KR20210047309A - 면역 반응을 자극하기 위한 방법 및 조성물 - Google Patents

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라몬 모한랄
란 황
제임스 알. 톤라
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Abstract

대상체에게 투여하기 위한 조성물이 개시되며, 조성물은 체액성 반응을 유도, 향상 또는 증대시키기 위해 애쥬번트 없이 또는 애쥬번트와 함께 백신 및 플리나불린을 포함한다. 백신 및 플리나불린을 투여하는 치료하는 방법이 개시된다. 또한 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여함으로써 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법이 개시된다. 백신 및 플리나불린은 동시에 또는 별도로 투여될 수 있다.

Description

면역 반응을 자극하기 위한 방법 및 조성물
우선권 출원에 대한 참조에 의한 통합
본 출원은 2018년 8월 16일 출원된 미국 가출원 번호 제62/765,099호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
분야
본 개시내용은 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는 조성물 및 백신 및 튜불린 결합제를 사용하는 치료 방법에 관한 것이다.
인간 면역계는 질병 및 질환으로부터 인체를 보호하기 위해 함께 작용하는 중첩 기능을 갖는 수많은 상이한 유형의 세포를 포함한다. 면역계의 세포는 복잡한 다중 기능 및 상호연결 관계를 갖는다. 이들 유기체에 의한 감염으로부터 숙주를 보호하는 데 필수적인 역할을 하는 면역계의 주요 구성요소는 체액성 항체 반응이다.
면역글로불린으로도 알려진 항체는 이들의 생산을 자극하는 외래 입자에 대한 특이성을 갖는 단백질 분자이다. 면역글로불린(Ig)은 두 쌍의 폴리펩티드 쇄로 이루어진 구조적으로 관련된 단백질의 부류이다. 두 쇄는 항원의 결합에 기여하고 하나의 Ig 분자에서 또 다른 분자까지 매우 가변적인 영역을 갖는다. 면역글로불린 M(IgM)은 항원에 대한 초기 노출에 반응하여 나타나는 여러 형태의 항체 중 하나이다.
면역글로불린은 항체-분비 세포에서 유래한다. 항체-분비 세포의 전구체는 "B 세포"로도 알려진 B 림프구이다. B 세포는 세포-표면 수용체로서 세포 표면 상의 발현에 대해 특화된 면역글로불린(Ig) 분자를 보유한다. 새로 분화된 B 세포는 처음에 IgM 부류의 표면 Ig만을 발현한다. B 세포의 성숙과 관련된 것은 B 세포의 표면 상에 다른 면역글로불린 이소형의 출현이다. 항원 mIg에 의한 막(m) Ig 분자의 교차-결합(교차-결합-의존성 B 세포 활성화), T 세포와의 직접 만남(예를 들어, CD40 리간드와 같은 헬퍼 T 세포 또는 헬퍼 T 세포-관련 분자), 또는 미토겐과의 만남을 포함하여 B 세포를 활성화시키는 다양한 방식이 있다. 이러한 만남에서, 항원은 B 세포의 세포-표면 Ig에 의해 인식된 에피토프를 제시한다.
일부 구현예는 백신, 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 백신, 및 플리나불린(plinabulin)을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다.
일부 구현예는 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 대상체에서 백진에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 백신에 대한 면역 반응은 튜불린 결합제 없이 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상된다. 일부 구현예는 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 백신에 대한 면역 반응은 플리나불린 없이 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상된다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 림프구 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 유효량의 플리나불린 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 림프구 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, B 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 유효량의 플리나불린 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, B 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 하나 이상의 면역글로불린의 생산을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 유효량의 플리나불린 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 하나 이상의 면역글로불린의 생산을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 면역글로불린은 IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예는 감염성 질환 또는 암과 관련된 항원 또는 면역원 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 감염성 질환 또는 암과 관련된 항원 또는 면역원 및 플리나불린을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다.
일부 구현예는 감염 질환 또는 암과 관련된 항원 또는 면역원 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 감염 질환 또는 암과 관련된 항원 또는 면역원 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 항원 또는 면역원 제시 세포-기반 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 항원 또는 면역원 제시 세포-기반 백신 및 플리나불린을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다.
일부 구현예는 항원 또는 면역원 제시 세포-기반 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는 백신을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 항원 또는 면역원 제시 세포-기반 백신 및 플리나불린을 포함하는 백신을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 수지상 세포-기반 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 수지상 세포-기반 백신 및 플리나불린을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다.
일부 구현예는 수지상 세포-기반 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 수지상 세포-기반 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 B 세포 기반 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 B 세포 기반 백신 및 플리나불린을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다.
일부 구현예는 B 세포 기반 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 B 세포 기반 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 백신 및 튜불린 결합제를 투여하는 단계를 포함하는, 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이며, 여기서 튜불린 결합제는 백신의 투여 후에 투여된다. 일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 플리나불린이다.
일부 구현예는 백신 및 튜불린 결합제를 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이며, 여기서 튜불린 결합제는 백신의 투여 후에 투여된다.
도 1a 내지 4j는 실시예 2에 기재된 바와 같은 연구에 예시된 바와 같이 오브알부민 면역화 시 B-세포 반응에 대한 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)의 향상 효과를 예시한다.
도 1a-1e는 5 개의 하위그룹에서 실시예 2의 연구에 따른 마우스의 평균 체중 변화를 도시한다: 하위그룹 1(도 1a), 하위그룹 2(도 1b), 하위그룹 3(도 1c), 하위그룹 4(도 1d), 하위그룹 5(도 1e).
도 2는 실시예 2의 연구에서 1 일차 내지 62 일차 사이에 마우스의 평균 체중 변화를 도시한다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 3a-3f는 실시예 2의 연구에서 30 일차(도 3a, 3c, 및 3e) 및 62 일차(도 3b, 3d, 및 3f) 면역화에 대한 오브알부민 IgG1의 개별 마우스 혈청 수준(ng/mL)을 도시한다. 도 3e-3f에 제시된 동물 3501, 3502, 3503, 3504, 및 3505는 대신에 15 mg/kg을 받았다.
도 4a-4j는 실시예 2의 연구에서 30 일차(도 4a, 4c, 4e, 4g, 및 4i) 및 62 일차(도 4b, 4d, 4f, 4h, 및 4j)에 하위그룹 1-5에서 오브알부민 IgG1의 혈청 수준을 도시한다. 플리나불린은면역화 후 명시된 시간에 하루에 BID 투여되었다: 면역화후 1 시간(도 4a-4b), 3 일차(도 4c-4d), 6 일차(도 4e-4f), 14 일차(도 4g-4h), 및 28 일차(도 4i-4j). 기호 "*" 및 "**"는 상응하는 비히클 그룹과 비교하여, 각각 p < 0.05 및 p < 0.01을 나타낸다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 5 내지 8은 실시예 3a에 기재된 바와 같은 연구에 예시된 바와 같이 CD14+ 수지상 세포에 의해 유도된 CD4+ T-세포 반응에 대한 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)의 향상 효과를 도시한다.
도 5는 연구군(Study Arm) #A1에서 분화 동안 플리나불린으로 처리된 수지상 세포의 FACS(형광-활성화 세포 분류) 프로파일을 도시한다. 도 6은 연구군 #A2에서 성숙 동안 플리나불린으로 처리된 수지상 세포의 FACS 프로파일을 도시한다. 도 7은 실시예 3a에 기재된 바와 같은 연구에서 MLR(혼합 림프구 반응)에서 IL-2 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시한다. 도 8은 실시예 3a의 연구에서 MRL에서 IFN-γ 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시한다. 도 7-8에서, 연구군 #A1-A3의 데이터를 조합하고 플롯팅하였다.
도 9 내지 12는 실시예 3b에 기재된 바와 같은 연구에 예시된 바와 같이 CD14+ 수지상 세포에 의해 유도된 CD4+ T-세포 반응에 대한 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)의 향상 효과를 도시한다.
도 9는 연구군 #B1에서 분화 동안 플리나불린으로 처리된 수지상 세포의 FACS 프로파일을 도시한다. 도 10은 연구군 #B2에서 성숙 동안 플리나불린으로 처리된 수지상 세포의 FACS 프로파일을 도시한다. 도 11은 실시예 3b의 연구에서 MLR에서 IL-2 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시한다. 도 12는 실시예 3b에 기재된 바와 같이, 연구에서 MLR에서 IFN-γ 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시한다. 도 11-12에서, 연구군 #B1, B2, 및 B3의 데이터를 조합하고 평균 +/- SEM으로 플롯팅하였다.
도 13 및 14는 실시예 3c에 기재된 바와 같은 연구에 예시된 바와 같이 CD14+ 수지상 세포에 의해 유도된 CD4+ T-세포 반응에 대한 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)의 향상 효과를 도시한다.
도 13은 IL-2 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시하고; 도 14는 실시예 3c의 연구에서 MLR 검정에서 IFN-γ 분비에 대한 시험 물품의 효과를 도시한다. 도 13-14에서 데이터를 평균 +/- SEM으로 플롯팅하였다.
면역계는 세포성 면역 및 체액성 면역을 포함한다. 세포성 면역은 세포 및 이벤트의 네트워크를 포함한다. 체액성 면역은 B 세포 및 항체를 수반한다. B 세포가 형질 세포로 형질전환되는 경우, 형질 세포는 항체를 발현하고 분비한다. 분비된 항체는 이후에 감염된 세포 또는 종양 세포의 표면 상에 존재하는 항원에 결합할 수 있다. 그 결과 감염된 세포 또는 종양 세포는 항체로 태깅된다. 항체가 감염된 세포 또는 종양 세포에 결합되면, 결합된 항체는 감염된 세포 또는 종양 세포의 사멸을 매개한다.
플리나불린, (3Z,6Z)-3-벤질리덴-6-{[5-(2-메틸-2-프로파닐)-1H-이미다졸-4-일]메틸렌}-2,5-피페라진디온은 천연 화합물 페닐라히스틴의 합성 유사체이다. 플리나불린은 미국 특허 번호 제7,064,201호 및 제7,919,497호에 상세히 기재된 방법 및 절차에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
플리나불린은 B 세포를 활성화하고, B 세포 증식 및 성숙을 유도하고, 제시된 항원에 특이적인 면역글로불린(예를 들어, IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE) 항체 생산 및 분비를 (전용된 형질 세포를 통해) 추가로 유도는 데 효과적일 수 있다.
일부 구현예는 대상체에서 면역 반응을 치료 또는 향상시키기 위해 하나 이상의 백신과 조합된 튜불린 결합제의 사용에 관한 것이다. 일부 구현예는 대상체에서 면역 반응을 치료 또는 향상시키기 위해 하나 이상의 백신과 조합된 플리나불린의 사용에 관한 것이다.
백신 및 플리나불린과 같은 튜불린 결합제의 투여는 면역 반응의 강도, 속도, 및 지속기간을 증가시키고/시키거나, 항체 반응의 개시 시간을 단축시킬 수 있다. 면역 반응은 체액성 면역 반응일 수 있다. 백신 및 플리나불린의 조합은 또한 백신을 단독으로 투여한 것과 비교하여, 항체 생산 B 세포의 수를 증가시키고/시키거나, IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE와 같은 중화 항체를 생산하는 속도를 증가시키고/시키거나, 항체가 생성되는 지속시간을 연장하고/하거나, 개시 시간을 단축시킬 수 있다. 따라서, 백신 및 플리나불린을 사용하면 백신에서 항원을 발현하는 병리학적 및/또는 면역원성 표적에 대한 더 큰 보호를 자극할 수 있다. 또한, 플리나불린과 함께 백신을 사용하면 클론 확장 및 기억력이 향상되고 해당 항원에 대해 다시 면역성 시험을 할 때 더 신속하고/더 빠르고 더 강렬하고 더 연장된 체액성 반응을 야기할 수 있다. 백신 및 플리나불린의 조합은 백신을 단독으로 사용하는 것보다 상승적 효과를 생성하고 더 큰 이익을 달성할 수 있으며; 상기 조합은 또한 보호 항체 역가를 달성하기 위해 더 적은 용량의 백신 사용을 가능하게 한다.
튜불린 결합제가 백신에 의해 유도된 면역 반응을 증대시키기 위해 사용되는 경우, 투여 시기가 중요할 수 있다. 백신 투여 후에, 특히 T 세포와 같은 림프구가 항원 제시 세포와 접촉함으로써 활성화되는 시점 또는 직후에 플리나불린과 같은 튜불린 결합제를 투여하면 림프구 확장 또는 증식을 크게 증가시키고 백신 전에 또는 백신과 동시에 튜불린 결합제를 투여하는 것보다 더 강한 면역 반응을 촉진할 수 있다는 것은 예상 밖이었다. 림프구 세포의 활성화 동안 또는 직후에 튜불린 결합제의 첨가는 백신 투여 전에 튜불린 결합체의 첨가보다 더 효과적으로 T 세포 증식을 증가시킬 수 있어서, 백신에서 향상된 면역 반응 및 항원을 발현하는 면역원성 표적에 대한 더 나은 보호를 제공할 수 있다.
정의
본원에 사용된 바와 같은 "대상체"는 인간 또는 비인간 포유동물, 예를 들어, 개, 고양이, 마우스, 래트, 소, 양, 돼지, 염소, 비인간 영장류 또는 조류, 예를 들어, 닭, 뿐만 아니라 임의의 다른 척추동물 또는 무척추동물을 지칭한다.
용어 "포유동물"은 이의 통상적인 생물학적 의미로 사용된다. 따라서, 구체적으로 시미안(침팬지, 유인원, 원숭이) 및 인간, 소, 말, 양, 염소, 돼지, 토끼, 개, 고양이, 설치류, 래트, 마우스 기니피그 돼지 등을 포함하는 영장류를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 바와 같은 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 질환 또는 병태의 증상 중 하나 이상을 어느 정도 완화시키거나, 또는 이의 발병 가능성을 감소시키는 데 효과적이며, 질환 또는 병태를 치유하는 것을 포함하는 치료제의 양을 지칭한다. "치유"는 질환 또는 병태의 증상이 제거되는 것을 의미하지만; 치유가 된 후에도(예컨대 광범위한 조직 손상) 특정 장기적 또는 영구적 효과가 존재할 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은 "치료하다", "치료", 또는 "치료하는"은 화합물 또는 약제학적 조성물을 예방적 및/또는 치료적 목적을 위해 대상체에게 투여하는 것을 지칭한다. 용어 "예방적 치료"는 질환 또는 병태의 증상을 아직 나타내지 않지만, 특정 질환 또는 병태에 걸리기 쉽거나, 또는 달리 위험이 있는 대상체를 치료하여, 치료로 인해 환자에서 질환 또는 병태가 발생할 가능성을 감소시키는 것을 지칭한다. 용어 "치료적 치료"는 이미 질환 또는 병태를 앓고 있는 대상체에게 치료를 투여하는 것을 지칭한다.
용어 "면역 반응의 유도 및/또는 향상"은 방법이 동물의 면역계의 임의의 반응을 일으키고/키거나 향상시킴을 의미한다. "면역 반응"은 예를 들어, 세포 매개(즉 세포독성 T-림프구 매개) 또는 체액성(즉 항체 매개) 성질의 면역계의 임의의 반응으로 정의된다. 이들 면역 반응은 항체 검정(예를 들어 ELISA 검정) 항원 특이적 세포독성 검정, 사이토카인의 생성(예를 들어 ELISPOT 검정) 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 당업자에게 널리 알려진 다수의 생체내 또는 시험관내 검정에 의해 평가될 수 있다.
용어 "림프 부위"는 비장, 흉선, 편도선, 파이어판(Peyer's patch), 골수, 림프구, 흉관과 같은 림프 기관, 조직, 세포, 절 또는 샘을 포함하는 림프계 뿐만 아니라 신체의 모든 림프절과 관련된 신체 부위를 의미한다.
용어 "면역글로불린" 또는 "Ig"는 항원을 중화하기 위해 면역계에 의해 사용되는 형질 세포에 의해 생성된 단백질 또는 항체를 지칭한다. 5가지 부류의 인간 항체가 있다: IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE. IgG, IgD, 및 IgE와 같은 일부 면역글로불린은 4 개의 당단백질 쇄로 구성된 단량체로 불리는 "Y"-형상의 거대분자이다. 항체 부류에 따라 달라지는 고분자량의 2 개의 동일한 중쇄가 있다. 또한, 2가지 종류 중 하나에 대해 2 개의 동일한 경쇄가 있다: 카파 또는 감마. 항체 부류에 따라, 항체의 Fc 부분의 생물학적 활성은 보체 경로를 활성화하거나(IgG 및 IgM), 포식세포에 결합하거나(IgG, IgA), 또는 비만 세포 및 호염기성 세포에 결합하는(IgE) 능력을 포함한다. 면역글로불린의 일부 부류는 더 복잡하다: 예를 들어, IgM은 Fc 부분에 연결된 5 개의 "Y"-유사 분자로 이루어진 오량체이고, 분비 IgA는 2 개의 "Y"-유사 분자로 이루어진 이량체이다.
본원에 사용된 바와 같이, 통상적인 약제학 약어는 다음과 같이 정의된다:
Figure pct00001
백신, 약제학적 조성물 및 투여
일부 구현예는 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예는 백신 및 플리나불린을 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 조성물은 애쥬번트(adjuvant)를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 조성물은 체액성 반응을 유도, 향상 또는 증대시키기 위해 애쥬번트를 추가로 포함한다.
일부 구현예에서, 백신은 상업적으로 이용가능한 백신일 수 있다. 일부 구현예에서, 상업적으로 이용가능한 백신은 적어도 하나의 추가 애쥬번트, 예를 들어, 백반을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 백신은 콜레라, 뎅기, 디프테리아, 헤모필루스 인플루엔자 b형 감염, A형 간염, B형 간염, 인플루엔자, 일본 뇌염, 수막구균 수막염, 백일해, 소아마비, 광견병, 파상풍, 결핵, 장티푸스, 및 황열병으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 질환에 대한 백신으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 백신은 헤모필루스 b 접합체 백신(파상풍 톡소이드 접합체); 흡착 파상풍 톡소이드, 감소 디프테리아 톡소이드 및 무세포 백일해 흡착 백신; 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 백신; 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드; 4가 인플루엔자 백신; 고용량 인플루엔자 백신; 4가 인플루엔자 백신; 피내 4가 인플루엔자 백신; 광견병 백신(인간 이배체 세포); 불활성화 폴리오바이러스 백신; 수막구균성(그룹 A, C, Y 및 W-135) 폴리사카라이드 디프테리아 톡소이드 접합체 백신; 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해, 불활성화 폴리오바이러스 및 헤모필루스 b 접합체(파상풍 톡소이드 접합체) 백신; 흡수 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 및 불활성화 폴리오바이러스 백신; 흡착 파상풍 및 디프테리아 톡소이드; 장티푸스 Vi 폴리사카라이드 백신; 황열병 백신; 열 처리 광견병 - HT 광견병 면역 글로불린(인간) USP; 투베르쿨린 정제 단백질 유도체, 망투(Mantoux); 및 황열병 백신으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
백신을 제조하는 데 사용되는 항원 또는 면역원은 매우 다양한 공급원으로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 적합한 항원 또는 면역원은 감염원(예를 들어, 박테리아, 진균, 원생동물, 기생충, 또는 바이러스), 감염원-유래 산물, 예를 들어, 단백질, 펩티드, 핵산, 폴리사카라이드, 당단백질, 당지질, 항원 또는 항원성 제제, 퇴행성 질환 항원, 아토피 질환 항원, 자가면역 질환 항원, 동종항원, 이종항원, 대사성 질환 효소 또는 효소적 산물, 재조합으로 생성된 단백질 또는 펩티드, 키메라 융합 단백질, 및/또는 소분자를 포함할 수 있다.
적합한 항원 또는 면역원은 전체 세포 또는 정제된 또는 부분적으로 정제된 항원 또는 항원성 제제 형태일 수 있다. 적합한 항원 또는 면역원은 변형 없이 생약 형태로, 또는 예를 들어 미소구체, 리포솜, 나노구체, 및 당업자에게 친숙한 다른 항원 전달 시스템과 같은 비히클 또는 담체와 조합하여 사용될 수 있다.
백신은 천연 공급원으로부터 제조 또는 유래되거나 또는 재조합 기술을 통해 생성된 항원에 기초할 수 있다.
감염성 질환 백신
일부 구현예에서, 백신은 감염성 질환에 대한 백신일 수 있다. 일부 구현예에서, 감염성 질환에 대한 백신은 미생물 구조(세포벽, 캡슐, 편모, 섬모, 바이러스 캡시드, 외피-관련 당단백질); 미생물 독소(알레르겐: 먼지, 화분, 머리카락, 음식, 비듬, 벌침 독, 약물, 및 알레르기 반응을 유발하는 다른 제제; 외래 조직 및 세포(이식 및 수혈에서 비롯됨); 신체가 "정상적 자기"로 인식하지 못하는 신체의 자체 세포(암 세포, 감염된 세포, 자가면역 질환에 수반되는 세포)로부터 선택된 항원 또는 면역원을 포함한다.
일 구현예에서, 항원 또는 면역원은 감염원, 또는 감염원의 생성물일 수 있다. 일 구현예에서, 항원 또는 면역원은 예를 들어, 사멸되거나 또는 달리 약화된 불활성화된 감염원을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 항원 또는 면역원은 살아있는 감염원을 포함한다.
일 구현예에서, 감염원(또는 감염원 산물)은 바이러스, 예를 들어 제한 없이, 수두 바이러스(예를 들어, 우두 바이러스), 천연두 바이러스, 마르부르그 바이러스, 플라비바이러스(예를 들어 황열병 바이러스, 뎅기 바이러스, 진드기 매개 뇌염 바이러스, 일본 뇌염 바이러스), 인플루엔자 바이러스(또는 F 및 G 단백질 또는 이의 유도체와 같은 항체), 예를 들어, 인플루엔자 A; 또는 HA, NP, NA, 또는 M 단백질, 또는 이의 조합과 같은 이의 정제된 또는 재조합 단백질), 파라인플루엔자 바이러스(예를 들어, 센다이 바이러스), 호흡기 세포융합 바이러스, 홍역 바이러스, 인간 면역결핍 바이러스(또는 예를 들어, tat, nef, gpl20 또는 gpl60과 같은 항원), 인간 유두종바이러스(또는 HPV6, 11, 16, 18과 같은 항원), 수두 대상포진 바이러스(또는 gpl, II 및 IE63과 같은 항원), 단순 포진 바이러스(예를 들어, 단순 포진 바이러스 I, 단순 포진 바이러스 II; 또는 예를 들어, gD 또는 이의 유도체와 같은 항원 또는 HSV1 또는 HSV2에서 비롯된 ICP27과 같은 급초기 단백질), 거대세포바이러스(또는 gB 또는 이의 유도체와 같은 항원), 엡스타인 바 바이러스(또는 gp350 또는 이의 유도체와 같은 항원), JC 바이러스, 랍도바이러스, 로타바이러스, 리노바이러스, 아데노바이러스, 유두종바이러스, 파보바이러스, 피코마바이러스, 폴리오바이러스, 볼거리를 유발하는 바이러스, 광견병을 유발하는 바이러스, 레오바이러스, 풍진바이러스, 토가바이러스, 오르토믹소바이러스, 레트로바이러스, 헤파드나바이러스, 한타바이러스, 쥬닌 비리온, 필로바이러스(예를 들어, 에볼라 바이러스), 콕사키바이러스, 말 뇌염 바이러스, 리프트 밸리열 바이러스, 알파바이러스(예를 들어, 치쿤구니야바이러스, 신드비스 바이러스), A형 간염 바이러스, B형 간염 바이러스(또는 이의 항원, 예를 들어 B형 간염 표면 항원 또는 이의 유도체), C형 간염 바이러스, D형 간염 바이러스, 또는 E형 간염 바이러스이다.
일 구현예에서, 감염원은 박테리아이다. 본 발명의 백신 및/또는 방법에 사용하기에 적합한 박테리아(또는 박테리아 유래 산물)의 비제한적인 예는 다음을 포함한다: 엔. 고노리아(N. gonorrhea) 및 엔. 메닝기티디스(N. meningitidis)(또는 예를 들어, 캡슐 폴리사카라이드 및 이의 접합체, 트랜스페린-결합 단백질, 락토페린 결합 단백질, PilC, 아데신과 같은 항원)를 포함하는 나이세리아(Neisseria) 종; 헤모필루스 종, 예를 들어, 에이치. 인플루엔자에(H. influenzae); 에스. 피로게네스(S. pyogenes)(또는 예를 들어, M 단백질 또는 이의 단편, C5A 프로테아제, 리포테이코산과 같은 항원), 에스. 아가락티애(S. agalactiae), 에스. 뮤탄스(S. mutans); 에이치. 듀크레이(H. ducreyi); 브란하멜라 카타르할리스(Branhamella catarrhalis)로도 알려진 엠 카타르할리스(M catarrhalis)(또는 예를 들어, 고분자량 및 저분자량 아데신 및 인바신과 같은 항원)를 포함하는 모락셀라(Moraxella) 종; 비. 페르투시스(B. pertussis)(또는 예를 들어, 페르탁틴, 백일해 독소 또는 이의 유도체, 필라멘트성 헤마글루티닌, 아데닐레이트 사이클라제, 핌브리애와 같은 항원), 비. 파라페르투시스(B. parapertussis) 및 비. 브로키셉티카(B. bronchiseptica)를 포함하는 보르데텔라(Bordetella) 종; 엠. 투베르쿨로시스(M. tuberculosis)(또는 예를 들어, ESAT6, 항원 85A, -B 또는 -C와 같은 항원), 엠. 보비스(M. bovis), 엠. 레프래(M. leprae), 엠. 아비움(M. avium), 엠. 파라투베르쿨로시스(M. para tuberculosis), 엠. 스메그마티스(M. smegmatis)를 포함하는 마이코바테리움(Mycobacterium) 종; 엘. 뉴모필라(L. pneumophila)를 포함하는 레지오넬라(Legionella) 종; 장독소 이. 콜라이(E. coli)(또는 예를 들어, 콜로니화 인자, 열-불안정 독소 또는 이의 유도체, 열-안정 독소 또는 이의 유도체와 같은 항원), 장출혈성 이. 콜라이, 장병원성 이. 콜라이(또는 예를 들어, 쉬가 독소-유사 독소 또는 이의 유도체와 같은 항원)를 포함하는 에스케리키아(Escherichia) 종; 브이. 콜레라(V. cholera)(또는 예를 들어, 콜레라 독소 또는 이의 유도체와 같은 항원)을 포함하는 비브리오(Vibrio) 종; 에스. 소네이(S. sonnei), 에스. 디센테리애(S. dysenteriae), 에스. 플렉스네리이(S. flexnerii)를 포함하는 시겔라(Shigella) 종; 와이 엔테로콜리티카(Y enterocolitica)(또는 예를 들어, Yop 단백질과 같은 항원), 와이 페스티스(Y pestis), 와이. 슈도투베르쿨로시스(Y. pseudotuberculosis)를 포함하는 예르시니아(Yersinia) 종; 씨. 제주니(C. jejuni)(또는 예를 들어, 독소, 아데신 및 인바신과 같은 항원) 및 씨. 콜라이(C. coli)를 포함하는 캄필로박터(Campylobacter) 종; 에스. 티피(S. typhi), 에스. 파라티피(S. paratyphi), 에스. 콜레라에수이스(S. choleraesuis), 에스. 엔테리티디스(S. enteritidis), 에스. 티피무리움(S. typhimurium), 및 에스. 디센테리애(S. dysenteriae)를 포함하는 살모넬라(Salmonella) 종; 엘. 모노시토게네스(L. monocytogenes)를 포함하는 리스테리아(Listeria) 종; 에이치. 파일로리(H. pylori)(예를 들어 우레아제, 카탈라제, 공포 독소)를 포함하는 헬리코박터(Helicobacter) 종; 피. 애루기노사(P. aeruginosa)를 포함하는 슈도모나스(Pseudomonas) 종; 에스. 아우레우스(S. aureus), 에스. 에피더미디스(S. epidermidis)를 포함하는 스타필로코쿠스(Staphylococcus) 종; 프로테우스(Proteus) 종, 예를 들어, 피. 미라빌리스(P. mirabilis); 이. 패칼리스(E. faecalis), 이. 패시움(E. faecium)을 포함하는 엔테로코쿠스(Enterococcus) 종; 씨. 테티니(C. tetani)(또는 예를 들어, 파상풍 독소 및 이의 유도체와 같은 항원), 씨. 보툴리눔(C. botulinum)(또는 예를 들어, 보툴리눔 독소 및 이의 유도체와 같은 항원), 씨. 디피실(C. difficile)(또는 예를 들어, 클로스트리디움 독소 A 또는 B 및 이의 유도체와 같은 항원), 및 씨. 퍼프링겐스(C. perfringens)를 포함하는 클로스트리디움(Clostridium) 종; 비. 안트라시스(B. anthracis)(또는 예를 들어, 보툴리눔 독소 및 이의 유도체와 같은 항원), 비. 세레우스(B. cereus), 비. 시르쿨란스(B. circulans) 및 비. 메가테리움(B. megaterium)을 포함하는 바실루스(Bacillus) 종; 씨. 디프테리애(C. diphtheriae)(또는 예를 들어, 디프테리아 독소 및 이의 유도체와 같은 항원)를 포함하는 코리네박테리움(Corynebacterium) 종; 비. 부르그도르페리(B. burgdorferi)(예를 들어 OspA, OspC, DbpA, DbpB), 비. 가리니이(B. garinii)(또는 예를 들어, OspA, OspC, DbpA, DbpB와 같은 항원), 비. 아프젤리이(B. afzelii)(예를 들어 OspA, OspC, DbpA, DbpB), 비. 안데르소니이(B. andersonii)(또는 예를 들어, OspA, OspC, DbpA, DbpB와 같은 항원), 비. 헤름시이(B. hermsii)를 포함하는 보렐리아(Borrelia) 종; 이. 에퀴(E. equi) 및 인간 과립구 에를리히아증의 제제를 포함하는 에를리히아(Ehrlichia) 종; 알. 리케치이(R. rickettsii)를 포함하는 릭케치아(Rickettsia) 종; 씨. 트라코마티스(C. trachomatis)(또는 예를 들어, MOMP, 헤파린-결합 단백질과 같은 항원), 씨. 뉴모니애(C. pneumoniae)(예를 들어 MOMP, 헤파린-결합 단백질), 씨. 프시타시(C. psittaci)를 포함하는 클라미디아(Chlamydia) 종; 엘. 인터로간스(L. interrogans)를 포함하는 렙토스피라(Leptospira) 종; 에스. 피오게네스(S. pyogenes), 에스. 아가락티애(S. agalactiae), 에스. 뉴모니아(S. pneumonia)와 같은 스트렙토코쿠스(Streptococcus) 종; 티. 팔리둠(T. pallidum)(또는 예를 들어, 희귀 외막 단백질과 같은 항원), 티 덴티콜라(T denticola), 및 티. 하이오다이센테리애(T. hyodysenteriae)를 포함하는 트레포네마(Treponema) 종.
일 구현예에서, 감염원은 기생충, 또는 기생충 유래 산물이다. 본 발명의 백신 및/또는 방법에 사용하기에 적합한 기생충(또는 기생충 유래 산물)의 비제한적인 예는 피. 팔시파룸(P. falciparum)을 포함하는 플라스모디움(Plasmodium) 종; 티. 곤디이(T. gondii)(또는 예를 들어 SAG2, SAG3, Tg34와 같은 항원)를 포함하는 톡소플라스마(Toxoplasma) 종; 이. 히스톨리티카(E. histolytica)를 포함하는 엔타모에바(Entamoeba) 종; 비. 미크로티(B. microti)를 포함하는 바베시아(Babesia) 종; 티. 크루지(T cruzi)를 포함하는 트리파노소마(Trypanosoma) 종; 지. 람블리아(G. lamblia)를 포함하는 지아르디아(Giardia) 종; 엘. 메이저(L. major)를 포함하는 레슈마니아(Leshmania) 종; 피. 카리니이(P. carinii)를 포함하는 뉴모시스티스(Pneumocystis) 종; 티. 바지날리스(T. vaginalis)를 포함하는 트리코모나스(Trichomonas) 종; 및 에스. 만소니(S. mansoni)를 포함하는 시소스토마(Schisostoma) 종을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 감염원은 진균류, 또는 진균 유래 산물이다. 본 발명의 백신 및/또는 방법에 사용하기에 적합한 진균류(또는 진균 유래 산물)는 제한없이 다음을 포함한다: 씨 알비칸스(C. albicans) 및 파라프실로시스(parapsilosis)를 포함하는 칸디다(Candida) 종; 씨. 네오포르만스(C. neoformans)를 포함하는 크립토코쿠스(Cryptococcus) 종; 아스페르길루스 푸미가테스(Aspergillus fumigates) 및 니제르(niger), 푸사리움(Fusarium) 종, 트리코파이톤(Trychophyton) 종, 압시디아(Absidia) 종, 예를 들어, 압시디아 코림비페라(Absidia corymbifera), 아젤로마이세스(Ajellomyces) 종, 예를 들어, 아젤로마이세스 캅술라투스(Ajellomyces capsulatus), 아르트로더마(Arthroderma) 종, 예를 들어, 아르트로더마 벤하미애(Arthroderma benhamiae), 블라스토마이세스(Blastomyces) 종, 예를 들어, 블라스토마이세스 더마티티디스(Blastomyces dermatitidis), 클라도피알로포라(Cladophialophora) 종, 예를 들어, 클라도피알로포라 카리오니이(Cladophialophora carrionii), 콕시디오이데스(Coccidioides) 종, 예를 들어, 콕시디오이데스 이미티스(Coccidioides immitis), 크립토코쿠스 종, 예를 들어, 크립토코쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 쿠닝하멜라(Cunninghamella) 종, 에피더모파이톤(Epidermophyton) 종, 예를 들어, 에피더모파이톤 플로코숨(Epidermophyton floccosum), 엑소피알라(Exophiala) 종, 예를 들어, 엑소피알라 더마티티디스(Exophiala dermatitidis), 필로바시디엘라(Filobasidiella) 종, 예를 들어, 필로바시디엘라 네오포르만스(Filobasidiella neoformans), 폰세카애(Fonsecaea) 종, 예를 들어, 폰세카애 페드로소이(Fonsecaea pedrosoi), 푸사리움 종, 예를 들어, 푸사리움 솔라니(Fusarium solani), 게오트리쿰(Geotrichum) 종, 예를 들어, 게오트리쿰 칸디둠(Geotrichum candidum), 히스토플라스마(Histoplasma) 종, 예를 들어, 히스토플라스마 캅술라툼(Histoplasma capsulatum), 호르타애(Hortaea) 종, 예를 들어, 호르타애 베르네키이(Hortaea werneckii), 이사켄키아(Issatchenkia) 종, 예를 들어, 이사켄키아 오리엔탈리스(Issatchenkia orientalis), 마두렐라(Madurella) 종, 예를 들어, 마두렐라 그리새(Madurella grisae), 말라세지아(Malassezia) 종, 예를 들어, 말라세지아 푸르푸르(Malassezia furfur), 미크로스포룸(Microsporum) 종, 예를 들어, 미크로스포룸 카니스(Microsporum canis), 무코르(Mucor) 종, 예를 들어, 무코르 시르시넬로이데스(Mucor circinelloides), 넥트리아(Nectria) 종, 예를 들어, 넥트리아 해마토코카(Nectria haematococca), 패실로마이세스(Paecilomyces) 종, 예를 들어, 패실로마이세스 바리오티이(Paecilomyces variotii), 파라콕시디오이데스(Paracoccidioides) 종, 예를 들어, 파라콕시디오이데스 브라실리엔시스(Paracoccidioides brasiliensis), 페니실리움(Penicillium) 종, 예를 들어, 페니실리움 마르네페이(Penicillium marneffei), 피키아(Pichia) 종, 예를 들어, 피키아 길리에르몬디이(Pichia guilliermondii), 뉴모시스티스 종, 예를 들어, 뉴모시스티스 카리니이(Pneumocystis carinii), 슈달레케리아(Pseudallescheria) 종, 예를 들어, 슈달레케리아 보이디이(Pseudallescheria boydii), 리조푸스(Rhizopus) 종, 예를 들어, 리조푸스 오리재(Rhizopus oryzae), 로도토룰라(Rhodotorula) 종, 예를 들어, 로도토룰라 루브라(Rhodotorula rubra), 스케도스포리움(Scedosporium) 종, 예를 들어, 스케도스포리움 아피오스페르뭄(Scedosporium apiospermum), 시조필룸(Schizophyllum) 종, 예를 들어, 시조필룸 코무네(Schizophyllum commune), 스포로트릭스(Sporothrix) 종, 예를 들어, 스포로트릭스 스켄키이(Sporothrix schenckii), 트리코파이톤(Trichophyton) 종, 예를 들어, 트리코파이톤 비올라세움(Trichophyton violaceum), 및 트리코스포론(Trichosporon) 종, 예를 들어, 트리코스포론 무코이데스(Trichosporon mucoides).
또 다른 구현예에서, 감염원은 원생동물, 또는 원생동물 유래 산물이다. 본 발명의 백신 및/또는 방법에 사용하기에 적합한 원생동물(또는 원생동물 유래 산물)은 제한없이, 프로시험(protest)(단세포 또는 다세포), 예를 들어, 플라스모디움 팔시파룸, 및 연충류, 예를 들어, 촌충류, 선충류, 및 디스토마류를 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 백신 및 방법에 사용하기에 적합한 항원 또는 면역원은 단백질 또는 펩티드, 지질단백질, 지질, 탄수화물, 핵산, 효소, 구조적 단백질, 분비 단백질, 세포 표면 수용체, 및 사이토카인, 예를 들어, TNF, IFN-γ, IL-1, 또는 IL-6과 같은 동종항원(자기-항원)이다. 일 구현예에서, 자기-항원은 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질(CETP), 알츠하이머 관련 Aβ 단백질, Aβ 단백질의 병리학적 형태를 처리하는 단백질분해 효소, 예를 들어, 베타-세크레타제, 아테롬성 동맥경화증 관련 LDL, 또는 HIV-I에 대한 공수용체, 예를 들어, CCR5이다. 일 구현예에서, 아테롬성 동맥경화증 관련 LDL은 산화되거나 또는 최소로 변형된다.
암 백신
일부 구현예에서, 백신은 암 백신일 수 있다. 암 백신은 면역 반응을 활성화할 수 있는 항원 또는 면역원을 포함할 수 있다. 암 백신은 또한 임의의 DNA 손상제를 포함할 수 있다. 암 백신과 조합된 플리나불린의 투여는 백신을 단독으로 사용하는 것과 비교하여, 백신에서 항원 또는 면역원을 발현하는 병리학적 및/또는 면역원성 표적에 대해 더 신속하게/더 빠르게, 및/또는 더 강렬하게, 및/또는 더 긴 기간 동안 더 큰 보호를 자극할 수 있다. 플리나불린과 같은 튜불린 결합제는, 암 백신과 조합하여 사용될 때, 암 세포 성장을 지연시키거나 또는 중단시키거나; 종양 수축을 유발하거나; 암이 재발하는 것을 방지하거나; 또는 다른 형태의 치료에 의해 사멸되지 않은 암 세포를 제거하는 보다 효과적인 면역 반응을 일으킬 수 있다.
DNA 손상제는 세포에서 DNA 손상을 유발하거나 또는 세포에서 내인성 DNA 손상의 복구를 억제할 수 있는 제제의 외인성 공급원을 포함한다. 일부 구현예에서, DNA 손상제는 항원 제시를 증가시키고 암 세포에 대한 면역 반응을 촉진할 수 있다. 일부 구현예에서, DNA 손상제는 화학 요법 및/또는 방사선 요법을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, DNA 손상제는 알킬화제(예를 들어, 사이클로포스파미드 및 이포스파미드), 백금 기반 화합물(예를 들어 시스플라틴, 카보플라틴 및 옥살리플라틴), 항대사성물질(예를 들어, 젬시타빈, 메토트렉세이트 및 페메트렉세드), 안트리사이클린(예를 들어 독소루비신 및 에피루비신), 토포이소머라제 I 억제제(예를 들어, 에토포시드), 토포이소머라제 II 억제제(예를 들어 이리노테칸 및 토포테칸), 방사선 유사제(예를 들어 블레오마이신) 및 다른 항-유사분열제(예를 들어 도세탁셀, 파클리탁셀 및 비노렐빈)를 포함할 수 있다. 본원에 기재된 DNA 손상제는 면역계가 면역 반응을 인식하고 이를 향해 시작할 수 있는 암 세포에서 새로운 외래 에피토프를 생성하여, 백신으로 기능하고 항암 면역 반응을 일으킬 수 있다. 플리나불린과 같은 튜불린 결합제는, DNA 손상제와 같은 암 백신과 조합하여 사용될 때, 향상된 항-종양 면역 반응 및 암 세포의 보다 효과적인 사멸을 일으킬 수 있다.
일부 구현예에서, 암 백신은 환자 자신의 종양 세포로부터 만들어질 수 있다(즉, 특정 환자의 종양에 고유한 특징에 대해 면역 반응을 시작하도록 맞춤화된다). 일부 구현예에서, 암 백신은 특정 유형의 종양에 의해 생성된 물질(항원 또는 면역원)로부터 만들어질 수 있다(즉, 종양이 항원 또는 면역원을 생성하는 임의의 환자에서 면역 반응을 시작한다).
일부 구현예에서, 암 백신은 수지상 세포(DC), 항원 제시 세포(APC) 또는 B-세포에 실질적으로 로딩된 암 항원 또는 암 면역원을 포함한다. 최초의 FDA-승인된 암 치료 백신인 시푸류셀-T(sipuleucel-T)는 환자의 혈액으로부터 항원-제시 세포(APC)의 유형인 수지상 세포라 불리는 면역계 세포를 단리함으로써 생성된다. 이들 세포는 백신 제조업체로 보내지며, 실험실에서 PAP-GM-CSF라고 불리는 단백질과 함께 배양된다. 이 단백질은 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자(GM-CSF)라고 불리는 단백질에 연결된 PAP로 이루어지며, 이는 면역계를 자극하고 항원 제시를 향상시킨다.
여러 전략을 사용하여 수지상 세포(DC), 항원 제시 세포(APC), 또는 B 세포에 암 항원을 로딩하였다: 1) 합성 펩티드 또는 정제된 단백질은 DC, APC, 또는 B 세포 표면 위에 펄스될 수 있다. 2) DC, APC, 또는 B 세포는 특이적 유전자 산물을 발현하도록 플라스미드 DNA, RNA, 또는 바이러스로 조작될 수 있다. 3) 종양 용해물, 종양 RNA, 종양 세포 용해물, 및 자가 포식소체는 APC 또는 미성숙 DC 또는 B 세포와 혼합되어 APC 또는 DC가 다중 펩티드를 처리하고 제시하도록 할 수 있다. 4) DC 또는 APC 또는 B 세포는 PEG 또는 전기천공을 통해 전체 종양 세포와 융합될 수 있다.
일부 구현예에서, 암 백신은 APC 기반 백신이다. 일부 구현예에서, 암 백신은 DC 기반 백신이다. 일부 구현예에서, 암 백신은 B 세포 기반 백신이다. 일부 구현예에서, 암 백신은 체크 포인트 억제제를 포함하지 않는다.
암 백신의 일부 예는 시푸류셀-T, 트라스투주맙, 리툭시맙, 오파투무맙, 알렘투주맙, 항체-약물 접합체(ADC) 예컨대 아도-트라스투주맙 엠탄신, 브렌툭시맙 베도틴; 블리나투모맙, 데닐류킨 디피톡스, 또는 탈리모겐 라허파렙벡을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
일 구현예에서, 암 백신은 종양-관련 항원인 "자기"-항원을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 암 백신 및 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)는 체액성 반응을 유도, 향상 또는 증대시키기 위해 애쥬번트 없이 투여된다. 일부 구현예에서, 암 백신 및 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)는 체액성 반응을 유도, 향상 또는 증대시키기 위해 애쥬번트와 함께 투여된다.
본 발명의 백신 및 방법에 사용하기에 적합한 항원 또는 면역원은 임의의 공급원으로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 백신을 제형화하는 데 사용하기 위한 감염원은 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(ATCC)을 포함하나 이에 제한되지 않는 상업적인 공급원으로부터 수득될 수 있다. 일부 구현예에서, 감염원은 비스포스페이트 및 약제학적으로 허용되는 담체와 조합되기 전에 세포 배양물 및/또는 동물에 전달된다. 다른 구현예에서, 적합한 항원 또는 면역원은 정제되지 않거나(또는 세포 용해물), 부분적으로 정제되거나(예를 들어, 세포 용해물이 제거됨), 또는 정제된다. 다른 구현예에서, 적합한 항원은 재조합적으로 제조된다.
일 구현예에서, 적합한 항원 또는 면역원은 상업적으로 이용가능한 백신(예를 들어, 백반을 포함하는 상업적으로 이용가능한 백신)에 존재한다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 조성물 및 방법에 사용하기 위한 상업적으로 이용가능한 백신은 예를 들어, 미국 식품의약국, 유럽 의약품 기구(EMA), 일본 후생노동성(MHW), 호주 식약처, 국가 식품약품 감독관리총국(SFDA)(중국), 및 캐나다 보건위생국과 같은 규제 기간에 의해 승인되었다.
본원에 기재된 조성물 및 방법에 사용하기에 적합한 상업적으로 적합한 백신은 예를 들어, 인간 및 수의학적 투여에 적합한 백신을 포함한다.
본 발명의 백신 및 방법에 사용하기 위한 상업적으로 이용가능한 백신의 예는 제한없이 하기 표 A에 나열된 것들을 포함한다.
표 A. 상업적으로 입수가능한 백신의 비제한적인 예
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
본 발명의 백신 및 방법에 사용하기에 적합한 추가의 상업적으로 이용가능한 백신은 예를 들어, www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/default.htm에서 찾을 수 있다.
일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 선천성 또는 체액성 면역력의 촉진제로서 기능한다. 일부 구현예에서, 플리나불린은 선천성 또는 체액성 면역력의 촉진제로서 기능한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 조성물은 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
일부 구현예에서, 조성물은 비경구로 투여된다. 일부 구현예에서, 조성물은 피하로, 근육내로, 정맥내로, 또는 비강내로 투여된다.
일부 구현예에서, 조성물은 액체 또는 고체 형태이다.
일부 구현예에서, 대상체는 인간이다. 일부 구현예에서, 대상체는 동물이다. 일부 구현예에서, 대상체는 포유동물이다.
튜불린 결합제(TBA)
일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 빈카 알카로이드(예컨대 빈블라스틴(VBL), 비노렐빈(VRL), 빈크리스틴(VCR), 및 빈데신(VDS)), 크립토파이신, 돌라스타틴, 탁산(예컨대 도세탁셀, 카바지탁셀, 및 파클리탁셀), 에포틸론, 디스코더몰라이드, 사이클로스트렙틴, 라울리말라이드, 타칼로노라이드, 페롤루사이드, 헤미아스터린, 콤브레타스타틴(예컨대 콤브레타스타틴 A-4(CA-4)), 콜히친, 및 2-메톡시에스트라디올(2-ME), 및 이의 약제학적으로 사용가능한 유도체, 염, 용매화물, 호변이성질체, 또는 입체이성질체, 및 이의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 플리나불린이다. 일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 플리나불린, 콜히친, 콤브레타스타틴 A-4, 도세탁셀, 파클리탁셀, 빈블라스틴, 및 빈크리스틴으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 튜불린 결합제의 양은 대상체에서 백신에 대한 면역 반응성을 자극하거나 또는 향상시키는 데 효과적이다. 일부 구현예에서, 플리나불린의 양은 대상체에서 백신에 대한 면역 반응성을 자극하거나 또는 향상시키는 데 효과적이다.
상기 기재된 백신 및 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)는 약제학적 조성물로 제형화될 수 있다. Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams and Wilkins(2005)에 개시된 것들과 같은 표준 약제학적 제형 기술이 사용되며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 따라서, 일부 구현예는 (a) 안전하고 치료 유효량의 본원에 기재된 백신; (b) 안전하고 치료 유효량의 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린); 및 (c) 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 이의 조합을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
용어 "약제학적으로 허용되는 담체" 또는 "약제학적으로 허용되는 부형제"는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항균제 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약제학적 활성 물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당업계에 잘 알려져 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 성분과 비호환성인 경우를 제외하고, 치료 조성물에서 이의 사용이 고려된다. 게다가, 당업계에서 통상적으로 사용되는 것과 같은 다양한 애쥬번트가 포함될 수 있다. 약제학적 조성물에 다양한 구성요소를 포함하기 위한 고려사항은 예를 들어, Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman and Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Pergamon Press에 기재되어 있으며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
약제학적으로 허용되는 담체 또는 이의 구성요소로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 락토스, 덱스트로스, 글루코스 및 수크로스와 같은 당; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 및 메틸 셀룰로스와 같은 셀룰로스 및 이의 유도체; 분말화된 트라가칸트(tragacanth); 맥아; 젤라틴; 활석; 스테아르산 및 마그네슘 스테아레이트와 같은 고체 윤활제; 칼슘 술페이트; 땅콩유, 면실유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 테오브로마의 오일과 같은 식물성 오일; 프로필렌 글리콜, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; 알긴산; TWEENS와 같은 유화제; 나트륨 라우릴 술페이트와 같은 습윤제; 착색제; 향미제; 타정제, 안정화제; 산화방지제; 보존제; 무발열원 수; 등장성 염수; 및 포스페이트 완충 용액이다.
대상 화합물과 함께 사용될 약제학적으로 허용되는 담체의 선택은 기본적으로 화합물이 투여되는 방식에 의해 결정된다.
투여
본원에 기재된 조성물은 바람직하게는 단위 투여 형태로 제공된다. 본원에 사용된 바와 같이, "단위 투여 형태"는 우수한 의료 관행에 따라 단일 용량으로 동물, 바람직하게는 포유동물 대상체에게 투여하기에 적합한 화합물의 양을 함유하는 조성물이다. 그러나, 단일 또는 단위 투여 형태의 제제는 투여 형태가 1 일 1 회 또는 요법 과정 당 1 회 투여됨을 의미하지 않는다. 이러한 투여 형태는 1 일 1 회, 2 회, 3 회 또는 그 이상 투여되는 것으로 고려되며 일정 기간(예를 들어, 약 30 분 내지 약 2-6 시간)에 걸쳐 주입으로 투여되거나, 또는 연속 주입으로 투여될 수 있고, 단일 투여가 특별히 제외되지는 않지만, 요법 과정 동안 1 회 초과로 주어질 수 있다. 당업자는 제형이 전체 요법 과정을 구체적으로 고려하지 않으며 이러한 결정이 제형보다는 치료 분야의 숙련자에게 남겨짐을 인식할 것이다.
상기 기재된 바와 같은 조성물은 다양한 투여 경로, 예를 들어, 경구, 비강, 직장, 국소(경피 포함), 안구, 뇌내, 두개내, 척수강내, 동맥내, 정맥내, 근육내, 또는 다른 비경구 투여 경로에 적합한 임의의 다양한 형태일 수 있다. 당업자는 경구 및 비강 조성물이 흡인에 의해 투여되고 이용가능한 방법론을 사용하여 제조된 조성물을 포함함을 인식할 것이다. 원하는 특정 투여 경로에 따라, 당업계에 잘 알려진 다양한 약제학적으로 허용되는 담체가 사용될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 예를 들어 고체 또는 액체 충전제, 희석제, 하이드로트로피(hydrotropy), 표면활성제, 및 캡슐화 물질을 포함한다. 화합물의 억제 활성을 실질적으로 방해하지 않는 임의적인 약제학적으로 활성 물질이 포함될 수 있다. 화합물과 함께 이용되는 담체의 양은 화합물의 단위 용량 당 투여를 위한 물질의 실질적인 양을 제공하기에 충분하다. 본원에 기재된 방법으로 투여 형태를 제조하기 위한 기술 및 조성물은 하기 참고문헌에 기재되어 있으며, 모두 본원에 참조로 포함된다: Modern Pharmaceutics, 4th Ed., Chapters 9 and 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002); Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989); 및 Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8th Edition (2004).
정제, 캡슐, 과립 및 벌크 분말과 같은 이러한 고체 형태를 포함하는 다양한 경구 투여 형태가 사용될 수 있다. 적합한 결합제, 윤활제, 희석제, 붕해제, 착색제, 향미제, 유동 유도제, 및 용융제를 함유하는 정제는 압축, 정제 분쇄, 장용성 코팅, 당 코팅, 필름 코팅, 또는 다중 압축될 수 있다. 액체 경구 투여 형태는 적합한 용매, 보존제, 유화제, 현탁제, 희석제, 감미료, 용융제, 착색제 및 향미제를 함유하는, 수용액, 에멀젼, 현탁액, 용액 및 비발포성 과립으로부터 재구성된 현탁액, 및 발포성 과립으로부터 재구성된 발포성 제제를 포함한다.
경구용 투여를 위한 단위 투여 형태의 제제에 적합한 약제학적으로 허용되는 담체는 당업계에 잘 알려져 있다. 정제는 전형적으로 칼슘 카르보네이트, 나트륨 카르보네이트, 만니톨, 락토스 및 셀룰로스와 같은 불활성 희석제; 전분, 젤라틴 및 수크로스와 같은 결합제; 전분, 알긴산 및 크로스카멜로스와 같은 붕해제; 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 및 활석과 같은 윤활제로서 통상적인 약제학적으로 호환가능한 애쥬번트를 포함한다. 이산화규소와 같은 활택제를 사용하여 분말 혼합물의 유동 특징을 개선시킬 수 있다. FD&C 염료와 같은 착색제는 외관을 위해 첨가될 수 있다. 아스파르탐, 사카린, 멘톨, 페퍼민트, 및 과일 향과 같은 감미료 및 향미제는 저작성 정제에 유용한 애쥬번트이다. 캡슐은 전형적으로 상기 개시된 하나 이상의 고체 희석제를 포함한다. 담체 구성요소의 선택은 맛, 비용, 및 보관 안정성과 같은 2차 고려사항에 의존하며, 이는 중요하지 않고 당업자에 의해 용이하게 이루어질 수 있다.
경구용 조성물은 또한 액체 용액, 에멀젼, 현탁액 등을 포함한다. 이러한 조성물의 제조에 적합한 약제학적으로 허용되는 담체는 당업계에 잘 알려져 있다. 시럽, 엘릭시르, 에멀젼 및 현탁액에 대한 담체의 전형적인 구성요소는 에탄올, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 액체 수크로스, 소르비톨 및 물을 포함한다. 현탁액의 경우, 전형적인 현탁제는 메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, AVICEL RC-591, 트라가칸트 및 나트륨 알기네이트를 포함하고; 전형적인 습윤제는 레시틴 및 폴리소르베이트 80을 포함하고; 전형적인 보존제는 메틸 파라벤 및 나트륨 벤조에이트를 포함한다. 경구용 액체 조성물은 또한 상기 개시된 감미료, 향미제 및 착색제와 같은 하나 이상의 구성요소를 함유할 수 있다.
이러한 조성물은 또한 통상적인 방법에 의해, 전형적으로 pH 또는 시간 의존적 코팅으로 코팅될 수 있어서, 대상 화합물이 원하는 국소 적용 부근의 위장관에서, 또는 원하는 작용을 연장하기 위한 다양한 시간에 방출되도록 한다. 이러한 투여 형태는 전형적으로 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 폴리비닐아세테이트 프탈레이트, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 프탈레이트, 에틸 셀룰로스, 유드라짓(Eudragit) 코팅, 왁스 및 셸락(shellac)을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 기재된 조성물은 임의적으로 다른 약물 활성을 포함할 수 있다.
대상 화합물의 전신 전달을 달성하기 위한 다른 조성물은 설하, 협측 및 비강 투여 형태를 포함한다. 이러한 조성물은 전형적으로 수크로스, 소르비톨 및 만니톨과 같은 가용성 충전제 물질; 및 아카시아, 미세결정질 셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스 및 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스와 같은 결합제 중 하나 이상을 포함한다. 상기 개시된 활택제, 윤활제, 감미료, 착색제, 산화방지제 및 향미제가 또한 포함될 수 있다.
본원에 개시된 약제학적 조성물에 사용될 수 있는 보존제는 벤즈알코늄 클로라이드, PHMB, 클로로부타놀, 티메로살, 페닐수은, 아세테이트 및 페닐수은 니트레이트를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 유용한 계면활성제는 예를 들어, Tween 80이다. 마찬가지로, 다양한 유용한 비히클이 본원에 개시된 안과 제제에 사용될 수 있다. 이들 비히클은 폴리비닐 알코올, 포비돈, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 폴록사머, 카르복시메틸 셀룰로스, 하이드록시에틸 셀룰로스 및 정제수를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
등장성 조절제는 필요에 따라 또는 편리하게 첨가될 수 있다. 이들은 염, 특히 나트륨 클로라이드, 칼륨 클로라이드, 만니톨 및 글리세린, 또는 임의의 다른 적합한 안과용으로 허용되는 등장성 조절제를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
생성된 제제가 안과용으로 허용되는 한 pH를 조정하기 위한 다양한 완충제 및 수단이 사용될 수 있다. 많은 조성물의 경우, pH는 4 내지 9일 것이다. 따라서, 완충제는 아세테이트 완충제, 시트레이트 완충제, 포스페이트 완충제 및 보레이트 완충제를 포함한다. 산 또는 염기가 필요에 따라 이들 제형의 pH를 조정하기 위해 사용될 수 있다.
안과용 제제에 포함될 수 있는 다른 부형제 구성요소는 킬레이트제이다. 유용한 킬레이트제는 에데테이트 디나트륨이지만, 다른 킬레이트제가 또한 그 자리에 또는 이와 함께 사용될 수 있다.
정맥내 투여를 위해, 본원에 기재된 조성물은 염수 또는 덱스트로스 용액과 같은 약제학적으로 허용되는 희석제에 용해되거나 또는 분산될 수 있다. NaOH, 나트륨 카르보네이트, 나트륨 아세테이트, HCl, 및 시트르산을 포함하나 이에 제한되지 않는 적합한 부형제가 원하는 pH를 달성하기 위해 포함될 수 있다. 다양한 구현예에서, 최종 조성물의 pH는 2 내지 8, 또는 바람직하게는 4 내지 7 범위이다. 산화방지제 부형제는 나트륨 비술파이트, 아세톤 나트륨 비술파이트, 나트륨 포름알데하이드, 술폭실레이트, 티오우레아, 및 EDTA를 포함할 수 있다. 최종 정맥내 조성물에서 발견되는 적합한 부형제의 다른 비제한적인 예는 나트륨 또는 칼륨 포스페이트, 시트르산, 타르타르산, 젤라틴, 및 덱스트로스, 만니톨, 및 덱스트란과 같은 탄수화물을 포함할 수 있다. 추가의 허용되는 부형제는 Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238-311 및 Nema et al., Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci and Tech 2011, 65 287-332에 기재되어 있으며, 둘 다 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 페닐수은 니트레이트, 티메로살, 벤제토늄 클로라이드, 벤잘코늄 클로라이드, 페놀, 크레솔, 및 클로로부탄올을 포함하나 이에 제한되지 않는 항균제가 또한 정균 또는 진균 용액을 달성하기 위해 포함될 수 있다.
정맥내 투여를 위한 조성물은 투여 직전에 멸균수, 염수 또는 물 중 덱스트로스와 같은 적합한 희석제로 재구성되는 하나 이상의 고체 형태로 간병인에게 제공될 수 있다. 다른 구현예에서, 조성물은 비경구로 투여할 준비가 된 용액에 제공된다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 투여 전에 추가로 희석되는 용액으로 제공된다. 본원에 기재된 화합물 및 또 다른 제제의 조합을 투여하는 것을 포함하는 구현예에서, 조합은 혼합물로서 간병인에게 제공될 수 있거나, 또는 간병인은 투여 전에 두 제제를 혼합할 수 있거나, 또는 두 제제는 별도로 투여될 있다.
일부 구현예에서, 플리나불린은 약 0.01-50 mg/m2 체표면적 범위 내의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 플리나불린은 약 0.01-0.1, 0.01-0.2, 0.01-0.3, 0.01-0.4, 0.01-0.5, 0.01-0.6, 0.01-0.7, 0.01-0.8, 0.01-0.9, 0.01-1, 0.01-2, 0.01-3, 0.01-4, 0.01-5, 0.01-6, 0.01-7, 0.01-8, 0.01-9, 0.01-10, 0.01-11, 0.01-12, 0.01-13, 0.01-13.75, 0.01-14, 0.01-15, 0.01-16, 0.01-17, 0.01-18, 0.01-19, 0.01-20, 0.01-22.5, 0.01-25, 0.01-27.5, 0.01-30, 0.1-0.5, 0.1-0.6, 0.1-0.7, 0.1-0.8, 0.1-0.9, 0.1-1, 0.1-2, 0.1-3, 0.1-4, 0.1-5, 0.1-6, 0.1-7, 0.1-8, 0.1-9, 0.1-10, 0.1-11, 0.1-12, 0.1-13, 0.1-13.75, 0.1-14, 0.1-15, 0.1-16, 0.1-17, 0.1-18, 0.1-19, 0.1-20, 0.1-22.5, 0.1-25, 0.1-27.5, 0.1-30, 0.1-40, 0.1-50, 0.25-0.5, 0.25-0.6, 0. 25-0.7, 0.25-0.8, 0.25-0.9, 0.25-1, 0.25-2, 0.25-3, 0.25-4, 0.25-5, 0.25-6, 0.25-7, 0.25-8, 0.25-9, 0.25-10, 0.25-11, 0.25-12, 0.25-13, 0.25-13.75, 0.25-14, 0.25-15, 0.25-16, 0.25-17, 0.25-18, 0.25-19, 0.25-20, 0.25-22.5, 0.25-25, 0.25-27.5, 0.25-30, 0.25-40, 0.25-50, 0.5-1, 0.5-2, 0.5-3, 0.5-4, 0.5-5, 0.5-6, 0.5-7, 0.5-8, 0.5-9, 0.5-10, 0.5-11, 0.5-12, 0.5-13, 0.5-13.75, 0.5-14, 0.5-15, 0.5-16, 0.5-17, 0.5-18, 0.5-19, 0.5-20, 0.5-22.5, 0.5-25, 0.5-27.5, 0.5-30, 0.5-40, 0.5-50, 1.5-2, 1.5-3, 1.5-4, 1.5-5, 1.5-6, 1.5-7, 1.5-8, 1.5-9, 1.5-10, 1.5-11, 1.5-12, 1.5-13, 1.5-13.75, 1.5-14, 1.5-15, 1.5-16, 1.5-17, 1.5-18, 1.5-19, 1.5-20, 1.5-22.5, 1.5-25, 1.5-27.5, 1.5-30, 1.5-40, 1.5-40, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 1-8, 1-9, 1-10, 1-11, 1-12, 1-13, 1-13.75, 1-14, 1-15, 1-16, 1-17, 1-18, 1-19, 1-20, 1-22.5, 1-25, 1-27.5, 1-30, 1-40, 1-50, 2.5-2, 2.5-3, 2.5-4, 2.5-5, 2.5-6, 2.5-7, 2.5-8, 2.5-9, 2.5-10, 2.5-11, 2.5-12, 2.5-13, 2.5-13.75, 2.5-14, 2.5-15, 2.5-16, 2.5-17, 2.5-18, 2.5-19, 2.5-20, 2.5-22.5, 2.5-25, 2.5-27.5, 2.5-30, 2.5-7.5, 3-4, 3-5, 3-6, 3-7, 3-8, 3-9, 3-10, 3-11, 3-12, 3-13, 3-13.75, 3-14, 3-15, 3-16, 3-17, 3-18, 3-19, 3-20, 3-22.5, 3-25, 3-27.5, 3-30, 3.5- 6.5, 3.5-13.75, 3.5-15, 2.5-17.5, 4-5, 4-6, 4-7, 4-8, 4-9, 4-10, 4-11, 4-12, 4-13, 4-13.75, 4-14, 4-15, 4-16, 4-17, 4-18, 4-19, 4-20, 4-22.5, 4-25, 4-27.5, 4-30, 5-6, 5-7, 5-8, 5-9, 5-10, 5-11, 5-12, 5-13, 5-13.75, 5-14, 5-15, 5-16, 5-17, 5-18, 5-19, 5-20, 5-22.5, 5-25, 5-27.5, 5-30, 6-7, 6-8, 6-9, 6-10, 6-11, 6-12, 6-13, 6-13.75, 6-14, 6-15, 6-16, 6-17, 6-18, 6-19, 6-20, 6-22.5, 6-25, 6-27.5, 6-30, 7-8, 7-9, 7-10, 7-11, 7-12, 7-13, 7-13.75, 7-14, 7-15, 7-16, 7-17, 7-18, 7-19, 7-20, 7-22.5, 7-25, 7-27.5, 7-30, 7.5-12.5, 7.5-13.5, 7.5-15, 8-9, 8-10, 8-11, 8-12, 8-13, 8-13.75, 8-14, 8-15, 8-16, 8-17, 8-18, 8-19, 8-20, 8-22.5, 8-25, 8-27.5, 8-30, 9-10, 9-11, 9-12, 9-13, 9-13.75, 9-14, 9-15, 9-16, 9-17, 9-18, 9-19, 9-20, 9-22.5, 9-25, 9-27.5, 9-30, 10-11, 10-12, 10-13, 10-13.75, 10-14, 10-15, 10-16, 10-17, 10-18, 10-19, 10-20, 10-22.5, 10-25, 10-27.5, 10-30, 11.5-15.5, 12.5-14.5, 7.5-22.5, 8.5-32.5, 9.5-15.5, 15.5-24.5, 5-35, 17.5-22.5, 22.5-32.5, 25-35, 25.5-24.5, 27.5-32.5, 2-20, t 2.5-22.5, 또는 9.5-21.5 mg/m2 체표면적 범위 내의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 플리나불린은 약 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.07, 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, 14.5, 15, 15.5, 16, 16.5, 17, 17.5, 18, 18.5, 19, 19.5, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27, 27.5, 28, 28.5, 29, 29.5, 30, 30.5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 mg/m2 체표면적의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 플리나불린은 약 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.07, 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, 14.5, 15, 15.5, 16, 16.5, 17, 17.5, 18, 18.5, 19, 19.5, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27, 27.5, 28, 28.5, 29, 29.5, 30, 30.5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 mg/m2 체표면적 미만의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 플리나불린은 약 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.07, 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, 14.5, 15, 15.5, 16, 16.5, 17, 17.5, 18, 18.5, 19, 19.5, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27, 27.5, 28, 28.5, 29, 29.5, 30, 30.5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 mg/m2 체표면적 초과의 용량으로 투여된다.
일부 구현예에서, 플리나불린 용량은 약 0.1 mg- 10mg, 0.1 mg-25mg, 0.1 mg-30mg, 0.1 mg-50 mg, 0.1 mg-75mg, 0.1 mg-100 mg, 0.5mg-10mg, 0.5 mg-25mg, 0.5 mg-30mg, 0.5 mg-50 mg, 0.5 mg-75mg, 0.5 mg-100 mg, 1 mg-10mg, 1 mg-25mg, 1mg-30mg, 1 mg-50 mg, 1 mg-75mg,1 mg-100 mg, 2mg-10mg, 2 mg-25mg, 2 mg-30mg, 2 mg-50 mg, 2 mg-75mg, 2 mg-100 mg, 3mg-10mg, 3 mg-25mg, 3 mg-30mg, 3 mg-50 mg, 3 mg-75mg, 3 mg-100 mg, 4 mg-100 mg, 5mg-10mg, 5 mg-25mg, 5 mg-30mg, 5 mg-50 mg, 5 mg-75mg, 5 mg - 300 mg, 5 mg -200 mg, 7.5mg-15mg, 7.5 mg-25mg, 7.5 mg-30mg, 7.5 mg-50 mg, 7.5 mg-75mg, 7.5 mg-100 mg, 7.5 mg - 200 mg, 10mg-20mg, 10mg-25mg, 10mg -50mg, 10mg-75mg, 10 mg - 100 mg, 15 mg - 30 mg, 15 mg - 50 mg, 15 mg - 100 mg, 20mg-20mg, 20 mg - 100 mg, 30 mg - 100 mg, 40 mg - 100 mg, 10 mg - 80 mg, 15 mg - 80 mg, 20 mg - 80 mg, 30 mg - 80 mg, 40 mg - 80 mg, 10 mg - 60 mg, 15 mg - 60 mg, 20 mg - 60 mg, 30 mg - 60 mg, or 약 40 mg - 60 mg이다. 일부 구현예에서, 투여된 플리나불린은 약 20 mg - 60 mg, 27 mg - 60 mg, 20 mg - 45 mg, 또는 27 mg - 45 mg이다. 일부 구현예에서, 투여된 플리나불린은 약 1mg-5mg, 1mg-7.5mg, 2.5mg-5mg, 2.5mg-7.5mg, 5 mg-7.5 mg, 5 mg-9 mg, 5 mg-10 mg, 5 mg-12mg, 5mg-14mg, 5mg-15 mg, 5 mg-16 mg, 5 mg-18 mg, 5 mg-20 mg, 5 mg-22 mg, 5 mg-24 mg, 5 mg-26 mg, 5 mg-28mg, 5mg-30mg, 5mg-32mg, 5mg-34mg, 5mg-36mg, 5mg-38mg, 5mg-40mg, 5mg-42mg, 5mg-44mg, 5mg-46mg, 5mg-48mg, 5mg-50mg, 5mg-52mg, 5mg-54mg, 5mg-56mg, 5mg-58mg, 5mg-60mg, 7 mg-7.7 mg, 7 mg-9 mg, 7 mg-10 mg, 7 mg-12mg, 7mg-14mg, 7mg-15 mg, 7 mg-16 mg, 7 mg-18 mg, 7 mg-20 mg, 7 mg-22 mg, 7 mg-24 mg, 7 mg-26 mg, 7 mg-28mg, 7mg-30mg, 7mg-32mg, 7mg-34mg, 7mg-36mg, 7mg-38mg, 7mg-40mg, 7mg-42mg, 7mg-44mg, 7mg-46mg, 7mg-48mg, 7mg-50mg, 7mg-52mg, 7mg-54mg, 7mg-56mg, 7mg-58mg, 7mg-60mg, 9 mg-10 mg, 9 mg-12mg, 9mg-14mg, 9mg-15 mg, 9 mg-16 mg, 9 mg-18 mg, 9 mg-20 mg, 9 mg-22 mg, 9 mg-24 mg, 9 mg-26 mg, 9 mg-28mg, 9mg-30mg, 9mg-32mg, 9mg-34mg, 9mg-36mg, 9mg-38mg, 9mg-40mg, 9mg-42mg, 9mg-44mg, 9mg-46mg, 9mg-48mg, 9mg-50mg, 9mg-52mg, 9mg-54mg, 9mg-56mg, 9mg-58mg, 9mg-60mg, 10 mg-12mg, 10mg-14mg, 10mg-15 mg, 10 mg-16 mg, 10 mg-18 mg, 10 mg-20 mg, 10 mg-22 mg, 10 mg-24 mg, 10 mg-26 mg, 10 mg-28mg, 10mg-30mg, 10mg-32mg, 10mg-34mg, 10mg-36mg, 10mg-38mg, 10mg-40mg, 10mg-42mg, 10mg-44mg, 10mg-46mg, 10mg-48mg, 10mg-50mg, 10mg-52mg, 10mg-54mg, 10mg-56mg, 10mg-58mg, 10mg-60mg, 12mg-14mg, 12mg-15 mg, 12 mg-16 mg, 12 mg-18 mg, 12 mg-20 mg, 12 mg-22 mg, 12 mg-24 mg, 12 mg-26 mg, 12 mg-28mg, 12mg-30mg, 12mg-32mg, 12mg-34mg, 12mg-36mg, 12mg-38mg, 12mg-40mg, 12mg-42mg, 12mg-44mg, 12mg-46mg, 12mg-48mg, 12mg-50mg, 12mg-52mg, 12mg-54mg, 12mg-56mg, 12mg-58mg, 12mg-60mg, 15 mg-16 mg, 15 mg-18 mg, 15 mg-20 mg, 15 mg-22 mg, 15 mg-24 mg, 15 mg-26 mg, 15 mg-28mg, 15mg-30mg, 15mg-32mg, 15mg-34mg, 15mg-36mg, 15mg-38mg, 15mg-40mg, 15mg-42mg, 15mg-44mg, 15mg-46mg, 15mg-48mg, 15mg-50mg, 15mg-52mg, 15mg-54mg, 15mg-56mg, 15mg-58mg, 15mg-60mg, 17 mg-18 mg, 17 mg-20 mg, 17 mg-22 mg, 17 mg-24 mg, 17 mg-26 mg, 17 mg-28mg, 17mg-30mg, 17mg-32mg, 17mg-34mg, 17mg-36mg, 17mg-38mg, 17mg-40mg, 17mg-42mg, 17mg-44mg, 17mg-46mg, 17mg-48mg, 17mg-50mg, 17mg-52mg, 17mg-54mg, 17mg-56mg, 17mg-58mg, 17mg-60mg, 20 mg-22 mg, 20 mg-24 mg, 20 mg-26 mg, 20 mg-28mg, 20mg-30mg, 20mg-32mg, 20mg-34mg, 20mg-36mg, 20mg-38mg, 20mg-40mg, 20mg-42mg, 20mg-44mg, 20mg-46mg, 20mg-48mg, 20mg-50mg, 20mg-52mg, 20mg-54mg, 20mg-56mg, 20mg-58mg, 20mg-60mg, 22 mg-24 mg, 22 mg-26 mg, 22 mg-28mg, 22mg-30mg, 22mg-32mg, 22mg-34mg, 22mg-36mg, 22mg-38mg, 22mg-40mg, 22mg-42mg, 22mg-44mg, 22mg-46mg, 22mg-48mg, 22mg-50mg, 22mg-52mg, 22mg-54mg, 22mg-56mg, 22mg-58mg, 22mg-60mg, 25 mg-26 mg, 25 mg-28mg, 25mg-30mg, 25mg-32mg, 25mg-34mg, 25mg-36mg, 25mg-38mg, 25mg-40mg, 25mg-42mg, 25mg-44mg, 25mg-46mg, 25mg-48mg, 25mg-50mg, 25mg-52mg, 25mg-54mg, 25mg-56mg, 25mg-58mg, 25mg-60mg, 27 mg-28mg, 27mg-30mg, 27mg-32mg, 27mg-34mg, 27mg-36mg, 27mg-38mg, 27mg-40mg, 27mg-42mg, 27mg-44mg, 27mg-46mg, 27mg-48mg, 27mg-50mg, 27mg-52mg, 27mg-54mg, 27mg-56mg, 27mg-58mg, 27mg-60mg, 30mg-32mg, 30mg-34mg, 30mg-36mg, 30mg-38mg, 30mg-40mg, 30mg-42mg, 30mg-44mg, 30mg-46mg, 30mg-48mg, 30mg-50mg, 30mg-52mg, 30mg-54mg, 30mg-56mg, 30mg-58mg, 30mg-60mg, 33mg-34mg, 33mg-36mg, 33mg-38mg, 33mg-40mg, 33mg-42mg, 33mg-44mg, 33mg-46mg, 33mg-48mg, 33mg-50mg, 33mg-52mg, 33mg-54mg, 33mg-56mg, 33mg-58mg, 33mg-60mg, 36mg-38mg, 36mg-40mg, 36mg-42mg, 36mg-44mg, 36mg-46mg, 36mg-48mg, 36mg-50mg, 36mg-52mg, 36mg-54mg, 36mg-56mg, 36mg-58mg, 36mg-60mg, 40mg-42mg, 40mg-44mg, 40mg-46mg, 40mg-48mg, 40mg-50mg, 40mg-52mg, 40mg-54mg, 40mg-56mg, 40mg-58mg, 40mg-60mg, 43mg-46mg, 43mg-48mg, 43mg-50mg, 43mg-52mg, 43mg-54mg, 43mg-56mg, 43mg-58mg, 42mg-60mg, 45mg-48mg, 45mg-50mg, 45mg-52mg, 45mg-54mg, 45mg-56mg, 45mg-58mg, 45mg-60mg, 48mg-50mg, 48mg-52mg, 48mg-54mg, 48mg-56mg, 48mg-58mg, 48mg-60mg, 50mg-52mg, 50mg-54mg, 50mg-56mg, 50mg-58mg, 50mg-60mg, 52mg-54mg, 52mg-56mg, 52mg-58mg, 또는 52mg-60mg이다. 일부 구현예에서, 플리나불린 용량은 약 0.1 mg, 0.3mg, 0.5mg, 0.75mg, 1mg, 1.25mg, 1.5mg, 1.75mg, 2mg, 2.5mg, 3mg, 3.5mg, 4mg, 5 mg, 약 10 mg, 약 12.5 mg, 약 13.5 mg, 약 15 mg, 약 17.5 mg, 약 20 mg, 약 22.5 mg, 약 25 mg, 약 27 mg, 약 30 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150mg, 또는 약 200 mg 초과이다. 일부 구현예에서, 플리나불린 용량은 약 0.5mg, 0.75mg, 1mg, 1.25mg, 1.5mg, 1.75mg, 2mg, 2.5mg, 3mg, 3.5mg, 4mg, 5 mg, 약 10 mg, 약 12.5 mg, 약 13.5 mg, 약 15 mg, 약 17.5 mg, 약 20 mg, 약 22.5 mg, 약 25 mg, 약 27 mg, 약 30 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150mg, 또는 약 200 mg 미만이다.
본원에 개시된 조성물의 투여는 경구로, 피하로, 정맥내로, 비강내로, 국소로, 경피로, 복강내로, 근육내로, 폐내로, 질로, 직장으로, 또는 안구내를 포함하나 이에 제한되지 않는 유사한 유용성을 제공하는 제제에 대해 허용되는 임의의 투여 방식을 통해 이루어질 수 있다. 경구 및 비경구 투여는 바람직한 구현예의 대상인 적응증을 치료하는 데 통상적이다.
치료 방법
일부 구현예는 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 백신 및 플리나불린을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예에서, 백신은 감염 질환 백신이다. 일부 구현예에서, 백신은 암 백신이다.
일부 구현예는 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 백신 및 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 백신에 대한 면역 반응은 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상된다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린제(예를 들어, 플리나불린) 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 림프구 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린제(예를 들어, 플리나불린) 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, B 세포 증식을 유도하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 유효량의 튜불린제(예를 들어, 플리나불린) 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 면역글로불린의 생산을 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 면역글로불린은 IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예는 암 백신 및 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료에서 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이며, 여기서 암 백신에 대한 면역 반응은 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상된다.
백신 및 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)는 별도로(예를 들어, 백신은 플리나불린이 대상체에게 투여되기 전 또는 후에 투여될 수 있음) 또는 단일 제형으로(예를 들어, 백신은 플리나불린과 동시에 투여될 수 있음) 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 튜불린제(예를 들어, 플리나불린) 및 백신을 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 백신을 투여하기 전 또는 후에 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)를 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예는 백신을 대상체에게 투여하고 백신 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 면역 반응을 향상시키는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 플리나불린일 수 있다. 일부 구현예에서, 튜불린 결합제는 빈카 알카로이드, 크립토파이신, 돌라스타틴, 탁산, 에포틸론, 디스코더몰라이드, 사이클로스트렙틴, 라울리말라이드, 타칼로노라이드, 페롤루사이드, 헤미아스터린, 콤브레타스타틴, 콜히친 및 2 메톡시에스트라디올로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
일부 구현예에서, 튜불린 결합제(예를 들어, 플리나불린)는 백신 투여 후 적어도 30 분, 1 시간, 2 시간, 3 시간, 4 시간, 5 시간, 6 시간, 7 시간, 8 시간, 9 시간, 10 시간, 11 시간, 12 시간, 15 시간, 18 시간, 20 시간, 24 시간, 36 시간, 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 6 일, 7 일, 8 일, 9 일, 또는 10 일에 투여된다. 일부 구현예에서, 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)는 백신 투여 후 1 일, 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 6 일, 7 일, 8 일, 9 일, 10 일, 12 일, 15 일, 또는 20 일 이내에 투여된다. 일부 구현예에서, 튜불린제(예를 들어, 플리나불린)는 백신 투여 후 1 시간-1 일, 1 시간-2 일, 1 시간-3 일, 1 시간-4 일, 1 시간-5 일, 1 시간-6 일, 1 시간-7 일, 1 시간-8 일, 1 시간-9 일, 1 시간-10 일, 1 일- 2일, 1 일-3 일, 1 일-4 일, 1 일-5 일, 1 일-6 일, 1 일-7 일, 1 일-8 일, 1 일-9 일, 1 일-10 일, 2 일 - 3 일, 2 일-4 일, 2 일-5 일, 2 일-6 일, 2 일-7 일, 2 일-8 일, 2 일-9 일, 2 일-10 일, 3 일-4 일, 3 일-5 일, 3 일-6 일, 3 일-7 일, 3 일-8 일, 3 일-9 일, 3 일-10 일, 4 일-5 일, 4 일-6 일, 4 일-7 일, 4 일-8 일, 4 일-9 일, 4 일-10 일, 5 일-6 일, 5 일-8 일, 5 일-10 일에 투여된다.
일부 구현예는 튜불린제(예를 들어, 플리나불린) 및 백신을 조합하는 단계를 포함하는, 본원에 기재된 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.
실시예
실시예 1.
플리나불린은 BCG 요법에서 B-세포 활성화를 향상시킨다
본 연구는 방광에 정착된 BCG의 용량을 증가시키는 방광내 BCG(바실루스 칼메트-게랭균) 요법의 유도 단계 동안 방광의 고등급 비근육 침윤성 요로상피 암종에 대한 플리나불린의 사용을 평가하기 위해 수행한다. 플리나불린은 BCG 항원을 면역-적격 세포에 제시하는 것을 촉진시켜, BCG의 면역치료 잠재력을 향상시킨다. BCG의 투여는 활성화된 B-림프구에 의해 항-BCG-항체 생산(IgM 및 IgG)을 유도하는 것으로 나타났다. 플리나불린을 투여하면, BCG-특이적 B-림프구 활성화가 증가한다. 플리나불린을 추가하면 BCG 효능을 개선시킬 있으며, 필요한 경우 BCG 용량 단계적 증가를 허용할 수 있는 동시에 더 나은 치료 반응을 촉진시킬 수 있다.
방광의 고등급 비근육 침윤성 요로상피 암종에 대한 2 배 용량 바실루스 칼메트-게랭균(BCG) 유도 요법을 사용한 플리나불린의 I/II 상 연구: 안전성 및 비열등성에 대한 연구를 수행한다.
I 상 연구의 1차 목적은 방광의 고등급 이행 세포 암종이 있는 환자에서 2 배 용량 BCG와 조합된 플리나불린의 최대 허용 용량을 결정하는 것이다. II 상 연구의 1차 목적은 3 개월째에 적어도 50% 반응률을 달성함으로써 2 배 용량 BCG와 조합된 플리나불린의 최대 허용 용량의 비열등성을 입증하는 것이다(종양 및 음성 세포 검사의 시각화 없음).
일부 2차 목적은 중간 추적 시간 간격(1 년에 RFS 및 PFS)의 효능을 평가하고, 대상체의 삶의 질, 방광 자극 및 통증, 뿐만 아니라 치료 및 최대 1 년 추적 동안 전반적인 건강 및 웰빙의 변화를 평가하는 것을 포함한다.
일부 상관적/탐색적 목적은 BCG 점적 주입 및 플리나불린 정맥 주입으로 치료 기간에 걸쳐 항-BCG IgM 및 IgG 수준의 시간 과정 및 규모 및 개시 시간을 결정하고, BCG 점적 주입 및 플리나불린 정맥 주입의 치료 시 소변의 사이토카인 생산(INF-g, IL-1, IL-2, IL-6, IL-10, IL-12p70, TNF-a)을 탐색하는 것을 포함한다.
이것은 공개 표지 I/II 상 연구로, 방광의 고등급 비근육 침윤성 요로상피 암종이 있는 환자에서 용량 단계적 증가 부분(I 상) 및 1-군 효능 연구(II 상)를 포함한다.
I 상: 최대 허용 플리나불린 용량(MTD) 결정. 적격한 환자는 2 배 용량 BCG 점적 주입과 조합하여 5mg/m2에서 30mg/m2로 4 가지 단계적 증가 용량 코호트 중 하나에서 정맥내로 플리나불린을 받는다. 이 단계는 플리나불린 및 BCG의 애쥬번트 요법에 대한 독성 및 MTD를 결정한다. 적어도 3 명의 환자가 각 코호트에 등록되어 있으며, 2 배 용량 BCG와 함께 5 mg/m2의 플리나불린에서 시작한다. 플리나불린의 용량은 초기 연구 약물 투여 후 처음 21 일부터의 안전성 데이터를 검토한 후 순차적인 환자 코호트에서 단계적 증가된다. MTD 용량은 임의의 용량 제한 독성(DLT)을 경험하는 3 명의 환자 중 0명 또는 6 명의 환자 중 2 명 미만에서 최대 용량 코호트로 결정된다. 이 MTD는 권장 2상 용량(RP2D)으로도 불리는 II 상 시험에 대한 용량일 것이다.
II 상: 효능 연구. 상기 I 상에서 선택된 플리나불린 용량은 II 상으로 넘어간다. MTD 용량을 받은 I 상 환자는 두번째 단계에 포함된다. 환자는 6-주의 유도 2 배 용량 BCG 및 플리나불린 요법 후, 3 개월째에 진료실 방광경 검사 및 양성 소변 세포 검사에서 종양의 증거로 정의된 종양의 재발(1차 효능 평가변수)에 대해 평가된다. 효능 평가를 위해, 2 가지 평가가 있으며 18 명 중 11 명 이하, 또는 36 명 중 26 명 이하의 환자가 반응을 나타내는 경우, 시험은 중단될 것이고, 치료는 충분한 활성이 아닌 것으로 간주된다. 연구에 대한 최소 반응율 목표는 3 개월째에 50% 반응율(유도 요법 후 종양 및 음성 소변 세포 검사의 시각화 없음)이며 원하는 반응률은 3 개월째에 70%이다. 50% 미만의 반응률은 허용되지 않는 것으로 간주된다. I/II 상 연구 둘 다에 필요한 총 개인의 수는 독성 및 반응 평가에 따라 54 명의 이하이다.
I 상의 경우, I 상에 대한 1차 평가변수는 AE/SAE의 발생률 및 중증도 및 AE로 인한 치료 중단이다. II 상의 경우, 1차 평가변수는 요법 유도 후 3 개월째에 RFS(무재발 생존; 즉, 종양 및 음성 소변 세포 검사의 비시각화)이다.
2차 평가변수는 다음을 포함한다: II 상: 1 년째에 RFS(무재발 생존; 즉, 종양 및 음성 소변 세포 검사의 비시각화); II 상: 1 년째에 PFS(무진행 생존; 즉, 향후 TUR에서 종양의 비상승); I 상 및 II 상: 미국 비뇨기과 학회 증상 지수(AUA IPSS)를 사용하여 측정된 삶의 질 변화[기간: 기준선에서 6 주까지, 및 치료 시작 후 3 개월 및 12 개월의 변화]; I 상 및 II 상: 삶의 질(QOL) 설문지를 사용한 삶의 질 변화[기간: 기준선에서 6 주까지, 및 치료 시작 후 3 개월 및 12 개월의 변화]; I 상 및 II 상: O'Leary-Sant 지수를 사용한 방광 자극 및 통증의 변화[기간: 기준선에서 6 주까지, 및 치료 시작 후 3 개월 및 12 개월의 변화]; I 상 및 II 상: 방광암 요법의 기능성 평가(FACT-BL)를 사용한 전반적인 건강 및 웰빙의 변화 [기간: 기준선에서 6 주까지, 및 치료 시작 후 3 개월 및 12 개월의 변화].
상관적/탐색적 평가변수는 다음을 포함한다: I 상 및 II 상에서: 시간 경과에 따른 항-BCG IgM 및 IgG 수준(역가); 및 I 상 및 II 상에서: 시간 경과에 따른 소변의 사이토카인(INF-g, IL-1, IL-2, IL-6, IL-10, IL-12p70, TNF-a) 수준.
I 상은 최대 허용 플리나불린 용량(MTD) 결정 연구를 수반한다. 이 단계는 플리나불린 및 BCG의 애쥬번트 요법에 대한 독성 및 MTD를 결정하는 용량 단계적 증가 연구이다.
II 상은 효능 연구 확립을 수반한다. 상기 I 상에서 선택된 플리나불린 용량은 II 상으로 넘어간다. 최적 용량을 받은 I 상 환자는 두번째 단계에 포함된다. 환자는 6-주의 유도 2 배 용량 BCG 및 플리나불린 요법 후, 3 개월째에 진료실 방광경 검사 및 양성 소변 세포 검사에서 종양의 증거로 정의된 종양의 재발(1차 효능 평가변수)에 대해 평가된다.
I 상 투약 레지멘: 투약 레지멘은 2 배 용량 BCG 유도 요법에 대한 표준 레지멘을 따르며, 즉 초기 TUR 후 2 주의 휴식 기간 후(병리학 결과 또한 이용가능하게 되는 시간 동안), 적격한 환자는 플리나불린과 함께 주 1 회 2 배 용량 BCG의 6-주 과정을 시작한다. 그 다음에 환자는 종양 재발 평가(방광경 검사 및 소변 세포 검사를 통해) 동안 첫번째 방광내 BCG 치료 후 3 개월(또는 마지막 2 배 용량 BCG + 플리나불린 치료 후 6 주)에 되돌아온다.
표 1. 용량 단계적 증가 일정
Figure pct00005
표 2. 용량 단계적 증가 결정 규칙
Figure pct00006
I 상 용량 단계적 증가: I 상은 6 명의 대상체 중 3 명으로 구성된 3 개의 코호트를 가질 수 있으며, 투약은 5 mg/m2 플리나불린 + 2 배 용량 BCG의 용량으로 코호트 1에서 시작한다. 3 명의 환자 중 1 명이 용량 제한 독성(부작용 등급 >2)을 경험하는 경우 3 명의 대상체가 더 추가된다. 환잔 3 명 중 0 명 또는 6 명 중 2 명 미만이 코호트 1에서 용량 제한 독성(등급 >2)을 경험했다면 용량은 다음 코호트(코호트 2)에서 단계적 증가된다. MTD 용량은 0/3 또는 <2/6 독성인 최고 용량 코호트로 결정된다. 최저 용량의 플리나불린(5 mg/m2)에서 BCG의 1 회 용량 단계적 감소만이 허용된다. 예를 들어: 독성이 조합된 13.5 mg/m2의 플리나불린과 2 배 용량 BCG를 I 상의 다음 수준으로 진행하는 것을 차단했다면 5 mg/m2의 플리나불린과 2 배 용량 BCG의 조합은 이 시험의 I 상 부분의 또 다른 수준에서 13.5 mg/m2의 플리나불린과 단일 용량 BCG를 계속 검사하는 대신 이 연구의 II 상으로 진행될 것이다. 연구의 I 상 부분을 완료 하기 위해 최대 24 명의 환자가 필요하다. II 상 시험에 대해 최적 용량(MTD 이하)이 사용되고, 최적 용량을 받은 환자는 II 상 시험의 부분으로 포함된다.
용량 제한 독성(DLT)은 첫번째 플리나불린 및 2 배 용량 BCG 용량 후 21 일 동안 각 환자에 대해 평가된다. 어떠한 의심되거나 또는 확인된 DLT는 시험 책임자(Principal Investigator)에게 즉시(24 시간 내에) 보고되어야 한다. DLT는 NCI CTCAE 버전 5.0에 따라 등급화된 다음 치료 관련 AE 또는 실험실 이상으로 정의된다: 등급 4 기저 질환과 관련이 없는 빈혈; 등급 3 임상적으로 유의한 출혈이 있는 혈소판감소증 또는 등급 4, 7 일 초과로 지속되고/되거나 혈소판 수혈이 필요한 혈소판감소증; 등급 4, 7 일 초과로 지속되는 호중구감소증; 하기 나열된 예외를 제외하고, ≥등급 3 비혈액학적 AE; ≥등급 3 최적 예방적 및 치유적 치료에도 불구하고 > 48 시간 지속되는 메스꺼움, 구토, 설사, 또는 전해질 불균형; ≥등급 3 과민증 반응(처음 발생하고 적절한 임상 관리로 6 시간 이내에 해결되지 않는 한); 연구 약물 관련 AE에서 회복된 후 > 21 일 치료 지연.
약물 투여: 계산된 용량(mg)의 플리나불린(바이알에서 4 mg/mL 농도)을 물 중 덱스트로스 5%(D5W)에 희석하고 말초로 또는 중추로 인라인 필터를 사용하여 IV 투여한다. 희석된 용량을 희석 후 4 시간 이내에 사용한다. 플리나불린을 항상 빛으로부터 보호한다(저장, 희석 전, 동안, 후). 주사기: 플리나불린 약물 제품을 D5W 백으로 옮기기 위해 10 mL 초과의 PVC 무함유 빛 보호용 앰버 주사기가 제안된다. PVC 무함유 빛 보호용 앰버 주사기가 이용가능하지 않은 경우, 빛에 대한 노출을 최소화해야 한다. 플리나불린 바이알에서 앰버 슬리브로 덮인 D5W 백까지의 이동 시간은 최소로 유지해야 하며, 1 분을 초과하지 않아야 한다. 약제학 약물 제조에 대한 지침은 연구 Pharmacy Manual에서 찾을 수 있다. 플리나불린 용량은 기준선 BSA를 기준으로 계산해야 한다. BSA가 이후에 기준선으로부터 ±10% 초과만큼 달라진다면, 후속 용량 계산을 위해 새로운 BSA 값을 사용해야 한다. 플리나불린 용량은 0.1 mg/m2 내지 100　mg/m2와 같은 용량 범위일 수 있다.
BCG 치료: BCG 치료는 부위에 대한 기관 표준에 따르며; BCG는 요도 카테터를 통해 전달될 것이다.
용량 선택: 2 배 용량의 BCG 사용에 대한 이론적 근거는 BCG 요법이 NMIBC 환자에서 더 높은 용량으로 및/또는 더 긴 기간 동안 사용될 때 더 높은 효능을 가짐을 나타낸 여러 연구에 기초한다. 그러나, 용량이 증가할수록 BCG 독성이 또한 증가하기 때문에, 더 높은 용량은 부수적인 독성에 의해 제한된다. 플리나불린의 사용, BCG 치료-관련 염증 및 관련 부작용은 완화될 수 있어서 더 높은 용량의 BCG가 허용될 수 있다.
50 ml 보존제 무함유 염수에 현탁된 BCG 바이알 2 개가 이 연구를 위한 용량일 것이다. BCG 현탁액의 제조는 무균 기술을 사용하고 FDA 승인된 라벨링 및 사용 정보에 따라 완료된다.
환자는 어떠한 열 또는 독감-유사 증상, 뿐만 아니라 반복된 점적 주입으로 강도가 증가하는 임의의 전신 증상, 또는 2-3 일 초과로 지속되는 국소 증상(빈도, 긴급성, 배뇨 시 작열감)을 담당 조사자에게 즉시 보고해야 한다. 환자가 지속적으로 열이 나거나 또는 BCG 감염과 일치하는 급성 열성 질환을 경험하는 경우, BCG 치료가 중단될 수 있고 환자는 전신 감염에 대해 즉시 평가받고 치료된다.
BCG의 전신 살포 모니터링: 전신 BCG 감염의 조기 식별을 보장하기 위해, 대상체는 전신 감염 증상에 대해 모니터링될 것이다. BCG 치료의 각 주기에 대해, 대상체는 치료 1-6 주의 2-4 일차(치료는 1 일차임)에 전화를 걸어 경험할 수 있는 임의의 증상에 대해 문의할 것이다. 게다가, 각 환자는 체온계 및 일기를 제공받으며 BCG 치료(1-6 주) 내내 아침 저녁마다 구강 온도를 기록하고 경험할 수 있는 임의의 다른 증상을 기록하도록 요청받는다.
용량 투여 시기: BCG 치료는 6-주 주기의 1 일차에 투여를 시작해야 한다. BCG 치료는 2, 3, 4, 5, 및 6 주에 7 일마다 반복된다. BCG 치료는 행정상의 이유로 인해 예정된 날짜 전 또는 후(7 일) 최대 1 일에 투여될 수 있다. 모든 시험 치료는 외래 환자 기준에서 기관 기준에 따라 투여된다.
치료 계획: 연구 치료는 주 당 1 회 방광내 2 배 용량 BCG 및 정맥내 플리나불린을 사용하여 6-주 주기로 투여된다. 체표면적(BSA)이 2.4 m2 초과인 환자의 경우, 투약은 플리나불린에 대해 2.4 m2의 최대 BSA를 사용하여 계산되어야 한다. BCG 투약은 다음과 같다: 각각 5 × 10^8 CFU를 함유하는 TICE 균주 2 개 바이알을 생리 식염수 50 cc에 현탁하여, 2 배 용량 강도를 달성할 것이다(BCG의 통상의 전체 용량은 생리 식염수 50 cc에 현탁된 5 × 10^8 CFU를 함유하는 TICE 균주 1 개 바이알이다).
실시예 2.
플리나불린은 오브알부민 면역화에 대한 B-세포 반응을 향상시킨다
면역화에 대한 B-세포 반응 증대에 따른 플리나불린의 효과를 평가하기 위해 연구를 수행하였다. 외래 단백질 오브알부민(OVA)과 함께 완전 프로인트 애쥬번트(CFA)의 에멀젼을 사용하여, 각각이 다양한 농도의 플리나불린(플리나불린 용량은 0.01 mg 내지 30 mg 범위임)을 함유하는 샘플을 제조하였으며, 대조군은 플리나불린 첨가 없이 제조하였다.　 정상의 건강한 마우스를 CFA+OVA 에멀젼 +/- 플리나불린의 피하 주사, 및/또는 백반+OVA 애쥬번트 +/- 플리나불린의 복강내 주사에 의해 면역화하였다(플리나불린 용량 그룹 당 n=5 마리 마우스).　 본 실시예에서 하기에 논의된 바와 같이 상이한 시점에, 동물을 채혈하여 혈청에서 OVA에 결합하는 IgG의 농도를 평가하기 위해 혈청을 수집하였다.　 플리나불린으로 면역화된 마우스는 플리나불린 없이 CFA+OVA 또는 백반+OVA(백반 애쥬번트에 유화된 OVA)로 면역화된 마우스보다 더 높은 농도의 항-OVA IgG를 나타냈으며, 이는 플리나불린이 면역화에 대한 B-세포 반응을 증대시킬 수 있음을 나타낸다.
완전 프로인트 애쥬번트에서 오브알부민 에멀젼의 용량 제조: 하나의 유리 바이알에 10 mg 분말 및 하나의 유리 바이알에 멸균된 내독소 무함유 생리수 10 mL, 및 하나의 유리 바이알에 CFA 10 mL를 함유하는 EndoFit™ 오브알부민 키트(InvivoGen, USA)를 양호한 상태에서 수용하고 1 일차까지 2-8℃에서 저장하였다. 멸균된 내독소 무함유 식염수를 사용 전에 실온에 도달하도록 하였다. BSL2 캐비넷 내부에서, 5 mL 멸균수를 10 mg의 OVA를 함유하는 바이알에 첨가하고 부드럽게 교반하여 균질한 2 mg/mL OVA 용액을 수득하였다. 2.5 mL의 CFA에, 2.5 mL의 OVA 용액을 첨가하였고; 혼합물을 2 개의 연결된 10 mL 잠금 주사기에 결렬하게 혼합함으로써 유화시켜 1 mg/mL OVA/CFA 에멀젼을 제조하였다. 장치를 5 분 동안 분쇄된 유리에 두어 유화물을 냉각시킨 다음, 혼합 및 냉각을 추가 2 회 반복하였다. 에멀젼이 소실되지 않는지 확인하기 위해 물에 한 방울 첨가하여 에멀젼의 안정성을 시험하였다. 에멀젼을 주사를 위해 5 개의 1 mL 주사기로 옮기고 면역화할 때까지 분쇄된 얼음에서 냉각시켰다. 유화 과정을 동물의 면역화 동안 추가 2.5 mL의 OVA 용액 및 2.5 mL의 CFA로 반복하여 제조 4 시간 내에 사용하였다.
표 3. 실시예 2의 연구에 예시된 제형
Figure pct00007
비히클 대조군의 용량 제조: 마이크로피펫을 사용하여 284 μL의 Tween-80(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트; Sigma, USA)을 앰버 바이알에 첨가하여 투약 당일에 비히클(대조군)을 제조하고 1 분 동안 볼텍싱하였다. 그 다음에 1,020 μL의 프로필렌 글리콜을 앰버 바이알에 첨가하고 15 분 동안 볼텍싱한 다음, 수조에서 30 분 초음파처리하였다. 마지막으로, 2,696 μL의 물 중 5% 덱스트로스(D5W)를 용액에 첨가하고 3 분 동안 볼텍싱하여 7.1% Tween 80(v/v), 25.5% 프로필렌 글리콜(v/v), 및 67.4% D5W(v/v)로 구성된 비히클 용액 4 mL를 수득하였다.
시험 물품의 용량 제조: 플리나불린 용액(Plin-A)을 0.75 mg/mL로 투약 당일에 제조하였다. 플리나불린 분말(3 mg)을 실온에서 별도의 빛 보호된 앰버 바이알로 칭량하였다. 마이크로피펫을 사용하여, 284 μL의 Tween-80을 앰버 바이알에 첨가하고 1 분 동안 볼텍싱하였다. 1,020 μL의 프로필렌 글리콜을 앰버 바이알에 첨가하고 15 분 동안 볼텍싱한 다음, 수조에서 30 분 동안 초음파처리하였다. 마지막으로, 2,696 μL의 물 중 5% 덱스트로스를 용액에 첨가하고 3 분 동안 볼텍싱하여 0.75 mg/mL 플리나불린 용액 4 mL를 수득하였다. 플리나불린 용액(Plin-B)을 1.0 mg/mL로 투약 당일에 제조하였다. 플리나불린 분말(3 mg)을 실온에서 별도의 빛 보호된 앰버 바이알로 칭량하였다. 마이크로피펫을 사용하여, 213 μL의 Tween-80을 앰버 바이알에 첨가하고 1 분 동안 볼텍싱하였다. 765 μL의 프로필렌 글리콜을 앰버 바이알에 첨가하고 15 분 동안 볼텍싱한 다음, 수조에서 30 분 동안 초음파처리하였다. 마지막으로, 2,022 μL의 물 중 5% 덱스트로스를 용액에 첨가하고 3 분 동안 볼텍싱하여 1.0 mg/mL 플리나불린 용액 3 mL를 수득하였다.
실시예 2의 연구에서 제형은 본원의 하기 표 3에 요약되어 있다. 플리나불린 농도의 잠재적 분석을 위해 미사용된 제형화된 시험 물품(용액)을 -80℃에서 저장하였다.
항-오브알부민 검정: 마우스 항-OVA IgG1 ELISA 키트(Cayman Chemical, USA)를 구입하여 검정을 수행하였다. 30 일차의 혈청 샘플을 1-대-2,000, 1-대-6,000 및 1-대-20,000 희석으로 검정하였다. 62 일차의 혈청 샘플을 1-대-2,000 및 1-대-20,000 희석으로 검정하였다.
검정 시약 및 표준 제조: 모든 시약은 사용 전에 실온에 두었다. 면역검정 완충 B 농축물(10X)의 하나의 바이알의 내용물을 90 mL의 물로 희석하여 검정 완충액을 제조하였다. 바이알을 헹궈 침전될 수 있는 임의의 염을 제거하였다. 5 mL의 세척 완축 농축물 및 1 mL의 Polysorbate 20을 탈이온수에 첨가하여 2,000 mL의 세척 완충액을 제조함으로써 세척 완충액을 제조하였다. 1 mL의 검정 완충액으로 재구성하여 200 ng/mL의 스톡 용액을 제조함으로써 표준을 제조하고 15 분 동안 부드럽게 혼합하였다. 표준 곡선의 경우, 스톡 200 ng/mL는 가장 높은 농도였으며, 검정 완충액은 0 표준이었다: 0 ng/ml. 연속 희석을 수행하기 위해, 8 개의 튜브를 1 번부터 8 번까지 라벨링하였고 250 μL의 검정 완충액을 2 번 내지 8 번 튜브에 첨가하였다. 500 μL의 스톡 용액(200 ng/mL)을 1 번 튜브에 첨가하였다. 피펫을 사용하여 1 번 튜브에서 250 μL의 용액을 옮겨 2 번 튜브에 첨가하고 부드럽게 혼합하였다. 다음으로, 250 μL의 용액을 2 번 튜브에서 제거하여 3 번 튜브에 첨가하였다. 3 번 튜브를 부드럽게 혼합하였다. 이 과정을 4 번 내지 8 번 튜브에 대해 반복하였다.
혈청 샘플 제조: 혈청 샘플을 -80℃ 냉동고에서 제거하여 젖은 얼음 상에서 1 시간 동안 해동시켰다. 30 일차의 혈청 샘플을 1:2,000, 1:6,000 및 1:20,000 희석으로 검정하였고; 62 일차의 혈청 샘플을 검정 완충액을 사용하여 1:2,000 및 1:20,000 희석으로 검정하였다.
대표적인 검정 절차: 표준, 대조군, 또는 희석된 100 μL의 샘플을 미리 결정된 ELISA 플레이트 맵에 따라 각각의 샘플 웰에 첨가하였다. 플레이트를 접착 스트립으로 덮고 수평 궤도 마이크로플레이트 셰이커에서 실온에서 2 시간 동안 배양하였다. 2 시간 배양 후, 웰을 400 μL의 세척 완충액으로 4 회 세척하였다. 마지막 세척 후, 남아있는 세척 완충액을 경사법을 통해 제거하였다. 그 다음에 플레이트를 뒤집고 깨끗한 종이 타월로 블롯팅하였다. 100 μL의 염소 항-마우스 IgG1 HRP 접합체를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 새로운 접착 스트립으로 덮고 수평 궤도 마이크로플레이트 셰이커에서 실온에서 추가 1 시간 동안 배양하였다. 1 시간 배양 후, 웰을 400 μL의 세척 완충액으로 다시 4 회 세척한 다음 100 μL의 TMB 기질 용액을 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 빛으로부터 보호하면서 실온에서 30 분 동안 배양하였다. 30 분 배양 후, 100 μL의 정지 용액을 각 웰에 첨가하였다. 각 웰의 광학 밀도를 450 nm로 설정된 마이크로플레이트 판독기(SpectraMax i3X, Molecular Devices)를 사용하여 30 분 내에 결정하였다.
동물 시험 설정:
종 및 계통: 마우스, C57BL6.
성별 및 개체 수: 암컷, 그룹 당 25 마리, 3 그룹, 대체용 5 마리(총 80 마리 마우스).
연령: 마우스는 도착 시 대략 5 주령이었다. 마우스는 2018년 9월 4일(± 3 일)에 태어났다.
체중: 마우스 체중은 1 일차에 15.30 내지 19.70 g 범위였다.
공급원: 마우스는 Jackson Laboratory로부터 구입하였다.
식별: 개별 마우스를 귀표로 식별하였다. IACUC 프로토콜 번호, 공급업체, 종/계통, 성별, 그룹 지정, 및 개별 동물 연구 번호를 지정하는 케이지 카드를 각 케이지에 부착하였다.
탈락 및 대체: 면역화 전에 이 연구에 사용된 탈락 및 대체는 없었다.
시험 시스템 및 동물 수에 대한 근거: C57BL6 마우스를 연속 혈액 수집을 위한 저차 동물로서 과거 사용에 기초하여 본 연구를 위해 선택하였다. 요청된 동물의 수는 과학적 근거, 규제 요건 및 통계적 고려사항에 기초하였다. 본 연구에 사용된 동물의 수는 의사 결정을 위해 해석가능한 데이터를 생성하는 데 필요한 최소한의 것이었다. 규제 기관은 일반적으로 그룹 당 3 내지 15 마리의 동물의 그룹 크기가 잘 설계된 연구에서 시험 물품 관련 효과를 결정하기에 충분하였음을 나타냈다. 의뢰자는 시험 물품의 평가에 적절한 그룹 크기; 즉 5 개의 연구 하위그룹 각각에서 3 개의 그룹에 대해 그룹 당 5 마리 동물을 결정하였다.
살아있는 동물을 수반하는 모든 동물 사육 및 연구 절차는 국제 실험 동물 관리 평가 인증 협회(AAALAC)에 의해 공인된 동물 연구 시설에서 수행하였다. 축산 및 관리에 대한 표준은 미국 농무부(USDA) 동물 복지법(9 CFR 1, 2, 및 3 부), 실험실 동물 사용 관리 지침(The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)(8th Edition, Revised 2011, National Academy Press, Washington, DC, 2011) 및 연구 시설의 표준 운용 절차(SOP)에서 찾은 것들이었다.
사육: 연구 전반에 걸쳐, 마우스를 흡수성 침구 물질이 있는 폴리카보네이트 케이지에서 케이지 당 2-5 마리씩 쌍을 이루어 사육하였다. 케이지는 실험실 동물 사용 관리 지침에 제시된 표준을 준수하였다.
강화: 마우스는 연구 시설의 SOP에 따라 강화 항목(둥지 및 사육 물질)을 제공받았다.
순응: 마우스는 연구 시설에 도착하고 적어도 3 일 후에 순응하였다.
수의학 관리: 담당 수의사는 살아있는 동물의 연구 단계 동안 대기중이었다.
온도: 환경적 제어는 18℃ 내지 29℃ ± 3℃를 유지하도록 설정하였다.
습도: 환경적 제어는 30% 내지 70% 습도 ± 5% 범위를 유지하도록 가능한 한 밀접하게 모니터링하였다.
빛: 광원은 표본 수집 및 연구 수행에 필요한 경우를 제외하고 12 시간/12 시간 켜짐/꺼짐 주기로 조명하였다.
동시 약제: 동시 약제는 이 연구에 제공되지 않았다.
사료: 마우스는 Envigo Teklad 설치류 사료 2018C(Lot #: 05212018; 만료일: 2018년 11월 21일)를 제공받았다.
물: 마우스는 시영 수돗물을 임의로 제공받았다. 물은 보충가능한 물병을 통해 제공하였다. 실험실에 공급하는 도시 용수(미국 캘리포니아주 샌디에이고 소재의 샌디에이고 수도국)를 연구 시설의 SOP에 따라 오염물에 대해 정기적으로 분석하여 어떠한 것도 연구 결과에 부정적인 영향을 미칠 수 있는 수준으로 존재하지 않음을 확인하였다.
오염 진술: 사료, 물, 또는 침구에서 알려진 오염물은 이 연구에서 시험 물품을 방해할 것으로 예상되지 않았다.
위생: 실내 및 장비 위생 절차를 연구 시설의 적용가능한 SOP 및 실험실 동물 사용 관리 지침(The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)에 언급된 지침에 따라 수행하였다. 직원은 호흡기 및 적절한 개인 보호 장비를 착용하였다.
임상적으로 병들거나, 빈사 상태거나, 또는 사망한 채로 발견된 동물의 취급: 임상적으로 병들거나 또는 빈사 상태의 마우스를 안락사시키려는 결정은 담당 수의사 및 의뢰자의 연구 모니터 또는 가능한 경우 이들의 피지명자와 가능하게 협력한다는 점에서 연구 책임자의 책임이었다. 안락사 방법은 The Euthanasia of Animals: 2013 Edition(J. Am. Vet. Med. Assoc., 218:669-696, 2013)에 대한 미국 수의사 협회 지침에 따라 사용하였다. 사망했거나 빈사 상태로 발견된 마우스를 연구 책임자의 요청에 따라 총체적으로 부검하고 연구 시설의 SOP에 따라 처분하였다.
안락사: 조직 수집 전에 흡입된 이소플루란을 통해 마우스를 마취시켰다. 반사 핀칭 기술을 사용하여 확인된 바와 같이, 깊은 마취가 발생할 때까지 마우스를 2-5% 이소플루란에 노출시켰다. 샘플 수집 설계의 일부로서, 절개 없이 심장에 삽입된 25G 바늘 및 주사를 사용하여 마우스에서 채혈하였다. 이 혈액 수집 및 경추 탈구는 사체 처분 전에 사망을 확인하는 2차 방법으로 역할을 하였다.
투약 일정:
표 4. 실시예 2의 연구에 예시된 투약 일정
Figure pct00008
연구 지속기간: 이 연구의 살아있는 단계 부분은 순응을 포함하지 않는 62 일이었다.
무작위화: 마우스를 면역화 당일에 치료 그룹으로 체중에 따라 공식으로 무작위화하였다.
금식: 이 연구에서 마우스는 금식하지 않았다.
면역화 투여: 모든 75 마리 마우스는 연구 1 일차(2018년 10월 17일)에 피하 투여를 통해 동물 당 100 μL로 CFA 유화 중 100 μg 용량의 OVA를 받았다. 피하 용량은 동물의 등쪽 표면 상에 25G 바늘을 사용하여 투여하였다. OVA/CFA 유화를 투여 사이에 젖은 얼음 상에서 유지하였고 각 제조 후 4 시간 이내에 사용하였다.
시험 물품 투여: 각 동물은 하기 표 4에 나타낸 바와 같이 투약 당 10 내지 15 μL/g로 26G 바늘을 통해 복막내로 투여된 시험 물질을 가졌다. 면역화 날짜(2018년 10월 17일)와 관련한 투약 날짜가 또한 표 4에 나타내어 있다.
면역화 및 시험 물질의 투여에 대한 정당성: CFA 중 OVA로의 주사를 피하로(SC) 투여하여 면역화를 유도하였다. 시험 물품(예를 들어, 플리나불린)을 의뢰자의 요청에 따라 IP 투약을 통해 투여하였다. 시험 물질은 이전 연구에서 IP 경로에 따라 우수한 약동학을 가지고 있는 것으로 입증되었으므로 이 경로를 사용하여 시험 물질을 전달하였다. 환자에서 보이는 약동학을 더 잘 모델링하기 위해 시험 물질을 하루에 2 회(BID), 3 시간 간격으로 전달하였다(마우스에서 혈장 제거 반감기는 ~1.5-2 시간인 반면, 인간에서 ~5-6 시간이다).
관찰, 측정, 및 표본:
신체 검사: 자격이 있는 연구 조사자는 투약 전에 일반적인 신체 검사를 수행하였다. 일반적인 신체검사는 피부, 이동성, 외부 구멍, 행동, 및 외부 자극에 대한 반응을 포함하나 이에 제한되지 않았다. 신체 검사는 2019년 10월 11일에 수행하였다. 모든 동물은 정상이었고 연구에 대한 무작위화 전에 건강한 것으로 간주되었다.
빈사 상태/ 사망률: 모든 동물을 사망률/ 빈사 상태에 대해 평일 동안 일일 2회(아침 및 오후), 및 주말 또는 휴일에 일일 1회 관찰하였다.
상세한 임상 관찰: 예정된 상세한 임상 관찰은 이 연구에서 수행되지 않았다. 어떠한 이유로 일일 빈사 상태/사망률을 확인하는 동안 훈련된 직원에 의해 표시된 마우스에서 예정되지 않은 임상 관찰이 이루어졌다.
체중: 체중은 매주 1 회 측정하였다. 연구에 사용된 임의의 동물이 치료되는 날에, 연구에 사용된 모든 마우스에서 체중을 측정하였다.
음식 소비: 음식 소비는 이 연구에서 기록하지 않았다.
혈액 샘플 수집: 전혈 샘플을 1 일차(면역화 전), 8 일차, 및 30 일차에 수집 당 100 μL로 턱밑 정맥 또는 안구뒤를 통해 응고 활성제 튜브에 수집하였다. 전혈의 최대 부피를 62 일차에 종료 시 심장 천자를 통해 응고 활성제 튜브에 수집하였다. 모든 혈액 샘플을 실온에서 응고시키고, 주변 온도(대략 20-25℃)에서 3,000 RPM으로 10-15 분 동안 원심분리하고, 혈청 상청액을 각 혈청 샘플에 대해 깨끗한 저온 바이알로 옮겼다. 혈청 상청액은 분석 준비가 될 때까지 -80℃(± 12℃)에서 동결 저장하였다.
IgG 항체 항-OVA의 측정: 마우스 OVA 특이적 항체를 ELISA에 의해 측정하였다. IgG1 항-OVA를 30 일차에 샘플 수집 후 상업적으로 이용가능한 ELISA 키트(Cat. #: 500830, Cayman Chemical 정량적 ELISA)를 사용하여 측정한 다음, 62 일차에 샘플 수집 후 다시 측정하였다.
안락사, 조직 수집, 및 조기 사망/예정되지 않은 희생: 대체 동물을 마지막 하위그룹의 마지막 치료 투여 후 48 시간 이내에 안락사시켰다. 모든 생존 동물을 62 일차에 마지막 혈액 수집을 위해 희생시켰다. 병들거나 또는 빈사 상태/사망률의 징후를 문서화하였다. 연구 책임자는 연구 모니터와 협의하여 사망 시점에 마우스에 안락사가 필요함을 결정하였다. 안락사 방법은 동물 안락사에 대한 AVMA 지침: 2013년 판(AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2013 Edition)에 따라 사용하였다. 사망했거나 또는 빈사 상태로 발견된 마우스는 연구 책임자의 요청에 따라 처분하였다.
결과:
예정되지 않은 임상 관찰/ 치사율 확인: 하위그룹 I에서 15 mg/kg으로 투약된 그룹 3의 3 마리 동물(동물 #: 3501, 3503, 3505)에서는 시험 물품 투여 후 1 일 이내에 접촉 시 감소된 활성, 불규칙한 호흡, 탈수, 및 체온 저하를 포함하는 임상 관찰을 발견하였다. 연구 기간 동안 발견된 3 마리 동물의 사망이 플리나불린 치료와 관련될 수 있을 정도로, 플리나불린의 후속 용량을 낮췄다. 나머지 하위그룹 II-V에서 그룹 3 동물은 10 mg/kg(상기 표 3-4에서 "*"로 나타냄)으로 투약받았다. 본 실시예에서 하기 기재된 실험 관찰은 더 낮은 용량(10-mg/kg) 마우스에 초점을 맞추었다.
체중 결과: 도 1b-1f에 제시된 바와 같은 체중 평균은 CFA 중 오브알부민으로 1 일차에 면역화 후 3 가지 용량 그룹(0 mg/kg, 7.5 mg/kg, 및 10 mg/kg; 하루에 2 회, 3 시간 간격으로 IP 투약됨)에 대해 평가하였다. 용량 그룹은 5 개의 하위그룹(1-5)으로 나누었으며, 시험 물품을 각각 1 일차(면역화 후 1 시간; 도 1a에서 10 mg/kg 그룹 없음), 3 일차, 6 일차, 14 일차, 또는 28 일차에 투여하였다. 도 1a-1f에 제시된 바와 같이, 시험 물품 투여로 인한 체중 경향은 없었다. 도 2는 그룹 1-3 및 이의 하위그룹 중에서 1 일차 내지 62 일차 사이의 평균 체중 변화를 예시한다(상기 표 4에 기재된 바와 같음). 도 1-2에 제시된 바와 같이, 시험 물품 투여로 인한 체중 경향은 없었다. 일반적으로, 모든 체중은 1 일차 내지 62 일차 사이에 증가하였으며, 1 일차 면역화 후 모든 그룹에 대한 평균 체중은 약간 감소하였다.
혈청에서 IgG 항체 항-OVA 수준의 결과: 완전 프로인트 애쥬번트(CFA) 중 오브알부민(OVA)으로 마우스의 피하 면역화 후 30 일차 및 62 일차에 오브알부민 IgG1 농도에 대해 혈청을 평가하였다. 마우스 혈청 내 OVA IgG1의 농도는 ELISA 키트에 의해 검출하였다. 30 일차에 혈청 내 OVA IgG1의 농도는 1:2,000, 1:6,000 및 1:20,000 희석 데이터(표준 범위를 벗어난 데이터는 제외됨)로부터 평균화되었다. 62 일차에 혈청 내 OVA IgG1의 농도는 1:20,000 희석 단독의 결과였다. 혈청 OVA IgG1 수준의 높은 변이는 도 3a-3f에서 각각 30 일차 및 62 일차에 비히클 그룹에서 발견되었다. 개별 하위그룹에서, 7.5 및 10 mg/Kg의 플리나불린은 30 일차 및 62 일차 샘플 모두에서, 5 개의 하위그룹 중 4 개에서 항-OVA에 대한 억제 효과를 나타내었다(도 4c-4j). 면역화 1 시간 후 플리나불린이 투여된 하위그룹 1에서, 플리나불린은 통계적 유의성에 도달하지 않고 30 일차에 OVA IgG1의 생성을 용량 의존적으로 증가시켰다(도 4a). 플리나불린은 하위그룹 1에서 7.5 mg/kg의 용량으로 62 일차에 OVA IgG1 생성을 유의하게 증가시켰다(도 4b). 도 3-4에 제시된 바와 같이, 플리나불린은 오브알부민 면역화 1 시간 후 투여하였을 때 항-OVA 반응이 증가하는 경향이 있었고 이는 7.5 mg/kg, IP BID(3 시간 간격)로 면역화 후 62 일차에 유의성에 도달하였으며; 이 그룹은 연구에서 임의의 그룹의 가장 높은 평균 항-OVA IgG1 농도를 가졌다. 플리나블린을 면역화 후 하루, 3, 6, 14 또는 28 일 동안 BID 투여하였을 때, 항-OVA IgG1 농도는 유의하게 감소하거나, 또는 플리나불린 치료에 의해 감소되는 경향이 있었다.
실시예 3.
튜불린 결합제는 수지상 세포에 의해 유도된 T-세포 반응을 향상시킨다
인간 말초 CD14 양성 단핵구를 인간 공여자로부터 수집하고, 이후에, 분화시키고 CD14+ 수지상 세포(DC)로 성숙시켰다. 인간 CD4 양성 T-세포를 또 다른 인간 공여자로부터 별도로 수집하였다. 수집된 CD4+ T 세포를 혼합 림프구 반응(MLR)에서 CD14+ DC와 조합하였다.　 이 실시예에서, 튜불린 결합제를 각각 단핵구 분화 단계, 수지상 세포 성숙 단계, 및 CD14+ DC와 CD4+ T 세포의 조합에 의한 T-세포 활성화 단계에 첨가하였다.
사용된 시약 및 장비: Corning® 96-웰 투명 편평 바닥 폴리스티렌 TC-처리된 마이크로플레이트(Corning Inc., USA); Corning® 96-웰 투명 둥근 바닥 TC-처리된 마이크로플레이트(Corning Inc., USA); Nunc™ EasYFlask™ 25 cm2 세포 배양 플라스크(Thermo Scientific, USA); RPMI1640 배지(Gibco Co., USA); FBS(Gibco Co., USA); DMSO(Sigma-Aldrich, USA); ACCUSPIN™ System-Histopaque®-1077(Sigma-Aldrich, USA); IFN-γ ELISA 키트(R&D Systems, USA); IL-2 ELISA 키트(R&D Systems, USA); LS 칼럼(Miltenyi Biotec, USA); CD4+ T 세포 단리 키트(Miltenyi Biotec, USA); CD14 마이크로비드(Miltenyi Biotec, USA); ImmunoCult™ 수지상 세포 배양 키트(STEMCELL Technologies, USA); FACS 완충액: PBS + 2% FBS; EnVision Multi Label Reader 2104-0010A(PerkinElmer, USA); CO2 Water Jacketed Incubator(SANYO, Japan); Chongguang XDS-1B 도립 현미경(Chongqing Guangdian Corp., China); Eppendorf® Centrifuge(Sigma-Aldrich, USA); 및 SpectraMax Plus 96-웰 마이크로플레이트 판독기(Molecular Devices Corp., USA).
공여자에서 인간 PBMC의 단리: 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)를 다음과 같이 단계 (1a)-(1d)에 따라 인간 전혈에서 단리하였다: (1a) Histopaque-1077을 멸균된 50-mL 원심분리 튜브에 피펫팅하였고; 동일한 부피의 전혈을 혈액-Ficoll 경계의 교반 없이 Histopaque-1077 위에 조심스럽게 놓았다. (1b) 그 다음에 튜브를 400×g로 30 분 동안 원심분리하였다. 상단의 혈장 층을 흡입하였고; 백색의 반투명한 중간층(PBMC 함유)을 새로운 멸균된 원심분리 튜브로 조심스럽게 옮겼다. (1c) 수득된 단핵 세포를 무혈청 RPMI1640 배지로 2 내지 3 회 세척하였고; 튜브를 250×g로 10 분 동안 스핀 다운하였다. (1d) PBMC 세포 펠릿을 RPMI1640 배지에 재현탁하였다.
PBMC에서 CD14+ 단핵구의 단리: 연구 1 일차에, PBMC 세포를 상기 (1a)-(1d)에 따라 인간 공여자에서 수득하였다. 그 다음에 단핵구를 다음과 같이 단계 (2a)-(2k)에 따라 동일한 날(1 일차)에 이들 PBMC에서 단리하였다: (2a) PBMC 세포의 수를 결정하였다. (2b) 세포 현탁액을 300×g로 10 분 동안 원심분리하였고; 상청액을 완전히 흡입하였다. (2c) 세포 펠릿을 107 개의 총 세포 당 80 μL의 FACS 완충액에 재현탁하였다. (2d) 107 개의 총 세포 당, 20 μL의 CD14 마이크로비드를 첨가하였다. (2e) 웰을 혼합하고 냉장고(2 내지 8℃)에서 15 분 동안 배양한다. (2f) 107 개의 세포 당 1 내지 2 mL의 FACS 완충액을 첨가하여 세포를 세척하고 ×1500 rpm으로 10 분 동안 원심분리하였다. (2g) 세포를 500 μL의 FACS 완충액에서 최대 108 개 세포로 재현탁하였다. (2h) 칼럼을 적합한 MACS 분리기의 자기장에 배치하였다. (2i) 칼럼을 3 mL의 FACS 완충액으로 헹궈 준비하였다. (2j) 세포 현탁액을 칼럼 위에 적용하였다. 통과된 비표지된 세포를 수집하였고 칼럼을 3 mL의 FACS 완충액으로 각각 3 회 세척하였다. 비표지된 세포 분획인 총 유출물을 수집하였다. FACS 완충액을 3 회 첨가하여 세척 단계를 수행하였다. 칼럼 저장소가 비었을 때만 새로운 완충액을 첨가하였다. (2k) 그 다음에 칼럼을 분리기에서 제거하고 적합한 수집 튜브에 배치하였다. 5 mL의 FACS 완충액을 칼럼 위에 피펫팅하였다. 플런저(plunger)를 칼럼으로 단단히 밀어 자기적으로 표지된 세포를 제거하였다. 이 분획은 CD14 양성 단핵구를 나타낸다.
단핵구의 CD14+ 수지상 세포로의 분화: (2k)에서 수득된 CD14 양성 단핵구로부터, 다음과 같이 단계 (2l)-(2p)에 따라 수지상 세포(DC)를 분화하였다: (2l) 5 mL의 ImmunoCult™ DC 분화 배지 당 5 × 106 개의 세포를 재현탁하고 잘 혼합하였다. 그 다음에 5 mL의 세포 현탁액을 T-25 cm2 플라스크에 첨가하였고 세포를 37℃ 및 5% CO2에서 3 일 동안 배양하였다. (2m) 반면에, 동시에, 단핵구를 6-웰 플레이트의 웰에서 각각 3, 1, 0.3, 0.1, 0.01 및 0 μM 플리나불린으로 처리하였고 3 일 동안 배양하였다. (2n) 4 일차에, 피펫팅에 의해 배지를 T-25 cm2 플라스크에서 제거하고 14-mL 원심분리 튜브에 첨가하였다. 5 mL의 신선한 ImmunoCult™ DC 분화 배지를 배양 플라스크에 신속하게 첨가하였다. (2o) 배지 및 세포(단계 (2n)에서 수득)를 함유하는 14 mL 튜브를 300×g로 10 분 동안 원심분리하였다. 상청액을 제거하고 버렸다. 세포를 작은 부피(즉 50 μL 또는 원래 부피의 최대 10%)의 신선한 ImmunoCult™ DC 분화 배지에 재현탁하고 부착되지 않거나 또는 느슨하게 부착된 세포를 저장하기 위해 배양 플라스크에 되돌렸다. 그 다음에 세포를 37°C에서 2 일 동안 배양하였다. (2p) 또한 4 일차에, DC를 위한 90% 분화 배지를 6-웰 플레이트에서 제거하였고, 90% 신선한 분화 배지를 첨가하였다. 세포를 상기 (2m)(연구군 #1)에서 언급된 바와 같이 3, 1, 0.3, 0.1, 0.01 및 0 μM 플리나불린으로 처리하였다. 추가 2 일 배양 후, CD40, CD80, MHCII 및 CD86에 대해 FACS에 의해 수지상 세포 성숙을 평가하였다. 나머지 세포는 처리하지 않고 MLR 분석을 위해 하기 단계 (4a)-(4d)로 계속하였다.
CD14+ 수지상 세포의 성숙: 상기 단계 (2p)에서 분화된 수지상 세포를 다음과 같이 단계 (2q)-(2r)에 따라 성숙시켰다: (2q) 6 일차에, ImmunoCult™ 수지상 세포 성숙 보충제를 1/100 희석으로 배양 플라스크에 직접 첨가하였으며, 예를 들어, 50 μL 성숙 보충제를 대략 5 mL 배양 배지에 첨가하였다. 그 다음에 배양 플라스크를 부드럽게 휘저어 혼합하였다. 이 시점에서 배지를 교환하지 않았다. (2r) 별도로, 상기 단계 (2o)에서 분화된 DC의 일부를 6-웰 플레이트의 웰에서 각각 3, 1, 0.3, 0.1, 0.01 및 0 μM 플리나불린으로 처리하였다(연구군 #2). 모든 수지상 세포를 다음과 같은 성숙 마커의 FACS 평가를 위해 2 일 동안 배양하였다: CD40, CD80, MHCII 및 CD86. 나머지 세포는 MLR 검정을 위해 하기 단계 (4a)-(4d)로 계속하였다.
또 다른 공여자의 PBMC에서 인간 CD4+ T 세포의 단리: PBMC 세포를 상기 (1a)-(1d)에 따라 또 다른 인간 공여자에서 수득하였다. 그 다음에 CD4+ T-세포를 다음과 같이 단계 (3a)-(3k)에 따라 이들 PBMC에서 단리하였다: (3a) PBMC 세포의 수를 결정하였다. (3b) 세포 현탁액을 300×g로 10 분 동안 원심분리하였다. 그 다음에 상청액을 완전히 흡입하였다. (3c) 세포 펠릿을 107 개의 총 세포 당 40 μL의 FACS 완충액에 재현탁하였다. (3d) 107 개의 총 세포 당 10 μL의 CD4+ T 세포 비오틴-항체 칵테일을 첨가하였다. (3e) 혼합물을 잘 혼합하고 냉장고(2-8℃)에서 5 분 동안 배양하였다. (3f) 107 개의 총 세포 당 30 μL의 FACS 완충액을 첨가하였고, 107 개의 총 세포 당 20 μL의 CD4+ T-세포 마이크로비드 칵테일을 첨가하였다. (3g) 혼합물을 잘 혼합하고 냉장고(2 내지 8℃)에서 10 분 동안 배양하였다. (3h) 칼럼을 적합한 MACS 분리기의 자기장에 배치한다. (3i) 칼럼을 3 mL의 완충액으로 헹궈 준비한다. (3j) 세포 현탁액을 칼럼 위에 적용하였다. 풍부화된 CD4+ T 세포를 나타내는 비표지된 세포를 함유하는 통과액을 수집하였다. (3k) 칼럼을 3 mL의 FACS 완충액으로 세척하였다. 풍부화된 CD4+ T 세포를 나타내는 통과된 비표지된 세포를 수집하고 상기 단계 (3j)의 유출물과 조합하였다.
MLR 검정에 의해 평가된 T 세포의 동종이계 활성화: 동종이계 혼합 림프구 반응(MLR) 검정을 다음과 같이 단계 (4a)-(4d)에 따라 수행하였다: (4a) 시험 물품(예를 들어, 플리나불린 및 다른 튜불린 결합제)를 표 7-9 중 하나에 따라 RPMI 1640 배지에 각각 희석하고, 이어서 적절한 웰에 50 μL/웰로 첨가하였다. 각 조건에 대해 중복하여 수행하였다. (4b) 상기 (3k)에서 수득된 CD4+ T-세포의 농도를 1 × 106/mL로 조정하고; 96-웰 플레이트의 개별 웰에 100μL의 CD4+ T-세포를 1 × 105/웰로 첨가하였다. (4c) 2 mM EDTA를 첨가하여 상기 (2q)-(2r)에서 수득된 DC 세포를 방출하고, 수집하고 ×1500 rpm으로 5 분 동안 원심분리하였다. DC 세포의 농도를 2 × 105/mL로 조정하고; 50 μL의 DC 세포를 각 웰에 첨가하여(1 × 104/웰) 10:1 비의 T-세포 대 수지상 세포를 수득하였다. (4d) 플레이트를 37℃에서 5 일 동안 배양하였다.
13 일차에, (4e) ELISA에 의한 IL-2 및 IFN-γ 검출을 위해 세포 현탁액을 수집하였다.
대표적인 실험 타임라인은 표 5에 예시되어 있고; 실시예 3의 각 연구에서 3 개의 연구군은 표 6에 기재되어 있다.
표 5. 세포 준비 및 MLR 검정의 예시적인 타임라인
Figure pct00009
표 6. 연구군 설명
Figure pct00010
실시예 3A.
인간 PBMC를 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (1a)-(1d)에 따라 첫번째 공여자에서 단리하였다. 인간 CD14+ 단핵구를 단계 (2a)-(2k)에 따라 PBMC에서 단리하고, 단계 (2l)-(2p)에 따라 인간 CD14+ 수지상 세포로 분화시킨 다음, 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (2q)-(2r)에 따라 성숙시켰다. 인간 PBMC를 단계 (1a)-(1d)에 따라 두번째 공여자에서 단리하고 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (3a)-(3k)에 따라 인간 CD4+ T 세포를 수득하기 위해 추가로 단리하였다. MLR을 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4a)-(4d)에 따라 수행하였으며; 표 7은 다음과 같은 시험된 제제를 요약한다: 플리나불린, 니볼루맙(nivolumab), 및 IgG 대조군(및 이의 농도). 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4e)에 따라 IL-2 및 IFN-γ의 ELISA 측정을 위해 세포 상청액을 수집하였다.
표 7. MLR 검정에서 시험된 제제
Figure pct00011
상기 표 6에 기재된 바와 같이, 3 개의 연구군은 다음과 같았다: #A1(DC 분화 단계 (2m)에서 처리된 튜불린 결합제), #A2(DC 성숙 단계 (2r)에서 처리된 튜불린 결합제), 및 #A3(CD4+ T 세포가 CD14+ 수지상 세포와 조합된 경우 단계 (4a)에서 처리된 튜불린 결합제).
결과:
IFN-γ 분비에 대한 튜불린 결합제 처리의 주목할만한 효과는 도 8에 제시된 바와 같이 관찰되지 않았다.
세포가 CD14 세포로부터 분화 동안(도 5, 오른쪽 상단) 또는 DC 성숙 동안(도 6, 오른쪽 하단) 처리된 경우, 플리나불린은 DC에 대한 CD86 발현을 증가시켰으며; MHCII, CD80 및 CD40 발현에서 뚜렷한 증가는 관찰되지 않았다.
도 7은 MLR 검정에서, DC가 DC 성숙 동안(단독) 플리나불린(1 또는 3 μM)으로 처리된 경우 DC CD86 발현 증가와 함께 IL2 분비 증가를 나타낸다. 도 7은 동일한 농도의 플리나불린을 사용하여 DC 분화 동안 CD14+ 단핵구를 처리한 경우 IL2 분비 감소를 나타낸다. 도 7은 또한 성숙 DC가 CD4 T-세포와 조합되었을 때 플리나불린 처리(≥100 nM)가 시작된 경우, 니볼루맙(2 mg/ml) 보다 더 큰 MLR 유도된 IL-2 분비의 유의한 증가를 나타낸다.
실시예 3B.
인간 PBMC를 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (1a)-(1d)에 따라 첫번째 공여자에서 단리하였다. 인간 CD14+ 단핵구를 단계 (2a)-(2k)에 따라 PBMC에서 단리하고, 단계 (2l)-(2p)에 따라 인간 CD14+ 수지상 세포로 분화시킨 다음, 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (2q)-(2r)에 따라 성숙시켰다. 인간 PBMC를 단계 (1a)-(1d)에 따라 두번째 공여자로부터 단리하고 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (3a)-(3k)에 따라 인간 CD4+ T 세포를 수득하기 위해 추가로 단리하였다. MLR을 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4a)-(4d)에 따라 수행하였으며; 표 8은 다음과 같은 시험된 제제를 요약한다: 플리나불린, 항-PD-1, IgG 대조군, 도세탁셀, 및 콜히친(및 이의 농도). 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4e)에 따라 IL-2 및 IFN-γ의 ELISA 측정을 위해 세포 상청액을 수집하였다.
표 8. MLR 검정에서 시험된 제제
Figure pct00012
상기 표 6에 기재된 바와 같이, 3 개의 연구군은 다음과 같았다: #B1(DC 분화 단계 (2m)에서 처리된 튜불린 결합제), #B2(DC 성숙 단계 (2r)에서 처리된 튜불린 결합제), 및 #B3(CD4+ T 세포가 CD14+ 수지상 세포와 조합된 경우 단계 (4a)에서 처리된 튜불린 결합제).
결과: 도 9-10은 각각 연구군 #B1 및 #B2의 FACS 결과를 예시하고; 도 11-12는 각각 MLR에서 IL-2 및 IFN-γ 생성에 대한 시험 물품의 효과를 예시한다.
실시예 3C.
인간 PBMC를 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (1a)-(1d)에 따라 첫번째 공여자에서 단리하였다. 인간 CD14+ 단핵구를 단계 (2a)-(2k)에 따라 PBMC에서 단리하고, 단계 (2l), (2n), 및 (2o)에 따라 인간 CD14+ 수지상 세포로 분화시킨 다음, 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (2q)에 따라 성숙시켰다. 단계 (2m), (2p) 및 (2r)은 실시예 3C의 연구에서 생략하였다. 인간 PBMC를 단계 (1a)-(1d)에 따라 두번째 공여자에서 단리하고 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (3a)-(3k)에 따라 인간 CD4+ T 세포를 수득하기 위해 추가로 단리하였다. MLR을 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4a)-(4d)에 따라 수행하였으며; 표 9는 다음과 같은 시험된 제제를 요약한다: 플리나불린, 니볼루맙, IgG 대조군, 파수딜, 및 콜히친(및 이의 농도). 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 단계 (4e)에 따라 IL-2 및 IFN-γ의 ELISA 측정을 위해 세포 상청액을 수집하였다.
표 9. MLR 검정에서 시험된 제제
Figure pct00013
결과: 도 13-14는 각각 MLR에서 IL-2 및 IFN-γ 생성에 대한 시험 물품의 효과를 예시한다.
본 개시내용의 특정 구현예는 본 명세서의 끝에 제시된 청구범위, 또는 후일에 제시된 다른 청구범위에 포함된다. 추가 구현예는 하기 일련의 번호 매겨진 구현예에 포함된다:
구현예 1. 백신 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물.
구현예 2. 구현예 1에 있어서, 상기 백신이 감염성 질환 백신, 암 백신, 또는 이의 조합을 포함하는, 조성물.
구현예 3. 구현예 1 또는 2에 있어서, 상기 백신이 콜레라, 뎅기, 디프테리아, 헤모필루스 인플루엔자 b형(Hib) 감염, A형 간염, B형 간염, 인플루엔자, 일본 뇌염, 수막구균 수막염, 백일해(aP), 소아마비, 광견병, 파상풍, 결핵(TB), 장티푸스, 및 황열병(YF), 및 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 감염성 질환에 대한 것인, 조성물.
구현예 4. 구현예 1 내지 3 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 백신이 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 감염성 질환 백신인, 조성물:
디프테리아 및 파상풍(DT) 백신;
디프테리아, 파상풍, 및 백일해(DTaP) 백신;
파상풍 및 디프테리아(Td) 백신;
파상풍, 디프테리아, 및 백일해(Tdap) 백신;
헤모필루스 인플루엔자 b형(Hib) 접합체 백신;
인플루엔자(flu) 백신;
광견병 백신;
불활성화 폴리오바이러스 백신(IPV)과 같은 폴리오바이러스 백신;
수막구균성 접합체 백신;
장티푸스 백신;
결핵(TB) 백신; 및
황열병(YF) 백신; 및
조합된 DTaP-IPV 백신 및 조합된 DTaP-IPV/Hib 백신과 같은 이의 조합.
구현예 5. 구현예 1 내지 4 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 백신이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물:
ActHIB® 백신 또는 Hiberix® 백신과 같은 헤모필루스 b 접합체 백신 (파상풍 톡소이드 접합체);
Adacel® 백신과 같은 흡착 파상풍 톡소이드, 감소된 디프테리아 톡소이드 및 무세포 백일해 백신;
DAPTACEL® 백신과 같은 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 백신;
흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 백신;
예를 들어, Flublok® 4가 백신, Fluzone® 4가 백신, Fluzone® 고용량 3가 백신, 또는 Fluzone® 피내 4가 백신과 같은 인플루엔자 백신;
Imovax® 백신과 같은 인간 이배체 세포 광견병 백신(HDCV);
Imogam® 백신과 같은 열 처리 인간 광견병 인간 글로불린(HRIG);
IPOL® 백신과 같은 불활성화 폴리오바이러스 백신(IPV);
디프테리아 톡소이드 담체를 함유하는 4가 ACYW-135 Menactra® 백신과 같은 수막구균성 폴리사카라이드 디프테리아 톡소이드 접합체 백신;
Pentacel® 백신과 같은 파상풍 톡소이드 접합된 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해, 불활성화 폴리오바이러스 및 헤모필루스 b 접합체 백신;
Quadracel® 백신과 같은 흡수 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 및 불활성화 폴리오바이러스 백신;
Tenivac™ 백신과 같은 흡착 파상풍 및 디프테리아 톡소이드;
Typhim Vi® 백신과 같은 장티푸스 Vi 폴리사카라이드 백신;
TUBERSOL® 백신과 같은 투베르쿨린 정제 단백질 유도체; 및
YF-VAX® 백신 또는 F-VAX® 백신과 같은 황열병 백신.
구현예 6. 구현예 1 또는 2에 있어서, 상기 백신이 암 백신을 포함하는, 조성물.
구현예 7. 구현예 6에 있어서, 상기 암 백신이 항원 제시 세포(antigen presenting cell; APC)-기반 백신을 포함하는, 조성물.
구현예 8. 구현예 6 또는 7에 있어서, 상기 암 백신이 수지상 세포(dendritic cell; DC)-기반 백신을 포함하는, 조성물.
구현예 9. 구현예 6 내지 8 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 암 백신이 B 세포-기반 백신을 포함하는, 조성물.
구현예 10. 구현예 6 내지 9 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 암 백신이 DNA 손상제를 포함하는, 조성물.
구현예 11. 구현예 1 내지 10 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 선천성 또는 체액성 면역력의 유도자, 개선제(enhancer) 또는 촉진제(booster)로서 기능하는, 조성물.
구현예 12. 구현예 1 내지 11 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 대상체에서 백신에 대한 면역 반응성을 자극하거나 또는 향상시키는 데 효과적인 양으로 존재하는, 조성물.
구현예 13. 구현예 1 내지 12 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 플리나불린인, 조성물.
구현예 14. 구현예 1 내지 13 중 어느 한 구현예에 있어서, 약제학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함하는, 조성물.
구현예 15. 구현예 1 내지 14 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 조성물이 액체 또는 고체 형태인, 조성물.
구현예 16. 구현예 1 내지 15 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 조성물이 비경구로 투여되는, 조성물.
구현예 17. 구현예 1 내지 15 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 조성물이 근육내로 투여되는, 조성물.
구현예 18. 구현예 1 내지 17 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 대상체가 인간인, 조성물.
구현예 19. 구현예 1 내지 18 중 어느 한 구현예의 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 질환, 장애, 또는 병태를 치료 또는 면역화하는 방법.
구현예 20. 대상체에서 질환, 장애, 또는 병태를 치료 또는 면역화하는 방법으로서,
백신을 대상체에게 투여하는 단계; 및
튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 21. 구현예 19 또는 20에 있어서, 상기 질환, 장애, 또는 병태가 감염성 질환, 암, 또는 면역 질환, 또는 이의 조합인, 방법.
구현예 22. 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법으로서,
백신을 대상체에게 투여하는 단계; 및
백신 단독에 의해 유도된 면역 반응과 비교하여 백신에 대한 면역 반응을 향상시키기에 충분한 양으로 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 23. 구현예 22에 있어서, 상기 면역 반응을 향상시키는 단계가 림프구 세포 증식을 유도하는 것을 포함하고; 여기서 림프구 세포가 T 세포 또는 B 세포인, 방법.
구현예 24. 구현예 23에 있어서, 상기 림프구 세포가 T 세포인, 방법.
구현예 25. 구현예 23에 있어서, 상기 림프구 세포가 CD4+ 림프구 세포인, 방법.
구현예 26. 구현예 22에 있어서, 상기 면역 반응을 향상시키는 단계가 B-세포 증식 및 분화를 유도하는 것을 포함하는, 방법.
구현예 27. 구현예 22에 있어서, 상기 면역 반응을 향상시키는 단계가 면역글로불린 M(IgM) 항체 생산을 유도하거나, 또는 면역글로불린 G(IgG) 항체 생산을 유도하거나, 또는 이의 조합을 포함하는, 방법.
구현예 28. 구현예 20 내지 27 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 백신이 암 백신 또는 감염성 질환 백신인, 방법.
구현예 29. 구현예 20 내지 28 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 백신이 콜레라, 뎅기, 디프테리아, 헤모필루스 인플루엔자 b형 감염, A형 간염, B형 간염, 인플루엔자, 일본 뇌염, 수막구균 수막염, 백일해, 소아마비, 광견병, 파상풍, 결핵, 장티푸스, 황열병, 광견병, 및 결핵으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 질환에 대한 백신으로부터 선택되는, 방법.
구현예 30. 구현예 20 내지 29 중 어느 한 구현예에 있어서, 튜불린 결합제 및 백신을 동시에 투여하는 것을 포함하는, 방법.
구현예 31. 구현예 20 내지 30 중 어느 한 구현예에 있어서, 백신을 투여하기 전 또는 후에 튜불린 결합제를 투여하는 것을 포함하는, 방법.
구현예 32. 구현예 20 내지 32 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 플리나불린인, 방법.
구현예 33. 구현예 20 내지 33 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 플리나불린이 백신이 투여된 후 적어도 약 1 일에 투여되는, 방법.
구현예 34. 구현예 20 내지 33 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 플리나불린이 백신이 투여된 후 약 2 일 내지 약 6 일 사이의 시기에 투여되는, 방법.
구현예 35. 구현예 20 내지 34 중 어느 한 구현예에 있어서, 상기 플리나불린이 10 mg/kg 체중 이하로 투여되는, 방법.
구현예 36. 구현예 35에 있어서, 상기 플리나불린이 약 3 시간 간격으로 일일 2 회 투여되는, 방법.

Claims (35)

  1. 백신, 및 튜불린 결합제를 포함하는, 대상체에게 투여하기 위한 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 백신이 콜레라, 뎅기, 디프테리아, 헤모필루스 인플루엔자 b형 감염, A형 간염, B형 간염, 인플루엔자, 일본 뇌염, 수막구균 수막염, 백일해, 소아마비, 광견병, 파상풍, 결핵, 장티푸스, 및 황열병으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 질환에 대한 백신으로부터 선택되는, 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 백신이 ActHIB ® 헤모필루스 b 접합체 백신(파상풍 톡소이드 접합체); Adacel® 흡착 파상풍 톡소이드, 감소 디프테리아 톡소이드 및 무세포 백일해 백신 ; DAPTACEL® 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 백신; 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드; Flublok®, 4가 인플루엔자 백신; Fluzone® 고용량 인플루엔자 백신; Fluzone® 4가 인플루엔자 백신; Fluzone® 피내 4가 인플루엔자 백신; Imovax® 광견병 광견병 백신(인간 이배체 세포); IPOL® 불활성화 폴리오바이러스 백신; Menactra® 수막구균성(그룹 A, C, Y 및 W-135) 폴리사카라이드 디프테리아 톡소이드 접합체 백신; Pentacel® 흡착 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해, 불활성화 폴리오바이러스 및 헤모필루스 b 접합체(파상풍 톡소이드 접합체) 백신; Quadracel® 흡수 디프테리아 및 파상풍 톡소이드 및 무세포 백일해 및 불활성화 폴리오바이러스 백신; TENIVAC™ 흡착 파상풍 및 디프테리아 톡소이드; Typhim Vi® 장티푸스 Vi 폴리사카라이드 백신; YF-VAX® 황열병 백신; Imogam® 열처리 광견병 - HT 광견병 면역 글로불린(인간) USP; TUBERSOL®(투베르쿨린 정제 단백질 유도체, 망투); 및 F-VAX®(황열병 백신)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 선천성 또는 체액성 면역력의 유도자, 개선제 또는 촉진제(booster)로서 기능하는, 조성물.
  5. 제1항, 제2항, 또는 제4항에 있어서, 상기 백신이 감염성 질환에 대한 백신인, 조성물.
  6. 제1항, 제2항, 또는 제4항에 있어서, 상기 백신이 암 백신인, 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 암 백신이 항원 제시 세포-기반 백신(antigen presenting cell-based vaccine)을 포함하는, 조성물.
  8. 제6항에 있어서, 상기 암 백신이 수지상 세포-기반 백신(dendritic cell-based vaccine)을 포함하는, 조성물.
  9. 제6항에 있어서, 상기 암 백신이 B 세포 기반 백신을 포함하는, 조성물.
  10. 제6항에 있어서, 상기 암 백신이 DAN 손상제를 포함하는, 조성물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함하는, 조성물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 비경구로 투여되는, 조성물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 근육내로 투여되는, 조성물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 액체 또는 고체 형태인, 조성물.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 인간인, 조성물.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 튜불린 결합제의 양이 대상체에서 백신에 대한 면역 반응성을 자극하거나 또는 향상시키는 데 효과적인, 조성물.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 플리나불린인, 조성물.
  18. 백신 및 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법.
  19. 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법으로서, 백신 및 튜불린 결합제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 백신에 대한 면역 반응이 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상되는, 방법.
  20. 림프구 세포 증식을 유도하는 방법으로서, 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  21. B 세포 증식을 유도하는 방법으로서, 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  22. IgM 및 IgG의 생산을 유도하는 방법으로서, 유효량의 튜불린 결합제 및 백신을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  23. 대상체에서 암 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법으로서, 암 백신 및 튜불린 결합제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 백신에 대한 면역 반응이 암 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상되는, 방법.
  24. 제18항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 백신이 콜레라, 뎅기, 디프테리아, 헤모필루스 인플루엔자 b형 감염, A형 간염, B형 간염, 인플루엔자, 일본 뇌염, 수막구균 수막염, 백일해, 소아마비, 광견병, 파상풍, 결핵, 장티푸스, 황열병, 광견병, 및 결핵균으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 질환에 대한 백신으로부터 선택되는, 방법.
  25. 제18항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 튜불린 결합제 및 백신을 동시에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  26. 제18항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 백신을 투여하기 전 또는 후에 튜불린 결합제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  27. 튜불린 결합제 및 백신을 조합하는 단계를 포함하는, 제1항의 조성물을 제조하는 방법.
  28. 대상체에서 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법으로서,
    백신을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    상기 백신에 대한 면역 반응이 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상되도록, 상기 백신의 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  29. 림프구 세포 증식을 유도하는 방법으로서,
    백신을 대상체에게 투여하는 단계, 및
    백신의 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  30. T 세포 증식을 유도하는 방법으로서,
    백신을 대상체에게 투여하는 단계, 및
    백신의 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  31. 대상체에서 암 백신에 대한 면역 반응을 향상시키는 방법으로서,
    암 백신을 대상체에게 투여하는 단계, 및
    상기 백신에 대한 면역 반응이 암 백신을 단독으로 대상체에게 투여함으로써 생성된 면역 반응에 비해 향상되도록, 백신의 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  32. 면역화하는 방법으로서,
    백신을 대상체에게 투여하는 단계, 및
    백신의 투여 후에 튜불린 결합제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  33. 제18항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 튜불린 결합제가 플리나불린인, 방법.
  34. 제18항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 플리나불린이 백신이 투여된 후 적어도 약 1 일에 투여되는, 방법.
  35. 제18항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 플리나불린이 백신이 투여된 후 약 2 일 내지 약 6 일 사이의 시기에 투여되는, 방법.
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107530341B (zh) 2015-03-06 2021-10-01 大连万春布林医药有限公司 治疗与ras突变相关的癌症的方法
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SG11201806583XA (en) 2016-02-08 2018-09-27 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Compositions containing tucaresol or its analogs
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CN110431135A (zh) 2017-01-06 2019-11-08 大连万春布林医药有限公司 微管蛋白结合化合物及其治疗用途
KR20190109479A (ko) 2017-02-01 2019-09-25 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 호중구감소증의 감소 방법
JP7350015B2 (ja) 2018-01-24 2023-09-25 ビヨンドスプリング ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド プリナブリンの投与による血小板減少症を軽減するための組成物および方法
WO2023060200A1 (en) * 2021-10-07 2023-04-13 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancers and tumors
WO2023154755A1 (en) * 2022-02-10 2023-08-17 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Stable plinabulin formulations and methods of their preparation and use

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040197312A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-07 Marina Moskalenko Cytokine-expressing cellular vaccine combinations
CA2754217A1 (en) * 2009-03-02 2010-09-10 Massachusetts Institute Of Technology Methods and systems for treatment and/or diagnosis
CN101766815B (zh) * 2009-12-31 2012-04-25 胡松华 紫杉醇及多西紫杉醇的用途
WO2013124867A1 (en) * 2012-02-21 2013-08-29 Amrita Vishwa Vidyapeetham University Polymer - polymer or polymer - protein core - shell nano medicine loaded with multiple drug molecules
EP3256130A4 (en) * 2015-02-12 2018-08-01 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Use of plinabulin in combination with immune checkpoint inhibitors
CN110431135A (zh) * 2017-01-06 2019-11-08 大连万春布林医药有限公司 微管蛋白结合化合物及其治疗用途

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