KR20210009732A - 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 상기 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 효소처리 후 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei) 배양액을 반응시켜 제조한 생물전환 복합추출물은 내피세포의 활성을 높이고 염증을 억제하는 효과가 있으므로, 이를 효과적으로 심혈관계 질환의 예방 또는 치료에 이용할 수 있다.
Description
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 효소처리 후 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei) 배양액을 반응시켜 제조한, 심혈관계 질환의 개선에 효과가 있는 생물전환 복합추출물에 관한 것이다.
심혈관계 질환은 현대사회에서 암과 더불어 2대 사망원인으로 꼽힌다. 만약 대한민국이 2017년에 개정된 미국 심장학회 권고치 기준에 따른다면, 국민의 절반인 약 2,600만명이 고혈압 환자가 된다고 한다.
심장과 혈관과 관련된 질환에는 고혈압, 뇌경색, 뇌출혈, 동맥경화, 심근경색 등이 있으나 이들 질환의 원인은 매우 다양하고 복합적이다. 고혈압의 치료 목표는 고혈압에 의한 혈관, 뇌, 심장, 신장, 간장 등의 합병증을 막아 건강하게 생활할 수 있도록 하는 것으로, 치료제도 중요하지만 평소 기능을 건강하게 유지하고, 이미 기능이 떨어졌다면 속히 기능을 개선시키고, 더 나아가 예방을 할 수 있는 건강기능식품 조성물이 더욱 중요하며 시급한 실정이다.
미국 심장학회에서는 고혈압 기준을 130으로 낮추었고 이는 초기부터 더 적극적으로 혈압을 관리하는 것이 건강에 매우 중요하다는 것을 보여준 것이라고 알렸다.
그러나 일반적으로 고혈압 치료제는 한번 복용하면 평생 복용해야 하는 경우가 대부분이며, 많은 부작용들이 보고되고 있다. 따라서 이러한 질환은 사전에 예방하고 기능을 개선시키는 것이 매우 필요하다.
현재 사용되고 있는 주요 혈압강하 치료제들의 부작용은 다음과 같다. 이뇨제계 고혈압약은 저칼슘혈증, 고뇨산증, 고혈당, 고지혈증, 성기능장해, 고칼륨혈증 등을 유발하고, 교감신경차단계 혈압강하제는 성기능 장해, 갈증, 우울증, 기립성 저혈압, 서맥, 천식, 심부전 등이 나타난다. 혈관 확장계 혈압 강하약은, 빈맥, 협심증, 무력감, 다뇨, 홍조, 두통, 서맥 등이 나타난다. 안지오텐신 II 저해제는 급속한 신기능저하, 뇨독증, 심부전 등의 부작용이 나타나며, 5-HT 수용체 차단제는 두통, 입마름, 오심, 현기증, 발진, 소양감, 미각이상, 발열, 백혈구 감소, 신부전증, 관절통 등을 유발한다. 또한 고지혈증에 사용되는 스타틴계열 약물 역시, 근무력, 뇌기능저하, 코엔자임 q10 생성 저하, 간장애 등 부작용이 보고되고 있다.
또한 현재 시중에 나와 있는 혈압조절 및 콜레스테롤 관련 기능식품들은 주로 코엔자임 q10, 정어리, 사탕수수인 폴리코사놀, 오메가 3 정도이나 모두 근본적인 개선에는 한계가 많다. 그 이유로는 오메가 3는 최근 연구발표에 의하면 효과가 유의하지 않다고 보고되었고, 코엔자임 q10은 항산화제이며, 폴리코사놀은 LDL콜레스테롤을 떨어뜨린다고 하나 콜레스테롤이 심혈관 건강에 해롭다는 보고는 오류가 많다는 사실이 지적되고 있으며, 오히려 콜레스테롤은 인체에 매우 필요한 중요한 물질로 알려지고 있다.
심혈관의 기능이 나빠지는 근본적인 이유는 내피세포의 손상으로부터 시작된다. 내피세포의 손상은 여러 이유에서 유발되나, 주요 원인으로는 산화에 의한 만성염증 및 그로 인한 손상, 고혈당으로 인한 혈액의 탁도 증가, 대식세포의 혈관세포점착, 세포노화 등을 꼽을 수 있다.
혈관의 95%는 모세혈관이며, 혈관세포의 손상 및 노화로 인해 혈관의 탄력성이 떨어지고, 혈전 및 프라그가 혈관에 쌓이게 되면 점차 혈류의 흐름이 지체되기 시작하며, 심장은 혈류의 흐름을 더욱 강하게 하기 위해 혈압을 높이게 된다. 혈관의 압력이 높아짐에 따라 혈관의 손상은 다시 가속화되는 악순환에 빠진다.
그러므로 혈관의 세포가 건강해지고, 혈액의 탁도 개선으로 혈행이 개선된다면 혈압이 자연스럽게 정상적으로 조절되고, 각종 심혈관 건강의 개선이 근본적으로 이루어질 수 있을 것이다.
이러한 목적을 달성하기 위해 본 발명진은 식품공전에 등재된 식품 원료 중 전통적으로 심혈관 관련 기능 개선에 탁월한 약재인 인삼(홍삼)과 단삼을 선별하였다.
홍삼은 이미 자체로 혈행 개선과 항산화 효과로 기능성을 인정받았으며, 단삼은 중국 전통 약재서적인 본초강목, 신농본초경에서 어혈제거(탁한피 제거) 및 혈압강하, 심혈관 기능에 가장 좋은 상약으로 인정받고 있다. 단삼의 주요 생리활성 물질인 살비논산 b는 혈전분해 및 항산화 효과가 크며, 혈관내피세포에 여러 염증 물질들이 달라붙는 것을 예방함으로써 혈관세포를 보호하는 것으로 알려져 있다.
홍삼(인삼)의 주요 생리활성 물질인 사포닌은 약리활성이 매우 우수하여 다른 식물에서 발견되는 사포닌과는 별도로 진세노사이드라고 부른다. 진세노사이드는 담마란(dammarane) 골격을 갖는 배당체에 일종의 화학구조상 R1, R2, R3 위치에 결합된 당의 종류 및 개수에 따라 디올계(Protopanaxadiol; PPD)와 트리올계(Protopanaxatriol; PPT)의 진세노사이드 등으로 분류된다.
그러나 진세노사이드가 체내에 흡수되기 위해서는 디올계 진세노사이드는 20-O-β-D-[0005] 글루코피라노실-20(S)-프로토파낙사디올(20-O-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxa-diol, FGM 1, 이하, ‘화합물 K(Compound K)’라 함)로, 그리고 트리올계 진세노사이드는 20(S)-프로토파낙사트리올(20(S)-protopanaxatriol, FGM 4)로 분해된 후 체내에 흡수되면서 효능을 발휘하는데 열이나 산, 압력, 소화효소 등에 의해서는 소량만 흡수될 뿐이다. 최근 연구결과에 따르면 인삼 사포닌이 이러한 최종산물로 전환할 때 장내미생물이 필요하다고 밝혀졌다.
경구 복용한 사포닌이 컴파운드 K로 전환되어 흡수되려면 장내 미생물에 의해 분해되어야 하는데 일반인들 중 인분을 조사해 추정한 연구에서 정상인 중 30%는 사포닌을 대사할 수 있는 균이 전혀 없고, 비록 균이 있는 나머지 70% 중에도 대사 능력에 차이가 있어 디올계와 트리올계 사포닌을 모두 정상적으로 대사 할 수 있는 사람은 소수에 지나지 않았다.
경희대 약학대학의 연구발표에 따르면, 건강한 성인 남자 24명을 대상으로 한 경구섭취실험에서 진세노사이드 1 mg 당 0.2 ng/mL의 컴파운드 K 최대 혈중 농도를 보이고, 경구섭취 컴파운드 K 1 mg당 15 ng/mL의 최대 혈중 농도를 보여 약 75배의 컴파운드 K 혈중 농도 차이를 나타내고 있다. 이로부터 일반 진세노사이드의 컴파운드 K 전환율이 장 속에서 매우 낮음을 알 수 있다. 또한 Rb1 등 주요 진세노사이드 자체의 체내 흡수율은 1% 미만으로 알려져 있다.
이런 면에서 이미 외부에서 장내 미생물로 발효를 완료하여, 개인의 대사 기능에 관계없이 인삼의 유효성분을 흡수할 수 있는 형태로 전환시킴으로써, 누구나 효과를 볼 수 있는 컴파운드 K 강화 인삼 또는 홍삼 농축액을 개발하는 것은 매우 바람직하다고 볼 수 있다.
인삼의 사포닌 성분 중 상기 진세노사이드 컴파운드 K의 수율을 개선하기 위한 선행기술로서 한국등록특허 제10-1409761호(2014.06.13)에서는 3종의 효소를 혼합 사용하여 컴파운드 K로 전환시키는 방법을 개시한 바 있으나, 전환과정 중 Rd와 F2에서 전환이 정지되어 컴파운드 K의 전환율이 너무 낮았다. 한국공개특허 제10-2016-0076851호(2016.07.01)에서는 1종의 효소와 사이톨레이즈(Cytolase) PCL5를 혼합하여 컴파운드 K로 전환시키는 방법을 게시한 바 있으나 상기와 같은 전환과정에 관련한 이유로 컴파운드 K의 전환율이 낮았다.
단삼은 꿀풀과(Lamiaceae) 단삼속(genus Salvia)에 속하는 식물이며, 현재까지 110여 개 이상의 성분이 분리되어 각종 약리활성에 관한 연구가 진행 중이다. 단삼의 주요 성분 중 살비논산 B(salvianolic acid B)는 혈압 강하, 알츠하이머 예방, 항산화 효과, 간세포 보호, 항암효과, 만성염증완화 등 다양한 약리활성을 지닌 물질로 평가되었다. 독일 아벤티스(aventis)사의 연구에 따르면 살비논산 B를 포함한 단삼이 고혈압 약제보다 우수한 효과를 나타냈다고 보고한 바도 있다. 또한 싱가폴 국립대학 가정의학과에서는 단삼의 간암 억제효과 및 간암세포 세포사멸(Apoptosis) 유도를 실험적으로 증명하였으며, 그 외 다수의 연구진들의 연구들에 의하면 살비논산 A(salvianolic acid A)의 유방암 억제효과, 탄쉬논의 항암효과를 갖는다.
기존의 살비논산 B는 열수 추출, 혹은 에탄올 추출로 얻었으나, 본 발명에서는 발효공정을 추가하여 살비논산 B의 수율 증가를 획득하였고, 또한 살비논산 B의 활성도 역시 증가하는 결과를 획득하였다.
단삼의 생물전환기술을 이용한 가공형태는 선행된 전례가 없으며, 특히 홍삼과 혼합하여 복합 생물전환 반응을 수행한 공정은 새로운 제조방법이다. 또한 특정 비율의 홍삼과 단삼의 복합 반응은 홍삼 반응시 생성되는 컴파운드 K의 용해도를 개선시켜 체내 흡수율 증가가 기대되고 있다.
기존 선행 특허 10-0341368은 단삼과 삼칠을 물과 에탄올로 추출하고 그 추출물에 용뇌를 섞어 만든 심혈관 질환 치료제가 있으며, 또한 다른 특허 10-0327894 (2013년에 소멸) 역시 단삼과 삼칠의 혼합 추출물을 포함하는 고혈압 치료 및 콜레스테롤 저하 조성물이 있으나 단순히 물과 에탄올로 추출한 조성물이다.
더욱이 단삼 및 삼칠근 추출물의 심혈관 관련 기능 개선 작용과 관련하여서는 이미 위 선행특허 출원일 이전에 반포된 간행물인 Am. J. Chin. Med., vol. 14. pp. 145-152 (1986)에 삼칠근과 단삼의 추출물이 알비노 렛트와 토끼에서 혈압저하작용과 이들 추출물이 심혈관 시스템에 유효한 효과가 있음이 게재되었고, Zhongguo Zhong Xi Yi, Jie He Za Zhi, vol. 17. no. 5, pp. 292-294 (1997. 5)에는 단삼, 삼칠근을 포함하는 조성물이 혈압 강하작용이 공지된 바 있다.
또한 칭화대 연구발표에 따르면 인삼과 단삼의 혼합 추출물이 각각의 단일 추출물에 비해 동맥경화 개선에 시너지가 있었다. 그러나 고혈압에 대한 정보는 전혀 나타나 있지 않았다.
이에 본 발명자들은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 및 홍삼(red ginseng) 추출물에 효소처리 후 미생물 배양액을 반응시켜 제조한 생물전환 복합추출물에서 컴파운드 K 및 살비논산 B의 함량이 높게 나타나고, 내피세포의 활성 촉진 및 염증 억제 효과 또한 월등히 우수한 것을 확인하였다.
이에, 본 발명의 목적은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 다음 단계를 포함하는, 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계.
본 발명의 또 다른 목적은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 다음 단계를 포함하는, 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계.
본 발명의 또 다른 목적은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물의 심혈관계 질환 예방 또는 치료 용도에 관한 것이다.
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명자들은 본 발명에 따른 조성물에서 컴파운드 K 및 살비논산 B의 함량이 높게 나타나고, 내피세포의 활성 촉진 및 염증 억제 효과 또한 월등히 우수함을 확인하였다.
이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 양태는 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물이다.
단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물은 각각 생물전환 공정을 실시하여 추출물을 제조한 후 혼합할 수 있고, 단삼 및 홍삼 추출물을 생물전환 공정을 실시하여 제조한 것을 이용할 수도 있다.
본 명세서상의 용어 "생물전환(biotransformation 또는 bioconversion)"이란, 생물의 생리적 기능을 이용해 첨가된 물질을 화학적으로 변형된 형태로 전환시키는 과정을 의미하고, 구체적으로, 생체의 기능 또는 생체가 가지고 있는 생촉매의 기능을 이용하여 새로운 신생물 제품을 생산하거나, 기존 화학합성공정에 의해 합성 및 생산되고 있는 기존 화학제품을 신생물 제품으로 대체하고자 하는 기술을 의미한다.
상기 심혈관계 질환은 고혈압, 혈액순환장애 및 동맥경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 조성물은 단삼 및 홍삼 복합효소반응물에 미생물 배양액을 첨가하여 제조된 것일 수 있고, 상기 미생물 배양액은 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei), 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 또는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것일 수 있으며, 예를 들어, 트리코데르마 레에세이 균주의 배양액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 "효소반응물"은 본 발명에서 제시하는 효소처리 공정을 수행한 결과물을 의미한다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 제조되는 것일 수 있고, 펙티네이즈(Pectinase) 및 아라비네이즈(Arabinase)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소, 또는 이를 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으며, 예를 들어, 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 이를 동시 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서 상의 용어 "양조 효소"는 발효 공정에 의해 생산되는 주류의 생산 공정 상에 사용되는 효소를 의미하며, 보다 더 구체적으로는 저온 발효 공정 상에 사용될 수 있는 발효 효소들을 의미한다. 시판되는 양조 효소로서 Gluc Gin, Ginjou-koji, tome-koji 등을 구체적인 예로 들 수 있다.
본 발명의 양조 효소는 앞선 실시 단계들을 통해 얻어진 결과물 100 중량부를 기준으로 1 내지 10 중량부, 더 구체적으로는 2 내지 8 중량부, 보다 더 구체적으로는 3 내지 7 중량부, 보다 더 구체적으로는 4 내지 6 중량부를 추가하여 상온보다 비교적 높은 온도에서 반응시킬 수 있다. 구체적으로 예를 들면, 25℃ 내지 55℃, 30℃ 내지 55℃, 35℃ 내지 55℃, 40℃ 내지 55℃, 45℃ 내지 55, 또는 48℃ 내지 52℃의 온도에서 반응시킬 수 있다. 반응 시간은 30분 내지 수시간 정도가 적당하며, 구체적으로 예를 들면, 30분 내지 6시간, 더 구체적으로 1시간 내지 5시간, 보다 더 구체적으로 2시간 내지 4시간 동안 반응시킬 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 아스페르길루스 니제르(Aspergillus niger var) 균주를 첨가하여 제조될 수 있다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물의 중량비를 1:9 내지 9:1, 1:9 내지 7:3, 1:9 내지 6:4, 1:9 내지 5:5, 3:7 내지 9:1, 3:7 내지 7:3 또는 3:7 내지 6:4로 포함하는 것일 수 있고, 예를 들어, 3:7 내지 5:5로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 각각 효소처리 공정을 실시하여 수득한 효소반응물을 혼합하여 제조할 수 있고, 단삼 추출물 및 홍삼 추출물을 혼합한 복합추출물에 효소처리 공정을 실시하여 제조할 수도 있다.
상기 단삼 추출물은 30 내지 80%(w/w), 30 내지 75%(w/w), 30 내지 70%(w/w), 30 내지 65%(w/w), 30 내지 60%(w/w), 30 내지 55%(w/w), 40 내지 80%(w/w), 40 내지 75%(w/w), 40 내지 70%(w/w), 40 내지 65%(w/w) 또는 40 내지 60%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있고, 예를 들어, 40 내지 55%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 홍삼 추출물은 30 내지 80%(w/w), 30 내지 75%(w/w), 30 내지 70%(w/w), 30 내지 65%(w/w), 30 내지 60%(w/w), 30 내지 55%(w/w), 40 내지 80%(w/w), 40 내지 75%(w/w), 40 내지 70%(w/w), 40 내지 65%(w/w) 또는 40 내지 60%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있고, 예를 들어, 40 내지 55%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 조성물은 살비논산 B(salvianolic acid B) 및 컴파운드(compound) K을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 양태는 다음 단계를 포함하는, 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 제조방법이다:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계.
상기 방법은 효소처리 단계 이후에 양조 효소를 불활성화 시키는 불활성화 단계를 추가적으로 포함할 수 있다. 상술한 바와 같은 불활성화 단계의 실시에 의해 컴파운드 K가 프로토파낙사디올(protopanaxadiol; PPD)로 전환되는 것을 방지할 수 있다.
상기 양조 효소는 펙티네이즈 및 아라비네이즈로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소일 수 있고, 양조 효소 대신 펙티네이즈 및 아라비네이즈로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소를 발현하는 균주를 첨가하여 효소처리를 수행할 수 있다.
상기 심혈관계 질환은 고혈압, 혈액순환장애 및 동맥경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
단삼 추출물을 제조함에 있어서, 단삼의 뿌리를 취하고 이를 상온에서 정제수로 깨끗이 세척 및 건조 후 파쇄하되, 이 때 40 내지 50 메쉬(mesh) 사이의 크기가 되도록 하는 것이 바람직하다. 입자의 크기가 작을수록 추출은 용이하나, 여과 과정이 어려워지기 때문이다.
용매는 파쇄한 분말 무게의 10 내지 20배의 50% 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다. 또는 정제수 추출단계와 에탄올 추출단계를 순차적으로 수행할 수 있으나 최종 수율에 큰 영향을 미치지는 않는다. 또한 추출 시 온도는 55 내지 60℃ 사이에서 수행하는 것이 바람직하다. 단삼의 약리성분들 중에 열에 약한 성분들이 존재하기 때문이다. 추출물은 60℃를 넘기지 않는 조건하에서 30 brix까지 감압 농축시켜 이용할 수 있다.
홍삼 추출물을 제조함에 있어서, 홍삼, 홍미삼 및 백삼을 사용할 수 있으며 4년근 이상의 미삼을 사용하는 것이 바람직하다. 홍삼 추출 시에는 홍삼 무게의 10 내지 20배의 에탄올을 사용한다고 알려져 있으므로 진세노사이드의 추출 수율을 최대로 하기 위해서는 홍삼 무게의 20배의 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다. 에탄올 추출은 3차에 걸쳐 수행할 수도 있으나 2차에 걸쳐 수행하는 것이 바람직하다.
상기 효소처리 단계는 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 펙티네이즈 및 아라비네이즈를 동시 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 아스페르길루스 니제르(Aspergillus niger var) 균주를 첨가하여 제조될 수 있다.
효소처리 단계 수행을 위하여 에탄올 추출 시의 중량과 같아지도록 정제수를 첨가할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 효소의 투여량은 단삼 또는 홍삼 분말 중량의 1 내지 2%일 수 있으며 3%를 넘지 않도록 하는 것이 바람직하다.
상기 효소처리 단계는 20 내지 50℃, 20 내지 45℃, 20 내지 42℃, 28 내지 50℃, 28 내지 45℃, 28 내지 42℃, 32 내지 50℃, 32 내지 45℃, 32 내지 42℃, 40 내지 50℃, 또는 40 내지 45℃, 예를 들어, 40 내지 42℃에서 수행되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
살비논산 B는 열에 취약하기 때문에 60℃ 이상의 조건에서 효소처리 단계를 수행할 경우 그 양이 급격히 감소할 수 있고, 따라서 60℃ 이하의 저온 조건에서 효소처리 단계를 수행 시 수율을 올릴 수 있다. 단, 40℃ 미만의 온도 조건에서는 반응 시간이 오래 걸릴 수 있다.
상기 효소처리 단계는 16 내지 36시간, 16 내지 32시간, 16 내지 30시간, 16 내지 25시간, 18 내지 36시간, 18 내지 32시간, 18 내지 30시간, 18 내지 25시간, 20 내지 36시간, 20 내지 32시간 또는 20 내지 30시간, 예를 들어, 20 내지 25시간 동안 수행되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 혼합하는 데 있어서, 충분히 교반하여 완전히 섞이도록 하는 것이 바람직하다. 단삼 추출물 및 홍삼 추출물의 중량비를 1:9 내지 9:1, 1:9 내지 7:3, 1:9 내지 6:4, 1:9 내지 5:5, 3:7 내지 9:1, 3:7 내지 7:3 또는 3:7 내지 6:4로 포함하는 것일 수 있고, 예를 들어, 3:7 내지 5:5로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 생물전환 단계에 있어서, 미생물 배양액은 트리코데르마 레에세이, 아스퍼질러스 오리제, 비피도박테리움 롱검 또는 락토바실러스 람노서스로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것일 수 있으며, 예를 들어, 트리코데르마 레에세이 균주의 배양액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물의 100 중량부에 대하여 미생물 배양액은 1 내지 5 중량부를 첨가하고, 40 내지 45℃에서 50 내지 80시간 동안 반응시키는 것일 수 있으며, 이후 70 내지 100℃에서 40 내지 80분 동안 가열하여 생물전환공정을 종료시키는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 양태는 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품 조성물이다.
상기 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물은 각각 생물전환 공정을 실시하여 추출물을 제조한 후 혼합할 수 있고, 단삼 및 홍삼 추출물을 생물전환 공정을 실시하여 제조한 것을 이용할 수도 있다.
상기 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물은 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 첨가하여 제조된 것일 수 있다.
상기 심혈관계 질환은 고혈압, 혈액순환장애 및 동맥경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 제조되는 것일 수 있고, 펙티네이즈 및 아라비네이즈로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소, 또는 이를 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으며, 예를 들어, 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 이를 동시 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 아스페르길루스 니제르 균주를 첨가하여 제조될 수 있다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물의 중량비를 1:9 내지 9:1, 1:9 내지 7:3, 1:9 내지 6:4, 1:9 내지 5:5, 3:7 내지 9:1, 3:7 내지 7:3 또는 3:7 내지 6:4로 포함하는 것일 수 있고, 예를 들어, 3:7 내지 5:5로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 각각 효소처리 공정을 실시하여 수득한 효소반응물을 혼합하여 제조할 수 있고, 단삼 추출물 및 홍삼 추출물을 혼합한 복합추출물에 효소처리 공정을 실시하여 제조할 수도 있다.
상기 단삼 추출물은 30 내지 80%(w/w), 30 내지 75%(w/w), 30 내지 70%(w/w), 30 내지 65%(w/w), 30 내지 60%(w/w), 30 내지 55%(w/w), 40 내지 80%(w/w), 40 내지 75%(w/w), 40 내지 70%(w/w), 40 내지 65%(w/w) 또는 40 내지 60%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있고, 예를 들어, 40 내지 55%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 홍삼 추출물은 30 내지 80%(w/w), 30 내지 75%(w/w), 30 내지 70%(w/w), 30 내지 65%(w/w), 30 내지 60%(w/w), 30 내지 55%(w/w), 40 내지 80%(w/w), 40 내지 75%(w/w), 40 내지 70%(w/w), 40 내지 65%(w/w) 또는 40 내지 60%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있고, 예를 들어, 40 내지 55%(w/w)의 에탄올을 용매로 하여 수득되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 미생물 배양액은 트리코데르마 레에세이, 아스퍼질러스 오리제, 비피도박테리움 롱검 또는 락토바실러스 람노서스로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것일 수 있으며, 예를 들어, 트리코데르마 레에세이 균주의 배양액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 양태는 다음 단계를 포함하는, 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품의 제조방법이다:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계.
상기 방법은 효소처리 단계 이후에 양조 효소를 불활성화 시키는 불활성화 단계를 추가적으로 포함할 수 있다. 상술한 바와 같은 불활성화 단계의 실시에 의해 컴파운드 K가 전환되는 것을 방지할 수 있다.
상기 양조 효소는 펙티네이즈 및 아라비네이즈로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소일 수 있고, 양조 효소 대신 펙티네이즈 및 아라비네이즈로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소를 발현하는 균주를 첨가하여 효소처리를 수행할 수 있다.
상기 심혈관계 질환은 고혈압, 혈액순환장애 및 동맥경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 효소처리 단계는 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 펙티네이즈 및 아라비네이즈를 동시 발현하는 균주를 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 첨가하여 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 펙티네이즈 및 아라비네이즈, 또는 아스페르길루스 니제르(Aspergillus niger var) 균주를 첨가하여 제조될 수 있다.
상기 효소처리 단계는 20 내지 50℃, 20 내지 45℃, 20 내지 42℃, 28 내지 50℃, 28 내지 45℃, 28 내지 42℃, 32 내지 50℃, 32 내지 45℃, 32 내지 42℃, 40 내지 50℃, 또는 40 내지 45℃, 예를 들어, 40 내지 42℃에서 수행되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 효소처리 단계는 16 내지 36시간, 16 내지 32시간, 16 내지 30시간, 16 내지 25시간, 18 내지 36시간, 18 내지 32시간, 18 내지 30시간, 18 내지 25시간, 20 내지 36시간, 20 내지 32시간 또는 20 내지 30시간, 예를 들어, 20 내지 25시간 동안 수행되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단삼 및 홍삼 복합효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물의 중량비를 1:9 내지 9:1, 1:9 내지 7:3, 1:9 내지 6:4, 1:9 내지 5:5, 3:7 내지 9:1, 3:7 내지 7:3 또는 3:7 내지 6:4로 포함하는 것일 수 있고, 예를 들어, 3:7 내지 5:5로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 미생물 배양액은 트리코데르마 속 균주의 배양액인 것일 수 있으며, 예를 들어, 트리코데르마 레에세이, 아스퍼질러스 오리제, 비피도박테리움 롱검 또는 락토바실러스 람노서스로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것일 수 있으며, 예를 들어, 트리코데르마 레에세이 균주의 배양액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 상기 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 효소처리 후 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei) 배양액을 반응시켜 제조한 생물전환 복합추출물은 내피세포의 활성을 높이고 염증을 억제하는 효과가 있으므로, 이를 효과적으로 심혈관계 질환의 예방 또는 치료에 이용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물 제조공정을 나타내는 다이어그램이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 컴파운드(Compound) K 함량분석실험의 고성능 액체 크로마토그래피(high-performance liquid chromatography; HPLC) 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 내피세포 활성에 대한 MTT 분석 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 IL-6 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 IL-8 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 TNF-α 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 DPPH 라디칼(radical) 소거능 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 ABTs 라디칼 소거능 실험 결과를 그래프로 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 LDL 산화(oxidation) 억제 활성 측정 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 10은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 ox-LDL 업테이크(up take) 억제 활성 측정 실험 결과를 나타낸 그림이다.
도 11은 본 발명의 실시예에 따른 단삼 추출물 및 단삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
도 12는 본 발명의 실시예에 따른 홍삼 추출물 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
도 13은 본 발명의 실시예에 따른 단삼 및 홍삼 효소반응물 및 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 컴파운드(Compound) K 함량분석실험의 고성능 액체 크로마토그래피(high-performance liquid chromatography; HPLC) 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 내피세포 활성에 대한 MTT 분석 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 IL-6 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 IL-8 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 TNF-α 발현 억제 효과에 관한 ELISA 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 DPPH 라디칼(radical) 소거능 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 ABTs 라디칼 소거능 실험 결과를 그래프로 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 LDL 산화(oxidation) 억제 활성 측정 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 10은 본 발명의 실시예에 따른 생물전환 복합추출물의 ox-LDL 업테이크(up take) 억제 활성 측정 실험 결과를 나타낸 그림이다.
도 11은 본 발명의 실시예에 따른 단삼 추출물 및 단삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
도 12는 본 발명의 실시예에 따른 홍삼 추출물 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
도 13은 본 발명의 실시예에 따른 단삼 및 홍삼 효소반응물 및 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 혈압조절 효과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량)%, 고체/액체는 (중량/부피)%, 그리고 액체/액체는 (부피/부피)%이다.
실시예 1: 생물전환 복합추출물의 제조
1-1. 단삼 효소반응물의 제조
단삼의 뿌리 50 kg을 구입하여, 정제수로 잔존 토양을 제거하여 깨끗하게 세척 후 40 내지 50℃에서 온풍 건조하여 파쇄하였다. 파쇄된 단삼근 분말 45 kg에 대하여, 50% 에탄올을 900 L 첨가하여 55℃에서 72시간 동안 추출함으로써 에탄올 추출물을 제조하고, 이를 여과 없이 30 brix까지 감압 농축하였다.
이후 정제수를 첨가하여 10배 희석하고, 희석액에 Gluc gin(제조사: Higusi Moyashi, 효소종류: Pectinase and Arabinase, 효소생산 미생물: Aspergillus niger var)을 희석액 중량 대비 2 내지 3% 첨가하였다. 상기 반응은 50 내지 55℃에서 24시간 동안 수행하였다.
반응물은 90℃에서 1시간 동안 가열하여 잔존효소를 불활성화시키고, 반응물을 30 brix까지 감압 농축하였다. 농축액에서 생리활성물질인 살비논산 B(salvianolic acid B)의 함량을 분석한 후 결과에 따라 최종 농도가 2 mg/ml 이 되도록 정제수로 희석하였다.
1-2. 홍삼 효소반응물의 제조
실시예 1-1과 동일하게 수행하되, 단삼 대신 홍삼을 이용하여 제조하였다. 농축액에서는 Rb1의 최종 농도가 2 mg/ml 이 되도록 정제수로 희석하였다.
1-3. 트리코데르마 레에세이 배양액의 제조
트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei) 균주를 30℃ 액체 배지(YM broth: Yeast Extract 3 g, Malt Extract 3 g, Peptone 5 g, Dextrose 10 g을 정제수 1 리터에 녹임)에서 24시간 동안 배양한 후, 원심분리를 통하여 상층액을 취하고, 염석법(salting out)을 1회 수행하고 얻은 반응액을 여과하여(pore size 0.22 ㎛) 배양액을 얻었다.
1-4. 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 제조
실시예 1-1 및 1-2의 효소반응물을 0:10, 3:7, 4:6, 5:5, 6:4, 7:3 및 10:0의 다양한 중량비로 혼합하였다. 이후 단삼 및 홍삼의 효소반응물 100 중량부 대비 실시예 1-3의 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei)의 배양액 2 중량부를 첨가하여 40 내지 45℃에서 72시간 동안 반응시켜 생물전환하였다. 이후 반응물을 90℃에서 1시간 동안 가열함으로써 잔존효소를 불활성화시키고 생물전환공정을 종료시켰다. 상기 제조된 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물을 40 내지 50℃로 냉각한 후 퍼라이트(perlite)를 이용하여 여과하였다. 상기 여과액은 70 brix까지 감압 농축하여 최종 결과물(hyperfree)을 수득하였다.
실시예 2: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 컴파운드 K 함량 확인
본 발명의 실시예에 따라 제조된 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물과, 효소처리 공정 및 생물전환 공정 중 어느 것도 진행하지 않은 복합추출물을 각각 100배 희석하여 아래 표 1과 같은 조건으로 고성능 액체 크로마토그래피(high-performance liquid chromatography, HPLC)를 통하여 컴파운드 K의 함량을 비교하였다.
| 컬럼(Column) | Kromasil 100-5-C18 |
| 분석시간(Analytical time) | 70 min. |
| 이동상(Mobile phase) | Water:Acetonitrile (80:20~50:50) |
| 검출파장(Detection wavelength) | 203 nm |
도 2에서 확인할 수 있듯이, 생물전환공정을 진행하지 않은 경우의 효소반응물에서는 컴파운드 K가 확인되지 않았고, 상기 방법을 통하여 생물전환공정을 수행한 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물 에서는 17.3 mg/g의 컴파운드 K 함량이 확인되었다.
실시예 3: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물에서의 내피세포 활성 효과 확인
미리 24 웰 플레이트(well plate)에 웰 당 20,000 개의 내피세포를(Human Umbilical Vein Endothelial Cells, Single Donor, LONZA) 분주한 다음 CO2 인큐베이터(incubator)에서 EGM-2 배지를 사용하여 24시간 동안 배양한 후, 배양한 내피세포에 실시예 1-4에서 준비한 단삼과 홍삼의 조성을 달리한 시료들을 처리하였다.
이 때 각 단계별 시료들은 각각 50배로 희석하여 각 웰에 투여하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. 각 웰의 배지 성분은 버리고 남은 세포들을 MTT 분석법을 사용하여 대조군(Control)의 세포생존율(cell viability)을 기준으로 하여 다른 실험군들의 세포생존율을 퍼센트로 나타내었다.
도 3에서 확인할 수 있듯이, 해당 농도에서 각각의 시료들은 혈관내피세포에 대하여 독성을 보이지 않았을 뿐만 아니라 오히려 세포의 활성 유도에 도움이 되었다.
실시예 4: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물에서의 내피세포 염증 억제 효과 확인
24 웰 플레이트에 웰 당 20,000 개의 내피세포를 분주한 다음 CO2 인큐베이터에서 24시간 동안 배양한 후, 염증유발 대조군으로서 LPS를 첨가한 다음 24시간 동안 추가로 배양하였고, 상기와 같은 방법으로 제조된 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물 및 생물전환 기술이 적용되지 않은 단삼 및 홍삼 효소반응물을 준비하였다.
두 종류의 실험군은 각각 단삼과 홍삼의 함량비를 달리하여 각 웰에 0.5 ml씩(배지 9.5 ml) 투여하고, 다시 24시간 동안 배양한 후 각 실험군의 세포배양액을 모아, 염증을 유발한 내피세포에서의 대표적인 염증 바이오마커(inflammation bio-maker)인 인터류킨(Interleukin) 6과 인터류킨 8의 분비 농도 변화를 ELISA법으로 측정하여 염증 완화 효과 유무를 분석하였다.
도 4, 5 및 표 2에서 확인할 수 있듯이, 효소처리 공정 및 생물전환 공정 중 어느 것도 진행하지 않은 복합추출물을 처리한 실험군에서, 대조군에 비하여 IL-6 및 IL-8의 발현량이 약 5 내지 20% 감소하였고 특히 단삼과 홍삼 추출물의 비율이 4:6 또는 5:5인 경우에 다른 비율로 적용한 경우에 비해 발현량이 현저하게 감소하였다.
| 단삼:홍삼 | 대조군 | LPS | 0:10 | 3:7 | 4:6 | 5:5 | 6:4 | 7:3 | 10:0 |
| 복합추출물 Il-6 발현량 (%) | 28.5 | 100 | 87.6 | 76.85 | 69.5 | 74.95 | 84.95 | 89.4 | 91.45 |
| 생물전환복합추출물 Il-6 발현량 (%) | 27 | 100 | 73.35 | 54.75 | 35.15 | 49.55 | 73.25 | 77.75 | 79.65 |
| 복합추출물 Il-8 발현량 (%) | 28.5 | 100 | 82.25 | 80.45 | 68.25 | 69.9 | 80.5 | 84.25 | 86.9 |
| 생물전환복합추출물 Il-8 발현량 (%) |
27 | 100 | 66.7 | 59.2 | 40.15 | 48.9 | 54.5 | 59.15 | 58 |
그러나 모든 비율의 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물에서 적게는 20%, 많게는 50% 이상 IL-6 및 IL-8의 발현량이 감소하였으며, 특히 생물전환 공정을 수행한 경우가 그렇지 않은 경우보다 IL-6 및 IL-8의 발현량이 두드러지게 높았다.단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 비율은 4:6 인 경우 가장 높은 IL-6 및 IL-8 발현 억제를 보였으며, 이는 두 추출물에 포함된 약리 활성 성분들이 서로 시너지 효과를 나타냈기 때문인 것으로 보인다.
실시예 5: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 TNF-α 발현 억제 효과 확인
24 웰 플레이트에 웰 당 20,000 개의 RAW264.7 세포를 분주한 다음 CO2 인큐베이터에서 24시간 동안 배양한 후, 염증유발 대조군으로서 LPS를 첨가한 다음 24시간 동안 추가로 배양하였고, 상기와 같은 방법으로 제조된 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물과 효소처리 공정 및 생물전환 공정 중 어느 것도 진행하지 않은 복합추출물을 준비하였다.
두 종류의 실험군에서 각각 단삼과 홍삼의 조성비를 달리 설정하여 각 웰에 0.5 ml씩(배지 9.5 ml)투여하고, 다시 24시간 동안 배양한 후 각 실험군의 세포배양액을 모아, 염증을 유발한 내피세포에서의 대표적인 염증 바이오마커인 TNF-α(tumor necrosis factor-alpha) 분비 농도 변화를 ELISA 법으로 측정하여 염증 완화 효과 유무를 실험하였다.
도 6 및 표 3에서 확인할 수 있듯이, 상기 실시예 4에서와 거의 유사한 형태의 결과가 도출되었다.
| 단삼:홍삼 | 대조군 | LPS | 0:10 | 3:7 | 4:6 | 5:5 | 6:4 | 7:3 | 10:0 |
| 복합추출물 TNF-α 발현량 (%) | 16.1 | 100 | 73.7 | 66.75 | 56.2 | 59.8 | 70 | 73.05 | 76.1 |
| 생물전환복합추출물 TNF-α 발현량 (%) | 18 | 100 | 50.25 | 38.75 | 26.25 | 33.95 | 36.95 | 50.95 | 59.6 |
먼저 단삼 및 홍삼 복합추출물 실험군에서는 모든 구간에서 TNF-α 발현양이 20% 이상 감소하였고 특히 4:6, 5:5 비율의 조성비에서 가장 많은 감소량을 보였다. 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 경우에는 모든 실험군에서 50% 이상 TNF-α 발현양이 감소한 것을 확인하였으며, 특별하게는 4:6의 비율을 적용한 시료에서 가장 많은 감소량을 보였다.
실시예 6: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 DPPH 라디칼 소거능 측정
DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, sigma) 라디칼 소거활성은 Blois방법을 사용하여 측정하였다. DPPH 0.15 mM을 에탄올 원액(absolute ethanol) 100 mL에 용해한 후, 50% 에탄올 용액을 대조군으로 하여 517 nm에서 DPPH용액의 흡광도를 약 1.0이 되도록 희석하여 사용하였다.
상기 방법으로 제조된 단삼 및 홍삼 복합추출물과 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물을 각각 100배 희석하여 시료로 만들었다. 각 시료 0.5 mL에 DPPH 용액 5 mL을 혼합하여 정확히 3분 동안 반응시키고 UV-1601(UV-visible spectrophotometer)를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정한 후 하기 수학식 1을 통하여 RSA(radical scavenging activity, %)로 나타내었다.
<수학식 1>
DPPH radical scavenging activity (%)=(1-As/Ac)×100
(여기서 As: Absorbance of group with sample, Ac: Absorbance of group without sample이다.)
도 7 및 표 4에서 확인할 수 있듯이, 단삼 및 홍삼 복합추출물의 DPPH 라디칼 소거능 결과는 5:5, 6:4(단삼:홍삼)의 중량비에서 최대 약 80%의 전자 공여능을 보였으며, 다른 혼합비율에서도 개별 추출물보다 높은 활성을 보이고 있다. 또한 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 경우에도 마찬가지로 5:5, 6:4 비율에서 가장 높은 라디컬 소거 능력을 보였으며, 단삼 및 홍삼 복합추출물에 비해 작게는 20%에서 높게는 35% 가량의 소거 능력의 차이를 보였다.
| 단삼:홍삼 | 0:10 | 3:7 | 4:6 | 5:5 | 6:4 | 7:3 | 10:0 |
| 복합추출물 DPPH 라디칼 소거능 (%) |
59.95 | 68.65 | 82.05 | 80.7 | 72.15 | 59.2 | 38.2 |
| 생물전환 복합추출물DPPH 라디칼 소거능 (%) | 73.75 | 84.25 | 97.8 | 96.75 | 92.6 | 77.75 | 65.75 |
이는 단삼 및 홍삼의 DPPH 라디컬 소거능에 관한 여러 연구와도 일치하는 부분이고, 생물전환 공정이 포함되는 것이 소거능을 상당 부분 향상시킨다고 볼 수 있으며, 특히 적절한 중량비로 적용함에 따라 상승효과를 유도할 수 있다.
실시예 7: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 ABTs radical 소거능 측정
ABTS 라디칼 소거능은 Pellegrini N 등(1999)의 방법에 따라 측정하였다. 상기 실시예 6과 같은 방법으로 제조한 시료 100 uL에 0.1 M 포스페이트 버퍼(phosphate buffer, pH 5.0) 100 uL와 10 mM 과산화수소(hydrogen peroxide) 20 uL를 가하고 37℃에서 5분 동안 예비반응 시켰다.
반응물에 1.25 mM의 ABTS와 과산화효소(peroxidase, 1 U/mL)를 각각 30 uL씩 넣은 후 다시 37℃에서 10분 동안 반응시켰다. 반응물은 405 nm의 멀티플레이트 리더(Multiplate Reader. Sunrise RC/TS/TS Color-TC/TW/BC/6Filter, Tecan Austria GmbH, Grφdig, Austria)를 이용하여 흡광도를 측정하였고 하기 수학식 2에 의해 소거능을 계산하였다. 무처리구의 경우에는 시료 대신 DMSO를 사용하였다.
<수학식 2>
ABTS radical scavenging activity (%)=(1-As/Ac)×100
(여기서 As: Absorbance of group with sample, Ac: Absorbance of group without sample이다.)
도 8 및 표 5에서 확인할 수 있듯이, ABTS 소거능 측정 결과는 실시예 6의 DPPH 소거능과 거의 유사하게 도출되었다.
| 단삼:홍삼 | 0:10 | 3:7 | 4:6 | 5:5 | 6:4 | 7:3 | 10:0 |
| 복합추출물 ABTS 소거능 (%) | 47.9 | 62.1 | 81.15 | 77.65 | 64.2 | 59.2 | 61 |
| 생물전환 복합추출물ABTS 소거능 (%) | 84.6 | 86.9 | 98.25 | 94.45 | 92.1 | 81.6 | 78.9 |
먼저 단삼 및 홍삼 효소반응물의 경우 모든 경우의 시료에서 60% 이상의 소거능을 보여주었고, 특히 4:6 비율에서 가장 높게 나타났고, 단삼 또는 홍삼 단일 효소반응물(0:10 또는 10:0)에 비해 약 20% 정도 소거능이 높은 결과를 보여준다. 그런데 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 경우 전반적으로 모두 80% 이상의 높은 소거능을 보였으며, 생물전환공정이 앞선 결과와 마찬가지로 4:6의 중량비에서 최고의 소거능을 보였다. 실시예 6 및 실시예 7을 통하여 추측해 볼 때, 생물전환 공정이 수행됨으로써 항산화효과가 극대화된다는 것을 짐작할 수 있었다.
실시예 8: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 LDL 산화 억제 활성 측정
LDL 산화 억제 활성 측정 실험은 LDL(1 mg/ml final conc.)과 상기 과정을 통하여 얻은 복합 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물을 각기 종류별로 50배 희석하고(final conc.) 혼합하여 교반한 후 황산제이구리(CuSO4 10 uM)를 첨가한 후 다시 37℃에서 90분 동안 반응시켰다. 반응물의 흡광도는 234 nm의 멀티플레이트 리더를 이용하여 측정하였고 대조군인 프로부콜(probucol)의 값과 비교하여 상대적인 값으로 나타내었다.
도 9 및 표 6에서 확인할 수 있듯이, 단삼 또는 홍삼 단일 효소반응물이 약 30%의 억제능을 보였으며, 다른 모든 실험군에서는 60%를 상회하는 억제 활성을 보였다.
| 단삼:홍삼 | 프로부콜 | 0:10 | 3:7 | 4:6 | 5:5 | 6:4 | 7:3 | 10:0 |
| 생물전환 복합추출물 LDL 산화 억제 활성 (%) | 100 | 35.6 | 65.95 | 98.15 | 84.95 | 69.75 | 81 | 60.95 |
특히 중량비가 4:6에 해당하는 실험군에서는 프로부콜과 거의 동일한 억제 활성을 보였다. 이는 앞서 나타난 항산화능 측정과도 유사한 결과이며, 동맥경화에 있어서 약리활성의 발휘를 기대해 볼 수 있다.
실시예 9: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 ox-LDL 유입 억제 활성 측정
24웰 플레이트에 웰 당 20,000 개의 내피세포를 분주한 다음 CO2 인큐베이터에서 24시간 동안 배양한 후, 형광물질이 표지된 LDL을 사용하여, 실시예 8에서와 같은 방법으로 반응물을 제조하였다. 상기 반응물은 24웰에 각각 100 ul씩 첨가하여 3시간 동안 추가로 배양하였고, 형광현미경을 이용하여 사진을 분석하였다.
도 10에서 확인할 수 있듯이, 대조군에서는 상당량의 LDL이 내피세포 안으로 유입된데 비하여, 단삼:홍삼의 중량비를 4:6, 5:5 및 6:4로 한 시료에서는 LDL이 거의 세포내로 유입되지 않은 것으로 확인할 수 있었다.
실시예 10: 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물 복용 시 혈압 변화의 확인
고혈압 환자 총 30명을 여섯 그룹으로 나누어 각 그룹에 상기 방법으로 제조된 단삼 추출물, 홍삼 추출물, 단삼 및 홍삼 복합추출물(단삼:홍삼=4:6), 단삼 생물전환 추출물(단삼:홍삼=10:0), 홍삼 생물전환 추출물(단삼:홍삼=0:10), 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물(단삼:홍삼=4:6)을 20일 동안 매일 1.5 g씩 복용시키면서 혈압의 변화를 관찰하고 투여 전과 투여 후 매일 같은 시간에 측정한 수축기 혈압, 이완기 혈압 및 맥박을 측정하였다. 이때 각 실험군에서 가장 큰 차이를 보이거나 가장 작은 차이를 보이는 두가지 경우는 배제하여, 각 실험군에서 3명의 데이터를 명시하였다.
도 11 내지 13에서 확인할 수 있듯이, 투여 직후부터 완만한 혈압 강하에 따른 혈압 조절효과가 관찰되었으며, 모든 환자에서 혈압강하 효과가 관찰되었고, 적정혈압 이하로는 강하되지 않았으므로 혈압조절에도 유효한 것으로 판단하였다.
도 11에서 확인할 수 있는 단삼 추출물, 및 단삼 생물전환 추출물의 차이 및 도 12에서 확인할 수 있는 홍삼 추출물, 및 홍삼 생물전환 추출물의 차이는 거의 없거나 아주 작은 차이로 나타나는 것에 비해, 도 13에서 확인할 수 있는 단삼 및 홍삼 복합추출물, 및 단삼 및 홍삼 생물전환 복합추출물의 경우 복용 전후 혈압 강하 차이가 크게 나타나며, 특히 생물전환 복합추출물의 경우에서 확연한 혈압강하 효과를 확인할 수 있다.
Claims (16)
- 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물은 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 첨가하여 제조된 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 미생물 배양액은 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei), 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 또는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물은 단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 제조된 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 1:9 내지 9:1의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 3:7 내지 7:3의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 다음 단계를 포함하는, 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 제조방법:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계. - 제7항에 있어서, 상기 효소처리 단계는 20 내지 50℃에서 수행되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 제조방법.
- 제7항에 있어서, 상기 효소처리 단계는 16 내지 36시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 제조방법.
- 제7항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 1:9 내지 9:1의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 제조방법.
- 제10항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 3:7 내지 7:3의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 제조방법.
- 제7항에 있어서, 상기 미생물 배양액은 트리코데르마(Trichoderma) 속 균주의 배양액인 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 제조방법.
- 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품 조성물.
- 제13항에 있어서, 상기 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물은 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 첨가하여 제조된 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 제14항에 있어서, 상기 미생물 배양액은 트리코데르마 레에세이(Trichoderma reesei), 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 또는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 균주의 배양액인 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 다음 단계를 포함하는, 단삼(Salvia miltiorrhiza) 생물전환 추출물 및 홍삼(red ginseng) 생물전환 추출물을 포함하는 심혈관계 질환 개선용 식품의 제조방법:
단삼 추출물 및 홍삼 추출물에 양조 효소를 첨가하여 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물을 제조하는 효소처리 단계; 및
상기 단삼 효소반응물 및 홍삼 효소반응물에 미생물 배양액을 반응시켜 단삼 생물전환 추출물 및 홍삼 생물전환 추출물을 제조하는 생물전환 단계.
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|---|---|---|---|---|
| KR20230087305A (ko) * | 2021-12-09 | 2023-06-16 | 주식회사 리바이오 | 진세노사이드 f1 및 컴파운드 k 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20060111857A (ko) * | 2005-04-25 | 2006-10-30 | 영남대학교 산학협력단 | 단삼 추출물 및 분획물을 함유하는 동맥경화증의 예방 또는치료용 조성물 |
| KR20160141986A (ko) * | 2015-06-02 | 2016-12-12 | 재단법인 진안홍삼연구소 | 홍삼 및 유산균을 함유하는 혈관질환을 예방, 개선 또는 치료하기 위한 조성물 |
| KR20180019374A (ko) * | 2016-08-16 | 2018-02-26 | 송하석 | 생물전환기술을 이용한 특이 진세노사이드 화합물 k 고함량 제조기술 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101753077B1 (ko) * | 2010-05-07 | 2017-07-03 | 에스케이바이오랜드 주식회사 | 발효 인삼추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 조성물 |
| KR20150073438A (ko) * | 2013-12-23 | 2015-07-01 | (주)내츄럴씨앤에프 | 미생물을 이용한 단삼 발효산물을 제조하는 방법 |
| KR101822024B1 (ko) * | 2017-08-21 | 2018-01-25 | 주식회사한국야쿠르트 | 효소전환과 유산균 발효를 이용한 화합물 k의 함량이 강화된 발효홍삼 농축액의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 발효홍삼 농축액을 유효성분으로 함유하는 제품 |
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-
2020
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20060111857A (ko) * | 2005-04-25 | 2006-10-30 | 영남대학교 산학협력단 | 단삼 추출물 및 분획물을 함유하는 동맥경화증의 예방 또는치료용 조성물 |
| KR20160141986A (ko) * | 2015-06-02 | 2016-12-12 | 재단법인 진안홍삼연구소 | 홍삼 및 유산균을 함유하는 혈관질환을 예방, 개선 또는 치료하기 위한 조성물 |
| KR20180019374A (ko) * | 2016-08-16 | 2018-02-26 | 송하석 | 생물전환기술을 이용한 특이 진세노사이드 화합물 k 고함량 제조기술 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20230087305A (ko) * | 2021-12-09 | 2023-06-16 | 주식회사 리바이오 | 진세노사이드 f1 및 컴파운드 k 함량이 증진된 생물전환 홍삼 제조 방법 |
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