KR20180085106A - 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents
패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 패각의 유용성분을 용출시켜 제조된 패각 용해액을 이용하여 제조된 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하여 우수한 피부 보습 증진 및 염증 완화효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 천연식물추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 패각의 유용성분을 용출시켜 제조된 패각 용해액을 이용하여 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 제조하고, 이를 피부 보습 증진 및 염증 완화용 화장료 조성물에 이용하는 기술에 관한 것이다.
인간의 피부는 시간이 지나면서 생리적 기능이 저하되면서 노화과정을 겪게 되어 노화의 지표가 피부로 나타난다. 피부 노화의 원인에는 내적 원인과 외적 원인이 있다. 피부는 외부 환경에 노출되어 있어서 외적인 인자의 영향으로 노화가 진행되는 경우가 많으며, 이들 중에는 자외선에 의한 손상, 외부 유해 환경 성분, 각종 스트레스로 인한 내부 요인이 포함된다.
피부 표면은 피지선에서 분비되는 땀샘에서 나오는 수분이 자연적으로 잘 혼합된 피지막이 각질층을 덮고 있어서, 매끄럽고 윤기 있으며 촉촉한 상태로 유지된다. 그러나 신진 대사 작용의 이상으로 인해 피부 각질층의 수분함량이 떨어지게 되면 피부에서 각질이 떨어져 나가게 되고 이 물질의 침투가 용이하게 되어 각종 염증 및 알레르기가 유발되기 쉬워진다. 특히 노화가 진행됨에 따라 피부의 신진대사가 원활하지 못하므로 피부에 대한 각종 염증 및 알레르기는 가중되게 된다. 또한, 건조한 실내 환경, 공해, 자외선, 오용된 화장품이나 세제류 등에 의한 피부 자극에 의해 피부가 민감해져 가는 사람들이 증가하고 있다. 외부자극에 의해 민감해진 피부는 홍반과 같이 가벼운 증상에 그치는 경우도 있지만, 가려움, 따가움 등과 같이 몹시 심하고 불쾌한 염증 반응을 나타내는 경우도 있다. 이러한 인자들에 의하여 피부 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠어지면서 갈라지게 된다. 수분 손실이 되면 각질이 탈락되면서 외부에 노출되기 용이하게 되면서 자극에 대한 염증 및 피부질환이 유발된다. 건조한 피부는 면역기능이 약화되어 가려움증 및 아토피 피부염 등의 알러지가 유발되기 쉬워진다. 그러므로 피부의 수분 손실을 방지하는 것은 중요하다.
화장품은 피부를 보호하고 미화 청결을 위해 사용하는 제품이지만 다양한 기능성 물질들을 포함하며 유효한 효과뿐만 아니라 피부 자극의 원인이 되기도 한다. 이러한 문제점을 해결하기 위해서 최근 화학 물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 화장품이 개발되고 있다.
본 발명자들은 보습 증진 및 항염 등의 피부개선효과가 있는 천연물을 선별하고 다양한 방법으로 추출물을 제조하여 그 활성에 대하여 연구하였으며, 패각의 유효물을 용출시킨 패각 용해액을 추출용매로 하여 오크라, 여주 및 노니의 복합추출물을 제조하는 경우에 우수한 항염, 보습 유지 및 증진 활성 등을 나타내는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 유효성분으로 함유하여 우수한 피부 보습증진 효과 및 염증완화 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 패각 용해액은 패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시켜 분쇄한 패각 분말을 정제수에 넣어 100~120℃에서 5~30분 동안 가열한 후, 여과하여 얻어지는 것이다. 상기 추출용매로서의 패각 용해액은 pH 8~10인 것이 바람직하다.
이때, 상기 패각으로는 굴, 모시조개, 전복, 대합, 맛조개, 바지락, 키조개, 소라, 홍합, 참조개, 떡조개, 꼬막 및 가리비로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 패류의 껍질, 더욱 바람직하게는 굴, 모시조개, 또는 전복의 껍질을 사용할 수 있다.
상기 오크라, 여주 및 노니 복합추출물은 건조 중량기준으로 오크라, 여주 및 노니가 각각 1~15:1~15:1~15의 비율로 혼합되어 추출되는 것이며, 더욱 바람직하게는 동일 중량비율로 혼합되어 추출되는 것이다.
상기 화장료 조성물은 보습 관련 인자의 발현증가를 통해 피부의 보습력을 증가시키는 것을 특징으로 하는 보습용 화장료 조성물이다. 또한, 상기 화장료 조성물은 피부의 염증매개인자 발현억제활성을 가지는 것을 특징으로 하는 항염증용 화장료 조성물이다.
상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, A) a1) 패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; a2) 100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄하는 단계; a3) 패각 분말을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 동안 가열하는 단계; 및 a4) 필터로 분말을 분리시켜 패각 용해액을 제조하는 단계;
B) 상기 패각 용해액에 건조한 오크라, 여주 및 노니를 첨가하여 80~100℃로 가열하여 추출하는 단계; 및
C) 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 여과하고 감압 농축하는 단계를 포함하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법이 제공된다.
상기 B)단계에서 오크라, 여주 및 노니가 각각 1~15:1~15:1~15의 중량 비율로 혼합되어 추출된다.
상기 패각 용해액은 pH 8~10이며, 바람직하게는 pH 10이다.
패각의 유용성분을 용출시켜 제조된 용매를 사용하여 제조된 본 발명의 오크라, 여주 및 노니 복합추출물은 그 상승작용에 의하여 우수한 피부 보습증진 효과 및 염증완화 효과를 나타낸다.
이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
본 발명은 천연식물추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 패각의 유용성분을 용출시켜 얻어진 패각 용해액을 용매로 하여 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 제조하여 안전하면서도 피부 보습증진 효과 및 염증완화 효과가 우수한 화장료 조성물에 이용하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 유효 성분으로 포함되는 복합추출물을 추출하는데 사용되는 오크라(Hibiscus esculentus 또는 belmoschus esculentus)는 아욱과(Malvaceae)에 속하는 식물로서 열대 및 아열대 지역에 걸쳐 재배되는 식물로서 섬유질이 많으며 식물 내에 펙틴 갈락탐, 아라반 등의 혼합물인 점액이 있어 자양강장에 도움이 되고, 혈중 콜레스테롤을 낮추는 작용을 한다. 오크라 식용 부위는 풋 꼬투리로 개화 한 후 7일 정도면 수확이 가능하고, 개화 후 13일 정도에 길이가 최고조에 달한다. 오크라 꼬투리는 영양학 적으로는 약 90%의 수분과 약 15%의 단백질, 약 0.2%의 지방, 약 0.7%의 무기염류, 약 1.2%의 섬유질, 약 6.4%의 탄수화물, 약 88mg의 비타민 A, 약 13mg의 비타민 C가 들어있는 영양가가 높은 녹색채소로 주목을 받고 있다.
오크라는 비타민 C가 풍부하여 피로 회복에 좋다고 알려져 있으며, 예로부터 동양에서는 잎과 덜 익은 열매를 고통을 덜어 주는 찜질약으로 오랫동안 사용하여 왔다. 또한, 오크라의 다당체는 식품 이외의 분야에서도 이용되어 왔다(Ndjouenkeu, Goycoolea, Morris, & Akingbala, 1996; Tanaka et al., 2002; Woolfe, Chaplin, & Otchere, 1997). 본 발명 복합추출물의 제조에는 오크라의 잎, 줄기, 뿌리 및/또는 열매가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 오크라 열매가 사용된다.
본 발명의 화장료 조성물에 유효 성분으로 포함되는 복합추출물을 제조하는데 사용되는 여주(bitter gourd; Momordica Charantia)는 아시아에서 널리 재배되는 박과의 다년생 덩굴식물로서 쓴맛의 멜론이라는 뜻으로 중국에서는 고과(苦瓜), 일본에서는 고야로, 한국에서는 여주, 여자, 여지 등으로 불리고 있다. 여주는 항산화 효능을 가지고 있는 비타민을 포함하며, 케라틴, 카로틴, 칼슘, 철, 엽산, 판토텐산, 식물섬유, 모모르, 데신 등이 풍부하게 함유되어 있으며 항암 효과와 말라리아 치료, 체중감소, 소화 촉진 기능을 가지고 있어 한방의 재료로 쓰이고 있으며, 최근에는 당뇨병의 치료에도 사용될 수 있다고 보고되어 의학계에서도 관심이 높아지고 있는 식물성 채소이다(Miura T. et al., J. Nut. Sci. Vitaminol., 47:340-344, 2001). 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 복합추출물의 제조에는 여주의 열매가 사용된다.
본 발명의 화장료 조성물에 유효 성분으로 포함되는 복합추출물을 제조하는데 사용되는 노니(Morinda citrifolia)는 인도네시아 모로카제도 원산의 약용 식물이다. 약 6000여 년 전부터 노니의 열매 및 잎은 식용이나 약용으로 이용되고 뿌리 및 줄기는 염색에 이용되었으며 약 2000년 전에 해양 민족과 함께 태평양 연안으로 전파되었다. 인도네시아에서는 멘크드 파체 디바 등으로 불리며 만병에 효과가 있는 약으로서 지금도 쟈무라는 전통 치료약으로 이용되고 있다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 복합추출물의 제조에는 노니의 잎, 열매, 줄기 및/또는 뿌리가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 노니의 열매가 사용된다.
본 발명에 따르면, 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
본 발명에서, 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 제조하기 위해서 사용되는 패각 용해액은 용출(溶出)된 패각의 유용성분을 함유하는 알칼리성 용액으로서, 본 발명의 일 구체예에 따르면 다음과 같은 방법으로 제조된다. 먼저, 패각을 고온으로 소성하여 분말화하고, 정제수에 상기 분말을 함침시키고 가열하여 강알카리 용액을 제조한다. 보다 구체적으로는 먼저 굴, 모시조개, 전복, 대합, 맛조개, 바지락, 키조개, 소라, 홍합, 참조개, 떡조개, 꼬막 및 가리비로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 패류의 껍질(貝殼)을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시켜 100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄한다. 상기 패각 분말을 10~20배 부피의 정제수에 넣어 100~120℃에서 5~30분 동안 가열한다. 여과를 통해 고형 분말을 제거하여 여액을 얻는다. 이와 같이 제조되는 폐각 용해액은 pH 8~10, 더욱 바람직하게는 pH 10의 강알칼리성을 나타낸다.
상기 폐각 용해액을 이용하여 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 제조한다. 본 발명의 일 구체예에 따르면, 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법으로서,
A) a1) 패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; a2) 100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄하는 단계; a3) 패각 분말을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 동안 가열하는 단계; 및 a4) 필터로 분말을 분리시켜 패각 용해액을 제조하는 단계;
B) 상기 패각 용해액에 건조한 오크라, 여주 및 노니를 첨가하여 80~100℃로 가열하여 추출하는 단계; 및
C) 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 여과하고 감압 농축하는 단계를 포함하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법이 제공된다.
상기 오크라, 여주 및 노니는 건조 중량으로 각각 1~15:1~15:1~15의 비율로 혼합되어 추출되는 것이며, 더욱 바람직하게는 1:1:1의 중량 비율로 혼합되는 것이다. 상기 폐각 용해액은 각종 미네랄 등의 유용성분을 함유하며, 알칼리성을 띈다. 이러한 폐각 용해액을 사용하여 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 제조하는 경우에 우수한 보습 및 염증완화 효과를 나타내었다.
본 발명의 다른 실시예에 따르면, 상기 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조 방법으로서,
A) a1)패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; 및 a2)100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄하는 단계;
B) 상기 패각 분말, 건조한 오크라, 여주 및 노니 혼합물을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 가열하여 추출하는 단계; 및
C) 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 여과하고 감압 농축하는 단계를 포함하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법이 제공된다.
위의 방법에 의하여 제조된 본 발명 오크라, 여주 및 노니 복합추출물은 그 상승작용에 의하여 보습과 관련된 인자의 발현 증가 효과(시험예 3, 4), 염증과 관련된 인자의 발현 억제효과(시험예 2)에 있어서 우수하게 나타났다.
또한, 본 발명은 상기 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법에 따라서 패각을 사용하여 얻은 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유하는 항염증, 피부 배리어 기능 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조 될 수 있으며, 그 예로는 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스 등을 들 수 있다.
실시예
이하, 하기의 실시예와 시험예들을 통하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 이들 예는 본 발명을 단지 예시하기 위한 것이며, 본 발명이 이 예들에 의하여 한정되는 것은 아니다.
제조예
1:
오크라
추출물의 제조
오크라 열매 1kg을 정제수로 세척한 뒤 건조하고, 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.
위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 100g을 얻었다.
제조예
2: 여주 추출물의 제조
정제수로 세척한 후 건조시킨 여주 열매 1Kg에 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.
위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 100g을 얻었다.
제조예
3: 노니 추출물의 제조
정제수로 세적한 후 건조시킨 노니 열매 1Kg에 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.
위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐 클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 100g을 얻었다.
제조예
4:
패각
분말 및 용해액 제조
굴 패각 1kg을 1200℃ 직, 간접 열로 30분간 소성시켜 분쇄기로 패각을 200매쉬로 분쇄하였다. 굴 패각 분말을 10배 부피의 정제수에 넣어, 100℃의 열로 30분 가열하였다. 필터로 고형 분말을 분리시켜 패각 용해액을 얻었다.
실시예
1:
패각
용출액을 이용한
오크라
, 여주 및 노니 혼합 추출물의 제조
추출기에 정제수로 세척한 뒤 건조한 오크라 열매, 여주 열매, 노니 열매를 각 1kg씩 넣고, 상기 제조예에서 얻어진 패각의 용해액(pH 10)을 10배 부피량을 가하여 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다. 위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐 클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출물 분말 300g을 얻었다.
피부개선활성을 평가하기 위해, 하기 표 1에 나타낸 바와 같이 상기 제조예 1의 오크라 추출물, 제조예 2의 여주 추출물, 제조예 3의 노니 추출물, 상기 제조예 1~3의 용매 추출물을 동일 중량비로 혼합한 혼합물 및 상기 실시예 1의 추출물을 사용하였다.
표 1
시험예 1: 세포 독성 여부 확인
세포 독성 여부를 확인하기 위해 섬유아세포(ATCC, CRL-2076)를 10% FBS를 첨가한 IMDM 배지에 5×105의 세포 농도로 접종하여, 37℃ 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 상기 제조예 및 실시예에서 제조한 추출물을 시료농도가 50, 100, 500, 1000㎍/㎖가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 처리하여 24시간 배양한 후에 MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazoliumboromide, Sigma, U.S.A.)용액을 각 웰(well)에 100㎖씩 첨가한 후 (3㎎/㎖) 4시간 동안 더 배양하였다. 이후 상층액을 제거하고, 150㎕의 디메틸 설폭시드를 첨가한 후, 30분간 shaking하여 생성된 포르마잔(formazan)을 녹여 multimicroplate reader(Molecular device Spectra max190)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율은 아래의 식에 따라 계산하였으며 그 결과는 하기의 표 2에 나타내었다.
세포생존율(
%
)=시료
첨가군의
흡광도 / 대조군의 흡광도 × 100
표 2
상기 표 2의 결과에서 보는 바와 같이 오크라 추출물, 여주 추출물, 노니추출물, 오크라, 여주, 노니 추출 혼합물 및 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 적용한 시료 모두 500㎍/㎖ 농도에서 100%의 세포생존율이 확인됨에 따라 세포 독성에는 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었고, 이에 안전에는 문제가 없는 것을 확인하였다.
시험예 2: 염증매개인자 발현 억제효과 확인
RAW264.7 세포(ATCC)를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 5×105 세포/웰로 조절한 후, 12 웰 플레이트에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤 12시간 동안 기아상태를 유지시킨 후, 최종 농도를 LPS 10ng/mL, 각 시료의 농도를 0.1 w/v% 로 맞춘 배지로 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 역전사 중합효소 연쇄 반응(Reverse transcription polymerase chain reaction: RT-PCR)을 통해 TNFα의 발현 억제율을 확인하였다. TNFα 발현 억제율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
TNF
-α 발현억제율(
%
) = [(대조군
TNF
-
α발현양
- 시료
TNF
-
α발현양
)/ 대조군 TNF-α 발현양] × 100
표 3
상기 표 3에서 확인되는 바와 같이 0.1(wt/v)% 농도에서 시험한 시료 모두에서 TNFα 억제 효과를 확인할 수 있었다. 특히 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 실시예 1이 비교예 1 내지 4에 비하여 유의하게 우수한 TNFα 억제 효과를 나타내었다.
시험예 3: 보습관련인자 발현 증가효과 확인
CCD-986Sk 세포(ATCC)를 10% FBS가 첨가된 IMDM 배지를 이용하여 5×105 세포/웰로 조절한 후 12 웰 플레이트에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤 각각의 시료 농도를 0.1 w/v% 로 맞춘 배지로 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 역전사 중합효소 연쇄 반응(RT-PCR)을 통해 Hyaluronan Synthase-3(HAS-3)의 발현 증가율을 확인하였다. HAS-3 발현 증가율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. 대조를 위해 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다.
HAS-3 발현 증가율(
%
) = (시료 HAS-3
발현양
/대조군 HAS-3
발현양
) × 100
표 4
상기 표 4에서 확인되는 바와 같이 실시예 1의 패각 용해액으로 추출된 오크라, 여주 및 노니 복합추출물에서 비교예 1~3의 오크라, 여주 또는 노니 각각의 용매추출물과 비교예 4의 혼합추출물에 비해 유의하게 우수한 HAS-3 증가율을 나타내었다.
시험예
4:
히알루로니다제의
활성 억제 효과 확인
모르간 엘손(Morgan-Elson)법을 응용하여 히알루로니다제 활성억제 효과를 측정하였다. 히알루로니다제의 최종 효소 활성을 400NF unit/㎖, HA의 최종농도를 0.4㎎/㎖로 하고 활성제인 Compound 48/80 완충(buffer) 용액(0.1㎎/㎖)을 사용하여 불활성형 히알루로니다제의 활성화 단계의 저해작용을 중심으로 히알루로니다제 활성을 측정하였다. 시료는 완충용액(buffer)에 용해하여 시료 용액으로 하고 대조군은 시료 용액 대신에 완충 용액을 사용하였다. 대조를 위해 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다. 히아루로니다아제의 활성 저해율(%)은 아래의 수학식으로 계산하였다.
히알루로니다제
활성 저해율(
%
)= [(A-B)/A]×100
A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 효소 활성
B : 시료를 첨가한 웰의 효소 활성
표 5
상기 표 5에서 확인되는 바와 같이 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 실시예 1에서 다른 비교예들에 비하여 유의하게 우수한 활성억제효과를 나타내었다.
실시예
2 :
패각
용해액
오크라
, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는
화장료의
제조
패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 포함하는 화장료는 처방예1, 효능의 비교를 위해 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 포함하는 비교 처방예1, 복합추출물 대신 보습제로서 글리세린을 포함하는 비교 처방예 2를 하기 표 6와 같이 통상의 방법으로 제조하였다.
표 6
시험예 5 : 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 화장료의 보습 효과
본 발명의 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물(실시예 1)을 함유한 화장료 조성물의 보습 효능을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 피부가 건조한 성인 남녀 60명을 무작위로 20명씩 그룹 (A, B, C)으로 나눈 후, A 그룹은 처방예 1, B 그룹은 비교 처방예 1, C 그룹은 비교 처방예 2를 1일 2회 4주간 안면에 도포하게 하였다. 보습 효과는 시험 시작 전, 도포 후 2주, 4주에 Corneometer CM 825 (Corage+Khazaka, Germany)을 이용하여 평가하였다. 실험 결과는 하기 표 7에 나타내었다. 도포 전을 100%로 환산하여 2주 후, 4주 후 증가율을 계산하였다. 하기 표7에서 알 수 있듯이, 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물(처방예 1)을 포함하는 조성물의 보습 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.
표 7
시험예 6: 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 화장료의 피부 배리어 회복 효과
본 발명의 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물(실시예 1)을 함유한 화장료 조성물의 피부 배리어 회복 효능을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 피부가 건조한 성인 남녀 60명을 무작위로 20명씩 그룹 (A, B, C)으로 나누어 실시하였다. 전완부에 테이프 스트리핑으로 피부를 손상시킨 후, A 그룹은 처방예 1, B 그룹은 비교 처방예 1, C 그룹은 비교 처방예 2를 1일 2회 4주간 전완부에 도포하게 하였다. 피부 배리어 기능은 시험 시작 전, 도포 후 2주, 4주에 Tewameter(Corage+Khazaka, Germany)를 이용하여 평가하였다. 도포 전을 100%로 환산하여 2주 후, 4주 후 개선율을 계산하였다. 하기 표 8에서 알 수 있듯이, 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물(처방예 1)을 포함하는 조성물의 피부 배리어 효능이 우수함을 확인할 수 있었다.
표 8
시험예 7: 제형의 안정성 실험
본 발명의 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물(실시예 1)을 함유한 화장료에 대한 안정성을 시험하기 위해 이하 기재된 바와 같은 제형 실시예 1, 2 및 3을 제조하여 제형의 안정성을 시험하였다.
제형 실시예 1: 화장수
아래의 표 9에 기재된 조성으로 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 화장수를 통상의 방법으로 제조하였다.
표 9
제형 실시예 2: 에센스
아래의 표 10에 기재된 조성으로 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 에센스를 통상의 방법으로 제조하였다.
표 10
제형 실시예 3: 크림
아래의 표 11에 기재된 조성으로 패각 용해액 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 함유하는 크림을 통상의 방법으로 제조하였다.
표 11
<제형 안정성>
상기 제조된 제형 실시예 1, 2 및 3을 실온(25℃), 냉장(4℃) 및 항온(50℃)으로 일정하게 유지되는 실내, 냉장고 및 인큐베이터에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관 및 관찰(변색, 변취 및 분리)하며, 안정성을 확인하였다. 결과는 표 12에 나타내었다.
표 12
* 제형 안정 등급: 0: 변화 없음, 1: 미세한 변화, 2: 변화, 3: 극심한 변화
상기 표 12에서 나타낸 바와 같이 제형 실시예 1, 2 및 3의 제형 모두 25℃, 4℃ 및 50℃ 온도 조건하에서 변색, 변취 및 분리 현상이 나타나지 않고 안정함이 확인되었다.
Claims (5)
- A) a1) 패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; a2) 100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄하는 단계; a3) 패각 분말을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 동안 가열하는 단계; 및 a4) 필터로 분말을 분리시켜 패각 용해액을 제조하는 단계;
B) 상기 패각 용해액에 건조한 오크라, 여주 및 노니를 첨가하여 80~100℃로 가열하여 추출하는 단계; 및
C) 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 여과하고 감압 농축하는 단계를 포함하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법. - A) a1) 패각을 1000~1500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; 및 a2) 100~2000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄하는 단계;
B) 상기 패각 분말, 건조한 오크라, 여주 및 노니 혼합물을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 동안 가열하여 추출하는 단계; 및
C) 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 여과하고 감압 농축하는 단계를 포함하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법. - 제1항에 있어서,
상기 추출용매로서의 패각 용해액은 pH 8~10인 것임을 특징으로 하는 오크라, 여주 및 노니 복합추출물의 제조방법. - 제1항 또는 제2항에 따른 제조방법에 따라서 패각을 사용하여 얻은 오크라, 여주 및 노니 복합추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유하는 항염증, 피부 배리어 기능 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 오크라, 여주 및 노니 복합추출물은 건조 중량기준으로 오크라, 여주 및 노니가 각각 1~15:1~15:1~15의 비율로 혼합되어 추출되는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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| KR20080057419A (ko) | 2006-12-20 | 2008-06-25 | 주식회사 코리아나화장품 | 노니 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용화장료 조성물 |
| KR20110086894A (ko) * | 2010-01-25 | 2011-08-02 | 김선일 | 폐각의 알카리성 분말 그리고 칼슘용액을 포함하는 피부 외용제 조성물 |
| KR20150000922A (ko) | 2013-06-25 | 2015-01-06 | 주식회사 코리아나화장품 | 오크라 다당체를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 |
-
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- 2017-01-17 KR KR1020170007964A patent/KR101889344B1/ko active IP Right Grant
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