KR20200133541A - 워터코인 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
워터코인 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 항암용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 워터코인 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 항암보조제 및 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
본 발명에 따른 워터코인 추출물은 독성 부작용 없이 암세포의 성장 및 증식을 효과적으로 억제할 수 있는바, 암 치료, 예방 또는 개선을 위한 약학적 조성물, 항암보조제 및 건강기능식품 조성물 등으로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 워터코인 추출물은 독성 부작용 없이 암세포의 성장 및 증식을 효과적으로 억제할 수 있는바, 암 치료, 예방 또는 개선을 위한 약학적 조성물, 항암보조제 및 건강기능식품 조성물 등으로 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 항암용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 워터코인 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 항암보조제 및 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
현대화가 가속화됨에 따라 최근 우리나라의 식생활은 서구적으로 변해가고 있으며, 의식 수준이 높아지면서 더 나은 삶을 영위하기 위해 현대인들은 이전보다 더 많은 양의 업무를 처리하고 있으며 다양한 경로로 스트레스를 받고 있다. 이에 따라 질병 발생 양식과 사망원인 등이 예전과는 다른 양상을 나타내는 등 많은 부작용이 생겨나고 있는 실정이다. 통계청이 발표한 사망원인 통계조사에 따르면 암은 2010 우리나라 인구 10만명 당 사망률은 1444명으로 사망원인 1위를 기록하고 있으며 이는 계속 증가하는 추세이다. 종류별로는 폐암이 가장 많았고, 위암, 간암, 대장암, 췌장암 등이 뒤를 잇고 있다.
암이란 다양한 원인에 의해 세포의 분열과 사멸 간의 균형이 파괴되어 계속적인 분열과 증식에 의해 발생하는 비정상적인 세포의 집단을 의미하며, 종양 또는 신생물이라고도 한다. 일반적으로 장기, 백혈구, 뼈, 림프절 등을 포함한 100여 가지 이상의 신체 여러 부위에 발병하며, 주변조직으로 침윤하는 현상과 다른 기관으로 이동하는 전이를 통해 심각한 증상으로 발전한다(WHO, 2006). 암 발생의 원인으로는 화학물질, 바이러스, 세균, 전리 방사선 등의 환경적 또는 외적 요인과 선천성 유전자 변이 등의 내적 요인을 들 수 있다(Klaunig & Kamendulis, Annu Rev Pharmacol Toxicol 2004, 44:239-267).
이와 같은 암을 정복하기 위해 세포주기나 세포사멸(apoptosis)의 조절과 발암유전자나 암 억제 유전자들을 포함한 새로운 표적을 모색함에 있어서 눈에 띄는 발전을 거듭해 왔음에도 불구하고 암의 발생률은 계속적으로 증가하고 있다. 현재 암환자의 치료법은 외과적 수술, 방사선 치료, 강한 세포 독성을 보이는 항암물질 투여에 의한 화학요법에 의존하고 있다. 오늘날에는 약 60여종의 다양한 항암제가 사용되고 있으며, 최근 암 발생 및 암 세포의 특성에 관한 지식이 많이 알려짐에 따라, 새로운 항암제 개발에 관한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 항암 화학치료에 있어 많은 환자들은 항암제의 부작용에 의하여 고통을 받고 있으며, 특히 항암제의 독성으로 인하여 제한적인 투여가 이루어지고 있다. 임상에서 사용되고 있는 항암물질은 암세포뿐만 아니라 정상세포에도 영향을 미치며 투여회수가 반복되면서 치료에 실패하는 등 부작용 및 항암제 내성과 같은 문제점을 가지고 있다. 암 자체의 다양성 및 발병기전의 다양화로 인해 야기되는 기존항암제의 부작용을 극복할 수 있는 새로운 형태의 항암제 치료물질 연구가 진행되고 있다.
한편, 워터코인은 미나리과 피막이속에 속하는 여러해살이풀로서, 북아메리카, 남아메리카 일부 지역 및 전 세계적으로 분포하며 연못이나 호수, 강과 습지 등에서 자라는 수생식물이다. Water Pennywort, Dollarweed, Marshflower 등 여러 가지 이름으로 불리며 우리나라에서는 정식 명칭은 없으나 물동전으로 불리기도 한다.
전술한 기술적 배경하에서, 본 발명자들은 항암 효능을 가지는 천연 추출물에 대해 예의 연구하던 중, 워터코인 추출물이 정상세포에는 영향을 주지 않으면서 암세포의 성장 및 증식을 효과적으로 억제함을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서는 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 항암보조제 및 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 상기 과제를 해결하기 위하여, 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 워터코인 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 항암보조제를 제공한다.
또한, 본 발명은 워터코인 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 워터코인 추출물은 독성 부작용 없이 암세포의 성장 및 증식을 효과적으로 억제할 수 있는바, 암 치료, 예방 또는 개선을 위한 약학적 조성물, 항암보조제 및 건강기능식품 조성물 등으로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 마우스의 섬유아세포에서 얻은 세포주인 noncancerous NIH3T3 세포와 마우스의 흑색종세포주인 B16F10에 워터코인 추출물을 140 ㎍/mL로 48시간 동안 처리한 후, 세포성장 변화를 현미경으로 관찰한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 noncancerous NIH3T3, B16F10 (흑색종), CT26 (대장암), MCF7 (유방암), A549 (폐암), AGS (위암) 세포주에 워터코인 추출물을 140 ㎍/mL로 24, 48, 72, 96시간 동안 처리한 후 세포 성장률을 측정한 결과를 나타낸 것이다(*, p<0.05, **, p<0.01).
도 3은 B16F10 흑색종 암세포에 워터코인 추출물을 140 ㎍/mL로 처리하고 72시간 배양 후 세포주기를 관찰한 결과를 나타낸 것이다(*, p<0.05).
도 4는 워터코인 추출물의 암 치료 효과를 확인하기 위하여, B16F10 흑색종 암세포 또는 B16F10 암세포와 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 동시에 마우스 복강 내로 주입하고, 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 도면이다(흰색 화살표: 종양).
도 5는 워터코인 추출물의 암 치료 효과를 확인하기 위하여, B16F10 흑색종 암세포 또는 B16F10 암세포와 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 동시에 마우스 복강 내로 주입하고, 7일 후에 마우스의 복강에 발생한 종양의 무게를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 워터코인 추출물의 암 예방 효과를 확인하기 위하여, 마우스 복강내로 B16F10 흑색종 암세포(2×106)만 주입한 대조군과, 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 암세포 주입 7일 전부터 2일 간격으로 주입한 후 B16F10 암세포를 주입한 워터코인 처리군에 대하여, 암세포 주입 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 도면이다(흰색 화살표: 종양).
도 7은 워터코인 추출물의 암 예방 효과를 확인하기 위하여, 마우스 복강내로 B16F10 흑색종 암세포(2×106)만 주입한 대조군과, 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 암세포 주입 7일 전부터 2일 간격으로 주입한 후 B16F10 암세포를 주입한 워터코인 처리군에 대하여, 암세포 주입 7일 후에 마우스의 복강에 발생한 종양의 무게를 측정한 결과를 나타낸 것이다( **, p<0.01).
도 2는 noncancerous NIH3T3, B16F10 (흑색종), CT26 (대장암), MCF7 (유방암), A549 (폐암), AGS (위암) 세포주에 워터코인 추출물을 140 ㎍/mL로 24, 48, 72, 96시간 동안 처리한 후 세포 성장률을 측정한 결과를 나타낸 것이다(*, p<0.05, **, p<0.01).
도 3은 B16F10 흑색종 암세포에 워터코인 추출물을 140 ㎍/mL로 처리하고 72시간 배양 후 세포주기를 관찰한 결과를 나타낸 것이다(*, p<0.05).
도 4는 워터코인 추출물의 암 치료 효과를 확인하기 위하여, B16F10 흑색종 암세포 또는 B16F10 암세포와 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 동시에 마우스 복강 내로 주입하고, 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 도면이다(흰색 화살표: 종양).
도 5는 워터코인 추출물의 암 치료 효과를 확인하기 위하여, B16F10 흑색종 암세포 또는 B16F10 암세포와 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 동시에 마우스 복강 내로 주입하고, 7일 후에 마우스의 복강에 발생한 종양의 무게를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 워터코인 추출물의 암 예방 효과를 확인하기 위하여, 마우스 복강내로 B16F10 흑색종 암세포(2×106)만 주입한 대조군과, 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 암세포 주입 7일 전부터 2일 간격으로 주입한 후 B16F10 암세포를 주입한 워터코인 처리군에 대하여, 암세포 주입 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 도면이다(흰색 화살표: 종양).
도 7은 워터코인 추출물의 암 예방 효과를 확인하기 위하여, 마우스 복강내로 B16F10 흑색종 암세포(2×106)만 주입한 대조군과, 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 암세포 주입 7일 전부터 2일 간격으로 주입한 후 B16F10 암세포를 주입한 워터코인 처리군에 대하여, 암세포 주입 7일 후에 마우스의 복강에 발생한 종양의 무게를 측정한 결과를 나타낸 것이다( **, p<0.01).
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본 발명자들은 암 세포의 암세포의 성장 및 증식을 효과적으로 억제할 수 있는 물질을 찾기 위해 예의 연구 노력한 결과, 워터코인 추출물이 정상세포에 영향을 끼치지 않으면서 다양한 암 세포들의 성장 및 증식을 저해하는 효과가 우수함을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 워터코인은 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은 워터코인의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명의 상기 워터코인의 추출물에 있어서, 상기 워터코인을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 워터코인 추출물은 워터코인을 건조 및 분쇄한 분쇄물을 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득될 수 있으며, 바람직하게는 열수 추출법에 의하여 추출될 수 있다.
상기 열수 추출법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 본 발명의 상기 워터코인 추출물은 워터코인을 세척 및 건조하여 이물질을 제거하고, 상기 워터코인을 분쇄하여 얻은 건조물을 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출할 수 있다. 이때, 추출 용매는 워터코인 건조 중량의 2 배 내지 20 배로 하는 것이 바람직하다. 일례로 워터코인을 분말로 파쇄하여 혼합한 후 추출 용기에 넣고 물, 또는 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매를 넣고 38℃ 내지 120℃에서 추출하여 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 추출 이후에 농축 또는 동결 건조 등의 방법을 추가적으로 수행할 수 있다.
또한, 상기 워터코인 추출물은 워터코인의 잎, 줄기 또는 이들의 혼합물로터 추출하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 워터코인 추출물은 0.01 내지 100 mg/ml의 농도로 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 워터코인을 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 디클로로메탄 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명은 워터코인 추출물 또는 이의 분획물의 암 예방 또는 치료 용도를 처음으로 규명한 것으로, 본 발명의 워터코인 추출물 또는 이의 분획물은 암세포의 성장 및 증식 억제 효과가 우수한 것으로 확인되었다.
이때, 상기 암은 흑색종, 대장암, 유방암, 폐암, 위암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암, 전립선암, 뇌종양, 두경부암종, 골수종, 백혈병, 림프종, 췌장암, 비소세포성폐암, 간암, 식도암, 소장암, 항문부근암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병, 방광암, 신장암, 수뇨관암, 신장세포암종, 신장골반암종, 골암, 피부암, 두부암, 경부암, 피부흑색종, 안구내흑색종, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직육종, 요도암, 음경암, 중추신경계(central nervous system; CNS) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수종양, 뇌간신경 교종 및 뇌하수체선종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 바람직하게는 흑색종, 대장암, 유방암, 폐암 및 위암으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 암의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 상기 약학적 조성물의 투여에 의해 암의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치료"란 본 발명의 워터코인을 포함하는 조성물의 투여로 암세포의 사멸 또는 암의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명에서 유효성분과 결합하여 사용된 "치료학적으로 유효한 양"이란 용어는 대상 질환을 예방 또는 치료하는데 유효한 워터코인 추출물의 약학적으로 허용가능한 염의 양을 의미하며, 본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack Publishing Co.에 기술되어있다.
본 발명의 약학조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 암의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산 알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효성분으로서 워터코인 추출물 이외에 공지된 항암제를 추가로 포함할 수 있고, 이들 질환의 치료를 위해 공지된 다른 치료와 병용될 수 있다. 다른 치료에는 화학요법, 방사선치료, 호르몬 치료, 골수 이식, 줄기-세포 대체치료, 다른 생물학적 치료, 면역치료 등이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물에 포함될 수 있는 항암제의 예시에는 DNA 알킬화제(DNA alkylating agents)로 메클로에타민(mechloethamine), 클로람부칠(chlorambucil), 페닐알라닌(phenylalanine), 무스타드(mustard), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 이포스파미드(ifosfamide), 카르무스틴(carmustine: BCNU), 로무스틴(lomustine: CCNU), 스트렙토조토신(streptozotocin), 부술판(busulfan), 티오테파(thiotepa), 시스플라틴(cisplatin) 및 카보플라틴(carboplatin); 항암 항생제(anti-cancer antibiotics)로 닥티노마이신(dactinomycin: actinomycin D), 독소루비신(doxorubicin: adriamycin), 다우노루비신(daunorubicin), 이다루비신(idarubicin), 미토크산트론(mitoxantrone), 플리카마이신(plicamycin), 마이토마이신 C(mitomycin C) 및 블레오마이신(bleomycin); 및 식물 알카로이드(plant alkaloids)로 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastine), 파클리탁셀(paclitaxel), 도세탁셀(docetaxel), 에토포시드(etoposide), 테니포시드(teniposide), 토포테칸(topotecan) 및 이리도테칸(iridotecan) 등이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 워터코인 추출물 또는 이의 분획물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 상기 암이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함한 모든 동물을 의미하고, 본 발명의 약학적 조성물을 개체에게 투여함으로써 상기 질환들을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 기존의 치료제와 병행하여 투여될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "투여"란, 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 주사 제형으로 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다. 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다. 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제, 피하 주사제, 피내주사제, 근육 주사제, 점적 주사제 등이다. 주사제는 생리식염액, 링겔액 등의 수성용제, 식물유, 고급 지방산 에스테르(예, 올레인산에칠 등), 알코올 류(예, 에탄올, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 비수성 용제 등을 이용하여 제조할 수 있고, 변질 방지를 위한 안정화제(예, 아스코르빈산, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨, BHA, 토코페롤, EDTA 등), 유화제, pH 조절을 위한 완충제, 미생물 발육을 저지하기 위한 보존제 (예, 질산페닐수은, 치메로살, 염화벤잘코늄, 페놀, 크레솔, 벤질알코올 등) 등의 약학적 담체를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항암보조제를 제공한다.
또한, 본 발명은 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물을 식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 워터코인 추출물 또는 이의 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있으며, 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 통상의 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 항암제의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
또한, 본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 건강식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 워터코인 추출물을 활성성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명의 워터코인 추출물은 천연 식물을 원료로 하므로 약학적 조성물 또는 식품 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로, 안전하게 약학적 조성물 및 건강기능식품에 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
이하에서는 바람직한 실시예 등을 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예 등은 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이에 의하여 제한되지 않는다는 것은 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 자명할 것이다.
실시예
1.
워터코인
추출물의 제조
건조된 워터코인 잎과 줄기 15 g에 150 mL의 증류수를 가하여, 고압멸균기(JSAT-65(JSR), ㈜제이에스리서치, 공주, 대한민국)에서 121 ℃의 온도로 20분 동안 열수 추출하였다.
상기 추출된 워터코인 추출물을 세포 스트레이너(40 ㎛, 코닝, 뉴욕, 미국)를 이용하여 필터링하고, 동결건조기에서 건조될 때까지 농축하였다. 상기 동결 건조된 워터코인 추출물 분말(220 ㎎)을 3 ㎖의 증류수에 녹이고, 시린지 필터(0.20 ㎛, 현대마이크로, 안성, 대한민국)를 통해 필터링한 다음, 위와 동일한 방식으로 고압멸균기로 멸균을 하고 사용하기 전까지 -20℃에 보관하였다.
실험예
1.
워터코인
추출물 처리에 의한 세포성장변화 확인
상기 실시예 1에서 제조한 워터코인 추출물 처리에 의한 세포성장변화를 관찰하기 위한 실험을 진행하였다. 먼저, 마우스의 섬유아세포에서 얻은 세포주인 noncancerous NIH3T3 세포와 마우스 흑색종 세포인 B16F10 세포를 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) 배지에 10% fetal bovine serum과 1% penicillin/streptomycin을 섞어 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였으며, 상기 세포들에 워터코인 추출물을 1/500의 농도(140 ㎍/mL)로 48시간 동안 처리한 후, 세포성장 변화를 현미경으로 관찰하고 그 결과를 하기 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타난 바와 같이, NIH3T3 세포의 경우 워터코인 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교시, 워터코인 추출물 처리군의 경우에도 세포 성장의 변화가 관찰되지 않은 반면, B16F10 흑색종 세포의 경우 워터코인 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교시, 워터코인 추출물을 처리할 경우 세포의 성장이 현저하게 감소하는 것으로 확인되었다. 이를 통해 본 발명의 워터코인 추출물이 정상세포에서는 독성을 나타내지 않으면서, 암세포에 특이적으로 작용한다는 것을 알 수 있었다.
실험예
2.
워터코인
추출물 처리에 의한 세포성장률 확인
상기 실시예 1에서 제조한 워터코인 추출물 처리에 의한 세포성장률을 확인하기 위한 실험을 진행하였다. 먼저, 마우스의 섬유아세포에서 얻은 세포주인 noncancerous NIH3T3 세포, 마우스 흑색종 세포인 B16F10 세포, 마우스 대장암 세포인 CT26 세포, 인간 유방암 세포인 MCF7 세포를 DMEM 배지에 10% fetal bovine serum과 1% penicillin/streptomycin을 섞어 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 인간 폐암 세포인 A549와 인간 위암 세포인 AGS 세포는 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 배지에 10% fetal bovine serum과 1% penicillin/streptomycin을 섞어 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였으며, 상기 세포들에 워터코인 추출물을 1/500의 농도(140 ㎍/mL)로 처리한 후, 24, 48, 72, 96시간 마다 세포수 측정을 통해 세포 성장률을 측정하고 그 결과를 하기 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 정상 세포의 경우 워터코인 추출물 처리시 세포성장의 차이가 5.3%로 큰 변화가 없는 반면, 실험에 사용된 암세포들의 경우 워터코인 추출물 처리시 정상세포에 비해 마우스 흑색종 세포 B16F10은 62.6%, 마우스 대장암 세포 CT26은 22.3%, 인간 폐암 세포 A549는 33.1%, 인간 위암 세포 AGS는 84.4%, 그리고 인간 유방암 세포 MCF7는 62.3%의 수치로, 세포 성장이 유의적으로 감소하는 것으로 나타났으며, 특히, 흑색종, 유방암 및 위암 세포에서는 세포 성장이 현저하게 감소하는 것으로 나타났다.
실험예
3.
워터코인
추출물 처리에 의한 암세포의 세포성장주기 확인
상기 실시예 1에서 제조한 워터코인 추출물 처리에 의한 암세포의 세포성장주기를 확인하기 위한 실험을 진행하였다. 먼저, B16F10 세포에 워터코인 추출물을 처리하지 않은 그룹과 워터코인 추출물을 1/500의 농도(140 ㎍/mL)로 처리한 그룹을 72시간 배양하고, 70% Ethanol로 세포를 고정한 후, Propidium Iodide (PI)로 Staining을 통해 세포의 성장주기를 확인하였으며, 그 결과를 하기 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 워터코인을 처리한 그룹의 경우, G0/G1 phase에서 약 3.6% arrest가 일어난다는 것을 알 수 있었다.
실험예
4. 동물실험을 통한
워터코인
추출물의 암 치료 효과 확인
상기 실시예 1에서 제조한 워터코인 추출물 처리에 의한 암 치료 효과를 확인하기 위한 동물실험을 진행하였다. 먼저, B16F10 흑색종세포주를 DMEM 배지에 10% fetal bovine serum을 섞어 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였으며, 2x106의 세포를 200ul Phosphate-Buffered Saline (PBS) 버퍼에 풀어서 마우스 복강으로 주입하였다.
도 4 및 도 5는 워터코인 추출물의 암 치료 효과를 확인하기 위하여, B16F10 흑색종 암세포 또는 B16F10 암세포와 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 동시에 마우스 복강 내로 주입하고, 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 결과(도 4) 및 발생한 종양의 무게를 측정한 결과(도 5)를 나타낸 것이다.
측정 결과, 도 4 및 도 5에 나타난 바와 같이, 흑색종 세포주만 주입한 마우스 복강에서는 암세포가 발생 및 증식되어 있는 것이 쉽게 관찰되는 반면, 본 발명에 따른 워터코인 추출물을 처리할 경우에는 발생하는 암세포의 양이 현저하게 감소되거나 암이 생성되지 않는다는 것을 알 수 있었다.
실험예
5. 동물실험을 통한
워터코인
추출물의 암 예방 효과 확인
상기 실시예 1에서 제조한 워터코인 추출물 처리에 의한 암 예방 효과를 확인하기 위한 동물실험을 진행하였다. 먼저, B16F10 흑색종세포주를 DMEM 배지에 10% fetal bovine serum을 섞어 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였으며, 2x106의 세포를 200ul Phosphate-Buffered Saline (PBS) 버퍼에 풀어서 마우스 복강으로 주입하였다.
도 6 및 도 7은 워터코인 추출물의 암 예방 효과를 확인하기 위하여, 마우스 복강내로 B16F10 흑색종 암세포(2×106)만 주입한 대조군과, 워터코인 추출물 (10 mg/ml)을 암세포 주입 7일 전부터 2일 간격으로 주입한 후 B16F10 암세포를 주입한 워터코인 처리군에 대하여, 암세포 주입 7일 후에 마우스 복강 내 암 발생 및 증식 정도를 관찰한 결과(도 6) 및 발생한 종양의 무게를 측정한 결과(도 7)를 나타낸 것이다.
측정 결과, 도 6 및 도 7에 나타난 바와 같이, 흑색종 세포주만 주입한 마우스 복강에서는 암세포가 발생 및 증식되어 있는 것이 쉽게 관찰되는 반면, 본 발명에 따른 워터코인 추출물을 처리할 경우에는 발생하는 암세포의 양이 현저하게 감소되거나 암이 생성되지 않는다는 것을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (7)
- 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 열수 추출한 것인 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 추출물은 워터코인의 잎, 줄기 또는 이들의 혼합물로부터 추출한 것인 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 암은 흑색종, 대장암, 유방암, 폐암, 위암, 자궁암, 자궁경부암, 난소암, 전립선암, 뇌종양, 두경부암종, 골수종, 백혈병, 림프종, 췌장암, 비소세포성폐암, 간암, 식도암, 소장암, 항문부근암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병, 방광암, 신장암, 수뇨관암, 신장세포암종, 신장골반암종, 골암, 피부암, 두부암, 경부암, 피부흑색종, 안구내흑색종, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직육종, 요도암, 음경암, 중추신경계(central nervous system; CNS) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수종양, 뇌간신경 교종 및 뇌하수체선종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 추출물이 0.01 내지 100 mg/ml의 농도로 포함되는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항암보조제.
- 워터코인(Hydrocotyle Umbellata) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| CN105816536A (zh) * | 2016-03-28 | 2016-08-03 | 济南新时代医药科技有限公司 | 天胡荽愈肝片在制备抑制脑瘤细胞sf767细胞增殖药物中的应用 |
-
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Phytochemistry 73 (2012) 142-147* * |
| Planta Med 2010* * |
| 하늘지기, "피막이(Hydrocotyle sibthorpioides Lam.)", 네이버 블로그, 2013* * |
Also Published As
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|---|---|
| KR102223039B1 (ko) | 2021-03-03 |
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