KR20190026805A

KR20190026805A - 에틴일 유도체

Info

Publication number: KR20190026805A
Application number: KR1020197003025A
Authority: KR
Inventors: 바르바라 비에만스; 게오르크 얘슈케; 안토니오 리치; 다니엘 뤼허; 피온 오하라
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2016-07-18
Filing date: 2017-07-12
Publication date: 2019-03-13
Also published as: PH12019500119A1; JP6936305B2; ZA201900113B; US20220127275A1; PT3484889T; SI3484889T1; BR112019000314A2; RU2019102757A; CO2018013824A2; CL2019000045A1; WO2018015235A1; MA45665B1; ES2826389T3; MX2019000442A; TWI729169B; JP2019521158A; HRP20201615T1; SG11201811829QA; EP3484889B1; RU2019102757A3

Abstract

본 발명은 하기 화학식 IA 또는 IB의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 산 부가 염, 라세미 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상 이성질체 및/또는 광학 이성질체 및/또는 입체 이성질체에 관한 것이다:
[화학식 IA]

[화학식 IB]

.
상기 화합물은 파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 및 2형 당뇨병의 치료에 사용될 수 있다.

Description

에틴일 유도체

본 발명은 하기 화학식 IA 또는 IB의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 산 부가 염, 라세미 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상 이성질체 및/또는 광학 이성질체 및/또는 입체 이성질체에 관한 것이다:

[화학식 IA]

[화학식 IB]

.

놀랍게도, 화학식 IA 및 IB의 화합물이 대사성 글루타메이트 수용체 4(mGluR4)의 양성 알로스테릭 조절제(PAM)임이 밝혀졌다. 대사성 글루타메이트 수용체 4는 GRM4 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다.

GRM6, GRM7 및 GRM8과 함께, 이는 대사성 글루타메이트 수용체 과의 III 군에 속하고, Gαi/o 단백질의 활성화를 통해 아데닐레이트 사이클라제(cyclase)에 음성적으로 커플링된다. 이는 시냅스전 말단에 주로 발현되어 자가 수용체 또는 이종 수용체로서 기능하고, 이의 활성화는 시냅스전 말단으로부터 전달물질의 방출을 감소시킨다. 현재, mGluR4는 이의 고유한 분포 및 상기 수용체의 활성화가 CNS 및 비CNS 경로에서 주요한 조절 역할을 한다는 최근의 증거에 주로 근거하여 많은 주목을 받고 있다(문헌[Celanire S, Campo B, Expert Opinion in Drug Discovery, 2012]).

본 분야에서 어느 정도 진전이 있었으나, III 군 mGluR의 리간드 결합 도메인의 유사성은 상기 수용체의 선택성 오르토입체 작용제(orthosteric agonist)를 동정하는데 어려움이 된다. 그러나, 오르토입체 작용제보다는 양성 알로스테릭 조절제(PAM)를 표적으로 하는 것이 mGluR들 사이에서 배타적 선택성이 있는 분자를 동정하기 위한 폭넓은 기회를 제공한다.

mGluR4 PAM은 비-도파민적 접근을 통한 운동 증상(motor symptom)(및 비-운동 증상)의 치료를 위한 유망한 치료제 및 비-도파민적 접근을 통한 파킨슨병의 질환-조절제로서 대두되고 있다.

파킨슨병은 흑질(SN)에서 도파민 뉴런의 손실을 야기하는 진행성 신경변성 질환이다. 상기 질환에서 도파민 고갈의 하나의 결과는 일련의 운동 장애, 예컨대 서동증(bradykinesia), 무동증(akinesia), 떨림, 보행 장애 및 균형 조절의 문제이다. 상기 질환과 연관된 다수의 다른 비-운동 질환이 존재하지만, 이러한 운동 장애가 파킨슨병의 특징을 형성한다. 상기 질환의 과정 초기에, 파킨슨병 증상은 도파민 D2 수용체 작용제, 레보도파 또는 모노아민 옥시다제 B 억제제를 사용하여 도파민 대체(replacement) 또는 확대(augmentation)에 의해 효과적으로 치료된다. 그러나, 상기 질환이 진행될수록, 상기 제제가 운동 증상을 제어하는 데는 덜 효과적이게 된다. 추가로, 이의 사용은 도파민 작용제-유도된 운동 이상증을 비롯한 장애 효과의 발생에 의해 제한된다.

결과적으로, 운동 증상의 제어의 유효성을 향상시키는 파킨슨병의 치료에 대한 신규한 접근이 필요한 상태이다.

대사성 글루타메이트 수용체 4(mGluR4)의 활성화는 파킨슨병에 대한 잠재적 치료 접근법으로서 제안돼 왔다. III 군 mGluR의 구성원인 mGluR4는 주로 운동을 제어하는 기저핵 회로에서 몇몇 주요 위치에 발현되는 시냅스전 글루타메이트 수용체이다. III 군-선호 작용제에 의한 mGluR4의 활성화는 가정 상, GABA 및 글루타메이트 각각의 방출을 감소시킴으로써 억제성 및 흥분성 시냅스후 전위를 감소시킨다.

파킨슨증의 운동 증상을 완화시키는 한편, 흑질선조체 뉴런(nigrostriatal neuron)의 지속적인 쇠퇴를 약화시키는 신규한 약물을 찾는 것이 특히 관심이 된다. 오르토입체 mGluR4 작용제 L-AP4는 파킨슨병의 6-OHDA 설치류 모델에서 신경보호 효과를 입증하였고, 제1 양성 알로스테릭 조절제(-)-PHCCC는 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘(MPTP)으로 처리된 마우스에서 흑질선조체 쇠퇴를 감소시켰다. 이러한 연구들은 mGluR4 활성제가 파킨슨병의 증상 치료뿐 아니라 잠재적으로 상기 적응증을 위한 질환 조절제로서 유효한 접근법을 구성함을 주장하는 신뢰성 있는 전임상적 증거를 제공한다.

선택성 mGluR4 조절제의 신경보호 효과는 문헌[Neuroreport , 19(4), 475-8, 2008]; 문헌[Proc . Natl . Acad . Sci , USA, 100(23), 13668-73, 2003]; 문헌[J.Neurosci. 26(27), 7222-9, 2006] 및 문헌[Mol . Pharmacol . 74(5), 1345-58, 2008]에도 기재되어 있다.

불안 장애는 세계에서 가장 유행하는 정신 질환이고, 파킨슨 질환과 동반-이환된다(문헌[Prediger R, et al. Neuropharmacology 2012;62 :115- 24]). 과량의 글루타메이트성 신경전달은 불안증 병태생리학의 하나의 중요한 특징이다. 불안증 및 기분 장애와 관련된 뇌 영역에서 mGluR4의 시냅스전 국소화, 및 과도한 뇌 흥분성의 경감시킴에 근거하여, mGluR4 활성제는 항불안증 치료의 신규한 세대를 대표할 수 있다(문헌[Eur. J. Pharmacol., 498(1-3), 153-6, 2004]).

애덱스(Addex)는 2010년에 ADX88178이 2개의 불안증 전임상 설치류 모델들에서 활성이 있음을 보고하였다(마우스의 마블 베링 시험(marble burying test) 및 마우스와 랫의 EPM). 또한, ADX88178는 경구 투여 후 랫 EPM 시험에서 항불안증-유사 프로파일을 나타냈다.

mGluR4 조절제는 항우울 작용을 발휘하는 것으로도 나타났다(문헌[Neuropharmacology, 46(2), 151-9, 2004]).

또한, mGluR4 조절제는 글루카곤 분비 억제에도 수반되는 것으로 나타났다(문헌[Diabetes, 53(4), 998-1006, 2004]). 따라서, mGluR4의 오르토입체 또는 양성 알로스테릭 억제제는 이의 혈당강하 효과를 통해 2형 당뇨의 치료에 대한 잠재성을 갖는다.

또한, mGluR4는 전립선 암 세포계(문헌[Anticancer Res. 29(1), 371-7, 2009]) 또는 직장결장 암종(문헌[Cli . Cancer Research, 11(9)3288-95, 2005])에서 발현되는 것으로 나타났다.

mGluR4 PAM의 다른 제안된 효과는 구토증, 강박 장애, 식욕부진증 및 자폐증의 치료에 대한 것으로 기대될 수 있다.

화학식 IA 및 IB의 화합물은 가치있는 치료적 특성을 갖는 것으로 차별화된다. 이는 mGluR4 수용체에 대한 알로스테릭 조절제와 관련하여 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

mGluR4 수용체에 대한 알로스테릭 조절제인 화합물의 가장 바람직한 적응증은 파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 식욕부진증, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 및 2형 당뇨병이다.

본 발명은 화학식 IA 및 IB의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 약학적 활성 물질로서의 상기 화합물, 이의 제조 방법, mGluR4 수용체에 대한 알로스테릭 조절제와 관련된 장애, 예컨대 파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 및 2형 당뇨병의 치료 및 예방에서 이의 용도, 및 화학식 IA 및 IB의 화합물을 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 목적은 파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 식욕부진증, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 및 2형 당뇨병의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이고, 이는 화학식 IA 및 IB의 화합물의 효과량을 수요 포유동물에 투여하는 단계를 포함한다.

추가로, 본 발명은 모든 라세미 혼합물, 거울상 이성질체 및/또는 광학 이성질체, 또는 수소, 불소, 탄소, 산소 또는 질소의 동위원소를 함유하는 유사체를 포함한다.

용어 "약학적으로 허용되는 산 부가 염"은 무기 및 유기 산, 예컨대 염산, 질산, 황산, 인산, 시트르산, 포름산, 푸마르산, 말레산, 아세트산, 숙신산, 타르타르산, 메탄설폰산 또는 p-톨루엔설폰산을 갖는 염을 포괄한다.

본 발명의 화학식 IA 및 IB의 화합물의 제조는 연속적 또는 수렴적 합성 경로로 수행될 수 있다. 본 발명의 화합물의 합성은 하기 반응식 1에 도시되어 있다. 생성물의 반응 및 정제를 수행하는데 요구되는 기술은 당업자에게 공지되어 있다. 하기 제조법의 설명에 사용되는 치환기 및 지표는 본원에서 상기 제시된 의미를 갖는다.

화학식 IA 및 IB의 화합물은 하기 제시된 방법, 실시예에 제시된 방법, 또는 유사 방법에 의해 제조될 수 있다. 개별적인 반응 단계에 적절한 반응 조건은 당업자에게 공지되어 있다. 반응 순서는 반응식에 나타낸 것으로 한정되지 않되, 출발 물질 및 이의 각각의 반응성에 따라 반응 단계의 순서가 자유롭게 변경될 수 있다. 출발 물질은 시판되거나 하기 제시된 방법과 유사한 방법, 설명 또는 실시예에 인용된 참조에 기재된 방법, 또는 당업계에 공지되어 있는 방법에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 화학식 IA 및 IB의 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 당업계에 공지되어 있는 방법, 예를 들어 하기 과정을 포함하는 후술된 제조법의 변형에 의해 제조될 수 있다:

하기 화학식 12의 화합물을 에틸요오다이드에 의해 알킬화시키는 단계; 및

생성된 이성질체를 하기 화학식 IA 및 IB의 화합물로 분리하는 단계; 또는

필요에 따라, 수득된 화합물을 이의 허용되는 염으로 전환시키는 단계.

[화학식 12]

[화학식 IA]

[화학식 IB]

.

화학식 IA 및 IB의 화합물의 제조는 하기 반응식 1 및 실시예 1 및 2에 더 상세히 기재된다.

[반응식 1]

화학식 I의 화합물은, 예를 들어 2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐아민(6)을 CDI를 갖는 화학식 5의 적절히 합성된 아미노에스터와 용매, 예컨대 DMF 중에서 반응시켜 화학식 7의 목적 우레아 유사체를 형성함으로써 수득될 수 있다. 강염기, 예컨대 NaH에 의한 화학식 7의 화합물의 폐환 및 보호된 피라졸(8)의 알킬화를 통한 메틸의 도입은 목적 알킬화된 화합물(9)을 형성한다. 상기 화합물(9)과 페닐아세틸렌(10)의 소노가시라(Sonogashira) 커플링은 SEM 기의 탈보호 후, 목적 에틴일 화합물(12)을 형성한다. 형성된 이성질체의 알킬화 및 분리를 통한 에틸의 도입으로 화학식 I의 목적 최종 화합물이 수득된다(반응식 1).

일반적으로 설명하자면, 화학식 I의 화합물을 합성하는데 사용되는 단계의 순서가 특정 경우에 변형될 수도 있다.

생물학적 분석 및 데이터

HEK293 세포 내에 발현된 재조합 인간 mGluR4에서 Ca ² ⁺ 가동화를 사용한 EC ₅₀ 값의 측정

인간 mGluR4를 인코딩하는 cDNA로 안정하게 형질감염된 단일클론 HEK293 세포계를 생성하고, mGluR4 양성 알로스테릭 조절제(PAM)로 처리하기 위해, 낮은 수용체 발현 수준 및 낮은 구성 수용체 활성을 갖는 세포계를 선택하여 PAM 활성에 대해 작용적으로 분화되게 하였다. 1 mM 글루타민, 10%(부피/부피)의 열-비활성화된 소 태아 혈청, 페니실린/스트렙토마이신, 50 ㎍/mL 하이그로마이신 및 15 ㎍/mL 블라스티시딘으로 보충된 둘베코의 개질된 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium)에서 표준 프로토콜(문헌[Freshney, 2000])에 따라 세포를 배양하였다(모든 세포 배양 시약 및 항생제를 스위스 바젤 소재의 인비트로겐(Invitrogen)으로부터 입수함).

실험 약 24시간 전, 5 x 10⁴개의 세포/웰을 폴리-D-리신 코팅된 흑색/투명-바닥 96-웰 플레이트에 파종하였다. 세포를 로딩 완충액(loading buffer)(1xHBSS, 20 mM HEPES) 중 2.5 μM Fluo-4AM으로 1시간 동안 37℃에서 로딩하고 로딩 완충액으로 5회 세척하였다. 세포를 기능성 약물 스크리닝 시스템 7000(Functional Drug Screening System 7000)(프랑스 파리 소재의 하마마츠(Hamamatsu))로 옮기고, 세포를 10 내지 30분 동안 형광을 온라인(on-line) 기록하며 항온처리하였다. 상기 사전-항온처리 단계 후, 작용제 (2S)-2-아미노-4-포스포노부탄산(L-AP4)을 EC₂₀에 상응하는 농도로 세포에 첨가하면서 형광을 온라인 기록하였고, 세포의 반응성에 있어서 일일 변화를 설명하기 위해, 각각의 실험 바로 직전에 L-AP4의 전체 용량-반응 곡선을 기록함으로써 L-AP4의 EC₂₀을 측정하였다.

반응을 형광 마이너스(minus) 기저(즉 L-AP4)의 첨가가 없는 형광)에서 피크 증가로서 측정하고, L-AP4의 포화 농도에 의해 수득된 최대 자극 효과에 대해 정규화하였다. 레벤버그 마쿼트 알고리즘(Levenburg Marquardt algorithm)을 사용하여 데이터를 반복적으로 도시하는 곡선 근사 프로그램인 XL핏(XLfit)을 사용하여 그래프를 % 최대 자극으로 도시하였다. y = A + ((B-A)/(1+((x/C)D)))를 단일 자리 경쟁 분석 식으로서 사용하였고, 상기 식에서, y는 % 최대 자극 효과이고, A는 최소 y값이고, B는 최대 y값이고, C는 EC₅₀값이고, x는 경쟁하는 화합물의 농도의 log₁₀값이고, D는 상기 곡선의 기울기(힐 계수(Hill Coefficient))이다. 상기 곡선으로부터 EC₅₀값, 힐 계수 및 L-AP4의 포화 농도에 의해 수득된 최대 자극 효과의 % 최대 반응을 계산하였다(도 1 참고).

PAM 시험 화합물에 의한 사전-항온처리 동안(즉 EC₂₀ 농도의 L-AP4의 적용 전) 수득된 양의 신호는 작용적 활성의 지표이고, 이러한 신호의 부재는 작용제 활성의 결여를 나타낸다. EC₂₀ 농도의 L-AP4의 첨가 후 신호의 감소는 시험 화합물의 억제 활성의 지표이다.

도 1은 mGlu4 PAM Ca2+ 가동화 스크리닝 분석을 위한 실험 개요의 설명, 및 EC₅₀ 및 % E_max값의 측정을 나타낸다.

실시예 및 데이터 목록

화학식 IA 및 IB의 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염은, 예를 들어 약학 제제의 형태로 약제로서 사용될 수 있다. 상기 약학 제제는, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 유화액 또는 현탁액의 형태로 경구 투여될 수 있다. 그러나, 투여가, 예를 들어 좌제의 형태로 직장으로, 또는, 예를 들어 주사 용액의 형태로 비경구로도 효과적일 수도 있다.

화학식 IA 및 IB의 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 약학 제제의 제조를 위해 약학적 불활성의 무기 또는 유기 담체로 가공될 수 있다. 락토스, 옥수수 전분 또는 이의 유도체, 활석, 스테아르산 또는 이의 염 등이, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐을 위한 담체로서 사용될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐에 적합한 담체는, 예를 들어 식물성 오일, 왁스, 지방 또는 반고체 및 액체 폴리올 등이지만, 활성 물질의 성질에 따라 연질 젤라틴 캡슐의 경우에는 담체가 요구되지 않는다. 용액 및 시럽의 제조에 적합한 담체는, 예를 들어 물, 폴리올, 수크로스, 전화당 또는 글루코스 등이다. 보조제, 예컨대 알콜, 폴리올, 글리세롤 또는 식물성 오일 등이 화학식 IA 및 IB의 수용성 염의 주사 수용액에 사용될 수 있지만, 필수적 원칙은 아니다. 좌제에 적합한 담체는, 예를 들어 천연 또는 경화된 오일, 왁스, 지방, 또는 반액체 또는 액체 폴리올 등이다.

또한, 약학 제제는 보존제, 가용화제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미료, 착색제, 향미료, 삼투압 조절용 염, 완충액, 차폐제 또는 항산화제를 함유할 수 있다. 또한, 이는 치료적으로 가치있는 다른 물질을 함유할 여지가 있다.

전술된 바와 같이, 화학식 IA 및 IB의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 치료적 불활성 부형제를 함유하는 약제는 본 발명의 목적이고, 하나 이상의 화학식 IA 및 IB의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 필요에 따른 치료적으로 가치있는 하나 이상의 다른 물질을 하나 이상의 치료 불활성 담체와 함께 갈레누스 투약(galenical dosage) 형태로 함유시키는 상기 약제의 제조 방법도 본 발명의 목적이다.

추가로 전술된 바와 같이, 상기 인용된 질환의 예방 및/또는 치료에 유용한 약제의 제조를 위한 화학식 IA 및 IB의 화합물도 본 발명의 목적이다.

투약량은 넓은 한계치 내에서 달라질 수 있고, 당연히 각각의 특정한 경우에서 개별적인 요구조건에 적합화될 것이다. 일반적으로, 경구 또는 비경구 투여를 위한 효과적인 투약량은 0.01 내지 20 mg/kg/일이되, 0.1 내지 10 mg/kg/일이 기재된 모든 적응증에 대해 바람직하다. 따라서, 70　kg 중량의 인간 성인에 대한 일일 투약량은 0.7 내지 1400 mg/일, 바람직하게는 7 내지 700 mg/일이다.

본 발명의 화합물을 포함하는 약학 조성물의 제조

하기 조성의 정제를 통상적인 방식으로 제조하였다.

제조 절차

1. 성분 1, 2, 3 및 4를 혼합하고 정제수로 과립화시킨다.

2. 과립을 50℃에서 건조시킨다.

3. 상기 과립을 적합한 제분 장치에 통과시킨다.

4. 성분 5를 첨가하고 3분 동안 혼합하고 적합한 가압으로 압착한다.

하기 조성의 캡슐을 제조하였다.

제조 절차

1. 성분 1, 2 및 3을 적합한 혼합기에서 30분 동안 혼합한다.

2. 성분 4 및 5를 첨가하고 3분 동안 혼합한다.

3. 적합한 캡슐에 충전한다.

먼저, 화학식 IA 및 IB의 화합물, 락토스 및 옥수수 전분을 혼합기에 이어 분쇄 장치에서 혼합한다. 혼합물을 상기 혼합기로 다시 옮기고, 이에 활석을 첨가하고 완전히 혼합한다. 상기 혼합물을 장치에 의해 적합한 캡슐, 예를 들어 경질 젤라틴 캡슐에 충전한다.

하기 조성의 주사 용액을 제조하였다.

제조 절차

화학식 IA 및 IB의 화합물을 폴리에틸렌 글리콜 400과 수사용 물(부분)의 혼합물에 용해시켰다. pH를 아세트산으로 5.0까지 조정하였다. 잔류량의 물을 첨가하여 부피를 1.0 mL로 조정하였다. 용액을 여과하고 적절한 초과량(overage)을 사용하여 바이알에 채우고 멸균하였다.

실험 섹션

실시예 1

(4S)-3'-[2,6- 다이플루오로 -4-(2- 페닐에틴일 )페닐]-2-에틸-1'- 메틸 - 스피로 [6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

단계 1: 2 -((2-( 트라이메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-6,7- 다이하이드로 -2H- 인다졸 -4(5H)-온

6,7-다이하이드로-2H-인다졸-4(5H)-온(CAS 912259-10-0)(1.46 g, 10.7 mmol)을 THF(15 mL) 중에 용해시키고 0 내지 5℃까지 냉각하였다. 나트륨 수소화물(광물 오일 중 60% 분산액)(450 mg, 11.3 mmol, 1.05 당량)을 주의하여 분할로 첨가하고, 혼합물을 60분 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0 내지 5℃까지 다시 냉각하고, (2-(클로로메톡시)에틸)트라이메틸실란(2.28 mL, 2.15 g, 12.9 mmol, 1.2 당량)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 NaHCO₃ 포화 용액 및 2회 에틸 아세테이트로 주의하여 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 목적 2-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-6,7-다이하이드로-2H-인다졸-4(5H)-온(100%에 가까운 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: m/e = 267.2(M+H⁺).

단계 2: (NE)-2- 메틸 -N-[1-(2- 트라이메틸실릴에톡시메틸 )-6,7- 다이하이드로 -5H-인다졸-4-일리덴]프로판-2-설핀아미드

2-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-6,7-다이하이드로-2H-인다졸-4(5H)-온(실시예 1, 단계 1)(40g, 150.14 mmol)을 THF(400 mL) 중에 용해시켰다. (R)-2-메틸프로판-2-설핀아미드(CAS 196929-78-9)(27.3 g, 225.2 mmol, 1.5 당량) 및 티타늄(IV) 에톡사이드(102.75 g, 93.4 mL, 450.42 mmol, 3.0 당량)를 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, NaHCO₃ 포화 용액 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 형성된 현탁액을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 목적 (NE)-2-메틸-N-[1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일리덴]프로판-2-설핀아미드(20.0 g, 36% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS: m/e = 370.2(M+H⁺).

단계 3: 메틸 2-[(4S)-4-[[(R)-3차- 부틸설핀일 ]아미노]-1-(2- 트라이메틸실릴에톡시메틸 )-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트

메틸 아세테이트(22.25 g, 23.9 mL, 300.3 mmol, 3 당량)를 건조 THF(370 mL)에 용해시키고, 용액을 -70℃까지 냉각하였다. LDA(THF/헵탄/에틸벤젠 중 2.0 M)(150 mL, 300.3 mmol, 3 당량)를 -75 내지 -65℃에서 적가하고, 혼합물을 45분 동안 -70℃에서 교반하였다. 클로로티타늄 트라이이소프로폭사이드(다이클로로메탄 중 1.0 M)(400 mL, 400 mmol, 4 당량)을 -75 내지 -65℃에서 적가하고, 혼합물을 45분 동안 -70℃에서 교반하였다. 건조 THF(370 mL) 중에 용해된 (NE)-2-메틸-N-[1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일리덴]프로판-2-설핀아미드(실시예 1, 단계 2) (37 g, 100 mmol)를 -75 내지 -65℃에서 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 -70℃에서 교반하였다. NaHCO₃ 포화 용액을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 형성된 현탁액에 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 형성된 현탁액을 셀라이트를 통해 여과하고 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 메틸 2-[(4S)-4-[[(R)-3차-부틸설핀일]아미노]-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(22 g, 40% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS: m/e = 444.2(M+H⁺).

단계 4: 메틸 2-[(4S)-4-아미노-1-(2- 트라이메틸실릴에톡시메틸 )-6,7- 다이하이드로 -5H-인다졸-4-일]아세테이트

메틸 2-[(4S)-4-[[(R)-3차-부틸설핀일]아미노]-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(실시예 1, 단계 3)(20 g, 45.08 mmol)를 에틸 아세테이트(500 mL)에 용해시키고, HCl(에틸 아세테이트 중 4N)(56.3 mL, 225.4 mmol, 5 당량)을 0 내지 5℃에서 적가하였다. 혼합물을 30분 동안 0 내지 5℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0 내지 5℃에서 증발시키고 NaHCO₃ 포화 용액 및 3회 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합치고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 목적 메틸 2-[(4S)-4-아미노-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(340 mg, 54% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. MS: m/e = 340.1(M+H⁺).

단계 5: 메틸 2-[(4S)-4-[(2,6- 다이플루오로 -4- 요오도 -페닐) 카바모일아미노 ]-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트

2,6-다이플루오로-4-요오도아닐린(14.4 g, 56.56 mmol, 1.2 당량)을 DMF(250 mL) 중에 용해시키고, CDI(9.17 g, 56.56 mmol, 1.2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물에 DMF(20 mL) 중에 용해된 메틸 2-[(4S)-4-아미노-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(실시예 1, 단계 4)(16 g, 47.13 mmol, 1.0 당량)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 미정제 혼합물을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 메틸 2-[(4S)-4-[(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)카바모일아미노]-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(9.1 g, 19% 수율)를 갈색 고무질로서 수득하였다. MS: m/e = 621.1(M+H⁺).

단계 6: (4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

메틸 2-[(4S)-4-[(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)카바모일아미노]-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)-6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4-일]아세테이트(실시예 1, 단계 5)(18 g, 29.01 mmol)를 THF(360 mL) 중에 용해시키고, 나트륨 수소화물(광물 오일 중 60%)(1.74 g, 43.52 mmol, 1.5 당량)을 0 내지 5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 NH₄Cl 포화 용액 및 3회 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 염소로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 목적 (4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(240 mg, 86% 수율)을 황색 고무질로서 수득하였다. MS: m/e = 589.0(M+H⁺).

단계 7: (4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1'-메틸-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

(4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(실시예 1, 단계 6)(17 g, 28.9 mmol)을 DMF(200 mL) 중에 용해시키고, 세슘 카보네이트(14.12 g, 43.34 mmol, 1.5 당량) 및 요오도메탄(4.92 g, 2.16 mL, 34.67 mmol, 1.2 당량)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고 나트륨 설페이트로 건조시키고 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 석유:에틸 아세테이트 10:1 내지 1:1 구배로 용리하는 실리카 겔 컬럼 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 (4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1'-메틸-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(15.7 g, 90% 수율)을 황색 고무질로서 수득하였다. MS: m/e = 603.2(M+H⁺).

단계 8: (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-1'-메틸-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

(4S)-3'-(2,6-다이플루오로-4-요오도-페닐)-1'-메틸-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(실시예 1, 단계 7)(12 g, 19.9 mmol) 및 페닐아세틸렌(3.05 g, 3.32 mL, 29.9 mmol, 1.5 당량)을 THF(120 mL) 중에 용해시켰다. 트라이에틸아민(10.1 g, 13.9 mL, 99.6 mmol, 5 당량), 비스-(트라이페닐포스핀)-팔라듐(II)다이클로라이드(420 mg, 0.6 mmol, 0.03 당량), 트라이페닐포스핀(313 mg, 1.2 mmol, 0.06 당량) 및 구리(I)요오다이드(114 mg, 0.6 mmol, 0.03 당량)을 첨가하고 혼합물을 3시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 이소루트(isolute: 등록상표)로 증발시켰다. 미정제 생성물을 에틸 아세테이트:헵탄 30:70 내지 100:0 구배로 용리하는 실리카 겔 컬럼 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-1'-메틸-1-(2-트라이메틸실릴에톡시메틸)스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(11.2 g, 98% 수율)을 갈색 포말로서 수득하였다. MS: m/e = 577.3(M+H⁺).

단계 9: (4S)-3'-[2,6- 다이플루오로 -4-(2- 페닐에틴일 )페닐]-1'- 메틸 - 스피로 [1,5,6,7-테트라하이드로인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

실시예 1의 단계 4에 기재된 것과 유사한 화학반응을 사용하여, (S)-1'-(2,6-다이플루오로-4-(페닐에틴일)페닐)-3'-메틸-2-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-2,5,6,7-테트라하이드로-1'H-스피로[인다졸-4,4'-피리미딘]-2',6'(3'H,5'H)-다이온(실시예 1, 단계 8)으로부터 출발하여, 반응물을 2시간 동안 80℃에서 교반함으로써 표제 화합물을 백색 포말로서 수득하였다. MS: m/e = 447.2(M+H⁺).

단계 10: (4S)-3'-[2,6- 다이플루오로 -4-(2- 페닐에틴일 )페닐]-2-에틸-1'- 메틸 -스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

실시예 1의 단계 7에 기재된 것과 유사한 화학반응을 사용하여, (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-1'-메틸-스피로[1,5,6,7-테트라하이드로인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(실시예 1, 단계 9) 및 요오도에탄으로부터 출발하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. MS: m/e = 475.4(M+H⁺). 피크 A를 수집하는 용리액으로서 헵탄:에탄올 60:40 혼합물을 사용한 레프로실 키랄 NR(Reprosil Chiral NR: 등록상표) 컬럼을 사용하여 2개의 형성된 이성질체의 분리에 의해 목적 (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-2-에틸-1'-메틸-스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온을 수득하였다.

실시예 2

(4S)-3'-[2,6- 다이플루오로 -4-(2- 페닐에틴일 )페닐]-1-에틸-1'- 메틸 - 스피로 [6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온

실시예 1의 단계 7에 기재된 것과 유사한 화학반응을 사용하여, (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-1'-메틸-스피로[1,5,6,7-테트라하이드로인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온(실시예 1, 단계 9) 및 요오도에탄으로부터 출발하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. MS: m/e = 475.4(M+H⁺). 피크 B를 수집하는 용리액으로서 헵탄:에탄올 60:40 혼합물을 사용한 레프로실 키랄 NR(등록상표) 컬럼을 사용하여 2개의 형성된 이성질체의 분리에 의해 목적 (4S)-3'-[2,6-다이플루오로-4-(2-페닐에틴일)페닐]-1-에틸-1'-메틸-스피로[6,7-다이하이드로-5H-인다졸-4,6'-헥사하이드로피리미딘]-2',4'-다이온을 수득하였다.

Claims

하기 화학식 IA 또는 IB의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 산 부가 염, 라세미 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상 이성질체 및/또는 광학 이성질체 및/또는 입체 이성질체:
[화학식 IA]

[화학식 IB]

.
하기 화학식 12의 화합물을 에틸요오다이드에 의해 알킬화시키는 단계; 및
생성된 이성질체를 하기 화학식 IA 및 IB의 화합물로 분리하는 단계; 또는
필요에 따라, 수득된 화합물을 이의 약학적으로 허용되는 염으로 전환시키는 단계
를 포함하는, 제1항에 정의된 화학식 IA 또는 IB의 화합물의 제조 방법:
[화학식 12]

[화학식 IA]

[화학식 IB]

.
제1항에 있어서,
치료적 활성 물질로서 사용되는 화학식 IA 또는 IB의 화합물.
제1항에 있어서,
파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 또는 2형 당뇨병의 치료에 사용되는 화학식 IA 또는 IB의 화합물.
제1항에 청구된 화학식 IA 또는 IB의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물.
파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 또는 2형 당뇨병의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 제1항에 따른 화학식 IA 또는 IB의 화합물의 용도.
제1항에 청구된 화학식 IA 또는 IB의 화합물의 효과량을 투여하는 단계를 포함하는 파킨슨병, 불안증, 구토증, 강박 장애, 자폐증, 신경보호, 암, 우울증 또는 2형 당뇨병의 치료 방법.
전술된 본 발명.