KR20210103787A - 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법 - Google Patents

기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법 Download PDF

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조가희
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전남과학대학교 산학협력단
(주)현농
조가희
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Abstract

본 발명은 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 관한 것으로, (S1) 토란 모구를 멸균된 상토에 식재하여 눈(bud) 생성을 유도하는 단계; (S2) 상기 토란 모구부터 상기 눈을 채취하고, 상기 채취된 눈의 외피를 제거한 후, 상기 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계; (S3) MS(Murashige & Skoog) 기본배지 또는 LS(Linsmaier & Skoog) 배지에, BAP, kinetin 및 IAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 형성배지에서, 상기 소독된 눈을 배양하여 신초를 형성시키는 단계; (S4) LS 배지에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 증식배지에서 상기 신초를 증식시켜 유묘를 생장시키는 단계; 및 (S5) LS 배지에 IBA 및 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 유묘 발근배지에서 상기 생장된 유묘를 발근시키는 단계를 포함하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 관한 것이다.

Description

기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법{MASS PRODUCTION METHOD OF TARO SEEDLING-PLANT BY IN VITRO CULTURE}
본 발명은 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 관한 것으로서, 토란의 기내배양 조건을 확립하여 대량생산할 수 있도록 한 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 관한 것이다.
토란(土卵, Colocasia esculenta)은 천남성과의 여러해살이풀로서 원산지는 인도인도네시아 등 열대아시아이며, 인도, 스리랑카, 수마트라, 말레이 반도 등의 열대지방에서 많이 재배되고 있다. 태평양 지역 많은 도서지방에서 주식으로 취급되며, 우리나라 재배역사는 매우 오래된 것으로 추측되나 확실하지 않다. 주로 영양번식을 하며, 우리나라 1년생으로 꽃이 피어도, 저온 및 건조한 기후로 인해 결실하지 않으나 열대에서는 다년생이다. 학명은 일반적으로 Colocasia의 변종으로 C. var esculenta와 C. var. antiquorum으로 구분한다.
토란의 식물학적 특성을 보면 줄기는 땅속에서 거의 자라지 않고 비대해져 알줄기나 덩이줄기가 된다. 잎은 길이 1~1.5m이고, 잎새는 입술 모양이나 달걀꼴 또는 심장 모양인데, 길이 30~50cm, 너비 25~30cm나 된다. 표면은 미끄럽다. 오랜 세월을 거쳐 재배해 오는 동안 개화습성이 없어져 가고 있으나 간혹 고온인 해의 가을에 꽃이 피기도 한다. 꽃은 잎자루 사이에서 나온 꽃줄기 끝에 육수꽃차례로 달리며 길이 25~30cm, 너비 6cm 정도의 노란색 불염포에 싸여있다. 꽃차례의 밑부분에는 암꽃, 그 위는 수꽃, 맨 끝부분에는 무성화가 달린다.
한국의 재래종은 대개 일찍 자라는 조생으로서 줄기가 푸르고 새끼 토란이 여러개 달리며 알이 작다. 덩이줄기는 새끼 토란과 어미 토란으로 구분하며 어미 토란은 알이 크고 떫은 맛이 강하여 거의 대부분 먹지 못한다. 토란의 재배적 특성은 고온성 식물로서 고온다습한 곳에서 잘 자란다. 병충해는 매우 적으며, 간혹 개화하기는 하나 종자가 생기지 않으므로 알줄기를 4~5월 무렵에 심는다. 또한 화학비료나 농약사용이 적고 내습성이 강하며 그늘에 비교적 잘 견디고 건조에 약하며 5 ℃ 정도의 저온에 견디나 서리에는 약하여 연작을 하게 되면 기지현상을 일으키고, 괴경, 줄기, 잎을 식용한다. 고온 다습한 상태에서 본래의 특성을 발휘하고 발아최저온도는 15℃, 생육적온은 25∼30℃로 생육기간이 길기 때문에 추운지방에서 재배는 적고 중부지방과 남부지방에서 재배되고 있다. 모구는 식용가치가 적어 주로 자구를 재배하고 있다. 우리나라에서는 멀칭재배 등 재배법에 관한 연구는 진행되어 있으나 품종의 분류, 육종사업이 거의 되어 있지 않은 실정으로, 우리나라에 잘 적응하는 괴경 및 줄기겸용으로 팔도알토란이 1998년 12월 신규품종으로 등록되어 있다.
토란의 영양성분에 각종 미량요소 및 칼슘, 칼륨 등 무기질 함량이 풍부해 해열, 염증치료, 신경통완화, 어혈을 풀어주고 고혈압, 변비, 노화방지 등 기능성 식품으로 알려지면서 소비가 증가되고 있는 추세이다.
하기 표 1은 토란의 영양성분 함량을 나타낸다(삶은 것 기준, 덩이줄기 100g).
탄수화물 단백질 지질 칼슘 인 비타민 열량
12.5g 2.6g 0.2g 17mg 32mg 3mg 60kcal
그리고, 하기 표 2는 토란대의 영양성분 함량을 나타낸다(100g).
탄수화물 단백질 지질 칼슘 인 철 칼륨 열량
3.5g 0.5g 0.1g 270mg 19mg 1.3mg 240mg 15kcal
상기 표 1 및 표 2에서 볼 수 있는 바와 같이 토란의 영양성과 다양한 기능적인 특징에도 불구하고, 국내 재배품종이 많지 않고 자구를 이용한 영양번식을 통해 계속해서 연작하다 보니, 기지현상과 같은 연작장해가 발생하고 이에 따라 품질과 생산성에 영향을 미치고 있다.
본 발명은 토란 모구에서 발생된 눈을 채취하여 기내배양 조건 확립을 통한 개체의 대량증식으로 무병모구를 육성할 수 있는 자원을 확보하고 연작장해, 병충해, 다수확, 고품질 등 다양한 품종육성에 기본 소재로서 활용할 수 있도록 한 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에 따른 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법은, (S1) 토란 모구를 멸균된 상토에 식재하여 눈(bud) 생성을 유도하는 단계; (S2) 상기 토란 모구부터 상기 눈을 채취하고, 상기 채취된 눈의 외피를 제거한 후, 상기 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계; (S3) MS(Murashige & Skoog) 기본배지 또는 LS(Linsmaier & Skoog) 배지에, BAP, kinetin 및 IAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 형성배지에서, 상기 소독된 눈을 배양하여 신초를 형성시키는 단계; (S4) LS 배지에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 증식배지에서 상기 신초를 증식시켜 유묘를 생장시키는 단계; 및 (S5) LS 배지에 IBA 및 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 유묘 발근배지에서 상기 생장된 유묘를 발근시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
이때, 상기 (S1) 단계는, 상기 토란 모구 중앙 자엽 주변에서 눈(bud)의 생성을 유도하는 것으로, 25±2℃의 온도에서, 5~7일 동안, 하루에 15~17시간 동안 2,000~3,000lux로 광을 조사하여 눈의 발생을 촉진시키는 것일 수 있다.
그리고, 상기 (S2) 단계는, 상기 눈의 소독은, 차아염소산염을 포함하는 소독액에 침지시켜 1차 소독하고, 증류수로 세척한 후, 알코올로 2차 소독하고, 차아염소산나트륨(Sodium hypochlorite)으로 최종 살균 소독하는 것일 수 있다.
또한, 상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 BAP 또는 상기 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 0.5~10mg 균일하게 혼합된 것일 수 있다.
그리고, 상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 BAP 0.5~10mg과 상기 IAA 0.05~1mg이 균일하게 혼합된 것일 수 있다.
또한, 상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 kinetin 0.5~10mg과 상기 IAA 0.05~1mg이 균일하게 혼합된 것일 수 있다.
그리고, 상기 (S4) 단계의 상기 신초 증식배지는, 상기 LS 배지 1L에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 1~10mg 균일하게 혼합된 것일 수 있다.
또한, 상기 (S5) 단계의 상기 유묘 발근배지는, 상기 LS 배지 1L에, 상기 IBA 및 상기 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 1~10mg 균일하게 혼합된 것일 수 있다.
본 발명에 따른 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 의하면, 토란 모구로부터 채취된 눈의 기내배양 조건 확립을 통한 개체의 대량증식으로 토양에 이식하여 무병 종구를 생산하는데 활용할 수 있고, 연작장해, 병충해, 다수확, 고품질 등 다양한 품종육성에 기본 소재로서 활용할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 따른 토란 모구의 눈을 틔우는 상태를 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 토란 모구의 눈의 신초 형성상태를 나타낸 사진이다.
도 3은 도 2의 상태에서 신초의 키 및 직경을 더욱 생장시킨 상태를 나타낸 사진이다.
도 4는 도 3의 상태에서 발근시킨 상태를 나타낸 사진이다.
도 5는 도 4의 상태에서 토양 순화시킨 사진이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 각 구성을 보다 상세히 설명하나, 이는 하나의 예시에 불과할 뿐, 본 발명의 권리범위가 다음 내용에 의해 제한되지 아니한다.
본 발명에 따른 기내배양에 의한 토란 모종 대량생산 방법은, (S1) 토란 모구를 멸균된 상토에 식재하여 눈(bud) 생성을 유도하는 단계; (S2) 상기 토란 모구부터 상기 눈을 채취하고, 상기 채취된 눈의 외피를 제거한 후, 상기 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계; (S3) MS(Murashige & Skoog) 기본배지 또는 LS(Linsmaier & Skoog) 배지에, BAP, kinetin 및 IAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 형성배지에서, 상기 소독된 눈을 배양하여 신초를 형성시키는 단계; (S4) LS 배지에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 증식배지에서 상기 신초를 증식시켜 유묘를 생장시키는 단계; 및 (S5) LS 배지에 IBA 및 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 유묘 발근배지에서 상기 생장된 유묘를 발근시키는 단계를 포함한다.
이하, 본 발명에 따른 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법을 각 단계별로 나누어 설명한다.
(S1) 눈(bud) 생성을 유도하는 단계
본 단계는, 토란 모구를 멸균된 상토에 식재하여 눈 생성을 유도하는 단계이다. 당년에 수확된 토란 모구를 멸균된 상토에 식재한 다음, 토란 모구 중앙에서 자라난 자엽을 중심으로 주변에 발생되는 눈의 생성을 유도하는 것으로, 25±2℃의 온도에서, 5∼7일 동안, 하루에 15~17 시간 동안, 2,000~3,000lux로 광을 조사하여 눈의 발생을 촉진시킨다. 자엽을 중심으로, 환상으로 발생된 눈이 더 이상 발생되지 않거나 자엽이 3cm 이상 자라 올라오면 자엽을 제거하여 추가적인 눈의 발생을 유도한다. 5mm 이상 자라난 눈은 살균된 메스를 이용하여 채취하여 배양 재료로 사용한다.
상기와 같은 방법으로 눈 발생을 유도하는 이유는, 눈의 기내배양에 소재가 될 수 있는 분열조직이 포함된 부분으로, 토란 모구로부터 중심부에 1차 자엽이 자라나면 모구의 모든 영양분이 자엽생장에 집중되므로, 모구 주변의 눈의 발생이 억제된다. 또한 외부에서부터 전달되어 온 오염균을 최소화하면서 가능한 많은 눈의 생성을 유도하기 위함이다.
도 1은 토란 모구에서 눈이 생성된 모습을 나타낸다.
(S2) 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계
본 단계는, 토란 모구로부터 생성된 눈을 채취하고, 그 채취된 눈의 외피를 벗겨 제거한 후, 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계로서, 토란 모구에서 발생된 눈을 채취하고, 그 채취된 눈의 짙은 녹색에 가까운 외피를 2~3 껍질 벗겨서 외피는 제거하고, 내부의 연노란색을 나타내는 눈을 수득한 다음, 수득된 눈을 시중에서 판매되고 있는 일반적인 상업용 소독액(차아염소산염 포함)을 이용하여 1차 소독하고, 이후 증류수로 세척한 후, 알코올로 2차 소독하고, 이를 다시 차아염소산나트륨(Sodium hypochlorite)을 이용하여 최종 살균 소독한다.
상기 방법으로 눈을 소독하는 이유는, 토란 모구로부터 채취된 눈에 묻어있는 외부 오염균을 소독 및 살균하여 오염균을 제거함으로써 눈으로부터 발생되는 신초의 생성율을 높이고, 건강한 배양이 이루어지도록 하기 위함이다.
상기 눈을 소독 및 살균하는 구체적인 방법은, 채취된 눈을 시중에서 판매되고 있는 일반적인 상업용 종자소독액(차아염소산염, hypochlorite)에 5~30분간 침지시켜 소독하고, 이후 증류수로 3~5회 세척한 후, 다시 70±5%의 알코올로 1~3분간 침지 소독하며, 그 후 0.1~5%의 차아염소산나트륨(Sodium hypochlorite)에서 최종 살균 소독하는 것이다.
(S3) 소독된 눈을 배양하여 신초를 형성시키는 단계
전술한 바와 같이 소독된 눈을 신초 형성배지에서 배양해야 하는데, 이때 상기 눈에서 신초를 형성시키는 신초 형성배지는 MS(Murashige & Skoog) 기본배지 또는 LS(Linsmaier & Skoog) 배지에, BAP(benzylaminopurine), kinetin 및 IAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 것일 수 있다. 구체적으로는, MS 기본배지 또는 LS 배지 중, 어느 하나에, BAP, kinetin 중 어느 하나를 첨가하거나, 또는 MS 기본배지 또는 LS 배지 어느 하나에, BAP, kinetin 중 어느 하나를 첨가하고, IAA를 추가로 첨가하여 신초 형성배지를 제조한 다음, 수크로오스(sucrose)와 파이타 겔(Phyta gel)을 첨가하여 제조될 수 있다.
하기 표 3 및 표 4는 신초 형성배지에 따른 신초 형성 개수를 나타낸다.
구분 MS 기본배지 1L +BAP 0.5~10mg MS 기본배지 1L +kinetin 0.5~10mg MS 기본배지 1L
+BAP 0.5~10mg
+IAA 0.05~1mg		 MS 기본배지 1L
+ kinetin 0.5~10mg
+IAA 0.05~1mg
신초
형성
개수		 증
식
일		 3주 0.9 ±0.3 0.8 ± 0.3 1.1 ± 0.6 0.9 ± 0.6
4주 1.4 ±0.5 1.2 ± 1.4 1.8 ± 0.6 1.6 ± 1.2
5주 2.2 ±1.2 1.8 ± 0.6 2.8 ± 0.5 2.1 ± 0.5
구분 LS 배지 1L +BAP 0.5~10mg LS 배지 1L +kinetin 0.5~10mg LS 배지 1L
+BAP 0.5~10mg
+IAA 0.05~1mg		 LS 배지 1L
+ kinetin 0.5~10mg
+IAA 0.05~1mg
신초
형성
개수		 증
식
일		 3주 1.5 ± 0.1 1.2 ± 0.5 1.6 ± 0.2 1.0 ± 0.4
4주 2.3 ± 1.2 2.0 ± 0.8 2.8 ± 1.3 2.6 ± 1.0
5주 3.4 ± 1.5 3.2 ± 0.3 3.9 ± 0.4 3.6 ± 1.5
상기 BAP와 kinetin은 주로 유묘의 신초 증식에 필요한 생장조절제의 역할을 하는 것으로, MS 기본배지 또는 LS 배지 어느 하나의 1L에, BAP, kinetin 각각의 첨가량은 0.5~10mg이고, IAA의 첨가량은 0.05~1mg이다. 상기 수크로오스(sucrose)는 눈에서 새로운 신초가 형성되는데 필요한 에너지원(생장호르몬) 역할을 하는 것이고, 파이타 겔(Phyta gel)은 신초 형성배지를 겔화(고형화)시키는 역할을 하는 것이다.
상기 MS 기본배지 또는 LS 배지 어느 하나의 1L에, 수크로오스의 첨가량은 20~50g이고, 파이타 겔의 첨가량은 2~5g인 것일 수 있는데, 수크로오스의 첨가량이 20g 미만이면, 상기 눈이나 신초가 정상적으로 생장하는데 필요한 에너지원(탄소원)이 부족하여 정상적으로 생장하지 못하고, 50g을 초과하면, 상기 발아된 눈이 정상적으로 생장하는데 필요한 에너지원이 과다하여 너무 웃자라는 문제점이 발생할 수 있다.
또한, 파이타 겔은 기본배지가 액상으로서, 그 액상을 겔화(고형화)시켜 눈이나 신초가 유동되지 않고 안정적으로 제자리에서 고정되어 자랄 수 있도록 하는 것으로, 2g 미만을 사용하게 되면 액상의 MS 기본배지 또는 LS 배지는 겔화되지 못하고, 5g을 초과 사용하게 되면 액상의 MS 기본배지 또는 LS 배지가 너무 단단해져 눈이나 신초 생장에 지장을 주는 문제점이 발생할 수 있다.
도 2는 신초 형성상태를 나타낸 사진이다.
(S4) 신초를 증식시켜 유묘를 생장시키는 단계
전술한 방법에 의해 형성된 신초는, 1개체씩 분할되어 신초 증식배지로 옮겨져 증식되는데, 이때 상기 신초를 증식시키기 위한 신초 증식배지는 아래의 표 5에 나타난 것처럼, LS 배지에, BAP(benzylaminopurine) 또는 kinetin 중 어느 하나를 첨가하여 제조될 수 있다.
구분 LS 배지 1L LS 배지 1L
BAP 1mg BAP 5mg BAP 10mg kinetin 1mg kinetin 5mg kinetin 10mg
3주 1.51±0.2cm 1.53±0.28cm 1.42±0.3cm 1.10±0.5cm 0.51±0.4cm 0.44±0.3cm
4주 2.58±0.1cm 2.77±0.5cm 2.32±0.2cm 2.05±0.4cm 1.68±0.5cm 0.70±0.2cm
5주 3.72±0.3cm 3.52±0.2cm 2.92±0.1cm 3.12±0.5cm 2.05±0.8cm 1.15±0.3cm
상기 BAP와 kinetin은 주로 유묘의 신초 증식에 필요한 생장조절제의 역할을 하는 것으로, LS 배지 1L에, BAP, kinetin 각각의 첨가량은 1~10mg이다.
상기 첨가량 미만을 사용하거나, 초과하여 사용하게 되면, 유묘의 신초 형성과 증식이 정상적으로 이루어지지 못하여, 신초의 형성과 증식이 더디거나, 비정상적으로 생육되는 문제점이 발생하여, 이후 유묘의 잎과 뿌리가 균형을 유지하는 상태로 생장하지 못하는 문제점이 발생할 수 있다.
상기 신초 증식배지는 LS 배지에, BAP 또는 kinetin만을 첨가하여 제조될 수 있다.
상기와 같은 방법으로 신초 증식배지가 제조되면 그 제조된 신초 증식배지에 각 마디 단위로 분할된 각각의 신초 마디를 옮겨 22~27℃의 온도에서, 3~5주 동안, 하루에 15~17시간 동안 2,000~3,000lux로 광을 조사함으로써 신초를 증식시켜 유묘를 생장시킨다.
도 3은 신초를 더욱 생장시킨 것을 보여주는 사진이다.
상기 표 5에서 나타낸 바와 같이, 유묘의 신초는 LS 배지에 BAP를 첨가한 것이 가장 좋았고, LS 배지에 kinetin을 첨가한 것은 농도가 너무 올라갈수록 신초 생장이 억제되는 결과를 보여주었다. LS 배지에 BAP를 첨가한 경우, 4주~5주 동안 생장시키는 것이 가장 바람직하였다.
(S5) 생장된 유묘를 발근시키는 단계
전술한 방법에 의해 신초를 증식시켜 마디유묘를 생장시킨 후, 그 생장된 유묘를 유묘 발근배지로 옮겨 발근을 유도하게 된다. 이때 상기 유묘 발근배지는 LS 배지에 IBA(Indole butyric acid), NAA(naphthalene acetic acid) 중 어느 하나의 첨가물을 첨가하여 제조될 수 있다.
상기 IBA, NAA는 모두 마디유묘의 발근을 촉진시키고, 생장시키는 역할을 하는 것으로, LS 배지 1L에, 상기 IBA, NAA 중 어느 하나를 1~10mg 첨가하는 것이 바람직하다.
상기 유묘 발근배지를 제조할 때, 상기 첨가제의 사용량이 상기 수치범위 미만을 사용하거나, 초과하여 사용하게 되면, 유묘의 발근이 너무 더디게 생장하거나 또는 너무 웃자라게 되어 건강한 발근이 되지 못하기 때문에, 상기 수치범위를 만족하는 것이 바람직하다.
도 4는 상기 유묘 발근배지에서 발근된 상태를 나타낸다. 그리고 하기 표 6은 유묘 발근배지의 종류에 따라 생장된 유묘의 길이를 보여준다.
구분 LS배지+IBA(mg/L) LS배지+NAA(mg/L)
1 2 5 10 1 2 5 10
6주 3.5±
0.4cm		 2.83±
0.6cm		 2.32±
0.3cm		 1.50±
0.5cm		 2.6±
0.3cm		 2.15±
0.2cm		 1.92±
1.2cm		 1.40±
0.6cm
8주 7.2±
1.2cm		 4.92±
0.3cm		 3.50±
0.3cm		 1.85±
0.4cm		 5.3±
0.8cm		 3.52±
0.2cm		 2.50±
0.1cm		 1.65±
0.2cm
전술한 바와 같이 상기 유묘가 적절한 길이로 발근이 된 이후, 도 5에 나타난 것처럼 토양에 옮겨 심어, 토란 유묘를 더욱 생장시킬 수 있다.
본 발명에 따른 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법에 따르면, 토란 모구에서 채취된 눈을 이용하여 대량생산할 수 있으므로, 무병모구를 육성할 수 있는 자원을 확보하고 연작장해, 병충해, 다수확, 고품질 등 다양한 품종육성에 기본 소재로서 활용할 수 있는 장점이 있다.

Claims (8)

  1. (S1) 토란 모구를 멸균된 상토에 식재하여 눈(bud) 생성을 유도하는 단계;
    (S2) 상기 토란 모구로부터 생성된 상기 눈을 채취하고, 상기 채취된 눈의 외피를 제거한 후, 상기 외피가 제거된 눈을 소독하는 단계;
    (S3) MS(Murashige & Skoog) 기본배지 또는 LS(Linsmaier & Skoog) 배지에, BAP, kinetin 및 IAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 형성배지에서, 상기 소독된 눈을 배양하여 신초를 형성시키는 단계;
    (S4) LS 배지에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 신초 증식배지에서 상기 신초를 증식시켜 유묘를 생장시키는 단계; 및
    (S5) LS 배지에 IBA 및 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 첨가된 유묘 발근배지에서 상기 생장된 유묘를 발근시키는 단계를 포함하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 (S1) 단계는, 상기 토란 모구 중앙 자엽 주변에서 눈(bud)의 생성을 유도하는 것으로,
    25±2℃의 온도에서, 5~7일 동안, 하루에 15~17시간 동안 2,000~3,000lux로 광을 조사하여 눈의 발생을 촉진시키는 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 (S2) 단계는, 상기 눈의 소독은, 차아염소산염을 포함하는 소독액에 침지시켜 1차 소독하고, 증류수로 세척한 후, 알코올로 2차 소독하고, 차아염소산나트륨(Sodium hypochlorite)으로 최종 살균 소독하는 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 BAP 또는 상기 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 0.5~10mg 균일하게 혼합된 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 BAP 0.5~10mg과 상기 IAA 0.05~1mg이 균일하게 혼합된 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 (S3) 단계의 상기 신초 형성배지는, 상기 MS 기본배지 또는 상기 LS 배지 1L에, 상기 kinetin 0.5~10mg과 상기 IAA 0.05~1mg이 균일하게 혼합된 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 (S4) 단계의 상기 신초 증식배지는, 상기 LS 배지 1L에, BAP 및 kinetin으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 1~10mg 균일하게 혼합된 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 (S5) 단계의 상기 유묘 발근배지는, 상기 LS 배지 1L에, 상기 IBA 및 상기 NAA로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상이 1~10mg 균일하게 혼합된 것을 특징으로 하는 기내배양에 의한 토란 유묘 대량생산 방법.
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