KR20220004962A

KR20220004962A - 구강관리 제품

Info

Publication number: KR20220004962A
Application number: KR1020217031315A
Authority: KR
Inventors: 로젠조 에밀리아노 보이오치
Original assignee: 쿠라셉트 에이디에스 에스.알.엘.
Priority date: 2019-03-01
Filing date: 2020-02-27
Publication date: 2022-01-12
Also published as: RS63853B1; EP3930663B1; MD3930663T2; PT3930663T; AR118218A1; PL3930663T3; SI3930663T1; JOP20210210A1; UA127726C2; IL285497B2; SG11202108777SA; LT3930663T; MA55078B1; HUE061087T2; AU2020230945A1; IL285497B1; US20220117868A1; CL2021002237A1; CA3130899A1; IT201900003009A1

Abstract

본 발명은 클로르헥시딘 및 나트륨 DNA를 포함하는 구강 세정제, 치주용 겔 혹은 치약 같은 구강관리 제품에 관한 것이다. 이 구강관리 제품은 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 대한 항균 효과와 더불어 치유 및 항염증 활성을 나타내며 산화성 스트레스를 중화함으로써, 구강 점막에 대한 자극의 발생 및 전개를 제한하고 이 점막의 친화성을 촉진할 수 있다.

Description

구강관리 제품

본 발명은 클로로헥시딘 및 나트륨 DNA에 기반한 구강관리 제품, 예를 들어, 구강 세정제, 치아용 겔 혹은 치약에 관한 것으로서,이는 치아의 플라크 형성을 방지하는 동시에 구강 점막에 대한 자극 발생 및 전개를 제한함으로써 점막의 향성(혹은 친화성:trophism)을 촉진한다.

구강세정제 등과 같은 클로르헥시딘 기반의 구강관리 제품에서 활성 성분은 박테리아의 외부막에 침투하여 내부 단백질을 응집하는 능력 때문에 강력한 항균성 물질로 공지되어 있다. 클로로헥시딘은 또한 강력한 항플라크 활성 작용을 수행한다. 또한 클로로헥시딘을 함유하는 용액은 수술후 합병증을 예방하기 위해 다양한 농도로써 사용한다.

그러나, 클로로헥시딘계 구강관리 제품을 연장 사용시 예를 들어 구강 점막에 자극을 야기할 수 있으며, 장기간 계속되면 친화성을 저하시킬 수 있다.

실제로 출원인은, 치은염, 세균성 플라크 및 치주염의 치료시 클로르헥시딘의 유리한 효과가 공지되어 있음에도 불구하고, 치료 특히 장기 치료시 이의 사용을 유보하는 것은 구강 점막에 상기 활성 성분이 야기하는 부작용을 경계하기 때문임을 확인하였다.

따라서 본 발명의 목적은, 치은염, 세균성 플라크 및 치은염에 효과적이면서 치유 및 항염증 활성을 갖는 클로로헥시딘을 포함하는 신규의 구강관리 제품을 제공하는 것으로서, 이는 또한 산화성 스트레스를 중화하여 클로로헥시딘 사용으로 인한 구강 점막의 세포 구조의 변형 및 이에 대한 자극의 발생과 전개를 제한하고, 따라서 구강 점막 자체의 친화성을 촉진할 수 있다.

본 발명에 따르면, 출원인은 이러한 바람직한 특성은 클로로헥시딘을 나트륨 DNA와 조합하여 사용함으로써 달성할 수 있다는 놀라운 사실을 발견했다.

그러므로, 본 발명은 클로로헥시딘과 나트륨 DNA를 포함하는 구강관리 제품에 관한 것이다.

뜻밖에도, 나트륨 DNA와 클로로헥시딘의 조합은 구강 점막에 대한 후자의 자극 영향에 대응하여 클로로헥시딘에 대한 방어 효과 및 구강에 야기될 수 있는 상처의 치유 효과를 제공할 뿐만 아니라, 클로로헥시딘계 구강관리 제품을 장기간 사용시 일어날 수 있는 부작용, 구체적으로는 공포화(vacuolisation), 세포핵 변성, 세포간 공간의 확대 등을 포함하는 세포 구조의 변형 같은 부작용을 제한할 수 있다.

나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 특이적 조합 때문에, 본 발명의 구강관리 제품은 클로르헥시딘 단독에 기반한 구강관리 제품이 가진 응용 및 기능적 한계를 극복하고, 사용 가능성을 확대하고, 장기 사용에 의한 일부 부작용을 치료할 수 있는 등의 일련의 특징이 있다.

본 발명에 따른 구강관리 제품은 실제로 클로로헥시딘의 부작용에 대해 세포 수준의 효과적인 보호작용을 가능하게 하며, 따라서 구강 점막의 세포 구조 변형의 발생 및 전개를 제한하고, 이와 더불어, 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 대한 항균 효과와 산화적 스트레스를 중화할 수 있는 치유 및 항염증 활성의 조합을 달성하고, 또한 구강 점막의 자극 발생 및 전개를 제한함으로써 점막의 친화성을 향상시킬 수 있다. 이러한 특징들 때문에 장기간 사용해도 구강 점막에 대한 클로르헥시딘의 세포 수준의 자극 효과 및 부작용을 야기하지 않으면서 유리한 효과를 달 성할 수 있다.

본 출원인은 특히 클로르헥시딘계 구강관리 제품의 사용에 있어 응용 및 기능적 한계들 중 하나가 부작용 - 구체적으로 장기간 사용시 - 구강 점막의 자극 이외에도 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대 등을 포함한 점막 세포의 구조 변형을 일으키는 부작용이 발생하는 점이라는 사실에 주목했다.

그러므로, 출원인은 나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 조합이 구강 점막에 대한 자극 효과에 대항하여 클로로헥시딘에 대한 방어 효과 및 구강에 일어날 수 있는 상처의 치유 효과를 제공할 뿐만 아니라, 상기 활성 성분을 장기간 사용시 일어날 수 있는 부작용, 구체적으로는 공포화, 세포핵 변성, 세포간 공간의 확대 등을 포함하는 세포 구조의 변형 같은 부작용을 제한할 수 있다는 뜻밖의 사실을 확인하였다.

이에 근거하여 출원인은 클로르헥시딘을 포함하고 따라서 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 대해 효과적인 동시에, 점막 자극 및 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대 등 구강 점막의 세포 구조의 변형 포함한 상기 활성 성분의 장기 사용에 따른 부작용의 발생을 차단하거나 크게 제한할 수 있는 신규의 구강관리 제품을 정의하고 개발하였다.

이의 바람직한 구현예에서, 상기 구강관리 제품은 구강 세정제, 치아용 겔 및 치약으로 이루어진 군에서 선택된다.

이의 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 구강 세정제로서, 구체적으로는 구강 세정제 총 부피에 대해 0.01 내지 0.30 중량백분율 (중량%)의 클로르헥시딘, 0.01 내지 0.2 중량%, 0.1 내지 0.5 중량%의 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염, 0.1 내지 1.0 중량%의 아스코르빈산, 0.05 내지 1 중량%의 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체를 포함하는 구강 세정제이다.

또다른 측면에서, 본 발명은 구강 점막의 질병 치료를 위한 방법에서 사용하기 위한 나트륨 DNA에 관한 것으로서, 상기 질병은 구강 점막의 세포 구조의 변형을 수반하는 것이며 이러한 세포 구조의 변형은 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간 확대로 이루어진 군에서 선택된다.

실제로, 나트륨 DNA는 구강 점막의 세포 구조에 대한 보호 작용이 있으며, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대를 포함한 세포 구조 변형의 발생 및 전개에 대해 대항할 수 있다는 뜻밖의 사실을 발견하였다.

이에 따라, 예를 들어 구강 점막의 세포 구조에 공격적인 활성 성분, 예컨대 클로르헥시딘을 이용한 치료의 부작용을 제한함으로써, 인과관계 측면에서 구강 점막의 세포 변형에 관련하여 치료학적으로 개입할 수 있다.

본 출원인은 클로르헥시딘의 부작용을 치료하는 것이, 클로르헥시딘게 구강관리 제품의 사용에 있어 상술한 응용 및 기능적 한계를 고려시, 특별한 가치가 있는 혁신적인 측면을 구성한다는 것을 확인했다.

또다른 측면에서, 본 발명은 따라서 클로르헥시딘 치료를 받는 환자에서 클로르헥시딘의 부작용을 치료하는 방법에 이용되는 나트륨 DNA에 관한 것이며, 이 부작용은 환자의 구강 점막의 세포 구조 변형을 수반하며, 이때 상기의 세포 구조 변형은 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대로 이루어진 군에서 선택된다.

도 1은 실시예 1에 따른 실험에 이용된 장치의 일부 단면 개략도이다.
도 2는 실시예 1에 따른 용액(A, B, C 및 D)을 이용한 상이한 처리 시점에서의 ROE 세포에 대한 MTT 생존성 시험의 결과를 나타낸다.
도 3은 3 부피%의 H₂O₂ 용액으로 1분간 처리한 후 후속으로 실시예 1에 따른 용액(A, B, C 및 D)을 이용한 상이한 처리 시점에서의 ROE 세포에 대한 MTT 생존성 시험의 결과를 나타낸다.
도 4는 실시예 1에 따른 용액 (A, B, C 및 D)을 이용하여 각각 30분씩 처리한 후, ROE 시료의 CLSM 관측 및 최대 강도 투사시의 3D 재구성을 도시한다.
도 5는 3 부피%의 H₂O₂ 용액으로 1분간 처리후 후속으로 실시예 1에 따른 용액 (A, B, C 및 D)을 이용하여 각각 30분씩 처리한 후, ROE 시료의 CLSM 관측 및 최대 강도 투사시의 3D 재구성을 도시한다.
도 6은 실시예 1에 따른 용액 (A, B, C 및 D)을 이용하여 각각 30분씩 처리한 후의 ROE 시료의 각 영역들을 도시한다.
도 7은 3 부피%의 H₂O₂ 용액으로 1분간 처리후 후속으로 실시예1에 따른 용액 (A, B, C 및 D)을 이용하여 각각 30분씩 처리한 후의 ROE 시료의 각 영역들을 도시한다.

본 발명을 하기의 바람직한 특징들에 관한 하나 이상의 측면에서 예시할 수 있으며, 이들은 응용 요건에 따라 바람직하다면 서로 조합할 수도 있다.

본 명세서의 내용 및 하기의 특허청구 범위 내에서, 양을 나타내는 모든 수치적 크기, 변수, 백분율 등은 모든 상황에서 별도의 언급이 없을 경우 "약" 이라는 용어로써 표현되는 것으로 간주한다. 또한 모든 수치적 크기의 범위는 최대 및 최소값의 모든 가능한 조합 및 모든 가능한 중간 범위의 조합, 또한 하기의 범위를 포함한다.

본 발명의 범위에서, 2종의 물질의 조합은 클로르헥시딘과 나트륨 DNA로 동정되었으며 이의 복합적인 항균, 치유, 항염 및 산화성 스트레스 중화 특성 때문에 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 특히 효과적인 구강관리 제품의 활성 성분들로서 사용할 수 있고, 이와 동시에, 클로르헥사딘의 사용으로 인한 구강 점막의 세포 구조 변형의 발생 및 전개를 제한함으로써 구강 점막 자체의 친화성을 촉진할 수 있다.

더 구체적으로, 본 발명은 클로로헥시딘과 나트륨 DNA를 포함하는 구강관리 제품에 관한 것이다.

본 발명에서는 다음과 같은 표현들을 사용한다:

- "구강 세정제의 총부피에 대한 중량%"는 구강 세정제 100 밀리리터(mL) 내에 존재하는 해당 성분의 그램 단위의 양이고;

- "클로르헥시딘"은 별도로 명시하지 않은 경우 화합물 1,1'-헥사메틸렌비스[5-(p-클로로페닐)비구아니드] 및 이의 염이나 착염을 의미하며;

- "나트륨 DNA"는, 예를 들어, 수컷 철갑상어 생식샘의 조직으로부터 천연 데옥시리보핵산을 추출하고, 후속으로 정제, 탈중합화 및 나트륨 이온으로 중성화 처리함으로써 수득할 수 있는 데옥시리보핵산의 나트륨 염을 의미한다.

특정 이론에 기반하지 않더라도, 나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 연합이 구강 점막에 대한 후자의 자극 효과에 대항하여 보호 효과 및 구강내 일어날 수 있는 상처의 치유 효과를 제공할 수 있을 뿐만 아니라, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대 등의 세포 구조의 변형을 포함한 장기간의 클로르헥시딘계 구강관리 제품 사용에 따른 부작용을 제한할 수 있을 것으로 판단된다.

본 출원인은 특히, 클로르헥시딘계 구강관리 제품 사용시 응용 및 기능적 한계들 중 하나가 - 장기간 사용의 경우 - 구강 점막 자극 외에도, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대를 포함한 점막의 세포 구조 수준의 변형을 수반하는데 있다는 점에 주목했다.

본 출원인은 따라서, 나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 연합이 구강 점막에 대한이의 자극 효과에 대항하여 보호 효과 및 구강내 일어날 수 있는 상처의 치유 효과를 제공할 수 있을 뿐만 아니라, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대를 포함한 세포 구조의 변형 등 상기 활성 성분을 장기간 사용시의 부작용을 제한할 수 있다는 뜻밖의 사실을 발견했다.

이에 따라 본 출원인은, 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 대하여 효과적인 동시에, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대를 포함한 구강 점막의 자극 및 심지어 세포 구조 변형 등, 상기 활성 성분의 장기간 사용에 따른 부작용을 야기하지 않거나 크게 제한할 수 있는 것으로서, 클로르헥시딘을 포함하는 신규의 구강관리 제품을 정의 및 개발할 수 있었다.

나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 특정한 조합 때문에, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 클로르헥시딘 단독에 기반한 구강관리 제품의 응용 및 기능적 한계점들을 극복할 수 있는 일련의 특성들을 갖고, 응용 가능성을 확대하고 장기간 사용에 따른 부작용 중 일부를 치유할 수 있다.

본 발명에 따른 구강관리 제품은 실제로 세포 수준의 효과적인 보호 작용을 클로르헥시딘의 부작용과 연계시킬 수 있으며, 따라서 구강 점막의 세포 구조 변형의 발생 및 전개를 제한하는 한편, 치은염, 세균성 플라크 및 치주염에 대한 효과적인 항균 효과와 산화성 스트레스를 중화할 수 있는 치유 및 항염증 활성의 조합을 달성하고, 또한 구강 점막의 자극 발생 및 전개를 제한함으로써 점막의 친화성을 촉진할 수 있다. 이러한 특징들 때문에, 구강 점막에 대한 클로르헥시딘의 세포 수준에서의 자극 효과와 부작용을 수반함 없이 장기간 사용시에도 특히 효과적으로 사용할 수 있다.

바람직한 구현예에서, 상기 구강관리 제품은 구강 세정제, 치주용 겔 및 치약으로 이루어진 군에서 선택된다.

이의 제1 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 클로르헥시딘 나트륨 DNA를 포함하는 구강 세정제이다.

본 발명에 따른 구강 세정제는 클로르헥시딘을 포함한다. 바람직하게는, 구강 세정제에 함유된 클로르헥시딘의 양은 구강 세정제 총 부피에 대하여 0.01 내지 0.30 중량%, 더 바람직하게는 0.05 내지 0.30 중량%, 더욱 바람직하게는 0.09 내지 0.20 중량% 범위이다.

본 발명에 따른 구강 세정제에서, 클로르헥시딘은 유리하게는 염 및 착염의 형태로 존재할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 구강 세정제는 염 및 착염 형태의 클로르헥시딘을 포함한다. 클로르헥시딘 염으로서, 예를 들면, 디글루콘산 클로르헥시딘 혹은 디아세트산 클로르헥시딘은 본 발명에 따른 구강 세정제에 사용될 수 있다. 바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 글루콘산 클로르헥시딘 형태의 클로르헥시딘을 포함한다.

본 발명에 따른 구강 세정제는 나트륨 DNA를 포함한다.

바람직하게는, 구강 세정제 내의 나트륨 DNA의 양은 구강 세정제 총 부피에 대해 0.01 내지 0.2 중량%, 바람직하게는 0.05 내지 0.1 중량%의 범위이다.

본 발명의 목적에 적합한 나트륨 DNA는 상용하는 물질로서, 예를 들어 칼리넷 아우 (Kalinat aw) 분말이라는 상품명으로 시판하는 제품이 있다 (Kalichem). 상기한 양의 나트륨 DNA는 구강 점막에 대한 클로르헥시딘의 자극 효과를 중화하여 자극에 대한 보호 효과 및 구강에 일어날 수 있는 상처의 치유 효과를 제공하고, 따라서 구강 점막 자체의 적합한 친화성을 촉진하는데 최적인 것으로 입증되었다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트염을 포함한다.

상기 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트가 존재시 클로르헥시딘의 부작용인 치아의 흑변색 결점을 저지한다.

바람직하게는, 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트는 소듐 메타비설파이트, 포타슘 메타비설파이트 및 칼슘 메타비설파이트로 이루어진 군에서 선택된다. 더 바람직하게는, 본 발명에 따른 구강 세정제는 소듐 메타비설파이트를 포함한다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 구강 세정제에서 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염의 양은 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.1 내지 0.5 중량%, 더 바람직하게는 0.15 내지 0.3 중량%의 범위이다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 아스코르빈산을 포함한다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제에서 아스코르빈산의 양은 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.1 내지 1.0 중량%의 범위이다.

아스코르빈산의 존재는 클로르헥시딘의 부작용인 치아 흑변색의 결점을 방지한다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 아스코르빈산 및 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염를 포함하며, 더 바람직하게는 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.1 내지 0.5 중량%의 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염 및 0.1 내지 1.0 중량%의 아스코르빈산을 포함한다.

상기한 양의 성분 조합물은 치아 흑변색 같은 클로르헥시딘의 부작용을 중화함에 있어 최적인 것으로 입증되었다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 시트르산 삼염기 나트륨을 포함한다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제에서 시트르산 삼염기 나트륨의 양은 구강 세정제 총 부피에 대해 0.8 내지 2.0 중량%, 더 바람직하게는 0.8 내지 1.2 중량%의 범위이다.

상기한 양으로서 시트르산 삼염기 나트륨이 존재하면 구강 세정제의 pH를 사용에 최적인 값으로 유리하게 조정할 수 있다.

바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 아스코르빈산 및 시트르산 삼염기 나트륨을 포함한다. 더 바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 구강 세정제 총 부피에 대해 0.1 내지 1 중량%의 아스코르빈산 및 0.8 내지 2.0 중량%의 시트르산 삼염기 나트륨을 포함한다.

실제로, 상기 아스코르빈산 및 시트르산 삼염기 나트륨의 조합물은 본 발명에 따른 구강 세정제의 제형을 안정화할 수 있다는 뜻밖의 사실을 발견했다.

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제는 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체를 포함한다. 본 발명의 목적에 적합한 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체는 시판하는 재료로서, 예컨대, Luviskol® (BASF SE)라는 상품명으로 시중에서 구할 수 있는 제품을 포함한다.

상기 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체는 유리하게는 본 발명에 따른 구강 세정제에서 막 형성 및 안티플라크 작용을 제공한다..

바람직하게, 본 발명에 따른 구강 세정제에서 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체의 양은 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.05 내지 1 중량%, 더 바람직하게는 0.3 내지 1 중량%의 범위이다.

이의 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 구강 세정제로서, 구체적으로 구강 세정제의 총 부피에 대해, 0.01 내지 0.30 중량%의 클로르히드린, 0.01 내지 0.2 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 0.1 중량%의 나트륨 DNA, 0.1 내지 0.5 중량%의 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염, 0.1 내지 1.0 중량%의 아스코르빈산, 0.05 내지 1 중량%, 더 바람직하게는 0.3 내지 1 중량%의 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체를 포함한다.

본 발명에 따른 구강 세정제는 구강관리를 위한 용액을 위해 하나 이상의 공지된 다른 가능한 성분들을 함유할 수 있다.

특히, 본 발명에 따른 구강 세정제는 감미제, 향료, 습윤제, 보존제, 유화제, pH 조절제, 식용 색소 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다.

감미제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 자일리톨, 사카린산 나트륨, 아세술팜 칼륨, 수크랄로스, 스테비아 추출물 등을 포함할 수 있다.

향료로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 페퍼민트, 멘톨, 아니톨, 멘타비리디스, 시나몬, 클로브, 유칼립톨 등을 포함할 수 있다.

습윤제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 프로필렌 글리콜, 소르비톨, 글리세린 등을 포함할 수 있다.

보존제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 벤조에이트, 메틸이소티아졸리논 등을 포함할 수 있다.

가용화 계면활성제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 수소첨가 캐스터 오일 Peg40, 폴록사머 407 등을 포함할 수 있다.

pH 조절제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, 시트르산 나트륨, 시트르산 등을 포함할 수 있다.

착색제로서, 본 발명에 따른 구강 세정제는 예를 들어, CI 19140, CIU 42090, CI 17200 등을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 구강 세정제는 적절한 용매 매질, 예컨대 물에 녹인 용액이나 현탁액의 형태로서 공지의 방식대로 편리하게 제조한다.

바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 구강 세정제는 다음과 같은 성분들을 포함한다:

1. 물

2. 자일리톨

3. 프로필렌 글리콜

4. 수소첨가 캐스터 오일 PEG 40

5. 아스코르빈산

6. 클로르헥시딘 디글루코네이트

7. 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체

8. 나트륨 DNA

9. 향료

10. 폴록사머 407

11. 소듐 메타비설파이트

12. 시트르산 나트륨

13. 시트르산

14. C.I. 42090

15. C.I. 17200

또다른 일 구현예에서, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 클로르헥시딘과 나트륨 DNA를 포함하는 치주용 겔이다.

바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 치주용 겔은 다음의 성분들을 포함한다:

1. 물

2. 프로필렌 글리콜

3. 히드록시에틸 셀룰로오스

4. 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체

5. 수소첨가 캐스터 오일 PEG 40

6. 클로르헥시딘 디글루코네이트

7. 아세트산 나트륨

8. 나트륨 DNA

9. 멘톨

10. 페퍼민트 오일

11. 아세트산

12. 소듐 메타비설파이트

13. 아스코르빈산

바람직하게, 본 발명에 따른 치주용 겔은 치아용 곌의 총 부피에 대해 0.5 내지 1.0 중량%의 클로르헥시딘을 포함한다.

바람직하게, 본 발명에 따른 치주용 겔은 치주용 겔의 총 부피에 대해 0.3 중량%의 최대량, 더 바람직하게는 0.01 내지 0.3 중량%의 나트륨 DNA를 포함한다.

또다른 바람직한 일 구현예에서, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 클로르헥시딘과 나트륨 DNA를 포함하는 치약이다.

바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 치약은 다음의 성분들을 포함한다:

1. 소르비톨

2. 물

3. 실리카 (수화 실리카)

4. 글리세롤

5. 자일리톨

6. 코카미도프로필 베타인

7. 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체

8. 수소첨가 캐스터 오일 PEG 40

9. 향료

10. 클로르헥시딘 디글루코네이트

11. 카르복시메틸 셀룰로오스

12. 아스코르빈산

13. 소듐 메타비설파이트

14. 나트륨 DNA

15. 사카린 나트륨

16. 벤조산 나트륨

17. 시트르산 나트륨

바람직하게, 본 발명에 따른 치약은 치약의 총 부피에 대해 0.05 내지 0.2 중량%의 클로르헥시딘을 포함한다.

바람직하게, 적어도 하나의 무기 불화물이 선택적으로 본 발명에 따른 치약에 존재할 수 있다.

바람직하게, 본 발명에 따른 치약에서 나트륨 DNA의 양은 치약의 총 부피에 대해 0.01 내지 0.05 중량%의 범위이다.

또다른 측면에서, 본 발명은 또한 구강 점막의 항자극제로서의 본 발명에 따른 구강관리 제품의 용도에 관한 것이다.

또다른 측면에서, 본 발명은 구강 점막의 치유제로서의 본 발명에 따른 구강관리 제품의 용도에 관한 것이다.

바람직하게, 구강 점막은 치주 조직을 포함한다.

실제로, 나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 연합 덕분에 본 발명에 따른 구강관리 제품이 구강 점막에 대한 상기 후자의 자극 효과를 중화할 수 있고 이에 따라 점막의 보호 효과 및 구강에 생길 수 있는 상처에 대한 치유 효과를 제공하게 된다는 사실을 발견했다.

또한, 나트륨 DNA와 클로르헥시딘의 연합은 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간 확대 등의 세포 구조의 변형을 포함하여 클로르헥시딘계 구강관리 제품의 장기 사용시의 부작용을 제한할 수 있으며, 따라서 상기 제품의 응용 및 기능적 한계들 중 하나를 해소할 수 있다는 사실을 확인했다.

바람직하게, 본 발명은 이에 따라 치은염, 세균성 플라크 및 치주염으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 질병을 치료하기 위한 방법에서의 본 발명에 따른 구강관리 제품의 용도에 관한 것이다.

또한, 본 발명에 따른 구강관리 제품은 구강 임플란트 점막염의 치료에도 효과가 있다는 뜻밖의 사실을 발견했다. 따라서, 또다른 측면에 있어서 본 발명은 또한 구강 임플란트 점막염 치료를 위한 방법에서의 본 발명에 따른 구강관리 제품의 용도에 관한 것이다.

이의 또다른 측면에서, 본 발명은 구강 점막의 질병을 치료하는 방법에 사용하기 위한 나트륨 DNA의 용도에 관한 것으로서, 이때의 질병은 구강 점막의 세포 구조 변형을 수반하며 이러한 세포 구조의 변형은 공포화, 세포핵 변성, 세포간 공간의 확대로 이루어진 군에서 선택된다.

실제로, 나트륨 DNA는 구강 점막의 세포 구조에 대한 보호 작용을 부여하여, 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대 등을 포함하는 세포 구조 변형의 발생 및 전개를 저지할 수 있다는 뜻밖의 사실을 확인했다.

바람직하게, 이러한 구강 점막은 치주 조직을 포함한다.

본 출원인은 또한, 상기 나트륨 DNA의 보호 작용을 통해, 예를 들어, 특별히 구강 점막의 세포 구조로 진행하는 클로로헥시딘 같은 활성 성분들을 이용하여 치료의 부작용으 제한함으로써 임의의 원인에 따른 세포 변형에 치료학적으로 개입할 수 있다는 뜻밖의 사실을 발견했다.

본 출원인은, 클로르헥시딘계 구강관리 제품의 사용시 야기되는 클로르헥시딘 부작용을 해소하는 것이 상술한 응용 및 기능적 한계점에 비추어 특별한 가치가 있는 혁신적 측면을 구성하는 사실을 확인했다.

이의 또다른 측면에서, 본 발명은 이에 따라 또한 클로르헥시딘을 이용한 치료를 받는 환자에서 클로르헥시딘의 부작용을 해소하는 방법에서 사용하는 나트륨 DNA에 관한 것으로, 이 부작용은 환자의 구강 점막의 세포 구조 변형을 수반하며 이러한 세포 구조의 변형은 공포화, 세포핵 변성 및 세포간 공간의 확대로 이루어진 군에서 선택된다.

바람직하게, 상기 구강 점막은 치주 조직을 포함한다.

실험 부문

이에 본 발명을 비제한적인 예시의 목적으로 고려한 몇몇 실시예를 통하여 기술한다.

실시예 1

재료와 방법

All모든 시약, 배양액 (배지) 및 일회용 재료 등을 머크(Merck)사로부터 구했다 (E.Merck AG, Darmstadt, Germany). 0.5 cm²의 재구성된 인간 구강 상피세포 시료 (이하 "ROE") (SkinEthic HOE^TM/인간 구강 상피)를 EPISKIN로부터 구했다 (EPISKIN, Lyon Cedex 7, France). 나트륨 DNA (이하 "NaDNA", Kalinat® AW)를 ALICHEM로부터 구했다 (Kalichem, Brescia, Italy).

보존제를 함유하지 않은 다음과 같은 구강 세정제 용액을 시험했다:

A. 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.2 중량%의 클로르헥시딘을 함유한 구강 세정제 (양성 대조군);

B. 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.2 중량%의 클로르헥시딘 및 0.01 중량%의 NaDNA를 함유한 구강 세정제 (시험군);

C. 구강 세정제의 총 부피에 대해 0.01 중량%의 NaDNA를 함유한 구강 세정제;

D. 인산염 완충 염수액 (PBS, 음성 대조군).

재구성된 인간 구강 상피세포(ROE)

32 ROE 시료를 이용했다. ROE 시료를 멸균 공기 유동의 존재하에 후드 아래서 개방했다. 시료를 아가로스 영양분이 포함된 배지를 함유하는 24-웰 운반 플레이트에 정렬 배치했다.

시료는 운반 플레이트에서 추출하고 아가로스를 제거했다. 다음, 시료를 영양 배지 (RPMI 1640 배지, 20% 태아소 혈청, 1% L-글루타민 및 1% 페니실린/스트렙토마이신 보충)가 담긴 6-웰 플레이트에 담았다. 시험전, 배양 플레이트를 37 ℃에서 100% 상대습도의 5% CO₂ 분위기하에 하룻밤 배양했다.

생물 반응기

유동셀 바닥면에 시료를 담은 트레이를 설치할 수 있고 주변 순환배지내 ROE 시료를 침지할 수 있도록 개조된 2대의 시판형 점적유동 생물반응기(DFR 110; BioSurface Technologies, Bozeman, MT, USA)에서 시험을 수행했다. 이는 영양 배지를 연속 유량으로 사용할 수 있도록 한다.

시험관을 담은 생물 반응기의 모든 트레이 및 시료는, 과산화수소 기체 플라즈마 기술을 이용한 화학반응기를 사용하여 실험을 개시하기 전에 멸균했다 (Sterrad, ASP, Irvine, CA, USA). 최대 온도를 45 ℃로 제한하여, 전체 시스템의 열에 의한 손상을 피했다. 멸균후, 생물 반응기를 멸균 후드 내에 조립했다.

시험 절차

도 1은 실험에 이용된 장치의 일부 단면 개략도로서, 2대의 생물반응기 중 하나를 예시적으로 모여준다.

시스템(1)은 연동 펌프(11), 점적유동형 반응기(10) 및 시료를 담은 유동셀(14, 15 및 16)을 포함한다. 점적유동형 반응기(10)에는 유동챔버(21), 유입구(12) 및 드레인(13)이 장착된다. 유동챔버(21)는 유동 배지(20)를 함유하도록 구성된다.

ROE 시료는 멸균 메스와 핀셋으로 지지체로부터 절단 분리하여 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE)로 제작되고 각각 3개의 홀이 있는 8개의 유동셀(14, 15 및 16) 내의 생물반응기 내부에 담았으며, 영양배지 (배지 RPMI 1640, 20% 태아소 혈청, 1% L-글루타민 및 1% 페니실린/스트렙토마이신 보충)를 포함하는 유동배지(20)에 표면을 고정 및 노출시켰다. 모든 트레이를 병렬 조작하는 2대의 생물반응기(10) 각 유동챔버(21)의 바닥면에 고정하고 즉시 새로운 영양배지를 접종했다. 다음, 생물 반응기를 37 ℃와 5% CO₂ 및 100% 상대습도 하에 조작하는 배양기로 이동했다. 이어서, 컴퓨터 제어형 멀티채널 연동펌프(11) (RP-1, Rainin, Emeryville, CA, USA) 켜고 9.6 ml/h의 유속으로 설정하여, 영양배지를 함유한 유동배지(20)의 연속유동을 유동셀을 통해 공급하는데 이용했다. 도 1에서, 화살표(17, 18 및 19)는 유동배지(20)의 유동 방향을 개략적으로 표시한다. 연동펌프(11)는 반응기(10) 유입구(12)를 통과하여 유동배지(20)를 2대의 생물반응기(10)의 유동챔버(21)로 공급하며, 이어서 드레인(13)을 통해 배출한다.

24시간 후, 펌프(11)를 정지시키고 4개의 유동셀(14, 15 및 16)을 각 유동셀 당 하나씩 (10 ml) 각각 구강 세정제 (A, B, C 및 D)로 처리했다. 각 유동셀에서, 생물반응기(10)를 25분간 경사지게 하여 2개의 시료를 5분간 처리했고 다른 2개의 시료는 30분간 처리했으며, 그결과 용액이 2개의 하부 시료를 완전히 뒤덮었다. 다음, 이 용액을 나머지 5분간 수평 위치로 복귀시켜 결과적으로 4개의 시료 모두를 커버했다. 나머지 4개의 유동셀(14, 15 및 16)을 1차로 3% H₂O₂ 용액으로 1분간 처리하여 고 산화성 스트레스와 세포 손상을 유도한 다음, 시료를 멸균 PBS로 1분간 완전히 세정하고 유동셀 (14, 15 및 16)은 앞서 기술한 바와 같이 시험한 구강 세정제 용액으로 처리했다. 다시, 각 유동셀에서, 2개의 시료를 구강 세정제 용액으로 5분간 처리하는 한편 다른 2개의 시료는 30분간 처리했다.

그 후, 펌프(11)를 작동하여 60분간 구강 세정제를 세척하고 다시 ROE 시료는 유동셀(14, 15 및 16)으로부터 추출하고 다시 멸균 메스와 핀셋을 이용하여 4등분으로 즉시 절단한 후 다음과 같이 작업했다.

시료의 평가

각 처리시 ROE 시료는 MTT 생존율 시험을 거쳤고 (n = 4), 이어서 공초점 레이저 주사 현미경 이미징 (CLSM) (n = 2) 및 영상 투사법(TEM)에서 광학 현미경과 전자 현미경을 이용하여 조직학적 평가 (n = 2)를 수행했다.

MTT 생존율 시험

MTT 생존율 시험으로 세포 생존성을 평가했다. 투여 방법은 다음과 같이 시행했다: 5 mg/ml의 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드(MTT)를 멸균 PBS에 용해하고 또한 0.3 mg/ml의 N-메틸페나지늄 메틸 설페이트 (PMS)을 멸균 PBS에 용해하여 2가지 개시 원액을 조제했다. 이 용액들은, 각각 MTT원액, 멸균 PMS 및 PBS 원액을 각각 1:1:8의 비율로 혼합하여 새로운 측정 용액을 조제하는 실험 당일까지, 내광성 유리병에 2 ℃에서 보관했다. 10% (v/v)의 황산도데실 나트륨과 50% (v/v)의 디메틸포름아미드를 증류수에 용해시켜 용리액 (LS)을 조제했다. MTT의 대상인 ROE를 24-웰 멸균 편평바닥 플레이트의 각 웰에 담았다. 그 후, 1 ml의 FMS를 각 웰에 피펫 이동시키고 상기 플레이트를 광 조건하에 37 ℃에서 1시간 동안 배양했다. 배양 동안 세포막을 통해 전자가 이동하며, 소량이긴 하나, 세포성 산화물-환원 장치가 이 MTT 황색 염을 불용성 자주색 포르마잔으로 전환시켰다. 전환 반응은 중간 전자 수용체 (PMS)에 의해 촉진되었다. 다음, 미반응 FMS를 흡입범으로 웰로부터 신중히 제거하고, 1 ml의 LS를 각 웰에 가해 포르마잔 결정을 용해했으며, 광 조건하에 1시간 동안 추가 배양했다. 다음, 총 100 마이크로리터의 현탁물은 각 웰로부터 제거되고 광학 밀도 (550 nm)를 분광광도계로 측정했다 (Genesys 10-S, Thermo Spectronic, Rochester, NY, USA).

CLSM 관측

공지 문헌 (Brambilla E, Ionescu A, Mazzoni A, Cadenaro M, Gagliani M, Ferraroni M, Tay F, Pashley D, Breschi L. (2014))에 기술된 바와 같이 생/사 염색법을 이용해 CLSM 이미징을 수행했다. 덴틴 결합 시스템의 친수성은 시험관내 스트렙토코쿠스 돌연변이체 바이오필름의 형성에 영향을 미친다. (Dent Mater. 30(8): 926-35). 요약하면, CLSM 관측 대상인 ROE 시료는 현미경 측정을 위한 생/사® 생존율 키트를 이용하여 염색했다 (Invitrogen Ltd., Paisley, UK). 세포 ㅎ형광 염색된 생체 재료를 CLSM로 관측했다 (Eclipse Ti2 inverted CLSM, Nikon, Tokyo, Japan). 4개의 임의 선택된 이미지 스택 영역을 각 ROE 시료에서 기록했다. 건조 플랜 아포크로맷 20 x (NA 0.75) 렌즈를 이용해 공초점 이미지를 수득하여 니콘 소프트웨어로 1024 x 1024 픽셀의 화상도 및 1.0 줌 팩터를 이용하여 디지탈화 했다 각 이미지 스택 영역에서, 3D 렌더링 재구성은 공지 문헌 (Lindhe J, Heyden G, Svanberg G, Loe H, Rindom Schiott C (1970); 햄스터 구강 점막에 대한 클로르헥시딘의 국소 응용에 따른 효과. J. Periodont. Res. 5(3): 177-182)에 기술된 바와 같이 드리시티 3D 소프트웨어를 이용하여 수득했다.

조직학적 평가

조직학적 분석 대상인 ROE 시료는 신선하게 조제된 카르노프스키 용액 (0.1M 카코딜산 나트륨 완충액에 녹인 2.0% 파라포름알데히드 및 2.0% 글루타르알데히드의 용액)에서 하룻밤 동안 고정했다.

완충액으로 세정후, 시료는 2%의 OsO₄ 및 2%의 아세트산 우라닐로 염색했다. 다음, 시료를 아세톤 용액으로 탈수화하고 이폰-아랄다이트 수지 (Fluka, Italy)에 도입했다. 상이한 실험군의 모든 시료에서 톨루이딘 블루 염색 대상인 0.5 마이크론의 단면을 준비하여 최종 배율 1500 x의 광학 현미경 (Pro Plus Imaging software) 및 TEM (Zeiss microscope EM10)으로 관측했다.

결과

MTT 시험

MTT 생존율 시험의 데이타 설정을 분포 표준성(Shapiro-Wilk test) 및 등변량성 (Levene test)에 관하여 예비 점검했다. 데이타가 로그 변환후에도 정상 분포하지 않았으므로, 윌콕손 시험으로 비변수적 분석을 수행했다 (p < 0.05).

용액(A, B, C 및 D)를 이용하여 상이한 처리 시간에 ROE 세포에 대해 수득한 결과는 도 2에 나타낸다. 도 3은 3 부피%의 H₂O₂ 용액으로 1분간 처리하고 및 용액(A, B, C 및 D)를 이용한 후속의 다양한 처리후 ROE 세포에 대한 MTT 생존율 시험의 결과를 도시한다.

도 2에서 보는 바와 같이, 구강 세정제 용액을 이용하여 5분간 처리후 생존율은, 용액(B)와 비교시, 용액(C)로 처리한 시료에서 유의미하게 감소한 것으로 관측되었다. 음성 대조군 (용액 (D))에 대하여는 용액의 생존율 변화가 확인되지 않았다. 구강 세정제 용액을 30분간 ROE 시료를 처리한 결과 클로르헥시딘 함유 용액에 있어서 용액(C)에 의해 생존율의 유의미한 감소가 확인되었다. 3 부피%의 H₂O₂를 이용한 처리 (도 3)는 대체로 생존율 저하를 유도했다. 5분간 처리한 시료의 경우, 용액(B)보다 용액(A)로 처리한 후의 생존율이 유의미하게 높았으나, 30분간 처리후, 상기 2가지 용액간 차이는 유의미하게 감소했으며 용액(C 및 D)의 경우더욱 유의미하게 높았다. 또한, 용액(C)은 용액(D)보다 유의미하게 높은 생존율을 나타냈으며 이는 세포 생존율에 있어서 NaDNA의 유의미하고 양성적인 활성을 시사한다.

CLSM 관측

구강 세정제 용액으로 5분간 처리후 수득한 공초점 현미경 재구성 결과는 이들 그룹들 간에 차이점을 보이지 않았다. 30분간 처리후의 시료의 재구성은 도 4 (용액(A, B, C 및 D)를 이용한 30분간의 처리후의 시료) 및 도 5 (H₂O₂로 1분간 처리 및 용액(A, B, C 및 D)으로 30분간 후속 처리후의 시료)에서 보는 바와 같다.

용액(A)으로 처리한 시료 및 더 적은 양의 용액(B)으로 처리한 시료는 과산화수소에 노출될 시료의 경우도 세포 구조의 보존성이 양호한 것으로 나타났다. 음성 대조군 시료(D)의 경우 표면 상에 죽은 세포들이 존재했으며, 과산화수소로 처리한 후에는 거의 대부분 죽은 세포들로 이루어진 층이 표면 상에서 확인되었다. NaDHA (용액 C) 단독으로 처리한 시료는 과산화수소 처리 여부에 관계없이 음성 대조군에서보다 죽은 세포들의 양이 훨씬 적은 것으로 나타났다.

조직학적 평가

구강 세정제 용액을 이용한 5분간의 처리후 수득한 ROE 조직의 영역 (0.5 μm) 그룹간 차이가 없는 것으로 나타났다. 30분간의 처리후 시료의 영역은 도 6 (용액(A, B, C 및 D)를 이용한 30분간의 처리후의 시료) 및 도 7 (H₂O₂로 1분간 처리 및 용액(A, B, C 및 D)으로 30분간 후속 처리후의 시료)에서 보는 바와 같다.

도 6의 시료를 고려하면, 음성 대조군(D)는 조직 구조의 완전한 보존을 나타냈다. 용액(A)으로 처리한 시료 및 더 적은 양의 용액(B)으로 처리한 시료는 세포 구조의 변형, 예컨대, 외곽층 및 기저층 양측에서 공포화, 핵 변성 및 세포간 공간의 초기 확대 등을 나타냈다. 이러한 세포 구조의 변형은 클로르헥시딘의 활성 탓일 수 있다. 실제로, 클로르헥시딘 구강 세정제에 NaDNA를 첨가한 경우 (용액 B), 클로르헥시딘 단독으로 된 구강 세정제 (용액 A)에 비하여, 세포 구조의 변형이 적은 것으로 나타났다. 용액(C)으로 처리한 시료는 동일한 변형을 나타냈으나, 제1 세포층에만 국한되었다. 과산화수소 처리시 (도 7 참조) 예상대로, 뚜렷한 공포화, 핵 변성 및 세포간 공간의 확대 등 ROE 세포에 대한 광범위한 손상을 나타냈다. 이들 변형은 음성 대조군(D) 및 용액(A) (클로르헥시딘 단독)으로 처리한 시료들에서 더 뚜렷했다. 용액(B)로 처리한 시료들의 경우, 변성 징후가 없는 일부 세포들은 최내층에서 확인할 수 있으며 이들 세포는 과산화수소에 의해 생성된 반응성 산소종으로부터 더 큰 보호를 받고 또한 NaDNA는 세포 손상을 최소화하는 작용을 했다. 구강 제정제(C) (NaDNA 단독)으로 처리한 시료는 극소의 세포 변성 징후를 나타냈다.

결론적으로, NaDNA는 산화성 스트레스로 인한 세포 변성 및 클로르헥시딘 단독 함유의 구강 세정제에 대한 노출에 대하여 명백한 보호 작용을 나타냈다.

실시예 2

본 실험의 목적은 치아-임플란트 점막염이 있는 조건에서, 즉, 지지골 없는 임플란트 주변의 탐침시 출혈 및 질병성 포켓 (< 3 mm)이 있는 조건에서 겔 형태의 본 발명에 따른 구강관리 제품이 갖는 효과를 시험하는 것이다.

환자 선정

헬싱키 선언의 기준을 준수하고 키에티 및 페스카라에 있는 생의학 연구를 위한 윤리위원회의 승인하에 임상실험의 원칙에 따라 본 연구를 수행했다. 그러므로, 세균성 플라크 및 염증 제어 특성을 평가할 목적으로 치아-임플란트 점막염이 있는 환자들을 의학, 구강학 및 생물공학 부서에서 모집했다.

본 연구를 위해 선정한 환자들은 과학 연구 수행에 관한 헬싱키 선언에 명시된 원칙과 또한 다음과 같은 내부 기준에 따라 등록했다:

- 건강한 환자 즉: 예컨대 1차성 당뇨병, 면역 질환, 혈액학적 질환 등의 관련 계통적 질환; 신생물; 간부전의 징후 및/또는 증상을 동반하는 HIV 혹은 바이러스성 간염 등의 심각한 감염성 질환; 지능적 곤란성; 운동 부족 등이 없는 환자;

- 18세 이상; 및

- 구체적 고지에 동의한 실험 참가자.

점막염의 영향을 받은 임플란트가 있는 선정 후보들은 다음과 같이 정의된다:

- 임플란트 주변의 지지골 손실이 없는 상태에서 탐침시 출혈이 있음;

- 식물 이동성 없음;

- 적어도 2 mm의 케라틴화된 치은염이 임플란트 주위에 존재함;

- 최대 3개의 치아에서 단일 크라운 혹은 브릿지 이외의 임플란트 복원이 없음; 및

- 과하중 혹은 교합 외상의 뚜렷한 징후 없음.

기타의 원칙은 다음과 같다:

- 임플란트 수술적 조처후 전체 발치가 아님 (수술후 자연 치아가 존재하지 않을 경우, 플라크, 출혈 변수 등을 측정하기 불가함)

- 비흡연자 혹은 가벼운 흡연자 (일일 10개피 미만);

- 플라크 및 출혈 지수가 낮고 다른 치아에 치주 병변이 없는 양호한 구강관리 (FMPS 및 FMBS ≤ 25%); 및

- 글루콘산 클로르헥시딘 혹은 기구의 제형 및 플라시보의 기타 성분들에 대한 알러지가 있는 환자.

1차 평가지수의 선택:

1차 목표: 플라크 지수 점수: 플라크의 여부(존재/무존재)를 평가 대상 표면에 대해 기록했다.

2차 평가지수의 선택:

다음과 같은 임상 변수의 기록:

- 탐침시 출혈 ("BOP"): 탐침시 출혈의 여부를 기록했다.

- 잇몸 지수 (Loe & Silness 1963): 치주 조직의 건강을 다음과 같은 기준에 따라 기록했다:

0 = 정상 잇몸;

1 = 약한 염증 - 탐침시 출혈은 없이 약간의 부종 및 색 변화

2 = 보통 염증 - 붉은 색을 띠고 부기가 있는 조직 및 탐침시 출혈

3 = 심각한 염증 - 뚜렷한 적색, 부종, 궤양 및 출혈 성향.

통계적 분석

서술형 데이타 분석을 수행하였으며 정량 변수는 평균과 표준편차로 표시한다. 정량 변수에 대해 두 실험 그룹을 비교하기 위해, 스튜던트 T 검사를 이용했다. 유의성 수준은 5%로 설정했다. 정규 분포는 킬모고로프 스미르노프 시험 (p 값 > 0.05) 방식 및 14일 반응 변수를 이용한 그래프를 평가함으로써 결정했다.

실험 단계

다음의 겔을 시험했다:

E. 0.2 중량% 클로르헥시딘 및 0.01 중량% NaDNA를 함유한 겔;

F. 겔(E)와 동일한 조성을 갖지만 클로르헥시딘이나 NaDNA을 함유하지 않은 "플라시보(위약)";

시료의 크기는 2개 그룹간 등록비가 1:1인 24명의 환자로 구성되었다 (각 실험군당 12명의 환자).

임상변수 및 구강관리 상태를 기록한 뒤, 각 환자들은 무기명의 겔 튜브, 주사기 및 도포 노즐을 공급 받았다 (일일 3회 총 14일간). 겔(E) (0.2 중량% 클로르헥시딘 및 0.01 중량% NaDNA을 함유한)을 공급받은 환자들은 A 그룹으로 정의하는 한편, 겔(F) ("플라시보" 겔)을 수용한 환자들은 B 그룹으로 정의했다.

후속조치 동안 점검할 기록 대상 값들을 다음과 같이 설정했다:

- 기저값 (시간 0, "TO")

- 수술후 14일 (시간 1, "T1")

T0 단계에서, 임상 프로토콜마다 플라크 지수, 탐침시 출혈 및 잇몸 지수를 수집하여 치주 기록을 생성했다.

모든 환자들이 T0와 T1 임상연구 단계를 완료했다. 따라서 대상자들에게 올바른 가정내 구강관리 요령을 설명하고 14일 후에 재평가했다. T1 단계에서, 임상 프로토콜마다 플라크 지수, 탐침시 출혈 및 잇몸 지수를 수집하여 치주 기록을 생성했다. 연구 기간 동안 어떤 역효과도 기록되지 않았다. 또한, 겔(E) 및 (F) 투여에 따른 부적절한 영향이나 부작용도 존재하지 않았다.

결과

1차 평가지수

시간 T0에서, 플라크 지수 관련 기저값은 A 그룹(겔 E)이 2.4 ± 0.4 이고, B 그룹 (겔 F)이 2.2 ± 0.5 으로 검출되었다 (p > 0.05). 2주 치료후 (T1), 측정된 플라크 지수는 A 그룹 (겔 E)이 0.5 ± 0.4 이고, B 그룹 (겔 F)이 1.7 ± 1.9 이었다 (p < 0.05).

2차 평가지수

시간 T0에서, BOP 지수 관련 기저값은 A 그룹(겔 E)이 57.1% ± 15.2% 이고, B 그룹 (겔 F)이 55.3% ± 11.7% 으로 검출되었다 (p> 0.05). 2주 치료후 (T1), 측정된 BOP는 A 그룹 (겔 E)이 14.3% ± 6.6% 이고, B 그룹 (겔 F)이 45.4 ± 9.8% 이었다 (p <0.05).

상이한 실험 시간에 측정한 잇몸 지수에 대한 데이타는 다음과 같다: 기저값, 및 2주간 치료후인 T1에서의 데이타를 표 1에 나타낸다.

	A 그룹 (겔 E)	B 그룹 (겔 F)	P 값
T0 에서의 잇몸 지수	2.21 ± 0.51	2.35 ± 0.67	p> 0.05
T1 에서의 잇몸 지수	0.82 ± 0.53	1.62 ± 0.74	p<0.05

결론

실험 시간(T1)에서, 1차 플라크값 변수에 관하여 통계적으로 유의미한 차이값이 A 그룹(겔 E)과 B 그룹(겔 F) 사이에 확인된다. 이 치료의 장점은 또한 탐침후 출혈에 관한 2차 지수 및 잇몸 지수에 관련하여 입증되었으며, 평가한 변수들의 통계학적으로 유의미한 차이는 A 그룹에서 나타나고 따라서 치아-임플란트 점막염의 치료에 있어서 본 발명에 따른 구강관리 제품의 효용성을 확인할 수 있다.

실시예 3

본 실험의 목적은 치주 질환이 있는 환자들에 대해 2주후 구강의 연조직에 대해 사용한 구강 세정제 형태의 본 발명에 따른 구강관리 제품에 관하여, 치아 플라크에 대한 항균 및 억제 특성을 임상적으로 평가하기 위한 것이다.

환자 선정

헬싱키 선언의 기준을 준수하고 키에티 및 페스카라에 있는 생의학 연구를 위한 윤리위원회의 승인하에 임상실험의 원칙에 따라 본 연구를 수행했다. 그러므로, 세균성 플라크 및 염증 제어 특성을 평가할 목적으로 치주 질환이 있는 환자들을 의학, 구강학 및 생물공학 부서에서 모집했다.

환자들은 다음과 같은 내부 기준에 따라 모집했다:

- 20개 이상의 치아에서 탐침 검사시 (> 3 mm) 만성 치주염이 있는 환자;

- 비흡연자 혹은 가벼운 흡연 환자 (일일 10개피 미만);

기타의 기준은 다음과 같다:

- 치교 교정 중인 환자;

- 구강 세정제에 대한 내성이 없거나 알러지가 있는 환자;

- 흡연 및 음주자;

- 방사선 치료/화학요법을 5년 미만내에 받은 환자;

- 면역손상 환자;

- 계통적, 신장 혹은 심혈관 질환자; 및

- 임신이나 수유중인 여성 혹은 항생제 및 항염증 치료 중인 환자.

1차 평가지수의 선택:

총 구강 플라크 점수 (FMPS): 치아당 4곳에서 플라크의 존재 여부를 기록하고 그의 백분율을 표면에 대해 계산한다.

2차 평가지수의 선택:

총 구강 출혈 점수 (FMBS): 치아당 4곳에서 탐침시 출혈의 유무를 기록하고 그 백분율을 표면에 대해 계산한다.

잇몸 지수

잇몸 지수 (Loe & Silness 1963): 치주 조직의 건강을 다음과 같은 기준에 따라 기록했다:

0 = 정상 잇몸;

1 = 약한 염증 - 탐침시 출혈은 없이 약간의 부종 및 색 변화

3 = 심각한 염증 - 뚜렷한 적색, 부종, 궤양 및 출혈 성향.

합병증, 역효과 및 분비물 여부를 기록한다.

통계적 분석

실험 그룹에 관련하여 기저값, 1주 및 2주의 상이한 실험 시간에서의 FMPS, FMBS 및 GI 데이타의 분포를 킬모고로프 스미르노프 시험으로 평가했다. 연구 데이타의 유의미성은 스튜던트 T 시험으로 평가했다 (p < 0.05).

실험 치료

다음의 구강 세정제를 시험했다:

G: 0.2 중량% 클로르헥시딘 및 0.01 중량% NaDNA를 함유한 구강 세정제;

H. 겔(E)와 동일한 조성을 갖지만 클로르헥시딘이나 NaDNA을 함유하지 않은 "플라시보(위약)";

시료의 크기는 2개 그룹간 등록비가 1:1인 54명의 환자로 구성되었다 (각 실험군당 27명의 환자).

구강 세정제(G) (0.2 중량% 클로르헥시딘 및 0.01 중량% NaDNA을 함유한)을 공급받은 환자들은 A 그룹으로 정의하는 한편, 구강 세정제(H) ("플라시보" 겔)을 수용한 환자들은 B 그룹으로 정의했다.

연구 단계

실험 단계 (V1) - 환자의 적격성 및 연구 수용을 평가하기 위한 선별 검진. 고지에 대한 동의 및 구강관리 지침의 승인

실험 단계 (V2) (기준선) - 총 구강 플라크 값(FMPS), 총 구강 출혈 값(FMBS) 및 잇몸 지수(GI)를 기록하여 치주 기록를 작성. 각 할당된 연구 그룹 (A 혹은 B)에 관련한 구강 세정제 패키지를 각 환자에게 제공하고 10 ml의 헹굼 절차를 수행한다. 프로토콜에는 2주간의 치료 동안 가정내에서 일일 총 3회의 헹굼 절차 (아침 및 저녁 식사후)를 수행하는 것을 포함한다.

실험 단계 (V3) (1주차) - 다음과 같은 FMPS, FMB 및 GI 지수를 기록한 결과와 대조한다.

실험 단계 (V4) (2주차) - FMPS, MFBS, GI 및 생길 수 있는 스폿들을 제거하는 마지막 치료를 기록한 결과와 대조한다.

결과

1차 평가지수

시간 V2에서, 검출된 FMPS 관련 기저값은 A 그룹 (구강 세정제 G)이 52.7 ± 9.2 이고, B 그룹 (구강 세정제 H)이 58.2 ± 6.1 이었다 (p> 0.05). 제1주 치료시 (V3), 측정된 FMPS는 A 그룹이 13.3 ± 5.6 이고, B 그룹이 18.7 ± 4.3 으로 확인되었다 (p < 0.05). 제2주 치료시 (V4), 측정된 FMBS는 A 그룹이 14.2 ± 4.1 이고, B 그룹이 20.3 ± 5.2 인 것으로 확인되었다 (p < 0.05).

2차 평가지수

시간 V2에서, 검출된 FMBS의 기저값은 A 그룹이 46.7 ± 8.7 이고, B 그룹이 49.2 ± 6.2 이었다 (p > 0.05). 제1주 치료시 (V3), 측정된 FMBS는 A 그룹이 12.7 ± 4.2 이고, B 그룹이 18.5 ± 5.9 인 것으로 확인되었다 (p < 0.05). 마지막으로, 제2주 치료시 (V4), FMBS는 A 그룹이 13.1 ± 3.2 이고,B 그룹이 19.8 ± 4.9 인 것으로 확인되었다 (p < 0.05).

상이한 실험 시간에 측정한 잇몸 지수에 대한 데이타는 다음과 같다: 기저값, 제1주 및 제2주 치료시의 데이타를 표 2에 나타낸다.

	A 그룹 (구강 세정제 G)	B 그룹 (구강 세정제 H)	P 값
V2에서의 잇몸 지수 (기저값)	2.85 ± 0.47	2.71 ± 0.51	p> 0.05
V3에서의 잇몸 지수 (제1주)	1.14 ± 0.55	1.75 ± 0.49	p<0.05
V4에서의 잇몸 지수 (제2주)	1.09 ± 0.44	1.96 ± 0.39	p<0.05

결론

실험 시간(V3)에서, 1차 FMPS 변수에 관하여 통계적으로 유의미한 차이값이 A 그룹과 B 그룹 사이에 확인된다. 2주간의 치료후 평균 FMPS 수준은 A 그룹에서 20% 미만을 유지하는 것으로 입증되었다. 이에 관하여, 상기 치료의 장점은 또한 FMBS에 관한 2차 지수 및 잇몸 지수에 관련하여 입증되었으며, 임상 변수들의 통계학적으로 유의미한 차이는 A 그룹에서 나타난다. 이는 치료를 받은 대상자들의 잇몸 조직 상에서 본 발명에 따른 구강관리 제품에 의해 유도된 유리한 효과들과 상관관계가 있음을 보여주는 증거이다.

Claims

클로르헥시딘과 나트륨 DNA를 포함하는 구강관리 제품.
제1항에 있어서,
구강 세정제, 치주용 겔 및 치약으로 이루어진 군에서 선택되는 것인 구강관리 제품.
제2항에 있어서,
상기 제품은 구강 세정제이고 클로르헥시딘의 양은 구강 세정제 총 부피에 대해 0.01 내지 0.30 중량%의 범위인 것인 구강관리 제품.
제2항 또는 3항에 있어서,
상기 제품은 구강 세정제이고 클로르헥시딘은 염 혹은 착염의 형태인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 구강 세정제이고 나트륨 DNA의 양은 구강 세정제 총 부피에 대해 0.01 내지 0.2 중량%의 범위인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 알칼리금속 혹은 알킬리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염을 포함하는 구강 세정제인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 아스코르빈산을 포함하는 구강 세정제인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체를 포함하는 구강 세정제인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 시트르산 3염기 나트륨을 포함하는 구강 세정제인 것인 구강관리 제품.
제2항 내지 9항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 제품은 구강 세정제 총 부피에 대하여 0.01 내지 0.30 중량%의 클로르헥시딘, 0.01 내지 0.2 중량%의 나트륨 DNA, 0.1 내지 0.5 중량%의 알칼리금속 혹은 알칼리토금속의 적어도 하나의 메타비설파이트 염, 0.1 내지 1.0 중량%의 아스코르빈산, 및 0.05 내지 1 중량%의 적어도 하나의 폴리비닐피롤리돈-비닐아세테이트 공중합체를 포함하는 구강 세정제인 것인 구강관리 제품.
제2항에 있어서,
상기 제품은 치주용 겔의 총 중량에 대하여 0.5 내지 1.0 중량%의 클로로헥시딘을 포함하는 치주용 겔인 것인 구강관리 제품.
제2항 또는 11항에 있어서,
상기 제품은 치주용 겔의 총 중량에 대하여 최대 0.3 중량%의 양으로 나트륨 DNA를 포함하는 치주용 겔인 것인 구강관리 제품.
제2항에 있어서,
상기 제품은 치약의 총 부피에 대하여 0.05 내지 0.2 중량%의 클로르헥시딘을 포함하는 치약인 것인 구강관리 제품.
제2항 또는 13항에 있어서,
상기 제품은 치약의 총 부피에 대하여 0.01 내지 0.05 중량%의 양으로 나트륨 DNA를 포함하는 치약인 것인 구강관리 제품.
제1항 내지 14항 중 어느 한 항에 있어서,
구강 점막 항자극제로서 사용하는 것인 구강관리 제품.
제1항 내지 14항 중 어느 한 항에 있어서,
구강 점막 치유제로서 사용하는 것인 구강관리 제품.
제1항 내지 14항 중 어느 한 항에 있어서,
치은염, 세균선 플라크 및 치주염으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 질병을 치료하는 방법에 사용하는 것인 구강관리 제품.
제1항 내지 14항 중 어느 한 항에 있어서,
치아-임플란트 점막염의 치료 방법에 사용하는 것인 구강관리 제품.
구강 점막의 질병을 치료하는 방법에 사용하는 나트륨 DNA로서,
상기 질병은 구강 점막의 세포 구조의 변형을 수반하는 것이며, 이 세포 구조의 변형은 공포화, 세포핵의 변성 및 세포간 공간의 확대로 이루어진 군에서 선택되는 것인 나트륨 DNA.
클로르헥시딘 치료를 받는 환자에서 클로르헥시딘의 부작용을 치료하는 방법에 사용하는 나트륨 DNA로서,
상기 부작용은 상기 환자의 구강 점막의 세포 구조의 변형을 수반하는 것이며, 이 세포 구조의 변형은 공포화, 세포핵의 변성 및 세포간 공간의 확대로 이루어진 군에서 선택되는 것인 나트륨 DNA.