KR20190077040A - 아연 결합 모이어티를 갖는 포스포이노시티드 3-키나아제 억제제를 이용하는 조합 요법 - Google Patents

아연 결합 모이어티를 갖는 포스포이노시티드 3-키나아제 억제제를 이용하는 조합 요법 Download PDF

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알리 팻태이
가렛 더블유. 리야센
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쿠리스 인코퍼레이션
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Abstract

본 발명은 치료를 필요로 하는 대상에서의 암을 치료하기 위한, 다음을 대상에 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다:
(a) 화학식 I의 화합물:
Figure pct00025

또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 여기서 R은 수소 또는 아실기이고; 및
(b) BCL-2 억제제; 여기서 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제는 조합에서 치료적으로 효과적인 양으로 투여된다. 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물, BCL-2 억제제 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 추가로 제공한다.

Description

아연 결합 모이어티를 갖는 포스포이노시티드 3-키나아제 억제제를 이용하는 조합 요법
관련 출원
본 출원은, 2016년 11월 2일에 출원된 U.S. 가출원 번호 62/416,329의 이익을 주장한다. 상기 출원의 전체 교시내용은 참고로 본 명세서에 편입된다.
암의 치료를 위한 치료적 섭생은 둘 또는 그 이상 물질을 이용하는 조합 요법에 종종 관련된다. 특히, 표적 요법은 암의 다양한 유형을 더욱 효과적으로 치료하고 요법에 내성인 암 세포의 발달을 억제하는 것을 조합할 수 있다. 특정한 유형의 암의 치료를 위한 약물의 특히 효과적인 조합에 대한 암 약물 발달의 분야에서의 필요가 있다.
본 발명은 화학식 I의 화합물,
Figure pct00001
(I),
또는, R은 수소 또는 아실기인, 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 이용하는 조합 요법에 관한 것이다. 아실기는 바람직하게는 R1C(O)-, 여기서 R1은 치환된 또는 비치환된 C1-C24-알킬, 바람직하게는 C1-C10-알킬, 및 더욱 바람직하게는 C1-C6-알킬; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알케닐, 바람직하게는 C2-C10-알케닐, 및 더욱 바람직하게는 C2-C6-알케닐; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알키닐, 바람직하게는 C2-C10-알키닐, 및 더욱 바람직하게는 C2-C6-알키닐; 치환된 또는 비치환된 아릴, 바람직하게는 치환된 또는 비치환된 페닐; 또는 치환된 또는 비치환된 헤테로아릴이고, A는 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 피리딜 또는 임의로 치환된 피리미딜이고; 및 암의 치료를 위한 BCL-2 억제제이다. 예를 들어, 하나의 구체예에서, 본 발명은 대상에서의 치료를 필요로 하는 암을 예방하는 또는 치료하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제를 대상에 투여하는 것을 포함하고, 여기서 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 조합에서 치료적으로 효과적인 양으로 투여된다. 바람직하게는, 화학식 I의 화합물 또는 그의 염 및 BCL-2 억제제는 대상에 상승 작용인 양으로 투여된다.
본 발명은 또한, BCL-2 억제제 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체와 조합하여, 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
화학식 I의 화합물 및, 특히, R은 수소이고 A는 2-메톡시-5-피리딜인 화학식 I의 화합물은, 치료적 물질로서의 사용을 위한, 가령 PI3 키나아제 활성 및/또는 HDAC 활성에 관련된 암 및 다른 질환 및 장애의 치료를 위한 유리한 특징을 갖는, 화합물 1로서 본 명세서에서 또한 나타내어진다. 예를 들어, 화합물 1은 분자 표적 PI3K 및 HDAC에 대항하여 강력한 저해 활성 및 시험관 내 다양한 암 세포주에 대항하여 강력한 항증식성 활성을 갖는다. 화합물 1은 동물 모델 내에서 관찰되는 것과 같은 현저한 구강 생체 이용률을 갖는다. 이종이식 종양을 갖는 마우스에서의 구강 또는 정맥 내 투여 시, 화합물은 종양 조직에 의한 현저한 흡수율 및 종양 조직에서의 약력학적 활성을 보여준다. 화합물 1은 구강 또는 정맥 내 투여 다음의 마우스 이종이식 종양 모델에서의 실질적인 항종양 활성을 또한 보여준다. 화합물은, 예를 들어, Ames 테스트를 사용하여 유전독성을 테스트하는 것에 의해 보여지는 것과 같은 유리한 안전성 프로파일을 또한 갖는다.
본 발명의 방법 및 조성물에서 유용한 BCL-2 억제제는 바람직하게는 베네토클락스이다.
앞서 말한 및 다른 목적, 본 발명의 특징 및 이점은, 수반되는 도면에서 보여지는 것과 같은, 본 발명의 바람직한 구체예의 다음의 더욱 특정한 서술로부터 분명할 것이다.
도 1은 세포 성장 또는 다음의 세포주 (a) KARPAS422, (b) OCILY3, (c) SUDHL4, (d) WSUDLCL2, (e) DOHH2 및 (f) U2392에 대한 베네토클락스의 농도 증가의 효과, 베네토클락스 및 화합물 1 조합의 예측된 부가 효과 및 베네토클락스 및 화합물 1 조합의 관찰되는 효과를 보여주는 그래프를 제시한다.
도 2은 (A) 50 mg/kg 또는 (B) 100/75 mg/kg에서의 베네토클락스 및 화합물 1의 일정한 투여량에서, DOHH2 미만성 거대 B 세포 림프종 모델에서의 베네토클락스 및 화합물 1 개별 및 조합의 효과를 보여주는 그래프를 제시한다.
도 3은 50 mg/mL 경구 베네토클락스 및 100 mg/kg 정맥 내 화합물 1의 투여량에서의 SUDHL4 미만성 거대 B 세포 림프종 모델에서의 베네토클락스 및 화합물 1 개별 및 조합의 효과를 보여주는 그래프이다.
도 4는 50 mg/mL 경구 베네토클락스 및 75 mg/kg 경구 화합물 1의 투여량에서의 SUDHL4 미만성 거대 B 세포 림프종 모델에서의 베네토클락스 및 화합물 1 개별 및 조합의 효과를 보여주는 그래프이다.
본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제를 포함하는 암을 위한 조합 요법에 관련된 방법 및 조성물에 관한 것이다. 화학식 I의 화합물의 바람직한 구체예에서, A는 메톡시, 아미노 또는 N-메틸아미노로 치환된 페닐, 피리딜 또는 피리미딜이다. 더욱 바람직하게는, A는 아래에 설명된 그룹 중 하나이다.
Figure pct00002
화학식 I의 화합물의 바람직한 구체예에서, A는 상기 보여지는 그룹 중 하나이고 R은 수소이다.
바람직한 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 아래의 화합물 1, 2 및 3 및 그의 약제학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된다.
Figure pct00003
화합물 1
Figure pct00004
본 발명은 대상에서의 치료를 필요로 하는 암을 예방 또는 치료하기 위한 방법을 제공한다. 상기 방법은 대상에 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제를 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제는 조합에서 치료적으로 효과적인 양으로 투여된다. BCL-2 억제제는 BCL-2 단백질 또는 그러한 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염의 항-세포 자멸 활성을 억제하는 임의의 화합물일 수 있다. 적합한 BCL-2 억제제는, 베네토클락스, 오바토클락스, 나비토클락스, 사부토클락스, 감보그산, HA14-1, ABT-737, TW-37, APG-1252, AZD-4320, 유비데카레논, CNDO-113, CNDO-123, BCL-201, ATSP-1135, ATSP-1407, ATSP-1505, ATSP-1645, ATSP-1921, 및 AT101을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 특정한 구체예에서, BCL-2 억제제는 아래에 설명된 화합물 및 그의 약제학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된다.
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
바람직한 구체예에서, BCL-2 억제제는, 다음의 구조를 갖는, 베네토클락스 (ABT-199):
Figure pct00008
또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이다.
치료될 대상은 포유류, 가령 개, 고양이, 소, 또는 양 동물이다. 바람직하게는 대상은 사람이다.
본 발명의 방법 및 조성물의 특히 바람직한 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 화합물 1 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이고 BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이다.
본 발명의 방법의 특정한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 대상에 동시에 투여된다. 특정한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 투여의 동일하거나 상이한 경로를 걸쳐 대상에 동시에 투여된다.
특정한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 대상에 순차적으로 투여된다. 특정한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 투여의 동일하거나 상이한 경로를 걸쳐 대상에 순차적으로 투여된다. 하나의 구체예에서, BCL-2 억제제는 대상에 화학식 I의 화합물을 투여한 이후에 대상에 투여된다. 또 다른 구체예에서, BCL-2 억제제는 대상에 화학식 I의 화합물을 투여하기 이전에 대상에 투여된다.
화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 투여되는 특정한 구체예에서, 및 각각의 조성물은 점막 경유, 경구, 직장 내, 질 내, 설하, 정맥 내, 근육 내, 피하, 협측, 비강 내, 수조 내, 복강 내, 또는 귀 내로 독립적으로 투여된다. 특정한 구체예에서, 하나 또는 둘 모두의 조성물은좌제 또는 하이드로겔로 투여된다. 바람직한 구체예에서, 두 조성물 모두는 경구 투여된다.
화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 투여되는 특정한 구체예에서, 그들의 투여의 시기는, 물질의 약리학적 활성이 시간적으로 겹치고, 그렇게 함으로써 조합된 치료적 효과를 행사한다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 약 60 분 이상의 시간 간격을 갖고 순차적으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제의 순차적인 투여 사이의 시간은 60 분 이상, 2 시간 이상, 5 시간 이상, 10 시간 이상, 1 일 이상, 2 일 이상, 3 일 이상, 또는 1 주 이상 떨어져 있을 수 있다. 최적의 투여 시간은 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제의 흡수, 분포, 대사 및/또는 배설의 속도에 의존할 것이다.
화학식 I의 화합물 또는 BCL-2 억제제 중 하나가 첫번째로 투여될 수 있다. 예를 들어, BCL-2 억제제는 화학식 I의 화합물은 투여되는 시간 이후에 대상에 투여될 수 있다. 이 경우에서, 화학식 I의 화합물은 대상에 의해 약 50% (예를 들어, 약 40%, 약 30%, 약 20%, 약 10%, 또는 약 5% 시간 이전에) 대사되거나 배설되는 시간 이전에 BCL-2 억제제를 투여하는 것이 요망될 수 있다. 또 다른 실시예에서, 화학식 I의 화합물의 제1 투여량은 대상에 투여하고, 뒤이어 BCL-2 억제제의 단일 투여량, 뒤이어 화학식 I 조성물의 화합물의 부가적인 투여량을 이후 투여한다.
특정한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는, 점막 경유, 경구, 직장 내, 질 내, 설하, 정맥 내, 근육 내, 피하 협측, 비강 내, 수조 내, 복강 내, 또는 귀 내 투여되는, 단일 제형으로 투여된다. 바람직하게는, 단일 제형은 경구 투여된다.
화학식 I의 화합물은 주 당 약 1번, 하루 당 약 1 번, 또는 매일 1 번 이상 투여될 수 있다. 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 경구 투여된다. 또 다른 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 비경구적으로, 예를 들어, 정맥 내 투여된다. 화학식 I의 화합물은 약 1 mg 내지 약 1,500 mg의 일일 투여량으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물은 약 200 mg의 일일 투여량으로 투여될 수 있다. 하나의 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 체중의 kg 당 약 1 mg 내지 약 250 mg의 투여량으로 투여된다.
하지만, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제의 투여량 빈도수 및 총 일일 투여량은, 본 업계의 숙련가에 의해, 예를 들어, 담당 의사에 의해 타당한 의학적 판단의 범위 이내에서 개별 환자에 대해 결정될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 특정한 투여량 또는 임의의 특정한 환자를 위한 투여량은, 치료될 장애 및 장애의 중증도; 이용되는 특정한 화합물의 활성; 이용되는 특정한 조성물; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별 및 식단; 투여의 시간, 투여의 경로, 및 이용되는 특정한 화합물의 배설의 속도; 치료의 지속 기간; 이용되는 특정한 화합물과의 조합으로 또는 동시에 사용되는 약물; 의학적 업계에서 잘 알려진 요소 등을 포함하는 다양한 요소에 의존할 것이다.
용어 "암"은, 악성 신생 세포, 가령 종양, 신생물, 암종, 육종, 백혈병, 림프종 등의 증식에 의해 초래되는 임의의 암을 나타낸다. 예를 들어, 암은, 중피종, 백혈병 및 림프종 가령 피부 T-세포 림프종 (CTCL), 피부 외 말초 T-세포 림프종, 림프종 관련된 사람 T-세포 림프구 친화성 바이러스 (HTLV) 가령 성인 T-세포 백혈병/림프종 (ATLL), B-세포 림프종, 가령 미만성 거대 B-세포 림프종 (DLBCL), 급성 비림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 림프종, 및 다발성 골수종, 비-호지킨 림프종, 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 호지킨 림프종, 버킷 림프종, 성인 T-세포 백혈병 림프종, 급성-골수성 백혈병 (AML), 만성 골수성 백혈병 (CML), 또는 간세포 암종을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 추가적인 예시는 골수이형성 증후군, 아동 고형 종양 가령 뇌 종양, 신경아세포종, 망막모세포종, 윌름스 종양, 골 종양, 및 연부-조직 육종, 성인의 공통 고형 종양 가령 머리 및 목 암 (예를 들어, 구강, 후두, 비인두 및 식도), 비뇨생식기 암 (예를 들어, 전립선, 방광, 신장, 자궁, 난소, 고환), 폐암 (예를 들어, 소세포 및 비-소세포), 유방암, 췌장암, 흑색종 및 다른 피부암, 위암, 뇌 종양, 종양 에 관련된 골린 증후군 (예를 들어, 수모세포종, 수막종 등), 및 간암을 포함한다. 대상 화합물에 의해 치료될 수 있는 암의 부가적인 예시적 형태는, 골격 또는 평활근의 암, 위암, 소장의 암, 직장 암종, 침 샘의 암, 자궁내막 암, 부신 암, 항문 암, 직장 암, 부갑상선 암, 및 뇌하수체 암을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 기술된 화합물은 예방, 치료 및 연구하는데 유용할 수 있는 부가적인 암은, 예를 들어, 결장 암종, 가계성 선종 폴립 암종 및 유전성 비-폴립 결장직장 암, 또는 흑색종이다. 추가로, 암은, 순 암종, 후두 암종, 하인두 암종, 혀 암종, 침 샘 암종, 위 암종, 아데노암종, 갑상선 암 (수질 및 유두 갑상선 암종), 신장 암종, 콩팥 실질 암종, 자궁경부 암종, 자궁 체부 암종, 자궁내막 암종, 융모막 암종, 고환 암종, 비뇨기 암종, 흑색종, 뇌 종양 가령 교모세포종, 별아교세포종, 수막종, 수모세포종 및 말초 신경외배엽 종양, 담낭 암종, 기관지 암종, 다발성 골수종, 기저세포종, 기형종, 망막모세포종, 맥락막 흑색종, 정상피종, 횡문근육종, 두개인두종, 골육종, 연골육종, 근육종, 지방육종, 섬유육종, 어윙 육종, 및 형질세포종을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 하나의 양상에서, 본 발명은 암의 치료를 위한 약제의 제조에서 본 발명의 하나 또는 그 이상의 화합물의 용도를 제공한다.
하나의 구체예에서, 치료될 암은 혈액학적 암이다. 혈액학적 암은 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종을 포함한다. 예시는, 림프구성 백혈병, 가령 전구체 B 급성 림프아구성 백혈병, 전구체 T 급성 림프아구성 백혈병, 버킷 백혈병, 및 급성 이중표현형 백혈병을 포함하는 급성 림프구성 백혈병; 및 B-세포 전림프구성 백혈병을 포함하는 만성 림프구성 백혈병; 및 골수성 백혈병, 가령, 급성 전골수성 백혈병, 급성 골수아구성 백혈병, 및 급성 거핵아구성 백혈병을 포함하는 급성 골수성 백혈병; 및 만성 단핵구성 백혈병을 포함하는 만성 골수성 백혈병; 급성 단핵구성 백혈병을 포함한다. 다른 백혈병은 털 세포 백혈병; T-세포 전림프구성 백혈병; 거대 과립형 림프구성 백혈병; 및 성인 T-세포 백혈병을 포함한다.
림프종은, B-세포 림프종, T 세포 림프종, NK 세포 림프종 및 전구체 림프구성 신생물을 포함하는 호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종을 포함한다. B 세포 림프종은, 버킷 림프종/백혈병, 미만성 거대 B 세포 림프종, B-세포 만성 림프구성 백혈병/소세포 림프종, B-세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포성 림프종 (가령 발덴스트룀 고분자글로불린혈증), 비장 변연부 림프종, 털 세포 백혈병, 형질 세포 신생물, 형질 세포 골수종 (다발성 골수종으로 또한 알려진), 형질세포종, 단클론 면역 글로불린 침착 질환, H쇄병, 또한 MALT 림프종으로 불리는, 결절외 변연부 B 세포 림프종, 림프절 변연부 B 세포 림프종, 소포성 림프종, 원발성 피부 여포성 중앙 림프종, 외투세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 원발성 종격동 (흉선) 거대 B-세포 림프종, 혈관 내 거대 B-세포 림프종, ALK+ 거대 B-세포 림프종, 형질모세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, HHV8-연관 다원성 캐슬만 질환에서 발생하는 거대 B-세포 림프종, 림프종모양 육아종증, 원발성 종격동 (흉선) 거대 B-세포 림프종, 혈관 내 거대 B-세포 림프종, ALK+ 거대 B-세포 림프종, 형질모세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 및 HHV8-연관 다원성 캐슬만 질환에서 발생하는 거대 B-세포 림프종을 포함한다.
T-세포 및 NK 세포 림프종은 피부 T-세포, T-세포 전림프구성 백혈병, T-세포 거대 과립형 림프구 백혈병, 공격성 NK 세포 백혈병, 성인 T-세포 백혈병/림프종, 결절외 NK/T-세포 림프종, 비강 유형, 장질환-연관 T-세포 림프종, 간비장 T-세포 림프종, 아구성 NK 세포 림프종, 균상식육종 / 세자리 증후군, 원발성 피부 CD30-양성 T 세포 림프구증식 장애, 가령 원발성 피부 역형성 대세포 림프종, 림프종모양 구진증, 달리 명시되지 않은 말초 T-세포 림프종, 혈관면역모구성 T 세포 림프종, 및 역형성 대세포 림프종을 포함한다.
하나의 구체예에서, 치료될 암은 BCL-2 억제제에 내성이다. 특정한 구체예에서, 암은 베네토클락스에 내성이다.
바람직한 구체예에서, 치료될 암은 비-호지킨 림프종 및, 더욱 바람직하게는, B 세포 림프종이다. 특히 바람직한 구체예에서, 치료될 암은 미만성 거대 B 세포 림프종 (DLBCL), 예를 들어 ABC 하위 유형의 DLBCL, GCB 하위 유형의 DLBCL, 이중 히트 DLBCL 또는 이중 발현 DLBCL이다 (Quintanilla-Martinez, L., Hematol. Oncol. 2015, 33:50-55). 특정한 구체예에서, 암은 재발하거나 난치성 DLBCL이다.
하나의 구체예에서, 본 발명은 BCL-2 억제제와 조합하여 암의 치료를 위한 약제의 제조에서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 암을 치료하기 위한 약제의 제조에서 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제의 용도를 제공한다. 바람직한 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 화합물 1 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 및 BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이다.
본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물, 및 BCL-2 억제제를 추가로 포함한다. 하나의 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 화합물 1, 화합물 2 또는 화합물 3, 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염이다.
화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는, 비경구, 정맥 내, 근내, 피하, 피하 주입, 구강, 설하, 볼, 비강, 폐, 피부 경유, 국소, 질, 직장, 및 점막 경유 투여 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는, 임의의 적합한 수단에 의해 투여될 수 있다. 국소 투여는 피부 경유 투여 가령 피부 경유 패치 또는 이온토포레시스 장치의 사용을 또한 포함할 수 있다. 약제학적 제제는, 투여의 선택된 방식에 적합한 화학식 I의 화합물, BCL-2 억제제, 또는 둘 모두를 함유하는 고체, 반고체 또는 액체 제제 (정제, 펠렛, 트로키, 캡슐, 좌제, 크림, 연고, 에어로졸, 분말, 액체, 에멀젼, 현탁액, 시럽, 주사 등)를 포함한다. 하나의 구체예에서, 약제학적 조성물은 경구 투여되고, 경구 투여에 적합한 형태로, 즉, 고체 또는 액체 제제로서 이와 같이 제제화된다. 적합한 고체 구강 제제는 정제, 캡슐, 알약, 과립제, 펠렛, 사쉐 및 발포정, 분말, 등을 포함한다. 적합한 액체 구강 제제는 용액, 현탁액, 분산액, 에멀젼, 오일 등을 포함한다. 본 발명의 하나의 구체예에서, 조성물은 캡슐로 제제화된다. 에 따라서 본 구체예, 본 발명의 조성물은 활성 화합물 및 불활성 담체 또는 희석제에 더하여, 경질 젤라틴 캡슐을 포함한다.
담체 또는 희석제로서 흔히 사용되는 임의의 불활성 부형제는 본 발명의 제제, 가령 예를 들어, 검, 전분, 당, 셀룰로오스 물질, 아크릴레이트, 또는 그의 혼합물에서 사용될 수 있다. 바람직한 희석제는 미소결정질 셀룰로오스이다. 조성물은 붕해제 (예를 들어, 크로스카멜로오스 소듐) 및 윤활제 (예를 들어, 마그네슘 스테아레이트)를 추가로 포함할 수 있고, 결합제, 완충제, 프로테아제 억제제, 계면활성제, 가용화제, 가소제, 유화제, 안정화제, 점도 상승제, 감미료, 막 형성제, 또는 그의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 첨가제를 부가적으로 포함할 수 있다. 게다가, 본 발명의 조성물은 제어된 방출 또는 즉시 방출 제제의 형태일 수 있다.
액체 제제에 대해, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 수용성 또는 비-수용성 용액, 현탁액, 에멀젼 또는 오일일 수 있다. 비-수용성 용매의 예시는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 및 주사 가능한 유기 에스테르 가령 에틸 올리에이트이다. 수용성 담체는, 식염수 및 완충된 매질을 포함하는, 물, 알코올/수용성 용액, 에멀젼 또는 현탁액을 포함한다. 오일의 예시 석유, 동물, 식물, 또는 합성 유래의 것, 예를 들어, 땅콩유, 콩유, 광유, 올리브유, 해바라기유, 및 어류-간유가 있다. 용액 또는 현탁액은 다음의 성분을 또한 포함할 수 있다: 멸균 희석제 가령 주사용수, 식염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매; 항균성 물질 가령 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제 가령 아스코르브산 또는 소듐 바이설파이트; 킬레이트제 가령 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA); 완충제 가령 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트, 및 장력의 조정을 위한 물질 가령 소듐 클로라이드 또는 덱스트로오스. pH는, 산 또는 염기, 가령 염산 또는 소듐 하이드록사이드를 이용하여 조절될 수 있다.
게다가, 조성물은 결합제 (예를 들어, 아카시아, 옥수수전분, 젤라틴, 카보머, 에틸 셀룰로오스, 구아 검, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸 셀룰로오스, 포비돈), 붕해제 (예를 들어, 옥수수전분, 감자 전분, 알긴산, 실리콘 디옥사이드, 크로스카멜로오스 소듐, 크로스포비돈, 구아 검, 소듐 전분 글리콜레이트, 프리모겔), 다양한 pH 및 이온 강도의 완충제 (예를 들어, 트리스-HCI., 아세테이트, 포스페이트), 표면에 대한 흡수를 예방하기 위한 첨가제 가령 알부민 또는 젤라틴, 세제 (예를 들어, 트윈 20, 트윈 80, 플루로닉 F68, 담즙산 염), 프로테아제 억제제, 계면활성제 (예를 들어, 소듐 라우릴 설페이트), 침투 촉진제, 가용화제 (예를 들어, 글리세롤, 폴리에틸렌 글리세롤, 폴리에틸렌 글리콜), 활제 (예를 들어, 콜로이드질 실리콘 디옥사이드), 항-산화제 (예를 들어, 아스코르브산, 소듐 메타바이설파이트, 부틸화된 히드록시아니솔), 안정제 (예를 들어, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스), 점도 상승제 (예를 들어, 카보머, 콜로이드질 실리콘 디옥사이드, 에틸 셀룰로오스, 구아 검), 감미료 (예를 들어, 수크로오스, 아스파탐, 시트르산), 향료 물질 (예를 들어, 페퍼민트, 메틸 살리실레이트, 또는 오렌지 향료), 보존제 (예를 들어, 티메로살, 벤질 알코올, 파라벤), 윤활제 (예를 들어, 스테아르산, 마그네슘 스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트), 흐름-보조제 (예를 들어, 콜로이드질 실리콘 디옥사이드), 가소제 (예를 들어, 디에틸 프탈레이트, 트리에틸 시트레이트), 유화제 (예를 들어, 카보머, 히드록시프로필 셀룰로오스, 소듐 라우릴 설페이트), 중합체 코팅 (예를 들어, 폴록사머 또는 폴록사민), 코팅 및 막 형성제 (예를 들어, 에틸 셀룰로오스, 아크릴레이트, 폴리메타크릴레이트) 및/또는 보조제를 추가로 포함할 수 있다.
하나의 구체예에서, 활성 화합물은 신체, 가령, 삽입물 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 제어된 방출 제제로부터의 신속한 제거에 대항하여 화합물을 보호하는 담체와 함께 제조된다. 생분해성, 생체 적합성 중합체, 가령 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르소에스테르, 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 그러한 제제의 제조 방법은 본 업계의 숙련가에게 분명할 것이다. 물질은 Alza Corporation 및 Nova Pharmaceuticals, Inc로부터 상업적으로 또한 얻어질 수 있다. 리포솜 현탁액 (바이러스성 항원에 대한 단클론 항체와 함께 감염된 세포를 표적으로 하는 리포솜을 포함하는)은 약제학적으로 허용 가능한 담체로서 또한 사용될 수 있다. 이것은 본 업계의 숙련가에게 알려진, 예를 들어, 미국 특허 번호 4,522,811에서 기술된 것과 같은 방법에 따라 제조될 수 있다.
투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 투여량 단위 형태로 경구 조성물을 제제화 하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서에서 사용되는 것과 같은 투여량 단위 형태는 치료될 대상을 위한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 나타내고; 각각의 단위는 요구되는 약제학적 담체에 관련하여 요망되는 치료적 효과를 생성하도록 계산된 활성 화합물의 선결정되는 양을 함유한다. 본 발명의 투여량 단위 형태에 대한 사양은 활성 화합물의 독특한 특성 및 달성될 특정한 치료적 효과, 및 개별의 치료를 위한 그러한 활성 화합물을 배합하는 분야에서의 내재된 제한에 의해 지시되고 직접 의존한다.
경구 투여를 위해 의도된 본 발명의 제제는, 장쇄 지방산 또는 그의 염, 가령 데카노산 및 소듐 데카노에이트를 포함하는 하나 또는 그 이상의 침투 촉진제를 포함할 수 있다.
하나의 바람직한 구체예에서, 화합물은 정맥 내 주사를 위한 수용성 용액으로 제제화될 수 있다. 하나의 구체예에서, 가용화제는 적합하게 이용될 수 있다. 특히 바람직한 가용화제는, 시클로덱스트린 및 개질된 시클로덱스트린, 가령, 설포부틸 유도체화된-β-시클로덱스트린, 가령 상표명 CAPTISOL® 하에서 CyDex, Inc.에 의해 판매되는 설포부틸에테르-7-β-시클로덱스트린을 포함하는 설폰산 치환된 β-시클로덱스트린 유도체 또는 그의 염을 포함한다.
약제학적 조성물은 투여에 대한 지시와 함께 용기, 팩, 또는 디스펜서 내에 포함될 수 있다.
며칠 내지 몇 년의 기간 동안 일일 투여는 지속적으로 반복될 수 있다. 구강 치료는 일주일 및 환자의 수명 사이 동안 계속할 수 있다. 바람직하게는 투여는, 환자가 추가로 투여가 요구되는지를 결정하기 위해 평가될 수 있는 시간인 연속적인 5일 이후 동안 일어날 수 있다. 투여는 지속적인 또는 간헐적인, 예를 들어, 다수의 연속적인 며칠 동안의 치료 뒤이어 휴식 기간일 수 있다. 본 발명의 화합물은 치료의 첫째 날에 정맥 내 투여되고, 둘째 날 및 그 후의 모든 연속적인 날에서 경구 투여될 수 있다.
활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물의 제제는, 예를 들어, 혼합, 과립화, 또는 정제-형성 공정에 의해, 본 업계에서 잘 이해된다. 활성 치료적 성분은 종종 약제학적으로 허용 가능한 및 활성 성분과 양립될 수 있는 부형제와 혼합된다. 경구 투여에 대해, 활성 물질은 본 목적을 위해 통상적인 첨가제, 가령 비히클, 안정제, 또는 불활성 희석제와 혼합되고, 통상적인 방법에 의해 상기 서술된 것과 같은 투여를 위해 적합한 형태, 가령 정제, 코팅된 정제, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐, 수용성, 알코올 또는 유성 용액 등으로 전환된다.
환자에 투여되는 화합물의 양은 환자에서 독성을 초래하는 양 미만이다. 특정한 구체예에서, 환자에 투여되는 화합물의 양은 화합물의 독성 수준과 동등하거나 이를 초과하는 환자의 혈장 내 화합물의 농도를 초래하는 양 미만이다. 바람직하게는, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 10 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 25 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 50 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 100 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 500 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 1000 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 2500 nM에서 유지된다. 하나의 구체예에서, 환자의 혈장 내 화합물의 농도는 약 5000 nM에서 유지된다. 본 발명의 실행에서 환자에 투여되어야 하는 화합물의 최적의 양은 사용되는 특정한 화합물 및 치료될 암의 유형에 의존할 것이다.
정의
본 발명을 기술하기 위해 사용되는 다양한 용어의 정의가 아래에 열거된다. 개별적으로 또는 더욱 큰 그룹의 일부로서, 특정한 사례에서 제한하지 않는 한, 이들 정의는 본 명세서 및 청구범위 내내 사용되는 것과 같은 용어에 적용된다.
용어 "아실"은 수소, 알킬, 부분적으로 포화된 또는 완전히 포화된 시클로알킬, 부분적으로 포화된 또는 완전히 포화된 헤테로사이클, 아릴, 및 헤테로아릴 치환된 카르보닐기를 나타낸다. 예를 들어, 아실은 가령 (C1-C6)알카노일 (예를 들어, 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 발레릴, 카프로일, t-부틸아세틸 등), (C3-C6)시클로알킬카르보닐 (예를 들어, 시클로프로필카르보닐, 시클로부틸카르보닐, 시클로펜틸카르보닐, 시클로헥실카르보닐 등), 헤테로시클릭카르보닐 (예를 들어, 피롤리디닐카르보닐, 피롤리드-2-온-5-카르보닐, 피페리디닐카르보닐, 피페라지닐카르보닐, 테트라하이드로푸라닐카르보닐 등), 아로일 (예를 들어, 벤조일) 및 헤테로아로일 (예를 들어, 티오페닐-2-카르보닐, 티오페닐-3-카르보닐, 푸라닐-2-카르보닐, 푸라닐-3-카르보닐, 1H-피로일-2-카르보닐, 1H-피로일-3-카르보닐, 벤조[b]티오페닐-2-카르보닐 등)기를 포함한다. 게다가, 아실기의 알킬, 시클로알킬, 헤테로사이클, 아릴 및 헤테로아릴 부분은 각각의 정의 내에 기술된 임의의 그룹 중 하나일 수 있다. "임의로 치환된"으로서 명시될 때, 아실기는 비치환되거나 "치환된"에 대한 정의 내 아래에 열거된 치환기의 그룹으로부터 독립적으로 선택된 하나 또는 그 이상의 치환기 (전형적으로, 하나 내지 세 개의 치환기)로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 아실기의 알킬, 시클로알킬, 헤테로사이클, 아릴 및 헤테로아릴의 부분은, 각각, 치환기의 바람직한 및 더욱 바람직한 리스트 내 상기 기술된 것과 같이 치환될 수 있다.
용어 "알킬"은 1 내지 약 20 개의 탄소 원자 또는, 바람직하게는, 1 내지 약 12 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형 라디칼을 포괄한다. 더욱 바람직한 알킬 라디칼은 1 내지 약 10 개의 탄소 원자를 갖는 "저급 알킬" 라디칼이다. 1 내지 약 8 개의 탄소 원자를 갖는 저급 알킬 라디칼이 가장 바람직하다. 그러한 라디칼의 예시는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소-아밀, 헥실 등을 포함한다.
용어 "알케닐"은 2 내지 약 20 개의 탄소 원자 또는, 바람직하게는, 2 내지 약 12 개의 탄소 원자의 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 선형 또는 분지형 라디칼을 포괄한다. 더욱 바람직한 알케닐 라디칼은 2 내지 약 10 개의 탄소 원자 및 더욱 바람직하게는 약 2 내지 약 8 개의 탄소 원자를 갖는 "저급 알케닐" 라디칼이다. 알케닐 라디칼의 예시는 에테닐, 알릴, 프로페닐, 부테닐 및 4-메틸부테닐을 포함한다. 용어 "알케닐", 및 "저급 알케닐"은 "시스" 및 "트랜스" 배향, 또는 그렇지 않으면, "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포괄한다.
용어 "알키닐"은 2 내지 약 20 개의 탄소 원자 또는, 바람직하게는, 2 내지 약 12 개의 탄소 원자의 적어도 하나의 탄소-탄소 3중 결합을 갖는 선형 또는 분지형 라디칼을 포괄한다. 더욱 바람직한 알키닐 라디칼은 2 내지 약 10 개의 탄소 원자 및 더욱 바람직하게는 약 2 내지 약 8 개의 탄소 원자를 갖는 "저급 알키닐" 라디칼이다. 알키닐 라디칼의 예시는 프로파르질, 1-프로피닐, 2-프로피닐, 1-부틴, 2-부티닐 및 1-펜티닐을 포함한다.
용어 "아릴", 단독 또는 조합에서, 하나, 둘 또는 세 개의 고리를 함유하는 카르보시클릭방향족 시스템을 의미하고 여기서 그러한 고리는 결합된 방식으로 함께 부착될 수 있거나 융합될 수 있다. 용어 "아릴"은 방향족 라디칼 가령 페닐, 나프틸, 테트라하이드로나프틸, 인단 및 비페닐을 포괄한다.
용어 "헤테로아릴"은 불포화된 헤테로시클릴 라디칼을 포괄한다. 헤테로아릴 라디칼의 예시는, 1 내지 4 질소 원자를 함유하는 불포화된 3 내지 6-원, 바람직하게는 5 또는 6-원, 헤테로모노시클릭기, 예를 들어, 피롤릴, 피롤리닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 피리딜, 피리미딜, 피라지닐, 피리다지닐, 트리아졸릴 (예를 들어, 4H-1,2,4-트리아졸릴, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 2H-1,2,3-트리아졸릴 등) 테트라졸릴 (예를 들어, 1H-테트라졸릴, 2H-테트라졸릴 등) 등; 1 내지 5 질소 원자를 함유하는 불포화된 축합형 헤테로시클릴기, 예를 들어, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리지닐, 벤즈이미다졸릴, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 인다졸릴, 벤조트리아졸릴, 테트라졸로피리다지닐 (예를 들어, 테트라졸로[1,5-b]피리다지닐 등) 등; 산소 원자를 함유하는 불포화된 3 내지 6-원, 바람직하게는 5- 또는 6-원, 헤테로모노시클릭기, 예를 들어, 피라닐, 푸릴 등; 황 원자를 함유하는 불포화된 3 내지 6-원 헤테로모노시클릭기, 예를 들어, 티에닐 등; 1 내지 2 산소 원자 및 1 내지 3 질소 원자를 함유하는 불포화된 3 내지 6-원, 바람직하게는 5- 또는 6-원, 헤테로모노시클릭기, 예를 들어, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 옥사디아졸릴 (예를 들어, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴, 1,2,5-옥사디아졸릴 등) 등; 1 내지 2 산소 원자 및 1 내지 3 질소 원자를 함유하는 불포화된 축합형 헤테로시클릴기 (예를 들어, 벤즈옥사졸릴, 벤즈옥사디아졸릴 등); 1 내지 2 황 원자 및 1 내지 3 질소 원자를 함유하는 불포화된 3 내지 6-원, 바람직하게는 5- 또는 6-원, 헤테로모노시클릭기, 예를 들어, 티아졸릴, 티아디아졸릴 (예를 들어, 1,2,4- 티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 1,2,5-티아디아졸릴 등) 등; 1 내지 2 황 원자 및 1 내지 3 질소 원자를 함유하는 불포화된 축합형 헤테로시클릴기 (예를 들어, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴 등) 등을 포함한다.
용어 "치환된"은 다음을 포함하지만, 이에 제한되지 않는 명시된 치환기의 라디칼을 갖는 주어진 구조 내 하나 또는 그 이상의 수소 라디칼의 대체를 나타낸다: 할로, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로시클릴, 티올, 알킬티오, 아릴티오, 알킬티오알킬, 아릴티오알킬, 알킬설포닐, 알킬설포닐알킬, 아릴설포닐알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아르알콕시, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 알콕시카르보닐, 아릴옥시카르보닐, 할로알킬, 아미노, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬아미노알킬, 아릴아미노알킬, 아미노알킬아미노, 히드록시, 알콕시알킬, 카르복시알킬, 알콕시카르보닐알킬, 아미노카르보닐알킬, 아실, 아르알콕시카르보닐, 카르복실산, 설폰산, 설포닐, 포스폰산, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 및 지방족. 치환기는 추가로 치환될 수 있다 것이 이해된다.
신형성(neoplasia), 종양 성장 또는 종양 세포 성장의 맥락에서, 용어 "억제,"는 1차 또는 2차 종양의 지연된 출현, 1차 또는 2차 종양의 늦춰진 발달, 1차 또는 2차 종양의 감소된 발생, 질환의 2차 효과의 늦춰진 또는 감소된 중증도, 저지된 종양 성장 및 종양의 퇴행 등에 의해 평가될 수 있다. 극단적으로, 완전한 억제는 예방 또는 화학적 예방으로서 본 명세서에서 나타내어진다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은 용어 "전이,"는, 다른 조직에서 암을 생성하는, 혈관 및 림프관을 통한 원래의 종양 위치로부터의 암 세포의 이주를 나타낸다. 전이는 또한 떨어져 있는 위치에서 성장하는 2차 암에 사용되는 용어이다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은, 용어 "신생물,"은 과도한 세포 분열로 인한 조직의 비정상적인 덩어리를 나타낸다. 신생물은 양성 (암성이 아님), 또는 악성 (암성)일 수 있고 또한 종양으로 불릴 수 있다. 용어 "신형성(neoplasia)"은 종양 형성을 야기하는 병리학적 과정이다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은, 용어 "전암성"은 악성은 아니지만, 치료하지 않고 놔두면 악성이 될 수 있는 병태를 나타낸다.
용어 "증식"은 유사분열을 겪는 세포를 나타낸다.
용어 "치료"는 임의의 공정, 작용, 적용, 요법, 등을 나타내고, 사람을 포함하는 포유류는, 직접 또는 간접적으로 포유류의 병태를 개선하기 위한 목적을 갖는 의학적 도움의 대상이다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은, 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은, 타당한 의학적 판단의 범위 이내에서, 지나친 독성, 자극, 알러지 반응 등 없이 사람 및 저급 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 염을 나타내고, 합리적인 이익/위험 비율에 비례한다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 업계에서 잘 알려져있다. 예를 들어, S. M. Berge, et al.은 약제학적으로 허용 가능한 염을 J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)에서 상세히 기술한다. 염은 본 발명의 화합물의 최종 분리 및 정제 동안, 또는 유리 염기 작용기를 적합한 유기 산 또는 무기 산과 개별적으로 반응시키는 것에 의해 원위치 제조될 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 비독성 산 부가 염의 예시는, 무기 산 가령 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산으로 또는 유기 산 가령 아세트산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 숙신산 락토비온산 또는 말론산으로, 또는 업계에서 사용되는 다른 방법 가령 이온 교환을 사용하는 것에 의해 형성된 아미노기의 염을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 다른 약제학적으로 허용 가능한 염은, 아디페이트, 알지네이트, 아스코르베이트, 아스파테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로아이오다이드, 2-히드록시-에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 설페이트, 말레이트, 말리에이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올리에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 발러레이트 염, 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리성 토금속 염은 소듐, 리튬, 포타슘, 칼슘, 마그네슘, 등을 포함한다. 추가로 약제학적으로 허용 가능한 염은, 적절할 때, 반대 이온 가령 할라이드, 하이드록사이드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 1 내지 6 탄소 원자를 갖는 알킬 설포네이트, 설포네이트 및 아릴 설포네이트를 사용하여 형성된 비독성 암모늄, 4차 암모늄, 및 아민 양이온을 포함한다. 특정한 염 가령 소듐, 포타슘 및 콜린 염기 염 뿐만 아니라 산 염 가령 설페이트 및 메탄설포네이트 염은 약제학적으로 허용 가능한 수용성 매질 내 화학식 I의 화합물의 가용성을 개선하는 것으로 밝혀졌다. 하나의 구체예에서, 화합물 1의 약제학적으로 허용 가능한 염은 콜린 염이다. 화합물 1의 바람직한 염은 소듐 염 및 포타슘 염을 포함한다. 다른 바람직한 염은 설페이트 및 메탄설포네이트 염을 포함한다. 화합물 1의 특히 바람직한 염은 메탄설포네이트 및 벤젠설포네이트 염이다. 화합물 2의 특히 바람직한 염은 하이드로클로라이드 염이다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은, "약제학적으로 허용 가능한 담체"는, 약제학적 투여, 가령 멸균 무-발열원 물과 양립될 수 있는 임의의 및 모든 용매, 분산액 매질, 코팅, 항균성 및 항진균 물질, 등장 및 흡수 지연제 등을 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 담체는, 분야 내 표준 참고 문헌, Remington's Pharmaceutical Sciences의 최신판 내에 기술되고, 이는 본 명세서에서 참고로서 포함된다. 그러한 담체 또는 희석제의 바람직한 예시는, 물, 식염수, 링거 용액, 덱스트로오스 용액, 및 5% 사람 혈청 알부민을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 리포솜 및 비-수용성 비히클 가령 고정유는 또한 사용될 수 있다. 약제학적으로 활성인 물질을 위한 그러한 매질 및 물질의 사용은 본 업계에서 잘 알려져있다. 임의의 종래의 매질 또는 물질이 활성 화합물과 양립될 수 없는 것을 제외하고, 조성물 내 그의 사용은 고려된다. 보충 활성 화합물은 조성물 내로 또한 포함될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은, 용어 "전암성"은 악성은 아니지만, 치료하지 않고 놔두면 악성이 될 수 있는 병태를 나타낸다.
본 명세서에서 사용되는 것과 같은 용어 "대상"은 동물을 나타낸다. 바람직하게는 동물은 포유류이다. 더욱 바람직하게는 포유류는 사람이다. 대상은, 예를 들어, 개, 고양이, 말, 소, 돼지, 기니피그, 물고기, 새 등을 또한 나타낸다.
본 발명의 화합물은 선택적인 생물학적 특징을 향상시키는 적절한 기능을 첨부하는 것에 의해 개질될 수 있다. 그러한 개질이 본 업계에서 공지되어있고, 주어진 생물학적 시스템 (예를 들어, 혈액, 림프계, 중추 신경 시스템)으로의 생물학적 침투를 증가시키고, 경구 유용성을 증가시키고, 가용성을 증가시켜 주사에 의한 투여를 가능하게 하고, 대사를 변경하고 배설의 속도를 변경하는 것을 포함할 수 있다.
약제학적 조성물
본 발명의 약제학적 조성물은 BCL 억제제, 가령 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염과 조합하여, 하나 또는 그 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제와 함께 제제화된 화학식 I의 화합물, 가령 화합물 1, 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염의 치료적으로 효과적인 양을 포함한다.
바람직하게는, 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제는 비-독성, 불활성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화제 또는 임의의 유형의 제제 보조이다. 약제학적으로 허용 가능한 담체의 역할을 할 수 있는 물질의 몇몇 예시는 당 가령 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스; 시클로덱스트린 가령 알파- (α), 베타- (β) 및 감마- (γ) 시클로덱스트린; 전분 가령 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로오스 및 그의 유도체 가령 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트; 분말형 트라가칸트; 맥아; 젤라틴; 탤크; 부형제 가령 코코아 버터 및 좌제 왁스; 오일 가령 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 콩유; 글리콜 가령 프로필렌 글리콜; 에스테르 가령 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트; 아가; 완충제 가령 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드; 알긴산; 무-발열원 물; 등장 식염수; 링거 용액이고; 에틸 알코올, 및 포스페이트 완충제 용액, 뿐만 아니라 다른 비-독성 양립될 수 있는 윤활제 가령 소듐 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트, 뿐만 아니라 착색제, 이형제, 코팅 물질, 감미료, 향료 및 방향 물질, 보존제 및 항산화제가 조제자의 판단에 따라 조성물 내에 또한 존재할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구, 비경구적으로, 흡입 분무에 의해, 국소적으로, 직장 내, 비강, 협측, 질 내 또는 걸쳐 삽입된 저장소, 바람직하게는 경구 투여에 의해 또는 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 임의의 종래의 비-독성 약제학적으로-허용 가능한 담체, 보조제 또는 비히클을 함유할 수 있다. 몇몇의 경우에서, 제제의 pH는, 제제화된 화합물 또는 그의 전달 형태의 안정성을 향상시키기 위해, 약제학적으로 허용 가능한 산, 염기 또는 완충제를 이용하여 조절될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 것과 같은 용어 비경구는 피하, 피내, 정맥 내, 근내, 관절 내, 동맥 내, 활막 내, 흉골 내, 척추 강 내, 병소 내 및 두개 내 주사 또는 투입 기술을 포함한다.
경구 투여를 위한 액체 제형은 약제학적으로 허용 가능한 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭서를 포함한다. 활성 화합물에 더하여, 액체 제형은 업계에서 흔히 사용되는 불활성 희석제 가령, 예를 들어, 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제 가령 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일 (특히, 면실, 땅콩, 옥수수, 배아, 올리브, 피마자유, 및 참기름), 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 그의 혼합물을 함유할 수 있다. 불활성 희석제 외에, 경구 조성물은 보조제 가령 습윤제, 유화 및 현탁제, 감미료, 향료, 및 방향 물질을 또한 포함할 수 있다.
주사 가능한 제제, 예를 들어, 멸균 주사 가능한 수용성 또는 유질 현탁액은 적합한 분산 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 알려진 기술에 따라 제제화될 수 있다. 멸균 주사 가능한 제제는 또한 비독성 비경구적으로 허용 가능한 희석제 또는 용매 내, 예를 들어, 1,3-부탄디올 내 용액과 같은 멸균 주사 가능한 용액, 현탁액 또는 에멀젼일 수 있다. 이용될 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거 용액, U.S.P. 및 등장 소듐 클로라이드 용액이 있다. 게다가, 멸균, 고정유는 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 이용된다. 본 목적을 위해 임의의 블랜드 고정유는 합성 모노- 또는 디글리세라이드를 포함하여 이용될 수 있다. 게다가, 지방산 가령 올레산은 주사 가능한 제제로 사용된다.
주사 가능한 제제는, 예를 들어, 세균-유지 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용하기 이전에 멸균수 또는 다른 멸균 주사 가능한 매질 내에 용해되거나 분산될 수 있는 멸균 고체 조성물의 형태로 멸균 물질을 혼입하는 것에 의해 멸균될 수 있다.
약물의 효과를 연장시키기 위하여, 피하 또는 근내 주사로부터 약물의 흡수를 늦추는 것이 종종 요망된다. 이것은 빈약한 물 가용성을 갖는 결정질 또는 무정형 물질의 액체 현탁액의 사용에 의해 달성될 수 있다. 따라서 약물의 흡수의 속도는, 차례차례, 결정 크기 및 결정질 형태에 의존하는, 용해의 속도에 의존한다. 그렇지 않으면, 비경구적으로 투여되는 약물 형태의 지연된 흡수는 오일 비히클 내에 약물을 용해 또는 현탁시키는 것에 의해 달성된다. 주사 가능한 데포 형태는 생분해성 중합체 가령 폴리락타이드-폴리글리콜리드 내 약물의 마이크로캡슐 매트릭스 형성에 의해 제조된다. 중합체에 대한 약물의 비율 및 이용되는 특정한 중합체의 성질에 따라, 약물 방출의 속도는 제어될 수 있다. 생분해성 중합체의 다른 예시는 폴리(오르소에스테르) 및 폴리(무수물)을 포함한다. 데포 주사 가능한 제제는 신체 조직과 양립될 수 있는 리포솜 또는 마이크로에멀젼 내에 약물을 포집하는 것에 의해 또한 제조된다.
직장 또는 질 투여를 위한 조성물은 바람직하게는, 본 발명의 화합물을 적합한 비-자극성 부형제 또는 담체 가령 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜과 혼합하는 것에 의해 제조될 수 있는 좌제, 또는 상온에서는 고체이지만 체온에서는 액체이고 그러므로 직장 또는 질강 내에서 용융되고 활성 화합물을 방출하는 좌제 왁스이다.
경구 투여를 위한 고체 제형은 캡슐, 정제, 알약, 분말, 및 과립제를 포함한다. 그러한 고체 제형에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 불활성, 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체 가령 소듐 시트레이트 또는 디칼슘 포스페이트 및/또는 다음과 혼합된다: a) 충전제 또는 신전 가령 전분, 락토오스, 수크로오스, 글루코오스, 만니톨, 및 규산; b) 결합제 가령, 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로오스, 알지네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리디논, 수크로오스, 및 아카시아; c) 보습제 가령 글리세롤; d) 붕해제 가령 아가-아가, 칼슘 카보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정한 실리케이트, 및 소듐 카보네이트; e) 용액 서방제 가령 파라핀; f) 흡수 가속제 가령 4차 암모늄 화합물; g) 습윤제 가령, 예를 들어, 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트; h) 흡수제 가령 카올린 및 벤토나이트 점토; 및 i) 윤활제 가령 탤크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트, 및 그의 혼합물. 캡슐, 정제 및 알약의 경우에서, 제형은 완충제를 또한 포함할 수 있다.
유사한 유형의 고체 조성물은, 락토오스 또는 유당 뿐만 아니라 고분자 중량 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 그러한 부형제를 사용하여, 연질 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐 내 충전제로서 이용될 수 있다.
정제, 당제, 캡슐, 알약, 및 과립제의 고체 제형은, 코팅 및 껍질 가령 장용성 코팅 및 약제학적 제제화 업계에서 잘 알려진 다른 코팅으로 제조될 수 있다. 이들은 불투명화제를 임의로 함유할 수 있고, 또한 활성 성분(들)만을, 또는 바람직하게는, 장의 특정한 부분에서, 임의로, 지연된 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 임베딩 조성물의 예시는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다.
본 발명의 화합물의 국소 또는 피부 경유 투여를 위한 제형은 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 분말, 용액, 분무, 흡입제 또는 패치를 포함한다. 활성 성분은 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 요구될 수 있는 임의의 필요로 하는 보존제 또는 완충제와 멸균 상태 하에서 혼합된다. 안과 제제, 귀 물약, 안연고, 분말 및 용액이 본 발명의 범위 이내로서 또한 고려된다.
연고, 페이스트, 크림 및 겔은, 본 발명의 활성 화합물에 더하여, 부형제 가령 동물 및 식물성 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 탤크 및 아연 옥사이드, 또는 그의 혼합물을 함유할 수 있다.
분말 및 분무는, 본 발명의 화합물에 더하여, 부형제 가령 락토오스, 탤크, 규산, 알루미늄 하이드록사이드, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 분말, 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다. 분무는 통상적인 압축가스 가령 클로로플루오로하이드로카본을 부가적으로 함유할 수 있다.
피부 경유 패치는 신체에 화합물의 제어된 전달을 제공하는 부가된 이점을 갖는다. 그러한 제형은 적절한 매질 내에 화합물을 용해 또는 분배하는 것에 의해 제조될 수 있다. 흡수 촉진제는 피부를 가로지르는 화합물의 유동을 증가시키기 위해 또한 사용될 수 있다. 속도는, 속도 제어 막을 제공하는 것에 의해 또는 화합물을 중합체 매트릭스 또는 겔 내에 분산시키는 것에 의해 제어될 수 있다.
폐 전달을 위해, 본 발명의 치료적 조성물을 제제화하고, 직접 투여 (예를 들어, 호흡기계 내로의 흡입)에 의해 고체 또는 액체 미립자 형태로 환자에 투여한다. 본 발명을 실행하기 위해 제조된 활성 화합물의 고체 또는 액체 미립자 형태는 호흡 가능한 크기의 입자를 포함한다: 즉, 흡입 시 입 및 후두를 통해 및 기관지 및 폐의 폐포 내로 통과하기 위해 충분하게 작은 크기의 입자. 에어로졸화된 치료제, 특히 에어로졸화된 항생제의 전달은 본 업계에서 알려져있다 (예를 들어, Van Devanter et al.의 미국 특허 번호 5,767,068, Smith et al.의 미국 특허 번호 5,508,269, 및 Montgomery에 의한 WO 98/43650 참조, 이들 모두는 본 명세서에서 참고로서 포함됨). 항생제의 폐 전달의 논의는 또한 미국 특허 번호 6,014,969에서 밝혀졌고, 이는 본 명세서에서 참고로서 포함된다.
화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제의 조합의 "치료적으로 효과적인 양"은, 임의의 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 이익/위험 비율에서 치료되는 대상에 대한 치료적 효과를 조합으로 부여하는 각각의 화합물의 양을 의미한다. 치료적 효과는 객관적 (즉, 몇몇 테스트 또는 마커에 의해 측정 가능한) 또는 주관적 (즉, 대상은 효과의 지시 또는 느낌을 제공한다) 일 수 있다. 효과적인 투여량은 투여의 경로뿐만 아니라, 다른 물질과의 병용의 가능성에 따라 또한 달라질 것이다. 하지만, 본 발명의 화합물 및 조성물의 총 일일 사용량은 담당 의사에 의해 타당한 의학적 판단의 범위 이내에서 결정된다는 것이 이해될 것이다. 임의의 특정한 환자를 위한 특정한 치료적으로 효과적인 투여량 수준은 치료될 장애 및 장애의 중증도; 이용되는 특정한 화합물의 활성; 이용되는 특정한 조성물; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별 및 식단; 투여의 시간, 투여의 경로, 및 이용되는 특정한 화합물의 배설의 속도; 치료의 지속 기간; 조합에서 또는 이용되는 특정한 화합물과 동시에 사용되는 약물; 의학적 업계에서 잘 알려진 요소를 포함하는 다양한 요소에 의존할 것이다. 바람직한 구체예에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제의 조합의 치료적으로 효과적인 양은, 치료될 암 유형에서 상승 작용을 나타낸다.
본 발명의 조합 요법에서 사람 또는 다른 동물에 단일 또는 나뉘어진 투여량으로 투여되는 각각의 화합물의 총 일일 투여량은, 예를 들어, 0.01 내지 50 mg/kg 체중 또는 대개 0.1 내지 25 mg/kg 체중 양일 수 있다. 단일 투여량 조성물은 일일 투여량을 구성하기 위해 그러한 양 또는 그의 약수를 함유할 수 있다. 일반적으로, 본 발명에 따른 치료 섭생은 그러한 치료를 필요로 하는 환자에의 단일 또는 다발성 투여량으로 하루 당 약 10 mg 내지 약 1000 mg의 본 발명의 화합물(들)의 투여를 포함한다.
본 발명의 조합 요법에서 각각의 화합물은, 약 0.1 내지 약 500 mg/체중 kg 범위인 투여량, 그렇지 않으면 1 mg 및 1000 mg/투여량 사이의 투여량으로, 매 4 내지 120 시간, 또는 특정한 약물의 필요조건에 따라, 예를 들어, 정맥 내, 동맥 내, 피하, 복강 내, 근육 내, 또는 피하 주사에 의해; 또는 경구, 협측, 비강, 점막 경유, 국소적으로, 안과 제제로, 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 본 명세서의 방법은 요망되는 또는 명시된 효과를 달성하기 위한 화합물 또는 화합물 조성물의 효과적인 양의 투여를 고려한다. 전형적으로, 본 발명의 약제학적 조성물은 하루 당 약 1 내지 약 6 시간 또는 그렇지 않으면, 지속적인 투입으로서 투여될 것이다. 그러한 투여는 만성 또는 급성 요법으로서 사용될 수 있다. 약제학적으로 부형제 또는 담체와 조합되어 단일 제형을 생성할 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주 및 투여의 특정한 방식에 따라 달라질 것이다. 전형적인 제제는 약 5% 내지 약 95% 활성 화합물 (w/w)을 함유할 것이다. 그렇지 않으면, 그러한 제제는 약 20% 내지 약 80% 활성 화합물을 함유할 수 있다.
상기 언급된 것보다 더 낮은 또는 더 높은 투여량이 요구될 수 있다. 임의의 특정한 환자를 위한 특정한 투여량 및 치료 섭생은, 이용되는 특정한 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별, 식단, 투여의 시간, 배설의 속도, 약물 조합, 질환의 중증도 및 과정, 병태 또는 증상, 질환에 대한 환자의 성향, 병태 또는 증상, 및 치료하는 의사의 판단을 포함하는 다양한 요소에 의존할 것이다.
환자의 병태의 개선 시, 화합물, 조성물 또는 본 발명의 조합의 유지 투여량은, 필요하다면, 투여될 수 있다. 차후에, 투여의 투여량 또는 빈도수, 또는 둘 모두는, 증상이 요망되는 수준까지 완화될 때 개선된 병태가 유지되는 수준에 대한 증상의 함수로서 감소될 수 있다. 하지만, 환자는 질환 증상의 임의의 재발 시 장기간의 간헐적 치료를 요구할 수 있다.
실시예
본 발명의 화합물 및 공정 다음의 실시예와 관련되어 더 잘 이해될 것이고, 이는 예시로서만 의도되고 본 발명의 범위를 제한하지 않는다. 개시된 구체예에 대한 다양한 변화 및 개질은 본 업계의 숙련가에게 분명할 것이고 그러한 변화 및 개질은 화학적 구조, 치환기, 유도체, 제제에 관련된 것을 포함하지만 이에 제한되지 않고 및/또는 본 발명의 방법은 본 발명의 진정한 의미 및 첨부된 청구범위의 범위를 벗어나지 않을 수 있다.
화합물 1 및 메탄설포네이트, 소듐, 포타슘 및 콜린 그의 염의 합성은 아래의 반응식에서 보여진다.
Figure pct00009
중간체 107-1 또는 107-2는, 각각, R-2-1 또는 R-2-2와 반응시키는 것 106에 의해 제조될 수 있다. R-2-1 및 R-2-2의 합성을 위한 합성 반응식은 아래에 보여진다:
Figure pct00010
또는 다음의 대체 방법에 의해:
Figure pct00011
중간체 108-1 및 108-2는 R-3-1 또는 R-3-2과 107-1 또는 107-2의 커플링 반응에 의해 제조될 수 있고, 여기서 R-3-1 및 R-3-2은 다음의 반응식에 따라 제조될 수 있다:
Figure pct00012
실시예 1: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 1)의 제조
단계 a: (Z)-에틸-2-(에톡시메틸)-3-메톡시아크릴레이트 (화합물 202)
소듐 (40.9 g, 1.78 mol)을 에탄올 (750 mL)에 조심스럽게 나누어 부가했고 모든 소듐 금속이 사라진 이후에 상기 용액을 농축하여 NaOEt 분말을 얻었다. 교반 하에서, 헥산 (1.0 L)을 부가했고 얼음물 수조를 이용하여 상기 혼합물을 냉각시켰다. 201 (130 g, 0.89 mol) 및 에틸 포르메이트 (131 g, 1.78 mol)의 혼합물을 0-5°C에서 적상 부가했다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 디메틸 설페이트 (224 g, 1.78 mol)를 얼음물 수조로 냉각시키면서 적상 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 50°C에서 2시간 동안 가열했다. 상기 혼합물에 트리에틸암모늄 클로라이드 (122 g) 및 소듐 하이드록사이드 (20 g)를 부가했다. 이후 상기 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반했고 여과했다. 물을 이용하여 여과액을 세척했고 Na2SO4 상에서 건조했다. 이를 농축해서 다음의 추가 정제 단계 없이 사용되는 무색의 오일로서 표제 화합물 (140 g, 37%)을 수득했다.
단계 b: 에틸 2-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 203)
화합물 202 (140 g, 0.745 mol), 요소 (40.0 g, 0.697 mol) 및 에탄올 (500 mL) 내 농축된 염산 (34 mL)의 혼합물을 환류에서 밤새 가열했다. 반응의 부피의 ~50%를 증발시킨 후, 결과로 얻은 현탁액을 여과했고, 소량의 에탄올을 이용하여 세척했고, 건조시켜 화합물 203 (47 g, 37%)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 171 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.92 (s, 2H), 4.08 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 7.0 (s, 1H), 7.08 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.83 (d, br, J = 4.8 Hz, 1H).
단계 c: 에틸 2-옥소-1,2-디하이드로피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 204)
아세트산 (500 mL) 내 화합물 203 (47 g, 280 mmol)의 용액에 브롬 (49.0 g, 307 mmol)을 부가했다. 상기 혼합물을 환류에서 2시간 동안 가열했고, 실온까지 냉각했고, 0-5°C까지 추가로 냉각했고 여과하여 황색 고체 (38 g, 54%)로서 표제 화합물 204을 얻었다. LCMS: 169 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, D2O): δ 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.32 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 9.00 (br, s, 2H).
단계 d: 에틸 2-클로로피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 R-2-1)
화합물 204 (38.0 g, 153 mmol) 및 포스포릴 트리클로라이드 (300 mL) 및 N, N-디메틸아닐린 (3 mL)의 혼합물을 환류에서 2시간 동안 가열했고, 실온까지 냉각했고 농축했다. 얼음물을 이용하여 잔류물을 조심스럽게 ?칭했고, 소듐 카보네이트를 이용하여 7-8로 pH를 조절했고 EtOAc을 이용하여 추출했다. 얼음물 및 소금물을 이용하여 조합된 유기물을 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고, 증발시켰고, 컬럼 크로마토그래피 (를 이용하여 용출시켰다 EtOAc/헥산, 10%)에 의해 정제하여 백색 고체로서 화합물 R-2-1 (15 g, 52%)을 수득했다. LCMS: 187 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.36 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 4.39 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 9.08 (s, 2H).
단계 e: 소듐 (Z)-2-(디메톡시메틸)-3-메톡시-3-옥소프로프-1-엔-1-올레이트 (화합물 206)
무수 1,2-디메톡시에탄 (300 mL) 내 NaH (광유 내 27 g, 60%, 0.675mol) 의 혼합물을 40-50 ºC까지 가열했고 메틸 3,3-디메톡시 프로피오네이트 (205) (100 g, 0.675 mol)를 적상 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 0.5 시간 동안 교반했고 무수 메틸 포르메이트 (81 g, 1.35mol)를 40-50 ºC에서 적상 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 40-50 ºC에서 (내부 온도) 2시간 동안 교반했고 이후 0 ºC까지 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물을 25 ºC까지 천천히 가온했고 밤새 교반했다. Et2O (150 mL)을 부가했고 30 분 동안 교반했다. 결과로 얻은 현탁액을 여과했다. 상기 고체를 Et2O (100mL)을 이용하여 세척했고, 수집했고 건조하여 표제 화합물 206을 미색 고체로서 (82 g, 61%) 수득했다. LCMS (m/z): 130.8 [M+1]+. 1HNMR (400 MHz, CD3OD): δ 3.36 (s, 6H), 3.60 (s, 3H), 5.34 (s, 1H), 8.92 (s, 1H).
단계 f: 2-아미노-피리미딘-5-카르복실산 메틸 에스테르 (화합물 207)
DMF (300 mL) 내 구아니딘 하이드로클로라이드 (42.2 g, 0.44 mol)의 혼합물에 화합물 206 (80 g, 0.40 mol)을 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 100 ºC에서 1시간 동안 가열했다. 상기 반응 혼합물을 여과하고 이후 냉각했다. 필터 케이크를 50 mL의 DMF을 이용하여 세척했고 조합된 여과액을 농축하여 찬 EtOH 내에 현탁된 잔류물을 남겼고 찬 EtOH (50 mL)을 이용하여 세척하여 화합물 207 (38 g, 61.5%)을 황색 고체로서 수득했다. LCMS (m/z): 154.2 [M+1]+, 195.1[M+42]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 3.88 (s, 3H), 8.77 (s, 2H).
단계 g: 메틸 2-클로로피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 R-2-2)
화합물 207 (7 g, 0.046 mol)을 농축된 염산 (15.2 mL) 및 CH2Cl2 (60 mL)의 혼합물에 부가했다. 냉각 이후에, ZnCl2 (18.6 g, 0.138 mol)을 15-20 ºC에서 부가했다. 상기 혼합물을 15-20 ºC에서 0.5 시간 동안 교반했고 5-10 ºC까지 냉각했다. NaNO2 (9.5 g, 0.138 mol)을 내부 온도를 5-10 ºC로 유지하면서 조금씩 부가했다. 반응을 ~ 2시간 동안 계속한다. 상기 반응 혼합물을 얼음물 (50 mL) 내로 주입했다. 유기 층을 분리했고 CH2Cl2 (30 mL*2)를 이용하여 수용성 상을 추출했다. 조합된 유기 추출물을 농축하여 조 생성물 (4.2 g)을 수득했다. 상기 조 화합물을 헥산 (20 mL) 내에 현탁했고, 60 ºC에서 30 분 동안 가열했고 여과했다. 상기 여과액을 농축해서 표제 화합물 R-2-2 (3.5 g, 44.4 %)을 미색 고체로서 수득했다. LCMS (m/z): 214.1[M+42]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.00 (s, 3H), 9.15 (s, 2H).
단계 h: 5-브로모-2-메톡시피리딘 (화합물 303)
2-메톡시-피리딘 (100 g, 0.92 몰), 아세토니트릴(1.0L) 내 NBS (180 g, 1.0 몰)의 용액을 환류에서 21시간 동안 교반했다. TLC는 반응이 완료된 것을 보여주었다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 농축했다. ~900ml 용매를 수집했다. 결과로 얻은 현탁액을 여과했고 n-헥산 (~400mL)을 이용하여 세척했다. 상기 여과액을 다시 농축하여 조 생성물을 수득했다. 상기 조 생성물을 감소된 압력 (30°C/~0.3mmHg)에서 증류했고 표제 화합물을 투명한 오일로서 (146 g, 84%) 수득했다. LCMS (m/z): 190.0 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.90 (s, 3H), 6.65 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.8 Hz, 2.4Hz, 1H), 8.19 (s, 1H).
단계 i: 6-메톡시피리딘-3-일보론산 (R-3-1):
무수 THF (180 ml) 내 화합물 303 (20 g, 0.11 몰)의 용액에 n-BuLi (59 mL, THF 내 2M)을 -78 °C에서 적상 부가했고, 결과로 얻은 혼합물을 1시간 동안 교반했다. 트리이소프로필 보레이트 (37mL)를 -78 °C에서 부가했고 반응 혼합물을 실온까지 가온했고 교반을 밤새 계속했다. TLC (헥산/에틸 아세테이트 =5:1)는 반응 완료를 보여주었다. 상기 혼합물을 4N HCl (90 ml)을 이용하여 3-4로 pH를 조절했다. 여과에 의해 침전물을 수집하여 조 화합물 R-3-1 (21 g, 128%)을 수득했다. 상기 조 화합물 R-3-1 (21g)을 물 (200 ml) 내에 용해시켰고 상기 용액을 농축된 암모니아 용액을 이용하여 8-9로 pH를 조절했고, 여과에 의해 침전물을 수집하여 순수 표제 화합물 R-3-1을 백색 고체로서 수득했다. (11 g, 67%). LCMS (m/z): 154.1 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.86 (s, 3H), 6.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 8.05 (br, 2H), 8.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H).
단계 j: 2-메톡시-5-(4,4,5,5,-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (화합물 R-3-2)
무수 디옥산 (500 mL) 내 화합물 303 (55 g, 0.29 mol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸 -2,2'-바이(1,3,2-디옥사보롤란) (90 g, 0.35 mol), 포타슘 아세테이트 (57 g, 0.58 mol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (2.2 g, 3 mmol)의 혼합물을 108°C에서 N2 대기 하에서 밤새 가열했다. 상기 반응 혼합물을 농축했고 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제했고 헥산/에틸 아세테이트를 이용하여 용출시켜 표제 화합물 R-3-2 (58 g, 84 %)을 수득했다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.30 (s, 12H), 3.88 (s, 3H), 6.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 8.0 Hz, 2.0Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.0Hz, 1H).
단계 k: 티에노[3,2-d]피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 (화합물 102)
요소 방법: 메틸 3-아미노티오펜-2-카르복실레이트 (101) (90.0 g, 573 mmol, 1.0 eq) 및 요소 (277.6 g, 4.6 mol, 8.0 eq)의 혼합물을 190°C에서 3-4시간 동안 가열했고 실온까지 냉각했다. 상기 반응 혼합물에 수용액 NaOH (10%, 800 mL)을 부가했다. 상온에서 1시간 동안 교반한 이후에, 여과에 의해 고체를 제거했다. 상기 여과액을 HCl을 이용하여 pH 3-4로 산성화했고, 침전된 고체를 여과에 의해 수집했고, 물을 이용하여 세척했고 진공 속에서 건조하여 요망되는 생성물 화합물 102을 미색 고체로서 (87 g, 89%) 얻었다. m.p.:280-285°C. LCMS (m/z): 169.0 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ 6.92 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 11.0-11.5 (br, 2H).
KOCN 방법: 3-아미노티오펜-2-카르복실레이트 (101) (100.0 g, 636.9 mmol, 1.0 eq), 아세트산 (705 mL) 및 물 (600 mL)의 혼합물에 물 (326 mL) 내 포타슘 시아네이트 (154.8 g, 1.91 mol, 3.0 eq)의 용액을 1시간 이상 천천히 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반했고, 여과했고 물을 이용하여 (500 mL) 세정했다. 적합한 크기의 반응기에 케이크를 충전했고 2 M 수용성 소듐 하이드록사이드 용액 (1.65 L)을 부가했고, 2시간 동안 슬러리를 교반했고 LCMS로 요망되는 생성물의 형성을 확인했다. 상기 혼합물을 10°C까지 냉각시켰고 3 M 수용성 염산 (1.29 L)을 pH = 5.0 ~ 6.0까지 부가했다. 슬러리를 여과했고, 물을 이용하여 (700 mL) 세정했고, 50°C에서 24시간 동안 진공 오븐 내에서 건조하여 화합물 102 (100 g, 94%)을 미색 고체로서 수득했다. LCMS (m/z): 169.1 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 6.92 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 11.14 (s, 1H), 11.51 (s, 1H).
단계 l: 2,4-디클로로티에노[3,2-d]피리미딘 (화합물 103)
아세토니트릴(250 mL) 내 화합물 102 (40 g, 238 mmol, 1.0 eq) 및 N,N-디메틸아닐린 (22.5 mL, 179 mmol, 0.75 eq)의 찬 용액에 인 옥시클로라이드 (152 mL, 1.67 mol, 7.0 eq)를 20°C 아래의 온도를 유지하면서 천천히 부가했다. 상기 혼합물을 이후 85°C까지 가열했고 24시간 동안 교반했다. 상기 반응 혼합물을 15°C까지 냉각시키고, 이후 얼음 및 찬 물 (360 mL)의 혼합물 상에 천천히 주입했다. 결과로 얻은 슬러리를 여과했고, 찬 물 (200 mL)을 이용하여 세정했다. 진공 오븐 내에서 40°C에서 24시간 동안 케이크를 건조하여 화합물 103 (40.5 g, 83%)을 미색 고체로서 수득했다. M.p.:245-250°C. LCMS (m/z): 205.0 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 7.75 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.71 (d, J = 5.2 Hz, 1H).
단계 m: 2-클로로-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 (화합물 104)
화합물 103 (34.2 g, 167 mmol, 1.0 eq) 및 메탄올 (500 mL)의 혼합물에 모르폴린 (31.2 mL, 367 mmol, 2.2 eq)을 천천히 부가했다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 여과에 의해 침전물을 수집했고, 메탄올을 이용하여 세척했고 진공 속에서 건조하여 요망되는 생성물 화합물 104을 연황색 고체로서 (39 g, 91%) 얻었다. M.p.: 250-255°C. LCMS (m/z): 256.0 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.76 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 5.2 Hz, 1H).
단계 n: 2-클로로-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6-카르브알데히드 (화합물 105)
-78°C에서 THF 내 (무수, 320 mL) 화합물 104 (20 g, 78.4 mmol, 1.0 eq)의 현탁액에 n-BuLi (헥산 내, 2.4 M, 40.8 mL, 102 mmol, 1.3 eq)을 질소 하에서 천천히 부가했다. 결과로 얻은 슬러리를 -60°C까지 투명한 갈색 용액이 될 때까지 가온했다. 상기 반응 혼합물을 이후 다시 -78°C까지 냉각했고 DMF (무수, 9.1 mL, 118 mmol, 1.5 eq)을 천천히 부가했다. 결과로 얻은 용액을 -78°C에서 0.5 시간 동안 교반했고, 0°C까지 1시간 이상 가온했고 수용액 HCl (0.25 M, 660 mL) 및 얼음 물 (320 mL)의 혼합물에 천천히 주입했다. 결과로 얻은 슬러리를 0-10°C에서 0.5 시간 동안 교반했고, 여과했고, 찬 물을 사용하여 세척했고 진공 속에서 건조하여 화합물 105을 황색 고체로서 (22 g, 98%) 수득했다. M.p.:260-265°C. LCMS (m/z): 284.0 [M+1]+ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.77 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.96 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 8.30 (s, 1H), 10.21 (s, 1H).
단계 o: (2-클로로-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘-6-일메틸)- 메틸-아민 (화합물 106)
메탄올 (125 mL) 내 화합물 105 (20.0 g, 70.4 mmol, 1.0 eq)의 용액에 메탄올 (27% v/v, 75 mL, 563.2 mmol) 내 메틸아민 용액을 질소 대기 하에서 부가했다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했고 진공 속에서 용매를 제거하여, 질소 하에서 메탄올 (550 mL) 및 THF (220 mL) 내에 용해된 조 고체 생성물을 얻었다. 소듐 보로하이드라이드 (8g, 211.2 mmol)를 나누어 부가했고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 상기 반응 혼합물을 진공 속에서 증발시켰고 물 (300 mL)을 부가했다. 메틸렌 클로라이드를 이용하여 수용성 혼합물을 추출했고 조합된 추출물을 Na2SO4 상에서 건조했고 농축했다. 잔류물을 6M HCl (230 mL) 내에 용해시켰고 30 분 동안 교반했다. 수용성 용액을 메틸렌 클로라이드를 이용하여 수 시간 동안 세척했고, NaOH (4N)를 이용하여 pH 9-10로 조절했다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집했고 건조하여 (60°C, 6시간) 연황색 고체 (18 g, 85%)를 얻었다. M.p.: 240-245°C. LCMS (m/z): 299 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 2.32 (s, 3H), 3.74 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.88 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.96 (s, 2H), 7.24 (s, 1H).
단계 p(a): 2-[(2-클로로-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘-6-일메틸)-메틸-아미노]-피리미딘-5-카르복실산 에틸 에스테르 (화합물 107-1)
CH3CN (400 mL) 내 106 (10 g, 33.6 mmol) 및 R-2-1 (6.8 g, 36.4 mmol)의 혼합물에 디이소프로필에틸아민 (220 mL, 1.26 mol)을 실온에서 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 상기 혼합물을 이후 증발시켰고 뒤이어 메틸렌 클로라이드 (300 mL)를 부가했다. 물을 이용하여 유기 상을 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고 진공 속에서 농축하여 잔류물을 남겼다. 잔류물에 에틸 아세테이트를 부가했고 결과로 얻은 혼합물을 얼음/물 수조 온도에서 50 분 동안 교반했다. 결과로 얻은 고체를 여과에 의해 수집하여 표제 생성물 107-1을 백색 고체로서 (10.6 g, 70%) 얻었다. LCMS: 449 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.25 (s, 3H), 3.71 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.83 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 4.29 (m, 2H), 5.21 (s, 2H), 7.39 (s, 1H), 8.87 (s, 2H).
단계 p(b): 2-[(2-클로로-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘-6-일메틸)-메틸-아미노]-피리미딘-5-카르복실산 메틸 에스테르 (화합물 107-2)
화합물 106 (25 g, 84 mmol), CH3CN (500 mL) 및 R-2-2 (16 g, 92 mmol)의 혼합물을 실온에서 교반했다. 디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (500 mL, 2.9 mol)을 부가했다. 용액을 밤새 교반하고 증발시켰다. 이후에 메틸렌 클로라이드 (500 mL)을 부가했고, 물을 이용하여 유기 상을 세척했고, Na2SO4를 이용하여 건조했고 진공 속에서 농축했다. 잔류물에 에틸 아세테이트 (200 mL)를 부가했고 혼합물을 얼음/물 수조 내에서 50 분 동안 교반했다. 표제 생성물을 백색 고체로서 (29.4 g, 81%) 수집했다. LCMS (m/z): 435.2 [M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6): 3.25 (s, 3H), 3.71 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.82-3.84 (m, 7H), 5.21 (s, 2H), 7.39 (s, 1H), 8.87 (s, 2H).
단계 q(a): 에틸-2-(((2-(6-메톡시피리딘-3-일)-4-모르폴리노티에노 [3,2-d]피리미딘- 6-일) 메틸) (메틸)아미노)피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 108-1)
방법 A: 톨루엔 (80 ml), 에탄올 (50 ml) 및 물 (10 ml)의 혼합된 용매 내 화합물 107-1 (12 g, 26.7 mmol), R-3-1 (4.9 g, 32 mmol), NaHCO3 (6.7 g, 80.1 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (188 mg, 0.267 mmol)의 혼합물을 108°C에서 4.5시간 동안 N2 대기 하에서 가열했다. TLC는 반응이 완료된 것을 보여주었다. 상기 반응 혼합물을 이후 실온까지 냉각했고 물 (20 ml)을 부가했다. 결과로 얻은 고체를 여과에 의해 수집했고 이후 에탄올 (100 mL) 내에 현탁했다. 상기 현탁액을 실온에서 30 분 동안 교반했고 여과했다. 수집된 고체를 에탄올을 이용하여 세척했고 진공 속에서 건조하여 표제 화합물 108-1을 백색 고체로서 (10g, 72%) 수득했다.
방법 B: 톨루엔 (24 ml), 에탄올 (15 ml), 및 물 (3 ml)의 혼합된 용매 내 화합물 107-1 (1.5 g, 3.34 mmol), R-3-2 (1.6 g, 6.68 mmol), NaHCO3 (0.84 g,10.0 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (118 mg, 0.167 mmol)의 혼합물을 108°C에서 N2 대기 하에서 밤새 가열했다. 상기 반응 혼합물을 디클로로메탄 및 물 사이에 분배했다. 유기 층을 분리했고 소금물을 이용하여 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고, 여과했고 진공 속에서 증발시켜 헥산/에틸 아세테이트를 이용하여 용출된 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제된 잔류물을 얻어 화합물 108-1을 백색 고체로서 (1.7 g, 98 %) 수득했다.
m.p.198-202°C. LCMS: 522.30 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.31 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.28 (s, 3H), 3.76 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.93 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.94 (s, 3H), 4.30 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 5.24 (s, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 8.57 (dd, J = 8.8 Hz, 2.0Hz, 1H), 8.88 (s, 2H), 9.15 (d, J = 2.0 Hz, 1H).
단계 q(b): 메틸-2-(((2-(6-메톡시피리딘-3-일)-4-모르폴리노티에노 [3,2-d]피리미딘- 6-일) 메틸) (메틸)아미노)피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 108-2)
디옥산 (540 mL) 내 화합물 107-2 (20 g, 46.0 mmol), B-3-1 (9.2 g, 60.2 mmol, 1.3 eq.)의 혼합물에 고체 NaHCO3 (11.6 g, 138.1 mmol, 3 eq.)을 실온에서 부가했고 뒤이어 물 (40 mL)을 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 용액의 표면을 통해 N2를 통과시켜 탈기시켰다. 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐(II) 클로라이드 (323 mg, 0.46 mmol, 0.01 eq.)를 이후 부가했고 결과로 얻은 혼합물을 108°C에서 15시간 동안 가열했다. TLC 및 LCMS는 반응 완료를 보여주었다. 상기 반응 혼합물을 여전히 고온 (>90°C)일 동안 셀라이트를 통해 여과했고 디옥산 (70 mL)을 이용하여 세척했다. 상기 여과액을 점진적으로 실온까지 냉각시켰고 이는 냉각 기간 동안 백색 미세 결정을 형성했다. 상기 현탁액을 여과했고 디옥산 (80 mL)을 이용하여 세척하여 표제 화합물 108-2을 백색 고체로서 (18g, 78%) 수득했다. LCMS (m/z): 508.3 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.28 (s, 3H), 3.76 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.82 (s, 3H); 3.92 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 5.20 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 8.57 (dd, J = 8.8Hz, 2.4Hz, 1H), 8.88 (s, 2H), 9.15 (d, J = 2.0Hz, 1H).
단계 r: N-히드록시-2-(((2-(6-메톡시피리딘-3-일)-4-모르폴리노티에노[3,2-d] 피리미딘-6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 1)
히드록실아민 메탄올 용액의 제조
MeOH 내 (400 mL) NH2OH.HCl (80 g, 1.12 mol)의 혼합물을 60-65 oC에서 1시간 동안 가열하여 투명한 용액을 형성했다. 이후 상기 용액을 얼음물 수조 내에서 냉각했다. 찬 혼합물에 MeOH 내 (240 mL) KOH (96 g, 1.68 mol)의 용액을 0-10 °C에서 반응 온도를 유지하면서 적상 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 0 °C에서 30 분 동안 교반했고 이후 무수 Na2SO4 (700 g)로 충전된 일정한 압력 깔때기를 통해 여과했다. 상기 여과액을 얼음-수조 하에서 수집했고 미래의 사용을 위해 냉장고에 저장했다.
화합물 108-1로부터 화합물 1의 제조
화합물 108-1 (10 g, 19 mmol)을 상기 신선하게 제조된 히드록실아민 메탄올 용액 (1.79M, 350 ml) 내에 현탁했다. 이 혼합물에 디클로로메탄 (100 mL)을 부가했다. 반응 플라스크를 밀봉했고 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하여 투명한 용액으로 만들었다. 반응물을 부가적인 9시간 동안 교반했고 이를 여과하여 임의의 불용성 고체를 제거했다. 아세트산의 부가를 이용하여 상기 여과액을 pH 6-7로 조절하여 고체 침전물을 형성했다. 상기 고체를 여과에 의해 수집했고 물 및 최소량의 메탄올을 이용하여 세척했고, 60°C에서 5시간 동안 진공 속에서 건조하여 화합물 1을 백색 고체로서 (9.2g, 96%) 수득했다. m.p. 177-180°C. LCMS: 509.3 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.24 (s, 3H), 3.76 (t, J = 5 Hz, 4H), 3.92 (t, J = 5 Hz, 4H), 3.92 (s, 3H), 5.20 (s, 2H), 6.90 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 8.57 (dd, J = 8.8 Hz, 2.4Hz, 1H), 8.75 (s, 2H), 9.01 (s, 1H), 9.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 11.08 (s,1H).
화합물 108-2로부터 화합물 1의 제조
디클로로메탄 (310 mL) 내 화합물 108-2 (31 g, 61.1 mmol)의 현탁액에 상기 신선하게 제조된 히드록실아민 메탄올 용액 (1.79M, 744 ml)을 실온에서 부가했다. 반응 플라스크를 밀봉했고 상기 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반했다. 상기 반응 혼합물을 투명한 용액으로 만들었다. 상기 반응 용액을 여과하여 임의의 불용성 고체를 제거했다. 상기 여과액에 물 (310 mL)을 이후 부가했고 부가 동안 형성된 고체가 없었다. 교반하면서 아세트산 (18.5 mL)을 부가하여 pH 10.20으로 (pH 미터에 의해 지속적으로 모니터링된) 조절했다. 아세트산 부가 동안 내부 온도 변화가 없었다. 결과로 얻은 반응 혼합물을 또 다른 4시간 동안 계속 교반했다. 백색 고체가 점진적으로 형성되었다. 상기 현탁액을 여과했고 최소량의 메탄올 (100mL x 3)을 이용하여 세척했다. 수집된 백색 고체를 메탄올 (620mL) 및 물 (124mL) 내에 재-현탁하여 현탁액을 형성했다. 상기 현탁액에 부가적인 아세트산 (11g)을 부가하여 pH를 5-6으로 조절했다. 고체 형태의 변화가 관찰되었다. 현탁액을 또 다른 2시간 동안 계속 교반했고 필터 페이퍼를 통해 여과했고 최소량의 메탄올 (100 mL x 3)을 이용하여 세척했다. 수집된 백색 고체를 오븐 (50°C) 내에서 12시간 동안 건조하여 표제 화합물 1을 백색 고체로서 (23.6g, 76.0%) 수득했다. m. p.: 255-259°C. LCMS (m/z): 509.3 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.24 (s, 3H), 3.76 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.92 (t, J = 5.2Hz, 4H), 3.92 (s, 3H), 5.20 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 8.57 (dd, J = 8.4Hz, 2.4Hz, 1H), 8.75 (s, 2H), 9.07 (s, 1H), 9.14 (d, J = 2.4Hz, 1H), 11.14 (s,1H).
실시예 2: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 메탄설포네이트 ( 메탄설 포네이트 염 화합물 1의)의 제조
방법 A: 화합물 1 (300 mg, 0.59 mmol) 및 MeOH/Et2O (3/1, 40 mL)의 혼합물에 MeOH (3 mL) 내 메탄설폰산 (114 mg, 1.18 mmol)의 용액을 0°C에서 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 0°C에서 3시간 동안 교반했다. 여과에 의해 침전물을 수집했고 Et2O을 사용하여 세척했고 화합물 2를 백색 고체로서 (260 mg, 73%) 수득했다.
방법 B: 디클로로메탄/ MeOH (40 mL / 10 mL) 내 화합물 1 (1.5 g, 2.95 mmol)의 현탁액에 2 mL MeOH 내 메탄설폰산 (341 mg, 3.55 mmol)을 실온에서 (15ºC) 부가하여 투명한 용액을 형성했다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물은 여전히 투명했다. 에틸 아세테이트 (40mL)를 혼합물에 부가했고 3시간 동안 실온에서 교반을 계속했다. 결과로 얻은 침전물을 여과에 의해 수집했다 화합물 2를 백색 고체로서 (1.45g, 83%) 수득했다.
m.p.: 179-185 °C. LCMS: 509.3 [M+1] +. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 2.35 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 3.78 (t, J = 9.6 Hz, 4H), 3.95 (s, 3H), 4.03 (t, J = 9.2 Hz, 4H), 5.24 (s, 2H), 6.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 8.54 (dd, J = 8.8 Hz, 2.4 Hz, 1H), 8.76 (s, 2H), 9.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 11.11 (br, 1H).
실시예 3: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 소듐 염 (소듐 염 화합물 1의)의 제조
메탄올 (30 mL) 내 화합물 1 (300 mg, 0.59 mmol)의 현탁액에 t-BuONa (85 mg, 0.88 mmol)을 0°C에서 천천히 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 실온까지 가온했고 2시간 동안 교반을 계속했다. 반응을 농축했고 잔류물을 분쇄했고 에탄올을 이용하여 세척했고 뒤이어 여과하여 화합물 3을 백색 고체로서 (230 mg, 73%) 수득했다. m.p.: 178-183 °C. LCMS: 509.3 [M+1] +. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.17 (s, 3H), 3.75 (s, 4H), 3.92 (s, 7H), 5.16 (s, 2H), 6.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 8.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.65 (s, 2H), 9.14 (s, 1H).
실시예 4: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 포타슘 염 (포타슘 염 화 합물 1의)의 제조
메탄올 (50 mL) 내 화합물 1 (400 mg, 0.78 mmol)의 혼합물에 t-BuOK (132 mg, 1.17 mmol)을 0°C에서 N2 하에서 부가했다. 혼합물을 0°C에서 1시간 동안 교반했고 실온에서 1.5시간 동안 교반을 계속했다. 불용성 고체를 여과에 의해 제거했고 여과액을 -20°C까지 냉각시켰다. Et2O (100 mL)을 상기 여과액에 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 -20°C에서 1시간 동안 교반했다. 헥산 (70 mL)을 부가했고 -20°C에서 2시간 동안 혼합물을 계속 교반했다. 여과에 의해 고체를 수집했고 진공 속에서 건조하여 화합물 4를 백색 고체로서 (150 mg, 35%) 수득했다. m.p.: 174-179°C. LCMS: 509.3[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 3.16 (s, 3H), 3.74-3.76 (m, 4H), 3.90-3.93 (m, 7H), 5.15 (s, 2H), 6.90 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 8.39 (br, 1H), 8.58 (d, J = 8.8Hz, 1H), 8.62 (s, 2H), 9.15 (s, 1H).
실시예 5: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 콜린 염 (콜린 염 화합물 1의)의 제조
DCM/MeOH (60 mL/12 mL) 내 화합물 1 (200 mg, 0.39 mmol)의 용액에 콜린 하이드록사이드 (106 mg, 0.39 mmol, MeOH 내 45%)를 부가했다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반했고 이후 농축하여 ~ 30 mL의 용매를 제거했다. 에틸 아세테이트 (60 mL)를 부가했고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반했다. 발생된 소량의 침전 이후에, 혼합물을 농축하여 ~ 40 mL의 용매를 제거했고 부가적인 에틸 아세테이트 (60 mL)를 부가했다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반했고 여과해서 화합물 5를 백색 고체로서 (180 mg, 76%) 수득했다. m.p.: 181-185°C. LCMS: 509.3[M+1]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6): δ 3.11 (s, 9H), 3.17 (s, 3H), 3.40 (t, J = 4.8Hz, 2H), 3.75 (t, J = 4.8Hz, 4H), 3.84 (br, 2H), 3.90-3.93 (m, 7H), 5.15 (s, 2H), 6.89 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 8.57 (dd, J = 8.8Hz, 2.4Hz, 1H), 8.64 (s, 2H), 9.14 (d, J = 2.0Hz, 1H).
실시예 6: N-히드록시-2-(((2-(6- 메톡시피리딘 -3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 설페이트 (화합물 1의 설페이트 염)의 제조
DCM/MeOH (30 mL/7.5 mL) 내 화합물 1 (200 mg, 0.39 mmol)의 현탁액에 황산 (77 mg, 0.79 mmol, in 1 mL MeOH)을 부가하여 투명한 용액을 형성했다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 침전이 발생했고 tert-부틸 메틸 에테르 (60 mL)을 이후 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 실온에서 1시간 동안 계속 교반했다. 상기 고체를 여과에 의해 수집하여 화합물 6을 백색 고체로서 (180 mg, 76%) 수득했다. m.p.: 243-246°C. LCMS: 509.3 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 3.26 (s, 3H), 3.78 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.96 (s, 3H), 4.03 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 5.24 (s, 3H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 8.54 (dd, J = 8.8 Hz, 2.4 Hz, 1H), 8.76 (s, 2H), 9.12 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 11.06 (br, 1H).
실시예 7: N -히드록시-2-( 메틸((2-(6-(메틸아미노) 피리딘-3-일)-4- 모르폴리노티에노[3,2- d ]피리미딘 -6-일)메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 2)
단계 7a: (2-클로로-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘-6-일메틸)- 메틸-아민 (화합물 0503)
메탄올 (125 mL) 내 0112 (20.0 g, 70.4 mmol)의 용액에 메탄올 (27% v/v, 75 mL, 563.2 mmol) 내 메틸아민 용액을 질소 대기 하에서 부가했다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했고 진공 속에서 용매를 제거하여, 질소 하에서 메탄올 (550 mL) 및 THF (220 mL) 내에 용해된 조 고체 생성물을 얻었다. 소듐 보로하이드라이드 (8 g, 211.2 mmol)를 나누어 부가했고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 상기 반응 혼합물을 진공 속에서 증발시켰고 물 (300 mL)을 부가했다. 메틸렌 클로라이드를 이용하여 수용성 혼합물을 추출했고 조합된 추출물을 Na2SO4 상에서 건조했고 농축했다. 상기 잔류물을 6M HCl (230 mL) 내에 용해시켰고 30 분 동안 교반했다. 수용성 용액을 메틸렌 클로라이드를 이용하여 수 시간 동안 세척했고, NaOH (4N)를 이용하여 pH = 9-10로 조절했다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집했고 건조하여 (60 °C, 6시간) 연황색 고체 (18 g, 85%)를 얻었다.
LCMS: 299 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 2.32 (s, 3H), 3.74 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.88 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.96 (s, 2H), 7.24 (s, 1H).
단계 7b: 2-[(2-클로로-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘-6-일메틸)-메틸-아미노]-피리미딘-5-카르복실산 에틸 에스테르 (화합물 0504)
0503 (10 g, 33.6 mmol), CH3CN (400 mL) 및 0305 (6.8 g, 36.4 mmol)의 혼합물을 실온에서 교반했다. 디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (220 mL, 1.26 mol)을 이후 부가했고 용액을 밤새 교반하고 증발시켰다. 메틸렌 클로라이드 (300 mL)을 부가한 이후에, 물을 이용하여 유기 상을 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고 진공 속에서 농축하여 잔류물을 남겼다. 상기 잔류물에 에틸 아세테이트를 부가했고 혼합물을 얼음/물 수조 내에서 50 분 동안 교반했다. 표제 생성물 0504을 백색 고체로서 (10.6 g, 70%) 수집했다. LCMS: 449 [M+1]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.25 (s, 3H), 3.71 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.83 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 4.29 (m, 2H), 5.21 (s, 2H), 7.39 (s, 1H), 8.87 (s, 2H).
단계 7c: 에틸 2-(메틸((2-(6-(메틸아미노)피리딘-3-일)-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리 -미딘-6-일)메틸)아미노)피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 0603-111)
N-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (0602-227) (351 mg, 1.5 mmol), 0504 (314 mg , 0.7 mmol), NaHCO3 (176 mg, 2.1 mmol) 및 Pd(PPh3)2Cl2 (24.6 mg, 0.035 mmol)의 혼합물을 톨루엔/ EtOH/ H2O (2.5 mL/ 1.6 mL/ 0.7 mL) 내에 용해시켰다. 이후 반응을 120 oC에서 마이크로파 내에서 2시간 동안 교반했다. 물 (8 mL)을 혼합물에 부가했고 에틸 아세테이트 (15 mL x 3)를 이용하여 추출했다. 유기 층을 건조했고, 농축했고, 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄 내 메탄올, 5% v/v)에 의해 정제하여 표제 화합물 0603-111 (150 mg, 41%)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 521 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.81 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.73 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 3.86 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 6.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 8.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.86 (s, 2H), 8.90 (s, 1H).
단계 7d: N-히드록시-2-(메틸((2-(6-(메틸아미노)피리딘-3-일)-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6-일)메틸)아미노)피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 2)
0603-236 (150 mg, 0.29 mmol)로부터 화합물 2을 갈색 고체로서 (21 mg, 14%) 제조했고 실시예 1 내에 기술된 것과 유사한 절차를 사용하여 히드록실아민 메탄올 용액 (6 mL)을 신선하게 제조했다: mp: 193-195 oC. LCMS: 508 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 2.83 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 3.23 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.89 (m, 4H), 5.20 (s, 2H), 6.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 8.27 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 8.75 (s, 2H), 9.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 9.07 (br, 1H).
실시예 8: 2 -(((2-(4- 아미노페닐 )-4- 모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘 -6-일) 메틸 )(메틸)아미노)-N-히드록시피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 3)
단계 8a: N-(4-브로모페닐)아세트아미드 (화합물 0601-150)
CH2Cl2 (50 mL) 내 4-브로모아닐린 (6.3 g, 63.7mmol)의 용액에 아세틸 클로라이드 (3.75 g, 47.7 mmol) 및 TEA (7.4 g, 73.4 mmol)을 0 oC에서 부가했고, 2 시간 동안 교반했다. 상기 반응 혼합물을 물, 소금물을 이용하여 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고, 여과했고, 감소되는 압력 하에서 농축하여 표제 화합물 0601-150 (3.6 g, 46%)을 갈색 고체로서 얻었다. LCMS: 214 [M+1]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6). δ 2.05 (s, 3H), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 10.12 (s, 1H).
단계 8b: N-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)아세트아미드 (화합물 0602-150)
화합물 0602-107 (실시예 34)에 대해 기술된 것과 유사한 절차를 사용하여 0601-150 (2.0 g, 9.3 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (4.4 g, 17.5 mmol), 포타슘 아세테이트 (3.5 g, 14 mmol), 및 PdCl2(dppf)2 (76 mg, 0.088 mmol)로부터 표제 화합물, 0602-150을 백색 고체로서 제조했다 (2.3 g, 94%). LCMS: 262 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.27 (d, J = 6.8 Hz, 12H), 2.04 (s, 3H), 7.58 (s, 4H), 10.03 (s, 1H).
단계 8c: 에틸 2-(((2-(4-아미노페닐)-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카르복실레이트 (화합물 0603-150)
톨루엔 (4 mL), 에탄올 (2 mL) 및 물 (1 mL) 내 화합물 0504-54 (210 mg, 0.46 mmol), 0602-150 (159 mg, 0.60 mmol), 소듐 수소 카보네이트 (118 mg, 1.4 mmol), 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(Ⅱ) 클로라이드 (17 mg, 0.02 mmol)의 혼합물을 질소를 이용하여 플러싱했고 120 oC에서 2시간 동안 마이크로파 조사 하에서 가열했다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물 사이에 분배했고, 소금물을 이용하여 유기 층을 세척했고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조했고, 여과했고 진공 내에서 증발시켰다. 상기 잔류물을 디클로로메탄을 이용하여 세척하여 에틸 2-(((2-(4-아세트아미도페닐)-4-모르폴리노티에노- [3,2-d]피리미딘-6-일)메틸)(메틸)아미노)피리미딘-5-카르복실레이트 (136 mg, 53%)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 548 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.06 (s, 6H), 3.26 (s, 3H), 3.75 (m, 4H), 3.91 (m, 4H), 4.28 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 5.22 (s, 2H), 7.45 (s, 1H),7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.87 (s, 1H), 10.10 (s, 1H).
상기 THF 내 (10 mL) 에틸 에스테르 (280 mg, 0.51 mmol)의 용액에 수용성 HCl 용액 (6M, 15 mL)을 40 oC에서 부가했고, 2 시간 동안 교반했고, NaHCO3 을 이용하여 반응 혼합물을 중화시켰고 CH2Cl2를 이용하여 추출했고, 물, 소금물을 이용하여 유기 층을 세척했고, Na2SO4 상에서 건조했고, 여과했고, 농축했고, 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄 내 메탄올, 2% v/v)에 의해 정제했고, 표제 화합물 0603-150 (180 mg, 48%)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 506 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1.29 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 3.24 (s, 3H), 3.73(m, 4H), 3.86 (m, 4H), 4.27 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 6.59 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 8.07 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.86(s, 1H).
단계 8d: 2-(((2-(4-아미노페닐)-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6-일)메틸)(메틸)아미노)-N-히드록시피리미딘-5-카복사마이드 (화합물 3)
0603-150 (170 mg, 0.3 mmol)로부터 화합물 3을 황색 고체로서 제조했고 (43 mg, 26%) 실시예 1 내에 기술된 것과 유사한 절차를 사용하여 히드록실아민 메탄올 용액 (4 mL)을 신선하게 제조했다. m.p. 183-186 oC. LCMS: 493 [M+1]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.22 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.87 (m, 4H), 4.27 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 5.50 (s, 2H), 6.59 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 8.07 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.86 (s, 2H).
실시예 9: PI3 키나아제 활성 분석
PI3K의 다양한 이소폼 및 돌연변이를 억제하는 화합물 1의 능력을 결정하기 위해 다음의 분석을 사용했다.
PI3Kα
ADP-Glo 발광성 키나아제 분석을 사용하여 PI3Kα 활성을 측정했다. P13Kα, N-말단 GST-표지된 재조합 전체 길이 사람 p110α 및 비표지된 재조합 전체 길이 사람 p85α의 복합체를 바큐로바이러스 감염된 Sf9 세포 발현 시스템에서 동시발현시켰다. (GenBank Accession No. for p110α, U79143; for p85α, XM_043865). 글루타티온-아가로스를 사용하는 1단계 친화성 크로마토그래피에 의해 단백질을 정제했다. 경쟁 분석을 수행하여 정제된 재조합 PI3Kα (p110α/p85α) 및 PIP2의 존재 하에서 ATP로부터 발생된 ADP의 양을 측정했다. 반응 완충제 내에서 (50 mM HEPE, pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 3 μM Na 오르소바나데이트, 1 mM DTT, 10 μM 초순수 ATP 및 0.5% DMSO) 20 μM PIP2 기질과 함께 30 분 동안 30oC에서 PI3Kα을 배양했다. 반응에서 발생된 ADP를 이후 ADP-Glo 분석에 의해 측정했다. 2 단계에서 분석을 수행했다; 첫번째로 동등한 부피의 ADP-GLO? 시약 (Promega)을 부가하여 키나아제 반응을 종료했고 나머지 ATP를 대폭 감소시켰다. 제2 단계에서, ADP를 ATP로 동시에 전환시키는, 키나아제 검출 시약을 부가했다. 커플링된 루시페라아제/루시페린 반응을 사용하여 새롭게 합성된 ATP을 측정했다. 이 분석에서 화합물 1에 대해 결정되는 IC50는 100 nM 미만이었다.
PI3Kα 돌연변이 H1047R 및 E545K을 억제하는 화합물 1의 능력이 상기 기술된 일반적인 절차를 사용하여 또한 결정되었다. 두 돌연변이 모두에 대해 결정된 IC50은 100 nm 미만이었다.
PI3Kβ
균질 시분해 형광 (HTRF) 기술을 활용하는 시분해 형광 공명 에너지 전이 (TR-FRET) 분석을 사용하여 PI3Kβ의 활성을 측정했다. P13Kβ, N-말단 히스티딘-표지된 재조합 전체 길이 사람 p110β 및 비표지된 재조합 전체 길이 사람 p85α의 복합체를 바큐로바이러스 감염된 Sf21 세포 발현 시스템에서 동시발현시켰다. (GenBank Accession No. for p110b, NM_006219; for p85a, XM_043865). 글루타티온-아가로스를 사용하는 1단계 친화성 크로마토그래피에 의해 단백질을 정제했다. 경쟁 분석을 수행하여 정제된 재조합 PI3Kbeta (p110β/p85α)의 존재 하에서 PIP2로부터 발생된 PIP3의 양을 측정했다. 반응 완충제 내에서 (20 mM HEPE, pH 7.5, 10 mM NaCl, 4 mM MgCl2, 2 mM DTT, 10 μM ATP 및 1% DMSO) 10 μM PIP2 기질과 함께 30 분 동안 30oC에서 PI3Kβ을 배양했다. 이후 반응 생성물을, PIP3 검출기 단백질, 유로피움-표지된 항신체, 비오틴-표지된 PIP3 프로브 및 알로피코시아닌-표지된 스트렙트아비딘과 혼합했다. 센서 복합체가 형성되어 반응 혼합물에서 안정한 TR-FRET 신호를 발생시킨다. PIP3 검출기에 결합하는 비오틴-표지된 프로브가 PIP3에 의해 대체되는 것과 같은 이 신호 강도 감소는 효소 활성에 의해 생성되고 혼합물 내 결합되지 않은 비오틴-표지된 PIP3 프로브의 양이 증가한다. 배경 제거를 갖는 마이크로 플레이트 판독기를 사용하여 TR-FRET 신호를 결정한다.
이 분석에서 화합물 1에 대해 결정된 IC50은 100 및 1000 nM 사이이다.
PI3Kδ
형광 편광 분석을 사용하여 PI3Kδ의 활성을 측정했다. P13Kδ, N-말단 히스티딘-표지된 재조합 전체 길이 사람 p110δ 및 비표지된 재조합 전체 길이 사람 p85α의 복합체를 바큐로바이러스 감염된 Sf9 세포 발현 시스템에서 동시발현시켰다. (GenBank Accession No. for p110δ, NM_005026). 글루타티온-아가로스를 사용하는 1단계 친화성 크로마토그래피에 의해 단백질을 정제했다. 경쟁 분석을 수행하여 정제된 재조합 PI3Kδ (p110δ/p85α)의 존재 하에서 PIP2로부터 발생된 PIP3의 양을 측정했다. 반응 완충제 내에서 (20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM NaCl, 4 mM MgCl2, 2 mM DTT, 10 μM ATP 및 1% DMSO) 10 μM PIP2 기질과 함께 1시간 동안 30oC에서 PI3Kδ을 배양했다. 이후 반응 생성물을 PIP3 검출기 단백질 및 형광 PIP3 프로브와 혼합했다. PIP3 검출기에 결합하는 형광 프로브가 PIP3에 의해 대체되는 것과 같은 편광 (mP) 값 감소는 효소 활성에 의해 생성되고 혼합물 내 결합되지 않은 형광 프로브의 양을 증가시킨다. 배경 제거를 갖는 마이크로 플레이트 판독기를 사용하여 편광도 (mP) 값을 결정했다.
이 분석에서 화합물 1에 대해 결정되는 IC50는 100 nM 미만이었다.
PI3Kγ
균질 시분해 형광 (HTRF) 기술을 활용하는 시분해 형광 공명 에너지 전이 (TR-FRET) 분석을 사용하여 PI3Kγ의 활성을 측정했다. 바큐로바이러스 감염된 Sf9 세포 발현 시스템에서 N-말단 히스티딘 표지된 사람 P13Kδ이 발현되었다. (GenBank Accession AF327656). 글루타티온-아가로스를 사용하는 1단계 친화성 크로마토그래피에 의해 단백질을 정제했다. 경쟁 분석을 수행하여 정제된 재조합 PI3Kγ (p120γ)의 존재 하에서 PIP2로부터 발생된 PIP3의 양을 측정했다. 반응 완충제 내에서 (20 mM HEPE, pH 7.5, 10 mM NaCl, 4 mM MgCl2, 2 mM DTT, 10 μM ATP 및 1% DMSO) 10 μM PIP2 기질과 함께 30 분 동안 30oC에서 PI3Kγ (2 nM)을 배양했다. 이후 반응 생성물을, PIP3 검출기 단백질, 유로피움-표지된 항신체, 비오틴-표지된 PIP3 프로브 및 알로피코시아닌-표지된 스트렙트아비딘과 혼합했다. 센서 복합체가 형성되어 반응 혼합물에서 안정한 TR-FRET 신호를 발생시킨다. PIP3 검출기에 결합하는 비오틴-표지된 프로브가 PIP3에 의해 대체되는 것과 같은 이 신호 강도 감소는 효소 활성에 의해 생성되고 혼합물 내 결합되지 않은 비오틴-표지된 PIP3 프로브의 양이 증가한다. 배경 제거를 갖는 마이크로 플레이트 판독기를 사용하여 TR-FRET 신호를 결정한다.
이 분석에서 화합물 1에 대해 결정된 IC50은 100 및 1000 nM 사이이다.
실시예 10: HDAC 활성 분석
Biomol Color de Lys 시스템 (AK-500, Biomol, Plymouth Meeting, PA)을 사용하여 HDAC 저해 활성을 평가했다. 간단히, HDAC의 원천으로서 HeLa 세포 핵 추출물을 사용했다. 테스트 화합물의 상이한 농도를 디메틸설폭시드 (DMSO) 내에 연속적으로 희석했고 비색계 인공 기질의 존재 하에서 HeLa 세포 핵 추출물에 부가했다. 최종 분석 조건은 50 mM Tris/Cl, pH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl 및 1 mM MgCl2을 함유했다. 종료를 위한 현상액의 부가 이전에 반응을 실온에서 (25°C) 1시간 동안 수행했다. WALLAC Victor II 1420 마이크로 플레이트 판독기에서 형광 강도로 (여기: 350- 380 nm; 방출: 440-460 nm) 상대적인 효소 활성을 측정했다. IC50 계산을 위한 s자형 투여량 반응 곡선 맞춤을 갖는 GraphPad Prism (v4.0a) 사용하여 데이터를 분석했다. 이 분석에서 화합물 1에 대해 결정되는 IC50는 100 nM 미만이었다.
HDAC 이소타입에 대항하여 화합물 1의 활성을 또한 결정했다. HDAC 특이성 분석을, 그들의 표준 작동 절차에 따라 BPS Bioscience (San Diego, CA)에서 수행했다. 간단히, 정제된 flag- (사람 HDAC-1), NCOR2- (사람 HDAC3), GST- (사람 HDAC4, 6, 7, 10 및 11) 또는 His- (사람 HDAC 2, 5, 8 및 9) 표지된 효소가 Sf9 곤충 세포에서 발현되었고 사용 이전에 이를 정제했다. HDAC1, 2, 3, 6, 7, 8, 9 및 11에 대해 사용되는 기질은 BPS Bioscience에 의해 개발된 HDAC 기질 3이다. 다른 HDAC 효소에 대해, HDAC Class 2a 기질이 사용되었다. 실온에서 3 시간 동안 수행되는, HDAC11 효소 분석을 제외하고, 모든 효소 반응을 37ºC에서 30 분 동안 중복하여 수행했다.
아래의 표는, 다음과 같이 제공된 IC50 값을 갖는 각각의 HDAC 1-11에 대한 결과를 설명한다: I > 1000 nM; 100 nM < II < 1000 nM; 10 nM < III < 100 nM; IV < 10 nM.
Figure pct00013
실시예 11: 베네토클락스와 조합한 화합물 1의 시험관 내 연구
시약
베네토클락스 (ABT-199)를 Selleck Chemicals (Houston, TX)로부터 구입했다. 시험관 내 분석에 대해, 화합물을 디메틸 설폭시드 (DMSO) 내에 용해시켜 1000X 저장 용액을 만들었고 일회용으로만 -80°C에서 저장했다.
세포 배양
DLBCL 암 세포주를 American Type Culture Collection (Manassa, VA) 및 German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (Braunschweig, Germany)로부터 구입했다. 제조 권장 사항에 따라 세포를 유지했고 5% CO2의 습윤 대기 내 37°C에서 배양했다. 성장 배지를 2 내지 3 일마다 바꾸었고 세포를 2 x 106 내지 4 x 106 세포/mL의 밀도에서 유지시켰다. 기하급수적으로 성장하는 세포 배양물을 아래에 기술된 모든 실험에서 사용했다.
암 세포 증식 및 분석
증식 분석을 위해 권장 배양 배지를 갖는 96-웰 평판 플레이트에 2 x 104의 밀도로 세포를 도말했다. 이후 10% (v/v) FBS가 보충된 배양 배지 내 명시된 시간 동안 다양한 농도로 명시된 화합물과 함께 세포를 배양했다. CELLTITER-GLO® 발광 세포 생존력 분석 (Promega, Madison, WI)을 사용하여 세포 생존력을 평가했다. 곡선 맞춤 및 IC50 계산을 위해 GraphPad Prism 5.0 (Graphpad 소프트웨어, La Jolla, CA)을 사용했다. 각각의 실험에 대해 중복되는 두 독립적인 실험을 수행했다.
약물 조합 연구
치료의 24 시간 이후에 세포 증식으로서 생성된 투여량-효과 곡선에 기초하여 약물 조합 시너지를 결정했다. 상승 작용에 대한 각각의 물질의 상대적인 기여도를 탐구하기 위해, 베네토클락스 단독의 또는 화합물 1의 고정된 농도와 조합하여 연속적인 희석을 테스트했다. 식 E(d1, d2)=E(d1)+E(d2) - E(d1)*E(d2)에 의해 정의된 Bliss 독립 모델에 의해 상승 작용, 가성성, 또는 길항 작용을 결정했고, 여기서 E(d1, d2)는 그들의 개별 효과 E(d1) 및 E(d2)에 의해 예측된 것과 같은 화합물 1 및 베네토클락스의 부가 효과이다.
결과
테스트된 세포주의 성장에 대한 화합물 1 및 베네토클락스 (ABT-199)의 조합의 결과가 아래의 표 및 도 1에서 보여진다.
Figure pct00014
데이터는, 세포주 KARPAS422, OCILY3, SUDHL4 및 WSUDLCL2이 단일 물질로서의 베네토클락스에 내성인 것을 보여준다. 화합물 1 및 베네토클락스의 조합은, KARPAS422 및 OCILY3 세포주에서 1000배 증가 초과, U2932 세포주에서 2배 증가로의 감소와 함께, 각각의 세포주에서 예측된 부가 효과 이상의 개선을 보여준다. 특히, 베네토클락스-난치성 세포주는 화합물 1/베네토클락스 조합을 이용하여 치료될 때 억제의 가장 큰 향상을 보여준다.
실시예 12: DOHH2 미만성 거대 B 세포 림프종 이종이식 모델
Charles River Laboratories (Wilmington, MA)로부터 얻어진 6- 내지 9-주령 암컷 면역 결핍 Fox Chase SCID 베이지 마우스에 오른쪽 후방 측면 영역 내로 100 내지 200 μL의 매질 현탁액 내 5 Х 106 세포를 피하 주사했다. 평균 종양 크기가 대략 100 내지 200 mm3 에 도달될 때 치료를 시작했다. 화합물 1을 30% Captisol (비히클 1; Ligand Pharmaceuticals, Inc, La Jolla, CA)로 제제화했다. 베네토클락스를 60% phosal 50PG, 30% PEG 400, 10% 에탄올 (비히클 2; Sigma Aldrich, St. Loui, MO)로 제제화했다.
화합물 1 단독, 베네토클락스 단독, 조합 또는 비히클로 두 물질의 달라지는 투여량을 실험 동물 운영 위원회 가이드라인에 따라 경구 투여했다. 화합물 1 및 비히클 1를 5 일 투여, 2 일 휴식 (5/2) 일정으로 21 일 동안 투여했다. 베네토클락스 및 비히클 2를 21 일 동안 매일 투여했다.
마우스를 다음의 그룹으로 나누었다: A. 비히클: (i) 비히클 1 및 (ii) 비히클 2; B. 50 mg/kg에서의 화합물 1; C: 100/75 mg/kg에서의 화합물 1; D. 50 mg/kg에서의 베네토클락스; E: 100 mg/kg에서의 베네토클락스; F: 50 mg/kg에서의 화합물 1 및 50 mg/kg에서의 베네토클락스; G: 50 mg/kg에서의 화합물 1 및 100 mg/kg에서의 베네토클락스; H: 100/75 mg/kg에서의 화합물 1 및 50 mg/kg에서의 베네토클락스; I: 100/75 mg/kg에서의 화합물 1 및 100 mg/kg에서의 베네토클락스. 그룹 C, H 및 I에서, 화합물 1을 최초 5 일 동안 100 mg/kg으로, 이후 75 kg/mg으로 투여했다.
종양 크기를 매주 2번 측정했고 부피를 화학식, V = 0.5a x b2을 사용하여 mm3로 표현했고, 여기서 a 및 b는, 각각, 종양의 긴 및 짧은 직경이다. 이후 종양 성장 억제 (TGI) = (1- (T1-T0) / (C1-C0)) x 100의 계산을 위해 종양 크기를 사용했다, 여기서 C1= 시간 t에서 대조군 마우스의 평균 종양 부피; T1 = 시간 t에서 치료되는 마우스의 평균 종양 부피; C0 = 시간 0에서 대조군 마우스의 평균 종양 부피; 및 T0 = 시간 0에서 치료되는 마우스의 평균 종양 부피이다.
통계적 분석
GraphPad Prism 5.0 (GraphPad 소프트웨어) 상에서의 스튜던트 t-테스트를 사용하여 상이한 실험적 병태를 갖는 치료되는 종양 내 얻어진 값 사이의 차이를 결정했다. p<0.05가 통계적으로 유의하게 간주된다.
결과
생체 내 DOHH2 미만성 거대 B 세포 림프종 모델의 결과가 도 2에서 보여진다. 그래프 A는 비히클 대조군, 화합물 1 단독 (50 mg/kg), 베네토클락스 단독 (100 mg/kg) 및 화합물 1 (50 mg/kg) 및 베네토클락스 (100 mg/kg)의 조합을 비교한다. 그래프 B는 비히클 대조군, 화합물 1 단독 (100 mg/kg 제1 투여량, 75 mg/kg 그 다음 투여량), 베네토클락스 단독 (100 mg/kg) 및 화합물 1 (100 mg/kg 제1 투여량, 75 mg/kg 그 다음 투여량) 및 베네토클락스 (100 mg/kg)의 조합을 비교한다. 두 실험 모두에서 화합물 1 및 베네토클락스의 조합의 효과는 각각의 물질을 갖는 단일요법의 결과에 기초한 예상되는 부가 효과보다 현저하게 크다.
실시예 13: SU -DHL 미만성 거대 B 세포 림프종 이종이식 모델
Charles River Laboratories (Wilmington, MA)로부터 얻어진 7- 내지 9-주령 암컷 면역 결핍 Fox Chase SCID 베이지 마우스 (15-24 g)에 오른쪽 후방 측면 영역 내로 100 μL 저온 PBS의 매질 현탁액 내 5 Х 106 SU-DHL-4 세포를 피하 주사했다. 피하 주입 후 29 일에 치료를 시작했고; 도달된 평균 종양 크기는 126 mm3 이다. 화합물 1 (화합물 1)을 7.5 mg/mL 의 농도로 비히클 1 (30% Captisol) 내에 용해시켰다. 베네토클락스 (ABT-199)를 20 mg/mL의 농도로 비히클 2 (60% phosal 50 PG, 30% PEG 400 및 10% 에탄올) 내에 용해시켰다.
마우스를 각각 8 마우스의 11 그룹으로 나누었고 아래의 표 내에 보여지는 것과 같이 투여했다. 그룹 H 내지 K에서, 화합물 1 및 베네토클락스를 서로의 1 분 이내 투여했다.
Figure pct00015
Figure pct00016
종양 크기를 매주 2번 측정했고 부피를 화학식, V = 0.5a x b2을 사용하여 mm3로 표현했고, 여기서 a 및 b는, 각각, 종양의 긴 및 짧은 직경이다. 이후 종양 성장 억제 (TGI) = (1- (T1-T0) / (C1-C0)) x 100의 계산을 위해 종양 크기를 사용했다, 여기서 C1= 시간 t에서 대조군 마우스의 평균 종양 부피; T1 = 시간 t에서 치료되는 마우스의 평균 종양 부피; C0 = 시간 0에서 대조군 마우스의 평균 종양 부피; 및 T0 = 시간 0에서 치료되는 마우스의 평균 종양 부피이다.
통계적 분석
GraphPad Prism 5.0 (GraphPad 소프트웨어) 상에서의 스튜던트 t-테스트를 사용하여 상이한 실험적 병태를 갖는 치료되는 종양 내 얻어진 값 사이의 차이를 결정했다. p<0.05가 통계적으로 유의하게 간주된다.
결과
생체 내 SUD-HL4 미만성 거대 B 세포 림프종 모델의 결과가 도 3 및 4 내에서 보여진다. 도 3은 비히클 대조군 (그룹 A), 화합물 1 단독 (그룹 D), 베네토클락스 단독 (그룹 F 및 G) 및 화합물 1 및 베네토클락스의 조합 (그룹 I 및 J)을 비교한다. 도 4는 비히클 대조군 (그룹 B), 화합물 1 단독 (그룹 E), 베네토클락스 단독 (그룹 F) 및 화합물 1 및 베네토클락스의 조합 (그룹 K)을 비교한다. 두 실험 모두에서 화합물 1 및 베네토클락스의 조합의 효과는 각각의 물질을 갖는 단일요법의 결과에 기초한 예상되는 부가 효과보다 현저하게 크다.
본 명세서에서 나타내어진 특허 및 학술 문헌은 본 업계의 숙련가에게 이용 가능한 지식을 확립한다. 본 명세서에서 인용된 모든 미국 특허 및 공개된 또는 미공개된 미국 특허 출원은 참고로서 포함된다. 본 명세서에서 인용된 모든 공개된 외국 특허 및 특허 출원은 본 명세서에서 참고로서 포함된다. 본 명세서에서 언급된 모든 다른 공개된 참고 문헌, 문서, 원고 및 학술 문헌은 본 명세서에서 참고로서 포함된다.
본 발명은 그의 바람직한 구체예를 참고로 하여 특히 보여지고 기술되었지만, 형태 및 세부 사항의 다양한 변화가 첨부된 청구범위에 포함된 본 발명의 범위를 벗어나지 않고 그 안에서 이루어질 수 있다는 것이 본 업계의 숙련가에 의해 이해될 것이다.

Claims (31)

  1. 치료를 필요로 하는 대상에서 암을 치료하기 위한, 다음을 대상에 투여하는 것을 포함하는 방법:
    (a) 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00017

    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 여기서 R은 수소 또는 아실기이고 A는 임의로 치환된 페닐, 피리딜 또는 피리미딜이고; 및
    (b) BCL-2 억제제; 여기서 화학식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 BCL-2 억제제는 조합에서 치료적으로 효과적인 양으로 투여됨.
  2. 제1항에 있어서, R은 R1C(O)-이고, 여기서 R1은 치환된 또는 비치환된 C1-C24-알킬; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알케닐, 바람직하게는 C2-C10-알케닐, 및 더욱 바람직하게는 C2-C6-알케닐; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알키닐; 치환된 또는 비치환된 아릴; 또는 치환된 또는 비치환된 헤테로아릴인 방법.
  3. 제1항에 있어서, R은 수소 또는 아세틸인 방법.
  4. 제3항에 있어서, R은 수소인 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, A는 아래의 그룹으로부터 선택된 방법:
    Figure pct00018
  6. 제1항에 있어서, 화학식 I의 화합물은 다음으로부터 선택된 방법:
    Figure pct00019
    ;
    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  7. 제1항에 있어서, 화학식 I의 화합물은 다음의 화학식에 의해 나타내는 방법:
    Figure pct00020
    ,
    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스, 오바토클락스, 나비토클락스, 사부토클락스, 감보그산, HA14-1, ABT-737, TW-37, AT101 및 그의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방법.
  9. 제8항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 방법.
  10. 제7항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 방법.
  11. 제1항 내지 제7항 및 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 다음인 방법:
    (a) 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 대상에 동시에 투여되거나; 또는
    (b) 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 개별 조성물로서 대상에 순차적으로 투여됨.
  12. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 I의 화합물 및 BCL-2 억제제는 단일 조성물로 투여되는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 암은 혈액학적 암인 방법.
  14. 제13항에 있어서, 암은 백혈병 또는 림프종인 방법.
  15. 제14항에 있어서, 림프종은 B 세포 림프종, T 세포 림프종 또는 NK 세포 림프종인 방법.
  16. 제14항에 있어서, 림프종은 미만성 대세포 B 세포 림프종인 방법.
  17. 제10항에 있어서, 암은 혈액학적 암인 방법.
  18. 제17항에 있어서, 암은 백혈병 또는 림프종인 방법.
  19. 제17항에 있어서, 림프종은 B 세포 림프종, T 세포 림프종 또는 NK 세포 림프종인 방법.
  20. 제18항에 있어서, 림프종은 미만성 대세포 B 세포 림프종인 방법.
  21. 다음을 포함하는 약제학적 조성물:
    (a) 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00021

    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 여기서 R은 수소 또는 아실기이고 A는 임의로 치환된 페닐, 피리딜 또는 피리미딜이고;
    (b) BCL-2 억제제; 및
    (c) 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제.
  22. 제21항에 있어서, R은 R1C(O)-이고, 여기서 R1은 치환된 또는 비치환된 C1-C24-알킬; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알케닐, 바람직하게는 C2-C10-알케닐, 및 더욱 바람직하게는 C2-C6-알케닐; 치환된 또는 비치환된 C2-C24-알키닐; 치환된 또는 비치환된 아릴; 또는 치환된 또는 비치환된 헤테로아릴인 약제학적 조성물.
  23. 제22항에 있어서, R은 수소 또는 아세틸인 약제학적 조성물.
  24. 제23항에 있어서, R은 수소인 약제학적 조성물.
  25. 제21항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, A는 아래의 그룹으로부터 선택된 약제학적 조성물:
    Figure pct00022
  26. 제21항에 있어서, 화학식 I의 화합물은 다음으로부터 선택된 약제학적 조성물:
    Figure pct00023
    ;
    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  27. 제21항에 있어서, 화학식 I의 화합물은 다음의 화학식에 의해 나타내는 약제학적 조성물:
    Figure pct00024

    또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  28. 제21항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스, 오바토클락스, 나비토클락스, 사부토클락스, 감보그산, HA14-1, ABT-737, TW-37, AT101 및 그의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 약제학적 조성물.
  29. 제27항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 약제학적 조성물.
  30. 제28항에 있어서, BCL-2 억제제는 베네토클락스 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 약제학적 조성물.
  31. 제21항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 정제 또는 캡슐의 형태인 약제학적 조성물.
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