KR20190062984A

KR20190062984A - 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20190062984A
Application number: KR1020170161704A
Authority: KR
Inventors: 신수정; 명길선; 신보현; 이은수; 진유진
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2017-11-29
Filing date: 2017-11-29
Publication date: 2019-06-07
Also published as: WO2019107727A1; KR102518581B1; US20210212924A1; CN111405892A; CN111405892B; US11291623B2

Abstract

본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 각각의 해수추출물을 혼합한 해수 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 채소류를 해수를 이용하여 자연적인 방법으로 추출한 복합추출물은 뛰어난 피부 수분이탈 방지 및 피부 장벽 강화 효과를 가지며, 우수한 피부 보습력을 갖는다. 따라서 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 우수한 피부 보습력을 갖는 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION CONTAINING THE COMPLEX EXTRACT OF BRUSSELS SPROUTS, LIMA BEAN AND ARTICHOKE}

본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 각각의 해수추출물을 혼합한 해수 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부에서부터 순서대로 표피, 진피, 피하지방 조직의 3개 층으로 크게 구분되며, 인체를 외부 환경으로부터의 물리적, 화학적인 자극으로부터 보호해주는 기능을 하는데, 특히 피부는 인체가 갖고 있는 약 65~70%의 수분이 체외로 증발되는 것을 조절해준다. 그 중에서도 표피는 외부로부터 각질층, 과립층, 유극층, 기저층의 순서로 구분되는데, 표피의 각질층은 약 10~20%의 수분을 함유하고 인체의 최외각에 존재하여 체내로부터의 수분 증발을 억제하는 한편 외부로부터의 물질 과잉 침투를 차단한다(J. Invest. Dermatol . 80( Suppl .), 44-49. 1973). 이러한 각질층을 구성하고 있는 세포에는 수용성 성분인 고농도의 자연보습인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)가 존재하여 피부가 유연성을 나타내도록 작용함은 물론 적절한 수분을 유지할 수 있도록 돕는다(J. Invest. Dermatol . 54, 24-31, 1970). 그러나, 환경의 변화 혹은 생활 패턴의 변화, 사회 생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경 오염, 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 원인으로 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠게 되며, 피부가 윤기를 잃어 칙칙하게 보이는 등의 현상이 발생하여 피부 보습에 관한 문제는 그 중요성이 점점 더 커지고 있다.

이에 피부 보습 기능의 다양한 화장품 원료들이 개발되고 있는데, 화학원료의 경우, 피부 알러지나 피부 트러블 등의 부작용을 유발하는 등의 문제점이 있고, 동물성 원료의 경우, 소비자들의 선호도 하락과 광우병 등의 파문으로 동물성 원료에 대한 사용이 급격히 줄어들고 있어, 식물성 등 친환경 유래의 원료들이 각광받고 있는 실정이다.

대한민국 공개특허공보 제10-2014-0090896호 대한민국 공개특허공보 제10-2005-0111667호

본 발명은 피부장벽관련 유전자 및 피부세포에서 수분이탈을 막는 유전자의 발현을 촉진시켜 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 특징에 따른 화장료 조성물은, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 그 구성상의 특징으로 한다.

본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 채소류를 해수를 이용하여 자연적인 방법으로 추출한 복합추출물은 뛰어난 피부 수분이탈 방지 및 피부 장벽 강화 효과를 가지며, 우수한 피부 보습력을 갖는다. 따라서 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 우수한 피부 보습력을 갖는 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 시험예 1에 따른 ABCA12 유전자의 발현량 비교 그래프이다.
도 2는 시험예 2에 따른 오클루딘(Occludin) 유전자 발현량 비교 그래프이다.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.

이하, 본 발명에 따른 화장료 조성물에 대하여 구체적으로 설명한다.

본 명세서에서 부피, 시간(기간), 농도, 함량, 면적, 온도 등을 표현하는데 사용된 용어 "약"은 해당 수치 또는 수치 범위에서 최대 10%의 허용오차가 존재한다는 것을 의미한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 함유한다.

본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 방울양배추는 방울 다다기 양배추(Brassica oleracea L. var. gemmifera Zenker )라고도 하며, 영문 명칭은 Brussels sprouts로 알려져 있다. 상기 방울 양배추는 일반적인 양배추와는 달리 줄기가 길게 자라고 여기에 잎이 드물게 붙는다. 줄기는 높이 60~90cm로 자라고 잎은 30~40개 정도 달린다. 겨드랑눈에서 방울 모양으로 결구(結球)하여 새끼 양배추가 달리는데 지름이 3~5cm이고 1개의 질량은 10~15g이다. 2년 정도 재배하면 각각의 새끼 양배추에서 꽃대가 나와 꽃이 피고 열매를 맺는다. 다른 양배추처럼 서늘한 기후를 좋아하는데 줄기와 새끼양배추가 자라는 조건이 서로 다르다. 줄기가 자라는 시기에는 18~20℃의 온도와 높은 습도를 요구하지만 새끼양배추가 여무는 시기에는 건조하고 비교적 서늘한 조건(12~13℃)을 요구한다. 특히 내한성이 매우 강해 -3℃에서도 한해를 입지 않는다.

이러한 방울 양배추는 저장성이 우수하고, 일반 양배추보다 단백질, 칼슘, 인, 철, 비타민 A, 비타민 C 등 영양소의 함량이 월등이 높은 것으로 알려져 있다.

본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 리마콩(Lima bean)은 남아메리카에서 가장 오래된 콩 종류로 중앙 및 남아메리카가 원산지이다. 리마빈은 온대에서는 겨울에 말라 죽으며, 덩굴이 없는 품종도 있다. 식물의 길이는 약 1~4m 정도이며, 여름에 나비 모양의 흰색꽃을 달고 초승달 모양의 꼬투리는 약 9cm까지 자라 여문다. 콩은 한 개의 꼬투리에 3~4알이 들어 있고 콩의 직경은 1.5~2cm 정도로 타원형에 납작한 모양을 하고 있다. 어린 리마콩은 초록색을 띠며, 성숙한 콩은 흰색을 띠는 것이 보통이나 그 밖에 검은색, 붉은색, 얼룩무늬를 띠기도 한다. 파종 이후 60~90일 사이에 수확이 가능하며, 열대지역에서는 일년 내내 수확이 가능하다.

리마콩은 다른 콩 종류와 마찬가지로 단백질이 풍부하면서 칼로리가 적고 지방이 적어 체중조절 시 포만감을 줄 수 있는 식품으로 활용될 수 있으며, 섬유질이 다량 함유되어 있어 변비 예방은 물론 체내의 콜레스테롤 수치를 낮추어 동맥경화, 고혈압과 같은 성인병 예방에도 도움을 준다. 또한 이소플라본이 함유되어 있어서 유방암 예방에도 도움을 준다고 알려져 있다.

본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 아티초크(Cynara scolymus)는 국화과에 속하는 엉겅퀴처럼 생긴 다년생 화초이며 거인의 엉겅퀴라 할만큼 엉겅퀴를 닮은 거대한 꽃이 특징인 화초이다. 고대 그리스나 로마시대부터 재배하여 식용으로 이용했다고 전해진다. 지중해 연안이 원산지이며, 바닷가 근처에서 자란다. 줄기는 높이가 1.5~2m이고 잎은 어긋나고 깃 모양으로 깊이 갈라진다. 잎 표면은 녹색이고 뒷면은 솜 같은 흰색 털이 빽빽이 있다. 꽃은 여름에 자줏빛으로 피고 두상화(꽃대 끝에 꽃자루가 없는 작은 꽃이 많이 모여 피어 머리 모양을 이룬 꽃)를 이루며 달린다. 다른 채소와는 다르게 커다란 꽃봉오리를 식용으로 이용한다. 아티초크에는 인슐린과 같은 작용을 하는 당류가 있어 약용으로 높이 평가받고 있으며 잎이나 뿌리의 경우 콜레스테롤 저하효과가 있다고 알려져 있다. 차로 이용하면 이뇨작용과 간 개선에 도움을 준다. 또한, 강력한 항산화 활성, 간세포에 대한 보고기능, 혈당 조절 등 성인병 예방효과 및 소화촉진의 효능이 있다.

본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크로부터 각각의 해수 추출물을 수득한 후 혼합한 것이거나, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크를 혼합한 후 해수로 추출한 것일 수 있으며, 바람직하게는 상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크로부터 각각의 해수 추출물을 수득한 후 혼합한 혼합추출물이다.

상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크는 공지의 천연물 추출방법에 의해 추출될 수 있고, 추출 시 이용되는 용매는 해수인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 해수의 양은 추출하는 방울양배추 해수 추출물, 리마콩 해수 추출물 및 아티초크 해수 추출물의 양에 따라 달라질 수 있다. 예컨대, 100ml의 해수에 0.1~20.0g, 바람직하게는 1.0~10.0g, 더욱 바람직하게는 2.0~6.0g, 가장 바람직하게는 3.5~4.5g의 방울양배추, 리마콩 또는 아티초크 각각의 식물체를 첨가한 후 침지시켜 각각의 해수 추출물을 제조할 수 있다.

이때 추출온도는 5~60℃, 바람직하게는 12~30℃, 더욱 바람직하게는 10~20℃이며, 추출시간은 특별히 제안되지 않으며, 예컨대 1~24시간, 바람직하게는 2~12시간, 더욱 바람직하게는 4~6시간 동안 추출할 수 있다.

상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 필요에 따라 공지의 천연물 추출법으로 제조될 수 있다. 예를 들어 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출, 가열 추출법으로 추출할 수 있으며, 바람직하게는 열수추출 또는 환류 냉각 추출법으로 추출할 수 있으며, 1회 내지 10회, 바람직하게는 2회 내지 7회 반복 추출할 수 있다.

상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 여과하여 액상으로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 분무건조 또는 동결건조의 건조 공정을 통하여 고형화하여 사용할 수 있다. 더욱 바람직하게는 분무건조 또는 동결건조 전 덱스트린을 혼합하여 건조할 수 있다.

또한, 목적하는 효과를 위하여, 상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 본 발명에 따른 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 40 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 30 중량%, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%의 양으로 함유될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 조성물은 제형 안정성과, 화장품의 안전에 관한 규칙에 의거한 사용 제한량을 고려하여, 상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물의 총 함량이 0.001중량% 미만일 경우 화장료로서 효능을 갖기에 지나치게 낮은 수준이며, 40중량% 초과일 경우 화장료 조성물에 사용하기에 피부 안전성의 우려가 있고 용해시킬 수 없어 제형 중 배합이 불가능하다.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 해수는 일반 해수, 해양심층수, 용암해수 등일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 바람직하게는 제주도 동부지역 북제주군 구좌읍 한동리에서 지하 100 내지 200m, 바람직하게는 150m를 굴착하여 지하(평균 해수면 기준) 30 내지 150m, 바람직하게는 44.35m, 86.35m 또는 126.35m에서 취수한 용암해수일 수 있다.

또한, 상기 해수의 밀도는 해수의 온도, 압력 및 염도(salinity)에 따라 다를 수 있으나, 보통 1000~2000g/L, 바람직하게는 1002~1100g/L, 더욱 바람직하게는 1005~1045g/L이며, 이러한 해수는 멸균 필터, 바람직하게는 0.2㎛의 필터를 이용하여 취수한 해수의 미생물 등의 불순물을 제거한 후 종래 알려진 탈염 방법, 예컨대, 플래시증발법, 해수동결법, 역삼투압법, 이온교환수지법, 전기투석법(electrodialysis; ED) 또는 시중에 유통되는 전기투석기나 탈염기를 사용하여 탈염된 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 전기전도도 값을 달리함으로써 탈염 해수의 미네랄 농도 및 경도를 조절할 수 있는 전기투석법으로 탈염된 것을 사용할 수 있다. 예컨대, 전기투석법을 이용하는 경우 전기전도도 값을 8mS/㎝, 10mS/㎝, 12mS/㎝, 15mS/㎝ 등으로 조절하여 1가 양이온 및 2가 음이온을 제거하는 탈염 과정을 거쳐 탈염 해수를 준비할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제, 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온붕쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 향료, 친수성 또는 친유성 활성제와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다. 또한 이들 보조제 또는 담체는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 함량으로 도입된다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

이하, 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 이러한 실시예 및 시험예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이러한 실시예 및 시험예로 한정되는 것은 아니고, 당업계에서 통상적으로 주지된 변형, 치환 및 삽입 등을 수행할 수 있으며, 이에 대한 것도 본 발명의 범위에 포함된다.

실시예 1: 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물 제조

방울양배추 20g, 리마콩 종자(seed) 20g 및 아티초크 잎(leaf) 200g을 각각 분쇄기를 이용하여 분쇄한 후, 상기 분쇄한 방울양배추, 리마콩 종자 및 아티초크 잎을 0.5L, 0.5L 및 5L의 해수에 각각 15℃에서, 5시간 동안 침지시킨 후 여과하여 준비하고, 각각의 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수추출물을 혼합하여 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 해수 복합추출물을 제조하였다.

상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 잎은 소매상에서 입수하였고, 해수는 ㈜두래에서 공급받은 것으로서, 제주도 동부지역 북제주군 구좌읍 한동리에서 지하 150m를 굴착하여 지하(평균 해수면 기준) 86.35m에서 취수한 용암해수를 0.2㎛의 필터로 불순물을 걸러낸 후, 전기투석법(electrodialysis; ED)으로 탈염을 거친 해수를 이용하였다.

한편, 상기 86.35m에서 취수한 용암해수 및 그 외 44.35m, 126.35m에서 취수한 용암해수에 대하여 한국화학시험연구원에 성분 분석을 의뢰하여 얻은 제주 용암해수의 수심별 미네랄 함량(단위: ppm)은 하기 표 1과 같다.

시험항목	용암해수 44.35m	용암해수 86.35m	용암해수 126.35m	담수 1m
Na	11400	11400	10700	146
Mg	1510	1520	1390	0.49
Ca	460	490	431	9.20
K	643	540	621	38.5
Cu	0.00157	0.00113	0.00080	0.00069
Co	-	-	-	-
Sn	-	-	-	-
Mo	0.011	0.012	0.011	0.0014
V	3.28	3.53	0.01	0.013
Ge	0.0032	0.003	0.0025	0.00019
Br	-	-	-	-
Sr	1.18	1.31	1.30	0.05
Ti	-	-	-	-
Ni	-	-	-	-
Si(SiO2)	7.23	6.19	1.21	1.21
Zn	0.0045	0.0039	0.0019	0.001
Fe	0.21	0.26	0.04	0.082
Mn	19.51	20.7	18.9	0.01
Cl	16629	18500	19900	262
B	3.35	3.73	0.15	0.15
Li	0.37	0.41	0.09	0.09
Ba	0.032	0.019	0.015	0.015
Pb	0.004	0.0013	0.00065	0.00091
F	-	-	-	-
As	0.01	-	-	-
Se	0.00005	0.00124	0.00086	0.000049
Hg	-	-	-	-
CN	-	-	-	-
Cr	-	-	-	-
Cd	-	-	-	-
Al	0.63	0.49	0.47	0.14

상기 표 1의 결과로부터, 용암 해수는 칼슘, 마그네슘 등의 항목에서는 담수와 유사하게 나타나지만, 바나듐, 게르마늄, 셀레늄 등의 미량원소 항목에서는 뚜렷한 차이를 보이는 것으로 확인되었다.

비교예 1: 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 정제수 복합추출물 제조

추출 용매로 정제수를 사용한 것 외에는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 정제수 복합추출물을 제조하였다.

시험예 1: ABCA12 유전자 발현 촉진 효과

ABCA12 유전자는 피부 장벽 관련 유전자로서, 각질세포의 내부(cytosol)에서 층판 과립(lamellar granule)로의 지질 이동에 관여하여 세포간 지질형성에 기여하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 해수 복합추출물의 ABCA12 유전자의 발현 촉진 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.

각질형성세포(Human Epidermal Keratinocytes, HEKn, Lonza사)를 6-well plate의 배지(KBM-gold, Lonza사)에 2x10⁵ cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO₂의 조건 하에서 24시간 동안 배양하였다. 여기에 상기 실시예 1의 해수 복합추출물을 부피 기준으로 0.05% 및 0.1% 수준으로 처리하고, 추가로 24시간을 더 배양하였다. 추가로 배양된 각질형성세포를 TRIzol(Invitrogen사)을 이용하여 세포를 용해시키고 RNA를 분리하고 분리된 RNA를 RNA 키트(QIAGEN RNeasy kit, QIAGEN사, Valencia, CA)로 한번 더 정제한 후, 바이오애널라이저 2100 모델 기기(Agilent 200 BioAnalyzer, Agilent Technologies사, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 RNA의 질(quality)을 확인한 다음, 역전사키트(Superscript Reverse Transcriptase (RT) kit, Invitrogen사, Carlsbad, CA)를 이용하여 cDNA를 합성하였다. ABCA12 유전자의 발현량을 확인하기 위해서 프로브(TaqManTM fluorogenic probe, Hs00292421_m1)를 이용하여 real time PCR을 수행하여 ABCA12 유전자의 발현양상을 관찰하였으며, 여기서 각 시료에 대한 상대적 발현양상의 분석을 위해 RPL13A(Ribosomal Protein L13a)의 mRNA의 발현량을 기준으로 보정하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다. 대조군으로는 무처리군과 실시예 1의 해수 복합추출물 대신에 비교예 1의 정제수 복합추출물을 부피 기준으로 0.05% 및 0.1% 수준으로 처리한 것을 사용하였다. 도 1의 y축 값은 무처리군의 유전자 발현량을 1로 하였을 때의 상대적인 유전자 발현량을 나타낸다.

도 1의 결과에서, 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물이 피부 장벽 관련 유전자인 ABCA12의 유전자의 발현을 크게 촉진시키는 것을 확인할 수 있었으며, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 정제수 복합추출물을 처리한 경우와 비교하여 동일 농도 처리시에 매우 우수한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

따라서 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 ABCA12의 유전자 발현을 크게 촉진시켜 피부 장벽 강화 및 피부 보습 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

시험예 2: 오클루딘(Occludin)의 mRNA의 발현 촉진 효과

오클루딘(Occludin)은 세포막 단백질로서, 피부의 장벽기능 유지 및 강화에 중요한 기능을 담당하는 밀착 연접(Tight junction)에서 특이적으로 발현된다. 이러한 오클루딘 단백질의 발현이 저해되면 TEWL(Transepidermal Water Loss, 경표피 수분 손실)이 크게 증가하므로 수분 손실과의 관련성이 높다고 할 수 있다(Bazzoni et al., J Cell Biol ., 156(6):947-9. 2002; Furuse et al., J Cell Biol ., 156(6):1099-111, 2002; Nakajima et al., J Pharmacol Exp Ther ., 354(3):440-7., 2015; Volksdorf et al., Am J Pathol ., 187(6):1301-1312, 2017; Papakonstantinou et al., Dermatoendocrinol., 4(3):253-8, 2012).

따라서 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크 해수 복합추출물의 오클루딘 코딩 유전자(mRNA)의 발현 촉진 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.

각질형성세포(Human Epidermal Keratinocytes, HEKn, Lonza사)를 6-well plate의 배지(KBM-gold, Lonza사)에 2x10⁵ cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO₂의 조건 하에서 24시간 동안 배양하였다. 여기에 상기 실시예 1의 해수 복합추출물을 부피 기준으로 0.05% 및 0.1% 수준으로 처리하고, 추가로 24시간을 더 배양하였다. 추가로 배양된 각질형성세포를 TRIzol(Invitrogen사)을 이용하여 세포를 용해시키고 RNA를 분리하고 분리된 RNA를 RNA 키트(QIAGEN RNeasy kit, QIAGEN사, Valencia, CA)로 한번 더 정제한 후, 바이오애널라이저 2100 모델 기기(Agilent 200 BioAnalyzer, Agilent Technologies사, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 RNA의 질(quality)을 확인한 다음, 역전사키트(Superscript Reverse Transcriptase (RT) kit, Invitrogen사, Carlsbad, CA)를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 오클루딘 유전자 발현량을 확인하기 위해서 프로브(TaqManTM fluorogenic probe, Hs00170162_m1)를 이용하여 real time PCR을 수행하여 오클루딘의 mRNA 발현량을 관찰하였으며, 여기서 각 시료에 대한 상대적 발현양상의 분석을 위해 RPL13A(Ribosomal Protein L13a)의 mRNA의 발현량을 기준으로 보정하였다. 그 결과는 도 2에 나타내었다. 대조군으로는 무처리군과 실시예 1의 해수 복합추출물 대신에 비교예 1의 정제수 복합추출물을 부피 기준으로 0.05% 및 0.1% 수준으로 처리한 것을 사용하였다. 도 2의 y축 값은 무처리군의 유전자 발현량을 1로 하였을 때의 상대적인 유전자 발현량을 나타낸다.

도 2의 결과에서, 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물이 밀착연접(tight junction) 관련 단백질인 오클루딘의 mRNA 발현을 크게 촉진시키는 것을 확인할 수 있었으며, 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 정제수 복합추출물을 처리한 경우와 비교하여 동일 농도 처리시에 매우 우수한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

따라서 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 오클루딘의 mRNA 발현을 크게 촉진시켜 피부세포에서의 수분이탈을 효율적으로 방지하여 피부 보습 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물은 다양한 제형으로 제품화(화장품 등)될 수 있으며, 구현하고자 하는 제품의 기능성, 비용 및 기타 조건을 고려하여 적정 함량 비율로 제어될 수 있다.

제형예 1: 연고의 제조

유상성분과 수상성분을 포함하는 하기 표 1의 성분들을 혼합하여 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 포함하는 연고를 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물	10.0
카프린/카프릴트리글릭세리드	10.0
액상파라핀	10.0
솔비탄세스퀴올리에이트	6.0
옥틸도데세스-25	9.0
세틸에틸헥사노에이트	10.0
스쿠알란	1.0
살리실산	1.0
글리세린	15.0
솔비톨	10.0

제형예 2: 영양화장수(밀크로션)의 제조

유상성분과 수상성분을 포함하는 하기 표 2의 성분들을 혼합하여 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 포함하는 영양화장수를 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물	0.1
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.5
유동파라핀	0.5
Montana 202 (제조사:Seppic)	5.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량

제형예 3: 마사지크림의 제조

유상성분과 수상성분을 포함하는 하기 표 3의 성분들을 혼합하여 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 포함하는 마사지크림을 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물	0.1
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
피이지 60 경화피마자유	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	0.8
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
Montana 202 (제조사: Seppic)	4.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량

제형예 4: 팩의 제조

유상성분과 수상성분을 포함하는 하기 표 4의 성분들을 혼합하여 본 발명에 따른 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 포함하는 팩을 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물	0.1
폴리비닐알콜	13.0
소듐카르복시메틸셀룰로오스	0.2
글리세린	5.0
알란토인	0.1
에탄올	6.0
핑이지-12 노닐페닐에테르	0.3
폴리솔베이트 60	0.3
방부제, 색소, 향료	적량

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 복합추출물은,
방울양배추 해수 추출물, 리마콩 해수 추출물 및 아티초크 해수 추출물을 1:1:3~50의 중량비로 혼합한 것임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 방울양배추, 리마콩 및 아티초크의 해수 복합추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 40 중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 세포의 ABCA12 유전자의 발현 수준을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 세포의 오클루딘(Occludin)을 코딩하는 유전자의 발현 수준을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 장벽 기능 강화용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 보습력 개선용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.