KR20210020104A - 면역 반응 촉진 - Google Patents

Abstract

약학적 조성물은 1-ADP-헵토스 접합체를 포함하고 면역원 또는 면역관문억제제를 포함할 수 있으며 면역 반응을 촉진하는 데 사용된다.

Description

면역 반응 촉진

본 발명은 면역 반응을 유도하여 감염을 예방하거나 퇴치하기 위한 면역을 촉진하는 방법 및 조성물에 관한 것이다.

많은 질병 및 병리학은 면역 체계의 손상 및 감염원에 대한 감수성 증가와 관련이 있다. 수술, 방사선 또는 화학 요법을 받고 있는 환자와 자가 면역 또는 기타 면역 결핍 질환을 앓고 있는 환자는 감염으로 인한 병리학적 상태가 발생할 위험이 높다. 면역 활성화 전략은 감염을 예방하거나 퇴치하기 위해 면역 반응을 유도하는 데 사용될 수 있다.

백신은 세균, 바이러스 및 진균을 포함한 많은 전염성 유기체에 의한 감염을 예방하거나 치료하는 데 널리 사용되며, 암을 치료하기 위해 다양한 백신과 면역 요법이 개발되었으며, 그 효능을 향상시키기 위해 많은 전략과 보조제가 사용되었다.

관련 문헌에는 WO2016054745 및 Gaudet et al. Science 348, 1251-1255 (2015)을 포함한다.

감염원, 암세포 및 면역 또는 염증성 질환에 의해 유발되는 감염에 대한 추가 치료 및 예방 옵션을 개발할 필요가 있다.

본 발명은 면역 반응을 촉진하는 방법 및 이에 상응하는 약학적 조성물을 제공한다.

한 측면에서, 본 발명은 1-ADP-헵토스 접합체를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 사람에게 투여하는 것을 포함하는 면역 반응을 촉진하는 방법을 제공한다.

일 실시예에서

-헵토스는 L/D-글리세로-α/β-L/D-만노/글루코/갈락토-헵토스 구성이다.

-헵토스는 L/D-글리세로-α/β-L/D-만노-헵토스 구성이다.

-헵토스는 L/D-글리세로-α/β-D-만노-헵토스 구성이다.

-헵토스는 L/D-글리세로-β-D-만노-헵토스 구성이다.

-헵토스는 하기와 같은 구성이다:

L-글리세로-β-D-글루코-헵토스	L-글리세로-β-L-갈락토-헵토스
D-글리세로-β-D-글루코-헵토스	D-글리세로-β-L-갈락토-헵토스
L-글리세로-α-D-글루코-헵토스	L-글리세로-α-L-갈락토-헵토스
D-글리세로-α-D-글루코-헵토스	D-글리세로-α-L-갈락토-헵토스
L-글리세로-β-L-글루코-헵토스	L-글리세로-β-D-만노-헵토스
D-글리세로-β-L-글루코-헵토스	D-글리세로-β-D-만노-헵토스
L-글리세로-α-L-글루코-헵토스	L-글리세로-α-D-만노-헵토스
D-글리세로-α-L-글루코-헵토스	D-글리세로-α-D-만노-헵토스
L-글리세로-β-D-갈락토-헵토스	L-글리세로-β-L-만노-헵토스
D-글리세로-β-D-갈락토-헵토스	D-글리세로-β-L-만노-헵토스
L-글리세로-α-D-갈락토-헵토스	L-글리세로-α-L-만노-헵토스 또는
D-글리세로-α-D-갈락토-헵토스	D-글리세로-α-L-만노-헵토스

-상기 접합체는 1-ADP-헵토스-7-인산염이다.

-상기 방법은 바람직하게는 세균, 바이러스, 기생충 또는 암세포의 항원을 포함하는 면역원을 사람에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

-상기 방법은 바람직하게는 하기와 같은 치료용 특이항체를 포함하는 면역관문억제제 (immune checkpoint inhibitor)를 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함한다:

아데노신 A2A 수용체(A2AR);

분화클러스터 276 (CD276; B7-H3);

B 및 T 림프구 감쇠조절자 (BTLA; CD272);

세포독성T림프구 관련 단백질 4 (CTLA-4);

인돌아민 2,3-이산소화효소 (IDO);

살해 면역글로불린 유사 수용체 (KIR);

림프구 활성화 유전자 3 (LAG-3; CD223);

PD-1/예정사 리간드 1 또는 2 (PD-L1 또는 PD-L2);

T세포 면역글로불린 뮤신 3 (TIM-3); 또는

T세포 활성의 V-도메인 Ig 억제제 (VISTA)

-상기 면역관문억제제는 더발루맙, 아테졸리주맙 또는 아벨루맙과 같은 PD-L1 억제제; 또는 트레멜리무맙과 같은 CTLA-4 억제제인 치료용 항체이고;

-상기 방법은 면역원 또는 면역관문억제제를 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함하며, 상기 조성물은 면역원 또는 억제제를 포함한다.

한 측면에서, 본 발명은 1-ADP-헵토스 접합체를 포함하는 면역 반응을 촉진하는 약학적 조성물을 제공한다.

실시예에서:

-조성물은 면역원 또는 면역관문억제제를 추가로 포함한다.

-조성물은 단위 투여 형태이다.

본 발명은 본 명세서에 인용된 특정 실시예의 모든 조합을 포함한다.

본 발명의 약학적 조성물 및 방법은 1-ADP-헵토스 접합체를 포함하고 면역원 또는 면역관문억제제를 포함할 수 있으며 면역 반응을 촉진한다.

도 1A. ADP-헵토스 및 그 유사체 (UDP-헵토스, CDP-헵토스, dCDP-헵토스, dADP-헵토스, dGDP-헵토스, GDP-헵토스 및 dTDP-헵토스)는 용량 의존적 방식으로 293T 세포에서 NF-κB를 활성화하였다. NF-κB 활성화는 루시퍼레이즈 리포터 활성 (luciferase reporter activity)에 의해 측정되었다.
도 1B. ADP-헵토스와 그 유사체는 293T 세포에서 TIFA 인산화를 유도하였다. EGFP-TIFA를 안정적으로 발현하는 293T 세포를 ADP-헵토스 유사체 (5μM)로 5시간 동안 처리하고 항-pT9-TIFA 면역블롯 (immunoblot)으로 분석하였다.
도 1C. ADP-헵토스는 생체 내에서 아쥬반트 활성을 나타내어 혈청 오브알부민 (OVA)-특이적 IgG 생산을 증가시켰다. C57BL/6N 생쥐 (그룹당 8마리의 생쥐)를 PBS, 명반 (2mg/생쥐) 또는 ADP-헵토스 (0.5mg/생쥐)와 혼합된 10μg OVA로 근육 내 면역화하였다. 21일 후, OVA-특이적 IgG의 혈청 역가를 ELISA로 측정하였다.
도 1D 및 도 1E. ADP-헵토스로 종양 후 처리 (posttumor treatment)에 의한 B16-OVA 종양 성장을 억제하였다. 0일에 2x10⁵ B16-OVA 흑색종 (melanoma) 세포를 C57BL/6N 생쥐 (n = 그룹당 6마리의 생쥐)에 피하 주사하였다. ADP-헵토스 (0.5mg/생쥐)는 종양 내 주사에 의한 종양 접종 후 8, 11, 14 및 17일에 투여되었다. 종양 부피 (D) 및 종양 무게 (E).
도 1F. ADP-헵토스 및 관문억제제를 사용한 종양 후 처리에 의한 MC38 종양 성장을 억제하였다. 0일에 2x10⁵ MC38 결직장 선암 세포 (colorectal adenocarcinoma cell)를 C57BL/6N 생쥐 (n = 그룹당 6마리의 생쥐)에 피하 주사하였다. ADP-헵토스 (0.5mg/생쥐, 종양 내 주사) 및 항-PD-1 항체 (40ug/생쥐, 복강내주사)는 종양 접종 후 13, 16, 19, 22, 25 및 28일에 투여되었다.

특정 실시예 및 예에 대한 하기 설명은 제한이 아닌 예시로서 제공된다. 당업자는 본질적으로 유사한 결과를 산출하기 위해 변경되거나 수정될 수 있는 다양한 중요하지 않은 파라미터를 쉽게 인식할 것이다. 본 발명은 무수한 실시예를 제공한다.

금하거나 달리 언급되지 않는 한, 이러한 설명 및 본 명세서 전체에서 용어 "a" 및 "an"은 하나 이상을 의미하고, 용어 "또는 (or)"은 및/또는 (and/or)을 의미하며 폴리뉴클레오티드 서열이 반대 가닥 (opposite strand)뿐만 아니라 본원에서 설명된 대체 백본 (alternative backbone)을 포함하는 것으로 이해된다.

면역원은 감염성 세균, 바이러스성 또는 기생충에 의한 병원체와 같은 감염원의 항원일 수 있고, 예컨대 나이세리아속 (Neisseria) (수막구균성수막염 (Neisseria meningitidis), 임균 (Neisseria gonorrohoeae) 포함), 에세리키아 (Escherichia) (대장균 (Escherichia coli) 포함), 클렙시엘라 (Klebsiella) (폐렴간균 (Klebsiella pneumoniae) 포함), 살모넬라속 (Salmonella) (쥐장티푸스균 (Salmonella typhimurium) 포함), 시겔라 (Shigella) (지하적리균 (Shigella dysenteriae), 플렉스네리이질균 (Shigella flexneri), 시겔라소네이균 (Shigella sonnei) 포함)), 비브리오 (Vibrio) (콜레라균 (Vibrio cholerae) 포함), 헬리코박터 (Helicobacter) (헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 포함), 슈드모나스 (Pseudomonas) (녹농균 (Pseudomonas aeruginosa) 포함), 버크홀데리아 (Burkhoideria) (버크홀데리아 멀티보란스 (Burkholderia multivorans) 포함), 헤모필루스 (Haemophilus) (헤모필루스 인플루엔자 (Haemophilus influenzae) 포함), 모락셀라 (Moraxella) (모락셀라 카타르할리스 (Moraxella catarrhalis) 포함), 보르데텔라속 (Bordetella) (백일해균 (Bordetella pertussis) 포함), 프란시셀라 (Francisella) (야토병균 (Francisella tularensis) 포함), 파스퇴렐라 (Pasteurella) (파스퇴렐라 물토시다 (Pasteurella multocida) 포함), 레지오넬라 (Legionella) (레지오넬라 뉴모필라 (Legionella pneumophila) 포함), 보렐리아 (Borrelia) (보렐리아 부르그도르페리 (Borrelia burgdorferi) 포함), 캄필로박터 (Campylobacter) (캄필로박터 제주니 (Campylobacter jejuni) 포함), 에르시니아 (Yersinia) (페스트균 (Yersinia pestis) 및 에르시니아 엔테로콜리티카 (Yersinia enterocolitica) 포함), 리케차 (Rickettsia) (리케차 리케치 (Rickettsia rickettsii) 포함), 트레포네마 (Treponema) (트레포네마팔리둠 (Treponema pallidum) 포함), 클라미디아속 (Chlamydia) (클라미디아 트라코마 (Chlamydia trachomatis), 클라미디아 뉴모니아 (Chlamydia pneumoniae) 포함) 및 브루셀라 (Brucella)종에 속하는 그람음성의 세균성 병원균을 포함하고, 포도상구균 (Staphylococcus) (황색포도상구균 (Staphylococcus aureus) 포함), 연쇄상구균 (Streptococcus) (폐렴구균 (Streptococcus pneumoniae), 화농연쇄구균 (Streptococcus pyogenes) 포함), 리스테리아 (Listeria) (리스테리아 모노사이토제니스 (Listeria monocytogenes) 포함), 코리네박테리움 (Corynebacterium) (디프테리아균 (Corynebacterium diphtheriae) 포함), 장내구균 (Enterococcus) (엔테로코커스 페칼리스 (Enterococcus faecalis) 포함), 클로스트리듐 (Clostridium)종, 및 미코박테리움 (Mycobacterium) (결핵균 (Mycobacterium tuberculosis), 나균 (Mycobacterium leprae), 조형결핵균 (Mycobacterium avium) 포함)속에 속하는 그람양성의 세균성 병원균을 포함한다.

면역원 또는 항원은 또한 아데노바이러스과 (Adenoviridae) (아데노바이러스 (Adenovirus) 포함), 허피스바이러스과 (Herpesviridae) (엡스타인-바 (Epstein-Barr) 바이러스, 단순포진바이러스 (Herpes Simplex Virus), 거대세포바이러스 (Cytomegalovirus), 수주대상포진바이러스 (Varicella Zoster virus) 포함), 유두종바이러스과 (Papillomaviridae), 폭스바이러스과 (Poxviridae) (유두종바이러스 (Papillomavirus) 포함), 헤파드나바이러스과 (Hepadnaviridae) (B형간염바이러스 (Hepatitis B virus) 포함), 파르보바이러스과 (Parvoviridae), 아스트로바이러스과 (Astroviridae), 칼리시바이러스과 (Caliciviridae), 피코르나바이러스과 (Picornaviridae) (콕삭키바이러스 (Coxsackievirus), A형간염바이러스 (Hepatitis A virus), 폴리오바이러스 (Poliovirus) 포함), 코로나바이러스과 (Coronaviridae), 플라비바이러스과 (Flaviviridae) (C형간염바이러스 (Hepatitis C virus), 뎅기바이러스 (Dengue virus) 포함), 토가바이러스과 (Togaviridae) (풍진바이러스 (Rubella virus) 포함), 헤페바이러스과 (Hepeviridae), 레트로바이러스과 (Retroviridae) (HIV 포함), 오르토믹소바이러스과 (Orthomyxoviridae) (인플루엔자 바이러스 (Influenza virus) 포함), 아레나바이러스과 (Arenaviridae), 부니아바이러스과 (Bunyaviridae), 필로바이러스과 (Filoviridae), 파라믹소바이러스과 (Paramyxoviridae) (홍역 바이러스 (Measles virus), 멈프스바이러스 (Mumps virus), 파라인플루엔자바이러스 (Parainfluenza virus), 호흡기세포융합바이러스 (Respiratory Syncytial virus) 포함), 랍도바이러스과 (Rhabdoviridae) (광견병바이러스 (Rabies virus) 포함) 또는 레오바이러스과 (Reoviridae)를 포함하는 병원성바이러스에서 유래할 수도 있다.

면역원 또는 항원은 또한 칸디다 (Candida), 아스페르길루스 (Aspergillus), 크립토코커스 (Cryptococcus), 히스토플라스마 (Histoplasma), 폐포자충 (Pneumocystis) 또는 콕시디오이데스 (Coccidioides)에 의해 유발된 것을 포함하는 병원성 진균증으로부터 유래할 수 있다. 백신은 또한 리슈마니아 (Leishmania), 말라리아원충 (Plasmodium), 톡소플라스마 (Toxoplasma), 트리파노소마 (Trypanosoma) 및 주혈흡충 (Schistosoma)을 포함한 기생충 병원균을 표적으로 삼을 수 있다.

면역원 또는 항원은 병원성 세포 또는 조직에 대한 면역 반응을 자극하기 위해 종양 항원 또는 암 항원과 같은 대상체 자체의 세포에서 발현된 단백질 또는 다른 항원으로부터 유래할 수 있다. 일 실시예에서, 조성물은 종양에 대한 면역 반응을 증가시키기 위해 종양에 직접 투입될 수 있다. 면역원은 백신 제제의 일부로 투여될 수 있다.

방법 및 조성물은 염, 프로드러그, 입체이성질체, 비정질 형태 등을 포함하는 임의의 적합한 형태 및 투여 단위로 화합물을 사용할 수 있다.

용어 "약학적으로 허용되는 염"은 본원에 기재된 화합물에서 발견되는 특정 치환기에 따라 상대적으로 무독성인 산 또는 염기로 제조된 활성 화합물의 염을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 산성 작용기를 함유하는 경우, 염기 부가 염은 그러한 화합물의 중성 형태를 순수한 (neat) 또는 적합한 불활성 용매에서 충분한 양의 원하는 염기와 접촉시킴으로써 수득될 수 있다. 약학적으로 허용되는 염기 부가 염의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 아미노 또는 마그네슘 염, 또는 유사한 염을 포함한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 염기성 작용기를 포함하는 경우, 산 부가 염은 그러한 화합물의 중성 형태를 순수한 또는 적합한 불활성 용매에서 충분한 양의 원하는 산과 접촉시킴으로써 수득될 수 있다. 약학적으로 허용되는 산 부가 염의 예는 염산, 브롬화수소산, 질산, 탄산, 일수소탄산 (monohydrogencarbonic acid), 인산, 일수소인산 (monohydrogenphosphoric acid), 이수소인산 (dihydrogenphosphoric acid), 황산, 일수소황산 (monohydrogensulfuric acid), 요오드수소산 또는 아인산 등과 같은 무기산으로부터 유도된 것들뿐만 아니라, 아세트산, 프로피온산, 이소부티르산, 옥살산, 말레산, 말론산, 벤조산, 숙신산, 수베르산, 푸마르산, 만델산, 프탈산, 벤젠술폰산, p-톨릴술폰산(p-tolylsulfonic acid), 구연산, 타르타르산, 메탄술폰산 등과 같은 상대적으로 독성이 없는 유기산으로부터 유래된 염을 포함한다. 또한 알긴산 등과 같은 아미노산의 염 및 글루쿠론산 또는 갈락투론산 등과 같은 유기산의 염도 포함된다. 본 발명의 특정 화합물은 화합물이 염기 또는 산 부가 염으로 전환될 수 있도록 하는 염기성 및 산성 작용기를 모두 포함한다.

중성 형태의 화합물은 염을 염기 또는 산과 접촉시키고 통상적인 방식으로 모 화합물 (parent compound)을 분리함으로써 재생될 수 있다. 화합물의 모 형태 (parent form)는 극성 용매에서의 용해도와 같은 특정 물리적 특성에서 다양한 염 형태와 다르지만, 염은 본 발명의 목적상 화합물의 모 형태 (parent form)와 동등하다.

염 형태 이외에 본 발명은 프로드러그 형태인 화합물을 제공한다. 본원에 기재된 화합물의 프로드러그는 본 발명의 화합물을 제공하기 위해 생리적 조건 하에서 화학적 변화를 겪는 화합물이다. 추가로, 프로드러그는 생체 외 환경에서 화학적 또는 생화학적 방법에 의해 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, 프로드러그는 적절한 효소 또는 화학 시약과 함께 경피 패치 저장소 (transdermal patch reservoir)에 배치될 때 본 발명의 화합물로 천천히 전환될 수 있다. 프로 드러그는 경우에 따라 모 약물 (parent drug)보다 투여하기가 더 쉬울 수 있기 때문에 종종 유용하다. 예를 들어, 그들은 모 약물보다 경구 투여에 의해 더 생체 이용 가능할 수 있다. 프로드러그는 또한 모 약물에 비해 약학적 조성물에서 개선된 용해도를 가질 수 있다. 프로드러그의 가수분해 절단 또는 산화적 활성화에 의존하는 것과 같은 다양한 프로드러그 유도체가 당 업계에 공지되어 있다. 제한없이 프로드러그의 예는 에스테르 ("프로드러그")로 투여되지만, 활성 물질인 카르복시산으로 대사적으로 가수분해되는 본 발명의 화합물이다. 추가적인 예는 본 발명의 화합물의 펩티딜 유도체를 포함한다.

본 발명의 특정 화합물은 수화된 형태를 포함하는 용매화된 형태뿐만 아니라 용매화되지 않은 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화된 형태는 용매화되지 않은 형태와 동등하며 본 발명의 범위 내에 포함되도록 의도된다. 본 발명의 특정 화합물은 다중 결정질 또는 비정질 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 모든 물리적 형태는 본 발명에 의해 고려되는 용도에 대해 동등하며 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 의도된다.

본 발명의 특정 화합물은 비대칭 탄소 원자 (광 중심 (optical center)) 또는 이중 결합을 갖고; 라세미 화합물, 부분입체 이성질체, 기하 이성질체 및 개별 이성질체는 모두 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 의도된다.

용어 "치료적 유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 다른 임상의가, 예를 들어 투여 시, 추구하는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 어느 정도까지 이끌어 낼 대상 화합물의 양을 의미하고, 치료중인 상태 또는 장애의 하나 이상의 증상의 발생을 예방하거나 어느 정도 완화하기에 충분하다. 치료적 유효량은 화합물, 질병 및 그 중증도 및 치료할 포유 동물의 연령, 체중 등에 따라 달라질 수 있다.

본 발명은 또한 대상 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물, 특히 대상 화합물의 단위 투여량을 포함하는 조성물, 특히 적용 가능한 질환 또는 상태를 치료하기 위한 조성물의 용도를 설명하는 지침과 함께 포장된 이러한 조성물을 제공한다 (본원).

투여용 조성물은 벌크 액체 용액 또는 현탁액, 또는 벌크 분말의 형태를 취할 수 있다. 그러나 보다 일반적으로, 조성물은 정확한 투여를 용이하게 하기 위해 단위 투여 형태로 제공된다. 용어 "단위 투여 형태"는 인간 대상체 및 다른 포유 동물에 대한 단위 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며, 각 단위는 적합한 약학적 부형제와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 물질을 함유한다. 전형적인 단위 투여 형태는 액체 조성물의 미리 충전된, 미리 측정된 앰플 또는 주사기, 또는 고체 조성물의 경우 알약, 정제, 캡슐, 로젠지 등을 포함한다. 이러한 조성물에서, 화합물은 일반적으로 소량의 성분 (약 0.1 내지 50 중량% 또는 바람직하게는 약 1 내지 40 중량%)이고 나머지는 원하는 투여 형태를 형성하는 데 도움이 되는 다양한 부형제 또는 담체 및 가공 보조제이다.

투여 가능한 조성물을 제조하기 위한 적합한 부형제 또는 담체 및 방법은 당업자에게 공지되어 있거나 명백하며 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co, NJ (1991)와 같은 간행물에 보다 상세하게 설명되어 있다. 또한, 화합물은 본원에 기술되거나 당업계에 달리 공지된 다른 치료제, 특히 다른 항괴사제와 함께 유리하게 사용될 수 있다. 따라서, 조성물은 개별적으로, 공동으로 투여되거나 단일 투여 단위로 결합될 수 있다.

투여량은 화합물 제형, 투여 경로 등에 따라 다르며 일반적으로 일상적인 시험에서 경험적으로 결정되며, 반드시 표적, 숙주, 투여 경로 등에 따라 변이가 발생할 것이다. 일반적으로, 단위 용량 제제에서 활성 화합물의 양은 특정 적용에 따라 약 1, 3, 10 또는 30 내지 약 30, 100, 300 또는 1000 mg으로 변경되거나 조정될 수 있다. 일 실시예에서, 단위 투여 형태는 적어도 6, 9 또는 12개의 단위 투여 형태의 시트를 포함하는 블리스터팩 (blisterpack)과 같은 순차적 사용에 적합한 멀티팩 (multipack)으로 포장된다. 사용되는 실제 복용량은 환자의 요구 사항과 치료 중인 상태의 심각성에 따라 달라질 수 있다. 특정 상황에 대한 적절한 투여량의 결정은 당 업계의 기술 내에 있다. 일반적으로 치료는 화합물의 최적 용량보다 적은 용량으로 시작된다. 그 후, 그 상황에서 최적의 효과에 도달할 때까지 복용량을 소량씩 늘린다. 편의상, 총 일일 투여량은 원하는 경우 하루 동안 부분적으로 나누어 투여할 수 있다.

화합물은 예방적 및/또는 치료적 치료를 위해 예를 들어 에어로졸 또는 경피 투여와 같은 비경구, 국부, 경구 또는 국소 투여를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 방법에 의해 투여될 수 있다. 또한 숙련된 임상의의 지식에 따라, 치료 프로토콜 (예: 투여량 및 투여 시간)은 환자에 대한 투여된 치료제의 관찰된 효과 및 투여된 치료제에 대해 관찰된 질병의 반응에 대한 관점에 따라 다양할 수 있다.

본 발명의 치료제는 환자의 치료를 위한 치료학적 유효 프로토콜의 과정에서 치료학적 유효 투여량으로 투여될 수 있다. 더 강력한 화합물의 경우, 환자 킬로그램당 마이크로그램 (ug) 양이 충분할 수 있다. 예를 들어, 약 1, 10 또는 100 ug/kg 내지 약 0.01, 0.1, 1, 10 또는 100 mg/kg 범위에서 최적의 투여량은 화합물에 따라 다르지만 일반적으로 각 화합물에 대해 경험적으로 결정된다.

일반적으로, 임상 시험에서 일상적인 실험은 최적의 치료 효과를 위한 특정 범위를 결정할 것이며, 각 치료제에 대해, 각 투여 프로토콜 및 특정 환자에 대한 투여는 환자 상태 및 초기 투여에 대한 반응성에 따라 효과적이고 안전한 범위 내로 조정될 것이다. 그러나 최종 투여 프로토콜은 환자의 연령, 상태 및 크기뿐만 아니라 화합물 역가, 치료 중인 질병의 중증도 등과 같은 요인을 고려하여 담당 임상의의 판단에 따라 조절된다. 예를 들어, 화합물의 투여 요법은 10 내지 2000mg/일, 바람직하게는 10 내지 1000mg/일, 더욱 바람직하게는 50 내지 600mg/일, 2 내지 4회 (바람직하게는 2회) 분할 용량으로 경구 투여될 수 있다. 간헐적 치료 (예: 3주 중 1주 또는 4주 중 3주)도 사용할 수 있다.

대상 화합물은 단독으로 또는 다른 치료제와 결합하여 사용될 수 있다. 따라서 다제병용요법 (combination therapies)은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 결정질 또는 비정질 형태의 화합물 및 하나 이상의 다른 치료 활성제의 투여를 포함한다. 대상 화합물 및 다른 치료적 활성제(들)는 단일 약학적 조성물로 함께 투여되거나 개별적으로 투여될 수 있으며, 개별적으로 투여되는 경우, 이는 임의의 순서로 동시에 또는 순차적으로 발생할 수 있다. 대상 화합물 및 다른 치료 활성제(들)의 양 및 상대적 투여시기는 원하는 결합된 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 것이다. 따라서 추가적인 측면에서, 하나 이상의 다른 치료 활성제와 함께 화합물의 약학적으로 허용되는 결정질 또는 비정질 형태를 포함하는 조합이 제공된다.

본 발명의 화합물은 전신 투여 및 국소 투여 둘 다를 포함하는 임의의 적절한 투여 경로에 의해 투여될 수 있다. 전신 투여에는 경구 투여, 비경구 투여, 경피 투여, 직장 투여 및 흡입 투여가 포함된다. 비경구 투여는 장, 경피 또는 흡입 이외의 투여 경로를 말하며 일반적으로 주사 또는 주입에 의한 것이다. 비경구 투여에는 정맥 내, 근육 내 및 피하 주사 또는 주입이 포함된다. 흡입은 입이나 비강을 통해 흡입하여 환자의 폐에 투여하는 것을 의미한다. 국소 투여에는 피부 도포가 포함된다.

본 발명의 화합물은 1회 또는 투여 요법에 따라 투여될 수 있으며, 여기서 다수의 투여량은 주어진 기간 동안 다양한 시간 간격으로 투여된다. 예를 들어, 용량은 일일 1, 2, 3 또는 4회 투여될 수 있다. 원하는 치료 효과가 달성될 때까지 또는 원하는 치료 효과를 유지하기 위해 무기한 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물에 대한 적절한 투여 요법은 흡수, 분포 및 반감기와 같은 화합물의 약동학적 특성에 따라 달라지며, 이는 숙련된 기술자에 의해 결정될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물에 대한 적절한 투여 요법은 이러한 요법으로 투여되는 기간을 포함하여 치료되는 질병 또는 장애, 치료되는 질병 또는 장애의 중증도, 치료되는 환자의 연령 및 신체 상태, 치료할 환자의 병력, 병행 요법의 성격, 원하는 치료 효과 및 숙련된 장인의 지식과 전문 지식 내의 유사 요소에 따라 달라진다. 적절한 투여 요법은 투여 요법에 대한 개별 환자의 반응이 주어지거나 개별 환자가 변화를 필요로 하면서 시간이 지남에 따라 조정이 필요할 수 있음을 이러한 숙련된 기술자에 의해 추가로 이해될 것이다. 총 일일 복용량은 1 내지 2000mg이다.

치료에 사용하기 위해, 본 발명의 화합물은 일반적으로 환자에게 투여하기 전에 약학적 조성물 또는 투여 단위로 제형화될 것이지만 반드시 그런 것은 아니다. 따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 투여 단위에 관한 것이다.

본 발명의 약학적 조성물 또는 투여 단위는 유효량의 본 발명의 화합물을 추출한 다음 사용 분말, 시럽 및 주입 용액과 같은 것으로 환자에게 제공할 수 있는 벌크 형태로 제조 및 포장될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 약학적 조성물 또는 투여 단위는 단위 투여 형태로 제조 및 포장될 수 있다. 경구 적용을 위해, 예를 들어, 하나 이상의 정제 또는 캡슐이 투여될 수 있다. 약학적 조성물의 용량은 적어도 치료적 유효량의 본 발명의 화합물을 함유한다. 단위 투여 형태로 제조될 때, 약학적 조성물 또는 투여 단위는 1 내지 1000 mg의 대상 화합물을 함유할 수 있다.

본원에 제공된 바와 같이, 1 내지 1000 mg의 화합물을 함유하는 단위 투여 형태 (약학적 조성물 또는 투여 단위)는 1일 1, 2, 3 또는 4회, 바람직하게는 1일 1, 2 또는 3회, 더 바람직하게는 1일 1 또는 2회 투여될 수 있다.

본원에 사용된 "약학적으로 허용되는 부형제"는 조성물에 형태 또는 일관성을 부여하는 데 관여하는 물질, 조성물 또는 부형제 (vehicle)를 의미한다. 환자에게 투여할 때 본 발명의 화합물의 효능을 실질적으로 감소시키는 상호작용 및 약학적으로 허용되지 않는 약학적 조성물을 초래하는 상호작용이 방지되도록 각 부형제는 혼합될 때 약학적 조성물의 다른 성분과 상용성이어야 한다. 또한, 각각의 부형제는 약학적으로 허용될 수 있도록 충분히 높은 순도여야 한다.

본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제 또는 부형제는 일반적으로 원하는 투여 경로로 환자에게 투여하기 위해 적합한 투여 형태로 제형화될 것이다. 통상적인 투여 형태는 (1) 정제, 캡슐, 캐플릿 (caplet), 알약, 트로키 (troche), 분말, 시럽, 엘릭시르 (elixir), 현탁액, 용액, 에멀젼, 사셰 (sachet) 및 카세제 (cachet)와 같은 경구 투여; (2) 멸균 용액, 현탁액 및 재구성용 분말과 같은 비경구 투여; (3) 경피 패치와 같은 경피 투여; (4) 좌약과 같은 직장 투여; (5) 에어로졸 및 용액과 같은 흡입; 및 (6) 크림, 연고, 로션, 용액, 페이스트 (paste), 스프레이, 폼 및 젤과 같은 국소 투여에 적합한 것들을 포함한다.

적합한 약학적으로 허용되는 부형제는 선택된 특정 투여 형태에 따라 달라질 것이다. 또한, 적합한 약학적으로 허용되는 부형제는 이들이 조성물에서 작용할 수 있는 특정 기능을 위해 선택될 수 있다. 예를 들어, 특정 약학적으로 허용되는 부형제는 균일한 투여 형태의 생산을 용이하게 할 수 있도록 선택될 수 있다. 특정 약학적으로 허용되는 부형제는 안정한 투여 형태의 생산을 용이하게 할 수 있도록 위해 선택될 수 있다. 특정 약학적으로 허용되는 부형제는 환자에게 일단 투여된 본 발명의 화합물 또는 화합물을 한 장기 또는 신체 일부로부터 다른 장기 또는 신체 일부로 운반 또는 수송하는 것을 용이하게 하기 위해 선택될 수 있다. 특정 약학적으로 허용되는 부형제는 환자 순응도를 향상시키기 위해 선택될 수 있다.

적합한 약학적으로 허용되는 부형제는 하기 유형의 부형제를 포함한다: 희석제, 충전제, 결합제, 붕해제 (disintegrant), 윤활제, 활택제, 과립화제, 코팅제, 습윤제, 용매, 공용매, 현탁제, 유화제, 감미료, 향미제, 향미 차폐제, 착색제, 고결 방지제 (anti-caking agent), 습윤제, 킬레이트제, 가소제, 점도증가제 (viscosity increasing agent), 산화방지제, 방부제, 안정제, 계면활성제 및 완충제. 당업자는 특정 약학적으로 허용되는 부형제가 하나 이상의 기능을 제공할 수 있고, 부형제가 제형에 얼마나 많이 존재하고 어떤 다른 성분이 제형에 존재하는지에 따라 대체 기능을 제공할 수 있음을 이해할 것이다. 숙련된 장인은 본 발명에서의 용도를 위해 적절한 양으로 적합한 약학적으로 허용되는 부형제를 선택할 수 있도록 하는 당해 분야의 지식과 기술을 보유하고 있다. 또한, 약학적으로 허용되는 부형제를 설명하고 적합한 약학적으로 허용되는 부형제를 선택하는 데 유용할 수 있는 당업자에게 이용 가능한 많은 자료가 있다. 예를 들면 Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), 및 The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)가 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 당업자에게 공지된 기술 및 방법을 사용하여 제조된다. 당업계에서 일반적으로 사용되는 방법 중 일부는 Remington's Pharmaceutical Sciences (supra)에 설명되어 있다. 따라서, 본 발명의 또 다른 실시예는 약학적으로 허용되는 결정질 형태의 대상 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제와 혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물 또는 투여 단위를 제조하는 방법이다.

한 측면에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 및 희석제 또는 충전제를 포함하는 정제 또는 캡슐과 같은 고체 경구 투여 형태에 관한 것이다. 적합한 희석제 및 충전제는 락토스, 수크로스, 덱스트로스, 만니톨, 소르비톨, 전분 (예: 옥수수 전분, 감자 전분 및 예비 젤라틴화 (pre-gelatinized) 전분), 셀룰로스 및 이의 유도체 (예: 미정질 셀룰로스), 황산칼슘 및 이염기성인산칼슘 (dibasic calcium phosphate)을 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 결합제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 결합제는 전분 (예: 옥수수 전분, 감자 전분 및 예비 젤라틴화 전분), 젤라틴, 아카시아, 알긴산나트륨, 알긴산, 트라가칸트 (tragacanth), 구아검, 포비돈 (povidone) 및 셀룰로스 및 이의 유도체 (예: 미정질 셀룰로스)를 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 붕해제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 붕해제는 크로스포비돈 (crospovidone), 전분글리콜산나트륨 (sodium starch glycolate), 크로스카멜로스 (croscarmelose), 알긴산 및 카르복시메틸셀룰로스나트륨 (sodium carboxymethyl cellulose)을 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 윤활제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 윤활제는 스테아르산, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘 및 활석을 포함한다.

본 명세서에 설명된 실시예 및 구현예는 단지 예시를 위한 것이며, 그에 비추어 다양한 수정 또는 변경이 당업자에게 제안될 것이며 본 출원의 정신 및 범위 및 첨부된 청구항의 범위 내에 포함되어야 함을 이해해야 한다. 본 명세서에 인용된 내용을 포함하여 본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 모든 목적을 위해 그 전체가 본 명세서에 참조로 포함된다.

<실시예>

알파-키나아제 1은 박테리아 1-ADP-헵토스에 대한 사이토솔 선천적 면역수용체 (cytosolic innate immune receptor)이다.

종종 전 염증성 (proinflammatory) NF-κB 신호 전달을 활성화시키는 패턴 인식 수용체에 의한 병원체 관련 분자 패턴 (PAMP)의 면역 검출 (immune detection)은 항균 방어를 결정한다. 알려진 세균성 PAMP는 몇 가지 유형의 구조 분자 또는 뉴클레오티드 2차 전달자로 제한된다. 이전 연구에 따르면 예르시니아 및 기타 세균성 병원체의 유형 III 분비 시스템 (T3SS)이 숙주 NF-κB 신호를 활성화할 수 있다. 여기에서 우리는 가성결핵균 (Y. pseudotuberculosis)과 생화학 분석에서 전이인자 스크린 (screen)을 결합하고 T3SS 의존 NF-κB 활성화 및 염증성 사이토카인 생산을 매개하는 당 대사산물 1-ADP-β-D-만노-헵토스 (ADP-Hep)를 식별하였다. ADP-Hep는 생합성 전구체가 아닌 D-글리세로-β-D-만노 헵토스 1,7-이중인산 (HBP)은 자체적으로 숙주 세포질에 들어가 THP-1 및 293T 세포에서 NF-kB 활성화와 사이토카인 유도 (예: 인터루킨-8)를 한다. 이를 통해 ADP-Hep 유도 NF-κB 활성화에 필요한 알파-키나아제 1 (alpha-kinase 1, ALPK1)-TIFA 축을 식별하기 위해 게놈 전체의 CRISPR/Cas9 스크린을 수행할 수 있었다. ALPK1 N-말단 도메인 (NTD)은 ADP-Hep에 직접 결합하여 NTD-결합 C-말단 키나제 도메인을 자극하여 TIFA를 인산화하고 올리고머화를 유도한다. ALPK1-NTD/ADP-Hep 복합체의 결정구조는 이 리간드/수용체 인지의 원자 메커니즘을 나타냈다. HBP는 숙주 유래 아데닐기 전이효소 (adenylyltransferase)에 의해 ALPK1 활성화 능력이 있는 ADP-헵토스 7-P로 전환될 수 있으며, 숙주 세포로 형질주입된 HBP에서 관찰된 NF-κB 활성화를 설명한다. ADP-Hep (세포 불투과성 HBP는 아님) 또는 세균 감염의 주입은 Alpk1-의존적 방식으로 생쥐에서 강력한 염증 반응을 유도한다. ADP-Hep 및 ALPK1은 항균 면역에서 새롭고 일반적인 패턴 인식 경로이다.

ADP-Hep 단독 또는 세균감염 동안 Alpk1- 의존적 방식으로 강력한 면역 반응을 유도한다.

ADP-Hep 단독으로 생체 내에서 선천적 면역 반응을 자극할 수 있는지 조사하기 위해, 급성 염증을 평가하기 위해 확립된 생쥐 등쪽 공기 주머니 모델 (a mouse dorsal air pouch model)이 사용되었다 (Gaudet et al. Science 348, 1251-1255 (2015)).

화학적으로 합성된 ADP-LD-Hep를 공기 주머니에 주입하면 주머니에 대량의 호중구 동원이 유도되었다. 대조적으로, 화학적으로 합성된 동일한 양의 HBP는 공기 주머니 호중구의 수를 증가시키지 못하여 HBP가 포유류 세포에 들어갈 수 없다는 점에 동의한다. 그런 다음 공기 주머니 세척과 주입된 생쥐의 혈청 모두에서 36개의 사이토카인에 대해 다중 면역 분석을 수행하였다. IL-6, TNFα, C-X-C 모티프 케모카인 10 (IP-10/CXCL10), 단핵구 화학유인 단백질-1 및 3 (MCP-1/3), IFNγ, GM-CSF, MIP-1α 및 β, RANTES를 포함한 일련의 전 염증성 사이토카인 및 케모카인은 식염수 대조군에 비해 ADP-LD-Hep을 주입한 공기 주머니에서 높게 상승하였다. ADP-LD-Hep는 또한 혈청에서 각질세포 유래 케모카인 (GRO-α/KC/CXCL1), IP-10 및 MCP-1의 수준을 증가시켰다. ADP-LD-Hep와는 달리, HBP를 공기 주머니에 주입하는 것은 NF-κB 매개 전사의 알려진 표적인 이러한 염증성 사이토카인 및 케모카인의 국소 및 전신 생산에 영향을 미치지 않았다. 따라서 HBP가 아닌 ADP-Hep은 생쥐에서 선천적 면역 반응을 강력하게 활성화할 수 있다.

1-ADP-L/D-글리세로-α/β-L/D-만노/글루코/갈락토-헵토스 접합체는 강력한 면역 반응을 촉진한다.

1-ADP-헵토스 및 1-ADP-헵토스-7-인산염이 생체내에서 선천적 면역 반응을 자극할 수 있음을 확인하기 위해, 급성 염증을 평가하기 위해 확립된 생쥐 등쪽 공기 주머니 모델이 사용되었다 (Gaudet, et al. Science 348 , 1251-1255 (2015).

1-ADP-헵토스 및 1-ADP-헵토스-7-인산염을 공기 주머니에 주입하면 주머니에 호중구 동원이 유도된다. 공기 주머니 세척 및 주입된 생쥐의 혈청 모두에서 36개의 사이토 카인에 대해 동일한 다중 면역 분석을 수행하였고, IL-6, TNFα, C-X-C 모티프 케모카인 10 (IP-10/CXCL10), 단핵구 화학유인 단백질-1 및 3 (MCP-1/3), IFNγ, GM-CSF, MIP-1α 및 β, RANTES를 포함한 일련의 전 염증성 사이토카인 및 케모카인은 식염수 대조군과 비교하여 1-ADP-헵토스 및 1-ADP-헵토스-7-인산염이 주입된 공기 주머니에서 고도로 상승한다. 1-ADP-헵토스 및 1-ADP-헵토스-7-인산염은 또한 혈청 내 각질세포 유래 케모카인 (GRO-α/KC/CXCL1), IP-10 및 MCP-1의 수준을 증가시킨다. 화합물 1 내지 24 (표 2) 및 화합물 25 내지 38 (표 3)은 각각 ADP-LD-Hep의 약 30 내지 200% 범위의 향상된 호중구 동원 및 사이토카인/케모카인 유도를 보여준다. 따라서, 이러한 1-ADP-L/D-글리세로-α/β-L/D-만노/글루코/갈락토-헵토스 접합체는 생체 내에서 강력한 면역 반응을 촉진한다.

우리의 결과는 특히 ADP-헵토스 유사체 (UDP-헵토스, CDP-헵토스, dCDP-헵토스, dADP-헵토스, dGDP-헵토스, GDP-헵토스 및 dTDP-헵토스 포함)가 NF-kB를 활성화하고 293T 세포에서 TIFA 인산화를 유도할 수 있고; ADP-헵토스는 혈청 항원-특이적 IgG 생산을 증가시키기 위해 생체 내에서 아쥬반트 활성을 나타내었고; ADP-헵토스 종양내 주사는 B16-OVA 종양 성장을 억제 할 수 있으며; 항-PD-1 항체와 결합된 ADP-헵토스는 MC38 종양 성장을 억제할 수 있다는 것을 식별하였음을 입증한다. 도 1A 내지 1F 참조.

Claims (15)

1-ADP-헵토스 접합체를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 사람에게 투여하는 것을 포함하는 면역 반응을 촉진하는 방법.

제1항에 있어서, 상기 헵토스가 L/D-글리세로-α/β-L/D-만노/글루코/갈락토-헵토스의 구성인 방법.

제1항에 있어서, 상기 헵토스가 L/D-글리세로-α/β-L/D-만노-헵토스의 구성인 방법.

제1항에 있어서, 상기 헵토스가 L/D-글리세로-α/β-D-만노-헵토스의 구성인 방법.

제1항에 있어서, 상기 헵토스가 L/D-글리세로-β-D-만노-헵토스의 구성인 방법.

제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 접합체가 1-ADP-헵토스-7-인산염인 방법.

제1항에 있어서, 면역원을 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.

제1항에 있어서, 세균, 바이러스, 기생충 또는 암세포의 항원을 포함하는 면역원을 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.

제1항에 있어서, 면역관문 억제제를 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.

제1항에 있어서,
아데노신 A2A 수용체(A2AR);
분화클러스터 276 (CD276; B7-H3);
B 및 T 림프구 감쇠조절자 (BTLA; CD272);
세포독성 T 림프구 관련 단백질 4 (CTLA-4);
인돌아민 2,3-이산소화효소 (IDO);
살해 면역글로불린 유사 수용체 (KIR);
림프구 활성화 유전자 3 (LAG-3; CD223);
PD-1/예정사 리간드 1 또는 2 (PD-L1 또는 PD-L2);
T세포 면역글로불린 뮤신 3 (TIM-3); 또는
T세포 활성의 V-도메인 Ig 억제제 (VISTA)의 치료용 특이항체를 포함하는 면역관문억제제를 사람에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.

제7항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 면역원 또는 억제제를 포함하는 것인 방법.

1-ADP-헵토스 접합체를 포함하는 면역 반응을 촉진하는 약학적 조성물.

제12항에 있어서, 면역원을 추가로 포함하는 조성물.

제12항에 있어서, 면역관문 억제제를 추가로 포함하는 조성물.

제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 단위 투여 형태인 조성물.

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