KR20210009357A - Ror 감마 조정제로서의 트리시클릭 술폰 화합물 - Google Patents

Abstract

하기 화학식 (I)의 RORγ 조정제, 또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물이 기재된다. 상기를 포함하는 제약 조성물이 또한 제공된다. 본 발명의 화합물은 세포에서 RORγ 활성을 조정하는 방법, 및 대상체가 RORγ 활성의 조정으로부터 치료 이익을 얻을 수 있는 질환 또는 장애, 예를 들어 자가면역 및/또는 염증성 장애를 앓고 있는 대상체를 치료하는 방법에 유용할 수 있다.

Description

ROR 감마 조정제로서의 트리시클릭 술폰 화합물

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2018년 5월 17일에 출원된 미국 가출원 번호 62/672802을 우선권 주장하며, 그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다.

발명의 분야

본 발명은 레티노이드-관련 고아 수용체 RORγ의 조정제, 및 상기 조정제를 사용하는 방법에 관한 것이다. 본원에 기재된 화합물은 특히 인간 및 동물에서 다양한 질환 및 장애를 치료하는데 유용할 수 있다. 예시적인 장애는 건선, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 결장염, 급성 이식편-대-숙주 질환, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 전신 홍반성 루푸스 (SLE), 루푸스 신염 (LN), 쇼그렌 증후군 및 다발성 경화증을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

레티노이드-관련 고아 수용체인 RORα, RORβ 및 RORγ는 기관 발생, 면역, 대사 및 일주기 리듬을 포함한 수많은 생물학적 과정에서 중요한 역할을 한다. 예를 들어, 문헌 [Dussault et al. in Mech. Dev. (1998) vol. 70, 147-153; Andre et al. in EMBO J. (1998) vol. 17, 3867-3877; Sun et al. in Science (2000) vol. 288, 2369-2373; and Jetten in Nucl. Recept. Signal. (2009) vol. 7, 1-32]을 참조한다.

RORγ는 흉선, 신장, 간 및 근육을 포함한 여러 조직에서 발현된다. RORγ의 2가지의 이소형이 확인되었다: RORγ1 및 RORγ2 (또한 RORγ 및 RORγt로서 각각 공지됨). 예를 들어, 문헌 [Hirose et al. in Biochem. Biophys. Res. Commun. (1994) vol. 205, 1976-1983; Oritz et al. in Mol. Endocrinol. (1995) vol. 9, 1679-1691; and He et al. in Immunity (1998) vol. 9, 797-806]을 참조한다. RORγt의 발현은 CD4+CD8+ 흉선세포, IL-17 생산 T 헬퍼 (Th17) 세포, 림프성 조직 유도인자 (LTi) 세포, 및 γδ 세포를 포함한 림프성 세포 유형에 제한된다. RORγt는 림프절 및 파이어 패치(Peyer's patch)의 발생, 및 Th17, γδ 및 LTi 세포의 정상 분화에 필수적이다. 예를 들어, 문헌 [Sun et al. in Science (2000) vol. 288, 2369-2373; Ivanov et al. in Cell (2006) vol. 126, 1121-1133; Eberl et al. in Nat. Immunol. (2004) vol. 5, 64-73; Ivanov et al. in Semin. Immunol. (2007) vol. 19, 409-417; and Cua and Tato in Nat. Rev. Immunol. (2010) vol. 10, 479-489]을 참조한다.

Th17 세포 및 다른 RORγ+ 림프구에 의해 생산되는 염증유발 시토카인, 예컨대 IL-17A (IL-17로서 또한 지칭됨), IL-17F, 및 IL-22는 세포외 병원체에 대한 면역 반응을 활성화시키고 지시한다. 예를 들어, 문헌 [Ivanov et al. in Semin. Immunol. (2007) vol. 19: 409-417; and Marks and Craft in Semin. Immunol. (2009) vol. 21, 164-171]을 참조한다. RORγ는 IL-17 전사를 직접 조절하며, 마우스에서의 RORγ의 파괴는 IL-17 생산을 감쇠시킨다. 예를 들어, 문헌 [Ivanov et al. in Cell (2006) vol. 126, 1121-1133]을 참조한다.

IL-17의 조절이상 생산은 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 건선, 염증성 장 질환 (IBD), 전신 홍반성 루푸스 (SLE) 및 루푸스 신염 (LN), 쇼그렌 증후군 및 천식을 비롯한 여러 인간 자가면역 및 염증성 질환에 연관되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Lock et al. in Nat. Med. (2002) vol. 8, 500-508; Tzartos et al. in Am. J. Pathol. (2008) vol. 172, 146-155; Kotake et al. in J. Clin. Invest. (1999) vol. 103, 1345-1352; Kirkham et al. in Arthritis Rheum. (2006) vol. 54, 1122-1131; Lowes et al. in J. Invest. Dermatol. (2008) vol. 128, 1207-1211; Leonardi et al. in N. Engl. J. Med. (2012) vol. 366, 1190-1199; Fujino et al. in Gut (2003) vol. 52, 65-70; Seiderer et al. in Inflamm. Bowel Dis. (2008) vol.14, 437-445; Wong et al. in Clin. Exp. Immunol. (2001) vol. 125, 177-183; Duo Li et al. in Autoimmunity (2015) vol. 48, 353-361, M. Tahara et al. in Clinical and Experimental Immunology (2016), Vol. 187, 213-224 and Agache et al. in Respir. Med. (2010) 104: 1131-1137]을 참조한다. 이들 질환의 뮤린 모델에서, 중화 항체에 의한 IL-17 기능의 억제, 또는 IL-17 또는 IL-17 수용체의 유전자 파괴는 질환 경과 또는 임상 증상을 호전시킨다. 예를 들어, 문헌 [Hu et al. in Ann. N.Y. Acad. Sci. (2011) vol. 1217, 60-76]을 참조한다.

또한, 마우스에서의 RORγ의 파괴는 실험적 자가면역 뇌척수염 (EAE), 이미퀴모드 유발 건선, 결장염, 전신 홍반성 루푸스 (SLE) 및 루푸스 신염 (LN), 쇼그렌 증후군 및 알레르기성 기도 질환을 비롯한 자가면역 및 염증의 동물 모델에서의 질환 진행 또는 중증도를 감쇠시킨다. 예를 들어, 문헌 [Ivanov et al. in Cell (2006) vol. 126, 1121-1133; Yang et al. in Immunity (2008) vol. 28, 29-39; Pantelyushin et al. in J. Clin. Invest. (2012) vol. 122, 2252-2256; Leppkes et al. in Gastroenterology (2009) vol. 136, 257-267; A. Gaweco et al. Annals of the Rheumatic Diseases (2015), 74, 120; M. Tahara et al. in Clinical and Experimental Immunology (2016), Vol. 187, 213-224 and Tilley et al. in J. Immunol. (2007) vol. 178, 3208-3218]을 참조한다.

본 배경기술 섹션의 각각의 참고문헌은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

다양한 염증성 및 자가면역 질환을 치료하기 위한 치료제가 존재하지만, 이들 치료 영역에서 상당한 미충족 의료 필요가 여전히 남아있다. 인간 질환에서의 IL-17의 역할 및 뮤린 질환 모델에서의 표적으로서의 IL-17 및 RORγ의 검증을 고려하면, RORγt 활성을 조정할 수 있는 화합물은 다수의 면역 및 염증성 장애의 치료에서 치료 이익을 제공할 것으로 여겨진다.

본 발명의 화합물은 시험관내 실험을 기반으로 GSH 부가물은 형성하지 않으면서 RORγt 활성을 조정할 수 있는 것으로 밝혀졌다. GSH 부가물의 형성은 대사물의 잠재적 형성으로 인해 바람직한 특성이 아닐 수 있다.

발명의 개요

한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:

본 발명은 그의 입체이성질체, 용매화물 또는 전구약물을 포함한다.

한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물을 포함한다:

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또 다른 측면에서, 본 발명은, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)에 따른 화합물, 입체이성질체 형태 또는 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은, 세포와 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)에 따른 화합물, 입체이성질체 형태 또는 제약상 허용되는 염을 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 RORγ를 조정하는 방법을 포함한다. 이러한 측면은 시험관내 또는 생체내에서 수행될 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은, RORγ에 의해 조정되는 질환 또는 장애를 앓는 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)에 따른 화합물, 입체이성질체 형태, 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체를 치료하는 방법을 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은, 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)에 따른 화합물, 또는 입체이성질체 형태, 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 염증성 질환 또는 장애, 자가면역 질환 또는 장애, 알레르기성 질환 또는 장애, 대사 질환 또는 장애, 및/또는 암으로부터 선택된 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 포함한다.

한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체 또는 제약상 허용되는 염을 포함한다.

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한 실시양태에서, 본 발명은 제약상 허용되는 담체 및 치료 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염 또는 용매화물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 제약상 허용되는 염 또는 용매화물을 제조하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 요법에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 요법에서의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 본 발명의 화합물 및 추가의 치료제(들)의 조합 제제를 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 비제한적으로 건선, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 결장염, 급성 이식편-대-숙주 질환, 건선성 관절염, 강직성 척추염 및 다발성 경화증과 같은 질환을 포함하는, 염증이 구성요소인 질환의 치료 (또는 질환을 치료하는 방법)에 사용하기 위한, 본 발명의 화합물을 제공한다.

하기는 본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 용어의 정의이다. 본원의 기 또는 용어에 대해 제공되는 초기 정의는, 달리 나타내지 않는 한, 개별적으로 또는 또 다른 기의 일부로서 명세서 및 청구범위 전반에 걸친 기 또는 용어에 적용된다.

화학식 I의 화합물은 유리 형태 (이온화 없음)로 존재할 수 있거나 또한 본 발명의 범주 내에 있는 염을 형성할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 본 발명의 화합물에 대한 언급은 유리 형태 및 그의 염에 대한 언급을 포함하는 것으로 이해된다. 용어 "염(들)"은 무기 및/또는 유기 염기를 사용하여 형성된 염기성 염(들)을 나타낸다. 제약상 허용되는 (즉, 비-독성인 생리학상 허용되는) 염, 예컨대 예를 들어 양이온이 염의 독성 또는 생물학적 활성에 유의하게 기여하지 않는, 허용되는 금속 및 아민 염이 바람직하다. 그러나, 다른 염이, 예를 들어 제조 동안 사용될 수 있는 단리 또는 정제 단계에서 유용할 수 있고, 따라서 본 발명의 범주 내에서 고려된다. 화학식 I의 화합물의 염은, 예를 들어, 화학식 I의 화합물을 소정량, 예컨대 등가량의 염기와, 매질 예컨대 염이 침전하는 매질에서 또는 수용성 매질에서 반응시킨 후 동결건조시킴으로써 형성될 수 있다.

예시적인 염기성 염은 암모늄 염, 알칼리 금속 염, 예컨대 나트륨, 리튬, 및 칼륨 염; 알칼리 토금속 염, 예컨대 칼슘 및 마그네슘 염; 바륨, 아연, 및 알루미늄 염; 유기 염기 (예를 들어, 유기 아민), 예컨대 트리알킬아민, 예컨대 트리에틸아민, 프로카인, 디벤질아민, N-벤질-β-페네틸아민, 에페나민, N,N'-디벤질에틸렌-디아민, 데히드로아비에틸아민, N-에틸피페리딘, 벤질아민, 디시클로헥실아민 또는 유사한 제약상 허용되는 아민과의 염, 및 아미노산, 예컨대 아르기닌, 리신과의 염 등을 포함한다.

어구 "제약상 허용되는"은, 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 합리적인 이익/위험 비에 상응하여 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 이들 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하는 것으로 본원에 사용된다.

본원에 사용된 "제약상 허용되는 염"은 모 화합물이 그의 염기 염을 제조함으로써 변형된 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 제약상 허용되는 염의 예는 카르복실산의 알칼리 또는 유기 염을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 염기으로부터 형성된 모 화합물의 통상적인 비-독성 염 또는 4급 암모늄 염을 포함한다.

본 발명의 제약상 허용되는 염은, 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 통상적인 화학적 방법에 의해 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 화합물의 유리산 형태를 화학양론적 양의 적절한 염기와 물 중에서 또는 유기 용매 중에서, 또는 이 둘의 혼합물 중에서 반응시켜 제조될 수 있으며; 일반적으로 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올, 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990)]에서 발견되며, 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 화합물의 전구약물 및 용매화물이 또한 고려된다. 용어 "전구약물"은, 대상체에게 투여 시, 대사 또는 화학적 과정에 의해 화학적 전환을 겪어 화학식 I의 화합물, 및/또는 그의 염 및/또는 용매화물을 생성하는 화합물을 나타낸다. 생체내에서 전환되어 생물활성제를 제공할 임의의 화합물 (즉, 화학식 I을 위한 화합물)이 본 발명의 범주 및 취지 내에서 전구약물이다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물의 카르복실산 기는 체내에서 가수분해되어 그 자체로 화학식 I의 화합물을 생성하는 것에 의해 전구약물로서 작용하는 생리학상 가수분해성 에스테르를 형성할 수 있다. 가수분해는 다수의 경우에서 주로 소화 효소의 영향 하에 일어나기 때문에, 이러한 전구약물은 바람직하게는 경구로 투여된다. 비경구 투여는 에스테르가 그 자체로 활성인 경우에, 또는 가수분해가 혈액 내에서 일어나는 경우에 사용될 수 있다. 화학식 I의 화합물의 생리학상 가수분해성 에스테르의 예는 C_1-6 알킬벤질, 4-메톡시벤질, 인다닐, 프탈릴, 메톡시메틸, C_1-6 알카노일옥시-C_1-6 알킬, 예를 들어 아세톡시메틸, 피발로일옥시메틸 또는 프로피오닐옥시메틸, C_1-6 알콕시카르보닐옥시-C_1-6 알킬, 예를 들어 메톡시카르보닐옥시메틸 또는 에톡시카르보닐옥시메틸, 글리실옥시메틸, 페닐글리실옥시메틸, (5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔렌-4-일)-메틸, 및 예를 들어 페니실린 및 세팔로스포린 분야에서 사용되는 기타 널리 공지된 생리학상 가수분해성 에스테르를 포함한다. 이러한 에스테르는 관련 기술분야에 공지된 통상적인 기술에 의해 제조될 수 있다.

전구약물의 다양한 형태는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 이러한 전구약물 유도체의 예에 대해, 하기 문헌:

a) [Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), and Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985)];

b) [Bundgaard, H., Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs", Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Harwood Academic Publishers (1991)]; 및

c) [Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992)]

을 참조하고, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 또 다른 측면은 본 발명에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 제약 염 또는 용매화물을 포함하는 제약 조성물이다. 본원에 기재된 제약 조성물은 일반적으로 본원에 기재된 화합물 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제의 조합물을 포함한다. 이러한 조성물은 비-제약상 허용되는 성분을 실질적으로 함유하지 않으며, 즉 본 출원의 출원 시점에 미국 규제 요건에 의한 허용치보다 더 낮은 양으로 비-제약상 허용되는 성분을 함유한다. 이러한 측면의 일부 실시양태에서, 화합물이 물 중에 용해되거나 현탁되는 경우, 조성물은 추가의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 임의로 포함한다. 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조성물은 고체 제약 조성물 (예를 들어, 정제, 캡슐 등)이다.

이들 조성물은 제약 기술분야에 널리 공지된 방식으로 제조될 수 있으며, 국부 또는 전신 치료를 목적하는지 여부에 따라 및 치료할 영역에 따라, 다양한 경로에 의해 투여될 수 있다. 투여는 국소 투여 (안과적 투여, 및 비강내, 질 및 직장 전달을 포함한 점막에의 투여 포함), 폐 투여(예를 들어, 네뷸라이저에 의한 것을 포함한 분말 또는 에어로졸의 흡입 또는 취입; 기관내, 비강내, 표피 및 경피에 의함), 안구, 경구 또는 비경구 투여일 수 있다. 안구 전달을 위한 방법은 국소 투여 (점안제), 결막하, 안구주위 또는 유리체내 주사, 또는 풍선 카테터 또는 외과적으로 결막낭 내에 배치되는 안과용 삽입물에 의한 주입을 포함할 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 피하, 복강내 또는 근육내 주사 또는 주입; 또는 두개내, 예를 들어 척수강내 또는 뇌실내 투여를 포함한다. 비경구 투여는 단일 볼루스 투여 형태일 수 있거나, 예를 들어 연속 관류 펌프에 의한 것일 수 있다. 국소 투여를 위한 제약 조성물 및 제제는 경피 패치, 연고, 로션, 크림, 겔, 점적제, 좌제, 스프레이, 액체 및 분말을 포함할 수 있다. 통상적인 제약 담체, 수성, 분말 또는 유성 베이스, 증점제 등이 필요하거나 또는 바람직할 수 있다.

또한, 제약 조성물은 활성 성분으로서 상기 본원에 기재된 화합물을 1종 이상의 제약상 허용되는 담체와 조합하여 함유할 수 있다. 본원에 기재된 조성물을 제조함에 있어서, 활성 성분은 전형적으로 부형제와 혼합되거나, 부형제에 의해 희석되거나, 또는 이러한 담체 내에, 예를 들어 캡슐, 사쉐, 페이퍼 또는 다른 용기의 형태로 봉입된다. 부형제가 희석제로서 기능하는 경우, 이는 활성 성분에 대해 비히클, 담체 또는 매질로서 작용하는 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 따라서, 조성물은 정제, 환제, 분말, 로젠지, 사쉐, 카쉐, 엘릭시르, 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸 (고체로서의 에어로졸 또는 액체 매질 중의 에어로졸), 예를 들어 10 중량% 이하의 활성 화합물을 함유한 연고, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌제, 멸균 주사가능한 용액, 및 멸균 포장된 분말의 형태일 수 있다.

제제를 제조함에 있어서, 활성 화합물은 다른 성분과 조합하기 전에 적절한 입자 크기를 제공하도록 밀링될 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 불용성인 경우, 이는 200 메쉬 미만의 입자 크기로 밀링될 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 수용성이라면, 입자 크기는 제제에서 실질적으로 균일한 분포를 제공하기 위해 분쇄됨으로써 조정될 수 있으며, 예를 들어, 약 40 메쉬이다.

적합한 부형제의 일부 예는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 검, 인산칼슘, 알기네이트, 트라가칸트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정질 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 및 메틸 셀룰로스를 포함한다. 제제는 추가적으로 윤활제 예컨대 활석, 스테아르산마그네슘, 및 미네랄 오일; 습윤제; 유화제 및 현탁화제; 보존제 예컨대 메틸- 및 프로필히드록시-벤조에이트; 감미제; 및 향미제를 포함한다. 본원에 기재된 조성물은 관련 기술분야에 공지된 절차를 사용함으로써, 대상체에게 투여 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연 방출을 제공하도록 제제화될 수 있다.

활성 화합물은 폭넓은 투여량 범위에 걸쳐 효과적일 수 있으며, 일반적으로 제약 유효량으로 투여된다. 그러나, 실제로 투여되는 화합물의 양은 통상적으로, 치료될 상태, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물, 개별 대상체의 연령, 체중 및 반응, 개별대상체의 증상의 중증도 등을 포함한 관련 상황에 따라 의사에 의해 결정되는 것으로 이해될 것이다.

고체 조성물 예컨대 정제를 제조하기 위해, 주요 활성 성분을 제약 부형제와 혼합하여 본원에 기재된 화합물의 균질 혼합물을 함유하는 고체 예비제제 조성물을 형성한다. 이들 예비제제 조성물이 균질한 것으로 언급된 경우, 활성 성분은 전형적으로, 조성물이 동등하게 유효한 단위 투여 형태 예컨대 정제, 환제 및 캡슐로 용이하게 세분될 수 있도록 조성물 전반에 걸쳐 균일하게 분산되어 있다. 이어서, 이러한 고체 예비제제는 예를 들어 0.1 내지 약 500 mg의 본원에 기재된 화합물의 활성 성분을 함유하는 상기 기재된 유형의 단위 투여 형태로 세분된다.

정제 또는 환제는 지속 작용의 이점을 제공하는 투여 형태를 제공하기 위해 코팅되거나 또는 달리 배합될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 환제는 내부 투여 및 외부 투여 성분을 포함할 수 있고, 후자는 전자 위의 외피 형태로 존재한다. 이들 2종의 성분은, 위 내 붕해에 대해 저항하여 내부 성분이 십이지장 내로 무손상 통과하거나 또는 방출이 지연되는 것을 허용하는 장용 층에 의해 분리될 수 있다. 다양한 물질이 이러한 장용 층 또는 코팅에 사용될 수 있으며, 이러한 물질은 다수의 중합체 산, 및 중합체 산과 쉘락, 세틸 알콜 및 셀룰로스 아세테이트와 같은 물질의 혼합물을 포함한다.

화합물 및 조성물이 경구 또는 주사에 의한 투여를 위해 혼입될 수 있는 액체 형태는 수용액, 적합하게는 향미 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 식용 오일 예컨대 목화씨 오일, 참깨 오일, 코코넛 오일 또는 땅콩 오일을 포함하는 향미 에멀젼, 뿐만 아니라 엘릭시르 및 유사한 제약 비히클을 포함한다.

흡입 또는 취입을 위한 조성물은 제약상 허용되는 수성 또는 유기 용매 또는 그의 혼합물 중 용액 및 현탁액, 및 분말을 포함한다. 액체 또는 고체 조성물은 상기 기재된 바와 같은 적합한 제약상 허용되는 부형제를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 국부 또는 전신 효과를 위해 구강 또는 비강 호흡 경로에 의해 투여된다. 내부의 조성물은 불활성 기체의 사용에 의해 연무화될 수 있다. 연무화된 용액이 연무화 장치로부터 직접 호흡될 수 있거나, 또는 연무화 장치가 페이스 마스크 텐트 또는 간헐적 양압 호흡 기계에 부착될 수 있다. 용액, 현탁액 또는 분말 조성물은 제제를 적절한 방식으로 전달하는 장치로부터 경구로 또는 비강으로 투여될 수 있다.

대상체에 투여되는 화합물 또는 조성물의 양은 투여되는 것, 투여 목적, 예컨대 예방 또는 요법, 대상체의 상태, 투여 방식 등에 따라 달라질 것이다. 치료 용도에서, 조성물은 질환을 이미 앓고 있는 대상체에게 질환 및 그의 합병증의 증상을 치유하거나 또는 적어도 부분적으로 정지시키기에 충분한 양으로 투여될 수 있다. 유효 용량은 치료될 질환 상태에 따라 달라질 뿐만 아니라 질환의 중증도, 대상체의 연령, 체중 및 전반적 상태 등과 같은 인자에 따라 담당 임상의의 판단에 의해 달라질 것이다.

대상체에게 투여되는 조성물은 상기 기재된 제약 조성물의 형태일 수 있다. 이들 조성물은 통상적인 멸균 기술에 의해 멸균될 수 있거나, 또는 멸균 여과될 수 있다. 수용액은 그대로 사용되도록 포장되거나 또는 동결건조될 수 있으며, 동결건조된 제제는 투여 전에 멸균 수성 담체와 조합된다. 화합물 제제의 pH는 전형적으로 3 내지 11, 보다 바람직하게는 5 내지 9, 가장 바람직하게는 7 내지 8일 것이다. 특정의 상기 부형제, 담체 또는 안정화제의 사용은 제약상 허용되는 염의 형성을 유발할 것으로 이해될 것이다.

화합물의 치료 투여량은, 예를 들어 치료가 이루어지는 특정한 용도, 화합물의 투여 방식, 대상체의 건강 및 상태, 및 처방 의사의 판단에 따라 달라질 수 있다. 제약 조성물 중 본원에 기재된 화합물의 비율 또는 농도는 투여량, 화학적 특징 (예를 들어, 소수성), 및 투여 경로를 포함한 다수의 인자에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 화합물은 비경구 투여를 위해 약 0.1 내지 약 10% w/v의 화합물을 함유하는 수성 생리 완충제 용액으로 제공될 수 있다. 일부 전형적인 용량 범위는 1일에 약 1 μg/kg 내지 약 1 g/kg 체중이다. 일부 실시양태에서, 용량 범위는 1일에 약 0.01 mg/kg 내지 약 100 mg/kg 체중이다. 투여량은 질환 또는 장애의 유형 및 진행 정도, 특정한 대상체의 전반적 건강 상태, 화합물의 생물학적 효능, 부형제의 제제, 및 그의 투여 경로와 같은 변수에 따라 달라질 수 있다. 유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유도된 용량-반응 곡선으로부터 추정될 수 있다.

본 발명의 화합물은 인간 또는 동물에서 다양한 의학적 장애를 예방, 진단 및 치료하는데 유용하다. 화합물은, 동일한 화합물의 부재 하에서의 RORγ 수용체와 비교하여, RORγ 수용체와 연관된 1종 이상의 활성을 억제 또는 감소시키기 위해 사용된다. 따라서, 본 발명의 한 측면에서, 대상체에서 자가면역 질환 또는 장애, 천식, 알레르기성 질환 또는 장애, 대사 질환 또는 장애, 및 암으로부터 선택된 질환 또는 장애를 치료하는 방법은 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 또는 제약상 허용되는 염, 용매화물, 또는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [L.A. Solt et al., "Action of RORs 및 their ligands in (patho)physiology," Trends Endocrinol. Metab. 2012, 23 (12): 619-627; M.S. Maddur et al., "Th17 cells: biology, pathogenesis of autoimmune and inflammatory diseases, and therapeutic strategies," Am. J. Pathol. 2012 Jul;181(1):8-18; and A.M. Jetten, "Retinoid-related orphan receptors (RORs): critical roles in development, immunity, circadian rhythm, and cellular metabolism," Nucl. Recept. Signal. 2009;7:e003]을 참조하며, 이들 각각은 그 전문 뿐만 아니라 배경기술 섹션에서 논의된 참고문헌이 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, 자가면역 질환 또는 장애는 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 건선 및 건선성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환 쇼그렌 증후군 및 루푸스로부터 선택된다. 특정 실시양태에서, 알레르기성 질환 또는 장애는 알레르기성 비염 및 피부염으로부터 선택된다. 특정 실시양태에서, 대사 질환 또는 장애는 비만, 비만-유도된 인슐린 저항성 및 제II형 당뇨병으로부터 선택된다.

특정 실시양태에서, 질환 또는 장애는 류마티스 관절염이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 다발성 경화증이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 강직성 척추염이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 염증성 장 질환이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 루푸스이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 쇼그렌 증후군이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 건선이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 건선성 관절염이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 이식편-대-숙주 질환 (GVHD)이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 자가면역 포도막염이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 비만 및/또는 인슐린 저항성이다.

다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 흑색종이다.

특정 측면에서, 본원에 개시된 화합물을 사용하여 진단, 치료 또는 예방되는 의학적 장애는, 예를 들어 자가면역 장애일 수 있다. 다른 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물을 사용하여 진단, 치료 또는 예방되는 장애는 염증성 장애일 수 있다. 예를 들어, 특정 실시양태에서, 장애는 관절염, 당뇨병, 다발성 경화증, 포도막염, 류마티스 관절염, 건선, 천식, 기관지염, 알레르기성 비염, 만성 폐쇄성 폐 질환, 아테롬성동맥경화증, 에이치. 필로리(H. pylori) 감염 및 염증성 장 질환으로부터 선택된다. 다른 실시양태에서, 장애는 크론병, 궤양성 결장염, 스프루 및 식품 알레르기로부터 선택된다. 다른 실시양태에서, 장애는 자가면역 뇌척수염, 이미퀴모드-유도된 건선, 결장염 또는 알레르기성 기도 질환이다.

본원에 사용된 어구 "치료 유효량"은 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 조직, 계, 동물, 개체 또는 인간에서 추구되는 생물학적 또는 의학적 반응을 도출하는 활성 화합물 또는 제약 작용제의 양을 지칭한다.

특정 실시양태에서, 치료 유효량은 (1) 질환의 예방; 예를 들어 질환, 상태 또는 장애에 대한 소인이 있을 수 있지만 아직 질환의 병리상태 또는 동반증상을 경험하지 않거나 나타내지 않는 개체에서의 질환, 상태 또는 장애의 예방; (2) 질환의 억제; 예를 들어 질환, 상태 또는 장애의 병리상태 또는 동반증상을 경험하거나 나타내는 개체에서의 질환, 상태 또는 장애의 억제; 또는 (3) 질환의 호전; 예를 들어 질환, 상태 또는 장애의 병리상태 또는 동반증상을 경험하거나 나타내는 개체에서의 질환, 상태 또는 장애의 호전 (즉, 병리상태 및/또는 동반증상의 역전) 예컨대 질환 중증도의 감소에 적합한 양일 수 있다.

본원에 사용된 용어 "치료" 및 "치료하는"은 (i) 언급된 질환 상태의 호전, 예를 들어 질환, 상태 또는 장애의 병리상태 또는 동반증상을 경험하거나 나타내는 개체에서의 질환, 상태 또는 장애의 호전 (즉, 병리상태 및/또는 동반증상의 역전 또는 개선) 예컨대 질환 중증도의 감소; (ii) 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 조직, 계, 동물, 개체 또는 인간에서 추구되는 생물학적 또는 의학적 반응의 도출; 또는 (iii) 언급된 질환 상태의 억제; 예를 들어 질환, 상태 또는 장애의 병리상태 또는 동반증상을 경험하거나 나타내는 개체에서의 질환, 상태 또는 장애의 억제를 의미한다.

제조 방법

본 발명의 화합물은 유기 화학 기술분야의 통상의 기술자에게 이용가능한 다수의 방법에 의해 합성될 수 있다. 제조 방법의 한 예는 하기 실시예에 나타낸다. 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 상이한 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 빈번하게, 합성 기술분야의 숙련된 화학자는 1종 이상의 고려사항, 예컨대 보다 짧은 반응 시간, 보다 저렴한 출발 물질, 작업 또는 단리의 용이성, 개선된 수율, 촉매작용에 대한 적합성, 독성 시약의 회피, 전문화된 기기의 접근성, 감소된 선형 단계 수 등에 기초하여 바람직할 수 있는 대안적 제조법을 고안할 수 있다.

호모키랄 화합물 또는 중간체의 제조는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 기술에 의해 수행될 수 있다. 예를 들어, 호모키랄 화합물은 키랄 상 정제용 크로마토그래피에 의한 라세미 생성물 또는 부분입체이성질체의 분리에 의해 제조될 수 있다. 대안적으로, 실시예 화합물은 거울상이성질체적으로 또는 부분입체이성질체적으로 풍부한 생성물을 제공하는 것으로 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물을 제조하는데 사용된 반응 및 기술은 사용된 시약 및 물질에 적절한 용매 중에서 수행되며, 이는 변형이 이루어지기에 적합하다. 용매의 선택을 비롯한 모든 반응 조건, 반응 분위기, 반응 온도, 실험 지속기간 및 후처리 절차는 그 반응에 대하여 표준인 조건으로 선택되며, 이는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인식되어야 한다. 분자의 다양한 부분에 존재하는 관능기는 제안된 시약 및 반응과 상용성이어야 한다는 것이 유기 합성 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해된다. 반응 조건과 상용성인 치환기에 대한 이러한 제한은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 용이하게 명백할 것이며, 비상용성 치환기가 존재하는 경우에는 대안이 필요하다. 이는 때때로 본 발명의 목적 화합물을 수득하기 위해 합성 단계의 순서를 변형하거나, 또는 하나의 특정한 공정 반응식을 또 다른 공정 반응식에 대해 선택하는 것에 대한 판단을 필요로 할 것이다. 또한, 본 분야의 임의의 합성 경로의 계획 시 또 다른 주요 고려사항은 본 발명에 기재된 화합물에 존재하는 반응성 관능기의 보호에 사용되는 보호기의 신중한 선택임이 인식될 것이다. 숙련된 진료의에게 많은 대안을 설명하는 권위있는 설명은 문헌 [Wuts and Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley and Sons (2007)]이다.

실시예

하기 실시예는 본 발명의 특정하고 바람직한 실시양태를 예시하며, 이는 본 발명의 범주를 제한하지는 않는다. 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 합성 반응식이 하기 기재된다. 이 반응식은 예시적이며, 관련 기술분야의 통상의 기술자가 본원에 개시된 화합물을 제조하는데 사용할 수 있는 가능한 기술을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 화학적 약어 및 기호 뿐만 아니라 과학적 약어 및 기호는, 달리 명시되지 않는 한, 그의 통상적이고 관례적인 의미를 갖는다. 실시예 및 본 출원의 다른 곳에 사용된 추가의 약어는 하기 정의되어 있다.

칼럼 크로마토그래피는 일반적으로, 콤비플래쉬(CombiFlash)^® 자동화 크로마토그래피 장치 (텔레다인 이스코(Teledyne Isco))를 사용하여 제시된 용매 또는 용매 혼합물로 용리시키면서 사전-패킹된 실리카 겔 카트리지를 사용하여 수행하였다. 분석용 고성능 액체 크로마토그래피는 (HPLC)는 분리할 물질의 양에 적절한 크기의 역상 칼럼을 사용하여, 일반적으로 0.05% 트리플루오로아세트산을 또한 함유하는 물 중 증가하는 농도의 아세토니트릴의 구배로, 칼럼 크기 및 분리의 달성에 적합한 용리 속도로 용리시키면서 수행하였다. 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체의 키랄 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) 분리는 기재된 조건을 사용하여 수행하였다. 질량 스펙트럼 데이터는 전기분무 이온화를 사용하는 액체 크로마토그래피 질량 분광분석법 (LCMS)에 의해 획득하였다.

화학 명칭은 켐바이오드로우 울트라(ChemBioDraw Ultra), 버전 14.0.0.126 (퍼킨엘머 인크.(PerkinElmer Inc.))을 사용하여 결정하였다. 하기 약어가 사용된다:

화학식 I의 화합물 (화합물 1)의 제조

실시예 1

(1R,3S,4R)-4-((3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌-3-카르보닐)-3-메틸시클로헥산-1-카르복실산

단계 1: 2,2,2-트리플루오로-1-((3aR,9bR)-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)에탄-1-온의 제조

빙수조에서 냉각시킨 DCM (20 mL) 중 (3aR,9bR)-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌 히드로클로라이드 (국제 특허 출원 WO 2016/179460, 1.78 g, 3.44 mmol)의 용액에 피리딘 (1.39 mL, 17.2 mmol)에 이어서 2,2,2-트리플루오로아세트산 무수물 (0.717 mL, 5.16 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (40 mL)으로 희석하고, 0.2 N HCl (2x50 mL), 물 (2x40 mL), 및 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 2,2,2-트리플루오로-1-((3aR,9bR)-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)에탄-1-온을 황색 고체 (1.9 g, 96% 수율)로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2 및 3: 1-((3aR,9bR)-8-아미노-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온의 제조

H₂SO₄ (95%, 40 mL) 중에 용해시킨 2,2,2-트리플루오로-1-((3aR,9bR)-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)에탄-1-온 (2.50 g, 4.33 mmol)의 용액에 0℃에서 KNO₃ (0.700 g, 6.93 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고, 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수 (150 mL)에 첨가하고, EtOAc (2x100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 (2x80 mL) 및 염수 (80 mL)로 순차적으로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 에탄올 (20 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 교반한 후 갈색 고체를 여과에 의해 수집하고, 추가 정제 없이 사용하였다.

상기 고체를 에탄올 (30 mL) 및 아세트산 (20 mL)과 혼합하고, 철 분말 (1.21 g, 21.7 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (2x20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 물 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 고체 Na₂CO₃을 사용하여 염기성화시켰다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (50 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 건조 (Na₂SO₄)시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 (80 g) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM으로 용리시키면서 정제하여 1-((3aR,9bR)-8-아미노-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 (1.70 g, 66% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.57 (tt, J=7.3, 1.4 Hz, 1H), 7.41 - 7.31 (m, 4H), 7.20 (s, 1H), 6.79 (br s, 1H), 4.77 (dd, J=11.9, 5.0 Hz, 1H), 4.42 (br s, 2H), 4.22 - 4.14 (m, 1H), 3.97 - 3.89 (m, 1H), 3.61 - 3.53 (m, 1H), 2.62 (dt, J=14.7, 9.8 Hz, 1H), 2.55 - 2.47 (m, 1H), 2.33 (dt, J=16.0, 3.1 Hz, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.28 - 1.17 (m, 1H).

LCMS m/z (M+H)⁺ 593.2.

단계 4 및 5: (3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌의 제조

DCM (40 mL) 중 1-((3aR,9bR)-8-아미노-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 (2.00 g, 3.38 mmol)의 현탁액에 0℃에서 LiBF₄ (0.949 g, 10.1 mmol) 및 BF₄NO (0.591 g, 5.06 mmol)를 첨가하였다. 그 온도에서 1.5시간 동안 교반한 후, 혼합물을 밀봉된 압력 플라스크에서 100℃로 4.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 여과하고, 고체를 DCM으로 여러 번 세척하고, 여과물 및 DCM 세척물을 합하고, 진공 하에 농축시키고, 실리카 겔 (40 g) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 DCM으로 용리시키면서 정제하여 2,2,2-트리플루오로-1-((3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-1,2,3a,4,5,9b-헥사히드로-3H-벤조[e]인돌-3-일)에탄-1-온 (1.30 g)을 수득하였다.

THF (16 mL), 물 (4 mL) 및 MeOH (4 mL) 중 이 물질의 용액에 LiOH 수화물 (0.916 g, 21.8 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 물 (30 mL) 및 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 희석하고, DCM (2 x 60 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 건조 (Na₂SO₄)시키고, 진공 하에 농축시켜 (3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌 (0.97 g, 두 단계에 거쳐 58% 수율, 그러나 약 20% (3aR,9bR)-8-클로로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌로 오염됨)를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 6 및 7: (1R,3S,4R)-4-((3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌-3-카르보닐)-3-메틸시클로헥산-1-카르복실산의 제조

N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 (3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌 (0.95 g, 1.90 mmol)의 용액에 실온에서 (1R,2S,4R)-4-(메톡시카르보닐)-2-메틸시클로헥산-1-카르복실산 (국제 특허 출원 WO 2018/071620, 0.457 g, 2.28 mmol), HATU (0.940 g, 2.47 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (0.997 mL, 5.71 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 포화 수성 NH₄Cl (10 mL)로 켄칭하고, 물 (50 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 포화 수성 NH₄Cl (2 x 40 mL), 포화 수성 NaHCO₃ (50 mL), 및 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 (40 g) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 EtOAc/헥산 (25분에 걸쳐 0-60% 구배)로 용리시키면서 정제하여 메틸 (1R,3S,4R)-4-((3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌-3-카르보닐)-3-메틸시클로헥산-1-카르복실레이트를 수득하였다.

상기 중간체에 THF (8 mL), 물 (2.5 mL), MeOH (2.5 mL) 및 LiOH 수화물 (0.798 g, 19.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 1 N 수성 HCl을 사용하여 pH 1로 산성화시키고, EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 건조 (Na₂SO₄)시키고, 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 SFC 정제 (칼럼: 키랄 IC (4.6 x 25 cm, 5 마이크로미터); 칼럼 온도 40℃; CO₂ 유량: 3 mL/분; 공용매: MeOH 중 0.1 NH₄OH, 유량 3 mL/분; 주입 부피: 10 mL)로 처리하여 (1R,3S,4R)-4-((3aR,9bR)-8-플루오로-7-(퍼플루오로프로판-2-일)-9b-(페닐술포닐)-2,3,3a,4,5,9b-헥사히드로-1H-벤조[e]인돌-3-카르보닐)-3-메틸시클로헥산-1-카르복실산 (730 mg, 58% 수율, 98-99% 순도)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, 메탄올-d₄) δ 7.76 (d, J=13.1 Hz, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 1H), 7.48 - 7.21 (m, 5H), 4.84 - 4.77 (m, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 2.80 - 2.67 (m, 2H), 2.61 - 2.53 (m, 2H), 2.50 - 2.42 (m, 2H), 2.09 - 2.01 (m, 1H), 2.00 - 1.91 (m, 2H), 1.85 - 1.75 (m, 2H), 1.65 - 1.48 (m, 2H), 1.35 - 1.27 (m, 1H), 1.14 - 1.09 (m, 3H).

LCMS m/z (M+H)⁺ 668.3. HPLC (12분 구배 95:5 물/MeCN에서 5:95 물/MeCN까지, 0.05% TFA 포함; 유량 1 mL/분) t_R 10.45분, 99% 순도 (에이스 유코어 슈퍼(ACE UCore Super) C₁₈ 2.5 μm, 3.0x125 mm ), t_R 9.62분, 순도 98.2% (에이스 유코어 슈퍼HexPh 2.5 μm, 3.0x125 mm). 화합물의 절대 입체화학을 FLACK 방법을 사용하여 이상 분산 신호로부터 단결정 X선 분석에 기초하여 결정하였다.

일반 RORγ Gal4 리포터 검정

RORγ에 대한 잠재적 리간드의 역 효능제 활성을 Jurkat 세포에서 Gal4-루시페라제 리포터 검정에서의 발광의 억제에 의해 측정하였다.

RORγ 수용체를 안정하게 과다발현하는 Jurkat 세포인 pEx/Gal/hRORγ CLBD/HYG pG5luc/blast를 384-웰 고체 백색 세포 배양 플레이트 (퍼킨 엘머 #6007899) 내에 10,000개 세포/웰의 농도로 0.1% BSA, 100X HEPES (깁코(Gibco) 15360-080), 100 mM 피루브산나트륨 (깁코 11360-040), 50 mg/mL 히그로마이신 B (인비트로젠(Invitrogen) 10687-010) 및 10 mg/mL 블라스티시딘 (인비트로젠 R210-01)을 함유하는 검정 완충제 RPMI 1640 (깁코 11875-085 1L) 중에 플레이팅하였다. 40 μM 내지 0.67 nM 범위의 최종 농도를 갖는 3배 연속 희석물로 100 nL의 시험 화합물을 세포에 첨가하고, 이어서 이를 밤새 인큐베이션하였다.

다음날, 세포를 스테디-글로(Steady-Glo) 루시페라제 검정 시스템 (프로메가(Promega) 카탈로그 번호 EZ550) 10 μL로 용해시키고, 즉시 분석하였다. IC₅₀ 값을 결정하였다. IC₅₀ 값은 루시페라제 활성을 50%만큼 감소시키기 위해 필요한 시험 화합물의 농도로서 정의되며, 4 파라미터 로지스틱 방정식을 사용하여 계산하여 정규화된 데이터에 피팅하였다.

RORγ Gal4 리포터 검정에서의 화합물 1 및 참조 화합물 A에 대한 IC₅₀ 값을 하기에 제공한다. 화합물 A는 미국 특허 번호 9,815,859에 개시되고 청구되어 있다.

래트 또는 인간 시토졸 인큐베이션에서의 글루타티온 접합체 형성에 대한 검정

화합물 A 및 화합물 1을 10 μM의 농도로 인산칼륨 완충제 (50 mM, pH 8.5) 1 mL 중에서 래트 또는 인간 간 시토졸 (3-5 mg/mL) (수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 래트 간 시토졸, 로트 BIM, 바이오레클레메이션(Bioreclamation) IVT로부터 구입 n= 100, 또는 혼합 성별 풀, 로트 452115, 코닝(Corning)으로부터 구입 n= 150)과 함께 인큐베이션하였다. 글루타티온 (GSH) (5 mM)을 첨가하여 반응 (n= 2, 총 부피= 1000 μL)을 개시하고, 써모믹서에서 37℃에서 인큐베이션하였다. 0 및 60분에, 반응 혼합물의 분취물 (100 μL)을 수집하고, 2 부피의 아세토니트릴을 첨가함으로써 반응을 종결시켰다. 이어서, 밀리포어 시그마(Millipore Sigma) (매사추세츠, BA) 멀티스크린 솔비너트(Multiscreen Solvinert) 필터 플레이트를 사용하여 2000 rpm에서 5분 동안 원심분리 (에펜도르프(Eppendorf) 5810 R, 독일 함부르크)에 의해 단백질을 제거하였다. 여과물을 96-웰 플레이트에서 수집하고, 고해상도 벨로스 LTQ-오비트랩(Velos LTQ-Orbitrap) (LC-UV/MS) 시스템에 의해 분석하였다. UV 흡광도를 220-600 nm에서 수집하였다. GSH 접합체 확인은 관찰된 정확한 질량을 기준으로 하였으며, MS 단편화 패턴을 대등한 조건 하에 수득된 모체의 패턴과 비교하여, 모 화합물 및 GSH 접합체에 대한 피크 면적을 계산하였다.

두 화합물로부터의 GSH 접합체의 형성의 정도를 하기에 제시한다. 항목은 260-280 nm에서 모 화합물에 대비하여 계산된 UV 피크 면적을 나타낸다. 괄호 안의 데이터는 2회 실험의 평균을 나타낸다.

화합물 구조

화합물 1은 시험관내 실험을 기반으로 GSH 부가물을 형성하지 않는 것으로 밝혀졌다.

Claims (5)

1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
   

   

   .
2. 하기 화학식 (I)의 화합물:
   

   

   .
3. 제1항에 따른 화합물 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
4. 대상체에게 치료 유효량의 제1항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 자가면역 질환 또는 장애, 천식, 알레르기성 질환 또는 장애, 대사 질환 또는 장애, 및 암으로부터 선택되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
5. 제4항에 있어서, 자가면역 질환 또는 장애가 건선, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 결장염, 급성 이식편-대-숙주 질환, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 쇼그렌 증후군 및 다발성 경화증으로부터 선택되는 것인 방법.