KR20200070503A - 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 소정의 균주를 통한 발효로 인해 항산화성이 현저히 우수한 효과를 나타내는 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 소정의 균주를 통한 발효로 인해 항산화성이 현저히 우수한 효과를 나타내는 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
최근 천연식물체를 중심으로 한 연구가 발전하면서 이들이 가지는 생리활성 물질에 대한 관심이 증대되고 있다. 생리활성 물질은 적은 양으로 현저한 활성을 나타내는 고부가치 물질이기에 새로운 물질들의 연구, 개발이 활발히 이루어지고 있다.
특히 인공합성물질 중 일부에 대한 안전성 문제들이 제기되고, 사람들의 건강에 대한 관심과 욕구 증대에 따라 천연 생리활성 물질에 대한 관심은 더욱 증가할 것으로 보인다. 따라서 식품학, 영양학, 약학 등의 연구분야에서는 다양한 천연 식물체 내에 존재하는 여러 화합물들의 생물학적 활성 평가가 이루어지고 있으며, 그 중 항산화 활성에 관한 연구에 관심이 집중되고 있다.
생물체의 산화스트레스로 인한 산화물이 노화를 비롯한 암, 동맥경화 등의 각종 만성 퇴행성 질환의 발생원인으로 밝혀지면서 이를 조절하는데 관여하는 천연 항산화 물질의 가치가 부각되고 있다.
일반적으로 항산화제는 인체에서 세포막의 산화 등을 저해하여, 노화 등의 예방에 유익한 성분으로 알려졌으나, 기존의 합성 항산화제는 천연물에 비해서 인체독성이 있는 관계로 식품 등 인간의 섭취물에 인공적으로 첨가되는 첨가제로 사용하기에는 문제가 있어, 최근 천연 항산화제의 추출, 분리를 위한 연구가 활발히 진행되고 있다.
종래에는 탈지미강을 물과 에탄올 혼합액으로 추출하여 얻은 추출액을 여과, 농축한 다음 항산화제를 제조하는 방법을 통해 항산화성 향상을 도모하였으나, 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있었다.
이에, 항산화성이 현격히 우수한 효과를 나타낼 수 있는 물질에 대한 연구가 시급한 실정이다.
본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 소정의 균주를 통한 발효로 인해 항산화성이 현저히 우수한 효과를 나타내는 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는데 목적이 있다.
상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은, 하수오를 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함하는 제1용매를 통해 추출한 하수오 추출물을, 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 균주로 발효시킨 하수오 발효추출물;을 유효성분으로 포함하는 하수오 발효추출 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 제1용매가 물이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus) 또는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 420㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 1 ~ 210㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 60㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 150㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 3 ~ 8㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출물을 80 ~ 130㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다.
또한, 상기 발효는 온도 25 ~ 45℃에서 35 ~ 61시간 동안 수행할 수 있다.
또한, 상기 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)는 기탁번호가 KACC91148일 수 있고, 상기 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 기탁번호가 KACC91147일 수 있으며, 상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은 기탁번호가 KACC91563일 수 있다.
한편, 본 발명은 (1) 하수오를 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함하는 제1용매를 통해 추출하여 하수오 추출물을 제조하는 단계; (2) 상기 하수오 추출물을 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 균주로 발효시켜서 하수오 발효추출물을 제조하는 단계; (3) 상기 하수오 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 하수오 발효추출 조성물을 제조하는 단계;를 포함하는 하수오 발효추출 조성물 제조방법을 제공한다.
한편, 본 발명은 상술한 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
한편, 본 발명은 상술한 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 건강 보조 식품을 제공한다.
한편, 본 발명은 상술한 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법은 소정의 균주를 통한 발효로 인해 항산화성이 현저히 우수한 효과를 발현할 수 있다.
도 1 내지 도 3은 하수오의 추출 용매와 발효 균주에 따른 DPPH 항산화성 실험결과 그래프, 그리고,
도 4 내지 도 6은 하수오의 추출 용매와 발효 균주에 따른 ABTS 항산화성 실험결과 그래프이다.
도 4 내지 도 6은 하수오의 추출 용매와 발효 균주에 따른 ABTS 항산화성 실험결과 그래프이다.
이하 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 실시예에 따른 하수오 발효추출 조성물은, 하수오를 제1용매를 통해 추출한 하수오 추출물을, 균주로 발효시킨 하수오 발효추출물;을 유효성분으로 포함하여 구현 된다.
먼저, 상기 하수오 추출물에 대하여 설명한다.
상기 하수오 추출물은 하수오를 제1용매를 통해 추출하여 제조한다.
이때, 상기 제1용매는 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 용매라면 제한 없이 사용할 수 있고, 바람직하게는 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 보다 바람직하게는 물 및 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있으며, 보다 더 바람직하게는 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 더욱 바람직하게는 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함하며, 더욱 더 바람직하게는 물, 농도가 20 ~ 40%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 60 ~ 80%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함할 수 있다.
또한, 상기 추출 방법 및 조건은 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 천연 식물성 재료의 추출 방법 및 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있음에 따라, 본 발명에서는 이를 특별히 한정하지 않는다.
한편, 상기 하수오 추출물을 제조하기 전에, 하수오 추출물의 제조가 더욱 용이하도록 상기 하수오를 전처리할 수 있다.
상기 전처리는 수세, 분쇄 등을 수행할 수 있으며, 상기 수세 및 분쇄의 방법 및 조건은 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 수세 및 분쇄의 방법 및 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있음에 따라, 본 발명에서는 이를 특별히 한정하지 않는다.
다음, 하수오 발효추출물에 대해 설명한다.
상기 하수오 발효추출물은 하수오 추출물을, 균주로 발효시켜서 제조할 수 있다.
상기 균주는 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이고, 바람직하게는 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종일 수 있다.
이때, 상기 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)는 기탁번호가 KACC91148일 수 있고, 상기 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 기탁번호가 KACC91147일 수 있으며, 상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은 기탁번호가 KACC91563일 수 있다.
본 발명에 따른 하수오 발효추출 조성물은 상술한 균주를 통해 하수오 추출물을 발효시킨 하수오 발효추출물을 유효성분으로 포함함에 따라, 항산화성이 현격히 우수한 효과를 발현할 수 있다.
다음, 하수오 발효추출 조성물에 대해 설명한다.
하수오 발효추출 조성물은 상술한 바와 같이 하수오 발효 추출물을 유효성분으로 포함한다.
이때, 상기 제1용매와 균주의 종류에 따라 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 하수오 발효추출물의 농도가 상이할 수 있다.
구체적으로, 상기 제1용매가 물이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus) 또는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 420㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 40 ~ 400㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 물이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus) 또는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 30㎍/㎖ 미만이거나, 420㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 1 ~ 210㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 2 ~ 200㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 2㎍/㎖ 미만이거나, 200㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 60㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 35 ~ 55㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 30㎍/㎖ 미만이거나, 60㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 150㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 40 ~ 130㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 30㎍/㎖ 미만이거나, 150㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
또한, 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 3 ~ 8㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 4 ~ 7㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 3㎍/㎖ 미만이거나, 8㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
그리고, 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물은 상기 하수오 발효추출물을 80 ~ 130㎍/㎖의 농도로, 바람직하게는 85 ~ 120㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 만일 상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물에 구비되는 상기 하수오 발효추출물의 농도가 80㎍/㎖ 미만이거나, 130㎍/㎖를 초과하면 목적하는 수준으로 항산화성을 발현할 수 없는 문제가 있을 수 있다.
한편, 상기 하수오 발효추출 조성물은, 하수오 발효추출물 외에, 제2용매;를 더 포함할 수 있다.
상기 제2용매는 당업계에서 통상적으로 후술하는 화장료 조성물, 건강 보조 식품 및 약?e적 조성물에 사용할 수 있는 용매라면 제한 없이 사용할 수 있고, 바람직하게는 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 보다 바람직하게는 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 하수오 발효추출 조성물은, (1) 하수오를 제1용매를 통해 추출하여 하수오 추출물을 제조하는 단계; (2) 상기 하수오 추출물을 균주로 발효시켜서 하수오 발효추출물을 제조하는 단계; (3) 상기 하수오 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 하수오 발효추출 조성물을 제조하는 단계;를 포함하여 제조된다.
이때, 상기 (1) 단계의 추출은 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 추출 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있으며, 바람직하게는 60 ~ 80℃에서 3 ~ 5시간 동안 처리하고, 3 ~ 5시간 동안 휴지시키는 공정을 2 ~ 5회 반복수행, 보다 바람직하게는 65 ~ 75℃에서 3.5 ~ 4.5시간 동안 처리하고, 3.5 ~ 4.5시간 동안 휴지시키는 공정을 2 ~ 4회 반복수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 (2) 단계의 발효는 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 발효 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있고, 바람직하게는 온도 25 ~ 45℃에서 48 ~ 96시간 동안, 보다 바람직하게는 온도 30 ~ 40℃에서 55 ~ 89시간 동안 수행할 수 있다.
한편, 본 발명은 상술한 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 건강 보조 식품 및 약?e적 조성물을 각각 제공한다.
상기 건강 보조 식품의 종류는 당업계의 통상적인 건강 보조식품이라면 제한되지 않으며, 일예로, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있고 통상적인 의미에서의 건강 보조 식품을 모두 포함한다.
상기 건강 보조 식품이 음료 조성물일 경우, 본 발명에 따른 하수오 발효추출 조성물을 함유하는 것 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며 통상의 음료와 같이 다양한 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
통상적으로, 건강기 보조 품에 포함되는 하수오 발효추출 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 ~ 20 중량%, 바람직하게는 0.01 ~ 10 중량%로 포함될 수 있다. 또한, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수도 있다.
또한, 화장료 조성물로 제제화되는 경우, 상기 하수오 발효추출 조성물의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량%이며, 바람직하게는 0.01 내지 5.0 중량%이다. 최소한의 자외선에 의한 피부 손상 개선 효과를 달성할 수 있도록 하수오 발효추출 조성물의 함량은 상기 최소치 이상인 것이 바람직하며, 과량 첨가에 따른 사용감 저하 및 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여 하수오 발효추출 조성물은 상기 최대치 이하인 것이 바람직하다. 이때, 상기 하수오 발효추출 조성물의 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절될 수 있다.
본 발명의 하수오 발효추출 조성물 및 이의 제조방법은 소정의 균주를 통한 발효로 인해 항산화성이 현저히 우수한 효과를 발현할 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.
[실시예]
실시예 1: 하수오 발효추출 조성물의 제조
(1) 하수오 추출물의 제조
하수오를 제1용매로 물에 추출하되, 온도 70℃에서 4시간동안 처리하고, 4시간 휴지시키는 공정을 4회 반복수행한 후, 추출에 사용된 제1용매를 진공 여과법을 통해 제거하여 하수오 추출물을 제조하였다.
(2) 하수오 발효추출물의 제조
비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 균주(기탁번호: KACC91563)를 상기 제조한 하수오 추출물에 접종하고 35±2℃에서 72시간 동안 발효시켜서 하수오 발효추출물을 수득하였다.
(3) 하수오 발효추출 조성물의 제조
제조한 하수오 발효추출물을 제2용매로 증류수에 희석하여 하수오 발효추출물의 농도가 40㎍/㎖가 되도록 하수오 발효추출 조성물을 제조하였다.
실시예 2 ~ 36
실시예 1과 동일하게 실시하되, 제1용매와 제2용매의 종류, 균주의 종류, 하수오 발효추출 조성물에서 하수오 발효추출물의 농도 등의 달리하여, 하기 표 1 및 표 2와 같이 하수오 발효추출 조성물을 제조하였다.
비교예 1 ~ 12
실시예1과 동일하게 실시하되, 하수오 추출물을 발효하지 않고, 하수오 추출물을 제2용매와 혼합하는 방법으로, 제1용매와 제2용매의 종류와 하수오 발효추출 조성물의 하수오 추출물의 농도를 달리하여 하기 표 1 및 표 2와 같이 하수오 발효추출 조성물을 제조하였다.
이때, 하기에서 사용한 균주인 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)는 기탁번호가 KACC91148이고, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 기탁번호가 KACC91147이다.
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
실시예 1 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 40 | 실시예 13 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 40 |
실시예 2 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 100 | 실시예 14 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 100 |
실시예 3 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 200 | 실시예 15 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 200 |
실시예 4 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 400 | 실시예 16 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 400 |
실시예 5 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 40 | 실시예 17 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 40 |
실시예 6 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 100 | 실시예 18 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 100 |
실시예 7 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 200 | 실시예 19 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 200 |
실시예 8 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 400 | 실시예 20 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 400 |
실시예 9 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 40 | 실시예 21 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 40 |
실시예 10 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 100 | 실시예 22 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 100 |
실시예 11 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 200 | 실시예 23 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 200 |
실시예 12 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 400 | 실시예 24 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 400 |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
실시예 25 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 40 | 비교예 1 |
물 | - | 40 |
실시예 26 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 100 | 비교예 2 |
물 | - | 100 |
실시예 27 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 200 | 비교예 3 |
물 | - | 200 |
실시예 28 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 400 | 비교예 4 |
물 | - | 400 |
실시예 29 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 40 | 비교예 5 |
농도30% 주정 |
- | 40 |
실시예 30 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 100 | 비교예 6 |
농도30% 주정 |
- | 100 |
실시예 31 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 200 | 비교예 7 |
농도30% 주정 |
- | 200 |
실시예 32 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 400 | 비교예 8 |
농도30% 주정 |
- | 400 |
실시예 33 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 40 | 비교예 9 |
농도70% 주정 |
- | 40 |
실시예 34 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 100 | 비교예 10 |
농도70% 주정 |
- | 100 |
실시예 35 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 200 | 비교예 11 |
농도70% 주정 |
- | 200 |
실시예 36 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 400 | 비교예 12 |
농도70% 주정 |
- | 400 |
<실험예 1>
상기 실시예 1 ~ 36 및 비교예 1 ~ 12에 대해 하기 항목에 대하여 측정/평가하여 도 1 내지 도 3에 나타내었다.
1. DPPH 자유 라디칼 소거활성 측정
상기 실시예 1 ~ 36 및 비교예 1 ~ 12에 따라 제조한 하수오 발효추출 조성물에 대하여, DPPH 자유 라디칼 소거활성 측정을 평가하였다.
상기 실시예 1 ~ 36 및 비교예 1 ~ 12에 따라 제조한 하수오 발효추출 조성물을 1㎖ 씩 준비하고, standard로 사용되는 BHT 용액은 BHT 10mg을 메탄올(methanol) 1㎖로 희석하여 상기 실시예 1 ~ 36 및 비교예 1 ~ 12와 동일한 농도로 각각 1㎖ 씩 제조하였다. DPPH 용액은 DPPH 0.002gdp 메탄올 25㎖를 혼합하여 제조하였다.
그리고, 96 well plate에 BHT용액과 메탄올을 각각 80 mL씩 혼합한 군, BHT와 DPPH 용액을 각각 80 mL씩 혼합한 군, 시료와 DPPH 용액을 각각 80 mL씩 혼합한 군, 메탄올과 DPPH용액을 각각 80 mL씩 혼합한 군, 메탄올만을 160 mL씩 처리한 군, 증류수와 DPPH용액을 각각 80 mL씩 혼합한 군, 증류수와 메탄올을 각각 80 mL씩 혼합한 군을 각각 구분하여 분주한 후 빛과 반응하지 못하게 foil로 감싸준 뒤 실온에서 30분간 방치하였다. ELISA reader를 이용해 517㎚에서 흡광도를 측정하였다.
흡광도 측정기기(ELISA reader)를 이용하여 517㎚에서 흡광도를 측정하였다.
그리고, 측정한 흡광도를 통해 실시예 1 ~ 36 중 비교예 1 ~ 12와 동일 농도를 가지는 각각의 실시예에 대하여, 비교예 1 ~ 12에 대비한 DPPH 자유 라디칼 소거 활성 향상 정도를 하기 수학식 1에 따라 계산하여, 그 결과를 도 1 내지 도 3에 나타내었다.
[수학식 1]
상기 수학에서, R, RA, RB는 각각 라디칼 소거능 증가율, 실시예에 따른 조성물의 라디칼 소거능, 비교예에 따른 조성물의 라디칼 소거능이다.
측정결과, 도 1에 도시된 바와 같이 제1용매로 물을 사용한 실시예 1 ~ 12중, 실시예 1 ~ 8의 DPPH 자유 라디칼 소거능이 현격히 우수하고, 도 2에 도시된 바와 같이 제1용매로 농도 30%의 주정을 사용한 실시예 13 ~ 24 중 실시예 13, 14, 17 ~ 19 및 21의 DPPH 자유 라디칼 소거능이 현격히 우수하며, 도 3에 도시된 바와 같이 제1용매로 농도 70%의 주정을 사용한 실시예 25 ~ 36 중 실시예 26의 DPPH 자유 라디칼 소거능이 현격히 우수함에 따라 항산화성이 현저히 우수한 것을 확인할 수 있다.
실시예 37 ~ 실시예 63
실시예 1과 동일하게 실시하여 제조하되, 제2용매로 농도 50%의 에탄올을 사용하고, 제1용매와 제2용매의 종류, 균주의 종류, 하수오 발효추출 조성물에서 하수오 발효추출물의 농도 등의 달리하여, 하기 표 3 및 표 4와 같이 하수오 발효추출 조성물을 제조하였다.
비교예 13 ~ 22
비교예 1과 동일하게 실시하여 제조하되, 제2용매로 농도 50%의 에탄올을 사용하고, 제1용매와 제2용매의 종류, 균주의 종류, 하수오 발효추출 조성물에서 하수오 발효추출물의 농도 등의 달리하여, 하기 표 3 및 표 4와 같이 하수오 발효추출 조성물을 제조하였다.
이때, 하기에서 사용한 균주인 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)는 기탁번호가 KACC91148이고, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 기탁번호가 KACC91147이다.
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
실시예 37 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 2 | 실시예 46 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 2 |
실시예 38 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 5 | 실시예 47 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 5 |
실시예 39 |
물 | 비피도박테리움 롱검 | 10 | 실시예 48 |
농도30% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 10 |
실시예 40 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 2 | 실시예 49 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 2 |
실시예 41 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 5 | 실시예 50 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 5 |
실시예 42 |
물 | 락토바실러스 헬베티쿠스 | 10 | 실시예 51 |
농도30% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 10 |
실시예 43 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 2 | 실시예 52 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 2 |
실시예 44 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 5 | 실시예 53 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 5 |
실시예 45 |
물 | 스트렙토코서스 써모필러스 | 10 | 실시예 54 |
농도30% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 10 |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
구분 | 제1/제2용매 종류 |
균주 종류 | 농도 (㎍/㎖) |
실시예 55 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 2 | 비교예 13 |
물 | - | 2 |
실시예 56 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 5 | 비교예 14 |
물 | - | 5 |
실시예 57 |
농도70% 주정 |
비피도박테리움 롱검 | 10 | 비교예 15 |
물 | - | 10 |
실시예 58 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 2 | 비교예 16 |
농도30% 주정 |
- | 2 |
실시예 59 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 5 | 비교예 17 |
농도30% 주정 |
- | 5 |
실시예 60 |
농도70% 주정 |
락토바실러스 헬베티쿠스 | 10 | 비교예 18 |
농도30% 주정 |
- | 10 |
실시예 61 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 2 | 비교예 19 |
농도70% 주정 |
- | 2 |
실시예 62 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 5 | 비교예 20 |
농도70% 주정 |
- | 5 |
실시예 63 |
농도70% 주정 |
스트렙토코서스 써모필러스 | 10 | 비교예 21 |
농도70% 주정 |
- | 10 |
<실험예 2>
상기 실시예 37 ~ 63 및 비교예 13 ~ 21에 대해 하기 항목에 대하여 측정/평가하여 도 4 내지 도 6에 나타내었다.
1. ABTS 라디칼 소거활성 측정
상기 실시예 37 ~ 63 및 비교예 13 ~ 21에 따라 제조한 하수오 발효추출 조성물에 대하여, ABTS 라디칼 소거활성 측정을 평가하였다.
구체적으로, 7 mM ABTS와 140 mM 과황산칼륨(potassium persulfate) 용액을 혼합하고, 24시간 동안 암실에 방치한 후, 734㎚에서 흡광도 값이 0.7±0.02가 되도록 농도 50%의 에탄올로 희석한 후, 실시예 37 ~ 63 및 비교예 13 ~ 21에 따라 제조한 하수오 발효추출 조성물 50μL를 가하여 흡광도의 변화를 정확히 3분 후에 측정하였으며, 하기 수학식 2에 의해 ABTS 라디칼 소거 활성(%)을 환산하여, 대조군에 대한 흡광도 감소율을 측정함으로써 ABTS 라디칼 소거 활성(%)을 측정하였다.
[수학식 2]
ABTS 라디칼 소거활성(%)={1-(시료 흡광도/대조군 흡광도)}×100
그리고, 실시예 37 ~ 63 중 비교예 13 ~ 21과 동일 농도를 가지는 각각의 실시예에 대하여, 비교예 13 ~ 21에 대비한 ABTS 라디칼 소거 활성 향상 정도를 도 4 내지 도 6에 나타내었다.
측정결과, 도 4에 도시된 바와 같이 제1용매로 물을 사용한 실시예 37 ~ 45중, 실시예 41의 ABTS 라디칼 소거능이 현격히 우수하고, 도 5에 도시된 바와 같이 제1용매로 농도 30%의 주정을 사용한 실시예 46 ~ 54 중 실시예 49 ~ 51의 ABTS 라디칼 소거능이 현격히 우수하며, 도 6에 도시된 바와 같이 제1용매로 농도 70%의 주정을 사용한 실시예 55 ~ 63 중 실시예 59의 ABTS 라디칼 소거능이 현격히 우수함에 따라 항산화성이 현저히 우수한 것을 확인할 수 있다.
이하, 본 발명에 따른 하수오 발효추출 조성물을 유효성분으로 포함하는 제조예에 대하여 나타내도록 하겠으나, 이는 본 발명은 구체적으로 설명하기 위한 것일뿐이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1: 하수오 발효추출 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강 보조 식품의 제조
하수오 발효추출 조성물 200 ㎎
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B 1 0.13 ㎎
비타민 B 2 0.15 ㎎
비타민 B 6 0.5㎎
비타민 B 12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
제조예 2: 하수오 발효추출 조성물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물의 제조
하수오 발효추출 조성물: 1중량%
친유형 모노스테아린산글리세린: 2중량%
세테아릴알콜: 2중량%
스테아린산: 1.5중량%
폴리솔베이트 60: 1.5중량%
솔비탄스테아레이트: 0.6중량%
하이드로제네이티드 폴리이소부텐: 1중량%
스쿠알란: 3중량%
광물유: 5중량%
사이클로메치콘: 5중량%
디메치콘: 1중량%
초산토코페롤: 0.5중량%
글리세린: 5중량%
베타인: 3중량%
트리에탄올아민: 1중량%
산탄검: 0.05중량%
향: 적량
방부제: 적량
색소: 적량
증류수: 잔량
이상에서 본 발명의 일 실시 예에 대하여 설명하였으나, 본 발명의 사상은 본 명세서에 제시되는 실시 예에 제한되지 아니하며, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에서, 구성요소의 부가, 변경, 삭제, 추가 등에 의해서 다른 실시 예를 용이하게 제안할 수 있을 것이나, 이 또한 본 발명의 사상범위 내에 든다고 할 것이다.
Claims (13)
- 하수오를 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함하는 제1용매를 통해 추출한 하수오 추출물을, 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 균주로 발효시킨 하수오 발효추출물;을 유효성분으로 포함하는 하수오 발효추출 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 물이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus) 또는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 420㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 1 ~ 210㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 60㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 30 ~ 150㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 3 ~ 8㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 제1용매가 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜이고, 상기 균주가 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)인 경우,
상기 하수오 발효추출물을 80 ~ 130㎍/㎖의 농도로 포함하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 발효는 온도 25 ~ 45℃에서 35 ~ 61시간 동안 수행하는 하수오 발효추출 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)는 기탁번호가 KACC91148이고,
상기 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 기탁번호가 KACC91147이며,
상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은 기탁번호가 KACC91563인 하수오 발효추출 조성물. - (1) 하수오를 물, 농도가 15 ~ 45%인 C1 ~ C4의 알콜 및 농도가 55 ~ 85%인 C1 ~ C4의 알콜로 이루어진 군에서 선택된 1종을 포함하는 제1용매를 통해 추출하여 하수오 추출물을 제조하는 단계;
(2) 상기 하수오 추출물을 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 균주로 발효시켜서 하수오 발효추출물을 제조하는 단계;
(3) 상기 하수오 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 하수오 발효추출 조성물을 제조하는 단계;를 포함하는 하수오 발효추출 조성물 제조방법. - 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 건강 보조 식품.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하수오 발효추출 조성물;을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물.
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