KR20190108605A - Mrsa 감염 방어제 - Google Patents

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Abstract

신규한 MRSA 감염 방어제를 제공한다. 엔테로코커스 속에 속하는 균이 MRSA 감염을 방어할 수 있는 것을 알아내었다. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어제. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 의약품. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 식품.

Description

MRSA 감염 방어제
본 발명은, MRSA 감염 방어제에 관한 것이다.
MRSA (메티실린 내성 황색 포도상구균, Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)는 의료 관련 감염을 일으키는 대표적인 균이며, 원내(院內)에서 분리되는 내성균으로서 가장 분리 빈도가 높다.
일본에서 인가되어 있는 항MRSA약은, 반코마이신(vancomycin, VCM), 테이코플라닌(teicoplanin, TEIC), 아르베카신(arbekacin, ABK), 리네졸리드(linezolid, LZD), 답토마이신(daptomycin, DAP)의 5 종류가 있고, 항MRSA약의 적정 사용을 위해서, MRSA 감염증의 치료 가이드 라인이 작성되어 있다(비특허문헌 1).
그러나, 근래에 이들 항MRSA약에 대한 내성균의 출현이 보고되고 있으며, 신규한 항MRSA약의 개발이 기대되고 있다.
MRSA 감염증의 치료 가이드 라인, 2013년 6월 9일, 공익사단법인 일본화학요법학회
본 발명은, 신규한 MRSA 감염 방어제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명자들은, 예의 노력한 결과, 엔테로코커스 속에 속하는 유산균이 MRSA 감염을 방어할 수 있는 것을 알아내고, 본 발명을 완성시키기에 이르렀다.
본 발명의 요지는 이하와 같다.
(1) 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어제.
(2) 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 의약품.
(3) 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 식품.
(4) 엔테로코커스 속에 속하는 균을 의약적으로 유효한 양으로 피험자에게 투여하는 것을 포함하는, MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료 방법.
(5) MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료를 위한, 엔테로코커스 속에 속하는 균의 사용.
(6) MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료 방법에 사용하기 위한, 엔테로코커스 속에 속하는 균.
본 발명에 의해, MRSA 감염을 방어할 수 있다.
본 명세서는, 본원의 우선권의 기초인 일본 특허출원 특원2017-13789 및 특원2017-115577의 명세서 및/또는 도면에 기재되는 내용을 포함한다.
도 1은 실시예 1의 시험 일정을 나타낸다.
도 2는 실시예 1의 시험 결과(생존율)를 나타낸다.
도 3은 실시예 1의 시험 결과(체중)를 나타낸다.
도 4는 실시예 1의 시험 결과(섭이량(攝餌量))를 나타낸다.
도 5는 실시예 1의 시험 결과(섭수량(攝水量))를 나타낸다.
도 6은 실시예 2의 시험일정을 나타낸다.
도 7은 실시예 2의 시험 결과(생존율)를 나타낸다.
도 8은 실시예 2의 시험 결과(체중)를 나타낸다.
도 9는 실시예 2의 시험 결과(섭이량)를 나타낸다.
도 10은 실시예 2의 시험 결과(섭수량)를 나타낸다.
이하, 본 발명의 실시 형태에 대해서 보다 상세하게 설명한다.
본 발명은, 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어제를 제공한다.
엔테로코커스 속에 속하는 균은, 유산구균이어도 되고(예를 들면, 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코커스 패시움(Enterococcus faecium), 엔테로코커스 아비움(Enterococcus avium), 엔테로코커스 갈리나룸(Enterococcus gallinarum), 엔테로코커스 카셀라플라버스(Enterococcus casseliflavus) 등), 생체 응답 조절 물질(Biological Response Modifier, BRM) 활성(약학지, 112:919-925, 1992; 약학지, 113:396-399, 1992; 동물임상의학, 3:11-20, 1994)을 가지는 것이 바람직하다. 엔테로코커스 패칼리스는 BRM 활성을 가지는 유산구균으로서 알려져 있다. 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001주는 니혼베름 주식회사(도쿄도 치요다구 나가타쵸 2-14-3)로부터 입수할 수 있다.
Enterococcus Faecalis-2001주는, 정상인의 분변으로부터 채취할 수 있고, 하기의 성질을 가지고 있다.
그램 양성 구균이다. 콜로니의 형태(트립토소야 한천 배지, 24시간 배양): 직경 1.0㎜, 스무드, 정원형(正圓形), 백색 콜로니균 형태: 구로부터 타원형(1.0×1.5㎛) 액체 배지에서 잘 연쇄함. 아포(芽胞) 비형성. 통성(通性) 혐기성. 글루코오스를 발효하여 유산 생산(최종 pH 4.3). 가스 비생산. 카탈라아제 음성. 10~45℃에서 증식(최적은 37℃). pH 9.6, 6.5% NaCl, 40% bile로 증식. 0.04% 아(亞)텔루르산칼륨 양성. 0.01% 테트라졸륨 양성. 0.1% 메틸렌블루밀크 양성. 아르기닌을 가수분해. 아미그달린, 셀로비오스, 프럭토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 글리세롤, 락토오스, 말토오스, 만노오스, 만니톨, 리보오스, 살리신, 수크로오스, 멜레치토스, 소르비톨을 발효하여 산 생산. 60℃, 30분 내성. 카제인, 젤라틴을 소화. 티로신을 탈탄산하여서 티라민으로. Lancefield 항원 그룹 D. GC% 35.0±1.0%
엔테로코커스 속에 속하는 균은, 생균이어도, 사균이어도 되고, 균체에는, 파괴 처리(호모지나이즈 처리, 효소 처리, 초음파 처리 등), 가열, 건조(동결 건조, 분무 건조 등) 등의 처리가 가해져도 된다. 균체는, 희석제와 혼합한 후, 호료(糊料)를 첨가하여서 과립상으로 하여도 된다. 희석제나 호료는, 식품이나 의약품에 첨가하는 것으로서 허가되어 있는 재료로부터 선택하면 된다.
본 발명의 MRSA 감염 방어제는, MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료에 이용할 수 있다. 본 발명의 MRSA 감염 방어제는, 의약품으로서 혹은 식품첨가물로서 사용할 수 있다.
본 발명은, 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 의약품을 제공한다.
의약으로서 이용하는 경우에는, 엔테로코커스 속에 속하는 균을 단독으로, 혹은 부형제 또는 담체와 혼합하고, 정제(錠劑), 캅셀제, 산제(散劑), 과립제, 액제(液劑), 시럽, 에어로졸, 좌제(坐劑), 주사제 등으로 제제화하면 된다. 부형제 또는 담체는, 당해 분야에서 상투적으로 사용되고 의약적으로 허용되는 것이면 되고, 그 종류 및 조성은 적절히 선택된다. 예를 들면, 액상 담체로서는 물, 식물유 등이 이용된다. 고체 담체로서는, 유당, 백당, 포도당 등의 당류, 바레이쇼 전분, 옥수수 전분 등의 전분, 결정 셀룰로오스 등의 셀룰로오스 유도체 등이 사용된다. 스테아린산마그네슘 등의 활택제, 젤라틴, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 결합제, 카르복시메틸셀룰로오스 등의 붕괴제(崩壞劑) 등을 첨가하여도 된다. 그 외, 항산화제, 착색제, 교미제(矯味劑), 보존제등을 첨가하여도 된다. 또한, 동결건조 제제로서 이용하거나 할 수도 있다.
엔테로코커스 속에 속하는 균은 경구, 경비, 직장, 경피, 피하, 정맥내, 근육내 등의 여러 가지의 경로에 의해서 투여할 수 있다.
엔테로코커스 속에 속하는 균의 제제 중에서의 함량은, 제제의 종류에 의해 다르지만, 통상 0.001~100 질량%, 바람직하게는 0.01~100 질량%이다.
엔테로코커스 속에 속하는 균의 투여량은, 의약적으로 유효한 양, 즉, MRSA 감염 방어 효과를 확인할 수 있는 양이면 되고, 제형, 투여 경로, 환자의 연령, 체중, 질환의 중독도(重篤度) 등에 의해 다르지만, 예를 들면 1회당의 투여량은 성인의 경우, 엔테로코커스 속에 속하는 균의 양으로 환산하여서, 1억~1,000억 CFU/㎏체중 정도, 바람직하게는 60억~120억 CFU/㎏체중 정도로 하고, 1일에 1회로부터 수회 투여하면 된다.
엔테로코커스 속에 속하는 균은 식품에 첨가하여도 된다. 본 발명은 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 식품을 제공한다.
본 발명의 식품에는, 단백질, 지질, 탄수화물, 나트륨 등의 일반 성분, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 인 등의 미네랄류, 철, 아연, 구리, 셀레늄, 크롬 등의 미량 원소, 비타민 A, β－카로텐, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 비타민 B12, 비타민 C, 나이아신, 엽산, 비타민 D3, 비타민 E, 비오틴, 판토텐산 등의 비타민류, 코엔자임 Q10, α－리포산, 갈락토올리고당, 식물 섬유, 부형제(물, 카르복시메틸셀룰로오스, 유당 등), 감미료, 교미제(사과산, 구연산, 아미노산 등), 향료 등을 첨가하여도 된다. 본 발명의 식품을 액제로 하는 경우, 식품 성분을 분산 또는 용해하는 액체로서 물, 생리식염수, 과즙 등을 이용할 수 있고, 경구 투여에서의 미각 향상의 목적에서는 과즙을 이용하면 된다.
본 발명의 식품은 분말, 과립, 정제, 액제 등의 어떠한 형상으로 하여도 되지만, 환자나 고령자가 용이하게 섭취 가능하게 하기 위해서는, 젤리 등의 겔상 제품으로 하는 것이 바람직하다.
겔화제로서는 덱스트린, 한천, 크산탄검, 로커스트빈검, 카라기난, 펙틴 등의 증점 다당류, 젤란검, 사일리움씨드검, 타라검, 구아검, 글루코만난 알긴산, 타마린드씨드검, 셀룰로오스 등을 이용할 수 있고, 1종 또는 2종 이상의 증점 다당류를 이용하는 것이 바람직하다. 겔상 제품의 겔 강도는 5℃에서의 겔 강도가 7,000±2,000 N/㎡인 것이 바람직하고, 또한 겔 강도가 7,000±2,000 N/㎡일 때, 부착 에너지가 60±40 J/㎥이며, 응집성이 0.7±0.1 J/㎥인 것이 보다 바람직하다. 이와 같이 부착성이 낮고, 응집성이 높은 겔은 뛰어난 연하(嚥下) 적성(適性)을 갖는다.
겔 강도는, 이하와 같이 하여 측정할 수 있다. 겔 강도 측정 기기로서는, 야마덴 텍스츄로미터 및 φ16㎜의 플런저를 이용하여, 측정 온도 25℃, 압축 속도(플런저를 압입(押入)하는 속도) 10㎜/s, 측정 왜율(歪率)(시료의 두께에 대한 압입 비율) 40.00%, 플런저를 압입하는 거리 10.00㎜, 플런저를 압입하는 횟수 2회로 측정을 수행한다.
부착 에너지는 상기 겔 강도 측정에 있어서, 1회 압입한 후, 플런저를 인발할 때의 부(負)의 에너지로서 측정한다.
응집성은 상기 겔 강도 측정에 있어서, 2회 압입하였을 때에 1회째와 2회째의 에너지의 비율로서 측정한다.
엔테로코커스 속에 속하는 균의 섭취량은, MRSA 감염 방어 효과를 확인할 수 있는 양이면 되고, 제형, 투여 경로, 환자의 연령, 체중, 질환의 중독도 등에 의해 다르지만, 예를 들면 1회당의 섭취량은 성인의 경우, 엔테로코커스 속에 속하는 균의 양으로 환산하여서, 1억~1,000억 CFU/㎏체중 정도, 바람직하게는 60억~120억 CFU/㎏체중 정도로 하고, 1일에 1회로부터 수회 섭취하면 된다.
실시예
이하, 실시예에 근거하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 유산균 EF-2001주의 MRSA 감염 방어 시험
군 구성: 3군 비교(각 군 n=10)
A: 대조군
B: 유산균 분말 EF-2001(40㎎/125mL) 군
C: 유산균 분말 EF-2001(80㎎/125mL) 군
시험 방법: 마우스(BALB/C) 4주령을 사용하고, 피험 물질(유산균 분말 EF-2001(니혼베름 주식회사))을 1일 1회 1주간 경구 투여한 후, 메티실린 내성 Staphylococcus aureus(ATCC 43300, 이하 「MRSA」)를 감염(시클로포스파미드(주사용 엔독산(등록상표) 100㎎, 시오노기 제약 주식회사) 200 ㎎/㎏를 복강내 투여(액량: 10mL/㎏) 3일 후, 접종 균액 0.5mL(5×106 CFU)를 복강내에 접종)시키고, 그 후 2주간 관찰하였다(도 1). 대조군에는, 피험물질 대신에, 주사용수(주식회사 오오츠카 제약 공장)를 투여하였다. 사료(CRF-1, 오리엔탈 효모 공업 주식회사)와 음료수(상수도수)는 자유롭게 섭취시켰다.
통계학적 방법: 각 군에서 생존율을 산출하였다. 체중은 각 군의 평균치 및 표준오차를 산출하였다. 유의차 검정은, 관찰 종료일의 생존율에 대해서, 대조군과 각 군간에 Fisher 정확 확률 검정을 실시하였다. 시험 기간 전체에 대해서는 Kaplan-Meier plot를 실시하여서 Logrank test 검정을 수행하였다. 위험률은 5%를 유의로 하고, 각각 5% 미만 및 1% 미만으로 나누어 표시하였다. 또한, 통계 해석은 시판의 통계 프로그램(SAS 시스템: SAS 인스티튜트 재팬)을 이용하였다.
검사 내용: 생존율, 체중, 섭이량 및 섭수량
결과:
생존율(도 2)
A군의 생존율은 MRSA 접종 후 4일 후에 40%가 되고, 12일 후의 생존율을 A군과 B군 및 C군과 비교하면 B군, C군의 생존율은 유의하게 높았다.
체중(도 3)
체중은, 각 군의 생존 동물의 평균 체중이다. A군의 체중은 MRSA 접종 후 1일째에 B군 및 C군과 비교하여 유의하게 낮은 값이었다. 또한, A군에서는 MRSA 접종 12일째에 있어서도 MRSA 접종 전의 체중까지 증가하지 않았지만, B군 및 C군은 회복되어 갔다.
섭이량(도 4)
A군의 섭이량은, MRSA 접종 후 1일째로, B군 및 C군과 비교하여 유의하게 적었다.
섭수량(도 5)
A군의 섭수량은, MRSA 접종 후 1일째로, B군 및 C군과 비교하여 유의하게 적었다.
[실시예 2] 유산균 EF-2001주의 MRSA 감염 후의 치료 효과 시험
군 구성: 2군 비교(각 군 n=10)
A: 대조군
B: 유산균 분말 EF-2001(80㎎/125mL) 군
시험 방법: 마우스(BALB/C) 4주령을 사용하고, 메티실린 내성 Staphylococcus aureus(ATCC 43300, 이하 「MRSA」)를 감염(시클로포스파미드(주사용 엔독산(등록상표) 100㎎, 시오노기 제약 주식회사) 200㎎/㎏를 복강내 투여(액량: 10mL/㎏) 3일 후, 접종 균액 0.5mL(5×106 CFU)를 복강내에 접종) 시킨 후, 피험 물질(유산균 분말 EF-2001(니혼베름 주식회사))을 1일 1회 10일간 경구 투여하였다(도 6). 대조군에는, 피험 물질 대신에, 주사용수(주식회사 오오츠카 제약 공장)를 투여하였다. 사료(CRF-1, 오리엔탈 효모 공업 주식회사)와 음료수(상수도수)는 자유롭게 섭취시켰다.
통계학적 방법: 양쪽 군 모두 생존율을 산출하였다. 체중은 양쪽 군의 각각의 평균치 및 표준오차를 산출하였다. 유의차 검정은, 관찰 종료일의 생존율에 대해서, 대조군과의 사이에 Fisher 정확 확률 검정을 수행하였다. 시험 기간 전체에 대해서는 Kaplan-Meier plot를 실시하여 Logrank test 검정을 수행하였다. 위험률은 5%를 유의로 하여서, 각각 5% 미만 및 1% 미만으로 나누어 표시하였다. 또한 통계 해석은 시판의 통계 프로그램(SAS 시스템: SAS 인스티튜트 재팬)을 이용하였다.
검사 내용: 생존율, 체중, 섭이량 및 섭수량
결과:
생존율(도 7)
A군의 생존율은 MRSA 접종 후 3일 후에 40%가 되고, 10일 후의 생존율을 A군과 B군을 비교하면 B군의 생존율은 유의하게 높았다.
체중(도 8)
체중은, 양쪽 군 각각의 생존 동물의 평균 체중이다. 체중은 MRSA 접종 후에 있어서, 양쪽 군 간에 차이는 보이지 않고, 양쪽 군 모두 MRSA 접종 전의 체중으로 회복하여 갔다.
섭이량(도 9)
A군의 섭이량은, MRSA 접종 후 4 및 5일째로, B군과 비교하여 유의하게 적었다.
섭수량(도 10)
양쪽 군의 섭수량에 유의차는 인정되지 않았다.
본 명세서에서 인용한 모든 간행물, 특허 및 특허 출원을 그대로 참고로 하여서 본 명세서에 삽입되어 있는 것으로 한다.
[산업상의 이용 가능성]
본 발명은 MRSA 감염 방어에 이용할 수 있다.

Claims (6)

  1. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어제.
  2. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 의약품.
  3. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 함유하는 MRSA 감염 방어용 식품.
  4. 엔테로코커스 속에 속하는 균을 의약적으로 유효한 양으로 피험자에게 투여하는 것을 포함하는, MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료 방법.
  5. MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료를 위한, 엔테로코커스 속에 속하는 균의 사용.
  6. MRSA 감염증의 예방 및/또는 치료 방법에 사용하기 위한, 엔테로코커스 속에 속하는 균.
KR1020197024660A 2017-01-30 2018-01-25 Mrsa 감염 방어제 KR102399450B1 (ko)

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