KR20180098882A

KR20180098882A - 땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈당 상승 억제 조성물

Info

Publication number: KR20180098882A
Application number: KR1020170025598A
Authority: KR
Inventors: 김서곤; 이상봉; 김영동
Original assignee: 주식회사 솔고 바이오메디칼
Priority date: 2017-02-27
Filing date: 2017-02-27
Publication date: 2018-09-05
Anticipated expiration: 2037-02-27
Also published as: KR101979001B1

Abstract

본 발명은 땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%, 이눌린 10 내지 70중량%, 팔라티노스 10 내지 70중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 조성물을 제공하며, 본 발명에 따른 조성물은 슈크라제(sucrase), 말타제(maltase), 글루코아밀라제(glucoamylase) 등의 이당류 소화흡수관련 효소에 대한 저해능이 우수할 뿐만 아니라, 혈당상승을 효과적으로 억제하여 당뇨병을 예방 또는 치료하는데 유용하다.

Description

땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈당 상승 억제 조성물{Composition for the effect of suppressing the elevation of blood sugar level having extract of peanut sprouts as active component}

본 발명은 땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈당 상승 억제 조성물에 관한 것으로서, 상세하게는 식품으로 안전하게 섭취할 수 있으면서 사용자의 기호도를 만족시킬 수 있는 식후 혈당 상승을 억제할 수 있는 유용한 조성물에 관한 것이다.

당뇨병은 발병 이후 치료에 의해 완치가 거의 불가능하기 때문에 당뇨병 치료 목적은 주로 당뇨병으로 인한 증상을 개선시키거나 당뇨병과 관련된 급만성 합병증을 막는 예방적 차원의 치료에 있다. 이는 고혈당에 의한 증상을 없애거나, 저혈당이나 반대로 심한 인슐린 결핍으로 인한 당뇨병성 케톤산증, 고혈당성 고삼투압 증후군과 같은 급성 합병증을 예방 치료하는 것과, 망막병증, 신증, 신경병증, 죽상경화증, 뇌혈관질환 및 관상동맥질환같은 만성 합병증을 예방하는데 치료 목적이 있다.

우리나라 당뇨환자의 대부분은 2형 당뇨병으로, 이는 고혈당을 특징으로 하는 대사질환인 유전적, 대사적, 환경적인 요인에 의한 췌장 베타세포의 인슐린 분비 저하 또는 말초 조직에서의 인슐린 저항성 증가로 인해 발생된다. 이런 고혈당은 췌장 베타 세포에 손상을 일으켜 세포 사멸을 야기하므로 제2형 당뇨병의 치료를 위해서는 효과적인 혈당의 조절이 가장 중요하다.

따라서, 당뇨병 치료는 혈당을 낮추는 것이 가장 중요하다. 당뇨 환자의 혈당 조절은 일반적으로 약물 치료와 식이요법을 병행하고 있으며 약물 복용에 따른 문제가 부각되면서 근래에 와서 천연물의 약리효능과 기능성 성분에 대한 연구보고가 활발히 진행되고 있다.(Korean J. SOC. FOOD SCI, 1997, Vol.13, No. 4, pp.500-506)

현재 개발된 당뇨병 치료제로써는 식후 당질의 흡수를 늦추어 주는 알파-글루코시다제 저해제로써 개발된 바이엘의 아카보스 외에 인슐린분비 촉진제인 설포닐우레아, 레파글리나이드, 나테글리나이드와 인슐린 저항성 개선제인 비구아니드, 글리타존 계열의 약물들이 있다. 그러나, 현재까지 개발된 당뇨병 치료제는 신장이나 간 기능장애, 심장 질환계 이상을 유발하는 부작용이 있고, 제2형 당뇨병을 치료하는 약제로써 개발된 알파-글루코시다아제 저해제인 아카보스는 기존의 당뇨병 치료제 보다는 부작용이 덜 하지만 복부팽만감, 설사 등 그 부작용이 만만치 않아 부작용은 적고 약효는 우수한 경구용 혈당강하제의 개발이 계속 요구되고 있다.

또한 혈당치의 상승을 방지하는 성분으로서, 김네마 실베스타 잎의 추출물 (일본 공개특허공보 소64-85058호, 일본공개특허공보 평2-79955호), 김네마 이노도럼의의 추출물 (일본 공개특허공보 평5-252897호) 및 김네마 친겐의추출물 (일본 공개특허공보 평6-245735호) 이 알려져 있고, 이들은 당 흡수 억제 효과에 의해 혈당치의 상승을 억제한다고 알려져 있다. 김네마 이노도럼에 함유되는 트리테루펜 배당체 (일본 공개특허공보평6-128161호) 도 동일하게 당흡수 억제 효과가 있다고 보고되어 있다.

또한 모노테루펜 배당체에는, 수크라아제 저해 효과에 의한 혈당치 상승 억제 효과가 있는 것이 알려져 있고(일본 공개특허공보 평6-100453호), 이러한 모노테루펜 배당체로는, 사탕무에서 얻어지는 베타인 (일본 공개특허공보 평8-133970호), 두릅나무에서 얻어지는 사포닌 혼합물 (일본 공개특허공보 평8-283169호), α-글루코시다아제 저해제 (일본 공개특허공보 평8-289783호) 를 들 수 있다.

여기에 더하여, 혈당치 상승 억제 효과를 갖는 탄수화물이 최근 보고되고 있다. 즉, 난(難)소화성 덱스트린이, 혈당치가 오르기 쉬운 사람의 식후 혈당치 상승 억제 효과를 나타내는 것 및 지질대사에 영향을 주는 것이 알려져 있다. 또 L-아라비노스가 자당을 분해하는 소장 수크라아제 활성을 특이적으로 저해하는 것이 확인되었다.

또 탄수화물은 아니지만, 식물 추출물인 구아바잎 열수 추출물이 말타아제, 수크라아제, α-아밀라아제의 탄수화물 분해 효소 활성을 저해하는 것이 알려져 있고, 특히 α-아밀라아제에 대한 저해가 다른 2종의 효소에 대한 저해 효과보다도 강한 것이 알려져 있으며, 이것으로부터 식후 혈당치의 상승을 억제하는 것이 확인되었다.

그러나, 종래의 추출물 등은 쓴 맛이 나서 단 맛을 없애버리기 때문에, 특별한 처리를 하지 않으면 사용할 수없고, 난소화성 덱스트린이나 L-아라비노스 등은 탄수화물이라 해도 체내에서 소화흡수되기 어렵고, 다량으로 먹으면 설사를 하게 되는 경우가 있었다. 또한, 수크라아제 활성 저해 효과를 갖는 물질은, 자당을 동시에 섭취하면 그것이 분해되지 않고 대장으로까지 도달하는 것이 지적되고 있었다. 즉, 혈당치 상승 억제 효과가 인정되는 상기 물질은 사용시에 문제가 생기거나, 용도가 제한되는 경우가 많다는 문제가 있었다.

1. 일본 공개특허공보 평8-133970호 2. 일본 공개특허공보 평8-289783호

따라서, 본 발명의 목적은, 상기 종래 기술의 문제점을 해결하는 혈당치 상승 억제제를 제공하는 것에 있다.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여 본 발명은,

땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%

이눌린 10 내지 70중량%

팔라티노스 10 내지 70중량%

포함하는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 조성물을 제공한다.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것이 바람직하다.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물은 상기 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함할 수 있다.

또한 상기 기술적 과제를 달성하기 위하여 본 발명은,

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물 10 내지 70중량%와 잔부 중량%의 수소수를 포함하는 것으로 특징으로 하는 혈당 상승 억제 음료를 제공한다.

본 발명에 따른 조성물은 슈크라제(sucrase), 말타제(maltase), 글루코아밀라제(glucoamylase) 등의 이당류 소화흡수관련 효소에 대한 저해능이 우수할 뿐만 아니라, 혈당상승을 효과적으로 억제하여 당뇨병을 예방 또는 치료하는데 유용하다.

본 발명에 따른 조성물 포함되는 땅콩새싹 추출물은 땅콩을 일정 배양조건에서 발아시켜 식용 가능한 수준인 4 내지 7일에 수확한 땅콩새싹을 물 또는 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하여 제조한 것으로서, 땅콩새싹 추출물이 건강식품 소재로 주목 받는 이유는 이 발아과정에서 기능성을 나타내는 성분인 레스베라트롤(resveratrol)이 다량 생성되기 때문이다. 땅콩새싹으로부터 추출물을 제조하는 방법은 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것으로서 특별한 제한이 없다.

레스베라트롤(resveratrol)은 식물이 스트레스를 받을 때 분비되는 피토알렉신(phytoalexin)으로서 항암 및 강력한 항산화 작용을 하는 것으로 알려져 있으며, 혈청 콜레스테롤을 낮춰 주는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이 외에도 항바이러스(antiviral), 신경보호작용(neuroprotective), 항염증작용(anti-inflammatory), 항노화(anti-aging) 및 수명을 연장시키는 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 프렌치 패러독스(French Paradox)는 레스베라트롤의 작용에 의한 것으로 프랑스인들이 비교적 지방이 많은 음식을 섭취하면서도 심장 질환의 발병률이 낮게 나타나는 현상을 말하는 것이다.

또한 레스베라트롤은 발암의 3단계인 개시, 촉진, 진행 단계 모두를 차단함으로써 강력한 항암 작용이 있다는 사실이 보고되었다. 레스베라트롤은 발암원으로 작용하는 유해한 물질들의 독성을 완화시켜 유전자의 변형을 막아줄 수 있으며, 개시에서 진행의 단계로 접어든 비정상 세포들의 증식을 강력하게 억제할 수 있는 작용이 있다. 최근 연구에 의하면 유방암, 전립선암, 대장암, 폐암 등을 포함한 많은 암세포에서 레스베라트롤은 세포 자살을 촉진하는 유전자들의 활성을 통하여 암세포의 증식을 억제할 수 있음이 밝혀졌다. 또한 레스베라트롤은 세포증식을 촉진하는 특정 유전자 신호전달계의 발현을 조절함으로써 손상을 입은 세포뿐만 아니라 빠르게 분열하는 각종 인체 암세포의 증식을 강력하게 차단할 수 있는 것으로 알려져 있다. 레스베라트롤은 포유동물의 노화를 효과적으로 억제하는 것으로 보고되었는데, 2003년 영국의 과학전문지 <네이처>에 발표한 논문에 따르면 적포도주와 적포도 속의 레스베라트롤(resveratrol)이라는 세포 사멸을 억제하는 SIRT1 유전자를 활성화하여 생명을 연장한다고 한다.

본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 땅콩새싹 추출물은 10 내지 70중량% 포함되는 것이 혈당 상승 억제 효과에 바람직하며, 10중량% 미만으로 포함될 경우 혈당 상승 억제 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.

본 발명에 따른 조성물에 포함되는 이눌린(inulin)은 백색의 둥근 결정으로 비교적 물에 잘 녹으며, 주로 국화과(菊花科)의 땅속줄기, 달리아의 알뿌리나 우엉 뿌리, 돼지감자, 치커리 등에 존재한다. 본 발명에서 사용되는 이눌린은 그 유래는 어떠한 것을 사용하여도 무방하며 콜레스테롤 개선, 배변활동 원활, 식후혈당상승억제의 기능성이 알려져 있다.

또한 본 발명에서의 이눌린은 치커리 추출물에서 얻어지는 것을 사용할 수 있는데 치커리추출물은 치커리의 뿌리를 열수로 추출, 정제하여 만든 것을 말하며, 식이섬유를 80% 이상 함유하고 있으며, 건강한 사람 12명에게 4주 동안 이눌린 9g을 섭취시킨 Brighenti 등(1999)의 연구에서는 총 콜레스테롤이 감소하였으며, 동시에 장내 유익균이 증가한 것으로서 보고되었으며, Kleessen 등(2007)은 45명의 성인에게 3주 동안 치커리 이눌린 8g을 섭취시켜 대변 경도가 감소하고 총 균수가 증가하는 것을 관찰하였으며, Hond 등(2000)은 건강한 사람 6명에게 2주 동안 치커리 이눌린 15g을 제공하여 배변 빈도가 증가하였다고 보고하였다. 20g의 치커리 이눌린을 콜레스테롤이 약간 높은 사람 12명에게 섭취시킨 Causey 등(2000)의 연구에서는 변 중 단쇄지방산이 증가하였다. 또한, Jackson 등(1999)은 건강한 사람 54명에게 이눌린 10g을 8주 동안 섭취시켜 공복 시 인슐린 분비가 감소함을 관찰하였다.

본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 이눌린은 10 내지 70중량% 포함되는 것이 혈당 상승 억제 효과에 바람직하며, 10중량% 미만으로 포함될 경우 혈당 상승 억제 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.

본 발명에 따른 조성물에 포함되는 팔라티노스(palatinose)는 자당(슈크로오스)에 미생물기원의 α-glucosyl 전달효소를 작용시켜 자당의 α-1,2 결합(1G-2F)을 분자 내 전위로 α-1,6결합(1G-6F)으로 바꾼 것을 말하며, Palatinose의 명명은 최초에 Protamino bactenum rubrun(균)이 발견된 독일 토지의 Latin명 Palatin에서 유래된 것으로서 용해도는 자당보다 낮고 결정화하기 쉽다. 감미도는 자당의 50% 정도로 미질은 좋다. 또한 자당과 공존하면 자당의 우식성을 억제하는 항우식성이 있으며, 환원기를 갖기 때문에 가열착색성은 자당보다 강하여 항우식성 감미료로 캔디 등에 쓰이고 있다.

본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 팔라티노스는 10 내지 70중량%, 10중량% 미만으로 포함될 경우 혈당 상승 억제 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물은 음료, 칩류, 면류, 가공류, 곡류, 정제, 연질캅셀 및 과립제 중 선택된 하나 또는 그 이상의 형태로 식품으로 제공될 수 있으며. 이와 같은 경우 보존료, 착향료, 팽창제, 강화제, 개량제, 유화제, 여러 가지 영양제, 합성 풍미제와 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색료, 발색제, 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH조절제, 안정화제, 소포제, 용제, 이형제, 방부제, 품질 개량제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 등의 기타 식품제조용 첨가제를 더 포함할 수 있다.

구체적으로 살펴보면, 상기 식품은 과일, 야채, 과일이나 야채의 건조제품; 또는 절단제품, 과일쥬스, 야채쥬스 또는 이들의 혼합쥬스; 칩류, 면류, 축산가공식품, 수산가공식품, 유가공식품, 발효유식품, 두류식품, 곡류식품, 미생물발효식품, 제과제빵, 양념류, 육가공류, 음료수, 감초류, 허브류 중 어느 하나 또는 하나 이상이다.

예를 들어, 음료로 제조되는 경우 본 발명에 따른 조성물을 수소수에 용해시켜 제조할 수 있는데, 일반적으로, 수소수는 자화 처리, 초음파 처리, 광석 처리, 미네랄 처리, 또는 전기 분해 등의 방법에 의해 제조된다. 이들 방법 중 전기 분해 방법이 주로 사용되며, 전기 분해에 의해 제조된 수소수를 전해 수소수라 한다.전해 수소수는 알칼리 이온수 또는 수소 풍부수 등으로 불리며, 먹는 물, 미용, 산업 및 농업용 등으로 사용될 수 있다. 구체적으로, 전해 수소수는 아토피와 같은 피부염, 피부 미백, 노화, 생활 습관병 등에 효과가 있고, 노화 방지와 보습 효과로 화장품에도 사용될 수 있으며, 식품류 장기 원형 보존성에서 우수한 효과를 가진다.

또한 땅콩새싹 추출물을 이용하여 식품을 만드는 경우 두류의 비린 맛 및 비린내인데 수소수를 이용하여 음료로 하는 경우 두류에서 유래하는 특유의 비린 맛과 비린내가 없어져 음료로서의 기호도가 향상될 수 있다.

또한 본 발명에 따른 조성물을 선택적으로 참죽나물 추출물을 더 포함할 수 있으며, 본 발명에서의 본 발명에서 사용되는 참죽나물은 참죽나무의 잎 또는 순을 의미하는 것으로서, 참죽나무(Cedrela sinensis A. Juss.)는 원산지가 아시아지역인 멀구슬나무과의 낙엽교목이다. 이른 봄에 참죽나무 순이 돋아날 때는 붉은 색을 나타내 매우 아름다우며 맛, 향기, 색이 조화를 이루는 산채이며 데쳐서 무친 참죽나물은 봄의 미각을 돋아주는 식품으로서 잎은 장염이나 이질 등의 치료, 열매는 관절통, 뿌리껍질은 빈혈, 대하 등에 약용으로 쓰이기도한다.

상기 참죽나물 추출물은 참죽나물을 물 또는 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하여 제조한 것으로서, 추출법은 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것이라면 특별한 제한 없이 사용이 가능하며, 그 함량은 상술한 조성물의 기본 성분 전체 중량 대비 10 내지 30중량부이다.

함량 기준을 이와 같은 범위를 설정한 것은 10중량부 미만으로 포함될 경우 혈당 상승 억제 효과를 수득할 수 없으며, 30중량부를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없기 때문이다.

이하 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

< 실시예 1: 조성물의 제조>

하기 표 1에 따른 각 성분을 혼합하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.

	본 발명 조성물 (중량%)	비교 조성물 1 (중량%)	비교 조성물 2 (중량%)	비교 조성물 3 (중량%)
땅콩새싹 추출물	40	100
치커리 이눌린	30		100
팔라티노스	30			100

< 실험예 2>

<알파- 글루코시다제 억제 효과(Rat intestinal α- glucosidase Inhibition assay)>

-Enzyme = rat intestinal acetone powder

-Substrate = pNP-glycoside(pNPG, p-Nitrophenyl α-D-glucopyranoside)

Rat intestinal acetone powder 150 mg에 9 ml의 0.9% NaCl solution을 첨가하여 30초간 12회 ice water bath에서 sonication 후, 10,000 X g, 4℃, 30분간 원심 분리하였다. 원심분리 후 상층 액만을 회수하여 Rat intestinal α-glucosidase inhibition assay에 사용하였다. 100 ㎕의 rat α-glucosidase solution과 50 ㎕의sample solution을 넣고 37℃에서 10분간 반응시킨 후, 50 ㎕의 5 mM pNPG solution을 가하여 37℃에서 30분간 반응시키고, 405nm에서 ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하였다.

결과를 살펴보면, 실시예 1의 본 발명의 조성물이 나타내는 알파-글루코시다제 억제효과(α-glucosidase inhibitory activity)(%)를 측정한 결과, 1, 2, 5 mM/mL 농도에서 28.50%, 37.75%, 55.54% 저해활성을 나타냈으며, 농도 유의적으로 α-glucosidase inhibitory activity가 증가하는 것으로 나타났다. 높은α-glucosidase inhibitory activity를 가진 것으로 알려진 쿼세틴(Quercetin)을 양성 대조군으로 IC50를 비교 한 결과, 쿼세틴(quercetin) 0.48 mM, 본 발명의 조성물 4.07 mM로 본 발명의 조성물이 쿼세틴(quercetin)에 비교하여 낮은 활성을 나타냈다.

<알파-아밀라제 억제 효과(Porcine pancreatic α-amylase inhibition assay)>

- Enzyme porcine pancreatic α-amylase

- Substrate 1% starch solution in 0.02 M sodium phosphate buffer (pH 6.9)

- Coloring reagent 3,5-dinitrisalic acid solution (DNS) in 2 M NaOH with 30 % sodium potassium tartrate tetrahydrate

- 0.02M sodium phosphate buffer (pH 6.9 with 0.006M sodium chloride) 에 녹인 1U 농도의 porcine pancreatic α-amylase 용액 300 ㎕와 sample 용액 200㎕ 을 넣고 25℃에서 10분간 incubation시켰다. 이 용액에 25℃에서 10min pre-incubation시킨 1% starch 용액 500 ㎕를 첨가하여 25℃에서 10분간 반응시켰다. 30% Rochelle염에 녹인 1% DNS 용액 1 ㎖을 첨가 후 boiling water bath에서 5분간 처리한 다음, 10 ㎖ distilled water를 첨가하였다. α-amylase에 의해서 기질로부터 분해된 당과 DNS 용액과의 반응정도를 540 nm ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하였으며, 대조군으로서 sample buffer를 사용하였다.

본 발명의 조성물이 나타내는 Porcine pancreatic α-amylase inhibitory activity (%)에 대한 저해 활성을 측정한 결과, 1, 2, 5 mM/mL의 농도에서 저해활성을 나타내지 않았으며, 동일한 농도의 양성대조군인 쿼세틴(quercetin)과 의뢰시료 모두, Porcine pancreatic α-amylase inhibitory 활성이 나타나지 않았다.

이러한 효소저해 특이성은 과도한 아밀라제 저해에 의해 소화되지 않은 탄수화물의 대장유입으로 문제가 되는 시판되고 있는 기존 α-glucosidase 저해제의 부작용 (복부팽만, 설사, 소화불량)을 경감시킬 수 있는 긍정적인 결과이며, 이러한 이유로 식물 파이토 케미칼 유래의 저해제 개발이 이 분야의 주요 트랜드이다.

<Rat intestinal glucose oxidase assay (Maltase, Sucrase , Glucoamylase ) 저해활성 분석>

한국식품의약품안전청에서 제시한 건강기능식품의 기능성 시험가이드에 제시된 방법을 변형하여 말타아제(Maltase), 슈크라제(Sucrase), 글루코아밀라제(Glucoamylase) 저해 활성을 분석하였다. 효소는 rat 유래의 intestinal acetone powder (Sigma S9765)을 사용하였다. Rat intestinal acetone powder 150 mg에 9 ml의 0.9% NaCl solution을 첨가 하여 30초간 12회 ice water bath에서 sonication 후, 10,000 * g, 4℃, 30분간 원심 분리하였다. 원심분리 후 상층 액만을 회수하여 Rat intestinal α-glucosidase inhibition assay에 사용하였다.

측정방법은 96 clear plate에 100 ㎕d의 rat α-glucosidase solution에 50 ㎕의 시료를 넣은 다음 37℃ Incubator에서 10분간 정치시켰다. 각각의 실험 방법에 따라 50 ㎕의 100mM Maltose, 혹은 200mM Sucrose, 1% Starch solution을 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시키고 30분간 반응 사이에 Glucose oxidase/peroxidase reagent (Sigma G3660) 와 O-Dianisidine reagent (Sigma D2679) 섞은 용액 1 ㎖을 2 ㎖ epp-tube에 넣은 후 37℃ Incubator에서 5분간 pre-incubation 시킨 후, 30분동안 반응한 Rat-intestinal acetone solution(enzyme), sample, 기질 용액 200 ㎕을 취하여 1 ㎖ Glucose oxidase/peroxidase reagent 와 ODianisidine reagent 용액에 첨가한 후 37℃ Incubator에서 10분간 반응 시킨다. 각각의 epp-tube에 12N 황산 1 ㎖을 첨가하여 반응을 정지 시킨 후, 96 clear plate에 200 ㎕씩 넣은 후 540 nm ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하여 Rat intestinal glucose oxidase kit를 사용하여 말타아제(Maltase), 슈크라제(Sucrase), 글루코아밀라제(Glucoamylase)의 저해활성 분석하였으며, 대조군으로서 쿼세틴(quercetin)과 sample buffer를 사용하였다.

통계처리는 SAS(Statistical Analysis system)에 의한 Duncan의 다범위 검정(Duncan’s multiple range test)을 통하여 p<0.05에서 각 시료의 농도간의 유의적인 차이를 검증하였다.

결과를 살펴보면, 본 발명의 조성물이 나타내는 sucrase inhibitory activity(%)를 측정한 결과, 0.1, 0.3, 0.5 mM/mL 농도에서 21.48%, 54.73%, 68.75% 저해 활성을 나타냈으며, 농도 유의적으로 sucrase inhibitory activity가 증가하는 것으로 나타났다. 높은 sucrase inhibitory activity를 가진 것으로 알려진 쿼세틴을 양성 대조군으로 IC50를 비교 한 결과, 쿼세틴 0.45 mM, 옥시레스베라트롤 0.31 mM로 본 발명의 조성물이 쿼세틴에 비교하여 높은 슈크라제 억제활성을 나타냈다.

또한 본 발명의 조성물이 나타내는 maltase inhibitory activity(%)를 측정한 결과, 0.1, 0.5, 1.0mM/mL 농도에서 3.44%, 39.63%, 65.55% 저해 활성을 나타냈으며, 농도 유의적으로 maltase inhibitory activity가 증가하는 것으로 나타났다. 높은 maltase inhibitory activity를 가진 것으로 알려진 쿼세틴을 양성 대조군으로 IC50를 비교 한 결과, 쿼세틴 1.13 mM, 본 발명의 조성물 0.72 mM로 쿼세틴에 비교하여 높은 말타아제(maltase) 억제활성을 나타냈다.

그리고 본 발명의 조성물이 나타내는 glucoamylase inhibitory activity(%)를 측정한 결과, 0.1, 0.3, 0.5 mM/mL 농도에서 19.91%, 49.02%, 75.37% 저해 활성을 나타냈으며, 농도 유의적으로 glucoamylase inhibitory activity가 증가하는 것으로 나타났다. 높은 glucoamylase inhibitory activity를 가진 것으로 알려진 쿼세틴을 양성 대조군으로 IC50를 비교 한 결과, 쿼세틴 0.53 mM, 본 발명의 조성물 0.31 mM로 쿼세틴에 비교하여 높은 글루코아밀라제(glucoamylase) 억제활성을 나타내었다.

< 실험예 2: 혈당 억제 효과 시험>

(1) 시료의 준비

정제수에 하기 표 2와 같은 함량으로 각각을 전체 중량이 200g이 되도록 음료를 제조하여 시료를 사용하였다.

	자당	글루코오스	본 발명 조성물	비교 조성물 1	비교 조성물 2	비교 조성물 3
음료 1	50g
음료 2		50g
음료 3	50g		25g
음료 4		50g	25g
음료 5	50g			25g
음료 6		50g		25g
음료 7	50g				25g
음료 8		50g			25g
음료 9	50g					25g
음료 10		50g				25g

(2) 혈당치 측정 시험

31세∼40세의 건강한 남녀 5명 (남성 4명, 여성 1명) 을 피험자로 골라, 피험자는 시험 당일 아침 식사를 하지 않고 시험 개시 전 12시간 이상 절식 상태가 되도록 하였다. 음료 섭취 전 (0분), 섭취 후 30분, 60분, 90분, 120분 후에 각 피험자에게서 혈액을 채취하여 혈당치를 측정하였다.

1회의 시험에서 섭취하는 음료는 1종류로 하고, 다른 날에 섭취하는 음료를 바꿔 시험은 1일 1회, 연속 10일간 실시하여 음료 1부터 음료 10까지 모든 음료를 섭취하게 하여 혈당 측정시험을 실시하여 5명의 평균적인 결과를 표 3에 나타냈다.

	증가한 혈당치(mg/㎗)
	0분	30분	60문	90분	120분
음료 1	0	33.2	30.8	18.7	7.6
음료 2	0	32.7	29.4	18.4	6.4
음료 3	0	14.2	13.8	10.9	3.2
음료 4	0	13.8	12.4	10.1	3.1
음료 5	0	24.3	22.8	14.5	5.2
음료 6	0	23.8	21.4	14.2	5.1
음료 7	0	24.5	22.5	14.7	5.2
음료 8	0	23.6	22.6	14.1	5.3
음료 9	0	22.8	21.5	13.8	5.4
음료 10	0	22.5	21.2	13.5	5.3

상기 표 3을 보면 본 발명에 따른 조성물을 함유하는 음료 3 및 4의 효과가 다른 음료에 비하여 혈당 상승치 억제 효과가 우수한 확인할 수 있습니다.

< 실험예 3: 수소수 음료 혈당 억제 효과 시험>

실험예 2에서와 동일한 시험을 하였으며 음료 3 및 4의 정제수를 수소수로 변경한 것에 차이가 있으며, 음료 3의 변형을 음료 11로 음료 4의 변형을 음료 12로 하여 그 결과를 표 4에 나타냈다. 수소수는 솔고바이오메디칼 디스펜서 수소샘 수소수제조기 [SHD-100]을 이용하여 제조한 것을 사용하였다.

	증가한 혈당치(mg/㎗)
	0분	30분	60문	90분	120분
음료 11	0	12.5	11.3	9.8	2.9
음료 12	0	11.2	10.8	8.4	2.3

상기 표 4를 보면 표 3의 음료 3 및 4보다 각각 더 혈당 증가를 억제하는 것으로 나타나 혈당 증가 억제에 수소수가 긍정적인 역할을 하는 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 4: 땅콩새싹 추출물의 관능 평가>

땅콩새싹 추출물을 열수 추출한 후 농축한 농축액을 정제수과 수소수에 1.0%(w/w) 희석함으로써 음료를 제조한 후 관능평가를 실시하였다. 관능평가 시 고소한맛, 비린맛, 비린내, 텁텁함, 기호도 등 5항목을 9점 척도(0~9점)로 평가하여 검증하였다. 평가 결과, 표 4에서 나타냈다.

수소수는 솔고바이오메디칼 디스펜서 수소샘 수소수제조기 [SHD-100]을 이용하여 제조한 것을 사용하였다.

	고소한맛	비린맛	비린내	텁텁함	기호도
정제수	1.90±1.83	7.94 ±1.03	7.04 ±2.09	4.41±2.95	2.29 ±2.27
수소수	3.66±1.55	3.84 ±1.79	2.97 ±1.73	3.52 ±2.21	4.64 ±1.33

상기 표 5에서 보는 바와 같이 고소한 맛과 기호도는 증가하고, 비린맛, 비린내, 텁텁함은 감소하여 제품 품질 증진에 건조공정이 효과적임을 알 수 있었다. 특히 비린맛과 비린내에 대한 개선 정도가 매우 크다는 점을 확인할 수 있었다.

< 실험예 5: 참죽나물 추출물 포함 혈당 억제 효과 시험>

상기 표 1의 본 발명에 따른 조성물의 전제 중량 대비 참죽나물 열수 추출물의 농축액을 15중량부 더 포함시킨 조성물을 이용하여 상기 실험예 2에서와 동일한 시험을 하였으며, 음료 13은 자당 50g에 참죽나물 가지 열수 추출물의 농축액을 더 포함하는 조성물을 25g을 포함시킨 것이며, 음료 14는 글루코오스 50g에 참죽나물 가지 열수 추출물의 농축액을 더 포함하는 조성물을 25g을 포함시킨 것이며

	증가한 혈당치(mg/㎗)
	0분	30분	60문	90분	120분
음료 13	0	12.3	11.5	9.4	2.7
음료 14	0	11.4	10.4	8.5	2.5

상기 표 6을 보면 표 3의 음료 3 및 4보다 혈당 증가 억제 효가가 우수한 것으로 나타나 혈당 증가 억제에 참죽나물 추출물이 긍정적인 역할을 하는 것을 확인할 수 있었다.

Claims

땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%
이눌린 10 내지 70중량%
팔라티노스 10 내지 70중량%
포함하는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 조성물.
제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함하는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 조성물.
제 1항에 따른 조성물 10 내지 70중량%와 잔부 중량%의 수소수를 포함하는 것으로 특징으로 하는 혈당 상승 억제 음료.
제 4항에 있어서,
상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 음료.
제 4항 또는 제 5항에 있어서,
상기 제 1항에 따른 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함하는 것을 특징으로 하는 혈당 상승 억제 음료.