KR20200076731A - 항-il23 특이적 항체로 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 유효한 방법 - Google Patents

항-il23 특이적 항체로 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 유효한 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20200076731A
KR20200076731A KR1020207015671A KR20207015671A KR20200076731A KR 20200076731 A KR20200076731 A KR 20200076731A KR 1020207015671 A KR1020207015671 A KR 1020207015671A KR 20207015671 A KR20207015671 A KR 20207015671A KR 20200076731 A KR20200076731 A KR 20200076731A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
antibody
ser
treatment
patient
gly
Prior art date
Application number
KR1020207015671A
Other languages
English (en)
Inventor
엘리자베스 시아
릴리안 수
Original Assignee
얀센 바이오테크 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 얀센 바이오테크 인코포레이티드 filed Critical 얀센 바이오테크 인코포레이티드
Publication of KR20200076731A publication Critical patent/KR20200076731A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H50/00—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics
    • G16H50/30—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics for calculating health indices; for individual health risk assessment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A90/00—Technologies having an indirect contribution to adaptation to climate change
    • Y02A90/10—Information and communication technologies [ICT] supporting adaptation to climate change, e.g. for weather forecasting or climate simulation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Databases & Information Systems (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Primary Health Care (AREA)
  • Data Mining & Analysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 IL-23 특이적 항체, 예를 들어, 구셀쿠맙을 투여함으로써 환자에서 건선성 관절염을 치료하며, 초기 치료 후 16 주, 24 주, 32 주, 40 주, 및 48 주에 측정되는 바와 같이 환자가 상당한 ACR20/50/70, PASI70/90/100, MDA, HAQ-DI, SF-36 PCS, MCS, LEI/지염, PASDAS, GRACE, mCPDAI, DAPSA, 또는 RAPID3 개선을 달성하는 방법.

Description

항-IL23 특이적 항체로 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 유효한 방법
본 발명은 인간 IL-23 단백질에 결합하는 항체로 건선성 관절염을 치료하는 방법에 관한 것이다. 특히 본 발명은, 건선성 관절염을 앓는 환자에게 안전하고 유효한, 항-IL-23 특이적 항체, 및 항체, 예를 들어, 구셀쿠맙의 특이적 약제학적 조성물을 투여하는 방법에 관한 것이다.
서열 목록
본 출원은 ASCII 서식으로 전자적으로 제출된 서열 목록을 포함하며, 이는 본 명세서에 전체적으로 참고로 포함된다. 2018년 11월 5일자로 생성된 상기 ASCII 사본은 파일명이 JBI5144WOPCT11SEQLIST.txt이며, 크기가 79,736 바이트이다.
인터류킨 (IL)-12는 대략적인 분자량에 따라 p35 및 p40으로 명명된 2개의 이황화물-연결된 글리코실화 단백질 하위단위로 이루어진 분비형 이종이량체성 사이토카인이다. IL-12는 항원-제시 세포에 의해 주로 생성되며, T 세포 또는 자연 살해 (NK) 세포의 표면 상에서 발현되는 2-사슬 수용체 복합체에 결합함으로써 세포-매개 면역을 유도한다. IL-12 수용체 베타-1 (IL-12Rβ1) 사슬은 IL-12의 p40 하위단위에 결합하여, IL-12와 이의 수용체 사이의 주요 상호작용을 제공한다. 그러나, 세포내 신호전달(예를 들어, STAT4 인산화) 및 수용체-보유 세포의 활성화를 부여하는 것은 제2 수용체 사슬 IL-12Rβ2의 IL-12p35 라이게이션이다. 항원 제시를 동반한 IL-12 신호전달은 인터페론 감마(IFNγ) 생성을 특징으로 하는, T 헬퍼 1(Th1) 표현형으로의 T 세포 분화를 일으키는 것으로 생각된다. Th1 세포는 일부 세포내 병원체에 대한 면역을 촉진하고, 보체-고정(complement-fixing) 항체 동종형을 생성하며, 종양 면역감시(immunosurveillance)에 기여하는 것으로 여겨진다. 따라서, IL-12는 숙주 방어 면역 기전의 중요한 성분인 것으로 생각된다.
IL-12의 p40 단백질 하위단위는 또한 p19로 표기된 별개의 단백질 하위단위와 결합하여 신규한 사이토카인 IL-23을 형성할 수 있음이 밝혀졌다. IL-23은 또한 2-사슬 수용체 복합체를 통해 신호를 전달한다. p40 하위단위는 IL-12와 IL-23 사이에 공유되므로, 결론적으로 IL-12Rβ1 사슬이 또한 IL-12와 IL-23 사이에 공유된다. 그러나, IL-23 특이적 세포내 신호전달(예를 들어, STAT3 인산화) 및 T 세포에 의한 후속 IL-17 생성을 부여하는 것은 IL-23 수용체 복합체 IL-23R의 제2 성분의 IL-23p19 라이게이션이다. 2개의 사이토카인 사이의 구조적 유사성에도 불구하고, IL-23의 생물학적 기능은 IL-12의 것들과는 구별된다는 것이 최근의 연구에서 입증되었다.
항체에 의한 IL-12의 중화가 건선, 다발성 경화증(MS), 류마티스성 관절염, 염증성 장 질환, 인슐린-의존성(1형) 당뇨병, 및 포도막염의 동물 모델을 치료함에 있어서 유효하므로, IL-12 및 Th1 세포 집단의 비정상적인 조절은 많은 면역-매개 질환과 관련되어 왔다. 그러나, 이러한 연구는 공유된 p40 서브유닛을 표적으로 하므로, IL-12 및 IL-23 모두가 생체 내에서 중화되었다. 따라서, IL-12 또는 IL-23 중 하나가 질환을 매개하는지, 질환을 억제하기 위해 두 사이토카인 모두를 억제해야 하는지 여부는 불분명하였다. IL-23 억제가 항-IL-12p40 전략과 동등한 이점을 제공할 수 있다는 것이 연구에서 IL-23p19 결핍 마우스 또는 IL-23의 특이적 항체 중화를 통해 확인되었다. 그러므로, 면역-매개 질환에서 IL-23의 특이적 역할에 대한 증거가 증가하고 있다. 그렇다면 IL-12 경로의 억제 없이 IL-23을 중화시키는 것은 중요한 숙주 방어 면역 기전에 제한된 영향을 갖는 면역-매개 질환의 효과적인 치료를 제공할 수 있을 것이다. 이는 현재의 치료 옵션에 비해 상당한 개선을 나타낼 것이다.
건선은 건선 관절염(PsA), 우울증, 심혈관 질환, 고혈압, 비만, 당뇨병, 대사 증후군, 및 크론병(Crohn's disease)과 같은 상당한 합병증을 갖는 통상적인 만성 면역-매개 피부 장애이다. 판상 건선은 이 질환의 가장 흔한 형태이며, 은백색 인설로 덮여 있는 경계가 뚜렷한 홍반성 병변으로 나타난다. 판상은 가렵고, 고통스럽고, 종종 보기 흉하고 불능화되며, 상당한 비율의 건선 환자가 손/손발톱, 얼굴, 발, 및 외생식기 상에 판상을 갖는다. 이와 같이, 건선은 신체적 피부학적 증상을 넘어서 연장되고 일상 활동을 방해하는 신체적이고 정신사회적인 부담을 부과하는 것을 포함하여, 상당한 정도로 건강 관련 삶의 질(HRQoL)에 부정적인 영향을 미친다. 예를 들어, 건선은 가족, 배우자, 사회 및 직장 관계에 부정적인 영향을 줄 수 있으며, 더 높은 우울증 발병률 및 자살 경향의 증가와 관련이 있다.
건선성 관절염(PsA)은 지염, 골부착부염, 천장골염, 및/또는 관절 변형(joint deformity)을 포함하는 다양한 임상적 징후 및 방사선촬영 징후를 갖는, 관절 염증 및 건선을 특징으로 하는 다기관 질환이다. 불량하게 제어된 PsA와 관련된 기능 손상, 감소된 삶의 질, 및 증가된 건강-관리 자원 이용은 상당한 경제적 부담을 제공한다. 생물제제(예를 들어, 종양-괴사-인자[TNF]α 억제제, 우스테키누맙, 세쿠키누맙), 및 다른 제제(예를 들어, 아프레밀라스트)의 이용가능성에도 불구하고, 이종 질환 성분을 치료함에 있어서 높은 수준의 효능 및 안전성을 제공할 수 있는 새로운 PsA 요법에 대해 충족되지 않은 상당한 필요성이 존재한다.
건선 병변의 조직학적 특성은 비정상적인 각질형성세포 증식 및 분화뿐만 아니라 피부 침윤 및 CD3+ T 림프구와 수지상 세포의 공배치(co-localization)로 인해 두꺼워진 표피를 나타낸다. 건선의 병인이 잘 정의되어 있지는 않지만, 유전자 및 단백질 분석에 의하면 IL-12, IL-23 및 이들의 하류 분자가 건선 병변에서 과발현되며, 일부는 건선 질환의 중증도와 관련이 있을 수 있음이 밝혀졌다. 건선의 치료에 사용되는 일부 요법은 IL-12 및 IL-23 수준을 조절하며, 이는 이들의 효능에 기여하는 것으로 추정된다. Th1 및 Th17 세포는 혈관확장제, 화학유인물질의 생성 및 내피 세포에서의 부착 분자의 발현을 유도하는 이펙터 사이토카인을 생성할 수 있으며, 이는 결과적으로 단핵구 및 호중구 동원(recruitment), T 세포 침윤, 신혈관형성 및 각질형성세포 활성화 및 과형성을 촉진한다. 활성화된 각질형성세포는 호중구, 단핵구, T 세포 및 수지상 세포 수송(trafficking)을 촉진하는 화학유인물질 인자를 생성하여 염증 및 각질형성세포 과다증식의 주기를 확립할 수 있다.
건선의 병인의 규명은 종양 괴사 인자-알파(TNF-α), 인터류킨(IL)-12 및 IL-23 둘 모두, 및 가장 최근에는 IL-17 뿐만 아니라 IL-23 단독(구셀쿠맙을 사용한 1 상 및 2 상 임상 시험을 포함함)을 표적화하는 효과적인 생물학적 치료로 이어졌다. 구셀쿠맙(CNTO 1959로도 알려짐)은 IL-23의 p19 서브유닛에 결합하고 T 헬퍼(Th) 17 세포의 최종 분화에 필요한 IL-23의 세포내 및 하류 신호전달을 억제하는 완전 인간 IgG1 람다 단일클론 항체이다. IL-12/23 또는 하류 IL-17 또는 IL-17R을 표적으로 하는 생물제제(예를 들어, 우스테키누맙, 세쿠키누맙, 익세키주맙, 브로달루맙)는 2/3 상 건선/PsA 시험에서 강건한 효능을 일관되게 나타냈다.
제1 태양에서 본 발명은, 환자에게 항-IL-23 특이적 항체(IL-23p19 항체로도 지칭됨), 예를 들어, 구셀쿠맙을 피하 투여하며, 여기서 항-IL-23 특이적 항체는 초기 용량, 그로부터 4 주 후의 용량으로, 그리고 그 후로 매 8 주마다 1회의 투여 간격으로, 예를 들어, 0 주, 4 주, 8 주, 16 주, 24 주, 32 주, 40 주, 및 48 주에서의 용량으로 투여되는 단계를 포함하는, 환자에서 건선성 관절염을 치료하는 방법에 관한 것이다.
다른 태양에서, 본 발명의 방법에 사용되는 조성물은 항-IL-23 특이적 항체를 약 1.0 ㎍/ml 내지 약 1000 mg/ml, 구체적으로는 50 mg 또는 100 mg의 양으로 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 바람직한 실시 형태에서, 항-IL-23 특이적 항체는 100 mg/mL의 구셀쿠맙; 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물; 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80의 약제학적 조성물이며; 여기서 희석제는 표준 상태에서의 물이다.
본 발명의 방법의 실시 형태에서, PsA 환자는 24 주까지 위약에 비해 구셀쿠맙의 경우에 ACR20 반응의 상당한 개선(구셀쿠맙 대 위약-치료 환자의 58% 대 18.4%) 및 24 주까지 시간 경과에 따른 일관되게 더 높은 ACR50 및 ACR70 반응을 달성하였다.
본 발명의 다른 태양에서, 약제학적 조성물은 (i) 서열 번호 5, 서열 번호 20, 및 서열 번호 44의 중쇄 CDR 아미노산 서열; 및 (ii) 서열 번호 50, 서열 번호 56, 및 서열 번호 73의 경쇄 CDR 아미노산 서열을 포함하는 구셀쿠맙 CDR 서열을 갖는 100 mg/mL의 단리된 항-IL23 특이적 항체; 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물; 약제학적 조성물의 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80을 포함하며; 여기서 희석제는 표준 상태에서의 물이다.
본 발명의 방법의 다른 태양은 서열 번호 106의 구셀쿠맙 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 및 서열 번호 116의 구셀쿠맙 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 갖는 100 mg/mL의 단리된 항-IL-23 특이적 항체; 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물; 약제학적 조성물의 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80을 포함하며; 여기서 희석제는 표준 상태에서의 물인 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
도 1. 시험 연구의 개요를 나타낸다. 연구 약물로 44 주의 치료를 완료한 1 명의 환자가 추적 조사에 실패하였고, 56 주 추적 조사 방문에 참석하지 않았음에 유의한다.
도 2a 내지 도 2d. 치료 실패, 조기 종료, 및 누락된 데이터에 대해 NRI를 사용하여, 변형된 치료 의향(mITT/FAS) 집단에서, 시간 경과에 따른 ACR20(2A), ACR50(2B), ACR70(2C), 및 최소 질환 활성(minimal disease activity), MDA(2D) 반응을 달성하는 환자들의 비율을 나타낸다. P 값은 CMH 시험으로부터 유도되었다. 16 주에서의 ACR50(24 주 이외의 것), ACR70, 및 MDA에 대한 P 값을 사후 계산하였다. ACR20/50/70-미국 류마티스 학회(American College of Rheumatology) 20/50/70% 개선 = ACR 기준에 따른, 건선성 관절염의 징후 또는 증상의 20%, 50%, 및 70% 이상의 개선을 갖는 환자의 비율, CMH - 코크란-맨텔-헨첼(Cochran-Mantel-Haenszel), MDA - 최소 질환 활성, FAS - 전체 분석 세트, mITT - 변형된 치료 의향.
도 3a 내지 도 3j. 16 주 및 24 주에 MDA(3a) 및 VLDA(3b)를 달성하는 환자의 비율(전체 분석 세트; NRI) 및 질환 활성 상태를 달성하는 환자의 비율, 및 16 주 및 24 주에 PASDAS(3c, 3d), GRACE(3e, 3f), mCPDAI(3g, 3h), 및 DAPSA(3i, 3j) PsA-특이적 복합 종점에 대한 기준선으로부터의 평균 변화(전체 분석 세트; 누락된 데이터에 대해서는 마지막 관찰을 이월함)를 나타낸다. DAPSA = 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(Disease Activity Index for PSoriatic Arthritis), GRACE = 건선 및 건선성 관절염의 연구 및 평가 그룹(GRAppa) 복합 점수, mCPDAI = 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(modified Composite Psoriatic Disease Activity Index), MDA = 최소 질환 활성, NRI = 비반응자 귀속, PASDAS - 건선성 관절염 질환 활성 점수(Psoriatic ArthritiS Disease Activity Score), PsA = 건선성 관절염, VLDA = 매우 낮은 질환 활성
도 4a 내지 도 4d. 24 주에 PASDAS(4a), GRACE(4b), mCPDAI(4c), 및 DAPSA(4d) PsA-특이적 복합 종점에 따른 질환 활성 상태에 의한 SF-36 PCS 점수의 기준선으로부터의 평균 변화(전체 분석 세트 내의 구셀쿠맙-치료 환자; 누락된 데이터에 대해서는 마지막 관찰을 이월함)를 나타낸다. DAPSA = 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수, GRACE = 건선 및 건선성 관절염의 연구 및 평가 그룹(GRAppa) 복합 점수, mCPDAI = 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수, PASDAS = 건선성 관절염 질환 활성 점수, PCS = 신체적 요소 요약, PsA = 건선성 관절염, SF-36 = 36-항목 단축형 건강 조사
도 5a 내지 도 5j. MDA(5a) 및 VLDA(5b)를 달성하는 환자의 비율 및 질환 활성 상태를 달성하는 환자의 비율, 및 24 주 후에 PASDAS(5c, 5d), GRACE(5e, 5f), mCPDAI(5g, 5h), 및 DAPSA(5i, 5j) PsA-특이적 복합 종점에 대한 기준선으로부터의 평균 변화를 나타낸다(24 주 후의 효능 분석 세트; 관찰된 데이터). 동일한 집단에서의 24 주 관찰 데이터가 참조로서 포함된다. DAPSA = 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수, GRACE = 건선 및 건선성 관절염의 연구 및 평가 그룹(GRAppa) 복합 점수, mCPDAI = 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수, MDA = 최소 질환 활성, PASDAS - 건선성 관절염 질환 활성 점수, PsA = 건선성 관절염, VLDA = 매우 낮은 질환 활성
도 6a 내지 도 6c. PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA PsA-특이적 복합 종점에 따른 24 주에 검출된 구셀쿠맙 치료 효과를 평가하는 비교 통계를 나타낸다: 표준화된 평균 차이(6a), 효과 크기(6b), 및 표준화된 반응 평균(6c)(전체 분석 세트; 누락된 데이터에 대해서는 마지막 관찰을 이월함). CI = 신뢰 구간, DAPSA = 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수, GRACE = 건선 및 건선성 관절염의 연구 및 평가 그룹(GRAppa) 복합 점수, mCPDAI = 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수, PASDAS - 건선성 관절염 질환 활성 점수, PsA = 건선성 관절염.
도 7a 및 도 7b. 시간 경과에 따라 지염 해소를 갖는 환자의 비율을 나타낸다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 건선의 치료 방법은 단리된 재조합 및/또는 합성 항-IL- 23 특이적 인간 항체 및 진단 및 치료 조성물을 투여하는 단계, 방법, 및 장치를 포함한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "항-IL-23 특이적 항체", "항-IL-23 항체", "항체 부분", 또는 "항체 단편" 및/또는 "항체 변이체" 등은 중쇄 또는 경쇄의 하나 이상의 상보성 결정 영역 (CDR) 또는 이의 리간드 결합 부분, 중쇄 또는 경쇄 가변 영역, 중쇄 또는 경쇄 불변 영역, 프레임워크 영역, 또는 이의 임의의 부분, 또는 IL-23 수용체 또는 결합 단백질의 하나 이상의 부분과 같으나 이에 한정되지 않는 면역글로불린 분자의 적어도 일부를 포함하는 분자를 함유하는 임의의 단백질 또는 펩티드를 포함하며, 이는 본 발명의 항체 내로 혼입될 수 있다. 이러한 항체는 선택적으로 특이적 리간드에 추가로 영향을 주는데, 비제한적인 예로서, 이러한 항체는 시험관내에서, 원위치에서, 및/또는 생체내에서 하나 이상의 IL-23 활성 또는 결합, 또는 IL-23 수용체 활성 또는 결합을 조절, 감소, 증가, 길항화, 작용화, 완화, 경감, 차단, 억제, 저해, 및/또는 방해한다. 비제한적인 예로서, 본 발명의 적합한 항-IL-23 항체, 특정 부분, 또는 변이체는 하나 이상의 IL-23 분자, 또는 이의 특정 부분, 변이체, 또는 도메인에 결합할 수 있다. 적합한 항-IL-23 항체, 특정 부분, 또는 변이체는 또한 선택적으로 RNA, DNA, 또는 단백질 합성, IL-23 방출, IL-23 수용체 신호전달, 막 IL-23 절단, IL-23 활성, IL-23 생성 및/또는 합성과 같으나 이에 한정되지 않는 하나 이상의 IL-23 활성 또는 기능에 영향을 줄 수 있다.
용어 "항체"는 추가로 항체, 이의 분해 단편, 특정 부분 및 변이체를 포함하고자 하며, 항체 모방체(mimetic)를 포함하거나, 단일쇄 항체 및 이의 단편을 포함하는, 항체 또는 이의 특정 단편 또는 부분의 구조 및/또는 기능을 모방하는 항체의 부분을 포함한다. 기능적 단편은 포유류 IL-23에 결합하는 항원-결합 단편을 포함한다. 예를 들어, Fab(예를 들어, 파파인 분해에 의함), Fab'(예를 들어, 펩신 분해 및 부분적인 환원에 의함), 및 F(ab')2(예를 들어, 펩신 분해에 의함), facb(예를 들어, 플라스민 분해에 의함), pFc'(예를 들어, 펩신 또는 플라스민 분해에 의함), Fd(예를 들어, 펩신 분해, 부분적인 환원, 및 재응집에 의함), Fv 또는 scFv(예를 들어, 분자생물학 기술에 의함) 단편을 포함하지만 이에 한정되지 않는, IL-23 또는 이의 부분에 결합할 수 있는 항체 단편이 본 발명에 포함된다(예를 들어, 문헌[Colligan, Immunology, 상기 문헌] 참조).
그러한 단편들은 당업계에 알려져 있는 바와 같은, 그리고/또는 본 명세서에 기재된 바와 같은 효소적 절단, 합성 또는 재조합 기법에 의해 생산될 수 있다. 항체는 또한 하나 이상의 정지 코돈이 천연 정지 부위의 상류에 도입된 항체 유전자를 사용하여 다양한 절단된(truncated) 형태로 생성될 수 있다. 예를 들어, 중쇄의 CH1 도메인 및/또는 힌지 영역을 인코딩하는 DNA 서열을 포함하도록, F(ab')2 중쇄 부분을 인코딩하는 조합 유전자를 설계할 수 있다. 항체의 다양한 부분은 통상의 기술에 의해 화학적으로 함께 연결될 수 있거나, 유전 공학 기술을 사용하여 연속 단백질로서 제조될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "인간 항체"는 단백질의 실질적으로 모든 부분(예를 들어, CDR, 프레임워크, CL, CH 도메인(예를 들어 CH1, CH2, CH3), 힌지, (VL, VH))이, 단지 사소한 서열 변화 또는 변형만을 가지면서, 인간에서 실질적으로 비면역원성인 항체를 지칭한다. "인간 항체"는 또한 인간 생식세포계열 면역글로불린 서열로부터 유래되거나 이와 거의 일치하는 항체일 수 있다. 인간 항체는 생식세포계열 면역글로불린 서열에 의해 인코딩되지 않는 아미노산 잔기(예를 들어, 시험관내에서의 랜덤 또는 부위-특이적 돌연변이 생성에 의해 또는 생체내에서의 체세포 돌연변이에 의해 도입되는 돌연변이)를 포함할 수 있다. 종종, 이는 인간 항체가 인간에서 실질적으로 비면역원성임을 의미한다. 인간 항체는 이들의 아미노산 서열 유사성에 기초하여 그룹으로 분류된다. 따라서, 서열 유사성 검색을 사용하여, 유사한 선형 서열을 갖는 항체를 주형으로 선택하여 인간 항체를 생성할 수 있다. 유사하게, 영장류(원숭이, 개코원숭이, 침팬지 등), 설치류(마우스, 래트, 토끼, 기니아 피그, 햄스터 등) 및 다른 포유동물에 지정된 항체는 그러한 종, 아속, 속, 아과, 및 과 특이적 항체를 지정한다. 추가로, 키메라 항체는 상기의 임의의 조합을 포함할 수 있다. 이러한 변화 또는 변이는 선택적으로 그리고 바람직하게는, 변형되지 않은 항체에 비해 인간 또는 다른 종에서의 면역원성을 유지시키거나 감소시킨다. 따라서, 인간 항체는 키메라 또는 인간화 항체와 구별된다.
인간 항체는 기능적으로 재배열된 인간 면역글로불린 (예를 들어, 중쇄 및/또는 경쇄) 유전자를 발현할 수 있는 비인간 동물 또는 원핵 또는 진핵세포에 의해 생성될 수 있다는 점이 주목된다. 또한, 인간 항체가 단일쇄 항체일 때, 인간 항체는 천연 인간 항체에서는 발견되지 않는 링커 펩티드를 포함할 수 있다. 예를 들어, Fv는 중쇄의 가변 영역 및 경쇄의 가변 영역을 연결시키는 링커 펩티드, 예를 들어 2 내지 약 8개의 글리신 또는 다른 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 그러한 링커 펩티드는 인간 기원인 것으로 간주된다.
적어도 2개의 상이한 항원에 대한 결합 특이성을 갖는 단일클론, 바람직하게는, 인간 또는 인간화 항체인 이중특이성(bispecific), 이종특이성(heterospecific), 이형접합성(heteroconjugate) 또는 유사 항체도 사용할 수 있다. 이 경우에, 결합 특이성 중 하나는 하나 이상의 IL-23 단백질에 대한 것이고, 다른 하나는 임의의 다른 항원에 대한 것이다. 이중특이성 항체를 제조하는 방법은 본 기술 분야에 알려져 있다. 통상적으로, 이중특이성 항체의 재조합 생성은 2개의 중쇄가 상이한 특이성을 갖는, 2개의 면역글로불린 중쇄-경쇄 쌍의 동시 발현에 기초한다 (문헌[Milstein and Cuello, Nature 305:537 (1983)]). 면역글로불린 중쇄 및 경쇄의 무작위 분류로 인해, 이러한 하이브리도마 (콰드로마(quadroma))는 하나만 정확한 이중특이적 구조를 갖는 10개의 상이한 항체 분자의 잠재적인 혼합물을 생성한다. 일반적으로 친화성 크로마토그래피 단계에 의해 수행되는 정확한 분자의 정제는 다소 성가시며, 생성물 수율도 낮다. 유사한 절차가, 예를 들어 국제특허 공개 WO 93/08829호, 미국 특허 제6210668호, 제6193967호, 제6132992호, 제6106833호, 제6060285호, 제6037453호, 제6010902호, 제5989530호, 제5959084호, 제5959083호, 제5932448호, 제5833985호, 제5821333호, 제5807706호, 제5643759호, 제5601819호, 제5582996호, 제5496549호, 제4676980호, 국제특허 공개 WO 91/00360호, WO 92/00373호, 유럽 특허 제03089호, 문헌[Traunecker et al., EMBO J. 10:3655 (1991)], 문헌[Suresh et al., Methods in Enzymology 121:210 (1986)]에 개시되어 있으며, 이들 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
본 발명의 방법 및 조성물에 유용한 항-IL-23 특이적(IL-23 특이적 항체로도 명명됨)(또는 IL-23에 대한 항체)은 선택적으로 IL-23에 대한 높은 친화도 결합, 및 선택적으로 그리고 바람직하게는 낮은 독성을 특징으로 할 수 있다. 특히, 개별 성분, 예를 들어 가변 영역, 불변 영역 및 프레임워크가 개별적으로 및/또는 공동으로, 선택적으로 그리고 바람직하게는 낮은 면역원성을 갖는 본 발명의 항체, 특정 단편 또는 변이체가 본 발명에서 유용하다. 본 발명에서 사용할 수 있는 항체는 선택적으로 측정가능한 정도로 증상을 완화하고, 낮고/낮거나 허용가능한 독성을 보이면서 장기간 동안 환자를 치료할 수 있는 능력을 특징으로 한다. 낮거나 허용가능한 면역원성 및/또는 높은 친화도뿐만 아니라 다른 적합한 특성이 달성되는 치료 결과에 기여할 수 있다. 본 명세서에서 "낮은 면역원성"은 치료한 환자의 약 75% 미만, 또는 바람직하게는 약 50% 미만에서 유의한 HAHA, HACA, 또는 HAMA 반응을 야기하고/하거나 치료한 환자에서 낮은 역가(이중 항원 효소 면역검정으로 측정할 때, 약 300 미만, 바람직하게는 약 100 미만)를 야기하는 것으로서 정의된다 (전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Elliott et al., Lancet 344:1125-1127 (1994)]). "낮은 면역원성"은 또한 항-IL-23 항체로 치료한 환자에서 항-IL-23 항체에 대한 항체의 적정가능한 수준의 발생률이 치료 기간 중에 권장 치료 과정 동안 권장 용량으로 치료한 환자의 25% 미만, 바람직하게는10% 미만으로 발생하는 것으로서 정의될 수 있다.
용량, 투여 계획, 치료, 또는 방법과 관련하여 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 " 임상적으로 입증된 효능" 및 "임상적으로 유효한 것으로 입증된"은 특정 용량, 투여량, 또는 치료 계획의 임상적으로 입증된 유효성을 지칭한다. 수행된 임상 시험, 예를 들어 2 상 이전의 임상 시험에 기초하여, 본 발명의 제제에 반응하는 질환 경과의 변화에 기초하여 효능을 측정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 항-IL-23 항체(예를 들어, 항-IL-23 항체 구셀쿠맙)는 치료되는 장애의 중증도를 반영하는 하나 이상의 지표의 개선, 바람직하게는 지속적인 개선을 유도하기에 충분한 양 및 시간으로 환자에게 투여된다. 치료의 양 및 시간이 충분한지 여부를 결정하기 위해 대상체의 병, 질병, 또는 질환의 정도를 반영하는 다양한 지표를 평가할 수 있다. 이러한 지표는, 예를 들어 문제의 장애의 질병 중증도, 증상, 또는 징후의 임상적으로 인정된 지표를 포함한다. 개선의 정도는 일반적으로 의사에 의해 결정되며, 의사는 징후, 증상, 생검체, 또는 다른 검사 결과에 기초하여 이러한 결정을 할 수 있고, 또한 의사는 대상체에게 제공되는 설문지, 예컨대 주어진 질병에 대해 개발된 삶의 질 설문지를 사용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 항-IL-23 항체는 건선성 관절염에 관련된 환자의 병태의 개선을 달성하기 위해 투여될 수 있다. 개선은 질병 활성 지수의 개선에 의해, 임상 증상의 개선에 의해, 또는 질병 활성의 임의의 다른 척도에 의해 나타날 수 있다. 하나의 이러한 질환 지수는 ACR 20% 개선 기준(ACR20)이다. 또한, 건선 면적 및 중증도 지수(PASI: Psoriasis Area and Severity Index)는 피부 질환 중증도/정도를 평가하기 위해 사용되는 질환의 지수이며, 예를 들어 PASI75 = 75% 개선, PASI90 = 90% 개선, 및 PASI100 = 실질적으로 병변이 제거됨이다. 효능의 척도는 또한, HAQ-DI, 기준선 골부착부염/지염을 갖는 환자에서의 골부착부염/지염 개선, SF-36 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS) 점수의 변화, 및 최소 질환 활성(MDA) 기준 점수의 달성을 포함할 수 있다.
본 발명의 항-IL-23 항체(예를 들어, 항-IL-23 항체 구셀쿠맙)를 이용한 용량, 투여 계획, 치료, 또는 방법에 관련될 때, 용어 "임상적으로 안전한 것으로 입증된"은, 표준 치료 또는 다른 비교대상에 비교하여, 수행된 임상 시험, 예를 들어 2 상 이전의 임상 시험으로부터의 치료-유발 유해 사건(AE 또는 TEAE라고 지칭됨)의 상대적으로 낮거나 감소된 빈도 및/또는 낮거나 감소된 중증도를 지칭한다. 유해 사건은 의약품을 투여한 환자에서의 바람직하지 않은 의료 사건이다. 특히, 본 발명의 항-IL-23 항체를 이용한 용량, 투여 계획, 또는 치료와 관련하여 "임상적으로 안전한 것으로 입증된"은, 속성이 항-IL-23 항체의 사용으로 인한 것일 가능성이 있거나, 개연성이 있거나, 가능성이 매우 높은 것으로 간주되는 경우에 항체의 투여와 관련된 유해 사건의 상대적으로 낮거나 감소된 빈도 및/또는 낮거나 감소된 중증도를 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 달리 언급되지 않는 한, (독립적으로 사용되거나 용어 "안전한" 및/또는 "유효한"을 수식하는 데 사용되는) 용어 "임상적으로 입증된"은 임상 시험에 의해 입증된 것임을 의미할 것인데, 여기서 임상 시험은 미국 식품 의약국(U.S. Food and Drug Administration), EMEA 또는 상응하는 국가 규제 기관의 승인 표준을 만족시켰다. 예를 들어, 임상 연구는 약물의 효과를 임상적으로 입증하는 데 사용되는 충분한 크기, 무작위배정, 이중-맹검 연구일 수 있다.
유용성
본 발명의 단리된 핵산은 하나 이상의 항-IL-23 항체 또는 이의 특정 변이체의 생성에 사용될 수 있으며, 이는 건선을 진단하거나, 모니터링하거나, 조절하거나, 치료하거나, 경감시키거나, 그의 발생의 예방을 돕거나, 그의 증상을 감소시키기 위해, 세포, 조직, 기관, 또는 동물(포유류 및 인간을 포함함)에서 측정 또는 효과를 위해 사용될 수 있다.
이러한 방법은 증상, 효과, 또는 기전의 이러한 조절, 치료, 완화, 예방, 또는 감소를 필요로 하는 세포, 조직, 기관, 동물, 또는 환자에게 하나 이상의 항-IL-23 항체를 포함하는 조성물 또는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 본 명세서에 기재되거나 관련 기술 분야에 알려진 바와 같이, 알려진 방법을 사용하여 수행하고 측정한 유효량은 단일 (예를 들어, 볼루스(bolus)), 다회 또는 연속 투여당 약 0.001 내지 500 mg/㎏의 양, 또는 단일, 다회 또는 연속 투여당 0.01 내지 5000 ㎍/ml 혈청 농도의 혈청 농도를 달성하는 양, 또는 그 안의 임의의 유효 범위 또는 값을 포함할 수 있다.
인용
구체적으로 지정되는지 여부에 관계 없이 본 명세서에서 인용된 모든 간행물 또는 특허는 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함되며, 이는 그들이 본 발명의 시점에서의 최신의 기술을 보여주고/주거나 본 발명의 설명 및 용이성을 제공하기 때문이다. 간행물은 임의의 학술 간행물 또는 특허 간행물, 또는 모든 기록 형식, 전자 형식 또는 인쇄 형식을 포함하는 임의의 매체 형식으로 이용가능한 또 다른 정보를 가리킨다. 하기 참고문헌은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다: 문헌[Ausubel, et al., ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987-2001)]; 문헌[Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor, NY (1989)]; 문헌[Harlow and Lane, antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY (1989)]; 문헌[Colligan, et al., eds., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc., NY (1994-2001)]; 문헌[Colligan et al., Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997-2001)].
본 발명의 항체 - 생성 및 생산
본 발명의 방법에 사용되는 하나 이상의 항-IL-23 항체는 본 기술 분야에 잘 알려진 바와 같이, 세포주, 혼합 세포주, 무한증식(immortalized) 세포, 또는 무한증식 세포의 클론 집단에 의해 선택적으로 생성될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Ausubel, et al., ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987-2001)]; 문헌[Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor, NY (1989)]; 문헌[Harlow and Lane, antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY (1989)]; 문헌[Colligan, et al., eds., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc., NY (1994-2001)]; 문헌[Colligan et al., Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997-2001)]을 참조하며, 이들 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
바람직한 항-IL-23 항체는 서열 번호 106의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 및 서열 번호 116의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 갖고 서열 번호 5, 서열 번호 20, 및 서열 번호 44의 중쇄 CDR 아미노산 서열; 및 서열 번호 50, 서열 번호 56, 및 서열 번호 73의 경쇄 CDR 아미노산 서열을 갖는 구셀쿠맙 (CNTO1959로도 지칭됨)이다. 다른 항-IL-23 항체는 그 전체 내용이 본 명세서에 참고로 포함된 미국 특허 제7,935,344호에 기재되고 본 명세서에 열거된 서열을 갖는다.
단리된 IL-23 단백질 및/또는 이의 부분과 같은 적절한 면역원성 항원(합성 펩티드와 같은 합성 분자를 포함함)에 대해 인간 IL-23 단백질 또는 이의 단편에 특이적인 인간 항체를 발생시킬 수 있다. 다른 특이적 또는 일반적 포유류 항체를 유사하게 발생시킬 수 있다. 면역원성 항원의 제조 및 단일클론 항체 생성은 임의의 적합한 기술을 사용하여 수행될 수 있다.
한 방법에서, 하이브리도마(hybridoma)는 적합한 무한증식 세포주 (예를 들어, Sp2/0, Sp2/0-AG14, NSO, NS1, NS2, AE-1, L.5, L243, P3X63Ag8.653, Sp2 SA3, Sp2 MAI, Sp2 SS1, Sp2 SA5, U937, MLA 144, ACT IV, MOLT4, DA-1, JURKAT, WEHI, K-562, COS, RAJI, NIH 3T3, HL-60, MLA 144, NAMALWA, NEURO 2A 등과 같으나 이에 한정되지 않는 골수종 세포주, 또는 이종골수종(heteromyeloma), 이의 융합 산물, 또는 이로부터 유도되는 임의의 세포 또는 융합 세포, 또는 본 기술 분야에 알려진 임의의 다른 적합한 세포주) (예를 들어, www.atcc.org, www.lifetech.com 등 참조)를, 내인성 또는 이종 핵산으로서, 재조합 또는 내인성 바이러스, 세균, 조류, 원핵생물, 양서류, 곤충, 파충류, 어류, 포유동물, 설치류, 말, 양(ovine), 염소, 양, 영장류, 진핵생물, 게놈 DNA, cDNA, rDNA, 미토콘드리아 DNA 또는 RNA, 엽록체 DNA 또는 RNA, hnRNA, mRNA, tRNA, 단일, 이중 또는 삼중 가닥, 혼성화된 것 등, 또는 이들의 임의의 조합으로서, 단리되거나 클로닝된 비장, 말초 혈액, 림프선, 편도선, 또는 다른 면역 세포 또는 B 세포 함유 세포, 또는 중쇄 또는 경쇄 불변 또는 가변 또는 프레임워크 또는 CDR 서열을 발현하는 임의의 다른 세포와 같으나 이에 한정되지 않는 항체 생성 세포와 융합시켜 생성된다. 예를 들어, 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함되는, 문헌[Ausubel, 상기 문헌] 및 문헌[Colligan, Immunology, 상기 문헌, 챕터 2]을 참조한다.
항체 생성 세포는 또한, 목적 항원으로 면역화된 인간 또는 다른 적합한 동물의 말초 혈액, 또는 바람직하게는 비장 또는 림프절로부터 얻을 수 있다. 임의의 다른 적합한 숙주 세포를 사용하여 본 발명의 항체, 이의 특정 단편 또는 변이체를 인코딩하는 이종 또는 내인성 핵산을 또한 발현할 수 있다. 융합된 세포 (하이브리도마) 또는 재조합 세포는 선택적 배양 조건 또는 다른 적합한 공지 방법을 사용하여 단리될 수 있고, 제한 희석 또는 세포 분류, 또는 다른 공지의 방법에 의해 클로닝될 수 있다. 원하는 특이성을 갖는 항체를 생성하는 세포를 적합한 검정 (예를 들어, ELISA)에 의해 선별할 수 있다.
펩티드 또는 단백질 라이브러리(비제한적인 예를 들어, 박테리오파지, 리보솜, 올리고뉴클레오티드, RNA, cDNA 등, 디스플레이 라이브러리; 예를 들어, 영국 캠브리지셔 소재의 Cambridge antibody Technologies; 독일 마르틴스레이드/플라네그 소재의 MorphoSys; 영국 스코틀랜드 아버딘 소재의 Biovation; 스웨덴 룬드 소재의 BioInvent; Dyax Corp., Enzon, Affymax/Biosite; 캘리포니아주 버클리 소재의 Xoma; Ixsys로부터 입수가능 함. 예를 들어, EP 368,684호, PCT/GB91/01134호; PCT/GB92/01755호; PCT/GB92/002240호; PCT/GB92/00883호; PCT/GB93/00605호; US 08/350260(5/12/94)호; PCT/GB94/01422호; PCT/GB94/02662호; PCT/GB97/01835호; (CAT/MRC); WO90/14443호; WO90/14424호; WO90/14430호; PCT/US94/1234호; WO92/18619호; WO96/07754호; (Scripps); WO96/13583호, WO97/08320호(MorphoSys); WO95/16027호(BioInvent); WO88/06630호; WO90/3809호(Dyax); US 4,704,692호(Enzon); PCT/US91/02989호(Affymax); WO89/06283호; EP 371 998호; EP 550 400호; (Xoma); EP 229 046호; PCT/US91/07149호(Ixsys)를 참조함; 또는 추계적으로 생성된 펩티드 또는 단백질 - US 5723323, 5763192, 5814476, 5817483, 5824514, 5976862, WO 86/05803, EP 590 689(Ixsys, Applied Molecular Evolution(AME)의 전신, 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함됨))로부터 재조합 항체를 선택하는 방법, 또는 본 기술 분야에 알려지고/알려지거나 본 명세서에 기재된 바와 같이 인간 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 유전자도입(transgenic) 동물(예를 들어, SCID 마우스, 문헌[Nguyen et al., Microbiol. Immunol. 41:901-907 (1997)]; 문헌[Sandhu et al., Crit. Rev. Biotechnol. 16:95-118 (1996)]; 문헌[Eren et al., Immunol. 93:154-161 (1998)], 관련 특허 및 출원과 더불어 각각 전체적으로 참고로 포함됨)의 면역화에 의존하는 방법을 포함할 수 있지만 이로 한정되지 않는, 요구되는 특이성의 항체를 제조 또는 단리하는 다른 적합한 방법이 사용될 수 있다. 이러한 기술은 리보솜 디스플레이(문헌[Hanes et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:4937-4942 (May 1997)]; 문헌[Hanes et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:14130-14135 (Nov. 1998)]); 단일 세포 항체 생성 기술(예를 들어, 선택된 림프구 항체 방법("SLAM")(미국 특허 제5,627,052호, 문헌[Wen et al., J. Immunol. 17:887-892 (1987)]; 문헌[Babcook et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7843-7848 (1996)]); 겔 마이크로소적 및 유세포측정(문헌[Powell et al., Biotechnol. 8:333-337 (1990)]; 미국 매사추세츠주 캠브리지 소재의 One Cell Systems; 문헌[Gray et al., J. Imm. Meth. 182:155-163 (1995)]; 문헌[Kenny et al., Bio/Technol. 13:787-790 (1995)]); B-세포 선택(문헌[Steenbakkers et al., Molec. Biol. Reports 19:125-134 (1994)]; 문헌[Jonak et al., Progress Biotech, Vol. 5, In Vitro Immunization in Hybridoma Technology, Borrebaeck, ed., Elsevier Science Publishers B.V., Amsterdam, Netherlands (1988)])을 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
또한, 비인간 또는 인간 항체를 유전자 조작하거나 인간화하는 방법이 사용될 수 있으며, 이는 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 일반적으로, 인간화되거나 유전자 조작된 항체는 마우스, 래트, 토끼, 비인간 영장류 또는 다른 포유동물과 같으나 이에 한정되지 않은 비인간 공급원으로부터의 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는다. 이러한 비인간 아미노산 잔기는 종종 "유입(import)" 잔기로 지칭되고, 전형적으로 공지의 인간 서열의 "유입" 가변, 불변 또는 기타 도메인으로부터 취한 잔기로 대체된다.
공지의 인간 Ig 서열은, 예를 들어 www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi; www.ncbi.nih.gov/igblast; www.atcc.org/phage/hdb.html; www.mrc-cpe.cam.ac.uk/ALIGNMENTS.php; www.kabatdatabase.com/top.html; ftp.ncbi.nih.gov/repository/kabat; www.sciquest.com; www.abcam.com; www.antibodyresource.com/onlinecomp.html; www.public.iastate.edu/~pedro/research_tools.html; www.whfreeman.com/immunology/CH05/kuby05.htm; www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab; www.path.cam.ac.uk/~mrc7/mikeimages.html; mcb.harvard.edu/BioLinks/Immunology.html; www.immunologylink.com; pathbox.wustl.edu/~hcenter/index.html; www.appliedbiosystems.com; www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody; www.m.ehime-u.ac.jp/~yasuhito/Elisa.html; www.biodesign.com; www.cancerresearchuk.org; www.biotech.ufl.edu; www.isac-net.org; baserv.uci.kun.nl/~jraats/links1.html; www.recab.uni-hd.de/immuno.bme.nwu.edu; www.mrc-cpe.cam.ac.uk; www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html; http://www.bioinf.org.uk/abs; antibody.bath.ac.uk; www.unizh.ch; www.cryst.bbk.ac.uk/~ubcg07s; www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.html; www.path.cam.ac.uk/~mrc7/humanisation/TAHHP.html; www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html; www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html; www.jerini.de; 문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Dept. Health (1983)]에 개시되어 있으며, 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
이러한 유입된 서열은 면역원성을 감소시키거나, 결합, 친화도, 결합 속도(on-rate), 해리 속도(off-rate), 결합력(avidity), 특이성, 반감기, 또는 본 기술 분야에 알려진 임의의 다른 적합한 특성을 감소시키거나, 향상시키거나, 변형시키기 위해 사용될 수 있다. 일반적으로, CDR 잔기는 직접적이고 가장 실질적으로 항원 결합에 영향을 준다. 따라서, 가변 및 불변 영역의 비인간 서열은 인간 또는 다른 아미노산으로 대체될 수 있는 반면에, 비인간 또는 인간 CDR 서열의 일부 또는 전부가 유지된다.
항체는 또한 선택적으로 항원에 대한 높은 친화도와 다른 유리한 생물학적 특성을 유지하면서 인간화 또는 인간 항체로 유전자 조작될 수 있다. 이러한 목적을 달성하기 위해, 인간화 (또는 인간) 항체는 선택적으로 모(parental) 서열 및 인간화 서열의 3차원 모델을 사용하여 모 서열 및 다양한 개념적(conceptual) 인간화 생성물을 분석하는 과정에 의해 제조될 수 있다. 3차원 면역글로불린 모델은 일반적으로 구매가능하며, 당업자에게 익숙하다. 선택된 후보 면역글로불린 서열의 가능한 3차원 입체형태 구조를 예시하고 디스플레이하는 컴퓨터 프로그램이 이용가능하다. 이들 디스플레이에 대한 조사는 후보 면역글로불린 서열의 기능에 있어서의 잔기의 가능성이 있는 역할의 분석, 즉 후보 면역글로불린이 그의 항원과 결합하는 능력에 영향을 주는 잔기의 분석을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 프레임워크(FR) 잔기가 컨센서스 및 유입 서열로부터 선택 및 조합되어, 원하는 항체 특성, 예컨대 표적 항원(들)에 대한 증가된 친화도가 달성되도록 할 수 있다.
추가로, 본 발명의 방법에 사용되는 인간 IL-23 특이적 항체는 인간 생식세포계열 경쇄 프레임워크를 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 경쇄 생식세포계열 서열은 A1, A10, A11, A14, A17, A18, A19, A2, A20, A23, A26, A27, A3, A30, A5, A7, B2, B3, L1, L10, L11, L12, L14, L15, L16, L18, L19, L2, L20, L22, L23, L24, L25, L4/18a, L5, L6, L8, L9, O1, O11, O12, O14, O18, O2, O4 및 O8을 포함하지만 이에 한정되지 않는 인간 VK 서열로부터 선택된다. 소정 실시 형태에서, 이러한 경쇄 인간 생식세포계열 프레임워크는 V1-11, V1-13, V1-16, V1-17, V1-18, V1-19, V1-2, V1-20, V1-22, V1-3, V1-4, V1-5, V1-7, V1-9, V2-1, V2-11, V2-13, V2-14, V2-15, V2-17, V2-19, V2-6, V2-7, V2-8, V3-2, V3-3, V3-4, V4-1, V4-2, V4-3, V4-4, V4-6, V5-1, V5-2, V5-4 및 V5-6으로부터 선택된다.
다른 실시 형태에서, 본 발명의 방법에 사용되는 인간 IL-23 특이적 항체는 인간 생식세포계열 중쇄 프레임워크를 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 이러한 중쇄 인간 생식세포계열 프레임워크는 VH1-18, VH1-2, VH1-24, VH1-3, VH1-45, VH1-46, VH1-58, VH1-69, VH1-8, VH2-26, VH2-5, VH2-70, VH3-11, VH3-13, VH3-15, VH3-16, VH3-20, VH3-21, VH3-23, VH3-30, VH3-33, VH3-35, VH3-38, VH3-43, VH3-48, VH3-49, VH3-53, VH3-64, VH3-66, VH3-7, VH3-72, VH3-73, VH3-74, VH3-9, VH4-28, VH4-31, VH4-34, VH4-39, VH4-4, VH4-59, VH4-61, VH5-51, VH6-1 및 VH7-81로부터 선택된다.
특정 실시 형태에서, 경쇄 가변 영역 및/또는 중쇄 가변 영역은 프레임워크 영역 또는 프레임워크 영역의 적어도 일부 (예를 들어, 2 또는 3개의 하위영역, 예컨대 FR2 및 FR3을 함유함)를 포함한다. 소정 실시 형태에서, 적어도 FRL1, FRL2, FRL3 또는 FRL4는 완전 인간이다. 다른 실시 형태에서, 적어도 FRH1, FRH2, FRH3 또는 FRH4는 완전 인간이다. 일부 실시 형태에서, 적어도 FRL1, FRL2, FRL3 또는 FRL4는 생식세포계열 서열 (예를 들어, 인간 생식세포계열)이거나, 특정 프레임워크에 대한 인간 공통 서열 (상술한 공지의 인간 Ig 서열의 공급원에서 용이하게 입수가능함)을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 적어도 FRH1, FRH2, FRH3 또는 FRH4는 생식세포계열 서열 (예를 들어, 인간 생식세포계열)이거나, 특정 프레임워크에 대한 인간 공통 서열을 포함한다. 바람직한 실시 형태에서, 프레임워크 영역은 완전 인간 프레임워크 영역이다.
각각 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Winter](문헌[Jones et al., Nature 321:522 (1986)]; 문헌[Riechmann et al., Nature 332:323 (1988)]; 문헌[Verhoeyen et al., Science 239:1534 (1988)]), 문헌[Sims et al., J. Immunol. 151: 2296 (1993)]; 문헌[Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901 (1987)], 문헌[Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:4285 (1992)]; 문헌[Presta et al., J. Immunol. 151:2623 (1993)], 미국 특허 제5723323호, 제5976862호, 제5824514호, 제5817483호, 제5814476호, 제5763192호, 제5723323호, 제5,766886호, 제5714352호, 제6204023호, 제6180370호, 제5693762호, 제5530101호, 제5585089호, 제5225539호; 제4816567호, PCT/: US98/16280, US96/18978, US91/09630, US91/05939, US94/01234, GB89/01334, GB91/01134, GB92/01755; WO90/14443, WO90/14424, WO90/14430, EP 229246, 그 안에 인용된 참고문헌에 기재된 것들과 같으나 이에 한정되지 않는 임의의 알려진 방법을 사용하여, 본 발명의 항체의 인간화 또는 유전자 조작을 수행할 수 있다.
소정 실시 형태에서, 항체는 변경된 (예를 들어, 돌연변이된) Fc 영역을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시 형태에서, Fc 영역을 변경하여 항체의 이펙터 기능을 감소시키거나 향상시킨다. 일부 실시 형태에서, Fc 영역은 IgM, IgA, IgG, IgE 또는 다른 동종형으로부터 선택된 동종형이다. 대안적으로 또는 추가적으로, 아미노산 변형을 IL-23 결합 분자의 Fc 영역의 C1q 결합 및/또는 보체 의존성 세포독성 기능을 변경하는 하나 이상의 추가의 아미노산 변형과 조합하는 데 유용할 수 있다. 특정 목적 출발 폴리펩티드는 C1q에 결합하여, 보체 의존성 세포독성 (CDC)을 나타내는 것일 수 있다. 기존의 C1q 결합 활성, 선택적으로 CDC를 매개하는 능력을 추가로 가진 폴리펩티드는 변형되어, 이러한 활성의 하나 또는 둘 모두가 향상될 수 있다. C1q를 변경하고/하거나 이의 보체 의존성 세포독성 기능을 변형시키는 아미노산 변형이, 예를 들어 본 명세서에 참고로 포함되는, WO0042072에 기재되어 있다.
상기 개시된 바와 같이, 예를 들어 C1q 결합 및/또는 FcγR 결합을 변형시키고 이에 의해 보체 의존성 세포독성(CDC) 활성 및/또는 항체-의존성 세포-매개 세포독성(ADCC) 활성을 변화시킴으로써, 변경된 이펙터 기능을 갖는 본 발명의 인간 IL-23 특이적 항체의 Fc 영역을 설계할 수 있다. "이펙터 기능"은 (예를 들어, 대상체에서) 생물학적 활성을 활성화하거나 감소시키는 것을 담당한다. 이펙터 기능의 예는 C1q 결합; CDC; Fc 수용체 결합; ADCC; 식작용; 세포 표면 수용체(예를 들어, B 세포 수용체; BCR)의 하향 조절 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 이러한 이펙터 기능은 Fc 영역이 결합 도메인(예를 들어, 항체 가변 도메인)과의 조합될 것을 필요로 할 수 있으며, 다양한 검정(예를 들어, Fc 결합 검정, ADCC 검정, CDC 검정 등)을 사용하여 평가할 수 있다.
예를 들어, 개선된 C1q 결합 및 개선된 FcγRIII 결합을 갖는(예를 들어, 개선된 ADCC 활성 및 개선된 CDC 활성 둘 모두를 갖는) 인간 IL-23(또는 항-IL-23) 항체의 변이체 Fc 영역을 생성할 수 있다. 대안적으로, 이펙터 기능이 감소되거나 제거되기를 원하는 경우, 변이체 Fc 영역을 감소된 CDC 활성 및/또는 감소된 ADCC 활성으로 유전자 조작할 수 있다. 다른 실시 형태에서, 이러한 활성 중 하나만을 증가시킬 수 있고, 선택적으로, 다른 활성도 감소시킬 수 있다 (예를 들어, 개선된 ADCC 활성을 갖지만 감소된 CDC 활성을 가지거나, 그 반대의 경우인 Fc 영역 변이체를 생성하기 위해).
Fc 돌연변이는 또한 유전자 조작(engineer)에 도입되어, 이들과 신생아 Fc 수용체 (FcRn)의 상호작용을 변경하고, 이들의 약동학적 특성을 개선할 수 있다. FcRn에 대한 개선된 결합을 갖는 인간 Fc 변이체들의 수집이 기재되어 있다(문헌[Shields et al., (2001). High resolution mapping of the binding site on human IgG1 for FcγRI, FcγRII, FcγRIII, and FcRn and design of IgG1 variants with improved binding to the FcγR, J. Biol. Chem. 276:6591-6604]).
다른 유형의 아미노산 치환은 인간 IL-23 특이적 항체의 Fc 영역의 글리코실화 패턴을 변경하는 역할을 한다. Fc 영역의 글리코실화는 전형적으로 N-결합 또는 O-결합이다. N-결합은 아스파라긴 잔기의 측쇄에 대한 탄수화물 모이어티의 부착을 지칭한다. O-결합 글리코실화는 5-하이드록시프롤린 또는 5-하이드록시라이신이 또한 사용될 수 있지만, 가장 일반적으로는 세린 또는 트레오닌인 하이드록시아미노산에 대한 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스 또는 자일로스 중 하나의 부착을 지칭한다. 아스파라긴 측쇄 펩티드 서열에 대한 탄수화물 모이어티의 효소적 부착을 위한 인식 서열은 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-트레오닌이며, 이때 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산이다. 따라서, 폴리펩티드에서 이러한 펩티드 서열 중 하나의 존재는 잠재적인 글리코실화 부위를 생성한다.
예를 들어, 폴리펩티드에서 발견되는 하나 이상의 글리코실화 부위(들)를 제거하고/하거나 폴리펩티드에 존재하지 않는 하나 이상의 글리코실화 부위를 부가하여 글리코실화 패턴을 변경할 수 있다. 인간 IL-23 특이적 항체의 Fc 영역에 글리코실화 부위를 부가하는 것은, 그것이 상기 기재된 트라이펩티드 서열 중 하나 이상을 함유하도록 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 수행된다(N-결합 글리코실화 부위의 경우). 예시적인 글리코실화 변이체는 중쇄의 잔기 Asn 297의 아미노산 치환을 갖는다. (O-결합 글리코실화 부위의 경우) 변경은 원래 폴리펩티드의 서열에 하나 이상의 세린 또는 트레오닌 잔기의 부가에 의해 또는 이에 의한 치환에 의해 또한 이루어질 수 있다. 추가로, Asn 297의 Ala로의 변경은 글리코실화 부위 중 하나를 제거할 수 있다.
소정 실시 형태에서, 본 발명의 인간 IL-23 특이적 항체가 베타 (1,4)-N-아세틸글루코사미닐트랜스페라아제 III(GnT III)을 발현하는 세포에서 발현되어, GnT III이 인간 IL-23 항체에 GlcNAc를 첨가한다. 이러한 방식으로 항체를 생성하는 방법이 WO/9954342, WO/03011878, 특허 출원 공개 제20030003097A1호, 및 문헌[Umana et al., Nature Biotechnology, 17:176-180, Feb. 1999]에 제공되며; 이들 모두는 전체적으로 본 명세서에 참고로 구체적으로 포함된다.
또한 선택적으로 항-IL-23 항체는 본 명세서에 기재되고/되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, 인간 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 유전자도입 동물(예를 들어, 마우스, 쥐, 햄스터, 인간외 영장류 등)의 면역화에 의해 생성될 수 있다. 본 명세서에 기재된 방법과 같은 적합한 방법을 사용하여, 그러한 동물로부터 인간 항-IL-23 항체를 생성하는 세포를 단리하고 무한증식시킬 수 있다.
인간 항원에 결합하는 인간 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 유전자도입 마우스는 알려진 방법(비제한적인 예를 들어, 각각 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된, Lonberg 등에게 허여된 미국 특허 제5,770,428호, 제5,569,825호, 제5,545,806호, 제5,625,126호, 제5,625,825호, 제5,633,425호, 제5,661,016호, 및 제5,789,650호; Jakobovits 등의 WO 98/50433, Jakobovits 등의 WO 98/24893, Lonberg 등의 WO 98/24884, Lonberg 등의 WO 97/13852, Lonberg 등의 WO 94/25585, Kucherlapate 등의 WO 96/34096, Kucherlapate 등의 EP 0463 151 B1, Kucherlapate 등의 EP 0710 719 A1, Surani 등의 미국 특허 제5,545,807호, Bruggemann 등의 WO 90/04036, Bruggemann 등의 EP 0438 474 B1, Lonberg 등의 EP 0814 259 A2, Lonberg 등의 GB 2 272 440 A, 문헌[Lonberg et al. Nature 368:856-859 (1994)], 문헌[Taylor et al., Int. Immunol. 6(4)579-591 (1994)], 문헌[Green et al, Nature Genetics 7:13-21 (1994)], 문헌[Mendez et al., Nature Genetics 15:146-156 (1997)], 문헌[Taylor et al., Nucleic Acids Research 20(23):6287-6295 (1992)], 문헌[Tuaillon et al., Proc Natl Acad Sci USA 90(8)3720-3724 (1993)], 문헌[Lonberg et al., Int Rev Immunol 13(1):65-93 (1995)], 및 문헌[Fishwald et al., Nat Biotechnol 14(7):845-851(1996)])에 의해 생성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 마우스는 기능적으로 재배열되거나, 기능적으로 재배열될 수 있는 하나 이상의 인간 면역글로불린 유전자좌로부터의 DNA를 포함하는 하나 이상의 도입유전자(transgene)를 포함한다. 상기 마우스에서 내인성 면역글로불린 유전자좌는 파괴되거나 결실되어, 내인성 유전자에 의해 인코딩되는 항체를 생성하는 동물의 능력을 제거할 수 있다.
통상적으로 펩티드 디스플레이 라이브러리를 사용하여 유사한 단백질 또는 단편에 특이적으로 결합하는 항체를 스크리닝할 수 있다. 이러한 방법은 원하는 기능 또는 구조를 갖는 개별 구성원에 대하여 거대 펩티드 집단을 스크리닝하는 것을 포함한다. 펩티드 디스플레이 라이브러리의 항체 스크리닝은 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 디스플레이된 펩티드 서열의 길이는 3 내지 5000개 이상의 아미노산, 종종 5 내지 100개의 아미노산, 종종 약 8 내지 25개의 아미노산일 수 있다. 펩티드 라이브러리를 생성하기 위한 직접적인 화학적 합성 방법 외에도, 여러 가지 재조합 DNA 방법이 기재되어 있다. 하나의 유형은 박테리오파지 또는 세포의 표면 상에 펩티드 서열을 디스플레이하는 것을 포함한다. 각각의 박테리오파지 또는 세포는 특정 디스플레이된 펩티드 서열을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 이러한 방법이 PCT 특허 공개 91/17271호, 91/18980호, 91/19818호 및 93/08278호에 기재되어 있다.
펩티드의 라이브러리를 생성하는 다른 시스템은 시험관내에서의 화학적 합성 및 재조합 방법 모두의 태양을 포함한다. PCT 특허 공개 92/05258호, 92/14843호 및 96/19256호를 참조한다. 또한 미국 특허 제5,658,754호; 및 제5,643,768호를 참조한다. 펩티드 디스플레이 라이브러리, 벡터 및 스크리닝 키트는 Invitrogen (캘리포니아주 칼스바드) 및 Cambridge antibody Technologies (영국 캠브리지셔)와 같은 공급원으로부터 시판된다. 예를 들어, Enzon에 양도된 미국 특허 제4704692호, 제4939666호, 제4946778호, 제5260203호, 제5455030호, 제5518889호, 제5534621호, 제5656730호, 제5763733호, 제5767260호 및 제5856456호; Dyax에 양도된 제5223409호, 제5403484호, 제5571698호, 제5837500호, Affymax에 양도된 제5427908호, 제5580717호; Cambridge antibody Technologies에 양도된 제5885793호; Genentech에 양도된 제5750373호, Xoma, Colligan에 양도된 제5618920호, 제5595898호, 제5576195호, 제5698435호, 제5693493호, 제5698417호, 상기 문헌; 문헌[Ausubel, 상기 문헌]; 또는 문헌[Sambrook, 상기 문헌]을 참조하며, 상기 특허 및 간행물 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
그들의 우유에 이러한 항체를 생성하는 유전자도입 동물 또는 포유류, 예컨대 염소, 소, 말, 양, 토끼 등을 제공하기 위해 하나 이상의 항-IL23 항체를 암호화하는 핵산을 사용하여 본 발명의 방법에 사용되는 항체를 또한 제조할 수 있다. 이러한 동물은 알려진 방법을 사용하여 제공할 수 있다. 비제한적인 예를 들어, 미국 특허 제5,827,690호; 제5,849,992호; 제4,873,316호; 제5,849,992호; 제5,994,616호; 제5,565,362호; 제5,304,489호 등을 참조하며, 이들 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
식물 부분, 또는 그로부터 배양된 세포에서 이러한 항체, 특정 부분, 또는 변이체를 생성하는 유전자도입 식물 및 배양된 식물 세포(비제한적인 예를 들어, 담배 및 옥수수)를 제공하기 위해 하나 이상의 항-IL23 항체를 암호화하는 핵산을 사용하여 본 발명의 방법에 사용되는 항체를 추가로 제조할 수 있다. 비제한적인 예로서, 재조합 단백질을 발현하는 유전자도입 담배 잎이, 예를 들어 유도성 프로모터를 사용하여 다량의 재조합 단백질을 제공하는 데 성공적으로 사용되었다. 예를 들어, 문헌[Cramer et al., Curr. Top. Microbol. Immunol. 240:95-118 (1999)] 및 그 안에 인용된 참고문헌을 참조한다. 또한, 유전자도입 옥수수는 다른 재조합 시스템에서 생성되거나, 천연 공급원으로부터 정제된 것과 동등한 생물학적 활성으로, 상업 생산 수준으로 포유류 단백질을 발현하는 데 사용되어 왔다. 예를 들어, 문헌[Hood et al., Adv. Exp. Med. Biol. 464:127-147 (1999)] 및 그 안에 인용된 참고문헌을 참조한다. 항체는 또한 항체 단편, 예를 들어 단일쇄 항체 (scFv's)를 포함하는, 유전자도입 식물 종자, 예를 들어 담배 종자 및 감자 덩이줄기(potato tuber)로부터 다량으로 생성되었다. 예를 들어, 문헌[Conrad et al., Plant Mol. Biol. 38:101-109 (1998)] 및 그 안에 인용된 참고문헌을 참조한다. 따라서, 본 발명의 항체는 또한 알려진 방법에 따라 유전자도입 식물을 사용하여 생성될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Fischer et al., Biotechnol. Appl. Biochem. 30:99-108 (Oct., 1999)], 문헌[Ma et al., Trends Biotechnol. 13:522-7 (1995)]; 문헌[Ma et al., Plant Physiol. 109:341-6 (1995)]; 문헌[Whitelam et al., Biochem. Soc. Trans. 22:940-944 (1994)]; 및 그 안에 인용된 참고문헌을 또한 참조한다. 상기 참고문헌 각각은 본 명세서에 전체적으로 참고로 포함된다.
본 발명의 방법에 사용되는 항체는 광범위한 친화도(KD)로 인간 IL-23에 결합할 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 선택적으로 인간 mAb는 고친화도로 인간 IL-23에 결합할 수 있다. 예를 들어, 인간 mAb는 약 10-7 M 이하, 비제한적인 예로서 0.1 내지 9.9(또는 그 안의 임의의 범위 또는 값) X 10-7, 10-8, 10-9, 10-10, 10-11, 10-12, 10-13, 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값의 KD로 인간 IL-23에 결합할 수 있다.
항원에 대한 항체의 친화도 또는 결합력은 임의의 적합한 방법을 사용하여 실험적으로 결정될 수 있다. (예를 들어, 문헌[Berzofsky, et al., "Antibody-Antigen Interactions," In Fundamental Immunology, Paul, W. E., Ed., Raven Press: New York, NY (1984)]; 문헌[Kuby, Janis Immunology, W. H. Freeman and Company: New York, NY (1992)]; 및 본 명세서에 기재된 방법을 참조한다). 특정 항체-항원 상호작용의 측정된 친화도는 상이한 조건(예를 들어, 염 농도, pH) 하에서 측정된다면 변동될 수 있다. 따라서, 친화도 및 기타 항원-결합 파라미터(예를 들어, KD, Ka, Kd)의 측정은 바람직하게는 항체 및 항원의 표준화된 용액, 및 표준화된 완충액, 예컨대 본 명세서에 기재된 완충액을 사용하여 행해진다.
핵산 분자
본 명세서에 제공된 정보를 사용하여, 예를 들어, 본 명세서에 개시된 다른 서열 중에서 본 명세서에 기재된 경쇄 또는 중쇄 가변 또는 CDR 영역 중 하나 이상의 연속 아미노산의 70 내지 100% 이상을 암호화하는 뉴클레오티드 서열, 이의 특정 단편, 변이체, 또는 공통 서열, 또는 이들 서열 중 하나 이상을 포함하는 기탁된(deposited) 벡터, 하나 이상의 항-IL-23 항체를 암호화하는 본 발명의 핵산 분자를, 본 명세서에 기재되거나 본 기술 분야에 알려진 방법을 사용하여 얻을 수 있다.
본 발명의 핵산 분자는 RNA 형태, 예를 들어 mRNA, hnRNA, tRNA 또는 임의의 다른 형태 또는 cDNA 및 클로닝에 의해 얻어지거나 합성에 의해 생성된 게놈 DNA 또는 이들의 임의의 조합을 포함하지만 이에 한정되지 않는 DNA의 형태일 수 있다. DNA는 삼중가닥, 이중가닥 또는 단일가닥, 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. DNA 또는 RNA의 적어도 한 가닥의 임의의 부분은 센스 가닥으로도 알려진 코딩 가닥일 수 있거나, 안티-센스 가닥으로도 언급되는 비코딩 가닥일 수 있다.
본 발명의 방법에 사용되는 단리된 핵산 분자는, 선택적으로 하나 이상의 인트론을 갖는 개방 해독틀(ORF: open reading frame)을 포함하는 핵산 분자, 비제한적인 예를 들어, 하나 이상의 CDR의 하나 이상의 특정 부분, 예컨대 하나 이상의 중쇄 또는 경쇄의 CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3; 항-IL-23 항체 또는 가변 영역에 대한 코딩 서열을 포함하는 핵산 분자; 및 상기 기재된 것들과는 실질적으로 상이하지만 유전자 코드의 축퇴로 인해 본 명세서에 기재되고/되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같은 하나 이상의 항-IL-23 항체를 여전히 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 분자를 포함할 수 있다. 물론, 유전 코드는 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 따라서, 본 발명의 방법에서 사용되는 특이적 항-IL-23 항체를 코딩하는 이러한 축퇴 핵산 변이체를 생성하는 것은 당업자에게 일상적일 것이다. 예를 들어, 문헌[Ausubel, et al. 상기 문헌]을 참조하며, 이러한 핵산 변이체는 본 발명에 포함된다. 단리된 핵산 분자의 비제한적인 예에는 각각 HC CDR1, HC CDR2, HC CDR3, LC CDR1, LC CDR2 및 LC CDR3을 인코딩하는 핵산이 포함된다.
본 명세서에 나타낸 바와 같이, 항-IL-23 항체를 암호화하는 핵산을 포함하는 핵산 분자는, 그 자체로 항체 단편의 아미노산 서열을 암호화하는 것들; 전체 항체 또는 이의 일부에 대한 코딩 서열; 항체, 단편, 또는 부분에 대한 코딩 서열뿐만 아니라, 추가의 서열, 예컨대 스플라이싱 및 폴리아데닐화 신호(예를 들어, mRNA의 리보솜 결합 및 안정성)를 포함하는, 전사, mRNA 프로세싱에서 역할을 담당하는 전사되고 번역되지 않는 서열과 같은 비-코딩 5' 및 3' 서열을 포함하지만 이에 한정되지 않는 추가의 비-코딩 서열과 함께, 하나 이상의 인트론과 같은, 전술한 추가의 코딩 서열이 있거나 없는, 하나 이상의 신호 리더 또는 융합 펩티드의 코딩 서열; 추가의 작용기를 제공하는 것들과 같은, 추가의 아미노산을 코딩하는 추가의 코딩 서열을 포함할 수 있지만 이에 한정되지 않는다. 따라서, 항체를 인코딩하는 서열은 항체 단편 또는 일부를 포함하는 융합된 항체의 정제를 용이하게 하는 펩티드를 인코딩하는 서열과 같은 마커 서열에 융합될 수 있다.
본 명세서에 기재된 폴리뉴클레오티드에 선택적으로 혼성화하는 폴리뉴클레오티드
본 발명의 방법은 선택적인 혼성화 조건 하에서 본 명세서에 개시된 폴리뉴클레오티드에 혼성화하는 단리된 핵산을 사용한다. 따라서, 이러한 실시 형태의 폴리뉴클레오티드는 이러한 폴리뉴클레오티드를 포함하는 핵산을 단리하고/하거나, 검출하고/하거나, 정량화하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 폴리뉴클레오티드는 기탁된 라이브러리에서 부분 또는 전장의 클론을 동정하거나, 단리하거나, 증폭하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드는 단리된 cDNA 서열 또는 게놈이거나, 그렇지 않으면 인간 또는 포유류의 핵산 라이브러리로부터의 cDNA에 상보성이다.
바람직하게는, cDNA 라이브러리는 적어도 80%의 전장 서열, 바람직하게는 적어도 85% 또는 90%의 전장 서열, 보다 바람직하게는 적어도 95%의 전장 서열을 포함한다. cDNA 라이브러리는 희귀 서열의 제시를 증가시키도록 정규화될 수 있다. 낮거나 중등의 엄격성 혼성화 조건은 전형적이지만 비배타적으로, 상보성 서열에 비해 감소된 서열 동일성을 갖는 서열과 함께 사용된다. 중등 및 높은 엄격성 조건은 동일성이 더 큰 서열에 대해 선택적으로 사용될 수 있다. 낮게 엄격한 조건은 약 70%의 서열 동일성을 갖는 서열의 선택적인 혼성화를 허용하고 동원성(orthologous) 또는 이원성(paralogous) 서열을 확인하는 데 사용될 수 있다.
선택적으로, 폴리뉴클레오티드는 항체의 적어도 일부를 인코딩할 것이다. 폴리뉴클레오티드는 본 발명의 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드에 선택적으로 혼성화하기 위해 사용될 수 있는 핵산 서열을 포함한다. 예를 들어, 각각 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Ausubel, 상기 문헌]; 문헌[Colligan, 상기 문헌]을 참조한다.
핵산의 작제
단리된 핵산은 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, (a) 재조합 방법, (b) 합성 기술, (c) 정제 기술 및/또는 (d) 이들의 조합을 사용하여 제조될 수 있다.
핵산은 본 발명의 폴리뉴클레오티드 외에도 서열을 편리하게 포함할 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 엔도뉴클레아제 제한 부위를 포함하는 다중-클로닝 부위는 폴리뉴클레오티드의 단리를 돕기 위해 핵산 내로 삽입될 수 있다. 또한, 번역가능한 서열은 본 발명의 번역된 폴리뉴클레오티드의 단리를 돕기 위해 삽입될 수 있다. 예를 들어, 헥사-히스티딘 마커 서열은 본 발명의 단백질을 정제하는 편리한 수단을 제공한다. 코딩 서열을 제외하는 본 발명의 핵산은 선택적으로, 본 발명의 폴리뉴클레오티드의 클로닝 및/또는 발현을 위한 벡터, 어댑터 또는 링커이다.
추가의 서열은 클로닝 및/또는 발현에서 이들의 기능을 최적화하거나, 폴리뉴클레오티드의 단리를 돕거나, 세포 내로의 폴리뉴클레오티드의 도입을 개선하기 위해 이러한 클로닝 및/또는 발현 서열에 부가될 수 있다. 클로닝 벡터, 발현 벡터, 어댑터 및 링커의 사용이 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. (예를 들어, 문헌[Ausubel, 상기 문헌]; 또는 문헌[Sambrook, 상기 문헌]을 참조한다)
핵산 작제를 위한 재조합 방법
RNA, cDNA, 게놈 DNA, 또는 이들의 임의의 조합과 같은 단리된 핵산 조성물을 본 기술 분야의 당업자에게 알려진 임의의 수의 클로닝 방법을 사용하여 생물학적 공급원으로부터 얻을 수 있다. 일부 실시 형태에서, 엄격한 조건 하에서, 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 선택적으로 혼성화하는 올리고뉴클레오티드 프로브는 cDNA 또는 게놈 DNA 라이브러리에서 원하는 서열을 확인하기 위해 사용된다. RNA의 단리 및 cDNA 및 게놈 라이브러리의 작제가 당업자에게 잘 알려져 있다. (예를 들어, 문헌[Ausubel, 상기 문헌]; 또는 문헌[Sambrook, 상기 문헌]을 참조한다)
핵산 스크리닝 및 단리 방법
cDNA 또는 게놈 라이브러리는 본 명세서에 개시된 것과 같이, 본 발명의 방법에 사용되는 폴리뉴클레오티드의 서열에 기초한 프로브를 사용하여 스크리닝될 수 있다. 프로브를 게놈 DNA 또는 cDNA 서열과 혼성화하여, 동일하거나 상이한 유기체 내의 상동 유전자를 단리하는 데 사용할 수 있다. 다양한 정도의 혼성화 엄격성이 검정에 사용될 수 있으며; 혼성화 배지 또는 세척 배지가 엄격할 수 있음을 당업자는 인정할 것이다. 혼성화 조건이 더 엄격해지면, 이중체(duplex)를 형성하기 위해 프로브와 표적 사이의 상보성 정도가 더 커야 한다. 엄격성 정도는 온도, 이온강도, pH 및 포름아미드와 같은 부분 변성 용매의 존재 중 하나 이상에 의해 제어될 수 있다. 예를 들어, 혼성화 엄격성은 예를 들어, 포름아미드 농도를 0% 내지 50%의 범위 내에서 조정하여, 반응 용액의 극성을 변경하여 편리하게 변동된다. 검출가능한 결합에 필요한 상보성 정도 (서열 동일성)는 혼성화 배지 및/또는 세척 배지의 엄격성에 따라 변동될 것이다. 상보성 정도는 최적으로 100%, 또는 70 내지 100%, 또는 상기 범위 내의 임의의 범위 또는 값일 것이다. 그러나, 프로브 및 프라이머에서의 작은 서열 변화는 혼성화 배지 및/또는 세척 배지의 엄격성을 감소시켜 보상될 수 있음을 이해해야 한다.
RNA 또는 DNA의 증폭 방법은 본 기술 분야에 잘 알려져 있고, 과도한 실험을 실시하지 않으면서, 본 명세서에 제시된 교시 및 지침을 기초로 하여 본 발명에 따라 사용될 수 있다.
알려진 DNA 또는 RNA 증폭 방법은 폴리머라제 연쇄 반응(PCR) 및 관련 증폭 과정(예를 들어, Mullis 등의 미국 특허 제4,683,195호, 제4,683,202호, 제4,800,159호, 제4,965,188호; Tabor 등의 제4,795,699호 및 제4,921,794호; Innis의 제5,142,033호; Wilson 등의 제5,122,464호; Innis의 제5,091,310호; Gyllensten 등의 제5,066,584호; Gelfand 등의 제4,889,818호; Silver 등의 제4,994,370호; Biswas의 제4,766,067호; Ringold의 제4,656,134호 참조) 및 이중 가닥 DNA 합성을 위한 주형으로서 표적 서열에 대한 안티센스 RNA를 사용하는 RNA 매개 증폭(Malek 등의 미국 특허 제5,130,238호, 상표명 NASBA)을 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 이들 참고문헌의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 포함된다. (예를 들어, 문헌[Ausubel, 상기 문헌]; 또는 문헌[Sambrook, 상기 문헌]을 참조한다)
예를 들어, 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR) 기술은 본 발명의 방법에 사용되는 폴리뉴클레오티드 서열 및 관련 유전자를 게놈 DNA 또는 cDNA 라이브러리로부터 직접 증폭하기 위해 사용될 수 있다. 또한, PCR 및 다른 시험관내 증폭 방법은, 예를 들어 발현되는 단백질을 코딩하는 핵산 서열을 클로닝하고, 샘플 내의 원하는 mRNA의 존재를 검출하기 위한 프로브로서 사용하는 핵산을 제조하거나, 핵산 서열분석 또는 기타 목적에 유용할 수 있다. 시험관내 증폭 방법을 통해 당업자를 지도하기에 충분한 기술의 예는 문헌[Berger, 상기 문헌], 문헌[Sambrook, 상기 문헌], 및 문헌[Ausubel, 상기 문헌]뿐만 아니라 Mullis 등의 미국 특허 제4,683,202호(1987); 및 문헌[Innis, et al., PCR Protocols A Guide to Methods and Applications, Eds., Academic Press Inc., San Diego, CA (1990)]에서 확인된다. 게놈 PCR 증폭을 위한 시판용 키트가 본 기술 분야에 알려져 있다. 예를 들어, Advantage-GC Genomic PCR Kit (Clontech)를 참조한다. 추가로, 예를 들어, T4 유전자 32 단백질 (Boehringer Mannheim)은 긴 PCR 생성물의 수율을 개선하기 위해 사용될 수 있다.
핵산 작제를 위한 합성 방법
본 발명의 방법에 사용되는 단리된 핵산은 또한 알려진 방법에 의해 직접적인 화학적 합성으로 제조될 수 있다 (예를 들어, 문헌[Ausubel 등, 상기 문헌] 참조). 화학적 합성은 일반적으로 단일 가닥 올리고뉴클레오티드를 생성하는데, 이는 상보성 서열과의 혼성화에 의해 또는 단일 가닥을 주형으로서 사용하여 DNA 폴리머라제에 의한 중합에 의해 이중 가닥 DNA로 전환될 수 있다. 당업자라면 DNA의 화학적 합성이 약 100개 이상의 염기의 서열로 제한될 수 있는 반면, 더 긴 서열은 더 짧은 서열의 라이게이션에 의해 얻어질 수 있음을 인식할 것이다.
재조합 발현 카세트
본 발명은 핵산을 포함하는 재조합 발현 카세트를 사용한다. 본 발명의 방법에 사용되는 핵산 서열, 예를 들어 항체를 인코딩하는 cDNA 또는 게놈 서열이 적어도 하나의 원하는 숙주 세포 내로 도입될 수 있는 재조합 발현 카세트 작제에 사용될 수 있다. 재조합 발현 카세트는 전형적으로 원하는 숙주 세포 내에서 폴리뉴클레오티드의 전사를 유도하는 전사 개시 조절 서열에 작동가능하게 연결된 폴리뉴클레오티드를 포함할 것이다. 이종성 및 비이종성 (즉, 내인성) 프로모터 모두가 핵산의 발현을 유도하는 데 사용될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 프로모터, 인핸서 또는 기타 요소로서 작용하는 단리된 핵산이 폴리뉴클레오티드의 발현을 상향조절하거나 하향조절하기 위해 본 발명의 폴리뉴클레오티드의 비이종성 형태의 적절한 위치 (상류, 하류 또는 인트론 내)에 도입될 수 있다. 예를 들어, 내인성 프로모터는 돌연변이, 결실 및/또는 치환에 의해 생체내에서 또는 시험관내에서 변경될 수 있다.
벡터 및 숙주 세포
본 발명은 또한, 본 기술 분야에 잘 알려진 바와 같이, 단리된 핵산 분자를 포함하는 벡터, 재조합 벡터로 유전자 조작된 숙주 세포, 및 재조합 기술에 의한 하나 이상의 항-IL-23 항체의 생성에 관한 것이다. 예를 들어, 각각 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Sambrook, et al., 상기 문헌]; 문헌[Ausubel, et al., 상기 문헌]을 참조한다.
폴리뉴클레오티드는 숙주 내에서의 증식을 위해 선택가능한 마커를 함유하는 벡터에 선택적으로 결합될 수 있다. 일반적으로, 플라스미드 벡터는 침전물, 예를 들어 인산칼슘 침전물 내에, 또는 하전된 지질과의 복합체 내에 도입된다. 벡터가 바이러스인 경우, 적합한 패키징(packaging) 세포주를 사용하여 시험관내에서 패키징된 후, 숙주 세포 내로 형질도입될 수 있다.
DNA 삽입물은 적합한 프로모터에 작동가능하게 연결되어야 한다. 발현 구조물은 전사 개시를 위한 부위, 종결을 위한 부위 및 전사된 영역에서 번역을 위한 리보솜 결합 부위를 추가로 함유할 것이다. 구조물에 의해 발현된 성숙 전사물의 코딩 부분은 바람직하게는 번역될 mRNA의 시작부에서 개시하는 번역 개시 코돈 및 그의 말단부에 적절하게 위치한 종료 코돈 (예를 들어, UAA, UGA 또는 UAG)을 포함할 것이며, 포유류 또는 진핵 세포 발현에는 UAA 및 UAG가 바람직하다.
발현 벡터는 바람직하게, 그러나 선택적으로 하나 이상의 선택가능한 마커를 포함할 것이다. 이러한 마커는, 예를 들어, 진핵 세포 배양을 위한 메토트렉세이트(MTX), 다이하이드로폴레이트 리덕타제(DHFR, 미국 특허 제4,399,216호; 제4,634,665호; 제4,656,134호; 제4,956,288호; 제5,149,636호; 제5,179,017호), 암피실린, 네오마이신(G418), 마이코페놀산, 또는 글루타민 신테타제(GS, 미국 특허 제5,122,464호; 제5,770,359호; 제5,827,739호) 내성 및 E. 콜라이(E. coli) 및 다른 세균 또는 원핵세포에서의 배양을 위한 테트라사이클린 또는 암피실린 내성 유전자를 포함하지만 이에 한정되지 않는다(상기 특허는 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함됨). 상술한 숙주 세포에 적절한 배양 배지 및 조건이 본 기술 분야에 알려져 있다. 적절한 벡터는 당업자에게 명백할 것이다. 숙주 세포 내로의 벡터 구조물의 도입은 인산칼슘 형질주입, DEAE-덱스트란 매개 형질주입, 양이온성 지질 매개 형질주입, 전기천공, 형질도입, 감염 또는 다른 알려진 방법에 의해 수행될 수 있다. 이러한 방법은 문헌[Sambrook, 상기 문헌, 챕터 1-4 및 16-18]; 문헌[Ausubel, 상기 문헌, Chapters 1, 9, 13, 15, 16]과 같이 본 기술 분야에 기재되어 있다.
본 발명의 방법에 사용되는 적어도 하나의 항체는 융합 단백질과 같은 변형된 형태로 발현될 수 있고, 분비 신호뿐만 아니라 추가의 이종성 기능 영역을 포함할 수 있다. 예를 들어, 추가의 아미노산, 특히 하전된 아미노산의 영역이 정제 동안, 또는 후속 취급 및 저장 동안 숙주 세포에서의 안정성 및 지속성을 개선시키기 위해 항체의 N-말단에 부가될 수 있다. 또한, 펩티드 모이어티가 정제를 용이하게 하기 위해 본 발명의 항체에 부가될 수 있다. 이러한 영역은 항체 또는 적어도 하나의 이의 단편의 최종 제조 전에 제거될 수 있다. 이러한 방법은 많은 표준 실험실 매뉴얼, 예컨대 문헌[Sambrook, 상기 문헌, 챕터 17.29-17.42 및 18.1-18.74]; 문헌[Ausubel, 상기 문헌, 챕터 16, 17, 및 18]에 기재되어 있다.
당업자는 본 발명의 방법에 사용되는 단백질을 인코딩하는 핵산의 발현에 이용가능한 많은 발현 시스템에 대해 잘 알고 있다. 대안적으로, 핵산은 항체를 인코딩하는 내인성 DNA를 함유하는 숙주 세포 내에서 (조작에 의해) 턴온(turn on)하여 숙주 세포 내에서 발현될 수 있다. 이러한 방법은, 예를 들어 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함되는, 미국 특허 제5,580,734호, 제5,641,670호, 제5,733,746호 및 제5,733,761호에 기재되어 있는 바와 같이 본 기술 분야에 알려져 있다.
항체, 이의 특정 부분 또는 변이체의 생성에 유용한 세포 배양물의 예는 포유류 세포이다. 포유류 세포 시스템은 종종 세포의 단일층 형태로 존재할 수 있지만, 포유류 세포 현탁액 또는 생물반응기도 사용될 수 있다. 온전한 글리코실화 단백질을 발현할 수 있는 다수의 적합한 숙주 세포주가 본 기술 분야에 개발되어 있고, COS-1(예를 들어, ATCC CRL 1650), COS-7(예를 들어, ATCC CRL1651), HEK293, BHK21(예를 들어, ATCC CRL-10), CHO(예를 들어, ATCC CRL 1610) 및 BSC-1(예를 들어, ATCC CRL-26) 세포주, Cos-7 세포, CHO 세포, hep G2 세포, P3X63Ag8.653, SP2/0-Ag14, 293 세포, HeLa 세포 등을 포함하며, 이들은, 예를 들어 미국 버지니아주 매나서스 소재의 American Type Culture Collection(www.atcc.org)으로부터 용이하게 입수가능하다. 바람직한 숙주 세포는 림프구 기원의 세포, 예를 들어 골수종 및 림프종 세포를 포함한다. 특히 바람직한 숙주 세포는 P3X63Ag8.653 세포 (ATCC 기탁 번호 CRL-1580) 및 SP2/0-Ag14 세포 (ATCC 기탁 번호 CRL-1851)이다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 재조합 세포는 P3X63Ab8.653 또는 SP2/0-Ag14 세포이다.
이들 세포에 대한 발현 벡터는 하기 발현 제어 서열 중 하나 이상, 비제한적인 예로서 복제 기점; 프로모터(예를 들어, 후기 또는 초기 SV40 프로모터, CMV 프로모터(미국 특허 제5,168,062호; 제5,385,839호), HSV tk 프로모터, pgk(포스포글리세레이트 키나제) 프로모터, EF-1 알파 프로모터(미국 특허 제5,266,491호), 하나 이상의 인간 면역글로불린 프로모터; 인핸서, 및/또는 프로세싱 정보 부위, 예컨대 리보솜 결합 부위, RNA 스플라이스 부위, 폴리아데닐화 부위(예를 들어, SV40 라지 T Ag 폴리 A 부가 부위), 및 전사 종결자 서열을 포함할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Ausubel et al., 상기 문헌]; 문헌[Sambrook, et al., 상기 문헌]을 참조한다. 본 발명의 핵산 또는 단백질 생성에 유용한 다른 세포가 알려져 있고/있거나, 예를 들어 세포주 및 하이브리도마의 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 카탈로그 (www.atcc.org) 또는 다른 공지의 또는 상업 공급원으로부터 이용가능하다.
진핵 숙주 세포가 사용될 경우, 폴리아데닐화 또는 전사 종결자 서열은 전형적으로 벡터에 통합된다. 종결자 서열의 예는 소 성장 호르몬 유전자로부터의 폴리아데닐화 서열이다. 전사물의 정확한 스플라이싱을 위한 서열도 포함될 수 있다. 스플라이싱 서열의 예는 SV40으로부터의 VP1 인트론이다 (문헌[Sprague, et al., J. Virol. 45:773-781 (1983)]). 추가로, 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, 숙주 세포 내의 복제를 조절하는 유전자 서열은 벡터 내로 도입될 수 있다.
항체의 정제
항-IL-23 항체는 단백질 A 정제, 황산암모늄 또는 에탄올 침전, 산 추출, 음이온 또는 양이온 교환 크로마토그래피, 포스포셀룰로오스 크로마토그래피, 소수성 상호작용 크로마토그래피, 친화도 크로마토그래피, 하이드록실아파타이트 크로마토그래피, 및 렉틴 크로마토그래피를 포함하지만 이에 한정되지 않는 잘 알려진 방법에 의해 재조합 세포 배양물로부터 회수 및 정제될 수 있다. 고성능 액체 크로마토그래피 ("HPLC")도 정제를 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 각각이 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함되는, 문헌[Colligan, Current Protocols in Immunology] 또는 문헌[Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997-2001), 예를 들어, 챕터 1, 4, 6, 8, 9, 10]을 참조한다.
본 발명의 방법에 사용되는 항체는 천연 정제된 생성물, 화학적 합성 절차의 생성물, 및 예를 들어 효모, 고등 식물, 곤충 및 포유류 세포를 포함하는 진핵 숙주로부터 재조합 기술에 의해 생성된 생성물을 포함한다. 재조합 생성 절차에 사용된 숙주에 따라, 항체는 글리코실화되거나 비-글리코실화될 수 있고, 글리코실화가 바람직하다. 이러한 방법은 많은 표준 실험실 매뉴얼, 예컨대 문헌[Sambrook, 상기 문헌, 섹션 17.37-17.42]; 문헌[Ausubel, 상기 문헌, 챕터 10, 12, 13, 16, 18, 및 20], 문헌[Colligan, Protein Science, 상기 문헌, 챕터 12-14]에 기재되어 있으며, 이들 모두는 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
항-IL-23 항체.
본 발명에 따른 항-IL-23 항체는 면역글로불린 분자의 적어도 일부, 비제한적인 예로서, 하나 이상의 리간드 결합 부분(LBP), 비제한적인 예로서, 중쇄 또는 경쇄의 상보성 결정 영역(CDR) 또는 이의 리간드 결합 부분, 중쇄 또는 경쇄 가변 영역, 프레임워크 영역(예를 들어, FR1, FR2, FR3, FR4, 또는 이의 단편, 선택적으로 하나 이상의 치환, 삽입, 또는 결실을 추가로 포함함), 중쇄 또는 경쇄 불변 영역(예를 들어, 하나 이상의 CH1, 힌지1, 힌지2, 힌지3, 힌지4, CH2, 또는 CH3, 또는 이의 단편을 포함하고, 선택적으로 하나 이상의 치환, 삽입, 또는 결실을 추가로 포함함), 또는 이의 임의의 부분을 포함하는 분자를 함유하는 임의의 단백질 또는 펩티드를 포함하며, 이는 항체 내로 혼입될 수 있다. 항체는 인간, 마우스, 토끼, 래트, 설치류, 영장류, 또는 이의 임의의 조합 등과 같으나 이에 한정되지 않는 임의의 포유류를 포함하거나 이로부터 유래될 수 있다.
본 발명의 방법에 사용되는 단리된 항체는 임의의 적합한 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩되는, 본 명세서에 개시된 항체 아미노산 서열, 또는 임의의 단리되거나 제조된 항체를 포함한다. 바람직하게는, 인간 항체 또는 항원-결합 단편은 인간 IL-23에 결합함으로써 단백질의 하나 이상의 생물학적 활성을 부분적으로 또는 실질적으로 중화시킨다. 하나 이상의 IL-23 단백질 또는 단편의 하나 이상의 생물학적 활성을 부분적으로 또는 바람직하게는 실질적으로 중화시키는 항체, 이의 특정 부분, 또는 변이체는 단백질 또는 단편에 결합함으로써 IL-23 수용체에 대한 IL-23의 결합을 통해 또는 다른 IL-23-의존성 또는 IL-23-매개 기전을 통해 매개되는 활성을 억제할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "중화 항체"는 IL-23-의존성 활성을 검정에 따라 약 20 내지 120%, 바람직하게는 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100% 이상만큼 억제할 수 있는 항체를 지칭한다. IL-23-의존성 활성을 억제하는 항-IL-23 항체의 능력은 바람직하게는 본 명세서에 기재되고/되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, 하나 이상의 적합한 IL-23 단백질 또는 수용체 분석에 의해 평가된다. 인간 항체는 임의의 종류 (IgG, IgA, IgM, IgE, IgD 등) 또는 동종형일 수 있고, 카파 또는 람다 경쇄를 포함할 수 있다. 일 실시 형태에서, 인간 항체는 IgG 중쇄 또는 정의된 단편, 예를 들어, 동종형, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중 하나 이상을 포함한다 (예를 들어, γ1, γ2, γ3, γ4). 이러한 유형의 항체는, 본 명세서에 기재되고/되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, 하나 이상의 인간 경쇄 (예를 들어, IgG, IgA 및 IgM) 도입유전자를 포함하는 유전자도입 마우스 또는 다른 유전자도입 비인간 포유류를 사용함으로써 제조될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 항-IL-23 인간 항체는 IgG1 중쇄 및 IgG1 경쇄를 포함한다.
항체는 하나 이상의 IL-23 단백질, 서브유닛, 단편, 부분, 또는 이들의 임의의 조합에 특이적인 하나 이상의 특정 에피토프에 결합한다. 하나 이상의 에피토프는 단백질의 적어도 하나의 부분을 포함하는 하나 이상의 항체 결합 영역을 포함하고, 에피토프는 바람직하게는 상기 단백질의 하나 이상의 세포외, 가용성, 친수성, 외부 또는 세포질 부분으로 이루어진다.
일반적으로, 인간 항체 또는 항원-결합 단편은 적어도 하나의 중쇄 가변 영역의 적어도 하나의 인간 상보성 결정 영역(CDR1, CDR2 및 CDR3) 또는 변이체 및 적어도 하나의 경쇄 가변 영역의 적어도 하나의 인간 상보성 결정 영역(CDR1, CDR2 및 CDR3) 또는 변이체를 포함하는 항원-결합 영역을 포함할 것이다. CDR 서열은 인간 생식세포계열 서열로부터 유래되거나, 인간 생식세포계열 서열과 거의 일치할 수 있다 예를 들어, 원래 비인간 CDR로부터 유래된 합성 라이브러리로부터의 CDR을 사용할 수 있다. 이러한 CDR은 원래 비인간 서열로부터의 보존적 치환의 도입에 의해 형성될 수 있다. 다른 특정 실시 형태에서, 항체 또는 항원-결합 부분 또는 변이체는 상응하는 CDR 1, 2 및/또는 3의 아미노산 서열을 갖는 적어도 하나의 경쇄 CDR(즉, CDR1, CDR2 및/또는 CDR3)의 적어도 일부분을 포함하는 항원-결합 영역을 가질 수 있다.
그러한 항체는, 종래의 기법을 사용하여 항체의 다양한 부분들(예를 들어, CDR, 프레임워크)을 함께 화학적으로 연결하거나, 재조합 DNA 기술의 종래 기법을 사용하여 항체를 인코딩하는 (하나 이상의) 핵산 분자를 제조하고 발현시키거나, 임의의 다른 적합한 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
항-IL-23 특이적 항체는 정의된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 중쇄 또는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 예를 들어, 바람직한 실시 형태에서, 항-IL-23 항체는 선택적으로 서열 번호 106의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 중쇄 가변 영역 및/또는 선택적으로 서열 번호 116의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 경쇄 가변 영역 중 하나 이상을 포함한다. 본 기술 분야에 알려지고/알려지거나 본 명세서에 기재된 바와 같이, 적합한 방법, 예컨대 파아지 디스플레이 (문헌[Katsube, Y., et al., Int J Mol. Med, 1(5):863-868 (1998)]) 또는 유전자도입 동물을 사용하는 방법을 사용하여 인간 Il-23에 결합하고 정의된 중쇄 또는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체를 제조할 수 있다. 예를 들어, 기능적으로 재배열된 인간 면역글로불린 중쇄 도입유전자 및 기능적으로 재배열될 수 있는 인간 면역글로불린 경쇄 유전자좌로부터의 DNA를 포함하는 도입유전자를 포함하는 유전자도입 마우스를 인간 IL-23 또는 이의 단편으로 면역화하여 항체의 생성을 유도할 수 있다. 필요한 경우, 항체 생성 세포가 단리될 수 있고, 하이브리도마 또는 다른 불멸화 항체-생성 세포는 본 명세서에 기재된 및/또는 본 기술 분야에 알려진 바와 같이 제조될 수 있다. 대안적으로, 항체, 특정 부분 또는 변이체는 적합한 숙주 세포에서 코딩 핵산 또는 이의 일부를 사용하여 발현될 수 있다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 아미노산 서열과 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 포함하는 항체, 항원-결합 단편, 면역글로불린 사슬 및 CDR에 관한 것이다. 바람직하게는, 이러한 항체 또는 항원-결합 단편 및 이러한 사슬 또는 CDR을 포함하는 항체는 고친화도(예를 들어, 약 10-9 M 이하의 KD)로 인간 IL-23에 결합할 수 있다. 본 명세서에 기재된 서열과 실질적으로 동일한 아미노산 서열은 보존적 아미노산 치환 및 아미노산 결실 및/또는 삽입을 포함하는 서열을 포함한다. 보존적 아미노산 치환은 제1 아미노산의 것과 유사한 화학적 및/또는 물리적 특성 (예를 들어, 전하, 구조, 극성, 소수성/친수성)을 갖는 제2 아미노산에 의한 제1 아미노산의 대체를 말한다. 보존적 치환은 하기 그룹의 하나의 아미노산의 다른 아미노산에 의한 대체를 제한 없이 포함한다: 라이신 (K), 아르기닌 (R) 및 히스티딘 (H); 아스파르테이트 (D) 및 글루타메이트 (E); 아스파라긴 (N), 글루타민 (Q), 세린 (S), 트레오닌 (T), 티로신 (Y), K, R, H, D 및 E; 알라닌 (A), 발린 (V), 류신 (L), 아이소류신 (I), 프롤린 (P), 페닐알라닌 (F), 트립토판 (W), 메티오닌 (M), 시스테인 (C) 및 글리신 (G); F, W 및 Y; C, S 및 T.
아미노산 코드
본 발명의 항-IL-23 항체를 구성하는 아미노산은 종종 약어로 표시된다. 아미노산 표기는 본 기술 분야에서 잘 이해되는 바와 같이 아미노산을 이의 1-문자 코드, 이의 3-문자 코드, 명칭, 또는 3 뉴클레오티드 코돈(들)에 의해 지정함으로써 표시될 수 있다 (문헌[Alberts, B., et al., Molecular Biology of The Cell, Third Ed., Garland Publishing, Inc., New York, 1994] 참조):
Figure pct00001
본 발명의 방법에서 사용되는 항-IL-23 항체는 본 명세서에 특정된 바와 같이 천연 돌연변이 또는 인공 조작으로부터의 하나 이상의 아미노산 치환, 결실, 또는 첨가를 포함할 수 있다.
숙련자에 의해 생성되는 아미노산 치환의 수는 상기 기재된 것을 포함하는 다수의 인자에 따라 달라진다. 일반적으로 말하면, 임의의 주어진 항-IL-23 항체, 단편, 또는 변이체에 대한 아미노산 치환, 삽입, 또는 결실의 수는 본 명세서에 특정된 바와 같이 40, 30, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1개 이하, 예컨대 1 내지 30개 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값일 것이다.
기능에 필수적인 항-IL-23 특이적 항체 내의 아미노산을 본 기술 분야에 알려진 방법, 예컨대 부위 지정 돌연변이유발 또는 알라닌-스캐닝 돌연변이유발(예를 들어, 문헌[Ausubel, 상기 문헌, 챕터 8, 15]; 문헌[Cunningham and Wells, Science 244:1081-1085(1989)])에 의해 확인할 수 있다. 후자의 절차는 분자 내의 모든 잔기에 단일 알라닌 돌연변이를 도입한다. 이어서, 생성되는 돌연변이 분자를 하나 이상의 IL-23 중화 활성과 같으나 이에 한정되지 않는 생물학적 활성에 대해 시험한다. 항체 결합에 결정적인 부위를 또한 결정화, 핵자기 공명 또는 광친화도 표지화 (문헌[Smith, et al., J. Mol. Biol. 224:899-904 (1992)] 및 문헌[de Vos, et al., Science 255:306-312 (1992)])와 같은 구조 분석에 의해 확인할 수 있다.
항-IL-23 항체는 서열 번호 5, 20, 44, 50, 56, 및 73 중 하나 이상의 연속 아미노산 중 5개 내지 전부로부터 선택되는 하나 이상의 부분, 서열, 또는 조합을 포함할 수 있지만 이에 한정되지 않는다.
IL-23 항체 또는 특정 부분 또는 변이체는, 상기 서열 번호의 3 내지 5개 이상의 연속 아미노산; 상기 서열 번호의 5 내지 17개의 연속 아미노산, 상기 서열 번호의 5 내지 10개의 연속 아미노산, 상기 서열 번호의 5 내지11개의 연속 아미노산, 상기 서열 번호의 5 내지7개의 연속 아미노산; 상기 5 내지 9개의 연속 아미노산으로부터 선택된 하나 이상의 부분, 서열, 또는 조합을 포함할 수 있지만 이에 한정되지 않는다.
선택적으로, 항-IL-23 항체는 상기 서열 번호의 5, 17, 10, 11, 7, 9, 119, 또는 108개의 연속 아미노산의 70 내지 100% 중 하나 이상의 폴리펩티드를 추가로 포함할 수 있다. 일 실시 형태에서, 면역글로불린 사슬, 또는 이의 부분(예를 들어 가변 영역, CDR)의 아미노산 서열은 상기 서열 번호 중 하나 이상의 상응하는 사슬의 아미노산 서열에 대해 약 70 내지 100%의 동일성(예를 들어, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값)을 갖는다. 예를 들어, 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 상기 서열 번호의 서열과 비교할 수 있거나, 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 상기 서열 번호와 비교할 수 있다. 바람직하게는, 70 내지 100% 아미노산 동일성(즉, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값)은 당업계에 공지된 바와 같이 적합한 컴퓨터 알고리즘을 이용하여 결정된다.
본 기술 분야에 알려진 바와 같은 "동일성"은 서열을 비교하여 결정되는, 둘 이상의 폴리펩티드 서열 또는 둘 이상의 폴리뉴클레오티드 서열 사이의 관계이다. 본 기술 분야에서, "동일성"은 또한 이러한 서열의 스트링 사이의 매치에 의해 결정되는, 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드 서열 사이의 서열 관련도를 의미한다. "동일성" 및 "유사성"은 문헌[Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988]; 문헌[Biocomputing:Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993]; 문헌[Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994]; 문헌[Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987]; 및 문헌[Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991]; 및 문헌[Carillo, H., and Lipman, D., Siam J. Applied Math., 48:1073 (1988)]에 기재된 것들을 포함하지만 이에 한정되지 않는 알려진 방법에 의해 용이하게 계산할 수 있다. 또한, 동일성 백분율 값은 벡터 NTI 스윗 8.0(Vector NTI Suite 8.0) (미국 메릴랜드주 프레데릭 소재의 Informax)의 얼라인엑스(AlignX) 요소에 대한 디폴트 설정치를 이용하여 생성된 아미노산 및 뉴클레오티드 서열 정렬로부터 얻을 수 있다.
동일성을 결정하는 바람직한 방법은 시험한 서열 사이에서 가장 큰 매치를 제공하도록 설계된다. 동일성 및 유사성을 결정하는 방법은 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 프로그램에 코딩되어 있다. 2개의 서열 사이의 동일성 및 유사성을 결정하는 바람직한 컴퓨터 프로그램 방법은 GCG 프로그램 패키지(문헌[Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research 12(1): 387 (1984)]), BLASTP, BLASTN, 및 FASTA(문헌[Atschul, S. F. et al., J. Molec. Biol. 215:403-410 (1990)])를 포함하지만 이에 한정되지 않는다. BLAST X 프로그램은 NCBI 및 다른 공급원으로부터 공개적으로 입수가능하다(문헌[BLAST Manual, Altschul, S., et al., NCBINLM NIH Bethesda, Md. 20894]: 문헌[Altschul, S., et al., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990)]). 또한, 잘 알려진 스미스 와트만(Smith Waterman) 알고리즘을 사용하여 동일성을 결정할 수 있다.
폴리펩티드 서열 비교에 바람직한 파라미터는 하기를 포함한다:
(1) 알고리즘: 문헌[Needleman and Wunsch, J. Mol Biol. 48:443-453 (1970)] 비교 매트릭스: 문헌[Hentikoff and Hentikoff, Proc. Natl. Acad. Sci, USA. 89:10915-10919 (1992)]으로부터의 BLOSSUM62.
갭 페널티: 12
갭 길이 페널티: 4
이들 파라미터에 유용한 프로그램은 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 Genetics Computer Group으로부터의 "갭" 프로그램으로서 공개적으로 입수가능하다. 전술한 파라미터는 펩티드 서열 비교를 위한 디폴트 파라미터이다(말단 갭에 대한 페널티가 없음과 더불어).
폴리뉴클레오티드 비교에 바람직한 파라미터는 하기를 포함한다:
(1) 알고리즘: 문헌[Needleman and Wunsch, J. Mol Biol. 48:443-453 (1970)]
비교 매트릭스: 일치=+10, 불일치= 0
갭 페널티: 50
갭 길이 페널티: 3
미국 위스콘신주 매디슨 소재의 Genetics Computer Group으로부터의 "갭" 프로그램으로서 입수가능하다. 이들은 핵산 서열 비교를 위한 디폴트 파라미터이다.
예로서, 폴리뉴클레오티드 서열은 다른 서열과 동일할 수 있거나 (즉, 100% 동일), 참조 서열과 비교하여 소정 정수 이하의 뉴클레오티드 변경을 포함할 수 있다. 이러한 변경은 하나 이상의 뉴클레오티드 결실, 전이 및 전환을 포함하는 치환, 또는 삽입으로 이루어진 군으로부터 선택되며, 변경은 참조 뉴클레오티드 서열의 5' 또는 3' 말단 위치에서 발생하거나, 참조 서열 내의 하나 이상의 연속 그룹에서 또는 참조 서열 내의 뉴클레오티드 중에 개별적으로 산재된 이러한 말단 위치 사이의 임의의 위치에서 발생할 수 있다. 뉴클레오티드 변경의 수는 서열 내의 뉴클레오티드의 총 수에 각각의 % 동일성의 수치 %를 곱하고(100으로 나눔), 그 곱을 서열 내의 뉴클레오티드의 총 수로부터 감산함으로써, 또는
n.sub.n.ltorsim.x.sub.n -(x.sub.n.y)에 의해 결정되며,
여기서, n.sub.n은 뉴클레오티드 변경의 수이고, x.sub.n은 서열 내의 뉴클레오티드의 총수이며, y는, 예를 들어, 70%에 대해 0.70, 80%에 대해 0.80, 85%에 대해 0.85, 90%에 대해 0.90, 95%에 대해 0.95 등이고, 여기서 x.sub.n과 y의 임의의 비-정수 곱은 x.sub.n으로부터 감산하기 전에 가장 가까운 정수로 내림한다.
상기 서열 번호를 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열의 변경은 이 코딩 서열에서 넌센스, 미스센스, 또는 프레임시프트 돌연변이(frameshift mutation)를 생성함으로써 이러한 변경 후에 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 폴리펩티드를 변경할 수 있다. 유사하게, 폴리펩티드 서열은 상기 서열 번호의 참조 서열과 동일할 수 있거나(즉, 100% 동일함), % 동일성이 100% 미만이도록 참조 서열에 비교하여 그것이 소정 정수 이하의 아미노산 변경을 포함할 수 있다. 이러한 변경은 하나 이상의 아미노산 결실, 보존적 및 비보존적 치환을 포함하는 치환, 또는 삽입으로 이루어진 군으로부터 선택되며, 변경은 참조 폴리펩티드 서열의 아미노- 또는 카르복시-말단 위치에서 발생하거나, 참조 서열 내의 하나 이상의 연속 그룹에서 또는 참조 서열 내의 아미노산 사이에 개별적으로 산재된 말단 위치 사이의 임의의 위치에서 발생할 수 있다. 주어진 % 동일성에 대한 아미노산 변경의 수는 상기 서열 번호 내의 아미노산의 총 수에 각각의 % 동일성의 수치 %를 곱한 후(100으로 나눔), 그 곱을 상기 서열 번호 내의 아미노산의 총 수로부터 감산함으로써, 또는:
n.sub.a.ltorsim.x.sub.a -(x.sub.a.y)에 의해 결정되며,
여기서, n.sub.a는 아미노산 변경의 수이고, x.sub.a는 상기 서열 번호 내의 아미노산의 총 수이며, y 는, 예를 들어, 70%에 대해 0.70, 80%에 대해 0.80, 85%에 대해 0.85 등이며, 여기서 x.sub.a와 y의 임의의 비-정수 곱은 x.sub.a로부터 감산하기 전에 가장 가까운 정수로 내림한다.
예시적인 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열 및 이의 부분이 상기 서열 번호에 제공된다. 본 발명의 항체 또는 이의 특정 변이체는 본 발명의 항체로부터의 임의의 수의 연속 아미노산 잔기를 포함할 수 있으며, 그 수는 항-IL-23 항체 내의 10 내지 100%의 연속 잔기의 수로 이루어진 정수의 군으로부터 선택된다. 선택적으로, 연속된 아미노산들의 이러한 하위서열(subsequence)은 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250개 또는 그 이상의 아미노산 길이 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값이다. 또한, 그러한 하위서열의 개수는 1 내지 20, 예컨대 적어도 2, 3, 4, 또는 5로 이루어진 군으로부터 선택되는 임의의 정수일 수 있다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 생물학적으로 활성인 항체를 포함한다. 생물학적으로 활성인 항체는 천연(비-합성) 내인성이거나 관련되고 공지된 항체의 적어도 20%, 30%, 또는 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 60%, 또는 70%, 가장 바람직하게는 적어도 80%, 90%, 또는 95% 내지 100%, 또는 그 이상 (제한 없이 최대 10배의 비활성도를 포함함)의 비활성도(specific activity)를 갖는다. 효소 활성 및 기질 특이성을 검정하는 방법 및 정량화하는 수단이 당업자에게 잘 알려져 있다.
다른 태양에서, 본 발명은 유기 모이어티의 공유 부착에 의해 변형된, 본 명세서에 기재된 인간 항체 및 항원-결합 단편에 관한 것이다. 이러한 변형은 약동학적 특성이 개선된 (예를 들어, 생체내 혈청 반감기 증가) 항체 또는 항원-결합 단편을 생성할 수 있다. 유기 모이어티는 선형 또는 분지형 친수성 중합체기, 지방산기 또는 지방산 에스테르기일 수 있다. 특정 실시 형태에서, 친수성 중합체기는 약 800 내지 약 120,000 달톤의 분자량을 가질 수 있으며, 폴리알칸 글리콜 (예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜 (PPG)), 탄수화물 중합체, 아미노산 중합체 또는 폴리비닐 피롤리돈일 수 있고, 지방산 또는 지방산 에스테르기는 약 8 내지 약 40개의 탄소 원자를 포함할 수 있다.
변형된 항체 및 항원-결합 단편은 항체에 직접 또는 간접적으로 공유결합된 하나 이상의 유기 모이어티를 포함할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 항원-결합 단편에 결합되는 각각의 유기 모이어티는 독립적으로 친수성 중합체기, 지방산기 또는 지방산 에스테르기일 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "지방산"은 모노-카르복실산 및 다이-카르복실산을 포함한다. 본 명세서에서 사용될 때 용어 "친수성 중합체기"는 옥탄 중에서보다 물 중에서 더 가용성인 유기 중합체를 지칭한다. 예를 들어, 폴리라이신은 옥탄 중에서보다 물 중에서 더 가용성이다. 따라서, 폴리라이신의 공유 부착에 의해 변형된 항체가 본 발명에 포함된다. 본 발명의 항체의 변형에 적합한 친수성 중합체는 선형 또는 분지형일 수 있으며, 예를 들어 폴리알칸 글리콜 (예를 들어, PEG, 모노메톡시-폴리에틸렌 글리콜 (mPEG), PPG 등), 탄수화물 (예를 들어, 덱스트란, 셀룰로스, 올리고당, 다당류 등), 친수성 아미노산의 중합체 (예를 들어, 폴리라이신, 폴리아르기닌, 폴리아스파르테이트 등), 폴리알칸 옥사이드 (예를 들어, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리프로필렌 옥사이드 등) 및 폴리비닐 피롤리돈을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 항체를 변형시키는 친수성 중합체는 별개의 분자 실체(entity)로서 약 800 내지 약 150,000 달톤의 분자량을 갖는다. 예를 들어, PEG5000 및 PEG20,000 (이때, 아래첨자는 중합체의 평균 분자량 (달톤)임)이 사용될 수 있다. 친수성 중합체기는 1 내지 약 6개의 알킬, 지방산 또는 지방산 에스테르기로 치환될 수 있다. 지방산 또는 지방산 에스테르기로 치환된 친수성 중합체를 적합한 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 아민기를 포함하는 중합체는 지방산 또는 지방산 에스테르의 카르복실레이트와 커플링될 수 있으며, 지방산 또는 지방산 에스테르 상의 활성화된 카르복실레이트 (예를 들어, N,N-카르보닐 다이이미다졸로 활성화됨)는 중합체 상의 하이드록실기와 커플링될 수 있다.
본 발명의 항체의 변형에 적합한 지방산과 지방산 에스테르는 포화될 수 있거나, 하나 이상의 불포화 단위를 함유할 수 있다. 본 발명의 항체의 변형에 적합한 지방산에는, 예를 들어 n-도데카노에이트 (C12, 라우레이트), n-테트라데카노에이트 (C14, 미리스테이트), n-옥타데카노에이트 (C18, 스테아레이트), n-에이코사노에이트 (C20, 아라키데이트), n-도코사노에이트 (C22, 베헤네이트), n-트라이아콘타노에이트 (C30), n-테트라콘타노에이트 (C40), 시스-Δ9-옥타데카노에이트 (C18, 올레에이트), 모든 시스-Δ5,8,11,14-에이코사테트라에노에이트 (C20, 아라키도네이트), 옥탄다이오산, 테트라데칸다이오산, 옥타데칸다이오산, 도코산다이오산 등이 포함된다. 적합한 지방산 에스테르에는 선형 또는 분지형 저급 알킬기를 포함하는 다이카르복실산의 모노-에스테르가 포함된다. 저급 알킬기는 1 내지 약 12개, 바람직하게는 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 포함할 수 있다.
변형된 인간 항체 및 항원-결합 단편은 적합한 방법을 사용하여, 예를 들어 하나 이상의 변형제와의 반응에 의해 제조될 수 있다. 본 명세서에서 사용될 때, 용어 "변형제"는 활성화기를 포함하는 적합한 유기기 (예를 들어, 친수성 중합체, 지방산, 지방산 에스테르)를 지칭한다. "활성화기"는 적절한 조건 하에 제2 화학기와 반응하여 변형제와 제2 화학기 사이의 공유 결합을 형성할 수 있는 화학 모이어티 또는 작용기이다. 예를 들어, 아민-반응성 활성화기에는 토실레이트, 메실레이트, 할로 (클로로, 브로모, 플루오로, 요오도), N-하이드록시석신이미딜 에스테르 (NHS) 등과 같은 친전자성 기가 포함된다. 티올과 반응할 수 있는 활성화기에는, 예를 들어 말레이미드, 요오도아세틸, 아크릴롤일, 피리딜 다이설파이드, 5-티올-2-니트로벤조산 티올 (TNB-티올) 등이 포함된다. 알데하이드 작용기는 아민- 또는 히드라지드-함유 분자와 커플링될 수 있고, 아지드기는 3가 인산기와 반응하여 포스포르아미데이트 또는 포스포르이미드 결합을 형성할 수 있다. 활성화기를 분자 내로 도입하기에 적합한 방법은 본 기술 분야에 알려져 있다 (예를 들어, 문헌[Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)]을 참조한다). 활성화기는 유기기 (예를 들어, 친수성 중합체, 지방산, 지방산 에스테르)에 직접 결합되거나, 링커 모이어티, 예를 들어 2가 C1 내지 C12 기 (이때, 하나 이상의 탄소 원자는 산소, 질소 또는 황과 같은 헤테로원자에 의해 대체될 수 있음)를 통해 결합될 수 있다. 적합한 링커 모이어티에는, 예를 들어, 테트라에틸렌 글리콜, -(CH2)3-, -NH-(CH2)6-NH-, -(CH2)2-NH- 및 -CH2-O-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH-NH-가 포함된다. 예를 들어, 모노-Boc-알킬다이아민 (예를 들어, 모노-Boc-에틸렌다이아민, 모노-Boc-다이아미노헥산)을 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필) 카르보다이이미드 (EDC)의 존재 하에 지방산과 반응시켜 유리 아민과 지방산 카르복실레이트 사이에 아미드 결합을 형성함으로써 링커 모이어티를 포함하는 변형제를 제조할 수 있다. 기재된 바와 같이, 다른 카르복실레이트에 커플링될 수 있거나, 말레산 무수물과 반응시키고 생성되는 생성물을 환화하여 지방산의 활성화 말레이미도 유도체를 제조할 수 있는 1차 아민을 노출시키기 위해, 트라이플루오로아세트산 (TFA)으로 처리함으로써 생성물로부터 Boc 보호기를 제거할 수 있다. (예를 들어, 전체 교시 내용이 본 명세서에 참고로 포함되는, 국제특허 공개 WO 92/16221호 (Thompson 등)를 참조한다.)
변형된 항체는 인간 항체 또는 항원-결합 단편을 변형제와 반응시켜 제조될 수 있다. 예를 들어, 유기 모이어티는 아민-반응성 변형제, 예를 들어 PEG의 NHS 에스테르를 사용함으로써 부위 비특이적 방식으로 항체에 결합될 수 있다. 변형된 인간 항체 또는 항원-결합 단편은 또한 항체 또는 항원-결합 단편의 이황화 결합 (예를 들어, 사슬내 이황화 결합)을 환원시킴으로써 제조될 수 있다. 이어서, 환원된 항체 또는 항원-결합 단편을 티올-반응성 변형제와 반응시켜 본 발명의 변형된 항체를 제조할 수 있다. 본 발명의 항체의 특이적인 부위에 결합하는 유기 모이어티를 포함하는 변형된 인간 항체 및 항원-결합 단편은 적합한 방법, 예컨대 역 단백질 분해(reverse proteolysis)(문헌[Fisch et al., Bioconjugate Chem., 3:147-153 (1992)]; 문헌[Werlen et al., Bioconjugate Chem., 5:411-417 (1994)]; 문헌[Kumaran et al., Protein Sci. 6(10):2233-2241 (1997)]; 문헌[Itoh et al., Bioorg. Chem., 24(1): 59-68 (1996)]; 문헌[Capellas et al., Biotechnol. Bioeng., 56(4):456-463 (1997)]), 및 문헌[Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)]에 기재된 방법을 사용하여 제조할 수 있다.
본 발명의 방법은 또한, 본 명세서에 기재되고/되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같이, 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 또는 그 이상의 항-IL-23 항체를 포함하는 항-IL-23 항체 조성물을 사용하며, 이는 비-천연 발생 조성물, 혼합물, 또는 형태로 제공된다. 이러한 조성물은 상기 서열 번호의 연속 아미노산의 70 내지 100%, 또는 이의 특정 단편, 도메인, 또는 변이체로 이루어진 군으로부터 선택되는 항-IL-23 항체 아미노산 서열의 1개 또는 2개 이상의 전장 C- 및/또는 N-말단 결실 변이체, 도메인, 단편, 또는 특정 변이체를 포함하는 비-천연 발생 조성물을 포함한다. 바람직한 항-IL-23 항체 조성물은 본 명세서에 기재된 항-23 항체 서열의 하나 이상의 CDR 또는 LBP 함유 부분으로서 1개 또는 2개 이상의 전장, 단편, 도메인, 또는 변이체, 예를 들어, 상기 서열 번호의 70 내지 100%, 또는 이의 특정 단편, 도메인, 또는 변이체를 포함한다. 추가로 바람직한 조성물은, 예를 들어, 상기 서열 번호 등의 70 내지 100%, 또는 이의 특정 단편, 도메인, 또는 변이체 중 하나 이상의 40 내지 99%를 포함한다. 이러한 조성 비율은 본 기술 분야에 공지되거나 본 명세서에 기재된 바와 같이, 액체 또는 무수 용액, 혼합물, 현탁액, 에멀젼, 입자, 분말 또는 콜로이드로서 중량, 부피, 농도, 몰농도, 몰랄 농도를 기준으로 한 것이다.
치료적으로 활성인 성분을 추가로 포함하는 항체 조성물
본 발명의 방법에 사용되는 항체 조성물은 선택적으로 항감염약, 심혈관 (CV)계 약물, 중추신경계 (CNS) 약물, 자율신경계 (ANS) 약물, 기도 약물, 위장 (GI)관 약물, 호르몬 약물, 체액 또는 전해질 균형을 위한 약물, 혈액 약물, 항신생물제, 면역조절 약물, 눈, 귀 또는 코 사용을 위한 약물, 국소 약물, 영양제 약물 등 중의 적어도 하나로부터 선택되는 적어도 하나의 화합물 또는 단백질의 유효량을 추가로 포함할 수 있다. 본 명세서에 제시된 각각에 대한 제형, 적응증, 용법, 및 투여를 포함하여, 이러한 약물은 본 기술 분야에 잘 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21st edition, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001]; 문헌[Health Professional's Drug Guide 2001, ed., Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc, Upper Saddle River, NJ]; 문헌[Pharmcotherapy Handbook, Wells et al., ed., Appleton & Lange, Stamford, CT] 참조, 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함됨).
본 발명의 방법의 항체와 배합할 수 있는 약물의 예로서, 항-감염성 약물은 살아메바제 또는 적어도 하나의 항원충제, 구충제, 항진균제, 항말라리아제, 항결핵제 또는 적어도 하나의 항나병약, 아미노글리코시드, 페니실린, 세팔로스포린, 테트라사이클린, 설폰아미드, 플루오로퀴놀론, 항바이러스제, 마크롤리드 항감염제 및 기타 항감염제로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. 호르몬 약물은 코르티코스테로이드, 안드로겐, 적어도 하나의 단백동화 스테로이드, 에스트로겐 또는 적어도 하나의 프로게스틴, 생식선자극호르몬, 항당뇨병 약물 또는 적어도 하나의 글루카곤, 갑상선 호르몬, 갑상선 호르몬 길항제, 뇌하수체 호르몬 및 부갑상선-유사 약물로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. 적어도 하나의 세팔로스포린은 세파클로르, 세파드록실, 세파졸린 나트륨, 세프디니르, 세페피메 염산염, 세픽시메, 세프메타졸 나트륨, 세포니시드 나트륨, 세포페라존 나트륨, 세포탁심 나트륨, 세포테탄 이나트륨, 세폭시틴 나트륨, 세프포독심 프록세틸, 세프프로질, 세프타지딤, 세프티부텐, 세프티족심 나트륨, 세프트리악손 나트륨, 세푸록심 악세틸, 세푸록심 나트륨, 세팔렉신 염산염, 세팔렉신 1수화물, 세프라딘 및 로라카르베프로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
적어도 하나의 코리코스테로이드는 베타메타손, 베타메타손 아세테이트 또는 베타메타손 나트륨 인산염, 베타메타손 나트륨 인산염, 코르티손 아세테이트, 덱사메타손, 덱사메타손 아세테이트, 덱사메타손 나트륨 인산염, 플루드로코르티손 아세테이트, 하이드로코르티손, 하이드로코르티손 아세테이트, 하이드로코르티손 시피오네이트, 하이드로코르티손 나트륨 인산염, 하이드로코르티손 나트륨 석시네이트, 메틸프레드니솔론, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 프레드니솔론, 프레드니솔론 아세테이트, 프레드니솔론 나트륨 인산염, 프레드니솔론 테부테이트, 프레드니손, 트리암시놀론, 트리암시놀론 아세토니드 및 트리암시놀론 다이아세테이트로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. 적어도 하나의 안드로겐 또는 단백동화 스테로이드는 다나졸, 플루옥시메스테론, 메틸테스토스테론, 난드롤론 데카노에이트, 난드롤론 펜프로피오네이트, 테스토스테론, 테스토스테론 시피오네이트, 테스토스테론 에난테이트, 테스토스테론 프로피오네이트 및 테스토스테론 경피 시스템으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
적어도 하나의 면역억제제는 아자티오프린, 바실릭시맙, 사이클로스포린, 다클리주맙, 림프구 면역 글로불린, 뮤로모납-CD3, 미코페놀레이트 모페틸, 미코페놀레이트 모페틸 염산염, 시롤리무스 및 타크롤리무스로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
적어도 하나의 국소 항-감염제는 아시클로비르, 암포테리신 B, 아젤라산 크림, 바시트라신, 부토코나졸 니트레이트, 클린다마이신 인산염, 글로트리마졸, 에코나졸 니트레이트, 에리트로마이신, 겐타마이신 설페이트, 케토코나졸, 마페니드 아세테이트, 메트로니다졸 (국소용), 미코나졸 니트레이트, 무피로신, 나프티핀 염산염, 네오마이신 설페이트, 니트로푸라존, 니스타틴, 실버 설파디아진, 테르비나핀 염산염, 테르코나졸, 테트라사이클린 염산염, 티오코나졸 및 톨나프테이트로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. 적어도 하나의 옴약 또는 이살충제는 크로타미톤, 린단, 퍼메트린 및 피레트린으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. 적어도 하나의 국소용 코르티코스테로이드는 베타메타손 다이프로피오네이트, 베타메타손 발레레이트, 클로베타솔 프로피오네이트, 데소니드, 데속시메타손, 덱사메타손, 덱사메타손 나트륨 인산염, 디플로라손 다이아세테이트, 플루오시놀론 아세토니드, 플루오시노니드, 플루란드레놀리드, 플루티카손 프로피오네이트, 할시오니드, 하이드로코르티손, 하이드로코르티손 아세테이트, 하이드로코르티손 부티레이트, 하이드로코르티손 발레레이트, 모메타손 푸로에이트 및 트리암시놀론 아세토니드로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다. (예를 들어, 문헌[Nursing 2001 Drug Handbook, pp. 1098-1136]을 참조한다.)
항-IL-23 항체 조성물은 이러한 조절, 치료, 또는 요법을 필요로 하는 세포, 조직, 기관, 동물, 또는 환자에게 접촉되거나 투여되는 하나 이상의 항-IL-23 항체를 포함하고, 선택적으로 하나 이상의 TNF 길항제(비제한적인 예를 들어, TNF 화학물질 또는 단백질 길항제, TNF 단일클론 또는 다클론 항체 또는 단편, 가용성 TNF 수용체(예를 들어, p55, p70, 또는 p85) 또는 단편, 이의 융합 폴리펩티드, 또는 소분자 TNF 길항제, 예를 들어 TNF 결합 단백질 I 또는 II(TBP-I 또는 TBP-II), 네렐리몬맙, 인플릭시맙, 에테르나셉트, CDP-571, CDP-870, 아펠리모맙, 레네르셉트 등), 항류마티즘제(예를 들어, 메토트렉세이트, 아우라노핀, 아우로티오글루코스, 아자티오프린, 에타네르셉트, 금 나트륨 티오말레이트, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 레플루노마이드, 설파살진), 면역화, 면역글로불린, 면역억제제(예를 들어, 바실릭시맙, 사이클로스포린, 다클리주맙), 사이토카인 또는 사이토카인 길항제로부터 선택되는 하나 이상을 추가로 포함하는 하나 이상의 조성물 또는 약제학적 조성물의 임의의 적합하고 유효한 양을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 사이토카인의 비제한적인 예에는 IL-1 내지 IL-23 등 (예를 들어, IL-1, IL-2 등) 중 하나가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 적합한 투여량은 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 문헌[Wells et al., eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000)]; 문헌[PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, CA (2000)]을 참조하며, 이들 참고문헌 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
본 발명의 방법에 사용되는 항-IL-23 항체 화합물, 조성물, 또는 조합은 희석제, 결합제, 안정화제, 완충제, 염, 친유성 용매, 보존제, 애쥬번트(adjuvant) 등과 같으나 이에 한정되지 않는 하나 이상의 임의의 적합한 보조제를 추가로 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 보조제가 바람직하다. 이러한 무균 용액의 제조 방법의 비제한적인 예는 문헌[Gennaro, Ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co. (Easton, PA) 1990]과 같은 그러나 이에 한정되지 않는 문헌에 기재된 바와 같이 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 본 기술 분야에 잘 알려지거나 본 명세서에 기재된 바와 같이 항-IL-23 항체, 단편, 또는 변이체 조성물의 투여 방식, 용해도, 및/또는 안정성에 적합한 약제학적으로 허용되는 담체는 일상적으로 선택될 수 있다.
본 조성물에 유용한 약제학적 부형제 및 첨가제는 단백질, 펩티드, 아미노산, 지질, 및 탄수화물(예를 들어, 단당류, 이당류, 삼당류, 사당류, 및 올리고당류를 포함하는 당; 유도체화된 당, 예컨대 알디톨, 알돈산, 에스테르화된 당 등; 및 다당류 또는 당 중합체)을 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 이는 단독으로 또는 조합하여 1 내지 99.99 중량% 또는 부피%를 차지하면서 개별적으로 또는 조합하여 존재할 수 있다. 예시적인 단백질 부형제는 혈청 알부민, 예컨대, 인간 혈청 알부민 (HSA), 재조합 인간 알부민 (rHA), 젤라틴, 카제인 등을 포함한다. 완충 용량에서도 기능할 수 있는 대표적인 아미노산/항체 성분은 알라닌, 글리신, 아르기닌, 베타인, 히스티딘, 글루탐산, 아스파르트산, 시스테인, 라이신, 류신, 아이소류신, 발린, 메티오닌, 페닐알라닌, 아스파탐 등을 포함한다. 바람직한 아미노산은 글리신이다.
본 발명에 사용하기에 적합한 탄수화물 부형제는, 예를 들어, 프럭토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스, 소르보스 등과 같은 단당류; 락토스, 수크로스, 트레할로스, 셀로비오스 등과 같은 이당류; 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란, 전분 등과 같은 다당류; 및 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨 소르비톨(글루시톨), 미오이노시톨 등과 같은 알디톨을 포함한다. 본 발명에 사용하기 바람직한 탄수화물 부형제는 만니톨, 트레할로스 및 라피노스이다.
항-IL-23 항체 조성물은 완충제 또는 pH 조절제를 또한 포함할 수 있으며; 전형적으로, 완충제는 유기산 또는 유기 염기로부터 제조된 염이다. 대표적인 완충제는 시트르산, 아스코르브산, 글루콘산, 탄산, 타르타르산, 석신산, 아세트산, 또는 프탈산의 염과 같은 유기산 염; 트리스, 트로메타민 염산염 또는 인산염 완충제를 포함한다. 본 발명의 조성물에서 사용하기 바람직한 완충제는 시트레이트와 같은 유기산 염이다.
추가로, 항-IL-23 항체 조성물은 폴리비닐피롤리돈, 피콜(중합체 당), 덱스트레이트(예를 들어, 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린과 같은 사이클로덱스트린), 폴리에틸렌 글리콜, 향료, 항미생물제, 감미제, 항산화제, 대전방지제, 계면활성제(예를 들어, "트윈(TWEEN) 20" 및 "트윈 80"과 같은 폴리소르베이트), 지질(예를 들어, 인지질, 지방산), 스테로이드(예를 들어, 콜레스테롤), 및 킬레이트제(예를 들어, EDTA)와 같은 중합체 부형제/첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-IL-23 항체, 부분, 또는 변이체 조성물에 사용하기에 적합한 이들 및 추가의 알려진 약제학적 부형제 및/또는 첨가제는, 예를 들어 문헌["Remington: The Science & Practice of Pharmacy," 19th ed., Williams & Williams, (1995), and in the "Physician's Desk Reference," 52nd ed., Medical Economics, Montvale, NJ (1998)]에 열거된 바와 같이 본 기술 분야에 알려져 있으며, 그의 개시 내용은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다. 바람직한 담체 또는 부형제 물질은 탄수화물 (예를 들어, 당류 및 알디톨) 및 완충제 (예를 들어, 시트레이트) 또는 중합체 물질이다. 예시적인 담체 분자에는 뮤코다당류, 하이알루론산이 있으며, 이는 관절내 전달에 유용할 수 있다.
제형
상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 약제학적으로 허용가능한 제형 내에 하나 이상의 항-IL-23 항체를 포함하는 안정한 제형을 제공하며, 이는 바람직하게는 염수 또는 선택된 염을 갖는 인산염 완충제뿐만 아니라, 보존제를 함유하는 보존된 용액 및 제형과 더불어, 약제학적 용도 또는 수의학적 용도에 적합한 다용도의 보존된 제형을 포함한다. 보존된 제형은 하나 이상의 페놀, m-크레졸, p-크레졸, o-크레졸, 클로로크레졸, 벤질 알코올, 페닐머큐릭 니트라이트, 페녹시에탄올, 포름알데하이드, 클로로부탄올, 염화마그네슘 (예를 들어, 6수화물), 알킬파라벤 (메틸, 에틸, 프로필, 부틸 등), 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 데하이드로아세트산나트륨 및 티메로살, 또는 수성 희석제 중의 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택적으로 선택되는 하나 이상의 공지의 방부제를 함유한다. 임의의 적합한 농도 또는 혼합물, 예를 들어 0.001 내지 5%, 또는 그 범위 내의 임의의 범위 또는 값, 예를 들어 0.001, 0.003, 0.005, 0.009, 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 또는 그 범위 내의 임의의 범위 또는 값 (이에 한정되지 않음)이 본 기술 분야에 알려진 바대로 사용될 수 있다. 비제한적인 예는 방부제를 포함하지 않거나, 0.1 내지 2%의 m-크레졸(예를 들어, 0.2, 0.3. 0.4, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.1 내지 3%의 벤질 알코올(예를 들어, 0.5, 0.9, 1.1, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5%), 0.001 내지 0.5%의 티메로살(예를 들어, 0.005, 0.01), 0.001 내지 2.0%의 페놀(예를 들어, 0.05, 0.25, 0.28, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.0005 내지 1.0%의 알킬파라벤(들)(예를 들어, 0.00075, 0.0009, 0.001, 0.002, 0.005, 0.0075, 0.009, 0.01, 0.02, 0.05, 0.075, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 0.9, 1.0%) 등을 포함한다.
상기 언급된 바와 같이, 본 발명의 방법은 포장 재료, 및 선택적으로 수성 희석제 중에 지정된 완충제 및/또는 보존제와 함께 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체의 용액을 포함하는 하나 이상의 바이알을 포함하는 제조 물품을 사용하며, 여기서 상기 포장 재료는 이러한 용액이 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 또는 72 시간 이상의 기간에 걸쳐 유지될 수 있음을 표시하는 라벨을 포함한다. 본 발명은 포장 재료, 및 동결건조된 항-IL-23 특이적 항체를 포함하는 제1 바이알, 및 지정된 완충제 또는 보존제의 수성 희석제를 포함하는 제2 바이알을 포함하는 제조 물품을 추가로 사용하며, 여기서 상기 포장 재료는 항-IL-23 특이적 항체를 수성 희석제 중에 재구성하여 24 시간 이상의 기간에 걸쳐 유지될 수 있는 용액을 형성하도록 환자에게 지시하는 라벨을 포함한다.
본 발명에 따라 사용되는 항-IL-23 특이적 항체는 포유류 세포 또는 유전자도입 제조로부터의 것을 포함하는 재조합 수단에 의해 제조될 수 있거나, 본 명세서에 기재되거나 본 기술 분야에 알려진 바와 같은 다른 생물학적 공급원으로부터 정제될 수 있다.
습윤/건조 시스템에서의 경우, 항-IL-23 특이적 항체의 범위는 재구성시에 약 1.0 ㎍/ml 내지 약 1000 mg/ml의 농도를 생성하는 양을 포함하지만, 더 낮거나 높은 농도가 작동가능하고 의도하는 전달 비히클에 의존하며, 예를 들어, 용액 제형은 경피 패치, 폐, 경점막, 또는 삼투압 또는 마이크로 펌프 방법과는 상이할 것이다.
바람직하게는, 선택적으로 수성 희석제는 약제학적으로 허용되는 방부제를 추가로 포함한다. 바람직한 방부제는 페놀, m-크레졸, p-크레졸, o-크레졸, 클로로크레졸, 벤질 알코올, 알킬파라벤 (메틸, 에틸, 프로필, 부틸 등), 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 데하이드로아세트산나트륨 및 티메로살, 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 포함한다. 제형 내에 사용되는 방부제의 농도는 항-미생물 효과를 내기에 충분한 농도이다. 이러한 농도는 선택된 방부제에 좌우되며, 당업자에 의해 쉽게 결정된다.
다른 부형제, 예를 들어 등장화제, 완충제, 산화방지제 및 보존성 인핸서가 선택적으로 그리고 바람직하게 희석제에 첨가될 수 있다. 글리세린과 같은 등장화제는 공지의 농도에서 통상 사용된다. 생리학적으로 허용되는 완충제는 바람직하게는 향상된 pH 제어를 제공하기 위해 첨가된다. 제형은 약 pH 4 내지 약 pH 10과 같은 넓은 범위의 pH를 포함할 수 있고, 바람직한 범위는 약 pH 5 내지 약 pH 9이며, 가장 바람직한 범위는 약 6.0 내지 약 8.0이다. 바람직하게는 본 발명의 제형은 약 6.8 내지 약 7.8의 pH를 갖는다. 바람직한 완충제는 인산염 완충제, 가장 바람직하게는 인산나트륨, 특히 인산염 완충 식염수 (PBS)를 포함한다.
약제학적으로 허용되는 가용화제, 예를 들어 트윈 20 (폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노라우레이트), 트윈 40 (폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노팔미테이트), 트윈 80 (폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노올레에이트), 플루로닉(Pluronic) F68 (폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 블록 공중합체), 및 PEG (폴리에틸렌 글리콜) 또는 폴리소르베이트 20 또는 80 또는 폴록사머 184 또는 188, 플루로닉® 폴리올과 같은 비이온성 계면활성제, 다른 블록 공중합체, 및 EDTA 및 EGTA 같은 킬레이트제와 같은 다른 첨가제가 응집을 감소시키기 위해 제형 또는 조성물에 선택적으로 첨가될 수 있다. 이러한 첨가제는 펌프 또는 플라스틱 용기가 제형을 투여하기 위해 사용될 경우에 특히 유용하다. 약제학적으로 허용되는 계면활성제의 존재는 단백질 응집 성향을 완화시킨다.
제형은 수성 희석제 중에 페놀, m-크레졸, p-크레졸, o-크레졸, 클로로크레졸, 벤질 알코올, 알킬파라벤(메틸, 에틸, 프로필, 부틸 등), 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 데하이드로아세트산나트륨 및 티메로살 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 보존제와 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체를 혼합하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 수성 희석제 중에 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체와 보존제를 혼합하는 단계는 통상의 용해 및 혼합 절차를 사용하여 수행한다. 적합한 제형을 제조하기 위해, 예를 들어, 완충 용액 중의 측정된 양의 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체를 완충 용액 중의 충분한 양의 원하는 보존제와 조합하여 원하는 농도의 단백질 및 보존제를 제공한다. 이러한 방법의 변형법이 당업자에 의해 인식될 것이다. 예를 들어, 성분이 첨가되는 순서, 추가의 첨가제 사용 여부, 제형 제조 온도 및 pH는 모두 사용되는 농도 및 투여 수단에 대해 최적화될 수 있는 인자이다.
제형은 투명한 용액으로서, 또는 물, 보존제, 및/또는 부형제, 바람직하게는 인산염 완충제 및/또는 염수 및 선택된 염을 수성 희석제 중에 함유하는 제2 바이알을 이용하여 재구성되는, 동결건조된 항-IL-23 특이적 항체의 바이알을 포함하는 이중 바이알로서 환자에게 제공될 수 있다. 단일 용액 바이알 또는 재구성이 필요한 이중 바이알은 수회 재사용될 수 있고, 환자 치료의 단일 또는 다수의 사이클에 충분하므로 현재 사용되는 것보다 더 편리한 치료 계획을 제공할 수 있다.
본 발명의 제조 물품은 즉시 내지 24시간 또는 그 이상의 범위의 기간에 걸쳐 투여하는 데 유용하다. 따라서, 본 발명에서 청구되는 제조 물품은 환자에게 상당한 이점을 준다. 본 발명의 제형은 선택적으로 약 2℃ 내지 약 40℃의 온도에서 안전하게 보관되고 장기간 동안 단백질의 생물학적 활성을 유지할 수 있으며, 따라서 6, 12, 18, 24, 36, 48, 72, 또는 96 시간 이상의 기간에 걸쳐 용액이 유지 및/또는 사용될 수 있음을 패키지 라벨에 표시하는 것이 가능하다. 보존된 희석제가 사용된 경우, 상기 라벨은 최대 1 내지 12달, 반년, 1년 반 및/또는 2년의 사용을 포함할 수 있다.
항-IL-23 특이적 항체의 용액은 수성 희석제 중에 하나 이상의 항체를 혼합하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 혼합을 통상의 용해 및 혼합 절차를 사용하여 수행한다. 적합한 희석제를 제조하기 위하여, 예를 들어 물 또는 완충제 중의 측정된 양의 적어도 하나의 항체를, 원하는 농도의 단백질 및 선택적으로 방부제 또는 완충제를 제공하기에 충분한 양으로 배합한다. 이러한 방법의 변형법이 당업자에 의해 인식될 것이다. 예를 들어, 성분이 첨가되는 순서, 추가의 첨가제 사용 여부, 제형 제조 온도 및 pH는 모두 사용되는 농도 및 투여 수단에 대해 최적화될 수 있는 인자이다.
청구되는 제품은 투명한 용액으로서, 또는 수성 희석제를 함유하는 제2 바이알을 이용하여 재구성되는, 동결건조된 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체의 바이알을 포함하는 이중 바이알로서 환자에게 제공될 수 있다. 단일 용액 바이알 또는 재구성이 필요한 이중 바이알은 수회 재사용될 수 있고, 환자 치료의 단일 또는 다수의 사이클에 충분하므로 현재 사용되는 것보다 더 편리한 치료 계획을 제공한다.
수성 희석제를 함유하는 제2 바이알을 이용하여 재구성되는, 동결건조된 하나 이상의 항-IL-23 특이적 항체의 바이알을 포함하는 이중 바이알, 또는 투명한 용액을 약국, 병원, 또는 다른 이러한 기관 및 시설에 제공함으로써, 청구되는 제품을 환자에게 간접적으로 제공할 수 있다. 이 경우 투명한 용액은 최대 1리터 또는 그보다 훨씬 더 큰 크기일 수 있는데, 소량의 적어도 하나의 항체 용액을 1회 또는 다회 회수하여 소량의 바이알에 옮기고, 약국 또는 병원을 통해 고객 및/또는 환자에게 제공할 수 있는 큰 저장고를 제공한다.
단일 바이알 시스템을 포함하는 공인된 장치는, 예를 들어, Becton Dickensen(미국 뉴저지주 프랭클린 레이크스 소재, www.bectondickenson.com), Disetronic(스위스 부르그도르프 소재, www.disetronic.com); 미국 오레곤주 포틀랜드 소재의 Bioject(www.bioject.com); National Medical Products, Weston Medical(영국 피터버러 소재, www.weston-medical.com), Medi-Ject Corp(미국 미네소타주 미니애폴리스 소재, www.mediject.com)에 의해 제조되거나 개발된 바와 같은 용액 전달을 위한 펜-주입기 장치(pen-injector device), 예컨대 BD 펜, BD Autojector®, Humaject®, NovoPen®, B-D®Pen, AutoPen®, 및 OptiPen®, GenotropinPen®, Genotronorm Pen®, Humatro Pen®, Reco-Pen®, Roferon Pen®, Biojector®, Iject®, J-tip Needle-Free Injector®, Intraject®, Medi-Ject®, Smartject®, 및 유사하게 적합한 장치를 포함한다. 이중 바이알 시스템을 포함하는 승인된 장치는 HumatroPen®과 같은 재구성된 용액의 전달을 위한 카트리지에 동결건조된 약물을 재구성하기 위한 펜-인젝터 시스템을 포함한다. 적합한 다른 장치의 예에는 사전 충전 시린지, 자동 주사기, 니들이 없는 주사기 및 니들이 없는 IV 주입 세트가 포함된다.
상기 제품은 포장 재료를 포함할 수 있다. 포장 재료는 규제 당국이 요구하는 정보 이외에 제품을 사용할 수 있는 조건을 제공한다. 본 발명의 포장 재료는, 적용가능한 경우, 2개의 바이알, 습윤/건식 제품에 대해 하나 이상의 항-IL-23 항체를 수성 희석제 중에 재구성하여 용액을 형성하고, 용액을 2 내지 24 시간 이상의 기간에 걸쳐 사용하기 위한 설명서를 환자에게 제공한다. 단일 바이알, 용액 제품, 사전 충전 시린지, 또는 자동 주사기의 경우, 라벨은 상기 용액을 2 내지 24시간 이상의 기간에 걸쳐 사용할 수 있음을 나타낸다. 제품은 인간의 의약품 용도로 유용하다.
본 발명의 방법에 사용되는 제형은 항-IL-23 항체와 선택된 완충제, 바람직하게는 염수 또는 선택된 염을 함유하는 인산염 완충제를 혼합하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 수성 희석제 중에 완충제와 항-IL-23 항체를 혼합하는 단계는 통상의 용해 및 혼합 절차를 사용하여 실행된다. 적합한 제형을 제조하기 위하여, 예를 들어 물 또는 완충제 중의 측정된 양의 적어도 하나의 항체를, 원하는 농도의 단백질 및 완충제를 제공하기 충분한 양의 수중의 원하는 완충제와 배합한다. 이러한 방법의 변형법이 당업자에 의해 인식될 것이다. 예를 들어, 성분이 첨가되는 순서, 추가의 첨가제 사용 여부, 제형 제조 온도 및 pH는 모두 사용되는 농도 및 투여 수단에 대해 최적화될 수 있는 인자이다.
본 발명의 방법은 인간 또는 동물 환자에게 투여하기에 유용하고 허용가능한 다양한 제형을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 이러한 약제학적 조성물은 희석제로서 "표준 상태"에서의 물을 그리고 당업자에게 잘 알려진 통상의 방법을 사용하여 제조된다. 예를 들어, 완충 성분, 예컨대 히스티딘 및 히스티딘 모노하이드로클로라이드 수화물이 먼저 제공된 후, 적절한 비최종 부피의 "표준 상태"에서의 물 희석제, 수크로스 및 폴리소르베이트 80이 첨가될 수 있다. 이어서, 단리된 항체가 첨가될 수 있다. 마지막으로, 약제학적 조성물의 부피는 물을 희석제로 사용하여 "표준 상태" 조건 하에서 원하는 최종 부피로 조정된다. 약제학적 조성물의 제조에 적합한 다수의 다른 방법을 당업자는 인지할 것이다.
약제학적 조성물은 물의 단위 부피당 각 성분의 지시된 질량을 포함하거나, "표준 상태"에서 지시된 pH를 갖는 수용액 또는 현탁액일 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "표준 상태"는 25℃ +/- 2℃의 온도 및 1 기압의 압력을 의미한다. 용어 "표준 상태"는 본 기술 분야에서 기술이 인정한 단일의 온도 또는 압력의 세트를 지칭하기 위해 사용되는 것이 아니라, 대신 기준 "표준 상태" 조건 하에서 특정 조성을 갖는 용액 또는 현탁액을 기술하기 위해 사용되는 온도 및 압력을 명시하는 기준 상태이다. 이는 용액의 부피가 부분적으로 온도와 압력의 함수이기 때문이다. 여기에 개시된 것과 동등한 약제학적 조성물이 다른 온도 및 압력에서 생성될 수 있음을 당업자는 인지할 것이다. 이러한 약제학적 조성물이 여기에 개시된 것과 동등한지 여부는 상기 정의된 "표준 상태" 조건 (예를 들어 25℃ +/- 2℃ 및 1 기압의 압력) 하에서 결정되어야 한다.
중요하게는, 이러한 약제학적 조성물은 약제학적 조성물 단위 부피당 "약" 소정 값 (예를 들어 "약 0.53 mg의 L-히스티딘")의 성분 질량을 함유할 수 있거나, 약 소정 값의 pH 값을 가질 수 있다. 단리된 항체가 약제학적 조성물에 존재하는 동안, 또는 단리된 항체가 약제학적 조성물로부터 제거된 후에(예를 들어, 희석에 의해), 약제학적 조성물에 존재하는 단리된 항체가 펩티드 사슬에 결합할 수 있는 경우, 약제학적 조성물에 존재하는 성분의 질량 또는 pH 값은 주어진 수치 값에 대해 "약"이다. 달리 말하면, 약제학적 조성물에 단리된 항체를 배치한 후 단리된 항체의 결합 활성이 유지되고 검출될 수 있는 경우, 성분의 질량 값 또는 pH 값과 같은 값은 주어진 수치 값에 대해 "약"이다.
경쟁 결합 분석을 수행하여, IL-23 특이적 mAb가 유사하거나 상이한 에피토프에 결합하고/하거나 서로 경쟁하는지를 결정할 수 있다. Ab를 ELISA 플레이트 상에 개별적으로 코팅한다. 경쟁 mAb를 첨가한 후, 비오틴화 hrIL-23을 첨가한다. 양성 대조군의 경우, 코팅을 위해 동일한 mAb를 경쟁 mAb로서 사용할 수 있다 ("자기-경쟁"). 스트렙타비딘을 사용하여 IL-23 결합을 검출한다. 이들 결과는 mAb가 IL-23 상에서 유사하거나 부분적으로 중첩되는 에피토프를 인식하는지 여부를 입증한다.
본 발명의 방법의 일 태양은 하기를 포함하는 약제학적 조성물을 환자에게 투여한다:
약제학적 조성물의 일 실시 형태에서, 단리된 항체 농도는 약제학적 조성물 1 ml 당 약 77 내지 약 104 mg이다. 약제학적 조성물의 다른 실시 형태에서, pH는 약 5.5 내지 약 6.5이다.
안정하거나 보존된 제형은 투명한 용액으로서, 또는 수성 희석제 중에 보존제 또는 완충제 및 부형제를 함유하는 제2 바이알을 이용하여 재구성되는, 동결건조된 하나 이상의 항-IL-23 항체의 바이알을 포함하는 이중 바이알로서 환자에게 제공될 수 있다. 단일 용액 바이알 또는 재구성이 필요한 이중 바이알은 수회 재사용될 수 있고, 환자 치료의 단일 또는 다수의 사이클에 충분하므로 현재 사용되는 것보다 더 편리한 치료 계획을 제공한다.
항-IL-23 항체를 안정화시키는 다른 제형 또는 방법은, 항체를 포함하는 동결건조된 분말의 투명한 용액 이외의 것을 유발할 수 있다. 투명하지 않은 용액 중에는 미립자 현탁액을 포함하는 제형이 있으며, 상기 미립자는 가변 치수의 구조 내에 항-IL-23 항체를 함유하는 조성물이고, 마이크로구체, 마이크로입자, 나노입자, 나노구체, 또는 리포좀으로서 다양하게 알려져 있다. 활성제를 함유하는 상대적으로 균질하고 본질적으로 구형인 이러한 미립자 제형은 미국 특허 제4,589,330호에 교시된 바와 같이, 활성제 및 중합체를 함유하는 수성 상과 비수성 상을 접촉시킨 후, 비수성 상을 증발시켜 수성 상으로부터 입자를 응결시켜 형성될 수 있다. 다공성 마이크로입자는 미국 특허 제4,818,542호에 교시된 바와 같이 연속 용매 중에 분산되어 있는 활성제 및 중합체를 포함하는 제1 상을 사용하고, 동결-건조 또는 희석-추출-침전에 의해 현탁액으로부터 상기 용매를 제거하여 제조될 수 있다. 이러한 제조에 바람직한 중합체는 천연 또는 합성 공중합체 또는 중합체이고, 이는 젤라틴 아가, 전분, 아라비노갈락탄, 알부민, 콜라겐, 폴리글리콜산, 폴리락트산, 글리콜라이드-L(-) 락티드, 폴리(엡실론-카프로락톤), 폴리(엡실론-카프로락톤-코-락트산), 폴리(엡실론-카프로락톤-코-글리콜산), 폴리 (β-하이드록시 부티르산), 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리에틸렌, 폴리(알킬-2-시아노아크릴레이트), 폴리(하이드록시에틸 메타크릴레이트), 폴리아미드, 폴리(아미노산), 폴리(2-하이드록시에틸 DL-아스파르타미드), 폴리(에스테르 우레아), 폴리(L-페닐알라닌/에틸렌 글리콜/1,6-다이아이소시아나토헥산) 및 폴리(메틸 메타크릴레이트)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특히 바람직한 중합체는 폴리에스테르, 예를 들어 폴리글리콜산, 폴리락트산, 글리콜라이드-L(-) 락티드, 폴리(엡실론-카프로락톤), 폴리(엡실론-카프로락톤-코-락트산) 및 폴리(엡실론-카프로락톤-코-글리콜산)이다. 중합체 및/또는 활성 물질의 용해에 유용한 용매는 물, 헥사플루오로아이소프로판올, 메틸렌클로라이드, 테트라하이드로푸란, 헥산, 벤젠 또는 헥사플루오로아세톤 세스퀴수화물을 포함한다. 제2 상과 함께 활성 물질을 함유하는 상을 분산시키는 방법은 노즐 내 오리피스를 통해 상기 제1 상에 압력을 가하여 소적 형성에 영향을 주는 단계를 포함할 수 있다.
건조 분말 제형은 동결건조 이외의 공정, 예를 들어, 결정질 조성물을 분무 건조시키거나 증발시키거나 침전에 의해 용매를 추출한 후, 수성 또는 비수성 용매를 제거하는 하나 이상의 단계에 의해 수득될 수 있다. 분무 건조된 항체 제제의 제조가 미국 특허 제6,019,968호에 교시되어 있다. 항체-기반 건조 분말 조성물은 흡입할 수 있는 건조 분말을 제공하기 위한 조건 하에서 용매 중의 항체 및 선택적으로 부형제의 용액 또는 슬러리를 분무 건조시켜 제조될 수 있다. 용매는 용이하게 건조될 수 있는 극성 화합물, 예를 들어 물 및 에탄올을 포함할 수 있다. 산소의 부재 하에, 예를 들어, 질소 블랭킷(nitrogen blanket) 하에 또는 건조 기체로서 질소를 사용하여 분무 건조법을 수행하여 항체 안전성을 증진시킬 수 있다. 상대적으로 건조한 다른 제형은 국제특허 공개 WO9916419호에 교시된 바와 같이 전형적으로 하이드로플루오로알칸 추진제를 포함하는 현탁 매질 중에 분산된 복수의 천공된 미세구조물의 분산물이다. 안정화된 분산물을 정량 흡입기를 사용하여 환자의 폐로 투여할 수 있다. 분무 건조된 약제의 상업적 제조에 유용한 장치는 부치 리미티드(Buchi Ltd.) 또는 니로 코포레이션(Niro Corp.)에 의해 제작된다.
본 명세서에 기재된 안정하거나 보존된 제형 또는 용액 중의 항-IL-23 항체는 SC 또는 IM 주사; 경피, 폐, 경점막, 임플란트, 삼투압 펌프, 카트리지, 마이크로펌프, 또는 본 기술 분야에 잘 알려진 바와 같이 당업자가 인정하는 다른 수단을 포함하는 다양한 전달 방법을 통해 본 발명에 따라 환자에게 투여될 수 있다.
치료적 응용
본 발명은 또한, 본 기술 분야에 알려지거나 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 발명의 하나 이상의 IL-23 항체를 사용하여, 예를 들어 치료적 유효량의 IL-23 특이적 항체를 세포, 조직, 기관, 동물, 또는 환자에게 투여하거나 접촉시켜 세포, 조직, 기관, 동물, 또는 환자에서 건선을 조절 또는 치료하기 위한 방법을 제공한다.
본 발명의 임의의 방법은 항-IL-23 항체를 포함하는 조성물 또는 약제학적 조성물의 유효량을 이러한 조절, 치료, 또는 요법을 필요로 하는 세포, 조직, 기관, 동물, 또는 환자에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 이러한 방법은 선택적으로 이러한 질환 또는 장애의 치료를 위한 병용 투여 또는 조합 요법을 추가로 포함할 수 있으며, 여기서 상기 하나 이상의 항-IL-23 항체, 이의 특정 부분 또는 변이체를 투여하는 단계는 하나 이상의 TNF 길항제(비제한적인 예를 들어, TNF 화학물질 또는 단백질 길항제, TNF 단일클론 또는 다클론 항체 또는 단편, 가용성 TNF 수용체(예를 들어, p55, p70, 또는 p85) 또는 이의 단편, 융합 폴리펩티드, 또는 소분자 TNF 길항제, 예를 들어 TNF 결합 단백질 I 또는 II(TBP-I 또는 TBP-II), 네렐리몬맙, 인플릭시맙, 에테르나셉트(Enbrel™), 아달리물랍(Humira™), CDP-571, CDP-870, 아펠리모맙, 레네르셉트 등), 항류머티즘제(예를 들어, 메토트렉세이트, 아우라노핀, 아우로티오글루코스, 아자티오프린, 금 나트륨 티오말레이트, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 레플루노마이드, 설파살진), 근육 이완제, 마약류(narcotic), 비스테로이드성 항염증제(NSAID), 진통제, 마취제, 진정제, 국소 마취제, 신경근육 차단제, 항미생물제(예를 들어, 아미노글리코시드, 항진균제, 구충제, 항바이러스제, 카르바페넴, 세팔로스포린, 플루오르퀴놀론, 마크롤리드, 페니실린, 설폰아미드, 테트라사이클린, 다른 항미생물제), 건선치료제, 코르티코스테로이드, 단백동화 스테로이드, 당뇨병 관련 제제, 미네랄, 영양제, 갑상선제, 비타민, 칼슘 관련 호르몬, 지사제, 진해제, 구토방지제, 항궤양제, 완하제, 항응고제, 에리트로포이에틴(예를 들어, 에포에틴 알파), 필그라스팀(예를 들어, G-CSF, Neupogen), 사르그라모스팀(GM-CSF, Leukine), 면역화, 면역글로불린, 면역억제제(예를 들어, 바실릭시맙, 사이클로스포린, 다클리주맙), 성장 호르몬, 호르몬 대체 약물, 에스트로겐 수용체 조절제, 산동제, 조절마비제, 알킬화제, 항대사물질, 유사분열 억제제, 방사성 의약품, 항우울제, 항조병제, 항정신병약, 불안 완화제, 수면제, 교감신경흥분제, 흥분제, 도네페질, 타크린, 천식 약물, 베타 작용제, 흡입 스테로이드, 류코트리엔 억제제, 메틸잔틴, 크로몰린, 에피네프린 또는 유사체, 도르나제 알파(Pulmozyme), 사이토카인 또는 사이토카인 길항제로부터 선택되는 하나 이상을 투여하기 전에, 그와 동시에, 및/또는 그 후에 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 적합한 투여량은 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 문헌[Wells et al., eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000)]; 문헌[PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, CA (2000)]; 문헌[Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21st edition, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001]; 문헌[Health Professional's Drug Guide 2001, ed., Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc, Upper Saddle River, NJ]을 참조하며, 이들 참고문헌 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
치료적 치료
전형적으로, 조성물에 함유된 활성제의 비활성도에 따라, 합계가 평균적으로 용량당 약 0.01 내지 500 밀리그램 이상의 항-IL-23 항체/환자의 킬로그램, 바람직하게는 단일 또는 다중 투여당 약 0.1 내지 100 밀리그램 이상의 항체/환자의 킬로그램의 범위인 유효량 또는 유효 투여량의 항-IL-23 항체 조성물을 투여함으로써, 건선성 관절염의 치료가 이루어진다. 대안적으로, 유효 혈청 농도는 단일 또는 다중 투여당 0.1 내지 5000 ㎍/ml의 혈청 농도를 포함할 수 있다. 적합한 투여량이 임상의에게 알려져 있으며, 물론 특정 질병의 상태, 투여되는 조성물의 특정 활성 및 치료할 특정 환자에 따라 달라질 것이다. 일부의 경우, 요구되는 치료량을 달성하기 위해, 반복 투여, 즉 요구되는 일일 용량 또는 효과가 달성될 때까지 특정 모니터링 또는 계량 용량의 개별적인 투여를 반복하는 것이 필요할 수 있다.
바람직한 투여량은 선택적으로 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 및/또는 100 내지 500 mg/㎏/투여, 또는 이의 임의의 범위, 값 또는 부분을 포함할 수 있거나, 단일 또는 다중 투여당 혈청 농도 0.1, 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5, 2.9, 3.0, 3.5, 3.9, 4.0, 4.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11, 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14, 14.5, 15, 15.5, 15.9, 16, 16.5, 16.9, 17, 17.5, 17.9, 18, 18.5, 18.9, 19, 19.5, 19.9, 20, 20.5, 20.9, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 96, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500 및/또는 5000 ㎍/ml, 또는 이의 임의의 범위, 값 또는 부분의 혈청 농도를 달성하도록 하는 양을 포함할 수 있다.
대안적으로, 투여되는 투여량은 알려진 인자, 예컨대 특정 작용제의 약력학적 특징, 및 그의 투여 방식 및 경로; 수용자의 연령, 건강, 및 체중; 증상의 성질 및 정도, 병행 치료의 종류, 치료의 빈도, 및 원하는 효과에 따라 변동될 수 있다. 일반적으로, 활성 성분의 투여량은 체중 1 킬로그램당 약 0.1 내지 100 밀리그램일 수 있다. 통상적으로, 0.1 내지 50, 바람직하게는, 0.1 내지 10 밀리그램/킬로그램/투여 또는 지속 방출 형태가 원하는 결과를 얻는 데 효과적이다.
비제한적인 예로서, 인간 또는 동물의 치료는, 본 발명의 하나 이상의 항체 0.1 내지 100 mg/㎏, 예컨대 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 또는 100 mg/㎏/일의 1회 또는 주기적 투여량으로서, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40 일 중 하나 이상, 또는 대안적으로 또는 추가로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 또는 52 주 중 하나 이상, 또는 대안적으로 또는 추가로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 년 중 하나 이상, 또는 이들의 임의의 조합에, 단일, 주입, 또는 반복 용량을 사용하여 제공할 수 있다.
체내 투여에 적합한 투여형(조성물)은 일반적으로 단위 또는 용기당 약 0.001 밀리그램 내지 약 500 밀리그램의 활성 성분을 함유한다. 이러한 약제학적 조성물에서, 활성 성분은 대체로 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.5 내지 99.999 wt%의 양으로 존재할 것이다.
비경구 투여의 경우, 항체는 약제학적으로 허용되는 비경구 비히클과 함께 또는 별도로 제공되는 용액, 현탁액, 에멀젼, 입자, 분말 또는 동결건조 분말로서 제형화될 수 있다. 이러한 비히클의 예는 물, 염수, 링거액, 덱스트로스 용액 및 1 내지 10% 인간 혈청 알부민이다. 리포솜 및 비수성 비히클, 예를 들어 고정유가 또한 사용될 수 있다. 비히클 또는 동결건조 분말은 등장성 (예를 들어, 염화나트륨, 만니톨) 및 화학적 안정성 (예를 들어, 완충제 및 방부제)을 유지하는 첨가제를 함유할 수 있다. 제형을 알려진 기술 또는 적합한 기술에 의해 살균시킨다.
적합한 약제학적 담체는 본 분야의 표준 참고문헌인 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol]의 최신판에 기재되어 있다.
대안적 투여
알려지고 개발된 많은 방식이 본 발명에 따라 약제학적 유효량의 항-IL-23 항체의 투여에 사용될 수 있다. 폐 투여가 하기 설명에서 사용되며, 다른 투여 방식이 적합한 결과를 보이면서 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 본 발명의 IL-23 특이적 항체는 흡입 또는 본 명세서에 기재되거나 본 기술 분야에 알려진 다른 방식에 의한 투여에 적합한 임의의 다양한 장치 및 방법을 사용하여, 용액, 에멀젼, 콜로이드, 또는 현탁액으로서, 또는 건조 분말로서 담체 중에 전달될 수 있다.
비경구 제형 및 투여
비경구 투여를 위한 제형은 통상적인 부형제로서 멸균수 또는 염수, 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리알킬렌 글리콜, 식물 기원의 오일, 수소화 나프탈렌 등을 함유할 수 있다. 주사를 위한 수성 또는 유성 현탁액은 알려진 방법에 따라 적당한 유화제 또는 습윤화제 및 현탁제를 사용하여 제조될 수 있다. 주사를 위한 약제는 용매 중의 수용액, 멸균 주사용 용액 또는 현탁액과 같은 비독성의 비경구 투여가능 희석제일 수 있다. 사용가능한 비히클 또는 용매로서, 물, 링거액, 등장성 염수 등이 허용되며; 통상의 용매 또는 현탁 용매로서, 멸균 비휘발성 오일이 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 천연 또는 합성 또는 반합성 지방 오일 또는 지방산; 천연 또는 합성 또는 반합성 모노- 또는 다이- 또는 트라이-글리세라이드를 포함하는 임의의 종류의 비휘발성 오일 및 지방산이 사용될 수 있다. 비경구적 투여는 본 기술 분야에 공지되어 있으며, 미국 특허 제5,851,198호에 기재된 기체 가압 무-바늘 주사 장치, 및 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함되는 미국 특허 제5,839,446호에 기재된 레이저 천공 장치와 같은 통상적인 주사 수단을 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
대안적 전달
추가로 본 발명은, 비경구, 피하, 근내, 정맥내, 관절내, 기관지내, 복강내, 관절낭내, 연골내, 강내, 체강내, 소뇌내, 뇌실내, 결장내, 경부내, 위내, 간내, 심근내, 골내, 골반내, 심장주위내, 복막내, 흉막내, 전립선내, 폐내, 직장내, 신장내, 망막내, 척수내, 활막내, 흉부내, 자궁내, 방광내, 병변내, 볼루스, 질내, 직장, 협측, 설하, 비강내, 또는 경피 수단에 의한 항-IL-23 항체의 투여에 관한 것이다. 항-IL-23항체 조성물은, 특히 액체 용액 또는 현탁액의 형태로 비경구(피하, 근육내, 또는 정맥내) 또는 임의의 다른 투여에 사용하기 위해; 특히 크림 및 좌약과 같으나 이에 한정되지 않는 반고체 형태로 질 또는 직장 투여에 사용하기 위해; 정제 또는 캡슐의 형태와 같으나 이에 한정되지 않는 구강 또는 설하; 또는, 분말, 점비제(nasal drop), 또는 에어로졸 또는 소정 작용제의 형태와 같으나 이에 한정되지 않는 비강내; 또는 피부 구조를 변형시키거나 경피 패치 내의 약물 농도를 증가시키기 위한 다이메틸 설폭사이드와 같은 화학적 인핸서를 갖거나(전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Junginger, et al. In "Drug Permeation Enhancement;"Hsieh, D. S., Eds., pp. 59-90 Marcel Dekker, Inc. New York 1994]), 단백질 및 펩티드를 함유하는 제형의 피부 상의 적용을 가능하게 하는 산화제(WO 98/53847), 또는 전기천공과 같이 일시적 수송 경로를 생성하거나 이온영동법과 같이 피부를 통해 하전된 약물의 이동성을 증가시키기 위한 전기장의 적용, 또는 음파영동과 같은 초음파의 적용(미국 특허 제4,309,989호 및 제4,767,402호)을 갖는, 겔, 연고, 로션, 현탁액, 또는 패치 전달 시스템과 같으나 이에 한정되지 않는 경피 투여를 위해 제조될 수 있다(상기 간행물 및 특허는 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함됨).
본 발명을 일반적으로 설명하였지만, 본 발명은 예시를 위해 제공되고 본 발명을 제한하는 것으로서 간주되지 않는 하기 실시예를 참고하여 보다 쉽게 이해될 것이다. 본 발명의 추가의 세부사항이 하기 비제한적인 실시예에 의해 예시된다. 본 명세서의 모든 인용문의 개시 내용은 본 명세서에 참고로 명백히 포함된다.
실시예
재료 및 방법
환자
건선성 관절염에 대한 분류 기준(CASPAR)을 충족시키는, 6 개월 이상 동안 PsA를 갖는 18 세 이상의 환자가 시험에 등록되었으며; (문헌[Taylor W. et al. Arthritis Rheum 2006, 54 : 2665-73]) 3개 이상의 압통 관절 및 3개 이상의 부종 관절, 0.3 mg/dL 이상의 C-반응성 단백질[CRP], 3% 체표면적(BSA) 이상의 판상 건선; 및 표준 요법(3 개월 이상의 비-생물학적 질환 변형 항-류마티스 약물[DMARD]; 4 주 이상의 경구 코르티코스테로이드 또는 비스테로이드성 항-염증 약물[NSAID])에 대한 부적절한 반응; 또는 그러한 요법의 불내성은 적격이었다. 1개의 이전의 항-TNFα 제제를 갖는 환자는 허용되었으나, 8 내지 12 주의 약물체외배출 후에 환자의 20%로 제한되었다. 환자가 중증, 진행성, 또는 제어되지 않는 의학적 병태의 이력 또는 현재의 징후를 가졌거나, 비흑색종 피부암(NMSC)을 제외하고 현재의 악성종양 또는 5 년 이내의 악성종양의 이력을 가진 경우, 그들은 부적격이었다. 활성 결핵(TB)의 이력 또는 증상을 갖는 환자는 배제되었다. 환자가 이전에 구셀쿠맙 또는 아달리무맙을 받았거나; 3 개월 이내에 다른 항-TNF-α 요법을 받았거나; 6 개월 이내에 IL-12/23, IL-17, 또는 IL-23을 표적화하는 다른 치료를 받았거나; 4 주 이내에 임의의 전신 면역억제제(예를 들어, 메토트렉세이트) 또는 광선요법을 받은 경우, 그들은 참여할 수 없었다.
연구 설계
본 연구는 2015년 3월 27일부터 2017년 1월 17일까지 7 개국(캐나다, 독일, 폴란드, 루마니아, 러시아, 스페인, 미국) 내의 34개 현장에서 수행된 이중 맹검 위약 대조 연구였다. 0 주, 4 주, 및 매 8 주마다(q8w) 피하 구셀쿠맙 100 mg 또는 위약을 받도록 환자들을 2:1로 무작위배정하였다(이전의 항-TNFα 사용에 의해 계층화됨). 이 용량 계획은 건선에서의 용량-반응에 기초하여 선택되었으며, 여기서 더 높은 용량(200 mg q12w)은 증분 이익을 산출하지 않았다.
16 주에, 부종 관절 계수 및 압통 관절 계수의 개선이 5% 초과인 모든 환자는 개방-표지 우스테키누맙으로의 조기 종료(위약→우스테키누맙, 구셀쿠맙→ 우스테키누맙)에 적격이었다. 위약을 계속하는 환자는 24 주, 28 주, 및 44 주까지 q8w로 구셀쿠맙 100 mg을 받도록 교차시험하였으며(위약→구셀쿠맙) 최종 추적 조사는 56 주였다. MTX(25 mg/주 이하), 경구 코르티코스테로이드(10 mg/일 이하의 프레드니손/동등물), 및 NSAID는 허용되었지만 필요하지는 않았으며; 안정한 용량은 24 주까지였다. 설파살라진(3 g/일 이하) 및 레플루노미드(20 mg/일 이하)는 24 주 후에 허용되었다. 다른 DMARD 및 생물제제는 56 주까지 금지되었다.
본 시험(NCT02319759)은 헬싱키 선언 및 임상 시험 지침(Good Clinical Practice guideline)에 따라 수행되었다. 프로토콜(NEJM.org에서 입수가능함)은 규제 윤리 단체(governing ethical body)에 의해 승인되었고; 환자는 고지에 입각한 서면 동의서(written informed consent)를 제공하였다. Janssen Research & Development, LLC가 본 연구에 출자하였고 데이터를 분석하였다(BD/YW/YZ/WB/XLX). 모든 저자가 데이터를 해석하였고 원고 작성에 공동작업하였으며, Janssen-출자 의료 기록인(medical writer)에 의한 지원을 받았다. 모든 저자는 공개를 위해 원고를 제출하기로 결정하였으며 데이터 진실성/완전성 및 프로토콜에 대한 연구 충실도를 증명한다.
기관 심의 위원회 또는 윤리 위원회는 참여 지역에서 연구 프로토콜을 승인하였고; 환자는 연구 개시 전에 고지에 입각한 서면 동의서를 제공하였다.
평가
독립적인 평가자가 압통(N=68) 및 부종(N=66, 고관절을 제외함)에 대해 관절을 평가하였다. 환자는 통증(0 내지 100 mm 시각적 아날로그 척도[VAS]), 전반적 질환 활성(0 내지 100 mm VAS), 및 신체적 기능(건강 평가 질문지-장애 지수[HAQ-DI])을 보고하였다. 연구자는 질환 활성의 전반적 평가(0 내지 100 mm VAS)를 완료하고, 혈청 CRP를 결정하였다. 관절 평가자는 또한, 0(지염 없음) 내지 3(중증의 지염)의 척도 상에서 0 내지 60의 총점으로 각각의 손가락/발가락에 대한 지염 중증도를 평가하였고, 리즈 골부착부염 지수(LEI: Leeds Enthesitis Index)를 사용하여 골부착부염의 존재를 평가하였다.
건선 면적 및 중증도 지수(PASI)는 피부 질환 중증도/정도를 평가하였다. 36-항목 단축형(SF-36) 건강 조사는 정신 건강 및 신체 건강 및 삶의 질을 평가하였다. 1차 종점은 24 주에 ACR 20% 개선 기준(ACR20)을 충족시키는 환자의 비율이었다. 2차 종점은 16 주에서의 ACR20; 및 PASI75/90/100, ACR50/70, HAQ-DI, 기준선 골부착부염/지염을 갖는 환자에서의 골부착부염/지염 개선, SF-36 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS) 점수의 변화, 및 56 주까지의 최소 질환 활성(MDA) 기준의 달성을 포함한다. 유해 사건(AE)을 모니터링하였다.
통계 분석
24 주까지의 효능 분석은 변형된 치료 의향 집단(mITT 또는 전체 분석 세트; 무작위배정하고 치료한 환자)을 사용하였다. 치료군 비교는 이원 종점에 대해 이전의 TNFα-억제제 사용에 의해 계층화된 코크란-맨텔-헨첼 검정을 사용하였고 연속 종점에 대해 반복 측정에 대한 혼합 모델, 분산 분석, 또는 윌콕슨 순위합 검정(Wilcoxon rank sum test)을 사용하였다. 다중성에 대한 유형 I 오차를 제어하기 위해, 1차 분석/선행 가설 성공 여부에 따라 24 주에 2개의 2차 분석(PASI75, HAQ-DI 변화)을 순차적으로 수행해야 했다(α=0.05; 양측). 추가의 분석 상세사항은 온라인으로 제공되어 있다.
24 주까지의 모든 효능 분석에 데이터 취급 규칙을 적용하였다. 치료 실패 기준을 충족시켰거나, 조기 종료하였거나, 누락된 데이터를 가진 환자는 치료 실패/조기 종료 후 24 주까지 이분형 ACR/MDA 반응에 대한 비반응자로 간주되었다. 연속 종점의 경우에 24 주까지, 누락된 기준선을 갖는 환자는 배제되었다. 마지막 관찰 이월 방법론을 사용하여 기준선 후 누락된 데이터 또는 조기 종료 후 데이터를 귀속시켰다. 치료 실패, 조기 종료, 또는 누락된 데이터에 대해 비반응자 귀속(NRI)을 사용하여 mITT 집단에서 56 주까지의 ACR/MDA 반응을 또한 사후 분석하였다.
결과
환자
251 명의 스크리닝된 환자 중에서, 149 명을 위약(N=49) 또는 구셀쿠맙(N=100)에 무작위배정하였다. 17 명(34.7%)의 위약-치료 환자 및 10 명(10.0%)의 구셀쿠맙-치료 환자가 16 주에 우스테키누맙으로의 조기 종료를 위한 자격을 부여 받았다. 위약을 받는 3 명(6.1%)의 환자, 위약→구셀쿠맙을 받는 1 명(3.4%), 및 구셀쿠맙 군 내의 6 명(6.0%)이 44 주까지 연구 제제를 중단하였다(도 1).
기준선 특징은 일반적으로 군들 사이에서 유사하였으며 중등도 내지 중증 관절염을 나타냈다. 평균 BSA/PASI 점수는 위약에 비해 구셀쿠맙에서 다소 더 높게 나타났고, 위약 군에 비해 구셀쿠맙 군에서 더 많은 환자가 기준선 지염/골부착부염을 가졌지만, 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 대부분(87.9%)의 환자가 이전에 통상의 DMARD를 받았고; 44.3%가 기준선에서 MTX를 받고 있었으며; 8.7%가 이전에 항-TNFα 제제를 받았다(표 1).
위약 대조 기간(0 주 내지 24 주) 중의 효능
1차 종점은 위약 대조 기간(0 주 내지 24 주) 중에 충족되었다. 구셀쿠맙-치료 환자 대 위약-치료 환자의 58.0% 대 18.4%(P<0.001)가 24 주에 ACR20 반응을 달성하였다. 감도 분석은 확증적이었으며(표 S1), 결과는 부수적인 MTX 사용에 무관하게 일치하였다(표 2). 4 주까지 위약에 비해 구셀쿠맙의 경우에 ACR20 반응의 상당한 개선이 관찰되었으며(21.0% 대 0, p<0.001), 16 주까지 최대에 도달하였다(60.0% 대 16.3%; P<0.001; 도 2a). 24 주까지 ACR50 및 ACR70(도 2b, 도 2c) 반응은 시간 경과에 따라 위약-치료 환자보다 구셀쿠맙-치료 환자 중에서 일관되게 더 높았다(ACR50: 34.0% 대 10.2%, P=0.002; ACR70: 14.0% 대 2.0%, P=0.023[사후 계산됨])(표 2). 24 주에 모든 ACR 성분에서 상당한 개선이 관찰되었다(P<0.001)(표 S2). HAQ-DI에 의해 평가된 신체적 기능은 24 주에 위약에 비해 구셀쿠맙에 의해 상당히 개선되었다(기준선으로부터의 HAQ-DI 변화의 최소 제곱 평균 차이[95%CI]: -0.31[-0.47, -0.15]; P<0.001)(표 2).
PASI75/90 반응은 위약에 비해 구셀쿠맙의 경우에 4 주까지(데이터는 나타내지 않음), 그리고 24 주까지(PASI75: 78.6% 대 12.5%, 및 PASI90: 66.3% 대 6.3%, P<0.001; 표 2) 상당히 더 높았다. PASI100 반응은 24 주에 상당히 더 높았다(39.8% 대 6.3%; P<0.001).
기준선 골부착부염을 갖는 사람들 중에서, 구셀쿠맙-치료 환자 대 위약-치료 환자의 56.6% 대 29.0%가 24 주에 골부착부염 해소를 가졌다(P=0.012). 유사한 발견이 24 주에 지염 해소에 대해 관찰되었다(55.2% 대 17.4%; P=0.001)(표 2). 이들 기준선 증상을 갖는 환자 중에서 구셀쿠맙은 위약보다 상당히 더 큰 LEI/지염 점수의 개선을 산출했다(둘 모두 100.0% 대 33.3%의 기준선으로부터의 중위 퍼센트 개선을 가짐; P≤0.009). 위약-치료 환자보다 상당히 더 높은 비율의 구셀쿠맙-치료 환자가 24 주에 MDA 반응을 달성했다(23.0% 대 2.0%; P=0.001; 표 2). 24 주까지 구셀쿠맙은 위약에 비해 SF-36 PCS(기준선으로부터의 평균 변화: 6.59 대 0.46; P<0.001) 및 MCS(기준선으로부터의 평균 변화: 4.95 대 0.42; P=0.002) 점수를 상당히 개선하였다(표 2).
24 주 후의 효능
24 주 결과와 일관되게, 24 주에서의 위약→구셀쿠맙으로의 교차시험 후에 효능 결과는 신속하게 개선되었으며 구셀쿠맙을 계속한 환자 중에서 44 주(마지막 치료중 효능 평가) 및 56 주(최종 추적 조사 방문)까지 유지되었다. 56 주까지의 ACR/MDA 반응은 NRI를 사용하거나(도 2a 내지 도 2d) 관찰된 데이터에 기초하여(표 S3) 나타낸다.
안전성
구셀쿠맙은 일반적으로 잘 용인되었다. 24 주까지, 구셀쿠맙-치료 환자의 36.0% 및 위약-치료 환자의 32.7%가 1개 이상의 AE를 보고하였다. 56 주까지, 0 주부터 44 주까지 구셀쿠맙을 받는 사람들의 46%를 포함하여, 구셀쿠맙-치료 환자의 39.5%가 1개 이상의 AE를 보고하였다. 부수적인 MTX 사용에 무관하게 AE 발생률은 유사했으며 더 긴 구셀쿠맙 노출에 의해 불비례 증가를 나타내지 않았다(표 3).
56 주까지 사망, 과민성/혈청병-유사 반응, 또는 자살 생각이 보고되지 않았다. 24 주까지 1 명의 위약 환자(2.0%, 관절 손상) 및 1 명의 구셀쿠맙 환자(1.0%, 심근 경색)에 의해, 그리고 56 주까지 추가의 5 명의 구셀쿠맙-치료 환자(골관절염, 폐렴, 동공 부등(pupils unequal), 요골 골절, 궤양성 각막염)에 의해 심각한 AE가 보고되었다. 모든 심각한 AE가 연구자에 의해 연구 약물과 무관한 것으로 간주되었고 해소되었다. 심근 경색을 갖는 환자는 다중 위험 인자(45 세 초과의 남성, 고혈압, 고지혈증, 조기 관상 동맥 질환의 가족력[55 세 초과], 비만, 흡연력)를 나타냈으며, 이전의 경동맥 내막절제술과 함께 기준선에서 죽상동맥경화증을 가졌다. 2 명(1.6%)의 구셀쿠맙-치료 환자가 44 주(마지막 연구 제제 투여)까지 AE로 인해 치료를 중단했다(표 3). 구셀쿠맙-치료 여성(67 세 코카시안/백색 피부, 야외 활동 빈번함)에서의 기저 세포 암종의 1개 사례를 제외하고는, 다른 악성종양이 발생하지 않았다. 주사-부위 반응은 750회의 구셀쿠맙 투여 중에서 보고되지 않았다.
24 주까지 각각 구셀쿠맙-치료 환자 및 위약-치료 환자의 16.0% 및 24.0%에서, 그리고 56 주까지 모든 구셀쿠맙-치료 환자의 20.9%에서 연구자-확인 감염이 발생했다. 2개의 급성 폐렴 에피소드(179 일/209 일)를 가졌고 그 후에 치료를 중단한 1 명(0.8%)의 구셀쿠맙-치료 78 세 여성에서 심각한 감염이 발생했다. 칸디다증, 활동성 결핵, 또는 기회 감염은 보고되지 않았다.
5 명(3.9%)의 구셀쿠맙-치료 환자가 호중구 감소증/호중구 계수 감소의 AE를 보고하였고, 그 중의 4 명은 백혈구 감소증/WBC 감소를 또한 보고하였다. 그러나, 국립 암 학회 AE에 대한 표준 용어 기준(NCI-CTCAE: National Cancer Institute Common Terminology Criteria for AEs)에 따른 등급-2(1000 내지 1500 세포/㎣) 또는 등급-3(500 내지 1000 세포/㎣) 호중구 감소증이 56 주까지 각각 3 명(3.0%, MTX를 받는 2 명) 및 1 명(1.0%, MTX 없음)의 구셀쿠맙-치료 환자에서 발생했다. 등급-3 호중구 감소증을 갖는 환자는 치료를 중단했으며, 그 후에 자연적으로 해소되었다. 3 명의 환자 각각 중에서 단 1회의 방문에 대해 등급-2 호중구 계수 감소가 관찰되었으며 구셀쿠맙을 계속하면서 자연적으로 해소되었다. 최종 추적 조사까지 이들 4 명의 환자에서 감염이 보고되지 않았다. NCI-CTCAE 등급 1(1.0 내지 3.0x 정상의 상한[ULN]) 또는 더 높은 기준을 충족시키는 알라닌 아미노트랜스페라제(ALT) 또는 아스파르테이트 아미노트랜스페라제(AST) 증가를 갖는 환자의 비율은 24 주까지 위약과 구셀쿠맙 사이에서 일반적으로 유사하였다. 56 주까지, 4 명(3.1%)의 구셀쿠맙-치료 환자(3 명은 부수적인 MTX를 가짐)가 ALT 증가를 나타냈고 5 명(3.9%)(기준선에서 만성 간 질환을 갖는 1 명을 포함하여 4 명은 MTX를 가짐)이 NCI-CTCAE 등급 2(3.0 내지 5.0x ULN)를 충족시키는 AST 증가를 가졌다. 구셀쿠맙-치료 환자에서는 관찰되지 않은, 56 주까지의 등급 3(5.0 내지 20.0x ULN) 또는 더 높은 ALT/AST 증가가 1 명(2.0%)의 위약-치료 환자에서 발생하였다.
56 주까지, 구셀쿠맙-치료 환자의 4.7%에서 구셀쿠맙에 대한 비-중화 항체가 생성되었다. 56 주까지 우스테키누맙으로 조기 종료하는 환자에서 예상외의 안전성 조사결과는 관찰되지 않았다(표 3).
논의
중등도 내지 중증 건선의 치료에 대해 미국에서 최근에 승인된 인간 단일클론 항-IL-23p19 항체인 구셀쿠맙(Janssen Biotech, Inc, TREMFYA® https:// www.tremfyahcp.com)은 PsA에서의 효능을 입증할 혁신 신약이다. 본 POC 시험에서, 0 주, 4 주, 및 q8w의 구셀쿠맙 100 mg은 관절 및 피부 질환, 골부착부염/지염을 상당히 감소시켰고, 신체적 기능/삶의 질을 개선했다. 본 연구는 그의 1 차 종점 및 모든 2 차 종점을 충족시켰다. 관절/피부 질환의 상당한 개선은 4 주에 관찰되었으며(최초 기준선 후 평가); 개선은 모든 ACR 성분에서, 그리고 인구통계학/질환 특징(데이터는 나타내지 않음) 및 이전의/부수적인 약물에 의해 정의된 환자 하위군에서 일관되게 관찰되었다(표 2). 효능은 약 1 년까지 잘 유지되었다. 구셀쿠맙에 의해 나타난 강건한 효능은 PsA 병인에 있어서 IL-23의 결정적 역할을 확인하였으며, 이는 이전의 PsA 우스테키누맙 연구로부터의 조사결과와 일치하였다. 구셀쿠맙 및 우스테키누맙 둘 모두는 중등도 내지 중증 건선의 임상 연구에서 매우 높은 임상 반응률을 나타냈으며(문헌[Leonardi CL et al. Lancet 2008, 371:1665-74]; 문헌[Papp KA et al, Lancet 2008, 371:1675-84]; 문헌[Blauvelt A. et al, 2017, 76:405-417]; 문헌[Reich K et al, J Am Acad Dermatol 2017, 76:418-31]), 또한 건선 및 PsA 둘 모두에 있어서 IL-23의 중심 역할을 강조한다.
IL-23/IL-23R 유전자 내의 유전자 다형성은 건선, PsA, 및 IBD에서의 감수성과 연결된다(문헌[Bowes J et al, Ann Rheum Dis 2011, 70:1641-44]; 문헌[Duerr RH et al, Science 2006, 314:1461-3]; 문헌[Liu Y et al. PLoS Genet 2008, 4(3):e1000041]; 문헌[Nair RP et al. Nat Genet 2009, 41:199-204]). PsA 환자는 IBD에 대한 증가된 위험을 가지며(문헌[Orchard TR et al, Gut 1998, 42:387-91]), 흔히 IBD 환자와 유사한 장 박테리아 프로파일을 나타낸다(문헌[Scher JU et al, Arthritis Rheum 2015, 67:128-39]). 따라서, PsA에서 "피부-관절-장 축"의 통상적인 면역-매개 염증 경로는 미생물군유전체-유도/매개일 수 있으며, Il-23이 이 기전에 결정적일 수 있다. 우스테키누맙은 크론병(CD)을 효과적으로 치료하며(문헌[Feagan BG et al, N Engl J Med 2016, 375:1946-60]), IL-23p19를 표적으로 하는 2개의 제제(리산키주맙/MEDI2070)가 2 상 CD 연구에서 유망한 결과를 나타냈다(문헌[Sands BE et al, J. gastro. 2017, S0016-5085(17)35401-X]; 문헌[Feagan BG et al, Lancet 2017, 389:1699-709]). 역으로, 2개의 항-IL-17 제제(세쿠키누맙/브로달루맙)는 2 상 시험에서 CD를 개선하거나 악화시키지 않았으며(문헌[Targan SR et al, Am J Gastroenterol 2016, 111:1599-607], 문헌[Hueber W et al. Gut 2012, 61:1693-700]), 3 상 세쿠키누맙 및 익세키주맙 연구에서는 새로운 발병/악화 IBD가 보고되었다(문헌[Baeten D et al. N Engl J Med 2015, 373:2534-48]; 문헌[Gordon KB et al, N Engl J Med 2016, 375:345-56]). 여기서, 기준선 IBD를 가진 환자는 없었고 IBD의 AE는 보고되지 않았다. IBD에서의 구셀쿠맙 효능은 향후 임상 연구에서 평가할 필요가 있다.
본 발명자들의 PsA 집단에서, 56 주까지의 구셀쿠맙 안전성은 건선에서 관찰되는 것과 일반적으로 일치하였으며(문헌[Blauvelt A. et al, 2017, 76:405-417]; 문헌[Reich K et al, J Am Acad Dermatol 2017, 76:418-31]), 24 주까지 감염을 포함하는 AE의 빈도는 위약과 유사하였다. NCI-CTCAE 등급-2/3 호중구 감소는 56 주까지 4 명(4.0%)의 구셀쿠맙-치료 환자에서 발생하였으며 MTX 사용과 관련되지 않았다. 호중구 항상성/조직 수송은 Il-17/과립구-콜로니-자극-인자-사이토카인-제어 루프에 의해 제어되며(문헌[Krstic A et al, Immunol Res 2012;52:34-41]), IL-17이 과립구조혈에서 중요한 역할을 담당한다(문헌[Rahman P et al, Arthritis Rheum 2008;58:1020-5]; 문헌[Langley RG et al, N Engl J Med 2014;371:326-38]; 문헌[Novartis Pharmaceuticals Corporation. COSENTYX®, https://www.pharma.us.novartis.com/sites/www.pharma.us.novartis.com/files/cosentyx.pdf]). 등급-1/2/3 호중구 감소증의 증가된 발생률이 항-IL-17 항체 세쿠키누맙(문헌[Langley RG et al, N Engl J Med 2014;371:326-38]; 문헌[Novartis Pharmaceuticals Corporation. COSENTYX®, https://www.pharma.us.novartis.com/sites/www.pharma.us.novartis.com/files/cosentyx.pdf]), 익세키주맙(문헌[Eli Lilly and Company, http://Pi.lilly.com/us/taltz-uspi.pdf]), 및 브로달루맙(문헌[Lebwohl et al, N Engl J Med 2015;373:1318-28])의 대규모 3 상 시험에서 보고되었으나; 2개의 대규모 3 상 구셀쿠맙 건선 시험의 조합된 분석에서는(문헌[Blauvelt A. et al, 2017, 76:405-417]; 문헌[Reich K et al, J Am Acad Dermatol 2017, 76:418-31]), 등급-3 또는 등급-4 호중구 감소증의 사례가 관찰되지 않았고 등급-2 호중구 감소증의 빈도는 위약 대조 기간 중에 16 주까지 위약(3/416, 0.7%) 및 구셀쿠맙 100 mg(6/821, 0.7%) 치료에 대해 유사하였다. 48 주까지, 등급-4 호중구 감소증은 관찰되지 않았고, 등급-3 호중구 감소증은 1/1,363(0.1%) 구셀쿠맙-치료 환자 및 2/576(0.3%) 아달리무맙-치료 환자에서 발생했다. 등급-2 호중구 감소증의 빈도는 구셀쿠맙-치료 환자(22/1363, 1.6%)와 아달리무맙-치료 환자(16/576, 2.8%) 사이에서 유사하였다. 구셀쿠맙은 간 트랜스아미나제, 글루코스, 또는 지질을 포함하는 다른 실험실 파라미터에 현저한 효과가 없었다. PsA 환자 중에서 호중구 계수, 간 효소, 및 다른 실험실 파라미터에 대한 구셀쿠맙의 효과는 대규모 3 상 시험에서 추가로 평가될 것이다.
연구 한계는 작은 샘플 크기, 상대적으로 짧은 지속기간, 및 용량 반응의 평가가 없음을 포함한다. 활성 비교대상의 결여 또한 다른 PsA 요법과의 비교를 제한한다. 제한된 샘플 크기를 가진 이러한 2 상 POC 연구에 대한 적절한 1차 종점으로서 ACR20 반응이 선택되었고, 임상적으로 더 유의미할 수 있는 ACR50을 2차 종점으로서 평가하였으며, 둘 모두 구셀쿠맙 치료에 의한 상당한 개선을 나타냈다. 모든 연구 참여자가 3% BSA 이상의 건선을 가졌으므로, 건선이 없거나 제한된 PsA 환자에서의 구셀쿠맙 효능/안전성은 추가의 평가가 필요하지 않다. 이 집단에서 임상 반응을 신뢰가능하게 추정하기에는 너무 적은 환자가 이전에 TNFα-억제제에 노출되었으며, 특이적 PsA 서브세트(예를 들어, 건선성 척추염)를 갖는 환자의 수도 그러했다. 기준선 BSA, PASI, 골부착부염, 지염, 및 MTX 사용에서의 작은 불균형은 위약 환자의 적은 수로 인한 것이었으며, 효능 조사결과의 해석에 영향을 줄 것으로 예상되지 않는다.
따라서, 활동성 PsA 및 3% BSA 이상의 건선을 갖는 환자 중에서, 구셀쿠맙은 Il-17-억제제와는 상이할 가능성이 있는 바람직한 안전성 프로파일로 관절 증상, 신체적 기능, 건선, 골부착부염, 지염, 및 삶의 질을 상당히 개선하였다. 조사결과는 Il-23의 결정적 역할을 확인하며, PsA에서의 치료 표적으로서 그것을 입증한다.
추가의 임상 지수
환자 지수 데이터의 일상적 평가(RAPID3: Routine Assessment of Patient Index Data 3)
환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)을 또한 사용하여 건선성 관절염(PsA)을 갖는 환자에 대한 구셀쿠맙(GUS)의 효과를 평가하였다. RAPID3(0 내지 30)은 통증 및 일반적 건강에 대한 다차원 건강 평가 질문지(MDHAQ) 수치 등급 척도(0 내지 10)로부터 유도된다. RAPID3 점수의 5.1의 변화는 PsA의 최소 중요 차이(MID: minimally important difference)로서 확인되었고, 3.0 이하의 RAPID3 은 PsA 관해를 정의하기 위해 사용되었다.
2 상 시험에서는, 항-TNFα 제제를 포함하는 표준 치료 요법을 이용한 현재 또는 이전의 치료를 불문하고, 활동성 PsA 및 3% 체표면적 이상의 판상 건선을 갖는 환자를 0주, 4 주에, 그리고 그 후로 44 주까지 매 8 주마다(q8w) 피하 GUS 100 mg(n=100) 또는 위약(PBO, n=49)을 받도록 2:1로 무작위배정하였다. 16 주에, 부종 관절 계수 및 압통 관절 계수 둘 모두의 기준선으로부터의 개선이 5% 미만인 어느 한 군으로부터의 환자는 개방-표지 우스테키누맙으로의 조기 종료에 대해 적격이었다. 24 주에, 모든 잔류 PBO 환자는 GUS 100 mg을 받도록 교차시험하였으며, 이어서 28 주에, 그리고 그 후로 44 주까지 q8w로 GUS를 받았다. 치료들 사이에서 RAPID3의 변화 및 MID를 달성하는 환자의 비율을 비교하였다. 스피어만 상관관계(Spearman correlation)를 사용하여 RAPID3 점수와 PsA 질환 활성 점수(PASDAS), GRACE 지수, 건선성 관절염에서의 질환 활성(DAPSA), 및 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI)의 상관관계를 평가하였다.
기준선에서의 평균(SD) RAPID3 점수는 16.9(5.19)였다. 24 주에, GUS 군 내의 환자는 PBO 군(0.57 +/- 0.51, p<0.001)보다 RAPID3(5.81 +/- 6.0)에서 통계적으로 유의하게 더 큰 개선을 달성하였고, PBO 군에서의 20.4%에 비해 GUS 군에서 50%의 환자가 MID를 달성하였다(p<0.001). PBO 군보다 GUS 군에서 더 높은 관해율이 관찰되었다(14.0% 대 2.4%, p=0.022). 44 주에, 구셀쿠맙을 계속한 환자에서 평균(SD) 개선이 24 주로부터 추가로 증가하였다(6.36[6.205]으로부터 7.48[6.310]까지). 24 주에 PBO로부터 GUS로 전환한 환자 중에서, RAPID3의 평균(SD) 개선은 위약을 받는 동안 24 주에 2.28(5.244)로부터 GUS로 전환한 후 44 주에 7.60(6.588)으로 증가하였다. RAPID3 점수는 16 주에 PASDAS(r=0.84, p<0.001), GRACE 지수(r=0.89, p<0.001), DAPSA(r=0.77 p<0.001) 및 mCPDAI(r=0.65, p<0.001)와 고도로 상관관계가 있었다.
리드 골부착부염 지수(LEI)
골부착부염은 리즈 골부착부염 지수(LEI)를 사용하여 평가하였다. 누락된 데이터 및 조기 종료에 대한 LOCF 귀속을 사용하여 24 주 이중 맹검 치료 중의 골부착부염 점수를 분석하였다. 24 주 후의 골부착부염은 관찰된 데이터를 사용하여 분석하였다.
활동성 PsA를 갖는 총 149 명의 환자 중에, 107 명(72%)이 기준선에서 골부착부염을 나타냈고(PBO N=31, 평균[SD] LEI=2.6[1.48], 중위[범위]=2.0[1, 6]; GUS N=76, 평균(SD) LEI=2.7[1.54], 중위[범위]=2.0[1, 6]) 24 주에 85 명이 계속하였다(PBO→GUS N=18; GUS→GUS N=67). 더 높은 압통/부종 관절 계수 및 CRP를 제외하고는, 골부착부염 서브세트의 기준선 특징은 전체 집단과 유사하였다. 구셀쿠맙은 8 주까지(기준선으로부터의 평균[SD] 변화, PBO: -0.4[1.59]; GUS: -1.2[1.65]; p=0.037), 그리고 24 주까지(기준선으로부터의 평균[SD] 변화, PBO: -0.7[1.53]; GUS: -1.5[1.81]; p=0.045) LEI를 상당히 감소시켰다. 24 주 후에, PBO→GUS 군은 신속하고 지속적인 해소를 달성하였으며(56 주: BL로부터의 평균[SD] 변화 = -2.1[1.65]; 62.5%의 환자가 해소됨), 이는 GUS→GUS 군(56 주: BL로부터의 평균[SD] 변화 = -1.9[1.59], 70.8%의 환자가 해소됨)과 유사하였다. 구셀쿠맙은 또한 골부착부염이 해소된 환자의 퍼센트를 상당히 증가시켰다. 골부착부염의 개선은 각각의 평가된 골부착부염 부위에서 관찰되었다. 구셀쿠맙-치료 환자에서 비반응자에 비해 ACR20 반응자에서 개선이 더 컸다. 골부착부염 개선은 압통 관절 계수(R=0.37, p=0.001), 부종 관절 계수(R=0.27, p=0.020), 의사의 질환 활성의 전반적 평가(R=0.47, p<0.0001) 및 환자의 질환 활성의 전반적 평가(R=0.32, p=0.005), SF36 PCS(R=0.27, p=0.02) 및 MCS(R=0.35, p=0.002)의 변화에서의 감소와 상관관계가 있었다.
구셀쿠맙 치료는 활동성 PsA를 갖는 환자에서 골부착부염의 신속하고 지속적인 개선을 생성하며, 이는 관절 증상 및 환자-보고 결과에서의 개선과 상관관계가 있다.
지염 지수
지염은 0 내지 60의 합산 점수에 대해 0 내지 3(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증)의 각각의 숫자를 채점함으로써 평가하였다. 24 주까지 지염 숫자(dactylitic digit)에 있어서 BL로부터의 변화의 감도 분석을 수행하였다(합산 점수 20). 누락된 데이터 및 조기 종료(EE)에 대한 LOCF 귀속을 사용하여 24-주 이중 맹검 치료 중의 지염 점수를 분석하였다. 관찰된 데이터를 사용하여 24 주 후의 지염을 평가하였다.
149 명의 환자 중에, 81 명이 기준선에서 지염을 나타냈고(PBO N=23, 평균[SD]=3.9[3.01]; GUS N=58, 평균[SD]=6.5[6.15]) 66 명이 활성 치료 기간으로 계속하였다(PBO→GUS N=16; GUS→GUS N=50). 부종 관절의 수, 압통 관절의 수, 및 CRP에 대한 더 높은 중위 값을 제외하고는, 지염 서브세트는 기준선 특징에서 전체 집단과 유사하였다. 16 주 및 24 주에, GUS 군은 PBO 군에 비교하여 지염 점수의 상당히 더 큰 감소(24 주 기준선으로부터의 평균[SD] 변화, PBO: -0.4[6.06]; GUS: -3.8[4.93]; p=0.006) 및 지염이 해소된 환자의 더 큰 %를 가졌다(도 7a 및 도 7b). 지염을 갖는 숫자에서 일치하는 결과가 얻어졌다(24 주 기준선으로부터의 평균[SD] 변화, PBO: -0.2[3.04]; GUS: -2.1[2.21]; p=0.003). 24 주에 나타난 지염의 개선은 GUS→GUS 군에서 유지되었고(56 주: BL로부터의 평균[SD] 변화= -5.5[4.84], 75%의 환자가 해소됨) PBO→GUS 군에 대한 값(56 주: BL로부터의 평균[SD] 변화= -4.4[3.50], 93.7%의 환자가 해소됨)은 GUS→GUS 군의 값에 접근하였다. 지염의 개선은 GUS-치료 환자에서 비반응자에 비해 ACR20/ACR50 반응자에서 더 컸으며(표 S5) TJC(R=0.38, p=0.004), SJC(R=0.50, p<0.0001), 및 HAQ-DI 점수(R=0.33, p=0.013)의 개선과 상당한 상관관계가 있었다.
GUS는 활동성 PsA를 갖는 환자에서 지염의 증상을 해소함에 있어서 효과적이다. 지염에 대한 이러한 효과는 관절 증상 및 신체적 기능의 개선과 상관관계가 있다.
복합 종점 PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA
건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS), GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수, 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI), 및 건선성 관절염(DAPSA)에 대한 질환 활성 지수는 건선성 관절염(PsA)에서 질환 활성을 평가하기 위해 최근에 개발된 복합 지수이다. 건선성 관절염(PsA)의 다양하고 고도로 개별적인 임상 및 방사선촬영 양상을 고려할 때, 통상의 채점 시스템과 비교하여 질환 활성을 평가하고 임상적으로 유의미한 치료 표적을 정의함에 있어서 복합 지수가 더 유용할 수 있다. 다중 PsA 복합 지수가 최근에 제안되었지만, 복합 질환 활성 척도의 선택에 관해 류마티스 학계 내의 합의가 현재 없고, PsA-특이적 복합 지수에 대한 성능 데이터가 결여되어 있다. 활동성 PsA를 갖는 환자에서의 2 상 연구에서 이들 지수에 대한 구셀쿠맙(GUS)의 효과를 평가하였다. 표준화된 평균 차이, 효과 크기, 및 표준화된 반응 평균을 사용하여 PsA 복합 지수의 성능을 평가하였다.
재료 및 방법
윤리
본 연구(NCT02319759)는 헬싱키 선언 및 임상 시험 지침에 따라 수행되었다. 프로토콜은 각각의 현장의 규제 윤리 단체에 의해 승인되었고; 환자는 고지에 입각한 서면 동의서를 제공하였다.
연구 설계
보고된 바와 같이(문헌[Deodhar2018]), 본 이중 맹검 위약 대조 평행군 2-아암 다기관 시험에 등록된 환자는 피하 구셀쿠맙 또는 위약을 받도록 중앙에서 무작위배정되었다(2:1). 연구 약물은 동일한 사전충전 주사기 내에 제공되었고; 모든 환자는 동일한 시점에 동일한 수의 주사를 받았다.
구셀쿠맙에 무작위배정된 환자는 0 주, 4 주, 12 주, 20 주, 28 주, 36 주, 및 44 주에 구셀쿠맙 100 mg을 받았고, 24 주에 위약을 받았다. 위약에 무작위배정된 환자는 0 주, 4 주, 12 주, 및 20 주에 위약을 받았고, 24 주, 28 주, 36 주, 및 44 주에 구셀쿠맙 100 mg을 받았다.
16 주에 부종 관절 계수 및 압통 관절 계수(TJC 및 SJC)의 개선이 5% 미만인 환자는, 승인된 국가-특이적 처방 정보에 따라 16 주, 20 주, 32 주, 및 44 주에 개방-표지 우스테키누맙(미국 펜실베이니아주 호르섬 소재의 Janssen Biotech, Inc.)으로, 즉, 위약→우스테키누맙 또는 구셀쿠맙→우스테키누맙으로 조기 종료하였다. 최종 추적 조사 방문은 56 주에 발생했다.
환자
적격 환자는 건선성 관절염에 대한 분류 기준(CASPAR)(문헌[Taylor2006]), 3개 이상의 압통 관절 및 3개 이상의 부종 관절, 0.3 mg/dL 이상의 C-반응성 단백질(CRP), 3% BSA 이상의 판상 건선, 및 표준 요법에 대한 부적절한 반응을 충족시키는, 6 개월 이상 동안 PsA를 갖는 성인을 포함하였다(문헌[Deodhar2018]). 1개의 이전의 항-종양 괴사 인자 알파 제제를 받은 환자는 허용되었으나, 8 내지 12 주의 약물체외배출 후에 환자의 20%로 제한되었다. 24 주까지 안정한 용량의 메토트렉세이트(MTX; 25 mg/주 이하), 경구 코르티코스테로이드(10 mg/일 이하의 프레드니손/동등물), 및 비스테로이드성 항-염증 약물은 허용되었지만 필요하지는 않았다. 설파살라진(3 g/일 이하) 및 레플루노미드(20 mg/일 이하)는 24 주 후에 허용되었다. 다른 질환-변형 항류마티스 약물(DMARD: disease-modifying antirheumatic drug) 및 생물제제는 금지되었다.
절차
독립적인 평가자가 관절 압통(N=68) 및 부종(N=66, 고관절을 제외함)을 평가하였다. 환자는 통증(0 내지 100 mm 시각적 아날로그 척도[VAS]), 전반적 질환 활성(관절염, 건선, 및 둘 모두에 대해 0 내지 100 mm VAS), 및 신체적 기능(HAQ-DI)을 보고하였다. 연구자는 질환 활성의 전반적 평가(0 내지 100 mm VAS)를 완료하고, 혈청 CRP를 결정하였다. 관절 평가자는 또한 각각의 손가락 및 발가락에 대해 지염(0-없음 내지 3-중증)을 평가하였고(총점 0 내지 60) LEI를 사용하여 골부착부염을 평가하였다. PASI는 피부 질환 중증도 및 정도를 평가하였다. SF-36은 신체적 및 정신적 HRQoL을 평가하였다. 주요 효능 평가는 스크리닝, 기준선, 36 주까지 매 4 주마다, 44 주, 및 56 주에 수행하였다.
결과
보고된 바와 같이(문헌[Deodhar A et al. Lancet, 2018, 391:2213-24]), 환자는 5/7 이상의 하기 기준을 충족시키는 경우에 MDA를 달성했다: 1/68 이하의 TJC, 1/66 이하의 SJC, 1 이하의 PASI, 15 이하의 환자 통증 VAS, 20 이하의 환자 전반적 질환 활성 VAS(관절염 및 건선), 0.5 이하의 HAQ-DI, 및 1 이하의 압통 골부착점(tender entheseal point)(문헌[Coates2010]). 7개의 기준 모두를 충족시키는 환자는 VLDA를 달성했다(문헌[Coates LC et al, Ann Rheum Dis 2010;69:48-53]).
PASDAS(문헌[Helliwell2013], 문헌[Helliwell2014b])는 환자 전반적 VAS(관절염 및 건선, 0 내지 100 mm), 의사 전반적 VAS(0 내지 100 mm), TJC, SJC, CRP(mg/L로 변환), 골부착부염(LEI), 지염(0 내지 3의 점수를 0 내지 1로 환산하였으며, 여기서 0 초과의 임의의 점수는 1과 동일했음), 및 SF-36의 PCS 점수를 사용하여 계산하였다. 질환 활성 컷오프는, 매우 낮음(1.9 이하), 낮음(1.9 초과 내지 3.2 이하), 보통(3.2 초과 내지 5.4 미만), 높음(5.4 이상)이었다(문헌[Helliwell PS et al, Ann Rheum Dis 2010, 69:48-53]).
GRACE는 사전정의된 알고리즘을 사용하고 0 내지 1 범위의 평균으로서 총점을 표현하여 하기 변수들을 변환함으로써 계산된 만족도 함수의 산술 평균(AMDF: Arithmetic Mean of the Desirability Function)으로부터 유도되며, 여기서 1은 0보다 더 양호한 상태를 나타낸다: TJC, SJC, HAQ-DI, 환자의 전반적 VAS(관절염 및 건선, 0 내지 100 mm), 환자의 피부 질환 활성 평가 VAS(0-100 mm), 환자의 전반적 평가 VAS(관절염, 0 내지 100 mm), PASI, 유도된 PsAQoL 지수(PsAQoL=25.355+[2.367×HAQ-DI] -[0.234×SF-36 PCS 점수] -[0.244×SF-36 정신적 요소 요약 점수]). 이어서 GRACE는 하기 질환 활성 컷오프로 (1-AMDF) × 10으로서 계산되었다: 낮음(2.3 이하), 보통(2.3 초과 내지 4.7 미만), 높음(4.7 이상)(문헌[Helliwell PS et al, Ann Rheum Dis 2010, 69:48-53]; 문헌[Helliwell PS et al, Arthritis Care Res 2014b;66:749-56]).
4개의 도메인(관절, 피부, 골부착부, 지염)을 평가하기 위해 PsA(mCPDAI)에 대해 변형된 CPDAI(문헌[Mumtaz2011])를 TJC, SJC, HAQ-DI, PASI, 및 지염/골부착부염 점수에 기초하여 계산하였다. 각각의 도메인 내에서, 사전정의된 컷오프에 따라 0 내지 3의 점수를 배정하였고 합산하여 0 내지 12의 총점을 산출하였다. 조정된 질환 활성 컷오프([CPDAI/15]x12)는, 낮음(3.2 이하), 보통(3.2 초과 내지 6.4 미만), 높음(6.4 이상)이었다(문헌[Helliwell PS et al, Arthritis Care Res 2014b;66:749-56]).
DAPSA는 TJC, SJC, CRP(mg/dL), 통증의 환자 평가 VAS(0 내지 10), 및 환자 전반적 평가 VAS(관절염, 0 내지 10)의 합으로서 계산되었다(문헌[Helliwell2014b]). 질환 활성 컷오프는, 관해(4 이하), 낮음(4 초과 내지 14 이하), 보통(14 초과 내지 28 이하), 높음(28 초과)였다(문헌[Schoels MM et al, Ann Rheum Dis 2016;75:811-8]).
통계 분석
24 주까지의 모든 효능 분석은 데이터 취급 규칙이 적용되는 무작위배정된 연구 약물의 1회 이상의 투여를 받은 환자를 포함하였다(전체 분석 세트). 치료 실패 기준(즉, 효능의 결여/PsA 악화로 인해 연구 제제를 중단하거나, MTX 또는 PsA에 대한 경구 코르티코스테로이드의 용량을 개시하거나 증가시키거나, 프로토콜-금지 약물 및/또는 요법을 개시함)을 충족시킨 환자는 24 주까지의 치료 실패 후에 MDA/VLDA에 대한 비반응자로 간주되었으며, 누락된 데이터를 가졌거나 16 주에 조기 종료한 환자도 그러했다. 24 주까지의 연속 변수들로부터 유도된 반응 종점 및 연속 종점의 경우, 누락된 기준선 데이터를 갖는 환자는 배제되었다. 마지막 관찰 이월 방법론을 사용하여 기준선 후 누락된 데이터 또는 조기 종료 후 데이터를 귀속시켰다. 24 주 후에는, 모든 환자가 활성 치료를 받았으며, 통계 비교는 계획되지 않았다. 그러므로, 관찰된 데이터를 사용하여 위약→구셀쿠맙으로 조기 종료한 29 명의 환자 및 16 주에 조기 종료하지 않았고 24 주 전에 연구 약물을 중단하지 않은 86 명의 구셀쿠맙-무작위배정 환자 중에서 24 주 후 데이터를 요약하였으며, 이들 환자에서의 24 주 데이터를 참조로서 포함하였다. SAS 버전 9.2(미국 노스캐롤라이나주 케리 소재의 SAS Institute, Inc.)를 사용하여 통계 분석을 수행하였다.
각각의 PsA 복합 지수에 의해 검출된 질환 활성의 개선과 HRQoL의 개선 사이의 상관관계를 조사하기 위해, 구셀쿠맙-치료 환자 중에서 기준선으로부터 24 주까지의 SF-36 PCS 점수의 평균 개선을 질환 활성 상태에 의해 요약하였다. 기술 통계를 사용하여 기준선으로부터 16 주 및 24 주까지의 복합 지수 점수의 변화를 요약하였고, 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 복합 지수의 변화의 치료간 비교를 수행하였다. 매우 낮은 질환 활성 또는 관해를 달성하는 환자의 비율의 치료간 비교를 피셔 정확 검정(Fisher's Exact test)으로 사후 수행하였다.
치료군 효과 크기(ES; 기준선과 24 주 값 사이의 평균 차이의 절대값을 기준선에서의 표준 편차[SD]로 나눈 것)의 계산을 통해 각각의 지수의 상대 성능을 평가하였다. ES 값을 사용하여 미미함(0.20 미만), 작음(0.20 이상 내지 0.50 미만), 보통(50 이상 내지 0.80 미만), 또는 큼(0.80 이상)으로서 치료 효과를 분류한다(문헌[Altman1991]). 추가의 비교 통계는 표준화된 평균 차이(SMD; 기준선으로부터의 변화의 평균 차이[구셀쿠맙 - 위약]의 절대값을 24 주에서의 기준선으로부터의 변화의 합동 SD로 나눈 것) 및 치료군 표준화된 반응 평균(SRM; 기준선으로부터의 평균 변화의 절대값을 24 주에서의 기준선으로부터의 변화의 SD로 나눈 것)을 포함하였다. 잔류 질환 활성 기준(정상의 상한[0.287 mg/dL] 이하의 CRP, 지염 점수=0, 골부착부염 LEI 점수=0, 1 이하의 PASI, 1/68 이하의 TJC, 1/66 이하의 SJC에 의해 정의됨)을 충족시키는 환자의 비율은 24 주에 PsA-특이적 복합 종점 낮은 질환 활성/관해 상태, MDA, 또는 VLDA를 달성하는 환자 중에서 평가하였다.
결과
소인 및 기준선 특징
본 2 상 시험은 34개의 현장(캐나다, 독일, 폴란드, 루마니아, 러시아, 스페인, 미국)에서 수행되었다. 환자 스크리닝은 2015년 3월 27일에 시작되었고, 마지막 환자 방문은 2017년 1월 17일에 완료되었다. 환자 소인이 보고되었다(문헌[Deodhar2018]). 약술하면, 149 명의 환자를 위약(N=49) 또는 구셀쿠맙 100 mg(N=100)에 무작위배정하였다. 16 주에 49 명 중 17 명(34.7%)의 위약-치료 환자 및 10/100 명(10.0%)의 구셀쿠맙-치료 환자가 우스테키누맙으로의 조기 종료를 위한 자격을 부여 받았다. 24 주에 위약 군에서 49 명 중 29 명(59.2%)의 환자를 구셀쿠맙을 받도록 교차시험하였으며; 28 명의 위약→구셀쿠맙 환자가 44 주까지 연구를 완료하였다. 구셀쿠맙 군에서 100 명 중 86 명(86.0%)의 환자가 24 주를 완료하고 구셀쿠맙 치료를 계속하였으며; 84 명의 환자가 44 주까지 연구를 완료하였다.
기준선 특징은 무작위배정된 군들 사이에서 일반적으로 유사하였으며, 실질적인 장애(평균 HAQ-DI: 1.39)를 동반하는 중등도 내지 중증 관절염을 나타냈다. 연구 착수 시에, 각각 71.8% 및 54.4%의 환자가 골부착부염 및 지염을 나타냈다(문헌[Deodhar2018]). 기준선 평균 PASDAS(6.5), GRACE(6.1), mCPDAI(7.5), 및 DAPSA(46.7) 점수 또한 치료군들에 걸쳐 보통 내지 높음의 질환 활성을 나타냈다. 추가로, 기준선에서 보통 내지 높음의 질환 활성을 나타낸 환자의 비율은 치료 아암들 사이에서 PASDAS(둘 모두 100%), GRACE(둘 모두 100%), mCPDAI(둘 모두 약 96%), 및 DAPSA(100% 및 99%) 복합 지수 각각에 대해 유사하였다(도 3c 내지 도 3j).
SF-36 PCS를 앵커로 사용하는 PsA-특이적 복합 지수의 입증
구셀쿠맙-치료 환자에서 기준선으로부터 24 주까지의 SF-36 PCS 점수의 변화는 각각의 PsA 복합 지수에 의해 정의된 질환 활성 상태와 일치하였다. 구체적으로, SF-36 PCS의 최대 개선은 24 주에 관해된/매우 낮은/낮은 질환 활성을 갖는 환자에서 관찰되었으며(지수들에 걸쳐 9.5 내지 12.9), 이는 24 주에 보통이거나(4.1 내지 6.4; p<0.05) 높은(0.6 내지 2.7; p<0.001) 질환 활성을 갖는 환자에서 관찰된 것들보다 상당히 더 높았다(도 4a 내지 도 4d).
PsA-특이적 복합 종점에 대한 구셀쿠맙의 효과
위약 대조 기간: PASDAS(평균 변화: 각각 -2.5 대 -0.5), GRACE(-2.7 대 -0.4), mCPDAI(-3.9 대 -0.8), 및 DAPSA(-23.1 대 -5.0) 복합 지수(모두 p<0.001; 도 3d, 도 3f, 도 3h, 도 3j)를 사용하여 평가한 경우, 구셀쿠맙은 위약에 비해 기준선으로부터 24 주까지 질환 활성을 상당히 개선하였다. 일관되게, PASDAS(35.0% 대 4.1%; p<0.001), GRACE(29.6% 대 2.1%; p<0.001), mCPDAI(51.0% 대 16.7%; p<0.001), 및 DAPSA(40.0% 대 12.2%; p<0.01) 복합 지수에 의해 평가한 경우, 위약-치료 환자보다 상당히 더 높은 비율의 구셀쿠맙-치료 환자가 낮은 질환 활성을 달성하였다.
추가로, 더 많은 환자가 PASDAS(8.0% 대 0, p=0.053)에 기초하여 매우 낮은 질환 활성을 달성하였고 상당히 더 많은 환자가 DAPSA 관해를 달성하였다(12.0% 대 0; p<0.01)(도 3c, 도 3e, 도 3g, 도 3i). 비교하면, 이전에 보고된 바와 같이(문헌[Deodhar2018]), 2.0%의 위약-치료 환자에 비해 23%의 구셀쿠맙-치료 환자가 MDA를 달성하였다(p=0.001)(도 3a). 유사한 반응 패턴이 VLDA에 대해 관찰되었다(즉, 6%의 구셀쿠맙-치료 환자 대 0 명의 위약-치료 환자(p=0.076))(도 3b).
활성-치료 기간: 24 주 후 효능 분석 집단에서, 44 주에 관찰된 PsA 복합 질환 활성 지수 점수의 평균 변화를 도 5d, 도 5f, 도 5h, 도 5j에 나타내며; 동일한 집단에서의 24 주 데이터는 참조로 포함된다. 24 주에 구셀쿠맙에 의해 제공된 개선은 44 주까지 구셀쿠맙-무작위배정 환자에서 지속되었으며, 24 주로부터 44 주까지 구셀쿠맙을 받은 위약-무작위배정 환자에서 유사한 개선이 실현되었다. 또한 24 주에 위약→구셀쿠맙으로 교차시험한 환자 중에서, 낮은 질환 활성을 갖는 환자의 비율은 구셀쿠맙을 받기 전인 24 주보다 44 주에 더 높았으며(즉, PASDAS 매우 낮음+낮음: 44 주에 39.3% 대 24 주에 7.1%; GRACE: 각각 39.3% 대 7.1%; mCPDAI: 각각 75.0% 대 25.0%; 및 DAPSA 관해+낮음: 각각 50.0% 대 20.7%) 0 주로부터 이후로 구셀쿠맙을 받는 환자 중에서 44 주에 관찰된 것들과 일반적으로 일치하였다(즉, PASDAS: 각각 28.6% 및 30.1%; GRACE: 각각 39.3% 및 42.2%; mCPDAI: 각각 75.0% 및 63.9%; 및 DAPSA: 각각 35.7% 및 32.1%; 도 5c, 도 5e, 도 5g, 도 5i). 구셀쿠맙-무작위배정 환자에서, PASDAS 및 DAPSA 낮은 질환 활성 반응률은 24 주→44 주까지 유지된 반면에(마지막 치료중 효능 평가, 즉, PASDAS에 대해 29.1%→30.1% 및 DAPSA에 대해 31.4%→32.1%), PASDAS 매우 낮은 질환 활성(9.3%→15.7%), DAPSA 관해(12.8%→19.0%)(도 5c, 도 5i), MDA(26.7%→34.5%), 및 VLDA(7.0%→13.1%)(도 5a, 도 5b) 반응률은 24 주→44 주까지 모두 증가하였다.
24 주에서의 치료 효과를 검출함에 있어서 PsA-특이적 복합 종점의 성능
SMD(5.16 내지 8.13), ES(1.12 내지 2.29), 및 SRM(1.14 내지 1.58) 통계는, 사용된 복합 지수에 무관하게, 위약에 비교하여 구셀쿠맙이 PsA의 다양한 징후를 치료함에 있어서 큰 효과를 유도했음을 나타냈다(도 6a 내지 도 6c). SMD에 기초하여, 위약에 비해 구셀쿠맙 치료 효과를 구별함에 있어서 PASDAS(8.14) 및 GRACE(8.84) 지수가 mCPDAI(7.21) 및 DAPSA(5.16)보다 더 민감한 것으로 나타났다(도 6a). ES 및 SRM 통계 또한 구셀쿠맙 치료 효과를 검출함에 있어서 PASDAS(각각 2.29 및 1.58) 및 GRACE 지수(각각 2.18 및 1.55)가 mCPDAI(각각1.72 및 1.40) 및 DAPSA(각각 1.12 및 1.14)보다 더 민감함을 나타냈다(도 6b, 도 6c).
PsA 복합 지수에 기초하여 24 주에 낮은/매우 낮은 질환 활성, 관해, MDA, 또는 VLDA를 달성한 구셀쿠맙-치료 환자 중의 잔류 질환 활성의 평가
PASDAS/GRACE/mCPDAI 낮거나 매우 낮은 질환 활성 및/또는 MDA/VLDA를 달성하는 환자의 80% 이상에서 잔류 피부 질환 기준(1 이하의 PASI)이 충족되었고; DAPSA 관해를 달성하는 환자의 75.0% 및 DAPSA 낮은 질환 활성을 달성하는 환자의 70.4%가 또한 1 이하의 PASI를 나타냈다. PASDAS 매우 낮은 질환 활성, DAPSA 관해, 및/또는 VLDA를 달성하는 환자의 100%에서; MDA를 달성하는 환자의 87.5%에서; 그리고 PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA에 기초하여 낮은 질환 활성을 달성하는 환자의 74.1 내지 79.3%에서 잔류 TJC 기준(1 이하)이 충족되었다. VLDA를 달성하는 환자의 100%에서; PASDAS 매우 낮은 질환 활성, DAPSA 관해, 및/또는 MDA를 달성하는 환자에서는 단지 약 60%에서; 그리고 PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA에 기초하여 낮은 질환 활성을 달성하는 환자의 단지 약 30 내지 40%에서 잔류 SJC 기준(1 이하)이 충족되었다. PsA-특이적 지수 또는 MDA/VLDA에 따른 낮거나 매우 낮은 질환 활성 또는 관해를 달성하는 환자의 대부분은 골부착부염 또는 지염을 갖지 않았으나, 50% 초과가 상승된 CRP(0.287 mg/dL 초과)를 가졌다. PASDAS 매우 낮은 질환 활성을 달성한 모든 환자 및 DAPSA 관해를 달성한 환자의 약 91%는 MDA 기준을 또한 충족시킨 반면에, 40% 미만은 VLDA 기준을 또한 충족시켰다(표 S4).
논의
활동성 PsA 를 가지며 3% BSA 이상이 건선에 의해 침범된 환자의 2 상 시험에서 구셀쿠맙은 효능을 나타냈다(문헌[Deodhar A et al, Lancet. 2018, 391:2213-24]). 동일한 시험의 이 보고서에서는, 복합 지수를 사용하여 구셀쿠맙 치료 효과를 평가하였다. 구셀쿠맙은 위약에 비해 PASDAS/GRACE/mCPDAI/DAPSA 점수를 상당히 감소시켰고, 위약-치료 환자보다 상당히 더 많은 구셀쿠맙-치료 환자가 MDA 및 낮은 질환 활성 상태를 달성하였다. 전체적으로, 치료 효과를 검출함에 있어서 PASDAS/GRACE가 mCPDAI/DAPSA보다 더 민감했다.
MDA 및 VLDA는 신체적 기능과 함께 관절, 피부, 및 골부착부 질환을 평가하며; 둘 모두 반응 기준(각각 낮은 질환 활성 및 매우 낮은 질환 활성을 정의함)으로 사용되고 치료 표적을 제공한다. PASDAS 및 GRACE는 PsA 환자의 대규모 국제 코호트로부터 유도된 종단 관찰 데이터(longitudinal observational data)를 사용하여 개발되었다(문헌[Helliwell 2013]). PASDAS는 관절, 피부, 지염, 골부착부염, 급성기 반응, 및 HRQoL 도메인보다 환자 및 의사 전반적 평가에 더 중점을 두는 반면에, GRACE는 그의 도메인(관절, 피부, 기능, QoL, 전반적 평가) 각각을 동일하게 강조한다. 축성 및 말초 관절, 피부, 골부착부, 및 지염을 평가하는 도메인-기반 mCPDAI는 간행 문헌 및 전문가 합의로부터 유도된 사전정의된 컷오프를 사용하여 질환 중증도를 분류하는 반면에, DAPSA는 관절 질환, 급성기 반응, 및 통증 및 전체 질환 활성의 환자 평가를 평가하기 위해 PsA 환자의 임상 코호트로부터 개발되었다. 이 연구에서는, SF-36 PCS 점수를 앵커로 사용하여 전술한 PsA-특이적 지수를 입증하였으며, 그것이 PASDAS의 성분임을 고려할 때 이는 부분적으로 순환논리일 수 있다. 결과는 SF-36 PCS 점수의 최대 개선이 24 주에 각각의 지수에 따라 관해된/매우 낮은/낮은 질환 활성을 갖는 환자에서 발생하였으며, 이들 개선은 24 주에 보통이거나 높은 질환 활성을 갖는 환자에서 관찰되는 것들보다 상당히 더 높았음을 나타냈다. 흥미롭게도, PASDAS, GRACE, 및 DAPSA 복합 척도는 또한 골리무맙 GO-REVEAL PsA 시험으로부터의 방사선촬영 데이터를 사용하여 PsA에서 외부적으로 입증되었다. 그 분석에서는, 각각의 지수가 말초 관절의 구조적 손상의 진행을 질환 결과와 관련하여 구별할 수 있었다(문헌[Helliwell PS et al, Arthritis Care Res 2018, 70:797-800]).
본 명세서에 보고된 바와 같이, 구셀쿠맙 2 상 PsA 연구에서의 추가의 효능 평가는 MDA, VLDA, PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA에 기초하여 구셀쿠맙이 위약에 비해 0 주→24 주까지 질환 활성을 상당히 감소시켰음을 나타냈다. 추가로, 위약-치료 환자보다 상당히 더 많은 구셀쿠맙-치료 환자가 각각의 PsA-특이적 복합 지수에 따른 낮은 질환 활성의 상태를 달성하였다. 질환 활성의 개선은 구셀쿠맙-무작위배정 환자에서 44 주까지 유지되었고 위약→구셀쿠맙 환자에서 24 주→44 주까지 관찰되었다. 조사결과는 시험의 1차 효능 종점(즉, 24 주 ACR20 반응: 58% 대 18%; p<0.0001)(문헌Deodhar2018])과 더불어, 본 시험에서 평가된 질환 활성의 일반 복합 척도(MDA/VLDA)와 일치하였다. 더 엄격한 기준, 예를 들어, VLDA, PASDAS 매우 낮은 질환 활성, 및 DAPSA 관해에 기초하는 반응률은 구셀쿠맙을 계속 받은 환자에서 24 주를 넘어 추가로 개선되었음에 유의하는 것이 중요하다(도 5a 내지 도 5j).
SMD, ES, 및 SRM에 기초하여, 구셀쿠맙 치료에 의해 제공되는 질환 활성의 변화를 검출하고 이들 효과를 위약의 효과로부터 구별함에 있어서 PASDAS 및 AMDF-기반 GRACE 지수는 mCPDAI 및 DAPSA 지수보다 더 민감한 것으로 나타난다. 일관되게, PsA에서의 골리무맙 GO-REVEAL 시험으로부터의 데이터를 이용하는 이전의 분석은 PASDAS 및 AMDF가 mCPDAI 및 DAPSA보다 더 큰 효과 크기를 나타냈음을 시사했다(문헌[Helliwell2014]). PASDAS는, 예를 들어, 주로 관절성인 DAPSA보다 더 넓은 질환 징후의 스펙트럼을 포함하는 가중 척도이며, 이는 그의 더 큰 효과 크기를 설명할 수 있다. PASDAS는 또한 회귀 분석을 사용하는 실제 환자 데이터로부터 유도되었으며, 이러한 방법론은 최대 변화를 나타내는 도메인에 더 많은 강조(중점)가 주어지는 것을 유발할 가능성이 있다. GRACE 및 CPDAI 둘 모두는 모듈 척도(modular measure)이며, 다수의 중요한 도메인을 망라함에도 불구하고, 그들의 모듈 구조가 그들의 반응성을 억제할 수 있다. 이 연구의 대부분의 환자가 다관절 질환을 가졌고 높은 수준의 임상 효능을 나타낸 약물로 치료 받았으며; 다른 상황에서는 이들 복합 지수의 상대 성능이 상이할 수 있음을 또한 기억해야 한다.
잔류 질환 활성의 관점에서, 구셀쿠맙 치료 후에 PASDAS, GRACE, mCPDAI, DAPSA, 및 MDA/VLDA 지수에 기초하여 낮거나, 매우 낮거나, 관해된 질환 활성을 달성한 환자의 70% 초과가 잔류 피부 질환, 골부착부염, 지염, 또는 압통 관절을 거의 나타내지 않았다. 골리무맙 GO-REVEAL 시험에 기초하는 이전의 결정에서 일치하는 결과가 얻어졌다(문헌[Helliwell 2014]). 그러나, PASDAS 매우 낮은 질환 활성, DAPSA 관해, 또는 MDA를 달성하는 환자의 1/3 초과에서, 그리고 PASDAS, GRACE, mCPDAI, 및 DAPSA 낮은 질환 활성을 달성하는 환자의 대부분에서 1 초과의 SJC가 관찰되었다. 추가로, 관해/낮은 질환 활성 상태를 달성함에도 불구하고, 이들 환자 중 대부분이 여전히 상승된 CRP 수준을 가졌으며, 이는 만성 염증의 불완전한 해소를 나타낸다. 명확하게, 이들 복합 최소 표적 중 어느 것도 질환 활성의 완전 제거(total abrogation)를 나타내지 않는다.
평가된 모든 복합 지수 중에서, VLDA가 가장 엄격한 것을 나타내는 것으로 보인다(44 주에 구셀쿠맙-치료 환자의 단지 13.1%에 의해 달성됨). 그러나, VLDA의 달성은 CRP 이외의 평가된 질환의 모든 양상에 걸쳐 최소량 잔류 질환 활성을 유발했다. 이 연구에서 VLDA를 달성하는 환자의 적은 수에 유의해야 하지만, PsA의 엄격한 제어(TICOPA: Tight Control of PsA) 연구 또는 관찰 코호트 연구에서 표준 또는 생물학적 DMARD를 받은 347 명의 환자의 후향적 분석에 기초하여 일치하는 결과가 최근에 보고되었다(문헌[Coates LC et al, Arthritis Rheumatol 2018, 70:345-355]). 여기에서, PASDAS 매우 낮은 질환 활성을 달성하는 모든 환자 및 DAPSA 관해를 달성하는 20/22 명(90.9%)이 또한 MDA를 달성한 반면에, MDA 기준을 충족시킨 15/23 명(65.2%)의 환자는 PASDAS 매우 낮은 질환 활성을 달성하지 않았고 13/23 명(56.5%)은 DAPSA 관해 기준을 충족시키지 않았으며, 이는 PASDAS 매우 낮은 질환 활성 및 DAPSA 관해 기준이 MDA보다 더 엄격하고 달성하기 어렵다는 것을 시사한다.
복합 척도에 대한 향후 난제는, 특히 진료소에서 포괄성과 실행가능성 사이의 정확한 균형을 이루는 것일 것이다. PASDAS 및 GRACE와 같은 복합 지수는 완수하기가 복잡하고 시간 소모적이지만, PsA를 갖는 임의의 환자의 완전한 평가는 모든 임상 도메인의 평가를 필요로 한다는 것을 주장할 수 있을 것이다. 이들 복합 지수 중 일부에 대한 추가의 데이터를 수집할 가치가 있다면, 본 발명자들은 이익에 대해 분명히 알 필요가 있다. 진료소에서, DAPSA에 필요한 데이터를 '단순히' 수집하는 것은 불완전한 평가를 조장할 것이고 전체 질환 활성의 오해를 제공할 수 있을 것이다. 새로운 복합 지수는 임상 시험에만 사용되어야 하는가? 현재로서는 그렇다고 답하지만(문헌[Coates 2018a]), 추가의 사용 및 진전에 있어서, 진료소 사용을 위해 '단축형' 버전이 개발될 수 있다. 전용 센터(dedicated center) 외부에서는, 복합 척도의 사용이 더 복잡한 임상 징후를 나타내는 환자로 제한될 수 있는 반면에, "저증상(oligosymptomatic)" 징후를 갖는 환자는 통상의 툴을 사용하여 용이하게 관리할 수 있을 것이다.
한계에 관하여, 현재의 분석은 그로부터 데이터가 유도된 2 상 시험의 작은 크기에 의해 제한된다. 추가로, SF-36 PCS 점수는 PASDAS의 성분이므로, PASDAS 입증에서 독립적인 척도가 아니었다. 잔류 질환의 평가는 또한 낮은/매우 낮은/관해된 질환 활성을 달성하는 환자의 적은 수에 의해 제한된다.
결론적으로, 사용된 PsA-특이적 복합 지수에 무관하게, 구셀쿠맙은 24 주까지 질환 활성을 상당히 개선하였고; 효능은 44 주까지 잘 유지되었다. 이전에 보고된 결과와 일관되게(문헌[Deodhar A et al, Lancet. 2018, 391:2213-24]), 이들 조사결과는 구셀쿠맙이 PsA의 다양한 임상 표현을 효과적으로 치료하며 낮은/최소 질환 활성 또는 관해와 같은 임상적으로 유의미한 치료 표적을 달성함을 시사한다. 평가된 복합 점수는 그들의 반응 또는 포함된 질환 도메인에 있어서 균일하지 않으며, 이는 임상 시험 및 진료소에서 복합 점수의 선택은 실행가능성 및 성능을 최적화하기 위한 신중한 고려를 필요로 함을 나타낸다.
약어 및 두문자어
AE 유해 사건
BCC 기저세포 암종
BMI 체질량 지수
BSA 체표면적
DLQI 피부 삶의 질 지수
f-PGA 손톱 의사의 전반적 평가
hf-PGA 손 및/또는 발의 의사의 전반적 평가
HRQoL 건강 관련 삶의 질
IGA 연구자의 전반적 평가
IL 인터류킨
NAPSI 손발톱 건선 면적 및 중증도 지수
NMSC 비흑색종 피부암
PASI 건선 면적 및 중증도 지수
PRO 환자-보고 결과
PSSD 건선 징후 및 증상 일지
SAE 심각한 유해 사례
ss-IGA 두피-특이적 연구자의 전반적 평가
TNFα-억제제 종양 괴사 인자-α 억제제
표
[표 1]
Figure pct00002
Figure pct00003
[표 2]
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
[표 3]
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
[표 S1]
Figure pct00015
Figure pct00016
[표 S2]
Figure pct00017
[표 S3]
Figure pct00018
Figure pct00019
[표 S4]
Figure pct00020
[표 S5]
Figure pct00021
본 발명의 추가의 실시 형태
본 명세서의 어딘가 다른 곳에 있는 본 개시내용에 따른 본 발명의 특정의 추가 실시 형태들이 하기에 나열되어 있다. 본 명세서에 개시된 본 발명과 관련된 것으로서 기재된 상기에 나열된 본 발명의 실시 형태들로부터의 특징은 또한 이들 추가의 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나와 관련된다.
1. 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 피하(SC) 투여되는, 건선성 관절염을 갖는 대상 또는 환자의 치료에 사용하기 위한 IL-23에 대한 항체.
2. 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역을 포함하며, 상기 경쇄 가변 영역은
서열 번호 50의 상보성 결정 영역 경쇄 1(CDRL1) 아미노산 서열;
서열 번호 56의 CDRL2 아미노산 서열; 및
서열 번호 73의 CDRL3 아미노산 서열을 포함하고,
상기 중쇄 가변 영역은
서열 번호 5의 상보성 결정 영역 중쇄 1(CDRH1) 아미노산 서열;
서열 번호 20의 CDRH2 아미노산 서열; 및
서열 번호 44의 CDRH3 아미노산 서열을 포함하는, 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 건선성 관절염을 갖는 대상 또는 환자의 치료에 사용하기 위한 IL-23에 대한 항체.
3. 서열 번호 116의 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역 및 서열 번호 106의 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역을 포함하는, 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 건선성 관절염을 갖는 대상 또는 환자의 치료에 사용하기 위한 IL-23에 대한 항체.
4. 초기 투여가 0 주에서의 용량이고, 4 주에서의 용량 및 그 후로 매 8 주마다(q8w)의 용량이 이어지는, 실시 형태 2 또는 실시 형태 3의 용도.
5. 실시 형태 4에 있어서, 용량이 25 mg 내지 200 mg인 용도.
6. 실시 형태 5에 있어서, 용량이 50 mg 또는 100 mg인 용도.
7. 실시 형태 6에 있어서, 용량이 100 mg인 용도.
8. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
9. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 16 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
10. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선 면적 및 중증도 지수 75, 90, 및 100(PASI75/90/100)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
11. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
12. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI: Psoriasis Area and Severity Index)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
13. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 리즈 골부착부염 지수(LEI)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
14. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 0 내지 3의 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
15. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 단축형 36(SF-36) 건강 조사에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
16. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS) 점수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
17. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 최소 질환 활성(MDA) 기준에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
18. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
19. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
20. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
21. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
22. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 용도.
23. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 24 주의 치료까지 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되며, 여기서 질환 활성은 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20), 미국 류마티스 학회 50% 개선 기준(ACR50), 건선 면적 및 중증도 지수 75, 90, 및 100(PASI75/90/100), 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70), 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI), 리즈 골부착부염 지수(LEI), 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증), 단축형 건강 조사(SF-36)의 변화, 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS)의 변화, 최소 질환 활성(MDA)의 달성, 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS), GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수, 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI), 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA), 및 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 기준에 의해 결정되는 용도.
24. 실시 형태 23에 있어서, ACR20, ACR50, ACR70, PASI70, PASI90, PSAI100, MDA, HAQ-DI, LEI/지염, SF-36 PCS, PASDAS, GRACE, mCPDAI, DAPSA, RAPID3, 또는 MCS 점수가 초기 치료 후 16 주, 20 주, 24 주, 또는 28 주에 측정되는 용도.
25. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 항체가 100 mg/mL의 항체; 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물; 약제학적 조성물의 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80을 포함하는 조성물로 존재하며; 여기서 희석제는 표준 상태에서의 물인 용도.
26. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 조성물이 건선 관절염을 치료하기 위해 사용되는 하나 이상의 추가의 약물을 추가로 포함하는 용도.
27. 실시 형태 26에 있어서, 추가의 약물이 면역억제제, 비스테로이드성 항-염증 약물(NSAID), 메토트렉세이트(MTX), 항-B-세포 표면 마커 항체, 항-CD20 항체, 리툭시맙, TNF-억제제, 코르티코스테로이드, 및 공동-자극성 조절제로 이루어진 군으로부터 선택되는 용도.
28. 실시 형태 1 내지 실시 형태 7 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 항체가 환자에서 건선성 관절염의 증상을 감소시키거나, 임상 반응을 유도하거나, 임상 관해를 유도 또는 유지하거나, 질환 진행을 억제하거나, 환자에서 질환 합병증을 억제하기에 유효한 용도.
SEQUENCE LISTING <110> JANSSEN BIOTECH, INC. HSIA, ELIZABETH XU, LILLIAN <120> SAFE AND EFFECTIVE METHOD OF TREATING PSORIATIC ARTHRITIS WITH ANTI-IL23 SPECIFIC ANTIBODY <130> JBI5144WOPCT1 <140> Unknown <141> 2018-11-05 <150> 62/581996 <151> 2017-11-06 <150> 62/744386 <151> 2018-10-11 <160> 148 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Asn Tyr Ala Ile Ser 1 5 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ser Asn Tyr Ile Ser 1 5 <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Asn Tyr Trp Ile Ser 1 5 <210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Ser Tyr Trp Ile Thr 1 5 <210> 5 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Asn Tyr Trp Ile Gly 1 5 <210> 6 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Ser Phe Gly Met Ser 1 5 <210> 7 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 7 Gly Ile Ile Pro Met Phe Gly Tyr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 8 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Gly Ile Ile Pro Val Phe Gly Phe Thr His Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 9 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 9 Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly His Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 10 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Ile Ile Ile Pro Pro Ile Gly Asn Ala Trp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Leu Ile Asp Pro Asn Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 12 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Leu Ile Asp Pro Val Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 13 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Leu Ile Asp Pro Met Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 14 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Ile Asn Ala His Leu Gly Gly Thr Trp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly 1 5 10 15 <210> 15 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Ile Ser Pro Gly Thr Gly Ile Asn Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 16 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthesized human sequence <220> <221> unsure <222> (1) <223> Where Xaa can be G, I, or L <220> <221> unsure <222> (2) <223> Where Xaa can be I or S <220> <221> unsure <222> (3) <223> Where Xaa can be I, P, N, or D <220> <221> unsure <222> (4) <223> Where Xaa can be P, G, or A <220> <221> unsure <222> (5) <223> Where Xaa can be I, M, P, <223> T, H, N, or V <220> <221> unsure <222> (6) <223> Where Xaa can be F, I, G, or L <220> <221> unsure <222> (7) <223> Where Xaa can G or I <220> <221> unsure <222> (8) <223> Where Xaa can be H, Y, N, or G <220> <221> unsure <222> (9) <223> Where Xaa can be A or T <220> <221> unsure <222> (10) <223> Where Xaa can be N, W, or Y <400> 16 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 17 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Trp Ile Arg Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Glu 1 5 10 15 Gly <210> 18 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 19 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 20 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 21 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Asp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 22 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Val Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 23 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Ser Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 24 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Phe Ile Ser Pro Asp Gly Ser His Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 25 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 Ile Ile Ser Pro Ser Gly Ser Thr Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 26 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Ala Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 27 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Ile Ile Asp Pro Val Ser Ser Trp Thr Lys Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 28 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthesized human sequence <220> <221> unsure <222> (3) <223> Where Xaa can be D or S <220> <221> unsure <222> (5) <223> Where Xaa can be S, V, D, or T <220> <221> unsure <222> (6) <223> Where Xaa can be N, S, or G <220> <221> unsure <222> (8) <223> Where Xaa can be Y, W, T, H, V, S, or A <220> <221> unsure <222> (10) <223> Where Xaa can be N, D, R, K, or W <400> 28 Ile Ile Xaa Pro Xaa Xaa Ser Xaa Thr Xaa Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 29 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Asn Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 30 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 31 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Asn Ile Glu His Lys Phe Met Gly Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala Gly 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 32 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Gly Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr His Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 33 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Ser Ile Glu His Lys Tyr Thr Gly Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala Pro 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 34 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Gln Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr Leu Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 35 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Ser Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr Phe Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 36 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Asn Ile Glu Gly Lys Tyr Thr Ser Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 37 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Gly Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Ala Thr Leu Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 38 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Gly Tyr Ala Thr Val Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 39 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Ser Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ala Gly 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 40 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 40 Asp Ile Tyr Ala Gly Met Asp Val 1 5 <210> 41 <211> 18 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 41 Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met Met Phe 1 5 10 15 Asp Leu <210> 42 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 42 His Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr 1 5 <210> 43 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 43 Gly Thr Phe Trp Ser Phe Gly Asn Tyr Phe Ala Asn 1 5 10 <210> 44 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val 1 5 <210> 45 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 1 5 10 <210> 46 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Arg Ala Ser Gln Ser Val Leu Gly Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 47 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 48 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 48 Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr Tyr Val Asn 1 5 10 <210> 49 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Phe Tyr Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 50 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Gly Tyr Asp Val His 1 5 10 <210> 51 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 51 Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser Val Ser 1 5 10 <210> 52 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 52 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 53 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 53 Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr 1 5 <210> 54 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 54 Gly Asn Thr His Arg Pro Ser 1 5 <210> 55 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 55 Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5 <210> 56 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 56 Gly Asn Ser Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 57 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 57 Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser 1 5 <210> 58 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 58 His Gln Tyr Gly Ser Ile Ser Thr Thr 1 5 <210> 59 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 59 Gln Gln Tyr Ser His Leu Leu Ile Thr 1 5 <210> 60 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 60 Gln Gln Tyr Ser His Ile Ser Leu Thr 1 5 <210> 61 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 61 Gln Gln Phe Ala His Ile Leu Leu Thr 1 5 <210> 62 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 62 Gln Gln Thr Ser Asn Thr Pro Phe Thr 1 5 <210> 63 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 63 Gln Gln Phe Ile Thr Tyr Leu Pro Thr 1 5 <210> 64 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 64 Gln Gln Asp Ala Leu Ser Pro Phe Thr 1 5 <210> 65 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 65 Gln Gln Asp Arg Gly Thr Pro Phe Thr 1 5 <210> 66 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 66 Gln Gln Ser Leu Asn Ile Pro Phe Thr 1 5 <210> 67 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 67 Gln Gln Asp Thr Ser Ser Pro Phe Thr 1 5 <210> 68 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthesized human sequence <220> <221> unsure <222> (3) <223> Where Xaa can be T, F, D, or S <220> <221> unsure <222> (4) <223> Where Xaa can be S, I, A, T, R, or L <220> <221> unsure <222> (5) <223> Where Xaa can be N, T, L, S, or G <220> <221> unsure <222> (6) <223> Where Xaa can be T, Y, S, or I <220> <221> unsure <222> (7) <223> Where Xaa can be P or L <220> <221> unsure <222> (8) <223> Where Xaa can be F or P <400> 68 Gln Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Thr 1 5 10 <210> 69 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 69 Gln Thr Tyr Ala Ser Leu Gly Pro Gly Glu Val 1 5 10 <210> 70 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 70 Gln Gln Tyr Ser Ser Glu Pro Val Thr 1 5 <210> 71 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 71 Ser Ser Trp Thr Pro Ser Ser Val Val 1 5 <210> 72 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 72 Ser Ser Trp Thr Asp Thr Pro Asn Met Ile Val 1 5 10 <210> 73 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 73 Ala Ser Trp Thr Asp Gly Leu Ser Leu Val Val 1 5 10 <210> 74 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthesized human sequence <220> <221> unsure <222> (1) <223> Where Xaa can be S or A <220> <221> unsure <222> (6) <223> Where Xaa can be T or G <220> <221> unsure <222> (7) <223> Where Xaa can be P or L <220> <221> unsure <222> (8) <223> Where Xaa can be S or N <220> <221> unsure <222> (9) <223> Where Xaa can be S, M, or L <220> <221> unsure <222> (10) <223> Where Xaa can be I or V <400> 74 Xaa Ser Trp Thr Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Val 1 5 10 <210> 75 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 75 Ser Ser Tyr Asp Thr Asn Lys Pro Leu Val Val 1 5 10 <210> 76 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 76 Gly Ser Tyr Asp Val Tyr Gly Arg Phe Tyr Val 1 5 10 <210> 77 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 77 Ser Ser Tyr Tyr Phe Tyr Leu Gln Arg Ile Val 1 5 10 <210> 78 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 78 Gln Thr Tyr Tyr Phe Ser Tyr Ser Gly Pro Val 1 5 10 <210> 79 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 79 Gly Ser Trp Asp Pro Ile Phe Ser Tyr Glu Val 1 5 10 <210> 80 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 80 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ile Pro Met Phe Gly Tyr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Tyr Ala Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 81 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 81 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ile Pro Val Phe Gly Phe Thr His Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Tyr Ala Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 82 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 82 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Leu Gly Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Gly Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 83 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 83 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Leu Gly Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser His Ile Ser 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 84 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 84 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Leu Gly Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser His Leu Ile 85 90 95 Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 85 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 85 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Leu Gly Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ala His Ile Leu 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 86 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 86 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly His Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 87 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 87 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Ile Pro Pro Ile Gly Asn Ala Trp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 88 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 88 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ser Pro Gly Thr Gly Ile Asn Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 89 <211> 126 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 89 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Asn Ala His Leu Gly Gly Thr Trp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 50 55 60 Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met 65 70 75 80 Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met Met 100 105 110 Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 90 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 90 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Leu Ile Asp Pro Asn Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 91 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 91 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Leu Ile Asp Pro Val Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 92 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 92 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Leu Ile Asp Pro Met Phe Gly Gly Ala Tyr Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Lys Lys Gly Met Tyr Gly Gly Trp Thr Tyr Pro Leu Met 100 105 110 Met Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 93 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 93 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Ser Asn Thr Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 94 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 94 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Ser Asn Thr Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 95 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 95 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ile Thr Tyr Leu 85 90 95 Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 96 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 96 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Ala Leu Ser Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 97 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 97 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Arg Gly Thr Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 98 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 98 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Tyr Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Asn Ile Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 99 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 99 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Arg Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Glu Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg His Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 100 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 100 Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr 20 25 30 Tyr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Asn Thr His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Thr Tyr Ala Ser Leu Gly 85 90 95 Pro Gly Glu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 101 <211> 121 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 101 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Thr Phe Trp Ser Phe Gly Asn Tyr Phe Ala Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 102 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 102 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Phe Tyr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Glu Pro Val 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 103 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 103 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 104 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 104 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Asp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 105 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 105 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 106 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 106 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asp Pro Ser Asn Ser Tyr Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 107 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 107 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asp Pro Val Ser Ser Trp Thr Lys Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 108 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 108 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Ser Pro Ser Gly Ser Thr Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 109 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 109 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Phe Ile Ser Pro Asp Gly Ser His Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 110 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 110 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Val Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 111 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 111 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Ser Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 112 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 112 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Ser Pro Thr Gly Ser Ala Thr Trp Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Tyr Tyr Lys Pro Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 113 <211> 109 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 113 Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Trp Thr Pro Ser 85 90 95 Ser Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 114 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Trp Thr Asp Thr 85 90 95 Pro Asn Met Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 115 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 115 Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Trp Thr Asp Gly 85 90 95 Leu Ser Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 116 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 116 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Trp Thr Asp Gly 85 90 95 Leu Ser Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 117 <211> 121 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 117 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 118 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 118 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Glu His Lys Phe Met Gly Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60 Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 119 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 119 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Glu His Lys Tyr Thr Gly Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60 Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 120 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 120 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Glu His Lys Tyr Thr Ser Tyr Thr Thr Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 121 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 121 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 122 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 122 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Gly Tyr Ala Thr Val Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 123 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 123 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60 Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 124 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 124 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr Phe Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 125 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 125 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr His Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 126 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 126 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gln Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Thr Thr Leu Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 127 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 127 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Glu His Lys Tyr Leu Ser Tyr Ala Thr Leu Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 128 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 128 Asp Ile Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Met Ile Tyr Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Asp Thr Asn 85 90 95 Lys Pro Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 129 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 129 Asp Ile Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Met Ile Tyr Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Tyr Phe Tyr 85 90 95 Leu Gln Arg Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 130 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 130 Asp Ile Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Met Ile Tyr Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Thr Tyr Tyr Phe Ser 85 90 95 Tyr Ser Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 131 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 131 Asp Ile Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Met Ile Tyr Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Val Tyr 85 90 95 Gly Arg Phe Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 132 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 132 Asp Ile Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Met Ile Tyr Ser Val Ser Ser Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Trp Asp Pro Ile 85 90 95 Phe Ser Tyr Glu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 133 <211> 381 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 133 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agcaactaca tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatggggatc agccctggca ccggtatcaa cgcatactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaagcaag 300 aagggcatgt acggcggctg gacctacccc ctgatgatgt tcgacctgtg gggccagggc 360 accctggtga ccgtgagcag c 381 <210> 134 <211> 381 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 134 caggtgcagc tggtgcagag cggcgccgag gtgaagaagc ccggcagcag cgtgaaggtg 60 agctgcaagg ccagcggcgg caccttcagc agcaactaca tcagctgggt gcgccaggcc 120 cccggccagg gcctggagtg gatgggcatc agccccggca ccggcatcaa cgcctactac 180 gcccagaagt tccagggccg cgtgaccatc accgccgacg agagcaccag caccgcctac 240 atggagctga gcagcctgcg cagcgaggac accgccgtgt actactgcgc ccgcagcaag 300 aagggcatgt acggcggctg gacctacccc ctgatgatgt tcgacctgtg gggccagggc 360 accctggtga ccgtgagcag c 381 <210> 135 <211> 381 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 135 caggtgcaat tggttcagtc tggcgcggaa gtgaaaaaac cgggcagcag cgtgaaagtg 60 agctgcaaag cctccggagg cactttttct tctaattata tttcttgggt gcgccaagcc 120 cctgggcagg gtctcgagtg gatgggcatt tctcctggta ctggtattaa tgcttattat 180 gctcagaagt ttcagggtcg ggtgaccatt accgcggatg aaagcaccag caccgcgtat 240 atggaactga gcagcctgcg tagcgaagat acggccgtgt attattgcgc gcgttctaag 300 aagggtatgt atggtggttg gacttatcct cttatgatgt ttgatctttg gggccaaggc 360 accctggtga cggttagctc a 381 <210> 136 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 136 gagatcgtgc tgacccagag ccccgccacc ctgagcctga gccccggcga gcgcgccacc 60 ctgagctgcc gcgccagcca gagcgtgagc agcaactacc tggcctggta ccagcagaag 120 cccggccagg ccccccgcct gctgatctac tacgccagcc gccgcgccac cggcgtgccc 180 gcccgcttca gcggcagcgg cagcggcacc gacttcaccc tgaccatcag cagcctggag 240 cccgaggact tcgccgtgta ctactgccag cagaccagca acaccccctt caccttcggc 300 cagggcacca aggtggagat caag 324 <210> 137 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 137 gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaactact tagcctggta ccaacagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat tacgcatccc gcagggccac tggcgtgcca 180 gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagcctagag 240 cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagacttcta atactccttt tacctttggc 300 cagggtacga aagttgaaat taaa 324 <210> 138 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 138 gagatcgtgc tgacccagag cccggcgacc ctgagcctgt ctccgggcga acgtgcgacc 60 ctgagctgca gagcgagcca gtctgtttct tctaattatc tggcttggta ccagcagaaa 120 ccaggtcaag caccgcgtct attaatttat tatgcttctc gtcgtgcaac tggggtcccg 180 gcgcgtttta gcggctctgg atccggcacg gattttaccc tgaccattag cagcctggaa 240 cctgaagact ttgcggtgta ttattgccag cagacttcta atactccttt tacctttggc 300 cagggtacga aagttgaaat taaa 324 <210> 139 <211> 351 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 139 gaggtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaagatc 60 tcctgtaagg gttctggata cagctttagc aactactgga tcggctgggt gcgccagatg 120 cccgggaaag gcctggagtg gatggggatc atcgacccta gcaactctta caccagatac 180 agcccgtcct tccaaggcca ggtcaccatc tcagccgaca agtccatcag caccgcctac 240 ctgcagtgga gcagcctgaa ggcctcggac accgccatgt attactgtgc gagatggtac 300 tacaagccct tcgacgtgtg gggccagggc accctggtga ccgtgagcag c 351 <210> 140 <211> 351 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 140 gaggtgcagc tggtgcagag cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgagag cctgaagatc 60 agctgcaagg gcagcggcta cagcttcagc aactactgga tcggctgggt gcgccagatg 120 cccggcaagg gcctggagtg gatgggcatc atcgacccca gcaacagcta cacccgctac 180 agccccagct tccagggcca ggtgaccatc agcgccgaca agagcatcag caccgcctac 240 ctgcagtgga gcagcctgaa ggccagcgac accgccatgt actactgcgc ccgctggtac 300 tacaagccct tcgacgtgtg gggccagggc accctggtga ccgtgagcag c 351 <210> 141 <211> 351 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 141 gaggtgcaat tggttcagag cggcgcggaa gtgaaaaaac cgggcgaaag cctgaaaatt 60 agctgcaaag gttccggata ttccttttct aattattgga ttggttgggt gcgccagatg 120 cctgggaagg gtctcgagtg gatgggcatt atcgatccgt ctaatagcta tacccgctat 180 tctccgagct ttcagggcca ggtgaccatt agcgcggata aaagcattag caccgcgtat 240 cttcaatgga gcagcctgaa agcgagcgat acggccatgt attattgcgc gcgttggtat 300 tataagcctt ttgatgtttg gggccaaggc accctggtga cggttagctc a 351 <210> 142 <211> 336 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 142 cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60 tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg agcggttatg atgtacactg gtaccagcag 120 cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaagcggcc ctcaggggtc 180 cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240 cagagcgagg atgaggctga ttattactgc gccagctgga ccgacggcct gagcctggtg 300 gtgttcggcg gcggcaccaa gctgaccgtg ctgggc 336 <210> 143 <211> 336 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 143 cagagcgtgc tgacccagcc ccccagcgtg agcggcgccc ccggccagcg cgtgaccatc 60 agctgcaccg gcagcagcag caacatcggc agcggctacg acgtgcactg gtaccagcag 120 ctgcccggca ccgcccccaa gctgctgatc tacggcaaca gcaagcgccc cagcggcgtg 180 cccgaccgct tcagcggcag caagagcggc accagcgcca gcctggccat caccggcctc 240 cagagcgagg acgaggccga ctactactgt gccagctgga ccgacggcct gagcctggtg 300 gtgttcggcg gcggcaccaa gctgaccgtg ctgggc 336 <210> 144 <211> 336 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 144 cagagcgtgc tgacccagcc gccttcagtg agtggcgcac caggtcagcg tgtgaccatc 60 tcgtgtacgg gcagcagcag caacattggt tctggttatg atgtgcattg gtaccagcag 120 ttgcccggga cggcgccgaa acttctgatt tatggtaatt ctaagcgtcc ctcaggcgtg 180 ccggatcgtt ttagcggatc caaaagcggc accagcgcga gccttgcgat tacgggcctg 240 caaagcgaag acgaagcgga ttattattgc gcttcttgga ctgatggtct ttctcttgtt 300 gtgtttggcg gcggcacgaa gttaaccgtt cttggc 336 <210> 145 <211> 189 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 145 Met Leu Gly Ser Arg Ala Val Met Leu Leu Leu Leu Leu Pro Trp Thr 1 5 10 15 Ala Gln Gly Arg Ala Val Pro Gly Gly Ser Ser Pro Ala Trp Thr Gln 20 25 30 Cys Gln Gln Leu Ser Gln Lys Leu Cys Thr Leu Ala Trp Ser Ala His 35 40 45 Pro Leu Val Gly His Met Asp Leu Arg Glu Glu Gly Asp Glu Glu Thr 50 55 60 Thr Asn Asp Val Pro His Ile Gln Cys Gly Asp Gly Cys Asp Pro Gln 65 70 75 80 Gly Leu Arg Asp Asn Ser Gln Phe Cys Leu Gln Arg Ile His Gln Gly 85 90 95 Leu Ile Phe Tyr Glu Lys Leu Leu Gly Ser Asp Ile Phe Thr Gly Glu 100 105 110 Pro Ser Leu Leu Pro Asp Ser Pro Val Ala Gln Leu His Ala Ser Leu 115 120 125 Leu Gly Leu Ser Gln Leu Leu Gln Pro Glu Gly His His Trp Glu Thr 130 135 140 Gln Gln Ile Pro Ser Leu Ser Pro Ser Gln Pro Trp Gln Arg Leu Leu 145 150 155 160 Leu Arg Phe Lys Ile Leu Arg Ser Leu Gln Ala Phe Val Ala Val Ala 165 170 175 Ala Arg Val Phe Ala His Gly Ala Ala Thr Leu Ser Pro 180 185 <210> 146 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 146 Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Gly Tyr Ala Thr Ser Tyr Ala Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 147 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 147 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Asn Ile Glu His Lys Tyr Leu Gly Tyr Ala Thr Ser Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Tyr Trp Gly Thr Pro Tyr Leu Met Gln Phe Asp Asn 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 148 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 148 His Gln Gly Leu Ile Phe Tyr Glu Lys Leu Leu Gly 1 5 10

Claims (62)

  1. IL-23에 대한 항체를 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역은
    서열 번호 50의 상보성 결정 영역 경쇄 1(CDRL1) 아미노산 서열;
    서열 번호 56의 CDRL2 아미노산 서열; 및
    서열 번호 73의 CDRL3 아미노산 서열을 포함하며,
    상기 중쇄 가변 영역은
    서열 번호 5의 상보성 결정 영역 중쇄 1(CDRH1) 아미노산 서열;
    서열 번호 20의 CDRH2 아미노산 서열; 및
    서열 번호 44의 CDRH3 아미노산 서열을 포함하는 환자에서 건선성 관절염을 치료하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 항체가 0 주에서의 초기 피하 용량, 4 주에서의 피하 용량, 및 그 후로 매 8 주마다(q8w)의 피하 용량으로 투여되는 방법.
  3. 제2항에 있어서, 항체가 25 mg 내지 200 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  4. 제2항에 있어서, 항체가 50 mg 또는 100 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  5. 제2항에 있어서, 항체가 100 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회(American College of Rheumatology) 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  7. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 16 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  8. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선 면적 및 중증도 지수(Psoriasis Area and Severity Index) 75, 90, 및 100(PASI75/90/100)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  9. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  10. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI: Health Assessment Questionnaire Disability Index)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  11. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 리즈 골부착부염 지수(LEI: Leeds enthesitis index)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  12. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 0 내지 3의 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  13. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 단축형 36(SF-36) 건강 조사에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  14. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS) 점수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  15. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 최소 질환 활성(MDA: minimal disease activity) 기준에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  16. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS: Psoriatic ArthritiS Disease Activity Score)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  17. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  18. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI: modified Composite Psoriatic Disease Activity Index)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  19. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA: Disease Activity Index for PSoriatic Arthritis)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  20. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  21. 제5항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 24 주의 치료까지 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되며, 여기서 질환 활성은 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20), 미국 류마티스 학회 50% 개선 기준(ACR50), 건선 면적 및 중증도 지수 75, 90, 및 100(PASI75/90/100), 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70), 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI), 리즈 골부착부염 지수(LEI), 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증), 단축형 건강 조사(SF-36)의 변화, 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS)의 변화, 최소 질환 활성(MDA)의 달성, 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS), GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수, 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI), 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA), 및 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 기준에 의해 결정되는 방법.
  22. 제5항에 있어서, ACR20, ACR50, ACR70, PASI70, PASI90, PSAI100, MDA, HAQ-DI, LEI/지염, SF-36 PCS, PASDAS, GRACE, mCPDAI, DAPSA, RAPID3, 또는 MCS 점수가 초기 치료 후 16 주, 20 주, 24 주, 또는 28 주에 측정되는 방법.
  23. 제5항에 있어서, 항체가 피하 투여되는 구셀쿠맙인 방법.
  24. 제23항에 있어서, 100 mg/mL의 항체;
    7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물;
    약제학적 조성물의 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80을 포함하며;
    여기서 희석제는 표준 상태에서의 물인 조성물 내에 항체가 존재하는 방법.
  25. 제1항에 있어서, 건선 관절염을 치료하기 위해 사용되는 하나 이상의 추가의 약물을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  26. 제25항에 있어서, 추가의 약물이 면역억제제, 비스테로이드성 항염증제(NSAID), 메토트렉세이트(MTX), 항-B-세포 표면 마커 항체, 항-CD20 항체, 리툭시맙, TNF-억제제, 코르티코스테로이드, 및 공동-자극성 조절제로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  27. 제1항에 있어서, 항체가 환자에서 건선성 관절염의 증상을 감소시키거나, 임상 반응을 유도하거나, 임상 관해를 유도 또는 유지하거나, 질환 진행을 억제하거나, 환자에서 질환 합병증을 억제하기에 유효한 방법.
  28. 환자에게 IL-23에 대한 항체를 안전하고 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 서열 번호 116의 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역 및 서열 번호 106의 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역을 포함하는 환자에서 건선성 관절염을 치료하는 방법.
  29. 제28항에 있어서, 항체가 0 주에서의 초기 피하 용량, 4 주에서의 피하 용량, 및 그 후로 매 8 주마다(q8w)의 피하 용량으로 투여되는 방법.
  30. 제28항에 있어서, 항체가 25 mg 내지 200 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  31. 제28항에 있어서, 항체가 50 mg 또는 100 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  32. 제28항에 있어서, 항체가 100 mg의 용량으로 투여되는 방법.
  33. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  34. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 16 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  35. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선 면적 및 중증도 지수 75, 90, 및 100(PASI75/90/100)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  36. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  37. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  38. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 리즈 골부착부염 지수(LEI)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  39. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 0 내지 3의 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  40. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 단축형 36(SF-36) 건강 조사에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  41. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS) 점수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  42. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 최소 질환 활성(MDA) 기준에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  43. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  44. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  45. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  46. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  47. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 항체를 이용한 24 주의 치료까지 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)에 의해 결정되는 바와 같이 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되는 방법.
  48. 제32항에 있어서, 환자가 항체를 이용한 치료에 대한 반응자이고, 24 주의 치료까지 통계적으로 유의한 질환 활성의 개선을 갖는 것으로 확인되며, 여기서 질환 활성은 미국 류마티스 학회 20% 개선 기준(ACR20), 미국 류마티스 학회 50% 개선 기준(ACR50), 건선 면적 및 중증도 지수 75, 90, 및 100(PASI75/90/100), 미국 류마티스 학회 50% 및 70% 개선 기준(ACR50/70), 건강 평가 질문지 장애 지수(HAQ-DI), 리즈 골부착부염 지수(LEI), 지염 평가 점수(0=부재, 1=경미, 2=보통, 3=중증), 단축형 건강 조사(SF-36)의 변화, 정신적 요소 요약 및 신체적 요소 요약(MCS 및 PCS)의 변화, 최소 질환 활성(MDA)의 달성, 건선성 관절염 질환 활성 점수(PASDAS), GRAppa 복합 점수(GRACE) 지수, 변형된 복합 건선성 질환 활성 지수(mCPDAI), 건선성 관절염에 대한 질환 활성 지수(DAPSA), 및 환자 지수 데이터의 일상적 평가 3(RAPID3)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 기준에 의해 결정되는 방법.
  49. 제32항에 있어서, ACR20, ACR50, ACR70, PASI70, PASI90, PSAI100, MDA, HAQ-DI, LEI/지염, SF-36 PCS, PASDAS, GRACE, mCPDAI, DAPSA, RAPID3, 또는 MCS 점수가 초기 치료 후 16 주, 20 주, 24 주, 또는 28 주에 측정되는 방법.
  50. 제32항에 있어서, 항체가 피하 투여되는 구셀쿠맙인 방법.
  51. 제50항에 있어서, 100 mg/mL의 항체;
    7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물;
    약제학적 조성물의 0.053%(w/v)의 폴리소르베이트 80을 포함하며;
    여기서 희석제는 표준 상태에서의 물인 조성물 내에 항체가 존재하는 방법.
  52. 제28항에 있어서, 건선 관절염을 치료하기 위해 사용되는 하나 이상의 추가의 약물을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  53. 제52항에 있어서, 추가의 약물이 면역억제제, 비스테로이드성 항염증제(NSAID), 메토트렉세이트(MTX), 항-B-세포 표면 마커 항체, 항-CD20 항체, 리툭시맙, TNF-억제제, 코르티코스테로이드, 및 공동-자극성 조절제로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  54. 제28항에 있어서, 항체가 환자에서 건선성 관절염의 증상을 감소시키거나, 임상 반응을 유도하거나, 임상 관해를 유도 또는 유지하거나, 질환 진행을 억제하거나, 환자에서 질환 합병증을 억제하기에 유효한 방법.
  55. IL-23에 대한 항체를 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역을 포함하고, 상기 경쇄 가변 영역은 서열 번호 50의 상보성 결정 영역 경쇄 1(CDRL1) 아미노산 서열;서열 번호 56의 CDRL2 아미노산 서열; 및 서열 번호 73의 CDRL3 아미노산 서열을 포함하며, 상기 중쇄 가변 영역은 서열 번호 5의 상보성 결정 영역 중쇄 1(CDRH1) 아미노산 서열;서열 번호 20의 CDRH2 아미노산 서열; 및 서열 번호44의 CDRH3 아미노산 서열을 포함하는, TNF 억제제에 대해 비반응자인 환자에서 건선성 관절염을 치료하는 방법.
  56. 제55항에 있어서, TNF 억제제가 아달리루맙 또는 에테르나셉트인 방법.
  57. 제56항에 있어서, PASI70/90/100 및/또는 ACR20/50/70 점수를 측정함으로써 환자를 TNF 억제제에 대해 비반응자인 것으로 결정하는 방법.
  58. IL-23에 대한 항체를 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 서열 번호 116의 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역 및 서열 번호 106의 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역을 포함하는, TNF 억제제에 대해 비반응자인 환자에서 건선성 관절염을 치료하는 방법.
  59. 제58항에 있어서, TNF 억제제가 아달리루맙 또는 에테르나셉트인 방법.
  60. 제59항에 있어서, PASI70/90/100 및/또는 ACR20/50/70 점수를 측정함으로써 환자를 TNF 억제제에 대해 비반응자인 것으로 결정하는 방법.
  61. IL-23에 대한 항체를 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 서열 번호 50의 상보성 결정 영역 경쇄 1(CDRL1) 아미노산 서열;서열 번호 56의 CDRL2 아미노산 서열;
    서열 번호 73의 CDRL3 아미노산 서열;
    서열 번호 5의 상보성 결정 영역 중쇄 1(CDRH1) 아미노산 서열;
    서열 번호 20의 CDRH2 아미노산 서열; 및 서열 번호 44의 CDRH3 아미노산 서열을 포함하고, 투여량은 0 주, 4 주, 및 그 후로 매 8 주마다 피하 주사에 의해 투여되는 100 mg이며, 항체는 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물;
    0.053%(W/v)의 폴리소르베이트 80를 포함하는 단일-용량 사전충전 주사기 내에 100 mg/mL의 농도로 존재하고, 희석제는 표준 상태에서의 물인, 전신 요법 또는 광선요법에 대한 후보인 성인 환자에서 중등도 내지 중증 건선성 관절염을 치료하는 방법.
  62. IL-23에 대한 항체를 임상적으로 안전한 것으로 입증되고 임상적으로 유효한 것으로 입증된 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 항체는 서열 번호 116의 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역 및 서열 번호 106의 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역을 포함하고, 투여량은 제0주, 제4주, 및 그 후로 매 8 주마다 피하 주사에 의해 투여되는 100 mg이며, 항체는 7.9%(w/v)의 수크로스, 4.0 mM의 히스티딘, 6.9 mM의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물;
    0.053%(W/v)의 폴리소르베이트 80를 포함하는 단일-용량 사전충전 주사기 내에 100 mg/mL의 농도로 존재하고, 희석제는 표준 상태에서의 물인, 전신 요법 또는 광선요법에 대한 후보인 성인 환자에서 중등도 내지 중증 건선성 관절염을 치료하는 방법.
KR1020207015671A 2017-11-06 2018-11-06 항-il23 특이적 항체로 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 유효한 방법 KR20200076731A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762581996P 2017-11-06 2017-11-06
US62/581,996 2017-11-06
US201862744386P 2018-10-11 2018-10-11
US62/744,386 2018-10-11
PCT/US2018/059444 WO2019090329A1 (en) 2017-11-06 2018-11-06 Safe and effective method of treating psoriatic arthritis with anti-il23 specific antibody

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20200076731A true KR20200076731A (ko) 2020-06-29

Family

ID=66326843

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207015671A KR20200076731A (ko) 2017-11-06 2018-11-06 항-il23 특이적 항체로 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 유효한 방법

Country Status (10)

Country Link
US (2) US20190135910A1 (ko)
EP (1) EP3706794A4 (ko)
JP (2) JP2021502349A (ko)
KR (1) KR20200076731A (ko)
AU (1) AU2018360789A1 (ko)
CA (1) CA3081343A1 (ko)
IL (1) IL274272A (ko)
MA (1) MA50580A (ko)
MX (1) MX2020004716A (ko)
WO (1) WO2019090329A1 (ko)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112021023295A2 (pt) * 2019-05-23 2022-02-08 Janssen Biotech Inc Método de tratamento de doença inflamatória intestinal com uma terapia de combinação de anticorpos para il-23 e tnf-alfa
KR20220016954A (ko) * 2019-06-04 2022-02-10 얀센 바이오테크 인코포레이티드 항-il23 특이적 항체에 의해 건선성 관절염을 치료하는 안전하고 효과적인 방법
EP4178616A1 (en) * 2020-07-13 2023-05-17 Janssen Biotech, Inc. Safe and effective method of treating psoriatic arthritis with anti-il23 specific antibody
JP2024510588A (ja) * 2021-03-12 2024-03-08 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｉｌ２３特異的抗体による、ｔｎｆ療法に対する不十分な応答を有する乾癬性関節炎患者を治療する方法
BR112023018353A2 (pt) * 2021-03-12 2024-02-06 Janssen Biotech Inc Método seguro e eficaz para tratamento da artrite psoriática com anticorpo específico anti-il23
US20230374122A1 (en) * 2022-05-18 2023-11-23 Janssen Biotech, Inc. Method for Evaluating and Treating Psoriatic Arthritis with IL23 Antibody

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2010291927A1 (en) * 2009-09-14 2012-04-12 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Methods for treating psoriasis
US9803010B2 (en) * 2012-06-27 2017-10-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Crystalline anti-human IL-23p19 antibodies
WO2015119841A1 (en) * 2014-02-05 2015-08-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Role of il-23 and pd-1 in autoreactive immune response
WO2017172771A2 (en) * 2016-03-29 2017-10-05 Janssen Biotech, Inc. Method of treating psoriasis with increased interval dosing of anti-il12/23 antibody
EP3744733A3 (en) * 2016-04-15 2021-02-24 Boehringer Ingelheim International GmbH Methods of treating inflammatory diseases
MA46861A (fr) * 2016-11-16 2019-09-25 Janssen Biotech Inc Procédé de traitement du psoriasis avec un anticorps anti-il-23 spécifique

Also Published As

Publication number Publication date
AU2018360789A1 (en) 2020-05-14
US20210363235A1 (en) 2021-11-25
EP3706794A4 (en) 2021-08-11
US20190135910A1 (en) 2019-05-09
EP3706794A1 (en) 2020-09-16
MX2020004716A (es) 2020-11-06
WO2019090329A1 (en) 2019-05-09
MA50580A (fr) 2020-09-16
CA3081343A1 (en) 2019-05-09
IL274272A (en) 2020-06-30
JP2021502349A (ja) 2021-01-28
JP2023182641A (ja) 2023-12-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2023162316A (ja) 抗ｉｌ１２及び／又は－２３抗体の増加した間隔投与による乾癬の処置
US20210363235A1 (en) Safe and Effective Method of Treating Psoriatic Arthritis with Anti-IL23 Specific Antibody
AU2017336799B2 (en) Safe and effective method of treating psoriasis with anti-IL23 specific antibody
KR20240065333A (ko) 항-il23 특이적 항체로 건선을 치료하는 방법
KR20200129125A (ko) 항-il23 특이적 항체로 크론병을 치료하는 방법
JP2024038223A (ja) 抗ｉｌ２３特異的抗体で治療した後の持続応答予測因子
US20220112282A1 (en) Method for Treating Crohn&#39;s Disease with Anti-IL12/IL23 Antibody
US20220025035A1 (en) Safe and Effective Method of Treating Psoriatic Arthritis with Anti-IL23 Specific Antibody
JP2024510588A (ja) 抗ｉｌ２３特異的抗体による、ｔｎｆ療法に対する不十分な応答を有する乾癬性関節炎患者を治療する方法
KR20210093973A (ko) 항-il23 특이적 항체로 건선을 치료하는 안전하고 효과적인 방법
KR20210141583A (ko) 항-il-12/il-23 항체를 사용한 소아 대상의 건선 치료 방법
US20210115129A1 (en) Safe and Effective Method of Treating Ulcerative Colitis with Anti-IL12/IL23 Antibody
US20230159633A1 (en) Method of Treating Ulcerative Colitis with Anti-IL23 Specific Antibody
US20210253690A1 (en) Safe and Effective Method of Treating Ulcerative Colitis with Anti-IL12/IL23 Antibody
KR20240103043A (ko) 항-il23 특이적 항체로 궤양성 결장염을 치료하는 방법
JP2024088688A (ja) 抗ｉｌ２３特異的抗体で乾癬を治療する安全かつ有効な方法
JP2024510744A (ja) 抗ｉｌ２３特異的抗体で乾癬性関節炎を治療する安全かつ有効な方法
KR20240099352A (ko) 항-il23 특이적 항체로 크론병을 치료하는 방법
JPWO2020104943A5 (ko)

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]