KR20180098204A - 율무 추출물을 포함하는 미백용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하며, 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 조성물로서, 효과적인 티로시아아제 억제 활성을 나타내는 미백용 조성물에 관한 것이다.

Description

율무 추출물을 포함하는 미백용 조성물{SKIN WHITENING COMPOSITION COMPRISING AN EXTRACT OF COIXLACHRYMA-JOBI VAR. MAYUEN}
본 발명은 율무 추출물을 포함하는 미백용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 코익솔이 함유된 율무 뿌리의 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하는 미백용 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 피부의 색깔은 환경, 인종, 성별 등의 영향을 받는데, 피부미백 정도는 갈색의 멜라닌의 함량에 의해 결정된다. 피부에 멜라닌 색소가 과다 침착되면 원하지 않는 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 찰상 및 화상을 비롯한 상처 또는 피부염으로 인한 염증후 과색소침착, 광독성 반응 또는 다른 유사한 소형의 고정 색소성 병변을 일으킬 수 있어 피부의 원래 색깔과 상관없이 피부 미관을 해치는 원인이 된다.
예를 들어, 대한민국 등록특허공보 10-0841276호에는 미백활성이 우수한 피부백삼 에틸아세테이트 분획물을 함유하는 피부 미백용 조성물로서, 보다 구체적으로는 신남산을 유효성분으로 하는 피부백삼 에틸아세테이트 분획물을 함유하는 피부 미백용 조성물이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-0850686호에는 피부 미백 활성을 갖는 흑종초자(Nigella glandulifera Freyn et Sint)추출물 및 이를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물로서, 구체적으로 멜라닌 생성 세포에서의 멜라닌 생성을 저해하는 흑종초자 추출물 및 이를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-1121736호에는 피부 미백용 생약재 추출물, 이들의 제조 방법 및 이들을 함유하는 미백용 화장료 조성물로서, 추출 용매를 이용하여 귀전우, 적양, 청심연자음으로부터 얻어진 추출물 및 이를 함유하는 화장료 조성물이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-0604085호에는 상지추출물과 글루타치온을 포함하는 미백화장료 조성물로서, 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 20.0 중량%, 바람직하게는 1.0 내지 10.0 중량%의 양으로 함유하고, 글루타치온은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 5.0 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 1.0 중량%의 상지 추출물을 함유한 미백화장료 조성물이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-0345226호에는 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물로서, 더욱 자세하게는 천련자 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물로서, 천련자 추출물을 익모초씨 추출물, 일당귀씨 추출물, 익모초 추출물, 일당귀 추출물 및 감초 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물과 혼합한 미백용 화장료 조성물이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-0515206호에는 백두옹의 추출물을 주성분으로 함유하고, 필요하면, 여기에 백두옹의 추출물에서 얻어진 라누쿨린(ranunculin), 데옥시포드필로톡신(deoxypodophyllotoxin), 3-O-α-L-람노피라노실(1→2)-[β-D-글루코피라노실 (1→4)]-α-L-아라비노피라노사이드(SB365)에서 선택된 1종이상의 성분을 함유하고, 여기에 유피 및 감초추출물에서 선택된 1종 이상의 보조성분을 함유하는 미백 화장용 조성물이 기재되어 있다.
상기와 같이 다양한 천연성분을 포함하는 미백용 조성물이 개시되어 있는데, 율무를 이용한 미백용 조성물도 개발되어 있으며, 이러한 예로는 대한민국 등록특허공보 10-1579500호에서 율무뿌리의 추출물 및 이의 분획물을 이용한 미백용 조성물이 개시되어 있다.
상기 선행기술에서는 율무 뿌리로부터 용매 추출물 및 이의 분획물을 제조하여 이를 주성분으로 함으로써 티로시나제 억제 활성 및 멜라닌 생성의 억제 효능을 확인하고 있다. 다만, 상기 선행기술에서는 율무 뿌리의 특정 화합물을 타겟으로 하여 미백 효과를 얻는 것이 아니기 때문에 미백 효과를 향상시키는 데에는 한계가 있다.
대한민국 등록특허공보 10-1579500호 대한민국 등록특허공보 10-0841276호 대한민국 등록특허공보 10-0850686호 대한민국 등록특허공보 10-1121736호 대한민국 등록특허공보 10-0604085호 대한민국 등록특허공보 10-0345226호 대한민국 등록특허공보 10-0515206호
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 코익솔을 함유하는 율무 추출물 또는 코익솔을 함유하는 율무 추출물의 용매 분획물을 통해 미백 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
본 발명은 상기와 같은 목적을 달성하기 위한 것으로서, 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하며, 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 함유하는 것을 특징으로 한다.
상기 율무 추출물은 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 얻어질 수 있고, 또는, 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 추출물을 수득한 후에, 이를 물에 용해시켜 용해액을 형성하며, 상기 용해액을 헥산, 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트로 순차로 추출하여 얻어진 헥산 분획물, 메틸렌 클로라이드 분획물, 에틸 아세테이트 분획물 및 물 분획물 중 하나 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
이때, 상기 에틸 아세테이트 분획물을 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 9개로 소분획하고, 2번 분획물을 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분리할 수 있으며, 상기 에틸 아세테이트 분획물은 에틸 아세테이트 및 수포화 n-부탄올로 추출하여 얻어질 수 있다.
또한, 상기 알코올은 에탄올일 수 있다.
상기와 같은 본 발명에 따른 미백용 조성물은 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하며, 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 함유하기 때문에 뛰어난 미백 효과를 나타내어 화장품, 식품, 의약품에 적용할 수 있는 효과를 나타낸다.
도 1은 본 발명의 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 분리하는 과정을 도식적으로 나타낸 순서도이다.
도 2는 본 발명의 율무 뿌리로부터 얻어진 코익솔의 1H NMR 분석결과이다.
도 3은 본 발명의 율무 뿌리로부터 얻어진 코익솔의 13C NMR 분석결과이다.
도 4는 코익솔(a), 연천산 율무 뿌리의 70% 에탄올 추출물(b), 제천산 율무 뿌리의 70% 에탄올 추출물(c)에 대한 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석결과이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 코익솔의 티로시나아제 효소 활성 억제 시험 결과이다.
이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
본 발명에서 사용되는 용어인 율무는 특별히 한정하지 않는 한 율무 뿌리를 가리키는 용어로 이해하여야 한다.
율무는 벼과에 속하는 1년생 초본식물로서, 이의 꽃은 7월에 피며 열매는 식용하는 것으로서 잘 알려져 있다. 한방에서는 의이인이라고 하며 약으로도 쓰이고 있다. 본 발명에서 율무는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에서 "미백"이란, 멜라닌 등의 색소의 과다로 인하여 명도가 감소된 피부의 명도를 증가시키거나 또는 피부의 명도를 일정 수준으로 유지하는 방법, 상기 방법으로 형성된 명도가 증가된 피부 등을 포괄하여 의미할 수 있다. 본 발명의 목적상 상기 미백은 율무 추출물 또는 이의 분획물에 의하여 피부에서 형성되는 멜라닌의 합성을 억제하는 수단에 의하여 수행되지만, 특별히 이로 제한되지는 않는다.
멜라닌은 피부, 머리카락, 눈동자 등 생물체에 널리 분포되어 있는 색소 성분으로 인체 표피층의 멜라닌 세포(melanocyte) 내의 멜라노좀(melanosome)에서 합성되는데, 티로시나아제(tyrosinase) 효소에 의해 티로신(tyrosine)을 출발 물질로 하여 DOPA(3,4-dihydroxy-phenylalanine) 또는 DOPA 퀴논으로 변환되는 산화 및 중합 반응으로 멜라닌이 생합성된다. 생합성된 멜라닌은 자외선과 같은 피부자극에 대해 저항력을 높여주지만, 과도한 멜라닌 합성은 기미, 주근깨, 검버섯과 같은 색소 침착을 일으키기 때문에 티로시나아제 활성 측정은 피부 미백효과를 나타내는 하나의 중요한 지표로 받아들여지고 있다.
본 발명의 미백용 조성물은 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하며, 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 함유하는 것을 특징으로 한다.
상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 도 1의 실시예에 개시된 바와 같은 과정을 통해 얻어질 수 있다.
즉, 본 발명에서 율무 추출물은 율무 열매 또는 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 얻어질 수 있고, 또는, 율무 열매 또는 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 추출물을 수득한 후에, 이를 물에 용해시켜 용해액을 형성하며, 상기 용해액을 헥산, 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트로 순차로 추출하여 얻어진 헥산 분획물, 메틸렌 클로라이드 분획물, 에틸 아세테이트 분획물 및 물 분획물 중 하나 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
상기 추출 용매인 C1 내지 C6의 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 펜탄올, 헥산올 등을 들 수 있는데, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다.
본 발명의 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 포함하는 것을 특징으로 한다. 코익솔은 화합물명이 6-메톡시벤족사졸린-2(3H)-온인 화합물로서 아래 화학식 1과 같은 구조의 화합물이다.
Figure pat00001
본 발명의 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물에 함유된 코익솔을 분리하여 1H NMR 및 13C NMR로 분석한 결과는 도 2 및 3과 같다.
1H NMR(700MHz, CD3OD) 분석 결과, δ 6.96 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-4), 6.88 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-7), 6.74 (1H, dd, J = 2.8, 8.4 Hz, H-5), 3.78 (3H, s, -OCH3)가 관찰되며, 13C-NMR(175MHz, CD3OD) 분석 결과, δ 157.1 (C-2), 157.0 (C-6), 145.5 (C-8), 124.4 (C-9), 110.4 (C-5), 110.1 (C-4), 97.5 (C-7), 55.9 (-OCH3)가 관찰되었다. 또한, 질량스펙트럼(ESIMS) 분석결과 m/z 166 [M + H]+가 관찰되어 본 발명의 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물이 코익솔을 함유하고 있는 것으로 나타났다.
본 발명의 율무 추출물 또는 이의 분획물은 이를 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물로서 다양한 용도에 적용할 수 있다.
미백용 화장료 조성물에 적용할 경우, 율무 추출물, 또는 이의 분획물을 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 50중량% 및 잔량으로서 화장료 베이스를 포함하여 이루어질 수 있다. 이때, 상기 화장료 조성물을 구성하는 화장료 베이스는 유연화장수(스킨로션), 영양화장수(영양로션), 에센스, 크림, 바디크림 또는 팩을 조성하는 화장료 베이스가 될 수 있다.
또한, 상기 화장료에의 건조분말 형태의 추출물의 함량은 0.0001 내지 5중량%, 액상의 1.3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린과 그 혼합액의 경우 0.001% 내지 50중량%, 각기 바람직하게는 전자의 경우 0.01 내지 1중량%, 그리고 후자의 경우 0.1 내지 10중량%의 양으로 화장료에 첨가할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 이 추출물을 화장료, 다시 말하면 유연화장수(스킨), 영양화장수(로션), 에센스, 영양크림, 팩, 바디로션, 바디오일 등에 첨가하는 것을 말한다.
또한, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 임의의 포뮬레이션으로 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 포뮬레이션화될 수 있으나, 이로 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 포뮬레이션으로 제조될 수 있다.
본 발명의 미백용 화장 포뮬레이션은 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에, 담체 성분으로서 동물성 기름, 식물성 기름, 왁스, 파라핀, 전분, 트래거캔스, 셀룰로오즈 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 미백용 화장 포뮬레이션은 파우더 또는 스프레이인 경우에, 담체 성분으로서 락토오즈, 탈크, 실리카, 알루미늄 하이드록사이드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 사용될 수 있다. 본 발명의 미백용 화장 포뮬레이션은 용액 또는 유탁액인 경우에, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 사용되고, 예를 들어 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다. 본 발명의 미백용 화장 포뮬레이션은 현탁액인 경우에, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미세결정상셀룰로오즈, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤토나이트, 아가 또는 트래거캔스 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 미백용 화장 포뮬레이션은 계면활성제 함유 클린징인 경우에, 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세라이드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 기름, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 급성 또는 만성 보습제(예를 들면 습윤제, 밀폐제, 및 피부의 자연 보습 기전에 영향을 미치는 제제 포함), 산화 방지제, UVA 및/또는 UVB 보호 기능을 갖는 자외선 차단제, 연화제, 자극 방지제, 비타민, 미량 금속, 항균제, 식물성 추출물, 향료, 및/또는 염료 및 색 성분과 같은 다른 유익한 제제 및 화합물들을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 계면활성제를 포함할 수 있다. 계면활성제는 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제 또는 계면활성제의 상용성 혼합물일 수 있다. 계면활성제는 또한 조성물의 pH에 따라 음이온 또는 양이온의 특성을 갖는 양성(ampholytic) 또는 양쪽성(amphoteric) 계면활성제일 수 있다.
또한, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 또한 하이드로트로프(hydrotrope)를 포함할 수 있다. 하이드로트로프는 다른 화합물의 물용해성을 증진시키는 능력을 갖는 화합물이다. 하이드로트로프의 특정 예는 소듐 큐멘 설포네이트, 암모늄 큐멘 설포네이트, 암모늄 크실렌 설포네이트, 칼륨 톨루엔 설포네이트, 소듐 톨루엔 설포네이트, 소듐 크실렌설포네이트, 톨루엔 술폰산 및 크실렌 술폰산을 포함하지만 이로 한정되는 것은 아니다. 다른 유용한 하이드로트로프는 소듐 폴리나프탈렌 설포네이트, 소듐 폴리스티렌 설포네이트, 소듐 메틸 나프탈렌 설포네이트, 소듐 캠퍼 설포네이트, 및 디소듐 숙시네이트를 포함한다.
또한, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 증점제 또는 겔화제를 포함할 수 있다. 증점제 또는 겔화제는 예를 들어 폴리머 또는 코폴리머 불포화 카르복시산 또는 불포화 에스테르, 다당류 유도체, 검, 콜로이드성 실리케이트, 폴리에틸렌글리콜(PEG) 및 그의 유도체, 폴리비닐피롤리돈 및 그의 유도체, 폴리아크릴아미드 및 그의 유도체, 폴리아크릴로니트릴, 친수성 실리카겔 또는 그의 혼합물일 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 양태는 율무리 추출물 또는 이의 분획물은 미백용 식품 조성물로도 적용될 수 있다.
미백용 식품 조성물은 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함할 수 있다.
상기 미백용 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물 이외에도 미백 활성에 방해가 되지 않는 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품 보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품 보조첨가제의 예로는 여러가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품 보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로즈 등; 및 다당류, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 상기 양태의 식품 조성물을 포함하는 색소 침착 질환의 예방 또는 완화용 건강기능성 식품을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능성 식품"이란, 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환제 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서, 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조 시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
또한, 본 발명에서 피부 색소 침착 질환을 예방 또는 완화한다는 것은 율무추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하는 조성물을 과다 색소 침착된 피부에 적용함으로써, 피부에 멜라닌 색소가 침착되는 것을 예방하는 것에 그치지 않고 더 나아가 피부에 이미 침착된 멜라닌을 완화시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 피부 색소 침착 질환은 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른 흑피증(cyanic melasma), 칼슘 길항제와 같은 약물 사용 후의 과다색소침착, 조직경화치료법(sclerotherapy)에 따른 후유증, 임신성 갈색반(gravidic chloasma), 경구 피임약을 복용한 여성에서의 흑피증, 찰상 및 화상을 비롯한 상처 또는 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착, 광독성 반응 또는 다른 유사한 소형의 고정 색소성 병변 등이 포함될 수 있으나, 이로 제한되는 것은 아니다.
유효 성분의 혼합 양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
일반적으로, 식품의 제조시에 본 발명의 율무뿌리 추출물 또는 이의 용매 분획물은 원료 조성물 중 1 내지 10중량%, 바람직하게는 5 내지 10중량%의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초코릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 율무 추출물 및 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 색소 침착 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물이다.
본 발명에서 피부 색소 침착 질환을 예방 또는 완화한다는 것은 율무뿌리 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하는 조성물을 과다 색소 침착된 피부에 적용함으로써, 피부에 멜라닌 색소가 침착되는 것을 예방하는 것에 그치지 않고 더 나아가 피부에 이미 침착된 멜라닌을 치료하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 피부 색소 침착 질환은 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른 흑피증, 칼슘 길항제와 같은 약물 사용 후의 과다색소침착, 조직경화치료법에 따른 후유증, 임신성 갈색반, 경구 피임약을 복용한 여성에서의 흑피증, 찰상 및 화상을 비롯한 상처 또는 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착, 광독성 반응 또는 다른 유사한 소형의 고정 색소성 병변 등이 포함될 수 있으나, 이로 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약제학적 조성물은 단일 제제로 사용할 수 있으며, 공인된 미백 효과를 가진다고 알려진 약제학적 조성물을 추가로 포함하여 복합 제제로도 제조하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물에는 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 또는 희석제를 추가하여, 약제학적 단위 투여형으로 제형화할 수 있다.
상기 "약학적으로 허용 가능한"이란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 활성 물질의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 것을 의미한다.
본 발명에서 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 혼합하여 제조된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아르산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액상 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물에서 율무뿌리 추출물 또는 이의 용매 분획물은 약학적으로 유효한 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 바람직하게는 본 발명에서 상기 율무뿌리 추출물 또는 이의 용매 분획물은 조성물에 0.001 내지 200㎍/ml로 포함될 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.001 내지 100 ㎍/ml으로 포함될 수 있다.
본 발명의 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하는 약제학적 조성물은 개체에 투여하여 피부 색소 침착 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 개체는 피부 색소 침착 질환의 예방 또는 치료가 필요한 개체로서, 인간 뿐만 아니라 피부 색소 침착 질환 및 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에서 용어, "투여"란 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 적용 횟수는 처방, 필요 또는 원하는 바에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 레이저 등의 외과적 방법과 병행하여 처방될 수도 있다. 또한, 깁스, 붕대, 드레싱, 거즈 패드, 및 유사한 품목에 혼입될 수도 있다.
본 발명은 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함한다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단 범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 일이다.
또한, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 미백용 조성물은 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 통해 상기 코익솔을 포함하는 물질을 얻음으로써 이를 통해 제조될 수 있으나, 상기 코익솔의 함량을 높이기 위하여, 도 1에서와 같이, 상기 에틸 아세테이트 분획물을 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 9개로 소분획하고, 2번 분획물을 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분리할 수 있다.
이때, 상기 에틸 아세테이트 분획물을 에틸 아세테이트 및 수포화 n-부탄올로 추출하여 코익솔을 선택적으로 분리할 수 있다.
일 실시예에서 율무 뿌리의 에탄올 추출물 및 이의 용매 분획물을 제조하고유효성분인 코익솔을 분리정제하는 과정은 다음과 같다.
추출 및 분획 공정은 다음과 같다.
건조된 율무 뿌리(1.9 kg)을 에탄올로 2회 상온 냉침 시킨 후 추출액을 감압 농축하여 에탄올 추출물 333.34 g을 얻었다. 이를 증류수에 (2ℓ에 현탁시킨 후 각각) 헥산 (3.9ℓ × 3회), 메틸렌 클로라이드 (3.9ℓ × 3회), 에틸 아세테이트 (3.9ℓ × 3회), 수포화 n-부탄올 (3.9ℓ × 3회)를 사용하여 용매 분획을 하였다. 상기 수포화 n-부탄올은 도 1에서 에틸 아세테이트와 물 층을 분리하기 위해 사용되는 물에 해당한다.
상기 에틸 아세테이트 분획물로부터 코익솔 화합물을 다음과 같이 분리하였다.
Hx fr.(14.3 g), CH2Cl2 fr.(5.1 g), EtOAc fr.(5.4 g) 그리고 BuOH fr.(29 g)을 컬럼 크로마토그래피(solvent gradient이용)를 실시하였다. EtOAc fr.은 C18 gel을 이용한 컬럼 크로마토그래피를 실시하여 9개의 소분획으로 나누었다. EtOAc fraction에 C-18 column chromatography (gradient : H2O → MeOH)를 통하여 얻어진 소분획 1 내지 9에서 2번 소분획을 Prep HPLC을 실시하여 코익솔(4.8㎎)을 얻었다.
코익솔이 에탄올 추출물에 함유된 양을 확인하기 위하여 위와 같은 방법으로 연천산 율무 뿌리와 제천산 율무 뿌리에 대해 에탄올 추출물을 제조한 후 이를 HPLC로 측정하였다. HPLC 측정은 HPLC Aglient 1200 series를 사용하여 수행하였으며, 분석컬럼은 VisionHT C18 HL-5㎛-C18(4.6*250㎜)를 사용하였으며 유속 1㎖/min, 인젝션양 20㎕의 조건에서 분석하였다. 검출기는 자외투흡광 광도계(측정파장 254nm)를 사용하였다.
HPLC 분석결과는 도 4와 같다. 도 4를 살펴보면, 율무 뿌리의 에탄올 추출물에서 19.5분에 코익솔로부터 유래하는 특정 피크가 관찰되고 있다.
다음으로 얻어진 코익솔의 미백효과를 확인하기 위하여, 생체 외 티로시나아제 억제 활성 측정을 통한 코익솔의 미백 효능을 분석하였다.
코익솔의 티로시나아제 효소 활성 억제 효과를 확인하기 위해, 머쉬룸 티로시나아제 억제 분석(mushroom tyrosinase inhibition assay) 방법을 이용하였다. 1 mM L-티로신(Ltyrosine), 50 mM 인산칼륨 완충액(potassium phosphate buffer) (pH 6.5), 그리고 증류수를 10:10:9의 비율로 혼합한 반응 혼합액 170㎕에 10㎕의 시료와 20㎕의 머쉬룸 티로시나아제 수용액 (1000 units/㎖)을 첨가한 반응액을 25℃에서 30분간 배양하였다. 그런 후, 마이크로플레이트 리더(microplate reader)를 이용하여 490nm 에서 생성된 도파크롬(dopachrome)의 양을 흡광도로 측정하였다. 양성 대조군으로는 티로시나아제 효소 활성 억제 물질로 알려진 코직산(kojic acid)을 사용하였다.
티로시나아제 효소 활성 억제의 백분율 공식은 다음과 같았다.
*
Figure pat00002
(A: 샘플 흡광도, B: 색상 대조군 흡광도, C: 대조군 흡광도)
상기 공식을 통해 계산된 Coixol이 함유된 율무 에탄올 추출물 및 이의 용매 분획물의 티로시나아제 효소 활성 저해능은 표 1과 같다.
시료 IC50(μM)
코익솔 62.4
알부틴 618.1
코직산 41.4
표 1을 살펴보면, IC50 값이 코익솔의 경우 62.4μM으로 나타나 양성대조군으로 사용한 코직산과 유사한 수치를 보였으며, 알부틴(618.1μM)보다 10배가량 높은 효소 활성 저해능을 보였다.
이러한 결과는 선행기술인 대한민국 등록특허공보 10-1579500호의 표 1과 대비해 보아도 크게 향상된 효과를 나타내는 결과이다. 이는 본 발명에서 율무 뿌리의 추출물 및 이의 용매 분획물에서 코익솔을 다량 함유함으로써 효과적으로 티로시나아제 발현을 억제하며, 결과적으로 멜라닌 합성을 저해하여 미백 효과 뿐 아니라, 멜라닌 침착에 의해 발생되는 질병을 치료할 수 있음을 시사하는 것이다.
또한, 티로시나아제 억제 활성을 평가한 도 5의 결과를 살펴보아도, 본 발명의 코익솔이 원액에서 100μM로 농도가 감소해도 여전히 코직산이나 알부틴에 비해 크게 높은 활성을 나타내는 것을 알 수 있다.
따라서 본 발명에 따른 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 미백 효과가 뛰어난 미백용 조성물로서 사용할 수 있다.
상기는 본 발명의 바람직한 실시예를 참고로 설명하였으며, 상기의 실시예에 한정되지 아니하고, 상기의 실시예를 통해 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 요지를 벗어나지 않는 범위에서 다양한 변경으로 실시할 수 있는 것이다.

Claims (6)

  1. 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물을 포함하며, 상기 율무 추출물 또는 이의 용매 분획물은 코익솔을 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서,
    상기 율무 추출물은 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 얻어진 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서,
    상기 율무 추출물은 율무 뿌리를 C1 내지 C6의 알코올, 또는 C1 내지 C6의 알코올과 물의 혼합물로 추출하여 추출물을 수득한 후에, 이를 물에 용해시켜 용해액을 형성하며, 상기 용해액을 헥산, 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트로 순차로 추출하여 얻어진 헥산 분획물, 메틸렌 클로라이드 분획물, 에틸 아세테이트 분획물 및 물 분획물 중 하나 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
  4. 청구항 3에 있어서,
    상기 에틸 아세테이트 분획물을 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 9개로 소분획하고, 2번 분획물을 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분리하는 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
  5. 청구항 3에 있어서,
    상기 에틸 아세테이트 분획물은 에틸 아세테이트 및 수포화 n-부탄올로 추출하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
  6. 청구항 2 또는 3에 있어서,
    상기 알코올은 에탄올인 것을 특징으로 하는 미백용 조성물.
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