KR20200021690A - 프로폴리스 추출물을 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물 - Google Patents
프로폴리스 추출물을 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물, 및 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물을 개시한다. 구체적으로, 본 발명에 따른 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물은, 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 석류의 껍질, 과씨 등을 포함하는 석류 추출물로 인한 피부 자극을 효과적으로 완화할 수 있으며, 본 발명에 따른 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물은, 석류의 껍질, 과육 등을 포함하는 석류 추출물을 프로폴리스 추출물과 함께 포함하여, 석류의 껍질, 과육 등으로 인한 피부 자극 등의 부작용이 없으면서도 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물의 효능을 그대로 발휘할 수 있고, 우수한 항산화 효능을 가질 수 있다.
Description
본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물에 관한 것이다.
프로폴리스(propolis)는 꿀벌이 여러 가지 수목이나 꽃에서 수지를 모아 뒷다리에 붙여 돌아오면 벌통 속의 다른 꿀벌이 그것을 받아 씹게 될 때 꿀벌의 타액 내 효소로 생성되는 수지성, 점착성, 고무상의 자연 물질로서, 꿀벌이 외부로부터 자기를 보호하기 위한 목적 또는 살균의 목적에서 생산된다. 프로폴리스는 꿀벌들이 수지를 채집해 오는 수목의 종류에 따라서 약간의 차이는 있으나 안정된 구조를 가지고 있고, 벌꿀과 마찬가지로 인체에 대한 부작용 및 독성은 전혀 없으며, 특유의 발삼(balsam) 향을 가지고 있어서 방향제 및 구강청정제 등으로 널리 사용되고 있다.
이러한 프로폴리스는 약 55%의 수지(resin) 성분 및 방향유, 30%의 밀랍, 10%의 정유, 50%의 화분(꽃가루) 및 각종 유기물/무기물로 구성되어 있으며, 약 20여 종류의 성분들이 분리 확인되었는데, 그 중에서 플라보노이드(flavonoid), 베툴렌(betulene), 베툴레놀(betulenol), 이소바닐린(isovanillin) 및 방향족 불포화산 등이 생물학적으로 활성을 지니고 있다고 알려져 있다. 이들 생물학적 활성물질 중 특히 플라보노이드는 프로폴리스로 하여금 특정 효소의 반응 억제, 세포막 강화, 결합조직 강화, 항알레르기 작용, 생체유익 효소 반응작용, 유해 산소 제거 및 악성 프로스타글란딘(prostaglandin) 생성 억제 등의 효과를 소지하도록 하는 중요한 성분으로 보고되고 있다.
석류추출물(punica granatum extract)은 종래에 피부 외용제 또는 화장료 조성물로서의 피부에 대한 유용한 효과가 알려져 있으나, 석류의 껍질과 과씨는 부작용을 초래할 수 있다는 연구결과가 있다. 구체적으로 예를 들면, 석류 껍질에 포함된 특정 알칼로이드(alkaloid)는 신체 기능을 저하하는 작용을 하며, 호흡계와 근육에 영향을 미쳐, 중독되면 발작, 경련, 혼수 상태 등이 일어날 수 있다고 보고되어 있다. 또한, 석류 과씨의 추출물 복용 시 일부 사람에게서 알레르기 반응인 혀 부음(tongue swelling) 등의 부작용이 생길 수 있다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하여, 석류의 껍질, 과씨 등을 포함하는 석류 추출물과 함께 사용 시, 석류 추출물에 의한 피부 자극을 완화하는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 함께 포함함으로써, 석류의 껍질, 과씨 등을 포함하는 석류 추출물을 고농도로 함유하여도 피부 자극 등의 부작용이 없는 피부 자극이 완화된 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 함께 포함함으로써, 프로폴리스 추출물을 저농도로 함유하여도 우수한 항산화 효능을 갖는 조성물을 제공하는 것을 또 다른 목적으로 한다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예는 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 실시예는 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물은, 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 석류의 껍질, 과씨 등을 포함하는 석류 추출물로 인한 피부 자극을 효과적으로 완화할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물은, 석류의 껍질, 과씨 등을 포함하는 석류 추출물을 프로폴리스 추출물과 함께 포함하여, 석류의 껍질, 과씨 등으로 인한 피부 자극 등의 부작용이 없으면서도 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물의 효능을 그대로 발휘할 수 있고, 우수한 항산화 효능을 가질 수 있다.
도 1은 시험예 2에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물의 조합 사용 시의 항산화 효능 평가 시험 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 명세서에서, "추출물"이라 함은, 천연물로부터 그 안의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질이라면, 추출 방법, 추출용매, 추출된 성분 또는 추출물의 종류와 무관하게 모두 포함한다. 예컨대, 물이나 유기 용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출해 낸 것, 천연물의 특성 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함하는 광의의 개념이다. 구체적으로, 상기 추출은 물, 유기 용매, 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 하라 수 있다. 유기 용매는 알코올, 이소프로판올, 아세톤, 헥산, 에틸아세테이트, 이산화탄소, 또는 이들 중 둘 이상의 혼합용매를 사용할 수 있으나 이에 한정되지는 않으며, 추출하고자 하는 천연물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 상기 알코올은 C1 내지 C5의 저급 알코올일 수 있다. 추출의 횟수나 방법은 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명은 일 측면에서, 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물에 관한 것일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 프로폴리스 추출물은 목적하는 효과를 위하여, 상기 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물 전체 중량을 기준으로 0.00001 내지 100 중량%로 함유될 수 있다. 일 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물의 상기 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물 중의 함량은 0.00001 중량% 이상, 0.0001 중량% 이상, 0.001 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.1 중량% 이상, 1 중량% 이상, 5 중량% 이상, 10 중량% 이상, 15 중량% 이상, 20 중량% 이상, 25 중량% 이상, 30 중량% 이상, 35 중량% 이상, 40 중량% 이상, 50 중량% 이상, 60 중량% 이상, 70 중량% 이상, 80 중량% 이상, 또는 90 중량% 이상일 수 있다. 다른 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물의 상기 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물 중의 함량은 90 중량% 이하, 80 중량% 이하, 70 중량% 이하, 60 중량% 이하, 50 중량% 이하, 40 중량% 이하, 35 중량% 이하, 30 중량% 이하, 25 중량% 이하, 20 중량% 이하, 15 중량% 이하, 10 중량% 이하, 5 중량% 이하, 1 중량% 이하, 0.1 중량% 이하, 0.01 중량% 이하, 0.001 중량% 이하 또는 0.0001 중량% 이하일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 프로폴리스 추출물은 상기 석류 추출물과 중량비 1:5 내지 1:600으로 사용될 수 있다. 일 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물 및 석류 추출물의 중량비는 1:5 이상, 1:20 이상, 1:40 이상, 1:60 이상, 1:80 이상, 1:100 이상, 1:130 이상, 1:160 이상, 1:200 이상, 1:230 이상, 1:260 이상, 1:300 이상, 1:330 이상, 1:360 이상, 1:400 이상, 1:430 이상, 1:460 이상, 1:500 이상, 1:530 이상, 또는 1:560 이상일 수 있다. 다른 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물 및 석류 추출물의 중량비는 1:600 이하, 1:560 이하, 1:530 이하, 1:500 이하, 1:460 이하, 1:430 이하, 1:400 이하, 1:360이하, 1:330 이하, 1:300 이하, 1:260 이하, 1:230 이하, 1:200 이하, 1:160 이하, 1:130 이하, 1:100 이하, 1:80 이하, 1:60 이하, 1:40 이하 또는 1:20 이하일 수 있다.
본 발명은 다른 측면에서, 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물에 관한 것일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 석류 추출물은 목적하는 효과를 위하여, 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 전체 중량을 기준으로 0.0005 내지 0.5 중량%로 함유될 수 있다. 0.0005 중량% 미만일 경우, 기대하는 효능을 나타내기 어려우며, 0.5 중량% 초과일 경우, 외용제로 사용 시 피부 안전성의 우려가 있다.
일 실시예로서, 상기 석류 추출물의 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 중의 함량은 0.0005 중량% 이상, 0.001 중량% 이상, 0.005 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.03 중량% 이상, 0.05 중량% 이상, 0.07 중량% 이상, 0.1 중량% 이상, 0.2 중량% 이상, 0.3 중량% 이상, 또는 0.4 중량% 이상일 수 있다. 다른 실시예로서, 상기 석류 추출물의 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 중의 함량은 0.5 중량% 이하, 0.4 중량% 이하, 0.3 중량% 이하, 0.2 중량% 이하, 0.1 중량% 이하, 0.07 중량 이하, 0.05 중량% 이하, 0.03 중량% 이하, 0.01 중량% 이하, 0.005 중량% 이하, 또는 0.001 중량% 이하일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 프로폴리스 추출물은 목적하는 효과를 위하여, 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 전체 중량을 기준으로 0.000045 내지 0.0045 중량%로 함유될 수 있다. 0.000045 중량% 미만일 경우, 기대하는 효능을 나타내기 어려우며, 0.0045 중량% 초과일 경우, 용해도가 떨어져 제형 배합이 불가능하다.
일 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물의 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 중의 함량은 0.000045 중량% 이상, 0.0001 중량% 이상, 0.0003 중량% 이상, 0.0005 중량% 이상, 0.0007 중량% 이상, 0.001 중량% 이상, 0.002 중량% 이상, 0.003 중량% 이상, 또는 0.004 중량% 이상일 수 있다. 다른 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물의 상기 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물 중의 함량은 0.0045 중량% 이하, 0.004 중량% 이하, 0.003 중량% 이하, 0.002 중량% 이하, 0.001 중량% 이하, 0.0007 중량 이하, 0.0005 중량% 이하, 0.0003 중량% 이하, 또는 0.0001 중량% 이하일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 프로폴리스 추출물과 상기 석류 추출물의 중량비는 1:5 내지 1:600일 수 있다. 일 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물 및 석류 추출물의 중량비는 1:5 이상, 1:20 이상, 1:40 이상, 1:60 이상, 1:80 이상, 1:100 이상, 1:130 이상, 1:160 이상, 1:200 이상, 1:230 이상, 1:260 이상, 1:300 이상, 1:330 이상, 1:360 이상, 1:400 이상, 1:430 이상, 1:460 이상, 1:500 이상, 1:530 이상, 또는 1:560 이상일 수 있다. 다른 실시예로서, 상기 프로폴리스 추출물 및 석류 추출물의 중량비는 1:600 이하, 1:560 이하, 1:530 이하, 1:500 이하, 1:460 이하, 1:430 이하, 1:400 이하, 1:360이하, 1:330 이하, 1:300 이하, 1:260 이하, 1:230 이하, 1:200 이하, 1:160 이하, 1:130 이하, 1:100 이하, 1:80 이하, 1:60 이하, 1:40 이하 또는 1:20 이하일 수 있다.
이와 같이 본 발명의 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물은 석류 추출물에 비해 상대적으로 낮은 비율의 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 자극이 없으면서 우수한 항산화 효능을 나타낼 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 석류 추출물은 석류의 껍질, 과씨, 과육 및 꽃 중 적어도 1 이상의 추출물일 수 있다. 본 발명의 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물은 부작용이 보고되고 있는 석류의 껍질 및 과씨 중 1 이상의 추출물을 포함하면서도 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유함에 따라 알레르기 반응 등의 피부 자극을 발생시키지 않는 것이 확인되었으며, 이는 추후 시험예를 통하여 보다 상세히 설명하도록 한다.
일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 항산화용 조성물일 수 있으며, 보다 구체적으로는 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 활성 억제를 통한 피부 항산화용 조성물일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물일 수 있다.
상기 식품 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 환제, 분말제, 드링크제와 같은 액제, 캐러멜, 겔, 바, 티백 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 식품 조성물은 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업계의 통상의 기술자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다. 또한 상기 식품은 건강기능식품일 수도 있다.
상기 조성물은 단순 섭취, 음용, 주사 투여, 스프레이 투여 또는 스퀴즈 투여 등 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업계의 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 식품 조성물은, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량 음료, 미네랄 워터, 알코올 음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능식품 제품일 수 있다.
상기 외에, 본 발명의 일 측면에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않으나 본 발명의 일측면에 따른 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 60 중량부의 범위에서 포함되는 것이 일반적이다.
일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있으며, 상기 화장료 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않고, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에는 상기 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.
본 발명에 다른 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 유연제, 유화제, 이온 봉쇄제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
상기 성분의 배합량은 특별히 제한되지 않으나, 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 10중량%, 구체적으로 0.01 내지 3중량%일 수 있다.
이하, 본 발명의 내용을 제조예 및 시험예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 그러나, 이러한 제조예 및 시험예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이러한 실시예 및 시험예로 한정되는 것은 아니고, 당업계에서 통상적으로 주지된 변형, 치환 및 삽입 등을 수행할 수 있으며, 이에 대한 것도 본 발명의 범위에 포함된다.
[제조예 1] 석류 추출물의 제조
겉껍질을 제거한 석류 열매와 석류 꽃을 물과 함께 100 내지 110℃에서 3 내지 4시간 동안 열수 추출하여 석류 추출물을 제조하고 이를 시험에 사용하였다.
[제조예 2] 프로폴리스 추출물의 제조
프로폴리스 왁스(wax) 원물과 에탄올을 부피를 기준으로 45:55의 비율로 교반기에 넣고 교반시켜 프로폴리스를 추출한 후 에탄올을 제거하여 페이스트(paste) 형태의 프로폴리스 추출 원액을 제조하고 이를 시험에 사용하였다.
[시험예 1] 하이포알러지 테스트(Hypo-allergy Test) 시험
본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물의 누적자극성 및 감작성 유발 가능성을 평가하기 위하여, 건강한 성인 53명을 대상으로 하이포알러지 테스트를 진행하였다. 하기 표 1의 조성에 따라 제조한 실시예 1을 시험 물질로 사용하였다.
성분 | 함량(중량%) |
정제수 | To100 |
에탄올 | 3.00000 |
에틸헥실글리세린 | 0.05000 |
나이아신아마이드 | 2.00000 |
아데노신 | 0.04000 |
보습제 | 16.73000 |
유화제 | 0.90000 |
유연제 | 2.60000 |
점증제 | 0.70000 |
이온 봉쇄제 | 0.05000 |
제조예 1의 석류추출물 | 0.01000 |
제조예 2의 프로폴리스추출물 | 0.00315 |
구체적인 시험방법은 하기와 같다.
1) 유도 단계(Induction phase): 시험 물질을 전박부에 격일로 24시간 폐쇄 첩포하며, 3주간 총 9회 같은 부위에 적용하였다. 매회 패치 제거 후 30분 후에 피부 반응을 검사하였다.
2) 휴지 단계(Resting phase): 약 2주간 아무런 처치도 하지 않았다.
3) 도전 단계(Challenge phase): 시험 물질을 새로운 부위에 48시간 동안 폐쇄 첩포하였다. 첩포 제거 후 30분, 24 시간 및 48 시간에 피부 반응을 검사하였다.
판정기준: 유도 단계(Induction phase) 동안에는, 피부 반응은 Frosch & Kligman(1979)에 의해 제시된 기준과 CTFA guidelines(1981)에 제시된 방법에서 변형된 기준(표 2; 유도 단계에서의 패치 테스트 결과 기준(Symbols to record patch test results for induction phase))에 의하여 판독하였다. 도전 단계(Challenge phase) 동안에는, 피부 반응은 국제접촉피부연구그룹(International Contact Dermatitis Research Group (ICDRF))에서 제안된 방법(표 3; 감작성에 대한 패치 테스트 결과 기준(Symbols to record patch test for sensitization (ICDRG)))에 따라 판독하였다. 모든 평가는 연구 전문가 혹은 피부과 전문의에 의해 일정한 조명 하에 진행되었다.
- | 가시적인 반응 없음 |
1+ | 반점(spotty) 또는 분산된(diffuse) 경미한 홍반(erythema) |
2+ | 중증도의 균일한 홍반 |
3+ | 부종(edema)을 동반한 심각한 홍반 |
4+ | 부종(edema) 및 소포(vesicles)를 동반한 심각한 홍반 |
1(+?) | 의심스러운 반응; 희미한 홍반만 관찰됨 |
2(+) | 약한 양성 반응; 홍반, 침윤(infiltration), 구진(papules) 가능성 |
3(++) | 강한 양성 반응; 홍반, 침윤, 구진, 소포 |
4(+++) | 극도의 양성 반응; 심각한 홍반 및 침윤 및 병합 소포(coalescing vesicles) |
시험결과는 하기 표 4에 나타내었다. 표 4의 도전 시간(challenge time)의 48시간, 72시간 및 96시간은 시험 물질을 48시간 동안 첩포 후 각각 30분, 24시간 및 48시간 경과한 것을 나타낸다.
상기 표 4의 결과로부터, 본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은, 인체피부에 대한 감작성 유발 가능성을 보이지 않으며, 누적자극 및 감작성 측면에서 안전한 물질로 판단되는 것으로 확인되었다. 즉, 본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 피부 자극 및 알레르기를 유발하지 않는 것으로 확인되었다.
[시험예 2] 항산화 효능 평가 시험
본 발명의 조성물의 유효성분인 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물의 병용 시의 항산화 효과를 확인하기 위하여, 유기 라디칼인 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 소거 활성을 측정하여 항산화능을 평가하는 방법을 사용하였으며, 본 DPPH 라디칼 소거능 측정은 무세포계(cell-free system)에서 진행하였다.
구체적으로, DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)를 에탄올에 희석하여 100μM 농도로 제조하였다. 상기 제조예 1에서 제조한 석류 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 프로폴리스 추출물 및 양성대조군인 아스코르브산(ascorbic acid)을 농도 별로 물 혹은 에탄올로 희석하여 사용하였다. 96well plate에 시료 및 양성대조군을 농도 별로 10μl씩 넣은 다음, DPPH 용액을 190μL씩 넣고, 37℃ 배양기에서 30분간 반응시켰다. 최종적으로 450nm 파장영역에서 흡광도를 측정하였으며, 추가적으로 시료 자체의 색이 결과값에 영향을 미치는지 여부를 확인하기 위해, 시료를 넣은 well에 DPPH 용액 대신 에탄올 용액 190μL를 넣어 대조군과의 흡광도 차이를 확인하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.
도 1의 결과로부터, 본 발명에 따라 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 혼합 처리할 경우, 농도 유의적으로 DPPH 라디칼 소거능을 보임을 확인할 수 있었다. 구체적으로, 프로폴리스 추출물 15.8ppm 이상, 석류 추출물 1500ppm 이상을 혼합하여 처리할 경우 농도 유의적으로 DPPH 라디칼 소거능이 증가하였으며, 특히 석류 추출물에 비하여 극히 저농도의 프로폴리스 추출물을 혼합하였음에도 뛰어난 DPPH 라디칼 소거 효능을 나타내어, 본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 함유하는 조성물이 우수한 항산화능을 가짐을 확인할 수 있었다.
[시험예 3] 피부 투명도 개선 효능 평가 시험
본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물의 피부 투명도 개선 효능을 평가하기 위하여, 만 28 내지 39세의 성인 여성 23명을 대상으로 상기 실시예 1의 조성물의 피부 투명도 개선 효능을 평가하였다.
구체적으로 피부 투명도는 피부 투명도 측정기인 Translucency meter TLS 850(Dia-Stron 社)를 사용하여 측정하였다. 측정은 볼 부위의 피부에 Translucency meter 프로브(probe)를 접촉시켜 측정하였으며, 실시예 1의 사용 전, 실시예 1을 매일 아침 저녁으로 2회씩 사용한 2주 후, 4주 후에 각각 동일 부위에서 총 3회 측정하여 얻어진 알파 값(alpha value)을 피부 투명도 평가 자료로 사용하였다. 측정 결과는 하기 표 5 및 표 6(*p<0.05)과 같다. 알파 값이 감소할수록 피부 투명도가 개선됨을 의미한다.
MEAN ± STDEV | |||
사용 전 | 사용 2주 후 | 사용 4주 후 | |
투명도 (Alpha) | 0.0325±0.001 | 0.0321±0.001 | 0.0313±0.001 |
변화율(%) | ||
사용 2주 후 | 사용 4주 후 | |
투명도 (Alpha) | -1.231 | -3.692 |
상기 표 5 및 표 6의 결과로부터, 실시예 1의 조성물을 사용함에 따라 유의적인 수준으로 피부 투명도가 개선되는 것을 확인할 수 있었다. 또한 사용 기간이 늘어날수록 투명도 개선 정도도 높아짐을 확인할 수 있었다. 즉, 본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 피부 투명도를 개선시키는 효능이 있음을 확인할 수 있었다.
[시험예 4] 진피 치밀도 개선 효능 평가 시험
본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물의 진피 치밀도 개선 효능을 평가하기 위하여, 만 28 내지 39세의 성인 여성 23명을 대상으로 상기 실시예 1의 조성물의 진피 치밀도 개선 효능을 평가하였다.
구체적으로 진피 치밀도 측정은 초음파 촬영장치인 Skin Scanner DUB-USB(TPM taberna pro medicum 社, 독일)를 이용하여 좌측 볼을 측정하였으며, 실시예 1의 사용 전, 실시예 1을 매일 아침 저녁으로 2회씩 사용한 4주 후에 동일한 부위를 촬영하였다. 진피 치밀도는 피부 치밀도를 의미하는 Density(%)로 분석하였으며, 그 결과는 하기 표 7 및 표 8(*p<0.05)에 나타내었다. 값이 증가할수록 진피 치밀도가 개선됨을 의미한다.
MEAN ± STDEV | ||
사용 전 | 사용 4주 후 | |
치밀도(Density, %) | 15.641±2.123 | 17.448±3.196 |
변화율(%) | |
사용 4주 후 | |
치밀도(Density, %) | 11.553 |
상기 표 7 및 표 8의 결과로부터, 실시예 1의 조성물을 사용함에 따라 유의적인 수준으로 진피 치밀도가 개선되는 것을 확인할 수 있었다. 즉, 본 발명에 따른 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 진피 치밀도를 개선시키는 효능이 있음을 확인할 수 있었다.
Claims (13)
- 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 석류 추출물에 의한 피부 자극 완화용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 프로폴리스 추출물은 상기 석류 추출물과 중량비 1:5 내지 1:600으로 사용됨을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 석류 추출물은 석류의 껍질, 과씨, 과육 및 꽃 중 적어도 1 이상의 추출물임을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 또한 항산화용임을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물 또는 화장료 조성물인, 조성물. - 석류 추출물 및 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극이 완화된 항산화용 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 조성물은 상기 석류 추출물을 조성물 전체 중량 대비 0.0005 내지 0.5 중량%로 함유함을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 조성물은 상기 프로폴리스 추출물을 조성물 전체 중량 대비 0.000045 내지 0.0045 중량%로 함유함을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 프로폴리스 추출물와 상기 석류 추출물의 중량비는 1:5 내지 1:600임을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 석류 추출물은 석류의 껍질, 과씨, 과육 및 꽃 중 적어도 1 이상의 추출물임을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 조성물은 또한 피부 투명도 개선용임을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 조성물은 또한 진피 치밀도 개선용임을 특징으로 하는, 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물 또는 화장료 조성물인, 조성물.
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KR20130135597A (ko) | 2012-06-01 | 2013-12-11 | 뉴트라폴리스 (주) | 프로폴리스 추출물과 마유가 함유된 피부질환 개선용 화장료조성물 |
KR20150115502A (ko) | 2014-04-04 | 2015-10-14 | (주) 건강사랑 | 고함량의 엘라그산을 포함하는 여성 갱년기 증상 개선용 석류 추출물 |
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2018
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