KR20200050761A - 다이설피람을 포함하는 항암용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 다이설피람을 유효성분으로 포함하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

다이설피람을 포함하는 항암용 조성물{Anti-cancer composition comprising disulfiram}

본 발명은 다이설피람(Disulfiram)을 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물에 관한 것이다.

두경부암은 상기도소화관에서 발생하는 모든 암을 포함한다. 지난 수십년 동안 다양한 치료 방법의 개발에도 불구하고, 두경부 편평 상피세포암(Head and Neck Squamous Cell Carcinoma, HNSCC)의 발병률은 지난 30년에 걸쳐 점차 증가하고 있으며 환자의 생존율에는 큰 변화가 없었다. 두경부 편평 상피세포암의 치료 방법은 수술, 방사선 및 화학요법을 포함한다. 이러한 적극적인 치료에도 불구하고 두경부 편평 상피암 환자의 전체 생존률은 50% 미만으로, 새로운 치료법의 개발이 절실히 필요한 상황이다.

그러나, 신약 치료제는 개발에 시간과 비용이 많이 들기 때문에 신약의 승인율은 매우 낮은 상황이다. 따라서, 기존 약물로부터 새로운 항암 효과를 확인함으로써 새로운 치료제를 개발하는 드러그 리포지셔닝(drug repositioning)은 좋은 대안이 될 수 있다. 또한, 드러그 리포지셔닝은 기존 약물의 임상 안정성이 이미 입증되어 있고, 임상적으로 이용 가능한 제형이 존재하기 때문에, 신약 개발에 있어 보다 빠르고 경제적인 방법이 될 수 있다.

다이설피람(Disulfiram)은 알코올 대사산물인 아세트알데히드의 산화를 억제함으로써 술을 소량만 마셔도 두통, 메스꺼움 등과 같은 알코올 부작용이 나타나 알코올 중독을 치료하는 데 사용되어온 약물이다.

다이설피람은 여러 가지 비 임상시험에서 췌장암 등 다양한 악성 종양에 항암 효과를 나타내는 것으로 보고된 바 있으나, 다이설피람이 가지는 항암 효과의 정확한 메커니즘은 아직 밝혀지지 않은 상태이다. 또한, 유방암 환자에 대한 임상시험, 폐암 환자를 대상으로 한 소규모 임상시험 등이 수행되었으나, 두경부 편평 상피암에 대한 항암 효과는 아직 연구되지 않았다.

이러한 배경 하에, 본 발명자는 다이설피람이 두경부 편평 상피세포암에 대한 항암 효과를 나타낸다는 사실을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 다이설피람을 유효성분으로 포함하는 두경부 편평 상피세포암의 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

그러나, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 해당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 다이설피람(Disulfiram)을 유효성분으로 포함하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물이 제공된다.

일 측에 따르면, 상기 다이설피람 농도는 0.5 μM 내지 2.0 μM일 수 있다.

일 측에 따르면, 상기 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 더 포함할 수 있다.

일 측에 따르면, 상기 약학적 조성물은 경구 투여용 일 수 있다.

일 측에 따르면, 상기 약학적 조성물은 정맥 주사용일 수 있다.

일 측에 따르면, 활성 산소종(ROS)의 생성을 증가시킬 수 있다.

일 측에 따르면, Akt 신호전달을 억제할 수 있다.

본 발명의 다이설피람을 유효성분으로 함유하는 두경부 편평 상피세포암 치료용 조성물은 두경부 편평 상피세포암에 대한 우수한 치료 효과를 가진다.

구체적으로, 본 발명의 조성물은 활성 산소종(ROS) 생성을 억제하고, Akt 신호전달을 억제함으로써 두경부 편평 상피세포암 치료용 조성물은 두경부 편평 상피세포암에 항암 효과를 나타낸다.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 두경부 편평 상피세포암 세포주(FaDu 및 Hep2)에 다이설피람, 구리 및 다이설피람/구리를 처리한 경우 세포 생존율을 CCK-8 분석법으로 측정한 것이다.
도 2는 FaDu 및 Hep2 세포주에 각각 0.5 내지 2.0 μM 농도의 다이설피람/구리를 처리한 경우 ROS 생성 정도를 비교한 것이다.
도 3은 FaDu 및 Hep2 세포주에 각각 0.5 내지 2.0 μM 농도의 다이설피람/구리를 처리한 경우 아폽토시스(apoptosis) 정도를 나타내는 유세포 분석 결과이다.
도 4는 FaDu 및 Hep2 세포주에 다이설피람/구리를 처리한 경우 autophagosome 형성에 필요한 Beclin-1과 LC3B I/II의 발현이 증가함을 웨스턴 블롯으로 확인한 것이다.
도 5는 FaDu 및 Hep2 세포주에 다이설피람/구리를 처리한 경우 p-JNK와 p-p38이 증가하고 p-　Akt의 인산화가 감소함을 웨스턴 블롯으로 확인한 것이다.
도 6은 두경부 편평 상피 세포암 마우스 모델에서 다이설피람을 50mg/kg 용량으로 투여한 경우 종양의 성장 억제 효과를 확인한 것이다.

이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.

실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.

또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 실시예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 실시예의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.

본 발명자들은 다이설피람(Disulfiram)을 구리와 함께 처리하는 경우 두경부 편평 상피세포암의 세포주에 처리하는 경우 활성 산소종(ROS) 생성을 억제하고, Akt 신호전달을 억제함으로써 두경부 편평 상피세포암 치료용 조성물은 두경부 편평 상피세포암에 항암 효과를 나타낸다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 다이설피람(Disulfiram)을 유효성분으로 포함하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물이 제공된다.

In vitro 실험 결과에 따르면, 다이설피람과 구리를 1:1의 비율로 준비하여 그 농도를 증가시키는 경우 농도 의존적으로 두경부 편평 상피세포암에 대한 항암 효과가 증가하는 것을 확인할 수 있다. 일반적으로 건강한 사람의 혈중 구리 농도는 10　㎍/DL (1.6　μM)로 알려져 있으므로, 본 발명의 약학적 조성물이 환자에게 투여되었을 때 항암 효과를 나타내기 위해서는 다이설피람이 0.5 μM 내지 2.0 μM의 농도로 포함되는 것이 바람직하며, 1.0 μM 내지 2.0 μM의 농도로 포함되는 것이 보다 바람직하다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 다이설피람의 농도가 0.5 μM 미만인 경우에는 기대하는 항암 효과를 얻을 수 없고, 2.0 μM를 초과하는 경우 부작용이 발생할 우려가 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 다이설피람을 단독으로 함유하거나, 약제로 이용되기 위해서 약제학적 분야에서 공지된 방법에 의해 제조될 수 있으며, 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 희석제, 안정화제, 방부제 등과 혼합하여 분말, 과립, 정제, 캡슐제, 또는 주사제 등의 제형으로 제조되어 사용될 수 있다.

약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대， 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분， 셀를로스 유 도체， 마그네슘 스테아레이트， 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 아울러， 펩티드 제제에 대한 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또 한， 비경구 투여용 담체는 물， 적합한 오일， 식염수， 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안 정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르 브산과 같은 항산화제 가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸 -또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제， 습 윤제， 감미제， 향미제， 유화제， 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다.　

상기 희석제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유, 땅콩유와 같은 식물성유 등의 비수성 용매나 염수(바람직하게는 0.8%의 염수), 완충 매질을 포함한 물(바람직하게는 0.05M의 인산염 완충액) 등의 수성 용매 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 부형제로는 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 나트륨 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 나트륨 클로라이드, 무수 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 안정화제로는 소르비톨, 만니톨, 전분, 수크로스, 덱스트란, 글루타메이트, 글루코스 등의 탄수화물이나 분유, 혈청 알부민, 카제인 등의 동물성, 식물성 또는 미생물성 단백질 등의 단백질을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 방부제로는 티메로살, 메르티올레이트, 젠타마이신, 네오마이신, 니스타틴, 암포테리신 B, 테트라사이클린, 페니실린, 스트렙토마이신, 폴리믹신 B 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있으며, 예를 들어 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다. 비경구적인 투여 방법으로는 정맥내， 근육내， 동맥내， 골수내, 경막내 심장내， 경피， 피하， 복강내， 비강내, 장관, 국소， 설하또는 직장내 투여일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 될 수 있다.

구체적으로는, 본 발명의 약학적 조성물을 정맥 주사용으로 제형화 할 때, 다이설피람을 Hydrophilic-DSF, Hydrophilic-DDC(diethyldithiocarbamate) 또는 Hydrophilic-DSF/Cu 형태로 리포좀 내에 담지하는 방식을 이용할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 총 유효량은 단일 투여량 (single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며， 다중 투여량 (multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 요법에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다.　 이는 제제화 방법, 투여경로 치료횟수 뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 질병의 증상, 투여시간 및 방법 등 다양한 요인들을 고려하여 결정될 수 있다. 이러한 점을 고려할 때, 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 조성물의 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 있어 특별히 제한되지 아니한다.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 항암제와 병용 투여될 수 있으며, 항암제와 동시에 투여되거나 순차적으로 투여될 수 있다. 상기 항암제로는 면역항암제, 시스플라틴, 백금-기반 항암치료제, 플루오로우라실(5-FU), 파클리탁셀, 오테라실칼륨 등을 예로 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 두경부 편평 상피세포암 치료에 쓰이는 항암제는 어느 것이든 이용 가능하다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 목적으로 기술된 것으로서, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.

시약 및 항체

다이설피람(DSF) 및 구리(Cu)는 Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA　)로부터 구입하였다. 　이하의 실험에서 "DSF/Cu"는 DSF 및 Cu가 동일한 비율로 혼합된 시약을 의미한다. 포스파테이즈 억제제 및 프로테아제 억제제 칵테일 타블렛은 Roche Applied Sciences (Penzberg, GER)　로부터 구입하였다.　 사용된 일차 항체는 다음과 같다: P-JNK, JNK, P-　cJun,　cJun,　P-P38, phospho-Akt　및　total-Akt　(Cell Signaling, Beverly,　CA,　USA). Horseradish peroxidase (HRP)가 컨쥬게이트 된 항- 토끼　IgG 및 항-마우스 IgG　이차 항체는 Bio-Rad Laboratories　(Hercules,　CA, USA)에서　구입하였다.

두경부 편평 상피세포암 세포의 배양

인간 HNSCC 세포주(FaDu 및 Hep2) 는 American Type Culture Collection (Manassas,Va　, USA　)으로부터 구입 하였다. 세포들은　10 % 소 태아 혈청 (FBS) 및 스트렙토 마이신 - 페니실린을 포함하는 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM)에서 100 U/㎖의 농도로 37℃, 5% CO₂를 함유하는 humidified atmosphere에서 배양하였다.

실시예 1: 두경부 편평 상피세포암 세포의 생존율 감소 효과

세포 생존율　셀　카운팅 키트(CCK) -8　(Dojindo　Molecular Technologies, 일본)를　사용하여 측정하였다.　 두경부 편평 상피세포암 세포주인 FaDu 및 Hep2 세포주 각각을 1ml에서 5 ×　10³　세포 /well의 밀도로 96-웰 플레이트에　씨딩하고, 다양한 농도 0.5 μM 내지 5.0 μM의 다이설피람으로 처리하였다.　 그 다음,　CCK-8　용액　40 μL를 더하여 4시간　동안 배양하였다.　 이어서, 각 배양 웰의 광학 밀도를 마이크로 플레이트 판독기 (Bio-Tek, Winooski, VT, USA)로 450 nm에서 측정하고, 그 결과를 도 1에 나타냈다.

도 1A에 나타낸 바와 같이, 다이설피람 단독으로는 두경부 편평 상피세포암 세포주의 세포 사멸을 유도하지 않았고, 다이설피람과 구리를 함께 투여한 경우 세포 사멸효과가 나타났다. 도 1B를 참고하면, 유의적인 세포 사멸효과는 FaDu 세포주의 경우 1 μM, Hep2 세포주의 경우 0.5 μM에서 시작하는 것을 확인할 수 있으며, 다이설피람/구리 제제가 농도 의존적으로 세포 생존율을 감소시키는 것을 알 수 있다(p<0.05).

실시예 2: 활성 산소종 ( ROS ) 생산 유도 효과

FaDu 및 Hep2 세포주를 0.5μM, 1.0μM, 1.5μM 및 2.0　μM의　DSF/Cu　로　처리하고, Incucyte　assay를 통해 활성 산소종 생성 정도를　24 시간 동안　분석하였다.　

그 결과, 도 2A에 나타낸 바와 같이 DSF/Cu의 처리가 농도 의존적으로　ROS　생산을　증가시키는 것을 확인 할 수 있었다. 도 2B를 참고하면, FaDu　세포주는 0.5　μM농도의 DSF/Cu를 처리한 경우,　Hep2 세포주는 0.5　μM농도의 DSF/Cu 를 처리한 경우에 통계적으로 유의적인 활성 산소종의 증가 효과가 나타나는 것을 확인할 수 있다(p <0.05).

실시예 3: DSF /Cu의 세포사멸 메커니즘 분석

DSF/Cu가 두경부 편평 상피세포암 세포주에서 아폽토시스를 유발하는지 여부를 확인하기 위해 Annexin V/PI FACS(fluorescence-activated cell sorting)를 수행하였다. 유세포 분석은 DSF/Cu에 의한 아폽토시스의 정량에 이용하였으며, annexin V-fluorescein　isothiocynate　(FITC) 및 propidium iodide (PI) 염색을 이용하여 DSF/Cu로 처리에 의해 아폽톱시스가 유발된 세포의 비율을 확인하였다.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 DSF/Cu 처리군에서 아폽토시스가 유발된 세포의 비율은 FaDu 세포주에서 49%, Hep2 세포주에서 14% 미만이었으며, 이를 통해 다이설피람의 세포사멸이 아폽토시스 또는 네크로시스에 의한 것이 아니라는 것을 알 수 있었다.

따라서, 다음으로 DSF/Cu에 의해 autophagy가 일어나는지 여부를 확인하기 위해 autophagosome 형성에 필요한 Beclin-1과 LC3B I/II의 발현을 웨스턴 블롯으로 검출하였다. 그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, Beclin-1과 LC3B I/II의 발현이 DSF/Cu의 농도에 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다.

또한, autophagy에 관여하는 것으로 알려진 Akt 신호전달이 DSF/Cu에 영향을 받는지 여부를 확인하기 위해 P-JNK, JNK, P-　cJun,　cJun,　P-P38, phospho-Akt　및　total-맛의 발현을 웨스턴 블롯으로 검출하였다. 그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, p-JNK 및 p-p38의　발현 수준은　DSF/Cu 처리 후에　증가한　반면, p-　Ak의 인산화는 감소되었다.　 이러한　결과는　Akt　신호전달의 억제가　DSF/Cu에 의한　autophagy 유도에 관여한다는 것을 시사한다.　

실시예 4: DSF /Cu의 두경부 편평 상피세포암 종양 성장 억제 효과

모든 동물 연구는 고려대학교 IACUC가 승인한 동물 연구 지침에 따라 수행되었다.　 5주 된 암컷 BALB/c 누드 마우스를 Shizuoka Laboratory Animal Center(Shizuoka, Japan)에서 구입하여 특정 병원균이 없는 조건에서 키웠다.　 마우스는 음식과　물을 자유롭게 이용할 수 있도록 하였고, 실험　시작　전에 일주일 동안 적응시켰다.　 100　μL 배양　배지의　FaDu　세포　(2×10⁶⁾를　매트 리겔(Matrigel)　100　μL와　혼합하고,　6주령의 BALB/c 누드 암컷 마우스의 오른쪽 옆구리에 피하 주사　하여 총　2x10　⁶의 FaDu　세포들이 주입되도록 하였다.　 　 용매　(DMSO/PBS) 또는 DSF (50mg/kg/day)를 2 주간 주 5 회 복강 내 주사 하여 용매(DMSO/PBS)만 주사한 군을 대조군으로 하였다.　

그 다음, 대조군과 실험군의 종양　체적　변화를　연속적인　약물의　주입을 시작한 2주 후에 종양의 부피를 매일 측정하였다.　 종양들은　캘리퍼(caliper)를　사용하여　측정하고,　부피는　아래의 식을 이용하여 계산하였다. V = (길이 x 너비　2)/2를　이용하여 계산하였다.

그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, 종양의 성장이 대조군에 비해 DSF를 주사한 실험군에서 유의하게 억제된 것을 확인할 수 있었으며, 본 실험 결과를 통해 in vivo에서는 Cu 없이 DSF만 주입 하더라도 항암 효과가 나타나는 것을 알 수 있다.

이상과 같이 실시예들이 비록 한정된 도면에 의해 설명되었으나, 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기를 기초로 다양한 기술적 수정 및 변형을 적용할 수 있다. 예를 들어, 설명된 기술들이 설명된 방법과 다른 순서로 수행되거나, 및/또는 설명된 구성요소들이 설명된 방법과 다른 형태로 결합 또는 조합되거나, 다른 구성요소 또는 균등물에 의하여 대치되거나 치환되더라도 적절한 결과가 달성될 수 있다.

그러므로, 다른 구현들, 다른 실시예들 및 특허청구범위와 균등한 것들도 후술하는 청구범위의 범위에 속한다.

Claims (7)

1. 다이설피람(Disulfiram)을 유효성분으로 포함하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 다이설피람의 농도는 0.5 μM 내지 2.0 μM인, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 더 포함하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 약학적 조성물은 경구 투여용인, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 약학적 조성물은 정맥 주사용인, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
6. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   활성 산소종(ROS)의 생성을 증가시키는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
7. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   Akt 신호전달을 억제하는, 두경부 편평 상피세포암 치료용 약학적 조성물.
   
   

Images