KR20210149157A - 약산성 약물의 약제학적 조성물 및 투여 방법 - Google Patents

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KR20210149157A
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페이 칸
이 퐁 린
코 치에 첸
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파모사 바이오팜 인코포레이티드
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Abstract

본 발명은 리포솜을 함유하는 약제학적 조성물로서, 상기 리포솜은 외부 지질 이중층; 및 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물을 포함하는 내부 수성 매체를 포함하는, 약제학적 조성물에 관한 것이다. 또한 감소된 투여 빈도로 폐고혈압을 치료하기 위해 본 명세서에 개시된 약제학적 조성물을 사용하는 것을 제공한다.

Description

약산성 약물의 약제학적 조성물 및 투여 방법
관련 출원에 대한 상호참조
본 출원은 2019년 5월 14일자로 출원된, 미국 출원 제62/847,337호의 혜택을 주장하는 것으로, 이의 전체 개시내용은 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
분야
약제학적 조성물로서, 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물을 캡슐화화는 적어도 하나의 리포솜을 포함하거나/포함하고, 1 내지 100의 최대 대 최저 약물 혈장 농도 비율(P/T 비율)(즉, 더 평평한 혈장 프로파일)을 산출하도록 제형화되거나/제형화되고, 유리 약산성 약물의 효능에 비교하여 캡슐화된 약산성 약물의 효능을 증가시키는, 약제학적 조성물이 본 명세서에 개시된다.
폐고혈압(PH)은 안정 시 25mmHg를 초과하거나 운동 중 30mmHg를 초과하는 평균 폐동맥압(PAP)으로 정의되며, 점진적이고 지속적인 폐혈관 저항성 증가로 특징지어진다. 이는 결국에 우심실 기능상실을 유도하고 치료받지 않을 경우 생명을 위협하는 상태가 될 수 있다. 세계 보건 기구(WHO)는 병리생태학, 임상 증상 및 치료 옵션을 기준으로 PH를 5개의 군으로 나누었다[J Am Coll Cardiol. 2009; 54(1 Suppl):S43-54].
PH(WHO 제1군)는, 힘든 운동에 의해 악화되는, 숨가쁨, 어지럼증, 실신 및 다른 증상을 유도하는, 폐동맥, 폐정맥 또는 폐모세혈관의 혈압 증가로 특징지어지는 상태이다. PH는 현저히 감소된 운동 내성(exercise tolerance) 및 심장 기능상실을 수반하는 심각한 질환이다. 이것은 미국에서 500 내지 1000의 새로운 사례 발생률을 보이는 희귀질환이다. 치료받지 않은 PH 환자의 중앙 생존률은 진단 시기에서 2 내지 3년의 범위이며, 사망의 원인은 일반적으로 우심실 기능상실이다.
PH 치료를 위해 흡입 방식으로 치료제를 투여하는 것은, 표적 기관으로 치료제를 직접적으로 전달하여 폐 특이성을 향상시키고 전신성 부작용을 줄이는 것을 포함하는 많은 이점을 갖는다. 이는 또한 혈관확장 및 개선된 기체 교환으로 인해 환기/관류 균형을 개선할 수 있고 더 낮은 전체 투여량으로 표적 기관에 더 높은 약물 농도를 유도할 수 있다. 프로스타글란딘 및 이의 유도체와 같은, PH 치료를 위한 다수의 치료제가 FDA에 의해 승인되었다. 흡입형 프로스타글란딘의 결점은 투여 사이의 약물 혈장 수준의 변동이 크다는 것과 프로스타글란딘의 반감기가 짧다는 것이다. 이러한 결점은 약물을 자주 흡입(4시간마다 1회, 하루에 4 내지 6회)하는 것을 필요로 하며 전신성 부작용(예를 들어 두통, 메스꺼움, 홍조 및 어지럼증) 및 국소 자극(예를 들어 기침, 인후 자극, 인두 통증, 코피, 객혈 및 천명)을 증가시키고, 이는 결국 흡입형 프라스타글란딘의 불내증을 유도한다(NS Hill et al, Inhaled Therapies for Pulmonary Hypertension. Respir Care 2015 Jun;60(6):794-802).
따라서, 연장된 치료 효과 및/또는 향상된 효능을 제공하면서도 투여 빈도를 줄이는 PH에 대한 흡입 요법이 필요하다. 본 발명은 이러한 요구 및 다른 요구를 다룬다.
본 발명은 외부 매체에 현탁된 리포솜을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 리포솜은 (a) 적어도 하나의 소포-형성 인지질을 포함하는 외부 지질 이중층; 및 (b) 내부 수성 매체로서, 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물 및 내부 수성 매체와 외부 매체 사이에 pH 구배를 제공하는 염을 포함하는, 내부 수성 매체를 포함하고, 적어도 6시간마다 약제학적 조성물의 투여 후 약 1 내지 약 100의 최대 대 최저 약물 혈장 농도 비율(P/T 비율)을 생성하는, 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 폐고혈압 치료 방법으로서, 적어도 6시간마다 본 명세서에 기술된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법을 개시한다.
본 발명은 첨부된 도면 및 다음의 상세한 설명에 의해 보다 명확해질 것이다.
본 발명의 예시적인 실시형태는 다음의 도면을 참조하여 아래에 상세하게 설명된다.
도 1a 내지 도 1d는 리포솜 트레프로스티닐(liposomal treprostinil) 조성물을 서로 다른 빈도로 투여한 쥐에서 모의실험 및 측정된 트레프로스티닐 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다(도 1a는 8시간 BID, 도 1b는 10시간 BID, 도 1c는 12시간 BID 및 도 1d는 8시간 TID). 도 1e는 4시간마다 QID 투여한 쥐에서 유리 트레프로스티닐 용액의 모의실험 및 측정된 트레프로스티닐 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다.
도 2a 내지 도 2d는 리포솜 일로프로스트(liposomal iloprost) 조성물을 서로 다른 빈도로 투여한 쥐에서 모의실험 및 측정된 일로프로스트 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다(도 2a는 6시간 BID, 도 2b는 8시간 BID, 도 2c는 6시간 TID 및 도 2d는 8시간 TID). 도 2e는 2시간마다 하루 6회 투여한 쥐에서 유리 일로프로스트 용액의 모의실험 및 측정된 일로프로스트 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다.
도 3a 내지 도 3d는 리포솜 트레프로스티닐(Tyvaso) 조성물을 서로 다른 빈도로 투여한 사람에서 모의실험 및 측정된 트레프로스티닐 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다(도 3a는 8시간 BID, 도 3b는 10시간 BID, 도 3c는 12시간 BID 및 도 3d는 8시간 TID). 도 3e는 4시간마다 QID 투여한 사람에서 유리 Tyvaso 용액의 모의실험 및 측정된 트레프로스티닐 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다.
도 4a는 염수, 유리 트레프로스티닐 용액(TRE 용액) 또는 본 발명의 리포솜 트레프로스티닐 조성물(리포솜 TRE)을 투여한 PH 쥐에서 PAP의 감소를 나타내는 선 그래프이다. 도 4b는 유리 트레프로스티닐 용액 또는 리포솜 트레프로스티닐 조성물을 투여한 PH 쥐에서 트레프로스티닐 혈장 수준을 나타내는 선 그래프이다.
도 5a는 염수, 유리 일로프로스트 용액(ILO 용액) 또는 본 발명의 리포솜 일로프로스트 조성물(리포솜 ILO)을 투여한 PH 쥐에서 PAP의 감소를 나타내는 선 그래프이다. 도 5b는 유리 일로프로스트 용액 또는 리포솜 일로프로스트 조성물을 투여한 PH 쥐에서 일로프로스트 혈장 농도를 나타내는 선 그래프이다. (* 0.25시간에 2마리가 정량화의 하한(LLOQ) 아래의 약물 수준을 갖고 0으로 간주되는 5마리의 실험쥐로부터의 평균 혈장 농도).
본 명세서에 사용된 단수적 표현은 그 대상의 하나 이상의 것(즉, 적어도 하나)을 의미한다. 예를 들어, "요소"는 하나의 요소 또는 하나 초과의 요소를 의미한다.
모든 숫자는 용어 "약"으로 변형된다. 본 명세서에 사용된 용어 "약"은 특정된 값의 ±10%의 범위를 의미한다.
용어 "포함"은 일반적으로 하나 이상의 특징, 성분 또는 구성 요소의 존재를 허용하는 것을 의미하는 포함의 의미로 사용된다.
용어 "대상"은 폐고혈압을 갖는 척추동물 또는 폐고혈압에 대한 치료가 필요한 것으로 간주되는 척추동물을 의미할 수 있다. 대상은 온혈 동물, 예를 들어 포유동물, 예를 들어 영장류, 및, 보다 바람직하게는 인간을 포함한다. 비-인간 영장류 또한 대상이다. 용어 대상은 길들여진 동물, 예를 들어 고양이, 개 등, 가축(예를 들어, 소, 말, 돼지, 양, 염소 등) 및 실험 동물(예를 들어, 생쥐, 토끼, 쥐, 저빌, 기니피그 등)을 포함한다. 따라서, 수의학적 용도 및 의학적 제형이 본 명세서에서 고려된다.
용어 "치료"는 요법적 처치 및 예방적 조치 모두를 의미한다. 치료가 필요한 대상은 이미 PH가 있는 대상, 만성 폐색전증, 폐섬유증, 만성 폐색성 폐 질환(COPD)과 같은 상태로 인해 PH에 걸리기 쉬운 대상 또는 PH를 예방해야 하는 대상을 포함한다. 본 명세서에 기술된 약제학적 조성물의 적용 또는 투여는 PH, PH의 증상 또는 상태, PH에 의해 유도된 장애 또는 PH의 진행을 치료, 치유, 완화, 경감, 변경, 구제 또는 개선하거나 이에 영향을 미치는 것을 목표로 한다.
본 명세서에 사용된 용어 "캡슐화", "적재" 및 "포획"은 혼용될 수 있고, 리포솜의 내부 수성 매체에 생물학적 활성 물질(예를 들어, 일로프로스트)의 포함 및 연합을 의미한다.
본 명세서에 사용된 "실질적으로 없는"은 약제학적 조성물이 특정 물질을 5%, 4%, 3%, 2% 또는 1% 미만으로 함유하는 것을 의미한다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 특정 물질을 함유하지 않는다.
용어 "약물 효능"은 PAP 감소의 AUC(곡선하면적) ÷ 약물 혈장 농도의 AUC로 정의된다.
본 명세서에 사용된 약산성 약물은, 달리 명시되거나 문맥상 명백하지 않는 한, 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이의 양성자화 형태도 포함한다. 일 실시형태에서, 약산성 약물은 1분 내지 2시간, 1분 내지 1.5시간, 1분 내지 1시간, 10분 내지 2시간 또는 30분 내지 2시간의 반감기를 갖는다. 다른 실시형태에서, 약산성 약물은 1 내지 7 사이, 1 내지 6 사이, 2 내지 6 사이, 2 내지 6.9 사이, 2.5 내지 7 사이 또는 2.5 내지 6 사이의 pKa를 갖는다. 또 다른 실시형태에서, 약산성 약물은 프로스타글란딘이다. 표 1은 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물의 비제한적 예시를 보여준다.
Figure pct00001
일 실시형태에서, 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물은 프로드럭(prodrug)이 아니다. 다른 실시형태에서, 약산성 약물은 담체, 예를 들어 중합체, 하이드로겔 또는 잘 수화된 중합체 매트릭스가 실질적으로 없다. 임의의 특정 이론에 얽매이지 않고, 담체와 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산의 조합(예를 들어, 중합체와 트레프로스티닐)은 약물이 중합체로부터 방출되지 않고 폐에 축적되어 원치않는 부작용을 유발할 수 있기 때문에 흡입에 적합하지 않은 것으로 여겨진다. 또한 이러한 조합은 응고를 유발하므로 비경구 투여에 적합하지 않다.
본 발명은 더 평평한 혈장 프로파일을 갖는 조절 방출 약제학적 조성물로서, 외부 매체에 현탁된 리포솜을 포함하고, 상기 리포솜은 (a) 적어도 하나의 소포-형성 인지질을 포함하는 외부 지질 이중층; 및 (b) 내부 수성 매체로서, 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물 및 내부 수성 매체와 외부 매체 사이에 pH 구배를 제공하는 약산성 염을 포함하는, 내부 수성 매체를 포함하고, 적어도 6시간마다 약제학적 조성물 투여 후, 약 1 내지 약 100의 P/T 비율을 생성하는, 약제학적 조성물을 제공한다.
본 명세서에 사용된 용어 "P/T 비율"은 적어도 2회의 투여 사이의 약산성 약물의 최대 혈장 수준(예를 들어, 가장 높은 안정 상태 혈장 농도) 및 적어도 2회의 투여 사이의 약산성 약물의 최저 혈장 수준(예를 들어, 가장 낮은 안정 상태 혈장 농도) 사이의 비율을 의미하도록 의도된다. 더 좁은 P/T 비율, 예를 들어 100, 90, 80, 70, 60, 50 및 40 미만 및 더 평평한 혈장 프로파일은 적어도 6시간 동안 치료 효과를 유지하며 약산성 약물의 투여 빈도를 줄인다.
약제학적 조성물의 P/T 비율은 적어도 6시간마다의 투여 빈도로 100 미만, 약 10 내지 100, 10 내지 95, 10 내지 90, 10 내지 85, 10 내지 80, 10 내지 75, 10 내지 70, 10 내지 65, 10 내지 60, 10 내지 55, 10 내지 50, 5 내지 100, 5 내지 95, 5 내지 90, 5 내지 85, 5 내지 80, 5 내지 75, 5 내지 70, 5 내지 65, 5 내지 60, 5 내지 55, 5 내지 50, 2 내지 100, 2 내지 95, 2 내지 90, 2 내지 85, 2 내지 80, 2 내지 75, 2 내지 70, 2 내지 65, 2 내지 60, 2 내지 55, 2 내지 50, 1 내지 100, 1 내지 95, 1 내지 90, 1 내지 85, 1 내지 80, 1 내지 75, 1 내지 70, 1 내지 65, 1 내지 60, 1 내지 55, 1 내지 50, 1 내지 45, 1 내지 40, 1 내지 39, 1 내지 38, 1 내지 37, 1 내지 36, 1 내지 35, 1 내지 34, 1 내지 33, 1 내지 32, 1 내지 31, 1 내지 30, 1 내지 29, 1 내지 28, 1 내지 27, 1 내지 26, 1 내지 25, 1 내지 24, 1 내지 23, 1 내지 22, 1 내지 21, 1 내지 20 또는 그 사이의 임의의 범위(예를 들어, 5 내지 40)이고 상응하는 유리 약물(예를 들어, 트레프로스티닐 및 일로프로스트)인 경우의 P/T 비율은 매 6시간보다 적은 투여 빈도로 100 초과이다.
예시적인 실시형태에서, 약제학적 조성물에 캡슐화된 일로프로스트의 P/T 비율은 6, 8, 10 또는 12시간마다의 투여 요법으로 약 5 내지 약 40이다. 다른 예시적인 실시형태에서, 약제학적 조성물에 캡슐화된 트레프로스티닐의 P/T 비율은 6, 8, 10 또는 12시간마다의 투여 요법으로 약 1 내지 약 20이다.
청구된 P/T 비율을 갖는 본 발명의 약제학적 조성물은 다음의 특징을 갖는다:
PAP 감소를 증가시키고 약산성 약물의 효능을 향상시킨다. 약제학적 조성물의 효능은 유리 약산성 약물의 효능보다 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15배 더 높다. 임의의 특정 이론에 얽매이지 않고, 약산성 약물(예를 들어, 프로스타사이클린 및/또는 이의 유사체)의 초기 스파이크 혈장 수준 및/또는 높은 P/T 비율은, 다른 프로스타노이드 수용체 하위유형의 활성화를 통해, 혈관 수축 및 혈관 확장을 매개하는 것으로 여겨진다. 따라서, 높은 P/T 비율을 갖는 약산성 약물은 혈장 내 더 높은 최대 약물 농도를 유도하며, 그러므로 폐혈관계를 수축시키는 혈관 수축 수용체(예를 들어 DP1, IP, EP2 및 EP4)의 활성화로 인해 PAP 감소가 줄어든다. 반면에, 더 낮은 P/T 비율(예를 들어, 100 미만)을 갖는 약산성 약물은 약물 혈장 농도의 초기 스파이크를 피하며(즉, 더 평평한 혈장 프로파일), 그러므로, 폐혈관계를 확장하는 혈관 확장 수용체(예를 들어 EP3, EP1 및 FP) 만의 활성화로 인해 PAP 감소가 더 커지고 약물 효능이 증가한다.
약산성 약물의 치료 효과는 약제학적 조성물의 단일 투여 후 적어도 6시간 동안 유지되며, 그러므로 투여 빈도가 감소(즉, 하루 1 내지 3회)하며 부작용이 감소한다.
예시적인 실시형태에서, 트레프로스티닐의 치료 효과는 6 내지 12시간 동안 유지된다. 다른 예시적인 실시형태에서, 일로프로스트의 치료 효과는 적어도 6시간 동안 유지된다.
약제학적 조성물의 더 높은 약물 농도(예를 들어, 1.0㎎/㎖을 초과하는 프로스타사이클린 또는 이의 유사체)는, 약물 혈장 농도의 초기 스파이크를 유도하지 않으면서, 유리 약물인 경우(분당 0.18㎎ 트레프로스티닐)에 비교하여 더 높은 양의 약물이 주어진 시간 내에 전달(예를 들어, 분당 0.45㎎의 트레프로스티닐이 전달될 수 있음)되는 것을 가능하게 한다.
본 발명은 또한 치료적 유효량의 본 명세서에 기술된 약제학적 조성물을 투여하여 PH를 치료하는 방법을 제공한다.
본 명세서에 사용된 "치료적 유효량"은 PH를 갖는 대상에 치료 효과를 제공하는 약산성 약물의 양을 의미하며 다양한 요인, 예를 들어 투여 경로 및 빈도, 체중 및 연령에 따라 달라질 수 있다. 이 분야의 기술자는 본 명세서의 개시내용, 확립된 방법 및 자신의 경험을 기반으로 각각의 경우에 투여량을 결정할 수 있다. 용어 "치료 효과"는 기준선으로부터 적어도 20%의 PAP 감소를 의미한다.
본 명세서에 기술된 약제학적 조성물은 경구로, 흡입으로, 주사로(예를 들어, 동맥내, 정맥내, 복강내, 피하, 유리체내, 척추강내, 관절내, 근육내, 다른 인체 공동 내) 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 흡입은 계량 흡입기, 건조 분말 흡입기, 네뷸라이저, 소프트 미스트 흡입기 또는 에어로졸 분산(비강내 및 폐 투여 포함)을 통해 투여된다.
일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 하루 1 내지 3회 투여될 수 있다. 다른 실시형태에서, 약제학적 조성물의 투여 빈도는 약 6시간마다, 6.5시간마다, 7시간마다, 7.5시간마다, 8시간마다, 8.5시간마다, 9시간마다, 9.5시간마다, 10시간마다, 10.5시간마다, 11시간마다, 11.5시간마다, 12시간마다 또는 이들의 일부 혼합일 수 있다.
일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 PH 치료를 위한 다른 치료제와 함께 투여된다. PH 치료를 위한 치료제의 비제한적 예시에는 PDE-5 저해제, 칼슘 채널 차단제, 엔도텔린 수용체 길항제, 구아닐산 시클라제 자극제, 항-응고제 또는 이들의 조합물이 포함된다.
리포솜 성분
본 명세서에 사용된 용어 "리포솜"은 내부 수성 매체를 둘러싸는 하나 이상의 지질 이중층으로 만들어진 미세 소포 또는 입자를 의미한다. 리포솜을 형성하기 위해, 지질 이중층을 형성하거나 여기에 통합될 수 있는 양친매성 지질인, "소포-형성 지질"의 존재가 필요하다. 임의의 적합한 소포-형성 지질이 리포솜을 구성하는 지질 이중층을 형성하기 위해 사용될 수 있다. 소포-형성 지질은 포스파티딜콜린(PC), 포스파티딜글리세롤(PG), 포스파티딜이노시톨(PI), 포스파티딘산(PA), 포스파티딜에탄올아민(PE) 또는 포스파티딜세린(PS)과 같은 인지질 및 하전된 지질, 예를 들어 양전하를 띠는 지질 또는 음전하를 띠는 지질을 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
리포솜의 지질 이중층은 또한 스테롤을 포함(예를 들어, 0 내지 14.99몰%)하고, 상기 스테롤은 콜레스테롤, 콜레스테롤 헥사석신산염, 에르고스테롤, 라노스테롤 및 이들의 임의의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것이지만, 이들로 제한되지 않는다. 예시적인 실시형태에서, 스테롤은 콜레스테롤이다.
일부 실시형태에서, 소포-형성 지질은 제1 인지질과 제2 인지질의 혼합물이다. 특정 실시형태에서, 제1 인지질은, 수소화 달걀 포스파티딜콜린(HEPC), 수소화 콩 포스파티딜콜린(HSPC), 다이팔미토일 포스파티딜콜린(DPPC), 다이스테아릴오일 포스파티딜콜린(DSPC), 다이아라키도일 포스파티딜콜린, 다이미리스토일 포스파티딜콜린(DMPC), 달걀 포스파티딜콜린(EPC), 콩 포스파티딜콜린(SPC), 올레오일 팔미토일 포스파티딜콜린, 다이올레오일 포스파티딜콜린(DOPC), 다이페트로셀리노일 포스파티딜콜린, 팔미토일엘라이도일 포스파티딜콜린, 팔미토일올레오일 포스파티딜콜린, 다이라우로일 포스파티딜콜린(DLPC), 다이운데카노일 포스파티딜콜린, 다이데카노일 포스파티딜콜린, 다이노나노일 포스파티딜콜린 및 이들의 임의의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된, 포스파티딜콜린(PC)이다. 다른 실시형태에서, 제2 인지질은, 약 500 내지 약 10,000달톤의 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜을 함유하는, 폴리에틸렌 글리콜 변형 인지질, 예를 들어 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민-N-[메톡시(폴리에틸렌 글리콜)-2000](DSPE-PEG2000), 음전하를 띤 인지질, 예를 들어 다이스테아릴오일 포스파티딜글리세롤(DSPG), 다이팔미토일포스파티딜글리세롤(DPPG) 또는 다이미리스토일포스파티딜글리세롤(DMPG) 또는 다이올레오일 포스파티딜글리세롤(DOPG)이다. 예시적인 실시형태에서, 제1 인지질:콜레스테롤:제2 인지질의 몰퍼센트는 75 내지 99:0 내지 14.9:0.1 내지 25이다.
다른 실시형태에서, 소포-형성 지질은 제1 인지질과 하전된 지질의 혼합물이다. 예시적인 실시형태에서, 소포-형성 지질은 제1 인지질, 제2 인지질 및 하전된 지질의 혼합물이다. 하전된 지질은 스테아릴아민, 1,2-다이올레오일-3-트라이메틸암모늄-프로판(DOTAP), 3ß-[N-(N',N'-다이메틸아미노에탄)-카바모일]콜레스테롤(DC-콜레스테롤), N4-콜레스테릴-스퍼민(GL67), 다이메틸다이옥타데실암모늄(DDAB), 1,2-다이-O-옥타데세닐-3-트라이메틸암모늄 프로판(DOTMA), 에틸포스포콜린(에틸 PC) 또는 이들의 조합물을 포함한다. 다른 예시적인 실시형태에서, 제1 인지질:콜레스테롤:하전된 지질의 몰퍼센트는 75 내지 99:0 내지 14.9:0.1 내지 25이다.
실시형태에서, 지질 이중층의 HSPC, 콜레스테롤 및 DSPG의 몰%는 75 내지 99:0 내지 14.9:0.1 내지 25이다. 다른 실시형태에서, 지질 이중층의 HSPC, 콜레스테롤 및 DSPE-PEG2000의 몰%는 75 내지 99:0 내지 14.9:0.1 내지 25이다.
일 실시형태에서, 리포솜의 외부 지질 이중층은, 비-이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제 또는 양쪽이온성 계면활성제일 수 있는, 계면활성제를 더 포함한다. 비-이온성 계면활성제는 형식적으로 헤드에 하전된 기가 없다. 양이온성 계면활성제는 헤드에 순양전하를 갖는다. 양쪽이온 계면활성제는 전기적으로 중성이지만 서로 다른 원자 상에 형식적인 양전하 및 음전하를 갖는다.
비-이온성 계면활성제의 비제한적 예시에는 비-이온성 수용성 모노-, 다이- 및 트라이-글리세라이드; 폴리에틸렌 글리콜의 비-이온성 수용성 모노- 및 다이-지방산 에스터; 비-이온성 수용성 솔비탄 지방산 에스터(예를 들어 TWEEN 20(폴리옥시에틸렌 20 솔비탄 모노올레산염), SPAN 80과 같은 솔비탄 모노올레산염); 비-이온성 수용성 트라이블록 공중합체(예를 들어, POLOXAMER 406(PLURONIC F-127)과 같은 폴리(에틸렌옥사이드)/폴리(프로필렌옥사이드)/폴리(에틸렌옥사이드) 트라이블록 공중합체) 또는 이들의 유도체가 포함된다.
양이온성 계면활성제의 비제한적 예시에는 다이메틸다이알킬암모늄 브롬화물 또는 도데실트라이메틸암모늄 브롬화물이 포함된다.
양쪽이온성 계면활성제의 비제한적 예시에는 3-(N,N-다이메틸 팔미틸암모니오)-프로판설폰산염이 포함된다.
현탁액 내 리포솜은 크기 감소에 대한 영향을 받는다. 리포솜의 크기는 전형적으로 직경을 의미한다. 리포솜 크기 감소는 잘 알려지고 이 분야의 기술자에 의해 수행될 수 있는 다수의 방법, 예를 들어, 압출, 음파처리, 균질화 기술 또는 밀링 기술로 달성될 수 있다. 압출은 리포솜을 정해진 공극 크기를 갖는 필터에, 1회 이상, 압력 하에서, 통과시키는 것을 포함한다. 필터는 일반적으로 폴리카보네이트로 만들어지지만, 리포솜과 상호작용하지 않고 충분한 압력 하에서의 압출이 가능하도록 충분히 강한 임의의 내구성이 있는 물질로 만들어질 수도 있다. 리포솜의 크기는, 더 작은 리포솜으로 자발적으로 재형성하도록 리포솜을 부수거나 전단하기 위해 음파 에너지를 사용하는, 음파처리로 줄일 수 있다. 예를 들어, 음파처리는 리포솜 현탁액을 함유하는 유리관을 수조-형 음파처리기에 생성된 음파 진원지에 담그는 방식으로 수행될 수 있고, 리포솜 현탁액과 직접 접촉한 상태에서 티타늄 탐침의 진동에 의해 음파 에너지가 생성되는 탐침 유형의 음파처리기가 사용될 수 있다. 본 발명에서, 리포솜은 일반적으로 약 50㎚ 내지 500㎚, 예를 들어 약 500㎚ 이하, 약 400㎚ 이하, 약 300㎚ 이하, 약 200㎚ 이하 또는 약 100㎚ 이하의 직경을 갖는다.
크기 조정 후, 내부 수성 매체 및 외부 매체 사이에 pH 구배를 제공하기 위해 외부 매체의 약산성 염의 농도가 조정되며, 이는 다수의 방법, 예를 들어 다이아필트레이션, 투석, 한외여과 또는 접선유동여과와 같은 방법을 사용하여, 시트르산 완충제(H3C6H5O) 및 인산 완충제(H3PO4)와 같은 약산성 염이 결핍된 적합한 완충제로, 외부 매체를 교환하는 방법으로 수행될 수 있다.
약산성 염은 외부 매체 및 리포솜의 내부 수성 매체 사이에 더 낮은 외측 및 더 높은 내측 pH 구배를 제공한다. 일 실시형태에서, 외부 매체의 pH는 약산성 약물의 pKa보다 적어도 0.1 단위, 0.5 단위 또는 1 단위 더 높다. 또 다른 실시형태에서, 내부 수성 매체의 pH는 약 7, 8, 9 또는 10이고 외부 매체의 pH는 7 미만, 6 미만, 5 미만, 4 미만, 3 미만, 약 3 내지 7, 약 3.5 내지 6.5 또는 약 4 내지 6이다.
약산성 염의 비제한적 예시에는 카복실산염 및 중탄산염이 포함된다.
본 명세서에 사용된 "중탄산염"은 중탄산염 음이온 및 양이온 성분을 포함하는 약학적으로 허용가능한 염 화합물을 의미한다. 일 실시형태에서, 염 화합물의 양이온성 성분은 금속이다. 금속의 비제한적 예시에는 IA군 또는 IIA군의 금속, 예를 들어 칼륨(K), 나트륨(Na), 칼슘(Ca), 마그네슘(Mg), 세슘(Cs) 및 리튬(Li), 또는 IA군 또는 IIA군의 금속과 다른 금속, 예를 들어 철(Fe) 및 니켈(Ni)이 포함된다. 중탄산염의 예시에는 중탄산칼륨, 중탄산나트륨, 중탄산칼슘, 중탄산마그네슘, 중탄산세슘, 중탄산리튬, 중탄산니켈, 중탄산철 또는 이들의 임의의 조합물이 포함되지만 이들로 제한되지 않는다.
본 명세서에 사용된 "카복실산염"은 포름산염, 아세트산염, 프로피온산염, 부티르산염, 아이소부티르산염, 발레르산염, 아이소발레르산염 또는 이들의 조합물을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 일 예시적 실시형태에서, 아세트산염은 아세트산나트륨, 아세트산칼슘 또는 이들의 조합물이다.
중탄산염 또는 카복실산염의 농도는 50mM 이상, 100mM 이상, 150mM 이상, 200mM 이상, 250mM 이상, 300mM 이상, 350mM 이상, 400mM 이상, 450mM 이상, 500mM 이상, 600mM 이상, 700mM 이상, 800mM 이상, 900mM 이상, 1000mM 미만, 50mM 내지 1000mM 미만, 50mM 내지 800mM, 200mM 내지 1000mM 미만, 200mM 내지 800mM, 또는 200mM 내지 600mM, 250mM 내지 1000mM 미만, 250mM 내지 800mM, 또는 250mM 내지 600mM, 300mM 내지 600mM이다.
제조된 리포솜은 약산성 약물을 적재하고 대상에 투여하기 전의 상당한 기간 동안 보관될 수 있다. 예를 들어, 리포솜은 약산성 약물을 적재하기 전의 상당한 기간 동안 냉장 조건에서 보관될 수 있다. 대안적으로, 리포솜은 탈수화, 보관 및 후속적으로 재수화되고 투여하기 전에 약산성 약물이 적재될 수 있다. 리포솜은 약산성 약물이 적재된 후에 탈수화될 수도 있다. 탈수화는 이 분야에 알려져 있고 이용가능한 다수의 방법으로 수행할 수 있다. 일부 실시형태에서, 리포솜은 표준 동결-건조 장치, 즉 저압 조건의 탈수화를 사용하여 탈수화할 수 있다. 또한, 리포솜은 예를 들어 액체 질소를 사용하여 동결할 수 있다. 탈수화 중 리포솜의 안정성 및 완전성을 확보하기 위해, 탈수화 전에, 당류가 리포솜 환경에, 예를 들어 리포솜을 함유하는 완충액에, 첨가될 수 있다. 당류의 예시에는 말토오스, 락토오스, 수크로오스, 트레할로오스, 덱스트로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 또는 이들의 조합물이 포함되지만 이들로 제한되지 않는다.
본 개시내용은 다음 실시예에서 추가로 설명될 것이다. 하지만, 다음의 실시예는 온전히 예시의 목적으로 의도된 것으로 이해되어야 하며 본 개시내용을 실제적으로 제한하는 것으로 해석되어서는 안될 것이다.
실시예
리포솜 트레프로스티닐 조성물
다음과 같이 에탄올 주입 기술을 사용하여 리포솜 콜로이드 현탁액을 제조하였다.
제1 인지질(즉, HSPC), 콜레스테롤 및 제2 인지질(즉, DSPG)을 3:2:0.075의 분자비로 포함하는 모든 지질 성분을 약 60℃에서 2.86㎖의 에탄올 용액에 용해하였다. 이후 생성된 지질 용액을 17.14㎖ 중탄산나트륨 용액(400mM; pH 8.5)에 주입하고 리포솜을 수화하기 위해 60℃에서 강하게 교반하여 혼합한 다음, 특정 공극 크기(각각 200 및/또는 100㎚)를 갖는 폴리카보네이트 막을 통해 6 내지 10회 압출하였다. 100㎚ 내지 140㎚의 평균 입자 크기 및 0.2 미만의 다분산도(PdI)를 갖는 리포솜의 현탁액을 얻었다. 리포솜의 내부 수성 코어와 외부 매체 사이의 막횡단 pH 구배(즉, 더 높은 내부 및 더 낮은 외부 pH 구배)를 형성하기 위해 리포솜 현탁액을 50mM 시트르산나트륨 완충액(pH 5.5)에 대한 접선유동여과 시스템으로 투석하고 약물 적재 전까지 4℃에 보관하였다.
트레프로스티닐(Cayman Chemical(미국 소재)에서 상업적으로 입수 가능함)을 50mM 시트르산나트륨 수성 용액에 용해하고, 1.5㎎/㎖ 대 10mM의 약물 대 인지질 비율로 상기 단락의 리포솜 현탁액에 첨가하고, 30분 동안 40℃에서 인큐베이션하였다. 생성된 산물을 시트르산나트륨 완충액(pH 5.5)으로 조정하여 외부 매체의 pH가 5.5이고 8.59㎎/㎖의 인지질 농도를 갖는 리포솜 트레프로스티닐 조성물을 얻었다.
리포솜 일로프로스트 조성물
다음과 같이 에탄올 주입 기술을 사용하여 리포솜 콜로이드 현탁액을 제조하였다.
제1 인지질(즉, HSPC) 및 제2 인지질(즉, DSPE-PEG2000)을 98:2의 분자비로 포함하는 모든 지질 성분을 약 60℃에서 2.86㎖의 에탄올 용액에 용해하였다. 이후 생성된 지질 용액을 사이클로덱스트린(즉, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(90mM))을 함유하는 17.14㎖ 중탄산나트륨 용액(200mM; pH 8.5)에 주입하고 리포솜을 수화하기 위해 60℃에서 강하게 교반하여 혼합한 다음, 특정 공극 크기(각각 200 및/또는 100㎚)를 갖는 폴리카보네이트 막을 통해 6 내지 10회 압출하였다. 100㎚ 내지 140㎚의 평균 입자 크기 및 0.02 미만의 다분산도(PdI)를 갖는 리포솜의 현탁액을 얻었다. 리포솜의 내부 수성 코어와 외부 매체 사이의 막횡단 pH 구배(즉, 더 높은 내부 및 더 낮은 외부 pH 구배)를 형성하기 위해 리포솜 현탁액을 10mM 시트르산나트륨 완충액(pH 5.5)에 대한 접선유동여과 시스템으로 투석하고 약물 적재 전까지 4℃에 보관하였다.
일로프로스트(Cayman Chemical(미국 소재)에서 상업적으로 입수 가능함)을 50mM 시트르산나트륨 수성 용액에 용해하고, 0.25㎎/㎖ 대 10mM의 약물 대 인지질 비율로 상기 단락의 리포솜 현탁액에 첨가하고 30분 동안 40℃에서 인큐베이션하였다. 생성된 산물을 시트르산나트륨 완충액(pH 5.5)으로 조정하여 외부 매체의 pH가 5.5이고 8.59㎎/㎖의 인지질 농도를 갖는 리포솜 일로프로스트 조성물을 얻었다.
유리 트레프로스티닐 용액 제조
6.52㎎/㎖의 염화나트륨, 6.31㎎/㎖의 시트르산나트륨 및 0.2㎎/㎖의 수산화나트륨을 함유하는 10㎖ 용액에 0.6㎎ 트레프로스티닐을 용해하여 유리 트레프로스티닐 용액을 제조하였다. 1N 염산을 사용하여 용액의 pH를 6.0 내지 7.2로 조정하였다.
유리 일로프로스트 용액 제조
1.62㎎/㎖의 에탄올, 0.242㎎/㎖의 트로메타민 및 9.0㎎/㎖의 염화나트륨을 함유하는 10㎖ 용액에 0.02㎎ 일로프로스트를 용해하여 유리 일로프로스트 용액을 제조하였다.
트레프로스티닐 농도 분석 방법
리포솜 트레프로스티닐 조성물 또는 유리 트레프로스티닐 용액의 트레프로스티닐 농도 분석은 PDA 검출기가 구비된 Waters HPLC 시스템을 사용하여 수행하였다. 1.0㎖/분의 유속으로 50:50 부피비의 아세토니트릴 및 인산 완충액(pH 2.5)의 혼합물을 이동상으로 사용하는 HPLC 시스템에 20㎕ 시료 용액의 분액을 직접 주입하였다. 45℃에서, 4.6㎜×7.5㎝, 3.5㎛의 C18 칼럼에서 분리를 수행하고 220㎚에서 피크를 검출하였다.
일로프로스트 농도 분석 방법
리포솜 일로프로스트 조성물 또는 유리 일로프로스트 용액의 일로프로스트 농도 분석은 PDA 검출기가 구비된 Waters HPLC 시스템을 사용하여 수행하였다. 1.0㎖/분의 유속으로 36:17:47 부피비의 아세토니트릴, 메탄올 및 인산 완충액(pH 2.5)의 혼합물을 이동상으로 사용하는 HPLC 시스템에 30㎕의 시료 용액의 분액을 직접 주입하였다. 25℃에서, 3.9㎜×15.0㎝, 5.0㎛에서 분리를 수행하고 205㎚에서 피크를 검출하였다.
쥐에서 약동학적(PK) 프로파일 측정
고압 시린지(PennCentury)가 부착된 마이크로스프레이 에어로졸 장치(MicroSprayer, PennCentury, 펜실베이니아주 필라델피아 소재)로 연구 동물에 시험 물품(트레프로스티닐 또는 일로프로스트를 포함하는 리포솜 조성물, 유리 트레프로스티닐 용액 또는 일로프로스트 용액)을 투여하였다. 각 Sprague Dawley 쥐(250g 초과)를 아이소플루란으로 마취하고 윗니로 45° 내지 50° 각도로 단단히 고정하였다. 마이크로스프레이 에어로졸 팁을 기관 분기점에 삽입하고 0.5㎖/㎏의 시험 물품을 투여하였다.
각각의 사전결정된 시점에서, 쥐의 혈액 시료를 젖은 얼음 위에 올린 헤파린-함유 튜브에 수집하였다. 이후 수집 1시간 내에 혈액 시료를 약 2500×g로 15분 동안 4±2℃에서 원심분리하여 혈액 세포로부터 혈장을 분리하였다. 약 0.1㎖의 혈장 시료를 새로운 보관 튜브에 담아 -70±2℃에 보관하였다.
50㎕의 혈장 시료와 150㎕의 아세토니트릴을 혼합하고 혼합물을 1분 동안 볼텍스하여 트레프로스티닐에 혈장 단백질이 결합하는 것을 방해하고, 5분 동안 3000rpm으로 원심분리하여 혈장 트레프로스티닐 농도를 측정하였다. 상등액(150㎕)을 동부피의 H2O와 혼합하고 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석(LC-MS/MS)을 수행하였다(표 2).
30㎕의 혈장 시료와 3㎖ 메틸 3차-부틸 에테르를 혼합하고 1분 동안 볼텍스-혼합하여 혈장 일로프로스트 농도를 측정하였다. 이후 1㎖의 포름산 용액(2%)을 첨가하고 생성된 혼합물을 2분 동안 볼텍스하여 일로프로스트에 혈장 단백질이 결합하는 것을 방해하고, 5분 동안 3000rpm으로 원심분리하였다. 상등액(150㎕)을 깨끗한 튜브로 옮기고, N2 스트림 하에서 15분 동안 35℃로 증발시켜 건조하고, 200㎕의 H2O와 혼합하고 LC-MS/MS 분석을 수행하였다(표 2).
Figure pct00002
건강한 사람에서 약동학적(PK) 프로파일 측정
마이크로 네뷸라이저(Philips Health Care, 영국 치체스터 소재)를 사용하여 리포솜 트레프로스티닐 조성물을 건강한 인간 대상(방출 용량 51㎍; n=6)에 투여하였다. 흡입 후 사전결정된 시점에 트레프로스티닐 혈장 농도를 평가하였다. 액체/액체 추출을 통해 트레프로스티닐을 분리하고, 상등액을 질소 스트림 하에서 증발시키고 남은 잔여물을 복원하였다. UPLC 및 MS/MS 검출을 통해 최종 추출물을 분석하였다(표 3).
Figure pct00003
의식있는 급성 PH 쥐 모델에서 약동학(PK) 및 약력학(PD) 평가
쥐에서 급성 PH의 유도
본 연구를 위해 약 300 내지 350g의 수컷 Sprague Dawley 쥐를 사용하였다. 압력을 측정하기 위해 압력 카테터의 한쪽 끝을 쥐의 폐동맥(PA)에 삽입하였다. 카테터의 다른 쪽 끝을 목덜미에 노출시키고 압력 변환기에 연결하였다. 다음날, 쥐를 저산소 챔버로 옮겼다(산소 수준은 10%/FiO2=0.1이었음). 지속적으로 PH를 유도하기 위해, 쥐를 저산소 챔버에 밤새 놓아두었다. PH가 설정되면, 마이크로스프레이를 사용하여 시험 물품을 기관 분기점 바로 위에 전달하였다. 30초 동안 연속적으로 PAP를 측정(평균 PAP를 계산하기 위함)하고 각각의 사전결정된 시점에 혈액 시료를 수집하였다.
시뮬레이션 혈장 프로파일
특정 기간 후(즉, 흡입 8, 10 및 12시간 후) 쥐 또는 인간에서 측정된 약물 혈장 수준을 기반으로 하는 선형 내부 방법을 사용하여 시뮬레이션 혈장 프로파일을 전산 처리하였다.
실시예 1: 건강한 쥐의 트레프로스티닐 혈장 수준에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 효과
도 1a 내지 도 1d는 서로 다른 투여 빈도로 쥐에 리포솜 트레프로스티닐 조성물을 투여하고 측정 및 시뮬레이션한 PK 프로파일을 보여준다. 트레프로스티닐 혈장 수준은 8시간 까지 2.0 내지 3.0ng/㎖ 사이였고 48㎍/㎏ 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 기관-내 투여 12시간 후 0.3ng/㎖로 감소하였다(도 1a 내지 도 1d에서의 측정 데이터 참조). 따라서, 본 발명의 리포솜 트레프로스티닐 조성물은 트레프로스티닐의 치료적 혈장 수준을 유지하면서 하루 2회(BID, 8, 10 또는 12시간마다) 또는 하루 3회(TID, 8시간마다)(도 1a 내지 도 1d의 시뮬레이션 프로파일 참조) 전달될 수 있다.
도 1e는 유리 트레프로스티닐 용액을 4시간마다 QID 투여(12㎍/㎏으로 투여)하고 측정 및 시뮬레이션한 PK 프로파일을 보여준다. 혈장 농도는 트레프로스티닐 흡입 1시간 내에 훨씬 더 높은 피크(8.0ng/㎖)에 도달하였고(Tmax = 0.083시간) 트레프로스티닐 흡입 4시간 내에 정량화 하한(25pg/㎖의 LLOQ) 아래로 떨어졌다(도 1e의 측정 데이터). 이러한 PK 프로파일은 4시간마다 하루 4회(QID)인, 흡입 Tyvaso(트레프로스티닐)의 처방 정보에 나열된 투여 일정을 따른다(도 1e의 시뮬레이션 프로파일).
리포솜 트레프로스티닐 조성물의 BID 또는 TID 투여 일정은 유리 트레프로스티닐 용액의 QID 투여 일정인 경우(P/T 비율 = 121)와 비교하여 더 평평한 혈장 프로파일 및 더 낮은 P/T 비율(10 미만)을 유도한다(표 4 참조).
Figure pct00004
실시예 2: 건강한 쥐의 일로프로스트 혈장 수준에서 리포솜 일로프로스트 조성물의 효과
리포솜 일로프로스트 조성물의 기관-내 투여(60㎍/㎏) 후, 일로프로스트 혈장 농도는 투여 5분 내에 피크 Cmax(8.10ng/㎖)에 도달했고 투여 8시간 후 0.32ng/㎖ 및 투여 12시간 후 0.17ng/㎖로 점차 감소하였다(도 2a 내지 도 2d, 측정 데이터). 따라서, 리포솜 일로프로스트 조성물은 일로프로스트의 치료적 혈장 수준을 유지하면서 하루 2회(BID, 6 내지 8시간마다) 또는 하루 3회(TID, 6 내지 8시간마다)(도 2a 내지 도 2d의 시뮬레이션 프로파일 참조) 전달될 수 있다.
유리 일로프로스트 용액의 쥐 PK 프로파일(60㎍/㎏ 투여)은 0.083시간(Tmax)에 더 높은 최대 혈장 농도(32ng/㎖)에 도달하는 것을 보여주며, 이는 리포솜 일로프로스트 조성물의 것과 유사하지만 Cmax는 리포솜 일로프로스트 조성물의 약 4배이다. 일로프로스트 혈장 농도는 투여 후 1시간 내에 LLOQ(100pg/㎖) 아래로 떨어졌다(도 2e, 측정 데이터). 이러한 PK 프로파일은 2시간마다 하루 6 내지 9회(QID)인, 흡입 Ventavis(일로프로스트)의 처방 정보에 나열된 투여 일정을 따른다(도 2e, 시뮬레이션 프로파일).
리포솜 일로프로스트 조성물의 BID 또는 TID 투여 일정은 2시간마다 투여된 유리 일로프로스트 용액의 것과 비교하여 더 평평한 혈장 프로파일을 유도한다(표 5 참조).
Figure pct00005
실시예 3: 건강한 사람의 트레프로스티닐 혈장 수준에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 효과.
흡입된 리포솜 트레프로스티닐 조성물(102㎍ 방출 용량)의 인간 PK 프로파일은 혈장 트레프로스티닐 농도가 투여 8시간 후 0.12 내지 0.26ng/㎖ 사이를 유지하며, 투여 12시간 후 0.02ng/㎖로 점차 감소함을 보여준다(도 3a 내지 도 3d, 측정 데이터). 따라서, 본 발명의 리포솜 조성물은 트레프로스티닐의 치료적 혈장 수준을 유지하면서 하루 2회(BID, 8, 10 및 12시간마다) 또는 하루 3회(TID, 8시간마다)(도 3a 내지 도 3d, 시뮬레이션 프로파일) 투여될 수 있다.
사람에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 BID 또는 TID 투여 일정은 사람에서 유리 트레프로스티닐 용액의 QID 투여 일정인 경우(P/T 비율 = 845)에 비해서 더 평평한 혈장 프로파일 및 더 낮은 P/T 비율(15 미만)을 유도한다(표 6 참조).
도 3e의 유리 Tyvaso(트레프로스티닐) 용액(54㎍/㎏)의 참조 데이터는 건강한 지원자의 공개된 I상 단일 투여 단계적 증가 연구[Drug Design, Development and Therapy 2012:6 19-28]에서 도출되었으며, 0.167시간(Tmax)에 더 높은 최대 혈장 농도(0.845ng/㎖)에 도달하고 투여 4시간 후 100pg/㎖로 떨어졌음을 보여준다. 도 3e의 유리 Tyvaso(트레프로스티닐) 용액의 시뮬레이션 프로파일은 유리 Tyvaso의 참조 데이터를 기반으로 추정되었고, 4시간마다 하루에 4회(QID)의 일정인, 흡입 Tyvaso의 처방 정보에 나열된 투여 일정을 따른다.
Figure pct00006
실시예 4: PH 쥐에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 효과
급성 PH를 갖는 의식있는 쥐에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물의 PK 및 PD 프로파일을 평가하였다. 쥐에서 저산소증-유도 PH의 신뢰성을 확인하기 위해 염수 대조군을 포함시켰다. 염수 대조군에서 쥐의 PAP는 12시간까지 상승된 상태를 유지하였다.
앞서 기술된 방법에 따라 6㎍/㎏으로 유리 트레프로스티닐 용액을 또는 6㎍/㎏으로 리포솜 트레프로스티닐 조성물을 PH 쥐에 제공하였다.
유리 트레프로스티닐 용액을 제공받은 PH 쥐는 약간의 PAP 감소를 보였다. 투여 0.5시간 후 최대 효과(기준선 저산소 값의 79%로 감소된 PAP)가 관찰되었고 트레프로스티닐 혈장 수준은 약 1ng/㎖이었다.
리포솜 트레프로스티닐 조성물을 처리한 PH 쥐의 경우, PAP는 염수 또는 유리 트레프로스티닐 용액을 처리한 쥐의 것보다 지속적으로 낮았다. 더 낮은 PAP(기준선 저산소 값의 69%로 감소된 PAP)는 투여 12시간 후까지 지속되었다(도 4a). 이러한 결과는 리포솜 트레프로스티닐 조성물이 유리 트레프로스티닐 용액에 비교하여 PH 쥐에서 폐동맥의 혈관 확장을 더 효과적으로 유도한다는 것을 시사한다.
리포솜 트레프로스티닐 조성물을 처리한 PH 쥐에서, PK/PD 프로파일 데이터는 기준선 저산소 값의 63%로 PAP가 감소된 약 0.1ng/㎖의 트레프로스티닐 혈장 농도를 보여준다. 그러나, 도 4a 및 도 4b와 같이, 유리 트레프로스티닐 용액을 처리한 쥐에서 같은 트레프로스티닐 혈장 농도(0.1ng/㎖)는 기준선 저산소 값의 83%로 PAP가 감소되었을 뿐이다. 같은 트레프로스티닐 혈장 농도의 경우, 유리 트레프로스티닐 용액은 PAP 감소의 측면에서 리포솜 트레프로스티닐 조성물만큼 효과적이지 않다. 위에 기재된 PAP 감소 효능의 정의를 기반으로, 리포솜 트레프로스티닐 조성물은 유리 트레프로스티닐 용액의 것에 비교하여 3 내지 9배 더 높은 PAP 감소 효능을 보여준다(표 7).
Figure pct00007
실시예 5: PH 쥐에서 리포솜 일로프로스트 조성물의 효과.
유리 일로프로스트 용액(2.5㎍/㎏)을 제공받은 PH 쥐는 약간의 PAP 감소를 보였다. 도 5a와 같이, 투여 0.75시간 후 최대 효과(기준선 저산소 값의 76%로 감소된 PAP)가 나타났고 일로프로스트 혈장 수준은 0.1ng/㎖(LLOQ) 미만이었다.
리포솜 일로프로스트 조성물(2.5㎍/㎏)을 처리한 PH 쥐는 염수 또는 유리 일로프로스트 용액을 처리한 쥐의 것보다 지속적으로 더 낮은 PAP를 가졌다. 더 낮은 PAP(기준선 저산소 값의 70%로 PAP 감소)는 투여 4시간까지 지속되었다(도 5a). 이러한 결과는 리포솜 일로프로스트 조성물이 PH 쥐에서 폐동맥의 혈관 확장을 효과적으로 유도했다는 것을 시사한다.
도 5a 및 도 5b와 같이, PK/PD 프로파일 데이터는 리포솜 일로프로스트 조성물을 처리한 PH 쥐에서 0.1ng/㎖ 근처의 혈장 농도가 기준선 저산소 값의 68.4%로 PAP를 감소시킨 반면 유리 일로프로스트 용액을 처리한 쥐에서의 유사한 일로프로스트 혈장 농도(LLOQ 미만)는 리포솜 조성물만큼 효과적인 것으로 보이지 않는다(기준선 저산소 값의 77.2%로 PAP 감소)는 것을 보여준다. 위에 기재된 PAP 감소 효능의 정의를 기반으로, 리포솜 일로프로스트 조성물은 유리 일로프로스트 용액의 것에 비교하여 3 내지 5배 더 높은 PAP 감소 효능을 보여준다(표 8 참조).
Figure pct00008

Claims (19)

  1. 약제학적 조성물로서,
    외부 매체에 현탁된 리포솜을 포함하되, 상기 리포솜은,
    (a) 적어도 하나의 소포-형성 인지질을 포함하는 외부 지질 이중층; 및
    (b) 내부 수성 매체로서, 2시간 미만의 반감기를 갖는 약산성 약물 및 내부 수성 매체와 외부 매체 사이에 pH 구배를 제공하는 약산성 염을 포함하는, 상기 내부 수성 매체
    를 포함하고, 적어도 6시간마다 약제학적 조성물의 투여 후 약 1 내지 약 100의 최대 대 최저 약물 혈장 농도 비율(P/T 비율)을 생성하는, 약제학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 외부 지질 이중층은 콜레스테롤, 콜레스테롤 헥사석신산염, 에르고스테롤, 라노스테롤 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 스테롤을 더 포함하는, 약제학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 약산성 염은 중탄산염인, 약제학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 약산성 약물은 프로스타글란딘 또는 이의 유사체인, 약제학적 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 프로스타글란딘은 트레프로스티닐(treprostinil) 또는 일로프로스트(iloprost)인, 약제학적 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 프로스타글란딘은 일로프로스트이고 상기 P/T 비율은 약 5 내지 약 40인, 약제학적 조성물.
  7. 제5항에 있어서, 상기 프로스타글란딘은 트레프로스티닐이고 상기 P/T 비율은 약 1 내지 약 20인, 약제학적 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 소포-형성 지질은 제1 인지질 및 제2 인지질의 혼합물 또는 제1 인지질 및 하전된 지질의 혼합물인, 약제학적 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 제1 인지질은 포스파티딜콜린(PC), 포스파티딜글리세롤(PG), 포스파티딜이노시톨(PI), 포스파티딘산(PA), 포스파티딜에탄올아민(PE), 포스파티딜세린(PS) 및 이들의 임의의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것이고, 상기 제2 인지질은 PEG 변형 인지질, 양전하 또는 음전하를 띤 인지질이고, 상기 하전된 지질은 양전하 또는 음전하를 띤 지질인, 약제학적 조성물.
  10. 제8항에 있어서, 상기 제1 인지질은 HSPC, DSPC, DPPC, DMPC 또는 이들의 조합물로부터 선택된 것이고 상기 제2 인지질은 DSPG, DPPG, DMPG, PEG-DSPE 또는 이들의 조합물로부터 선택된 것인, 약제학적 조성물.
  11. 제8항에 있어서, 상기 제1 인지질은 HSPC, DSPC, DPPC, DMPC 또는 이들의 조합물로부터 선택된 것이고 상기 하전된 지질은 스테아릴아민, 1,2-다이올레오일-3-트라이메틸암모늄-프로판(DOTAP), 3ß-[N-(N',N'-다이메틸아미노에탄)-카바모일]콜레스테롤(DC-콜레스테롤), N4-콜레스테릴-스퍼민(GL67), 다이메틸다이옥타데실암모늄(DDAB), 1,2-다이-O-옥타데세닐-3-트라이메틸암모늄 프로판(DOTMA), 에틸포스포콜린(에틸 PC) 또는 이들의 조합물인, 약제학적 조성물.
  12. 제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물에서 상기 약산성 약물의 효능은 유리 약산성 약물의 효능보다 적어도 2배 이상인, 약제학적 조성물.
  13. 제1항에 있어서, 상기 약산성 약물은 담체를 실질적으로 포함하지 않는, 약제학적 조성물.
  14. 폐고혈압 치료 방법으로서,
    적어도 6시간마다 제1항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 폐고혈압 치료 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 약제학적 조성물을 하루에 1회, 2회 또는 3회 투여하는, 폐고혈압 치료 방법.
  16. 제14항에 있어서, 상기 약제학적 조성물을 흡입 방식으로 투여하는, 폐고혈압 치료 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 약산성 약물의 치료 효과가 상기 약제학적 조성물의 투여 후 적어도 6시간 동안 유지되는, 폐고혈압 치료 방법.
  18. 제16항에 있어서, 약 1 내지 약 40의 최대 대 최저 약물 혈장 농도 비율(P/T 비율)이 상기 약제학적 조성물의 투여 후 약 1시간 내지 약 12시간 유지되는, 폐고혈압 치료 방법.
  19. 제14항에 있어서, 폐고혈압의 치료에 유효한 적어도 하나의 다른 물질을 투여하는 단계를 더 포함하는, 폐고혈압 치료 방법.
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