KR20190002591A - Jak 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물 - Google Patents

Jak 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물 Download PDF

Info

Publication number
KR20190002591A
KR20190002591A KR1020187034319A KR20187034319A KR20190002591A KR 20190002591 A KR20190002591 A KR 20190002591A KR 1020187034319 A KR1020187034319 A KR 1020187034319A KR 20187034319 A KR20187034319 A KR 20187034319A KR 20190002591 A KR20190002591 A KR 20190002591A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino
azabicyclo
pyrazol
methyl
compound
Prior art date
Application number
KR1020187034319A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102244257B1 (ko
Inventor
라이언 허드슨
제니퍼 코작
멜리사 플레리
폴 알. 파더리
앤-마리 보솔레이
단테 디. 포데스토
샤오준 후앙
Original Assignee
세라밴스 바이오파마 알앤디 아이피, 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 세라밴스 바이오파마 알앤디 아이피, 엘엘씨 filed Critical 세라밴스 바이오파마 알앤디 아이피, 엘엘씨
Publication of KR20190002591A publication Critical patent/KR20190002591A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102244257B1 publication Critical patent/KR102244257B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D451/00—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/02—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/04—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof with hetero atoms directly attached in position 3 of the 8-azabicyclo [3.2.1] octane or in position 7 of the 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D451/00—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/14—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing 9-azabicyclo [3.3.1] nonane ring systems, e.g. granatane, 2-aza-adamantane; Cyclic acetals thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염을 제공하고:
Figure pct00055

상기 변수는 명세서에 정의된 바와 같고, 이는 JAK 키나제의 저해제이다. 본 발명은 또한 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 위장관 및 다른 염증 질환을 치료하기 위해 상기 화합물을 사용하는 방법, 및 상기 화합물들을 제조하는데 유용한 방법 및 중간체를 제공한다.

Description

JAK 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물
본 발명은 JAK 키나제 저해제로서 유용한 피리미딘 (pyrimidine) 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 염증 질환을 치료하기 위해 상기 화합물을 사용하는 방법, 및 상기 화합물을 제조하는데 유용한 방법 및 중간체에 관한 것이다.
궤양성 대장염 (ulcerative colitis)은 결장 (colon)의 만성 염증 질환이다. 상기 질환은 직장 및 대장의 점막층의 염증 및 궤양형성을 특징으로 한다. 일반적인 증상으로는 설사, 혈변 및 복부 통증을 포함한다. 상기 임상 경과는 간헐적으로, 악화 기간과 완화 기간이 교대로 나타난다. 발생률 (incidence)은 개발도상국보다는 선진국에서 더 큰 것으로 보인다. 주요 선진국에서 대략 120만명이 궤양성 대장염을 앓고 있고, 그 수는 인구 증가와 함께 증가할 것으로 예상된다. 궤양성 대장염 환자는 대장암 (colorectal cancer)으로 발전될 위험이 높다 (예컨대 Danese et al. N Engl J Med , 2011, 365, 1713-1725).
환자에서 궤양성 대장염 (UC)의 완화를 촉진 및 유지하기 위한 다양한 치료 옵션이 존재함에도 불구하고, 이상적인 것은 없었다. 술파살라진 (sulfasalazine)-관련 치료는 종종 경증 UC에서 효과적이지만, 중등도 내지 중증 질환에서는 훨씬 떨어진다. 코르티코스테로이드 (corticosteroids)는 종종 중등도 내지 중증 UC 환자에게 사용되어 빠르게 완화를 유도하였다. 그러나, 완화를 유지하기 위해 만성적 스테로이드의 사용은 장기간의 유해 효과 (예컨대, 골다공증 및 골절, 감염, 백내장, 더 느린 상처 치유 및 부신 호르몬 생성의 억제)와의 관련성으로 인해 권장되지 않는다. 전신 면역억제제인, 예컨대 아자티오프린 (azathioprine), 시클로스포린 (cyclosporine) 및 메토트렉세이트 (methotrexate)는 중등도 내지 중증 UC 환자에서 발병을 늦추고 보통의 효능을 갖지만, 장기간의 사용은 장기간의 전신 면역억제로 인해 문제가 될 수 있다 (예컨대, 감염 및 림프종의 위험 증가). 항-TNFα 항체 (예컨대, 인플릭시맙 및 아달리무맙)는 고가이고 피하 또는 정맥내 투여를 필요로 하지만, 중등도 내지 중증 질환의 UC 환자의 대략 60 내지 70　%에서 효과적이었다. 그러나, 최대 1/3의 환자는 적절하게 반응하는데 실패했고, 다른 2/3의 초기 반응자들은 몇 주에 걸쳐 내성이 발생되었다 (Allez et al., J　 Crohn's Colitis, 2010, 4, 355-366; Rutgeerts et al., N Engl J Med, 2005, 353, 2462-2476). 최근 승인된 UC 요법인 베돌리주맙 (vedolizumab)인, 항-인테그린 α4β7 항체 (anti-integrin α4β7 antibody)는, 이의 비경구 경로가 차선책임에도 불구하고, 중등도 내지 중증 UC 환자에서 효과적이고, 상기 기전을 통한 장기간 면역억제의 결과는 아직 결정되지 않고 있다. 기존의 치료 옵션에도 불구하고, 약 10 내지 20%의 UC 환자는 여전히 진단후 10년내에 결장절제술 (colectomy)을 필요로 한다 (Targownik et al., Am J Gastroenterol, 2012, 107, 1228-1235). 만성적이고 전신의 면역억제로부터 기인하는 안전성 문제 없이 중등도 내지 중증 UC의 완화를 촉진 및 유지하기 위한 효과적인 치료법에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 남아있다는 것이 분명하다.
궤양성 대장염의 기전은 완전히 이해되지는 않았지만, 유전적으로 감수성이 있는 개체에서 환경 요인이 면역계에 의해 장 미생물총 (gut microbiota)에 대한 부적절한 (과도한) 반응을 일으켜서, 결장 염증, 조직 손상, 및 상기 질환의 관련된 증상 특성을 야기하는 것으로 사료된다.
UC의 정확한 발병기전은 분명하지 않지만, 전염증성 시토킨이 면역 반응에서 중추적 역할을 하는 것이 명백하다 (Strober et al., Gastroenterol, 2011, 140, 1756-1767). UC에서 가장 흔하게 증가되는 다수의 전염증성 시토킨 (예컨대, IL-4, IL-6, IL-13, IL-15, IL-23, IL-24, IFNγ 및 렙틴)은 시그날 전달 (signal transduction)을 위해 티로신 키나제의 JAK 패밀리 (즉, JAK1, JAK2, JAK3 및 Tyk2)에 의존한다. 시토킨의 JAK-의존성 시토킨 수용체로의 결합은 수용체 이량체화를 유도하여 JAK 키나제에서 티로신 잔기의 포스포릴화 (phosphorylation)를 유도하여, JAK 활성화에 영향을 준다. 포스포릴화된 JAKs는, 이량체화되고, 세포 핵에 내재화되고 및 유전자 전사를 직접 조절하는 다양한 STAT 단백질에 차례로 결합 및 포스포릴화하여, 다른 효과들 중에서, 염증 질환과 관련된 하류 효과 (downstream effects)를 유도한다. 상기 JAKs는 대개 시토킨 수용체와 호모다이머 또는 헤테로다이머와 같이 쌍으로 결합한다. 특정 시토킨은 특정 JAK 페어링 (pairings)과 관련이 있다.
아토피 피부염 (atopic dermatitis: AD)은 미국에서만 대략 1400만명의 사람에게 영향을 주는 일반적인 만성 염증 피부 질환이다. AD는 선진국에서 어린이의 10 내지 20 % 및 성인의 1 내지 3 %에게 영향을 주는 것으로 추정되고 (Bao et al., JAK -STAT, 2013, 2, e24137) 또한 유병률 (prevalence)이 증가하고 있다. JAK-STAT 경로에 의존하는 전염증성 시토킨, 구체적으로 IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IFNγ, 및 TSLP의 증가는 AD와 관련이 있다 (Bao et al., Leung et al., The Journal of Clinical Investigation, 2004, 113, 651-657). 또한, JAK 페어링을 통해 시그날을 전달하는 다른 시토킨인 IL-31의 상향조절 (upregulation)은 AD의 만성 상태와 관련된 소양증 (pruritis)에서 역할을 하는 것으로 나타났다 (Sunkoly et al., Journal of Allergy and Clinical Immunology, 2006, 117, 411-417).
JAK 효소 패밀리의 저해는 많은 중요한 전염증성 시토킨의 시그날 전달을 저해할 수 있다. 그러므로, JAK 저해제는 궤양성 대장염 및 다른 위장관 염증 질환 예컨대 크론병 (Crohn's disease) 및 면역 체크포인트 저해제 유도된 대장염 (immune checkpoint inhibitor induced colitis), 아토피 피부염, 및 다른 염증 피부 질환, 알레르기성 비염, 천식 및 만성 폐쇄성 폐 질환 (chronic obstructive pulmonary disease: COPD)의 치료에 유용할 것이다. 그러나, 면역계에서 JAK/STAT 경로의 조절 효과에 의해서, JAK 저해제에 대한 전신 노출은 유해한 전신 면역억제 효과를 가질 수 있다. 그러므로, 유의한 전신 효과 없이 작용 부위에서 그의 효과를 갖는 신규한 JAK 저해제를 제공하는 것이 바람직할 것이다. 특히, 위장관 염증 질환, 예컨대 궤양성 대장염의 치료에 있어서, 경구로 투여될 수 있고, 최소 전신 노출로 위장관에서 치료적으로 관련된 노출을 달성할 수 있는 신규한 JAK 저해제를 제공하는 것이 바람직할 것이다. 또한, 최소 전신 노출로 국소로 투여될 수 있는 아토피 피부염의 치료를 위한 신규한 JAK 저해제를 제공하는 것이 바람직할 것이다.
일 양상에서, 본 발명은 JAK 키나제 저해제로서 활성을 갖는 신규한 화합물을 제공한다.
따라서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염 또는 입체이성질체를 제공한다:
Figure pct00001
상기에서
R1은:
(a) -S(O)2R4로서, 상기 R4는:
C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN, -OC1- 3알킬, 또는 C3-6시클로알킬로 치환되는 것인 C1-4알킬,
하나의 질소 원자를 포함하는 4 내지 6개의 고리 원자를 포함하는 헤테로시클일로서, 상기 임의의 헤테로시클일은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 헤테로시클일,
C3- 6시클로알킬,
피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐, 및
페닐로부터 선택되는 것인 -S(O)2R4;
(b) C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN,
Figure pct00002
, 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 C1- 4알킬; 및
(c) -C(O)R5로서, 상기 R5는:
C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 C3- 6시클로알킬로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1- 4알킬,
-OC1- 4알킬,
C3- 6시클로알킬, 및
모르폴리닐로부터 선택되는 것인 -C(O)R5로부터 선택되고;
R2는 수소 또는 메틸이고;
R3은 C1- 3알킬이고; 및
n은 1 또는 2이다.
이후에 사용되는 바와 같이, 문구 "화학식 (I)의 화합물"은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 의미하고; 즉, 상기 문구는 달리 지시하지 않는 한, 유리 염기 (free base) 형태 또는 약학적으로 허용가능한 염 형태의 화학식 (I)의 화합물을 의미한다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 및 약학적으로-허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
다른 양상에서, 본 발명은 결정 유리 염기 형태의 화학식 (I)의 특정 화합물을 제공한다. 결정 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴은 약 235℃ 내지 약 245℃, 통상적으로 약 237℃ 내지 약 242℃ 범위의 용융 온도 (melting temperature)를 가지며, 실온에서 약 5% 내지 약 90%의 상대 습도의 범위에 노출될 때 약 0.4% 미만의 중량 변화 (weight changes)를 나타내는 것으로 밝혀졌다.
본 발명은 또한 포유동물에서 위장관 염증 질환, 구체적으로 궤양성 대장염을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물을 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 방법 양상에서, 본 발명은 포유동물에서 피부 염증 질환 또는 장애, 구체적으로 아토피 피부염을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물을 상기 포유동물의 피부에 적용하는 단계를 포함한다.
개별 및 구별되는 양상에서, 본 발명은 또한 본원에 개시된 합성 방법 및 중간체를 제공하고, 이는 본 발명의 화합물을 제조하는데 유용하다.
본 발명은 또한 의학적 치료에 사용하기 위한 본원에 개시된 바와 같은 본 발명의 화합물 뿐만 아니라 포유동물에서 위장관 염증 질환을 치료하기 위한 제형 (formulation) 또는 약제 (medicament)의 제조에서 본 발명의 화합물의 용도를 제공한다. 추가로 본 발명은 피부 염증 질환을 치료하기 위한 제형 또는 약제의 제조에서 본 발명의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명의 다양한 양상은 첨부된 도면을 참조로 서술된다.
도 1은 결정 형태　I인 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 [이후에, 형태 I]의 분말 x-선 회절 (powder x-ray diffraction: PXRD) 패턴을 개시하였다.
도 2는 결정 형태 I의 시차 주사 열량계 (differential scanning calorimetry: DSC) 서모그램 (thermogram)을 개시하였다.
도 3은 결정 형태 I의 열 중량 분석 (thermal gravimetric analysis: TGA) 플롯을 개시하였다.
도 4는 약 25 ℃의 온도에서 관찰된 결정 형태 I의 동적 수분 흡착 (dynamic moisture sorption: DMS) 등온선 (isotherm)을 개시하였다.
도 5는 결정 형태　II인 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 [이후에, 형태 II]의 분말 X-선 회절 (PXRD) 패턴을 개시하였다.
도 6은 결정 형태 II의 시차 주사 열량계 (DSC) 서모그램을 개시하였다.
도 7은 결정 형태 II의 열 중량 분석 (TGA) 플롯을 개시하였다.
도 8은 약 25 ℃의 온도에서 관찰된 결정 형태　II의 동적 수분 흡착 (DMS) 등온선을 개시하였다.
다른 양상들 중에서, 본 발명은 화학식 (I)의 JAK 키나제 저해제, 그의 약학적으로-허용가능한 염, 및 그의 제조를 위한 중간체를 제공한다. 하기 치환체 및 값은 본 발명의 다양한 양상들의 대표적인 예를 제공하기 위한 것이다. 이러한 대표적인 값은 상기 양상을 더 정의하기 위한 것으로, 다른 값들을 배제하거나 또는 본 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다.
본 발명의 일 양상에서, R1은 (a) -S(O)2R4로서, 상기 R4는 C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN, -OC1- 3알킬, 또는 C3- 6시클로알킬로 치환되는 것인 C1- 4알킬; 하나의 질소 원자를 포함하는 4 내지 6개의 고리 원자를 포함하는 헤테로시클일로서, 상기 임의의 헤테로시클일은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 헤테로시클일; C3- 6시클로알킬; 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐; 및 페닐로부터 선택되는 것인 -S(O)2R4; (b) C1- 4알킬로서, 상기 C1-4알킬은 선택적으로 -CN,
Figure pct00003
, 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 C1- 4알킬; 및 (c) C(O)R5로서, 상기 R5는 C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 C3- 6시클로알킬로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1- 4알킬; -OC1- 4알킬; C3- 6시클로알킬; 및 모르폴리닐로부터 선택되는 것인 -C(O)R5로부터 선택된다.
다른 양상에서 R1은 -S(O)2R4이고, 상기 R4는 C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN, -OC1- 3알킬, 또는 C3- 6시클로알킬로 치환되는 것인 C1- 4알킬; 하나의 질소 원자를 포함하는 4 내지 6개의 고리 원자를 포함하는 헤테로시클일로서, 상기 임의의 헤테로시클일은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 헤테로시클일; C3- 6시클로알킬; 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐; 및 페닐로부터 선택된다.
또 다른 양상에서, R1은 -S(O)2R4이고, 상기 R4는 C1- 2알킬이고, 상기 C1- 2알킬은 선택적으로 -CN, -OCH3, 또는 시클로프로필로 치환되는 C1- 2알킬; 아제티디닐로서, 상기 아제티디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 아제티디닐; 피롤리디닐; 시클로프로필; 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐; 및 페닐로부터 선택된다.
또 다른 양상에서, R1은 -S(O)2R4이고, 상기 R4는 메틸, 에틸, 아제티디닐, 피롤리디닐, 시클로프로필, 피리디닐, 또는 페닐이고, 상기 에틸은 선택적으로 메톡시로 치환되고, 상기 아제티디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되고, 및 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환된다.
일 양상에서, R1은 C1- 4알킬이고, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN,
Figure pct00004
, 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환된다.
다른 양상에서, R1은 C1- 2알킬이고, 상기 C1- 2알킬은 선택적으로 -CN,
Figure pct00005
, 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환된다.
일 양상에서, R1은 -C(O)R5이고, 상기 R5는 C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 C3- 6시클로알킬로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1- 4알킬; -OC1- 4알킬; C3- 6시클로알킬; 및 모르폴리닐로부터 선택된다.
다른 양상에서, R1은 -C(O)R5이고, 상기 R5는 C1- 2알킬로서, 상기 C1- 2알킬은 선택적으로 시클로프로필로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1- 2알킬; -OC1- 4알킬; C3- 6시클로알킬; 및 모르폴리닐로부터 선택된다.
또 다른 양상에서, R1은 -C(O)R5이고, 상기 R5는 -CHF2, -CH2-시클로프로필,
-OCH3, -O-이소부틸, 시클로부틸, 시클로펜틸, 또는 모르폴리닐이다.
일 양상에서 R2는 수소 또는 메틸이다. 구체적 양상에서 R2는 메틸이다.
일 양상에서, R3은 C1- 3알킬이다.
다른 양상에서, R3은 메틸이다.
일 양상에서, n은 1 또는 2이다. 다른 양상에서, n은 2이다.
특정 양상에서, 본 발명은 하기 화학식 (II)의 화합물을 제공한다:
Figure pct00006
상기에서 변수 (variable) R4는 본원에 정의된 바와 같다.
일 양상에서, 본 발명은 하기 실시예 1-9 및 표　1-3의 화합물들을 제공한다.
또다른 양상에서, 본 발명은 하기로부터 선택된 화합물을 제공한다:
1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
(3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(메틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-((2-메톡시에틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
3-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)프로판니트릴,
5-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
5-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)니코티노니트릴,
이소부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
2,2-디플루오로-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(아제티딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((5-플루오로피리딘-3-일)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(페닐술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(에틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((시클로프로필메틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
3-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)-술포닐)프로판니트릴,
(3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피롤리딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(시클로프로필술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(페닐술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(아제티딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((시클로프로필메틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((5-플루오로피리딘-3-일)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
4-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
(3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일메틸)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
3-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)프로판니트릴,
1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)시클로프로판-1-카르보니트릴,
(3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피리딘-4-일메틸)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
4-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
2,2-디플루오로-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
이소부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
메틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시-피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)(모르폴리노)메타논,
2-시클로프로필-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
시클로펜틸((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메타논, 및
시클로부틸((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메타논,
및 그의 약학적으로 허용가능한 염.
화학 구조는 ChemDraw 소프트웨어 (PerkinElmer, Inc., Cambridge, MA)에서 구현되는 바와 같이 IUPAC 조약에 따라 본원에서 명명되었다. 예를 들어, 실시예 2의 화합물인:
Figure pct00007
는 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴로 명명되었다. 상기 (1R,3s,5S) 표기는 9-아자비시클로[3.3.1]노난 기에 대해 피리미디닐아미노 기의 엑소 배향 (exo orientation)을 개시하고 또한 8-아자비시클로[3.2.1]기 (즉 변수 n = 1)를 포함하는 화합물에 대해서도 유사하다. 본 발명의 모든 화합물들은 엑소 배향으로 있다.
또한, 상기 화학식 (I)의 화합물의 피라졸일 모이어티 (moiety)는 토토머 (tautomeric) 형태로 존재한다. 예를 들어, 실시예 2의 화합물은 하기와 같이 동등하게 표시될 수 있다:
Figure pct00008
IUPAC 조약에 따르면, 이러한 표현은 상기 피라졸일 부분의 원자의 다른 넘버링을 나타낸다. 상기 표현은 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-(( 3 -(히드록시메틸)-1H-피라졸- 5 -일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴로 명명되었고, 상기에서 밑줄은 상기 명칭이 첫 번째 표현의 명칭과 다른 경우를 확인하였다. 구조들이 특정 형태로 개시되거나 또는 명명되었음에도 불구하고, 본 발명은 또한 그의 토토머를 포함하는 것으로 이해될 것이다.
본 발명의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심 (chiral centers)을 포함하고, 그러므로 이러한 화합물 (및 그의 중간체)은 라세미 (racemic) 혼합물; 순수 입체이성질체 (즉, 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체); 입체이성질체-풍부한 혼합물 등으로 존재할 수 있다. 키랄 중심에서 정의된 입체화학 없이 본원에서 개시되거나 또는 명명된 키랄 화합물들은, 달리 지시되지 않는 한, 상기 정의되지 않은 입체중심에서 임의의 또는 모든 가능한 입체이성질체 변형 (variation)을 포함하는 것으로 의도된다. 특정한 입체이성질체의 묘사 (depiction) 또는 명명은 표시된 입체중심이 상기 지정된 입체화학을 갖는 것을 의미하며, 달리 명시되지 않은 경우, 상기 묘사되거나 명명된 화합물의 유용성이 또다른 입체이성질체의 존재에 의해 제거되지 않는 것을 전제로, 소량의 다른 입체이성질체가 또한 존재할 수 있는 것으로 이해된다.
화학식 (I)의 화합물은 또한 여러 염기성 기 (예를 들면, 아미노 기)를 포함하며, 따라서, 이러한 화합물들은 유리 염기 또는 다양한 염 형태로, 예컨대 일-양성자화 (mono-protonated) 염 형태, 이-양성자화 (di-protonated) 염 형태, 삼-양성자화 (tri-protonated) 염 형태, 또는 그의 혼합물로 존재할 수 있다. 이러한 모든 형태들은 달리 명시되지 않는 한 본 발명의 범위 내에 포함된다.
본 발명은 또한, 화학식 (I)의 동위원소-표지된 (isotopically-labeled) 화합물, 즉, 하나의 원자가 동일한 원자번호를 갖지만 자연 상태에서 우세하게 존재하는 원자량과는 다른 원자량을 갖는 원자로 대체 또는 강화시킨 (enriched), 화학식 (I)의 화합물을 포함한다. 화학식 (I)의 화합물로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 35S, 및 18F를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 특히 관심있는 것은, 삼중수소 (tritium) 또는 탄소-14가 강화된 화학식 (I)의 화합물이며, 이 화합물들은 예를 들어, 조직 분포 연구에 사용될 수 있다. 또한, 대사작용 (metabolism) 부위에서 중수소 (deuterium)가 강화된 화학식 (I)의 화합물이 특히 관심이 있으며, 이 화합물들은 보다 우수한 대사 안정성 (metabolic stability)을 가질 것으로 기대된다. 또한 특히 관심있는 것은 11C, 18F, 15O 및 13N과 같은, 양전자 방출 동위원소 (positron emitting isotope)가 강화된 화학식 (I)의 화합물이며, 이 화합물들은 예를 들어, 양전자 방출 단층촬영 (Positron Emission Tomography: PET) 연구에 사용될 수 있다.
정의
본 발명의 다양한 양상 및 구체예를 포함하는 본 발명을 개시할 때, 하기 용어들은 달리 지시하지 않는 한 하기의 의미들을 갖는다.
용어 "알킬 (alkyl)"은 직쇄 또는 분지쇄 또는 그의 조합일 수 있는 1가 포화된 탄화수소기를 의미한다. 달리 정의하지 않는 한, 이러한 알킬기는 통상적으로 1 내지 10개의 탄소 원자를 포함한다. 대표적인 알킬 기는, 예로서 메틸 (Me), 에틸 (Et), n-프로필 (n-Pr) 또는 (nPr), 이소프로필 (i-Pr) 또는 (iPr), n-부틸 (n-Bu) 또는 (nBu), sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸 (t-Bu) 또는 (tBu), n-펜틸, n-헥실, 2,2-디메틸프로필, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, 2-에틸부틸, 2,2-디메틸펜틸, 2-프로필펜틸 등을 포함한다.
탄소 원자의 특정 수가 특정 용어에 대해 의도되는 경우, 탄소 원자의 수는 상기 용어에 앞에 개시되었다. 예를 들어, 용어 "C1- 3알킬"은 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 알킬 기를 의미하고, 상기에서 탄소 원자는, 직쇄 또는 분지쇄 형태를 포함하는, 임의의 화학적으로-허용가능한 형태일 수 있다.
용어 "알콕시 (alkoxy)"는 1가 기인 -O-알킬을 의미하고, 여기서 알킬은 상기에서와 같이 정의된다. 대표적인 알콕시기는, 예로서 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시 등을 포함한다.
용어 "시클로알킬 (cycloalkyl)"은 모노시클릭 (monocyclic) 또는 멀티시클릭 (multicyclic)일 수 있는 1가 포화된 카르보시클릭 기를 의미한다. 달리 정의되지 않는 한, 이러한 시클로알킬 기는 통상적으로 3 내지 10개의 탄소 원자를 포함한다. 대표적인 시클로알킬 기는, 예로서 시클로프로필 (cPr), 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 아다만틸 등을 포함한다.
용어 "헤테로시클일 (heterocyclyl)", "헤테로사이클 (heterocycle)", "헤테로시클릭 (heterocyclic)", 또는 "헤테로시클릭 고리 (heterocyclic ring)"는, 3 내지 10개의 총 고리 원자를 갖는, 1가 포화된 또는 부분 불포화된 시클릭 비-방향족 기를 의미하고, 상기 고리는 2 내지 9개의 탄소 고리 원자, 및 질소, 산소 및 황으로부터 선택되는 1 내지 4개의 고리 헤테로원자를 포함한다. 헤테로시클릭 기는 모노시클릭 또는 멀티시클릭 (즉, 융합된 (fused) 또는 브릿지된 (bridged))일 수 있다. 대표적인 헤테로시클릭 기는, 예로서 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 이미다졸리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴일, 인돌린-3-일, 2-이미다졸리닐, 테트라히드로피라닐, 1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-2-일, 퀴뉴클리디닐 (quinuclidinyl), 7-아자노르보르나닐, 노르트로파닐 등을 포함하고, 여기서 부착 지점은 임의의 이용가능한 탄소 또는 질소 고리 원자에 있다. 본원에서 헤테로시클릭 기의 부착 지점을 명확하게 하는 경우, 상기 기들은 대안으로 비-원자가 (non-valent) 종, 즉 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 이미다졸, 테트라히드로피란 등으로 나타낼 수 있다.
용어 "치료적으로 유효한 양 (therapeutically effective amount)"은 치료를 필요로 하는 환자에게 투여될 때 치료에 영향을 주는 충분한 양을 의미한다.
본원에서 사용되는 용어 "치료 (treatment)"는, 하기 중 하나 이상을 포함하는, 포유동물 (특히, 인간)과 같은 환자에서, 질환, 장애, 또는 의학적 병태 (예컨대 위장관 염증 질환)의 치료를 의미한다:
(a) 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태의 발생 방지, 즉 상기 질환 또는 의학적 병태의 재발 방지 또는 상기 질환 또는 의학적 병태에 걸리기 쉬운 (pre-disposed) 환자의 예방적 치료 (prophylactic treatment);
(b) 다른 치료제의 효과에 길항 작용을 하는 것을 포함하여, 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태의 개선 (ameliorating), 즉 환자에서 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태를 제거 또는 퇴행 (regression);
(c) 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태의 억제 (suppressing), 즉 환자에서 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태의 발전을 둔화 또는 저지; 또는
(d) 환자에서 상기 질환, 장애, 또는 의학적 병태의 증상 완화.
용어 "약학적으로 허용가능한 염 (pharmaceutically acceptable salt)"은 환자 또는 인간과 같은 포유동물에 투여를 위해 허용가능한 염 (예컨대, 해당 용량 용법 (dosage regime)에 대해 허용가능한 포유동물 안전성을 갖는 염)을 의미한다. 대표적인 약학적으로 허용가능한 염은 아세트산, 아스코르브산, 벤젠술폰산, 벤조산, 캄포술폰산, 시트르산, 에탄술폰산, 에디실산 (edisylic), 푸마르산, 겐티스산 (gentisic), 글루콘산, 글루코론산, 글루탐산, 힙푸르산 (hippuric), 히드로브롬산, 히드로클로르산, 이세티온산 (isethionic), 락트산, 락토비온산 (lactobionic), 말레산, 말산, 만델산, 메탄술폰산, 무신산 (mucic), 나프탈렌술폰산, 나프탈렌-1,5-디술폰산, 나프탈렌-2,6-디술폰산, 니코틴산, 니트르산, 오로트산 (orotic), 파모산 (pamoic), 판토텐산, 포스포르산, 숙신산, 술푸르산, 타르타르산, p-톨루엔술폰산 및 크시나포산 (xinafoic acid) 등의 염을 포함한다.
용어 "그의 염 (salt thereof)"은 산의 수소가 양이온, 예컨대 금속 양이온 또는 유기 양이온 등으로 대체되는 경우 형성된 화합물을 의미한다. 예를 들어, 상기 양이온은 화학식 (I)의 화합물의 양성자화된 형태 (protonated form), 즉 하나 이상의 아미노기가 산에 의해 양성자화되어진 형태일 수 있다. 통상적으로, 상기 염은 약학적으로 허용가능한 염이고, 상기는 환자에게 투여하기 위한 것이 아닌 중간체 화합물의 염을 필요로 하지 않는다.
용어 "아미노-보호 기 (amino-protecting group)"는 아미노 질소에서 원하지 않는 반응을 방지하기에 적합한 보호 기를 의미한다. 대표적인 아미노-보호 기는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 포르밀; 아실 기, 예를 들어 알카노일 기, 예컨대 아세틸 및 트리-플루오로아세틸; 알콕시카르보닐 기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐 (Boc); 아릴메톡시카르보닐 기, 예컨대 벤질옥시카르보닐 (Cbz) 및 9-플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc); 아릴메틸 기, 예컨대 벤질 (Bn), 트리틸 (Tr), 및 1,1-디-(4'-메톡시페닐)메틸; 실일 기, 예컨대 트리메틸실일 (trimethylsilyl: TMS), 트리이소프로필실일 (triisopropylsiliyl: TIPS), tert -부틸디메틸실일 (tert -butyldimethylsilyl: TBS 또는 TBDMS), [2-(트리메틸실일)에톡시]메틸 (SEM); 등을 포함한다. 다수의 보호 기, 및 그의 도입 및 제거는 T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York에 개시되었다.
일반 합성 절차
본 발명의 화합물, 및 그의 중간체는 상업적으로-이용가능하거나 또는 통상적으로-제조된 개시 물질 및 시약을 사용하여 하기 일반적 방법 및 절차에 따라 제조될 수 있다. 하기 반응식에서 사용된 치환체 및 변수 (예컨대, R1, R2, R3, R4 등)는 달리 지시하지 않는 한 본원에 정의된 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 산성 또는 염기성 원자 또는 관능기를 갖는 화합물이 사용될 수 있거나 또는 달리 지시하지 않는 한 염으로 제조될 수 있다 (일부 경우에, 특정 반응에서 염의 사용은, 상기 반응을 수행하기 전에 통상적인 절차를 사용하여, 상기 염을 비-염의 형태, 예컨대 유리 염기로의 전환을 필요로 할 것이다).
본 발명의 특별한 구체예가 하기 절차에 개시 또는 서술될 수 있음에도 불구하고, 당 분야의 통상의 기술을 가진 자라면 본 발명의 다른 구체예 또는 양상이 또한 상기 절차를 사용하거나 또는 당분야의 통상의 기술을 가진 자에게 알려져 있는 다른 방법, 시약 및 개시 물질을 사용하여 제조될 수 있다는 것을 알 수 있을 것이다. 구체적으로, 본 발명의 화합물은 다양한 공정 경로에 의해 제조될 수 있고, 여기서 반응물들이 다른 순서로 조합되어, 최종 산물을 생성하는 도중에 상이한 중간체를 제공할 수 있다는 것을 알 수 있을 것이다.
본 발명의 최종 화합물들을 제조하는 일반적인 방법은 하기 반응식 1에 도시되는 바와 같이 중요 중간체 1을 사용한다. 변수 R1, R2, R4, R5, 및 n은 화학식 (I)에서 정의된 바와 같고, RA는 선택적으로 치환된 C1- 4알킬을 나타내고, 또한 L은 이탈기 (leaving group)이다. 반응식은, 변수 R3이 메틸인 화합물을 나타낸다. R3이 C2- 3알킬인 화합물은 유사하게 제조될 수 있다.
반응식 1
Figure pct00009
R1이 옵션 (a)에서와 같이 -S(O)2R4로 정의되는 술폰아미드 화합물은 통상적으로 중간체 1을 약 1 내지 약 1.1 당량의, 형태 Cl-S(O)2R4의 술포닐클로리드와 과량의 염기의 존재하에 약 0 ℃의 온도에서 접촉시킴으로써 제조된다. 상기 반응은 통상적으로 약 1 내지 약 24시간 동안 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다.
R1이 옵션 (b)에서 정의된 바와 같은 선택적으로 치환된 알킬 기인 화합물을 제조하기 위해서, 상기 알킬화 (alkylation) 반응은 통상적으로 할로 이탈기 L, 주로 클로로 또는 브로모를 사용한다. 상기 반응은 통상적으로 과량의 염기의 존재하에 비활성 희석제 중에 과량의 시약 L-RA와 중간체 1을 접촉시켜서 수행된다. 상기 반응은 통상적으로 약 20 ℃ 내지 약 60 ℃ 사이의 온도에서 약 10 내지 약 24시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다.
대안으로서, Michael 첨가 반응을 사용하여 R1이 시아노에틸 기인 화합물을 제조할 수 있다. 예를 들어, 하기 실시예에 개시된 바와 같이, R1이 -(CH2)2CN인 화합물을 제조하기 위해서, 중간체 1은 약 1 내지 약 1.5 당량의 아크릴로니트릴과 과량의 염기, 예를 들어 디이소프로필에틸아민 또는 디아조비시클로운데센의 존재하에 접촉된다. 상기 반응은 통상적으로 실온에서 약 3 내지 약 24시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다.
R1이 -C(O)R5로 정의되는 화합물은, R5가 -OC1- 4알킬로 정의될 때, 형태 Cl-C(O)R5의 카르보닐 클로리드, 구체적으로 클로로포르메이트를 사용하여 제조될 수 있다. 통상적으로, 중간체 1은 약 1 당량의 카르보닐 클로리드와 과량의 염기의 존재하에 약 0　℃의 온도에서 접촉된다. 상기 반응은 통상적으로 약 1 내지 약 3시간 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다.
대안으로서, R1이 -C(O)R5로 정의되는 화합물은 중간체 1을 적당히 과량 (modest excess)의 카르복실산 시약 HO-C(O)-R5와 통상적인 아미드 커플링 조건 (amide coupling conditions)하에 접촉시켜서 제조될 수 있다. 상기 반응은 통상적으로 과량의 염기의 존재하에 활성제 (activating agent) 예컨대 N,N,N ',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU)를 이용하여 수행된다. 상기 반응은 통상적으로 실온에서 약 3 내지 약 24시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다.
변수 R3이 메틸인 중간체 1의 제조를 위한 예시되는 반응은 하기 반응식 2에 예시된다.
반응식 2
Figure pct00010
단계 1의 방향족 치환 반응에서, 트리클로로피리미딘 2는 과량의 아미노-피라졸-메탄올 중간체 3과 염기의 존재하에 반응하여 중간체 4를 제공한다. 상기 Boc-보호된 아미노-아자-비시클로 중간체 5는 그 다음에 중간체 4와 반응하여 중간체 6을 제공한다. 예를 들어, 중간체 4는 약 1 내지 약 1.5 당량의 아자-비시클로 중간체 5와 과량의 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민 (diisopropylethylyamine)의 존재하에 조합된다. 상기 반응은 통상적으로 높은 온도, 약 85 ℃ 내지 약 120 ℃에서 약 6 내지 약 12시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다. 중간체 6과 소듐 메톡시드의 반응으로 중간체 7을 제공한다. 상기 반응은 통상적으로 밀봉된 튜브에서 높은 온도, 약 85 ℃ 내지 약 120 ℃의 온도에서 약 4 내지 약 10시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다. 마지막 단계에서, 상기 Boc 기는 산, 통상적으로 히드로클로르산과의 표준 처리에 의해 제거되어, 중간체 1을 제공할 수 있다.
대안으로서, 중간체 1은 하기 반응식 3에 예시된 단계들의 순서로 제조될 수 있다.
반응식 3
Figure pct00011
상기에서 RB는 수소 또는 실일 산소-보호 기, 예컨대 트리이소프로필실일 (TIPS) 또는 tert-부틸디메틸실일 (TBS)이다. 상기 Boc-보호된 아미노-아자-비시클로 기 5는 디클로로-메톡시피리미딘 중간체 8과 조합하여 중간체 9를 형성한다. 상기 반응은 통상적으로 높은 온도에서 염기 존재하에 수행된다. 중간체 9는 그 다음에 아미노-피라졸 중간체 3'과 표준 Buchwald 조건하에 반응하여 중간체 7을 제공한다. 예를 들어, 중간체 9는 약 1 내지 약 1.5 당량의 피라졸 중간체 3'과 염기 예컨대 세슘 카르보네이트 또는 포타슘 카르보네이트 및 팔라듐 촉매의 존재하에 조합된다. 상기 반응은 통상적으로 높은 온도, 약 80　℃ 내지 약 110 ℃에서, 약 8 내지 약 24시간 동안 또는 상기 반응이 실질적으로 완료될 때까지 수행된다. 최종 단계에서, 상기 Boc 보호 기는 반응식 2에서와 같이 제거된다. RB가 실일 보호 기인 경우, 상기 실일 및 Boc 기는 동시에 제거될 수 있다.
따라서, 일 방법 양상에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제조하는 방법을 제공하고, 상기 방법은:
하기 화학식 (III)의 화합물:
Figure pct00012
을
(i) Cl-S(O)2R4,
(ii) 화학식 L-RA의 화합물로서, 상기 L은 이탈기이고 및 RA는 C1- 4알킬이고, 상기 C1- 4알킬은 -CN,
Figure pct00013
, 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 화학식 L-RA의 화합물;
(iii) Cl-C(O)R5, 또는
(iv) HO-C(O)R5와 반응시키고, 상기 R1, R2, R3, R4, R5, 및 n은 상기에 정의된 바와 같은 것인 단계, 및
선택적으로 약학적으로-허용가능한 염을 형성하여 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 단계를 포함한다.
개별 및 구별되는 양상에서, 본 발명은 변수가 상기에 개시된 값들 중 어느 것을 취하는 화학식 (III)의 화합물 및 R2 및 R3이 각각 메틸이고 및 n이 1 또는 2인 화학식 (III)의 화합물을 제공한다.
다른 방법 양상에서, 본 발명은, R2 및 n이 상기에 정의된 바와 같은 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법을 제공하고,
Figure pct00014
상기 방법은:
(a) 화학식 9의 화합물:
Figure pct00015
을
RB가 수소 또는 실일 산소-보호 기인 화학식 3의 화합물:
Figure pct00016
과 반응하여
화학식 7의 화합물:
Figure pct00017
을 형성하는 단계, 및
(b) 상기 화학식 7의 화합물로부터 보호 기 또는 기들을 제거하여 화학식 1의 화합물을 제공하는 단계를 포함한다.
결정 형태
다른 양상에서, 본 발명은 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 (실시예 2 및 10-13 참조)을 결정 유리염기 형태 I 및 형태 II로 제공한다.
일 양상에서, 결정 유리염기 형태 I은 유의한 회절 피크들, 다른 피크들 중에, 8.89±0.20, 12.99±0.20, 13.44±0.20, 및 20.16±0.20의 2θ값에서의 회절 피크들을 갖는 분말 X-선 회절 (PXRD) 패턴을 특징으로 한다. 형태 I은, 10.64±0.20, 10.99±0.20, 15.02±0.20, 15.74±0.20, 16.47±0.20, 20.93±0.20, 22.22±0.20, 및 26.25±0.20으로부터 선택된 2θ값들에서 둘 이상의 부가의 회절 피크, 3 이상 및 4 이상의 부가의 회절 피크들을 포함하는 PXRD 패턴을 더 특징으로 할 수 있다. 다른 양상에서, 형태 I은 8.89±0.20, 10.64±0.20, 10.99±0.20, 12.99±0.20, 13.44±0.20, 15.02±0.20, 15.74±0.20, 16.47±0.20, 20.16±0.20, 20.93±0.20, 22.22±0.20, 및 26.25±0.20의 2θ 값들에서 회절 피크들을 갖는 PXRD 패턴을 특징으로 한다.
분말 X-선 회절 분야에 잘 알려져 있는 바와 같이, PXRD 패턴의 피크 위치는 실험 세부사항, 예컨대 시료 제조 및 기기 기하학의 세부사항에 대해, 상대 피크 높이보다 상대적으로 덜 민감하다. 그러므로, 일 양상에서, 상기 결정 형태 I은 상기 피크 위치가 도 1에 개시된 것과 실질적으로 일치하는 분말 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.
다른 양상에서, 결정 형태 I은 고온에 노출될 때 그의 거동 (behavior)을 특징으로 한다. 도 2에 나타낸 바와 같이, 분당 10℃의 가열 속도로 기록된 시차 주사 열량계 (DSC) 트레이스는 약 235℃ 내지 약 245℃로, 약 237℃ 내지 약 242℃를 포함하는 온도 범위에서 용융 전이 (melt transition)로 확인되는, 흡열 열 흐름 (endothermic heat flow)에서 피크를 나타내었다. 도 3의 열 중량 분석 (TGA) 트레이스는 용융-후 분해 (post-melting decomposition)에 해당하는 중량 손실의 개시를 나타낸다.
결정 형태 I은 흡습성 (hygroscopicity)에 대해 예외적인 작은 경향을 갖는 가역적 흡착/탈착 프로파일 (reversible sorption/desorption profile)을 갖는 것으로 나타났다. 형태 I은 5　% 내지 90　%의 상대 습도의 습도 범위에서 약 0.4% 미만의 중량 증량을 나타내었다. 흡착 및 탈착의 두 사이클에서 히스테리시스 (hysteresis)는 관찰되지 않았다. 형태 I은 비-흡습성 (non-hygroscopic)인 것으로 간주된다.
또한, 결정 형태 I은 미분화 (micronization)에 안정한 것으로 나타났다. 미분화되지 않은 물질의 분말 X-선 회절 패턴과 미분화 후에 형태 I의 물질의 분말 X-선 회절 패턴 사이의 차이는 관찰되지 않았다.
결정 유리염기 형태 II는 도 5의 PXRD 패턴 및 부가로 고온에 노출될 때 그의 거동을 특징으로 한다. 도 6에 나타낸 바와 같이, 분당 10℃의 가열 속도로 기록된 시차 주사 열량계 (DSC) 트레이스는 약 205℃ 내지 약 240℃ 범위의 흡열 열 흐름에서 넓은 (broad) 피크를 나타내었고, 도 7의 열 중량 분석 (TGA) 트레이스와 함께, 병합된 (merged) 용융 전이 및 분해로 해석될 수 있다. 형태 II는 약간 흡습성 고형물이고 이는 흡착과 탈착의 두 사이클 사이에서 작은 히스테리시스를 나타내었다. 형태 II는 5　% 내지 90　% 상대 습도의 습도 범위에서 약 1.2 %의 중량 증량을 나타내었다.
실시예 11 및 12에 개시된 바와 같이, 형태 I은 상기 화합물을 N-메틸피롤리돈 (NMP) 또는 디메틸포름아미드 (DMF)에 용해시키고 및 아세톤 및 물을 반용매 (antisolvents)로서 약 1:1.5 내지 1:1.75의 아세톤:물의 비율로 첨가하여 제조될 수 있다. 결과의 (resulting) 반응 혼합물을 약 4시간 내지 약 24시간 동안 교반하고, 여과하고, 아세톤과 물의 혼합물, 예컨대 아세톤과 물의 1:1.4 혼합물로 세척하고, 및 건조시켜서 결정 형태 I을 제공한다. 결정 형태 II를 제조하는 방법은 실시예 13에 개시되어 있다.
다른 양상에서, 본 발명은 결정 형태 I을 제조하는 방법을 제공하고, 상기 방법은: (a) 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴을 N-메틸피롤리돈 및 디메틸포름아미드로부터 선택된 희석제에 용해시켜서 반응 혼합물을 형성하는 단계; (b) 아세톤 및 물을 상기 반응 혼합물에 첨가하는 단계; 및 (c) 결정 형태 I을 상기 반응 혼합물로부터 단리시키는 단계를 포함한다.
약학적 조성물
본 발명의 화합물 및 그의 약학적으로-허용가능한 염은 통상적으로 약학적 조성물 또는 제형 (formulation)의 형태로 사용된다. 이러한 약학적 조성물은 경구, 국소 (경피 포함), 직장, 비강, 흡입, 및 비경구 투여 방식을 포함하지만, 이에 한정되지 않는 허용가능한 임의의 투여 경로로 환자에게 투여될 수 있다.
따라서, 그의 조성물 양상들 중 하나에서, 본 발명은 약학적으로-허용가능한 담체 또는 부형제 및 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 여기서 상기에 정의된 바와 같이, "화학식 (I)의 화합물"은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염을 의미한다. 선택적으로, 이러한 약학적 조성물은 원한다면 다른 치료제 및/또는 제형화제 (formulating agents)를 포함할 수 있다. 조성물 및 그의 용도를 논의하는 경우, "본 발명의 화합물"은 본원에서 "활성제 (active agent)"로도 지칭될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "본 발명의 화합물"은 화학식 (I)에 포함되는 모든 화합물뿐만 아니라 화학식 (II)에서 구체화된 종들 및 그의 약학적으로-허용가능한 염을 포함하는 것으로 의도된다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상적으로 본 발명의 화합물의 치료적으로 유효한 양을 포함한다. 그러나 당 분야의 통상의 기술자는 약학적 조성물이 벌크 (bulk) 조성물과 같이 치료적으로 유효한 양을 초과하여 포함하거나, 또는 치료적으로 유효한 양보다 적게, 즉 치료적으로 유효한 양의 달성을 위해 다회 투여 목적으로 설계된 개별 유닛 용량 (individual unit dose)을 포함할 수 있다는 것을 알 것이다.
통상적으로, 이러한 약학적 조성물은 약 0.1 내지 약 95 중량%의 활성제로; 약 5 내지 약 70 중량%의 활성제를 포함할 것이다.
임의의 종래의 담체 또는 부형제가 본 발명의 약학적 조성물에 사용될 수 있다. 특정 담체 또는 부형제의 선택, 또는 담체나 부형제의 조합은 특정한 환자 또는 의학적 병태 또는 질환 상태의 유형을 치료하기 위해 사용되는 투여 방식에 의존할 것이다. 이와 관련하여, 특정한 투여 방식에 적합한 약학적 조성물의 제조는 약제학 분야의 통상의 기술의 범위 내에 속한다. 추가적으로, 본 발명의 약학적 조성물에 사용되는 담체 또는 부형제들은 상업적으로-이용가능하다. 추가적인 예시의 방식으로, 통상적인 제형화 기법은 Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (2000); and H.C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999)에 기재되어 있다.
약학적으로 허용가능한 담체로 제공될 수 있는 물질들의 대표적인 예는 하기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 당, 예컨대 락토스, 글루코스 및 수크로스; 전분, 예를 들어, 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로스, 예컨대 미정질 셀룰로스, 및 그의 유도체, 예컨대 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; 트라가칸트 분말 (powdered tragacanth); 맥아 (malt); 젤라틴; 탈크; 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스 (suppository waxes); 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 홍화씨유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; 폴리올, 예컨대 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트; 아가 (agar); 완충제, 예컨대 마그네슘 히드록시드 및 알루미늄 히드록시드; 알긴산; 발열성물질-제거수 (pyrogen-free water); 등장성 식염수; 링거액; 에틸 알콜; 포스페이트 완충액; 및 약학적 조성물에 사용되는 기타 무독성 적합성 물질.
약학적 조성물은 통상적으로, 상기 활성제를 약학적으로-허용가능한 담체 및 하나 이상의 선택적 성분들과 철저하게 (thoroughly) 및 긴밀하게 (intimately) 혼합 (mixing) 또는 블렌딩 (blending)시켜 제조된다. 결과의 균일하게 블렌딩된 혼합물은 그 다음, 기존의 절차 및 장비를 사용하여, 정제, 캡슐, 환제 (pill) 등으로 성형 또는 로드 (load)될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 바람직하게 유닛 투여 형태 (unit dosage form)로 패키징 (package)된다. 용어 "유닛 투여 형태 (unit dosage form)"는 환자에게 투여하기에 적합한 물리적으로 분리된 유닛을 지칭하고, 즉 각 유닛은, 단독으로 또는 하나 이상의 추가적인 유닛과 조합되어 원하는 치료 효과를 발휘하도록 계산된 소정 양의 활성제를 함유한다. 예를 들어, 이러한 유닛 투여 형태는 캡슐, 정제, 환제 등, 또는 비경구 투여에 적합한 유닛 패키지일 수 있다.
일 구체예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여에 적합하다. 경구 투여에 적합한 약학적 조성물은 캡슐, 정제, 환제, 로젠지 (lozenge), 카쉐 (cachet), 드라제 (dragee), 산제 (powder), 과립제 (granule); 또는 수성 또는 비-수성 액체 중의 용액 또는 현탁액; 또는 수중유 (oil-in-water) 또는 유중수 (water-in-oil) 액체 에멀젼; 또는 엘릭서제 (elixir) 또는 시럽제 등의 형태일 수 있고; 각각은 본 발명의 화합물의 소정 양을 활성 성분으로 함유한다.
고체 투여 형태 (즉, 캡슐, 정제, 환제 등으로서)로 경구 투여를 의도하는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 통상적으로 활성제 및 하나 이상의 약학적으로-허용가능한 담체를 포함할 것이다. 선택적으로, 이러한 고체 투여 형태는 하기를 포함할 수 있다: 충전제 (filler) 또는 증량제 (extender), 예컨대 전분, 미정질 셀룰로스, 락토스, 디칼슘 포스페이트, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및/또는 규산 (silicic acid); 결합제, 예컨대 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 수크로스 및/또는 아카시아; 보습제 (humectants), 예컨대 글리세롤; 붕해제, 예컨대 크로스카르멜로스 소듐, 아가-아가 (agar-agar), 칼슘 카르보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정한 실리케이트, 및/또는 소듐 카르보네이트; 용액 지연제, 예컨대 파라핀; 흡수 촉진제, 예컨대 4차 암모늄 화합물; 습윤제, 예컨대 세틸 알콜 및/또는 글리세롤 모노스테아레이트; 흡착제, 예컨대 카올린 (kaolin) 및/또는 벤토나이트 (bentonite) 클레이; 윤활제, 예컨대 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 술페이트, 및/또는 이들의 혼합물; 착색제; 및 완충제.
이형제, 습윤제, 코팅제, 감미제, 향미제 및 방향제, 보존제 및 산화방지제가 본 발명의 약학적 조성물 중에 또한 존재할 수 있다. 약학적으로-허용가능한 산화방지제의 예는 하기를 포함한다: 수-용해성 산화방지제, 예컨대 아스코르브산, 시스테인 히드로클로리드, 소듐 비술페이트, 소듐 메타비술페이트, 소듐 술피트 등; 지용성 산화방지제, 예컨대 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화된 히드록시아니솔, 부틸화된 히드록시톨루엔, 레시틴, 프로필 갈레이트 (gallate), 알파-토코페롤 등; 및 금속-킬레이트제, 예컨대 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트산, 소르비톨, 타르타르산, 인산 등. 정제, 캡슐, 환제 등을 위한 코팅제는 장용성 코팅을 위해 사용되는 것, 예컨대 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트, 히드록시프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 메타크릴산, 메타크릴산 에스테르 코폴리머, 셀룰로스 아세테이트 트리멜리테이트, 카르복시메틸 에틸 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트 등을 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 또한 예로서, 다양한 비율의 히드록시프로필 메틸셀룰로스; 또는 기타 폴리머 매트릭스, 리포솜 (liposomes) 및/또는 미크로스피어 (microsphere)를 사용하여, 상기 활성제의 서방성 또는 조절된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 약학적 조성물은 불투명화제 (opacifying agent)를 선택적으로 함유할 수 있고, 선택적으로는 지연된 방식으로, 위장관의 특정 부분에서만 또는 우선적으로, 상기 활성제를 방출할 수 있도록 제형화될 수 있다. 사용될 수 있는 포매 (embedding) 조성물의 예는 폴리머 물질 및 왁스를 포함한다. 상기 활성제는 또한, 적합하다면 전술된 부형제 중 하나 이상을 갖는, 미크로-캡슐화된 (micro-encapsulated) 형태일 수 있다.
경구 투여에 적합한 액체 투여 형태는 예로서, 약학적으로-허용가능한 에멀전, 미크로에멀전, 용액, 현탁액, 시럽제, 및 엘릭서제를 포함한다. 액체 투여 형태는 통상적으로 상기 활성제 및 불활성 희석제, 가령, 예를 들어 물 또는 기타 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일 (특히, 면실유, 땅콩 기름, 옥수수유, 배아유, 올리브유, 피마자유 및 참기름), 올레산, 글리세롤, 테트라히드로푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 그의 혼합물을 포함한다. 대안으로서, 특정 액체 제형은, 예를 들어 분무 건조에 의해, 분말로 전환될 수 있고, 이는 기존의 절차에 의해 고체 투여 형태를 제조하는데 사용된다.
상기 활성 성분 이외에, 현탁제는 현탁화제, 예컨대, 예를 들어 에톡실화된 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미정질 셀룰로스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가-아가 및 트라가칸트, 및 그의 혼합물을 함유할 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 비경구로 (예컨대, 정맥내, 피하, 근육내, 또는 복강내 주사로) 투여될 수 있다. 비경구 투여를 위해, 상기 활성제는 통상적으로 예로서, 멸균 수용액, 식염수, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜과 같은 저분자량 알콜, 식물성 오일, 젤라틴, 에틸 올레에이트와 같은 지방산 에스테르 등을 포함하는 비경구 투여에 적합한 비히클 (vehicle)과 혼합된다. 비경구 제형은 또한 하나 이상의 산화방지제, 가용화제, 안정화제, 보존제, 습윤제, 유화제, 완충제 또는 분산제를 함유할 수 있다. 상기 제형들은 멸균 주사용 매질, 살균제, 여과, 조사, 또는 열을 사용하여 무균 상태로 만들 수 있다.
대안으로서, 본 발명의 약학적 조성물은 흡입에 의한 투여를 위해 제형화된다. 흡입에 의한 투여를 위한 적합한 약학적 조성물은 통상적으로 에어로졸 또는 분말의 형태일 것이다. 이러한 조성물은 일반적으로 잘 알려진 전달 장치, 예컨대 정량식 흡입기 (metered-dose inhaler), 건조 분말 흡입기, 네뷸라이저 (nebulizer) 또는 유사한 전달 장치를 사용하여 일반적으로 투여된다.
가압된 용기를 사용하여 흡입에 의해 투여되는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 통상적으로 활성 성분 및 적절한 추진제, 예컨대 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적절한 가스를 포함할 것이다. 또한, 상기 약학적 조성물은 본 발명의 화합물 및 분말 흡입에 사용하기에 적합한 분말을 포함하는 캡슐 또는 카트리지 (예를 들어 젤라틴으로 만들어짐)의 형태일 수 있다. 적합한 분말 베이스는 예로서 락토스 또는 전분을 포함한다.
본 발명의 화합물은 연고 또는 크림으로 피부에 국소 투여를 위해 제형화될 수 있다. 연고 제형은 통상적으로 맑은 오일 또는 그리스 (greasy) 물질의 베이스를 갖는 반고체 제제이다. 연고 제형에 사용하기에 적합한 오일 물질은 바셀린 (바셀린 (petroleum jelly)), 밀납 (beeswax), 코코아 버터, 셰어 버터 (shea butter), 및 세틸 알콜을 포함한다. 연고는 선택적으로 원한다면 추가로 연화제 (emollients) 및 침투 증강제 (penetration enhancers)를 포함할 수 있다.
크림 제형 (cream formulations)은 오일 상 및 수성 상, 통상적으로 정제된 물을 포함하는 수성 상을 포함하는 에멀젼으로 제조될 수 있다. 크림 제형의 성분들은 하기를 포함할 수 있다: 오일 베이스, 예컨대 바셀린, 미네랄 오일, 식물성 및 동물성 오일, 및 트리글리세리드; 크림 베이스, 예컨대 라놀린 알콜, 스테아르산, 및 세토스테아릴 알콜; 겔 베이스, 예컨대 폴리비닐 알콜; 용매, 예컨대, 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜; 유화제, 예컨대 폴리소르베이트, 스테아레이트, 예컨대 글리세릴 스테아레이트, 옥틸히드록시스테아레이트, 폴리옥실 스테아레이트, PEG 스테아릴 에테르, 이소프로필 팔미테이트, 및 소르비탄 모노스테아레이트; 안정화제, 예컨대 폴리사카리드 및 소듐 술피트; 연화제 (즉 보습제), 예컨대 중간쇄 (medium chain) 트리글리세리드, 이소프로필 미리스테이트, 및 디메티콘; 강화제 (stiffening agents), 예컨대 세틸 알콜 및 스테아릴 알콜; 항미생물제, 예컨대 메틸파라벤, 프로필파라벤, 페녹시에탄올, 소르브산, 디아졸리디닐 우레아, 및 부틸화된 히드록시아니솔; 침투 증강제, 예컨대 N-메틸피롤리돈, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 모노라우레이트 등; 및 킬레이트제, 예컨대 에데테이트 디소듐.
하기의 비제한적인 예는 본 발명의 대표적인 약학적 조성물을 예시한다.
정제 경구 고체 투여 형태
본 발명의 화합물 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염을 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 및 크로스카르멜로스 소듐과 4:5:1:1의 비율로 건식 블렌딩하고, 정제로 압축하여, 예를 들어 정제 당 5 mg, 20　mg 또는 40 mg의 활성제를 갖는 유닛 투여량을 제공한다.
캡슐 경구 고체 투여 형태
본 발명의 화합물 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염을 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 및 크로스카르멜로스 소듐과 4:5:1:1의 비율로 습윤 과립화에 의해 조합하고, 젤라틴 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스 캡슐로 로드하여, 예를 들어 캡슐 당 5 mg, 20　mg 또는 40 mg의 활성제를 갖는 유닛 투여량을 제공한다.
액체 제형
본 발명의 화합물 (0.1 %), 물 (98.9 %) 및 아스코르브산 (1.0 %)을 포함하는 액체 제형을, 본 발명의 화합물을 물과 아스코르브산의 혼합물로 첨가하여, 형성된다.
장용 코팅된 경구 투여 형태
본 발명의 화합물을 폴리비닐 피롤리돈을 포함하는 수용액에 용해시키고, 미정질 셀룰로스 또는 슈거 비드 (sugar beads) 상에 1:5 w/w의 활성제:비드의 비율로 분무 코팅하고, 그 다음에 아크릴산 코폴리머, 예를 들어 상표명 Eudragit-L® 및 Eudragit-S®로 이용가능한 아크릴산 코폴리머의 조합 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트를 포함하는 장용 코팅제의 약 5%의 중량 증량을 적용한다. 상기 장용 코팅된 비드를 젤라틴 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스 캡슐로 로드하여 예를 들어 캡슐 당 30　mg의 활성제를 갖는 유닛 투여량을 제공한다.
장용 코팅된 경구 투여 형태
Eudragit-L® 및 Eudragit-S®의 조합, 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트를 포함하는 장용 코팅제를 전술한 정제 경구 투여 형태 또는 캡슐 경구 투여 형태로 적용한다.
국소 투여를 위한 연고 제형
본 발명의 화합물을 바셀린, C8-C10 트리글리세리드, 옥틸히드록시스테아레이트, 및 N-메틸피롤리돈과, 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유하는 조성물을 제공하는 비율로 조합하였다.
국소 투여를 위한 연고 제형
본 발명의 화합물을 화이트 바셀린 (white petrolatum), 프로필렌 글리콜, 모노- 및 디-글리세리드, 파라핀, 부틸화된 히드록시톨루엔, 및 에데테이트 칼슘 디소듐과, 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유하는 조성물을 제공하는 비율로 조합하였다.
국소 투여를 위한 연고 제형
본 발명의 화합물을 미네랄 오일, 파라핀, 프로필렌 카르보네이트, 화이트 바셀린 및 화이트 왁스 (white wax)와 조합하여 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유하는 조성물을 제공한다.
국소 투여를 위한 크림 제형
미네랄 오일을 본 발명의 화합물, 프로필렌 글리콜, 이소프로필 팔미테이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 알콜, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리옥실 (polyoxyl) 40 스테아레이트, 소르브산, 메틸파라벤 및 프로필파라벤과 조합하여 오일 상을 형성하고, 이를 정제수와 전단 블렌딩 (shear blending)에 의해 조합하여 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유하는 조성물을 제공한다.
국소 투여를 위한 크림 제형
본 발명의 화합물, 벤질 알콜, 세틸 알콜, 시트르산 무수물, 모노 및 디-글리세리드, 올레일 알콜, 프로필렌 글리콜, 소듐 세토스테아릴 술페이트, 소듐 히드록시드, 스테아릴 알콜, 트리글리세리드, 및 물을 포함하는 크림 제형은 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유한다.
국소 투여를 위한 크림 제형
본 발명의 화합물, 세토스테아릴 알콜, 이소프로필 미리스테이트, 프로필렌 글리콜, 세토마크로골 (cetomacrogol) 1000, 디메티콘 360, 시트르산, 소듐 시트레이트, 및 정제 수와, 보존제로 이미두레아 (imidurea), 메틸파라벤, 및 프로필파라벤을 포함하는 크림 제형은 0.05 중량% 내지 5 중량%의 활성제를 함유한다.
유용성
본 발명의 화합물들은 JAK 효소 패밀리인: JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2의 강력한 저해제인 것으로 나타났다. JAK 효소 패밀리의 저해는 많은 중요 전염증성 시토킨의 시그날 전달을 저해할 수 있다. 그러므로, 본 발명의 JAK 저해제는 염증 질환 예컨대 궤양성 대장염, 및 크론병 및 면역 체크포인트 저해제 유도된 대장염과 같은 기타 위장관 염증 질환의 치료에 유용할 것으로 기대된다. 본 발명의 JAK 저해제는 아토피 피부염 및 기타 염증 및 소양성 피부 질환의 치료 및 호흡기 병태 예컨대 알레르기성 비염, 천식, 및 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD)의 치료에 유용할 것으로 기대된다.
위장관 염증 질환
JAK 효소의 강력한 저해를 제공하는 것 이외에, 본 발명의 화합물은 전신 노출을 최소화하기 위해 흡수율이 떨어지게 설계되었다. 캐뉼라 삽입된 (cannulated) 래트 (rats)에서 시험된 선택된 화합물들은 낮은 경구 생체이용률을 보였다. 또한, 상기 화합물은 작용 부위, 예를 들어 결장에서 그의 효과를 갖도록 설계되었다. 하기 분석 6 및 7에 개시된 바와 같이, 실시예 2의 화합물은 래트에서 경구 생체이용률이 약 5% 미만이고 또한 경구 투여시에 혈장내 노출에 대한 결장내 노출의 비율이 약 250 초과인 것을 나타내었다.
옥사졸론-유도된 대장염은 인간 궤양성 대장염과 조직학적 유사성을 갖는 실험 모델이다. 하기에 개시되는 바와 같이, 본 발명의 다른 화합물들 중에, 실시예 2의 화합물은 마우스 (mice)에서 옥사졸론-유도된 대장염 모델에서 활성을 나타내었다. 또한, 전신 기능 활성을 탐색하는 마우스의 면역억제 모델에서 시험될 때, 상기 화합물은 상기 옥사졸론 모델에서 효능을 나타내기 위해 필요로 하는 양과 동일한 용량으로 면역억제의 최소 효과를 나타내었다. 그러므로, 상기 화합물은 전임상 모델에서 전신 효과를 나타내지 않고 항-대장염 활성을 나타내었다.
높은 결장 대 혈장 비율은, 관련된 전신-유도된 유해 효과 없이, 강력한, 관강내 (luminally)-유도된 항-염증 활성을 제공할 것으로 기대된다. 상기 화합물은, 이에 한정되는 것은 아니지만, 궤양성 대장염 (직장구불창자염 (proctosigmoiditis), 전대장염 (pancolitis), 궤양성 직장염 (ulcerative proctitis) 및 좌측 대장염 (left-sided colitis)), 크론병, 콜라겐성 대장염, 림프구성 대장염, 베체트병 (Behcet's disease), 복강병 (celiac disease), 면역 체크포인트 저해제 유도된 대장염, 돌창자염 (ileitis), 호산구성 식도염 (eosinophilic esophagitis), 이식편대 숙주 질환 (graft versus host disease)-관련 대장염, 및 감염성 대장염을 포함하는 다양한 위장관 염증 적응증에 유용할 것으로 기대된다. 궤양성 대장염 (Reimund et al., J Clin Immunology, 1996, 16, 144-150), 크론병 (Woywodt et al., Eur J Gastroenterology Hepatology, 1999, 11, 267-276), 콜라겐성 대장염 (Kumawat et al., Mol Immunology, 2013, 55, 355-364), 림프구성 대장염 (Kumawat et al., 2013), 호산구성 식도염 (Weinbrand-Goichberg et al., Immunol Res, 2013, 56, 249-260), 이식편대 숙주 질환-관련 대장염 (Coghill et al., Blood, 2001, 117, 3268-3276), 감염성 대장염 (Stallmach et al., Int J Colorectal Dis, 2004, 19, 308-315), 베체트병 (Zhou et al., Autoimmun Rev, 2012, 11, 699-704), 복강병 (de Nitto et al., World J Gastroenterol, 2009, 15, 4609-4614), 면역 체크포인트 저해제 유도된 대장염 (예컨대, CTLA-4 저해제-유도된 대장염; (Yano et al., J Translation Med, 2014, 12, 191), PD-1- 또는 PD-L1-저해제-유도된 대장염), 및 돌창자염 (Yamamoto et al., Dig Liver Dis, 2008, 40, 253-259)은 특정 전염증성 시토킨 수준의 증가를 특징으로 한다. JAK 활성화를 통한 다수의 전염증성 시토킨 시그날로서, 본 명세서에 개시된 화합물은 상기 염증을 완화시키고 또한 증상 완화를 제공할 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 화합물은 궤양성 대장염의 완화를 유도 및 유지, 및 크론병, 면역 체크포인트 저해제 유도된 대장염, 및 이식편대 숙주 질환에서 위장관 유해 효과의 치료에 유용할 것으로 기대된다.
일 양상에서, 그러므로, 본 발명은 포유동물 (예컨대, 인간)에서 위장관 염증 질환을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 본 발명의 화합물 또는 약학적으로-허용가능한 담체 및 본 발명의 화합물을 포함하는 약학적 조성물을 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 포유동물에서 궤양성 대장염을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 본 발명의 화합물 또는 약학적으로-허용가능한 담체 및 본 발명의 화합물을 포함하는 약학적 조성물을 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
궤양성 대장염을 치료하기 위해 사용될 때, 본 발명의 화합물을 통상적으로 1일 1회, 또는 1일 수회 용량으로 경구로 투여될 것이고, 다른 투여 형태도 사용될 수 있다. 용량 당 투여되는 활성제의 양 또는 1일 당 투여되는 전체 양은 통상적으로, 치료되는 병태, 선택된 투여 경로, 투여된 실제 화합물 및 그의 관련 활성, 개별 환자의 연령, 체중 및 반응, 환자 증상의 중증도 등의 관련 상황에 비추어 의사에 의해 결정될 것이다.
궤양성 대장염 및 다른 위장관 염증 장애를 치료하는데 적합한 용량은 평균 70kg의 인간에 대해서 1일 당 약 1 내지 약 400　mg/일의 활성제로, 약 5 내지 약 300 mg/일 및 약 20 내지 약 70 mg/일을 포함하는 범위일 것으로 기대된다.
조합 요법
본 발명의 화합물은 또한 위장관 염증 장애의 치료에 효과적인 동일한 기전 또는 다른 기전으로 작용하는 하나 이상의 작용제와 조합하여 사용될 수 있다. 조합 요법을 위한 작용제의 유용한 부류는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 아미노살리실레이트, 스테로이드, 전신 면역억제제, 항-TNFα 항체, 항-VLA-4 항체, 항-인테그린 α4β7 항체, 항-박테리아 작용제, 및 지사제 (anti-diarrheal medicines)를 포함한다.
본 JAK 저해제 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 아미노살리실레이트는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 메살라민 (mesalamine), 오살라진 (osalazine) 및 술파살라진을 포함한다. 스테로이드의 예로는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 프레드니손, 프레드니솔론, 히드로코르티손, 부데소니드, 베클로메타손, 및 플루티카손을 포함한다. 염증 장애의 치료에 유용한 전신 면역억제제는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 시클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-메르캅토퓨린, 및 타크롤리무스를 포함한다. 또한, 항-TNFα 항체는, 이에 한정되는 것은 아니지만, 인플릭시맙, 아달리무맙, 골리무맙, 및 세르톨리주맙을 포함하고, 조합 요법으로 사용될 수 있다. 다른 기전에 의해 작용하는 유용한 화합물은 항-VLA-4 항체, 예컨대 나탈리주맙, 항-인테그린 α4β7 항체, 예컨대 베돌리주맙, 항-박테리아제, 예컨대 리팍시민 (rifaximin), 및 지사제, 예컨대 로페라미드 (loperamide)를 포함한다. (Mozaffari et al. Expert Opin . Biol . Ther . 2014, 14, 583-600; Danese, Gut, 2012, 61, 918-932; Lam et al., Immunotherapy, 2014 , 6, 963-971.)
다른 양상에서, 그러므로, 본 발명은 위장관 염증 장애의 치료에 사용하기 위한 치료적 조합물을 제공하고, 상기 조합물은 본 발명의 화합물 및 위장관 염증 장애를 치료하는데 유용한 하나 이상의 다른 치료제를 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 본 발명의 화합물 및, 아미노살리실레이트, 스테로이드, 전신 면역억제제, 항-TNFα 항체, 항-VLA-4 항체, 항-인테그린 α4β7 항체, 항-박테리아제 및 지사제로부터 선택된 하나 이상의 작용제를 포함하는 조합물을 제공한다. 제2 작용제(들)가 포함되는 경우 치료적으로 유효한 양, 즉 본 발명의 화합물과 동시-투여될 때 치료적으로 유익한 효과를 발휘할 수 있는 임의의 양으로 존재한다.
또한, 그러므로, 본 발명의 화합물 및 위장관 염증 장애를 치료하는데 유용한 하나 이상의 다른 치료제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
또한, 방법 양상에서, 본 발명은 위장관 염증 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 발명의 화합물 및 위장관 염증 장애를 치료하는데 유용한 하나 이상의 다른 치료제를 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
조합 요법으로 사용될 때, 상기 작용제는 상기에 개시된 바와 같이 단일 약학적 조성물로 제형화될 수 있거나, 또는 상기 작용제는 동일한 투여 경로 또는 다른 투여 경로로 동시에 또는 개별 시간에 투여되는 개별 조성물로 제공될 수 있다. 개별로 투여되는 경우, 상기 작용제는 원하는 치료 효과를 제공하기 위해서 시간적으로 충분히 가깝게 투여된다. 상기 조성물이 개별로 패키지될 수 있거나, 또는 키트 (kit)로 함께 패키지될 수 있다. 상기 키트내에 둘 이상의 치료제가 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로로 투여될 수 있다.
염증성 피부 질환
아토피 피부염은, 예를 들어, JAK-STAT 경로에 의존하는 전염증성 시토킨, 구체적으로 IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, 및 IFNγ의 상승과 관련이 있다. 본 발명의 화합물은 모두 4개의 JAK 효소에서 강력한 저해를 나타내기 때문에, 이들은 아토피 피부염 및 다른 염증성 피부 질환의 전염증성 시토킨 특성을 강력하게 저해할 것으로 기대된다. 구체적으로, 실시예 2에 개시된 화합물 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴은 분석 4, 2, 및 5에서 각각 개시된 바와 같은 세포 분석에서 IL-4, IL-13, 및 IFNγ의 저해에 대해 50 nM 또는 미만의 IC50 값을 나타내었다. 상기 화합물은 또한 마우스에서 TPA-유도된 자극 접촉 피부염 모델에서 용량- 및 농도-의존성 효과를 나타내었다. 또한, 실시예 2의 화합물의 모델 크림 및 연고 제형들은, 검출가능한 혈장 노출 없이, 피부 수준이 마우스에서 적어도 2일 동안 및 미니-피그 (mini-pig)에서 적어도 7일 동안 지속되는 것으로 나타났다.
유의한 전신 수준 없이 JAK 저해제의 지속되는 피부 수준은 전신-유도된 유해 효과 없이 피부에서 강력한 국소 항-염증 및 항-소양성 활성을 유도할 것으로 기대된다. 이러한 화합물은, 이에 한정되는 것은 아니지만, 아토피 피부염, 원형탈모증 (alopecia areata), 백반증 (vitiligo), 피부 T 세포 림프종 (cutaneous T cell lymphoma), 결절성 가려움발진 (prurigo nodularis), 편평태선 (lichen planus), 원발성 국소 피부 아밀로이드증 (primary localized cutaneous amyloidosis), 물집유사천포창 (bullous pemphigoid), 이식편대 숙주 질환의 피부 증상, 유사천포창 (pemphigoid), 원반모양 루푸스 (discoid lupus), 고리육아종 (granuloma annulare), 목덜미단순태선 (lichen simplex chronicus), 외음부/음낭/항문주위 소양증, 경화태선 (lichen sclerosus), 대상포진신경통후 가려움 (post herpetic neuralgia itch), 모공 편평 태선 (lichen planopilaris), 및 탈모털집염 (foliculitis decalvans)을 포함하는 다수의 피부 염증 또는 소양성 병태에 유익할 것으로 기대된다. 구체적으로, 아토피 피부염 (Bao et al., JAK -STAT, 2013, 2, e24137), 원형탈모증 (Xing et al., Nat Med. 2014, 20, 1043-1049), 백반증 (Craiglow et al, JAMA Dermatol. 2015, 151, 1110-1112), 피부 T 세포 림프종 (Netchiporouk et al., Cell Cycle. 2014; 13, 3331-3335), 결절성 가려움발진 (Sonkoly et al., J Allergy Clin Immunol . 2006, 117, 411-417), 편평태선 (Welz-Kubiak et al., J Immunol Res. 2015, ID:854747), 원발성 국소 피부 아밀로이드증 (Tanaka et al., Br J Dermatol. 2009, 161, 1217-1224), 물집유사천포창 (Feliciani et al., Int J Immunopathol Pharmacol. 1999, 12, 55-61), 및 이식편대 숙주 질환의 피부 증상 (Okiyama et al., J Invest Dermatol . 2014, 134, 992-1000)은 JAK 활성화를 통해 시그날 전달하는 특정 시토킨의 상승을 특징으로 한다. 따라서, 본 발명의 화합물은 상기 시토킨에 의해 유도된 관련된 피부 염증 또는 소양증을 완화시킬 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 화합물은 아토피 피부염 및 다른 염증 피부 질환의 치료에 유용할 것으로 기대된다.
일 양상에서, 그러므로, 본 발명은 포유동물 (예컨대, 인간)에서 염증성 피부 질환을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 발명의 화합물 및 약학적 담체를 포함하는 약학적 조성물을 상기 포유동물의 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 일 양상에서, 상기 염증성 피부 질환은 아토피 피부염이다.
본 발명의 화합물은 또한 그람 양성 항생제, 예컨대 무피로신 (mupirocin) 및 푸시드산 (fusidic acid)과 조합하여 사용되어, 염증성 피부 질환을 치료할 수 있다. 일 양상에서, 그러므로, 본 발명은 포유동물에서 염증성 피부 질환을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 발명의 화합물 및 그람 양성 항생제를 상기 포유동물의 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 다른 양상에서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 그람 양성 항생제, 및 약학적으로-허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 화합물은 하기 실시예에서 개시되는 바와 같이, 효소 결합 분석에서 JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2 효소의 강력한 저해제이고 또한 세포 분석에서 세포독성이 없는 강력한 기능적 활성을 갖는 것으로 나타났다.
실시예
하기 합성 및 생물학적 실시예는 본 발명을 서술하기 위해 제공되었고, 어느 방식으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 의도되지 않았다. 하기 실시예에서, 하기 약어들은 달리 지시하지 않는 한 하기 의미를 갖는다. 하기에 정의되지 않은 약어는 그의 일반적으로 받아들여지는 의미를 갖는다.
ACN = 아세토니트릴
CPME = 시클로펜틸 메틸 에테르
d = 일수 (day(s))
DIPEA = N,N-디이소프로필에틸아민
DMF = N,N-디메틸포름아미드
DMSO = 디메틸 술폭시드
EtOAc = 에틸 아세테이트
EtOH = 에틸 알콜
h = 시간 (hour(s))
HATU = N,N,N ',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트
IPA = 이소프로필 알콜
MeOH = 메탄올
min = 분 (minute(s))
NMP = N-메틸피롤리돈
RT = 실온
TEA = 트리에틸아민
THF = 테트라히드로푸란
TFA = 트리플루오로아세트산
Xantphos = 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐
Xphos = 디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐
XphosPd G2 = 클로로(2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐)[2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)]팔라듐(II)
시약 및 용매는 상업적 공급처 (Aldrich, Fluka, Sigma 등)로부터 구입하였고, 추가의 정제 없이 사용하였다. 반응 혼합물의 진행은 얇은 막 크로마토그래피 (thin layer chromatography: TLC), 분석적 고성능 액체 크로마토그래피 (analytical high performance liquid chromatography: anal. HPLC), 및 질량 분광법으로 모니터링하였다. 반응 혼합물들은 각 반응에서 구체적으로 기재된 바와 같이 구축되었다; 흔히 상기 반응 혼합물은 추출 및 기타 정제 방법, 예컨대 온도- 및 용매-의존성 결정화, 및 침전에 의해 정제되었다. 더욱이, 반응 혼합물은, 통상적으로 C18 또는 BDS 컬럼 팩킹 (column packings) 및 기존의 용리액을 이용한, 컬럼 크로마토그래피 또는 분취 HPLC (preparative HPLC)에 의해 일상적으로 정제된다. 통상적인 분취 HPLC는 하기에 개시되어 있다.
반응 산물의 특징분석은 질량 및 1H-NMR 분광법에 의해 일상적으로 수행되었다. NMR 분석을 위해, 시료를 중수소화 용매 (예컨대 CD3OD, CDCl3, 또는 d 6 -DMSO)에 용해시키고, 1H-NMR 스펙트럼을 표준 관찰 조건하에 Varian Gemini 2000 기기 (400 MHz)로 수득하였다. 화합물의 질량 분광분석적 확인은, 자동정제 시스템 (autopurification systems)과 결합된, Applied Biosystems (Foster City, CA) 모델 API 150 EX 기기 또는 Waters (Milford, MA) 3100 기기로 전자분무 이온화 방법 (electrospray ionization method: ESMS)에 의해 수행되었다.
달리 지시하지 않는 한, 하기 조건을 분취 HPLC 정제를 위해 사용하였다.
컬럼: C18, 5　μm 21.2 x 150 mm 또는 C18, 5 μm 21 x 250 mm 또는 C14, 5 μm 21x150 mm
컬럼 온도: 실온
유속: 20.0 mL/분
이동상: A = 물 + 0.05 % TFA
B = ACN + 0.05 % TFA,
주입 부피: (100-1500 μL)
검출기 파장: 214 nm
조질 (crude) 화합물을 1:1의 물:아세트산 중에 약 50 mg/mL로 용해시켰다. 4분 분석 스케일 테스트 실행 (analytical scale test run)을 2.1 x 50 mm C18 컬럼을 사용하여 수행하고, 그 다음에 15 또는 20분 분취 스케일 실행 (preparative scale run)을 분석 스케일 테스트 실행의 % B 보유 (retention)에 기반한 구배로 100μL 주입을 사용하여 수행하였다. 정확한 구배는 시료 의존성이다. 근접한 실행 불순물을 갖는 시료는 최적의 분리를 위해 21 x 250 mm C18 컬럼 및/또는 21 x 150 mm C14 컬럼으로 확인되었다. 원하는 산물을 포함하는 분획물은 질량 분광 분석으로 확인되었다.
분석적 HPLC 조건
방법 A
컬럼: LUNA C18 (2), 150 x 4.60 mm, 3 μm
컬럼 온도: 37℃
유속: 1.0 mL/분
주입 부피: 5 μL
시료 제조: 1:1의 ACN:물 중에 용해
이동상: A = 물:ACN:TFA (98:2:0.05)
B = 물:ACN:TFA (2:98:0.05)
검출기 파장: 250 nm
구배: 32분 전체 (시간 (분)/ % B): 0/2, 10/20, 24/90, 29/90, 30/2, 32/2
방법 B
컬럼: LUNA C18 (2), 150 x 4.60 mm, 3 μm
컬럼 온도: 37℃
유속: 1.0 mL/분
주입 부피: 10 μL
시료 제조: 1:1의 ACN:물 중에 용해
이동상: A = 물:ACN:TFA (98:2:0.05)
B = 물:ACN:TFA (10:90:0.05)
검출기 파장: 254 nm
구배: 35분 전체 (시간 (분)/ % B): 0/2, 20/25, 23/90, 26/90, 27/2, 35/2
제조예 1: (3-((2,6- 디클로로피리미딘 -4-일)아미노)-1 H - 피라졸 -5-일)메탄올
Figure pct00018
EtOH (80 mL) 중 2,4,6-트리클로로피리미딘 (8.0 g, 43.7 mmol) 및 (3-아미노-1H-피라졸-5-일)메탄올 (7.4 g, 65.4 mmol)의 혼합물에 DIPEA (11.3 g, 87.2 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 20 ℃에서 12시간 동안 교반하였고 및 여과하여 상기 표제의 중간체 (6.5 g, 57 % 수득율)를 백색 고체로 제공하였다. (m/z):　C8H7Cl2N5O에 대한 [M+H]+ 계산치 260.00 실측치 260.0.
제조예 2: (3-((2-(((1 R ,3 s ,5 S )-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00019
(a) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-클로로-6-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
DMSO (60 mL) 중 (3-((2,6-디클로로피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (6.0　g, 23.1 mmol), tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-아미노-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 (6.3 g, 27.7　mmol), 및 DIPEA (6.0 g, 46.2 mmol)의 혼합물을 100 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 파일롯 스케일 실행 (pilot scale run)의 산물과 조합하였고 및 물 (800　mL)로 부었다. 침전물을 여과하였고 및 진공에서 건조하였다. 잔류물을 EtOAc (500 mL) 및 석유 에테르 (500 mL)로부터 재결정화하여 표제의 중간체 (5.6 g, 50 % 수득율)를 회색 고체로 제공하였다. 구조는 NMR로 확인하였다.
(b) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
MeOH (30 mL) 중 소듐 메톡시드 (2.4 g, 44.5 mmol)의 용액에 이전 단계의 산물 (2.0 g, 4.45 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밀봉된 튜브에서 100 ℃에서 8시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 파일롯 스케일 실행의 산물과 조합하였고, 물 (30 mL)로 붓고, 및 EtOAc (3　x　50　mL)로 추출하였다. 유기 층을 브라인 (brine) (2 x 30 mL)으로 세척하였고, Na2SO4상에서 건조하였고, 여과하였고, 및 진공에서 농축하였다. 잔류물을 분취 HPLC (Daiso 250 x 50 mm 10 μm, 80　mL/분, 30-55 % ACN　+　0.1　%　TFA/ACN)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체 (0.7 g, 32 % 수득율)를 백색 고체로 제공하였다. (m/z):　C21H31N7O4에 대한 [M+H]+ 계산치 446.24 실측치 446.2.
(c) (3-((2-(((1R,3s,5S)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올
EtOAc 중 4 M HCl (20　mL) 중 이전 단계의 산물 (0.7 g, 1.57 mmol)의 용액을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였고, 및 진공에서 농축하여 상기 표제의 화합물의 HCl 염 (0.6 g, 99 % 수득율)을 백색 고체로 제공하였다. (m/z):　C16H23N7O2에 대한 [M+H]+ 계산치 346.19 실측치 346.2.
제조예 3: tert -부틸 ( 1 R ,3 s ,5 S )-3-( 메틸아미노 )-8- 아자비시클로[3.2.1]옥탄 -8-카르복실레이트
Figure pct00020
(a) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-아미노-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 (5.21 g, 23.00 mmol), DMF (115 ml), 및 트리에틸아민 (6.41 mL, 46.0　mmol)의 용액을 RT에서 15분 동안 교반하였다. 벤질 클로로포르메이트 (3.56 mL, 25.3 mmol)를 적상으로 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하였고, 물로 퀀칭하였고 (quenched), 및 EtOAc (4 x 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 분획물들을 브라인 (2 x 20 mL)으로 세척하였고, 소듐 술페이트상에서 건조하였고, 여과하였고, 및 농축하여 황색 오일 (yellow oil)을 제공하고, 이를 컬럼 크로마토그래피 (120 g 컬럼; 헥산 중 0-70% EtOAc)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체를 진하고, 맑은 오일 (3.79 g, 36　% 수득율; 79% 순도)로 제공하였다. (m/z):　C20H28N2O4에 대한 [M+H]+ 계산치 361.20 실측치 361.2.
(b) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-(((벤질옥시)카르보닐)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
DMF (41.5　mL) 중 이전 단계의 산물 (2.99 g, 8.29 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각시켰고 및 소듐 히드리드, 미네랄 오일 중 60% 분산물 (0.398　g, 16.58 mmol)을 한번에 첨가하였다. 결과의 (resulting) 현탁액을 0 ℃에서 15분 동안 교반하였고, 그 다음에 요오도메탄 (1.03 mL, 16.58 mmol)을 적상으로 첨가하였고 및 결과의 흐린, 연황색 (pale yellow) 혼합물을 0 ℃에서 15분 동안 교반하였고, RT로 가온하였고 및 2시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물로 퀀칭하였고 및 EtOAc (4 x 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 분획물들을 브라인 (2　x　20　mL)으로 세척하였고, 소듐 술페이트상에서 건조하였고, 여과하였고, 및 농축하여 맑은, 연황색 오일을 제공하였고, 이를 컬럼 크로마토그래피 (80 g 컬럼; 헥산 중 0-70% EtOAc)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체를 맑은, 무색의 진한 오일로 제공하였다 (2.07 g, 65 % 수득율; 97 % 순도). (m/z):　C21H30N2O4에 대한 [M+H]+ 계산치 375.22 실측치 375.5.
(c) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-(메틸아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
100 mL 플라스크에 탄소 상의 팔라듐, 10 % wt. (0.577 g, 0.542　mmol)를 첨가하였다. 상기 물질을 질소에 노출시켰고 그 다음에 MeOH (54.2 mL) 중 이전 단계의 산물 (1.015　g, 2.71 mmol)의 용액을 피펫으로 천천히 첨가하였다. 수소 기체 벌룬 (gas balloon)을 부착시켰다. 상기 플라스크를 비우고 및 다시 수소로 3회 채우고 H2 기체로 대기를 완전히 열었다. 상기 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였고, Celite®의 패드를 통해 여과하였고, 및 농축하여 맑은 오일을 제공하였고, 이를 컬럼 크로마토그래피 (40 g 컬럼; DCM 중 0-100% MeOH)에 의해 정제하여 산물을 맑은 오일로 제공하였다. 상기 컬럼을 10:1 MeOH:TEA로 플러시하였다 (flushed). 상기 여과물을 농축하여서 진한, 맑은 오일을 백색 고체로 제공하였고 이를 EtOAc에 용해시켰고, 여과하였고, 맑은 오일 산물과 조합하고 및 농축하여 상기 표제의 중간체를 제공하였다 (0.559 g, 86 % 수득율) (m/z):　C13H24N2O2에 대한 [M+H]+ 계산치 241.18 실측치 241.3.
제조예 4: (3-((2-(((1 R ,3 s ,5 S )-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00021
(a) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-클로로-6-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트
(3-((2,6-디클로로피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (200　mg, 0.77 mmol), tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-(메틸아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 (194 mg, 0.81 mmol) 및 TEA (0.29 mL, 1.92 mmol)의 용액을 DMSO (5 mL)에서 밤새 60 ℃에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 조질의 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체 (143 mg, 0.31 mmol, 40 % 수득율)를 제공하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
(b) (3-((2-(((1R,3s,5S)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)(메틸)아미노)-6-클로로피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올
ACN (3.0　mL)에 용해된 이전 단계의 산물 (143 mg, 0.31 mmol)에 디옥산 중 4 N HCl (1.156 mL 4.62 mmol)을 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 상기 표제 중간체의 HCl 염을 제공하였고 이를 다음 단계에서 정제 없이 사용하였다.
(c) (3-((2-(((1R,3s,5S)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올
MeOH (5 mL) 중 이전 단계의 산물 (112 mg, 0.280 mmol)의 교반된 용액에 MeOH 중 50 % 소듐 메톡시드 (0.960 mL, 8.39 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밀봉된 바이알에서 80 ℃에서 밤새 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고 및 조질의 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 상기 표제의 산물을 제공하였다 (27 mg, 0.057 mmol, 20 % 수득율).
제조예 5: (3-((2-((( 1 R ,3 s ,5 S )-9- 아자비시클로[3.3.1]노난 -3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00022
(a) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-클로로-6-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
DMSO (37 mL) 중 (3-((2,6-디클로로피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (3.7 g, 14.2 mmol) 및 tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-아미노-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (4.1　g, 17.0 mmol)의 혼합물에 DIPEA (3.7 g, 28.4 mmol)를 질소하에 첨가하였다. 상기 반응을 120 ℃에서 12시간 동안 교반하였고, 물 (80 mL)로 붓고, EtOAc (3　x　100　mL)로 추출하였고, 건조하였고, 및 농축하여 조질의 산물을 제공하였고, 이를 EtOAc (20　mL)로 세척하여, 상기 표제의 중간체 (3.8 g, 56 % 수득율)를 백색 고체로 제공하였다.
(b) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
4개의 반응을 병렬로 (in parallel) 수행하였다. MeOH 중 소듐 메톡시드 (10 mL) 중 이전 단계의 산물 (0.95 g, 2.0 mmol)의 혼합물을 120 ℃에서 3시간 동안 밀봉된 튜브에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물 (50 mL)에 첨가하였고 및 EtOAc (3 x 50　mL)로 추출하였다. 유기 층을 브라인 (30 mL)으로 세척하였고, Na2SO4상에서 건조하였고, 및 진공에서 농축하였다. 잔류물을 분취 HPLC (Luna C18 250　x　50　mm 10 μm, ACN　+　0.1　%　TFA/ACN)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체 (1.2 g 조합된 산물, 28 % 수득율)를 갈색 고체로 수득하였다. (m/z):　C22H33N7O4에 대한 [M+H]+ 계산치 460.26 실측치 460.3.
(c) (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올
이전 단계의 산물 (1.2 g, 2.5 mmol)에 EtOAc 중 4 M HCl (50 mL)을 첨가하였다. 상기 반응을 25 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔류물을 제조 산물과 1.5 mmol 스케일로 조합하였고 및 농축하여 상기 표제의 중간체 (2.0 g, 100 % 수득율)를 밝은 황색 고체로 제공하였다. (m/z):　C17H25N7O2에 대한 [M+H]+ 계산치 360.43 실측치 360.4.
제조예 6: (3-((2-((( 1 R ,3 s ,5 S )-9- 아자비시클로[3.3.1]노난 -3-일)( 메틸 )아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00023
(a) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-클로로-6-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
DMSO (80 mL) 중 (3-((2,6-디클로로피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (6.5　g, 24.9 mmol), tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-(메틸아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (6.9 g, 27.4 mmol)의 혼합물에 DIPEA (6.4 g, 49.8 mmol)를 질소하에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 120 ℃에서 8시간 동안 교반하였고, 물 (80 mL)로 붓고, EtOAc (500 mL)로 추출하였고, 건조하였고, 및 농축하여 조질의 산물을 제공하였다. 상기 조질의 산물을 개별 제조의 산물과 동일한 스케일로 조합하였고 및 분취 HPLC (Daiso 150　x　25　mm 5 μm, 80 mL/분, 35-60 % ACN　+　0.1　%　TFA/ACN)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체 (16.0 g, 64 % 수득율)를 밝은 황색 고체로 제공하였다. (m/z):　C22H32ClN7O3에 대한 [M+H]+ 계산치 478.23 실측치 478.2.
(b) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
MeOH (20　mL) 중 이전 단계의 산물 (2.0 g, 4.19 mmol)의 혼합물에 소듐 메톡시드 (2.2 g, 41.9 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 120 ℃에서 6시간 동안 밀봉된 튜브에서 12시간 동안 교반하였고, 물 (100 mL)로 붓고, EtOAc (800 mL)로 희석하였고, 브라인 (50 mL)으로 세척하였고, 건조하였고, 및 농축하여 조질의 산물을 제공하였다. 조질의 산물을 개별 제조의 산물과 2 mmol 스케일로 조합하였고 및 분취 HPLC (Synergi Max-RP, 250　x 50 mm 10 μm, 80　mL/분, 25-50 % ACN　+　0.1　%　TFA/ACN)에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체 (2.1 g, 71 % 수득율)를 백색 고체로 제공하였다.
(c) (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올
EtOAc (20　mL) 중 이전 단계의 산물 (2.1 g, 4.43 mmol)의 혼합물에 EtOAc 중 4 M HCl (20 mL)을 첨가하였고, 및 상기 반응을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였고 및 농축하여 산물의 HCl 염 (2.0 g, 100 % 수득율)을 백색 고체로 제공하였다. (m/z):　C18H27N7O2에 대한 [M+H]+ 계산치 374.22 실측치 374.1.
실시예 1: 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴
Figure pct00024
DMF (4.0　mL) 중 (3-((2-((1R,3s,5S)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (15 mg, 0.042 mmol)의 용액에 DIPEA (0.022 ml, 0.125 mmol) 그 다음에 3-시아노-1-아제티딘술포닐클로리드 (7.54 mg, 0.042 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하였고 및 조질의 잔류물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염을 제공하였다 (3.2 mg). (m/z):　C21H29N9O4S에 대한 [M+H]+ 계산치 504.21 실측치 504.1.
실시예 2: 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴
Figure pct00025
0 ℃에서 DMF (3 mL) 중 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 HCl (150　mg, 0.402 mmol) 및 DIPEA (0.351 mL, 2.008 mmol)의 용액에 3-시아노-1-아제티딘술포닐클로리드 (72.5 mg, 0.402 mmol)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 그 다음에 RT에서 15시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 적색 액체를 수득하였고 이를 분취 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염 (72.4 mg, 0.115 mmol, 28.5 % 수득율)을 백색 고체로 수득하였다. (m/z):　C22H31N9O4S에 대한 [M+H]+ 계산치 518.22 실측치 518.
실시예 3: (3-((6-메톡시-2-(메틸((1 R ,3 s ,5 S )-9-(메틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00026
DMF (7.0　mL) 중 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 HCl (250 mg, 0.669 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각시켰고 및 DIPEA (0.35 mL, 2.008 mmol)를 한번에 첨가하였고 그 다음에 메탄술포닐 클로리드 (0.053 mL, 77 mg, 0.676 mmol)를 적상으로 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였고, 1:1 아세트산:물 (6 mL)에 용해시켰고, 여과하였고, 및 분취 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염 (94 mg, 31 % 수득율)을 백색 분체로 제공하였다. (m/z):　C19H29N7O4S에 대한 [M+H]+ 계산치 452.15 실측치 452.2.
실시예 4: (3-((6-메톡시-2-(((1 R ,3 s ,5 S )-9-((2-메톡시에틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1 H -피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00027
DMF (7.0　mL) 중 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 HCl (250 mg, 0.703 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각시켰고 및 DIPEA (0.35 mL, 2.008 mmol)를 한번에 첨가하였고 그 다음에 2-메톡시-에탄술포닐 클로리드 (111 mg, 0.676 mmol)를 적상으로 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였고, 1:1 아세트산:물 (6　mL)에 용해시켰고, 여과하였고, 및 분취 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염 (41 mg, 12 % 수득율)을 백색 고체로 제공하였다. (m/z):　C21H33N7O5S에 대한 [M+H]+ 계산치 496.23 실측치 496.2.
실시예 5: 3-((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-프로판니트릴
Figure pct00028
MeOH (4.0　mL) 중 (3-((2-((1R,3s,5S)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (15 mg, 0.042 mmol)의 용액에 DIPEA (0.022 mL, 0.125 mmol) 그 다음에 아크릴로니트릴 (2.70 μL, 0.042 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였고, 진공에서 농축하였고 및 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염을 제공하였다 (4.3 mg). (m/z):　C20H28N8O2에 대한 [M+H]+ 계산치 413.23 실측치 413.2.
실시예 6: 5-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴
Figure pct00029
디이소프로필아민 (0.032 mL, 0.225 mmol) (0.256 mL)을 DMF 중 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (29.8 mg, 0.075 mmol)의 0.15 M 용액에 첨가하였고 및 상기 용액을 저어서 모든 물질을 용해시켰다. 상기 용액에 DMF 중 4-(클로로메틸)-피콜리노니트릴)의 0.23 M 용액 (0.5 mL, 34 mg, 0.113 mmol)을 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 폴리스티렌-티오페놀 수지 (0.115 g, 0.150 mmol)를 첨가하였고, 상기 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하였고 및 여과하였다. 상기 반응 용기를 DMF (0.5 mL)로 세척하였고 및 상기 세척물들 (washes)을 조합하였고, 회전 증발로 농축하였고, 1:1 아세트산:물에 용해시켰고, 여과하였고, 및 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염을 제공하였다 (6.4　mg). (m/z):　C24H29N9O2에 대한 [M+H]+ 계산치 476.24 실측치 476.1.
실시예 7: 5-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)니코티노니트릴
Figure pct00030
(3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 HCl (20 mg, 0.054 mmol), 5-(브로모메틸)니코티노니트릴 (10.55 mg, 0.054 mmol) 및 포타슘 카르보네이트 (22.20　mg, 0.161 mmol)의 용액을 DMF (6.0 mL)에서 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고 및 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 중간체의 TFA 염을 제공하였다 (3.7 mg). (m/z):　C25H31N9O2에 대한 [M+H]+ 계산치 490.26 실측치 490.2.
실시예 8: 이소부틸 (1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
Figure pct00031
0 ℃에서 DMF (305 μL) 중 (3-((2-((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올, HCl (25 mg, 0.061 mmol) 및 DIPEA (42.6 μL, 0.244 mmol)의 용액에 DMF (305 μL) 중 이소부틸 클로로포르메이트 (10　mg, 0.073 mmol)를 적상으로 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 5분 동안 교반하였고 그 다음에 RT에 도달하였다. 24시간 후에, 상기 반응 혼합물을 농축하였고, 1:1 ACN:물에 용해시켰고 및 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염을 제공하였다 (6.4 mg). (m/z):　C23H35N7O4에 대한 [M+H]+ 계산치 474.28 실측치 474.2.
실시예 9: 2,2-디플루오로-1-((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온
Figure pct00032
HATU (0.029 g, 0.077 mmol)를 DMF (3 mL) 중 2,2-디플루오로아세트산 (6.72 mg, 0.070 mmol)의 용액에 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 5분 동안 교반하여 활성화된 산의 0.14 M 용액을 제조하였다. 상기 활성화된 산의 0.14 M 용액 (0.5 mL, 0.070 mmol)을 DMF 중 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 HCl (29 mg, 0.070 mmol) 및 DIPEA (0.049 mL, 0.280 mmol)의 용액에 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였고, 진공에서 농축하였고 및 결과의 잔류물을 1:1 아세트산:물에 용해시켰고 및 역상 HPLC에 의해 정제하여 상기 표제의 화합물의 TFA 염을 제공하였다 (3.9 mg). C20H27N7O3에 대한 [M+H]+ 계산치 452.21 실측치 452.1.
유사한 합성 방법을 사용하여, 표 1-3의 화합물들을 제조하였다.
Figure pct00033
Figure pct00034
Figure pct00035
실시예 10: 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴
Figure pct00036
(a) 5-(((트리이소프로필실일)옥시)메틸)-1H-피라졸-3-아민 (3')
Figure pct00037
100 mL 플라스크에 (3-아미노-1H-피라졸-5-일)메탄올 (5.8 g, 51.3 　mmol), 1-메틸-2-피롤리디논 (58.0 mL) 및 이미다졸 (4.54 g, 66.7 mmol) 그 다음에 트리이소프로필실일 클로리드 (11.95 mL, 56.4 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 22 ℃에서 밤새 교반하였고 그 다음에 EtOAc (145 mL) 및 물 (145 mL)을 첨가하였다. 상기 층들을 분리시켰고 및 유기 층을 물 (145 mL) 및 브라인 (15 %, 100 mL)으로 세척하였고, Na2SO4상에서 건조하였고, 및 감압하에 증발시켜서 상기 표제의 중간체 (13.33 g, 49.5　mmol, 96 % 수득율)를 제공하였다 HPLC 방법 A 체류 시간 19.00분.
(b) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-클로로-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (9')
Figure pct00038
THF (300 mL) 중 2,4-디클로로-6-메톡시피리미딘 (20 g, 112 mmol) 및 (1R,3s,5S)-tert-부틸 3-(메틸아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (36.9 g, 145 mmol)의 혼합물에 DIPEA (39.0 mL, 223 mmol)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 20-25　℃에서 밤새 교반하였다. 부가의 (1R,3s,5S)-tert-부틸 3-(메틸아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (4.26 g, 16.76 mmol)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 55 ℃로 가온하였고, 2.5시간 동안 교반하였고, RT로 냉각시켰고 및 2일 동안 교반하였다. 헵탄 (400 mL)을 30분에 걸쳐 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 여과하였다. 액체 상을 IPA (300 mL, 그 다음에 200　mL)로 약 200-300　mL까지 공비혼합하였고 (azeotroped), 5 ℃에서 밤새 교반하였고, 및 여과하여 상기 표제의 중간체 (29.2 g, 71.4 mmol, 63.9 % 수득율)를 제공하였다. HPLC 방법 A 체류 시간 28.27분.
(c) tert-부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-메톡시-6-((5-(((트리이소프로필실일)옥시)메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (7')
Figure pct00039
250 mL 플라스크에 이전 단계의 산물 (9') (8 g, 20.16　mmol), 단계 (a)의 산물 (3') (6.79 g, 25.2 mmol), Cs2CO3 (13.13 g, 40.3 mmol), Xphos Pd G2 (0.793 g, 1.008 mmol) 및 XPhos (0.480 g, 1.008 mmol)를 첨가하였고, 상기 반응 혼합물을 3회 탈기시켰고 (degassed) 및 1,4-디옥산 (80 mL) 및 물 (8.00 mL)을 첨가하여 현탁액을 제공하였다. 상기 반응 혼합물을 3회 진공 및 질소하에 탈기시켰고 및 100 ℃로 가열하였고, 밤새 환류시켰고 (refluxed), 및 35 ℃로 냉각시켰다. SiliaMetS® 티올 관능화된 실리카 (thiol functionalized silica) (4 g)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 65 ℃로 가온하였고, 2시간 동안 교반하였고, 50 ℃로 냉각시켰고 및 Celite® (5 g)를 통해 여과시켰다. 물 (200　mL) 및 이소프로필 아세테이트 (200 mL)를 첨가하였고, 층들을 분리시켰고, 및 유기 층을 20 % NaHSO3로 세척하였다. 상기 층들을 분리시켰고 및 유기 층을 브라인으로 세척하였다. 층들을 다시 분리시켰고 및 수성 층을 EtOAc (300 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 층들을 Na2SO4상에서 건조하였고 및 증발시켜서 조질의 산물 (약 20 g)을 제공하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 교반하였고, 여과하였고 및 메탄올 (10 mL)로 세척하여 고형물을 제거하여 상기 표제의 화합물을 메탄올 용액으로 제공하였고 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. HPLC 방법 A: 체류 시간 16.05분.
(d) (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (1)
Figure pct00040
250 mL 플라스크에 메탄올 (50　mL) 중 조질의 이전 단계의 산물 (7') (12.68 g, 20.136 mmol) 및 CPME 중 3 M HCl (67.1 mL, 201 mmol)을 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 2시간 동안 교반하였고, 및 여과하여 상기 표제 화합물의 조질의 3 HCl 염 (4.8 g, 9.94 mmol, 49.4 % 수득율)을 제공하였다.
플라스크에 상기 조질의 3 HCl 염 (2 g, 4.14 mmol) 그 다음에 물 (30 mL) 및 SiliaMetS 티올 관능화된 실리카 40 % w/w (0.8 g, 4.14 mmol)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 65 ℃로 가온하였고, 16시간 동안 교반하였고, Celite를 통해 여과하였고 및 물 (1.5 mL)로 세척하였다. 아세톤 (120 mL)을 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였고, 여과하였고, 아세톤 (10 mL)으로 세척하였고 및 50 ℃에서 진공에서 건조하여 상기 표제 화합물의 정제된 3 HCl 염을 제공하였다 (1.05 g, 2.175 mmol, 52.5 % 수득율). HPLC 방법 A: 체류 시간 10.09분.
(e) 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴
바이알에 이전 단계의 산물 (1) (0.83 g, 1.719 mmol) 및 NMP (8.3 mL), 그 다음에 TEA (1.44 mL, 10.31 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 5-10분 동안 교반하였다. 3-시아노아제티딘-1-술포닐 클로리드 (0.466 g, 2.58 mmol)를 22 ℃에서 첨가하였다. 2시간 후에, 물 (25 mL)을 30분에 걸쳐 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 22시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 여과하였고 및 물 (2 mL)로 세척하여 상기 표제의 산물 (0.9 g, 1.704 mmol, 99 % 수득율)을 백색 고체로 제공하였다. HPLC 방법 A: 체류 시간 16.18분.
실시예 11: 결정 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 형태 I
100 mL 플라스크에 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((3-(히드록시메틸)-1H-피라졸-5-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 (1 g, 1.932 mmol) 및 DMF (3.00 mL) 그 다음에 아세톤 (4 mL)을 첨가하였다. 물 (6 mL)을 그 다음에 5분에 걸쳐서 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였고 및 여과하였고, 및 고형물을 물 및 아세톤으로 세척하였고, 및 30분 동안 건조시켜서 상기 표제의 화합물을 제공하였다 (0.94 g, 1.816　mmol, 94 % 수득율). HPLC 방법 A: 체류 시간 16.30분.
실시예 12: 결정 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 형태 I
20 L 플라스크에 (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올 (1) (1.20　kg, 2.69 mol), NMP (4.8 kg) 및 TEA (1.36 kg, 13.45 mol)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 RT에서 2시간 동안 교반하였다. 다음, NMP (2.4 kg)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 교반하였고 및 5-10 ℃로 약 1시간에 걸쳐 냉각시켰다. 3-시아노아제티딘-1-술포닐 클로리드 (0.58 kg, 3.23　mol)를 3 배치 (batches)로 첨가하였고, 매 0.5시간 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였고 및 RT로 가온시켰다. 메탄올 (4.2 kg)을 첨가하였고, 상기 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 물 (21.6 kg)을 3시간에 걸쳐 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였고 및 여과하였다. 고형물을 메탄올 (1.0 kg)로 린스하여 (rinsed) 조질의 표제 화합물 (1.33 kg)을 제공하였고 그의 1.20 kg을 NMP (3.6 kg)에 용해시켰다. 아세톤 (3.8 kg)을 첨가하였고, 용액을 여과하였고 및 상기 여과물을 교반하면서 45-55　℃로 가열시켰다. 물 (6.6 kg)을 6시간에 걸쳐 첨가하였고 및 상기 혼합물을 교반하였고, 25-30 ℃로 냉각시켰고 및 여과하였다. 고형물을 4:5.5 아세톤:물 (1.5 L)로 린스하였고 및 건조하여 상기 표제의 화합물 (1.21 kg, 99 % 순도, 85 % 수득율)을 제공하였다. HPLC 방법 B: 체류 시간 15.23분. 상기 산물을 에어 제트 밀링 공정 (air jet milling process)을 사용하여 하기 입자 크기 분포로 미립화하였다: X10 = 0.70 μm, X50 = 2.17 μm, 및 X90　=　6.15　μm, 여기서 Xn은 n %보다 더 작은 입자 퍼센트로 정의된다.
실시예 13: 결정 1-(((1 R ,3 s ,5 S )-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1 H -피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 형태 II
플라스크에 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴 (16 g, 30.9 mmol) 및 DMF (160 mL)를 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 여과하였다. 상기 용액에 물 (480 mL)을 30분에 걸쳐서 첨가하였고 및 상기 반응 혼합물을 65 ℃로 가온하였고, 밤새 교반하였고, RT로 냉각시켰고, 20시간 동안 교반하였고, 및 여과하였다. 고형물을 밤새 건조시켜서 상기 표제의 중간체 (11.8 g, 22.80　mmol, 73.8 % 수득율)를 제공하였다. HPLC 방법 A: 체류 시간 16.19분.
실시예 14-16: 본 발명의 고체 형태들의 특성
실시예 12 및 13의 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴의 형태 I 및 형태 II 결정 유리염기의 시료들 각각을 분말 X-선 회절 (PXRD), 시차 주사 열량계 (DSC), 열중량 분석 (TGA), 및 동적 수분 흡착 (DMS)에 의해 분석하였다.
실시예 14 분말 X-선 회절
도 1 및 도 5의 분말 X-선 회절 패턴은, 출력 전압 45 kV 및 전류 40 mA를 갖는 Cu-Kα 방사선 (λ = 1.54051 Å)을 사용하는 Bruker D8-Advance X-선 회절계에 의해 수득되었다. 상기 기기는 입사각, 발산각 및 산란 슬릿을 상기 시료에서 세기를 최대화하도록 설정된 Bragg-Brentano 기하학으로 작동되었다. 측정을 위해, 소량의 분말 (5-25 mg)을 시료 홀더에 부드럽게 눌러 매끄러운 표면을 만들고, X-선에 노출시켰다. 상기 시료를, 0.02°의 스텝 크기 (step size) 및 스텝 당 0.30°초의 스캔 속도로, 2θ에서 2°에서 40°까지 2θ-2θ 모드로 스캔되었다. 상기 데이터 수집은 Bruker DiffracSuite 측정 소프트웨어로 제어되었고, Jade 소프트웨어 (버전 7.5.1)로 분석되었다. 상기 기기는 corundum 표준으로 ±0.02° 2θ 각내에서, 검정되었다. 관찰된 PXRD 2θ 피크 위치 및 d-간격 (spacings)은, 결정 형태 I 및 결정 형태 II에 대해, 각각 표 4 및 표 5에 개시되었다. 표 4에 열거된 미분화된 물질의 형태 I의 2-θ 피크 위치를 동일한 합성 과정에 의해 제조된 미분화되지 않은 시료의 피크 위치와 비교하였다. 2-θ 피크 위치들에서 관찰된 최대 차이는 0.04도이다.
Figure pct00041
Figure pct00042
실시예 15: 열 분석
시차 주사 열량계 (DSC)는 Thermal Analyst 컨트롤러가 구비된 TA Instruments Model Q-100 모듈을 사용하여 수행되었다. TA Instruments Thermal Analysis 소프트웨어를 사용하여 데이터가 수집되고 분석되었다. 각 결정 형태의 시료를 뚜껑을 덮은 알루미늄 팬으로 정확하게 칭량하였다. 5℃에서 5분 등온 평형 기간 후, 0℃에서 300℃까지 10℃/분의 선형 가열 램프를 사용하여 시료를 가열하였다. 본 발명의 형태 I 및 형태 II 결정 유리염기의 대표적인 DSC 서모그램을 각각 도 2 및 도 6에 개시하였다.
열중량 분석 (TGA) 측정은 고해상도 능력을 갖춘 TA Instruments Model Q-50 모듈을 사용하여 수행되었다. TA Instruments Thermal Analyst 컨트롤러를 사용하여 데이터가 수집되었고, TA Instruments Universal Analysis 소프트웨어를 사용하여 분석되었다. 칭량된 시료를 백금 팬 상에 놓고, 주위 온도에서 300℃까지 10 ℃의 가열 속도로 스캔하였다. 저울 및 노 챔버를 사용 도중에 질소 흐름으로 퍼지하였다. 본 발명의 형태 I 및 형태 II 결정 유리염기의 대표적인 TGA 트레이스를 도 3 및 7에 개시하였다.
실시예 16: 동적 수분 흡착 평가
동적 수분 흡착 (DMS) 측정은 VTI 대기 마이크로저울, SGA-100 시스템 (VTI Corp., Hialeah, FL 33016)을 사용하여 수행되었다. 칭량된 시료를 사용하였고, 습도는 분석 시작시 가능한 가장 낮은 값 (0% RH에 가까움)이었다. 상기 DMS 분석은 120분 동안 초기 건조 단계 (0% RH), 이후 5% RH 내지 90% RH의 습도 범위에 걸쳐서 5% RH/단계의 스캔 속도로 흡착 및 탈착의 두 사이클로 구성되었다. 상기 DMS 실행은 25 ℃에서 등온적으로 수행되었다. 본 발명의 형태 I 및 형태 II 결정 유리염기의 대표적인 DMS 트레이스를 각각 도 4 및 8에 개시하였다.
생물학적 분석
본 발명의 화합물들은 하기 생물학적 분석들의 하나 이상으로 특성화되었다.
분석 1: 생화학적 JAK 및 오프 - 타켓 (Off-target) 키나제 분석
4개의 LanthaScreen JAK 생화학적 분석 (JAK1, 2, 3 및 Tyk2)의 패널을 통상의 키나제 반응 버퍼 (50 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 10 mM MgCl2, 및 1 mM EGTA)에서 수행하였다. 재조합 GST-태그된 JAK 효소 및 GFP-태그된 STAT1 펩티드 기질은 Life Technologies로부터 입수하였다.
일련의 희석된 화합물들을 4개의 JAK 효소 각각 및 기질과 white 384-웰 미크로플레이트 (Corning)에서 주위 온도로 1시간 동안 사전-인큐베이트하였다. ATP를 후속하여 상기 키나제 반응을 개시하기 위해서 10 μL의 전체 부피로, 1% DMSO와 함께 첨가하였다. JAK1, 2, 3 및 Tyk2에 대한 최종 효소 농도는 각각 4.2 nM, 0.1 nM, 1 nM, 및 0.25 nM이고; 사용된 해당하는 Km ATP 농도는 25 μM, 3 μM, 1.6 μM, 및 10 μM이고; 상기 기질 농도는 모두 4개의 분석에 대해서 200nM이었다. TR-FRET 희석 버퍼 (Life Technologies) 중 EDTA (10mM 최종 농도) 및 Tb-항-pSTAT1 (pTyr701) 항체 (Life Technologies, 2nM 최종 농도)의 10 μL 조제가 첨가되기 전에, 키나제 반응을 1시간 동안 주위 온도에서 진행시켰다. 상기 플레이트를 주위 온도에서 1시간 동안 인큐베이트시키고, EnVision 리더 (Perkin Elmer)에서 판독되었다. 방출 비율 시그날 (520nm/495nm)을 기록하였고, 사용하여 DMSO 및 배경 대조군에 기반한 퍼센트 저해 값을 산출하였다.
용량-반응 분석 (dose-response analysis)에 있어서, 퍼센트 저해 데이터는 화합물의 농도에 대해 플로팅되었고, IC50 값은 Prism 소프트웨어 (GraphPad Software)에 의해 4-parameter robust fit 모델로부터 결정되었다. 결과는 pIC50 (IC50의 음의 로그)으로 표시되었고, 후속하여 Cheng-Prusoff 방정식을 사용하여 pKi (해리 상수, Ki의 음의 로그)로 변환되었다.
4개의 JAK 분석의 각각에서 pKi 값이 더 높은 시험 화합물들은 JAK 활성의 저해가 더 높은 것을 보여주었다. 상기 분석에서 시험된 본 발명의 화합물은 통상적으로 약 7.5 내지 약 10.3의 pKi 값을 나타내었다.
오프-타켓 티로신 키나제 분석 (ABL1, Flt3, RET, FGFR2, NTRK1, 및 pDGFRβ)의 패널은, Life Technologies로부터 입수된 재조합 효소 및 AnaSpec에서 합성된 바이오티닐화 (biotinylated) 펩티드 기질로, 유사한 방법을 사용하여 개발되었다. 모든 분석은 주위 온도에서 최종 ATP 농도 100 μM로 수행되었다. Eu-항-포스포티로신 (pY20) 항체 및 SureLight APC-SA를 포함하는 검출 시약은 Perkin Elmer로부터 구입되었다. 방출 비율 시그날 (665nm/615nm)은 데이터 분석을 위해 기록되고 사용되었고, 최종 결과는 pIC50으로 표시되었다. 본 분석에서 시험된 선택된 화합물은 통상적으로 약 5 내지 약 6.5의 pIC50을 나타내었다.
분석 2: 세포 JAK 효능 분석: IL-13의 저해
JAK-의존성 시토킨 인터루킨-13 (IL-13)의 저해에 대한 시험 화합물들의 효능을 HT-29 인간 결장직장 선암종 세포 (ATCC)에서 IL-13 (IL-13, R&D Systems) 유도된 STAT6 포스포릴화를 측정함으로써 평가하였다.
상기 항-STAT6 항체 (Cell Signaling Technologies)가 AlphaScreen 수용체 비드 (acceptor beads) (Perkin Elmer)로 콘쥬게이트되었고, 상기 항-pSTAT6 (pTyr641) 항체 (Cell Signaling Technologies)가 EZ-Link Sulfo-NHS-Biotin (Thermo Scientific)을 사용하여 바이오티닐화되었다.
HT-29 세포를 37℃에서 5% CO2 습윤 인큐베이터에서, 10% FBS (Hyclone), 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신 (Life Technologies), 및 2 mM GlutaMAX (Life Technologies)가 보충된 McCoy's 5a 변형 배지 (ATCC)에서 성장시켰다. 분석 1일에, 세포를 25μL 배지를 갖는 화이트 폴리-D-리신-코팅된 384-웰 플레이트 (Corning)에서 7,500 세포/웰 밀도로 시딩하였고, 상기 인큐베이터에서 밤새 고착시켰다. 분석 2일에, 상기 배지를 제거하였고, 시험 화합물의 용량-반응을 포함하는 12 μL의 분석 버퍼 (Hank's Balanced Salt Solution/HBSS, 25 mM HEPES, 및 1 mg/ml 우혈청 알부민/BSA)로 교체하였다. 화합물들을 DMSO에서 일련으로 희석하였고, 그 다음에 배지에서 1000배 더 희석시켜서, 최종 DMSO 농도를 0.1%로 하였다. 세포를 시험 화합물과 37℃에서 1시간 동안 인큐베이트하였고, 그 후 12μL의 사전-가온된 IL-13 (분석 버퍼 중 12 ng/ml)을 자극을 위해 첨가하였다. 37℃에서 30분 동안 인큐베이트한 후에, 상기 분석 버퍼 (화합물 및 IL-13을 함유함)를 제거하였고, 10μL의 세포 용해 버퍼 (25 mM HEPES, 0.1% SDS, 1% NP-40, 5 mM MgCl2, 1.3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 및 Roche Diagnostics제 Complete Ultra mini 프로테아제 저해제 및 PhosSTOP이 보충됨). 상기 플레이트를 주위 온도에서 30분 동안 진탕시키고, 그 다음에 검출 시약을 첨가하였다. 비오틴-항-pSTAT6 및 항-STAT6 콘쥬게이트된 수용체 비드의 혼합물을 먼저 첨가하였고, 주위 온도에서 2시간 동안 인큐베이트하였고, 그 다음에 스트렙타비딘 (streptavidin) 콘쥬게이트된 공여체 비드 (Perkin Elmer)를 첨가하였다. 최소 2시간 인큐베이션 후에, 상기 분석 플레이트를 EnVision 플레이트 리더에서 판독하였다. AlphaScreen 발광 (luminescence) 시그날을 기록하였고 사용하여 DMSO 및 배경 대조군에 기반하여 퍼센트 저해 값이 산출되었다.
용량-반응 분석에 있어서, 퍼센트 저해 데이터는 화합물 농도에 대해 플로팅하였고, IC50 값은 Prism 소프트웨어에 의해 4-parameter robust fit 모델로부터 결정하였다. 결과는 IC50 값의 음의 로그값, pIC50으로 표시하였다.
상기 분석에서 pIC50 값이 더 높은 시험 화합물은 IL-13 유도된 STAT6 포스포릴화의 저해가 더 큰 것을 보여주었다. 본 분석에서 시험된 본 발명의 화합물은 통상적으로 약 6.0 내지 약 7.8의 pIC50 값을 나타내었다.
분석 3: JAK 세포독성 분석
CellTiter-Glo 발광 세포 생존력/세포독성 분석은 정상 성장 조건하에 BEAS-2B 인간 폐 상피 세포 (ATCC)에서 수행되었다.
세포를 37℃에서 5% CO2 습윤된 인큐베이터에서, 10% FBS (Hyclone), 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신 (Life Technologies), 및 2 mM GlutaMAX (Life Technologies)가 보충된 50% DMEM/50% F-12 배지 (Life Technologies)에서 성장시켰다. 분석 1일에, 세포를 25 μL 배지를 갖는 화이트 384-웰 조직 배양 플레이트 (Corning)에서 500 세포/웰 밀도로 시딩하였고, 상기 인큐베이터에서 밤새 고착시켰다. 분석 2일에, 시험 화합물의 용량-반응을 포함하는 5 μL의 배지를 첨가하였고, 37℃에서 48시간 동안 인큐베이트하였다. 30 μL의 CellTiter-Glo 검출 용액 (Promega)을 그 다음에 첨가하였고, 오비탈 쉐이커 (orbital shaker)에서 5분 동안 혼합하였고, 추가 10분 동안 인큐베이트하여, EnVision 리더에서 판독하였다. 발광 시그날을 기록하였고, 퍼센트 DMSO 대조값을 산출하였다.
용량-반응 분석에 있어서, 퍼센트 DMSO 대조군 데이터를 화합물 농도에 대해 플로팅하여, 각 데이터 점을 연결하는 선에 의해 용량-반응 곡선을 유도하였다. 각 곡선은 15% 저해 역치를 가로지르는 농도를 CC15로 정의하였다. 결과는 CC15 값의 음의 로그값, pCC15로 표시하였다.
상기 분석에서 더 낮은 pCC15 값을 나타내는 시험 화합물은 세포독성을 일으킬 가능성이 떨어지는 것으로 기대된다. 본 분석에서 시험된 본 발명의 화합물은 통상적으로 5 미만 내지 약 6의 pCC15 값을 나타내었다.
인 비트로 분석 결과
실시예 1 내지 9 및 표 1 내지 3의 모든 화합물들은 전술한 하나 이상의 분석으로 시험되었다. 상기 JAK1 효소 효능이 밝혀졌고 또한 분석 2에 개시된 세포 효능을 예측하는 것으로 이해되었기 때문에, 특정 화합물들의 효소 특성화는 JAK1 효소로 제한되었다.
하기 표 6에서, JAK1, JAK 2, JAK3, 및 TYK2 효소 분석에 있어서, A는 pKi 값 ≥ 10 (Ki ≤ 0.1 nM)을 나타내고, B는 9 내지 10의 pKi 값 (1 nM 내지 0.1 nM의 Ki)을 나타내고, C는 8 내지 9의 pKi 값 (10 nM 내지 1 nM의 Ki)을 나타내고, 및 D는 7.5 내지 8의 pKi 값 (31.6 nM 내지 10 nM의 Ki)을 나타낸다. THP-1 효능 분석에 있어서, A는 pIC50 값 ≥ 7.5 (IC50 ≤ 32 nM)을 나타내고, B는 6.7 내지 7.5의 pIC50 값 (200 nM 내지 32 nM의 IC50)을 나타내고, 및 C는 6 내지 6.7의 pIC50 값 (1μM 내지 200 nM의 IC50)을 나타낸다.
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
분석 4: 세포 JAK 효능 분석: CD3+ T 세포에서 IL-4 자극된 pSTAT6의 저해
인터류킨-4 (IL-4) 자극된 STAT6 포스포릴화의 저해에 대한 시험 화합물의 효능을, 유세포 분석을 사용하여 인간 전혈 (Stanford Blood Center)로부터 단리된 인간 말초혈액 단핵 세포 (peripheral blood mononuclear cells: PBMCs)에서 CD3-포지티브 (CD3+) T 세포에서 측정하였다. JAK를 통한 IL-4 시그날 때문에, 본 분석은 JAK 세포 효능의 척도를 제공한다.
CD3+ T 세포를 피코에리스로빌린 (phycoerythrobilin: PE) 콘쥬게이트된 항-CD3 항체 (Clone UCHT1, BD Biosciences)를 사용하여 동정하였고, Alexa Fluor 647 콘쥬게이트된 항-pSTAT6 항체 (pY641, Clone 18/P, BD Biosciences)를 사용하여 STAT6 포스포릴화를 검출하였다.
인간 말초혈액 단핵 세포 (PBMC)를 인간 건강한 공여체의 전혈로부터 피콜 구배 (ficoll gradient)를 사용하여 단리하였다. 세포를 37 ℃, 5% CO2 습윤 인큐베이터에서, 10 % 열 불활성화된 우태아 혈청 (FBS, Life Technologies), 2 mM Glutamax (Life Technologies), 25 mM HEPES (Life Technologies) 및 1X Pen/Strep (Life Technologies)이 보충된 RPMI (Life Technologies) 중에서 배양하였다. 세포를 배지 (200 μL) 중에 250,000 세포/웰로 시딩하였고, 1시간 동안 배양하였고, 그 다음에 시험 화합물의 다양한 농도들을 함유하는 분석 배지 (50 μL) (0.1 % 우혈청 알부민 (Sigma), 2 mM Glutamax, 25 mM HEPES 및 1X Penstrep이 보충된 RPMI)에 재현탁시켰다. 화합물들을 DMSO에서 일련으로 희석시켰고 그 다음에 분석 배지에서 500-배 (2x 최종 분석 농도로)로 더 희석시켰다. 시험 화합물들 (50 μL)을 세포와 37 ℃, 5 % CO2에서 1시간 동안 인큐베이트하였고, 그 다음에 50　μL의 IL-4 (R&D Systems; 최종 농도 20　ng/mL)를 사전-가온된 분석 배지 중에 30분 동안 첨가하였다. 시토킨 자극 후에, 세포를 사전-가온된 고정 용액 (fix solution) (100 μL) (BD Biosciences)으로 10분 동안 37 ℃, 5 % CO2에서 고정시켰고, FACS 버퍼 (1 mL) (DPBS 중 2 % FBS)로 2회 세척하였고, 및 1000 μL의 빙냉 (ice cold) Perm 버퍼 III (BD Biosciences)에 30분 동안 4℃에서 재현탁시켰다. 세포를 FACS 버퍼로 2회 세척하였고, 그 다음에 항-CD3 PE (1:50 희석) 및 항-pSTAT6 Alexa Fluor 647 (1:5 희석)을 함유하는 100 μL의 FACS 버퍼에 60분 동안 실온에서 암실에서 재현탁시켰다. 인큐베이션 후에, 세포를 FACS 버퍼로 2회 세척한 후에 LSRII 유세포분석기 (BD Biosciences)를 사용하여 분석하였다.
IL-4에 반응하는 시험 화합물의 저해 효능을 결정하기 위해서, pSTAT6의 중간 형광 세기 (median fluorescent intensity: MFI)를 CD3+ T 세포에서 측정하였다. IC50 값은 MFI 대 화합물 농도의 저해 곡선의 분석으로부터 결정하였다. 데이터를 pIC50 (음의 십진법 로그 IC50) 값 (평균 ± 표준편차)으로 나타내었다. 실시예 2의 화합물은 본 분석에서 pIC50 값이 약 7.3으로 나타났다.
분석 5: 세포 JAK 효능 분석: IFNγ -유도된 pSTAT1의 저해
인터페론 감마 (IFNγ) 자극된 STAT1 포스포릴화의 저해에 대한 시험 화합물들의 효능을 유세포 분석을 사용하여 인간 전혈 (Stanford Blood Center)로부터 유래된 CD14-포지티브 (CD14+) 단핵구 (monocytes)에서 측정하였다. JAK를 통한 IFNγ 시그날 때문에, 본 분석은 JAK 세포 효능의 척도를 제공한다.
단핵구는 플루오레세인 이소티오시아네이트 (fluorescein isothiocyanate: FITC) 콘쥬게이트된 항-CD14 항체 (Clone RM052, Beckman Coulter)를 사용하여 확인되었고, 및 Alexa Fluor 647 콘쥬게이트된 항-pSTAT1 항체 (pY701, Clone 4a, BD Biosciences)를 사용하여 STAT1 포스포릴화를 검출하였다.
인간 말초혈액 단핵 세포 (PBMC)를 인간의 건강한 공여체의 전혈로부터 피콜 구배를 사용하여 단리시켰다. 세포를 37 ℃, 5 % CO2 습윤 인큐베이터에서, 10 % 우태아 혈청 (FBS, Life Technologies), 2 mM Glutamax (Life Technologies), 25 mM HEPES (Life Technologies) 및 1X Pen/Strep (Life Technologies)이 보충된 RPMI (Life Technologies) 중에서 배양하였다. 세포를 250,000 세포/웰로 배지 (200 μL) 중에 시딩하였고, 2시간 동안 배양하였고 및 시험 화합물들의 다양한 농도들을 함유하는 분석 배지 (50 μL) (0.1 % 우혈청 알부민 (Sigma), 2 mM Glutamax, 25 mM HEPES 및 1X Penstrep이 보충된 RPMI)에서 재현탁하였다. 화합물들을 DMSO에서 일련으로 희석하였고 그 다음에 배지 중에 1000-배로 더 희석하여 최종 DMSO 농도를 0.1 %로 하였다. 시험 화합물들을 세포와 37 ℃, 5 % CO2에서 1시간 동안 인큐베이트하였고, 그 다음에 배지 (50μL) 중에 사전-가온된 IFNγ (R&D Systems)를 최종 농도 0.6　ng/mL로 30분 동안 첨가하였다. 시토킨 자극 후에, 세포를 사전-가온된 고정 용액 (100 μL) (BD　Biosciences)으로 10분 동안 37 ℃, 5 % CO2에서 고정시켰고, FACS 버퍼 (1　mL) (PBS 중 1% BSA)로 2회 세척하였고, 1:10의 항-CD14 FITC:FACS 버퍼 (100 μL)에 재현탁시켰고, 및 4 ℃에서 15분 동안 인큐베이트하였다. 세포를 한번 세척하였고, 그 다음에 빙냉 Perm 버퍼 III (BD Biosciences) (100 μL)에서 30분 동안 4 ℃에서 재현탁시켰다. 세포를 FACS 버퍼로 2회 세척하였고, 그 다음에 1:10의 항-pSTAT1 Alexa Fluor 647:FACS 버퍼 (100 μL)에서 30분 동안 RT에서 암실에서 재현탁하였고, FACS 버퍼에서 2회 세척하였고, 및 LSRII 유세포 분석기 (BD Biosciences)를 사용하여 분석하였다.
시험 화합물의 저해 효능을 결정하기 위해서, pSTAT1의 중간 형광 세기 (MFI)를 CD14+ 단핵구에서 측정하였다. IC50 값을 MFI 대 화합물 농도의 저해 곡선의 분석으로부터 결정하였다. 데이터는 pIC50 (음의 십진수의 로그 IC50) 값 (평균 ± 표준 편차)으로 나타내었다. 실시예 2의 화합물은 본 분석에서 pIC50 값이 약 7.6으로 나타났다.
분석 6: 캐뉼라 삽입된 래트에서 흡착 결정
경구 생체이용률 (F%), 흡수된 분획 (Fa%) 및 간 청소율을 이탈한 분획 (Fh%)은 하기 두 연구들로부터 Sprague Dawley 래트에서 결정되었다.
(1) 시험 화합물의 IV 투여 후에 래트에서 약동학: IV 투여 후에, 혈장 시료를 통상적으로 0-6시간으로부터 수집하였다. 약물 수준은 LC-MS-MS 방법을 사용하여 결정되었다. 결과의 약물 수준은 IV 약동학 파라미터: AUC IV 및 투여량 IV를 산출하는데 사용하였다.
(2) 문맥 (PV) 및 또한 경정맥 (JV)에 캐뉼라 삽입된 래트에게 경구로 시험 화합물을 투여하였다. 경구 투여 후에, 혈장 시료는 통상적으로 0-6시간으로부터 상기 문맥 및 상기 경정맥으로부터 수집하였다. 약물 수준은 LC-MS-MS 방법을 사용하여 결정하였다. 결과의 약물 수준은 하기 약동학 파라미터: AUC PO PV, AUC PO JV, 및 투여량 PO를 산출하는데 사용하였다.
상기 연구로부터 유래된 데이터를 사용하여, 상기 경구 생체이용률 F%, 및 정량 Fa% 및 Fh%를 하기 식으로부터 계산하였다:
F% = (AUC PO JV / AUC IV) * (투여량 IV/ 투여량 PO)*100
Fa% = (AUC PO PV / AUC IV) * (투여량 IV / 투여량 PO)*100
Fh%= AUC PO JV / AUC PO PV
상기에서:
AUC PO JV = 경구 투여 후 곡선하 면적 및 상기 경정맥으로부터 수집된 혈장
AUC PO PV = 경구 투여 후 곡선하 면적 및 상기 문맥으로부터 수집된 혈장
AUC IV = 정맥내 투여 후 곡선하 면적
투여량 IV = 정맥내 투여량 mg/kg
투여량 PO = 경구 투여량 mg/kg
실시예 1-4의 화합물들을 본 분석에서 시험하였고 및 경구 생체이용률 (F%)이 약 25% 미만을 나타내었다. 구체적으로, 실시예 1, 2, 및 4의 화합물들은 F % 값이 약 5 % 미만을 나타내었다. 또한 실시예 1 및 2의 화합물들은 문맥에서 흡수율 (Fa%)이 약 25% 미만을 나타내었고, 실시예 3 및 4의 화합물들은 Fa% 값이 40% 초과를 나타내었다.
분석 7: 래트에서 결장 약동학
시험 화합물을 수 중 0.5% 메틸-셀룰로스에서 제형화하였고, Sprague Dawley 래트에게 3.2 mg/kg 및 100 mg/kg으로 경구 섭식 (oral gavage)을 통해 투여하였다. 투여 후에 다양한 시점 (통상적으로 0.5, 1, 3, 6, 24시간)에서, 혈액 시료를 심장 천자 (cardiac puncture)를 통해 제거하였고, 온전한 결장을 상기 래트로부터 절제하였다. 혈액 시료를 1500 x g으로 15분 동안 원심분리하여서, 혈장을 수집하였다. 결장을 빙냉 포스페이트 완충된 식염수 (PBS)로 세척하였고, 칭량하고, PBS에서 1:10의 희석으로 균질화시켰다. 시험 화합물의 혈장 및 결장 수준을, 상기 시험 매트릭스에서 표준 곡선으로 구축되는 분석 표준에 대해 LC-MS 분석에 의해 결정하였다. 결장 대 혈장 비율을 μg hr/g로 결장 AUC 대 혈장 AUC의 비율로 결정하였다. 실시예 2의 화합물은 혈장에 대한 결장 비율이 5 mg/kg에서 약 250 초과 및 100 mg/kg에서 약 1200 초과를 나타내었다.
분석 8: 옥사잘론 -유도된 대장염의 마우스 모델
옥사졸론-유도된 대장염은 인간의 궤양성 대장염과 조직학적으로 유사한 실험 모델이다 (Heller et al. Immunology, 2002, 17, 629-638). Harlan제 성체 BALB/C 마우스를 본 분석에 사용하였다. 1일에, 동물들을 이소플루란으로 가볍게 마취시키고, 어깨부위의 털을 조심스럽게 제거하고, 옥사졸론 (4%, 150 μL, 4:1의 아세톤:올리브 오일 조제) 또는 비히클 용액을 피부 민감화 (skin sensitization)를 위해 천천히 적용하였다. 피부를 민감화시키고 7일 후에, 상기 마우스를 밤새 금식시키고, 이소플루란 흡입으로 마취시키고, 3.5-F 카테터 (catheter)를 구비하고 옥사졸론 용액이 충전된 1 mL의 시린지를 상기 마우스의 결장으로 약 4cm를 조심스럽게 삽입하였다. 삽입 후에, 50 μL의 옥사졸론 용액 (1%, 1:1 에탄올:물 조제)을 매우 천천히 (주입 펌프를 사용하여 30초에 걸쳐서) 상기 결장으로 주입하였다. 상기 카테터를 제거하였고, 상기 마우스를 2분 동안 수직으로 세워서 (머리가 아래로 가도록), 전체 옥사졸론 용액이 상기 결장내에 유지되도록 하였다. 약물 치료 (PO, BID 또는 TID) 또는 비히클을 상기 옥사졸론 직장내 (IR) 챌린지 하루 전날부터 시작하였다. 옥사졸론 직장내 챌린지후 2일에, 질병 활동 지수 (Disease Activity Index: DAI)를 기준 점수에 따라 각 마우스에 대해 치료-맹검된 실험자에 의해 평가하였다: 대변 굳기 점수 (0, 정상; 2, 묽음; 4, 설사), 육안 출혈 점수 (0, 부재; 2, 핏기를 띰; 4, 존재), 및 체중 손실 점수 (0, 없음; 1, 1%-5%; 2, 5%-10%; 3, 10%-20%; 4, 20% 초과); DAI = (대변 굳기 점수 + 육안 출혈 점수 + 체중 손실 점수)의 평균.
본 발명의 선택된 화합물을 본 분석에서 시험하였다. 상기 모델에서 효능은 비히클로 치료된 동물로부터의 점수와 비교하여 DAI 점수에서 감소에 의해 입증되었다. 실시예 2 및 4의 화합물들은, 1, 3, 및/또는 10 mg/kg BID의 투여량의 옥사잘론 모델에서, 비히클로 치료된 동물과 비교하여, DAI 점수가 통계적으로 유의하게 감소된 것을 나타내었고, 실시예 1의 화합물은 본 분석에서 시험된 10 mg/kg BID 미만의 투여량에서 통계적으로 유의한 감소를 나타내지 않았다.
분석 9: 마우스 비장 자연 살해 ( NK ) 세포에서 면역억제 효과
마우스 비장 세포의 상실 (depletion)은 면역억제의 실험 모델이다 (Kudlacz et al., Am. J. of Transplantation, 2004, 4, 51-57). 실시예 2의 화합물을, 옥사졸론-유도된 대장염 모델 (분석 8)에서 사용된 것과 동일한 치료 패러다임 후에 마우스 비장 세포 모델에서 평가하였다.
Harlan제 성체 수컷 Balb/C 마우스 (연령 12-14 주령)를 본 연구를 위해 사용하였다. 상기 화합물 (1, 10 및 100 mg/kg, BID) 및 토파시티닙 (tofacitinib) (30 및 60 mg/kg, BID)을 포지티브 대조군으로 3일 동안 나이브 (naive) 마우스에게 경구로 투여하였다. 마지막 투여하고 1시간 후에 비장을 수확하였고, 세포 서브타입 염색 (cell subtype staining)을 위해 즉시 분쇄하였다. 고정화시키기 전에, CD19 (FITC; B 세포), CD3e (PE; pan T 세포) 및 DX5 (APC; NK 세포)에 대해 형광단 (fluorophore)-표지된 항체를 각 동물로부터의 비장세포 시료와 인큐베이트하여 유세포분석기에서 다중 서브타입% 분석을 동시에 수행하였다. 각 동물에 대해 전체 비장 세포의 수를 Scepter™ 2.0 Handheld Automated Cell Counter에 의해 측정하였다.
림프구 서브타입 개체군의 절대 수 (예컨대, 비장 B, T 및 NK 세포)는 각 서브타입의 퍼센트에 각 동물에 대한 전체 비장 세포를 곱하여 산출하였다. Dunnett's post hoc 검정에 의한 일원 (one way) ANOVA를 사용하여, 상기 비히클과 시험 화합물 그룹의 비장 림프구 수를 비교하였다. α 수준은 p　<　0.05에서 설정하였다. 데이터는 각 그룹에 대해 평균 ± SEM으로 나타내었다.
포지티브 대조군으로, 토파시티닙 (30 및 60 mg/kg; PO, BID)은 용량-의존성이고, 비장 NK 세포수는 유의하게 감소되었다. 동일한 연구에서, 비장 NK 세포수는 100 mg/kg (시험된 최대 용량) 미만의 PO (BID) 용량으로 실시예 2의 화합물에 의해 영향받지 않았다. B 및 T 세포 개체군에 있어서 각 화합물에 의한 치료 효과는 관찰되지 않았다.
상기 데이터는, 옥사졸론-유도된 대장염의 마우스 모델 (분석 8)에서 유의한 항-대장염 효과를 야기하는 1 mg/kg 최소 용량과 함께, 실시예 2의 화합물에 대해 > 100의 기능적 치료 지수를 산출할 수 있게 한다.
분석 10: 마우스 및 미니- 피그 피부에서 피부 약동학
본 분석의 목적은 온전한 마우스 또는 미니-피그 피부에 24시간 노출시킨 후에 시험 화합물의 표피, 진피 및 혈장 약동학을 결정하는데 있다.
실시예 12에서 제조된 화합물, 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴을 개시되는 바와 같이 크림 또는 연고에서 0.5 % (w/w)로, 표 7에서 각각 제형 A 또는 제형 B로 제형화하였다.
투여하기 24시간 전에, 25 g 수컷 Balb/c 마우스의 등의 털을 면도하여 적어도 6 cm2의 면적 (체표면의 약 10 %)을 노출시켰고 및, 개별 실험에서, 10 kg Gottingen 미니-피그의 등의 털을 면도하여 적어도 450 cm2의 면적 (체표면의 약 10 %)을 노출시켰다. 시간 0에서, 이소플루란 마취 후에, 시험 화합물을 마우스 또는 미니-피그의 등에 25 μL/cm2의 용량으로 적용하였다. 피부를 접착 커버 (adhesive cover)로 덮어서 케이지 또는 베딩 (bedding)으로 화합물이 손실되는 것을 방지하였다.
24시간 노출 후에, 상기 등들을 비누와 물로 부드럽게 세척하여 흡수되지 않은 약물을 제거하고 두드려서 건조시켰다. 상기 세척한 직후에, 상기 마우스로부터 심장 천자에 의해 및 상기 미니-피그로부터 정맥천자 (venipuncture)에 의해 혈액을 뽑았다. 그 다음에 외부 피부 (각질층)를 접착 테이프 스트리핑에 의해 제거하였다. 표피를 노출시킨 후에 0.5 cm 펀치 생검 (punch biopsy)을 채취하였다. 상기 표피 및 진피를 빠르게 분리시켰고, 칭량하고 및 순간 냉동시켰다. 유사한 시료들을 마우스에 투여하고 48시간 후에 및 미니-피그에 투여하고 48시간, 94시간, 및 168시간 (7일)에 입수하였다.
표피 및 진피 시료들을 1:10 (w/v) 물에 Covaris 초음파 균질화기 (ultrasonic homogenizer)를 사용하여 균질화시켰다. 시료들을 3부피의 아세토니트릴에서 추출하였고 및 LC-MS 분석을 통해 표준 곡선에 대해 정량화하였다. 하기 표 8에 개시된 혈장, 표피 및 진피에 대한 약동학적 파라미터 AUC0 -t에 의해 입증된 바와 같이, 유의한 화합물 노출은 표피 및 진피 층들에서 나타났고 상기 혈장 노출은 마우스에서 무시할만하고 또한 미니-피그에서 정량화 한계 미만이었다.
제형 A 제형 B
실시예 12의 화합물 0.5% 실시예 12의 화합물 0.5%
스테아르산 5% 옥틸히드록시스테아레이트 5%
세토스테아릴 알콜 5% C8-C10 트리글리세리드 5%
이소프로필 팔미테이트 4% 바셀린 (바셀린) 79.5%
옥틸히드록시스테아레이트 2% N-메틸피롤리돈 10%
BRIJ S2
(PEG 2 스테아릴 에테르)		 1.08%
BRIJ S20
(PEG 20 스테아릴 에테르)		 6.92%
N-메틸피롤리딘 10%
PEG400 10 %
RO 물 55.5%
혈장
AUC 0 -t
( ㎍*hr/mL) 		표피
AUC 0 -t
( ㎍*hr/g) 		진피
AUC 0 -t
( ㎍*hr/g)
마우스 제형 A 0.014 718 61
마우스 제형 B 0.006 2830 296
미니-피그 제형 A <0.001 988 71
미니-피그 제형 B <0.001 4030 114
분석 11: 마우스에서 국소 TPA-유도된 자극 접촉 피부염 모델
본 분석의 목적은 아토피 피부염과 같은 피부 염증 병태에 대해 연구되는 시험 화합물의 급성 피부염의 모델에서 항-염증 효과를 평가하는데 있다 (Dong et al., J Pharmacol Exp Ther, 2013, 344, 436-446).
마우스에서 포르볼 에스테르 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 (TPA)의 국소 진피 적용으로 염증 반응을 유발시키고 이는 초기 단계 (2-24시간)에서 부종 및 호중구 유입 및 후기 단계 (24-48시간)에서 표피 세포 증식을 특징으로 한다 (Griffiths et al., Agents and Actions, 1988, 25, 344-351). 암컷 Balb/c 마우스에게 비히클 (1:7 DMSO:아세톤) 또는 비히클 중 TPA (2.5 μg)의 용액 20 μL를 각 귀에 국소로 투여하였다. TPA 투여하기 30분 전 및 투여하고 15분 후에, 비히클 또는 비히클 중 30, 100, 300, 1000, 및 3000 μg 용량의 실시예 2의 화합물 각각을 각 귀에 국소로 적용하였다. 염증 정도는 TPA 적용하고 6시간 후에 귀 두께의 변화로 평가하였다. 실시예 2의 화합물은 귀 두께에서 TPA-유도된 증가의 용량- 및 농도-의존성 저해를 나타내었다. 최대 통계적으로 유의한 효과는 1000 μg 용량에서 41% 저해가 관찰되었다.
본 발명은 그의 특정 양상 또는 구체예를 참조로 서술되었으며, 이는 당분야의 통상의 기술을 가진 자라면 본 발명의 진정한 정신 및 범위로부터 벗어나지 않고 다양한 변경이 만들어질 수 있고, 균등물로 대체될 수 있다는 것을 이해해야 한다. 또한, 적용가능한 특허법 및 규정에 의해 허용되는 한도내에서, 본원에 인용된 모든 간행물, 특허, 및 특허 출원은, 각 문헌이 본원에서 개별적으로 참고 문헌으로 인용되는 것과 동일한 정도로 그 전문이 참고 문헌으로 인용된다.

Claims (36)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로-허용가능한 염 또는 입체이성질체로서:
    Figure pct00046

    상기에서
    R1은:
    (a) -S(O)2R4로서, 상기 R4는:
    C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN, -OC1- 3알킬, 또는 C3-6시클로알킬로 치환되는 것인 C1-4알킬,
    하나의 질소 원자를 포함하는 4 내지 6개의 고리 원자를 포함하는 헤테로시클일로서, 상기 임의의 헤테로시클일은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 헤테로시클일,
    C3- 6시클로알킬,
    피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐, 및
    페닐로부터 선택되는 것인 -S(O)2R4;
    (b) C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN,
    Figure pct00047
    , 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 C1- 4알킬; 및
    (c) -C(O)R5로서, 상기 R5는:
    C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 C3- 6시클로알킬로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1- 4알킬,
    -OC1- 4알킬,
    C3- 6시클로알킬, 및
    모르폴리닐로부터 선택되는 것인 -C(O)R5로부터 선택되고;
    R2는 수소 또는 메틸이고;
    R3은 C1- 3알킬이고; 및
    n은 1 또는 2인 것인 화합물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 R3은 메틸인 것인 화합물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 R2는 메틸인 것인 화합물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 n은 2인 것인 화합물.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 R1은:
    (a) S(O)2R4로서, 상기 R4는:
    C1- 2알킬로서, 상기 C1- 2알킬은 선택적으로 -CN, -OCH3, 또는 시클로프로필로 치환되는 것인 C1- 2알킬,
    아제티디닐 또는 피롤리디닐로서, 상기 아제티디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 아제티디닐 또는 피롤리디닐,
    시클로프로필,
    피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 피리디닐, 및
    페닐로부터 선택되는 것인 S(O)2R4;
    (b) C1- 4알킬로서, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN,
    Figure pct00048
    , 또는 피리디닐로서, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 C1-4알킬; 및
    (c) C(O)R5로서, 상기 R5는:
    C1- 2알킬로서, 상기 C1- 2알킬은 선택적으로 시클로프로필로, 또는 하나 또는 2개의 플루오로로 치환되는 것인 C1-2알킬,
    -OC1- 4알킬,
    C3- 6시클로알킬, 및
    모르폴리닐로부터 선택되는 것인 C(O)R5로부터 선택되는 것인 화합물.
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 화합물은:
    1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
    1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(메틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-((2-메톡시에틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    3-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-8-아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)프로판니트릴,
    5-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
    5-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)니코티노니트릴,
    이소부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
    2,2-디플루오로-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(아제티딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((5-플루오로피리딘-3-일)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(페닐술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(에틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((시클로프로필메틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    3-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)-술포닐)프로판니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피롤리딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(시클로프로필술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(페닐술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(아제티딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((시클로프로필메틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((5-플루오로피리딘-3-일)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    4-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일메틸)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    3-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)프로판니트릴,
    1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)시클로프로판-1-카르보니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피리딘-4-일메틸)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    4-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메틸)피콜리노니트릴,
    2,2-디플루오로-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
    이소부틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
    메틸 (1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트,
    ((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시-피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)(모르폴리노)메타논,
    2-시클로프로필-1-((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)에탄-1-온,
    시클로펜틸((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메타논, 및
    시클로부틸((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)메타논,
    및 그의 약학적으로 허용가능한 염들로부터 선택되는 것인 화합물.
  7. 청구항 1에 있어서, 상기 화합물은 하기 화학식 (II)의 화합물:
    Figure pct00049

    또는 그의 약학적으로-허용가능한 염인 것인 화합물.
  8. 청구항 7에 있어서, 상기 R4는 메틸, 에틸, 아제티디닐, 피롤리디닐, 시클로프로필, 피리디닐, 또는 페닐이고, 상기 에틸은 선택적으로 메톡시로 치환되고, 아제티디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되고, 및 피리디닐은 선택적으로 플루오로로 치환되는 것인 화합물.
  9. 청구항 7에 있어서, 상기 화합물은:
    1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(메틸술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(((1R,3s,5S)-9-((2-메톡시에틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    3-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시-피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)-술포닐)프로판니트릴,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피롤리딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(시클로프로필술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(피리딘-3-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((6-메톡시-2-(메틸((1R,3s,5S)-9-(페닐술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-(아제티딘-1-일술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((시클로프로필메틸)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올, 및
    (3-((2-(((1R,3s,5S)-9-((5-플루오로피리딘-3-일)술포닐)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-3-일)(메틸)아미노)-6-메톡시피리미딘-4-일)아미노)-1H-피라졸-5-일)메탄올,
    및 그의 약학적으로-허용가능한 염들로부터 선택되는 것인 화합물.
  10. 하기 화학식의 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴:
    Figure pct00050

    또는 그의 약학적으로-허용가능한 염.
  11. 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴.
  12. 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴의 결정 형태 (crystalline form)로서, 상기 결정 형태는 8.89±0.20, 12.99±0.20, 13.44±0.20, 및 20.16±0.20의 2θ 값에서 회절 피크들을 포함하는 분말 X-선 회절 (powder X-ray diffraction)을 특징으로 하는 결정 형태.
  13. 청구항 12에 있어서, 상기 분말 X-선 회절 패턴은 10.64±0.20, 10.99±0.20, 15.02±0.20, 15.74±0.20, 16.47±0.20, 20.93±0.20, 22.22±0.20, 및 26.25±0.20으로부터 선택된 2θ 값에서 둘 이상의 부가의 회절 피크들을 갖는 것을 더 특징으로 하는 것인 결정 형태.
  14. 청구항 12에 있어서, 상기 결정 형태는 상기 피크 위치가 도 1에 개시된 패턴의 피크 위치와 실질적으로 일치하는 분말 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 것인 결정 형태.
  15. 청구항 12에 있어서, 상기 결정 형태는 약 235℃ 내지 약 245℃의 온도에서 흡열 열 흐름 (endothermic heat flow)의 최대값을 나타내는 분당 10℃의 가열 속도로 기록된 시차 주사 열량계 트레이스 (differential scanning calorimetry trace)를 특징으로 하는 것인 결정 형태.
  16. 청구항 15에 있어서, 상기 결정 형태는 도 2에 개시된 것과 실질적으로 일치하는 시차 주사 열량계 트레이스를 특징으로 하는 것인 결정 형태.
  17. 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물 및 약학적으로-허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  18. 청구항 17에 있어서, 위장관 염증 질환의 치료에 유용한 하나 이상의 다른 치료제를 더 포함하는 것인 약학적 조성물.
  19. 하기 화학식 (I)의 화합물:
    Figure pct00051

    또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로서, 상기 R1, R2, R3, 및 n은 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제조하는 방법으로서, 상기 방법은:
    (a) 하기 화학식 (III)의 화합물:
    Figure pct00052
    로서, 상기 R2, R3, 및 n은 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 화학식 (III)의 화합물을,
    (i) Cl-S(O)2R4로서, 상기 R4는 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 Cl-S(O)2R4;
    (ii) 화학식 L-RA의 화합물로서, 상기 L은 이탈기이고 및 RA는 C1- 4알킬이고, 상기 C1- 4알킬은 선택적으로 -CN,
    Figure pct00053
    , 또는 피리디닐로, 상기 피리디닐은 선택적으로 -CN으로 치환되는 것인 피리디닐로 치환되는 것인 화학식 L-RA의 화합물;
    (iii) Cl-C(O)R5로서, 상기 R5는 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 Cl-C(O)R5; 또는
    (iv) HO-C(O)R5로서, 상기 R5는 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 HO-C(O)R5와, 반응시키는 단계; 및
    (b) 선택적으로 약학적으로 허용가능한 염을 형성시켜서 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 단계를 포함하는 것인 방법.
  20. 하기 화학식 (III)의 화합물로서:
    Figure pct00054

    상기 R2, R3, 및 n은 청구항 1에 정의된 바와 같은 것인 화합물.
  21. 청구항 20에 있어서, 상기 R2 및 R3은 각각 메틸인 것인 화합물.
  22. 청구항 12에 정의된 바와 같은 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴의 결정 형태를 제조하는 방법으로서, 상기 방법은:
    (a) 1-(((1R,3s,5S)-3-((4-((5-(히드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-메톡시피리미딘-2-일)(메틸)아미노)-9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)술포닐)아제티딘-3-카르보니트릴을 N-메틸피롤리돈 및 디메틸포름아미드로부터 선택된 희석제 중에 용해시켜서 반응 혼합물을 형성하는 단계;
    (b) 아세톤 및 물을 상기 반응 혼합물에 첨가하는 단계; 및
    (c) 상기 결정 형태를 상기 반응 혼합물로부터 단리시키는 단계를 포함하는 방법.
  23. 포유동물에서 위장관 염증 질환의 치료에 사용하기 위한 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물.
  24. 청구항 23에 있어서, 상기 위장관 염증 질환은 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)인 것인 화합물.
  25. 청구항 23에 있어서, 상기 화합물은 위장관 염증 질환을 치료하는데 유용한 하나 이상의 다른 치료제와 조합하여 사용하기 위한 것인 화합물.
  26. 포유동물에서 위장관 염증 질환 치료용 약제의 제조를 위한 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물의 용도.
  27. 청구항 26에 있어서, 상기 위장관 염증 질환은 궤양성 대장염인 것인 용도.
  28. 포유동물에서 피부 염증 질환의 치료에 사용하기 위한 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물.
  29. 청구항 28에 있어서, 상기 피부 염증 질환은 아토피 피부염 (atopic dermatitis)인 것인 화합물.
  30. 포유동물에서 피부 염증 질환 치료용 약제의 제조를 위한 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물의 용도.
  31. 청구항 30에 있어서, 상기 피부 염증 질환은 아토피 피부염인 것인 용도.
  32. 포유동물에서 위장관 염증 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물 및 약학적으로-허용가능한 담체를 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하는 것인 방법.
  33. 청구항 32에 있어서, 상기 방법은 위장관 염증 질환을 치료하는데 유용한 하나 이상의 다른 치료제를 투여하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
  34. 청구항 32에 있어서, 상기 위장관 염증 질환은 궤양성 대장염인 것인 방법.
  35. 포유동물에서 피부 염증 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 화합물을 포함하는 약학적 조성물을 상기 포유동물의 피부에 적용하는 단계를 포함하는 것인 방법.
  36. 청구항 35에 있어서, 상기 염증 질환은 아토피 피부염인 것인 방법.
KR1020187034319A 2016-04-28 2017-04-27 Jak 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물 KR102244257B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662328737P 2016-04-28 2016-04-28
US62/328,737 2016-04-28
PCT/US2017/029796 WO2017189822A1 (en) 2016-04-28 2017-04-27 Pyrimidine compounds as jak kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190002591A true KR20190002591A (ko) 2019-01-08
KR102244257B1 KR102244257B1 (ko) 2021-04-26

Family

ID=58672793

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187034319A KR102244257B1 (ko) 2016-04-28 2017-04-27 Jak 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물

Country Status (20)

Country Link
US (3) US10028960B2 (ko)
EP (1) EP3433253B1 (ko)
JP (1) JP6881879B2 (ko)
KR (1) KR102244257B1 (ko)
CN (1) CN109071529B (ko)
AU (1) AU2017258186B2 (ko)
BR (1) BR112018072168A2 (ko)
CA (1) CA3020506A1 (ko)
CL (1) CL2018003060A1 (ko)
CO (1) CO2018011408A2 (ko)
DK (1) DK3433253T3 (ko)
EA (1) EA035226B1 (ko)
ES (1) ES2779880T3 (ko)
IL (1) IL262386B (ko)
MX (1) MX2018013191A (ko)
PT (1) PT3433253T (ko)
SG (1) SG11201809342YA (ko)
TW (1) TWI726094B (ko)
WO (1) WO2017189822A1 (ko)
ZA (1) ZA201807179B (ko)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3303348B1 (en) 2015-05-28 2019-08-07 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Naphthyridine compounds as jak kinase inhibitors
WO2017077283A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Topivert Pharma Limited 4,5,6,7-tetrahydro-1h-imidazo[4,5-c]pyridine and 1,4,5,6,7,8-hexahydroimidazo[4,5-d]azepine derivatives as janus kinase inhibitors
US10556901B2 (en) 2015-11-03 2020-02-11 Topivert Pharma Limited 4,5,6,7-tetrahydro-1H-imidazo[4,5-c]pyridine and 1,4,5,6,7,8-hexahydroimidazo[4,5-d]azepine derivatives as Janus kinase inhibitors
EA035226B1 (ru) * 2016-04-28 2020-05-19 ТЕРЕВАНС БАЙОФАРМА Ар энд Ди АйПи, ЭлЭлСи Пиримидиновые соединения в качестве ингибиторов jak киназы
JP7218364B2 (ja) 2017-10-27 2023-02-06 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー Ｊａｋキナーゼ阻害剤としてのピリミジン化合物
US20220257600A1 (en) 2018-06-20 2022-08-18 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a jak or other kinase inhibitor
WO2020108516A1 (zh) * 2018-11-27 2020-06-04 江苏豪森药业集团有限公司 含氮杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用
CN115925705A (zh) * 2018-11-30 2023-04-07 江苏豪森药业集团有限公司 杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用
JP7482152B2 (ja) 2019-04-24 2024-05-13 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー 皮膚疾患の処置のためのピリミジンｊａｋ阻害剤 発明の背景
CA3135383A1 (en) 2019-04-24 2020-10-29 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Ester and carbonate pyrimidine compounds as jak kinase inhibitors
WO2021231272A1 (en) * 2020-05-14 2021-11-18 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Administration of gut-selective jak3 inhibitor
WO2022083687A1 (zh) * 2020-10-21 2022-04-28 南京明德新药研发有限公司 硒杂环类化合物及其应用
WO2023011359A1 (zh) * 2021-08-05 2023-02-09 南京明德新药研发有限公司 桥环类化合物及其应用
CN113883920B (zh) * 2021-10-25 2024-01-23 安徽华铂再生资源科技有限公司 一种降低空分装置空冷塔出口温度的方法
WO2023202706A1 (zh) * 2022-04-21 2023-10-26 南京明德新药研发有限公司 硒杂环类化合物的盐型和晶型及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015094803A1 (en) * 2013-12-16 2015-06-25 Calitor Sciences, Llc Substituted heteroaryl compounds and methods of use
US20160052930A1 (en) * 2014-08-21 2016-02-25 Pfizer Inc. Aminopyrimidinyl compounds

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6660731B2 (en) 2000-09-15 2003-12-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
ES2265452T3 (es) 2000-12-21 2007-02-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compuestos de pirazol utiles como inhibidores de la proteina quinasa.
ATE519759T1 (de) * 2004-12-30 2011-08-15 Exelixis Inc Pyrimidinderivate als kinasemodulatoren und anwendungsverfahren
WO2007059299A1 (en) 2005-11-16 2007-05-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors
MX2008016523A (es) 2006-06-30 2009-01-19 Astrazeneca Ab Derivados de pirimidina utiles en el tratamiento de cancer.
CA2656290A1 (en) 2006-07-05 2008-01-10 Exelixis, Inc. Methods of using igf1r and abl kinase modulators
BR112014015549A8 (pt) 2011-12-22 2017-07-04 Hoffmann La Roche composto, método de inibição da atividade pak1, método para o tratamento, processo, composição, utilização de um composto e invenção
EP3303348B1 (en) 2015-05-28 2019-08-07 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Naphthyridine compounds as jak kinase inhibitors
EA035226B1 (ru) * 2016-04-28 2020-05-19 ТЕРЕВАНС БАЙОФАРМА Ар энд Ди АйПи, ЭлЭлСи Пиримидиновые соединения в качестве ингибиторов jak киназы

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015094803A1 (en) * 2013-12-16 2015-06-25 Calitor Sciences, Llc Substituted heteroaryl compounds and methods of use
US20160052930A1 (en) * 2014-08-21 2016-02-25 Pfizer Inc. Aminopyrimidinyl compounds

Also Published As

Publication number Publication date
EP3433253B1 (en) 2020-02-12
ZA201807179B (en) 2019-08-28
US20170312280A1 (en) 2017-11-02
TW201739747A (zh) 2017-11-16
IL262386B (en) 2021-08-31
US20200046709A1 (en) 2020-02-13
US10485803B2 (en) 2019-11-26
SG11201809342YA (en) 2018-11-29
DK3433253T3 (da) 2020-04-06
WO2017189822A1 (en) 2017-11-02
TWI726094B (zh) 2021-05-01
CL2018003060A1 (es) 2018-12-14
PT3433253T (pt) 2020-04-30
KR102244257B1 (ko) 2021-04-26
ES2779880T3 (es) 2020-08-20
CN109071529B (zh) 2021-08-06
CN109071529A (zh) 2018-12-21
EP3433253A1 (en) 2019-01-30
JP6881879B2 (ja) 2021-06-02
US11110095B2 (en) 2021-09-07
CA3020506A1 (en) 2017-11-02
IL262386A (en) 2018-11-29
JP2019514903A (ja) 2019-06-06
EA035226B1 (ru) 2020-05-19
AU2017258186A1 (en) 2018-11-15
AU2017258186B2 (en) 2020-09-17
MX2018013191A (es) 2019-02-13
CO2018011408A2 (es) 2018-11-13
US10028960B2 (en) 2018-07-24
US20180303836A1 (en) 2018-10-25
EA201892436A1 (ru) 2019-04-30
BR112018072168A2 (pt) 2019-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102244257B1 (ko) Jak 키나제 저해제로서 피리미딘 화합물
JP6942853B2 (ja) Ｊａｋキナーゼ阻害剤としてのナフチリジン化合物
JP7098716B2 (ja) Ｊａｋキナーゼ阻害剤としてのピラゾロおよびトリアゾロ二環式化合物
CA3125039A1 (en) Imidazo[1,5-a]pyridine, 1,2,4-triazolo[4,3-a]pyridine and imidazo[1,5-a]pyrazine as jak inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant