyaluronic acid so obtained
WO2022243788A1 (en) Mixtures of polysaccharides and polyaminosaccharides with improved rheological properties
Sturabotti Functionalization of hyaluronic acid with a chondroprotective molecule and preparation of sulfonated HA-based materials

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination