KR20210013096A - 면역접합체 - Google Patents

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KR20210013096A
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마이클 엔. 알론소
데이비드 와이. 잭슨
브라이언 사피나
셸리 에린 애커맨
에드가 조지 잉글맨
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볼트 바이오테라퓨틱스 인코퍼레이티드
더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티
더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티
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Abstract

본 발명은 (a) (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체, 및 (b) 1-8개의 아쥬반트 코어를 포함하는 면역접합체를 제공하며, 상기 각 아쥬반트 코어는 상기 항체 구조체에 링커를 경유하여 공유 결합하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하고, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 초과이다. 또한, 본 발명은 면역접합체로 암을 치료하는 방법을 제공한다.

Description

면역접합체
관련 출원에 대한 상호-참조
본 특허 출원은 2018년 5월 17일자 출원된 미국 특허 가출원 제62/673,015호, 및 2018년 8월 29일자 출원된 제62/724,259호의 이익을 주장하고, 상기 모두는 그 전체가 본원에 참조로 통합된다.
참조로 통합된 전자적으로 제출된 자료
본 출원과 함께 제출된 컴퓨터-판독 가능한 뉴클레오티드/아미노산 서열목록은 그 전체가 본원에 참조로 통합되고, 하기와 같이 확인된다: 2019년 5월 17일자에 형성된, "743565_ST25.TXT"라는 파일명의 1개의 102,498 바이트 ASCII (텍스트) 파일.
종양이 성장하려면 면역 회피를 용이하게 하는 돌연변이의 획득을 필요로 한다는 것이 이제 잘 알려져 있다. 그럼에도 불구하고, 종양 형성 (tumorigenesis)은 돌연변이된 항원 또는 신생항원의 축적을 초래하고, 이는 엑스 비보 (ex vivo) 자극 후에 숙주 면역계에 의해 쉽게 인식된다. 면역계가 신생항원을 인식하지 못하는 이유와 방법이 밝혀지기 시작하였다. Carmi 등의 획기적인 연구 (Nature, 521: 99-104 (2015))에 따르면, 신생항원을 활성화된 수지상 세포에 항체-종양 면역 복합체를 경유하여 전달함으로써 면역 무시 (immune ignorance)를 극복할 수 있다고 지적하였다. 이들 연구에서, 종양 결합 항체 및 수지상 세포 아쥬반트 (adjuvants)를 종양내 주사를 통해 동시에 전달하면 강력한 항-종양 면역이 유도되었다.
접근 불가능한 종양에 도달시키고, 암 환자 및 다른 대상을 위한 치료 옵션을 확장하기 위해서, 항체 및 수지상 세포 아쥬반트 전달을 위한 신규한 조성물 및 방법이 필요하다. 본 발명은 이러한 요구 및 다른 요구를 해결한다.
제1 양상에서, 본 발명은 (a) (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체, 및 (b) 1-8개의 아쥬반트 코어를 포함하는 면역접합체 (immunoconjugate)를 제공하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 상기 항체 구조체에 링커를 경유하여 공유 결합하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하고, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 초과이다.
다른 양상에서, 본 발명은 (a) (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체, 및 (b) 1-8개의 아쥬반트 코어를 포함하는 면역접합체를 제공하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 상기 항체 구조체에 링커를 경유하여 공유 결합하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하고, 아스파르트산 잔기, 세린 잔기 및 아르기닌 잔기를 포함하는 toll-유사 수용체 (toll-like receptor)의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있으며, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 (1) 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자 및/또는 (2) 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있다.
추가의 일 양상에서, 본 발명은 본 발명의 복수의 면역접합체를 포함하는 조성물을 제공한다.
다른 양상에서, 본 발명은 본 발명에 따른 면역접합체 또는 본 발명의 면역접합체를 포함하는 조성물의 치료적으로 유효한 양을 치료 및 예방을 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료 및 예방하는 방법을 제공한다.
도 1은 TLR의 결합 도메인과 관련된 예시되는 아쥬반트 모이어티의 묘사이고, 여기서 A, B 및 C는 아쥬반트 코어를 나타내고, "HBA"는 TLR의 결합 도메인 내의 수소 결합-수용 아미노산이고, "HP"는 TLR의 결합 도메인 내의 수소 포켓이고, "RH"는 아쥬반트 코어 상의 소수성 치환기이고, "P"는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점이고, "
Figure pct00001
"는 2-아미노 질소 모이어티로부터 소수성 치환기까지의 거리를 나타내고, "
Figure pct00002
"는 2-아미노 질소 모이어티로부터 링커의 부착 지점까지의 거리를 나타낸다.
도 2a는 HCC1954 인간 관암종 (ductal carcinoma) 종양 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화 (myeloid activation)에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD40 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기 (Median fluorescence intensity)를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2b는 HCC1954 인간 관암종 종양 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD86 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2c는 HCC1954 인간 관암종 종양 세포를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. TNFα 분비는 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 사이토카인 비드 어레이 (cytokine bead array) (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)에 의해 측정되었다.
도 2d는 JIMT-1 인간 관암종 종양 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD40 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2e는 JIMT-1 인간 관암종 종양 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD86 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2f는 JIMT-1 인간 관암종 종양 세포를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. TNFα 분비는 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 사이토카인 비드 어레이 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)에 의해 측정되었다.
도 2g는 COLO 205 인간 결장 선암종 (colon adenocarcinoma) 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD40 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2h는 COLO 205 인간 결장 선암종 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. 공동-자극 분자 CD86 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)의 중앙값 형광 세기를 유세포 분석에 의해 측정하고, 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 나타내었다.
도 2i는 COLO 205 인간 결장 선암종 세포주를 사용한, 골수성 APC-종양 공동-배양물에서 골수성 활성화에 대한 면역접합체 A의 효과를 보여주는 그래프이다. TNFα 분비는 트라스투주맙 (점선, 원), 트라스투주맙 + 화합물 7 (파선, 삼각형), 및 면역접합체 A (실선, 정사각형)에 대해 사이토카인 비드 어레이 (생존 가능한 CD45+CD11c+HLA-DR+에 게이트된 세포)에 의해 측정되었다.
도 3a는 면역접합체 B가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화 (myeloid differentiation)를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 3b는 면역접합체 B가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 3c는 면역접합체 B가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 3d는 면역접합체 B와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 4a는 면역접합체 C가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 4b는 면역접합체 C가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 4c는 면역접합체 C가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 4d는 면역접합체 C와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 5a는 면역접합체 D가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 5b는 면역접합체 D가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 5c는 면역접합체 D가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 5d는 면역접합체 D와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 6a는 면역접합체 E가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 6b는 면역접합체 E가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 6c는 면역접합체 E가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 6d는 면역접합체 E와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 6e는 면역접합체 E와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 7a는 면역접합체 F가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 7b는 면역접합체 F가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 7c는 면역접합체 F가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 7d는 면역접합체 F와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 8a는 면역접합체 G가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 8b는 면역접합체 G가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 8c는 면역접합체 G가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 8d는 면역접합체 G와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 9는 면역접합체 H와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 10a는 면역접합체 I가 CD14 하향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 분화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 10b는 면역접합체 I가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 10c는 면역접합체 I가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 10d는 면역접합체 I와 18시간 인큐베이션한 후에 골수 세포로부터 TNFα 분비를 보여주는 그래프이다.
도 11a는 면역접합체 J가 CD40 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 11b는 면역접합체 J가 CD86 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 11c는 면역접합체 J가 CD123 상향조절에 의해 나타낸 바와 같이 골수성 활성화를 유도하는 것을 보여주는 그래프이다.
도 12는 인간 TLR7 및 인간 TLR8을 발현하는 HEK293 리포터 세포에 의해 입증된 바와 같이, 아쥬반트의 활성을 유지하기 위한 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소의 중요성을 예시하는 2개의 그래프 세트이다.
도 13은 공동자극 분자 CD40 및 CD86의 상향조절에 의해 측정된 바와 같이, 면역접합체의 활성을 유지하기 위한 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소의 중요성을 예시하는 2개의 그래프 세트이다.
도 14는 CD14, CD16 및 CD123 발현에 의해 측정된 바와 같이, 수지상 세포 분화를 유도하기 위한 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소의 중요성을 예시하는 3개의 그래프 세트이다.
일반 (GENERAL)
공유적으로 부착된 항체-아쥬반트 면역접합체, 즉 항체가 아쥬반트에 공유 결합된 링커에 공유 결합된 항체-아쥬반트 면역접합체는 비공유적으로 부착된 항체-아쥬반트 면역접합체보다 면역 활성화를 유도하는데 정량적 및 정성적으로 더 효과적이다. 또한, 본 발명에 따라 연결된 항체-아쥬반트 면역접합체는 다른 알려진 면역접합체보다 훨씬 더 효과적이다. 상기 아쥬반트-항체 접합체의 전신 투여는 종양내 주사 및 외과적 절제에 대한 필요 없이 원발성 종양 및 관련 전이의 동시 표적화를 가능하게 한다.
본원에 기재된 면역접합체의 효과는 아쥬반트 모이어티가 그 수용체로 결합하는 능력의 관점에서 고려될 수 있다. 본 발명의 면역접합체는 하기 특징들 중 하나 이상으로 인해 증가된 아쥬반트 활성을 갖는다: (i) 상기 아쥬반트는 비치환된 2-아미노 질소 모이어티를 포함하고, (ii) 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 그 수용체의 결합 도메인에서 필요한 정렬을 허용하는 2-아미노 질소 모이어티에 대한 위치에 존재하며, (iii) 상기 아쥬반트 모이어티는 적어도 1개의 탄소 원자 (예: 적어도 2개의 탄소 원자, 적어도 3개의 탄소 원자, 적어도 4개의 탄소 원자, 또는 적어도 6개의 탄소 원자)를 갖는 소수성 치환기를 추가로 포함할 수 있다.
정의
본원에서 사용된, 용어 "면역접합체 (immunoconjugate)"는 본원에 기재된 바와 같이 비-자연 발생 화학적 모이어티에 공유 결합된 항체 구조체 또는 항체를 지칭한다. 용어 "면역접합체" 및 "항체-아쥬반트 면역접합체"는 본원에서 상호교환 가능하게 사용된다.
본원에서 사용된, 문구 "항체 구조체 (antibody construct)"는 항원 결합 도메인 및 Fc 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 항체 구조체는 항체를 포함하거나 또는 항체일 수 있다.
본원에서 사용된, 문구 "항원 결합 도메인 (antigen binding domain)"은 특정 항원 (예: 파라토프 (paratope))에 특이적으로 결합하는 단백질, 또는 단백질의 일부, 예를 들어 항원과 상호 작용하고, 항원-결합 단백질에 항원에 대한 그의 특이성과 친화도를 부여하는 아미노산 잔기를 함유하는 항원-결합 단백질의 일부를 지칭한다.
본원에서 사용된, 문구 "Fc 도메인 (Fc domain)"은 단편 결정화 가능한 영역, 또는 항체의 테일 영역 (tail region)을 지칭한다. 상기 Fc 도메인은 세포 표면에서 Fc 수용체와 상호 작용한다.
본원에서 사용된, 문구 "표적화 결합 도메인 (targeting binding domain)"은 면역접합체의 항원 결합 도메인에 의해 결합된 항원과 구별되는 제2 항원에 특이적으로 결합하는 단백질 또는 단백질의 일부를 지칭한다. 상기 표적화 결합 도메인은 Fc 도메인의 C-말단 단부에서 항체 구조체에 접합될 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "항체 (antibody)"는 항원에 특이적으로 결합하고 이를 인식하는 면역글로불린 유전자 또는 이의 단편으로부터의 항원 결합 영역 (상보성 결정 영역 (CDR) 포함)을 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 상기 인식된 면역글로불린 유전자는 카파, 람다, 알파, 감마, 델타, 엡실론 및 뮤 (mu) 불변 영역 유전자뿐만 아니라 수많은 면역글로불린 가변 영역 유전자를 포함한다.
예시되는 면역글로불린 (항체) 구조 단위는 사량체 (tetramer)를 포함한다. 각 사량체는 2개의 동일한 폴리펩티드 사슬 쌍으로 이루어지며, 각 쌍은 하나의 "경쇄" (약 25 kD) 및 하나의 "중쇄" (약 50-70 kD)를 갖는다. 각 사슬의 N-말단은 주로 항원 인식을 담당하는 약 100 내지 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 정의한다. 상기 용어 가변 경쇄 (VL) 및 가변 중쇄 (VH)는 각각 이들 경쇄 및 중쇄를 지칭한다. 경쇄는 카파 또는 람다로 분류된다. 중쇄는 감마, 뮤, 알파, 델타 또는 엡실론으로 분류되고, 이는 차례로 각각 면역글로불린 클래스 IgG, IgM, IgA, IgD 및 IgE를 정의한다.
IgG 항체는 4개의 펩티드 사슬로 이루어진 약 150 kDa의 큰 분자이다. IgG 항체는 약 50 kDa의 2개의 동일한 클래스 γ 중쇄 및 약 25 kDa의 2개의 동일한 경쇄를 함유하여, 사량체 4차 구조를 형성한다. 상기 2개의 중쇄는 디설파이드 결합에 의해 서로 및 경쇄에 각각 연결된다. 수득된 사량체는 2개의 동일한 반쪽을 가지며, 이는 함께 Y-유사 형태를 형성한다. 포크의 각 단부는 동일한 항원 결합 부위를 함유한다. 인간에는 4개의 IgG 서브클래스 (IgG1, 2, 3, 4)가 있으며, 이는 혈청 중 이들의 풍부함 순서로 명명된다 (IgG1이 가장 풍부함). 전형적으로, 상기 항체의 항원-결합 영역은 결합의 특이성 및 친화도에서 가장 중요할 것이다.
이량체 (dimeric) IgA 항체는 약 320 kDa이다. IgA는 2개의 서브클래스 (IgA1 및 IgA2)를 가지며, 이량체 형태뿐만 아니라 단량체 형태로 생성될 수 있다. 상기 IgA 이량체 형태 (분비 또는 sIgA)가 가장 풍부하다.
항체는 예를 들어 온전한 면역글로불린으로서 또는 다양한 펩티다제에 의한 소화에 의해 생성된 다수의 잘-특성화된 단편으로서 존재할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 펩신 (pepsin)은 힌지 영역에서 디설파이드 연결 아래의 항체를 소화하여, 그 자체가 디설파이드 결합에 의해 VH-CH1에 연결된 경쇄인 Fab의 이량체인 F(ab)'2를 생성한다. 상기 F(ab)'2는 힌지 영역에서 디설파이드 연결을 끊기 위해 온화한 조건하에 환원되어, 상기 F(ab)'2 이량체를 Fab' 단량체로 전환할 수 있다. 상기 Fab' 단량체는 기본적으로 힌지 영역의 일부를 가진 Fab이다 (예컨대, Fundamental Immunology (Paul, editor, 7th edition, 2012) 참조). 다양한 항체 단편은 온전한 항체의 소화 측면에서 정의되지만, 이러한 단편은 화학적으로 또는 재조합 DNA 방법을 사용하여 새로운 방식으로 합성될 수 있다. 따라서, 본원에서 사용된 용어 항체는 또한 전체 항체의 변형에 의해 생성되거나, 재조합 DNA 방법을 사용하여 새로 합성되거나 (예를 들어, 단일 사슬 Fv), 또는 파지 디스플레이 라이브러리를 사용하여 확인된 항체 단편을 포함한다 (예컨대, McCafferty et al., Nature, 348: 552-554 (1990) 참조).
용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 이들이 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한, 특히 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이성 항체 (예: 이중특이성 항체) 및 항체 단편을 포괄한다. 본원에서 사용된 "항체 단편" 및 이의 모든 문법적 변이체는 온전한 항체의 항원 결합 부위 또는 가변 영역을 포함하는 온전한 항체의 일부로서 정의되고, 상기 일부는 온전한 항체의 Fc 영역의 불변 중쇄 도메인 (즉, 항체 이소타입에 따라, CH2, CH3 및 CH4)은 존재하지 않는다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, 및 Fv 단편; 디아바디 (diabodies); 인접한 아미노산 잔기의 하나의 연속된 (uninterrupted) 서열로 구성된 1차 구조를 갖는 폴리펩티드인 임의의 항체 단편 (본원에서 "단일-사슬 항체 단편" 또는 "단일 사슬 폴리펩티드"로 지칭됨)을 포함하고, 상기는 제한 없이, (1) 단일-사슬 Fv (scFv) 분자; (2) 결합된 중쇄 모이어티 없이, 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR을 함유하는, 하나의 경쇄 가변 도메인만을 함유하는 단일 사슬 폴리펩티드, 또는 이의 단편; (3) 결합된 경쇄 모이어티 없이, 중쇄 가변 영역의 3개의 CDR을 함유하는, 하나의 중쇄 가변 영역만을 함유하는 단일 사슬 폴리펩티드, 또는 이의 단편; (4) 비-인간 종 유래의 단일 Ig 도메인 또는 다른 특정 단일-도메인 결합 모듈을 포함하는 나노바디 (nanobodies); 및 (5) 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 또는 다가 구조를 포함한다. 하나 이상의 중쇄를 포함하는 항체 단편에서, 상기 중쇄(들)는 온전한 항체의 비-Fc 영역에서 발견되는 임의의 불변 도메인 서열 (예: IgG 이소타입에서 CH1)을 함유할 수 있고, 및/또는 온전한 항체에서 발견되는 임의의 힌지 영역 서열을 함유할 수 있으며, 및/또는 중쇄(들)의 힌지 영역 서열 또는 불변 도메인 서열에 융합되거나 또는 그 안에 위치하는 류신 지퍼 서열 (leucine zipper sequence)을 함유할 수 있다.
본원에서 사용된, 생물학적 제품과 관련한 용어 "바이오시밀러 (biosimilar)"는 생물학적 제품이 임상적으로 불활성인 성분들과 경미한 차이가 있지만 참조 제품과 매우 유사하고, 생물학적 제품 및 참조 제품 간에 상기 제품의 안전성, 순도 및 효능 측면에서 임상적으로 유의미한 차이가 없음을 의미한다.
본원에서 사용된, 용어 "에피토프 (epitope)"는 파라토프라고도 하는, 항체의 항원-결합 부위에 결합하는, 항원 상에 임의의 항원성 결정인자를 의미한다. 에피토프 결정인자는 통상 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자들의 화학적으로 활성인 표면 그룹으로 구성되고, 통상 특정 전하 특성뿐만 아니라 특정 3차원 구조적 특성을 갖는다.
용어 "폴리펩티드 (polypeptide)", "펩티드 (peptide)" 및 "단백질 (protein)"은 아미노산 잔기의 폴리머를 지칭하기 위해 본원에서 상호교환 가능하게 사용된다. 이러한 용어들은 또한 자연 발생 아미노산 폴리머 및 비-자연 발생 아미노산 폴리머뿐만 아니라 하나 이상의 아미노산 잔기가 상응하는 자연 발생 아미노산의 인공 화학적 모방체인 아미노산 폴리머에도 적용된다.
본원에서 사용된, 용어 "아쥬반트 (adjuvant)"는 아쥬반트에 노출된 대상에서 면역 반응을 유도할 수 있는 물질을 지칭한다.
본원에서 사용된, 문구 "아쥬반트 모이어티 (adjuvant moiety)"는 본원에 기재된 바와 같이 항체에 공유 결합된 아쥬반트를 지칭한다. 상기 아쥬반트 모이어티는 항체에 결합되는 동안 또는 면역접합체를 대상에게 투여한 후 항체로부터 절단 (예: 효소 절단) 후에 면역 반응을 유도할 수 있다.
본원에서 사용된, 문구 "패턴 인식 수용체 (pattern recognition receptor)" 및 용어 "PRR"은 병원체-관련 분자 패턴 (PAMP) 또는 손상-관련 분자 패턴 (DAMP)을 인식하고, 선천성 면역의 핵심 신호전달 요소로서 작용하는 보존된 포유류 단백질 부류의 임의의 구성원을 지칭한다. 패턴 인식 수용체는 막-결합된 PRR, 세포질 PRR 및 분비된 PRR로 나뉜다. 막-결합된 PRR의 예는 Toll-유사 수용체 (TLR) 및 C-타입 렉틴 수용체 (CLR)를 포함한다. 세포질 PRR의 예는 NOD-유사 수용체 (NLR) 및 Rig-I-유사 수용체 (RLR)를 포함한다.
본원에서 사용된, 문구 "Toll-유사 수용체 (toll-like receptor)" 및 "TLR"은 병원체-관련 분자 패턴을 인식하고 선천성 면역에서 핵심 신호전달 요소로 작용하는 고도로-보존된 포유류 단백질 패밀리의 임의의 구성원을 지칭한다. TLR 폴리펩티드는 류신-풍부 반복부를 갖는 세포외 도메인, 막횡단 도메인 및 TLR 신호전달에 관여하는 세포내 도메인을 포함하는 특징적인 구조를 공유한다.
문구 "Toll-유사 수용체 1 (toll-like receptor 1)" 및 용어 "TLR1"은 공개적으로 이용 가능한 TLR1 서열, 예컨대 인간 TLR1 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAY85643 또는 뮤린 (murine) TLR1 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAG37302에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 2 (toll-like receptor 2)" 및 용어 "TLR2"는 공개적으로 이용 가능한 TLR2 서열, 예컨대 인간 TLR2 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAY85648 또는 뮤린 TLR2 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAD49335에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 3 (toll-like receptor 3)" 및 용어 "TLR3"은 공개적으로 이용 가능한 TLR3 서열, 예컨대 인간 TLR3 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAC34134 또는 뮤린 TLR3 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAK26117에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 4 (toll-like receptor 4)" 및 용어 "TLR4"는 공개적으로 이용 가능한 TLR4 서열, 예컨대 인간 TLR4 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAY82270 또는 뮤린 TLR4 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAD29272에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 5 (toll-like receptor 5)" 및 용어 "TLR5"는 공개적으로 이용 가능한 TLR5 서열, 예컨대 인간 TLR5 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 ACM69034 또는 뮤린 TLR5 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAF65625에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 6 (toll-like receptor 6)" 및 용어 "TLR6"은 공개적으로 이용 가능한 TLR6 서열, 예컨대 인간 TLR6 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 ABY67133 또는 뮤린 TLR6 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAG38563에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 7 (toll-like receptor 7)" 및 용어 "TLR7"은 공개적으로 이용 가능한 TLR7 서열, 예컨대 인간 TLR7 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAZ99026 또는 뮤린 TLR7 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAK62676에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 8 (toll-like receptor 8)" 및 용어 "TLR8"은 공개적으로 이용 가능한 TLR8 서열, 예컨대 인간 TLR8 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAZ95441 또는 뮤린 TLR8 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAK62677에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 7/8 (toll-like receptor 7/8)" 및 용어 "TLR7/8"은 TLR7 효능제 및 TLR8 효능제 모두인 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 9 (toll-like receptor 9)" 및 용어 "TLR9"는 공개적으로 이용 가능한 TLR9 서열, 예컨대 인간 TLR9 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAF78037 또는 뮤린 TLR9 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAK28488에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 10 (toll-like receptor 10)" 및 용어 "TLR10"은 공개적으로 이용 가능한 TLR10 서열, 예컨대 인간 TLR10 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAK26744에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
문구 "Toll-유사 수용체 11 (toll-like receptor 11)" 및 용어 "TLR11"은 공개적으로 이용 가능한 TLR11 서열, 예컨대 뮤린 TLR11 폴리펩티드의 경우 GenBank 수탁 번호 AAS83531에 대해 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 초과의 서열 동일성을 공유하는 핵산 또는 폴리펩티드를 지칭한다.
"TLR 효능제 (TLR agonist)"는 TLR 신호전달을 유도하기 위해 TLR (예: TLR7 및/또는 TLR8)에 직접 또는 간접적으로 결합하는 물질이다. TLR 신호전달에서 임의의 검출 가능한 차이는 효능제가 TLR을 자극 또는 활성화한다는 것을 나타낼 수 있다. 신호전달 차이는 예를 들어 표적 유전자의 발현, 신호 전달 성분의 인산화, NK-κB와 같은 다운스트림 요소의 세포내 국소화, 다른 단백질 또는 세포내 구조와 소정의 성분들 (예컨대 IRAK)의 결합, 또는 키나제 (예컨대 MAPK)와 같은 성분들의 생화학적 활성의 변화로서 나타낼 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "아미노산 (amino acid)"은 펩티드, 폴리펩티드 또는 단백질에 혼입될 수 있는 임의의 단량체 단위를 지칭한다. 아미노산은 자연-발생 α-아미노산 및 그의 입체이성질체, 및 비-천연 (비-자연 발생) 아미노산 및 그의 입체이성질체를 포함한다. 주어진 아미노산의 "입체이성질체 (stereoisomers)"는 동일한 분자식 및 분자내 결합을 갖지만, 결합 및 원자의 3차원 배열이 상이한 이성질체를 지칭한다 (예: L-아미노산 및 상응하는 D-아미노산).
자연-발생 아미노산은 유전자 코드에 의해 코딩된 아미노산, 및 이후에 변형되는 아미노산, 예컨대 히드록시프롤린, γ-카복시글루타메이트 및 O-포스포세린이 있다. 자연-발생 α-아미노산은 알라닌 (Ala), 시스테인 (Cys), 아스파르트산 (Asp), 글루탐산 (Glu), 페닐알라닌 (Phe), 글리신 (Gly), 히스티딘 (His), 이소류신 (Ile), 아르기닌 (Arg), 리신 (Lys), 류신 (Leu), 메티오닌 (Met), 아스파라긴 (Asn), 프롤린 (Pro), 글루타민 (Gln), 세린 (Ser), 트레오닌 (Thr), 발린 (Val), 트립토판 (Trp), 티로신 (Tyr) 및 이들의 조합을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 자연-발생 α-아미노산의 입체이성질체는 D-알라닌 (D-Ala), D-시스테인 (D-Cys), D-아스파르트산 (D-Asp), D-글루탐산 (D-Glu), D-페닐알라닌 (D-Phe), D-히스티딘 (D-His), D-이소류신 (D-Ile), D-아르기닌 (D-Arg), D-리신 (D-Lys), D-류신 (D-Leu), D-메티오닌 (D-Met), D-아스파라긴 (D-Asn), D-프롤린 (D-Pro), D-글루타민 (D-Gln), D-세린 (D-Ser), D-트레오닌 (D-Thr), D-발린 (D-Val), D-트립토판 (D-Trp), D-티로신 (D-Tyr) 및 이들의 조합을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
비천연 (비-자연 발생) 아미노산은 자연-발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 L- 또는 D-배치의 아미노산 유사체, 아미노산 모방체, 합성 아미노산, N-치환된 글리신 및 N-메틸 아미노산을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어, "아미노산 유사체 (Amino acid analogs)"는 자연-발생 아미노산과 동일한 기본 화학 구조를 갖지만 (즉, 수소, 카복실기, 아미노기에 결합된 탄소), 변형된 측쇄 그룹 또는 변형된 펩티드 백본을 가진 비천연 아미노산, 예컨대 호모세린, 노르류신, 메티오닌 설폭사이드, 메티오닌 메틸 설포늄일 수 있다. "아미노산 모방체 (Amino acid mimetics)"는 아미노산의 일반적인 화학 구조와는 다른 구조를 갖지만, 자연-발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 화합물을 지칭한다. 아미노산은 일반적으로 알려진 3-문자 기호 또는 IUPAC-IUB 생화학 명명법 위원회에서 권장하는 1-문자 기호로 본원에서 지칭될 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "면역 체크포인트 억제제 (immune checkpoint inhibitors)"는 면역 체크포인트 분자의 활성을 억제하는 임의의 조절제를 지칭한다. 면역 체크포인트 억제제는 면역 체크포인트 분자 결합 단백질, 소분자 억제제, 항체, 항체-유도체 (Fc 융합, Fab 단편 및 scFv 포함), 항체-약물 접합체, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA, 압타머 (aptamers), 펩티드 및 펩티드 모방체를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
연결 모이어티를 단백질 및 다른 물질에 연결하는데 유용한 결합에는 아미드, 아민, 에스테르, 카바메이트, 우레아, 티오에테르, 티오카바메이트, 티오카보네이트 및 티오우레아를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. "2가 (divalent)" 연결 모이어티는 2개의 관능기들을 연결하기 위한 2개의 부착 지점을 함유하고; 다가 연결 모이어티는 추가의 관능기들을 연결하기 위한 추가의 부착 지점을 가질 수 있다. 예를 들어, 2가 연결 모이어티는 2가 폴리머 모이어티, 예컨대 2가 폴리(에틸렌 글리콜), 2가 폴리(프로필렌 글리콜) 및 2가 폴리(비닐 알코올)을 포함한다.
본원에서 사용된, 용어 "선택적으로 존재하는"이 화학 구조 (예: "X" 또는 "Y")를 지칭하는데 사용되는 경우, 해당 화학 구조가 존재하지 않으면, 상기 화학 구조에 원래 만들어진 결합이 인접한 원자에 직접 만들어진다.
본원에서 사용된, 용어 "링커 (linker)"는 화합물 또는 물질 중에 2개 이상의 모이어티들을 공유 결합하는 관능기를 지칭한다. 예를 들어, 상기 링커는 면역접합체에서 아쥬반트 코어를 항체 구조체에 공유 결합시키는 역할을 할 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "스페이서 (spacer)"는 화합물 또는 물질 중에 2개 이상의 모이어티들을 공유 결합하는 관능기를 지칭한다. 예를 들어, 상기 스페이서는 면역접합체에서 아쥬반트 모이어티를 항체 구조체에 공유 결합시킬 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "알킬 (alkyl)"은 표시된 수의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄, 포화 지방족 라디칼을 지칭한다. 알킬은 임의의 수의 탄소, 예컨대 C1-2, C1-3, C1-4, C1-5, C1-6, C1-7, C1-8, C1-9, C1-10, C2-3, C2-4, C2-5, C2-6, C3-4, C3-5, C3-6, C4-5, C4-6 및 C5-6을 포함할 수 있다. 예를 들어, C1-6 알킬은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 헥실 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 알킬은 또한 최대 30개의 탄소 원자를 가진 알킬기를 지칭할 수 있고, 예컨대 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 알킬기는 치환 또는 비치환될 수 있다. "치환된 알킬" 기는 할로, 히드록시, 아미노, 옥소 (=O), 알킬아미노, 아미도, 아실, 니트로, 시아노 및 알콕시로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다. 용어 "알킬렌"은 2가 알킬 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "헤테로알킬 (heteroalkyl)"은 본원에 기재된 바와 같은 알킬기를 지칭하며, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 헤테로원자로 대체된다. 용어 "헤테로알킬렌"은 2가 헤테로알킬 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "시클로알킬"은 3 내지 12개의 고리 원자, 또는 표시된 수의 원자를 함유하는 포화 또는 부분 불포화, 모노시클릭 (monocyclic), 융합된 비시클릭 (fused bicyclic), 또는 브릿지된 폴리시클릭 (bridged polycyclic) 고리 조립체를 지칭한다. 시클로알킬은 임의의 수의 탄소, 예컨대 C3-6, C4-6, C5-6, C3-8, C4-8, C5-8, C6-8, C3-9, C3-10, C3-11, 및 C3-12를 포함할 수 있다. 포화 모노시클릭 카보시클릭 고리는 예를 들어 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로옥틸을 포함한다. 포화 비시클릭 및 폴리시클릭 카보시클릭 고리는 예를 들어 노르보르난, [2.2.2] 비시클로옥탄, 데카히드로나프탈렌 및 아다만탄을 포함한다. 시클로알킬기는 또한 고리에 하나 이상의 이중 또는 삼중 결합을 갖는, 부분적으로 불포화될 수 있다. 부분적으로 불포화된 대표적인 카보시클릭기는 시클로부텐, 시클로펜텐, 시클로헥센, 시클로헥사디엔 (1,3- 및 1,4-이성질체), 시클로헵텐, 시클로헵타디엔, 시클로옥텐, 시클로옥타디엔 (1,3-, 1,4- 및 1,5-이성질체), 노르보르넨 및 노르보르나디엔을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
불포화된 카보시클릭기는 또한 아릴기를 포함한다. 용어 "아릴"은 임의의 적절한 수의 고리 원자 및 임의의 적절한 수의 고리를 갖는 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 아릴기는 임의의 적절한 수의 고리 원자, 예컨대 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 또는 16개의 고리 원자뿐만 아니라 6 내지 10개, 6 내지 12개 또는 6 내지 14개의 고리 구성원을 포함할 수 있다. 아릴기는 모노시클릭일 수 있거나, 융합되어 비시클릭 또는 트리시클릭기를 형성할 수 있거나, 또는 결합에 의해 연결되어 비아릴기를 형성할 수 있다. 대표적인 아릴기는 페닐, 나프틸 및 비페닐을 포함한다. 다른 아릴기는 메틸렌 연결기를 갖는 벤질을 포함한다. 일부 아릴기는 6 내지 12개의 고리 구성원, 예컨대 페닐, 나프틸 또는 비페닐을 갖는다. 다른 아릴기는 6 내지 10개의 고리 구성원, 예컨대 페닐 또는 나프틸을 갖는다. 아릴기는 치환 또는 비치환될 수 있다. "치환된 아릴" 기는 할로, 히드록시, 아미노, 옥소 (=O), 알킬아미노, 아미도, 아실, 니트로, 시아노, 알킬 및 알콕시로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.
"2가 (divalent)" 시클로알킬은 분자 또는 물질 중에 2개의 모이어티들을 공유적으로 연결하기 위한 2개의 부착 지점을 갖는 카보시클릭기를 지칭한다. 시클로알킬기는 치환 또는 비치환될 수 있다. "치환된 시클로알킬" 기는 할로, 히드록시, 아미노, 옥소 (=O), 알킬아미노, 아미도, 아실, 니트로, 시아노, 알킬 및 알콕시로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "헤테로사이클 (heterocycle)"은 헤테로시클로알킬기 및 헤테로아릴기를 지칭한다. "헤테로아릴"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서, 5 내지 16개의 고리 원자를 함유하는 모노시클릭 또는 융합된 비시클릭 또는 트리시클릭 방향족 고리 조립체를 지칭하고, 여기서 고리 원자들 중 1 내지 5개는 헤테로원자 예컨대 N, O 또는 S이다. B, Al, Si 및 P를 포함하지만 이에 한정되지 않는, 부가의 헤테로원자가 또한 유용할 수 있다. 상기 헤테로원자는 산화되어 이에 한정되는 것은 아니지만 -S(O)- 및 -S(O)2-와 같은 모이어티를 형성할 수 있다. 헤테로아릴기는 임의의 수의 고리 원자, 예컨대 3 내지 6, 4 내지 6, 5 내지 6, 3 내지 8, 4 내지 8, 5 내지 8, 6 내지 8, 3 내지 9, 3 내지 10, 3 내지 11, 또는 3 내지 12개의 고리 구성원을 포함할 수 있다. 헤테로아릴기 중에 포함될 수 있는 헤테로원자의 임의의 적절한 수는 예컨대 1, 2, 3, 4 또는 5, 또는 1 내지 2, 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 2 내지 3, 2 내지 4, 2 내지 5. 3 내지 4, 또는 3 내지 5개일 수 있다. 상기 헤테로아릴기는 피롤, 피리딘, 이미다졸, 피라졸, 트리아졸, 테트라졸, 피라진, 피리미딘, 피리다진, 트리아진 (1,2,3-, 1,2,4- 및 1,3,5-이성질체), 티오펜, 푸란, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸 및 이속사졸과 같은 기를 포함할 수 있다. 상기 헤테로아릴기는 또한 방향족 고리 시스템, 예컨대 페닐 고리에 융합되어, 벤조피롤 예컨대 인돌 및 이소인돌, 벤조피리딘 예컨대 퀴놀린 및 이소퀴놀린, 벤조피라진 (퀴녹살린), 벤조피리미딘 (퀴나졸린), 벤조피리다진 예컨대 프탈라진 및 시놀린, 벤조티오펜 및 벤조푸란을 포함하지만, 이에 한정되지 않는 구성원을 형성할 수 있다. 다른 헤테로아릴기는 결합에 의해 연결된 헤테로아릴 고리, 예컨대 비피리딘을 포함한다. 헤테로아릴기는 치환 또는 비치환될 수 있다. "치환된 헤테로아릴" 기는 할로, 히드록시, 아미노, 옥소 (=O), 알킬아미노, 아미도, 아실, 니트로, 시아노, 알킬 및 알콕시로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.
헤테로아릴기는 고리에서 임의의 위치를 경유하여 연결될 수 있다. 예를 들어, 피롤은 1-, 2- 및 3-피롤을 포함하고, 피리딘은 2-, 3- 및 4-피리딘을 포함하며, 이미다졸은 1-, 2-, 4- 및 5-이미다졸을 포함하고, 피라졸은 1-, 3-, 4- 및 5-피라졸을 포함하며, 트리아졸은 1-, 4- 및 5-트리아졸을 포함하고, 테트라졸은 1- 및 5-테트라졸을 포함하며, 피리미딘은 2-, 4-, 5- 및 6-피리미딘을 포함하고, 피리다진은 3- 및 4-피리다진을 포함하며, 1,2,3-트리아진은 4- 및 5-트리아진을 포함하고, 1,2,4-트리아진은 3-, 5- 및 6-트리아진을 포함하며, 1,3,5-트리아진은 2-트리아진을 포함하고, 티오펜은 2- 및 3-티오펜을 포함하며, 푸란은 2- 및 3-푸란을 포함하고, 티아졸은 2-, 4- 및 5-티아졸을 포함하며, 이소티아졸은 3-, 4- 및 5-이소티아 졸을 포함하고, 옥사졸은 2-, 4- 및 5-옥사졸을 포함하고, 이속사졸은 3-, 4- 및 5-이속사졸을 포함하며, 인돌은 1-, 2- 및 3-인돌을 포함하고, 이소인돌은 1- 및 2-이소인돌을 포함하며, 퀴놀린은 2-, 3- 및 4-퀴놀린을 포함하고, 이소퀴놀린은 1-, 3- 및 4-이소퀴놀린을 포함하며, 퀴나졸린은 2- 및 4-퀴노아졸린을 포함하고, 신놀린은 3- 및 4-신놀린을 포함하며, 벤조티오펜은 2- 및 3-벤조티오펜을 포함하고, 벤조푸란은 2- 및 3-벤조푸란을 포함한다.
"헤테로시클로알킬 (heterocycloalkyl)"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서, 3 내지 12개의 고리 구성원 및 1 내지 4개의 N, O 및 S의 헤테로원자를 갖는 포화 고리 시스템을 지칭한다. B, Al, Si 및 P를 포함하지만 이에 한정되지 않는, 부가의 헤테로원자가 또한 유용할 수 있다. 상기 헤테로원자는 산화되어, 이에 한정되는 것은 아니지만 -S(O)- 및 -S(O)2-와 같은 모이어티를 형성할 수 있다. 헤테로시클로알킬기는 임의의 수의 고리 원자, 예컨대 3 내지 6, 4 내지 6, 5 내지 6, 3 내지 8, 4 내지 8, 5 내지 8, 6 내지 8, 3 내지 9, 3 내지 10, 3 내지 11 또는 3 내지 12개의 고리 구성원을 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬기 중에 포함될 수 있는 헤테로원자의 임의의 적절한 수는 예컨대 1, 2, 3 또는 4, 또는 1 내지 2, 1 내지 3, 1 내지 4, 2 내지 3, 2 내지 4, 또는 3 내지 4개일 수 있다. 상기 헤테로시클로알킬기는 아지리딘, 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘, 아제판, 아조칸, 퀴누클리딘, 피라졸리딘, 이미다졸리딘, 피페라진 (1,2-, 1,3- 및 1,4-이성질체), 옥시란, 옥세탄, 테트라히드로푸란, 옥산 (테트라히드로피란), 옥세판, 티이란 (thiirane), 티에탄, 티올란 (테트라히드로티오펜), 티안 (테트라히드로티오피란), 옥사졸리딘, 이속사졸리딘, 티아졸리딘, 이소티아졸리딘, 디옥솔란, 디티올란, 모르폴린, 티오모르폴린, 디옥산 또는 디티안과 같은 기를 포함할 수 있다. 상기 헤테로시클로알킬기는 또한 방향족 또는 비-방향족 고리 시스템에 융합되어, 이에 한정되는 것은 아니지만 인돌린을 포함하는 구성원을 형성할 수 있다. 헤테로시클로알킬기는 비치환 또는 치환될 수 있다. "치환된 헤테로시클로알킬" 기는 할로, 히드록시, 아미노, 옥소 (=O), 알킬아미노, 아미도, 아실, 니트로, 시아노, 알킬 및 알콕시로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.
헤테로시클로알킬기는 고리에서 임의의 위치를 경유하여 연결될 수 있다. 예를 들어, 아지리딘은 1- 또는 2-아지리딘일 수 있고, 아제티딘은 1- 또는 2-아제티딘일 수 있으며, 피롤리딘은 1-, 2- 또는 3-피롤리딘일 수 있고, 피페리딘은 1-, 2-, 3- 또는 4-피페리딘일 수 있으며, 피라졸리딘은 1-, 2-, 3- 또는 4-피라졸리딘일 수 있고, 이미다졸리딘은 1-, 2-, 3- 또는 4-이미다졸리딘일 수 있으며, 피페라진은 1-, 2-, 3- 또는 4-피페라진일 수 있고, 테트라히드로푸란은 1- 또는 2-테트라히드로푸란일 수 있으며, 옥사졸리딘은 2-, 3-, 4- 또는 5-옥사졸리딘일 수 있고, 이속사졸리딘은 2-, 3-, 4- 또는 5-이속사졸리딘일 수 있으며, 티아졸리딘은 2-, 3-, 4- 또는 5-티아졸리딘일 수 있고, 이소티아졸리딘은 2-, 3-, 4- 또는 5-이소티아졸리딘일 수 있으며, 모르폴린은 2-, 3- 또는 4-모르폴린일 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "할로 (halo)" 및 "할로겐 (halogen)"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서, 불소, 염소, 브롬 또는 요오드 원자를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "카보닐 (carbonyl)"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서, -C(O)-, 즉 산소에 이중 결합하고 카보닐을 갖는 모이어티 중에 다른 2개의 기에 결합된 탄소 원자를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "아미노 (amino)"는 모이어티 -NR3을 지칭하고, 여기서 각 R 기는 H 또는 알킬이다. 아미노 모이어티는 이온화되어 상응하는 암모늄 양이온을 형성할 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "히드록시 (hydroxy)"는 모이어티 -OH를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "시아노 (cyano)"는 질소 원자에 삼중-결합된 탄소 원자 (즉, 모이어티 -C≡N)를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "카복시 (carboxy)"는 모이어티 -C(O)OH를 지칭한다. 카복시 모이어티는 이온화되어 상응하는 카복실레이트 음이온을 형성할 수 있다.
본원에서 사용된, 용어 "아미도 (amido)"는 모이어티 -NRC(O)R 또는 -C(O)NR2를 지칭하고, 여기서 각 R 기는 H 또는 알킬이다.
본원에서 사용된, 용어 "니트로 (nitro)"는 모이어티 -NO2를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "옥소 (oxo)"는 화합물에 이중-결합된 산소 원자 (즉, O=)를 지칭한다.
본원에서 사용된, 용어 "치료하다 (treat)", "치료 (treatment)" 및 "치료하는 (treating)"은, 임의의 객관적 또는 주관적 파라미터 예컨대 증상 감소 (abatement); 완화 (remission); 점감 (diminishing), 또는 증상, 상해, 병리 또는 병태를 환자가 더 견딜 수 있게 발휘; 증상 진행 속도의 감소; 증상 또는 병태의 빈도 또는 기간 감소; 또는 일부 상황에서, 증상 발병의 예방을 포함하는, 상해, 병리, 병태 또는 증상 (예: 인지 손상)의 치료 또는 개선에서 임의의 성공 표시를 지칭한다. 상기 증상의 치료 또는 개선은 임의의 객관적 또는 주관적 파라미터에 기반할 수 있고; 예를 들어 신체 검사 결과를 포함한다.
본원에서 사용된, 용어 "암 (cancer)"은 고형암, 림프종 및 백혈병을 포함하는 병태를 의미한다. 상이한 타입의 암의 예는 폐암 (예: 비-소세포 폐암 또는 NSCLC), 난소암, 전립선암, 결장직장암, 간암 (즉, 간세포암종), 신장암 (즉, 신세포 암종), 방광암, 유방암, 갑상선암, 흉막암, 췌장암, 자궁암, 자궁경부암, 고환암, 항문암, 담관암, 위장관 카르시노이드 종양 (gastrointestinal carcinoid tumors), 식도암, 담낭암, 맹장암, 소장암, 위암, 중추신경계암, 피부암 (예: 흑색종), 융모막암종 (choriocarcinoma), 두경부암, 혈액암, 골육종, 섬유육종, 신경모세포종, 신경아교종, 흑색종, B-세포 림프종, 비-호지킨 림프종 (non-Hodgkin's lymphoma), 버킷 림프종 (Burkitt's lymphoma), 소세포 림프종 (Small Cell lymphoma), 대세포 림프종 (Large Cell lymphoma), 단핵구 백혈병, 골수성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병 및 다발성 골수종을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용된 문구 "유효량 (effective amount)" 및 "치료적으로 유효한 양 (therapeutically effective amount)은 물질 예컨대 면역접합체를 투여하여 치료 효과를 발휘하는 용량을 지칭한다. 특정 용량은 치료 목적에 따라 다를 것이고, 알려져 있는 기술을 사용하여 당업자에 의해 확인될 수 있을 것이다 (예컨대, Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (volumes 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Pickar, Dosage Calculations (1999); Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 11th Edition, 2006, Brunton, ed., McGraw-Hill; and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, 2005, Hendrickson, Ed., Lippincott, Williams & Wilkins 참조).
본원에서 사용된, 용어 "대상 (subject)"은 영장류 (예: 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는 포유류 동물과 같은 동물을 지칭한다. 소정의 구체예에서, 상기 대상은 인간이다.
본원에서 사용된, 용어 "투여하는 (administering)"는 대상에 대한, 비경구, 정맥내, 복강내, 근육내, 종양내, 병변내, 비강내 또는 피하 투여, 경구 투여, 좌약, 국소 접촉과 같은 투여, 척수강내 투여, 또는 서방형 장치, 예컨대 미니-오스모틱 펌프 (mini-osmotic pump) 이식을 지칭한다.
수치를 수식하기 위해 본원에서 사용되는 용어 "약" 및 "대략"은 그 명시된 값 주위의 상대적으로 근사한 범위를 나타낸다. "X"가 값이면, "약 X" 또는 "대략 X"는 0.9X 내지 1.1X, 예컨대 0.95X 내지 1.05X 또는 0.99X 내지 1.01X의 값을 나타낸다. "약 X" 또는 "대략 X"에 대한 언급은 구체적으로 적어도 상기 값 X, 0.95X, 0.96X, 0.97X, 0.98X, 0.99X, 1.01X, 1.02X, 1.03X, 1.04X 및 1.05X를 나타낸다. 따라서, "약 X" 및 "대략 X"는 예를 들어 "0.98X"의 청구 제한에 대한 상세한 설명의 뒷받침을 교시하고 제공하기 위한 것이다.
본원에서 사용된, 문구 "링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점"은 링커가 결합된 아쥬반트 코어 중에 존재하는 탄소 원자 또는 질소 원자를 지칭한다.
본원에서 사용된, 문구 "소수성 치환기의 아쥬반트 코어로의 부착 지점"은 링커가 결합된 아쥬반트 코어 중에 존재하는 탄소 원자 또는 질소 원자를 지칭한다.
항체 아쥬반트 접합체
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 하기 화학식의 면역접합체 A의 것이고:
Figure pct00003
,
상기 P는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 나타내고, 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티를 포함하며, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다.
상기 화학식의 면역접합체 A의 면역접합체는 또한 하기 화학식의 면역접합체 B에 의해 정의될 수 있다:
Figure pct00004
;
상기 아쥬반트 모이어티는 2-아미노 질소 모이어티 및 스페이서를 부착하기 위한 합성 핸들 (synthetic handle)을 포함하고, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 모이어티는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 모이어티 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다.
따라서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 아쥬반트 모이어티 A의 것일 수 있고:
Figure pct00005
,
상기 링커는 하기 화학식의 링커 A의 것일 수 있으며:
Figure pct00006
,
상기 P는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 나타내고, 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티를 포함한다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다. 본원에서 사용된, 문구 "합성 핸들 (synthetic handle)"은 아쥬반트 모이어티의 일부이고, 항체를 스페이서 및 합성 핸들을 경유하여 아쥬반트 코어에 부착시키는 화학적 치환기를 지칭한다. 따라서, 상기 항체가 스페이서 및 합성 핸들을 경유하여 아쥬반트 코어에 부착되는 경우, 상기 합성 핸들 및 스페이서는 링커가 되어서, 상기 링커는 부착 지점 "P"에서 상기 아쥬반트 코어에 결합된다. 그러나 아쥬반트 활성을 고려할 때, 상기 합성 핸들은 아쥬반트 모이어티의 일부로 간주된다. 따라서, 상기 아쥬반트 모이어티는 아쥬반트 코어, 부착 지점 및 합성 핸들을 포함한다.
따라서, 일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 하기 화학식의 면역접합체 C의 것이다:
Figure pct00007
;
상기 합성 핸들 및 스페이서는 링커를 구성하고, P는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 나타내며, 상기 아쥬반트 코어 및 합성 핸들은 아쥬반트 모이어티를 구성하고, 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티를 포함하며, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다.
상기 아쥬반트 모이어티는 면역 반응을 유발하는 화합물이다. 본 발명의 일부 면역접합체에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 TLR 효능제이다. TLR 효능제는 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11 또는 이들의 임의의 조합 (예: TLR7/8 효능제)을 포함한다. TLR을 활성화할 수 있는 임의의 아쥬반트가 본 발명의 면역접합체에서 이용될 수 있다. TLR은 척추동물에서 선천성 면역 반응의 개시를 담당하는 타입-I 막횡단 단백질이다. TLR은 박테리아, 바이러스 및 진균 유래의 다양한 병원체-관련 분자 패턴을 인식하고, 침입하는 병원체에 대한 제1 방어선으로 작용한다. TLR은 척추동물에서 개시하는 신호전달 경로 및 세포 발현의 차이로 인해 중복되지만 구별되는 생물학적 반응을 유도한다. (예: 자연 자극 또는 합성 TLR 효능제에 의한) 결합시에, TLR은 신호 전달 캐스케이드를 개시하여, 어댑터 단백질 골수성 분화 1차 반응 유전자 88 (MyD88)을 통한 NF-κB의 활성화 및 IL-1 수용체 관련 키나제 (IRAK)의 동원으로 이어진다. 그 다음에 IRAK의 인산화는 TNF-수용체 관련 인자 (TRAF) 6 (TRAF6)의 동원을 유도하여, NF-κB 억제제 I-κB의 인산화를 초래한다. 결과적으로, NF-κB는 세포 핵으로 진입하여, 사이토카인과 같이, 프로모터가 NF-κB 결합 부위를 함유하는 유전자의 전사를 개시한다. TLR 신호전달을 위한 추가의 조절 모드는 TRAF6의 어댑터-유도 인터페론-β (TRIF)-의존성 유도 및 TRIF 및 TRAF3을 통한 MyD88 비의존성 경로의 활성화를 함유하는 TIR-도메인을 포함하여, 인터페론 반응 인자 (IRF) 3 (IRF3)의 인산화로 이어진다. 유사하게, 상기 MyD88 의존성 경로는 또한 IRF5 및 IRF7을 포함하는, 몇몇 IRF 패밀리 구성원을 활성화하는 반면, 상기 TRIF 의존성 경로는 또한 NF-κB 경로를 활성화한다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 TLR7 및/또는 TLR8 효능제이다. TLR7 및/또는 TLR8을 활성화할 수 있는 임의의 아쥬반트가 본 발명의 면역접합체에서 이용될 수 있다. TLR7 효능제 및 TLR8 효능제의 예는 예를 들어, Vacchelli et al. (OncoImmunology, 2(8): e25238 (2013), 이는 그 전체가 본원에 참고로 통합됨) 및 Carson et al. (U.S. 특허 출원 공개 제2013/0165455호, 이는 그 전체가 본원에 참고로 통합됨)에 기재되어 있다. TLR7 및 TLR8는 모두 단핵구 및 수지상 세포에서 발현된다. 인간에서, TLR7은 또한 형질세포양 수지상 세포 (plasmacytoid dendritic cell: pDC) 및 B 세포에서 발현된다. TLR8은 골수성 기원의 세포, 즉 단핵구, 과립구 및 골수성 수지상 세포에서 대부분 발현된다. TLR7 및 TLR8은 바이러스 침입에 대한 응답 수단으로서 세포내 "외래 (foreign)" 단일-가닥 RNA의 존재를 검출할 수 있다. TLR8-발현 세포의 TLR8 효능제에 의한 치료는 높은 수준의 IL-12, IFN-γ, IL-1, TNF-α, IL-6 및 다른 염증성 사이토카인의 생성을 초래할 수 있다. 유사하게, TLR7-발현 세포, 예컨대 pDC의 TLR7 효능제에 의한 자극은 높은 수준의 IFN-α 및 다른 염증성 사이토카인의 생성을 초래할 수 있다. TLR7/TLR8 진입 (engagement) 및 수득된 사이토카인 생성은 수지상 세포 및 다른 항원-제시 세포를 활성화할 수 있어서, 종양 파괴를 이끄는 다양한 선천성 및 후천성 면역 반응 기전을 유도한다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 하기 화학식의 면역접합체 A1 또는 면역접합체 A2의 것이고:
Figure pct00008
또는
Figure pct00009
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A가 존재하고, B 및 C는 선택적으로 존재하며, A, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리 또는 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다. 소정의 구체예에서, 상기 링커의 B 고리 또는 C 고리로의 부착 지점은 2-아미노 질소 모이어티에 대해 아쥬반트 코어의 반대면에서 나타난다. 본원에서 사용된, 용어 "반대면 (opposite face)"은 면역접합체 A1 및 면역접합체 A2의 아쥬반트 코어의 오목면 (concave side) 및 단부를 지칭한다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 2-아미노 질소 모이어티에 대해 아쥬반트 코어의 반대면에서 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 상기 링커의 유리한 입체 및/또는 전자 상호작용을 허용하고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 활성이 유지되는 것으로 여겨진다. 소정의 구체예에서, 고리 A, B, 및 C가 존재한다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 하기 화학식의 면역접합체 C1 또는 면역접합체 C2의 것이고:
Figure pct00010
또는
Figure pct00011
;
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A가 존재하고, B 및 C는 선택적으로 존재하며, A, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하고, 선택적으로 치환되며, 상기 합성 핸들 및 스페이서는 링커를 구성하며, P는 링커의 B 고리 또는 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, 상기 아쥬반트 코어 및 합성 핸들은 아쥬반트 모이어티를 구성하며, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다. 바람직한 구체예에서, 상기 B 고리 또는 C 고리에서 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 2-아미노 질소 모이어티에 대해 아쥬반트 코어의 반대면에서 나타난다.
일부 구체예에서, 상기 B 고리 및 C 고리가 존재하지 않는다. 이러한 구체예에서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, A 고리 상에 존재할 수 있다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00012
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A가 존재하고, B 및 C는 선택적으로 존재하며, A, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리 또는 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수이다. 상기 아쥬반트 코어는 2-아미노 질소 모이어티가 비치환 상태로 유지되는 한, 아쥬반트 코어 주위의 치환 패턴이 특별히 제한되지 않도록 선택적으로 치환된다.
일부 구체예에서, 상기 A 고리 및 C 고리는 toll 유사 수용체의 결합 도메인의 소수성 포켓 중에 존재하는 것으로 간주된다. 이러한 구체예에서, 상기 링커의 부착 지점은 B 고리에 존재한다. 본 발명의 소정의 양상에서, 상기 A 고리 및/또는 C 고리는 상기 A 고리 및/또는 C 고리 및 상기 소수성 포켓 간에 부가의 상호작용을 제공하는 치환기를 추가로 포함한다. 일부 구체예에서, 부가의 상호작용을 제공하는 치환기는 적어도 1개의 탄소 원자 (예: 적어도 2개의 탄소 원자, 적어도 3개의 탄소 원자, 적어도 4개의 탄소 원자, 또는 적어도 6개의 탄소 원자)를 갖는 소수성 치환기이다. 일반적으로, 상기 A 고리 및/또는 C 고리 및 상기 소수성 포켓 간에 부가의 상호작용을 제공하는 치환기는 2-아미노 질소 모이어티에 대해 아쥬반트 코어의 동일면에서 나타난다. 본원에서 사용된, 문구 "동일면"은 면역접합체 A1 및 면역접합체 A2의 아쥬반트 코어의 볼록면 (convex side)을 지칭한다.
임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 아쥬반트 활성은 하기 중 각 하나 이상에 의해 증가되는 것으로 여겨진다: (i) 상기 2-아미노 질소 모이어티는 비치환 상태로 유지되고, (ii) 상기 링커의 부착 지점은 상기 B 고리 또는 C 고리, 및 때로는 상기 B 고리 및 C 고리가 존재하지 않는 경우에만 A 고리에 존재하고, (iii) 상기 A 고리 및/또는 C 고리는 적어도 1개의 탄소 원자 (예: 적어도 2개의 탄소 원자, 적어도 3개의 탄소 원자, 적어도 4개의 탄소 원자 또는 적어도 6개의 탄소 원자)를 가진 치환기를 추가로 포함한다. 그러나 상기 A 고리 및/또는 C 고리의 치환기의 치환기는 바람직하지 않은 입체 및/또는 전자 상호작용을 초래할만큼 크지 않은 것이 중요하다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 펜던트 질소 원자를 가진 2-아미노 질소 모이어티를 포함하는 아쥬반트 코어를 가진 아쥬반트 모이어티를 포함하고, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내 (예: 약 4.9 Å 이내, 약 4.8 Å 이내, 약 4.7 Å 이내, 약 4.6 Å 이내, 약 4.5 Å 이내, 약 4.4 Å 이내, 약 4.3 Å 이내, 약 4.2 Å 이내, 약 4.1 Å 이내, 약 4.0 Å 이내, 약 3.9 Å 이내, 약 3.8 Å 이내, 약 3.7 Å 이내, 약 3.6 Å 이내, 약 3.5 Å 이내, 약 3.4 Å 이내, 약 3.3 Å 이내, 약 3.2 Å 이내, 약 3.1 Å 이내, 또는 약 3 Å 이내)에 있다. 일반적으로, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp543 또는 Asp545이다. 소정의 구체예에서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp543이다. 바람직한 구체예에서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기 (예: Asp543)의 산성 측쇄와 수소 결합 및/또는 염 브릿지 (salt bridge)를 형성하는 것으로 여겨진다. 상기 수소 결합 및/또는 염 브릿지는 아쥬반트 모이어티의 활성을 유지하는데 중요한 것으로 여겨진다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 펜던트 질소 원자를 가진 2-아미노 질소 모이어티를 포함하는 아쥬반트 코어를 가진 아쥬반트 모이어티를 포함하고, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내 (예: 약 4.9 Å 이내, 약 4.8 Å 이내, 약 4.7 Å 이내, 약 4.6 Å 이내, 약 4.5 Å 이내, 약 4.4 Å 이내, 약 4.3 Å 이내, 약 4.2 Å 이내, 약 4.1 Å 이내, 약 4.0 Å 이내, 약 3.9 Å 이내, 약 3.8 Å 이내, 약 3.7 Å 이내, 약 3.6 Å 이내, 약 3.5 Å 이내, 약 3.4 Å 이내, 약 3.3 Å 이내, 약 3.2 Å 이내, 약 3.1 Å 이내, 또는 약 3 Å 이내)에 있다. 일반적으로, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp548 또는 Asp555이다. 소정의 구체예에서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp555이다. 바람직한 구체예에서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기 (예: Asp555)의 산성 측쇄와 수소 결합 및/또는 염 브릿지를 형성하는 것으로 여겨진다. 상기 수소 결합 및/또는 염 브릿지는 아쥬반트 모이어티의 활성을 유지하는데 중요한 것으로 여겨진다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하는 아쥬반트 코어를 가진 아쥬반트 모이어티를 포함하고, 아르기닌 및 세린 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å (예: 약 3 Å 내지 약 9 Å, 약 3 Å 내지 약 8 Å, 약 3 Å 내지 약 7 Å, 또는 약 3 Å 내지 약 6 Å)에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å (예: 약 3 Å 내지 약 9 Å, 약 3 Å 내지 약 8 Å, 약 3 Å 내지 약 7 Å, 또는 약 3 Å 내지 약 6 Å)에 있다. 소정의 구체예에서, 상기 세린 잔기는 Ser352이고, 상기 아르기닌 잔기는 Arg429이다. 바람직한 구체예에서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 7 Å 이내에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 7 Å 이내에 있다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 링커 및 결합 도메인 간에 입체 및/또는 전자 상호작용을 피하기 위해 TLR8의 결합 도메인의 개구부에 근접해야 한다고 여겨진다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 결합 도메인 (예: Ser352 및 Arg429)의 개구부에 근접해야 한다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하는 아쥬반트 코어를 가진 아쥬반트 모이어티를 포함하고, 리신 및 발린 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 (methine) 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å (예: 약 3 Å 내지 약 9 Å, 약 3 Å 내지 약 8 Å, 약 3 Å 내지 약 7 Å, 또는 약 3 Å 내지 약 6 Å)에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å (예: 약 3 Å 내지 약 9 Å, 약 3 Å 내지 약 8 Å, 약 3 Å 내지 약 7 Å, 또는 약 3 Å 내지 약 6 Å)에 있다. 소정의 구체예에서, 상기 발린 잔기는 Val355이고, 상기 리신 잔기는 Lys432이다. 바람직한 구체예에서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 링커 및 결합 도메인 간에 입체 및/또는 전자 상호작용을 피하기 위해 TLR7의 결합 도메인의 개구부에 근접해야 한다고 여겨진다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 결합 도메인 (예: Val355 및 Lys432)의 개구부에 근접해야 한다.
바람직한 구체예에서, 아스파르트산, 아르기닌 및 세린 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있다. 소정의 구체예에서, 상기 세린 잔기는 Ser352이고, 상기 아르기닌 잔기는 Arg429이고, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp543이다.
바람직한 구체예에서, 아스파르트산, 리신 및 발린 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합하는 경우, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있다. 소정의 구체예에서, 상기 발린 잔기는 Val355이고, 상기 리신 잔기는 Lys432이고, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp555이다.
임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자가 결합 포켓에서 수소 결합 및/또는 염 브릿지를 유지하도록 TLR의 결합 도메인에서 아쥬반트 모이어티의 배향을 용이하게 하는 소정의 위치에 아쥬반트 코어가 연결되어야 한다고 여겨진다. 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점이 결합 도메인의 개구부에 근접하지 않은 경우, 상기 아쥬반트 모이어티를 이동시키고, 이에 의해 상기 2-아미노 질소 모이어티의 수소 결합 및/또는 염 브릿지를 파괴하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 실시예 1 및 2를 참조한다.
원자들 간 거리는 임의의 적절한 수단에 의해 측정될 수 있다. 일부 구체예에서, 원자들 간 거리는 Copyright ⓒ Schrodinger LLC의 PyMol v1.8.0.1 Enhanced for Mac OS X를 사용하여 이론적으로 측정될 수 있다. 일부 구체예에서, 원자들 간 거리는 분자, 복합체 또는 단백질의 결정 구조로부터 측정될 수 있다.
항체
본 발명의 면역접합체는 (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항체 구조체는 표적화 결합 도메인을 추가로 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 항체 구조체는 항체이다. 소정의 구체예에서, 상기 항체 구조체는 융합 단백질이다.
상기 면역접합체 중에 항체는 동종이형 항체일 수 있다. 문구 "동종이형 항체 (allogeneic antibody)" 및 용어 "동종항체 (alloantibody)"는 해당하는 개인 (예: 종양이 있고 치료하고자 하는 개인)으로부터 유래한 것이 아닌, 동일한 종으로부터 유래하거나, 또는 다른 종으로부터 유래하지만, 이종-항체 (예: 자신이 아닌)로서 인식하는 것을 감소, 완화 또는 회피하도록 조작된 항체를 지칭한다. 예를 들어, 상기 "동종이형 항체"는 인간화 항체 (humanized antibody)일 수 있다. 당업자는 이종-항체로서의 인식을 피하기 위해 비-인간 항체를 조작하는 방법에 대해 잘 알고 있다. 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 본원에서 사용된 "항체" 및 "동종이형 항체"는 면역글로불린 G (IgG) 또는 면역글로불린 A (IgA)를 지칭한다.
인간 개인의 암세포가 동일한 사람에 의해 생성되지 않은 항체와 접촉하는 경우 (예: 항체가 제2 인간 개인에 의해 생성되고, 상기 항체는 마우스와 같은 다른 종에 의해 생성되고, 상기 항체는 다른 종에 의해 생성된 인간화 항체임), 상기 항체는 (제1 개인에 대해) 동종이형인 것으로 간주된다. 인간 항원 (예: 암세포 내에 및/또는 상에 풍부한 항원인, 암-특이적 항원)을 인식하는 인간화 마우스 모노클로날 항체는 "동종항체" (동종이형 항체)인 것으로 간주된다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 폴리클로날 동종이형 IgG 항체이다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 복수의 결합 특이성을 갖는 폴리클로날 IgG 항체들의 혼합물 중에 존재한다. 일부 구체예에서, 상기 혼합물 중 항체는 상이한 표적 분자에 특이적으로 결합하고, 일부 경우에 상기 혼합물 중 항체는 동일한 표적 분자의 상이한 에피토프에 특이적으로 결합한다. 따라서, 항체들의 혼합물은 일부 경우에 하나 초과의 본 발명의 면역접합체를 포함할 수 있다 (예: 아쥬반트 모이어티는 혼합물, 예컨대 폴리클로날 IgG 항체들의 혼합물 중 항체에 공유 결합되어, 본 발명의 항체-아쥬반트 접합체의 혼합물을 생성할 수 있음). 항체들의 혼합물은 2명 이상의 개인 (예: 3명 이상의 개인, 4명 이상의 개인, 5명 이상의 개인, 6명 이상의 개인, 7명 이상의 개인, 8명 이상의 개인, 9명 이상의 개인, 10명 이상의 개인 등)으로부터 수집 (pooling)될 수 있다. 일부 경우에, 수집된 혈청은 동종항체의 공급원으로 사용되고, 상기 혈청이 임의의 수의 개인으로부터 나오는 경우, 어느 누구도 제1 개인이 아니다 (예: 혈청은 2명 이상의 개인, 3명 이상의 개인, 4명 이상의 개인, 5명 이상의 개인, 6명 이상의 개인, 7명 이상의 개인, 8명 이상의 개인, 9명 이상의 개인, 10명 이상의 개인 등으로부터 수집될 수 있음). 일부 경우에, 상기 항체는 사용하기 전에 혈청으로부터 단리 또는 정제된다. 상기 정제는 다른 개인의 항체를 수집하기 전 또는 후에 수행될 수 있다.
면역접합체 중 항체가 혈청 유래의 IgG를 포함하는 일부 경우에, 상기 항체 (즉, 혈청 유래의 IgG)의 일부 (예: 0% 초과 50% 미만), 절반, 대부분 (50% 초과 100% 미만), 또는 심지어 전부에 대한 표적 항원은 알려져 있지 않다. 그러나 이러한 혼합물은 다양한 표적 항원에 특이적인 매우 다양한 항체를 함유하기 때문에 상기 혼합물 중에 적어도 하나의 항체가 관심 표적 항원을 인식할 가능성은 높다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 폴리클로날 동종이형 IgA 항체이다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 복수의 결합 특이성을 갖는 폴리클로날 IgA 항체들의 혼합물 중에 존재한다. 일부 경우에, 상기 혼합물 중 항체는 다른 표적 분자에 특이적으로 결합하고, 일부 경우에, 상기 혼합물 중 항체는 동일한 표적 분자의 다른 에피토프에 특이적으로 결합한다. 따라서, 항체들의 혼합물은 일부 경우에 하나 초과의 본 발명의 면역접합체를 포함할 수 있다 (예: 아쥬반트 모이어티는 혼합물 중 항체, 예컨대 폴리클로날 IgA 항체들의 혼합물 중 항체에 공유 결합하여, 본 발명의 항체-아쥬반트 접합체의 혼합물을 생성할 수 있음). 항체들의 혼합물은 2명 이상의 개인 (예: 3명 이상의 개인, 4명 이상의 개인, 5명 이상의 개인, 6명 이상의 개인, 7명 이상의 개인, 8명 이상의 개인, 9명 이상의 개인, 10명 이상의 개인 등)으로부터 수집될 수 있다. 일부 경우에, 수집된 혈청은 동종항체의 공급원으로 사용되고, 상기 혈청이 임의의 수의 개인으로부터 나오는 경우, 어느 누구도 제1 개인이 아니다 (예: 혈청은 2명 이상의 개인, 3명 이상의 개인, 4명 이상의 개인, 5명 이상의 개인, 6명 이상의 개인, 7명 이상의 개인, 8명 이상의 개인, 9명 이상의 개인, 10명 이상의 개인 등으로부터 수집될 수 있음). 일부 경우에, 상기 항체는 사용하기 전에 혈청으로부터 단리 또는 정제된다. 상기 정제는 다른 개인의 항체를 수집하기 전 또는 후에 수행될 수 있다.
면역접합체 중 항체가 혈청 유래의 IgA를 포함하는 일부 경우에, 상기 항체 (즉, 혈청 유래의 IgA)의 일부 (예: 0% 초과 50% 미만), 절반, 대부분 (50% 초과 100% 미만), 또는 심지어 전부에 대한 표적 항원은 알려져 있지 않다. 그러나 이러한 혼합물은 다양한 표적 항원에 특이적인 매우 다양한 항체를 함유하기 때문에 상기 혼합물 중에 적어도 하나의 항체가 관심 표적 항원을 인식할 가능성은 높다.
일부 경우에, 상기 면역접합체 중 항체는 정맥내 면역글로불린 (IVIG) 및/또는 IVIG 유래의 (예: 농축, 정제, 예컨대 친화도 정제) 항체를 포함한다. IVIG는 다수의 (예: 때로는 1,000 내지 60,000명) 정상 및 건강한 혈액 공여자의 혈장 (예: 일부 경우에 임의의 다른 단백질이 없음)으로부터 수집한 IgG (면역글로불린 G)를 함유하는 혈액 제품이다. IVIG는 상업적으로 입수 가능하다. IVIG는 높은 퍼센트의 천연 인간 단량체 IVIG를 함유하고, 낮은 IgA 함량을 갖는다. 정맥으로 투여되는 경우, IVIG는 몇몇 질병 병태를 개선한다. 그러므로 미국 식품의약국 (Food and Drug Administration: FDA)은 하기를 포함하는 다수의 질병에 대해 IVIG 사용을 승인하였다: (1) 가와사키병 (Kawasaki disease); (2) 면역-매개 혈소판감소증; (3) 원발성 면역결핍증; (4) 조혈모세포 이식 (20세 이상의 경우); (5) 만성 B-세포 림프구성 백혈병; 및 (6) 소아 HIV 타입 1 감염. 2004년에, FDA는 신장 이식 수혜자를 위한 Cedars-Sinai IVIG 프로토콜을 승인하여, 수혜자는 혈액형 (ABO 비호환) 또는 조직 일치에 관계없이, 임의의 건강한 공여자로부터 살아있는 공여자 신장을 수용할 수 있었다. IVIG의 이러한 양상 및 다른 양상은 예를 들어 미국 특허 출원 공개 2010/0150942; 2004/0101909; 2013/0177574; 2013/0108619; 및 2013/0011388에 기재되어 있고; 이는 그 전체가 본원에 참조로 통합된다.
일부 경우에, 상기 항체는 정의된 서브클래스 (예: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 또는 IgA2)의 모노클로날 항체이다. 항체들의 조합이 사용되는 경우, 상기 항체들은 동일한 서브클래스 또는 다른 서브클래스로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 상기 항체는 IgG1 항체일 수 있다. 상이한 상대적 비율로, 상이한 서브클래스들의 다양한 조합이 당업자에 의해 수득될 수 있다. 일부 경우에, 특정 서브클래스 또는 다른 서브클래스들의 특정 조합이 암치료 또는 종양 크기 감소에 특히 효과적일 수 있다. 따라서, 본 발명의 일부 구체예는 항체가 모노클로날 항체인 면역접합체를 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 모노클로날 항체는 인간화된다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 암세포의 항원에 결합한다. 예를 들어, 상기 항체는 암세포의 표면에서 적어도 10; 100; 1,000; 10,000; 100,000; 1,000,000; 2.5 x 106; 5 x 106; 또는 1 x 107개 이상의 카피가 존재하는 표적 항원에 결합할 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 비-암세포에서 상응하는 항원보다 더 높은 친화도로 암 또는 면역 세포에서 항원에 결합한다. 예를 들어, 상기 항체는 비-암 또는 비-면역 세포에서 상응하는 야생형 항원의 인식과 비교하여, 암 또는 면역 세포에서 발견되는 다형성 (polymorphism)을 함유하는 항원을 우선적으로 인식할 수 있다. 일부 경우에, 상기 항체는 비-암 또는 비-면역 세포보다 더 큰 결합력 (avidity)으로 암 또는 면역 세포에 결합한다. 예를 들어, 상기 암 또는 면역 세포는 더 높은 밀도의 항원을 발현할 수 있으므로, 상기 암 또는 면역 세포에 대한 다가 항체의 더 높은 친화도 결합을 제공한다.
일부 경우에, 상기 항체는 비-암 항원에 유의하게 결합하지 않는다 (예: 상기 항체는 표적 암 항원보다 적어도 10; 100; 1,000; 10,000; 100,000; 또는 1,000,000배 더 낮은 친화도 (더 높은 Kd)로 하나 이상의 비-암 항원에 결합함). 일부 경우에, 상기 항체가 결합하는 표적 암 항원이 암세포에 풍부하다. 예를 들어, 상기 표적 암 항원은 상응하는 비-암세포보다 적어도 2, 5, 10; 100; 1,000; 10,000; 100,000; 또는 1,000,000배 더 높은 수준으로 암세포 표면에 존재할 수 있다. 일부 경우에, 상기 상응하는 비-암세포는 과증식성 또는 암성이 아닌 동일한 조직 또는 기원의 세포이다. 일반적으로, 암세포의 항원 (표적 항원)에 특이적으로 결합하는 대상 IgG 항체는 다른 이용 가능한 항원에 대해 특정 항원에 우선적으로 결합한다. 그러나 상기 표적 항원은 암세포에 특이적일 필요는 없고 다른 세포에 비해 암세포에 풍부할 필요도 없다 (예: 상기 표적 항원은 다른 세포에 의해 발현될 수 있음). 따라서, 문구 "암세포의 항원에 특이적으로 결합하는 항체"에서, 용어 "특이적으로"는 항체의 특이성을 지칭하며, 특정 세포 타입에서 항원의 독특함 (uniqueness)을 의미하는 것은 아니다.
일부 구체예에서, 상기 면역접합체 중에 항체는 변형된 Fc 영역을 함유하고, 여기서 변형은 상기 Fc 영역의 하나 이상의 Fc 수용체로의 결합을 조절한다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 Fc 영역에서 돌연변이가 없는 천연 항체와 비교하여, 하나 이상의 Fc 수용체 (예: FcγRI (CD64), FcγRIIA (CD32A), FcγRIIB (CD32B), FcγRIIIA (CD16a), 및/또는 FcγRIIIB (CD16b))로의 결합을 조절하는 (예; 결합 증가 또는 결합 감소), Fc 영역에서 하나 이상의 변형 (예: 아미노산 삽입, 결실 및/또는 치환)을 함유한다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 FcγRIIB에 대한 항체의 Fc 영역의 결합을 감소시키는, Fc 영역에서 하나 이상의 변형 (예: 아미노산 삽입, 결실 및/또는 치환)을 함유한다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 Fc 영역에 돌연변이가 없는 천연 항체와 비교하여, FcγRI (CD64), FcγRIIA (CD32A), 및/또는 FcRγIIIA (CD16a)에 대한 결합을 동일하게 유지하거나 또는 이에 대한 결합을 증가시키면서, FcγRIIB에 대한 항체의 결합을 감소시키는 항체의 Fc 영역에서 하나 이상의 변형 (예: 아미노산 삽입, 결실 및/또는 치환)을 함유한다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 FcγRIIB에 대한 항체의 Fc 영역의 결합을 증가시키는 Fc 영역에서 하나 이상의 변형을 함유한다. 일부 구체예에서, 상기 변형은 항체 이펙터 기능을 실질적으로 감소시키거나 또는 제거한다.
일부 구체예에서, 상기 조절된 결합은 항체의 천연 Fc 영역에 비해 항체의 Fc 영역에서 돌연변이에 의해 제공된다. 상기 돌연변이는 CH2 도메인, CH3 도메인 또는 이들의 조합 중에 존재할 수 있다. "천연 Fc 영역"은 "야생형 Fc 영역"과 동의어이며, 자연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일하거나 또는 천연 항체에서 발견된 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 천연 서열 인간 Fc 영역은 천연 서열 인간 IgG1 Fc 영역, 천연 서열 인간 IgG2 Fc 영역, 천연 서열 인간 IgG3 Fc 영역, 및 천연 서열 인간 IgG4 Fc 영역뿐만 아니라 이의 자연 발생 변이체를 포함한다. 천연 서열 Fc는 다양한 동종이형 (allotypes)의 Fc를 포함한다 (예컨대, Jefferis et al., mAbs, 1(4): 332-338 (2009) 참조).
일부 구체예에서, 하나 이상의 Fc 수용체에 대한 결합을 조절하는 Fc 영역의 돌연변이는 하기 돌연변이들 중 하나 이상: SD (S239D), SDIE (S239D/I332E), SE (S267E), SELF (S267E/L328F), SDIE (S239D/I332E), SDIEAL (S239D/I332E/A330L), GA (G236A), ALIE (A330L/I332E), GASDALIE (G236A/S239D/A330L/I332E), V9 (G237D/P238D/P271G/A330R), 및 V11 (G237D/P238D/H268D/P271G/A330R), 및/또는 하기 아미노산들: E233, G237, P238, H268, P271, L328 및 A330에서 하나 이상의 돌연변이를 포함할 수 있다. Fc 수용체 결합을 조절하기 위한 부가의 Fc 영역 변형은 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 2016/0145350 및 미국 특허 제7,416,726호 및 제5,624,821호에 기재되어 있고, 이들은 그 전체가 본원에 참조로 통합된다.
일부 구체예에서, 상기 항체의 Fc 영역은 천연 비-변형 Fc 영역과 비교하여 Fc 영역의 변경된 글리코실화 패턴을 갖도록 변형된다.
인간 면역글로불린은 각 중쇄의 Cγ2 도메인내 Asn297 잔기에서 글리코실화된다. 이러한 N-연결된 올리고사카라이드는 코어인 헵타사카라이드, N-아세틸글루코사민4만노스3 (GlcNAc4Man3)으로 구성된다. 엔도글리코시다제 또는 PNGase F로 헵타사카라이드를 제거하면, 항체 Fc 영역의 형태적 변화가 발생하고, 이는 활성화된 FcγR에 대한 항체-결합 친화도를 상당히 감소시키고, 이펙터 기능을 감소시키는 것으로 알려져 있다. 상기 코어 헵타사카라이드는 종종 갈락토스, 이등분면 (bisecting) GlcNAc, 푸코스 또는 시알산으로 장식되고, 이는 활성화 및 억제 FcγR에 대한 Fc 결합에 차별적으로 영향을 미친다. 또한, α2,6-시알화는 인 비보에서 항-염증 활성을 증진시키는 반면, 탈푸코실화 (defucosylation)는 개선된 FcγRIIIa 결합을 유도하고, 항체-의존성 세포 독성 및 항체-의존성 식세포 작용 (phagocytosis)을 10배 증가시킨다는 것이 입증되었다. 그러므로 특정 글리코실화 패턴을 사용하여 염증 이펙터 기능을 제어할 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 글리코실화 패턴을 변경하기 위한 변형은 돌연변이, 예를 들어, Asn297에서 치환이 있다. 일부 구체예에서, Asn297은 글루타민으로 돌연변이된다 (N297Q). FcγR-조절된 신호전달을 조절하는 항체로 면역 반응을 조절하는 방법은 예를 들어 미국 특허 제7,416,726호 및 미국 특허 출원 공개 2007/0014795 및 2008/0286819에 기재되어 있고, 이들은 그 전체가 본원에 참조로 통합된다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 비-자연 발생 글리코실화 패턴을 갖는 조작된 Fab 영역을 함유하도록 변형된다. 예를 들어, 하이브리도마 (hybridomas)는 FcRγIIIa 결합 및 이펙터 기능을 증가시킬 수 있는 특정 돌연변이를 갖는 아푸코실화 mAb (afucosylated mAb), 데시알릴화 mAb (desialylated mAb) 또는 데글리코실화 Fc (deglycosylated Fc)를 분비하도록 유전자 조작될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 아푸코실화되도록 조작된다.
일부 구체예에서, 항체의 전체 Fc 영역은 상이한 Fc 영역과 교환되어, 상기 항체의 Fab 영역이 비-천연 Fc 영역에 접합된다. 예를 들어, 통상 IgG1 Fc 영역을 포함하는 아테졸리주맙 (atezolizumab)의 Fab 영역은 IgG2, IgG3, IgG4 또는 IgA에 접합될 수 있거나, 또는 통상 IgG4 Fc 영역을 포함하는 니볼루맙 (nivolumab)의 Fab 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgA1 또는 IgG2에 접합될 수 있다. 일부 구체예에서, 비-천연 Fc 도메인을 가진 Fc 변형된 항체는 또한 기재된 Fc 도메인의 안정성을 조절하는, 하나 이상의 아미노산 변형, 예컨대 IgG4 Fc내 S228P 돌연변이를 포함한다. 일부 구체예에서, 비-천연 Fc 도메인을 가진 Fc 변형된 항체는 또한 FcR에 대한 Fc 결합을 조절하는 본원에 기재된 하나 이상의 아미노산 변형을 포함한다.
일부 구체예에서, FcR에 대한 Fc 영역의 결합을 조절하는 변형은 천연 비-변형 항체와 비교할 때 항체의 Fab 영역과 그의 항원의 결합을 변경하지 않는다. 다른 구체예에서, FcR에 대한 Fc 영역의 결합을 조절하는 변형은 또한 천연 비-변형 항체와 비교할 때 항체의 Fab 영역과 그의 항원의 결합을 증가시킨다.
일부 구체예에서, 상기 Fc 영역은 TGFβ1 (transforming growth factor beta 1)에 결합할 수 있는, TGFβ1 수용체 또는 이의 단편의 부착 또는 봉입에 의해 변형된다. 예를 들어, 상기 수용체는 TGFβ 수용체 II (TGFβRII)일 수 있다 (전체가 본원에 통합된, 미국 특허 제9,676,863호 참조). 일부 구체예에서, 상기 TGFβ 수용체는 인간 TGFβ 수용체이다. 일부 구체예에서, 상기 Fc 영역 (예: IgG)은 TGFβ 수용체 (예: TGFβRII) 세포외 도메인 (ECD; 예컨대 미국 특허 제9,676,863호의 서열번호: 9의 아미노산 24-159)에 대한 C-말단 융합을 갖는다. "Fc 링커"는 상기 IgG를 TGFβR 세포외 도메인, 예를 들어 G4S4G Fc 링커에 부착시키는데 사용될 수 있다. 상기 Fc 링커는 표적에 대한 결합-특이성을 유지하면서 분자의 적절한 3차원 폴딩 (folding)을 허용하는 짧고 유연한 펩티드일 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 TGFβ 수용체의 N-말단은 (Fc 링커에 의해 또는 없이) Fc 영역에 융합된다. 일부 구체예에서, 상기 면역글로불린 중쇄의 C-말단은 (Fc 링커에 의해 또는 없이) TGFβ 수용체에 융합된다. 일부 구체예에서, 상기 항체 중쇄의 C-말단 리신 잔기는 알라닌으로 돌연변이된다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 서열번호: 168을 포함한다.
표적
일부 구체예에서, 상기 항원 결합 도메인 또는 항체는 하기로부터 선택된 하나 이상의 표적 또는 항원에 결합할 수 있다 (예컨대, 하기로부터 선택된 표적에 특이적으로 결합함): 5T4, ABL, ABCF1, ACVR1, ACVR1B, ACVR2, ACVR2B, ACVRL1, ADORA2A, AFP, Aggrecan, AGR2, AICDA, AIF1, AIGI, AKAP1, AKAP2, ALCAM, ALK, AMH, AMHR2, ANGPT1, ANGPT2, ANGPTL3, ANGPTL4, ANPEP, APC, APOCl, AR, 아로마타제 (aromatase), ASPH, ATX, AX1, AXL, AZGP1 (zinc-a-glycoprotein), B4GALNT1, B7, B7.1, B7.2, B7-H1, B7-H3, B7-H4, B7-H6, BAD, BAFF, BAG1, BAI1, BCR, BCL2, BCL6, BCMA, BDNF, BLNK, BLR1 (MDR15), BIyS, BMP1, BMP2, BMP3B (GDFIO), BMP4, BMP6, BMP8, BMP10, BMPR1A, BMPR1B, BMPR2, BPAG1 (플렉틴), BRCA1, C19orflO (IL27w), C3, C4A, C5, C5R1, CA6, CA9, CANT1, CAPRIN-1, CASP1, CASP4, CAV1, CCBP2 (D6/JAB61), CCL1 (1-309), CCLI1 (에오탁신), CCL13 (MCP-4), CCL15 (MIP-Id), CCL16 (HCC-4), CCL17 (TARC), CCL18 (PARC), CCL19 (MIP-3b), CCL2 (MCP-1), MCAF, CCL20 (MIP-3a), CCL21 (MEP-2), SLC, exodus-2, CCL22(MDC/STC-I), CCL23 (MPIF-I), CCL24 (MPIF-2/에오탁신-2), CCL25 (TECK), CCL26(에오탁신-3), CCL27 (CTACK/ILC), CCL28, CCL3 (MIP-Ia), CCL4 (MIPIb), CCL5(RANTES), CCL7 (MCP-3), CCL8 (mcp-2), CCNA1, CCNA2, CCND1, CCNE1, CCNE2, CCR1 (CKR1/HM145), CCR2 (mcp-IRB/RA), CCR3 (CKR3/CMKBR3), CCR4, CCR5(CMKBR5/ChemR13), CCR6 (CMKBR6/CKR-L3/STRL22/DRY6), CCR7 (CKR7/EBI1), CCR8 또는 CDw198 (CMKBR8/TERI/CKR-L1), CCR9 (GPR-9-6), CCRL1 (VSHK1), CCRL2 (L-CCR), CD13, CD164, CD19, CDH6, CDIC, CD2, CD20, CD21, CD200, CD22, CD23, CD24, CD27, CD28, CD29, CD3, CD33, CD35, CD37, CD38, CD3E, CD3G, CD3Z, CD4, CD40, CD40L, CD44, CD45RB, CD47, CD52, CD56, CD69, CD70, CD72, CD74, CD79A, CD79B, CD8, CD80, CD81, CD83, CD86, CD97, CD99, CD117, CD125, CD137, CD147, CD179b, CD223, CD279, CD152, CD274, CDH1 (E-카드헤린), CDH1O, CDH12, CDH13, CDH18, CDH19, CDH2O, CDH3, CDH5, CDH7, CDH8, CDH9, CDH17, CDK2, CDK3, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK9, CDKN1A (p21Wap1/Cip1), CDKN1B (p27Kip1), CDKN1C, CDKN2A (p16INK4a), CDKN2B, CDKN2C, CDKN3, CEA, CEACAM5, CEACAM6, CEBPB, CERI, CFC1B, CHGA, CHGB, 키티나제 (Chitinase), CHST1O, CIK, CKLFSF2, CKLFSF3, CKLFSF4, CKLFSF5, CKLFSF6, CKLFSF7, CKLFSF8, CLDN3, CLDN6, CLDN7 (클라우딘-7), CLDN18, CLEC5A, CLEC6A, CLEC11A, CLEC14A, CLN3, CLU (클러스테린), CMKLR1, CMKOR1 (RDC1), CNR1, C-MET, COL18A1, COLIA1, COL4A3, COL6A1, CR2, Cripto, CRP, CSF1 (M-CSF), CSF2 (GM-CSF), CSF3 (GCSF), CTAG1B (NY-ESO-1), CTLA4, CTL8, CTNNB1 (b-카테닌), CTSB (카텝신 B), CX3CL1 (SCYD1), CX3CR1 (V28), CXCL1 (GRO1), CXCL1O (IP-IO), CXCLI1 (1-TAC/IP-9), CXCL12 (SDF1), CXCL13, CXCL14, CXCL16, CXCL2 (GRO2), CXCL3 (GRO3), CXCL5 (ENA-78/LIX), CXCL6 (GCP-2), CXCL9 (MIG), CXCR3 (GPR9/CKR-L2), CXCR4, CXCR6 (TYMSTR/STRL33/Bonzo), CYB5, CYC1, CYSLTR1, DAB2IP, DES, DKFZp451J0118, DLK1, DNCL1, DPP4, E2F1, Engel, Edge, Fennel, EFNA3, EFNB2, EGF, EGFR, ELAC2, ENG, Enola, ENO2, ENO3, EpCAM, EPHA1, EPHA2, EPHA3, EPHA4, EPHA5, EPHA6, EPHA7, EPHA8, EPHA9, EPHA10, EPHB1, EPHB2, EPHB3, EPHB4, EPHB5, EPHB6, EPHRIN-A1, EPHRIN-A2, EPHRINA3, EPHRIN-A4, EPHRIN-A5, EPHRIN-A6, EPHRIN-B1, EPHRIN-B2, EPHRIN-B3, EPHB4, EPG, ERBB2 (HER-2), ERBB3, ERBB4, EREG, ERK8, 에스트로겐 수용체, Earl, ESR2, F3 (TF), FADD, FAP, 파르네실트란스퍼라제, FasL, FASNf, FCER1A, FCER2, FCGR3A, FGF, FGF1 (aFGF), FGF10, FGF1 1, FGF12, FGF12B, FGF13, FGF14, FGF16, FGF17, FGF18, FGF19, FGF2 (bFGF), FGF20, FGF21, FGF22, FGF23, FGF3 (int-2), FGF4 (HST), FGF5, FGF6 (HST-2), FGF7 (KGF), FGF8, FGF9, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4, FIGF (VEGFD), FIL1(EPSILON), FBL1 (ZETA), FLJ12584, FLJ25530, FLRT1 (피브로넥틴), FLT1, FLT-3, FOLR1, FOS, FOSL1(FRA-1), FR-알파, FY (DARC), GABRP (GABAa), GAGEB1, GAGEC1, GALNAC4S-6ST, GATA3, GD2, GD3, GDF5, GFI1, GFRA1, GGT1, GM-CSF, GNAS1, GNRH1, GPC1, GPC3, GPNB, GPR2 (CCR10), GPR31, GPR44, GPR81 (FKSG80), GRCC1O (C1O), GRP, GSN (Gelsolin), GSTP1, GUCY2C, HAVCR1, HAVCR2, HDAC, HDAC4, HDAC5, HDAC7A, HDAC9, Hedgehog, HER3, HGF, HIF1A, HIP1, 히스타민 및 히스타민 수용체, HLA-A, HLA-DR, HLA-DRA, HLA-E, HM74, HMOXI, HSP90, HUMCYT2A, ICEBERG, ICOSL, ID2, IFN-a, IFNA1, IFNA2, IFNA4, IFNA5, EFNA6, BFNA7, IFNB1, IFN감마, IFNW1, IGBP1, IGF1, IGFIR, IGF2, IGFBP2, IGFBP3, IGFBP6, DL-1, ILIO, ILIORA, ILIORB, IL-1, IL1R1 (CD121a), IL1R2(CD121b), IL-IRA, IL-2, IL2RA (CD25), IL2RB(CD122), IL2RG(CD132), IL-4, IL-4R(CD123), IL-5, IL5RA(CD125), IL3RB(CD131), IL-6, IL6RA, (CD126), IR6RB(CD130), IL-7, IL7RA(CD127), IL-8, CXCR1 (IL8RA), CXCR2, (IL8RB/CD128), IL-9, IL9R(CD129), IL-10, IL10RA(CD210), IL10RB(CDW210B), IL-11, IL11RA, IL-12, IL-12A, IL-12B, IL-12RB1, IL-12RB2, IL-13, IL13RA1, IL13RA2, IL14, IL15, IL15RA, IL16, IL17, IL17A, IL17B, IL17C, IL17R, IL18, IL18BP, IL18R1, IL18RAP, IL19, ILIA, ILIB, ILIF10, ILIF5, IL1F6, ILIF7, IL1F8, DL1F9, ILIHYI, ILIR1, IL1R2, ILIRAP, ILIRAPLI, ILIRAPL2, ILIRL1, IL1RL2, ILIRN, IL2, IL20, IL20RA, IL21R, IL22, IL22R, IL22RA2, IL23, DL24, IL25, IL26, IL27, IL28A, IL28B, IL29, IL2RA, IL2RB, IL2RG, IL3, IL30, IL3RA, IL4, 1L4, IL6ST (당단백질 130), ILK, INHA, INHBA, INSL3, INSL4, IRAK1, IRAK2, ITGA1, ITGA2, ITGA3, ITGA6 (α6 인테그린), ITGAV, ITGB3, ITGB4 (β4 인테그린), JAG1, JAK1, JAK3, JTB, JUN, K6HF, KAI1, KDR, KIT, KITLG, KLF5 (GC Box BP), KLF6, KLK10, KLK12, KLK13, KLK14, KLK15, KLK3, KLK4, KLK5, KLK6, KLK9, KRT1, KRT19 (케라틴 19), KRT2A, KRTHB6 (헤어 (hair)-특이적 타입 II 케라틴), L1CAM, LAG3, LAMA5, LAMP1, LEP (렙틴), Lewis Y 항원 ("LeY"), LILRB1, Lingo-p75, Lingo-Troy, LGALS3BP, LRRC15, LPS, LTA (TNF-b), LTB, LTB4R (GPR16), LTB4R2, LTBR, LY75, LYPD3, MACMARCKS, MAG 또는 OMgp, MAGEA3, MAGEA6, MAP2K7 (c-Jun), MCP-1, MDK, MIB1, midkine, MIF, MISRII, MJP-2, MLSN, MK, MKI67 (Ki-67), MMP2, MMP9, MS4A1, MSMB, MT3 (메탈로티오넥틴-UI), mTOR, MTSS1, MUC1 (mucin), MUC16, MYC, MYD88, NCK2, NCR3LG1, 뉴로칸 (neurocan), NFKBI, NFKB2, NGFB (NGF), NGFR, NgR-Lingo, NgRNogo66, (Nogo), NgR-p75, NgR-Troy, NMEI (NM23A), NOTCH, NOTCH1, NOTCH3, NOX5, NPPB, NROB1, NROB2, NRID1, NR1D2, NR1H2, NR1H3, NR1H4, NR112, NR113, NR2C1, NR2C2, NR2E1, NR2E3, NR2F1, NR2F2, NR2F6, NR3C1, NR3C2, NR4A1, NR4A2, NR4A3, NR5A1, NR5A2, NR6A1, NRP1, NRP2, NT5E, NTN4, NY-ESO1, ODZI, OPRDI, P2RX7, PAP, PART1, PATE, PAWR, P-카드헤린, PCA3, PCD1, PD-L1, PCDGF, PCNA, PDGFA, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PECAMI, L1-CAM, peg-아스파라기나제, PF4 (CXCL4), PGF, PGR, 포스파칸 (phosphacan), PIAS2, PI3 키나제, PIK3CG, PLAU (uPA), PLG, PLXDCI, PKC, PKC-베타, PPBP (CXCL7), PPID, PR1, PRAME, PRKCQ, PRKD1, PRL, PROC, PROK2, PSAP, PSCA, PSMA, PTAFR, PTEN, PTHR2, PTGS2 (COX-2), PTN, PVRIG, RAC2 (P21Rac2), RANK, RANK 리간드, RARB, RGS1, RGS13, RGS3, RNFI1O (ZNF144), Ron, ROBO2, ROR1, RXR, S100A2, SCGB 1D2 (리포필린 B), SCGB2A1 (맘마글로빈 2), SCGB2A2 (맘마글로빈 1), SCYE1 (내피 단핵구-활성화 사이토카인), SDF2, SERPENA1, SERPINA3, SERPINB5 (마스핀), SERPINEI (PAI-I), SERPINFI, SHIP-1, SHIP-2, SHB1, SHB2, SHBG, SfcAZ, SLAMF7, SLC2A2, SLC33A1, SLC43A1, SLC44A4, SLC34A2, SLIT2, SPP1, SPRR1B (Spr1), ST6GAL1, ST8SIA1, STAB1, STATE, STEAP, STEAP2, TB4R2, TBX21, TCP1O, TDGF1, TEK, TGFA, TGFB1, TGFB1I1, TGFB2, TGFB3, TGFBI, TGFBR1, TGFBR2, TGFBR3, THIL, THBS1 (트롬보스폰딘-1), THBS2, THBS4, THPO, TIE (Tie-1), TIMP3, 조직 인자 (tissue factor), TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TNF, TNF-a, TNFAIP2 (B94), TNFAIP3, TNFRSFI1A, TNFRSF1A, TNFRSF1B, TNFRSF21, TNFRSF5, TNFRSF6 (Fas), TNFRSF7, TNFRSF8, TNFRSF9, TNFSF1O (TRAIL), TNFRSF10A, TNFRSF10B, TNFRSF12A, TNFRSF17, TNFSF1 1 (TRANCE), TNFSF12 (APO3L), TNFSF13 (April), TNFSF13B, TNFSF14 (HVEM-L), TNFRSF14 (HVEM), TNFSF15 (VEGI), TNFSF18, TNFSF4 (OX40 리간드), TNFSF5 (CD40 리간드), TNFSF6 (FasL), TNFSF7 (CD27 리간드), TNFSF8 (CD30 리간드), TNFSF9 (4-1BB 리간드), TOLLIP, Toll-유사 수용체, TOP2A (토포이소머라제 Iia), TP53, TPM1, TPM2, TRADD, TRAF1, TRAF2, TRAF3, TRAF4, TRAF5, TRAF6, TRKA, TREM1, TREM2, TROP2, TRPC6, TSLP, TWEAK, 티로시나제 (Tyrosinase), uPAR, VEGF, VEGFB, VEGFC, 베르시칸 (versican), VHL C5, VLA-4, WT1, Wnt-1, XCL1 (림포탁틴), XCL2 (SCM-Ib), XCRI (GPR5/CCXCR1), YY1, ZFPM2, CLEC4C (BDCA-2, DLEC, CD303, CDH6, CLECSF7), CLEC4D (MCL, CLECSF8), CLEC4E (Mincle), CLEC6A (덱틴-2), CLEC5A (MDL-1, CLECSF5), CLEC1B (CLEC-2), CLEC9A (DNGR-1), CLEC7A (덱틴-1), CLEC11A, PDGFRa, SLAMF7, GP6 (GPVI), LILRA1 (CD85I), LILRA2 (CD85H, ILT1), LILRA4 (CD85G, ILT7), LILRA5 (CD85F, ILT11), LILRA6 (CD85b, ILT8), LILRB1, NCR1 (CD335, LY94, NKp46), NCR3 (CD335, LY94, NKp46), NCR3 (CD337, NKp30), OSCAR, TARM1, CD30, CD300C, CD300E, CD300LB (CD300B), CD300LD (CD300D), KIR2DL4 (CD158D), KIR2DS, KLRC2 (CD159C, NKG2C), KLRK1 (CD314, NKG2D), NCR2 (CD336, NKp44), PILRB, SIGLEC1 (CD169, SN), SIGLEC5, SIGLEC6, SIGLEC7, SIGLEC8, SIGLEC9, SIGLEC10, SIGLEC11, SIGLEC12, SIGLEC14, SIGLEC15 (CD33L3), SIGLEC16, SIRPA, SIRPB1 (CD172B), TREM1 (CD354), TREM2, KLRF1 (NKp80), 17-1A, SLAM7, MSLN, CTAG1B/NY-ESO-1, MAGEA3/A6, ATP5I (Q06185), OAT (P29758), AIFM1 (Q9Z0X1), AOFA (Q64133), MTDC (P18155), CMC1 (Q8BH59), PREP (Q8K411), YMEL1 (O88967), LPPRC (Q6PB66), LONM (Q8CGK3), ACON (Q99KI0), ODO1 (Q60597), IDHP (P54071), ALDH2 (P47738), ATPB (P56480), AATM (P05202), TMM93 (Q9CQW0), ERGI3 (Q9CQE7), RTN4 (Q99P72), CL041 (Q8BQR4), ERLN2 (Q8BFZ9), TERA (Q01853), DAD1 (P61804), CALX (P35564), CALU (O35887), VAPA (Q9WV55), MOGS (Q80UM7), GANAB (Q8BHN3), ERO1A (Q8R180), UGGG1 (Q6P5E4), P4HA1 (Q60715), HYEP (Q9D379), CALR (P14211), AT2A2 (O55143), PDIA4 (P08003), PDIA1 (P09103), PDIA3 (P27773), PDIA6 (Q922R8), CLH (Q68FD5), PPIB (P24369), TCPG (P80318), MOT4 (P57787), NICA (P57716), BASI (P18572), VAPA (Q9WV55), ENV2 (P11370), VAT1 (Q62465), 4F2 (P10852), ENOA (P17182), ILK (O55222), GPNMB (Q99P91), ENV1 (P10404), ERO1A (Q8R180), CLH (Q68FD5), DSG1A (Q61495), AT1A1 (Q8VDN2), HYOU1 (Q9JKR6), TRAP1 (Q9CQN1), GRP75 (P38647), ENPL (P08113), CH60 (P63038), 및 CH10 (Q64433). 상기 목록에서, 식별 번호는 괄호 안에 표시된다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 항-PD-L1 항체, 항-HER2 항체, 항-EGFR 항체 및 항-CEA 항체로 구성된 그룹으로부터 선택된다.
본 발명의 일 구체예는 PD-L1 (서열번호: 1)을 특이적으로 인식하고 결합하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 항-PD-L1 항체의 항원 결합 도메인의 하나 이상의 가변 영역 (예: 2개의 가변 영역)을 포함할 수 있고, 각 가변 영역은 CDR1, CDR2 및 CDR3을 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 아테졸리주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 2-4 모두, (ii) 서열번호: 5-7 모두, 또는 (iii) 서열번호: 2-7 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 2-7 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 아테졸리주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 아테졸리주맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 아테졸리주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 8의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 9의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 10의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 11의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 12의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 13의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 14의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 15의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 2-4 및 8-11 모두, (ii) 서열호: 5-7 및 12-15 모두; 또는 (iii) 서열번호: 2-7 및 8-15 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 아테졸리주맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 44를 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 45를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 44, 서열번호: 45, 또는 서열번호: 44 및 45 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 44-45 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 두르발루맙 (durvalumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 18-20 모두, (ii) 서열번호: 21-23 모두, 또는 (iii) 서열번호: 18-23 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 18-23 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 두르발루맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 두르발루맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 두르발루맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 24의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 25의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 26의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 27의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 28의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 29의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 30의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 31의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 18-20 및 24-26 모두, (ii) 서열번호: 21-23 및 27-31 모두; 또는 (iii) 서열번호: 18-21 및 24-31 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 두르발루맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 46을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 47을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 46, 서열번호: 47, 또는 서열번호: 46 및 47 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 46-47 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 아벨루맙 (avelumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 30-32 모두, (ii) 서열번호: 33-35 모두, 또는 (iii) 서열번호: 30-35 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 30-35 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 아벨루맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 아벨루맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 아벨루맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 36의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 37의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 38의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 39의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 40의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 41의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 42의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 43의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 30-32 및 36-39 모두, (ii) 서열번호: 33-35 및 40-43 모두; 또는 (iii) 서열번호: 30-35 및 36-43 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 아벨루맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 48을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 49를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 48, 서열번호: 49, 또는 서열번호: 48 및 49 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 48-49 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 HER2 (서열번호: 50)를 특이적으로 인식하고 이에 결합하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 항-HER2 항체의 항원 결합 도메인의 하나 이상의 가변 영역 (예: 2개의 가변 영역)을 포함할 수 있고, 각 가변 영역은 CDR1, CDR2 및 CDR3을 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 트라스투주맙 (trastuzumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 56의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 51-53 모두, (ii) 서열번호: 54-56 모두, 또는 (iii) 서열번호: 51-56 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 51-56 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 트라스투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 트라스투주맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 트라스투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 57의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 58의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 59의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 60의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 61의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 62의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 63의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 64의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 51-53 및 57-60 모두, (ii) 서열번호: 54-56 및 61-64 모두; 또는 (iii) 서열번호: 57-59 및 65-68 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 트라스투주맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 65를 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 66을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 65, 서열번호: 66, 또는 서열번호: 65 및 66 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 65-66 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 페르투주맙 (pertuzumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 71의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 72의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 67-69 모두, (ii) 서열번호: 70-72 모두, 또는 (iii) 서열번호: 67-72 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 67-72 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 페르투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 페르투주맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 페르투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 73의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 74의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 75의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 76의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 77의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 78의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 79의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 80의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 67-69 및 73-76 모두, (ii) 서열번호: 70-72 및 77-80 모두; 또는 (iii) 서열번호: 67-72 및 73-80 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 페르투주맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 81을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 82를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 81, 서열번호: 82, 또는 서열번호: 81 및 82 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 81-82 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 CEA (서열번호: 83)를 특이적으로 인식하고 이에 결합하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 항-CEA 항체의 항원 결합 도메인의 하나 이상의 가변 영역 (예: 2개의 가변 영역)을 포함할 수 있고, 각 가변 영역은 CDR1, CDR2 및 CDR3을 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 라베투주맙 (labetuzumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 87의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 88의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 89의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 84-86 모두, (ii) 서열번호: 87-89 모두, 또는 (iii) 서열번호: 84-89 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 84-89 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, 라베투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 라베투주맙의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 라베투주맙의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 90의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 91의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 92의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 93의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 94의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 95의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 96의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 97의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 84-86 및 90-93 모두, (ii) 서열번호: 87-89 및 94-97 모두; 또는 (iii) 서열번호: 84-89 및 90-97 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 라베투주맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 98을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 99를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 98, 서열번호: 99, 또는 서열번호: 98 및 99 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 98-99 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 PR1A3의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 103의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 104의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 105의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 100-102 모두, (ii) 서열번호: 103-105 모두, 또는 (iii) 서열번호: 100-105 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 100-105 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, PR1A3의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 PR1A3의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 PR1A3의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 106의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 107의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 108의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 109의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 110의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 111의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 112의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 113의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 100-102 및 106-109 모두, (ii) 서열번호: 103-105 및 110-113 모두; 또는 (iii) 서열번호: 100-103 및 106-113 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 PR1A3의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 114를 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 115를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 114, 서열번호: 115, 또는 서열번호: 114 및 115 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 114-115 모두를 포함한다.
발명의 일 구체예는 MFE-23의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 119의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 121의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 116-118 모두, (ii) 서열번호: 119-121 모두, 또는 (iii) 서열번호: 116-121 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 116-121 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, MFE-23의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 MFE-23의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 MFE-23의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 122의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 123의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 124의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 125의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 126의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 127의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 128의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 129의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 116-118 및 122-125 모두, (ii) 서열번호: 119-121 및 126-129 모두; 또는 (iii) 서열번호: 116-121 및 122-129 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 MFE-23의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 130을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 131을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 130, 서열번호: 131, 또는 서열번호: 130 및 131 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 130-131 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 SM3E의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 135의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 136의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 137의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체는 (i) 서열번호: 132-134 모두, (ii) 서열번호: 135-137 모두, 또는 (iii) 서열번호: 132-137 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 132-137 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서, SM3E의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 SM3E의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 SM3E의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 138의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 프레임워크 영역 ("FR") 1), 서열번호: 139의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR2), 서열번호: 140의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR3), 서열번호: 141의 아미노산 서열 (제1 가변 영역의 FR4), 서열번호: 142의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR1), 서열번호: 143의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR2), 서열번호: 144의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR3), 및 서열번호: 145의 아미노산 서열 (제2 가변 영역의 FR4)을 추가로 포함한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 132-134 및 138-53 모두, (ii) 서열번호: 135-137 및 142-144 모두; 또는 (iii) 서열번호: 132-137 및 138-144 모두를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 SM3E의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 146을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 147을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 146, 서열번호: 147, 또는 서열번호: 146 및 147 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 폴리펩티드는 서열번호: 146-147 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 항-EGFR 항체 세툭시맙 (cetuximab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 148의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 149의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 150의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 151의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 152의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 153의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 148-150 모두, (ii) 서열번호: 151-153 모두, 또는 (iii) 서열번호: 148-153 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 148-153 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 항-EGFR 항체 파니투무맙 (panitumumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체는 서열번호: 154의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 155의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 156의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 157의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 158의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 159의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 154-156 모두, (ii) 서열번호: 157-159 모두, 또는 (iii) 서열번호: 154-159 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 154-159 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 항-EGFR 항체 네시투무맙 (necitumumab)의 CDR 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 160의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제1 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제1 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제1 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제1 가변 영역, 및 서열번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 (제2 가변 영역의 CDR1), 서열번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 (제2 가변 영역의 CDR2) 및 서열번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 (제2 가변 영역의 CDR3)을 포함하는 제2 가변 영역을 포함할 수 있다. 이와 관련하여, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 (i) 서열번호: 160-162 모두, (ii) 서열번호: 163-165 모두, 또는 (iii) 서열번호: 160-165 모두를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인은 서열번호: 160-165 모두를 포함한다.
본 발명의 일 구체예는 상기 항-EGFR 항체 세툭시맙의 하나 또는 둘 모두의 가변 영역을 포함하는 항체 구조체 또는 항원 결합 도메인을 제공한다. 이와 관련하여, 상기 제1 가변 영역은 서열번호: 166을 포함할 수 있다. 상기 제2 가변 영역은 서열번호: 167을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 상기 항체는 서열번호: 166, 서열번호: 167, 또는 서열번호: 166 및 167 모두를 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 서열번호: 166-167 모두를 포함한다.
항체에 추가하여, 대체 단백질 스캐폴드가 상기 면역접합체의 일부로 사용될 수 있다. 문구 "대체 단백질 스캐폴드 (alternative protein scaffold)"는 비-면역글로불린 유래 단백질 또는 펩티드를 지칭한다. 이러한 단백질 및 펩티드는 일반적으로 조작이 가능하고, 주어진 항원에 대해 단일특이성, 이중특이성 또는 다중특이성을 부여하도록 디자인될 수 있다. 대체 단백질 스캐폴드의 조작은 몇몇 접근법을 사용하여 수행될 수 있다. 루프 이식 접근법 (loop grafting approach)은 알려진 특이성의 서열이 스캐폴드의 가변 루프에 이식되는 경우에 사용될 수 있다. 서열 무작위화 및 돌연변이 유발을 사용하여 돌연변이체 라이브러리를 개발할 수 있으며, 이는 새로운 결합제를 확인하기 위해 다양한 디스플레이 플랫폼 (예: 파지 디스플레이)을 사용하여 스크리닝될 수 있다. 부위-특이적 돌연변이 유발은 유사한 접근법의 일부로 사용될 수 있다. 대체 단백질 스캐폴드는, 최소 2차 구조를 가진 작은 펩티드에서 전체 크기의 항체와 유사한 크기의 큰 단백질에 이르기까지, 다양한 크기로 존재한다. 스캐폴드의 예는 시스틴 노트 미니단백질 (cystine knotted miniproteins) (노틴 (knottins)으로도 알려짐), 시클릭 시스틴 노트 미니단백질 (cyclic cystine knotted miniproteins) (시클로타이드 (cyclotides)로도 알려짐), 아비머 (avimers), 아피바디 (affibodies), 인간 피브로넥틴의 제10 타입 III 도메인, DARPins (디자인된 안키린 반복부), 및 안티칼린 (리포칼린으로도 알려짐)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 알려진 특이성을 가진 자연 발생 리간드는 주어진 표적에 대해 새로운 특이성을 부여하도록 조작될 수도 있다. 조작될 수 있는 자연 발생 리간드의 예는 EGF 리간드 및 VEGF 리간드를 포함한다. 조작된 단백질은 원하는 결합 전략 및 특이성에 따라 단량체 단백질 또는 다량체로 생성될 수 있다. 단백질 공학 전략을 사용하여 대체 단백질 스캐폴드를 Fc 도메인에 융합시킬 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 FcRγ-결합된 수용체에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 FcRγ-결합된 수용체는 하기로 구성된 그룹으로부터 선택된다: GP6 (GPVI), LILRA1 (CD85I), LILRA2 (CD85H, ILT1), LILRA4 (CD85G, ILT7), LILRA5 (CD85F, ILT11), LILRA6 (CD85b, ILT8), LILRB1, NCR1 (CD335, LY94, NKp46), NCR3 (CD335, LY94, NKp46), NCR3 (CD337, NKp30), OSCAR, 및 TARM1.
일부 구체예에서, 상기 항체는 DAP12-결합된 수용체에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 DAP12-결합된 수용체는 하기로 구성된 그룹으로부터 선택된다: CD300C, CD300E, CD300LB (CD300B), CD300LD (CD300D), KIR2DL4 (CD158D), KIR2DS, KLRC2 (CD159C, NKG2C), KLRK1 (CD314, NKG2D), NCR2 (CD336, NKp44), PILRB, SIGLEC1 (CD169, SN), SIGLEC5, SIGLEC6, SIGLEC7, SIGLEC8, SIGLEC9, SIGLEC10, SIGLEC11, SIGLEC12, SIGLEC14, SIGLEC15 (CD33L3), SIGLEC16, SIRPB1 (CD172B), TREM1 (CD354), 및 TREM2.
일부 구체예에서, 상기 항체는 hemITAM-보유 수용체에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 hemITAM-보유 수용체는 KLRF1 (NKp80)이다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 하기로부터 선택된 하나 이상의 표적에 결합할 수 있다: CLEC4C (BDCA-2, DLEC, CD303, CLECSF7), CLEC4D (MCL, CLECSF8), CLEC4E (Mincle), CLEC6A (덱틴-2), CLEC5A (MDL-1, CLECSF5), CLEC1B (CLEC-2), CLEC9A (DNGR-1), 및 CLEC7A (덱틴-1). 일부 구체예에서, 상기 항체는 CLEC6A (덱틴-2) 또는 CLEC5A에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 CLEC6A (덱틴-2)에 결합할 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 하기로부터 선택된 하나 이상의 표적에 결합 할 수 있다 (예컨대, 하기로부터 선택된 표적에 특이적으로 결합함): ATP5I (Q06185), OAT (P29758), AIFM1 (Q9Z0X1), AOFA (Q64133), MTDC (P18155), CMC1 (Q8BH59), PREP (Q8K411), YMEL1 (O88967), LPPRC (Q6PB66), LONM (Q8CGK3), ACON (Q99KI0), ODO1 (Q60597), IDHP (P54071), ALDH2 (P47738), ATPB (P56480), AATM (P05202), TMM93 (Q9CQW0), ERGI3 (Q9CQE7), RTN4 (Q99P72), CL041 (Q8BQR4), ERLN2 (Q8BFZ9), TERA (Q01853), DAD1 (P61804), CALX (P35564), CALU (O35887), VAPA (Q9WV55), MOGS (Q80UM7), GANAB (Q8BHN3), ERO1A (Q8R180), UGGG1 (Q6P5E4), P4HA1 (Q60715), HYEP (Q9D379), CALR (P14211), AT2A2 (O55143), PDIA4 (P08003), PDIA1 (P09103), PDIA3 (P27773), PDIA6 (Q922R8), CLH (Q68FD5), PPIB (P24369), TCPG (P80318), MOT4 (P57787), NICA (P57716), BASI (P18572), VAPA (Q9WV55), ENV2 (P11370), VAT1 (Q62465), 4F2 (P10852), ENOA (P17182), ILK (O55222), GPNMB (Q99P91), ENV1 (P10404), ERO1A (Q8R180), CLH (Q68FD5), DSG1A (Q61495), AT1A1 (Q8VDN2), HYOU1 (Q9JKR6), TRAP1 (Q9CQN1), GRP75 (P38647), ENPL (P08113), CH60 (P63038), 및 CH10 (Q64433). 상기 목록에서, 식별 번호는 괄호 안에 표시된다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 하기로부터 선택된 항원에 결합한다: CCR8, CDH1, CD19, CD20, CD29, CD30, CD38, CD40, CD47, EpCAM, MUC1, MUC16, EGFR, HER2, SLAMF7, 및 gp75. 일부 구체예에서, 상기 항원은 하기로부터 선택된다: CCR8, CD19, CD20, CD47, EpCAM, MUC1, MUC16, EGFR, 및 HER2. 일부 구체예에서, 상기 항체는 Tn 항원 및 Thomsen-Friedenreich 항원으로부터 선택된 항원에 결합한다.
일부 구체예에서, 상기 항체 또는 Fc 융합 단백질은 하기로부터 선택된다: 아바고보맙, 아바타셉트 (또한, ORENCIATM으로 알려짐), 아브식시맙 (또한, REOPROTM, c7E3 Fab로 알려짐), 아달리무맙 (또한, HUMIRATM로 알려짐), 아데카투무맙, 알렘투주맙 (또한, CAMPATHTM, MabCampath 또는 Campath-1H로 알려짐), 알투모맙, 아펠리모맙, 아나투모맙 마페나톡스, 아네투무맙, 안루키주맙, 아폴리주맙, 아르시투모맙, 아셀리주맙, 아틀리주맙, 아토롤리무맙, 바피뉴주맙, 바실릭시맙 (또한, SIMULECTTM로 알려짐), 바비툭시맙, 벡투모맙 (또한, LYMPHOSCANTM으로 알려짐), 벨리무맙 (또한, LYMPHO-STAT-BTM로 알려짐), 베르틸리무맙, 베실레소맙, 베바시주맙 (또한, AVASTINTM으로 알려짐), 비시로맙 브랄로바르비탈, 비바투주맙 메르탄신, 캄파트, 카나키누맙 (또한, ACZ885로 알려짐), 칸투주맙 메르탄신, 카프로맙 (또한, PROSTASCINTTM로 알려짐), 카투막소맙 (또한, REMOVABTM로 알려짐), 세델리주맙 (또한, CIMZIATM로 알려짐), 세르톨리주맙 페골, 세툭시맙 (또한, ERBITUXTM로 알려짐), 클레놀릭시맙, 다세투주맙, 다클릭시맙, 다클리주맙 (또한, ZENAPAXTM로 알려짐), 데노수맙 (또한, AMG 162로 알려짐), 데투모맙, 도를리모맙 아리톡스, 도를릭시주맙, 둔투무맙, 두리물루맙, 두르물루맙, 에크로멕시맙, 에쿨리주맙 (또한, SOLIRISTM로 알려짐), 에도바코맙, 에드레콜로맙 (또한, Mab17-1A, PANOREXTM로 알려짐), 에팔리주맙 (또한, RAPTIVATM로 알려짐), 에푼구맙 (또한, MYCOGRABTM로 알려짐), 엘로투주맙, 엘실리모맙, 엔리모맙 페골, 에피투모맙 시툭세탄, 에팔리주맙, 에피투모맙, 에프라투주맙, 에를리주맙, 에르투막소맙 (또한, REXOMUNTM으로 알려짐), 에타네르셉트 (또한, ENBRELTM로 알려짐), 에타라시주맙 (또한, 에타라투주맙, VITAXINTM, ABEGRINTM으로 알려짐), 엑비비루맙, 파놀레소맙 (또한, NEUTROSPECTM으로 알려짐), 파랄리모맙, 펠비주맙, 폰톨리주맙 (또한, HUZAFTM로 알려짐), 갈릭시맙, 간테네루맙, 가빌리모맙 (또한, ABXCBLTM로 알려짐), 겜투주맙 오조가미신 (또한, MYLOTARGTM로 알려짐), 골리무맙 (또한, CNTO 148로 알려짐), 고밀릭시맙, 이발리주맙 (또한, TNX-355로 알려짐), 이브리투모맙 티욱세탄 (또한, ZEVALINTM으로 알려짐), 이고보맙, 임시로맙, 인플릭시맙 (또한, REMICADETM로 알려짐), 이놀리모맙, 이노투주맙 오조가미신, 이필리무맙 (또한, MDX-010, MDX-101로 알려짐), 이라투무맙, 켈릭시맙, 라베투주맙, 레말레소맙, 레브릴리주맙, 레르델리무맙, 렉사투무맙 (또한, HGS-ETR2, ETR2-ST01로 알려짐), 렉시투무맙, 리비비루맙, 린투주맙, 루카투무맙, 루밀릭시맙, 마파투무맙 (또한, HGSETR1, TRM-1로 알려짐), 마슬리모맙, 마투주맙 (또한, EMD72000으로 알려짐), 메폴리주맙 (또한, BOSATRIATM로 알려짐), 메텔리무맙, 밀라투주맙, 민레투모맙, 미투모맙, 모롤리무맙, 모타비주맙 (또한, NUMAXTM로 알려짐), 무로모납 (또한, OKT3으로 알려짐), 나콜로맙 타페나톡스, 나프투모맙 에스타페나톡스, 나탈리주맙 (또한, TYSABRITM, ANTEGRENTM으로 알려짐), 네바쿠맙, 네렐리모맙, 니모투주맙 (또한, THERACIM hR3TM, THERA-CIM-hR3TM, THERALOCTM로 알려짐), 노페투모맙 메르펜탄 (또한, VERLUMATM로 알려짐), 오비누투주맙, 오크렐리주맙, 오둘리모맙, 오파투무맙, 오말리주맙 (또한, XOLAIRTM로 알려짐), 오레고보맙 (또한, OVAREXTM로 알려짐), 오텔릭시주맙, 파기박시맙, 팔리비주맙 (또한, SYNAGISTM로 알려짐), 파나투무맙 (또한, ABX-EGF, VECTIBIXTM로 알려짐), 파스콜리주맙, 펨투모맙 (또한, THERAGYNTM으로 알려짐), 페르투주맙 (또한, 2C4, OMNITARGTM로 알려짐), 펙셀리주맙, 핀투모맙, 프릴릭시맙, 프리투무맙, 라니비주맙 (또한, LUCENTISTM로 알려짐), 락시바쿠맙, 레가비루맙, 레슬리주맙, 리툭시맙 (또한, RITUXANTM, MabTHERATM로 알려짐), 로벨리주맙, 루플리주맙, 사투모맙, 세비루맙, 시브로투주맙, 시플리주맙 (또한, MEDI-507로 알려짐), 손투주맙, 스타물루맙 (또한, MYO-029로 알려짐), 술레소맙 (또한, LEUKOSCANTM으로 알려짐), 타카투주맙 테트락세탄, 타도시주맙, 탈리주맙, 타플리투모맙 팝톡스, 테피바주맙 (또한, AUREXISTM로 알려짐), 텔리모맙 아리톡스, 테넬릭시맙, 테플리주맙, 티실리무맙, 토실리주맙 (또한, ACTEMRATM로 알려짐), 토랄리주맙, 토시투모맙, 트라스투주맙 (또한, HERCEPTINTM으로 알려짐), 트레멜리무맙 (또한, CP-675,206으로 알려짐), 투코투주맙 셀모류킨, 투비루맙, 우르톡사주맙, 우스테키누맙 (또한, CNTO 1275로 알려짐), 바팔릭시맙, 벨투주맙, 베팔리모맙, 비실리주맙 (또한, NUVIONTM으로 알려짐), 볼로식시맙 (또한, M200으로 알려짐), 보투무맙 (또한, HUMASPECTTM로 알려짐), 잘루투무맙, 자놀리무맙 (또한, HuMAX-CD4로 알려짐), 지랄리무맙, 졸리모맙 아리톡스, 다라투무맙, 올라라투맙, 브렌툭시맙 베도틴, 아피베르셉트, 아바타셉트, 벨라타셉트, 아피베르셉트, 에타네르셉트, 로미플로스팀, SBT-040 (미국 2017/0158772에 열거된 서열). 일부 구체예에서, 상기 항체는 하기로 구성된 그룹으로부터 선택된다: 올라라투맙, 오비누투주맙, 트라스투주맙, 세툭시맙, 리툭시맙, 페르투주맙, 베바시주맙, 다라투무맙, 에타네르셉트, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 이필리무맙, 파니투무맙, 잘루투무맙, 니모투주맙, 마투주맙 및 엘로투주맙. 소정의 구체예에서, 상기 항체는 트라스투주맙이다.
체크포인트 억제제
임의의 적절한 면역 체크포인트 억제제가 본원에 개시된 면역접합체와 함께 사용하기 위해 고려된다. 일부 구체예에서, 상기 면역 체크포인트 억제제는 하나 이상의 면역 체크포인트 단백질의 발현 또는 활성을 감소시킨다. 다른 구체예에서, 상기 면역 체크포인트 억제제는 하나 이상의 면역 체크포인트 단백질 및 이들의 리간드 간 상호 작용을 감소시킨다. 면역 체크포인트 분자의 발현 및/또는 활성을 감소시키는 억제성 핵산이 또한 본원에 개시된 방법에서 사용될 수 있다.
대부분의 체크포인트 항체는 세포를 사멸시키는 것이 아니라, 신호전달을 차단하기 때문에 이펙터 기능을 갖지 않도록 디자인된다. 본 발명의 면역접합체는 골수성 면역을 활성화하는데 필요한 "이펙터 기능"을 다시 추가할 수 있다.　그러므로 대부분의 체크포인트 항체 억제제의 경우, 이러한 발견이 중요하다.
일부 구체예에서, 상기 면역 체크포인트 억제제는 세포독성 T-림프구 항원 4 (CTLA4, CD152로도 알려짐), Ig 및 ITIM 도메인을 갖는 T 세포 면역수용체 (TIGIT), 글루코코르티코이드-유도 TNFR-관련 단백질 (GITR, TNFRSF18로도 알려짐), 유도성 T 세포 공동자극 (ICOS, CD278로도 알려짐), CD96, 폴리오바이러스 수용체-관련 2 (PVRL2, CD112R로도 알려짐), 프로그램된 세포 사멸 단백질 1 (PD-1, CD279로도 알려짐), 프로그램된 세포 사멸 1 리간드 1 (PD-L1, B7-H3 및 CD274로도 알려짐), 프로그래밍된 세포 사멸 리간드 2 (PD-L2, B7-DC 및 CD273으로도 알려짐), 림프구 활성화 유전자-3 (LAG-3, CD223으로도 알려짐), B7-H4, 킬러 면역글로불린 수용체 (KIR), 종양 괴사 인자 수용체 상과 구성원 4 (TNFRSF4, 또한 OX40 및 CD134라고도 알려짐) 및 이의 리간드 OX40L (CD252), 인돌아민 2,3-디옥시게나제 1 (IDO-1), 인돌아민 2,3-디옥시게나제 2 (IDO-2), 암 배아 항원-관련 세포 부착 분자 1 (CEACAM1), B 및 T 림프구 감쇠인자 (BTLA, 또한 CD272로 알려짐), T-세포 막 단백질 3 (TIM3), 아데노신 A2A 수용체 (A2Ar), 및 T 세포 활성화의 V-도메인 Ig 억제인자 (VISTA 단백질)이다. 일부 구체예에서, 상기 면역 체크포인트 억제제는 CTLA4, PD-1 또는 PD-L1의 억제제이다.
일부 구체예에서, 상기 항체는 이필리무맙 (또한, YERVOYTM로 알려짐), 펨브롤리주맙 (또한, KEYTRUDATM로 알려짐), 니볼루맙 (또한, OPDIVOTM로 알려짐), 아테졸리주맙 (또한, TECENTRIGTM로 알려짐), 아벨루맙 (또한, BAVENCIOTM로 알려짐), 및 두르발루맙 (또한, IMFINZITM로 알려짐)으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 항체는 이필리무맙 (또한, YERVOYTM로 알려짐), 펨브롤리주맙 (또한, KEYTRUDATM로 알려짐), 니볼루맙 (또한, OPDIVOTM로 알려짐), 및 아테졸리주맙 (또한, TECENTRIGTM로 알려짐)으로부터 선택된다.
스페이서
상기 접합체 중에 아쥬반트 모이어티 및 아쥬반트 코어는 단백질 변형 (modification)을 위한 다양한 화학을 사용하여 항체에 공유 결합될 수 있고, 상기 기재된 링커 또는 스페이서는 반응성 링커 기를 가진 시약과, 단백질 관능기 (즉, 아미노산 측쇄)의 반응으로부터 기인한다. 다양한 이러한 시약이 당분야에 알려져 있다. 이러한 시약의 예는 N-히드록시숙신이미딜 (NHS) 에스테르 및 N-히드록시설포숙신이미딜 (설포-NHS) 에스테르 (아민 반응성); 카보디이미드 (아민 및 카복실 반응성); 히드록시메틸 포스핀 (아민 반응성); 말레이미드 (티올 반응성); 할로겐화 아세트아미드 예컨대 N-요오도아세트아미드 (티올 반응성); 아릴 아지드 (1차 아민 반응성); 불소화 아릴 아지드 (탄소-수소 (C-H) 삽입을 통해 반응성); 펜타플루오로페닐 (PFP) 에스테르 (아민 반응성); 테트라플루오로페닐 (TFP) 에스테르 (아민 반응성); 이미도에스테르 (아민 반응성); 이소시아네이트 (히드록실 반응성); 비닐 설폰 (티올, 아민 및 히드록실 반응성); 피리딜 디설파이드 (티올 반응성); 및 벤조페논 유도체 (C-H 결합 삽입을 통해 반응성)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 추가 시약은 Hermanson, Bioconjugate Techniques, 2nd Edition, Academic Press, 2008에 기재된 것을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
상기 링커가 항체 구조체 및 아쥬반트 코어에 공유 결합되는 경우, 상기 항체 구조체 및 아쥬반트 모이어티의 기능이 유지되도록 상기 링커는 임의의 적절한 길이를 가질 수 있다. 상기 링커는 약 3 Å 이상, 예를 들어, 약 4 Å 이상, 약 5 Å 이상, 약 6 Å 이상, 약 7 Å 이상, 약 8 Å 이상, 약 9 Å 이상, 약 10 Å 이상, 또는 약 20 Å 이상의 길이를 가질 수 있다. 대안으로서, 또는 상기에 추가로, 상기 링커는 약 100 Å 이하, 예를 들어, 약 90 Å 이하, 약 80 Å 이하, 약 70 Å 이하, 약 60 Å 이하, 약 50 Å 이하, 약 45 Å 이하, 약 40 Å 이하, 약 35 Å 이하, 약 30 Å 이하, 약 25 Å 이하, 약 20 Å 이하, 또는 약 15 Å 이하의 길이를 가질 수 있다. 따라서, 상기 링커는 임의의 2개의 전술한 종점에 의해 한정된 길이를 가질 수 있다. 상기 링커는 약 3 Å 내지 약 100 Å, 예를 들어, 약 3 Å 내지 약 90 Å, 약 3 Å 내지 약 80 Å, 약 3 Å 내지 약 70 Å, 약 3 Å 내지 약 60 Å, 약 3 Å 내지 약 50 Å, 약 3 Å 내지 약 45 Å, 약 3 Å 내지 약 40 Å, 약 3 Å 내지 약 35 Å, 약 3 Å 내지 약 30 Å, 약 3 Å 내지 약 25 Å, 약 3 Å 내지 약 20 Å, 약 3 Å 내지 약 15 Å, 약 5 Å 내지 약 50 Å, 약 5 Å 내지 약 25 Å, 약 5 Å 내지 약 20 Å, 약 10 Å 내지 약 50 Å, 약 10 Å 내지 약 20 Å, 약 5 Å 내지 약 30 Å, 약 5 Å 내지 약 15 Å, 약 20 Å 내지 약 100 Å, 약 20 Å 내지 약 90 Å, 약 20 Å 내지 약 80 Å, 약 20 Å 내지 약 70 Å, 약 20 Å 내지 약 60 Å, 또는 약 20 Å 내지 약 50 Å의 길이를 가질 수 있다. 소정의 구체예에서, 상기 링커는 약 20 Å 내지 약 100 Å의 길이를 갖는다.
상기 스페이서가 상기 항체 구조체 및 아쥬반트 모이어티에 공유 결합하는 경우, 상기 항체 구조체 및 아쥬반트 모이어티의 기능이 유지되도록 상기 스페이서는 임의의 적절한 길이를 가질 수 있다.　상기 스페이서는 약 3 Å 이상, 예를 들어, 약 4 Å 이상, 약 5 Å 이상, 약 6 Å 이상, 약 7 Å 이상, 약 8 Å 이상, 약 9 Å 이상, 약 10 Å 이상, 또는 약 20 Å 이상의 길이를 가질 수 있다. 대안으로서, 또는 추가로, 상기 스페이서는 약 80 Å 이하, 예를 들어, 약 70 Å 이하, 약 60 Å 이하, 약 50 Å 이하, 약 45 Å 이하, 약 40 Å 이하, 약 35 Å 이하, 약 30 Å 이하, 약 25 Å 이하, 약 20 Å 이하, 또는 약 15 Å 이하의 길이를 가질 수 있다. 따라서, 상기 스페이서는 임의의 2개의 전술한 종점에 의해 한정된 길이를 가질 수 있다. 상기 스페이서는 약 3 Å 내지 약 80 Å, 예를 들어, 약 3 Å 내지 약 70 Å, 약 3 Å 내지 약 60 Å, 약 3 Å 내지 약 50 Å, 약 3 Å 내지 약 45 Å, 약 3 Å 내지 약 40 Å, 약 3 Å 내지 약 35 Å, 약 3 Å 내지 약 30 Å, 약 3 Å 내지 약 25 Å, 약 3 Å 내지 약 20 Å, 약 3 Å 내지 약 15 Å, 약 5 Å 내지 약 50 Å, 약 5 Å 내지 약 25 Å, 약 5 Å 내지 약 20 Å, 약 10 Å 내지 약 50 Å, 약 10 Å 내지 약 20 Å, 약 5 Å 내지 약 30 Å, 약 5 Å 내지 약 15 Å, 약 20 Å 내지 약 80 Å, 약 20 Å 내지 약 70 Å, 약 20 Å 내지 약 60 Å, 또는 약 20 Å 내지 약 50 Å의 길이를 가질 수 있다. 소정의 구체예에서, 상기 스페이서는 약 20 Å 내지 약 80 Å의 길이를 갖는다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 생리학적 조건하에 절단 불가능하다. 본원에서 사용된, 용어 "생리학적 조건 (physiological conditions)"은 섭씨 20-40도의 온도 범위, 대기압 (즉, 1 atm), pH 약 6 내지 약 8, 및 하나 이상의 생리학적 효소, 프로테아제, 산 및 염기를 지칭한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 생리학적 조건하에 절단될 수 있다. 예를 들어, 상기 링커는 효소 과정 또는 대사 과정에 의해 절단될 수 있다.
상기 스페이서는 스페이서 및/또는 링커의 원하는 길이가 달성될 수 있는 임의의 적절한 유기 2가 연결 모이어티일 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 스페이서는 에틸렌 글리콜기 또는 글리신 잔기를 포함하는 2가 연결 모이어티이다. 상기 스페이서는 바람직하게는 아미드 결합, C-N 단일 결합, C-O 단일 결합 또는 C-C 단일 결합을 경유하여 아쥬반트 모이어티에 결합되고, 아미드 결합 또는 C-N 단일 결합을 경유하여 항체에 결합된다. 일부 구체예에서, 상기 스페이서는 아쥬반트 모이어티의 질소기 및 항체의 질소기에 결합된다. 이러한 구체예에서, 상기 스페이서는 아미드 결합, C-N 단일 결합, 또는 이들의 조합을 경유하여 인접한 질소기에 결합된다.
일부 구체예에서, 상기 스페이서는 폴리(에틸렌 글리콜)기를 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 스페이서는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜기 (예: 적어도 3개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 4개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 5개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 6개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 7개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 8개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 9개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 10개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 11개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 12개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 13개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 14개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 15개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 16개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 17개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 18개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 19개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 20개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 21개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 22개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 23개의 에틸렌 글리콜기, 적어도 24개의 에틸렌 글리콜기, 또는 적어도 25개의 에틸렌 글리콜기를 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 스페이서는 디(에틸렌 글리콜) 기, 트리(에틸렌 글리콜) 기, 또는 테트라(에틸렌 글리콜) 기, 5개의 에틸렌 글리콜기, 6개의 에틸렌 글리콜기, 8개의 에틸렌 글리콜기, 12개의 에틸렌 글리콜기, 24개의 에틸렌 글리콜기, 또는 25개의 에틸렌 글리콜기를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 스페이서는 글리신 잔기를 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 스페이서는 적어도 2개의 글리신 잔기 (예: 적어도 3개의 글리신 잔기, 적어도 4개의 글리신 잔기, 적어도 5개의 글리신 잔기, 적어도 6개의 글리신 잔기, 적어도 7개의 글리신 잔기, 적어도 8개의 글리신 잔기, 적어도 9개의 글리신 잔기, 적어도 10개의 글리신 잔기, 적어도 11개의 글리신 잔기, 적어도 12개의 글리신 잔기, 적어도 13개의 글리신 잔기, 적어도 14개의 글리신 잔기, 적어도 15개의 글리신 잔기, 적어도 16개의 글리신 잔기, 적어도 17개의 글리신 잔기, 적어도 18개의 글리신 잔기, 적어도 19개의 글리신 잔기, 적어도 20개의 글리신 잔기, 적어도 21개의 글리신 잔기, 적어도 22개의 글리신 잔기, 적어도 23개의 글리신 잔기, 적어도 24개의 글리신 잔기, 또는 적어도 25개의 글리신 잔기를 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 스페이서는 2개의 글리신 잔기, 3개의 글리신 잔기, 4개의 글리신 잔기, 5개의 글리신 잔기, 6개의 글리신 잔기, 8개의 글리신 잔기, 12개의 글리신 잔기, 24개의 글리신 잔기, 또는 25개의 글리신 잔기를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 스페이서는 2가 시클로헥실렌기를 추가로 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 스페이서는 하기로부터 선택된다:
Figure pct00013
;
상기 R은 선택적으로 존재하고, 1 내지 8개의 탄소 단위를 포함하는 직쇄형 또는 분지쇄형, 고리형 또는 직쇄형, 포화 또는 불포화 알킬, 헤테로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 사슬이고; a는 1 내지 40의 정수이고; 각 A는 독립적으로 임의의 아미노산으로부터 선택되고; 아래 첨자 c는 1 내지 25의 정수이고; G1은 CH2, C=O 또는 결합이고, G2는 CH2, C=O 또는 결합이고, 파선 ("
Figure pct00014
")은 아쥬반트 모이어티로의 부착 지점을 나타내고; 물결선 ("
Figure pct00015
")은 항체로의 부착 지점을 나타낸다. 소정의 구체예에서, a는 2 내지 25의 정수이다. 소정의 구체예에서, c는 2 내지 8의 정수이다.
아쥬반트
일반적으로, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 I의 아쥬반트 코어 구조를 갖는다:
Figure pct00016
상기 B 및 C는 선택적으로 존재하고, A, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하고, 상기 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하며, 선택적으로 치환된다. 상기 화학식 I의 코어 구조 내에 이중 결합 및 헤테로원자 (즉, 방향족 고리 주위의 다른 원자)는, A 고리가 화학식 I에 표시된 2-아미노 질소 모이어티를 갖는 한 특별히 한정되지 않는다. 따라서, 본원에서 사용된, 문구 "아쥬반트 코어 (adjuvant core)"는 2-아미노 질소 모이어티를 포함하는 융합된 고리 (즉, 1, 2 또는 3개의 고리) 기를 지칭한다. 바람직한 구체예에서, 상기 A 고리는 4, 5 또는 6개의 탄소 원자 및 적어도 1개의 질소 원자 (예: 1개의 질소 원자, 2개의 질소 원자 또는 3개의 질소 원자)를 함유하는 고리형 방향족 또는 비-방향족 고리를 나타낸다. 상기 아쥬반트 코어 주위의 치환은, 2-아미노 질소 모이어티가 비치환된 상태로 유지되는 한 특별히 한정되지 않는다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티는 상기 아쥬반트의 활성을 유지하는데 중요하다고 여겨진다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 B 고리가 존재하는 화학식 I의 아쥬반트 코어 구조를 갖는다. 일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 C 고리가 존재하는 화학식 I의 아쥬반트 코어 구조를 갖는다. 소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 B 고리 및 C 고리가 존재하는 화학식 I의 아쥬반트 코어 구조를 갖는다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 IA의 아쥬반트 코어를 갖는다:
Figure pct00017
,
상기에서, Ar은 고리가 방향족이고, 선택적으로 다른 질소 원자를 포함하고, 선택적으로 치환된 것을 나타내고, B 및 C는 선택적으로 존재하고, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하고, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하고, 선택적으로 치환된다. 화학식 IA의 코어 구조 내에 코어 구조내 이중 결합 및 헤테로원자 (즉, 고리 주위의 다른 원자)는, 상기 고리가 점선 타원형으로 표시되고, 유지되는 2-아미노 질소 모이어티을 갖는 한 특별히 한정되지 않는다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 IB의 아쥬반트 코어를 갖는다:
Figure pct00018
,
상기에서, B 및 C는 선택적으로 존재하고, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내며, 선택적으로 이중 결합을 포함하고, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자 (예: 질소, 산소 및/또는 황)를 포함하고, 선택적으로 치환된다. 화학식 IB의 코어 구조 내에 코어 구조 내 이중 결합 및 헤테로원자 (즉, 고리 주위의 다른 원자)는, 상기 고리가 점선 타원형으로 표시되고, 유지되는 2-아미노 질소 모이어티을 갖는 한 특별히 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 본 발명의 면역접합체는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하는 아쥬반트 코어를 갖는 아쥬반트 모이어티를 포함하고, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 초과 (예: 약 5.25 Å 초과, 약 5.5 Å 초과, 약 5.75 Å 초과, 또는 약 6 Å 초과)이다. 소정의 구체예에서, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 6 Å 초과이다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 결합 도메인의 개구부와 반대편의 toll-유사 수용체의 결합 도메인 측에서 아미노산과 수소 결합 및/또는 염 브릿지를 형성하는 것으로 여겨진다. 따라서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 전형적으로 아쥬반트 모이어티의 반대편에 있다. 도 1은 TLR의 결합 도메인에 대해 예시되는 아쥬반트 모이어티를 나타내고, 여기서 "
Figure pct00019
"는 2-아미노 질소 모이어티로부터 링커의 부착 지점까지의 거리를 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 적어도 1개의 탄소 원자 (예: 적어도 2개의 탄소 원자, 적어도 3개의 탄소 원자, 적어도 4개의 탄소 원자, 또는 적어도 6개의 탄소 원자)를 갖는 소수성 치환기 ("RH")를 추가로 포함한다. 상기 소수성 치환기가 -NH2, -OH 또는 -SH 치환기를 함유하지 않는 한, 상기 소수성 치환기는 임의의 적절한 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 이들의 조합일 수 있다. 또한, 상기 소수성 치환기는 바람직하지 않은 입체 및/또는 전자 상호작용을 초래할 만큼 크지 않은 것이 중요하다. 따라서, 상기 소수성 치환기는 8개 미만의 비-수소 원자 (예: 탄소, 산소, 질소, 황 등)를 가질 것이다.
전형적으로, 존재하는 경우, 상기 소수성 치환기는 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자로부터 약 6 Å 이내 (예: 약 5.75 Å 이내, 약 5.5 Å 이내, 약 5.25 Å 이내, 또는 약 5 Å 이내)의 거리에 있는, 상기 소수성 치환기의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 가질 것이다. 소정의 구체예에서, 상기 펜던트 질소 원자 및 소수성 치환기의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 미만이다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 소수성 포켓 영역에 근접한 toll-유사 수용체의 결합 도메인 측에서 아미노산과 수소 결합 및/또는 염 브릿지를 형성하는 것으로 여겨진다. 따라서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자 및 소수성 치환기의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 전형적으로 매우 근접해 있다. 도 1은 TLR의 결합 도메인에 대해 예시되는 아쥬반트 모이어티를 나타내며, 여기서 "
Figure pct00020
"는 2-아미노 질소 모이어티로부터 소수성 치환기까지의 거리를 나타낸다.
상기 아쥬반트 코어는 아쥬반트 모이어티가 그의 아쥬반트 활성을 유지하도록 허용하는 위치에서 링커에 부착된다. 따라서, 상기 링커는 2-아미노 질소 모이어티에 부착될 수 없으며, 이는 상기 화학적 모이어티는 비치환 상태로 유지되어야 하기 때문이다. 또한, 상기 아쥬반트 모이어티는 하나 이상의 소수성 포켓 영역 ("RH")을 가지며, 여기서 링커는 아쥬반트 코어에 부착될 수 없다. 본원에서 사용된, 문구 "소수성 포켓 영역 (hydrophobic pocket region)"은 수용체 결합 도메인의 이론적 모델링에 의해 결정된 바와 같이, 소수성 포켓에 존재하고 및/또는 아쥬반트 모이어티의 각 수용체의 결합 도메인의 아미노산 잔기를 방해하는 아쥬반트 모이어티의 영역을 지칭한다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, RH로 지정된 위치에 부착된 링커는 바람직하지 않은 입체 및/또는 전자 상호작용을 초래하고, 이에 의해 아쥬반트의 활성을 감소시키는 것으로 여겨진다. 따라서, 상기 아쥬반트 코어는 상기 아쥬반트의 활성을 유지하기 위해 특정 위치 ("RC")에서 링커에 부착되어야 한다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 Adj A의 것이다:
Figure pct00021
상기에서
각 J는 독립적으로 C, CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
E는 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00022
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00023
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00024
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00025
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00026
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00027
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00028
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
본원에서 사용된, 용어 "2가 (divalent)"는, 다른 원자들 중 하나가 수소인 경우에도, 화학적 모이어티의 동일하거나 또는 상이한 위치에서, 동일하거나 또는 상이한 2개의 다른 원자에 결합할 수 있는 화학적 모이어티를 지칭한다. 예를 들어, 2가 기는 V, W, X, Y 및 Z로 정의된 바와 같이, 탄소, 질소, 산소 또는 수소에 결합할 수 있는 동일하거나 또는 상이한 2개의 연결 지점을 갖는다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00029
;
상기에서,
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00030
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00031
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00032
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00033
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00034
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00035
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 경우에, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00036
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00037
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00038
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00039
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00040
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00041
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00042
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00043
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00044
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00045
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00046
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00047
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00048
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00049
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00050
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00051
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00052
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00053
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00054
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00055
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00056
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00057
.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 Adj B의 것이다:
Figure pct00058
;
상기에서
각 J는 독립적으로 C, CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
A는 CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00059
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00060
,
RH가 선택적으로 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00061
;
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00062
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00063
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00064
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00065
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00066
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00067
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00068
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00069
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00070
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00071
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00072
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 경우에, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00073
.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00074
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00075
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00076
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00077
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00078
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00079
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00080
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00081
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00082
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00083
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00084
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00085
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00086
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00087
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식 Adj C의 것이다:
Figure pct00088
;
상기에서
각 E는 독립적으로 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00089
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00090
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00091
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00092
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00093
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00094
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00095
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00096
,
T1, T2, T3 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00097
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00098
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00099
")은 Q, T1, T2, T3 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00100
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00101
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00102
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00103
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00104
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00105
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00106
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00107
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00108
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00109
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00110
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00111
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00112
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식 Adj D의 것이다:
Figure pct00113
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00114
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00115
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00116
,
상기에서
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00117
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00118
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00119
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00120
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00121
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00122
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00123
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00124
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00125
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 경우에, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00126
.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00127
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00128
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00129
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00130
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00131
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00132
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00133
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00134
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00135
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00136
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00137
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00138
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식 Adj E의 것이다:
Figure pct00139
;
상기에서
각 E는 독립적으로 C, CH 또는 N이고,
A는 CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00140
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00141
,
각 RH는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00142
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00143
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00144
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00145
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00146
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00147
,
T1, T2 및 각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00148
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00149
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00150
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00151
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00152
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00153
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00154
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00155
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00156
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00157
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
바람직한 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00158
;
상기에서
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00159
,
V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00160
")은 RH의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00161
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
더 바람직하게는, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00162
;
상기에서
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
파선 ("
Figure pct00163
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00164
;
상기에서
Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
파선 ("
Figure pct00165
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00166
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00167
,
T1, T2 및 각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00168
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00169
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00170
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00171
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00172
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00173
,
T1 및 각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00174
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00175
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00176
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00177
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00178
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00179
,
각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00180
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00181
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00182
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00183
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 화학식 Adj F의 것이다:
Figure pct00184
;
상기에서
각 J는 독립적으로 C, CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
E는 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00185
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00186
,
각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00187
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00188
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 "
Figure pct00189
"는 독립적으로 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00190
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00191
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00192
;
상기에서
각 A는 독립적으로 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00193
,
T1, T2 및 각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00194
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00195
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 "
Figure pct00196
"는 독립적으로 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00197
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00198
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00199
;
상기에서
각 A는 독립적으로 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00200
,
T1, T2 및 각 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00201
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00202
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 "
Figure pct00203
"는 독립적으로 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00204
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00205
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식 Adj G의 것이다:
Figure pct00206
;
상기에서
각 J는 독립적으로 C, CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
각 E는 독립적으로 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00207
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00208
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00209
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00210
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00211
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00212
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00213
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00214
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00215
,
T1, T2, T3 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00216
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00217
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00218
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00219
")은 Q, T1, T2, T3 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00220
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00221
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00222
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00223
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00224
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00225
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00226
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00227
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00228
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH, CH2, N, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00229
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00230
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00231
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00232
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00233
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00234
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00235
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
J는 CH2, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00236
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00237
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00238
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00239
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00240
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00241
;
상기에서
J는 CH2, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00242
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00243
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00244
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00245
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00246
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00247
;
상기에서
J는 CH2, NH, O 또는 S이고,
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00248
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00249
,
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Y는 선택적으로 존재하고, -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00250
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00251
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00252
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
바람직한 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00253
;
상기에서
J는 CH2, NH, O 또는 S이고,
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Z는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
적어도 X 또는 Z가 존재한다면,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00254
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
더 바람직하게는, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00255
;
상기에서
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Z는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
적어도 X 또는 Z가 존재한다면,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00256
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00257
;
상기에서
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
R은 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00258
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이 아니다:
Figure pct00259
;
상기에서
E는 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00260
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00261
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00262
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00263
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00264
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00265
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00266
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식 Adj H의 것이다:
Figure pct00267
;
상기에서
A는 CH 또는 N이고,
각 E는 독립적으로 C, CH 또는 N이고,
각 RC는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00268
,
단, 적어도 하나의 RC가 존재하고, 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00269
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00270
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00271
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00272
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00273
")은 RC 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00274
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 RC가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00275
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00276
,
T1, T2, T3 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00277
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00278
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00279
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00280
")은 Q, T1, T2, T3 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00281
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00282
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00283
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00284
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00285
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00286
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00287
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00288
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00289
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00290
,
T1, T2 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00291
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00292
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00293
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00294
")은 Q, T1, T2 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00295
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00296
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00297
,
T1 및 RH는 독립적으로 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00298
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00299
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
"
Figure pct00300
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타내고,
물결선 ("
Figure pct00301
")은 Q, T1 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00302
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00303
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00304
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00305
,
각 V는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 X는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
각 Y는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00306
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00307
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00308
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00309
;
상기에서
Q는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00310
,
RH는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00311
,
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
각 W는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Y는 선택적으로 존재하고, -CO- 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화, 2가 C1-C8 알킬이고,
각 Z는 선택적으로 존재하고, 독립적으로 -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
U는 선택적으로 존재하고,
Figure pct00312
이고,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
물결선 ("
Figure pct00313
")은 Q 및 RH의 부착 지점을 나타내고,
점 ("●")은 U의 부착 지점을 나타내고,
파선 ("
Figure pct00314
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다. 따라서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점 ("P")은 Q가 결합된 아쥬반트 코어내 원자이다.
바람직한 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00315
;
상기에서
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Z는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
적어도 X 또는 Z가 존재한다면,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00316
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
더 바람직하게는, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00317
;
상기에서
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
X는 선택적으로 존재하고, 1, 2, 3 또는 4개의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기가 존재하는 경우, 하나 초과의 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 연결되거나 또는 융합되고, 상기 연결된 2가 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기는 결합 또는 -CO-를 통해 연결되고,
Z는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH- 또는 -NR-이고,
적어도 X 또는 Z가 존재한다면,
각 R은 독립적으로 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00318
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00319
;
상기에서
V는 선택적으로 존재하고, -O-, -S-, -NH-, -NR- 또는 -CO-이고,
R은 수소, 할로겐 (예: 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), 니트릴, -COOH, 또는 직쇄형 또는 분지쇄형, 포화 또는 불포화 C1-C4 알킬이고,
각 n은 독립적으로 0 내지 4의 정수이고,
파선 ("
Figure pct00320
")은 아쥬반트 모이어티의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
본 발명의 소정의 구체예에서, 화학식 Adj A - Adj H에서 하나 이상의 방향족 수소 원자는 할로겐 원자 (예: 불소, 염소, 브롬, 요오드 또는 이들의 조합)로 치환될 수 있다.
일부 구체예에서, X는 하기로부터 선택되는 하나 이상의 2가 기이다: 벤젠, 나프탈렌, 피롤, 인돌, 이소인돌, 인돌리진, 푸란, 벤조푸란, 벤조티오펜, 티오펜, 피리딘, 아크리딘, 나프티리딘, 퀴놀론, 이소퀴놀린, 이속사졸, 옥사졸, 벤족사졸, 이소티아졸, 티아졸, 벤즈티아졸, 이미다졸, 티아디아졸, 테트라졸, 트리아졸, 옥사디아졸, 벤즈이미다졸, 퓨린, 피라졸, 피라진, 프테리딘, 퀴녹살린, 프탈라진, 퀴나졸린, 트리아진, 페나진, 신놀린, 피리미딘, 피리다진, 시클로헥산, 데카히드로나프탈렌, 피롤리딘, 옥타히드로인돌, 옥타히드로이소인돌, 테트라히드로푸란, 옥타히드로벤조푸란, 옥타히드로벤조티오펜, 테트라히드로티오펜, 피페리딘, 테트라데카히드로아크리딘, 나프티리딘, 데카히드로퀴놀린, 데카히드로이소퀴놀린, 이속사졸리딘, 옥사졸리딘, 옥타히드로벤조옥사졸, 이소티아졸리딘, 티아졸리딘, 옥타히드로벤조티아졸, 이미다졸리딘, 1,2,3-티아디아졸리딘, 테트라졸리딘, 1,2,3-트리아졸리딘, 1,2,3-옥사디아졸리딘, 옥타히드로벤조이미다졸, 옥타히드로퓨린, 피라졸리딘, 피페라진, 데크히드로프테리딘, 데카히드로퀴녹살린, 데크히드로프탈라진, 데크히드로퀴나졸린, 1,3,5-트리아지난, 테트라데카히드로페나진, 데카히드로 신놀린, 헥스히드로피리미딘 또는 헥사히드로피리다진. 일부 구체예에서, X의 하나 이상의 2가 기들이 융합된다. 일부 구체예에서, X의 하나 이상의 2가 기들이 결합 또는 -CO-를 통해 연결된다.
소정의 구체예에서, X는 하기 화학식의 것이다:
Figure pct00321
Figure pct00322
, 여기서 상기 언급된 구조들 중 임의의 것이 양측으로 (bilaterally) 사용될 수 있다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 모이어티는 S-27609, CL307, UC-IV150, 이미퀴모드 (imiquimod), 가르디퀴모드 (gardiquimod), 레시퀴모드 (resiquimod), 모톨리모드 (motolimod), VTS-1463GS-9620, GSK2245035, TMX-101, TMX-201, TMX-202, 이사토리빈 (isatoribine), AZD8848, MEDI9197, 3M-051, 3M-852, 3M-052, 3M-854A, S-34240, KU34B, 또는 CL663, ORN02, ORN06, CL075, CL097, CL264, 또는 록소리빈 (loxoribine)은 아니다.
소정의 구체예에서, 상기 아쥬반트 ("Adj")는 하기와 같다:
Figure pct00323
Figure pct00324
Figure pct00325
Figure pct00326
Figure pct00327
Figure pct00328
Figure pct00329
Figure pct00330
Figure pct00331
Figure pct00332
Figure pct00333
Figure pct00334
Figure pct00335
Figure pct00336
Figure pct00337
Figure pct00338
Figure pct00339
Figure pct00340
Figure pct00341
Figure pct00342
Figure pct00343
Figure pct00344
Figure pct00345
Figure pct00346
Figure pct00347
Figure pct00348
Figure pct00349
Figure pct00350
Figure pct00351
Figure pct00352
Figure pct00353
Figure pct00354
Figure pct00355
Figure pct00356
Figure pct00357
Figure pct00358
Figure pct00359
Figure pct00360
Figure pct00361
Figure pct00362
Figure pct00363
Figure pct00364
Figure pct00365
Figure pct00366
Figure pct00367
Figure pct00368
Figure pct00369
Figure pct00370
Figure pct00371
Figure pct00372
상기에서 파선 ("
Figure pct00373
")은 아쥬반트의 스페이서로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 구체예에서, 본 발명은 본원에 기재된 아쥬반트 모이어티에 의해 정의된 아쥬반트를 제공하고, 여기서 파선 ("
Figure pct00374
")은 아쥬반트 모이어티의 수소로의 부착 지점을 나타낸다. 임의의 특정 이론에 국한되지 않고, 아쥬반트 모이어티가 본원에 기재된 면역접합체의 일부로서 활성을 갖는 경우, 상기 아쥬반트 모이어티는 또한 아쥬반트로서 활성이 있을 것으로 여겨진다. 대안으로서, 상기 아쥬반트 모이어티는 본원에 기재된 면역접합체의 일부로서 활성이 없을 수 있지만 아쥬반트로서 활성이 있을 수 있다. 따라서, 상기 아쥬반트는 단독 요법 또는 병용 요법으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 아쥬반트는 toll-유사 수용체 (예: TLR7 및/또는 TLR8)를 표적으로 하는 요법에서 사용될 수 있다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 아미노기에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 제외한 동일한 면역접합체의 아쥬반트 활성보다 적어도 약 2배, 적어도 약 3배, 적어도 약 4배, 적어도 약 5배, 적어도 약 6배, 적어도 약 7배, 적어도 약 8배, 적어도 약 9배, 적어도 약 10배, 적어도 약 15배, 적어도 약 20배, 적어도 약 25배, 적어도 약 30배, 적어도 약 35배, 적어도 약 40배, 적어도 약 45배, 적어도 약 50배, 적어도 약 60배, 적어도 약 70배, 적어도 약 80배, 적어도 약 90배, 또는 적어도 약 100배 더 큰 아쥬반트 활성을 갖는다. 본원에서 사용된, "아쥬반트 활성 (adjuvant activity)"은 면역접합체 중 아쥬반트 모이어티 (즉, 아쥬반트 코어 및 합성 핸들 포함)의 그 수용체에 결합하는 능력의 정량적 척도이다.
상기 아쥬반트 활성은 NF-κB 및 AP-1 결합 부위에 융합된 IFN-β 최소 프로모터의 제어하에 유도성 분비된 배아 알칼리성 포스파타제 리포터 유전자 및 인간 TLR7 또는 TLR8 또는 뮤린 TLR7로 공동-형질감염된 HEK293 세포를 사용하여 결정된다. 후속하여 상기 세포를 알칼리성 포스파타제 기질의 존재하에 37℃에서 12시간 동안, 각 지시된 아쥬반트의 2배 연속 희석물과 함께 인큐베이션하였다. 분광광도법 (OD 650 nm)으로 활성을 측정하였다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 위치 RH에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 제외한 동일한 면역접합체의 아쥬반트 활성보다 적어도 약 2배, 적어도 약 3배, 적어도 약 4배, 적어도 약 5배, 적어도 약 6배, 적어도 약 7배, 적어도 약 8배, 적어도 약 9배, 적어도 약 10배, 적어도 약 15배, 적어도 약 20배, 적어도 약 25배, 적어도 약 30배, 적어도 약 35배, 적어도 약 40배, 적어도 약 45배, 적어도 약 50배, 적어도 약 60배, 적어도 약 70배, 적어도 약 80배, 적어도 약 90배, 또는 적어도 약 100배 더 큰 아쥬반트 활성을 갖는다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 항체 및 링커가 부재한 아쥬반트 모이어티의 아쥬반트 활성의 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 95%의 아쥬반트 활성을 갖는다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 아미노기에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 제외한 동일한 면역접합체의 면역접합체 활성보다 적어도 약 2배, 적어도 약 3배, 적어도 약 4배, 적어도 약 5배, 적어도 약 6배, 적어도 약 7배, 적어도 약 8배, 적어도 약 9배, 적어도 약 10배, 적어도 약 15배, 적어도 약 20배, 적어도 약 25배, 적어도 약 30배, 적어도 약 35배, 적어도 약 40배, 적어도 약 45배, 적어도 약 50배, 적어도 약 60배, 적어도 약 70배, 적어도 약 80배, 적어도 약 90배, 또는 적어도 약 100배 더 큰 면역접합체 활성을 갖는다. 본원에서 사용된, "면역접합체 활성 (immunoconjugate activity)"은 선천성 면역 반응을 유도하는 면역접합체의 능력의 정량적 척도이다.
상기 면역접합체 활성은, CD14, CD16, CD40, CD86, CD123 및 HLA-DR에 대한 모노클로날 항체를 함유하는 RosetteSep Human Monocyte Enrichment Cocktail (Stem Cell Technologies)을 사용한 밀도 구배 원심분리에 의해 건강한 혈액 공여자 (Stanford Blood Center)로부터 입수한 인간 말초혈액 단핵 세포로부터 음성으로 (negatively) 선택된 인간 항원 제시 세포 (APC)를 사용하여 결정된다. 후속하여 미성숙한 (immature) APC를, CD14, CD16, CD40, CD86, CD123 및 HLA-DR에 대한 모노클로날 항체를 함유하는 CD16의 고갈 없이 EasySep Human Monocyte Enrichment 키트를 사용한 음성 선택을 통해 ＞97% 순도로 정제하였다. 2 x 105 APC를, 10% 우태아 혈청, 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신, 2 mM L-글루타민, 소듐 피루베이트, 비-필수 아미노산, 50 μM 2-ME 및 지시되는 경우 다양한 농도의 항체가 보충된 IMDM 배지 (Gibco)를 함유하는 96-웰 플레이트 (Corning)에서 6.5 x 105의 자가 (autologous) 또는 동종이형 (allogeneic) CFSE-표지된 종양 세포와 함께 또는 없이 인큐베이션하였다. 세포 및 무-세포 상등액을 18시간 후에 유세포 분석을 통해 분석하였다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 위치 RH에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 제외한 동일한 면역접합체의 면역접합체 활성보다 적어도 약 2배, 적어도 약 3배, 적어도 약 4배, 적어도 약 5배, 적어도 약 6배, 적어도 약 7배, 적어도 약 8배, 적어도 약 9배, 적어도 약 10배, 적어도 약 15배, 적어도 약 20배, 적어도 약 25배, 적어도 약 30배, 적어도 약 35배, 적어도 약 40배, 적어도 약 45배, 적어도 약 50배, 적어도 약 60배, 적어도 약 70배, 적어도 약 80배, 적어도 약 90배, 또는 적어도 약 100배 더 큰 면역접합체 활성을 갖는다.
일부 구체예에서, 아쥬반트 모이어티가 위치 RC에서 링커에 부착된 아쥬반트 코어를 함유하는, 아쥬반트 모이어티를 포함하는 본 발명의 면역접합체는, 동일한 조건하에 연결되지 않은 아쥬반트 모이어티 및 항체를 포함하는 혼합물의 면역접합체 활성의 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 250%, 또는 적어도 약 300%의 면역접합체 활성을 갖는다.
일부 구체예에서, 본 발명은 하기 화학식의 면역접합체 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00375
,
Figure pct00376
,
Figure pct00377
,
상기에서 아래 첨자 r은 1 내지 10의 정수이고, "Ab"는 본원에 기재된 항체 구조체이다. 소정의 구체예에서, 아래 첨자 r은 1 내지 4의 정수 (즉, 1, 2, 3 또는 4)이다.
면역접합체의 제제화 및 투여
관련된 양상에서, 본 발명은 상기 기재된 복수의 면역접합체를 포함하는 조성물을 제공한다. 일부 구체예에서, 면역접합체 당 아쥬반트 모이어티의 평균 수는 약 1개 내지 약 8개의 범위이다. 면역접합체 당 아쥬반트 모이어티의 평균 수는 예를 들어 약 1개 내지 약 8개, 또는 약 1개 내지 약 6개, 또는 약 1개 내지 약 4개의 범위일 수 있다. 면역접합체 당 아쥬반트 모이어티 평균 수는 약 0.8, 1, 1.2, 1.4, 1.6, 1.8, 2, 2.2, 2.4, 2.6, 2.8, 3, 3.2, 3.4, 3.6, 3.8, 4.0 또는 4.2일 수 있다. 일부 구체예에서, 면역접합체 당 아쥬반트 모이어티의 평균 수는 약 4개이다. 일부 구체예에서, 면역접합체 당 아쥬반트 모이어티의 평균 수는 약 2개이다. 일부 경우에, 상기 항체는 단일 아쥬반트 모이어티에 공유 결합된다. 일부 경우에, 상기 항체는 2개 이상의 아쥬반트 모이어티 (예: 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상의 아쥬반트 모이어티)에 링커를 경유하여 공유 결합된다. 일부 경우에, 상기 항체는 1-8개의 아쥬반트 모이어티 (예: 1-5, 1-3, 2-8, 2-5, 2-3 또는 3-8개의 아쥬반트 모이어티)에 링커를 경유하여 공유 결합된다. 일부 경우에, 상기 항체는 2-8개의 아쥬반트 모이어티 (예: 2-5, 2-3 또는 3-8개의 아쥬반트 모이어티)에 공유 결합된다. 상기 항체가 하나 초과의 아쥬반트 모이어티에 공유 결합되는 일부 경우에, 부착된 아쥬반트 모이어티는 동일하거나 또는 상이할 수 있다. 예를 들어, 일부 경우에, 2개 이상의 아쥬반트 모이어티는 동일할 수 있다 (예: 동일한 아쥬반트 모이어티의 2개의 상이한 분자가 항체 상의 상이한 부위에서의 항체에 각각 부착될 수 있음). 일부 경우에, 상기 항체는 2개 이상의 상이한 아쥬반트 모이어티 (예: 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상의 상이한 아쥬반트 모이어티)에 공유 결합된다. 예를 들어, 본 발명의 면역접합체를 생성할 때, 하나 이상의 항체를 2개 이상 (예: 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상)의 상이한 아쥬반트-링커 화합물을 포함하는 혼합물과 조합하여, 하나 이상의 항체내 아미노산 측쇄를 상기 아쥬반트-링커 화합물과 반응시키고, 이에 의해 2개 이상의 상이한 아쥬반트 모이어티에 각각 공유 결합되는 하나 이상의 면역접합체를 생성한다.
일부 구체예에서, 상기 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 면역접합체는 비경구 투여, 예컨대 정맥내 (IV) 투여 또는 체강 또는 장기의 내강으로의 투여를 위해 제제화될 수 있다. 대안으로서, 상기 면역접합체는 종양내로 주사될 수 있다. 주사용 제제는 통상 약학적으로 허용 가능한 담체 중에 용해된 면역접합체의 용액을 포함할 것이다. 이용될 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매에는 물 및 등장성 염화나트륨인 링거 용액이 있다. 또한, 멸균 고정 오일 (sterile fixed oils)은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로 이용될 수 있다. 이를 위해, 합성 모노글리세리드 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 블랜드 고정 오일이 이용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산도 주사제 제조에 사용될 수 있다. 이러한 용액은 멸균이고, 일반적으로 바람직하지 않은 물질은 없다. 이러한 제제는 통상적으로 잘 알려진 멸균 기술로 멸균될 수 있다. 상기 제제는 생리학적 조건에 근접하는데 필요한 약학적으로 허용 가능한 보조 물질, 예컨대 pH 조절제 및 완충제, 독성 조절제, 예를 들어, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드, 포타슘 클로라이드, 칼슘 클로라이드, 소듐 락테이트 및 유사물을 함유할 수 있다. 이들 제제 중 면역접합체의 농도는 광범위하게 가변될 수 있고, 선택된 특정 투여 방식 및 환자의 필요에 따라, 유체 부피, 점도, 체중 등에 기반하여 주로 선택될 것이다. 소정의 구체예에서, 주사용 용액 제제 중 면역접합체의 농도는 약 0.1% (w/w) 내지 약 10% (w/w)의 범위일 것이다.
다른 양상에서, 본 발명은 암을 치료하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 치료적으로 유효한 양의 면역접합체 (예: 상기에 기재된 조성물로서)를 치료를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 상기 방법은 상기 면역접합체를 대상에게 약 100 ng/kg 내지 약 50 mg/kg의 용량을 제공하도록 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 5 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 10 μg/kg 내지 약 5 mg/kg, 또는 약 100 μg/kg 내지 약 1 mg/kg의 범위일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 100, 200, 300, 400 또는 500 μg/kg일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 mg/kg일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 치료될 암의 타입 및 중증도뿐만 아니라 특정 접합체에 따라, 이러한 범위를 벗어날 수도 있다. 투여 빈도는 1주일 당 1회 내지 수회 용량, 또는 더 자주 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 면역접합체는 1개월당 약 1회 내지 1주일당 약 5회 투여된다. 일부 구체예에서, 상기 면역접합체는 1주일당 1회 투여된다.
다른 양상에서, 본 발명은 암을 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 치료적으로 유효한 양의 면역접합체 (예: 상기에 기재된 조성물로서)를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 소정의 구체예에서, 상기 대상은 예방될 소정의 암에 대해 감수성이 있다. 예를 들어, 상기 방법은 상기 면역접합체를 대상에게 약 100 ng/kg 내지 약 50 mg/kg의 용량을 제공하도록 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 5 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 10 μg/kg 내지 약 5 mg/kg, 또는 약 100 μg/kg 내지 약 1 mg/kg의 범위일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 100, 200, 300, 400 또는 500 μg/kg일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 mg/kg일 수 있다. 상기 면역접합체 용량은 치료될 암의 타입 및 중증도뿐만 아니라 특정 접합체에 따라, 이러한 범위를 벗어날 수도 있다. 투여 빈도는 1주일 당 1회 내지 수회 용량, 또는 더 자주 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 면역접합체는 1개월당 약 1회 내지 1주일당 약 5회 투여된다. 일부 구체예에서, 상기 면역접합체는 1주일당 1회 투여된다.
본 발명의 일부 구체예는 상기에 기재된 바와 같이 암을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 암은 두경부암이다. 두경부암 (두경부 편평 세포 암종 포함)은 구강, 인두 및 후두, 타액선, 부비동, 비강 및 목 상부의 림프절의 편평 세포 암종을 특징으로 하는 다양한 암을 지칭한다. 두경부암은 미국에서 전체 암의 대략 3 내지 5%를 차지한다. 이러한 암은 남성 및 50세 이상의 사람에서 더 흔하다. 담배 (무연 담배 포함) 및 알코올 사용은 두경부암, 특히 구강암, 구인두암, 하인두암 및 후두암의 가장 중요한 위험 인자이다. 두경부암의 85%는 담배 사용과 관련이 있다. 본 발명의 방법에서, 상기 면역접합체는 다수의 악성 세포를 표적으로 하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 면역접합체는 입술, 구강, 인두, 후두, 비강 또는 부비동의 편평 상피 세포를 표적으로 하는데 사용될 수 있다. 상기 면역접합체는 점막표피성 암종 세포, 선종 낭성 암종 세포, 선암종 세포, 소세포 미분화 암세포, 감각신경모세포종 (esthesioneuroblastoma) 세포, 호지킨 림프종 세포 및 비-호지킨 림프종 세포를 표적으로 하는데 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 두경부암을 치료하는 방법은 EGFR (예: 세툭시맙, 파니투무맙, 마투주맙 및 잘루투무맙), PD-1 (예: 펨브롤리주맙) 및/또는 MUC1에 결합할 수 있는 항체를 함유하는 면역접합체를 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 일부 구체예는 상기에 기재된 바와 같이 암을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 암은 유방암이다. 유방암은 유방의 여러 부위에서 비롯될 수 있고, 다수의 다양한 유방암 타입이 특성 규명되어 있다. 예를 들어, 본 발명의 면역접합체는 인 시투 유관 암종 (ductal carcinoma in situ); 침윤성 유관 암종 (예: 유방의 관상 암종; 수질 암종; 점액 암종;, 유두 암종; 또는 사상 암종); 인 시투 소엽 암종 (lobular carcinoma in situ); 침윤성 소엽 암종; 염증성 유방암; 및 다른 형태의 유방암을 치료하는데 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 유방암을 치료하는 방법은 HER2 (예: 트라스투주맙, 마르게툭시맙), 당단백질 NMB (예: 글렘바투무맙) 및/또는 MUC1에 결합할 수 있는 항체를 함유하는 면역접합체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 암은 TLR7 및/또는 TLR8에 의해 유도된 항-염증 반응에 감수성이 있다.
본원에 기재된 본 주제의 구체예를 포함하는 양상은 단독으로 또는 하나 이상의 다른 양상 또는 구체예와 조합하여 유익할 수 있다. 전술한 설명을 제한하지 않고, 1-35로 번호가 매겨진 개시내용의 소정의 비-제한적 양상이 하기에 제공된다. 본 개시내용을 읽음으로써 당업자에게 명백한 바와 같이, 개별적으로 번호가 매겨진 각 양상이 사용되거나, 또는 개별적으로 번호가 매겨진 양상에 선행하거나 또는 후속한 것 중 어느 하나와 조합될 수 있다. 이는 양상들의 이러한 조합들 모두에 대한 뒷받침을 제공하기 위한 것이고, 하기에 명시적으로 제공된 양상들의 조합들에 한정되지 않는다:
1. 면역접합체 (immunoconjugate)로서,
(a) (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체, 및 (b) 1-8개의 아쥬반트 코어를 포함하고,
상기 각 아쥬반트 코어는 상기 항체 구조체에 링커를 경유하여 공유 결합하며, 상기 각 아쥬반트 코어는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하고, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 초과인 것인 면역접합체.
2. 양상 1에 있어서, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5.5 Å 초과인 것인 면역접합체.
3. 양상 2에 있어서, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 6 Å 초과인 것인 면역접합체.
4. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00378
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A 및 B가 존재하고, C는 선택적으로 존재하며, A, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
5. 양상 4에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00379
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 Ar, B 및 C로 표시되고, 상기 Ar 및 B가 존재하고, C는 선택적으로 존재하며, Ar은 2-아미노 질소 모이어티를 함유하는 방향족 고리를 나타내고, 선택적으로 추가의 질소 원자를 포함하며, 선택적으로 치환되고, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
6. 양상 4에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00380
,
상기 B가 존재하고, C는 선택적으로 존재하며, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
7. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00381
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A, B 및 C가 존재하고, 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
8. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00382
,
상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 Ar, B 및 C로 표시되고, 상기 Ar 및 C가 존재하고, B는 선택적으로 존재하며, Ar은 2-아미노 질소 모이어티를 함유하는 방향족 고리를 나타내고, 선택적으로 추가의 질소 원자를 포함하며, 선택적으로 치환되고, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
9. 양상 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
Figure pct00383
,
상기 C가 존재하고, B는 선택적으로 존재하며, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
10. 양상 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
11. 양상 10에 있어서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp543인 것인 면역접합체.
12. 양상 10 또는 11에 있어서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
13. 양상 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
14. 양상 13에 있어서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp555인 것인 면역접합체.
15. 양상 13 또는 14에 있어서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
16. 양상 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 아르기닌 및 세린 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있는 것인 면역접합체.
17. 양상 16에 있어서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있는 것인 면역접합체.
18. 양상 16 또는 17에 있어서, 상기 세린 잔기는 Ser352이고, 상기 아르기닌 잔기는 Arg429인 것인 면역접합체.
19. 양상 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 리신 및 발린 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 (methine) 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있는 것인 면역접합체.
20. 양상 19에 있어서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있는 것인 면역접합체.
21. 양상 19 또는 20에 있어서, 상기 발린 잔기는 Val355이고, 상기 리신 잔기는 Lys432인 것인 면역접합체.
22. 양상 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 구조체는 표적화 결합 도메인을 추가로 포함하는 것인 면역접합체.
23. 양상 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 구조체는 항체인 것인 면역접합체.
24. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 암세포의 항원에 결합하는 것인 면역접합체.
25. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 CDH1, CD19, CD20, CD29, CD30, CD40, CD47, EpCAM, SLAMF7, PDGFRa, gp75, MSLN, CA6, CA9, CDH6, CEA, CTAG1B/NY-ESO-1, LAMP1, LeY, MAGEA3/A6, P-카드헤린, BCMA, CD38, HLA-DR, ROR1, WT1, GFRA1, FR-알파, L1-CAM, LRRC15, MUC1, MUC16, PSMA, SLC34A2, TROP2, GPC3, CCR8 및 VEGF로 구성된 그룹으로부터 선택된 항원에 결합하는 것인 면역접합체.
26. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 HER2에 결합하는 것인 면역접합체.
27. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 EGFR에 결합하는 것인 면역접합체.
28. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 PD-L1에 결합하는 것인 면역접합체.
29. 양상 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 CEA에 결합하는 것인 면역접합체.
30. 양상 23 내지 29 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG1 항체인 것인 면역접합체.
31. 양상 23 내지 29 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 올라라투맙, 오비누투주맙, 트라스투주맙, 세툭시맙, 리툭시맙, 페르투주맙, 베바시주맙, 다라투무맙, 에타네르셉트, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 이필리무맙, 파니투무맙, 잘루투무맙, 니모투주맙, 마투주맙 및 엘로투주맙으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것인 면역접합체.
32. 양상 1 내지 31 중 어느 하나에 따른 복수의 면역접합체를 포함하는 조성물.
33. 양상 1 내지 31 중 어느 하나에 따른 면역접합체 또는 양상 32에 따른 조성물의 치료적으로 유효한 양을 치료를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법.
34. 양상 1 내지 31 중 어느 하나에 따른 면역접합체 또는 양상 32에 따른 조성물의 치료적으로 유효한 양을 예방을 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 예방하는 방법.
35. 양상 33 또는 34에 있어서, 상기 암은 TLR7 및/또는 TLR8에 의해 유도된 항-염증 반응에 감수성이 있는 것인 방법.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 추가로 설명하지만, 물론 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되서는 안된다.
실시예 1: 화합물 2의 합성
Figure pct00384
2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (41.89 g, 290.66 mmol, 1 eq) 및 4-브로모아닐린 (50 g, 290.66 mmol, 1 eq)의 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다 (neat). 그 후에, 소량의 남아 있는 아세톤을 진공으로 제거하였다. Eaton 시약 (415.15 g, 1.74 mol, 273.12 mL, 6 eq)을 상기 혼합물에 80℃에서 12시간 동안 부가하였다. 물 (1000 mL)을 상기 혼합물에 부가하면서 격렬하게 교반하였다. 침전물을 여과하고, H2O로 세척하고, 공기 건조하여 고형물을 제공하였다. 상기 고형물을 에탄올로부터 재결정화하여 6-브로모퀴놀린-2,4-디올 (26 g, 108.31 mmol, 37.26% 수율)을 회백색 (off-white) 고형물로서 제공하였다. 1H NMR (디메틸 설폭시드 (DMSO)-d6, 400 MHz) δ 11.53 (s, 1H), 11.33 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 8.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 7.18-7.24 (m, 1H), 5.75 (s, 1H).
실시예 2: 화합물 3의 합성
Figure pct00385
AcOH (500 mL) 중 질산 HNO3 (13.65 g, 216.62 mmol, 9.75 mL, 2 eq)의 용액에 6-브로모퀴놀린-2,4-디올 (26 g, 108.31 mmol, 1 eq)을 15℃에서 천천히 부가하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 냉각시키고, 물 (1000 mL)을 부가하여 퀀칭하였다. 생성물을 여과로 분리하고, 물 (100 mL x 3)로 세척하고, 건조하여 원하는 생성물을 수득하였다. 조 생성물 (crude product) 6-브로모-3-니트로-퀴놀린-2,4-디올 (30 g, 105.24 mmol, 97.17% 수율)을 황색 고형물로 수득하고, 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.92 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H).
실시예 3: 화합물 4의 합성
Figure pct00386
POCl3 (484.12 g, 3.16 mol, 293.41 mL, 30 eq) 중 6-브로모-3-니트로-퀴놀린-2,4-디올 (30 g, 105.24 mmol, 1 eq)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (40.81 g, 315.73 mmol, 55.00 mL, 3 eq)을 15℃에서 천천히 부가하였다. 상기 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 얼음물 (2000 mL)에 붓고, 여과하고, H2O (500 mL x 3)로 세척하고, 건조하여 6-브로모-2,4-디클로로-3-니트로-퀴놀린 (30 g, 93.18 mmol, 88.54% 수율)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H).
실시예 4: 화합물 5의 합성
Figure pct00387
실온에서 DMF (100 mL) 중 6-브로모-2,4-디클로로-3-니트로퀴놀린 (5.6 g, 17.4 mmol, 1 eq.) 및 고체 K2CO3 (3.6 g, 26 mmol, 1.5 eq.)의 용액에 순수한 2,4-디메톡시벤질아민 (3.5 g, 20.1 mmol, 1.2 eq.)을 부가하였다. 상기 혼합물을 15분 동안 교반하고, 물 (300 mL)을 부가하고, 혼합물을 추가 5분 동안 교반하였다. 수득된 고형물을 여과하고, 그 다음에 에틸 아세테이트 (100 mL)에 용해시켰다. 상기 용액을 물 (100 mL), 브라인 (100 mL)으로 세척하고, 분리하고, 건조하고 (Na2SO4), 그 다음에 여과하고, 진공에서 농축하였다. 갈색 고형물을 1:1의 헥산/디 에틸 에테르 (150 mL)로 연화하고 (triturated), 여과하여 6-브로모-2-클로로-4-(2,4-디메톡시벤질)아미노-3-니트로퀴놀린 (6.9 g, 15.3 mmol, 88%)을 황색 고형물로 수득하였다. 상기 화합물은 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 5: 화합물 6의 합성
Figure pct00388
0℃에서 메탄올 (200 mL) 중 6-브로모-2-클로로-4-(2,4-디메톡시벤질)아미노-3-니트로퀴놀린 (6.9 g, 15.3 mmol, 88%)에 NiCl2 . 6H2O (0.36 g, 1.5 mmol, 0.1 eq)를 부가하였다. 소듐 보로히드라이드 (펠렛, 1.42 g, 38 mmol, 2.5 eq.)를 부가하고, 반응을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음에, 실온으로 가온하고, 추가 15분 동안 교반하였다. 빙초산 (5 mL)을 pH가 ~5가 수득될 때까지 부가하였다. 상기 용매를 진공에서 증발시키고, 조 고형물을 에틸 아세테이트 (150 mL)에 재용해시킨 다음, 규조토 층을 통해 여과하여 검정색 불용성 물질을 제거하였다. 상기 에틸 아세테이트를 진공에서 제거하였다. 암갈색 고형물을 에테르 (75 mL)로 연화한 다음 여과하여 3-아미노-6-브로모-2-클로로-4-(2,4-디메톡시벤질)아미노퀴놀린 (5.81 g, 13.7 mmol, 90%)을 황갈색 (tan) 고형물로 수득하였다. 상기 화합물은 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 6: 화합물 7의 합성
Figure pct00389
실온에서 교반되는 트리에틸아민 (2.1 g, 2.8 mL, 20 mmol, 1.5 eq.)을 함유하는 디클로로메탄 (100 mL) 중 3-아미노-6-브로모-2-클로로-4-(2,4-디메톡시벤질)아미노퀴놀린 (5.75 g, 13.6 mmol, 1 eq.)의 용액에 순수한 발레로일 클로라이드 (2.0 mL, 2.0 g, 16 mmol, 1.2 eq)를 부가하였다. 상기 혼합물을 물 (150 mL), 브라인 (150 mL)으로 세척하고, 분리하고, 건조하고 (Na2SO4), 여과 및 농축하였다. 고형물을 에테르로 연화하고, 여과하고, 진공하에 건조시켰다. N-(6-브로모-2-클로로-4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)퀴놀린-3-일)펜탄아미드를 갈색 고형물 (5.8 g, 11.4 mmol, 84%)로 수득하였다. 상기 화합물은 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 7: 화합물 8의 합성
Figure pct00390
100 mL 비커 (beaker)에서, N-(6-브로모-2-클로로-4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)퀴놀린-3-일)펜탄아미드 (5.8 g, 11.4 mmol, 1 eq.) 및 2-클로로벤조산 (0.90 g, 5.7 mmol. 0.5 eq)의 혼합물을 50 mL 톨루엔 중에서 2시간 동안 끓였다. 상기 부피가 25 mL에 도달할 때마다 톨루엔을 부가하여 50 mL로 하였다. 2,4-디메톡시벤질아민 (9.5 g, 57 mmol, 5 eq.)을 부가하고, 반응을 120℃에서 2시간 동안 유지하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 물 (80 mL) 그 다음에 아세트산 (3.5 mL)을 부가하였다. 상등액을 따라내고, 조 생성물을 물 (80 mL)로 세척하였다. 습윤 고형물을 메탄올 (100 mL)로 연화하여 8-브로모-2-부틸-N,1-비스(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미 다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (4.80 g, 7.7 mmol, 68%)을 회백색 고형물로 제공하였다. 상기 화합물은 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 8: 화합물 9의 합성
Figure pct00391
8-브로모-2-부틸-N,1-비스(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (0.31 g, 0.5 mmol, 1 eq.) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (0.19 g, 1 mmol, 2 eq.)의 혼합물을 톨루엔 (2 mL)에서 조합한 다음, 아르곤으로 탈기시켰다. Pd2dba3 (45 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq.), 트리-tert-부틸포스핀 테트라플루오로보레이트 (29 mg, 0.10 mmol, 0.2 eq) 및 소듐 tert-부톡사이드 (144 mg, 1.5 mmol, 3 eq)를 부가하였다. 상기 혼합물을 캡을 씌운 바이알에서 110℃에서 30분 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 냉각한 다음 에틸 아세테이트 (50 mL)와 물 (50 mL) 사이에서 분배하였다. 유기층을 브라인 (50 mL)으로 세척하고, 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 50% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시킨 실리카겔 (20 g)상에서 정제하여, tert-부틸 4-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-카복실레이트 (0.28 g, 0.39 mmol, 78%)를 회백색 고형물로 수득하였다. LC/MS [M+H] 725.40 (산출치); LC/MS [M+H] 725.67 (관측치).
실시예 9: 화합물 10의 합성
Figure pct00392
Tert-부틸 4-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-카복실레이트 (0.28 g, 0.39 mmol, 1 eq.)를 TFA (3 mL)에 용해시키고, 5분 동안 가열 환류시켰다. 상기 TFA를 진공에서 제거하고, 조 생성물을 아세토니트릴에 용해시키고, 여과한 다음 농축하여 2-부틸-8-(피페라진-1-일)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민의 TFA 염 (0.16 g, 0.37 mmol, 95%)을 회백색 고형물로서 수득하였다. LC/MS [M+H] 325.21 (산출치); LC/MS [M+H] 325.51 (관측치).
실시예 10: 화합물 11의 합성
Figure pct00393
80℃에서 DCM (1 mL) 중 옥살릴 클로라이드 (127 mg, 86 μL, 1 mmol, 2 eq)의 용액에 DCM (1 mL) 중 DMSO (156 mg, 142 μL, 2 mmol, 4 eq)의 용액을 적가하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 15분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 DCM (1 mL) 중 히드록실-PEG10-t-부틸 에스테르 (602 mg, 0.5 mmol, 1 eq)의 용액을 부가하였다. 15분 동안 교반한 후에, Et3N (303 mg, 418 μL)을 부가하고, 상기 혼합물을 80℃에서 15분 동안 교반한 다음 냉욕조 (cold bath)로부터 꺼내서, 30분에 걸쳐 20℃로 가온하였다. DMF (3 mL) 중 2-부틸-8-(피페라진-1-일)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민의 TFA 염 및 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (212 mg, 1 mmol, 2 eq)의 현탁액에 이전 혼합물을 20℃에서 천천히 부가하였다. 조합된 혼합물을 20℃에서 45분 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 나머지에 3 mL의 10% Na2CO3를 부가하고, 15분 동안 격렬하게 교반하였다. 물 (20 mL)을 부가하고, 조 생성물을 DCM (25 mL)으로 추출하였다. 유기층을 브라인으로 세척하고, 건조하고 (Na2SO4), 여과 및 농축하였다. 조 물질을 2-15% MeOH/DCM + 1% Et3N의 구배 용출액을 사용하는 플래시 크로마토그래피 (flash chromatography)로 정제하여 tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트를 56% 수율로 수득하였다. LC/MS [M+H] 893.55 (산출치); LC/MS [M+H] 893.79 (관측치).
실시예 11: 화합물 12의 합성
Figure pct00394
Tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트를 디옥산 및 3N HCl의 1:1 혼합물 (5mL)에 용해시킨 다음, 60℃로 90분 동안 가열하였다. 상기 용매를 제거하고, 잔류물을 아세토니트릴 (5 mL)로 4 회 공비시켰다. 수득된 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산 HCL 염을 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 12: 화합물 13의 합성
Figure pct00395
1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산 HCL 염 (0.13 mmol, 1 eq)에, 아세토니트릴 (3 mL)에 용해시킨 2,3,5,6-테트라플루오로페놀 (66 mg, 0.4 mmol, 3 eq) 및 디이소프로필카보디이미드 (51 mg, 62 μL, 0.4 mmol, 3 eq)의 혼합물을 부가하고, 상기 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 물 (12 mL)로 희석하고, 10분에 걸쳐 30-80% 아세토니트릴/물 + 0.1% TFA의 구배 용출액을 사용하는 역상 크로마토그래피로 정제하였다. 수집된 분획물을 감압하에 농축하고, 유리질 필름 (glassy film)을 아세토니트릴로 4회 (20 mL) 공비하여 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조)[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트를 54% 수율로 수득하였다. LC/MS [M+H] 985.49 (산출치); LC/MS [M+H] 985.71 (관측치).
실시예 13: 화합물 15의 합성
Figure pct00396
Et2O (80 mL) 중 6-브로모-1H-인돌 (5.00 g, 25.50 mmol, 1 eq) 및 피리딘 (2.62 g, 33.16 mmol, 2.68 mL, 1.3 eq)의 혼합물에 에틸 2-클로로-2-옥소-아세테이트 (4.18 g, 30.61 mmol, 3.43 mL, 1.2 eq)를 N2하에 0℃에서 천천히 부가하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 황색 고형물이 침전되었다. 상기 혼합물을 여과하고, 케이크 (cake)를 H2O로 세척하였다. 조 생성물을 20℃에서 20분 동안 H2O로 연화하여 에틸 2-(6-브로모-1H-인돌-3-일)-2-옥소-아세테이트 (5.4 g, 18.24 mmol, 71.50% 수율)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 12.46 (s, 1H), 8.46 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 14: 화합물 16의 합성
Figure pct00397
EtOH (60 mL) 중 에틸 2-(6-브로모-1H-인돌-3-일)-2-옥소-아세테이트 (5.4 g, 18.24 mmol, 1 eq) 및 부틸히드라진 (3.41 g, 27.35 mmol, 1.5 eq, HCl)의 혼합물에 AcOH (10.95 g, 182.36 mmol, 10.43 mL, 10 eq)를 N2하에 25℃에서 부가하였다. 상기 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 상기 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (컬럼 높이: 250 mm, 직경: 100 mm, 100-200 메시 실리카겔, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5/1, 1/2)로 정제하여 7-브로모-2-부틸-피라졸로[3,4-c] 퀴놀린-4-올 (3 g, 9.37 mmol, 51.38% 수율)을 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 11.40 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.34 (dd, J =8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.91-1.84 (m, 2H), 1.32-1.25 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 15: 화합물 17의 합성
Figure pct00398
POCl3 (13.41 g, 87.45 mmol, 8.13 mL, 10 eq) 중 7-브로모-2-부틸-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-4-올 (2.8 g, 8.74 mmol, 1 eq)의 혼합물에 25℃에서 PCl5 (910.52 mg, 4.37 mmol, 0.5 eq)를 한 번에 부가하였다. 상기 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 상기 혼합물을 농축하였다. 잔류물을 얼음물 (100 mL)에 붓고, CH2Cl2 (30 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과 및 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (컬럼 높이: 250 mm, 직경: 100 mm, 100-200 메시 실리카겔, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1, 3/1)로 정제하여 7-브로모-2-부틸-4-클로로-피라졸로[3,4-c]퀴놀린 (2.6 g, 7.68 mmol, 87.80% 수율)을 황색 오일로서 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.30 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (dd, J =8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.53 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.08-2.04 (m, 2H), 1.46-1.37 (m, 2H), 0.10 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 16: 화합물 18의 합성
Figure pct00399
7-브로모-2-부틸-4-클로로-피라졸로[3,4-c]퀴놀린 (2.6 g, 7.68 mmol, 1 eq) 및 2,4-디메톡시페닐)메탄아민 (6.42 g, 38.39 mmol, 5.78 mL, 5 eq)의 혼합물을 120℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 상기 혼합물을 EtOAc/H2O (10 mL/10 mL)에 용해시키고, 수성 HCl (4M)로 pH = 3으로 조정하였다. 수성상을 여과하여 7-브로모-2-부틸-N-[(2,4-디메톡시페닐)메틸]피라졸로[3,4-c]퀴놀린-4-아민 (2.9 g, 6.18 mmol, 80.47% 수율)을 황색 고형물로서 제공하고, 이는 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.03 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 4.49 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.75 (m, 6H), 1.96-1.89 (m, 2H), 1.35-1.27 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 17: 화합물 19의 합성
Figure pct00400
DMF (10 mL) 중 7-브로모-2-부틸-N-[(2,4-디메톡시페닐)메틸]피라졸로[3,4-c]퀴놀린-4-아민 (0.45 g, 958.73 μmol, 1 eq) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (535.69 mg, 2.88 mmol, 3 eq)의 혼합물에, Pd2(dba)3 (43.90 mg, 47.94 μmol, 0.05 eq), Cs2CO3 (624.74 mg, 1.92 mmol, 2 eq) 및 RuPhos (44.74 mg, 95.87 μmol, 0.1 eq)를 N2 하에 25℃에서 한번에 부가하였다. 상기 혼합물을 140℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 상기 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 얼음물 (30 mL)에 붓고, 1분 동안 교반하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (10 mL x 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 브라인 (10 mL)으로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1, 1/1)로 정제하여, tert-부틸 4-[2-부틸-4-[(2,4-디메톡시페닐)메틸아미노]피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일]피페라진-1-카복실레이트 (0.45 g, 783.00 μmol, 81.67% 수율)를 황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.95 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.49 (d, J =2.4 Hz, 1H), 6.45 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.87 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.33 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.64-3.61 (m, 4H), 3.26-3.23 (m, 4H), 1.99-1.92 (m, 2H), 1.51 (s, 9H), 1.40-1.34 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 18: 화합물 20의 합성
Figure pct00401
DCM (20 mL) 중 tert-부틸 4-[2-부틸-4-[(2,4-디메톡시페닐)메틸아미노]피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일]피페라진-1-카복실레이트 (0.2 g, 348.00 μmol, 1 eq)의 혼합물에, TFA (1.98 g, 17.40 mmol, 1.29 mL, 50 eq)를 25℃에서 한번에 부가하였다. 상기 혼합물을 50℃에서 36시간 동안 교반하였다. LCMS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 상기 혼합물을 농축하고, prep-HPLC (컬럼: Nano-micro KROMASILTM (Sigma-Aldrich) C18 100 * 30mm 5um; 이동상: [물 (0.1% TFA)-ACN]; B%: 20%-55%, 10분)로 정제하여 2-부틸-7-피페라진-1-일-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-4-아민 (0.088 g, 200.71 μmol, 57.67% 수율, TFA)을 회백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.01 (s, 2H), 8.88 (s, 1H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.49 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.45-3.44 (m, 4H), 3.35-3.29 (m, 4H), 1.98-1.90 (m, 2H), 1.36-1.27 (m, 2H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): C18H24N6 질량 산출치 324.21, m/z 실측치 325.3 [M+H]+.
실시예 19: 화합물 21의 합성
Figure pct00402
실시예 10에 기재된 절차를 사용하여, 2-부틸-7-(피페라진-1-일)-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-4-아민을 tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트로 65% 수율로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 893.56 (산출치); LC/MS [M+H] 893.82 (관측치).
실시예 20: 화합물 22의 합성
Figure pct00403
실시예 11에 기재된 절차를 사용하여, Tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트를, 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산으로 92% 수율로 전환시켰다. 상기 화합물을 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 21: 화합물 23의 합성
Figure pct00404
실시예 12에 기재된 절차를 사용하여, 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산을, 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트로 46% 수율로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 985.49 (산출치); LC/MS [M+H] 985.73 (관측치).
실시예 22: 화합물 25의 합성
Figure pct00405
실시예 13-21에 기재된 경로를 사용하여, 5-브로모-1H-인돌을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-2H-피라졸로[3,4-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 985.49 (산출치); LC/MS [M+H] 985.73 (관측치).
실시예 23: 화합물 27의 합성
Figure pct00406
실시예 2에 기재된 절차에 따라, 7-브로모퀴놀린-4-올 (9.66 g, 43.11 mmol, 1 eq.)를 7-브로모-3-니트로퀴놀린-4-올 (7.46 g, 27.7 mmol, 64%)로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 268.96/270.95 (산출치); LC/MS [M+H] 268.99/271.02 (관측치).
실시예 24: 화합물 28의 합성
Figure pct00407
실시예 3에 기재된 절차에 따라, 7-브로모-3-니트로퀴놀린-4-올 (7.46 g, 27.7 mmol, 1 eq.)를 7-브로모-4-클로로-3-니트로퀴놀린 (6.88 g, 23.9 mmol, 86%)으로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 286.92/288.92 (산출치); LC/MS [M+H] 286.98/288.97 (관측치).
실시예 25: 화합물 29의 합성
Figure pct00408
7-브로모-4-클로로-3-니트로퀴놀린 (2.86 g, 10 mmol, 1 eq.)를 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민 (100 mmol, 10 eq)에 20℃에서 부가하였다. 상기 혼합물을 120℃에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 물 (200 mL)로 희석하고, EtOAc (100 ml x 3)로 추출하였다. 유기층을 브라인 (100 mL)으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과 및 농축하였다. 잔류물을 플래시 실리카겔 크로마토그래피 (Teledyne Isco, 10 g, SEPAFLASHTM 실리카 플래시 컬럼, 용리액 0 내지 약 50% 에틸 아세테이트/석유 에테르 구배 100 mL/분)로 정제하여, 7-브로모-N-(2,4-디메톡시벤질)-3-니트로퀴놀린-4-아민 (4.2 g, 10.0 mmol, 100%)을 제공하였다. LC/MS [M+H] 418.04/420.04 (산출치); LC/MS [M+H] 418.19/420.16 (관측치).
실시예 26: 화합물 30의 합성
Figure pct00409
7-브로모-N-(2,4-디메톡시벤질)-3-니트로퀴놀린-4-아민 (4.2 g, 10.0 mmol, 1 eq.)을 아세토니트릴 (24 ml)에 현탁시켰다. 물 (4 ml)을 부가한 다음. 니켈(II) 클로라이드 헥사히드레이트 (0.48 g, 2 mmol, 0.2 eq)를 부가하였다. 소듐 보로히드라이드 (1.52 g, 40.2 mmol, 4 eq)를 녹색 현탁액에 부가하고, 발열 반응을 30분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 여과하고, 농축하고, 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-N4-(2,4-디메톡시벤질)퀴놀린-3,4-디아민 (2.15 g, 5.5 mmol, 55%)을 제공하였다. LC/MS [M+H] 388.07/390.06 (산출치); LC/MS [M+H] 388.22/390.21 (관측치).
실시예 27: 화합물 31의 합성
Figure pct00410
7-브로모-N-4-(2,4-디메톡시벤질)퀴놀린-3,4-디아민 (2.15 g, 5.53 mmol, 1 eq)을 아세토니트릴 (25 ml)에 용해시켰다. 상기 교반 용액에 트리에틸 오르토발레레이트 (2.57 ml, 11.1 mmol, 2 equiv.), 그 다음에 요오드 (0.140 g, 0.55 mmol, 0.1 eq)를 부가하였다. 상기 반응을 LCMS에 의해 출발 물질이 관찰되지 않을 때까지 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축하고, 디클로로메탄 중에 희석하고, 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 (2.43 g, 5.3 mmol, 97%)을 제공하였다. LC/MS [M+H] 454.11/456.11 (산출치); LC/MS [M+H] 454.28/456.23 (관측치).
실시예 28: 화합물 32의 합성
Figure pct00411
7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 (2.7 g, 5.94 mmol, 1 eq)을 15 ml의 DCM에 용해시켰다. 상기 교반 반응에 4-클로로퍼옥시벤조산 (4.39 g, 17.83 mmol, 3 eq)을 부가하였다. 상기 반응을 실온에서 교반하고, LCMS로 모니터링하였다. 출발 물질이 소모되면, 상기 반응을 10% 수성 소듐 카보네이트로 퀀칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 농축하고, 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 5-옥사이드 (0.88 g, 1.87 mmol, 31%)를 제공하였다. LC/MS [M+H] 470.11/472.11 (산출치); LC/MS [M+H] 470.27/472.25 (관측치).
실시예 29: 화합물 33의 합성
Figure pct00412
7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 5-옥사이드 (0.88 g, 1.87 mmol, 1 eq)를 디클로로메탄 (20 ml)에 용해시키고, 얼음에서 냉각시켰다. 포스포릴 클로라이드 (0.21 ml, 2.2 mmol, 1.2 eq)를 빠르게 교반하는 용액에 적가한 다음, N,N-디메틸포름아미드 (0.072 ml, 0.94 mmol, 0.5 eq)를 적가하였다. 5분 후에, 상기 반응을 주위 온도로 가온하고, LCMS로 모니터링하였다. 출발 물질이 소모되면, 상기 용액을 얼음 및 10% 수성 소듐 카보네이트의 혼합물로 세척하였다. 유기층 및 수성층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄 (15 ml)으로 추출하였다. 조합된 유기 분획물들을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과 및 농축하여 7-브로모-2-부틸-4-클로로-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린을 갈색 발포체 (brown foam) (1.02 g, 2.09 mmol, 100%)로 제공하였다. LC/MS [M+H] 488.07/490.07 (산출치); LC/MS [M+H] 488.22/490.21 (관측치).
실시예 30: 화합물 34의 합성
Figure pct00413
7-브로모-2-부틸-4-클로로-1-(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 (1 g, 2 mmol, 1 eq.) 및 (2,4-디메톡시페닐) 메탄아민 (20 mmol, 10 eq)의 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 2M HCl을 부가하여 pH ~4로 조정하고, 에틸 아세테이트 (50 mL x 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 브라인 (50 mL)으로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 20/1 내지 0: 1)로 정제하여 7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-N-(2,4-디메톡시페닐)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (0.694 g, 1.12 mmol, 57%)을 수득하였다. LC/MS [M+H] 619.19/621.32 (산출치); LC/MS [M+H] 619.37/621.32 (관측치).
실시예 31: 화합물 35의 합성
Figure pct00414
7-브로모-2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-N-(2,4-디메톡시페닐)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (0.154 g, 0.25 mmol, 1 eq) 및 Pd(PPH3)4 (28.7 mg, 0.0025 mmol, 0.1 eq)를 건조 이질소 (dry dinitrogen) 하에 조합하였다. 시아노부틸아연 브로마이드 (2.5 ml, THF 중 0.5 M, 1.24 mmol, 5 eq.)를 건조 이질소 하에 부가하고, 상기 반응을 75℃로 가열하였다. 30분 후에, 시아노부틸아연 브로마이드의 추가 부분을 부가하고 (2.5 ml, THF 중 0.5 M, 1.24 mmol, 5 eq.), 반응을 추가 90분 동안 교반하였다. 상기 용액을 시럽으로 농축하고, 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 원하는 5-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시페닐)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜탄니트릴과 2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-N-(2,4-디메톡시페닐)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민의 혼합물 및 조 혼합물로서 포함된 잔류 용매 (0.288g)를 제공하였다. LC/MS [M+H] 622.34 (산출치); LC/MS [M+H] 622.96 (관측치).
실시예 32: 화합물 36의 합성
Figure pct00415
5-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시페닐)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜탄니트릴 (0.69 g, 1.1 mmol, 1 eq.)을 메탄올 (20 ml)에 용해시키고, 얼음에서 냉각시켰다. 니켈(II) 클로라이드 헥사히드레이트 (0.053 g, 0.22 mmol, 0.2 eq) 및 Boc 무수물 (0.51 ml, 2.22 mmol, 2 eq)을 교반 혼합물에 부가하였다. 소듐 보로히드라이드 (1 g, 26.4 mmol, 23.8 eq)를 1시간에 걸쳐 천천히 나누어 부가하였다. 상기 반응을 가온하고, 주위 온도에서 1시간 동안 정치한 다음 농축하였다. 조 물질을 에틸 아세테이트에 흡수시키고, 포화 중탄산나트륨으로 세척하였다. 유기 분획물을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과 및 농축한 다음 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (5-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시페닐)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜틸)카바메이트 (0.265 g, 0.37 mmol, 33%)를 제공하였다. LC/MS [M+H] 726.42 (산출치); LC/MS [M+H] 726.64 (관측치).
실시예 33: 화합물 37의 합성
Figure pct00416
THF (20 mL) 중 tert-부틸 (5-(2-부틸-1-(2,4-디메톡시벤질)-4-((2,4-디메톡시페닐)아미노)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜틸)카바메이트 (94.3 mg, 0.13 mmol, 1 eq)의 용액에, LiAlH4 (0.65 mmol, 5 eq)를 N2하에 25℃에서 나누어 부가하였다. 상기 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 포화 수성 Na2SO4 (2 mL)에 부가하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 2-부틸-N,1-비스(3,4-디메틸벤질)-7-(5-(메틸아미노)펜틸)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민을 제공하였다. LC/MS [M+H] 640.39 (산출치); LC/MS [M+H] 640.55 (관측치).
실시예 34: 화합물 38의 합성
Figure pct00417
DCM (20 mL) 중 2-부틸-N,1-비스(3,4-디메틸벤질)-7-(5-(메틸아미노)펜틸)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (348.57 μmol, 1 eq)의 용액에 TFA (24.56 mmol, 70.45 eq)를 25℃에서 한번에 부가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 45℃에서 감압 농축하였다. 잔류물을 prep-HPLC (컬럼: LUNATM C18 100 x 30 5u (Phenomenex, Inc.); 이동상: [물 (0.1% TFA)-ACN]; B%: 5%-25%, 10분)로 정제하여 2-부틸-7-(5-(메틸아미노)펜틸)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민을 제공하였다. LC/MS [M+H] 340.25 (산출치); LC/MS [M+H] 340.36 (관측치).
실시예 35: 화합물 39의 합성
Figure pct00418
실시예 10에 기재된 절차를 사용하여, 2-부틸-7-(5-(메틸아미노)펜틸)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (50 mg, 0.15 mmol, 1 eq)를 tert-부틸 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 908.60 (산출치); LC/MS [M+H] 908.75 (관측치).
실시예 36: 화합물 40의 합성
Figure pct00419
실시예 11에 기재된 절차를 사용하여, Tert-부틸 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노에이트를 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노산 (45 mg, 0.15 mmol, 화합물 38로부터 33%)으로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 852.53 (산출치); LC/MS [M+H] 852.75 (관측치).
실시예 37: 화합물 41의 합성
Figure pct00420
실시예 12에 기재된 절차에 따라, 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노산 (45 mg, 0.053 mmol, 1 eq.)을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노에이트 (28.5 mg, 0.053 mmol, 54%)로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 1000.53 (산출치); LC/MS [M+H] 1000.72 (관측치).
실시예 38: 화합물 43의 합성
Figure pct00421
실시예 23-37에 기재된 경로를 사용하여, 5-브로모퀴놀린-4-올을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-9-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 1000.53 (산출치); LC/MS [M+H] 1000.94 (관측치).
실시예 39: 화합물 44의 합성
Figure pct00422
실시예 31-37에 기재된 경로를 사용하여, 화합물 8을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 39-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)-34-메틸-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-데카옥사-34-아자노나트리아콘타노에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 1000.53 (산출치); LC/MS [M+H] 1000.92 (관측치).
실시예 40: 화합물 45의 합성
Figure pct00423
실시예 8-10에 기재된 절차에 따라, 7-브로모-2-부틸-N,1-비스(2,4-디메톡시벤질)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민을 tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 893.56 (산출치); LC/MS [M+H] 893.79.
실시예 41: 화합물 46의 합성
Figure pct00424
실시예 11에 제시된 절차에 따라, tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트를 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산으로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 837.49 (산출치); LC/MS [M+H] 837.84 (관측치).
실시예 42: 화합물 47의 합성
Figure pct00425
실시예 12에 제시된 절차에 따라, 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘타노-33-산을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-7-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-데카옥사트리트리아콘탄-33-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 985.49 (산출치); [M+H] 985.71 (관측치).
실시예 43: 화합물 48의 합성
Figure pct00426
실시예 10에 기재된 절차에 따라, 2-부틸-8-(피페라진-1-일)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민을 tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H)-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18-헥사옥사헤니코산-21-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 717.45 (산출치); LC/MS [M+H] 717.75 (관측치).
실시예 44: 화합물 49의 합성
Figure pct00427
실시예 11에 기재된 절차에 따라, Tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18-헥사옥사헤니코산-21-오에이트를 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18-헥사옥사헤니코사노-21-산으로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 661.39 (산출치); LC/MS [M+H] 661.60 (관측치).
실시예 45: 화합물 50의 합성
Figure pct00428
실시예 12에 기재된 절차에 따라, 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18-헥사옥사헤니코사노-21-산을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18-헥사옥사헤니코산-21-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 809.39 (산출치); LC/MS [M+H] 809.62 (관측치).
실시예 46: 화합물 51의 합성
Figure pct00429
실시예 10에 기재된 절차에 따라, 2-부틸-8-(피페라진-1-일)-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-4-아민을 tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-도데카옥사노나트리아콘탄-39-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 981.61 (산출치); LC/MS [M+H] 981.86 (관측치).
실시예 47: 화합물 52의 합성
Figure pct00430
실시예 11에 기재된 절차에 따라, Tert-부틸 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-도데카옥사노나트리아콘탄-39-오에이트를 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-도데카옥사노나트리아콘타노-39-산으로 전환시켰다. 상기 화합물을 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 48: 화합물 53의 합성
Figure pct00431
실시예 12에 기재된 절차에 따라, 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-도데카옥사노나트리아콘타노-39-산을 2,3,5,6-테트라플루오로페닐 1-(4-(4-아미노-2-부틸-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-8-일)피페라진-1-일)-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-도데카옥사노나트리아콘탄-39-오에이트로 전환시켰다. LC/MS [M+H] 1073.54 (산출치); LC/MS [M+H] 1073.81 (관측치).
실시예 49: 화합물 55의 합성
Figure pct00432
7-브로모-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (WO 2006/93514에 따라 제조됨) (320 mg, 1 mmol, 1 eq)에, N2 하에 4-시아노부틸아연 브로마이드 (THF 중 0.5 M, 20 mL, 5 eq.)의 용액을 부가하였다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (115 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq)을 부가하고, 상기 혼합물을 60℃ 또는 90분 교반하였다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체 중탄산나트륨 (1.0 g, 11.9 mmol, 11.9 eq)을 부가하였다. 상기 교반된 현탁액에 물 (0.8 mL)을 부가하고, 현탁액을 20분 동안 격렬하게 교반하였다. 상기 현탁액을 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 고체 케이크 케이크를 디클로로메탄 (25 mL)으로 세척하였다. 여과액을 디클로로메탄 (60 mL)으로 희석하고, 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액 (60 mL) 그 다음에 브라인 (60 mL)으로 세척하였다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피 (에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 5-(4-아미노-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜탄니트릴 (268 mg, 0.82 mmol, 82%)을 농축 후에 황색 고형물로 수득하였다. LC/MS: [M+H] 산출치 325.14; [M+H] 관측치 325.26.
실시예 50: 화합물 56의 합성
Figure pct00433
무수 THF (9 mL) 중 5-(4-아미노-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-7-일)펜탄니트릴) (260 mg, 0.79 mmol, 1 eq)에, N2 하에 고체 리튬알루미늄 하이드라이드 (117 mg, 3.2 mmol, 4 eq)를 나누어 부가하였다. 기체 발생이 멈춘 후에, 상기 혼합물을 60℃에서 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체 중탄산나트륨 (1.0 g, 11.9 mmol, 14.8 eq)을 부가하였다. 이 교반된 현탁액에 물 (0.3 mL)을 부가하고, 현탁액을 20분 동안 격렬하게 교반하였다. 상기 현탁액을 셀 라이트 플러그를 통해 여과하고, 고체 케이크를 디클로로메탄 (25 mL)으로 세척하였다. 여과액을 디클로로메탄 (30 mL)으로 희석하고, 용매를 증발시켰다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피 (메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 7-(5-아미노펜 틸)-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (220 mg, 0.67 mmol, 82%)을 농축 후에 황색 고형물로 수득하였다. LC/MS: [M+H] 산출치 329.17; [M+H] 관측치 329.31.
실시예 51: 화합물 58의 합성
Figure pct00434
아세토니트릴 (3 mL) 중 4,7,10,13,16,19-헥사옥사도코산디오산 (286 mg, 0.75 mmol, 1.1 eq) 용액에, 아세토니트릴 (3 mL) 중 디이소프로필카보디이미드 (283 mg, 2.25 mmol, 3.3 eq) 및 소듐 N-히드록시숙신이미드-3-설포네이트의 혼합물을 부가하였다. 상기 혼합물을 1분 동안 초음파 처리하고, 50℃에서 10분 동안 가열하였다. 수득된 조 1,1'-(4,7,10,13,16,19-헥사옥사도코산디오일비스(옥시))비스(2,5-디옥소피롤리딘-3-설폰산)을 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 52: 화합물 59의 합성
Figure pct00435
이전 반응에서 수득된 아세토니트릴 (6 mL) 중 조 1,1'-(4,7,10,13,16,19-헥사옥사도코산디오일비스(옥시))비스(2,5-디옥소피롤리딘-3-설폰산)을 7-(5-아미노펜틸)-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-4-아민 (220 mg, 0.67 mmol, 1 eq.)에 부가하고, 상기 반응을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 용매를 증발시키고, 조 생성물을 역상 C18 크로마토그래피 (아세토니트릴/물 + 0.1% TFA)로 정제하여 28-(4-아미노-2-프로필티아졸로[4,5-c]퀴놀린-7-일)-22-옥소-4,7,10,13,16,19-헥사옥사-23-아자옥타코사노산 설포-NHS 에스테르 (146 mg, 0.17 mmol, 25%)를 용매 증발 후에 담황색 필름으로 수득하였다. LC/MS: [M+H] 산출치 870.32; [M+H] 관측치 870.53.
실시예 53: 면역접합체 A의 합성
Figure pct00436
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 A의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 7몰 당량의 화합물 13과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 포스페이트 완충 식염수 (PBS)에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 A를 분리하였다. 아쥬반트-항체 비율 (DAR)은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation, Milford, Massachusetts)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 A는 2.5의 DAR을 가졌다.
실시예 54: 면역접합체 B의 합성
Figure pct00437
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 B의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 7.4몰 당량의 화합물 44와 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 B를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 B는 2.56의 DAR을 가졌다.
실시예 55: 면역접합체 C의 합성
Figure pct00438
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 C의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 7.5몰 당량의 화합물 25와 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 C를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 C는 2.65의 DAR을 가졌다.
실시예 56: 면역접합체 D의 합성
Figure pct00439
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 D의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 8.5몰 당량의 화합물 47과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 D를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 D는 2.26의 DAR을 가졌다.
실시예 57: 면역접합체 E의 합성
Figure pct00440
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 E의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 8몰 당량의 화합물 43과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 E를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 E는 2.8의 DAR을 가졌다.
실시예 58: 면역접합체 F의 합성
Figure pct00441
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 F의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 7.8몰 당량의 화합물 23과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 F를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 F는 2.39의 DAR을 가졌다.
실시예 59: 면역접합체 G의 합성
Figure pct00442
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 G의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 8.5몰 당량의 화합물 50과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 G를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 G는 2.37의 DAR을 가졌다.
실시예 60: 면역접합체 H의 합성
Figure pct00443
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 H의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 6몰 당량의 화합물 41과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 H를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 H는 1.98의 DAR을 가졌다.
실시예 61: 면역접합체 I의 합성
Figure pct00444
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 I의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 6몰 당량의 화합물 53과 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 I를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 I는 2.15의 DAR을 가졌다.
실시예 62: 면역접합체 J의 합성
Figure pct00445
본 실시예는 트라스투주맙을 항체 구조체 (Tras)로서 사용한 면역접합체 J의 합성을 나타낸다.
트라스투주맙은 G-25 SEPHADEXTM 탈염 컬럼 (Sigma-Aldrich)을 사용하여, pH 8.3에서 100 mM 붕산, 50 mM 염화나트륨, 1 mM 에틸렌디아민테트라아세트산을 함유하는 접합 버퍼로 버퍼 교환되었다. 그 다음에 용출액은 상기 버퍼를 사용하여 각각 6 mg/ml로 조정하고, 멸균 여과하였다. 6 mg/ml의 트라스투주맙을 30℃로 예열하고, 6몰 당량의 화합물 59와 빠르게 혼합하였다. 반응을 30℃에서 16시간 동안 진행하고, pH 7.2에서 PBS에서 평형화된 2개의 연속 G-25 탈염 컬럼을 실행하여 반응물들로부터 면역접합체 J를 분리하였다. DAR은 XEVOTM G2-XS TOF 질량 분광분석계 (Waters Corporation)에 연결된 ACQUITYTM UPLC H-클래스 (Waters Corporation)에서 C4 역상 컬럼을 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석계 분석에 의해 결정되었다. 면역접합체 J는 2.07의 DAR을 가졌다.
실시예 63. 인 비트로 면역접합체 활성 평가
본 실시예는 면역접합체 A-J가 골수성 활성화를 유도하는데 효과적이므로, 암 치료에 유용하다는 것을 보여준다.
인간 항원 제시 세포의 단리. 인간 골수 항원 제시 세포 (APC)를, CD14, CD16, CD40, CD86, CD123 및 HLA-DR에 대한 모노클로날 항체를 함유하는 ROSETTESEPTM Human Monocyte Enrichment Cocktail (Stem Cell Technologies, Vancouver, Canada)을 사용한 밀도 구배 원심분리에 의해 건강한 혈액 공여자 (Stanford Blood Center, Palo Alto, California)로부터 입수한 인간 말초혈액으로부터 음성으로 선택하였다. 후속하여 미성숙 APC를, CD14, CD16, CD40, CD86, CD123 및 HLA-DR에 대한 모노클로날 항체를 함유하는 CD16의 고갈 없이 EASYSEPTM Human Monocyte Enrichment Kit (Stem Cell Technologies)를 사용한 음성 선택을 통해 ＞ 97% 순도로 정제하였다.
종양 세포의 준비. 3개의 종양 세포주를 사용하였다: HCC1954, JIMT-1 및 COLO 205. HCC1954 (American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, Virginia)는 림프절 전이가 없는 원발성 단계 IIA, 등급 3 침윤성 유관 암종으로부터 유래되었다. HCC1954는 상피 세포 특이적 마커인 상피 당단백질 2 및 사이토케라틴 19에 대해 양성이고, 에스트로겐 수용체 (ER) 및 프로게스테론 수용체 (PR)의 발현에 대해 음성이다. HCC1954는 상대적으로 "높은" 수준의 과발현으로 HER2를 과발현하였다 (효소-연결된 면역흡착 분석 (ELISA)에 의해 결정됨). JIMT-1 (DSMZ, Braunschweig, Germany)은 수술후 방사선 후에 유관 유방암 (등급 3 침윤성, 단계 IIB)을 가진 여성의 흉막 삼출액으로부터 유래되었다. JIMT-1은 "중간" 수준의 과발현으로 간주되는 수준에서 HER2를 과발현하지만, HER2-억제 약물 (예: 트라스투주맙)에는 감수성이 없었다. COLO 205 (ATCC)는 결장 암종을 가진 남성의 복수액으로부터 유래되었다. COLO 205는 암배아 항원 (CEA), 케라틴, 인터루킨 10 (IL-10)을 발현하고, 상대적으로 "낮은" 수준의 과발현으로 HER2를 과발현하는 것으로 간주되었다.
각 세포주로부터의 종양 세포를 1 내지 10 x 106 세포/mL에서 0.1% 우태아 혈청 (FBS)을 포함한 PBS 중에 별도로 재현탁시켰다. 후속하여 세포를 2 μM 카복시플루오레세인 숙신이미딜 에스테르 (CFSE)와 함께 인큐베이션하여 최종 농도 1 μM을 수득하였다. 상기 반응을 10% FBS가 포함된 10 mL 완전 배지를 부가하여 2분 후에 퀀칭시키고, 완전 배지로 2회 세척하였다. 세포를 2% 파라포름알데히드에 고정시키고, PBS로 3회 세척하거나 또는 사용하기 전에 생존 가능하게 두었다.
APC-종양 공동-배양물. 10% FBS, 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신, 2 mM L-글루타민, 소듐 피루베이트, 비-필수 아미노산 및 지시되는 경우, 다양한 농도의 비접합된 HER2 항체 및 본 발명의 면역접합체 A (상기 실시예에 따라 제조됨)가 보충된 iscove 변형된 dulbecco 배지 (iscove's modified dulbecco's medium: IMDM) (Thermo Fisher Scientific)를 함유하는 96-웰 플레이트 (Corning, Corning, NY)에서 5:1 내지 10:1의 이펙터 대 표적 (종양) 세포 비율로 CFSE-표지된 종양 세포와 함께 (예: 도 2a-2i) 또는 없이 (예: 도 3a-11c) 2 x 105 APC를 인큐베이션하였다. 세포 및 무-세포 상등액을 18시간 후에 유세포 분석 또는 ELISA를 통해 분석하였다.
본 분석의 결과를 도면에 도시하였고, 예를 들어 HCC1954 세포주 상에 면역접합체 A에 대해 도 2a (CD40) 및 도 2b (CD86), JIMT-1 세포주 상에 면역접합체 A에 대해 도 2d (CD40) 및 도 2e (CD86), 및 COLO 205 세포주 상에 면역접합체 A에 대해 도 2g (CD40) 및 도 2h (CD86).
CD40 및 CD86과 같은 T 세포 자극 분자의 발현은 효과적인 T 세포 활성화를 위해 필요하지만, APC는 또한 염증유발 사이토카인의 분비를 통해 후속 면역 반응의 특성에 영향을 준다. 그러므로 자극 후에 인간 APC에서 사이토카인 분비를 유도하는 면역접합체의 능력이 조사되었다. 데이터에 따르면 상기 면역접합체-자극된 세포가 높은 수준의 TNFα를 분비하였음을 나타내었다. HCC1954 세포주와 공동 배양된 면역접합체 A에 대해 도 2c를, JIMT-1 세포주와 공동 배양된 면역접합체 A에 대해 도 2f를, COLO 205 세포주와 공동 배양된 면역접합체 A에 대해 도 2i를 참조한다.
면역접합체들 B-J에 대해 유사한 데이터가 도 3a-11c에 제공된다 (공동-배양 없음).
실시예 64. 면역접합체 K와 면역접합체 L의 비교
본 실시예는 적어도 1개의 탄소 원자를 갖는 소수성 치환기를 추가로 포함하는 아쥬반트 모이어티를 포함하는 면역접합체에 의해 입증된 면역접합체 활성의 증가를 보여준다.
Figure pct00446
상기 DAR을 결정하기 위해, 면역접합체들 K 및 L을 산성화하고 (수 중에 5배 이상 희석, 0.2% 포름산), Waters Aquity H-클래스 UPLC에 연결된 Waters BEH-C4 역상 컬럼 (제품 번호 186004495)에 주입하고, 1-90% 아세토니트릴, 0.1% 포름산의 선형 구배를 사용하여 분리하였다. C4 컬럼 용출액은 Waters Xevo G2-XS TOF (Time of Flight) 질량 분광분석계에서 전기분무 이온화를 통해 지속적으로 분석된다. 접합체에 대한 DAR을 결정하기 위해, 먼저 C4 컬럼으로부터 항체 접합체에 대한 용출 창 (elution window)에 해당하는 총 이온 전류 크로마토그램 (TIC)의 시간 창 (time window)을 확인해야 한다. 일단 선택되면, 주어진 시간 창 내에서 질량/전하 (m/z) 종의 여러 공동-용출 패밀리 (각 단백질 종에 대해 하나의 패밀리)를 나타내는 관찰된 이온을, Water의 MassLynx v4.1 소프트웨어를 사용하여, 존재하는 각 DAR 종에 대해 정확한 질량으로 디컨볼루트한다 (deconvolute). 그 다음에 각 DAR 종에 대한 피크의 세기를 하기 식 1을 사용하여 조합한다:
Figure pct00447
상기 iDAR은 주어진 DAR 종에 대해 관찰된 피크 세기 (관찰된 이온)와 동일하고, 관찰된 종의 총 수는 5개 (4개의 DAR 종 + 표지되지 않은 항체)이다. 상기 식은 존재하는 종의 수에 따라 조정될 수 있다. 이러한 식은 LC-MS 분석 전에 탈글리코실화된 항체 접합체에 대한 것이다. 글리코실화된 항체의 분석을 위해, 각 DAR 종은 디컨볼루트된 시간 창내에 다수의 피크들로 표시될 수 있다. 이 경우에, iDARn = [n x (iDARngly1 + iDARngly2 + iDARngly3)]이고, 여기서 n은 DAR 종이고, 관찰된 글리코실화 변이체의 수는 예를 들어 3개이다.
항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 K 및 항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 L은 본원에 기재된 아쥬반트 활성 및 면역접합체 활성 절차를 사용하여 분석된다.
면역접합체 K는 골수성 활성화에 의해 입증된 바와 같이, 면역접합체 L에 비해 인 비트로 활성을 증가시켰다. 따라서, 적어도 1개의 탄소 원자를 갖는 소수성 치환기를 추가로 포함하는 아쥬반트 모이어티는 면역접합체의 활성을 향상시켰다.
실시예 65. 면역접합체 K와 면역접합체 M의 비교
본 실시예는 2-아미노 모이어티에 대해 상이한 위치에 연결된 2개의 면역접합체에 의해 나타나는 링커의 부착 지점의 위치의 중요성을 보여준다.
Figure pct00448
면역접합체들 K 및 M의 DAR은 실시예 64에 제공된 절차에 따라 결정되었다.
항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 K 및 항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 M은 본원에 기재된 아쥬반트 활성 및 면역접합체 활성 절차를 사용하여 분석되었다.
면역접합체 K는 골수성 활성화에 의해 입증된 바와 같이, 면역접합체 M에 비해 인 비트로 활성을 증가시켰다. 따라서, 2-아미노 모이어티로부터 링커의 부착 지점을 추가로 갖는 아쥬반트 모이어티는 면역접합체의 활성을 향상시킬 수 있고, 이에 의해 상기 링커의 부착 지점의 중요성을 입증할 수 있다.
실시예 66. 면역접합체 K와 면역접합체 N의 비교
본 실시예는 골수성 활성화에 의해 입증된 바와 같이, 적어도 1개의 탄소 원자를 갖는 소수성 치환기 및 링커의 바람직한 부착 지점을 추가로 포함하는 아쥬반트 모이어티를 포함하는 면역접합체의 시너지 효과를 보여준다.
Figure pct00449
면역접합체들 K 및 N의 DAR은 실시예 64에 제공된 절차에 따라 결정되었다.
항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 K 및 항체로서 트라스투주맙을 사용하고, DAR이 2인 면역접합체 N은 본원에 기재된 아쥬반트 활성 및 면역접합체 활성 절차를 사용하여 분석되었다.
면역접합체 K는 골수성 활성화에 의해 입증된 바와 같이, 면역접합체 N에 비해 인 비트로 활성을 증가시켰다. 면역접합체 N에 비해 면역접합체 K의 활성 증가는 면역접합체 L 및 M에 비해 달성된 이익의 합계보다 크다 (실시예 64 및 65 참조). 따라서, 본 실시예는 골수성 활성화에 의해 입증된 바와 같이, 적어도 1개의 탄소 원자를 갖는 소수성 치환기 및 링커의 바람직한 부착 지점을 추가로 포함하는 아쥬반트 모이어티를 포함하는 면역접합체의 시너지 효과를 입증하였다.
실시예 67. 아쥬반트 1과 아쥬반트 2의 비교
본 실시예는 인간 TLR7 또는 인간 TLR8을 발현하는 HEK293 리포터 세포에 의해 입증된 바와 같이, 아쥬반트의 활성을 유지하기 위해 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소의 중요성을 보여준다.
Figure pct00450
NF-KB 활성을 측정하는 HEK293 리포터 분석을 사용하여 아쥬반트 1 및 2의 활성을 측정하였다. 분석 내용은 하기와 같다.
인간 TLR7 또는 인간 TLR8을 발현하는 HEK293 리포터 세포를 Invivogen (San Diego, CA)으로부터 구입하고, 세포 증식 및 실험에 대해 공급업체 프로토콜을 따랐다. 10% 우태아 혈청 (FBS), 제오신 및 블라스티시딘이 보충된 Dulbecco 변형된 Eagle 배지 (Dulbecco's Modified Eagle's Medium: DMEM)에서 5% CO2에서 80-85% 융합 (confluence)으로 세포를 성장시켰다. 그 다음에 도 12에 명시된 양으로 HEK 검출 배지 및 아쥬반트 1 또는 아쥬반트 2를 함유하는 기질과 함께 4x104 세포/웰로 96-웰 평면 플레이트에 세포를 시딩하였다. 620-655 nm에서 플레이트 판독기를 사용하여 활성을 측정하였다. 결과는 도 12에 제시되었다.
도 12는 아쥬반트 1에 비해 아쥬반트 2가 TLR7 및 TLR8 리포터 세포 모두에서 완전히 불활성임을 보여주었다. 이러한 결과는 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소가 TLR7 및/또는 TLR8에 대한 아쥬반트의 활성을 유지하는데 필요하다는 것을 보여주었다.
실시예 68. 면역접합체 O와 면역접합체 P의 비교
본 실시예는 면역접합체 활성 및 수지상 세포 분화에 의해 입증된 바와 같이, 면역접합체의 활성을 유지하기 위해 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소의 중요성을 보여준다.
Figure pct00451
면역접합체들 O 및 P의 DAR은 실시예 64에 제공된 절차에 따라 결정되었다.
항체로서 리툭시맙을 사용하고 DAR이 1.9인 면역접합체 O 및 항체로서 리툭시맙을 사용하고 DAR이 2.2인 면역접합체 P는 본원에 기재된 아쥬반트 활성 및 면역접합체 활성 절차를 사용하여 분석하고, 그 결과를 도 13 및 14에 제시하였다.
도 13은 공동자극 분자 CD40 및 CD86의 상향조절에 의해 측정된 바와 같이, 면역접합체 P에서 TLR 활성의 제거 (실시예 67 참조)가 활성화에서 완전한 정지를 초래하였음을 보여준다. 도 13은 또한 공동자극 분자 CD40 및 CD86의 면역접합체 P에 의한 상향조절이 항체 대조군과 유사하고, 면역접합체 O에 비해 유의하게 감소되었음을 보여준다. 이러한 결과는 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소가 공동자극 분자 CD40 및 CD86의 상향조절에 의해 측정된 바와 같이 면역접합체 활성을 유지하는데 필요하다는 것을 입증하였다.
도 14는 CD14, CD16 및 CD123 발현에 의해 측정된 바와 같이, 면역접합체 P에서 TLR 활성의 제거 (실시예 67 참조)가 수지상 세포 분화에서 완전한 정지를 초래하였음을 보여준다. 면역접합체 O로 처리했을 때, 단핵구에서 발견되는 두 마커인 CD14 및 CD16은 모두 하향조절되었다. 대조적으로, 염증성 골수 유래 수지상 세포에서 발현되는 마커인 CD123은 면역접합체 O로 처리한 후에 상향조절되었다. 그러나 면역접합체 P로 처리했을 때, 그 결과는 CD14, CD16 및 CD123 발현에 의해 측정된 바와 같이, 수지상 세포 분화를 생성하지 않는 항체 대조군과 비슷하였다. 이러한 결과는 CD14, CD16 및 CD123 발현에 의해 측정된 바와 같이 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소가 수지상 세포 분화를 유도하는데 필요하다는 것을 입증하였다.
본원에 인용된 간행물, 특허 출원 및 특허를 포함한 모든 참고문헌은 각 참고문헌이 개별적 및 구체적으로 참고로 통합되는 것으로 표시되고, 본원에 그 전문이 제시되는 것과 동일한 정도로 본원에 참고로 통합된다.
본 발명을 설명하는 문맥에서 (특히 하기 청구항의 문맥에서) 용어 "a" 및 "an" 및 "the" 및 "적어도 하나" 및 유사한 지시어의 사용은 본원에서 달리 명시되지 않거나 또는 문맥상 명백하게 모순되지 않는 한 단수 및 복수 모두를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 하나 이상의 항목 목록 다음에 용어 "적어도 하나" (예를 들어, "A 및 B 중 적어도 하나")의 사용은 본원에 달리 명시되지 않거나 또는 문맥상 명확하게 모순되지 않는 한, 열거된 항목들로부터 선택된 하나의 항목 (A 또는 B) 또는 열거된 항목들의 두개 이상의 임의의 조합 (A 및 B)을 의미하는 것으로 해석되어야 한다. 용어 "포함하는", "갖는", "포괄하는" 및 "함유하는"은 달리 명시되지 않는 한 개방형 용어 (즉, "포함하지만, 이에 한정되지 않음"을 의미)로 해석되어야 한다. 본원에서 수치의 범위를 인용하는 것은, 본원에서 달리 지시하지 않는 한, 범위 내에 속하는 각 개별 값을 개별적으로 언급하는 약식 방법으로서 역할을 하는 것으로 의도되고, 각 개별 값은 마치 본원에서 개별적으로 인용된 것처럼 명세서에 통합된다. 본원에 기재된 모든 방법은 본원에서 달리 지시되지 않거나 또는 문맥상 명백하게 모순되지 않는 한 임의의 적절한 순서로 수행될 수 있다. 본원에 제공된 임의의 예 및 모든 예, 또는 예시되는 언어 (예: "예컨대")의 사용은 단지 본 발명을 더 잘 설명하기 위한 것이며, 달리 청구되지 않는 한 본 발명의 범위를 제한하지 않는다. 본 명세서의 어떠한 언어도 본 발명의 실시에 필수적인 것으로 주장되지 않은 요소를 나타내는 것으로 해석되서는 안된다.
본 발명을 수행하기 위해 본 발명자들에게 알려진 최선의 방식을 포함하여 본 발명의 바람직한 구체예가 본원에 기재되어 있다. 이러한 바람직한 구체예의 변형은 전술한 설명을 읽었을 때 당업자에게 명백할 수 있다. 본 발명자들은 당업자가 이러한 변형을 적절하게 사용할 것을 기대하고, 본 발명자들은 본 발명이 본원에 구체적으로 기재된 것과 다르게 실시될 수 있음을 의도한다. 따라서, 본 발명은 준거법에 의해 허용되는 바와 같이 본원에 첨부된 청구범위에 인용된 주제의 모든 수정 및 등가물을 포함한다. 더욱이, 이의 모든 가능한 변형에서 전술한 요소들의 임의의 조합은 본원에서 달리 지시되지 않거나 또는 문맥상 명백하게 모순되지 않는 한 본 발명에 통합된다.
SEQUENCE LISTING <110> BOLT BIOTHERAPEUTICS, INC. THE BOARD OF TRUSTEES OF THE LELAND STANFORD JUNIOR UNIVERSITY <120> IMMUNOCONJUGATES <130> 743565 <150> US 62/724,259 <151> 2018-08-29 <150> US 62/673,015 <151> 2018-05-17 <160> 168 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 290 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 1 Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu 1 5 10 15 Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr 20 25 30 Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu 35 40 45 Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile 50 55 60 Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser 65 70 75 80 Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn 85 90 95 Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr 100 105 110 Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val 115 120 125 Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val 130 135 140 Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu 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Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly 1 5 10 <210> 112 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 112 Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu 1 5 10 15 Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 113 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 113 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 114 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 115 <211> 121 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 115 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 116 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 116 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His 1 5 10 <210> 117 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 117 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 118 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 118 Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 119 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 119 Asp Ser Tyr Met His 1 5 <210> 120 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 120 Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 121 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 121 Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 122 <211> 23 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 122 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Asn Ile Ala Cys 20 <210> 123 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 123 Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 124 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 124 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 1 5 10 15 Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 125 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 125 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 1 5 10 <210> 126 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 126 Gln Val Lys Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys 20 25 30 <210> 127 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 127 Trp Leu Arg Gln Gly Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile Gly 1 5 10 <210> 128 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 128 Lys Ala Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr Leu Gly 1 5 10 15 Leu Ser Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Glu 20 25 30 <210> 129 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 129 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 130 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 130 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Asn Ile Ala Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 131 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 131 Gln Val Lys Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 20 25 30 Tyr Met His Trp Leu Arg Gln Gly Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Lys Ala Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gly Leu Ser Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 132 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 132 Ser Ala Ser Ser Ser Val Pro Tyr Met His 1 5 10 <210> 133 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 133 Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 134 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 134 Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 135 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 135 Asp Ser Tyr Met His 1 5 <210> 136 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 136 Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 137 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 137 Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 138 <211> 23 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 138 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Ala Cys 20 <210> 139 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 139 Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 140 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 140 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 1 5 10 15 Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 141 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 141 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 1 5 10 <210> 142 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 142 Gln Val Lys Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys 20 25 30 <210> 143 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 143 Trp Leu Arg Gln Gly Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile Gly 1 5 10 <210> 144 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 144 Lys Ala Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr Leu Gly 1 5 10 15 Leu Ser Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Glu 20 25 30 <210> 145 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 145 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 146 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 146 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Ala Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Pro Tyr Met 20 25 30 His Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 147 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 147 Gln Val Lys Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 20 25 30 Tyr Met His Trp Leu Arg Gln Gly Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Lys Ala Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gly Leu Ser Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 148 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 148 Asn Tyr Gly Val His 1 5 <210> 149 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 149 Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr Ser 1 5 10 15 <210> 150 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 150 Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 151 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 151 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn Ile His 1 5 10 <210> 152 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 152 Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser 1 5 <210> 153 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 153 Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr Thr 1 5 <210> 154 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 154 Ser Gly Asp Tyr Tyr Trp Thr 1 5 <210> 155 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 155 His Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 156 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 156 Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile 1 5 <210> 157 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 157 Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 158 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 158 Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr 1 5 <210> 159 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 159 Gln His Phe Asp His Leu Pro Leu Ala 1 5 <210> 160 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 160 Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Asp Tyr 1 5 <210> 161 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 161 Tyr Tyr Ser Gly Ser 1 5 <210> 162 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 162 Val Ser Ile Phe Gly Val Gly Thr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 163 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 163 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 164 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 164 Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5 <210> 165 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 165 His Gln Tyr Gly Ser Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 166 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 166 Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe 65 70 75 80 Lys Met Asn Ser Leu Gln Ser Asn Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 167 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 167 Asp Ile Leu Leu Thr Gln Ser Pro Val Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Ser Phe Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn 20 25 30 Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Asn Gly Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Ser 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 168 <211> 607 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 168 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 450 455 460 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val 465 470 475 480 Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro 485 490 495 Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln 500 505 510 Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro 515 520 525 Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr 530 535 540 Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile 545 550 555 560 Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys 565 570 575 Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn 580 585 590 Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp 595 600 605

Claims (35)

  1. 면역접합체 (immunoconjugate)로서,
    (a) (i) 항원 결합 도메인 및 (ii) Fc 도메인을 포함하는 항체 구조체, 및
    (b) 1-8개의 아쥬반트 코어를 포함하고,
    상기 각 아쥬반트 코어는 상기 항체 구조체에 링커를 경유하여 공유 결합하고, 상기 각 아쥬반트 코어는 펜던트 질소 원자를 갖는 2-아미노 질소 모이어티 및 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점을 포함하며, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5 Å 초과인 것인 면역접합체.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 5.5 Å 초과인 것인 면역접합체.
  3. 청구항 2에 있어서, 상기 펜던트 질소 원자 및 링커의 부착 지점 간 거리는 약 6 Å 초과인 것인 면역접합체.
  4. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00452
    ,
    상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A 및 B가 존재하고, C는 선택적으로 존재하며, A, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  5. 청구항 4에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00453
    ,
    상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 Ar, B 및 C로 표시되고, 상기 Ar 및 B가 존재하며, C는 선택적으로 존재하고, Ar은 2-아미노 질소 모이어티를 함유하는 방향족 고리를 나타내며, 선택적으로 추가의 질소 원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  6. 청구항 4에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00454
    ,
    상기 B가 존재하고, C는 선택적으로 존재하며, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 B 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  7. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00455
    ,
    상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 A, B 및 C로 표시되고, 상기 A, B 및 C가 존재하며, 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  8. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00456
    ,
    상기 아쥬반트 코어는 융합된 고리들 Ar, B 및 C로 표시되고, 상기 Ar 및 C가 존재하며, B는 선택적으로 존재하고, Ar은 2-아미노 질소 모이어티를 함유하는 방향족 고리를 나타내며, 선택적으로 추가의 질소 원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, B 및 C는 독립적으로 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  9. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역접합체는 하기 화학식의 것이고:
    Figure pct00457
    ,
    상기 C가 존재하고, B는 선택적으로 존재하며, B 및 C는 5-, 6-, 7-, 8- 또는 9-원 고리를 나타내고, 선택적으로 이중 결합을 포함하며, 2-아미노 질소 모이어티에 추가하여 선택적으로 헤테로원자를 포함하고, 선택적으로 치환되며, P는 링커의 C 고리로의 부착 지점을 나타내고, n은 1 내지 8의 정수인 것인 면역접합체.
  10. 청구항 1 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
  11. 청구항 10에 있어서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp543인 것인 면역접합체.
  12. 청구항 10 또는 11에 있어서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
  13. 청구항 1 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, 아스파르트산 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 5 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
  14. 청구항 13에 있어서, 상기 아스파르트산 잔기는 Asp555인 것인 면역접합체.
  15. 청구항 13 또는 14에 있어서, 상기 2-아미노 질소 모이어티의 펜던트 질소 원자는 아스파르트산 잔기의 산성 측쇄의 카보닐 산소로부터 약 3 Å 이내에 있는 것인 면역접합체.
  16. 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항에 있어서, 아르기닌 및 세린 잔기를 포함하는 TLR8의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있는 것인 면역접합체.
  17. 청구항 16에 있어서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 세린 잔기의 측쇄의 산소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 아르기닌 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있는 것인 면역접합체.
  18. 청구항 16 또는 17에 있어서, 상기 세린 잔기는 Ser352이고, 상기 아르기닌 잔기는 Arg429인 것인 면역접합체.
  19. 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 리신 및 발린 잔기를 포함하는 TLR7의 결합 도메인에 결합될 때, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 (methine) 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있고, 및/또는 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 10 Å에 있는 것인 면역접합체.
  20. 청구항 19에 있어서, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 발린 잔기의 측쇄의 메틴 탄소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있고, 상기 링커의 아쥬반트 코어로의 부착 지점은 리신 잔기의 측쇄의 질소 원자로부터 약 3 Å 내지 약 7 Å에 있는 것인 면역접합체.
  21. 청구항 19 또는 20에 있어서, 상기 발린 잔기는 Val355이고, 상기 리신 잔기는 Lys432인 것인 면역접합체.
  22. 청구항 1 내지 21 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 구조체는 표적화 결합 도메인을 추가로 포함하는 것인 면역접합체.
  23. 청구항 1 내지 22 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 구조체는 항체인 것인 면역접합체.
  24. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 암세포의 항원에 결합하는 것인 면역접합체.
  25. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 CDH1, CD19, CD20, CD29, CD30, CD40, CD47, EpCAM, SLAMF7, PDGFRa, gp75, MSLN, CA6, CA9, CDH6, CTAG1B/NY-ESO-1, LAMP1, LeY, MAGEA3/A6, P-카드헤린, BCMA, CD38, HLA-DR, ROR1, WT1, GFRA1, FR-알파, L1-CAM, LRRC15, MUC1, MUC16, PSMA, SLC34A2, TROP2, GPC3, CCR8 및 VEGF로 구성된 그룹으로부터 선택된 항원에 결합하는 것인 면역접합체.
  26. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 HER2에 결합하는 것인 면역접합체.
  27. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 EGFR에 결합하는 것인 면역접합체.
  28. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 PD-L1에 결합하는 것인 면역접합체.
  29. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 도메인은 CEA에 결합하는 것인 면역접합체.
  30. 청구항 23 내지 29 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 항체인 것인 면역접합체.
  31. 청구항 23 내지 29 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 올라라투맙, 오비누투주맙, 트라스투주맙, 세툭시맙, 리툭시맙, 페르투주맙, 베바시주맙, 다라투무맙, 에타네르셉트, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 이필리무맙, 파니투무맙, 잘루투무맙, 니모투주맙, 마투주맙 및 엘로투주맙으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것인 면역접합체.
  32. 청구항 1 내지 29 중 어느 한 항에 따른 복수의 면역접합체를 포함하는 조성물.
  33. 청구항 1 내지 31 중 어느 한 항에 따른 면역접합체 또는 청구항 32에 따른 조성물의 치료적으로 유효한 양을 치료를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법.
  34. 청구항 1 내지 31 중 어느 한 항에 따른 면역접합체 또는 청구항 32에 따른 조성물의 치료적으로 유효한 양을 예방을 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 예방하는 방법.
  35. 청구항 33 또는 34에 있어서, 상기 암은 TLR7 및/또는 TLR8에 의해 유도된 항-염증 반응에 감수성이 있는 것인 방법.
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