KR20200036879A - 3세대 egfr 타이로신 키나아제 억제제 및 사이클린 d 키나아제 억제제의 치료적 조합물 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 특히 암, 특히 폐암의 치료에 사용하기 위한, (a) 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 암의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 이러한 조합물의 용도; 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 연계된 치료적 유효량의 상기 조합물을 상기 대상체에 투여하는 단계를 포함하는 방법; 이러한 조합물을 포함하는 제약 조성물 및 이에 대한 상업적 패키지에 관한 것이다.

Description

3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제 및 사이클린 D 키나아제 억제제의 치료적 조합물

본 발명은 인간 대상체에서의 암, 예를 들어 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC)의 치료 방법, 및 이러한 치료에 유용한 제약 조합물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 (a) 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(TKI), 특히 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조합물을 제공한다. 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)의 치료에 사용하기 위한 이러한 조합물; 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서의 이러한 조합물의 용도; 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC) 치료를 필요로 하는 인간 대상체에서 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)을 치료하는 방법으로서, 상기 대상체에게 연계된 치료적 유효량의 상기 조합물들을 투여하는 단계를 포함하는 방법; 이러한 조합물을 포함하는 제약 조성물 및 이에 대한 상업적 패키지가 또한 제공된다.

폐암은 전 세계적으로 가장 흔하고 치명적인 암이며, 비소세포 폐암(NSCLC)이 폐암 사례의 약 85%를 차지한다. 서구 국가에서 10~15%의 비소세포 폐암(NSCLC) 환자는 그의 종양에서 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 돌연변이를 발현하고 아시아 국가에서는 30~40%의 높은 비율이 보고된 바 있다. 우세한 발암성 EGFR 돌연변이(L858R 및 ex19del)는 EGFR NSCLC의 약 85%를 차지한다.

EGFR-돌연변이 환자에게는 1차 요법제로서 EFGR 억제제가 제공된다. 그러나 대부분의 환자에서 일반적으로 10개월 내지 14개월 내에 획득 내성이 발달한다. 1세대 TKI로도 지칭되는, 1세대 가역성 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(TKI), 예컨대 에를로티닙, 게피티닙 및 이코티닙으로 치료한 1차 EGFR 돌연변이가 있는 NSCLC 환자 중 최대 50%에서 2차 "게이트키퍼(gatekeeper)" T790M 돌연변이가 발생한다.

2세대 EGFR TKI(예컨대 아파티닙 및 다코미티닙)는 이러한 내성 기작을 극복하기 위해 개발되었다. 이것은 EGFR ATP 부위에서 시스테인 797에 공유 결합하는 비가역성 제제이다. 2세대 EGFR TKI는 전임상 모델에서 활성화[L858R, ex19del] 및 획득 T790M 돌연변이 둘 다에 대해 강력하다. 그러나, 이의 임상 효능은 가능하게는 수반되는 야생형(WT) EGFR의 억제에 의해 야기되는 심각한 부작용으로 인해 제한되는 것으로 입증되었다. 2세대 억제제에 대한 내성도 곧 발생하며, 사실상 1세대 및 2세대 TKI를 제공받은 모든 환자는 약 9~13개월 후에 내성을 갖게 된다.

이로 인해 3세대 EGFR TKI, 예를 들어 나자르티닙(EGF816), 로실레티닙, ASP8273 및 오시머티닙(Tagrisso®)이 개발되었다. 3세대 EGFR TKI는 WT EGFR을 남겨둔 것(sparing)이며, 또한 활성화 EGFR 돌연변이[예컨대 L858R 및 ex19del] 및 획득 T790M에 대하여 상대적으로 동등한 효력을 갖는다. 오시머티닙은 최근 미국에서, 진행성 EGFR T790M + NSCLC 환자(상기 환자의 질환은 EGFR TKI 치료시에 또는 그 후에 진행됨)의 치료에 대해 승인되었다.

그러나 이 3세대 제제에 대한 내성도 곧 발생한다. 이러한 더 새로운 제제에 대한 내성은 그리 잘 특성화되지 않았지만, 일부 경우에 오시머티닙 치료가 진행 중인 환자의 혈장 샘플에서 발견된 3차 EGFR C797S 돌연변이(문헌[Thress et al., Nature Medicine, 21 (6), 2015, pp 560-562]), MET 또는 FGFR1의 증폭 또는 BRAF 돌연변이(문헌[Ho et al, Journal of Thoracic Oncology, 2016])와 연관된 것으로 밝혀졌다.

따라서, EGFR 타이로신 키나아제 억제제 (TKI), 특히 3세대 EGFR TKI를 이용한 치료 과정에서 (예를 들어, 더 영속적인 차도를 유도함으로써) 내성의 출현을 방지하거나 지연시키는 치료 옵션; 및/또는 EGFR 타이로신 키나아제 억제제, 특히 3세대 EGFR TKI를 이용한 치료 과정에서 획득된 내성을 극복하거나 역전시키는 치료 옵션에 대한 필요성이 여전히 남아있다. 또한 EGFR TKI의 효능에도 불구하고 NSCLC, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 여전히 치유할 수 없기 때문에, 이러한 질환에서의 새로운 치료 옵션을 개발할 필요성이 계속 남아있다.

본 발명자들은 CDK4/6의 불활성화가 EGFR 돌연변이 NSCLC 모델에서 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(예를 들어, EGF816)의 항-증식 효과를 실질적으로 개선한다는 것을 밝혀냈다. 이것은 현재 효과적인 치료법이 존재하지 않는 이 임상 환경에서 효과적인 치료 옵션의 가능성을 열어준다.

따라서, 본 발명의 목적은 암, 특히 비소세포 폐암, 더 특히 EGFR-돌연변이 NSCLC의 치료를 개선하기 위한 치료법을 제공하는 것이다. 특히, 본 발명의 목적은 초기 반응을 심화시키고/시키거나 약물 내성, 특히 EGFR TKI 요법제에 대한 내성의 출현을 방지하거나 지연시키는 안전한 내용성 치료를 제공하는 것이다. 본원에 기술된 제약 조합물은 안전하고 내용성을 가질 것으로 예상되며, 또한 치료-나이브(naive) 및/또는 3세대 EGFR-TKI 나이브, T790M + EGFR-돌연변이 NSCLC(T790M + EGFR-돌연변이 진행성 NSCLC를 포함함)에서 EGF816에 대한 반응의 깊이 및/또는 지속 시간을 개선시킬 것으로 예상된다.

본 발명은 본 발명의 일 양태로서 (a) 3세대 EGFR TKI 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물을 제공한다.

본 발명은 또한 (a) 화학식 I의 화합물, 즉 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판)-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드(본원에서 "화합물 A"로 지칭됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및

(b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물을 제공한다.

바람직한 양태에서, 본 발명은 (a) (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드(본원에서 "화합물 A"로 지칭됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및

(b) 리보시클립 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조합물을 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 리보시클립 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 조합하여 투여하기에 적합한 투약 요법에 관한 것이다. 본 발명은 EGFR TKI 암 치료법의 초기 단계에서 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(TKI)의 치료 효능을 최대화하고, 이어서 3세대 EGFR TKI 및 CDK4/6 억제제의 제약 조합물을, 종양이 최소 잔존 질환 상태에 있을 때 뒤따르는 상대적으로 안정한 질환 제어 기간 동안 투여하는 치료 요법을 제공한다.

본 발명의 치료제는 3세대 EGFR TKI, 예를 들어 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 단일 제제로서, 상대적으로 안정한 질환 제어(즉, 최소 잔존 질환 상태)를 달성하기에 충분한 기간 동안 투여하고, 이어서 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 조합물을 투여하는 것을 포함하는 투약 요법에 따라 유용하게 투여될 수 있을 것으로 예상된다.

따라서, 본 발명은 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 필요로 하는 인간에서 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC을 치료하는 방법을 제공하며, 이는 하기 단계를 포함한다:

(a) 최소 잔존 질환이 달성될 때까지(즉, 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지) 치료적 유효량의 3세대 EFGR 타이로신 키나아제 억제제(예를 들어, 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염)를 단일요법제로서 투여하는 단계; 이어서

(b) 치료적 유효량의, 상기 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(예를 들어, 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염) 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물을 투여하는 단계.

본 발명은 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 필요로 하는 인간에서 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 데 사용하기 위한 3세대 EFGR 타이로신 키나아제 억제제(예컨대 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염)를 제공하며, 여기서,

(a) 최소 잔존 질환이 달성될 때까지(즉, 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지) 3세대 EFGR 타이로신 키나아제 억제제(예컨대 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염)가 단일요법제로서 투여되고;

(b) 그 후 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(예컨대 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염) 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물이 투여된다.

바람직한 양태에서, 본 발명은 또한 (a) 화학식 I의 화합물

(이는 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드(본원에서 "나자르티닙" 또는 "화합물 A"로도 지칭됨)로도 공지됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제(이는 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드(본원에서 "리보시클립" 또는 "화합물 B"로도 지칭됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염임)을 포함하는, 본 발명의 조합물로 지칭되는 제약 조합물에 관한 것이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 암, 특히 비소세포 폐암, 더 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 암, 특히 비소세포 폐암, 더 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 상기 암에 대해 연계된 치료적 유효량의 본 발명의 조합물을 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 암, 특히 비소세포 폐암, 더 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 본 발명의 조합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 암, 특히 폐암(예를 들어 NSCLC)의 치료를 위한, 사이클린 D 키나아제 4/6 억제제, 특히 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염과의 병용 요법에서 사용하기 위한, 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제, 특히 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 제공한다.

암, 특히 폐암(예를 들어 NSCLC)의 치료를 위한, 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제, 특히 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염과의 병용 요법에서 사용하기 위한, 사이클린 D 키나아제 4/6 억제제, 특히 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드, 또는 이의 제약상 허용가능한 염도 제공된다.

도 1: EGF816과 LEE011의 조합물의 상승 효과를 나타내는 EGF816 대 LEE011의 용량 매트릭스 % 억제 값.
도 2: Rb 인산화에 대한 EGF816과 LEE011의 조합물의 영향. EGF816과 LEE011의 조합물에 의한 Rb의 향상된 억제가 관찰되었고 이는 조합물의 상가 효능에 기여할 가능성이 있다.
도 3: 4가지의 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포주(PC9, HCC827, HCC4006, 및 MGH707)에서의 EGF816 및 LEE011의 장기 생존성 실험. 합류는 세포수에 대한 대용으로서 2x/주당 2회(2x) 측정되었고 제0일에 합류의 분율로 표시된다. EGFR 억제제 + CDK4/6 억제제의 조합물은 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포의 재성장을 늦춘다.
도 4: 단일 제제 화합물 A(EGF816) 및 화합물 B(LEE011) 또는 조합물(화합물 A + 화합물 B) 처리의 존재 하에 시간 경과에 따라 기록된 생체 내 종양 부피 변화.
도 5: 단일 제제 화합물 A(EGF816) 및 화합물 B(LEE011)의 단일 제제 또는 조합물(화합물 A + 화합물 B) 처리의 시간 경과에 따른 종양 Rb 인산화의 면역조직화학적 약력학적 분석. EGF816 및 LEE011은 조합되어 Rb 인산화를 억제하며, 이는 NCI-H1975 모델에서 관찰된 종양 성장 억제의 양과 상관된다.

일 양태에서, 본 발명은 3세대 EGFRTKI 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다. 이러한 제약 조합물은 본원에서 "본 발명의 조합물"로 지칭된다.

본 발명은 또한 (a) 하기 화학식 I:

[화학식 I]

의 화합물(이는 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드(본원에서 "화합물 A"로도 지칭됨)로도 공지됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다.

본 발명의 조합물의 바람직한 실시 형태는 (a) 하기 화학식 I:

[화학식 I]

의 화합물인 화합물(이는 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드(본원에서 "화합물 A"로도 지칭됨)로도 공지됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제(이는 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드(본원에서 "리보시클립" 또는 "화합물 B"로도 지칭됨) 또는 이의 제약상 허용가능한 염임)를 포함하는 제약 조합물이다.

3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제

3세대 EGFR TKI는 야생형(WT) EGFR 스페어링(sparing)이며, 또한 활성화 EGFR 돌연변이[예컨대 L858R 및 ex19del] 및 획득 T790M에 대하여 상대적으로 동등한 효력을 갖는다.

본 발명의 제약 조합물 및 본원에 기술된 바람직한 투여량에서 사용되는 바람직한 3세대 EGFR 억제제는 나자르티닙으로, 그리고 "EGF816"으로 또한 공지된 화합물 A이다. 화합물 A는 야생형(WT) EGFR을 남겨 두면서 활성화 및 획득 저항성 돌연변이체(L858R, ex19del 및 T790M)를 선택적으로 억제하는 표피 성장 인자 수용체(EGFR)의 표적화된 공유적 비가역성 억제제이다(문헌[Jia et al, Cancer Res October 1, 2014 74; 1734] 참조). 화합물 A는 임상적 관련 유효 농도에서 WT EGFR 억제를 나타내지 않는 EGFR 돌연변이체(L858R, ex19del 및 T790M) 암 모델 (시험관 내 및 생체 내)에서 유의한 효능을 나타냈다. 용량-의존성 항-종양 효능은 몇몇 이종이식 모델에서 관찰되었고, 화합물 A는 유효 용량에서 체중 손실이 관찰되지 않았고 내용성이 우수하였다.

화합물 A는 T790M을 보유한 진행성 비소세포 폐암(NSCLC)을 앓고 있는 환자에서의 임상 연구에서 영속적인 항종양 활성을 나타낸다는 것이 밝혀졌다(문헌[Tan et al, Journal of Clinical Oncology 34, no.　15 suppl (May 2016)] 참조).

화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조성물은 WO2013/184757에 기술되어 있으며, 이는 그 전체가 본원에 참고로 포함된다. 화합물 A 및 그의 제조 및 이를 함유하는 적합한 제약 제형은 WO2013/184757, 예를 들어 실시예 5에 개시되어 있다. 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 캡슐 제형 또는 정제의 형태의 경구 제약 조성물로서 투여될 수 있다. 화합물 A의 제약상 허용가능한 염은 이의 메실레이트 염 및 히드로클로라이드 염을 포함한다. 바람직하게는 제약상 허용가능한 염은 메실레이트 염이다.

본원에 기술된 조합물 및 본원에 기술된 투여 요법에 유용한 다른 3세대 TKI는 오시머티닙(AZD9291), 올무티닙 (BI 1482694/HM61713), ASP8273, PF-06747775 및 아비티닙을 포함한다.

사이클린 의존성 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제

용어 "사이클린 D 키나아제 4/6"(또는 "CDK4/6") 억제제는 세포가 성장하고 분열하는 방식을 조절하는 데 있어서 핵심적인 역할을 하는, 사이클린-의존성 키나아제(CDK) 4 및 6으로 알려진 효소의 활성을 차단하는 화합물을 지칭하는 것으로 본원에서 정의된다. CDK4/6은 포스파티딜이노시톨 3 키나아제(PI3K) 및 라파마이신의 포유동물 표적(mTOR)을 통해 EGFR 및 다른 수용체 타이로신 키나아제(RTK)의 하류에서 신호전달하여 세포 증식을 촉진한다. 본 출원의 교시를 기반으로 하면, 본원에 기술된 제약 조합물 및 치료 요법에서의 조합 파트너로서의 CDK4/6 억제제, 특히 선택적 CDK4/6 억제제, 예컨대 팔보시클립(PD0332991), 리보시클립(LEE011), 트릴라시클립 및 아베마시클립(LY2835219)은 세포 주기 제어를 회복시키고 종양 성장을 정지시키고 본원에 기술된 암과 같은 경로 이상을 나타내는 암을 가진 환자에게 임상적 이득을 가져다 줄 것으로 기대된다.

본 조합물의 바람직한 사이클린 의존성 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제는 리보시클립 또는 이의 제약상 허용가능한 염이다. 리보시클립은 "LEE011"로도 알려져 있으며, 하기 화학식 II의 화합물이다:

[화학식 II]

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리보시클립의 화학명은 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드이다. 이 화합물은 본원에서 "화합물 B"로도 지칭된다. 리보시클립(Kisqali®)은 최근에 미국에서, 아로마타아제 억제제와 조합되어 HR+/HER2- 전이성 유방암을 위한 1차 치료제로 FDA 승인을 받았다. 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조성물은 그 전체가 본원에 참고로 포함된 WO2010/020675에 기술되어 있고, 화합물 B의 적합한 제조도 WO2010/020675, 예를 들어, 실시예 74에 기술되어 있다.

전임상 시험관 내 실험은 EGFR-돌연변이 NSCLC 세포에서 증식/생존성의 손상에서 화합물 A와 리보시클립 사이의 시너지를 입증하였다. 리보시클립은 pRb의 CDK4/6 특이적 인산화를 억제하고 이에 의해 G1기에서 세포 주기 진행을 정지시킨다. 사이클린 D1은 돌연변이 EGFR 신호전달의 중요한 하류 이펙터이며, 이는 사이클린 D1-CDK4/6 축이 EGFR 돌연변이 NSCLC에서 중요한 역할을 한다는 것을 시사한다(문헌[Kobayashi Cancer Res 2006, Yu Cancer Res 2007]). 따라서, 본원에 기술된 교시를 기반으로 하면, 리보시클립은 CDK4/6 신호전달이 나자르티닙 치료의 맥락에서 저항성 또는 종양 세포 지속성에 기여하는 종양에서 활성을 가질 것으로 예상된다.

달리 명시되지 않거나 본문에 의해 명확하게 표시되지 않는 한, 또는 적용불가능한 것이 아닌 한, 표현 "본 발명의 조합물"은 3세대 EGFR TKI 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 포함하는 제약 조합물과 관련된다. 본 발명의 조합물의 바람직한 실시 형태는 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물이다.

달리 명시되지 않거나 본문에 의해 명확하게 표시되지 않는 한, 또는 적용불가능한 것이 아닌 한, 본 발명의 조합물에 유용한 치료제에 대한 언급은 화합물의 유리 염기 및 화합물의 모든 제약상 허용가능한 염 둘 다를 포함한다.

일 양태에서, 본 발명은 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

일 양태에서, 본 발명은 암, 특히 비소세포 폐암, 더 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

용어 "조합물" 또는 "제약 조합물"은 치료제, 예를 들어, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제가 함께, 독립적으로 동시에 또는 개별적으로 시간 간격 내에 투여될 수 있는 조합된 투여를 위한 부분들의 키트, 비-고정 조합물, 또는 하나의 단위 투여 형태의 고정된 조합물 중 어느 하나를 지칭하는 것으로 본원에 정의되는데, 이는 바람직하게는 조합 파트너들이 협력 효과, 예를 들어 상승 효과를 나타내도록 한다. "고정 조합물"이라는 용어는 치료제, 예를 들어 화학식 I의 화합물 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제가 단일 엔티티 또는 투여 형태의 형태로 존재함을 의미한다.

용어 "비-고정 조합물"은 치료제, 예를 들어 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제가 별개의 엔티티 또는 투여 형태로서, 동시에, 함께 또는 순차적으로, 특정 시간 제한 없이 환자에게 투여됨을 의미하며, 여기서, 바람직하게는 이러한 투여는 이를 필요로 하는 인간의 체내에서 상기 2가지 치료제의 치료적 유효 수준을 제공한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "상승 효과"는 2가지 치료제, 예를 들어 (a) 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 (b) 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4) 억제제가 효과를 생성하는, 예를 들어, 암의 증상 진행, 이의 증상들을 지연시키거나 저항성 발생을 극복하거나 예비치료로 인해 획득된 저항성을 역전시키는 작용을 지칭하는데, 이는 투여된 각각의 치료제 단독의 효과들을 단순히 더한 것보다 더 크다. 예를 들어, 다음과 같은 적합한 방법을 사용하여 상승 효과를 계산할 수 있다: S자형-Emax 방정식(문헌[Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)]), 뢰베(Loewe) 상가도 방정식(문헌[Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)]) 및 중간값-효과 방정식(문헌[Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)]). 상기 언급된 각각의 방정식은 약물 조합의 효과를 평가하는 데 도움을 주는 상응하는 그래프를 생성하기 위해 실험 데이터에 적용될 수 있다. 상기 언급된 방정식과 관련된 상응하는 그래프는 각각 농도-효과 곡선, 이소볼로그램 곡선 및 조합 지수 곡선이다. 시너지는 당업자에게 공지된 방법에 따라 조합물의 시너지 점수를 계산함으로써 추가로 나타낼 수 있다.

용어 "제약상 허용가능한 염"은 화합물의 생물학적 효과 및 특성을 보유하고 전형적으로 생물학적으로 또는 달리 바람직한 염을 지칭한다. 화합물은 아미노 기의 존재에 의해 산 부가염을 형성할 수 있다.

본원에서 달리 지시되지 않거나 맥락에 의해 명백하게 모순되지 않는 한, 본 발명의 설명의 맥락에서(특히 하기 청구범위의 맥락에서) 단수형 용어("a" 및 "an" 및 "the") 및 유사한 언급 대상은 단수형 및 복수형 둘 다를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 복수형이 화합물, 염 등에 사용되는 경우, 이는 또한 단일 화합물, 염 등을 의미하는 것으로 간주된다.

용어 "치료하는" 또는 "치료"는 대상체에서 하나 이상의 증상을 완화, 감소 또는 경감시키거나 질환의 진행 지연에 영향을 미치는 치료를 지칭하는 것으로 본원에서 정의된다. 예를 들어, 치료는 암과 같은 질환의 하나 또는 몇 개의 증상의 감소 또는 질환의 완전한 박멸일 수 있다. 본 발명의 의미 내에서, 용어 "치료하다"는 또한 EGFR 억제제 치료에 대한 내성 발달의 위험 또는 달리 질환의 악화 위험을 감소시키고/시키거나 진행을 저지하고, 지연시키는 것을 나타낸다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "대상체" 또는 "환자"는 암, 바람직하게는 폐암, 예를 들어 NSCLC, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC을 앓고 있는 인간을 지칭한다.

용어 "투여"는 또한 치료제가 반드시 동일한 투여 경로에 의해 또는 동시에 투여될 필요는 없는 치료 요법을 포함하고자 한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "연계된 치료적 활성" 또는 "연계성 치료 효과"는 치료제들이, 치료할 인간 대상체에서 선호하고 여전히 유익한(바람직하게는 상승적인) 상호작용(연계성 치료 효과)을 나타내는 시간 간격으로 개별적으로(시간순으로 시차를 두고, 특히 순서-특이적 방식으로) 제공될 수 있음을 의미한다. 이것이 사실인지는 특히 혈액 수준에 따라 결정될 수 있으며, 이는 두 치료제가 적어도 특정 시간 간격 동안 치료될 인간의 혈액에 존재함을 보여준다.

치료제들의 조합물의 "유효량" 또는 "치료적 유효량"이라는 용어는 본원에서 조합물로 치료되는 암의 임상적으로 관찰가능한 기준선 징후 및 증상에 비하여 관찰가능한 개선을 제공하기에 충분한 양을 지칭하는 것으로 정의된다.

용어 "약"은 주어진 값에서의 통계적으로 허용가능한 변동을 지칭하고, 전형적으로 +/- 5% 또는 10%이다. 반면에, 수치 값이 "약"이라는 용어를 동반하지 않고 인용될 때, 이 수치 값은 당업계에서 통계적으로 허용가능한 그 값의 변동을 포함할 것임이 이해될 것이다.

본원에서 사용되는 바와 같이, "최소 잔존 질환이 달성될 때까지"라는 표현은 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 종양 부담 감소가 5% 미만이 될 때까지를 의미한다.

본원에 제공된 제약 조합물 및 치료 요법은 TKI 치료 나이브 환자인 환자, 즉, NSCLC, 예를 들어 진행성 NSCLC에 대한 사전 치료를 받지 않은 환자에게 유용할 수 있다고 생각된다. 또한 이들 환자는 3세대 EGFR TKI-나이브 환자를 포함하는 것으로 생각된다.

따라서, 본 발명은 EGFR-돌연변이 NSCLC를 포함하는 비소세포 폐암의 1차 치료에 사용하기 위한 본원에 기술된 바와 같은 조합물을 제공한다.

본원에 제공된 제약 조합물 및 치료 요법으로부터 이익을 얻을 가능성이 있는 환자는 또한 예비 치료를 제공받은 환자, 예를 들어 1세대 EGFR TKI(예를 들어 에를로티닙, 게피티닙 및 이코티닙) 및/또는 2세대 EGFR TKI(예를 들어 아파티닙 및 다코미티닙)로 사전 치료를 제공받은 환자를 포함한다.

종양 평가 및 종양 부담 평가는 RECIST 기준(문헌[(Therasse et al 2000), New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16] 및 개정된 RECIST 지침(버전 1.1)(문헌[(Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247]을 기반으로 하여 이루어질 수 있다.

치료에 대한 종양의 반응을 평가하기 위해 하기 표에 기술된 것과 같은 다수의 반응 기준이 사용될 수 있다.

표적 병변에 대한 반응 기준

종양 부담("종양 부하"로도 칭해짐)은 암세포의 수, 종양의 크기 또는 체내의 암의 양을 지칭한다. 암을 앓고 있는 대상체는 하나 이상의 제제를 이용한 치료법에서 진행되었거나, 상기 치료법에 대하여 더 이상 반응하지 않거나, 또는 자신이 앓고 있는 암이 진행되었을 때, 즉, 종양 부담이 증가했을 때, 하나 이상의 제제를 이용한 것에 대하여 내용성이 없는 것을 포함하는 것으로 규정된다. 암, 예컨대 NSCLC 또는 종양의 진행은 새로운 종양의 검출 또는 전이의 검출 또는 종양 축소의 중단에 의해 나타낼 수 있다. 암의 진행 및 종양 부담 증가 또는 감소의 평가는 당업계에 잘 알려진 방법에 의해 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 상기 진행은 암의 육안 검사에 의해, 예컨대 X-선, CT 스캔 또는 MRI에 의해 또는 종양 바이오마커 검출에 의해 모니터링될 수 있다. 암의 증가된 성장은 암의 진행을 나타낼 수 있다. 종양 부담 평가의 평가는 표적 병변의 직경의 합계에서의 기준선으로부터의 퍼센트 변화에 의해 결정될 수 있다. 종양 부담의 감소 또는 증가를 결정하는 종양 부담 평가는 보통 다양한 간격으로, 예를 들어 적어도 1개월, 2개월, 3개월, 바람직하게는 1개월 간격으로 실시되는 연속 평가로 실시될 것이다.

본 발명의 조합물은 폐암의 치료에 특히 유용하다. 본 발명의 조합물에 의해 치료될 수 있는 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)일 수 있다. NSCLC의 가장 일반적인 유형은 편평 세포 암종, 대세포 암종 및 폐 선암종이다. 덜 일반적인 유형의 NSCLC는 다형성, 카르시노이드 종양, 타액선 육종 및 미분류 육종을 포함한다. NSCLC, 특히 폐 선암종은 EGFR의 비정상적인 활성화, 특히 EGFR의 증폭 또는 EGFR의 체세포 돌연변이를 특징으로 할 수 있다.

따라서 치료될 폐암은 EGFR 돌연변이 NSCLC를 포함한다. 본 발명의 조합물은 진행성 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 데 유용할 것으로 생각된다. 진행성 NSCLC는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 가진 환자를 지칭한다. 국소 진행성 NSCLC는 수술을 포함하여 최종적 다중 복합 치료에 순응하지 않는 IIIB기 NSCLC로 정의된다. 전이성 NSCLC는 IV기 NSCLC를 지칭한다.

본원에 기술된 방법에 따라 치료될 수 있는 EGFR 돌연변이 암의 확인을 위해, EGFR 돌연변이 상태가 당업계에서 이용가능한 테스트, 예를 들어 QIAGEN therascreen® EGFR 테스트 또는 기타 FDA 승인 테스트에 의해 결정될 수 있다. therascreen EGFR RGQ PCR 키트는 EGFR 종양 유전자에서의 특정 돌연변이의 검출을 위한 FDA 승인된 정성적 실시간 PCR 분석법이다. EGFR 돌연변이의 증거는 기존의 지역 데이터 및 종양 샘플의 테스트로부터 얻을 수 있다. EGFR 돌연변이 상태는 임의의 이용가능한 종양 조직으로부터 결정될 수 있다.

본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

치료될 암, 특히 폐암, 더 특히 EGFR 돌연변이 비소세포 폐암(NSCLC)은 EGFR C797(이는 EGF816 및 다른 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제의 결합 부위임)의 돌연변이를 보유할 수 있다.

EGFR에서의 C797S 돌연변이(즉, 위치 797에서 시스테인을 세린이 되게 하는 단일 점 돌연변이)는 임상적으로, 오시머티닙으로 치료받은 환자 및 지금까지 EGF816로 치료받은 1명 이상의 환자에서 내성 기작으로서 관찰되었다. EGFR C797S 돌연변이는 EGFR에 3세대 EGFR TKI가 결합하는 것을 방해하는 것으로 가정되며, C797S 돌연변이는 T790M 돌연변이에 대한 상이한 EGFR 대립 유전자에서 발생할 수 있다. 즉, EGFR 돌연변이 NSCLC은 트랜스로 작용하는(in trans) C797m/T790M을 보유할 수 있다. C797S 돌연변이가 T790M 돌연변이와 동일한 EGFR의 대립 유전자에서 발생하는 경우, 상기 돌연변이들은 시스로 작용한다(in cis)고 한다(시스로 작용하는 C797m/T790M).

암, 특히 폐암, 더 특히 비소세포 폐암(NSCLC)은 EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실, EGFR 엑손 20 삽입, EGFR T790M 돌연변이, EGFR T854A 돌연변이, EGFR D761Y 돌연변이, EGFR C797S 돌연변이, 또는 이들의 임의의 조합을 또한 보유할 수 있다.

본 발명의 제약 조합물은 EGFR L858R 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실 또는 이들 둘 다를 보유하는 NSCLC의 치료에 특히 유용할 수 있다. 치료될 NSCLC는 또한 드노보(de novo) 돌연변이 또는 획득 돌연변이일 수 있는 추가의 EGFR T790M 돌연변이를 보유할 수 있다. 획득 돌연변이는 1세대 EGFR TKI(예를 들어, 에를로니티닙, 게피티닙, 이코티닙 또는 이들의 임의의 조합)를 이용한 치료 및/또는 2세대 TKI(예를 들어, 아파티닙, 다코미티닙 또는 이들 둘 다)를 이용한 치료 후에 발생할 수 있다.

본 발명의 제약 조합물은 또한 3세대 TKI, 예를 들어 오시머티닙과 관련하여 치료 나이브인 환자에게 유용할 수 있다. 병용 요법으로부터 이익을 얻을 수 있는 환자는 암, 예를 들어, NSCLC(이는 또한 시스로 작용하는 C797m/T790M(즉, 시스로 작용하는 C797 돌연변이 및 T790M)을 또한 보유함)을 앓고 있는 환자를 포함한다. C797m은 EGFR C797에서의 돌연변이이며, EGF816 및 다른 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제에 대한 내성을 부여한다. 추가로, 이들 환자는 또한 MET 증폭, 엑손 14 스킵 돌연변이, BRAF 융합 또는 돌연변이, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택되는 추가 돌연변이를 갖는 종양을 나타낼 수 있다.

바람직한 실시 형태에서, 치료될 NSCLC는 EGFR 엑손 19 결실, EGFR T790M 돌연변이, 또는 EGFR 엑손 19 결실과 EGFR T790M 둘 다; 또는 EGFR L858R 돌연변이, 또는 EGFR L858R과 EGFR T790M 둘 다로부터 선택되는 EGFR 돌연변이를 지닌다.

또 다른 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR C797S 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC에 사용하기 위한 본 발명의 조합물을 제공한다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR T790M 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

일 실시 형태에서, EGFR T790M 돌연변이는 드노보 돌연변이이다. 용어 "드노보 돌연변이"는 본원에서 EGFR 억제제를 이용한 임의의 치료의 시작 전에 인간에서 검출가능하거나 검출된 유전자 변경을 지칭하는 것으로 정의된다. 드노보 돌연변이는 보통 유전 물질의 복제 오류 또는 세포 분열 오류로 인해 발생한 돌연변이이며, 예를 들어, 드노보 돌연변이는 부모 중 하나의 생식 세포(예를 들어, 난자 또는 정자)의 돌연변이 또는 수정란 그 자체의 돌연변이, 또는 체세포에서 발생하는 돌연변이에 기인할 수 있다.

"드노보" T790M은 EGFR을 억제하는 것으로 공지된 임의의 치료법으로 이전에 치료받은 적이 없는 NSCLC 환자에서의 EGFR T790M 돌연변이의 존재로서 정의된다.

또 다른 실시 형태에서, EGFR T790M 돌연변이는 획득 돌연변이, 예를 들어 암 치료 전에는 검출불가능하거나 검출되지 않지만 암 치료, 특히 하나 이상의 EGFR 억제제, 예를 들어, 게피티닙, 에를로티닙 또는 아파티닙을 이용한 치료의 과정에서는 검출가능하게 되거나 검출되는 돌연변이이다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR C797S 돌연변이, EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실 및 EGFR 엑손 20 삽입으로 이루어진 목록으로부터 선택되는 임의의 다른 돌연변이와 조합된 EGFR T790M 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR C797S 돌연변이, EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실 및 EGFR 엑손 20 삽입으로 이루어진 목록으로부터 선택되는 임의의 다른 돌연변이와 조합된 EGFR T790M 돌연변이(여기서, EGFR T790M 돌연변이는 드노보 돌연변이임)를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR C797S 돌연변이, EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실 및 EGFR 엑손 20 삽입으로 이루어진 목록으로부터 선택되는 임의의 다른 돌연변이와 조합된 EGFR T790M 돌연변이(여기서 EGFR T790M 돌연변이는 획득 돌연변이임)를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 C797S, G719S, G719C, G719A, L858R, L861Q, 엑손 19 결실 돌연변이 및 엑손 20 삽입 돌연변이로 이루어진 군으로부터 선택되는 EGFR 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다. 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 하기 돌연변이 중 적어도 하나를 보유하는 것을 특징으로 하는 암의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다: EGFR L858R 및 EGFR 엑손 19 결실.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 C797S, G719S, G719C, G719A, L858R, L861Q, 엑손 19 결실 돌연변이, 및 엑손 20 삽입 돌연변이로 이루어진 군으로부터 선택되는 EGFR 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하고, 추가로, T790M, T854A 및 D761Y 돌연변이로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 추가 EGFR 돌연변이를 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어, EGFR L858R 돌연변이 또는 EGFR 엑손 19 결실을 보유하고 EGFR T790M 돌연변이를 추가로 보유하는 것을 특징으로 하는 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이며, 여기서, 암은 EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성을 갖거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생하고 있는 중이거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높다. EGFR 타이로신 키나아제 억제제는 에를로티닙, 게피티닙, 아파티닙 및 오시머티닙을 포함한다.

또 다른 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 조합물에 관한 것이며, 여기서, 암은 EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성을 갖거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생하고 있는 중이거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높고, EGFR 타이로신 키나아제 억제제는 에를로티닙, 게피티닙 및 아파티닙으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 조합물은 또한 예후가 불량한 환자, 특히 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC(이는 EGFR 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성을 갖게 됨), 예를 들어, 처음에는 EGFR 억제제를 이용한 치료에 반응하였지만 그 후에 재발된 환자의 암을 갖는 이러한 불량한 예후의 환자를 치료하는 데 적합하다. 추가 예에서, 상기 환자는 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제를 이용한 치료를 제공받은 적이 없다. 이 암은 하나 이상의 EGFR 억제제를 이용한 사전 치료 동안 내성을 획득했을 수 있다. 예를 들어, EGFR 표적화된 치료법은 게피티닙, 에를로티닙, 라파티닙, XL-647, HKI-272(네라티닙), BIBW2992(아파티닙), EKB-569(펠리티닙), AV-412, 카네르티닙, PF00299804, BMS 690514, HM781-36b, WZ4002, AP-26113, 세툭시맙, 파니투무맙, 마투주맙, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 본 발명의 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 이용한 치료를 포함할 수 있다. 특히, EGFR 표적화된 치료법은 게피티닙, 에를로티닙 및 아파티닙을 이용한 치료를 포함할 수 있다. 획득 내성의 기작은 EGFR 유전자 그 자체에서의 제2 돌연변이, 예를 들어 T790M, EGFR 증폭; 및/또는 FGFR 조절 해제, FGFR 돌연변이, FGFR 리간드 돌연변이, FGFR 증폭, MET 증폭 또는 FGFR 리간드 증폭이 발생하는 것을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 일 실시 형태에서, 획득 내성은 EGFR에서의 T790M 돌연변이의 존재를 특징으로 한다.

본 발명의 조합물은 또한 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC을 갖는 환자의 치료에 적합하며, 여기서, 암은 EGFR 억제제를 단독 치료제로서 이용하는 치료에 대하여 내성이 발생하고 있다. EGFR 억제제는 1세대 억제제(예를 들어, 에를로티닙, 게피티닙 및 이코티닙), 2세대 억제제(예를 들어, 아파티닙 및 다코미티닙) 또는 3세대 억제제(예를 들어, 오시머티닙 또는 나자르티닙)일 수 있다.

본 발명의 조합물은 또한 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC를 갖는 환자의 치료에 적합하며, 여기서, 암은 EGFR 억제제를 단독 치료제로서 이용하는 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높다. EGFR 돌연변이를 보유하는 거의 모든 암 환자, 특히 NSCLC 환자는 게피티닙, 에를로티닙, 아파티닙 또는 오시머티닙과 같은 EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대해 시간 경과에 따라 내성이 발생하기 때문에, 상기 환자의 암은 EGFR 억제제를 단독 치료제로서 이용하는 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 항상 높다. 따라서, EGFR C797S 돌연변이, EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실, EGFR 엑손 20 삽입, EGFR T790M 돌연변이, EGFR T854A 돌연변이 또는 EGFR D761Y 돌연변이, 또는 이들의 임의의 조합을 보유하는 암은 EGFR 억제제를 단독 치료제로서 이용하는 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높다.

본원에 제공된 조합물 및 치료 요법은 다음에 적합할 수 있다:

● EGFR 감작 돌연변이(예를 들어, L858R 및/또는 ex19del)를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 갖는 치료 나이브 환자;

● 1세대 EGFR TKI 또는 2세대 EGFR TKI를 이용한 사전 치료 진행 후 EGFR 감작 돌연변이 및 획득 T790M 돌연변이(예를 들어, L858R 및/또는 ex19del, T790M+)를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 가진 환자: 이들 환자는 EGFR T790M 돌연변이를 표적화하는 임의의 제제(즉, 3세대 EGFR TKI)를 제공받은 적이 없는 환자를 포함함.

● EGFR 감작 돌연변이 및 "드노보" T790M 돌연변이를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 갖는 환자(즉, EGFR TKI를 포함하여 EGFR을 억제하는 것으로 알려진 임의의 제제를 이용한 사전 치료가 없음): 이들 환자는 임의의 사전 3세대 EGFR TKI를 제공받은 적이 없는 환자를 포함함.

따라서, 본 발명은 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)을 갖는 환자의 치료 방법을 포함하며, 본 방법은 치료적 유효량의 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및/또는 치료적 유효량의 본 발명의 조합물을, 암, 특히 본원에 기술된 돌연변이 중 하나 이상을 보유하는 폐암(예를 들어, NSCLC)을 갖는 것으로 이전에 결정된 환자에게 선택적으로 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명은 또한 하기 단계를 포함하는, 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)을 갖는 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다:

(a) 환자가 본원에 기술된 돌연변이 중 하나 이상을 보유하는 암을 가짐을 결정하거나 결정한 단계; 및

(b) 치료적 유효량의 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및/또는 치료적 유효량의 본 발명의 조합물을 상기 환자에게 투여하는 단계.

본 발명은 또한 암, 특히 폐암(예를 들어, NSCLC)을 갖는 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 본 방법은 본원에 기술된 돌연변이 중 하나 이상을 갖는 것으로 이전에 결정된 환자에 기초하여 치료할 환자를 선택하는 단계, 및 치료적 유효량의 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및/또는 치료적 유효량의 본 발명의 조합물을 상기 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.

본원에서, "본원에 기술된 돌연변이 중 하나 이상"이라는 표현에는 EGFR C797S 돌연변이, EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실, EGFR 엑손 20 삽입, EGFR T790M 돌연변이, EGFR T854A 돌연변이 또는 EGFR D761Y 돌연변이, 또는 이들의 임의의 조합이 포함된다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명의 조합물 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 담체를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "제약상 허용가능한 담체"는 환자에게 일반적으로 안전한 것으로 인식되는 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 방부제(예를 들어, 항균제, 항진균제), 등장제, 흡수 지연제, 염, 방부제, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 활택제, 감미제, 착향제, 염료, 완충제(예를 들어, 말레산, 타르타르산, 락트산, 시트르산, 아세트산, 중탄산나트륨, 인산나트륨 등) 등 및 이들의 조합을 포함하며, 이는 당업자에게 공지된 바와 같다(예를 들어, 문헌[Remington’s Pharmaceutical Sciences] 참조). 임의의 통상적인 담체가 화합물 A 또는 화합물 B와 불상용성인 경우를 제외하고는, 제약 조성물 또는 약제에서의 그의 용도가 고려된다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 폐암 치료를 위하여 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제와 조합하여 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 더 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 위하여 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 조합하여 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제의 용도에 관한 것이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 상기 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC에 대해 연계된 치료적 유효량의 본 발명의 조합물을 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여하는 단계를 포함한다.

투여량

본원에 인용된 투여량 또는 용량은, 달리 명백하게 언급되지 않는 한, 유리 염기로서 계산된, 완제 의약품에 존재하는 화합물 A 또는 화합물 B의 양을 지칭한다.

본원에 기술된 투약 요법에서 화합물 A가 단일요법제로서 투여될 때, 화합물 A의 용량은 50~350 mg의 범위, 더 바람직하게는 50~150 mg의 범위에서 선택될 수 있다. 화합물 A는 일일 1회 50, 75, 100, 150, 200, 225, 250, 300 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 따라서, 화합물 A는 일일 1회 50, 75, 100 또는 150 mg; 더 바람직하게는 일일 1회 50, 75 또는 100 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 50, 75 또는 100 mg의 용량은 효능의 손실 없이 내용성이 더 우수해질 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 화합물 A는 일일 1회 100 mg의 투여량으로 투여될 수 있다.

병용 요법의 일부로서 투여될 때, 화합물 A는 25~150 mg, 바람직하게는 25~100 mg의 투여량으로, 바람직하게는 일일 1회 투여될 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 화합물 A는 25, 50, 75 또는 100 mg의 투여량으로, 예를 들어 일일 1회 병용 요법의 일부로서 투여될 수 있다. 바람직하게는, 용량은 유리 염기로 지칭되는 원료 의약품 50, 75 및 100 mg으로부터 선택되며, 그 이유는 이러한 용량들이 효능의 손실 없이 내용성이 더 우수할 수 있기 때문이다. 바람직한 실시 형태에서, 화합물 A는 병용 요법의 일부로서 일일 1회 100 mg의 투여량으로 투여된다.

화합물 B의 일일 용량은 200~900 mg의 범위, 바람직하게는 200~600 mg의 범위, 더 바람직하게는 200~400 mg의 범위에서 선택될 수 있다. 화합물 B는 바람직하게는 일일 1회 투여된다. 투여량은 200, 300 또는 400 mg의 화합물 B일 수 있다. 주어진 병용 치료 주기(예를 들어, 28일 주기)에서, 화합물 B는 3주일 주어지고 1주일은 휴약할 수 있을 것으로 생각된다.

본 발명의 제약 조합물의 일부 실시 형태는 하기에 열거되어 있다.

본 발명의 조합물의 개별 치료제들, 즉 3세대 EGFR 억제제 및 CDK4/6 억제제는 치료 과정 동안 상이한 시점에 개별적으로 또는 함께 분할 형태 또는 단일 조합물 형태로 투여될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른, 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 방법은 하기 단계를 포함할 수 있다: (i) 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염 형태의 화합물 A의 투여 단계, 및 (ii) 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염 형태의 사이클린 D 키나제 4/6(CDK4/6) 억제제, 바람직하게는 화합물 B의 투여 단계(임의의 순서로 순차적으로 또는 동시에, 연계된 치료적 유효량으로, 바람직하게는 상승작용적 유효량으로, 예를 들어, 본원에 기술된 양에 상응하는 매일 또는 간헐적 투여량으로).

확립된 테스트 모델에 의하면, 본 발명의 조합물은 앞에서 본원에 기술된 유익한 효과를 초래한다는 것을 알 수 있다. 당업자는 이러한 유익한 효과를 증명하기 위하여 관련 테스트 모델을 전적으로 선택할 수 있다. 본 발명의 조합물 및/또는 본원에 기술된 투약 요법의 약리학적 활성은 예를 들어 이하에 본질적으로 기술된 바와 같이 임상 연구 또는 생체 내 또는 시험관 내 테스트 절차에서 입증될 수 있다.

중요한 일 양태에서, 본 발명은 치료-저항성 질환의 발생을 예방하거나 지연시키는 잠재력을 갖는, 단일 제제 3세대 EGFR 억제제와 비교하여 또는 제2 조합 파트너와 비교하여 임상적 이점을 갖는 치료법을 제공하는 것을 목표로 한다.

본 발명자들은 초기 치료 상황(first line setting)에서의 1세대/2세대 EGFR TKI에 대한 임상 반응 및 2차 이상에서의 EGFR T790M-돌연변이 NSCLC에서의 EGF816에 대한 임상 반응이 일반적으로 최대 종양 반응의 신속한 획득, 이어서 장기간의 상대적으로 안정한 질환의 제어를 특징으로 함을 관찰하였다. 이러한 안정한 질환 제어 기간 동안, 최소 잔존 질환 상태가 있으며, 여기서 종양 조직은 약물-내성 클론(들)의 생장 전에 상대적으로 휴면 상태로 남아 있다. 일단 이 종양 축소 평탄역이 달성되면, 3세대 EGFR 억제제 및 CDK4/6 억제제의 조합물의 투여가 암 치료에 특히 유익할 것으로 생각된다. 단일 제제 치료법 외에 병용 추가 요법(combination add-on therapy)이 생존성 "지속성" 종양 세포의 표적화에 유익할 것이며, 따라서 약물-내성 클론(들)의 출현을 방지할 수 있다.

따라서, 본 발명은 EGFR 억제제, 적합하게는 3세대 EGFR 억제제의 초기 효능 및 본 발명의 조합물의 상승 효과를 이용하는 투약 요법을 제공한다.

본 발명은 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 필요로 하는 인간에서 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 방법을 제공하며, 본 방법은 하기 단계를 포함한다:

(a) 최소 잔존 질환이 달성될 때까지(즉, 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지) 치료적 유효량의 3세대 EFGR 억제제(예컨대 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염)를 단일요법제로서 투여하는 단계; 이어서

(b) 치료적 유효량의, 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물을 투여하는 단계.

본 발명은 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 필요로 하는 인간에서 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 데 사용하기 위한 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 제공하며, 여기서,

(a) 최소 잔존 질환이 달성될 때까지(즉, 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지) 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 단일요법제로서 투여되고;

(b) 그 후 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물이 투여된다.

암의 진행, 종양 부담 증가 또는 감소, 및 EGFR 억제제를 이용한 치료에 대한 반응은 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 모니터링될 수 있다. 따라서, 상기 진행 및 치료에 대한 반응은 암의 육안 검사에 의해, 예컨대 X-선, CT 스캔 또는 MRI에 의해 또는 종양 바이오마커 검출에 의해 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 암의 증가된 성장은 암의 진행 및 치료법에 대한 반응의 결여를 나타낸다. 암, 예컨대 NSCLC 또는 종양의 진행은 새로운 종양의 검출 또는 전이의 검출 또는 종양 축소의 중단에 의해 나타날 수 있다. 종양 부담 감소 또는 종양 부담 증가의 평가를 비롯한 종양의 평가는 RECIST 기준(문헌[(Therasse et al 2000), New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16] 및 개정된 RECIST 지침(버전 1.1)(문헌[(Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247]을 기반으로 하여 이루어질 수 있다. 종양 진행은 치료가 시작된 후 시점들 사이의 종양 상태의 비교에 의해 또는 치료가 시작된 후 시점에서 관련 치료의 시작 전 시점까지의 종양 상태의 비교에 의해 결정될 수 있다.

최소 잔존 질환 상태 또는 안정한 질환 반응의 달성의 결정은 Response Evaluation Criteria In Solid Tumors(RECIST 1.1) 또는 WHO 기준을 사용하여 이루어질 수 있다. 안정한 질환(Stable Disease 또는 SD) 반응은 표적 병변이 부분 관해(PR)에 대한 자격을 갖추기에 충분한 축소를 나타내지도 않고 진행성 질환(PD)에 대한 자격을 갖추기에 충분한 증가도 나타내지 않는 반응으로 정의될 수 있는데, 이는 치료가 시작된 이후 표적 병변의 최장 직경(LD)의 최소 합계를 기준으로 한다. 다른 반응 기준은 다음과 같이 정의 될 수 있다.

완전 관해(CR): 모든 표적 병변의 소실

부분 관해(PR): LD의 기준선 합계를 기준으로 하여, 표적 병변의 LD의 합계가 적어도 30% 감소함

진행성 질환(PD): 치료가 시작된 이후 기록된 LD의 최소 합계를 기준으로 하여 표적 병변의 LD의 합계가 적어도 20% 증가하거나 하나 이상의 새로운 병변의 출현.

단일요법으로서 3세대 EGFR 억제제가 투여되는 치료 기간은 최소 잔존 질환을 달성하기에 충분한 기간이며, 이는 그에 따라 당업자에 의해 용이하게 측정될 수 있다. 치료 기간은 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회 또는 이보다 많은 28일 주기, 바람직하게는 2회 또는 3회 주기로 이루어질 수 있다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명의 조합물 및 본 발명의 조합 물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여하는 것에 대한 설명서를 포함하는 상업적 패키지에 관한 것이다. 일 실시 형태에서, 본 발명은 암, 특히 폐암, 특히 비소세포 폐암(NSCLC), 예를 들어 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한, 3세대 EGFR 억제제 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 바람직하게는 화합물 B 또는 이의 제약상 허용가능한 염과의 동시적, 개별적 또는 순차적 사용을 위한 설명서를 포함하는 상업적 패키지를 제공하며, 바람직하게는 암은 돌연변이 EGFR을 특징으로 하고; 예를 들어, 돌연변이 EGFR은 C797S, G719S, G719C, G719A, L858R, L861Q, 엑손 19 결실 돌연변이, 엑손 20 삽입 돌연변이, EGFR T790M, T854A 또는 D761Y 돌연변이, 또는 이들의 임의의 조합을 포함하며, 바람직하게는 상기 암은 하나 이상의 EGFR 억제제를 이용한 사전 치료 동안 획득된 내성을 갖거나, 하나 이상의 EGFR 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생 중이거나, EGFR 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높다.

하기 실시예는 상기에 기술된 본 발명을 예시하지만, 본 발명의 범주를 어떠한 방식으로도 제한하려는 것이 아니다. 관련 기술 분야의 기술자에게 알려진 다른 테스트 모델도 청구된 발명의 유익한 효과를 결정할 수 있다.

실시예

실시예 1: 근위 바이오마커에 대한 화합물의 표적 활성 및 조합 효과에 대해 입증하기 위한 기계적 조합 연구.

이 실험은 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포주에 대한 화합물 A(EGF816) 및 화합물 B(LEE011)의 조합 효과를 테스트하고, 관찰된 항-증식성 상승 효과가 근위 판독의 기계적 분석을 통해 결정되는 바와 같이 표적에서의 효능에 의해 유도됨을 입증하기 위해 실시한다.

몇몇 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포주를 다음과 같이 상이한 농도의 EGF816와 LEE011의 조합물로 72시간 동안 처리하였다. NCI-H1975(돌연변이 L858R, T790M을 가짐), PC-14(돌연변이 ex 19 del 또는 엑손 19 결실을 가짐), HCC827(돌연변이 ex19del을 가짐) 및 HCC4006(돌연변이 ex19del을 가짐) 세포를 가습 5% CO2 인큐베이터에서 37℃에서 10% 소 태아 혈청(GIBCO, 카탈로그 번호 F4135)이 보충된 RPMI-1640 성장 배지(ATCC, 카탈로그 번호 20-2001)에서 배양하였다. 기계적 연구를 위해, 세포를 각각 HCC827, NCI-H1975, HCC4006 및 PC-9(엑손 19 결실 돌연변이를 가짐)의 경우 웰당 400k, 400k, 100K 및 50k 세포의 밀도로 조직 배양용 처리 6웰 플레이트(Corning 3506)에 접종하고, 하룻밤 부착시켰다. 그 후, 세포를 0, 0.12, 0.333 μM의 EGF816 대 0, 0.312, 2.5 μM의 LEE011의 농도로 EGF816 및 LEE011의 3x3 매트릭스 조합 처리에 노출시켰다. 72시간의 처리 후, 세포를 프로테아제 억제제 칵테일(Sigma P8340), 포스파타아제 억제제 칵테일 2(Sigma P5726) 및 포스파타아제 억제제 칵테일 3(Sigma P0044)을 함유하는 100 μl/웰의 RIPA 완충액(Sigma R0278)에 용해시켰다. 세포를 얼음 상에서 10분 동안 용해시켰으며, 이때 Cell Lifter(Corning 3008)를 사용하여 긁어냈다. 그 후, 용해물을 4℃의 Eppendorf 5417R 마이크로-원심분리기에서 14000 rpm에서 마이크로-원심분리하였다.

웨스턴 블롯

용해물의 총 단백질 함량을 제조사의 지시에 따라 BCA 분석(Pierce 23227)에 의해 결정하고, 샘플은 200 mM DTT를 함유하는 Invitrogen LDS Sample Buffer(NP0007)를 사용하여 웨스턴 블롯용으로 준비하고, 95℃에서 10분 동안 끓이고, 마이크로-원심분리하고, 웰당 20 μg의 총 단백질을 로딩하였다. NuPAGE 4~12% 비스 트리스 겔(Invitrogen WG1402BOX)(MOPS 러닝(running) 완충액(Invitrogen NP0001)을 사용함)을 사용하여 분자량을 기반으로 하여 단백질을 분리하였다. 그 후 니트로셀룰로오스 전달 스택(InvitrogenIB301001)을 갖춘 iBLOT 겔 전달 장치(Invitrogen)를 사용하여 단백질을 니트로셀룰로오스 막으로 옮겼다. 그 후, 로킹 플랫폼(rocking platform)에서 실온에서 최소 1시간 동안 5% 탈지유를 함유하는 TBS-T(0.1 % w/v)로 막을 차단하였다. 포스포 EGFR Y1068, 포스포 Rb S807/811, 사이클린 D1 및 GAPDH에 대한 항체를 다음의 공급처(각각 Cell Signaling #3777, Cell Signaling #8516, Abcam ab16663, Millipore MAB374)로부터 획득하고, 제조사의 지시에 따라 희석하고, 4℃에서 하룻밤 인큐베이션하였다. 하룻밤 인큐베이션한 후, 막을 최소 3x 5분 세척을 위하여 TBS-T(0.1%(w/v))로 세척하였다. HRP 콘쥬게이션 항체(당나귀 항 토끼 IgG HRP Amersham NA934, 당나귀 항 마우스 IgG HRP Amersham NA931)를 5% 탈지유 함유 TBS-T(0.1%(w/v))에 희석시키고, 막에서 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 막을 최소 3x 5 분 세척을 위해 TBS-T(0.1%(w/v))로 세척하고, 그 후 화학발광 시약(Pierce 34096)에 노출시키고, GE Imagequant LAS4000을 사용하여 이미징하였다.

증식 분석

세포는 8-채널 표준 카세트를 갖춘 MultiDrop Combi(Thermo-Fisher)를 사용하여 웰당 1000개의 세포의 밀도로 384웰 플레이트(Thermo Scientific, 카탈로그 번호 4332)에 80 μl의 배지를 이용하여 접종하였다. 전체 웰에 걸쳐 세포의 균일한 분포를 촉진하기 위해, 세포를 1000 RPM에서 잠시 원심분리하고 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 화합물 첨가 전에 모든 플레이트를 37℃, 5% CO2에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 화합물 스톡을 적절한 배양 배지 중에 신선하게 제조하고, 200nl 핀 툴이 장착된 PAA 로봇을 사용하여 첨가하였다. 최소 3개의 중복 웰에서, 72시간 후 단일 제제 및 조합 효과를 현미경 이미징으로 평가하였다. 이미징을 위하여, 세포를 플레이트에 고정시키고, 제어된 분배 속도를 갖는 WellMate 디스펜서를 통해 PBS 중 10% PFA, 0.3% TX-100의 용액을 투과시켰다. 세포핵을 Hoechst 33342(H3570, Invitrogen)로 염색하고, 필요한 모든 세척 단계를 BioTek 세척기로 수행하였다.

InCell Analyzer 2000(GE Healthcare, 28-9534-63)으로부터의 이미지는 TIFF 형식이며 크기는 2048x2048 픽셀이며, 이는 384웰 플레이트의 전체 웰을 캡처하였다. 자동화 이미지 분석 파이프라인은 오픈 소스, 통계 프로그래밍 언어 R의 맞춤형 스크립트 및 BioConductor 패키지 EBImage의 기능을 사용하여 확립하였다. 목표는 세포 생존력에 대한 근사치로서 웰당 생존성 핵(세포)의 수를 정량화하는 것이었다. 상기 파이프라인은 다음의 7단계로 이루어졌다: (I.) 강도 피크 수를 줄이기 위한 이미지의 평활화, (II.) 전경(신호)과 배경(노이즈)를 분리하기 위한 임계값 기능의 적용, (III. ) 핵에 대한 시드(seed)로서의 역할을 하는 전경에서의 국소 최대치의 식별, (IV.) 근접한 국소 최대치의 필터링, (V.) 잔존 국소 최대치로부터 핵의 전파, (VI.) 및 전파된 핵으로부터의 대상 특징의 추출(핵의 수, 크기 특징 및 강도 특징). 마지막 단계 (VII.)로서, 잔사(예를 들어, 단편화된 핵)을 카운팅에서 제외하기 위해, DMSO- 및 스타우로스포린-처리된 웰에서 확인된 대상을 이용하여 각각 생존성 핵 및 단편화된 핵에 대한 특징 분포를 수득하였다. 이를 이용하여 생존성 핵과 단편화된 핵을 구별하는 컷오프를 설정하였다. 단편화된 핵의 수를 식별된 대상의 총 수에서 차감하였으며 그 결과를 그 웰에 대한 최종 카운트로서 보고하였다.

결과

테스트한 세포주는 둘 다의 화합물을 이용한 단일 제제 처리에 대해 상당한 민감성을 나타냈으며, 이는 분석 과정에 걸친 세포 성장의 감소에 의해 강조되었다. 그리드 용량 매트릭스 전체에 걸쳐 관찰된 값과 뢰베 모델 값 사이의 차이로부터 계산된 시너지 점수를 통해 CHALICE 소프트웨어를 사용하여 뢰베 상가도 모델과 비교하여 시너지를 평가하였다. 뢰베 익세스(Loese Excess) 그리드 매트릭스 내에서 더 큰 값은 증가된 시너지가 관찰되는 농도를 나타낸다. 상기 기술 및 계산에 대한 더 상세한 설명은 문헌[Lehar et al. "Synergistic drug combinations improve therapeutic selectivity", Nat. Biotechnol. 2009, July; 27(7), 659-666]에서 발견할 수 있다.

조합하여 처리하는 경우, 8x8 그리드 용량 매트릭스 내에서 도시되는 증가하는 뢰베 익세스 값에 의해 강조되는 바와 같이, 테스트한 세포주 전체에 걸쳐 시너지 수준이 관찰되었으며, 이때 항-증식 효과는 상승적으로 증가한 것으로 관찰되었다(도 1(이는 72시간 시점에서의 값을 보여줌)).

4가지의 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포(PC-14, NCI-H1975, HCC827 및 HCC4006)를 72시간의 기간 동안 단독의, 그리고 조합된 EGF816 및 LEE011로 처리하였다. 그 후 세포를 수집하고 단백질 용해물을 포스포-EGFR(EGFR Y1068), 포스포-Rb(Rb S807/811), 사이클린 D1 또는 GAPDH에 대하여 면역블롯 분석하였다. EGFR 인산화는 EGF816에 의해 모든 세포주에 걸쳐 용량 의존적 방식으로 억제되는 반면, 레티노블라스토마(Rb) 인산화는 4가지 세포주 중 3가지에서 LEE011 단일 제제에 의해 억제된다. EGF816과 LEE011의 조합물은 4가지 세포주 중 3가지에서 Rb 인산화의 양을 감소시켰다(도 2).

다양한 조합 시너지 수준은 기계적 판독과 상관 관계가 있으며, 이때 더 높은 상승작용성의 세포주는 둘 다의 화합물에 의해 영향을 받는 Rb 인산화를 포함하여 근위 및 원위 둘 다에서의 표적에서의 활성을 나타내는 기계적 마커에 대한 더 큰 영향을 나타낸다.

따라서, EGF816과 LEE011의 조합물은 기계적으로 조합되어 Rb 인산화를 억제하는 것으로 밝혀졌는데, 이는 관찰된 항-증식 시너지의 양과 상관 관계가 있다. EGF816과 LEE011의 조합물에 의한 Rb의 이러한 향상된 억제는 임상 환경에서의 상기 조합물의 상가적 효능에 기여할 가능성이 있을 수 있다.

실시예 2: 장기 생존성 연구: EGFRi + CDK4 /6i의 조합물은 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포의 재성장을 늦춘다.

PC9(3,000개/웰), HCC827(10,000개/웰), HCC4006(5000개/웰), 및 MGH707(5000개/웰) 세포를 96웰 플레이트 내에 플레이팅하고, 다음날 단독의, 또는 LEE011(1000 nM)과 조합된 EGF816(300 nM)으로 4주 동안 처리하였다. 약물은 일주일에 2회 리프레쉬하였다. 세포 합류를 세포수의 대용으로 사용하였고 처리 시작시에, 그리고 그 후 주당 2회(2x) 인큐사이트 줌(incucyte zoom)(Essen Biosciences)으로 측정하였다.

EGF816을 이용한 단일 제제 처리는 테스트한 4가지 EGFR 돌연변이 NSCLC 세포주(PC9, HCC827, HCC4006 및 MGH707)에서 다양한 정도의 아폽토시스 및 세포 주기 정지를 초래하지만, 모든 경우에 세포는 EGFRi의 존재 하에 4주 처리 시간 코스의 마지막까지 서서히 재성장하기 시작할 수 있다. 이 재성장이 CDK4/6의 잔존 활성에 의해 매개되는지를 테스트하기 위해, LEE011을 EGF816과 조합하였다. 모든 경우에 있어서, 상기 조합물은 EGF816 약물-내용성 세포의 재성장을 늦추었으며, 따라서 이는 LEE011과 조합된 LEE011의 상가적 효능을 입증하였다(도 3(도 3에서의 용어 "816+LEE"는 "EGF816과 LEE011"의 조합물을 지칭함)).

실시예 3: 단독의, 또는 조합된 화합물 A 및 화합물 B의 생체 내 효능 연구

EGFR 돌연변이, L858R 및 T790M을 보유한 환자 유래 이종이식편 모델에서, 하기에 논의된 바와 같이 화합물 B 및 화합물 A 공동 처리에 의해 생체 내에서 조합 활성을 관찰하였다(도 4).

종양 세포 배양

NCI-H1975 세포는 10%의 소 태아 혈청, 2 mM의 글루타민, 100 단위/mL의 소듐 페니실린 G, 25 μg/mL의 겐타마이신 및 100 μg/mL의 스트렙토마이신 술페이트를 함유하는 RPMI 1640 배지에서 중간-로그기까지 성장시켰다. 종양 세포를 5% CO₂ 및 95% 공기의 분위기에서 37℃의 가습 인큐베이터에서 조직 배양 플라스크에서 배양하였다.

생체 내 이식 및 종양 성장

마우스에서의 이식에 사용한 NCI-H1975 세포를 대수기 성장 동안 수확하고 50% Matrigel™(BD Biosciences)을 함유하는 냉 PBS에 재현탁시켰다. 각 마우스에 1 x 107개의 세포(0.2 mL의 세포 현탁액)를 오른쪽 옆구리에 피하 주사하였다. 평균 부피가 원하는 100 내지 150 mm³ 범위에 근접함에 따라 종양을 2차원으로 캘리퍼스로 재서 성장을 모니터링하였다.

테스트 물품

화합물 A(EGF816)와 화합물 B(LEE011)를 -20℃에서 보관하고 보관 및 취급 동안 차광하였다. 화합물 A(유리 염기)를 0.5% MC/0.5% Tween® 80에 용해시키고 투명 용액이 얻어질 때까지 와동시켰다. 투약 용액을 매일 신선한 상태로 제조하고 4℃에서 보관하였다. 투약 용액을 매주 신선하게 제조하고 4℃에서 보관하였다. 화합물 B(숙시네이트 염으로서, 79%의 유리 염기)를 탈이온수(비히클 1) 중 0.5% 메틸셀룰로오스 중에 9.454 mg/mL(10 mg/mL의 유리 염기)로 용해시켰다. 투약 용액을 매주 신선하게 제조하고, 4℃에서 보관하고, 차광하였다.

치료 계획

화합물 A(유리 염기)를 연속 45일 동안(일일 1회(qd) x 45) 경구(p.o.) 투약하였다(10 mg/kg 또는 30 mg/kg의 유리 염기). 화합물 B(숙시네이트 염)를 94.94 mg/kg(80 mg/kg의 유리 염기와 등가임), po, qd x 21 또는 qd x 45로 투약하였다. 또한 10 mg/kg 및 32 mg/kg의 화합물 A(유리 염기)를 화합물 B(숙시네이트 염)와 함께, p.o., qd x 45로 투약하였다. 대조 마우스는 화합물 A(유리 염기) 및 화합물 B(숙시네이트 염), 비히클을, po, qd x 21로 투여받았다. 투약 부피, 10 mL/kg(0.2 mL/20 g 마우스)는, 이전 금요일 BW(체중)가 이월되는 주말을 제외하고, 투약일에 측정된 각 동물의 체중에 맞추어 조정하였다.

도 4는 생체 내에서 단일 제제 화합물 A(EGF816)가 유의한 종양 퇴행을 초래하였으며, 이는 더 높은 용량에서 증가함을 보여준다. 단일 제제 화합물 B(LEE011 또는 리보시클립)는 테스트한 모델에서 단일 제제 활성을 나타내지 않았지만, 더 낮은 화합물 A 용량의 효과를 증가시켰으며, 이는 조합 시너지를 강조하는 것이다.

면역조직화학(IHC)

단독의, 또는 조합된 화합물로 처리한 NCI-H1975(돌연변이 L858R, T790M을 가짐) 종양에서 시간 경과에 따른 면역조직화학적 분석을 수행하여, 표적에서의 활성의 약력학적 근위(LEE011) 및 원위(EGF816) 마커, Rb 인산화의 감소에 대한 영향을 입증하였다.

토끼 단클론 항-인간 항체인 포스포 Rb(Ser807/811)는 Cell Signaling Technology(카탈로그 번호 8516)로부터 획득하였다. 1:400의 항체 희석물에서 Ventana Discovery XT 오토스테이너에서 IHC를 수행하였다. IHC 염색 후, 슬라이드를 증가하는 농도의 에탄올(95~100%), 그 후 자일렌에서 탈수시킨 후 커버슬립핑하였다. IHC 슬라이드를 광학 현미경으로 평가하고 Leica/Aperio ScanScope 슬라이드 스캐너(미국 캘리포니아주 비스타)로 스캐닝하였다. Aperio 컬러 디컨볼루션 알고리즘을 사용하여 전체 샘플에 대해 IHC 이미지 분석을 적용하였다. 이미지 분석 점수는 강, 중 및 저 포지티브 디지털 신호를 인간 판독성 점수(0~300, 점수 = % 약 포지티브 X1 + % 중 포지티브X2 + % 강 포지티브X3)로 카운팅하였다.

결과

생체 내에서, 단일 제제 EGF816은 유의한 종양 퇴행을 초래하였으며, 이는 더 높은 용량에서 증가하였다. 단일 제제 LEE011(리보시클립)은 테스트한 모델에서 단일 제제 활성을 나타내지 않았지만, 더 낮은 EGF816 용량의 효과를 증가시켰으며, 이는 긍정적인 기능적 조합 시너지를 강조하는 것이었는데, 이는 또한 EGF816 및 LEE011 표적 둘 다의 하류에 있는 포스포 Rb의 약력학적 판독에 반영되었다(도 5). 요약하면, 실시예 1 내지 3은 EGFR-돌연변이 NSCLC에서 EGFR 및 CDK4/6의 억제성의 조합이 항-증식 효능의 증가를 초래할 수 있음을 입증한다. 장기 생존성 실험에 의하면 LEE011의 첨가가 다수의 모델에서 EGF816 약물-내용성 세포의 성장을 늦추는 것으로 나타났다. 이러한 상승 효과는 Rb 인산화 억제에 대한 증가된 영향에 부분적으로 반영된다. 이와 함께, 이러한 데이터는 EGF816과 LEE011의 조합물이 치료-내용성 질환의 성장을 지연시킬 수 있고 클리닉에서 상가적 이익을 제공할 수 있음을 시사한다.

실시예 4: EGFR -돌연변이 NSCLC 환자에서 리보시클립과 조합된 EGF816의 I b상 , 공개(open-label), 용량 증가 및/또는 용량 확장 연구.

이 연구를 위한 적격 환자는 현재 어떤 치료법으로도 치유할 수 없는 질환인 진행성 EGFR-돌연변이 NSCLC를 가진 환자이다. 1차, 치료-나이브 환자 또는 획득 EGFR T790M 게이트키퍼 돌연변이가 있고/있거나 이전 3세대 EGFR TKI에 대하여 나이브 상태인 환자에서의 단일 제제로서의 EGF816(화합물 A)을 이용한 치료는 대다수의 환자에서 임상적 이익을 초래할 것으로 예상된다. 그러나, 모든 환자는 단일 제제 EGF816에서의 소정의 기간 후 치료 저항성 및 궁극적 질환 진행이 발생할 것으로 예상된다.

리보시클립은 CDK4/6 신호전달이 EGF816 치료의 맥락에서 내성 또는 종양 세포 지속성에 기여하는 종양에서 활성을 가질 것으로 예상된다. 상기에 나타낸 바와 같이, 전임상 실험은 EGFR-돌연변이 NSCLC 세포에서 증식성/생존성의 손상에서의 EGF816과 리보시클립 사이의 시너지를 입증하였다. 리보시클립은 CYP3A4/5의 억제제이기 때문에, 함께 투여될 때 EGF816의 노출을 증가시킬 가능성이 있다.

따라서 이 연구는 EGF816의 임상 효능을 향상시키는 그의 잠재력을 뒷받침하는 합리적인 근거를 갖는다. 이 연구의 잠재적 이점은 치료-저항성 질환의 출현을 예방하거나 지연시키는 잠재력을 갖는, 단일 제제 EGFR TKI와 비교하여 개선된 임상적 이점이다.

연구 설계

이것은 진행성 EGFR-돌연변이 NSCLC를 가진 성인 환자에서 리보시클립과 조합된 EGF816의 용량 확장이 뒤따르는, 리보시클립과 조합된 EGF816의 Ib상, 공개, 비-무작위 용량 증가 연구이다. 환자는 진행된 환경(advanced setting)에서 치료-나이브이고 EGFR에서의 감작 돌연변이(ex19del 또는 L858R)를 보유하거나, 또는 1세대 또는 2세대 EGFR TKI(예를 들어 에를로티닙, 게피티닙, 아파티닙)에서 진행되고 종양 내에 EGFR T790M 돌연변이를 보유해야 한다. 환자는 이전에 3세대 EGFR TKI(예를 들어 오시머티닙, 로실레티닙, ASP8273)를 투여받은 적이 없어야 한다.

포함 기준

이 연구에 포함시키기에 적격인 환자는 하기 기준을 충족시켜야 한다:

· 18세 이상의 환자(남성 또는 여성).

· 환자는 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 국소 진행성(IIIB기) 또는 전이성(IV기) EGFR 돌연변이(ex19del, L858R) NSCLC를 가져야 한다.

· EGFR 돌연변이 상태 및 이전 라인의 치료의 요건:

● EGFR 감작 돌연변이(예를 들어, L858R 및/또는 ex19del)를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 갖는 치료 나이브 환자는 진행성 NSCLC에 대한 전신 항신생물 치료를 제공받은 적이 없으며 EGFR TKI 치료를 받을 자격이 있다. EGFR 엑손 20 삽입/복제 환자는 자격이 없다. 주: 진행된 환경에서 단지 한 사이클의 화학요법을 제공받은 적이 있는 환자는 허용된다.

● 1세대 EGFR TKI(예를 들어 에를로티닙, 게피티닙 또는 이코티닙) 또는 2세대 EGFR TKI(예를 들어 아파티닙 또는 다코미티닙)를 이용한 사전 치료의 진행 후, EGFR 감작 돌연변이 및 획득 T790M 돌연변이(예를 들어, L858R 및/또는 ex19del, T790M+)를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC를 갖는 환자. 이들 환자는 EGFR TKI를 포함하여, 진행된 환경에서 4차 초과의 이전 항신생물 치료를 받지 않았을 수 있고, EGFR T790M 돌연변이를 표적화하는 제제(즉, 3세대 EGFR TKI)를 받지 않았을 수 있다. EGFR 돌연변이 테스트는 EGFR TKI에서의 진행 후 수행해야 한다.

● EGFR 감작 돌연변이 및 "드노보" T790M 돌연변이를 갖는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC 환자(즉, EGFR TKI를 포함하여 EGFR을 억제하는 것으로 알려진 임의의 제제를 이용한 사전 치료는 없음). 이들 환자는 진행된 환경에서 3차 초과의 이전 항신생물 치료를 받지 않았을 수 있고 이전 3세대 EGFR TKI를 제공받지 않았을 수 있다.

· ECOG 수행 상태: 0~1

증가 및 확장 파트에 있는 모든 환자는 약 5회의 28일 주기(치료 기간 1) 동안 단일 제제로서의 EGF816 100 mg을 qd로 투여받으며, 그 후 리보시클립과 조합된 EGF816 100 mg을 qd로 투여받는다(치료 기간 2).

병용 치료에 대한 할당은 부분적으로 대략 4회 주기의 EGF816 치료 후 수집된 종양 샘플 및 cfDNA의 표적화 게놈 프로파일링 결과에 기초한다.

병용 치료를 받는 환자는 또한 시스로 작용하는 EGFR C797 돌연변이 및 /T790M을 특징으로 하는 종양을 가진 환자를 포함한다. 시스로 작용하는 C797 돌연변이 및 T790M을 특징으로 하는 종양을 가진 환자도 포함되며, 이는 또한 MET 증폭 또는 엑손 14 스킵 돌연변이 및/또는 BRAF 융합 또는 돌연변이를 나타낸다. C797 돌연변이는 EGF816의 작용 방식에 대한 직접적인 저항 기작이다. 리보시클립은 변경된 EGFR, BRAF 및 MET의 하류의 공통 모드를 차단한다. 따라서 조합 파트너로서의 리보시클립은 이러한 환자에게 유용한 치료법이 될 것으로 예상된다.

효능 평가를 치료 동안 기준선 및 8주마다(두 주기마다) 수행한다. 따라서, 환자가 병용 치료를 시작하기 전에 2개 이상의 기준선 이후 효능 평가가 얻어졌을 것이다. 병용 치료를 시작하기 전에 질환 진행을 경험하는 환자는 임상적 이익을 경험한 환자에 대해 예외가 이루어지지 않는 한 연구에서 중단된다.

시작 용량

화합물 A의 일일 용량은 또한 25, 50, 75, 100 또는 150 mg으로부터 선택될 수 있다.

이 조합 연구를 위해, EGF816(화합물 A)은 연속 매일 투약 일정으로 100 mg을 qd(정제; 음식과 함께 또는 음식 없이)로 투여한다. 이전 연구에서 EGF816에 대한 전체 반응률은 매일 100 mg과 매일 150 mg에서 유사하지만 더 낮은 비율의 발진 및 설사가 매일 100 mg에서 관찰되었다. 따라서, 특히 조합이 중복 독성을 초래하는 한편 EGFR-돌연변이 NSCLC에 대한 효능을 유지하는 경우, 150 mg보다 내용성이 더 우수할 것으로 예상되므로, 처음에는 EGF816의 100 mg의 일일 용량이 선택된다. 100 mg qd 용량은, 단일 제제 EGF816과 비교하여 약물-약물 상호작용이 100 mg qd에서 EGF816의 노출을 증가시킬 수 있는 조합물에 대해 충분히 큰 내용성 한계를 제공할 것으로 예상된다. 권장 요법이 여전히 결정되어야 하는 조합물의 첫 번째 코호트(cohort)(들)로부터의 PK 데이터를 기반으로 하면, EGF816 노출을 100 mg qd에서의 EGF816 단일 제제의 노출에 가깝게 유지하기 위해 EGF816 노출을 증가시키는 조합물에서 EGF816 용량이 감소될 수 있다.

리보시클립 시작 용량은 연속 투약 일정으로 200 mg q.d(정제; 음식과 함께 또는 음식 없이)이며 600 mg qd까지 증가될 수 있고; 3주 투약/1주 휴약의 투약 일정이 또한 모색될 수 있다. 이 리보시클립 요법은 단일 제제 리보시클립에 대한 MTD의 대략 30%(900 mg qd, 3주 투약/1주 휴약)이다. 리보시클립은 EGF816의 노출을 증가시킬 것으로 예측되기 때문에, 상기 주기의 코스에 걸쳐 EGF816 노출이 변화하는 것을 피하기 위해 시작 요법에 있어서 리보시클립의 연속 투약이 선택된다. EGF816은 리보시클립 노출에 영향을 주지 않을 것으로 예상된다.

리보시클립과 조합된 EGF816에 대하여 제안된 시작 요법은 EGF816 100 mg 및 리보시클립 200 mg이며, 이들 각각은 일일 1회 연속적으로 투여된다. 이러한 사전 안전성 데이터와 DDI(Drug-Drug Interaction)에 대한 가정을 기반으로, 시작 용량 조합은 BLRM 내의 EWOC 기준을 충족한다.

연속 투약은 치료 주기 지속 기간 동안 중단 없이 제제를 투여하는 것을 의미한다. 따라서 일일 1회 연속 투여는 주어진 치료 기간 동안 휴약일 없이 일일 1회 치료제를 투여하는 것을 지칭한다.

EGFR-돌연변이 NSCLC를 갖는 환자에서 리보시클립과 조합된 화합물 A의 안전성 및 내용성을 특성화하고 권장 용량 및 요법을 결정하기 위해 연구의 용량 증가 파트의 설계를 선택하였다. 필요한 경우, 용량 증가는 리보시클립과 조합된 화합물 A의 MTD(최대 내용 용량(Maximum Tolerated Dose))를 확립할 수 있게 하며 베이지안 로지스틱 회귀 모델(Basian Logistic Regression Model, BLRM)에 의해 가이드될 것이다.

BLRM은 암 환자에서 최대 내용 용량(MTD)을 개산하기 위한 잘 확립된 방법이다. 적응형 BLRM은 연구 중인 향후 환자에서 용량 제한 독성(DLT)의 위험을 제어하기 위해 과도용량이 제어된 용량증가(escalation with overdose control; EWOC) 원칙에 의해 가이드될 것이다. 소규모 데이터세트에 대한 베이지안 응답 적응 모델의 사용은 EMEA(2007년 2월 1일자의 "소규모 집단에서의 임상 시험 지침")에 의해 승인되었으며 수많은 출판물에 의해 보증되었고(문헌[Babb et al 1998, Neuenschwander et al 2008, Neuenschwander et al 2010]), 이의 개발 및 적절한 사용은 FDA’s Critical Path Initiative의 한 측면이다.

선택된 용량 수준

후속 조합 코호트에 대한 EGF816 용량 수준(100, 75 또는 50 mg)의 선택은 초기 조합 코호트(들)의 EGF816 PK에 의존할 것이다.

[표]

치료 지속 기간 :

환자는 RECIST 1.1에 의한 질환 진행, 허용불가능한 독성, 새로운 항신생물 치료법의 시작, 조사자 또는 환자의 재량에 따른 중단, 추적 관찰 불가, 사망 또는 연구 종료까지 지정된 치료를 계속 받는다.

본 연구의 목적 및 관련 종점:

Claims (30)

1. 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(TKI) 및 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제의 제약 조합물.
2. 제1항에 있어서, 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제는 하기 화학식 I의 화합물인 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염인 제약 조합물:
   [화학식 I]
   

   
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제는 리보시클립, 또는 이의 제약상 허용가능한 염인 제약 조합물.
4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 화학식 I의 화합물의 제약상 허용가능한 염은 메실레이트 염 또는 히드로클로라이드 염, 바람직하게는 메실레이트 염인 제약 조합물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 동시 사용, 개별 사용 또는 순차적 사용을 위한 제약 조합물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에서의 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조합물.
7. 제6항에 있어서, 암은 폐암인 제약 조합물.
8. 제7항에 있어서, 폐암은 비소세포 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 비소세포 폐암인 제약 조합물.
9. 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 EGFR의 이상 활성화, 특히 EGFR의 증폭, 또는 EGFR의 체세포 돌연변이를 특징으로 하는 제약 조합물.
10. 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 암을 앓고 있는 환자는 치료 나이브 환자(즉, EGFR 돌연변이 비소세포 폐암에 대한 임의의 전신 항신생물 치료법을 이용한 사전 치료를 제공받은 적이 없는 환자)인 제약 조합물.
11. 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 암을 앓고 있는 환자는 타이로신 키나아제 억제제(예를 들어, EGFR TKI 또는 3세대 EGFR TKI)를 이용한 사전 치료를 제공받은 적이 있는 제약 조합물.
12. 제6항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성을 갖거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생하고 있는 중이거나, EGFR 타이로신 키나아제 억제제를 이용한 치료에 대하여 내성이 발생할 위험이 높은 제약 조합물.
13. 제6항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 EGFR G719S 돌연변이, EGFR G719C 돌연변이, EGFR G719A 돌연변이, EGFR L858R 돌연변이, EGFR L861Q 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실, EGFR 엑손 20 삽입, EGFR T790M 돌연변이, EGFR T854A 돌연변이 또는 EGFR D761Y 돌연변이, 또는 이들의 임의의 조합을 보유하는 것을 특징으로 하는 제약 조합물.
14. 제6항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 NSCLC이며, NSLC은 EGFR L858R 돌연변이, EGFR 엑손 19 결실 또는 이들 둘 다를 보유하는 제약 조합물.
15. 제14항에 있어서, NSCLC는 EGFR T790M 돌연변이를 추가로 보유하는 제약 조합물.
16. 제15항에 있어서,EGFR T790M 돌연변이는 드노보(de novo) 돌연변이인 제약 조합물.
17. 제15항에 있어서, EGFR T790M 돌연변이는 획득 돌연변이인 제약 조합물.
18. 제11항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 1세대 EGFR TKI(예를 들어, 에를로니티닙, 게피티닙, 이코티닙 또는 이들의 임의의 조합)를 이용한 치료 및/또는 2세대 TKI(예를 들어, 아파티닙, 다코미티닙 또는 이들 둘 다)를 이용한 치료 후에 진행된 제약 조합물.
19. 제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 암을 앓고 있는 환자는 3세대 TKI(예를 들어, 오시머티닙)와 관련하여 치료 나이브 상태인 제약 조합물.
20. 제6항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 시스로 작용하는(in cis) EGFR C797m/T790M을 특징으로 하는 제약 조합물.
21. 제20항에 있어서, 암은 추가로, MET 증폭 또는 엑손 14 스킵 돌연변이 및/또는 BRAF 융합 또는 돌연변이를 갖는 것을 특징으로 하는 제약 조합물.
22. EGFR-돌연변이 폐암의 치료를 위하여 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제와 조합하여 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도.
23. EGFR-돌연변이 폐암의 치료를 위하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 조합하여 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제의 용도.
24. 암, 특히 폐암(예를 들어 NSCLC)의 치료를 위한, 사이클린 D 키나아제 4/6 억제제, 특히 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 이용한 병용 요법에서 사용하기 위한 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제, 특히 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염.
25. 암, 특히 폐암(예를 들어 NSCLC)의 치료를 위한, 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제, 특히 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 이용한 병용 요법에서 사용하기 위한 사이클린 D 키나아제 4/6 억제제, 특히 7-사이클로펜틸-2-(5-피페라진-1-일-피리딘-2-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 디메틸아미드 또는 이의 제약상 허용가능한 염.
26. 폐암 치료를 필요로 하는 대상체에게 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 제약 조합물을, 상기 폐암에 대한 연계된 치료적 유효량으로 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여하는 단계를 포함하는, 폐암을 치료하는 방법.
27. 폐암 치료에 사용하기 위한 상업적 패키지로서, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 제약 조합물 및 상기 제약 조합물을 이를 필요로 하는 인간 환자에게 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여하는 것에 대한 설명서를 포함하는, 패키지.
28. EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료를 필요로 하는 인간에서 EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC를 치료하는 방법으로서, 하기 단계를 포함하는, 방법:
    (a) 최소 잔존 질환이 달성될 때까지(즉, 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지) 치료적 유효량의 3세대 EFGR 타이로신 키나아제 억제제(예컨대 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염)를 단일요법제로서 투여하는 단계; 이어서
    (b) 치료적 유효량의, 3세대 EGFR 타이로신 키나아제 억제제(예컨대 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염)와 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 화합물 B(리보시클립) 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물을 투여하는 단계.
29. EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염으로서,
    (a) 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 최소 잔존 질환이 달성될 때까지 단일요법제로서 투여되고;
    (b) 그 후 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 사이클린 D 키나아제 4/6(CDK4/6) 억제제, 특히 리보시클립 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물이 투여되는, 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염.
30. EGFR 돌연변이 폐암, 특히 EGFR 돌연변이 NSCLC의 치료에 사용하기 위한 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염으로서,
    (a) 상기 암을 앓고 있는 환자의 종양 부담 감소가 적어도 1개월 간격으로 실시되는 두 평가 사이에서 5% 미만일 때까지 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 단일요법제로서 투여되고;
    (b) 그 후 화합물 A 또는 이의 제약상 허용가능한 염과 리보시클립 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 제약 조합물이 투여되는, 나자르티닙 또는 이의 제약상 허용가능한 염.

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