KR20190095210A - 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백 효과가 있는 하이알폴 매트릭스(Hyalpol Matrix) 혼합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 하이알폴 매트릭스 혼합물의 인체 피부 콜라겐 생성 촉진, 멜라닌 형성억제 및 수분함량을 증가시키는 효과를 실험적으로 확인함으로써 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백 기능성 화장료 조성물을 제공할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.

Description

신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법 {Novel Hyalpol Matrix Mixture and Moisturizing, anti-wrinkling, and whitening cosmetic composition comprising the same and preparation method of the same}

본 발명은 신규한 하이알폴 매트릭스(Hyalpol Matrix) 혼합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 상기 하이알폴 매트릭스 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 수분 함량 증가, 콜라겐 생성 촉진 및 멜라닌 합성 저해용 신규한 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.

하이알루로닉애씨드(Hyaluronic acid)는 황산콘드로이틴 등과 함께 주요한 뮤코다당류로 알려져 있다. N-아세틸글루코사민과 글루쿠론산이 교대로 사슬 모양으로 결합한 분자량이 20만∼40만 되는 고분자 화합물이다. 눈의 초자체나 탯줄 등에 존재하며, 점성이 크고 세균의 침입이나 독물의 침투를 막는 데 중요한 물질로 알려져 있다. 이것은 식물의 펙틴질과 비슷하며, 히알루로니다아제에 의하여 가수분해된다. 1934년 소의 초자체막으로부터 마이어가 처음으로 얻었고, 초자체막(hyaloid)의 우론산이라는 뜻으로 이름을 붙였다. 하이알루로닉애씨드는 매우 강력한 친수성과 높은 점성을 가지며, 뛰어난 수분함유능력으로 수분 균형을 유지하는데 큰 역할을 한다. 또한 분자에 카르복실기(COO-)와 같은 음전하를 띠는 부분이 끊임없이 반복되기 때문에 물분자와 결합되는 능력이 매우 뛰어난 것이 특징으로, 온도나 습도와 같은 환경인자에 영향을 받지 않고 안정적이라는 또 다른 특징을 갖는다.

또, 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hylauronic Acid)는 당-유사 분자로 많은 양의 물과 결합할 수 있는 물질이다. 가수분해를 통하여 평균 50kDa 사이즈의 분자량이 작아진 히알루론산이 사용되며 가수분해로 인해 기존 하이알루론산에 비하여 더욱 피부 침투력이 향상되고 사용시 주름개선능이 향상된다는 보고가 있었다(Anti-aging and filling efficacy of six types hyaluronic acid based dermo-cosmetic treatment: double blind, randomized clinical trial of efficacy and safety. Vincenzo Nobile et al, J Cosmet Dermatol. 2014 Dec; 13(4): 277287).

한편, 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate)는 안내(眼)수술에서 세포의 보호,조직간극의 유지, 조직윤활을 위해 사용되는 점성고분자 물질의 대표적인 물질로서, 화학구조는 N-아세틸글루코사민과 글루크론산으로 구성되는 장쇄상의 글리코사미노글리칸으로 대단히 큰 분자량(550~1,000kDa)의 다수의 친수기를 가지며 높은 점성 및 수분 보유능을 나타낸다. 안내 렌즈삽입술 등에 적용되며, 점조수술법 (viscosurgery)에 필요한 것으로 알려져 있다. 소듐하이알루로네이트는 분자량이 크므로 고분자 사슬이 서로 겹치게 되어 얽힌 사슬간의 상호작용(chain-chain interaction)을 통해 고유의 점탄성을 가지며 세포내에서 조직에 수분을 함유케 하고 윤활성을 주는 역할을 수행 한다.

그리고, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer)는 3차원의 Cross - Linked 된 소듐히알루론산이 서로 결합된 형태로, 체내 효소가 이들의 결합을 분해할 때마다 소듐히알루로산이 방출되어 자유롭게 활동하게 된다고 알려져 있다. 이러한 성질 때문에 소듐하이알루로네이트크로스폴리머는 피부에 흡착하여 지속적인 수분을 전달하며 주름개선 효능을 가질 수 있다. 특히 표피에서 주름/미세주름 부위 충진 역할을 수행하여 일반 히알루론산에 비해 히알루론산분해효소에 의한 분해가 쉽지 않아 보습능의 유지기간이 길어질 수 있다는 장점을 가질 수 있으며 피부 탄력을 증대 시키고 보습효과와 피부 진정 효과를 보일 것으로 기대된다.

이 밖에도 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycan)은 동물의 연결조직에서 유래한 물질으로서 글루코사민(glucosamine)과 글루쿠론산(glucuronic acid)으로 구성되어 있다. 흰목이버섯과 표고버섯으로부터 얻은 순수 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸을 고농도로도 사용할 수 있는 것으로 알려진다. 또 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸은 200~600 Dalton의 초 저분자 올리고머로 각질층 아래 표피까지 수분을 전달하여 각질층과 표피층(경피)침투로 수분 보유량을 증가시키는데 기여하는 것으로 알려져 있다. 특히 피부속 수분을 유지하는 보습 효과를 부여함으로써 촉촉한 피부로 가꾸는데 도움을 줄 수 있어서 노화로 인해 굴곡진 피부결을 관리하여 탄력 있고 견고한 피부로 관리하는데 도움을 줄 수 있다고 알려져 있다.

한편, 인체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다. 이렇게 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은, 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 하지만 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미나 주근깨, 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 되고, 또한 레져 인구의 증가로 외부에서 활동하는 것을 즐기는 사람들이 많아지면서 자외선에 의한 멜라닌 색소 침착을 막고자 하는 요구가 늘어나게 되었다.

그리고 피부는 외부에서부터 순서대로 표피, 진피 및 피하조직의 3개층으로 크게 구분되며, 체내의 제기관을 기온 및 습도 변화, 자외선, 기타 물리적, 화학적인 외부 환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능이 있다. 특히 표피에서는 인체 내부의 수분 증발을 방지하는 중요한 역할을 한다. 표피는 외부로부터 순서대로 각질층, 과립층, 유극층 및 기저층으로 구분되며, 각질층의 세포들은 벽돌과 같은 역할을 하고, 각질세포 사이의 세포간 지질들은 모르타르와 같은 역할로 작용하여 피부 장벽을 구성한다. 건강한 사람의 각질세포에는 고농도의 자연보습인자(Natural Moisturing Factor, NMF)가 존재하여 수분과 결합하여 피부에서 수분이 건조되는 것을 억제한다. 그러나 요즘과 같이 환경의 변화나 생활패턴의 변화에 따른 냉/난방의 인위적인 온도 조절, 사회 생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경 오염으로 인한 피부 스트레스, 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 여러 가지 원인으로 인하여 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠 게 되며 피부가 푸석거리고 윤기를 잃어 칙칙하게 보이는 등의 현상이 발생하기 때문에 피부 보습제의 필요가 증가하고 있다.

일반적으로 콜라겐(Collagen)은 경단백질 또는 교원질(膠原質)이라고도 하며 무척추동물이나 척추동물 등의 다세포동물에 널리 분포하며 양적으로도 가장 많이 발견되는 경단백질이다. 포유류에서는 전체 단백질의 약 1/4을 차지하며 동물의 결합조직을 구성하고 있는 주요한 섬유 모양의 장력이 매우 강한 경단백질로서 힘줄이나 인대에서 힘을 손실 없이 전달한다. 콜라겐의 기본적 구조단위는 분자량 약 30만의 트로포콜라겐(母膠原質)이다. 이 분자는 3가닥의 폴리펩티드사슬이 오른쪽꼬임의 3중 나선구조로 되어 있다. 트로포콜라겐 분자는 회합하여 콜라겐 섬유(교원섬유)를 형성하는데 각 분자는 축방향으로 1/4씩 어긋나게 배열되어 64nm 간격의 독특한 줄무늬를 형성하면서 동물의 생장과 함께 분자 사이에 다리 걸친 구조가 생겨 불용성으로 된다. 그러나 콜라겐을 열수나 희산 또는 묽은 알칼리에서 오래 끓이면 물에 녹는 유도 단백질 젤라틴으로 변한다. 콜라겐 펩타이드는 아미노산 중에서 유황을 함유한 아미노산은 적은 편이며 글리신, 프롤린, 히드록시프롤린, 글루타민산 등으로 구성된 섬 유성 단백질의 일종으로 1,000여개의 아미노산이 모여 가늘고 긴 띠의 형상을 지닌 경단백질로서 사람의 몸에서 장기를 감싸는 막, 관절 연골, 눈의 각막, 뼈와 피부 등에 주로 존재하고, 특히 피부 속 진피층의 구성 성분으로 매우 중요한 역할을 하고 있다. 콜라겐의 주된 기능은 피부의 견고성, 조직의 저항력과 결합력, 세포접착의 지탱 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 고령화 및 자외선 조사에 의한 광노화로 인하여 피부의 두께가 얇아지고 이러한 현상은 피부의 주름 형성에 밀접한 관련이 있다고 알려져 있다. 소득수준이 높아지고 노령화사회로 접어들면서 피부 노화에 대한 광범위한 연구가 진전되어 콜라겐의 피부에 대한 기능이 밝혀지고 있다. 그 중에서 콜라겐의 합성 촉진에 의해 콜라겐 대사가 활발해지면 진피 메트릭스의 성분이 증가되어 주름개선, 탄력증진, 피부강화 및 상처치유의 효과를 기대할 수 있다는 주장에 따라 콜라겐 합성 촉진물질인 레티논산(retinoic acid), TGF(transforming growth factor), 동물유래 태반(placenta), 베투린산(betulinic acid), 클로렐라 추출물 등을 피부강화용 화장료 조성물로 사용한 제품들이 많이 출시되었으나 크게 각광을 받지 못하였다. 또한 콜라겐을 피부 보호용 화장품 조성물로 하는 콜라겐을 배합한 제품들이 다수 판 매되고 있으나, 피부 표면에 도포하는 화장품은 고분자인 콜라겐의 경피흡수가 어려워 피부의 보습작용을 기대하기 어렵다는 지적이 있다.

피부 노화를 지연시키고 주름을 개선하기 위하여 다양한 보습제, 멜라닌과 콜라겐의 형성을 촉진하는 화장료가 개발되고 있다. 본 발명 관련 선행기술로서 히알루론산이 함유된 화장료 조성물이 대한민국 공개특허 제10-2016-0015571호에 공지되어 있으나, 이는 인체 지방줄기세포 배양액 추출물과 히알루론산을 함유하는 주름개선, 미백 및 피부탄력 증진 화장료 조성물에 관한 것이다. 한편, 대한민국 공개특허 제 10-2015-0064454호에는 히알루론산 단일물질을 고농도 함유하는 보습효과를 갖는 피부 외용제 조성물 및 그 제조방법이 개시되어 있다. 본 발명은 상기와 같은 점들을 감안하여 지금까지 공지된 바 없는 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물을 제조하고 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 보습기능, 멜라닌 형성 억제 기능 및 콜라겐 형성 촉진 기능을 평가하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

따라서 본 발명의 목적은 화장료 조성물의 원료로서 신규한 하이알폴 매트릭스(Hyalpol Matrix) 혼합물을 제공한다. 본 발명의 다른 목적은 상기 화장료 조성물 원료 하이알폴 매트릭스(Hyalpol Matrix) 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 나아가 주름 개선 및 미백 동시 기능성 화장료 조성물과 그 제조방법을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 상기 다기능성 화장료 조성물 원료로서 하이알폴 매트릭스 혼합물은 하기 전체 화장료 조성물의 10 중량% 내외 사용이 바람직하다.

또, 본 발명의 다른 목적은 전체 화장료 조성물 대비 0.001-0.01%(v/v)의 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid), 0.1-1%(v/v)의 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid), 1-5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate), 1-10%(v/v)의 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer), 1-10%(v/v)의 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycans), 1-10%(v/v) 프로판디올, 나머지는 정제수를 100%에 맞추어 혼합하여 하이알폴 매트릭스 혼합물을 수득하는 단계로 이루어지고,

상기에서 수득한 하이알폴 매트릭스 혼합물을 공시재료로 수분함량을 증대, 콜라겐 생성 촉진, 멜라닌 형성을 억제시킬 수 있는 피부 보습강화, 주름개선 및 미백기능의 실험 결과를 평가함으로써 달성하였다.

본 발명은 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백 효과를 동시에 가지는 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물을 제공하는 뛰어난 효과가 있고, 상기 하이알폴 매트릭스 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

도1은 본 발명에 따른 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물을 농도별로 함유한 배지를 사용하여 배양된 피부 섬유아세포(HDFn)를 24시간 배양한 후 그 배양액으로부터 enzymes-linked immunoassay kit를 이용하여 콜라겐 전구체의 C-말단 펩티드(PIP)의 양을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도2는 본 발명에 따른 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물을 농도별로 함유한 배지를 사용하여 배양된 murine melanoma (B-16 F1) 세포를 원심분리하여 얻은 펠렛(pellet)의 세포 내 멜라닌(Intra-melanin)의 양을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도3은 본 발명에 따라 제조된 화장료를 건강한 피험자(n=6)를 선발하여 전박부분에 도포하고 시간에 따른 전기용량의 변화를 수분측정장치(Skin-O-mat)를 이용하여 수분량을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.

본 발명은 신규한 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물을 개시한다.

본 발명의 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물은 전체 화장료 조성물 대비 0.001-0.01%(v/v)의 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid), 0.1-1%(v/v)의 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid), 1-5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate), 1-10%(v/v)의 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer), 1-10%(v/v)의 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycans), 1-10%(v/v) 프로판디올, 나머지는 정제수를 100%에 맞추어 혼합하여 수득한다. 가장 바람직하게는 전체 화장료 조성물 대비 0.005%(v/v)의 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid), 0.5%(v/v)의 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid), 2.5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate), 5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer), 5%(v/v)의 하이드롤라이즈드클라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycans), 5%(v/v) 프로판디올, 나머지는 정제수를 100%에 맞추어 혼합하여 수득한다.

본 발명의 화장료 조성물에는 본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물 외에 펩타이드나 당이 추가로 포함될 수 있다.

*본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 보다 상세하게 설명하다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것에 불과하며, 본 발명의 권리범위를 한정하는 것으로 의도되지 않는다.

[실시예1] 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물의 제조

본 발명에 따른 신규 하이알폴 매트릭스 혼합물은 전체 화장료 조성물 대비 0.001-0.01%(v/v)의 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid), 0.1-1%(v/v)의 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid), 1-5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate), 1-10%(v/v)의 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer), 1-10%(v/v)의 하이드롤라이즈드글라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycans), 및 1-10%(v/v)의 프로판디올 및 나머지는 정제수를 100%에 맞추어 혼합하여 수득되었다.

[실험예1] 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물의 콜라겐 생성

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물의 콜라겐 생성 효과를 확인하기 위하여 피부 섬유아세포(HDFn)를 48 웰 플레이트에 5x10⁴ cells/well이 되도록 배양 배지 0.3 mL로 접종하여 37℃, 5% CO2에서 배양하였다. 24시간 지난 이후 상기 세포들은 하이알폴 매트릭스를 농도별로 포함한 새로운 배지에서 24시간 동안 배양되었다. 24시간 배양 이후 배양액을 모아서 enzymes-linked immunoassay kit (Takara사)를 이용하여 콜라겐 전구체의 C-말단의 양(PIP)을 측정하였다. 여기서, 콜라겐 용액 640 ng/mL을 이용하여 콜라겐 농도 0 ng-640 ng 사이의 standard curve를 얻어 배지에 있는 콜라겐 양을 계산하였다.

실험 결과, 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물의 1%(v/v) 농도에서 PIP(Procollagen Type 1, Collagen synthesis marker)로 대변되는 13.02%의 콜라겐 생성 효과를 보였다 (도1).

[실험예2] 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물의 멜라닌 합성 저해

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물의 멜라닌 합성 저해 효과를 확인하기 위하여 murine melanoma (B-16 F1) 세포를 적량의 FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6-well plate에 well당 1x10⁵개로 접종한 후 5% CO2, 37℃하에서 세포가 well 바닥에 약 80 % 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료가 적당 농도로 희석된 배지로 교체한 후 5% CO2, 37℃하에서 일정시간 배양하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphated buffer saline)로 세척하고 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 hematocytometer를 이용하여 세포수를 측정한 후 5,000∼10,000 rpm으로 10분간 원심분리 한 다음 상등액을 제거하여 pellet을 얻었다. 상기 세포 pellet은 60℃에서 건조한 후 10% DMSO가 함유된 1M 수산화나트륨액 100 ㎕ 또는 적량의 cell lysis buffer를 넣어 60 ℃ 항온조에서 세포 내 멜라닌을 얻었다. 상기 액을 가지고 마이크로플레이트 측정기로 405nm에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 멜라닌 양 또는 일정 단백질당 멜라닌양을 구하였다.

실험결과, 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물은 1%의 농도에서 20.06%의 멜라닌 형성 억제 효과를 보였다 (도2).

[실험예3] 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물의 수분 함량 증가

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물의 수분 함량 증가 효과를 확인하기 위하여 건강한 피험자(n=6, 28~40세, 평균 34세)를 선발하여 화장품을 전박부분에 도포 (2 cm x 2 cm 구역에 5 분간 흡수) 하고, 시간에 따른 전기용량의 변화를 평가하는 것이다. 본 실험에서는 수분측정 장치 Skin-O-mat(Cosmomed, 독일)을 이용하여 피부의 전기용량을 측정하였으며, 그 결과는 초기값에 대한 상대치의 평균으로 표시하였다. 모든 실험은 온도와 습도가 조절된 공간에서 이루어졌다.

실험결과, 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물을 처리한 군에서 처리 후 2시간 동안 약 40%에 이르는 피부 수분 함량의 증가의 효과를 보였다 (도3).

이하 본 발명을 사용하기에 바람직하고 다양한 화장품 제형을 개시하지만 본 발명의 권리범위는 이들 개시된 제형에 제한되지 않음은 물론이다.

제조예1. 화장수

본 발명 상기 실시예1에서 얻은 신규 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 화장수를 하기 표1과 같이 제조하였다.

성분	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물	10.0
2	글리세린	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0
5	폴리옥시에칠렌 경화피마자유	1.0
6	에탄올	10.0
7	트리에탄올아민	0.1
8	방부제	미량
9	색소	미량
10	향료	미량
11	정제수	잔량
계		100%

상기 표 1에서 11번 물질에 2,3,4,8번 물질을 순서대로 반응용기에 투입하고 교반하여 용해시킨 후, 5번 물질을 60℃ 정도로 가열하여 용해시켰다. 이 후, 10번 물질을 투입하여 용해한 후 11번 물질에 투입하였다. 마지막으로 1,6,7,9 번 물질을 투입하여 충분히 교반시킨 뒤 25℃에서 3일간 숙성시켜 표제의 화장수를 제조하였다. 1번 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물은 10%의 양이 사용되어야 화장수가 혼탁해지는 것을 방지하는 동시에 그 효과를 유지할 수 있었다.

제조예2. 로션

본 발명 상기 실시예1에서 얻은 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 로션을 하기 표2와 같이 제조하였다.

성분	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물	10.0
2	밀납	1.0
3	폴리솔베이트 60	1.5
4	솔비단 세스퀴올레이트	0.5
5	유동 파라핀	10.0
6	소르비단 스테아레이트	1.0
7	친유형 모노스테아린신 글리세린	0.5
8	스테아린산	1.5
9	글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.0
10	프로필렌글리콜	3.0
11	카르복시폴리머	0.1
12	트리에탄올아민	0.2
13	방부제	미량
14	색소	미량
15	향료	미량
16	정제수	잔량
계		100%

상기 표2에서 10,11,13, 16번 물질을 혼합 교반하면서 80~85℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2,3,4,5,6,7,8,9,12번 물질을 80~85℃ 사이로 가열 용해한 후 유화시켰다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 15번 물질을 투입하고 45℃까지 냉각한 뒤 14번 물질을 투입하고 35℃에서 1번 본 발명 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물을 10% 투입하여 점도를 조절하고 25℃까지 냉각한 뒤 25℃에서 3일간 숙성시켜 표제의 로션을 제조하였다.

제조예3. 크림

본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 크림을 하기 표3과 같이 제조하였다.

성분	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물	10.0
2	스테아린산	2.0
3	세틸알콜	2.0
4	글리세릴모노스테아레이트	2.0
5	폴리옥시에틸렌소르비단모소스테아레이트	0.5
6	솔비단세스퀴올레이트	0.5
7	글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트	1.0
8	왁스	1.0
9	유동파라핀스	4.0
10	스쿠알란	4.0
11	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
12	카르복시비닐폴리머	0.3
13	부틸렌글리콜	5.0
14	글리세린	3.0
15	트리에탄올아민	0.5
16	정제수	잔량
계		100%

상기 표3에서 2,3,5 번 물질을 혼합 교반하면서 40~45℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 4,6,7 번 물질을 제조부에 투입하고 유화시켰다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 35℃까지 냉각하고 1번 본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물을 투입하여 점도를 조절하고 25℃까지 냉각한 뒤 25℃에서 3일간 숙성시켜 표제의 크림을 제조하였다.

제조예4. 에센스 제조

본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 신규 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 에센스를 하기 표4와 같이 제조하였다.

성분	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 하이알폴 매트릭스 혼합물	10.0
2	시토 스테롤	1.7
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.5
4	세라마이드	0.7
5	스테아레스-4	1.2
6	콜레스테롤	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4
8	농글리세린	5.0
9	마카다미아 오일	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2
11	산탄검	0.2
12	방부제	미량
13	향료	미량
14	정제수	잔량
계		100%

상기 표4에서 2,3,4,5, 및 6번 물질을 일정한 온도에서 균질화하여 비이온계 양친매성 지질을 제조하였다. 이 비이온계 양친매성 지질과 1,7,8 및 14번 물질을 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로플루이다이져를 통과시키고 이어 9번 물질을 50~60℃로 가온하여 서서히 첨가하여 균질화한 후 다시 마이크로플루이다이져에 재차 통과시켰다. 그 후 10,11,12,13 번 물질을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시켜 표제의 에센스를 제조하였다.

본 발명은 하이알폴 매트릭스 (Hyalpol Matrix) 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물을 제공하는 효과가 있을 뿐 아니라 크림, 로션, 연고 등 다양한 제형의 화장품용 신소재로서 사용될 수 있는 뛰어난 효과가 있으므로 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (2)

1. 0.005%(v/v)의 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid), 0.5%(v/v)의 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid), 2.5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate), 5%(v/v)의 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer), 5%(v/v)의 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸(Hydrolyzed Glycosaminoglycans), 5%(v/v) 프로판디올 및 나머지가 정제수로 이루어진 하이알폴 매트릭스(Hyalopol Matrix) 혼합물
2. 제1항의 매트릭스 혼합물이 10중량% 이상 유효성분으로 함유하는 화장수, 로션, 크림 및 에센스 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 특징인 피부보습, 주름개선 및 미백 동시 기능성 화장료 조성물

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